MD4648C1 - Utilizare a N-ciclohexil-2-[1-(piridin-2-il)etiliden]hidrazincarbotioamidei în calitate de inhibitor al proliferării microorganismelor gram-pozitive şi fungilor Candida albicans - Google Patents

Abstract

Invenţia se referă la chimie şi medicină, şi anume la utilizarea compusului din clasa tiosemicarbazonelor, care manifestă o activitate antimicrobiană şi antimicotică înaltă şi poate găsi aplicare în medicină şi veterinărie în calitate de preparat cu acţiune antimicrobiană şi antimicotică sau de ingredient la crearea mediilor nutritive selective de cultivare a microorganismelor şi fungilor.Esenţa invenţiei constă în utilizarea în calitate de inhibitor al proliferării microorganismelor gram-pozitive şi fungilor Candida albicans a N-ciclohexil-2-[1-(piridin-2-il)etiliden]hidrazincarbotioamidei cu formula :.Rezultatul invenţiei constă în sporirea activităţii bacteriostatice şi bactericide faţă de microorganismele gram-pozitive Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Enterococcus faecalis de 2...12 ori şi asigurarea unei activităţi antimicotice înalte faţă de fungii Candida albicans.

Description

Invenţia se referă la chimie şi medicină, şi anume la utilizarea compusului organic biologic activ din clasa tiosemicarbazonelor, care manifestă activitate antimicrobiană şi antimicotică faţă de un spectru larg de microorganisme gram-pozitive şi fungii din specia Candida albicans. Datorită acestor proprietăţi el poate găsi aplicare în medicină şi veterinărie în calitate de preparat cu acţiune antimicrobiană şi antimicotică sau în calitate de ingredient la crearea mediilor nutritive selective de cultivare a microorganismelor şi fungilor.

În practica medicală pentru tratarea şi profilaxia proceselor inflamatorii şi purulente se utilizează furacilina (nitrofural) - [(5-nitrofuran-2-il)metiliden]aminourea [1], care are următoarea formulă :

.

Acest compus inhibă creşterea şi multiplicarea majorităţii microorganismelor gram-pozitive şi gram-negative în limitele concentraţiilor 2,34...9,37 µg/ml, însă nu poate fi utilizat în cazurile, când este necesară o activitate antimicrobiană mai înaltă a preparatului faţă de bacteriile susnumite şi nu este utilizat pentru tratarea micozelor din cauza lipsei activităţii antifungice.

Din compuşii chimici care conţin în componenţa lor fragmentul tiosemicarbazidic şi care simultan inhibă creşterea şi multiplicarea microorganismelor gram-pozitive şi fungilor din specia Candida albicans, cel mai înalt efect antimicrobian şi antifungic a fost obţinut în cazul metil-N'-[(2-hidroxinaftalen-1-il)metiliden]-N-prop-2-en-1-ilhidrazonotioatului [2] cu formula :

După activitatea antimicrobiană faţă de Staphylococcus aureus el depăşeşte de 13,4...3,3 ori activitatea bacteriostatică şi bactericidă a furacilinei, iar faţă de alte microorganisme gram-pozitive manifestă activitatea la nivelul nitrofuralului. În acelaşi timp el manifestă şi activitate antimicotică faţă de fungii din specia Candida albicans, care depăşesc de 110...115 ori caracteristicile respective ale nistatinei, utilizată actualmente în medicină pentru tratarea şi profilaxia micozelor (cu furacilină nu se compară din cauza lipsei actvităţii antimicotice). Dezavantajul metil-N'-[(2-hidroxinaftalen-1-il)metiliden]-N-prop-2-en-1-ilhidrazonotioatului constă în faptul că el nu posedă o activitate antimicrobiană şi antimicotică simultană suficient de înaltă şi din această cauză compusul dat nu a găsit o aplicare în medicină sau medicina veterinară.

Problema pe care o rezolvă prezenta invenţie constă în extinderea arsenalului de inhibitori ai microorganismelor gram-pozitive şi fungilor din specia Candida albicans cu activitate antimicrobiană şi antimicotică înaltă.

Esenţa invenţiei constă în utilizarea în calitate de inhibitor al proliferării microorganismelor gram-pozitive şi fungilor din specia Candida albicans a N-ciclohexil-2-[1-(piridin-2-il)etiliden]hidrazincarbotioamidei (N-ciclohexiltiosemicarbazonei 2-acetilpiridinei) cu formula :

.

Procedeul de sinteză a tioamidei date, structura şi proprietăţile ei sunt descrise în literatură (Salam M. A., Affan M. A., Ahmad F. B., Ng S. W., Tiekink E. R. T.

1-Cyclohexyl-3-{(E)-[1-(pyridine-2-yl)ethylidene]amino}thiourea. Acta Cryst., Sect. E., 2011, 67, p. 955; Ming-Xue Li, Dong Zhang, Li-Zhi Zhang, Jing-Yang Niu, Bian-Sheng Ji. Synthesis, crystal structures and biological activities of 2- acetylpyridine N(4)-cyclohexylthiosemicarbazone and its manganese(II) and nickel(II) complexes. Inorg. Chem. Com., 2010, Vol. 13, nr. 12, p. 1572-1575).

Investigând proprietăţile ei biologice a fost stabilit că ea inhibă proliferarea unor bacterii şi unor celule canceroase (Kovala-Demertzi D., Galani A., Kourkoumelis N., Miller J. R., Demertzis M. A. Synthesis, characterization, crystal structure and antiproliferative activity of platinum(II) complexes with 2-acetylpyridine-4-cyclohexyl-thiosemicarbazone. Polyhedron, 2007, Vol. 26, p. 2871-2879) şi a micobacteriilor tuberculozei (Pavan F. R., Maia P. I. S., Leite S. R. A., Deflon V. M., Batista A. A., Sato D. N., Franzblau S. G., Leite C. Q. F. Thiosemicarbazones, semicarbazones, dithiocarbazates and hydrazide-hydrazones: anti-Mycobacterium tuberculosis activity and cytotoxicity. Eur. J. Med. Chem., 2010, Vol. 45, p. 1898-1905).

Proprietăţile antimicrobiene ale acestui compus sunt puţin studiate, iar antifungice - nu sunt descrise în literatură.

Rezultatul tehnic al invenţiei constă în sporirea activităţii bacteriostatice şi bactericide faţă de microorganismele gram-pozitive Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Enterococcus faecalis de 2...12 ori şi asigurarea unei activităţi antimicotice faţă de fungii Candida albicans la nivelul celei mai apropiate soluţii.

Determinarea activităţii antimicrobiene a compusului revendicat a fost efectuată în mediu nutritiv lichid [bulion peptonat din carne de 2%, pH = 7,0] prin metoda diluţiilor succesive. În calitate de cultură de referinţă în experimentul ,,in vitro” au fost folosite tulpinile standard de Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ГИСК 8035), Enterococcus faecalis şi Escherichia coli (ATCC 25922). Dizolvarea substanţelor studiate în dimetilformamidă, cultivarea microorganismelor, obţinerea suspensiei, determinarea concentraţiei minime de inhibare (CMI) şi concentraţiei minimale bactericide (CMB) au fost efectuate după metoda standard descrisă în literatură.

Proprietăţile antimicotice ale N-ciclohexil-2-[1-(piridin-2-il)etiliden]-hidrazincarbotioamidei au fost cercetate “in vitro” pe tulpina de laborator Candida albicans. Activitatea s-a determinat în mediul nutritiv lichid Sabouroud (pH 6,8). Inoculatele se pregăteau din tulpini de fungi recoltate în decurs de 3...7 zile. Concentraţia lor în suspensie constitue (2...4) ·106 unităţi formatoare de colonii într-un mililitru.

Rezultatele experimentale, obţinute la studierea activităţilor antimicrobiene şi antifungice ale compusului revendicat sunt prezentate în tabelul, din care se vede că el posedă activitate bacteriostatică şi bactericidă în concentraţie de 0.06...250 µg/ml faţă de bacteriile gram-pozitive şi Candida albicans. Pentru comparaţie în acelaşi tabel sunt prezentate datele antimicrobiene caracteristice furacilinei, utilizată în practica medicală şi metil-N'-[(2-hidroxinaftalen-1-il)metiliden]-N-prop-2-en-1-ilhidrazonotioatului - analogului structural al compusului declarat, care manifestă una din cele mai înalte activităţi dintre substanţe din şirul tiosemicarbazonic, cunoscute în literatură. Datele experimentale obţinute demonstrează, că N-ciclohexil-2-[1-(piridin-2-il)etiliden]hidrazincarbotioamida manifestă o activitate antimicrobiană de 39...1,2 ori mai înaltă faţa de Staphylococcus aureus şi Bacillus cereus decât furacilina şi de 12...2 ori depăşeşte activitatea bacteriostatică şi bactericidă a celei mai apropiate soluţii faţă de microorganismele gram-pozitive studiate, iar faţă de microorganismele gram-negative (Escherichia coli) şi fungii din specia Candida albicans rămâne la nivelul metil-N'-[(2-hidroxinaftalen-1-il)metiliden]-N-prop-2-en-1-ilhidrazonotioatului.

Tabel

Activitatea antimicrobiană şi antimicotică a compusului revendicat faţă de microorganismele gram-pozitive, Escherichia coli şi Candida albicans în comparaţie cu furacilina şi analogul structural, µg/ml

Tulpina microorganismului Concen- traţia a) Compusul Furacilina (Nitrofural) Analogul structuralb) Compusul revendicatc) Staphylococcus aureus, ATCC 25923 CMI 2,34 0,70 0,06 CMB 9,37 0,70 0,24 Bacillus cereus, ГИСК 8035 CMI 4,68 3,90 1,95 CMB 4,68 7,80 3,90 Enterococcus faecalis CMI 37,5 250 125 CMB 75,0 500 250 Escherichia coli, ATCC 25922 CMI 2,34 500 500 CMB 9,37 500 500 Candida albicans CMI ˃ 10 000 0,70 0,70 CMB ˃ 10 000 0,70 0,70

Notă : a) CMI - concentraţia minimă de inhibare şi CBM - concentraţia bactericidă minimală; b) metil-N'-[(2-hidroxinaftalen-1-il)metiliden]-N-prop-2-en-1-ilhidrazonotioat;

c) N-ciclohexil-2-[1-(piridin-2-il)etiliden]hidrazincarbotioamida.

Proprietăţile depistate ale N-ciclohexil-2-[1-(piridin-2-il)etiliden]hidrazincarbotioamidei prezintă interes pentru practica medicală şi veterinară din punct de vedere al extinderii arsenalului de remedii antimicrobiene şi antimicotice.

1. Фармацевтическая химия. Ред. В.А. Абрамов. М., Медицина, 1976, v. 1, p. 381-387

2. MD 4402 B1 2016.02.29

Claims (1)

1. Utilizare a N-ciclohexil-2-[1-(piridin-2-il)etiliden]hidrazincarbotioamidei cu formula :

   în calitate de inhibitor al proliferării microorganismelor gram-pozitive şi fungilor Candida albicans.