MX2007000562A

MX2007000562A - Compuestos y su preparacion para el tratamiento de la enfermedad de alzheimer al inhibir la produccion de peptidos beta-amiloideos.

Info

Publication number: MX2007000562A
Application number: MX2007000562A
Authority: MX
Inventors: Donald Landry; Shixian Deng; Tae-Wan Kim; Jeong Hill Park
Original assignee: Univ Columbia
Priority date: 2004-07-16
Filing date: 2005-07-11
Publication date: 2007-03-30
Also published as: WO2006019685A3; KR20070057779A; EP1778715A2; JP2008506686A; CA2573699A1; WO2006019685A2

Abstract

La presente invencion proporciona compuestos novedosos de ginsenoside, composiciones (por ejemplo, composiciones farmaceuticas) que comprenden los compuestos de ginsenoside, y los metodos para la sintesis de estos compuestos de ginsenoside. Adicionalmente, la presente invencion proporciona los metodos para inhibir la produccion de peptidos beta-amiloideos y los metodos para tratar o prevenir una condicion patologica, en particular, enfermedades neurodegenerativas (por ejemplo, la enfermedad de Alzhaimer) utilizando estos compuestos de ginsenoside.

Description

COMPUESTOS Y SU PREPARACIÓN PARA ?L TRATAMIENTO DE LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER AL INHIBIR LA PRODUCCIÓN DE PÉPTIDOS BETA-AMILOIDEOS CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona compuestos novedosos de ginsenósido, composiciones (por ejemplo, composiciones farmacéuticas) que comprenden los compuestos de ginsenósido, y los métodos para la síntesis de estos compuestos de ginsenósido. Adicionalmente, la presente invención proporciona los métodos para inhibir la producción de péptidos beta-a iloideos y los métodos para tratar o prevenir una condición patológica, en particular, enfermedades neurodegenerativas (por ejemplo, la enfermedad de Alzheimer), utilizando estos compuestos de ginsenósido.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La enfermedad de Alzheimer (AD, por sus siglas en ingles) es una enfermedad neurodegenerativa caracterizada por una pérdida progresiva, inexorable de la función cognoscitiva (Francis, et al., Neuregulins and ErbB receptors in cultured neonatal astrocytes. J. Neurosci . Res . , 57 : 487-94 , 1999) que con el tiempo conduce a una incapacidad para mantener un desempeño social y/u ocupacional normal. La enfermedad de Alzheimer es la forma más común de demencia relacionada con la edad, y uno de los problemas de salud más serios, en los Estados Unidos. Aproximadamente 4 millones de norteamericanos sufren de la enfermedad de Alzheimer, con un costo anual de al menos $100 mil millones — aciendo de la enfermedad de Alzheimer uno de los trastornos más costosos del envejecimiento. La enfermedad de Alzheimer es aproximadamente el doble de común tanto en mujeres como en hombres, y se toma en cuenta en más del 65% de la demencia en los ancianos. La enfermedad de Alzheimer es la cuarta causa que conduce a la muerte en los Estados Unidos. A la fecha, no está disponible ninguna cura para la enfermedad de Alzheimer, y la declinación cognoscitiva es inevitable. Aunque la enfermedad puede durar por más de 20 años, los pacientes con AD por lo general viven de 8 a 10 años, en promedio, después de ser diagnosticados con la enfermedad. La patogénesis de la enfermedad de Alzheimer está asociada con una cantidad excesiva de hebras neurofibrilares (compuestas de filamentos helicoidales apareados y proteínas tau) y placas neuríticas o seniles (compuestas de neuritas, astrocitos, y células gliales alrededor de un núcleo amiloideo) en la corteza cerebral.

Mientras que las placas seniles y las hebras neurofibrilares se presentan con el envejecimiento normal, las mismas son más prevalentes en las personas con la enfermedad de Alzheimer. En la enfermedad de Alzheimer también se pueden presentar anormalidades proteínicas específicas. En particular, la AD se caracteriza por la deposición del ß-péptido amiloideo (Aß, por sus siglas en ingles) en placas amiloideas en el cerebro (Selkoe, et al. (2001) Alzheimer' s disease: genes, proteins, and therapy.

Physiol Rev. 81, 741-66; Hardy and Selkoe (2002) . The amyloid hypothesis of Alzheimer' s disease: progress and proble s on the road .to therapeutics. Science 297, 2209). Aß se produce mediante escisiones proteolíticas secuenciales de la proteína precursora amiloidea (APP, por sus siglas en ingles) mediante un conjunto de proteasas unidas a membranas denominadas ß- y ?-secretasas (Vassar and Citrón (2000) Abeta-generating enzymes: recent advances in beta- and gamma-secretase research. Neuron 27, 419-422; John, et al. (2003) Human beta-secretase (BACE) and BACE inhibitors. J. Med Chem . 46, 4625-4630; Selkoe and Kopan (2003) Notch and Presenilin: regulated intramembrane proteólisis links development and degeneration. Annu . Rev Neurosci . 26, 565-597; Medina and Dotti (2003) ripped out by presenilin-dependent gamma-secretase. Cell Signal 15, 829-841) . La escisión de ß-secretasa heterogénea en el extremo C-terminal de Aß produce dos isoformas principales de Aß, Aß40 y Aß42. Mientras que Aß40 es el producto de escisión predominante, se cree que el Aß42 bastante a iloidogénico, menos abundante, será uno de los agentes patogénicos clave en la AD (Selkoe, (2001) Alzheimer' s disease: genes, proteins, and therapy. Physiol Rev. 81, 741-66) y el Aß42 cerebrocorical aumentado está estrechamente relacionado con una disfunción sináptica/neuronal asociada con la AD (Selkoe, Alzheimer' s disease is a synaptic failure, Science 298, 789-791 (2002) . Se requieren presenilinas para la proteólisis intramembrana de las proteínas de membrana tipo I seleccionadas, incluyendo la proteína precursora beta amiloidea (APP) , para proporcionar la proteína beta-amiloidea (De Strooper et al., Deficiency of presenilin-1 inhibits the normal cleavage of amyloid precursor protein. Nature 391:387-90, 1998; Steiner and Haass, Intramembrane proteolysis by presenilins. Nat . Rev. Mol . Cell . Biol . 1:217-24, 2000; Ebinu and Yankner, A rip tide in neuronal signal transduction. Neuron 34:499-502, 2002; De Strooper and Annaert, Presenilins and the intramembrane proteolysis of proteins: facts and fiction. Nat . Cell Biol . 3-.E221-25, 2001; Sisodia and George-Hyslop, ?-Secretase, ?otch, a-beta and Alzheimer' s disease: where do the presenilins fit in? Nat . Rev. Neurosci . 3:281-90, 2002) . Esta proteólisis se puede producir mediante una maquinaria de ß-secretasa dependiente de presenilina, que se sabe estará bastante conservada a través de las especies, incluyendo nemátodos, moscas y mamíferos (L'Hernault and Arduengo, Mutation of a putative sperm membrane protein in Caenorhabditis elegans prevents sperm differentiation but not its associated meiotic divisions. J. Cell . Biol . 119:55-58, 1992; Levitan and Greenwald, Facilitation of lin-12-mediated signaling by sel-12, a Caenorhabditis elegans S182 Alzheimer' s disease gene. Nature 377:351-54, 1999; Li and Green ald, HOP-1, a Caenorhabditis elegans presenilin, appears to be functionally redundant with SEL-12 presenilin and to facilítate LIN-12 and GLP-1 signaling. Proc. Nati . Acad. Sci . USA 94:12204-209, 1997; Steiner and Haass, Intramembrane proteolysis by presenilins. Nat . Rev. Mol . Cell . Biol . 1:217-24, 2000; Sisodia and George-Hyslop, ?-Secretase, Notch, a-beta and Alzheimers disease: where do the presenilins fit in? Nat . Rev. Neurosci . 3:281-90, 2002) . ?-Secretasa, un complejo ulti-proteínico de alto peso molecular que alberga heterodímeros de presenilina y nicastrina, suministra el paso final en la producción de Aß en la enfermedad de Alzheimer (Li, et al., Presenilin 1 is linked with ß-secretase activity in the detergent solubilized state. Proc. Nati . Acad. Sci . USA 97:6138-43, 2000; Esler, et al., Activity-dependent isolation of the presenilin-?-secretase complex reveáis nicastrin and a gamma substrate. Proc . Nati . Acad. Sci . USA 99:2720-25, 2002). La estabilización de heterodímeros de presenilina (convertidos de un agrupamiento de corta vida a un agrupamiento de larga vida) y otros componentes núcleo sin definir parecen ser decisivos para la activad de ?-secretasa (Thinakaran, et al., Evidence that levéis of presenilins (PS1 and PS2) are coordinately regulated by co petition for limiting cellular factors . J. Biol . Chem . 272:28415-422, 1997; Tomita, et al., The first proline of PALP otif at the C terminus of presenilins is obligatory for stabilízation, complex formation, and gamma-secretase activities of presenilins. J. Biol . Chem. 276:33273-281, 2001) . La actividad de ?-secretasa exhibe una especificidad de secuencia muy amplia cercana al sitio de escisión transmembrana destinado y se ha mostrado que suministra la escisión intramembrana de otros sustratos de membrana tipo-I que no son APP, incluyendo Notch (Schroeter, E.H., et al. (1998) Notch-1 signaling requires ligand-induced proteolytic reléase of intracellular domain.

Nature 393, 382-386; De Strooper, et al. (1999) Presenilin-1-dependent gamma-secretase-like protease mediates reléase of Notch intracellular domain. Nature 398:518-522), ErbB4 (Lee, et al. (2002) Presenilin-dependent . gamma-secretase-like intramembrane cleavage of ErbB4. J. Biol . Chem . 277, 6318-6323; Ni, et al. (2001) Gamma-Secretase cleavage and nuclear localization of ErbB-4 receptor tyrosine kinase.

Science 294, 2179-2181), y el receptor de neurotrofina p75 (p75NTR) (Jung, et al. (2003) Regulated intramembrane proteolysis of the p75 neurotrophin receptor modulates its association with the TrkA receptor. J. Biol Chem. 278, 42161-42169) . Se predice que el bloqueo general de la actividad de ß-secretasa no sólo suprime la generación de Aß aunque también inhibe el procesamiento normal de otros sustratos ß-secretasa celulares, requerido para la función celular relevante de estos substratos. De esta forma, la inhibición completa de la actividad ?-secretasa potencialmente podría conducir a graves efectos secundarios (Doerfler, et al., Links Free in PMC Presenilin-dependent gamma-secretase activity modulates thymocyte development. (2001) Proc Nati . Acad. Sci USA 98, 9312-9317; Hadland, et al. Gamma-secretase inhibitors repress thymocyte development. Proc Nati . Acad. Sci USA 98, 7487-7491). Un enfoque más- seguro idealmente podría ser utilizar reactivos que puedan reducir selectivamente la generación de Aß42 sin afectar la proteólisis intramembrana de otros sustratos de ?-secretasa. Como un ejemplo, se mostró que un subconjunto de fármacos anti-inflamatorios no esteroideos (NSAIDs, por sus siglas en ingles) disminuye la producción de Aß42 (Weggen, et al. (2001). A subset of NSAIDs lower amyloidogenic Abeta42 independently of cyclooxygenase activity.' Nature 414, 212-216) , without significantly affecting ?-secretase-mediated cleavage of ErbB4 (Weggen, et al. (2003). Abeta42-lowering nonsteroidal an i-inflammatory drugs preserve intramembrane cleavage of the amyloid precursor protein (APP) and ErbB-4 receptor and signaling through the APP intracellular domain. J. Biol . Chem . 278, 30748-30754) . Por consiguiente, pequeñas moléculas que son capaces de reducir selectivamente la producción de Aß42 (sin afectar la escisión de otros sustratos ?-secretasa) son atractivas y prometedoras como reactivos terapéuticos para el tratamiento de la AD. La mayoría de los casos de la enfermedad de Alzheimer familiar (FAD, por sus siglas en ingles) de inicio anticipado se provocan por mutaciones en dos genes relacionados que codifican para las proteínas de presenilina: PS1 y PS2 (Tanzi, et al. The gene defects responsible for familial Alzheimer' s disease: Neurobiol . Dis . 3:159-68, 1996: Hardy, J. , Amyloid, the presenilins and Alzheimer' s disease. Trends Neurosci . 20:154-59, 1997; Selkoe, D.J., Alzheimer' s disease: genes, proteins, and therapy. Physiol . Rev. 81:741-66, 2001). Las mutaciones asociadas con la FAD en las presenilinas provocan una producción aumentada de una forma más larga (42 residuos de aminoácidos) , más amiloidogénica de amiloide-beta (Aß42, por sus siglas en ingles) . Descifrar la patología asociada con las presenilinas proporciona una oportunidad única para aclarar una base molecular para la enfermedad de Alzheimer. Se sospechosa que un exceso en la producción beta-amiloidea provoca la característica demencia subyacente de la degeneración neuronal de AD. Ginseng es el nombre común proporcionado a las raíces deshidratadas de las plantas del género Panax que se ha utilizado extensivamente en Asia durante miles de años como un tónico de salud general y medicina para el tratamiento de un despliegue de enfermedades (Cho, et al. (1995) Pharmacological action of Korean ginseng. In the Society for Korean Ginseng (eds.): Understanding Korean Ginseng, Seoul: Hanlim Publishers, pp 35-54; Shihata S. (2001) Chemistry and cáncer preventing activities of ginseng saponins and some related triterpenoid compounds. J Korean Med Sci . 16 Suppl: S28-37; Attele, et al. (1999); Ginseng pharmacology: múltiple constituents and múltiple actions. Biochem Pharmacol . 58:1685-1693; Coleman, et al. (2003) . The effects of Panax ginseng on quality of life. J. Clin . Pharm . Ther. 28, 5-15; Coon and Ernst (2002) . Panax ginseng: a systematic review of adverse effects and drug interactions . Drug Saf. 25:323-44). El género Panax contiene aproximadamente seis especies naturales de Asia oriental y dos especies naturales del Este Norteamericano. Panax ginseng (ginseng asiático) y Panax quinquefolius L. (ginseng norteamericano) son las dos especies utilizadas de manera más común en composiciones nutracéuticas y farmacéuticas. Las raíces y sus extractos contienen una variedad de sustancias entre las que se incluyen saponinas. Es bien sabido que el ginseng tiene efectos farmacológicos específicos entre los que se incluyen la mejora de la función hepática y un mejoramiento inmunológico, así como también efectos anti-arteriosecleróticos, anti-trombóticos, anti-tensión, antidiabéticos, anti-hipertensión y anti-tumorales. Entre las diversas clases de compuestos aislados de la raíz de ginseng, se sabe que las saponinas de ginseng serán los constituyentes químicos que contribuyen a sus efectos farmacológicos. Estos compuestos son glucósidos de triperteno denominados ginsenóxidos Rx (x es el índice "a" a "k" dependiendo de su polaridad) . La polaridad se determinada por su movilidad en placas de cromatografía en capa fina y es una función del número de residuos de monosacárido en la cadena de azúcar de la molécula. A la fecha, se han aislado al menos 31 ginsenósidos de ginseng blanco y rojo. Todos los ginsenósidos se pueden dividir en tres grupos dependiendo de sus aglicones: ginsenósidos tipo protopanaxadiol (por ejemplo, Rbl, Rb2, Rc, Rd, (20R)Rg3, (20S)Rg3, Rh2), ginsenósidos tipo protopanaxatriol (por ejemplo, Re, Rf, Rgl, Rg2, Rbl) , y ginsenósidos tipo ácido oleanólico (por ejemplo, Ro) . Los ginsenósidos tanto tipo protopanaxadiol como tipo protopanaxatriol tienen una estructura de triterpeno, conocida como damarano (Attele, et al. (1999) Ginseng pharmacology: múltiple constituents and múltiple actions. Biochem . Pharmacol . 58:1685-1693). Rkl, Rg5 (20R)Rg3 y (20S)Rg3 son ginsenósidos que están casi excepcionalmente presentes en el ginseng procesado con calor, aunque no se encontró que existen como elementos traza en ginseng' sin procesar (Kwon, et al. (2001) Liquid chromatographic determination of less polar ginsenosides in processed ginseng. J. Chromatogr. A. 921; 335-339; Park, et al. (2002); Cytotoxic dammarane glycosides from processed ginseng. Chem . Pharm . Bul . 50, 538-540 Park, et al. (2002); Three new dammarane glycosides from heat-processed ginseng. Arch . Pharm . Res . 25, 428-432; Kim, et al. (2000); Steaming of ginseng at high temperature enhances biological activity. J. Nat . Prod. 63:1702-1702). Los carbohidratos entre los que se incluyen glucopiranosilo, arabinopiranosilo, arabinofuranosilo y ramnopiranosilo también pueden estar asociados químicamente con un ginsenósido particular. El procesamiento de ginseng con vapor a alta temperatura mejora adicionalmente el contenido de estos ginsenósidos Rkl, Rg5, (20R)Rg3 y (20S)Rg3, únicos, los cuales parecen poseer actividades farmacológicas novedosas.

Al menos algunas de las calidades benéficas del ginseng se pueden atribuir a su contenido de triterpensaponina, una mezcla de glucósidos denominada colectivamente como ginsenósidos. La patente de los Estados Unidos No. 5,776,460, ("la patente 460") expone un producto de ginseng procesado que tiene efectos farmacológicos mejorados. Este producto de ginseng, conocido comercialmente como "sun ginseng", contiene niveles aumentados de componentes farmacológicos efectivos debido al tratamiento con calor del ginseng a una alta temperatura durante un periodo de tiempo particular. Como se expone específicamente en la Patente 60, el tratamiento con calor del ginseng se puede realizar a una temperatura de 120° hasta 180 °C durante 0.5 hasta 20 horas, y de preferencia se realiza a una temperatura de 120° hasta 140°C durante 2 hasta 5 horas. El tiempo de calentamiento varía dependiendo de la temperatura de calentamiento, de tal forma que menores temperaturas de calentamiento requieren mayores tiempos de calentamiento mientras que mayores temperaturas de calentamiento requieren comparativamente tiempos de calentamiento más cortos . Recientemente, Tae- an Kim et al., demostraron que los únicos componentes del producto de ginseng procesado con calor expuestos en la patente 60 disminuyeron significativamente la producción de Aß42 en células (solicitud de patente pendiente) . Específicamente, los inventores descubrieron que al menos tres ginsenósidos Rkl, (20S)Rg3, y Rg5, los únicos componentes del ginseng procesado con calor conocido como "Sun Ginseng", así como también Rgk351, que es una mezcla de (20R)Rg3, (20S)Rg3, Rg5, y Rkl, disminuyen la producción de Aß42 en células mamíferas. Rgk351 y Rkl son más efectivos para reducir los niveles de Aß42. Además, Rkl también mostró que inhibe la producción de Aß42 en un análisis libre de células utilizando un complejo de ?-secretasa purificado parcialmente, que sugiere que Rkl modula su especificidad y/o actividad de la enzima ?-secretasa. Además, Tae- an Kim et al. Encontraron que ciertos ginsenósidos que no albergan actividad reductora de Aß42 in vitro, son efectivos para reducir Aß42 in vivo. Por ejemplo, algunos de los ginsenósidos del grupo 20 (S) -protopanaxatriol (PPT, por sus siglas en inglés) , tal como por ejemplo, Rgl, se pueden convertir en PPT después de la ingestión oral. De esta forma, mientras que Rgl en general no tiene actividad reductora amiloidea in vi tro, Rgl se puede convertir en un compuesto reductor amiloideo activo PPT in vivo.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona composiciones y métodos para prevenir y tratar enfermedades neurodegenerativas, tales como por ejemplo, enfermedad de Alzheimer. En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto que tiene la fórmula: en donde Rx se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y Rg es un alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH. El grupo alquilo I además puede contener oxígeno, nitrógeno, o fósforo y el grupo alquilo II además puede contener un grupo funcional seleccionado del grupo que consiste de hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff. En una modalidad, el grupo azúcar se selecciona del grupo que consiste de Glc, Ara (pyr) , Ara(fur), Rha, y Xyl . En otra modalidad, R se selecciona del grupo que consiste de: en donde la configuración de cualquier estéreo-centro es R o S; X es OR o NR, en donde R es alquilo o arilo; X es alquilo, OR o NR, en donde R es alquilo o arilo; y R' es H, alquilo, o acilo. En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición, en particular, una composición farmacéutica, que comprende un compuesto que tiene la fórmula general : en donde R], se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y R6 es alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH. La presente invención también proporciona un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula : que comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: (b) con un agente oxidante, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) tratar el compuesto formado en el paso (a) con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: en donde Ri es H u OH; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; y R4 es alquenilo, arilo, o alquilo. En una modalidad, el agente oxidante es anhídrido crómico y el agente reductor es NaBH . La presente invención proporciona además un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula : que comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente oxidante, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) opcionalmente, tratar el compuesto formado en el paso (b) con un derivado Rx protegido, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (d) tratar el compuesto formado en el paso (c) con un agente para desprotección, para formar un compuesto que tiene la fórmula: en donde Rx se selecciona del grupo, que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-R6P03~, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y Rg es alquenilo, arilo, o alquilo I; R se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH. Adicionalmente, la invención proporciona un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula: en donde el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula con un agente oxidante, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con un agente protector, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) tratar el compuesto formado en el paso (b) con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (d) tratar el compuesto formado en el paso (c) con Ac8-Glc-Glc-Br, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (e) tratar el compuesto formado en el paso (d) con un agente para desprotección, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (f) modificar adicionalmente el compuesto formado en el paso (e) para formar un compuesto que tiene la fórmula: En una modalidad, el material de partida, betulafolientriol, se obtiene de una planta, tal como por ejemplo, abedul común.

En un aspecto, la presente invención proporciona un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula: en donde el método comprende el paso de tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente reductor, tal como por ejemplo, NaBH4. En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula: en donde el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con Acg-Glc-Glc-Br, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) tratar el compuesto formado en el paso (d) con un agente para desprotección, para formar un compuesto que tiene la fórmula: Adicionalmente, la presente invención proporciona un método para tratar o prevenir una condición patológica en un sujeto, que comprende administrar un compuesto que tiene la fórmula general: al sujeto, en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y Rs es alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y 0-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados adiados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH. En una modalidad, la condición patológica es la neurodegeneración, de preferencia, la enfermedad de Alzheimer y un trastorno relacionado con Aß42. La presente invención proporciona además un método para inhibir la producción ß-amiloidea en un sujeto, que incluye inhibir la producción ß-amiloidea en un contexto in vi tro, que comprende administrar un compuesto que tiene la fórmula general: al sujeto, en donde Rx se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-RgCOO-, a-R6P03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y Rg es alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y 0-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es tí u OH. Los aspectos adicionales de la presente invención harán evidentes en vista de la siguiente descripción.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 representa un procesamiento proteolítico secuencial de la proteína precursora ß-amiloidea (APP), suministrada por las ß- y ?-secretasas. La Figura 2 muestra el perfil de HPLC de (a) Ginsen Blanco; (b) Ginsen Rojo, y (c) Sun Ginseng (ginsen procesado con calor) . La Figura 3 ilustra la fórmula química general de: (a) Rg3, (b) Rkl y (c) Rg5. La Figura 4 muestra que Rgk351, (20R)Rg3, Rkl y Rg5 reducen la generación de Aß42 en células CHO transfectadas establemente con APP695 humano. Las células CHO se trataron con los compuestos indicados (a 50 µg/ml) durante 8 horas. Los niveles de Aß42 en el medio se midieron mediante ELISA y se normalizaron a un APP de longitud total intracelular. La Figura 5 muestra que el tratamiento con Rgk351, Rkl y Rg5 redujeron Aß42 en el medio de células CHO que expresan la APP humana de una forma dependiente de la dosis. La Figura 6 demuestra que el tratamiento de Rgk351, Rkl y Rg5 de preferencia reduce Aß42 (contra Aß40) en el medio de las células CHO que expresa la APP humana de una forma dependiente de la dosis. Los niveles relativos de Aß y Aß42 se normalizaron a los valores obtenidos de las células no tratadas y las tratadas con vehículos. Se obtuvieron datos similares utilizando Neuro2a-sw (células Neuro2a de ratón que expresan la forma mutante de la enfermedad de Alzheimer familiar sueca de APP) y 293 células que expresan la APP humana. La Figura 7 representa un análisis de los usados celulares y muestra que Rgk351, Rkl y Rg5 provocaron la acumulación aumentada de fragmentos C-terminales de APP (sustratos ?-secretasa) , mientras que no se afectaron los niveles holoAPP de longitud total. La Figura 8 demuestra que el tratamiento de Rgk351 y Rkl redujo los niveles de Aß42 en células CHO que co-expresan la APP humana junto con ya sea presenilina 1 tipo silvestre o las formas mutantes vinculadas al Alzheimer familiar de presenilina 1 (delta E9 ad L286V) .

Los efectos de Rg5 sobre la generación de Aß42 fueron muy inferiores en comparación con Rgk351 y Rkl. La Figura 9 muestra los efectos de Rkl(Rl) y Rg5(R5) sobre la actividad de ?-secretasa Aß42-específica. Naproxeno (NP, por sus siglas en ingles) y sulfuro de sulindaco (SS, por sus siglas en ingles) se probaron en paralelo. La Figura 10 representa los efectos de ginsenósidos naturales sobre la producción de Aß42. Las estructuras de siete ginsenósidos estándares estudiados (Rbl, Rb2, Rc, Rd, Re, Rgl y Rg2) se muestran en la Tabla 1. Las células CHO transfectadas establemente con la APP695 humana junto con las formas ya sea tipo silvestre (A, células CHO-APP/PS1) o mutante ?E9 FAD (B, células CHO-APP/?E9PS1) de PS1 se utilizaron. Las células se trataron con los compuestos indicados (a 50 µM) durante 8 horas. Los niveles de Aß40 y Aß42 secretados en el medio se determinaron mediante ELISA y se normalizaron a la APP de longitud total intracelular. En las células CHO-APP/PS1, las cantidades de Aß promedio en las muestras control fueron 320 pM para Aß40 y 79 pM para Aß42. Los niveles relativos de Aß y Aß42 se normalizaron a los valores obtenidos a partir de las células no tratadas y tratadas con vehículo y se mostraron como % parta control + s.d.). Se muestra uno de los tres experimentos representativos.

La Figura 11 muestra la actividad para disminución de Aß42 de diversos ginsenósidos derivados del ginsen procesado con calor o vapor. Las células CHO-APP/PS1 (A) y CH0-APP/?E9PS1 (B) se trataron con los compuestos indicados a 50 µM durante 8 horas y los niveles de Aß40 y Aß42 secretados se determinaron como se describe en la Figura 1. Obsérvese que la potencia de la actividad reductora de Aß42 estuvo en el orden de Rkl >/= (20S)Rg3 > Rg5 > (20R)Rg3, y los efectos de Rhl y Rg6 no fueron significativos. Rh2 también exhibió efectos para la disminución de Aß42 aunque la viabilidad celular se afectó parcialmente en el tratamiento con 50 µM (datos no mostrados) . La mutación PS1-?E9 FAD disminuyó la respuesta de Aß42 al tratamiento con Rkl (B) . La Figura 12 muestra el tratamiento con Rgk351, Rkl y Rg5 redujo Aß42 en el medio de células CHO-APP de una forma dependiente de la dosis. (A) respuesta a la dosis de la actividad para disminución de Aß42 de Rkl y Rg5. El IC50 de Rkl fue de aproximadamente 20. µM. (B) Rkl de preferencia disminuye Aß42 (contra Aß40) en células CHO-APP cultivadas y el patrón de inhibición de Aß42 de Rkl es similar al del sulfuro de sulindaco (SS) . Los niveles relativos de Aß40 y Aß42 se normalizaron a los valores obtenidos a partir de células no tratadas y tratadas con vehículos. Se obtuvieron datos similares utilizando Neuro2a-sw (células Neuro2a de ratón que expresan la forma mutante de la enfermedad de Alzheimer familiar sueca de APP) y 293 células que expresan la APP humana (datos no mostrados) . Los efectos de Rg5 sobre la generación de Aß42 fueron mucho menores en comparación con Rgk351 y Rkl. La Figura 13 representa un análisis del procesamiento de APP después del tratamiento con Rkl. Los niveles en estado estable de la APP de longitud total y los fragmentos C-terminales de APP (APP-CTFs) se examinaron mediante análisis de transferencia Western utilizando un anticuerpo anti-Rl . El tratamiento con Rgk351 (mezcla de Rg3, Rg5 y Rkl) , Rkl y Rg5 dio por resultado en la acumulación aumentada de fragmentos C-terminales de APP (sustratos de ?-secretasa) en células CHO-APP y células neuro2a de neuroblastoma de ratón que expresan establemente la forma mutante FAD sueca (KM670/671NL) de APP (APPsw) . En el panel inferior se muestran los niveles de Aß42 correlacionados para cada muestra. La Figura 14 muestra que los ginsenósidos Rkl para disminución de Aß42 no afectó significativamente la producción de los dominios intracelulares (ICD, por sus siglas en ingles) de APP (A, AICD) , Notchl (B, NICD) o el receptor de neurotrofina p75 (p75NTR, p75-ICD) . Las fracciones membranosas aisladas de 293 células que sobre-expresan ya sea APP (A) , Notch-?E (B) o p75-?E (C) y se incubaron en presencia de los compuestos indicados: Compuesto E (CpdE, inhibidor de ?-secretasa general) , Rgk351, Rkl y sulfuro de sulindaco (SS) . En las muestras control (- Incúbate) se detectaron muy bajas cantidades de AICD, NICD y p75-ICD o en las muestras tratadas con Cpd.E, pero AICD, NICD y p75-ICD se produjeron abundantemente en muestras incubadas con Rgk351, Rkl y SS. La Figura 15 muestra que el ginsenósido Rkl para disminución de Aß42 y (20S)Rg3 inhibe la generación de -Aß en un análisis con ?-secretasa sin células. (A) fracciones membranosas solubilizadas con CHAPSO se incubaron con los sustratos de ?-secretasa recombinante junto con los compuestos indicados (a 100 µm) y los niveles de Aß42 y Aß40 se determinaron mediante ELISA como se describe (27-29) . (B) respuesta a la dosis de la actividad de Rkl para disminuir Aß40 y Aß42 y (20S)Rg3 en un análisis con ?-secretasa sin células. El IC50 de Rkl fue 27 ± 3 µM para Aß40 y 32 ± 5 para Aß42. El IC50 de (20S)Rg3 fue 27 ± 4 para Aß40 y 26 ± 7 para Aß42. La Figura 16 representa los efectos de los dos principales metabolitos de ginsenósidos, incluyendo 20 (S)-protopanaxatriol (PPT) y 20 (S) -protopanaxadiol (PPD, por sus siglas en inglés) sobre la generación de Aß42. 20 (S)-panaxatriol (PT, por sus siglas en ingles) y 20 (S)-panaxadiol (PD, por sus siglas en ingles) son los derivados artificiales de PPT y PPPD, respectivamente. El tratamiento con ya sea PPT o PT redujo la producción de Aß42 sin afectar los niveles de Aß42 en células Neuro2a que expresa la forma mutante sueca humana de la APP (Neuro2a-SW, panel inferior) , así como también en células CHO que expresan la APP humana tipo silvestre (datos no mostrados) . PPD y PD no confieren ninguno de los efectos inhibidores sobre la generación de Aß40 o Aß42. La Figura 17 muestra el análisis espectrométrico másico de la especie Aß producida a partir de células CHO-APP tratadas con DMSO (vehículo), Rkl, o (20S)Rg3. Obsérvese que el tratamiento conduce a una disminución en especie de Aß42 (1-42), y la elevación tanto en Aß37 (1-37) y Aß38 (1-38). El análisis espectrométrico másico de la especie Aß se realizó como se describió anteriormente (Wang R, Sweeny D, Gandy SE, Sisodia SS. The profile of soluble amyloid ß-protein in cultured cell media. J. Bio . Chem . 1996; 271: 31894-31902) . La Figura 18 representa el análisis de los niveles Aß secretados después del tratamiento de las células CHO-APP con DMSO (Control 1) , naproxeno (Control 2), Rkl, o (205)Rg3. Aß se inmunoprecipitó utilizando el anticuerpo 4G8 (adquirido de Senetek) , sometido a SDS-PAGE utilizando gel de tricina/urea (el protocolo se suministró por el Dr. Y. Ihara, Universidad de Tokio), y se analizó mediante análisis de Transferencia Western utilizando el anticuerpo 6E10 (Senetek) . Para identificar las especies Aß correspondientes se utilizaron los péptidos sintéticos Aß40 y Aß42.

La Figura 19 muestra los efectos del ginsenósido # Rkl y (20S)Rg3 sobre la secreción de Aß40 y Aß42 en neuronas corticales embrionarias primarias derivadas de ratones transgénicos Tg2576. El tratamiento de Rkl y Rg3 disminuyó el nivel de Aß40 y Aß42 secretados.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN En el sentido en el que se utiliza en la presente y en las reivindicaciones anexas, las formas singulares "un", "uno", y "el" incluyen referencias al plural a menos que el contexto indique claramente que es de otra manera. De esta forma, por ejemplo, la referencia a "un agente" incluye una pluralidad de estos agentes, y la referencia a "el ginsenósido" es una referencia a uno o más ginsenósidos y equivalentes de los mismos conocidos por aquellos con experiencia en la técnica, etc. Todas las publicaciones, solicitudes de patente, patentes y otras referencias mencionadas en la presente se incorporan como referencia en su totalidad.

De acuerdo con la presente invención, se proporcionan los compuestos y métodos para tratar la enfermedad de Alzheimer, la neurodegeneración y para modular la producción de la proteína ß-amiloidea (Aß) . En un "aspecto, la presente invención proporciona un compuesto que tiene la fórmula: en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y Rg es alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R es alquenilo, arilo, o alquilo II; y Rs es H u OH. El grupo alquilo I además puede contener oxígeno, nitrógeno, o fósforo y el grupo alquilo II además puede contener un grupo funcional tal como por ejemplo, hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff. En una modalidad, el azúcar se selecciona de un grupo que consiste de Glc, Ara(pyr), Ara(fur), Rha, y Xyl . En otra modalidad, R se selecciona del grupo que consiste - de : en donde la configuración de cualquier estereocentro es R o S; X es OR o NR, en donde R es alquilo o arilo; X' es alquilo, OR, NR, en donde R es alquilo o arilo; y R' es H, alquilo, o acilo. Como se expone en la presente, los compuestos son dammaranos, en particular ginsenósidos y sus análogos. En el sentido en el que se utiliza en la presente, el término "ginsenósido" se refiere a la clase de glucósidos de triterpeno que incluyen, sin limitación, los compuestos específicos Ral, Ra2, Ra3, Rbl, Rb2, Rb3, Rc, Rd, res, Rf, Rgl, (20R)Rg2, (20S)Rg2, (20R)Rg3, (20S)Rg3, Rg5, Rg6, Rhl, (20R)Rh2, (20S)Rh2, Rh3, Rh4, (20R)Rg3, (20S)Rg3, Rkl, Rk2, Rk3, Rsl, Rs2, Rs3, Rs4, Rs5, Rs6, Rs7, F4, Rgk351, protopanaxadiol (PPD) , protopanaxatriol (PPT) , DHPPD-I, DHPPD-II, DHPPT-I, DHPPT-II, una fracción soluble en butanol de sun ginseng, ginseng blanco o ginseng rojo o análogos u homólogos de los mismos. Los ginsenósidos de la presente invención se pueden asociar químicamente con carbohidratos incluyendo de manera enunciativa: glucopiranosilo, arabinopiranosilo, arabinofuranosilo y ramnopiranosilo. Los ginsenósidos de la presente invención pueden ser compuestos de ginsenósido aislados o ginsenósidos aislados y sintetizados adicionalmente. Los ginsenósidos aislados de la presente invención se pueden sintetizar adicionalmente utilizando los procesos que incluyen, aunque no necesariamente se limitan a: procesos térmicos, con luz, químicos, enzimáticos u otros procesos de síntesis en general conocidos por el experto en la técnica. La presente invención proporciona además un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula en donde el método comprende los pasos de: en donde el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente oxidante, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: en donde Ri es H u OH; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; y R es alquenilo, arilo, o alquilo . En una modalidad, el agente oxidante es anhídrido crómico y el agente reductor es NaBH4. El material de partida, es decir, el compuesto que tiene la fórmula: en particular, betulafolientriol, se puede obtener de plantas incluyendo de manera enunciativa abedul común. Los extractos de estas plantas son fuentes ricas de betulafolientriol y son materiales de partida deseados para elaborar los ginsenósidos debido a que tienen un costo significativamente menor que el ginsen. La presente invención también proporciona un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula: en donde el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente oxidante, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) opcionalmente, tratar el compuesto formado en el paso (b) con un derivado Ri protegido, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (d) tratar el compuesto formado en el paso (c) con un agente para desprotección, para formar un compuesto que tiene la fórmula: en donde Rx se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-RP03-, y ß-RgP03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y Rg es alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H ú OH. El grupo alquilo I puede contener además oxígeno, nitrógeno, o fósforo; y el grupo alquilo II puede contener además un grupo funcional, tal como por ejemplo, hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff. En una modalidad, el agente oxidante es anhídrido crómico y el agente reductor es NaBH . En otra modalidad, el derivado Ri protegido es un derivado de halógeno Ri protegido. Por ejemplo, el derivado Ri protegido se puede proteger mediante un grupo Acß-. El grupo Ri protegido se puede desproteger utilizando agentes tales como por ejemplo, NaOMe. Adicionalmente, la presente invención proporciona un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula: en donde el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente oxidante, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con un agente protector, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) tratar el compuesto formado en el paso (b) con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (d) tratar el compuesto formado en el paso (c) con Acs-Glc-Glc-Br, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (e) tratar el compuesto formado en el paso (d) con un agente para desprotección, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (f) modificar adicionalmente el compuesto formado en el paso (e) para formar un compuesto que tiene la fórmula: En una modalidad, el agente oxidante es anhídrido crómico, un agente reductor es NaBH , el compuesto se desprotege utilizando NaOMe. La presente invención también proporciona un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula: en donde el método comprende el paso de tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente reductor, tal como por ejemplo, NaBH4. También se proporciona un método para la síntesis de un compuesto que tiene la fórmula: en donde el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con Ace-Glc-Glc-Br, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) tratar el compuesto formado en el paso (d) con un agente para desprotección, para formar un compuesto que tiene la fórmula: En una modalidad, el agente reductor es NaBH4 y el compuesto se desprotege utilizando NaOMe. Adicionalmente, la presente invención proporciona composiciones de ginsenósido para utilizarse en la modulación en la producción beta-amiloidea en una célula, tratar o provenir la enfermedad de Alzheimer y tratar o prevenir la neurodegeneración que comprende una mezcla de ginsenósidos aislados o aislados y sintetizados adicionalmente, en donde uno o más de los ginsenósidos, se selecciona del grupo que consiste de: Ral, Ra2, Ra3, Rbl, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rf, Rgl, (20R)Rg2, (20S)Rg2, (20R)Rg3, (20S)Rg3, Rg5, Rg6, Rhl, (20R)Rh2, (20S)Rh2, Rh3, Rh4, (20R)Rg3, (20S)Rg3, Rkl, Rk2, Rk3, Rsl, Rs2, Rs3, Rs4, Rs5, Rs6, Rs7, F4, protopanaxadiol (PPD) , protopanaxatriol (PPT), DHPPD-I, DHPPD-II, DHPPT-I, DHPPT-II, una fracción soluble en butanol de sun ginseng, ginseng blanco o ginseng rojo o análogos u' homólogos de los mismos. En una modalidad de la invención, la composición de ginsenósido es Rgk351. La presente invención proporciona los métodos y las composiciones farmacéuticas para utilizarse en la disminución de la producción beta-amiloidea que comprende la utilización de un portador farmacéuticamente aceptable y un compuesto de ginsenósido. Los ejemplos de portadores farmacéuticamente aceptables, las formulaciones de las composiciones farmacéuticas, y los métodos para preparar las formulaciones se describe en la presente. Las composiciones farmacéuticas pueden ser útiles para administrar los compuestos de damarano y ginsenósido de la presente invención a un sujeto para tratar una variedad de trastornos, incluyendo neurodegeneración y/o su sintomatología asociada, según se expone en la presente. El compuesto de ginsenósido se proporciona en una cantidad que sea efectiva para tratar el trastorno (por ejemplo, la neurodegeneración) en un sujeto a quien se administra la composición farmacéutica. El experto, como se describió anteriormente, fácilmente puede determinar esta cantidad. En una modalidad, la presente invención proporciona un método para inhibir la producción ß-amiloidea en un sujeto, que comprende administrar un compuesto que tiene la fórmula general: al sujeto, en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-RgCOO-, a-R6P03, y ß-RgP03, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y R6 es alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH. En el sentido en el que se utiliza en la presente, el término "sujeto" incluye, por ejemplo, un animal, por ejemplo, un ser humano, rata, ratón, conejo, perro, oveja, y vaca, así como también un sistema in vitro, por ejemplo, células cultivadas, tejido y órganos . La presente invención también proporciona un método para tratar la neurodegeneración en un sujeto que necesita del tratamiento, al poner en contacto células (de preferencia células del CNS) en el sujeto con una cantidad de un compuesto de ginsenósido o una composición efectiva para disminuir la producción beta-amiloidea en las células, tratando con esto la neurodegeneración. Los ejemplos de neurodegeneración que se puede tratar con el método de la presente invención incluyen de manera enunciativa: enfermedad de Alzheimer, esclerosis lateral amietrófica (enfermedad de Lou Gehrig) , enfermedad de Binswanger, degeneración corticobasal (CBD, por sus siglas en ingles) , demencia que carece de histopatología distintiva (DLDH, por sus siglas en ingles) , demencia frontotemporal (FTD, por sus siglas en ingles) , corea de Huntington, esclerosis múltiple, myastenia gravis, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Pick, y parálisis supranuclear progresiva (PSP, por sus siglas en ingles) . En una modalidad preferida de la presente invención, la neurodegeneración es la enfermedad de Alzheimer (AD) o enfermedad de Alzheimer esporádica (SAD, por sus siglas en ingles) . En una modalidad adicional de la presente invención, la enfermedad de Alzheimer es la enfermedad de Alzheimer familiar de inicio temprano (FAD) . El experto puede determinar fácilmente cuándo se hayan aliviado o reducido al mínimo los síntomas clínicos de la neurodegeneración. La presente invención también proporciona un método para tratar o prevenir una condición patológica, tal como por ejemplo, neurodegeneración y un trastorno relacionado con Aß42, en un sujeto que necesita el tratamiento, que comprende administrar al sujeto uno o más compuestos de ginsenósido en una cantidad efectiva para tratan la neurodegeneración. El trastorno relacionado con Aß42 puede ser cualquier trastorno provocado por Aß42 o tiene un síntoma de acumulación de Aß42 aberrante. En el sentido en el que se utiliza en la presente la frase "efectivo para tratar la neurodegeneración" significa efectivo para mejorar o reducir al mínimo la afectación clínica de los síntomas de la neurodegeneración. Por ejemplo, cuando la neurodegeneración es la enfermedad de Alzheimer, la afectación o síntomas clínicos de la neurodegeneración se pueden mejorar o reducir al mínimo al reducir la producción de beta-amiloides y el desarrollo de placas seniles y hebras neurofibrilares, reduciendo al mínimo con esto o atenuando la pérdida progresiva de la función cognoscitiva. La cantidad del inhibidor efectiva para .tratar la neurodegeneración en un sujeto que necesita del tratamiento variará dependiendo de los factores particulares de cada caso, incluyendo el tipo de neurodegeneración, la etapa de la neurodegeneración, el peso del sujeto, la gravedad de la condición del sujeto y el método de administración. Esta cantidad se puede determinar fácilmente por el técnico experto. En una modalidad, la presente invención proporciona un método para el tratamiento o prevención de la neurodegeneración en un sujeto, que comprende administrar un compuesto que tiene la fórmula general : al sujeto, en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-RgCOO-, a-RgP03, y ß-RgP03, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y R6 es alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH. En una modalidad de la invención, la enfermedad de Alzheimer se trata en un sujeto que necesita del tratamiento al administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición de ginsenósido, un ginsenósido o análogo u homólogo de los mismos efectivo para tratar la enfermedad de Alzheimer. El sujeto de preferencia es un mamífero (por ejemplo, seres humanos, animales domésticos, y animales comerciales, incluyendo vacas, perros, monos, ratones, cerdos, y ratas) , y de mayor preferencia un ser humano. El término análogo en el sentido en el que se utiliza en la presente invención se refiere a un compuesto químico que es estructuralmente similar a otro y que se puede derivar teóricamente del mismo, aunque difiere ligeramente en la composición. Por ejemplo, un análogo del ginsenósido (20S)Rg3 es un compuesto que difiere ligeramente de (20S)Rg3 (por ejemplo, como en el reemplazo de un átomo por un átomo de un elemento diferente o en presencia de un grupo funcional particular), y se puede derivar de (20S)Rg3. El término homólogo, en el sentido en el que se utiliza en la presente invención, se refiere a miembros de una serie de compuestos en los cuales cada miembro difiere del siguiente miembro mediante una unidad química constante. El término sintetizar, en el sentido en el que se utiliza en la presente invención, se refiere a la formación de un compuesto químico particular a partir de sus partes constituyentes utilizando procesos de síntesis conocidos en la técnica. Estos procesos de síntesis incluyen, por ejemplo, el uso de luz, calor, químicos, medios enzimáticos u otros para formar la composición química particular. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" o "cantidad efectiva", en el sentido en el que se utilizan en la presente, significan la cantidad de la composición de acuerdo con la invención que sea necesaria para prevenir, curar, mejorar o al menos reducir al mínimo el daño clínico, los síntomas o complicaciones asociadas con la enfermedad de Alzheimer ya sea en una dosis individual o múltiple. La cantidad de ginsenósido efectiva para tratar la enfermedad de Alzheimer variará dependiendo de los factores particulares de cada caso, incluyendo la etapa o gravedad de la enfermedad de Alzheimer, el peso del sujeto, la condición del sujeto y el método de administración. El experto podrá determinar fácilmente estas cantidades. Por ejemplo, el daño o síntomas clínicos de la enfermedad de Alzheimer se pueden mejorar o reducir al mínimo al disminuir cualquier demencia u otra molestia sufrida por el sujeto; al extender la supervivencia del sujeto más allá de lo que podría de otra manera esperarse en ausencia de este tratamiento; o al inhibir o prevenir la progresión de la enfermedad de Alzheimer. Tratar la enfermedad de Alzheimer, en el sentido en el que se utiliza en la presente, se refiere al tratamiento mediante una o más de las condiciones subyacentes de la enfermedad de Alzheimer entre las que se incluyen de manera enunciativa: neurodegeneración, placas seniles, hebras neurofibrilares, déficits neurotransmisores, demencia y senilidad. En el sentido en el que se utiliza en la presente, prevención de la enfermedad de Alzheimer incluye prevenir el inicio de la enfermedad de Alzheimer, retardando el inicio de la enfermedad de Alzheimer, previniendo la progresión o avance de la enfermedad de Alzheimer, disminuyendo la progresión, o avance de la enfermedad de Alzheimer, y retardando la progresión o avance de la enfermedad de Alzheimer. Antes de la presente invención, se desconocía el efecto de los damaranos y ginsenósidos sobre la producción de la proteína beta amiloidea. La presente invención establece que los gínsenósidos tales como por ejemplo, (20S)Rg3, Rkl y Rg5 y sus análogos u homólogos también se pueden utilizar para prevenir o tratar a los pacientes con la enfermedad de Alzheimer. Esta terapia novedosa proporciona una estrategia única para tratar y prevenir la neurodegeneración y demencia asociada con la enfermedad de Alzheimer al modular la producción de Aß42. Además, la neurodegeneración y demencias no asociadas con la enfermedad de Alzheimer también se pueden tratar o prevenir utilizando los ginsenósidos de la presente invención para modular la producción del Aß42. Los ginsenósidos de la presente invención variantes funcionales naturales o sintéticos, que tienen actividad biológica de ginsenósido, así como también los fragmentos de ginsenósido que tengan actividad biológica de ginsenósido. En el sentido en el que se utiliza adicionalmente en la presente, el término "actividad biológica de ginsenósido" se refiere a la actividad que modula la generación del Aß42 bastante amiloidogénico, la isoforma de 42-aminoácidos del péptido ß-amiloideo. En una modalidad de la invención, el ginsenósido reduce la generación de Aß42 en las células de un sujeto. Los ginsenósidos y composiciones de ginsenósido comúnmente conocidas incluyen, de manera enunciativa: Ral, Ra2, Ra3, Rbl, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rf, Rgl, (20R)Rg2, (20S)Rg2, (20R)Rg3, (20S)Rg3, Rg5, Rg6, Rhl, (20R)Rh2, (20S)Rh2, Rh3, Rh4, (20R)Rg3, (20S)Rg3, Rkl, Rk2, Rk3, Rsl, Rs2, Rs3, Rs4, Rs5, Rs6, Rs7, F4, Rgk351, protopanaxadiol (PPD) , protopanaxatriol (PPT), DHPPD-I, DHPPD-II, DHPPT-I, DHPPT-II, una fracción soluble en butanol de sun ginseng, ginseng blanco o ginseng rojo o análogos u homólogos de los mismos.

En una modalidad de la invención, el ginsenósido es Rkl.

En otra modalidad de la invención, el ginsenósido es (20S)Rg3. En una modalidad adicional, el ginsenósido es Rg5. Todavía en otra modalidad, la composición del ginsenósido es Rgk351, una mezcla de (20S)Rg3, Rg5 y Rkl. Los métodos para preparar ginsenósidos tales como por ejemplo, Rkl, (20S)Rg3 y Rg5, así como también sus análogo y homólogos, son bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, la patente de los Estados Unidos No. 5,776.460, la exposición de la misma se incorpora en la presente en su totalidad, describe lá preparación de un producto de ginseng procesado en la cual una proporción del ginsenósido (Rg3 + Rg5) a (Rc + Rd + Rbl + Rb2) es superior a 1.0. El producto procesado expuesto en la patente de los Estados Unidos No. 5,776,460 se prepara mediante tratamiento con calor de ginseng a una alta temperatura de 120° hasta 180 °C durante 0.5 hasta 20 horas. El ginsenósido de la presente invención puede ser compuestos de ginsenósido aislado o compuestos de ginsenósido aislado y sintetizado adicionalmente. Los ginsenósidos aislados de la presente invención se pueden sintetizar adicionalmente utilizando procesos que incluyen de manera enunciativa: calor, luz, químicos, procesos de síntesis enzimática u otros en general conocidos por el experto. En un método de la presente invención, el compuesto del ginsenósido se administra a un sujeto en combinación con uno o más diferentes compuestos de ginsenósido. La administración de un compuesto de ginsenósido "en combinación con" uno o mas diferentes compuestos de ginsenósido se refieren a la coadministración de los agentes terapéuticos. La coadministración se puede presentar concurrentemente, secuencial o alternadamente. La co-administración concurrente se refiere a la administración de diferentes compuestos de ginsenósido prácticamente al mismo tiempo. La co-administración concurrente, los cursos de tratamiento con los dos o más diferentes ginsenósidos que se pueden correr simultáneamente, Por ejemplo, una formulación combinada, individual, que contiene tanto una cantidad de un compuesto de ginsenósido particular como una cantidad de un segundos diferente compuesto de ginsenósido en asociación física entre sí, se puede administrar a un sujeto. La formulación combinada individual puede consistir de una formulación oral, que contiene cantidades de ambos compuestos de ginsenósido, que se pueden administrar oralmente al sujeto, o una mezcla líquida, que contiene cantidades de ambos compuestos de ginsenósido, que se pueden inyectar en el sujeto. También está dentro de los confines de la presente invención que una cantidad de un compuesto de ginsenósido particular y una cantidad de uno o más compuestos de ginsenósido diferentes se pueden administrar concurrentemente a un sujeto, en formulaciones individuales por separado. Por consiguiente, el método de la presente invención no se limita a co-administración concurrente de los diferentes compuestos de ginsenósido en asociación física entre sí. En el método de la presente invención, los compuestos de ginsenósido también se pueden co-administrar a un sujeto en formulaciones individuales por separado, que se dividen durante un periodo de tiempo,- con el fin de obtener la máxima eficacia de la combinación. La administración de cada agente terapéutico puede variar desde una breve administración rápida a una perfusión continua. Cuando se divide durante un período de tiempo, la co-administración de los compuestos del ginsenósido puede ser secuencial o alternada. Para la coadministración secuencial, uno de los agentes terapéuticos se administra por separado, seguido por el otro. Por ejemplo, un curso total de tratamiento con un derivado de Rg5 se puede completar, y luego se puede seguir por un curso completo de tratamiento con un derivado de Rkl . Alternativamente, para la co-administración secuencial, un curso total de tratamiento con el derivado de Rkl se puede completar, luego seguido por un curso total de tratamiento con un derivado de Rg5. Para la co-administración alternativa, los cursos parciales de tratamiento con el derivado de Rkl se pueden alternar con cursos parciales de tratamiento con el derivado de g5, hasta que se haya administrado un tratamiento total de cada agente terapéutico. Los agentes terapéuticos de la presente invención (es decir, el ginsenósido y análogos del mismo) se puede administrar a un sujeto humano o animal mediante procedimientos conocidos incluyendo de manera enunciativa: administración oral, administración parenteral (por ejemplo, administración intramuscular, intraperitoneal, intravascular, intravenosa o subcutánea) , y administración transdérmica. De preferencia, los agentes terapéuticos de la presente invención se administran oral o intravenosamente . Para la administración oral, las formulaciones de ginsenósidos se pueden presentar como cápsulas, tabletas, polvos, granulos, o como una suspensión. Las formulaciones pueden tener aditivos convencionales tales como por ejemplo, lactosa, manitol, almidón de maíz, o almidón de papa. Las formulaciones también se pueden presentar con aglutinantes, tales como por ejemplo, celulosa cristalina, análogos de celulosa, acacia, almidón de maíz o gelatinas. Adicionalmente, las formulaciones se pueden presentar con desintegradores, tales como por ejemplo, almidón de maíz, almidón de papa, o carboximetilcelulosa de sodio. Las formulaciones también se pueden presentar con fosfato de calcio dibásico, anhidro o glucolato de almidón de sodio.

Por último, las formulaciones se pueden presentar con lubricantes, tales como por ejemplo, talco o estearato de magnesio. Para administración parenteral, las formulaciones de ginsenósidos se pueden combinar con una solución acuosa estéril que de preferencia es isotónica con la sangre del sujeto. Estas formulaciones se pueden preparar al disolver un ingrediente activo sólido en agua que contenga sustancias fisiológicamente compatibles, tales como por ejemplo, cloruro de sodio, glicina, y lo semejante, y que tengan un pH amortiguado compatible con las condiciones fisiológicas, de tal forma que produzcan una solución acuosa, luego proporcionando la solución estéril. Las formulaciones se pueden presentar en recipientes de dosis unitaria o de múltiples dosis, tales como por ejemplo, ampollas o viales sellados. Además, las formulaciones se pueden suministrar mediante cualquier modo de inyección incluyendo de manera enunciativa: epiaponeurótica, intracapsular, intracutánea, intramuscular, intraorbital, intraperitoneal (en particular en el caso de terapias regionales localizadas) , intraespinal, intraesternal, intravascular, intravenosa, parenquimatosa, o subcutánea. Para administración transdérmica, la formulación de ginsenósido se puede combinar con intensificadores para penetración cutánea, tales como por ejemplo, propilenglicol, polietilenglicol, isopropanol, etanol, ácido oleínico, N-metilpirrolidona, y lo semejante, que aumentan la permeabilidad de la piel al agente terapéutico, y permiten que el agente terapéutico penetre a través de la piel y dentro de la corriente sanguínea. El agente terapéutico/composiciones intensificadoras también se pueden combinar adicionalmente con una sustancia polimérica, tal como por ejemplo, etilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, etileno/vinilacetato, polivinilpirrolidona, y lo semejante, para proporcionar la composición en forma de gel, que se puede disolver en un solvente tal como por ejemplo, cloruro de metileno, se puede evaporar a la viscosidad deseada, y luego se puede aplicar a un material con respaldo para proporcionar un parche. La dosis del ginsenósido de la presente invención también se puede liberar o suministrar desde una mini-bomba osmótica. La velocidad de liberación de una mini-bomba osmótica elemental se puede modular con un micro-poro, un gel de respuesta rápida dispuesto en el orificio de liberación. Una mini-bomba osmótica podría ser útil para controlar la liberación, o el suministro designado, de los agentes terapéuticos. Está dentro de los confines de la presente invención que las formulaciones de ginsenósido se pueden asociar con un portador farmacéuticamente aceptable, comprendiendo con esto una composición farmacéutica. El portador farmacéuticamente aceptable debe ser "aceptable" en el sentido de que sea compatible con los otros ingredientes de la composición, y no dañino al recipiente del mismo. Los ejemplos de portadores farmacéuticamente aceptables incluyen de manera enunciativa: carboximetilcelulosa, celulosa cristalina, glicerina, goma arábiga, lactosa, estearato de magnesio, metilcelulosa, polvos, solución salina, alginato de sodio, sacarosa, almidón, talco, y agua, entre otros. Las formulaciones de la composición farmacéutica se pueden presentar convenientemente en dosificación unitaria. Las formulaciones de la presente invención se pueden preparar mediante métodos bien conocidos en la técnica farmacéutica. Por ejemplo, el compuesto activo se portar en asociación con un portador o diluyente, como una suspensión o solución. Opcionalmente, uno o más ingredientes accesorios (por ejemplo, soluciones tampón, agentes saborizantes, agentes tensioactivos y lo semejante) también se pueden agregar. La elección del portador dependerá de la vía de administración. La composición farmacéutica podría ser útil para administrar los agentes terapéuticos de la presente invención (es decir, los ginsenósidos, sus análogo, ya sea en formulaciones individuales por separado, o en una formulación combinada individual) a un sujeto para tratar la enfermedad de Alzheimer. Los agentes terapéuticos se proporcionan en cantidades que sean efectivas para tratar o prevenir la enfermedad de Alzheimer en el sujeto. Estas cantidades se pueden determinar fácilmente por el experto. Las cantidades terapéuticas efectivas del ginsenósido variarán, dependiendo de los factores particulares de cada caso, incluyendo la etapa de la enfermedad de Alzheimer, el peso del sujeto, la gravedad de la condición del sujeto, y el método de administración. Por ejemplo, (20S)Rg3 se puede administrar en una dosificación de aproximadamente 5 µg/día hasta 1500 mg/día. De preferencia, (20S)Rg3 se administra a una dosificación de aproximadamente 1 mg/día hasta 1000 mg/día. Rg5 se puede administrar en una dosificación de aproximadamente 5 µg/día hasta 1500 mg/día, aunque de preferencia se administra a una dosificación de aproximadamente 1 mg/día hasta 1000 mg/día. Rkl se puede administrar en una dosificación de aproximadamente 5 µg/día hasta 1500 mg/día, aunque de preferencia se administra a una dosificación de aproximadamente 1 mg/día hasta 1000 mg/día. Además, la composición de ginsenósido Rgk351 se puede administrar a una dosificación de aproximadamente 5 µg/día hasta 1500 mg/día, aunque de preferencia se administra a una dosificación de aproximadamente 1 mg/día hasta 1000 mg/día. Las cantidades terapéuticas efectivas adecuadas de cualquier compuesto de ginsenósido particular dentro de las variaciones listadas se pueden determinar fácilmente por el experto dependiendo de los factores particulares de cada caso. La presente invención abarca adicionalmente los métodos para prevenir la enfermedad de Alzheimer en un sujeto con una condición de enfermedad pre-Alzheimer, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de ginsenósido. En el sentido en el que se utiliza en la presente, "condición de enfermedad pre-Alzheimer" se refiere a una condición anterior a la enfermedad de Alzheimer. El sujeto con una condición de enfermedad pre-Alzheimer no se ha diagnosticado que tengan la enfermedad de Alzheimer, aunque no obstante puede exhibir algunos de los síntomas típicos de la enfermedad de Alzheimer y/o tener un historial médico similar para aumentar el riesgo del sujeto para desarrollar la enfermedad de Alzheimer. La invención proporciona adicionalmente los métodos para tratar o prevenir la enfermedad de Alzheimer en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de ginsenósido.

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos ilustran la presente invención, que se muestran para auxiliar en la comprensión de la invención, y no se deben interpretar como limitantes de ninguna forma del alcance de la invención según se define en las reivindicaciones después de los mismos. Los inventores han encontrado inesperadamente que al menos tres compuestos de ginsenósido, Rkl, (20S)Rg3 y Rg5 así como también la mezcla de Rgk351, disminuyeron la producción de Aß42 en células, tratando con esto la AD y neuropatogénesis que no está asociada con la AD y/o prevenir la progresión de la AD y la neuropatogénesis que no está asociada con la AD. Rgk351 y Rkl fueron más efectivos para reducir los niveles de Aß42. Además, Rkl mostró que inhibe la producción de Aß42 en el análisis sin células utilizando un complejo de ?-secretasa purificada parcialmente, lo que sugiere que Rkl modula cualquier especificidad y/o actividad de la enzima ?-secretasa.

Ejemplo 1 Se examinaron los efectos potenciales de los ginsenósidos y sus análogos en el tratamiento de la AD. En primer lugar, se seleccionaron varios ginsenósidos con base en sus efectos sobre la generación de Aß. Los efectos de diversos ginsenósidos sobre la producción de Aß (por ejemplo, Aß40 y Aß42) se valoró inicialmente al incubar células de ovario de hámster chino (CHO, por sus siglas en ingles) que expresan APP humana (células CHO-APP) con cada ginsenósido purificado del ginseng sin procesar (conocido como "ginseng blanco") . Estos ginsenósidos representativos incluyen Rbl, Rb2, Rc, Rd, Re, Re, Rgl y Rg2 y difieren en sus cadenas laterales y entidades de azúcar. Tablas 1-3. Estructura de ginsenósidos utilizados en el estudio y sus efectos sobre la generación de Aß42. Los mismos difieren en las dos o tres cadenas laterales unidas a la estructura de triterpeno común conocida como damarano. La estructura común para cada grupo de ginsenósidos se muestra en el panel superior. Los ginsenósidos que albergan la actividad para disminución de Aß42 se indican en la columna derecha de las tablas: actividad de disminución de Aß42 ("Sí") , sin efectos profundos ("No") , y sin determinar ("ND") . Los ginsenósidos que afectaron la viabilidad celular se indican como "citotóxicos". Las abreviaturas para carbohidratos son como sigue: Glc, D-glucopiranosilo; Ara (pyr) , L-arabinopiranosilo; Ara (fur) , L-arabinofuraniosilo; Rha, L-ramnopiranosilo .

Tabla 1 Tabla 2 Tabla 3 Después de 8 horas de incubación, se recolectaron los medios y se determinaron mediante ELISA los niveles de Aß40 y Aß42 secretados. Ninguno de los ginsenósidos del grupo Rbl, Rb2, Rc, Rd, Re, Re, Rgl y Rg2 exhibieron ninguno de los efectos inhibidores sobre la producción de Aß40 y Aß42 (Figura 10) . La vaporización de ginseng a alta temperatura proporcionó ginsenósidos adicionales con actividad farmacológica mejorada, incluyendo (20S)Rg3, Rkl y Rg5 (22-25) . Después, se probaron los efectos de estos ginsenósidos derivados del procesamiento con calor (por ejemplo, (20S)Rg3, Rhl, Rh2, Rkl, Rg6, Rg5) sobre la generación de Aß40 y Aß42. La selección inicial identificó tres ginsenósidos relacionados estructuralmente, Rkl, (20S)Rg3, y Rg5 que disminuyeron selectivamente la secreción de Aß42 (Figura 11) . Por el contrario, los niveles de Aß42 no se afectaron por (20R)Rg3, Rhl, y Rg6. Los niveles de Aß40 no cambiaron por el tratamiento con ninguno de los ginsenósidos probados. La potencia de la actividad para disminuir Aß42 fue mayor con Rkl y (20S)Rg3. Rg5 fue un reactivo para disminución de Aß42 menos efectivo en comparación con Rkl o (20S)Rg3 (Figura 2). La secreción de Aß40 se vio afectada por el tratamiento con Rkl únicamente a una concentración muy alta (-100 µM) y la viabilidad celular no se afectó por el tratamiento de Rkl bajo estas condiciones (hasta 100 µM, tratamiento de 8 hora; datos no mostrados) . De manera interesante, la mutación PSl ?E9 FAD disminuyó la respuesta para la disminución de Aß42 para el tratamiento con (20S)Rg3, Rkl y Rg5 (Figura 11B) en comparación con las células que expresan PSl tipo silvestre (Figura HA) . Análisis adicionales revelaron que Rkl y Rg5 disminuyeron Aß42 de una forma dependiente de la dosis (Figura 12A) . Un tratamiento durante la noche con Rgk351, Rkl, y Rg5 también redujo la producción de Aß42 en células CHO-APP (Figura 12B) . La actividad para disminución de Aß42 de Rkl fue similar a la del sulfuro de sulindaco, uno de los NSAID para disminución de Aß42 conocido. Durante el tratamiento en la noche, la producción de Aß40 también se afectó ligeramente mediante el tratamiento con Rkl o sulfuro de sulindaco (Figura 12B) . Estos estudios proporcionan una relación de estructura-actividad entre las estructuras químicas de ginsenósidos y la actividad para disminución de Aß42, proporcionando además la base para diseñar análogos para disminución de Aß42 adicionales así como también para definir una clase de compuestos que alberguen una actividad para disminución de Aß42. Rkl no afectó los niveles en estado estable de la APP de longitud total en células tanto CHO-APP como Neuro2a-APPsw (Figura 13) , lo que sugiere que la reducción de Aß42 probablemente es debida al procesamiento posttraducción alterado de la APP. En contraste con la forma de longitud total, los niveles en estado estable de los fragmentos de APP C-terminales se sobre-regularon mediante el tratamiento con Rkl (Figura 13) . Estos datos sugieren que Rkl pueda afectar el paso de escisión de ?-secretasa (por ejemplo, la escisión de Aß42) , provocando por lo tanto la acumulación de fragmentos C-terminales de APP, según se ha mostrado para un compuesto E inhibidor de ?-secretasa general. Los niveles de Aß42 en el medio de cada una de las muestras correspondientes se muestran en el panel inferior. Ya que el efecto de Rkl fue selectivo para Aß42 (pero no para Aß40) en un análisis con base celular, la cuestión de que Rkl afecte o no otros eventos de escisión suministrados por ?-secretasa, incluyen la generación de AICD que resulta de una escisión transmembrana de APP distal desde cualquier sitio Aß40 o Aß42, y la escisión intramembrana suministrada por ?-secretasa del receptor de neurotrofina Notchl o p75 (p75NTR) para proporcionar los dominios intracelulares Notchl o p75NTR (NICD o p75-ICD, respectivamente) se probó. La generación sin células de AICD, NICD y p75-ICD no se afectó por la incubación con Rgk351 o Rkl (Figura 5) . Bajo estas condiciones, el compuesto E inhibió eficientemente la generación sin células de los ICD y el sulfuro de sulindaco no afectó la generación de ICD proveniente de la APP, Notchl o p75NTR. Estos datos indican que Rkl no es un inhibidor general de la escisión de ?-secretasa y no afecta la escisión intramembrana de otro sustrato de ?-secretasa, tal como por ejemplo, Notchl o p75NTR. Después, se estudiaron los efectos inhibidores de Rkl y (20S)Rg3 sobre la generación de Aß en un análisis de ?-secretasa in vitro . Tanto Rkl como sulfuro de sulindaco inhibieron potencialmente la generación de Aß42 in vi tro (Figura 15) . Por el contrario, naproxeno, un NSAID sin actividad para disminuir Aß42, no tuvo efectos sobre la producción de Aß42 (Figura 15A) . Similar a lo que se ha reportado para los NSAID que disminuyen Aß42 ( eggen, et al., Evidence that nonsteroidal anti-inflammatory drugs decrease amyloid beta 42 production by direct modulation of gamma-secretase activity, J. Bíol . Chem . 278:3183-3187 (2003) ) , los ginsenósidos para disminución de Aß42 (por ejemplo, Rkl y (20S)Rg3) inhibieron tanto Aß40 como Aß42 con una potencia similar en un análisis de ?-secretasa sin células (Figura 15B) , aunque ambos compuestos afectaron principalmente la producción de Aß42 en el análisis con base celular. Los ginsenósidos se metabolizan por bacterias intestinales humanas después de la administración oral del extracto de ginseng (Kobayashi K., et al., Metabolism of ginsenoside by human intestinal bacteria [II] Ginseng Review 1994; 18: 10-14; Hasegawa H., et al., Main ginseng saponin metabolites formed by intestinal bacteria. Planta Med. 1996; 62: 453-457.). Por lo tanto, se probaron los efectos de dos principales metabolitos de ginsenósidos, incluyendo 20 (S) -protopanaxatriol (PPT) y 20 (S)-protopanaxadiol (PPD) sobre la generación de Aß42. 20 (S)-panaxatriol (PT) y 20 (S) -panaxadiol (PD) son los derivados artificiales de PPT y PPPD, respectivamente. El tratamiento con ya sea PPT o PT redujo la producción de Aß42 sin afectar los niveles de Aß42 en células Neuro2a que expresa la forma mutante sueca humana de APP (Neuro2a-SW) así como también en células CHO que expresan la APP humana tipo silvestre (Figura 16) . PPD y PD no confieren ninguno de los efectos inhibidores sobre la generación de Aß40 o Aß42. En resumen, se han identificado los compuestos naturales para disminución de Aß42 que se originan del ginseng procesado con calor. Los ginsenósidos para disminución de Aß42, incluyendo Rkl y (20S)Rg3, aparecen para modular específicamente la actividad de ?-secretasa que está implicada en una producción de Aß42. La actividad estructural define una clase de compuestos que podrían servir como un fundamento para el desarrollo de agentes terapéuticos efectivos para el tratamiento de la AD.

Ejemplo 2 Los beneficios de la terapia con ginsenósidos para el tratamiento de la neurodegeneración asociada con la AD se pueden demostrar en un modelo murino de AD. Específicamente, los compuestos de ginsenósido (20S)Rg3, Rkl, Rg5 y Rgk351 se pueden utilizar para tratar ratones que padecen de neurodegeneración asociada con AD. Los ratones que expresan la APP humana así como también los ratones que expresan la forma mutante de la enfermedad de Alzheimer familiar sueca de APP se pueden obtener del Jackson Laboratory, 600 Main Street, Bar Harbor, Maine 04609. Entonces se pueden estudiar cuatro grupos de ratones: (1) ratones APP sin el tratamiento con ginsenósido (placebo) ; (2) ratones suecos sin el tratamiento con ginsenósido (placebo) ; (3) ratones APP + Rg5 (100 µg/µl/día) ; y (4) ratones suecos + Rg5 (100 µg/µl/día) . Después de aproximadamente 16 semanas de una terapia con inyecciones, se pueden medir las cantidades de Aß42 en el suero de los ratones. Se espera que los resultados de este estudio demuestren los beneficios generales de la terapia con ginsenósidos por el tratamiento de la neurodegeneración asociada con la AD. Los ratones con APP y suecos sin tratamiento con ginsenósido deben tener niveles significativamente altos de suero Aß42 y demuestran un comportamiento característico de la neurodegeneración, en comparación con los ratones con APP y suecos que recibieron tratamiento con ginsenósido.

Ejemplo 3 Las sapogeninas genuinas de los glucósidos de ginseng son estructuralmente similares a algunos constituyentes químicos de otras plantas . El betulafolientriol [dammar-24-eno-3a, 12ß, 20 (S) -triol} ] aislado de las hojas de abedul difiere de la sapogenina genuina de los glucósidos de ginseng, 20 (S)-protopanaxadiol, en la configuración en C-3 únicamente. Por lo tanto, el betulafolientriol, económico y relativamente accesible, lo hace un sustrato conveniente para preparar el 20 (S) -protopanaxadiol y su glucósido Rg3, Rg5, y Rkl.

Esquema 1 El betulafolientriol se aisló de un extracto volátil de las hojas de Btula péndula, seguido por cromatografía sobre gel de sílice y cristalización a partir de acetona: p.f. 195-195°, lit . 197 98° (Fisher et al . , (1959) Justus Liebigs Ann . Chem . 626:185). El derivado de 12-O-acetilo de 20 (S)-protopanaxadiol (3) se preparó a partir de betulafolientriol mediante la secuencia de reacciones mostrada en el Esquema 1. Betulafolientriol se oxida a la cetona 1, dammar-24-eno-12ß, 20 (S) -diol-3-ono, p.f. 197-199°, lit. 196-199°, (rendimiento: 60%), que se acetila con anhídrido acético en piridina para proporcionar el compuesto 2, 12-0-acetil-dammar-24-eno-12ß, 20 (S) -diol-3-ono (rendimiento: 100%?) (Nagal et al . , (1973) Chem. Pharm. Bull. 9:2061). ÍH NMR (CDC13) del compuesto 2: 0.90 (s, 3H) , 0.95 (s, 3H) , 1.0 (s, 6H) , 1.1 (s, 3H) , 1.1 (s, 3H) , 1.65 (s, 3H) , 1.72 (s, 3H) , 2.1 (s, 3H) , 3.04 (s, 1H) , 4.73 (td, 1H) , 5.17 (t, 1H) . La reducción con borohidruro de sodio del compuesto 2 en 2-propanol proporcionó el compuesto 3, 12-0-acetil-dammar-24-eno-3ß, 12ß, 20 (S) -triol (rendimiento: 90%). ÍH NMR (CDC13) del compuesto 3: 0.78 (s, 3H) , 0.86 (8, 3H) , 0.95 (s, 3H) , 1.0 (s, 3H) , 1.02 (s, 3H) , 1.13 (s, 3H) , 1.64 (s, 3H) , 1.71 (s, 3H) , 2.05 (s, 3H, OAc), 3.20 (dd, ÍH, H-3a) , 4.73 (td, ÍH, H-12a) , 5.16 (t, ÍH, H-24) . La condensación del compuesto 3 con bromuro de 0-acetilato-azúcar en presencia de óxido de plata y tamices moleculares 4A en dicloroetano dio por resultado en la formación del compuesto 4 (rendimiento: 50%) . Específicamente, una mezcla del compuesto 3 (1.08 g, 2 mmol), óxido de plata (1.4 g, 6 mmol), a-acetobromoglucosa (2.47 g, 6 mmol), tamices moleculares 4A (1.0 g) y dicloroetano (20 ml) se agitó a temperatura ambiente hasta que la acetobromoglucosa haya reaccionado (TLC, por sus siglas en inglés) . La mezcla de reacción luego se diluyó con CHC13 y se filtró. El solvente se evaporó y el residuo se lavó con agua caliente para eliminar el exceso de los derivados de glucosa. La cromatografía en columna de gel de sílice (8:1 n-hexano-acetona) proporcionó el compuesto 4 (853 mg) . La desprotección del glucósido 4 proporcionó el ginsenósido Rg3 que se concentró a Rkl o Rg5 en 2 pasos.

Esquema 2 Mientras que la invención anterior se ha descrito en algún detalle para fines de claridad y comprensión, se apreciará por aquellos expertos en la técnica, a partir de una lectura de la exposición, que se pueden realizar diversos cambios en la forma y detalles sin apartarse del verdadero alcance de la invención en las reivindicaciones anexas.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito el presente invento, se considera como una novedad y, por lo tanto, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes REIVINDICACIONES : 1. Un compuesto que tiene la fórmula general: en donde R1 se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-RgP03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y Rg es un alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 ' es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH.
2. El compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque el grupo alquilo I contiene además oxígeno, nitrógeno, o fósforo.
3. El compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque el grupo alquilo II contiene además un grupo funcional seleccionado del grupo hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff.
4. El compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque el azúcar se selecciona del grupo que consiste de Glc, Ara (pyr) , Ara (fur), Rha, y Xyl.
5. El compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque R se selecciona del grupo que consiste de: en donde la configuración de cualquier estéreo-centro es R o S; X es OR o NR, en donde R es alquilo o arilo; X' es alquilo, OR o NR, en donde R es alquilo o arilo; y R' es H, alquilo, o acilo.
6. El uso de un compuesto caracterizado porque tiene la fórmula general: en el tratamiento o prevención de una condición patológica, en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-RgCOO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y R6 es un alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH.
7. El uso según la reivindicación 6, caracterizado porque el grupo del alquilo I contiene además oxígeno, nitrógeno, o fósforo; y el grupo alquilo II contiene además un grupo funcional seleccionado del grupo hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff.
8. El uso según la reivindicación 6, caracterizado porque la condición patológica es la neurodegeneración .
9. El uso según la reivindicación caracterizado porque la condición patológica es la enfermedad de Alzheimer.
10. El uso según la reivindicación 6, caracterizado porque la condición patológica es un trastorno relacionado con Aß42.
11. Un compuesto aislado caracterizado porque tiene la fórmula: en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-RgP03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y R6 es un alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH.
12. El compuesto aislado según la reivindicación 10, caracterizado porque el grupo alquilo I contiene además oxígeno, nitrógeno, o fósforo; y el grupo alquilo II contiene además un grupo funcional seleccionado del grupo hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff.
13. Una composición caracterizada porque comprende un compuesto que tiene la fórmula general: en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y R6 es un alquenílo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y 0-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH.
14. La composición según la reivindicación 13, caracterizada porque el grupo alquilo I contiene además oxígeno, nitrógeno, o fósforo; y el grupo alquilo II contiene además un grupo funcional seleccionado del grupo hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff.
15. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un portador farmacéuticamente aceptable y un compuesto que tienen la fórmula general: en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-RgCOO-, ß-R6COO-, a-R6P03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y Rg es un alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH.
16. La composición farmacéutica según la reivindicación 15, caracterizada porque el grupo alquilo I contiene además oxígeno, nitrógeno, o fósforo; y el grupo alquilo II contiene además un grupo funcional seleccionado del grupo hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff.
17. Un método para la síntesis de un compuesto caracterizado porque tiene la fórmula: el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente oxidante, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: en donde Ri es H u OH; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; y R4 es alquenilo, arilo, o alquilo.
18. El método según la reivindicación 17, caracterizado porque el agente oxidante es anhídrido crómico .
19. El método según la reivindicación 17, caracterizado porque el agente reductor es NaBH4.
20. El método según la reivindicación 17, caracterizado porque el compuesto que tiene la fórmula: se obtiene de una planta.
21. El método según la reivindicación 20, caracterizado porque la planta se selecciona del grupo que consiste de abedul común.
22. El método según la reivindicación 20, caracterizado porque el compuesto que tiene la fórmula: es betulafolientriol.
23. Un método para la síntesis de un compuesto caracterizado porque tiene la fórmula: el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente oxidante, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) opcionalmente, tratar el compuesto formado en el paso (b) con un derivado Ri protegido, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (d) tratar el compuesto formado en el paso (c) con un agente para desprotección, para formar un compuesto que tiene la fórmula: en donde Ri se selecciona del' grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-R6COO-, a-R6P03, y ß-R6P03, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y R6 es alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y 0-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH.
24. El método según la reivindicación 23, caracterizado porque el grupo alquilo I contiene además oxígeno, nitrógeno, o fósforo; y el grupo alquilo II contiene además un grupo funcional seleccionado del grupo hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff.
25. El método según la reivindicación 23, caracterizado porque el agente oxidante es anhídrido crómico.
26. El método según la reivindicación 23, caracterizado porque el agente reductor es NaBH4.
27. El método según la reivindicación 23, caracterizado porque el derivado Ri protegido es un derivado de halógeno Ri protegido.
28. El método según la reivindicación 23, caracterizado porque el derivado Ri protegido se protege mediante un grupo Acs- .
29. El método según la reivindicación 28, caracterizado porque es el compuesto se desprotege utilizando NaOMe.
30. El método según la reivindicación 23, caracterizado porque el compuesto que tiene la fórmula: se obtiene de una planta.
31. El método según la reivindicación 30, caracterizado porque la planta se selecciona del grupo que consiste de abedul común.
32. El método según la reivindicación 30, caracterizado porque el compuesto que tiene la fórmula: es betulafolientriol.
33. Un método para la síntesis de un compuesto caracterizado porque tiene la fórmula: el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente oxidante para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con un agente protector, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) tratar el compuesto formado en el paso (b) con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (d) tratar el compuesto formado en el paso (c) con Acs-GIc-GIc-Br, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (e) tratar el compuesto formado en el paso (d) con un agente para desprotección, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (f) modificar adicionalmente el compuesto formado en el paso (e) para formar un compuesto que tiene la fórmula:
34. El método según la reivindicación 33, caracterizado porque el agente oxidante es anhídrido crómico.
35. El método según la reivindicación 33, caracterizado porque el agente reductor es NaBH4.
36. El método según la reivindicación 33, caracterizado porque es el compuesto se desprotege utilizando NaOMe.
37. El método según la reivindicación 33, caracterizado porque el compuesto que tiene la fórmula: se obtiene de una planta.
38. El método según la reivindicación 37, caracterizado porque la planta se selecciona del grupo que consiste de abedul común.
39. Un método para la síntesis de un compuesto caracterizado porque tiene la fórmula: el método comprende el paso de tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula:
40. El método según la reivindicación 39, caracterizado porque el agente reductor es NaBH .
41. Un método para la síntesis de un compuesto caracterizado porque tiene la fórmula: el método comprende los pasos de: (a) tratar un compuesto que tiene la fórmula: con un agente reductor, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (b) tratar el compuesto formado en el paso (a) con Ac8-Glc-Glc-Br, para formar un compuesto que tiene la fórmula: (c) tratar el compuesto formado en el paso (d) con un agente para desprotección, para formar un compuesto que tiene la fórmula:
42. El método según la reivindicación 41, caracterizado porque el agente reductor es NaBH4.
43. El método según la reivindicación 41, caracterizado porque es el compuesto se desprotege utilizando NaOMe.
44. Un método para tratar o prevenir una condición patológica en un sujeto, caracterizado porque comprende administrar un compuesto que tiene la fórmula general: al sujeto, en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6C00-, ß-RgCOO-, a-RgP03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y Rg es un alquenilo, arilo, o alquilo I; R se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH.
45. El método según la reivindicación 44, caracterizado porque el grupo alquilo I contiene además oxígeno, nitrógeno, o fósforo; y el grupo alquilo II contiene además un grupo funcional seleccionado del grupo hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff.
46. El método según la reivindicación 44, caracterizado porque la condición patológica es neurodegeneración.
47. El método según la reivindicación 44, caracterizado porque la condición patológica es la enfermedad de Alzheimer.
48. El método según la reivindicación 44, caracterizado porque la condición patológica es un trastorno relacionado con Aß42.
49. El método según la reivindicación 44, caracterizado porque el sujeto es un ser humano.
50. Un método para inhibir la producción ß-amiloidea en un sujeto, caracterizado porque comprende administrar un compuesto que tiene la fórmula general : al sujeto, en donde Ri se selecciona del grupo que consiste de a-OH, ß-OH, a-O-X, ß-O-X, a-R6COO-, ß-RgCOO-, a-RgP03-, y ß-R6P03-, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos, y R5 es un alquenilo, arilo, o alquilo I; R2 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, OAc, y O-X, en donde X es un carbohidrato que contiene uno o más azúcares o derivados acilados de los mismos; R3 se selecciona del grupo que consiste de H, OH, y OAc; R4 es un alquenilo, arilo, o alquilo II; y R5 es H u OH.
51. El método según la reivindicación 50, caracterizado porque el grupo alquilo I contiene además oxígeno, nitrógeno, o fósforo; y el grupo alquilo II contiene además un grupo funcional seleccionado del grupo que consiste de hidroxilo, éter, cetona, oxima, hidrazona, imina, y base Schiff.