MD4038C1 - Procedeu de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide - Google Patents

Procedeu de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide Download PDF

Info

Publication number
MD4038C1
MD4038C1 MDA20100035A MD20100035A MD4038C1 MD 4038 C1 MD4038 C1 MD 4038C1 MD A20100035 A MDA20100035 A MD A20100035A MD 20100035 A MD20100035 A MD 20100035A MD 4038 C1 MD4038 C1 MD 4038C1
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
dna
thyroid gland
risk
band
gland cancer
Prior art date
Application number
MDA20100035A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Other versions
MD4038B1 (ro
Inventor
Виктор Попеску
Original Assignee
Univ Nicolae Testemitanu
Univ De Stat De Medicin & Abreve & Scedil I Farmacie Nicolae Testemi & Tcedil Anu Din Republica Mold
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Nicolae Testemitanu, Univ De Stat De Medicin & Abreve & Scedil I Farmacie Nicolae Testemi & Tcedil Anu Din Republica Mold filed Critical Univ Nicolae Testemitanu
Priority to MDA20100035A priority Critical patent/MD4038C1/ro
Publication of MD4038B1 publication Critical patent/MD4038B1/ro
Publication of MD4038C1 publication Critical patent/MD4038C1/ro

Links

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Invenţia se referă la medicină, în special la medicina preventivă şi poate fi utilizată la prognozarea riscului dezvoltării cancerului glandei tiroide.Conform invenţiei, procedeul de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide constă în aceea că se prelevează un fragment de ţesut din tumoarea glandei tiroide, se extrage din acesta ADN-ul genomic prin digerare enzimatică cu proteinaza K, se modifică ADN-ul prin conversia citozinei în uracil prin metoda Qiagen EpiTect Bisulfite Kit, apoi ADN-ul modificat se amplifică cu ajutorul unor praimeri corespunzători ADN-ului genei p15 metilate şi celei nemetilate prin metoda Methylation Specific Polimerase Chain Reaction, produşii se introduc într-un gel de electroforeză din agaroză dizolvată în tris-borat-etilendiamintetraacetat şi se colorează cu bromură de etidiu, gelul se iradiază cu radiaţie ultravioletă cu lungimea de undă de 312 nm, şi în cazul, în care se vizualizează numai banda AND-ului metilat, se prognozează riscul de dezvoltare a cancerului glandei tiroide, iar în cazul în care se vizualizează banda AND-ului metilat şi banda AND-ului nemetilat - lipsa riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide.

Description

Invenţia se referă la medicină, în special la medicina preventivă şi poate fi utilizată la prognozarea riscului dezvoltării cancerului glandei tiroide.
Este cunoscut un procedeu de prognozare a riscului dezvoltării cancerului glandei tiroide, care constă în aceea că se prelevează un fragment de ţesut din tumoarea glandei tiroide, se extrage din acesta ADN-ul genomic prin digerare enzimatică cu proteinaza K, se modifică ADN-ul prin conversia citozinei în uracil prin metoda Qiagen EpiTect Bisulfite Kit, apoi ADN-ul modificat se amplifică cu ajutorul unor praimeri corespunzători ADN-ului generi Rassf1A, TSHR, RaRβ2, DAPK, S100, p16, CDH1, CALCA, TIMP3, TGF-β şi GSTpi, metilate şi celei nemetilate prin metoda Methylation Specific Polimerase Chain Reaction, produşii se introduc într-un gel de electroforeză din agaroză dizolvată în tris-borat-etilendiamintetraacetat şi se colorează cu bromură de etidiu, gelul se iradiază cu radiaţie ultravioletă cu lungimea de undă de 312 nm, iar în cazul în care se vizualizează numai banda AND-ului metilat, se prognozează riscul de dezvoltare a cancerului glandei tiroide, iar în cazul în care se vizualizează banda AND-ului nemetilat, iar cele metilate lipsesc, se prognozează lipsa riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide [1].
Dezavantajele acestui procedeu constau în următoarele: acest procedeu este genetic nespecific, adică presupune investigarea profilurilor metilice la nivelul genelor umane: Rassf1A, TSHR, RaRβ2, DAPK, S100, p16, CDH1, CALCA, TIMP3, TGF-β şi GSTpi şi nu permite de a atinge o reprezentativitate de până la 100% a diagnosticului, prognozarea prin acest procedeu a iniţierii transformării maligne a glandei tiroide este incertă.
Problema invenţiei constă în elaborarea unui procedeu nou cu o specificitate genetică mai înaltă şi o prognozare a malignizării tumorii glandei tiroide cu o certitudine de 100%.
Conform invenţiei, procedeul de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide constă în aceea că se prelevează un fragment de ţesut din tumoarea glandei tiroide, se extrage din acesta ADN-ul genomic prin digerare enzimatică cu proteinaza K, se modifică ADN-ul prin conversia citozinei în uracil prin metoda Qiagen EpiTect Bisulfite Kit, apoi ADN-ul modificat se amplifică cu ajutorul unor praimeri corespunzători ADN-ului genei p15 metilate şi celei nemetilate prin metoda Methylation Specific Polimerase Chain Reaction, produşii se introduc într-un gel de electroforeză din agaroză dizolvată în tris-borat-etilendiamintetraacetat şi se colorează cu bromură de etidiu, gelul se iradiază cu radiaţie ultravioletă cu lungimea de undă de 312 nm, iar în cazul în care se vizualizează doar banda AND-ului metilat, se prognozează riscul de dezvoltare a cancerului glandei tiroide, iar în cazul în care se vizualizează banda AND-ului metilat şi banda AND-ului nemetilat - lipsa riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide.
Procedeul revendicat asigură o specificitate genetică înaltă (presupune doar obţinerea profilului metilic al genei umane p15) şi permite prognozarea cu certitudine de 100 % de malignizare a tumorii glandei tiroide.
Rezultatul invenţiei constă în obţinerea unui procedeu cu o specificitate genetică înaltă şi în prognozarea malignizării tumorii glandei tiroide cu o certitudine de 100%.
Procedeul se realizează în modul următor: se prelevează un fragment de ţesut din tumoarea glandei tiroide, se extrage din acesta ADN-ul genomic prin digerare enzimatică cu proteinaza K, se modifică ADN-ul prin conversia citozinei în uracil prin metoda Qiagen EpiTect Bisulfite Kit, apoi ADN-ul modificat se amplifică cu ajutorul unor praimeri corespunzători ADN-ului genei p15 metilate şi celei nemetilate prin metoda Methylation Specific Polimerase Chain Reaction, produşii se introduc într-un gel de electroforeză din agaroză dizolvată în tris-borat-etilendiamintetraacetat şi se colorează cu bromură de etidiu, gelul se iradiază cu radiaţie ultravioletă cu lungimea de undă de 312 nm, iar în cazul în care se vizualizează numai banda AND-ului metilat, se prognozează riscul de dezvoltare a cancerului glandei tiroide, iar în cazul în care se vizualizează banda AND-ului metilat şi banda AND-ului nemetilat - lipsa riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide.
Exempu de realizarea procedeului
Pacientul X., 49 ani, cu diagnosticul de tumoare a glandei tiroide, a fost investigat conform procedeului revendicat. Ca rezultat s-a stabilit că gelul de electroforeză în lumină ultravioletă (la 312 nm) conţine doar o bandă (amplificarea ADN-ului metilat) şi se consideră că pacientul dat are risc de dezvoltare a cancerului glandei tiroide. Peste 12 luni, la examinarea morfologică şi histochimică s-a determinat o formaţiune malignă (cancer) a glandei tiroide.
Pacientul Z., 41 ani, cu diagnosticul de tumoare a glandei tiroide, a fost investigat conform procedeului revendicat. Ca rezultat s-a stabilit că gelul de electroforeză în lumină ultravioletă (la 312 nm) conţine două benzi de amplificare: una a ADN-ului metilat şi cealaltă a ADN-ului nemetilat. În acest caz se consideră că pacientul dat nu are risc de dezvoltare a cancerului glandei tiroide. Peste 12 luni, la examinarea morfologică şi histochimică nu s-a determinat nici o formaţiune malignă a glandei tiroide, nici un semn de malignizare.
Aşadar, aplicarea procedeului revendicat de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide în Laboratorul de genetică al Universităţii de Medicină şi Farmacie „N. Testemiţanu” a demonstrat o specificitate genetică înaltă pentru prognozarea riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide cu o certitudine de 100%.
1. Hoque M. O., Rosenbaum E. et al. Quantitative assesment of promoter methylation profiles in thyroid neoplasms. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 90 (7), 2005, p. 4011-4018

Claims (1)

  1. Procedeu de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide, care constă în aceea că se prelevează un fragment de ţesut din tumoarea glandei tiroide, se extrage din acesta ADN-ul genomic prin digerare enzimatică cu proteinaza K, se modifică ADN-ul prin conversia citozinei în uracil prin metoda Qiagen EpiTect Bisulfite Kit, apoi ADN-ul modificat se amplifică cu ajutorul unor praimeri corespunzători ADN-ului genei p15 metilate şi celei nemetilate prin metoda Methylation Specific Polimerase Chain Reaction, produşii se amplasează într-un gel pentru electroforeză din agaroză dizolvată în tris-borat-etilendiamintetraacetat şi se colorarează cu bromură de etidiu, gelul se iradiază cu radiaţie ultravioletă cu lungimea de undă de 312 nm, şi în cazul în care se vizualizează numai banda AND-ului metilat, se prognozează risc de dezvoltare a cancerului glandei tiroide, iar în cazul în care se vizualizează banda AND-ului metilat şi banda AND-ului nemetilat - lipsa riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide.
MDA20100035A 2010-03-03 2010-03-03 Procedeu de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide MD4038C1 (ro)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDA20100035A MD4038C1 (ro) 2010-03-03 2010-03-03 Procedeu de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDA20100035A MD4038C1 (ro) 2010-03-03 2010-03-03 Procedeu de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide

Publications (2)

Publication Number Publication Date
MD4038B1 MD4038B1 (ro) 2010-05-31
MD4038C1 true MD4038C1 (ro) 2011-01-31

Family

ID=43568954

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDA20100035A MD4038C1 (ro) 2010-03-03 2010-03-03 Procedeu de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide

Country Status (1)

Country Link
MD (1) MD4038C1 (ro)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104937111B (zh) 2012-11-27 2018-05-11 智利天主教教皇大学 用于诊断甲状腺肿瘤的组合物和方法

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU619859A1 (ru) * 1976-12-06 1978-08-15 Научно-исследовательский институт медицинской радиологии Способ дифференциальной диагностики рака щитовидной железы
SU1063390A1 (ru) * 1982-01-07 1983-12-30 Всесоюзный онкологический научный центр АМН СССР Способ диагностики рака щитовидной железы
SU1807409A1 (ru) * 1991-01-28 1993-04-07 Kh Nii Med Radiologii Способ диагностики рака щитовидной железы
RU2190346C2 (ru) * 1999-04-20 2002-10-10 Шилко Мария Владимировна Способ оценки функционального состояния щитовидной железы
RU2229262C1 (ru) * 2003-03-19 2004-05-27 Вараксин Виктор Васильевич Способ диагностики злокачественных опухолей щитовидной железы
RU2247376C1 (ru) * 2003-06-25 2005-02-27 Савина Лидия Васильевна Способ экспресс-диагностики структурных изменений в щитовидной железе человека
RU2253360C2 (ru) * 2003-04-17 2005-06-10 Шигаев Михаил Юрьевич Способ мониторинга отека биологической ткани
UA22831U (en) * 2006-12-26 2007-04-25 Oleksandr Pavlovych Nechai Method of preoperative diagnosticating for detecting medullary cancer of the thyroid gland
RU2300106C1 (ru) * 2005-10-17 2007-05-27 Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Способ дифференциальной диагностики злокачественных опухолей щитовидной железы у детей и подростков
RU2316260C2 (ru) * 2005-11-01 2008-02-10 ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения Российской академии медицинских наук Способ оценки риска развития йоддефицитного состояния у населения административной территории в условиях антропотехногенного химического загрязнения окружающей среды

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU619859A1 (ru) * 1976-12-06 1978-08-15 Научно-исследовательский институт медицинской радиологии Способ дифференциальной диагностики рака щитовидной железы
SU1063390A1 (ru) * 1982-01-07 1983-12-30 Всесоюзный онкологический научный центр АМН СССР Способ диагностики рака щитовидной железы
SU1807409A1 (ru) * 1991-01-28 1993-04-07 Kh Nii Med Radiologii Способ диагностики рака щитовидной железы
RU2190346C2 (ru) * 1999-04-20 2002-10-10 Шилко Мария Владимировна Способ оценки функционального состояния щитовидной железы
RU2229262C1 (ru) * 2003-03-19 2004-05-27 Вараксин Виктор Васильевич Способ диагностики злокачественных опухолей щитовидной железы
RU2253360C2 (ru) * 2003-04-17 2005-06-10 Шигаев Михаил Юрьевич Способ мониторинга отека биологической ткани
RU2247376C1 (ru) * 2003-06-25 2005-02-27 Савина Лидия Васильевна Способ экспресс-диагностики структурных изменений в щитовидной железе человека
RU2300106C1 (ru) * 2005-10-17 2007-05-27 Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Способ дифференциальной диагностики злокачественных опухолей щитовидной железы у детей и подростков
RU2316260C2 (ru) * 2005-11-01 2008-02-10 ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения Российской академии медицинских наук Способ оценки риска развития йоддефицитного состояния у населения административной территории в условиях антропотехногенного химического загрязнения окружающей среды
UA22831U (en) * 2006-12-26 2007-04-25 Oleksandr Pavlovych Nechai Method of preoperative diagnosticating for detecting medullary cancer of the thyroid gland

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Hoque M. O., Rosenbaum E. et al. Quantitative assesment of promoter methylation profiles in thyroid neoplasms. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 90 (7), 2005, p. 4011-4018 *

Also Published As

Publication number Publication date
MD4038B1 (ro) 2010-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zhu et al. DNA methylation and hydroxymethylation in cervical cancer: diagnosis, prognosis and treatment
Hoque et al. Quantitation of promoter methylation of multiple genes in urine DNA and bladder cancer detection
Menon et al. Ovarian cancer screening—current status, future directions
Dang et al. Micro RNA‐137 promoter methylation in oral lichen planus and oral squamous cell carcinoma
Chimonidou et al. CST6 promoter methylation in circulating cell-free DNA of breast cancer patients
Sun et al. Aberrant methylation of CDH13 gene in nasopharyngeal carcinoma could serve as a potential diagnostic biomarker
Tu et al. The association between genetic polymorphism and the processing efficiency of miR-149 affects the prognosis of patients with head and neck squamous cell carcinoma
Cheuk et al. Detection of methylated circulating DNA as noninvasive biomarkers for breast cancer diagnosis
Rao et al. Deletion of 1p32-p36 is the most frequent genetic change and poor prognostic marker in adenoid cystic carcinoma of the salivary glands
Nodit et al. Allelic loss of tumor suppressor genes in ameloblastic tumors
Bianco et al. Endometrial cancer: a genetic point of view
Liau et al. Hypermethylation of the CDKN2A gene promoter is a frequent epigenetic change in periocular sebaceous carcinoma and is associated with younger patient age
Guo et al. Promoter methylation as biomarkers for diagnosis of melanoma: A systematic review and meta‐analysis
Aydin et al. Lack of evidence of HPV etiology of prostate cancer following radical surgery and higher frequency of the Arg/Pro genotype in Turkish men with prostate cancer
Soon et al. Mitochondrial DNA mutations in grade II and III glioma cell lines are associated with significant mitochondrial dysfunction and higher oxidative stress
Park Promoter hypermethylation as a biomarker in prostate adenocarcinoma
Liu et al. ANKRD18A as a novel epigenetic regulation gene in lung cancer
Pejovic et al. Somatic D-loop mitochondrial DNA mutations are frequent in uterine serous carcinoma
Zhang et al. Recent advances in the diagnosis and management of bladder cancer
MD4038C1 (ro) Procedeu de prognozare a riscului de dezvoltare a cancerului glandei tiroide
Perveez et al. Promoter hypermethylation of KLOTHO; an anti-senescence related gene in colorectal cancer patients of Kashmir valley
Alsofyani et al. Prognostic potential of KLOTHO and SFRP1 promoter methylation in head and neck squamous cell carcinoma
Mohamed et al. Genomic characterization of testis cancer: association of alterations with outcome of clinical stage 1 mixed germ cell nonseminomatous germ cell tumor of the testis
Zhang et al. Identification and validation of specific methylation profile in bile for differential diagnosis of malignant biliary stricture
Wu et al. Detection and clinical significance of DLC1 gene methylation in serum DNA from colorectal cancer patients

Legal Events

Date Code Title Description
FG4A Patent for invention issued
KA4A Patent for invention lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration)
MM4A Patent for invention definitely lapsed due to non-payment of fees