LU85115A1 - PROCESS FOR THE PREPARATION OF L-CARNITINE AND INTERMEDIATE CHEMICALS USED IN THIS PROCESS - Google Patents
PROCESS FOR THE PREPARATION OF L-CARNITINE AND INTERMEDIATE CHEMICALS USED IN THIS PROCESS Download PDFInfo
- Publication number
- LU85115A1 LU85115A1 LU85115A LU85115A LU85115A1 LU 85115 A1 LU85115 A1 LU 85115A1 LU 85115 A LU85115 A LU 85115A LU 85115 A LU85115 A LU 85115A LU 85115 A1 LU85115 A1 LU 85115A1
- Authority
- LU
- Luxembourg
- Prior art keywords
- carbon atoms
- substituted
- carnitine
- chosen
- acid
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 73
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 49
- PHIQHXFUZVPYII-ZCFIWIBFSA-N (R)-carnitine Chemical compound C[N+](C)(C)C[C@H](O)CC([O-])=O PHIQHXFUZVPYII-ZCFIWIBFSA-N 0.000 title claims description 42
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 11
- 239000013461 intermediate chemical Substances 0.000 title description 3
- -1 octyl ester Chemical class 0.000 claims description 35
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 31
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 23
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 17
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 16
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 15
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 14
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 13
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 12
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 claims description 11
- WGNSGQNASYNCBU-GSVOUGTGSA-N (3r)-4-bromo-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound BrC[C@H](O)CC(O)=O WGNSGQNASYNCBU-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 9
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 9
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 8
- AKDAXGMVRMXFOO-GSVOUGTGSA-N (3r)-4-chloro-3-hydroxybutanoic acid Chemical class ClC[C@H](O)CC(O)=O AKDAXGMVRMXFOO-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 7
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- AFENDNXGAFYKQO-GSVOUGTGSA-N (R)-2-hydroxybutyric acid Chemical class CC[C@@H](O)C(O)=O AFENDNXGAFYKQO-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 6
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 claims description 6
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 150000004720 acetoacetic acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000002490 anilino group Chemical group [H]N(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 5
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 125000000951 phenoxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(O*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 5
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 claims description 5
- WHBMMWSBFZVSSR-GSVOUGTGSA-N (R)-3-hydroxybutyric acid Chemical class C[C@@H](O)CC(O)=O WHBMMWSBFZVSSR-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 4
- WHBMMWSBFZVSSR-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxybutyric acid Chemical class CC(O)CC(O)=O WHBMMWSBFZVSSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000004729 acetoacetic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims description 3
- 241000235349 Ascomycota Species 0.000 claims description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 241000228427 Eurotiales Species 0.000 claims description 2
- 241000235388 Mucorales Species 0.000 claims description 2
- 241000235343 Saccharomycetales Species 0.000 claims description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 claims description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims description 2
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims description 2
- JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M sodium bromide Chemical compound [Na+].[Br-] JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-M 4-hydroxybutyrate Chemical compound OCCCC([O-])=O SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 claims 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims 1
- 125000002071 phenylalkoxy group Chemical group 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 21
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 20
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- 229960004203 carnitine Drugs 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- WMRINGSAVOPXTE-SCSAIBSYSA-N methyl (3r)-4-chloro-3-hydroxybutanoate Chemical compound COC(=O)C[C@@H](O)CCl WMRINGSAVOPXTE-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 5
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N acetyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N 0.000 description 4
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 4
- 150000003931 anilides Chemical class 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- PHIQHXFUZVPYII-UHFFFAOYSA-N carnitine Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)CC([O-])=O PHIQHXFUZVPYII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 4
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- PHIQHXFUZVPYII-LURJTMIESA-N (S)-carnitine Chemical compound C[N+](C)(C)C[C@@H](O)CC([O-])=O PHIQHXFUZVPYII-LURJTMIESA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BXRCJHJPCOBFAY-VQXHTEKXSA-N CCCCC([C@@H](CC)OC(C(CC)O)=O)Cl Chemical compound CCCCC([C@@H](CC)OC(C(CC)O)=O)Cl BXRCJHJPCOBFAY-VQXHTEKXSA-N 0.000 description 3
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- JXXCENBLGFBQJM-FYZOBXCZSA-N [(2r)-3-carboxy-2-hydroxypropyl]-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)C[C@H](O)CC(O)=O JXXCENBLGFBQJM-FYZOBXCZSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybutyric acid Chemical compound OCCCC(O)=O SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 2
- 244000168141 Geotrichum candidum Species 0.000 description 2
- 235000017388 Geotrichum candidum Nutrition 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 2
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 241001149558 Trichoderma virens Species 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- KUWKPNMTVKBQTH-SSDOTTSWSA-N butyl (3R)-4-chloro-3-hydroxybutanoate Chemical compound CCCCOC(=O)C[C@@H](O)CCl KUWKPNMTVKBQTH-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 125000000000 cycloalkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- WASQWSOJHCZDFK-UHFFFAOYSA-N diketene Chemical compound C=C1CC(=O)O1 WASQWSOJHCZDFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000008570 general process Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- HFLMYYLFSNEOOT-UHFFFAOYSA-N methyl 4-chloro-3-oxobutanoate Chemical compound COC(=O)CC(=O)CCl HFLMYYLFSNEOOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 2
- 210000001589 microsome Anatomy 0.000 description 2
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 2
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- SOCAXRLFGRNEPK-IFZYUDKTSA-N (1r,3s,5r)-2-n-[1-carbamoyl-5-(cyanomethoxy)indol-3-yl]-3-n-[(3-chloro-2-fluorophenyl)methyl]-2-azabicyclo[3.1.0]hexane-2,3-dicarboxamide Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H]2C[C@H]2N1C(=O)NC1=CN(C2=CC=C(OCC#N)C=C21)C(=O)N)NCC1=CC=CC(Cl)=C1F SOCAXRLFGRNEPK-IFZYUDKTSA-N 0.000 description 1
- CEEKOEFUYMWDNW-SECBINFHSA-N (3r)-3,4-dihydroxy-n-phenylbutanamide Chemical compound OC[C@H](O)CC(=O)NC1=CC=CC=C1 CEEKOEFUYMWDNW-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- HXZQJJYLHRLBBX-GSVOUGTGSA-N (3r)-3-hydroxy-4-iodobutanoic acid Chemical class IC[C@H](O)CC(O)=O HXZQJJYLHRLBBX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- FQDBCBAPZOBXPI-SECBINFHSA-N (3r)-4-chloro-3-hydroxy-n-phenylbutanamide Chemical compound ClC[C@H](O)CC(=O)NC1=CC=CC=C1 FQDBCBAPZOBXPI-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CJLSDBRIXZFCKV-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-3-oxo-n-phenylbutanamide Chemical compound ClCC(=O)CC(=O)NC1=CC=CC=C1 CJLSDBRIXZFCKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCTNTYHJFWMUBD-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-3-oxobutanoic acid Chemical compound OC(=O)CC(=O)CCl UCTNTYHJFWMUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JEZCMVCLPKSUOT-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-3-oxobutanoic acid Chemical compound OCC(=O)CC(O)=O JEZCMVCLPKSUOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical group [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235389 Absidia Species 0.000 description 1
- WDJHALXBUFZDSR-UHFFFAOYSA-N Acetoacetic acid Natural products CC(=O)CC(O)=O WDJHALXBUFZDSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589220 Acetobacter Species 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 241000228218 Aspergillus amstelodami Species 0.000 description 1
- 241001225321 Aspergillus fumigatus Species 0.000 description 1
- 241000228243 Aspergillus giganteus Species 0.000 description 1
- 241000122824 Aspergillus ochraceus Species 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical group [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228339 Byssochlamys nivea Species 0.000 description 1
- LWTLYDKUWQMWER-SSDOTTSWSA-N CCCCOC(=O)C[C@@H](O)CI Chemical compound CCCCOC(=O)C[C@@H](O)CI LWTLYDKUWQMWER-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- LOUGYXZSURQALL-STYMGOOTSA-N C[C@@H](O)C(O)C(O)=O Chemical compound C[C@@H](O)C(O)C(O)=O LOUGYXZSURQALL-STYMGOOTSA-N 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 1
- 108010066477 Carnitine O-acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100036357 Carnitine O-acetyltransferase Human genes 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- QTQIANGQRHQQJU-STYMGOOTSA-N ClC(C(=O)O)[C@@H](C)O Chemical compound ClC(C(=O)O)[C@@H](C)O QTQIANGQRHQQJU-STYMGOOTSA-N 0.000 description 1
- 241001149472 Clonostachys rosea Species 0.000 description 1
- 241001290628 Cunninghamella echinulata Species 0.000 description 1
- 241000235556 Cunninghamella elegans Species 0.000 description 1
- 241001480508 Entomophthora Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 238000003747 Grignard reaction Methods 0.000 description 1
- 241001149669 Hanseniaspora Species 0.000 description 1
- 244000286779 Hansenula anomala Species 0.000 description 1
- 235000014683 Hansenula anomala Nutrition 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 229930194542 Keto Natural products 0.000 description 1
- 241000235489 Linderina Species 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000223250 Metarhizium anisopliae Species 0.000 description 1
- 241001450846 Mucor heterogamus Species 0.000 description 1
- 241000907556 Mucor hiemalis Species 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 241000228127 Penicillium griseofulvum Species 0.000 description 1
- 241001507806 Penicillium thomii Species 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 240000005384 Rhizopus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000013752 Rhizopus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 241000223252 Rhodotorula Species 0.000 description 1
- 241000223254 Rhodotorula mucilaginosa Species 0.000 description 1
- 241000122799 Scopulariopsis Species 0.000 description 1
- 241000825258 Scopulariopsis brevicaulis Species 0.000 description 1
- 241001136496 Talaromyces islandicus Species 0.000 description 1
- 241000006364 Torula Species 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 241000223261 Trichoderma viride Species 0.000 description 1
- 241000750042 Vini Species 0.000 description 1
- 241001193070 Wickerhamomyces subpelliculosus Species 0.000 description 1
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 1
- 241000235017 Zygosaccharomyces Species 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002948 appetite stimulant Substances 0.000 description 1
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 229940091771 aspergillus fumigatus Drugs 0.000 description 1
- AJGRCWAJLBXPIY-SNVBAGLBSA-N benzyl (3r)-4-chloro-3-hydroxybutanoate Chemical compound ClC[C@H](O)CC(=O)OCC1=CC=CC=C1 AJGRCWAJLBXPIY-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- QUKGYYKBILRGFE-UHFFFAOYSA-N benzyl acetate Chemical compound CC(=O)OCC1=CC=CC=C1 QUKGYYKBILRGFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Chemical group BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229940106681 chloroacetic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 125000006310 cycloalkyl amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- AGNNSVUTUUGMQD-CYBMUJFWSA-N decyl (3r)-3-hydroxy-4-iodobutanoate Chemical compound CCCCCCCCCCOC(=O)C[C@@H](O)CI AGNNSVUTUUGMQD-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- OMVGVLDYXKQAIP-CYBMUJFWSA-N decyl (3r)-4-chloro-3-hydroxybutanoate Chemical compound CCCCCCCCCCOC(=O)C[C@@H](O)CCl OMVGVLDYXKQAIP-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- WOWBFOBYOAGEEA-UHFFFAOYSA-N diafenthiuron Chemical compound CC(C)C1=C(NC(=S)NC(C)(C)C)C(C(C)C)=CC(OC=2C=CC=CC=2)=C1 WOWBFOBYOAGEEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002168 ethanoic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- SMWBHOKQXGBYJN-RXMQYKEDSA-N ethyl (3r)-3-hydroxy-4-iodobutanoate Chemical compound CCOC(=O)C[C@@H](O)CI SMWBHOKQXGBYJN-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- ZAJNMXDBJKCCAT-RXMQYKEDSA-N ethyl (3r)-4-chloro-3-hydroxybutanoate Chemical compound CCOC(=O)C[C@@H](O)CCl ZAJNMXDBJKCCAT-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- OHLRLMWUFVDREV-UHFFFAOYSA-N ethyl 4-chloro-3-oxobutanoate Chemical compound CCOC(=O)CC(=O)CCl OHLRLMWUFVDREV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- VUKJOZYOTKSXFI-SNVBAGLBSA-N heptyl (3r)-4-chloro-3-hydroxybutanoate Chemical compound CCCCCCCOC(=O)C[C@@H](O)CCl VUKJOZYOTKSXFI-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 150000002440 hydroxy compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- AMCCREBZBZYJDT-SCSAIBSYSA-N methyl (3r)-3-hydroxy-4-iodobutanoate Chemical compound COC(=O)C[C@@H](O)CI AMCCREBZBZYJDT-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N monoethanolamine hydrochloride Natural products NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- FAJRBIBGHKCOIX-LLVKDONJSA-N octyl (3r)-3-hydroxy-4-iodobutanoate Chemical compound CCCCCCCCOC(=O)C[C@@H](O)CI FAJRBIBGHKCOIX-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- IFQMZNJKZHSPSP-UHFFFAOYSA-N octyl 2-hydroxybutanoate Chemical compound CCCCCCCCOC(=O)C(O)CC IFQMZNJKZHSPSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- JHNDTEVRALJVEI-ZCFIWIBFSA-N propyl (2r)-2-hydroxybutanoate Chemical compound CCCOC(=O)[C@H](O)CC JHNDTEVRALJVEI-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- KFHFKBSXONJDPU-ZCFIWIBFSA-N propyl (3r)-4-chloro-3-hydroxybutanoate Chemical compound CCCOC(=O)C[C@@H](O)CCl KFHFKBSXONJDPU-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000011937 reductive transformation Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011916 stereoselective reduction Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 238000007738 vacuum evaporation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/24—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carbonyl group
- C12P7/26—Ketones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Procédé de préparation de L-camitine et produits • chimiques intermédiaires utilisés dans ce procédé.Process for the preparation of L-camitine and intermediate chemicals • used in this process.
La présente invention concerne des procédés de préparation de L-carnitine. Spécifiquement, 5 l'invention concerne un procédé pour la réduction microbiologique d'amides ou d'esters acéto-acétiques ¥" -substitués en leurs dérivés respectifs d'acides L-ß-hydroxy-butyriques V -substitués, ces dérivés pouvant être transformés aisément en chlorure de 10 L-carnitine. L'invention concerne également de nouveaux produits chimiques intermédiaires utilisés dans ce procédé.The present invention relates to methods of preparing L-carnitine. Specifically, the invention relates to a process for the microbiological reduction of ¥ "-substituted aceto-acetic amides or esters to their respective derivatives of L-ß-hydroxy-butyric V-substituted acids, these derivatives being convertible Easily into L-carnitine chloride The invention also relates to new intermediate chemicals used in this process.
Comme on le sait très bien, la carnitine i *' (acide p-hydroxy-)f-triméthyl-amino-butyrique) contient 15 un centre d'asymétrie et, par conséquent, la carnitine rf 1, existe sous deux formes stéréoisomères, à savoir les formes D et L.As is well known, carnitine i * '(p-hydroxy-) f-trimethyl-amino-butyric) contains a center of asymmetry and therefore carnitine rf 1 exists in two stereoisomeric forms, namely forms D and L.
- La L-carnitine est normalement présente ?" _ dans le corps où elle fonctionne pour véhiculer des 20 acides gras libres activés à longue chaîne à travers la membrane mitochondriale. Etant donné que la membrane mitochondriale est imperméable aux dérivés acyl-CoA, les acides gras libres -à longue chaîne ne „ ' ' peuvent pénétrer que lorsque l'estérification avec la 25 L-carnitine a eu lieu. La L-carnitine exerce sa J # fonction de véhiculeur à la fois en transportant des Ί acides gras actifs à longue chaîne des sièges de leur biosynthèse, par exemple, les microsomes, vers la mitochondrie où ils sont oxydés, ainsi qu'en transpor-30 tant l'acétyl-CoA de la mitochondrie où il est formé, vers les sièges extramitochondriaux où la synthèse d'acides gras à longue chaîne a lieu, par exemple, dans les microsomes dans lesquels l'acétyl-CoA peut être utilisé pour synthétiser le cholestérol et les 35 acides gras.- L-carnitine is normally present? "_ In the body where it functions to transport long chain activated free fatty acids through the mitochondrial membrane. Since the mitochondrial membrane is impermeable to acyl-CoA derivatives, the acids free-long chain fats can only "" enter when esterification with L-carnitine has taken place. L-carnitine performs its J # function as a carrier both by transporting Ί long active fatty acids chain of seats of their biosynthesis, for example, microsomes, to the mitochondria where they are oxidized, as well as transporting acetyl-CoA from the mitochondria where it is formed, to the extramitochondrial seats where the synthesis of Long chain fatty acids occur, for example, in microsomes in which acetyl-CoA can be used to synthesize cholesterol and fatty acids.
h 2h 2
Bien qu'il ait été établi que l'isomère lévogyre (L-carnitine) exclusivement soit la forme biologique (jusqu'à présent, la D-carnitine n'a jamais été détectée dans des tissus de mammifères), t 5 pendant un certain nombre d'années, le racémate de D,L-carnitine a été utilisé pour des indications différentes. Par exemple, la D,L-carnitine est vendue en Europe comme stimulant de l'appétit et il a été mentionné que cette matière exerçait un effet 10 sur le rythme de croissance des enfants (voir, par exemple, Borniche et al., Clinica Chemica Acta, 5* 171-176, i960 et Alexander et al., "Protides in the Biological Fluids", 6e colloque, Bruges, 1958, ^ 306-310). Dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique . r*·*· -./ * .Although it has been established that the levorotatory isomer (L-carnitine) exclusively is the biological form (so far, D-carnitine has never been detected in mammalian tissues), t 5 for some number of years, the racemate of D, L-carnitine has been used for different indications. For example, D, L-carnitine is sold in Europe as an appetite stimulant and it has been reported that this material has an effect on the growth rate of children (see, for example, Borniche et al., Clinica Chemica Acta, 5 * 171-176, i960 and Alexander et al., "Protides in the Biological Fluids", 6th conference, Bruges, 1958, ^ 306-310). In the patent of the United States of America. r * · * · -. / *.
15 n° 3·830.931 j on décrit des perfectionnements appor- J* tés à la contractilité du myocarde et au rythme systolique en cas de défaillance cardiaque congestive, ^ ces améliorations pouvant souvent être obtenues par l'administration de D,L-carnitine. Dans le brevet des 20 Etats-Unis d'Amérique n° 3.968.241, on décrit l'utilisation de la D,L-carnitine dans des arythmies cardiaques. Dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique n° 3»810.994j on décrit l'utilisation de la D,L- + carnitine pour le traitement de l'obésité.15 No. 3 · 830.931 I describe improvements in myocardial contractility and in the systolic rhythm in the event of congestive heart failure, these improvements often being achieved by the administration of D, L-carnitine. US Patent 3,968,241 describes the use of D, L-carnitine in cardiac arrhythmias. US Patent No. 3,810,994J describes the use of D, L- + carnitine for the treatment of obesity.
V_ -î , 25 Toutefois, récemment, on a de plus en plus ‘'tS* souligné l'importance de l'utilisation exclusive de , l'isomère lévogyre de carnitine du moins pour certaines applications thérapeutiques. En fait, il a été démontré que la D-carnitine était un inhibiteur 30 compétitif d'enzymes liées à la carnitine, par exemple, l'acétyl-transférase de carnitine et la palmityl-transférase de carnitine. De plus, une preuve récente suggère que la D-carnitine peut épuiser la L—carni— tine du tissu cardiaque. En conséquence, il est 35 essentiel que la L—carnitine exclusivement soit admi- h 3 ψ- nistrée à des patients sous traitement médical pour maladies cardiaques ou pour diminuer la teneur en lipides du sang.However, recently, there has been an increasing emphasis on the importance of the exclusive use of the levorotatory isomer of carnitine at least for certain therapeutic applications. In fact, D-carnitine has been shown to be a competitive inhibitor of carnitine-linked enzymes, for example, carnitine acetyl transferase and carnitine palmityl transferase. In addition, recent evidence suggests that D-carnitine can deplete L-carnietin from heart tissue. Therefore, it is essential that L-carnitine exclusively is administered to patients undergoing medical treatment for heart disease or to decrease the lipid content of the blood.
Plusieurs procédés ont été proposés pour 5 produire la carnitine à l’échelle industrielle.Several methods have been proposed for producing carnitine on an industrial scale.
4 Toutefois, la synthèse chimique de la carnitine aboutit inévitablement à un mélange racémique des isomères D et L. En conséquence, il convient d'adopter des procédés de dédoublement pour obtenir les 10 antipodes optiques séparés à partir du racémate.4 However, the chemical synthesis of carnitine inevitably results in a racemic mixture of the D and L isomers. Therefore, splitting methods should be adopted to obtain the separate optical antipodes from the racemate.
Toutefois, ces procédés de dédoublement sont compliqués et coûteux.However, these duplication processes are complicated and expensive.
Un objet de la présente invention est de préparer la L-carnitine avec un bon rendement moyen- , 15 nant une combinaison de procédés microbiologiques et chimiques.It is an object of the present invention to prepare L-carnitine in a good average yield, using a combination of microbiological and chemical methods.
Un objet de la présente invention est de ç fournir un procédé perfectionné pour la synthèse de la L—carnitine à partir de. matières premières d'un 20 coût modéré et aisément disponibles.It is an object of the present invention to provide an improved process for the synthesis of L-carnitine from. raw materials of moderate cost and readily available.
Un autre objet de la présente invention est de décrire la préparation de nouveaux produits intermédiaires utiles et optiquement actifs pour la synthèse de la L—carnitine, ainsi que de ses sels 25 ou esters.Another object of the present invention is to describe the preparation of new useful and optically active intermediates for the synthesis of L-carnitine, as well as its salts or esters.
Un autre objet de la présente invention est de fournir des procédés de préparation dé L— carnitine moyennant le déplacement à la triméthylamine du groupe halo d'un 4-halo-3(R)-hydroxybutyrate.Another object of the present invention is to provide processes for the preparation of L-carnitine by means of the displacement with trimethylamine of the halo group of a 4-halo-3 (R) -hydroxybutyrate.
30 Un autre objet encore de la présente inven tion est de fournir un procédé pour la préparation de 4-iodo- ou 4-bromo-3 (R)-hydroxybutyrates à partir de 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrates.Yet another object of the present invention is to provide a process for the preparation of 4-iodo- or 4-bromo-3 (R) -hydroxybutyrates from 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyrates.
Ces différents objets de l'invention, ainsi 35 que d'autres, apparaîtront plus clairement a la lec— /L^ 4 .These various objects of the invention, as well as others, will appear more clearly on reading L / 4.
r ture de la description ci-après.r ture of the description below.
A la lecture de la description détaillée qui va suivre, l'homme de métier reconnaîtra de toute évidence les avantages de la présente inven-5 tion.On reading the detailed description which follows, a person skilled in the art will obviously recognize the advantages of the present invention.
’ Il est connu que la fonction β-céto occu pant la position 3 dans les dérivés d'acides acéto-acétiques X —substitués peut être réduite par hydrogénation sur Pt/C (voir, par exemple, le brevet des 10 Etats-Unis d'Amérique n° 3·9ό9·4θ6). Toutefois, le composé hydroxy résultant de ce procédé est racémique. En revanche, en utilisant l'action fermentante d'un micro-organisme suivant le procédé de la présente invention, l'hydrogénation de la fonction oxo occu-15 pant la position 3 peut être effectuée de manière stéréosélective pour donner des dérivés d'acides ß-hydroxybutyriques T-substitués optiquement actifs.It is known that the β-keto function occupying the 3 position in the derivatives of aceto-acetic acids X —substituted can be reduced by hydrogenation on Pt / C (see, for example, the patent of the United States of 'America n ° 3 · 9ό9 · 4θ6). However, the hydroxy compound resulting from this process is racemic. On the other hand, by using the fermenting action of a microorganism according to the process of the present invention, the hydrogenation of the oxo function occu-15 pant position 3 can be carried out stereoselectively to give derivatives of acids Optically active T-substituted ß-hydroxybutyrics.
' En particulier, en choisissant judicieuse ment (comme décrit.ci-après) le substrat devant être 20 exposé à l'action fermentante des micro-organismes suivant le procédé de la présente invention, on obtient la configuration épimère 3(R) ou L. Cette configuration est requise pour la transformation en L— carnitine naturelle.In particular, by judiciously choosing (as described below) the substrate to be exposed to the fermenting action of microorganisms according to the process of the present invention, the epimeric configuration 3 (R) or L is obtained. This configuration is required for transformation into natural L-carnitine.
25 Dans ses grandes lignes, la présente inven-" tion concerne l'utilisation de l'enzyme réductase microbienne, à savoir la déhydrogénase de L-ß-hydroxy-acyl-CoA [EC 1.1.1,35] pour catalyser l'hydrogénation stéréosélective de dérivés d'acides acéto-acétiques 30 ^-substitués comme défini ci-après.Broadly speaking, the present invention relates to the use of the microbial reductase enzyme, namely L-ß-hydroxy-acyl-CoA dehydrogenase [EC 1.1.1.35] to catalyze hydrogenation stereoselective of 30 ^ -substituted acetoacetic acid derivatives as defined below.
En conséquence, sous son aspect le plus large, la présente invention fournit un procédé de préparation de dérivés d'acides ß-hydroxybutyriques X-substitués optiquement actifs répondant à la for— 35 mule : h 5 w OH H » ’νΧΛ, dans laquelle 5 X est choisi parmi Cl, Br, I et OH, et ’ R est un radical à chaîne droite, à chaîne ramifiée ou à configuration cyclique choisi parmi la classe comprenant : les radicaux alcoxy contenant 1 à environ 10 15 atomes de carbone j les radicaux alkylamino contenant environ 5 à environ 15 atomes de carbone ; les radicaux cycloalcoxy et cycloalkylamino _;Λ contenant environ 5 à environ 12 atomes de carbone ; , 15 les radicaux phénoxy et phénylalcoxy conte nant 7 à environ 14 atomes de carbone '3 les radicaux phénylamino et phénylalkylami-? no répondant aux formules : y y z I . 1 I , 20 -Ν-0-Α et -N-CH-0-A où Y et Z sont choisis parmi H, un groupe alkyle contenant 1 à environ 8 atomes de carbone, un groupe phényle ou un groupe benzyle et A est choisi parmi H, CH^, Cl et Br, à partir d'amides ou d’esters d’acides acéto-acétiques 25 Γ-substitués correspondants, " λ- . .'T .Accordingly, in its broadest aspect, the present invention provides a process for the preparation of optically active X-substituted β-hydroxybutyric acid derivatives having the formula: h 5 w OH H "'νΧΛ, in which 5 X is chosen from Cl, Br, I and OH, and 'R is a straight chain, branched chain or cyclic configuration radical chosen from the class comprising: alkoxy radicals containing 1 to about 10 15 carbon atoms j alkylamino radicals containing from about 5 to about 15 carbon atoms; cycloalkoxy and cycloalkylamino _; Λ radicals containing from about 5 to about 12 carbon atoms; , 15 the phenoxy and phenylalkoxy radicals containing 7 to about 14 carbon atoms; 3 the phenylamino and phenylalkylamide radicals? no corresponding to the formulas: y y z I. 1 I, 20 -Ν-0-Α and -N-CH-0-A where Y and Z are selected from H, an alkyl group containing 1 to about 8 carbon atoms, a phenyl group or a benzyl group and A is selected from H, CH ^, Cl and Br, from corresponding ou-substituted acetoacetic acids 25 or amides or esters, "λ-. .'T.
ce procédé comprenant les étapes consistant a : soumettre ces amides ou esters d’acides acéto-acétiques )f-substitués à l'action enzymatique 30 fermentante d’un micro-organisme qui élabore la déhydrogénase de L-ß-hydroxyacyl-CoA [EC 1.1.1,35], et récupérer les dérivés d'acides ß-hydroxy-butyriques Γ-substitués optiquement actifs désirés.this method comprising the steps of: subjecting these f-substituted amides or esters of aceto-acetic acids to the fermenting enzymatic action of a microorganism which produces the dehydrogenase of L-ß-hydroxyacyl-CoA [EC 1.1.1.35], and recovering the desired optically active ß-hydroxy-butyric acid derivatives désir.
En particulier, afin de préparer des dérivés 35 d'acides 3(R)-hydroxybutyriques ^-substitués optique-In particular, in order to prepare derivatives of 3 (R) -hydroxybutyric acids - -substituted optics-
[H[H
6 ψ ment actifs ayant la configuration 3(R) et répondant à la formule :6 actifs active with configuration 3 (R) and corresponding to the formula:
5 R5 R
’ le procédé comprend les étapes consistant à soumettre des composés répondant à la formule : 0 0 xch2-c-ch2cr 10 dans laquelle X et R ont les significations indiquées ci-dessus, avec cette restriction que, si R est un radical alcoxy, il contient 5 à environ 15 atomes de carbone, à l'action enzymatique fermentante d'un micro—orga— * 15 nisme qui élabore la déhydrogénase de L-ß-hydroxy-acyl-CoA [EC 1.1.1.35] et récupérer, du mélange réactionnel fermentant, les dérivés d'acides 3(R)-hydroxybutyriques 4-substitués optiquement actifs désirés.the process comprises the steps of subjecting compounds corresponding to the formula: 0 0 xch2-c-ch2cr 10 in which X and R have the meanings indicated above, with this restriction that, if R is an alkoxy radical, it contains 5 to about 15 carbon atoms, with the fermenting enzymatic action of a microorganism which develops the dehydrogenase of L-ß-hydroxy-acyl-CoA [EC 1.1.1.35] and recover from the mixture fermenting reaction, the optically active 3-R-hydroxybutyric acid derivatives 4-substituted desired.
20 On a trouvé que n'importe quel micro-orga nisme produisant l'enzyme désirée était capable d'agir pour catalyser la réduction stéréosélective. Sont particulièrement appropriés, les micro-organismes " de la classe Ascomycètes, des ordres Endomycetales, -.4.¾ J:#,, 25 Mucorales, Moniliales et Eurotiales, ainsi que du :¾ genre Saccharomyces. Saccharomyces Cerevisiae est ^ particulièrement préféré.It has been found that any microorganism producing the desired enzyme is capable of acting to catalyze stereoselective reduction. Particularly suitable are microorganisms "of the class Ascomycetes, of the orders Endomycetales, -.4.¾ J: # ,, 25 Mucorales, Moniliales and Eurotiales, as well as: ¾ genus Saccharomyces. Saccharomyces Cerevisiae is particularly preferred.
Pour préparer des esters 3(R)-hydroxy-butyrates 4-su.bstitués optiquement actifs et conte-30 nant 1 à 4 atomes de carbone, il est nécessaire d'utiliser la déhydrogénase de L-ß-hydroxyacyl-CoA purifiée [EC 1.1.1.35]' telle que celle du coeur de porc, car un micro-organisme intact possède des oxydo-réductases interférentes d'une configuration 35 opposée. Dès -lors, la réduction microbienne, par h 7 exemple, d’esters 4—chloro—acéto-acétiques contenant 1 à 4 atomes de carbone donne des 4-chloro~3-hydroxy-butyrates ayant des puretés optiques insatisfaisantes.In order to prepare optically active 3 (R) -hydroxy-butyrate 4-su.esters containing 1 to 4 carbon atoms, it is necessary to use purified L-ß-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase [EC 1.1.1.35] 'such as that of the pig heart, since an intact micro-organism has interfering oxidoreductases of an opposite configuration. Therefore, the microbial reduction, for h 7 for example, of 4-chloro-aceto-acetic esters containing 1 to 4 carbon atoms gives 4-chloro ~ 3-hydroxy-butyrates having unsatisfactory optical purities.
En conséquence, la présente invention four— 5 nit également un procédé de préparation de dérivés d’acides 3(R)-hydroxy-butyriques Γ-substitués optiquement actifs ayant la configuration 3(R) et répondant à la formule : v OH H 0 \Xà, . 4 dans laquelle X représente Cl, Br, I ou OH et R est un radical alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone, ce procédé comprenant les étapes consistant a 15 soumettre des composés répondant à la formule : 0 0Consequently, the present invention also provides a process for the preparation of optically active 3 (R) -hydroxy-butyric acid derivatives having the configuration 3 (R) and corresponding to the formula: v OH H 0 \ Xà,. 4 in which X represents Cl, Br, I or OH and R is an alkoxy radical containing 1 to 4 carbon atoms, this process comprising the steps consisting in subjecting compounds corresponding to the formula: 0 0
XCH2-C-CH2C-RXCH2-C-CH2C-R
i dans laquelle X et R ont les significations indiquées ci—dessus, à l’action enzymatique de la déhydrogénase 20 de L— ß—hydroxyacyl— CoA [EC 1.1.1.35] sous forme purifiée et récupérer, du mélange réactionnel enzymatique, les dérivés d’acides 3(R)-hydroxybutyriques îf-substituési in which X and R have the meanings indicated above, to the enzymatic action of the dehydrogenase 20 of L— ß-hydroxyacyl— CoA [EC 1.1.1.35] in purified form and recover, from the enzymatic reaction mixture, the derivatives if-substituted 3 (R) -hydroxybutyric acids
optiquement actifs désirés. Voptically active desired. V
0.0.
25 Dès lors, la présente invention fournit des composés ayant la configuration 3(R) ef répondant à la formule : 30 dans laquelle X est choisi parmi Cl, Br, I et OH, et R est un radical à chaîne droite, à chaîne ramifiée ou à configuration cyclique choisi parmi la classe comprenant î les radicaux alcoxy contenant 1 à envi— 35 ron 15 atomes de carbone ; h 8 les radicaux alkylamino contenant environ 5 à environ 15 atomes de carbone ; les radicaux cycloalcoxy et cycloalkyl— amino contenant environ 5 à environ 12 atomes de 5 carbone, les radicaux phénoxy et phénylalcoxy contenant 7 à environ 14 atomes de carbone, les radicaux phénylamino et phénylalkyl— amino répondant aux formules :Consequently, the present invention provides compounds having the configuration 3 (R) ef corresponding to the formula: in which X is chosen from Cl, Br, I and OH, and R is a straight chain, branched chain radical or cyclically selected from the class comprising alkoxy radicals containing 1 to about 15 carbon atoms; h 8 alkylamino radicals containing from about 5 to about 15 carbon atoms; cycloalkoxy and cycloalkylamino radicals containing about 5 to about 12 carbon atoms, phenoxy and phenylalkoxy radicals containing 7 to about 14 carbon atoms, phenylamino and phenylalkylamino radicals corresponding to the formulas:
10 Y Y Z10 Y Y Z
i , « i -N-0-A et -N-CH-0-A où Y et Z sont choisis parmi H, un groupe alkyle contenant 1 à environ 8 atomes de carbone, un groupe phényle ou un groupe benzyle et A est choisi parmi H, CH„, Cl et Br.i, "i -N-0-A and -N-CH-0-A where Y and Z are selected from H, an alkyl group containing 1 to about 8 carbon atoms, a phenyl group or a benzyl group and A is chosen from H, CH „, Cl and Br.
u 15 Ensuite, on peut faire réagir les dérivés =, d’acides L-ß-hydroxybutyriques 'C —substitués optique ment actifs avec la triméthylamine pour obtenir le dérivé correspondant d’acide )f—triméthylammonium-L-ß-hydroxybutyrique que l’on peut aisément transformer 20 en L—carnitine par traitement avec des acides aqueux.Then, the derivatives of optically active L-β-hydroxybutyric acids C-can be reacted with trimethylamine to obtain the corresponding derivative of) f-trimethylammonium-L-β-hydroxybutyric acid that l It can easily be converted to L-carnitine by treatment with aqueous acids.
On donnera ci—dessous un schéma des étapes réactionnelles de ce procédé.A diagram of the reaction steps of this process is given below.
\AÀt Micro-organisme 1\ AÀt Micro-organism 1
25 I ou déhydrogénase II25 I or dehydrogenase II
X=C1, Br, I, OH de L-ß-hydroxy- acyl-CoA CH.X = C1, Br, I, OH of L-ß-hydroxyacyl-CoA CH.
CH.-NCH.-N
1 «3 30 chq oh h ch oh, h 0 i-f* H+ »-F* / Il1 "3 30 chq oh h ch oh, h 0 i-f * H +" -F * / Il
H^-XT . C02H — H3C-Nl JLH ^ -XT. C02H - H3C-Nl JL
X“ CH^^ X“ CH3 RX “CH ^^ X“ CH3 R
IV IIIIV III
35 L-carnitine h 935 L-carnitine h 9
On a trouvé que la réaction ci-dessus * I —II avait lieu plus aisément lorsque X = Cl.It has been found that the above reaction * I -II takes place more easily when X = Cl.
Toutefois, étant donné que la réaction ultérieure TT —>» III a lieu avec de meilleurs rendements lors-5 que X = iode ou brome, il est préférable de préparer tout d’abord le dérivé Cl, puis de le transformer en dérivé I ou Br correspondant.However, since the subsequent reaction TT -> »III takes place with better yields when X = iodine or bromine, it is preferable to first prepare the derivative Cl, then to transform it into derivative I or Br corresponding.
La présente invention concerne également un procédé perfectionné consistant tout d’abord à 10 transformer l’ester 4~chloro-3(R)-hydroxybutyrate en 4-iodo- ou 4-bromo-3(R)-hydroxybutyrates correspondants. Pour des raisons de simplicité, il sera fait référence ci-après au dérivé I. On peut faire réagir doucement l’iodohydrine (V) avec la trïméthyl-15 amine à la température ambiante pour obtenir VI que l'on transforme aisément en L-carnitine suivant le schéma réactionnel ci-dessous : HO, HO HO H 0 11 sKs R = H ou ester CH^The present invention also relates to an improved process consisting first of all in transforming the 4 ~ chloro-3 (R) -hydroxybutyrate ester into corresponding 4-iodo- or 4-bromo-3 (R) -hydroxybutyrates. For reasons of simplicity, reference will be made below to derivative I. The iodohydrin (V) can be reacted gently with 15-methyl-amine at room temperature to obtain VI which is easily transformed into L- carnitine according to the reaction scheme below: HO, HO HO H 0 11 sKs R = H or ester CH ^
MeOH N-CH- j o CH3 ΐ; 25 Ί’ CH3 _0 0 CH, OH „ 0MeOH N-CH- j o CH3 ΐ; 25 Ί ’CH3 _0 0 CH, OH„ 0
CH,-i© ^ A Résine CH,-N+ ACH, -i © ^ A Resin CH, -N + A
3 **Dowex-l forme 0H“3 ** Dowex-l form 0H “
L-carnitine VIL-carnitine VI
De nombreuses variantes peuvent être ap-> portées au procédé illustré par l’équation ci-dessus.Many variants can be brought to the process illustrated by the above equation.
Quelle que soit la forme rendue disponible, on fait réagir l’ester avec l’iodure de sodium dans un solvant 35 approprié tel que la 2-butanone, l’acétone, le butanol, 10 etc. La réaction principale désirée à ce point de la réaction avec l'iodure de sodium est une réaction de déplacement formant 1*iodohydrine V sans perturber le centre chiral sur l'atome de carbone adjacent.Whichever form is made available, the ester is reacted with sodium iodide in a suitable solvent such as 2-butanone, acetone, butanol, etc. The main reaction desired at this point in the reaction with sodium iodide is a displacement reaction forming 1 * iodohydrin V without disturbing the chiral center on the adjacent carbon atom.
5 Pour cette réaction, il faut au moins une quantité suffisante d'iodure de sodium pour déplacer tout le chlorure de XI. Généralement parlant, on utilise un léger excès d'iodure de sodium.For this reaction, at least a sufficient amount of sodium iodide is required to displace all of the XI chloride. Generally speaking, a slight excess of sodium iodide is used.
La réaction de V avec la triméthylamine 10 peut être effectuée à une température modérée (par exemple, à 25°C) (voir-S.G. Boots et M.R. Boots, J. Pharm. Sei., 64, 1262, 1975) dans différents solvants tels que le méthanol ou l'éthanol contenant un excès de triméthylamine. Il est remarquable que, ' 15 suivant le solvant alcoolique utilisé, il se produise un échange d'ester. Par exemple, lorsqu'on utilise le méthanol comme solvant, on obtient l'ester méthy— ' lique de L-carnitine lors de la réaction. Cette réaction d'échange est avantageuse, car on sait que 20 l'ester méthylique de L-carnitine peut être transformé directement en base libre de L-carnitine par passage à travers une colonne échangeuse d'ions (OH ) [voir E. Strack et J. Lorenz, J. Physiol. Chem. (1966) 344» 276], 25 D'après la description des procédés ci- dessus, on peut constater qu'il se forme un certain nombre de nouveaux produits intermédiaires optiquement actifs et hautement utiles. Sont particulièrement utiles, les esters alkyliques d'acides 4-iodo-30 3(R)-hydroxybutyriques dans lesquels les groupes alkyle contiennent 6 à 10 atomes de carbone chacun. L'ester octylique est particulièrement préféré.The reaction of V with trimethylamine 10 can be carried out at a moderate temperature (for example, at 25 ° C.) (see-SG Boots and MR Boots, J. Pharm. Sci., 64, 1262, 1975) in various solvents such as than methanol or ethanol containing an excess of trimethylamine. It is remarkable that, depending on the alcoholic solvent used, an ester exchange takes place. For example, when methanol is used as the solvent, the methyl ester of L-carnitine is obtained during the reaction. This exchange reaction is advantageous since it is known that the methyl ester of L-carnitine can be converted directly into the free base of L-carnitine by passage through an ion exchange column (OH) [see E. Strack and J. Lorenz, J. Physiol. Chem. (1966) 344, 276], 25 From the description of the above processes, it can be seen that a number of new optically active and highly useful intermediate products are formed. Particularly useful are the alkyl esters of 4-iodo-3 (R) -hydroxybutyric acids in which the alkyl groups contain 6 to 10 carbon atoms each. The octyl ester is particularly preferred.
Des micro-organismes ayant l'activité d'oxydo-réductase désirée sont bien connus dans la 35 technique microbiologique et l'on peut utiliser L·.Microorganisms with the desired redox activity are well known in the microbiological art and L · can be used.
11 n’importe quel micro-organisme de ce type pour effectuer le procédé de la présente invention (voir K. Kieslich, "Microbial Transformations of Non-Ste-roid Cyclic Compounds” (Georg Thieme Publishers, 5 Stuttgart, 1976)), l’un ou l’autre des genres de ' micro-organismes décrits spécifiquement ici étant particulièrement applicable. On a trouvé que des micro-organismes aisément disponibles et peu coûteux du genre Saccharomyces, par exemple, la levure 10 de brasserie, la levure de boulangerie et la levure de vinificateur (Saccharomyces vini) produisaient la déhydrogénase de L-ß-hydroxyacyl-CoA [EL 1.1.1.35] et qu'ils étaient éminemment avantageux pour effec— y-.· tuer le procédé de l’invention. L’enzyme est décrite :¾ :v 15 par S.J. Wakil et E.M. Barnes Jr. dans "Compréhensive ^ ^ Biochemistry", volume 185 (1971)» pages 57-104·11 any such microorganism to carry out the process of the present invention (see K. Kieslich, "Microbial Transformations of Non-Ste-roid Cyclic Compounds” (Georg Thieme Publishers, 5 Stuttgart, 1976)), l either of the kinds of microorganisms described specifically herein being particularly applicable. It has been found that readily available and inexpensive microorganisms of the genus Saccharomyces, for example, brewer's yeast, baker's yeast and winemaker yeast (Saccharomyces vini) produced L-β-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase [EL 1.1.1.35] and were highly advantageous in carrying out the process of the invention. enzyme is described: ¾: v 15 by SJ Wakil and EM Barnes Jr. in "Compréhensive ^ ^ Biochemistry", volume 185 (1971) »pages 57-104 ·
Le substrat acéto-acétique 4-substitué = peut être incorporé dans un milieu nutritif d'une composition classique dans lequel ces organismes 20 sont cultivés et l'on peut alors adopter les conditions habituelles de fermentation pour effectuer la transformation réductrice. En variante, le principe actif peut être éliminé de la culture en croissance du micro-organisme, par exemple, par lyse des cellules ;#1§; - y:=£g£·...The 4-substituted aceto-acetic substrate = can be incorporated into a nutritive medium of a conventional composition in which these organisms are cultivated and the usual fermentation conditions can then be adopted to carry out the reduction transformation. Alternatively, the active ingredient can be removed from the growing culture of the microorganism, for example, by lysis of cells; # 1§; - y: = £ g £ · ...
25 pour libérer les enzymes ou en formant une suspension ' des cellules au repos dans un système aqueux frais. 3ΓΪ25 to release enzymes or by forming a suspension of cells at rest in a fresh aqueous system. 3ΓΪ
Dans l'une ou l'autre de ces techniques, la fonction β-céto sera réduite sélectivement pour autant que y l'enzyme active élaborée par les micro-organismes 30 soit présente dans le milieu. Bien entendu, les conditions de température, de temps et de pression dans lesquelles est effectué le contact du dérivé acéto-acétique 4-substitué avec 1'enzyme réductrice, sont interdépendantes, comme le comprendra l'homme de 35 métier. Par exemple, lors d'un chauffage modéré et 12 sous pression atmosphérique, le temps requis pour effectuer la transformation réductrice sera plus court que si cette transformation se déroule à la température ambiante dans des conditions par ail-5 leurs identiques. Bien entendu, ni la température, " ni la pression, ni le temps ne doivent atteindre des valeurs entraînant une dégradation du substrat. Lorsqu'on doit utiliser une culture en croissance de l’organisme, les conditions opératoires doivent éga-10 lement être suffisamment modérées pour que l’organisme ne soit pas tué avant qu’il élabore suffisamment d’enzymes hydrolytiques pour permettre le déroulement de la réaction. En règle générale, sous pression atmosphérique, la température peut se situer entre 15 environ 10°C et environ 35°C et la durée peut se situer entre environ 12 heures et environ 10 jours.In either of these techniques, the β-keto function will be selectively reduced provided that the active enzyme produced by the microorganisms is present in the medium. Of course, the conditions of temperature, time and pressure under which the contact of the 4-substituted aceto-acetic derivative with the reducing enzyme is carried out are interdependent, as will be understood by a person skilled in the art. For example, during moderate heating and 12 at atmospheric pressure, the time required to carry out the reductive transformation will be shorter than if this transformation takes place at ambient temperature under conditions using the same. Of course, neither the temperature, "nor the pressure, nor the time should reach values causing degradation of the substrate. When a growing culture of the organism is to be used, the operating conditions must also be sufficiently moderate so that the organism is not killed before it develops enough hydrolytic enzymes to allow the reaction to proceed. Generally, at atmospheric pressure, the temperature can be between about 10 ° C and about 35 ° C and the duration can be between approximately 12 hours and approximately 10 days.
Dans les exemples ci-après qui sont donnés pour illustrer la présente invention et qui ne limitent nullement le cadre des revendications ci-après, on a 20 préparé les substrats de dérivés d’acides V—halo-acéto-acétiques devant être soumis à une réduction microbiologique, à partir d’un dicétène, conformément au procédé général de C.D. Hurd et H.L. Abernethy (J. Am. Chem. Soc., 62, 1147* 1940) pour les dérivés 25 îf-chloro-acéto-acétiques et, conformément au procédé _ général de F. Chick, N.T.M. Wilsmore [J. Chem. Soc. ^ 1978 (I9IO)], pour les dérivés y-bromo-acéto-acétiques conformément au schéma réactionnel suivant : l^\ 13 X 0 0In the following examples which are given to illustrate the present invention and which in no way limit the scope of the following claims, the substrates of V-halo-aceto-acetic acid derivatives to be subjected have been prepared. microbiological reduction, starting from a diketene, in accordance with the general method of CD Hurd and HL Abernethy (J. Am. Chem. Soc., 62, 1147 * 1940) for the isf-chloro-aceto-acetic derivatives and, in accordance to the general process of F. Chick, NTM Wilsmore [J. Chem. Soc. ^ 1978 (I9IO)], for y-bromo-aceto-acetic derivatives in accordance with the following reaction scheme: l ^ \ 13 X 0 0
• H2C=C-CH2 ---y XCH2C-CH2CX• H2C = C-CH2 --- y XCH2C-CH2CX
ô-c=oô-c = o
dicétène RNHdiketene RNH
5 Y OR5 Y GOLD
O 0 Y | 0 0 XCH2CCH2C-NR xch2cch2cor où X = Cl ou Br Y = H ou groupe alkyle 10 R = tel que défini précédemment.O 0 Y | 0 0 XCH2CCH2C-NR xch2cch2cor where X = Cl or Br Y = H or alkyl group 10 R = as defined above.
En variante, on peut éventuellement préparer les dérivés d'acides —halo—acéto—acétiques à partir d'esters ΐΓ-halo-acétiques via une réaction classique de Grignard. Par exemple, on a préparé 15 aisément 1' ester octylique d'acide Y—chloracéto-acétique * en chauffant à reflux l'ester 'f-chloro-octylique avec deux équivalents de magnésium dans de l'éther pendant 48 heures. Après élimination du solvant, on a récupéré l’ester octylique d'acide acéto-acétique 20 avec un rendement d'environ 70$.Alternatively, the derivatives of —halo-aceto-acetic acids may optionally be prepared from ΐΓ-halo-acetic esters via a conventional Grignard reaction. For example, the octyl ester of Y-chloroacetoacetic acid * was readily prepared by refluxing the ester f-chloro-octyl with two equivalents of magnesium in ether for 48 hours. After removing the solvent, the octyl acetic acetic acid ester 20 was recovered with a yield of about $ 70.
On a préparé des dérivés d'acide )f-hydroxy— acéto-acétique à partir de leurs dérivés correspondants d'acide X-bromo-acéto-acétique par agitation dans une solution de dioxanne/eau (l:l) contenant du ' v 25 CaCO^ à 25°C pendant 12 heures.Derivatives of) f-hydroxyacetoacetic acid were prepared from their corresponding derivatives of X-bromoacetoacetic acid by stirring in a solution of dioxane / water (1: 1) containing 'v 25 CaCO ^ at 25 ° C for 12 hours.
On a identifié la structure de chacun des ί produits préparés conformément aux exemples ci—après par résonance magnétique nucléaire, par les spectres d'absorption des rayons infrarouges et par les mobi-30 lités de chromatographie sur couche mince. La pureté optique et la configuration absolue des produits ont „ été établies par leur transformation en L-carnitine, ainsi que par transformation en leurs esters qui sont aisément analysés, par le spectre de résonance magné-35 tique nucléaire et par la rotation optique.The structure of each of the products prepared according to the examples below was identified by nuclear magnetic resonance, by infrared absorption spectra and by thin layer chromatography devices. The optical purity and the absolute configuration of the products have been established by their transformation into L-carnitine, as well as by transformation into their esters which are easily analyzed, by the nuclear magnetic resonance spectrum and by optical rotation.
L· 14L14
Exemple 1 (levures) * On a préparé l'ester octylique d'acide (+)-4-chloro-3(R)~hydroxybutyrique comme suit : 0 0. OH „ 0Example 1 (yeasts) * The octyl ester of (+) - 4-chloro-3 (R) ~ hydroxybutyric acid was prepared as follows: 0 0. OH „0
5 Cl —*- JL5 Cl - * - JL
OC8H17 OC8H17 A. Fermentation, On a formé une suspension d'une croissance superficielle à partir d'une culture inclinée d'une semaine de Candida keyfr. NRRL Y-3%9> 10 développée sur de l'agar-agar de la composition suivante :OC8H17 OC8H17 A. Fermentation, A suspension of surface growth was formed from a week-long tilted culture of Candida keyfr. NRRL Y-3% 9> 10 developed on agar-agar of the following composition:
GrammesGrams
Agar-âgar 20Agar-Agar 20
Glucose 10 15 Extrait de levure 2,5 K9HP0, 1Glucose 10 15 Yeast extract 2.5 K9HP0, 1
Eau distillée, pour compléter à 1 litre (Stérilisation pendant 15 minutes à 1,4 kg/cm2) dans 5 ml d'une solution saline à 0,85$· On a utilisé 20 des portions de 1 ml de cette suspension pour inoculer un ballon Erlenmeyer de 250 ml (stade F-l) contenant 50 ml du milieu suivant (milieu de Vogel) :Distilled water, to make up to 1 liter (Sterilization for 15 minutes at 1.4 kg / cm2) in 5 ml of saline solution at $ 0.85 · 20 portions of 1 ml of this suspension were used to inoculate a 250 ml Erlenmeyer flask (stage F1) containing 50 ml of the following medium (Vogel medium):
GrammesGrams
Extrait de levure 5 25 Casamino-acides 5Yeast extract 5 25 Casamino acids 5
Dextrose 40Dextrose 40
Citrate de Na^.5 l/2H20 3 KH2po4 5 NH.N0 2 4 3 30 CaCl2.2H20 0,1Na citrate ^. 5 l / 2H20 3 KH2po4 5 NH.N0 2 4 3 30 CaCl2.2H20 0.1
MgSO *-7H20 - 0,2MgSO * -7:20 - 0.2
Solution d'oligo-éléments 0,1 ml0.1 ml solution of trace elements
Eau distillée, pour compléter à 1 litre pH 5*6 (stérilisation pendant 15 minutes à 2,1 kg/cm2) 15 ίDistilled water, to make up to 1 liter pH 5 * 6 (sterilization for 15 minutes at 2.1 kg / cm2) 15 ί
Solution d1 oligo-éléments g/lOO ml . Acide citrique ΙΗ,^Ο 5Solution of 1 trace elements g / lOO ml. Citric acid ΙΗ, ^ Ο 5
ZnS04.7H20 7ZnS04.7H20 7
Fe(NH4)2(S04)2.6H20 1 5 CuSO.,5Ho0 0,25 4 2Fe (NH4) 2 (S04) 2.6H20 1 5 CuSO., 5Ho0 0.25 4 2
MnS04.lH20 0,05 H3B03 0,05MnS04.lH20 0.05 H3B03 0.05
NaH2Mo04.2H20 0,05NaH2Mo04.2H20 0.05
On a incubé le ballon à 25°C sur un agi- 10 tateur rotatif (250 cycles/minute - rayon : 50,8 mm) pendant 24 heures, après quoi on a effectué un transfert de 10$ en volume dans un autre ballon Erlenmeyer de 250 ml (stade F-2) contenant 50 ml de milieu de Vogel. Après incubation pendant 24 heures sur un 15 agitateur rotatif, on a ajouté 150 mg d'ester octy-lique d'acide chloro—acéto—acétique dans 0,1 ml de "Tween 80" à 10$.The flask was incubated at 25 ° C on a rotary shaker (250 cycles / minute - radius: 50.8 mm) for 24 hours, after which a transfer of $ 10 by volume was made to another Erlenmeyer flask 250 ml (stage F-2) containing 50 ml of Vogel medium. After incubation for 24 hours on a rotary shaker, 150 mg of octyl ester of chloro-aceto-acetic acid was added in 0.1 ml of "Tween 80" at 10 $.
On a ensuite incubé le ballon de stade F—2 pendant une période supplémentaire de 24 heures dans 20 les conditions adoptées pour 1*incubation des ballons du stade F-l.The stage F-2 flask was then incubated for an additional 24 hours under the conditions adopted for incubating the stage F-1 flasks.
B. Isolation. 24 heures après l'addition de l'ester octylique d'acide ΙΓ-chloracéto—acétique, on a éliminé les cellules par centrifugation. On a extrait trois 25 fois complètement le produit surnageant avec 50 ml d'acétate d'éthyle. On a séché l'acétate d'éthyle sur du Na_S0. et on l'a évaporé pour obtenir un z 4 résidu huileux (186 mg). On a dissous le résidu dans 0,5 ml de la phase mobile et on a ajouté la 30 solution obtenue dans une colonne (l x 25 cm) de gel de silice (MN-kieselgel 60). On a élué la colonne avec un mélange 8:1 de "Skelly Bn et d'acétate d'éthyle et on a recueilli des fractions de 14 ml.B. Insulation. 24 hours after the addition of the ΙΓ-chloroacetoacetic acid octyl ester, the cells were removed by centrifugation. The supernatant was extracted three times completely with 50 ml of ethyl acetate. The ethyl acetate was dried over Na 2 SO 4. and evaporated to obtain an oily residue z 4 (186 mg). The residue was dissolved in 0.5 ml of the mobile phase and the solution obtained was added to a column (1 x 25 cm) of silica gel (MN-kieselgel 60). The column was eluted with an 8: 1 mixture of "Skelly Bn and ethyl acetate and 14 ml fractions were collected.
On a rassemblé les fractions 6 et 7 contenant le 35 produit désiré et on les a concentrées jusqu'à sic— L· « 16 » cité pour obtenir 120 mg de résidu cristallin# Par recristallisation dans un mélange d’acétate d’éthyle et d'hexane, on a obtenu 107 mg d’ester octylique 2 3 d’acide 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrique, [a] J +13*3° 5 (c, 4,45) (CHCl^) ; spectre de résonance magnétique protonique (cTCDCl^) ï 0,88 [3H, tr. distorsion, CH3-(CH2)n-] ; 1,28 [10H, s, -(CH2)5-] J 1,65 (2H, m, — CËL —CH„—CH0 0- C- ) 3 2,62 (2H, d, J = 6 Hz,Fractions 6 and 7 containing the desired product were pooled and concentrated to the above-quoted "16" to give 120 mg of crystalline residue # By recrystallization from a mixture of ethyl acetate and hexane, 107 mg of octyl ester 2 3 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyric acid, [a] J + 13 * 3 ° 5 (c, 4.45) (CHCl 4), were obtained; proton magnetic resonance spectrum (cTCDCl ^) ï 0.88 [3H, tr. distortion, CH3- (CH2) n-]; 1.28 [10H, s, - (CH2) 5-] J 1.65 (2H, m, - CËL —CH „—CH0 0- C-) 3 2.62 (2H, d, J = 6 Hz,
Z —Z /â JJZ —Z / â DD
0 10 -CH-CH9-CO0R) 3 3,22 (lH, large, -0H) 3 3,60 (2H, d, i Δ0 10 -CH-CH9-CO0R) 3 3.22 (1H, wide, -0H) 3 3.60 (2H, d, i Δ
0H0H
J = 6 Hz, C1CH2-CH-R) s 4,20 (3H, -CH2-CH-CH2 etJ = 6 Hz, C1CH2-CH-R) s 4.20 (3H, -CH2-CH-CH2 and
0H 0H0H 0H
-C-0-ÇH2CH2), Analyse : pour C^H^O^Cl : 15 0 calculé : C 57,47 J H 9,25 trouvé î C 57,52 3 H 9,07.-C-0-ÇH2CH2), Analysis: for C ^ H ^ O ^ Cl: 15 0 calculated: C 57.47 J H 9.25 found î C 57.52 3 H 9.07.
„ [Chromatographie sur couche mince R^ — 0,5, plaque de gel de silice de Brinkmann, 0,25 cm EM 3 mélange 20 de 5:1 de »Skelly B" et d'acétate d’éthyle].„[Thin layer chromatography R ^ - 0.5, Brinkmann silica gel plate, 0.25 cm EM 3 5: 1 mixture of 5: 1 of" Skelly B "and ethyl acetate].
Exemple 2Example 2
Cellules au repos. On a formé une suspension de 100 g de levure commerciale fraîche de boulangerie Saccharomyces cerevisiae ("Red Star'1) *- 25 dans 25Ο ml d'eau du robinet à laquelle on a ajouté 10 g de sucrose et 3,6 g d'ester octylique d'acide Γ-chloracéto-acétique. Après avoir incubé le contenu à 25°C sur un agitateur rotatif (250 cycles/minute — rayon : 50,8 mm) pendant 24 heures, on a ajouté une 30 quantité supplémentaire de 10 g de sucrose dans le ballon et on a laissé se dérouler la réaction pendant » 24 heures supplémentaires. On a ensuite éliminé les cellules par filtration à travers un tampon de célite, .Cells at rest. A suspension of 100 g of fresh commercial baker's yeast Saccharomyces cerevisiae ("Red Star'1) * - 25 was formed in 25Ο ml of tap water to which 10 g of sucrose and 3.6 g of ylique-chloroacetoacetic acid octyl ester After incubating the contents at 25 ° C on a rotary shaker (250 cycles / minute - radius: 50.8 mm) for 24 hours, an additional 10 was added g of sucrose in the flask and the reaction was allowed to proceed for an additional 24 hours. The cells were then removed by filtration through a pad of celite.
On a lavé les cellules avec de l’eau et de l'acétate 35 d'éthyle. On a combiné les produits de lavage avecThe cells were washed with water and ethyl acetate. The detergents were combined with
/U/ U
3 17 le filtrat et on les a extraits complètement avec de l'acétate d'éthyle. On a séché la couche d'acétate d'éthyle sur du MgSO^ et on l'a évaporée pour obtenir un résidu huileux que l'on a soumis à une 5 chromatographie dans une colonne de gel de silice pour obtenir 2,52 g d'ester octylique d'acide 4-chloro—3(r)—hydroxybutyrique sous forme d'un solide a bas point de fusion ; [a]^ +13*2° (c, 4*0* CHCl^) ·3 17 the filtrate and extracted completely with ethyl acetate. The ethyl acetate layer was dried over MgSO 4 and evaporated to give an oily residue which was subjected to column chromatography on silica gel to give 2.52 g of octyl ester of 4-chloro-3 (r) —hydroxybutyric acid as a low melting solid; [a] ^ + 13 * 2 ° (c, 4 * 0 * CHCl ^) ·
Exemple 3 10 On a préparé l'ester benzylique d'acide (+)4"-chloro-3 (R)-hydroxybutyrique comme suit : 0 0 CH H 0 C1vA/^\ -> Cl OCH20 ^ v ^ OCH20 15 A. Fermentation. On a formé une suspension d'une croissance superficielle provenant d'une culture inclinée d'une semaine de Gliocladium virens ATCC I3362 développée sur de l'agar-agar de la composition suivante : 20 GrammesExample 3 The benzyl ester of (+) 4 "-chloro-3 (R) -hydroxybutyric acid was prepared as follows: 0 0 CH H 0 C1vA / ^ \ -> Cl OCH20 ^ v ^ OCH20 15 A. Fermentation: A suspension of surface growth was formed from a one-week inclined culture of Gliocladium virens ATCC I3362 grown on agar of the following composition: 20 Grams
Extrait de malt 20Malt extract 20
Glucose 20Glucose 20
Peptone 1Peptone 1
Agar-agar 20 ί < .·,££ .Agar-agar 20 ί <. ·, ££.
25 Eau distillée-j pour compléter à 1 litre ··- (Stérilisation pendant 15 minutes à 1,4 kg/cm2) Wi dans 5 ml d'une solution saline à 0,8$%· On a utilisé des portions de 1 ml de cette suspension pour inoculer un ballon Erlenmeyer de 250 ml (stade F-l) 30 contenant 50 ml du milieu suivant (milieu de soya/ dextrose) : : l·· ·.25 Distilled water-j to make up to 1 liter ·· - (Sterilization for 15 minutes at 1.4 kg / cm2) Wi in 5 ml of 0.8%% saline solution · 1 ml portions were used of this suspension to inoculate a 250 ml Erlenmeyer flask (stage F1) containing 50 ml of the following medium (soybean / dextrose medium):: · · ·.
18 ! »18! "
GrammesGrams
Farine de soya 5Soy flour 5
Dextrose 20Dextrose 20
NaCl 5 5 kh2hpo4 5NaCl 5 5 kh2hpo4 5
Levure 5Yeast 5
Eau 1 litre pH : réglé à 7·Water 1 liter pH: set to 7 ·
Traitement en autoclave à 1,05 kg/cm2 pendant 15 10 minutes.Autoclave treatment at 1.05 kg / cm2 for 15 10 minutes.
On a incubé le ballon à 25°C sur un agitateur rotatif (250 cycles/minute - rayon : 50,8 mm) pendant 24 heures, après quoi on a effectué un trans— > fert de 10$ en volume dans un autre ballon Erlenmeyer 15 de 25Ο ml (stade F-2) contenant 50 ml de milieu de soya/dextrose. Après incubation pendant 24 heures sur un agitateur rotatif, on a ajouté 150 mg d’ester benzylique d'acide V-chloracéto-acétique dans 0,1 ml de "Tween 80" à 10$. On a ensuite incubé le ballon 20 de stade F-2 pendant une période supplémentaire de 24 heures dans les conditions adoptées lors de l'incubation des ballons de stade F-l.The flask was incubated at 25 ° C on a rotary shaker (250 cycles / minute - radius: 50.8 mm) for 24 hours, after which a transfer of $ 10 by volume was made into another Erlenmeyer flask 15 of 25Ο ml (stage F-2) containing 50 ml of soybean / dextrose medium. After incubation for 24 hours on a rotary shaker, 150 mg of V-chloroacetic acetic acid benzyl ester was added in 0.1 ml of "Tween 80" at $ 10. The stage F-2 flask 20 was then incubated for an additional 24 hours under the conditions adopted during the incubation of the stage F-1 flasks.
B. Isolation. 24 heures après l'addition de l'ester f benzylique d'acide )f-chloracéto-acétique, on a éliminé * 25 - les mycélia par filtration. On a extrait trois fois f complètement le filtrat avec 50 ml d'acétate d'éthyle. f On a séché la couche d'acétate d'éthyle sur du MgSO^ et on l'a concentrée sous vide pour obtenir un résidu (160 mg) · On a soumis le résidu à une chromatographie 30 dans une colonne (l x 25 cm) de gel de silice ("MN—B. Insulation. 24 hours after the addition of the benzyl acid ester f-chloroacetoacetic acid, the mycelia were removed by filtration. The filtrate was extracted three times completely with 50 ml of ethyl acetate. f The ethyl acetate layer was dried over MgSO 4 and concentrated in vacuo to obtain a residue (160 mg) · The residue was subjected to column chromatography (1 x 25 cm) silica gel ("MN—
Kieselgel 60"). On a élue la colonne avec un mélange , 10:1 de "Skelly B" et d'acétate d'éthyle et on a recueilli des fractions de 12 ml. On a rassemblé les fractions 11-16 contenant le produit désiré et 35 on les a concentrées jusqu'à siccité pour obtenirKieselgel 60 "). The column was eluted with a 10: 1 mixture of" Skelly B "and ethyl acetate and 12 ml fractions were collected. Fractions 11-16 containing the product were pooled desired and concentrated to dryness to obtain
LL
19 .19.
US mg d'ester benzylique d'acide 4-chloro-3(r)- hydroxybutyrique, [ot]^* +8,7° (c, 5,26 } CHCl^) 5 spectre de résonance magnétique protonique (ÎCDCIJ 2,65 (2H, d, J = 6 Hz, -CH-CH9C00R),US mg of 4-chloro-3 (r) - hydroxybutyric acid benzyl ester, [ot] ^ * + 8.7 ° (c, 5.26} CHCl ^) 5 proton magnetic resonance spectrum (ÎCDCIJ 2, 65 (2H, d, J = 6 Hz, -CH-CH9C00R),
5 OH5 OH
3,20 (lH, large, -OH) ; 3,54 (2H, d, J = 6 Hz, C1-ŒLCH) ; 4,20 (1H, m, -CH9-CH-CH9-) , 5,12 (2H,3.20 (1H, broad, -OH); 3.54 (2H, d, J = 6 Hz, C1-ŒLCH); 4.20 (1H, m, -CH9-CH-CH9-), 5.12 (2H,
Z 1 Z Z OH OHZ 1 Z Z OH OH
s, -C-O-CJ^CßHg) 5 7,31 (5H, s, 5 protons aromatiques). 10 0s, -C-O-CJ ^ CßHg) 5 7.31 (5H, s, 5 aromatic protons). 10 0
Analyse : pour C^H^Ogd Calculé : C 57,77 5 H 5,73 Trouvé : C 57,64 ί H 5,67 [Plaque de gel de silice EM Brinkmann pour chromato-15 graphie sur couche mince, 0,25 cm, R^ = 0,43, mélange 5:1 de "Skelly B" et d'acétate d’éthyle].Analysis: for C ^ H ^ Ogd Calculated: C 57.77 5 H 5.73 Found: C 57.64 ί H 5.67 [EM Brinkmann silica gel plate for thin layer chromatography, 0.25 cm, R ^ = 0.43, 5: 1 mixture of "Skelly B" and ethyl acetate].
Exemples 4-23Examples 4-23
On a répété le procédé de l'exemple 1 avec chacun des organismes repris dans le tableau 1, avec 20 cette exception que l'on a ajouté l'ester octylique d’acide 'ζ-chloracéto-acétique à une concentration de 1 mg/ml. On a obtenu une transformation en produit désiré, à savoir l'ester octylique d'acide (+)4-chloro-3(R)-hydroxybutyrique. On a répété les 25 procédés de ces exemples en ajoutant continuellement le substrat aux milieux de levure. Le rapport pondéral substrat/levure était d'environ 1:1,5 et.l'on a obtenu une excellente transformation en produit désiré.The process of Example 1 was repeated with each of the organisms listed in Table 1, with the exception that the octyl ester of ζ-chloro-acetic acid was added at a concentration of 1 mg / ml. A conversion was obtained into the desired product, namely the octyl ester of (+) 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyric acid. The procedures of these examples were repeated by continuously adding the substrate to the yeast media. The substrate / yeast weight ratio was about 1: 1.5 and excellent conversion to the desired product was obtained.
30 Exemples 24-4830 Examples 24-48
On a répété le procédé de l'exemple 3 avec chacun des organismes repris dans le tableau 2, avec cette exception que l'on a utilisé l'ester octylique d'acide Jf-chloracéto-acétique (l mg/ml). On a obtenu 35 une transformation en composé désiré, à savoir f(y-\ i 20 tester octylique d'acide (+)— 4—'chloro—3(R)-hydroxy— butyrique.The process of Example 3 was repeated with each of the organisms listed in Table 2, with the exception that the octyl ester of Jf-chloroacetic acetic acid (1 mg / ml) was used. Transformation to the desired compound, namely (octyl (+) - 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyric acid), was obtained.
Exemples 49-68Examples 49-68
On a répété le procédé de l'exemple 1 avec 5 chacun des organismes repris dans le tableau 1, avec * cette exception que, comme substrat, on a utilisé l’ester benzylique d'acide -chlor acéto-acétique (l mg/ml). On a obtenu une transformation en produit désiré, à savoir l'ester benzylique d'acide (+)4-10 chloro-3(R)-hydroxybutyrique.The process of Example 1 was repeated with each of the organisms listed in Table 1, with the exception that the benzyl ester of acetoacetic acid (1 mg / ml) was used as the substrate. ). A conversion was obtained into the desired product, namely the benzyl ester of (+) 4-10 chloro-3 (R) -hydroxybutyric acid.
Exemples 69-93Examples 69-93
On a répété le procédé de l'exemple 3 avec chacun des organismes repris dans le tableau 2 en utilisant, comme substrat, l'ester benzylique d'acide 15 îf-chloracéto-acétique (l mg/ml). On a obtenu une transformation en composé désiré, à savoir l'ester benzylique d'acide (+)4-chloro-3(R)-hydroxÿbutyrique.The process of Example 3 was repeated with each of the organisms listed in Table 2 using, as substrate, the benzyl ester of isf-chloroacetic acetic acid (1 mg / ml). A transformation was obtained into the desired compound, namely the benzyl ester of (+) 4-chloro-3 (R) -hydroxÿbutyric acid.
Exemple 94Example 94
On a préparé l'anilide d'acide (+)4—chloro— 20 3(R)-hydroxybutyrique conformément au procédé de l'exemple 2, avec cette exception que, comme substrat, on a utilisé le 4—chloracéto—acëtanilide à une concentration de 1 mg/ml 0 0 0H^ H 0 25 N0 N0 pour obtenir une transformation en produit désiré optiquement actif ; point de fusion : 110-111°C [a]2^ +17,5° (c, 3,0, CHCl/j) J spectre de résonance 30 0 magnétique protonique a CD3CCD3) : 2,67 (2H, d, J = 6 Hz, -H0HCH2-C0NHR), 3,66 (2H, d, J = 6 Hz, C1CH2CH0H-R), 4,43 (1H, m, -ch2-choh-ch2-) , 7s03-*7,44 (3H, m, protons aromatiques, méta et para), 7j6ç 35 (2H, d, J = 6 Hz, protons aromatiques, ortho), H- 21 9,24 (1H, large, -C-N-0).The (+) 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyric acid anilide was prepared according to the method of Example 2, except that, as the substrate, the 4-chloroacetoacetanilide was used. a concentration of 1 mg / ml 0 0 0H ^ H 0 25 N0 N0 to obtain a transformation into the desired optically active product; melting point: 110-111 ° C [a] 2 ^ + 17.5 ° (c, 3.0, CHCl / j) J proton magnetic resonance spectrum 30 CD3CCD3): 2.67 (2H, d, J = 6 Hz, -H0HCH2-C0NHR), 3.66 (2H, d, J = 6 Hz, C1CH2CH0H-R), 4.43 (1H, m, -ch2-choh-ch2-), 7s03- * 7 , 44 (3H, m, aromatic protons, meta and para), 7j6ç 35 (2H, d, J = 6 Hz, aromatic protons, ortho), H- 21 9.24 (1H, large, -CN-0).
Il 0It 0
Analyse pour C^qH^IïC^CI .Analysis for C ^ qH ^ IïC ^ CI.
* Calculé : C 56,21 ; H 5,66 5 Trouvé : c 56,17 ; H 5,47.* Calculated: C 56.21; H 5.66 5 Found: c 56.17; H 5.47.
Exemples 95-114Examples 95-114
On a répété le procédé de l’exemple 1 avec chacun des organismes repris dans le tableau 1, avec cette exception que l’on a ajouté le jT—chloracéto-10 acétanilide à une concentration de 1 mg/ml. Dans tous les cas, on a obtenu une transformation en produit désiré, à savoir l'anilide d'acide (+)4-chloro-3 (R)-hydroxybutyrique.The procedure of Example 1 was repeated with each of the organisms listed in Table 1, with the exception that jT-10-chloroacetoacetanilide was added at a concentration of 1 mg / ml. In all cases, a transformation was obtained into the desired product, namely the anilide of (+) 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyric acid.
Exemples 115-139 15 On a répété le procédé de l’exemple 3 avec les organismes repris dans le tableau 2. On a introduit le X-chloracéto-acétanilide à une concentration de 1 mg/ml. Dans tous ces cas, on a obtenu une transformation en anilide d’acide (+)4-chloro-3(R)-hydroxy-20 butyrique désiré.Examples 115-139 The process of Example 3 was repeated with the organisms listed in Table 2. The X-chloroacetoacetanilide was introduced at a concentration of 1 mg / ml. In all these cases, a transformation into the desired anilide of (+) 4-chloro-3 (R) -hydroxy-20-butyric acid was obtained.
Exemples 140-159Examples 140-159
On a répété le procédé de 1'exemple 1 avec les organismes repris dans le tableau 1, avec cette - exception que, comme substrat, on a utilisé l'ester 25 octylique d’acide 5f-bromacéto-acétique (l-mg/ml) ·The procedure of Example 1 was repeated with the organisms listed in Table 1, with the exception that, as substrate, the octyl ester 25f-bromacetoacetic acid (1 mg / ml was used ) ·
On a obtenu une transformation en produit désiré, à savoir l'ester octylique d'acide (+)4-bromo-3(R)-hydroxybutyrique ,A transformation was obtained into the desired product, namely the octyl ester of (+) 4-bromo-3 (R) -hydroxybutyric acid,
Exemples I6O-I84 30 On a répété le procédé de l’exemple 3 avec les organismes repris dans le tableau 2, avec cette exception que l'on a utilisé l'ester octylique d'acide X—bromacéto-acétique (l mg/ml). On a obtenu une transformation en produit désiré, à savoir l'ester 35 octylique d'acide (+)4-bromo-3(R)-hydroxybutyrique, L·.EXAMPLES 160-1084 The process of Example 3 was repeated with the organisms listed in Table 2, except that the octyl ester of X-bromacetoacetic acid (1 mg / ml was used ). A conversion was obtained to the desired product, namely the octyl ester of (+) 4-bromo-3 (R) -hydroxybutyric acid, L ·.
i 22i 22
Exemples 185-204 ’ On a répété le procédé de l’exemple 1 avec les organismes repris dans le tableau 1, avec cette exception que, comme substrat, on a utilisé 5 l’ester benzylique d'acide Y-bromacéto-acétique (l mg/ml) . On a obtenu une transformation en produit désiré^ à savoir l'ester benzylique d’acide (+) 4-bromo-3 (R) -hydroxybutyrique.EXAMPLES 185-204 'The procedure of Example 1 was repeated with the organisms listed in Table 1, with the exception that, as substrate, the benzyl ester of Y-bromacetoacetic acid (1 mg / ml). A transformation was obtained into the desired product, namely the benzyl ester of (+) 4-bromo-3 (R) -hydroxybutyric acid.
Exemples 205—229 10 On a répété le procédé de l'exemple 3 avec les organismes repris dans le tableau 2, avec cette exception que l'on a utilisé l'ester benzyli— que d'acide Ÿ-bromacéto-acétique (l mg/ml). On a obtenu la transformation en produit désiré, à savoir 15 l'ester benzylique d'acide (+)4-bromo-3(R)-hydroxy— butyrique.EXAMPLES 205-229 The process of Example 3 was repeated with the organisms listed in Table 2, except that the benzyl ester of que-bromacetoacetic acid (1 mg was used / ml). The conversion to the desired product, namely the benzyl ester of (+) 4-bromo-3 (R) -hydroxybutyric acid, was obtained.
Exemples 230-249 . On a répété le procédé de l'exemple 1 avec les organismes repris dans le tableau 1, avec 20 cette exception que, comme substrat, on a utilisé le Y-bromacétanilide (l mg/ml). On a obtenu une transformation en anilide d'acide (+)4-bromo-3(R)— hydroxybutyrique désiré.Examples 230-249. The process of Example 1 was repeated with the organisms listed in Table 1, except that, as the substrate, Y-bromacetanilide (1 mg / ml) was used. There was obtained a transformation into anilide of (+) 4-bromo-3 (R) - hydroxybutyric acid.
Exemples 250-274 25 On a répété le procédé de l'exemple 3 avec les organismes repris dans le tableau 2, avec cette exception que, comme substrat, on a utilise le Jf-bromacétanilide (l mg/ml) . On a obtenu une transformation en anilide d'acide (+)4~bromo-3(R·) — 30 hydroxybutyrique désiré.Examples 250-274 The process of Example 3 was repeated with the organisms listed in Table 2, except that, as the substrate, Jf-bromacetanilide (1 mg / ml) was used. There was obtained a transformation into anilide of (+) 4 ~ bromo-3 (R ·) - 30 hydroxybutyric acid.
Exemples 275-294Examples 275-294
On a répété le procédé de l'exemple 1 avec les organismes repris dans le tableau 1, avec cette exception que, comme substrat, on a utilisé 35 l'ester octylique d'acide y-hydroxyacéto-acétiqueThe process of Example 1 was repeated with the organisms listed in Table 1, with the exception that, as substrate, the octyl ester of γ-hydroxyaceto-acetic acid was used
/U/ U
23 (l mg/ml). On a obtenu une transformation en ester octylique d'acide 4“hydroxy-3(R)-hydroxy-butyrique désiré.23 (l mg / ml). A conversion was obtained into the desired 4 “hydroxy-3 (R) -hydroxy-butyric acid octyl ester.
Exemples 295-319 5 On a répété le procédé de l'exemple 3 avec les organismes repris dans le tableau 2, avec cette exception que, comme substrat, on a utilisé l'ester octylique d'acide jf~hydroxyacéto-acétique.Examples 295-319 The process of Example 3 was repeated with the organisms listed in Table 2, with the exception that, as substrate, the octyl ester of jf ~ hydroxyacetoacetic acid was used.
(1 mg/ml). On a obtenu une transformation en ester 10 octylique d'acide 4~hydroxy-3(R)-hydroxybutyrique désiré.(1 mg / ml). A conversion into octyl ester 4 ~ hydroxy-3 (R) -hydroxybutyric acid was obtained.
Exemples 320-339Examples 320-339
On a répété le procédé de l'exemple 1 avec les organismes repris dans le tableau 1, avec 15 cette exception que, comme substrat, on a utilisé le Y-hydroxyacéto-acétanilide (l mg/ml) · On a obtenu une transformation en anilide d'acide 4-hydroxy-3-(R)-hydroxybutyrique désiré.The process of Example 1 was repeated with the organisms listed in Table 1, except that, as the substrate, Y-hydroxyacetoacetanilide was used (1 mg / ml). desired 4-hydroxy-3- (R) -hydroxybutyric acid anilide.
Exemples 340-364 20 On a répété le procédé de l'exemple 3 avec les organismes repris dans le tableau 2, avec cette exception que, comme substrat, on a utilisé le Y-hydroxyacéto-acétanilide (l mg/ml). On a obtenu une transformation en anilide d'acide 4“ 25 hydroxy-3(R)-hydroxybutyrique désiré.Examples 340-364 The procedure of Example 3 was repeated with the organisms listed in Table 2, except that, as the substrate, Y-hydroxyacetoacetanilide (1 mg / ml) was used. Transformation to the desired 4 "hydroxy-3 (R) -hydroxybutyric acid anilide was obtained.
Exemple 365 4-chloro-3 (R)-hydroxybutyrate de méthyle (VIII) 0 0 H£ H 0 —*- ci \ 30 0CH3 0CH3Example 365 Methyl 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyrate (VIII) 0 0 H £ H 0 - * - ci \ 30 0CH3 0CH3
VII VIIIVII VIII
On a incubé 100 mg de 4-chloracéto-acétate de méthyle (Vil) avec 2 9 unités de déhydrogénas e de ß-hydroxyacyl-CoA (Sigma, H4626) de coeur de 35 porc (EC 1.1.1.35) et 1,36 g de NADH (Sigma„ 90$) 24 dans 30 ml d'un tampon de phosphate de sodium 0,1M, PH 6,5.100 mg of methyl 4-chloroaceto acetate (Vil) were incubated with 29 units of dehydrogenas and ß-hydroxyacyl-CoA (Sigma, H4626) from pork heart (EC 1.1.1.35) and 1.36 g NADH (Sigma „90 $) 24 in 30 ml of 0.1M sodium phosphate buffer, pH 6.5.
v Après 30 heures à 25°C, on a extrait quatre fois le mélange réactionnel avec 30 ml d’acétate 5 d’éthyle. On a séché la couche organique sur du sulfate de sodium et on l’a évaporée jusqu’à siccité sous pression réduite. On a soumis le résidu (90 mg) à une chromatographie dans une colonne (l,3 x 34 cm) de gel de silice (12 g). On a élué la colonne avec 10 un système solvant constitué d’un mélange 8:1 de "Skelly B" et d'acétate d'éthyle et l'on a recueilli des fractions de 20 ml. On a rassemblé les fractions 9-11 contenant le 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrate de méthyle désiré (VTII) comme lla révélé la chromato-15 graphie sur couche mince, [oc] +23*5° (c, 5,2 chci3).v After 30 hours at 25 ° C, the reaction mixture was extracted four times with 30 ml of ethyl acetate. The organic layer was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure. The residue (90 mg) was subjected to chromatography in a column (1.3 x 34 cm) of silica gel (12 g). The column was eluted with a solvent system consisting of an 8: 1 mixture of "Skelly B" and ethyl acetate and 20 ml fractions were collected. Fractions 9-11 containing the desired methyl 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyrate (VTII) were pooled as revealed by thin layer chromatography, [oc] + 23 * 5 ° (c, 5 , 2 chci3).
Exemple* 366Example * 366
On a répété le procédé de l'exemple 365 en utilisant le 4-chloracéto-acétate d'éthyle comme 20 substrat pour obtenir le 4-chloro-3(R)-hydroxÿbuty-rate d'éthyle, [a]£3 +22,7° (c, 4,7 CHCl^.The process of Example 365 was repeated using ethyl 4-chloroaceto acetate as a substrate to obtain ethyl 4-chloro-3 (R) -hydroxÿbuty-rate, [a] £ 3 +22 , 7 ° (c, 4.7 CHCl ^.
Exemple 367Example 367
On a répété le procédé de l'exemple 365 en utilisant le 4-chloracéto-acétate de n-propyle 25 comme substrat pour obtenir le 4**chloro-3(R)-hydroxy-butyrate de n-propyle, [a]p3 +21,5° (c, 5,0, CHCl^).The process of Example 365 was repeated using n-propyl 4-chloro-ketoacetate as a substrate to obtain n-propyl 4-chloro-3 (R) hydroxy-butyrate, [a] p3 + 21.5 ° (c, 5.0, CHCl 4).
Exemple 368Example 368
On a répété le procédé de l'exemple 365 en utilisant le 4-chloracéto-acétate de n-butyle 30 comme substrat pour obtenir le 4-chloro-3(R)-hydroxy-butyrate de n-butyle, [a]^3 +20,1° (c, 3,1, CHCl^).The process of Example 365 was repeated using n-butyl 4-chloro keto acetate as the substrate to obtain n-butyl 4-chloro-3 (R) hydroxy-butyrate, [a] ^ 3 + 20.1 ° (c, 3.1, CHCl 4).
• /U• / U
/ U' 25/ U '25
Procédé général de transformation dlamides et d’esters * 4-halo-3(R)—hydroxybutyriques en L-carnitine.General process for the transformation of amides and esters * 4-halo-3 (R) —hydroxybutyrics into L-carnitine.
Exemple 369Example 369
Pendant environ 2 heures, on a chauffé, à 5 80-90°C, un mélange de 1,5 g d’ester octylique d’acide 4-chloro-3(R)-hydroxÿbutyrique, de 3 ml d’éthanol et de triméthylamine (solution à 25$ en poids) dans 3 ml d’eau. On a soumis les solvants et l’excès de tri-méthylamine à une évaporation sous vide jusqu’à sic-10 cité pour obtenir 1,8 g d’un résidu brut. On a chauffé le produit brut.(l g) à 80-90°C dans une solution de HCl à 10$ (7 ml) pendant 1,5 heure.For about 2 hours, a mixture of 1.5 g of octyl ester of 4-chloro-3 (R) -hydroxÿbutyric acid, 3 ml of ethanol and trimethylamine (solution at 25 $ by weight) in 3 ml of water. The solvents and excess tri-methylamine were subjected to vacuum evaporation to sic-10 to give 1.8 g of a crude residue. The crude product (1 g) was heated to 80-90 ° C in a 10 $ HCl solution (7 ml) for 1.5 hours.
Après évaporation des solvants sous pression réduite, on a extrait deux fois le produit brut avec de l’étha— 15 nol absolu (10 ml) et on a évaporé l’éthanol sous vide. On a dissous le résidu cristallin dans une petite quantité d’éthanol et, par addition d’éther, on a précipité le chlorure de L-carnitine avec un bon rendement (320 mg) } point de fusion : 142° 20 (décomposition) ; [a] —23,7° (c* 4*5* K^O).After evaporation of the solvents under reduced pressure, the crude product was extracted twice with absolute ethanol (10 ml) and the ethanol was evaporated in vacuo. The crystalline residue was dissolved in a small amount of ethanol and, by addition of ether, the L-carnitine chloride was precipitated with good yield (320 mg)} melting point: 142 ° 20 (decomposition); [a] —23.7 ° (c * 4 * 5 * K ^ O).
On peut aisément transformer le chlorure de L—carnitine en un sel interne de L-carnitine pharmaceutiquement préféré par échange d’ions de façon bien connue dans la technique.L-carnitine chloride can readily be transformed into a pharmaceutically preferred internal salt of L-carnitine by ion exchange in a manner well known in the art.
25 - Exemple 370 4-iodo-3(R)-hydroxybutyrate d’octyle (IX) 0H H p _QHII p oc8h17 1 OC8H1725 - Example 370 Octyl 4-iodo-3 (R) -hydroxybutyrate (IX) 0H H p _QHII p oc8h17 1 OC8H17
30 11 IX30 11 IX
Pendant 24 heures* on a chauffé à reflux un mélange de 1,426 g de 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrate d’octyle (II) et de 1,2 g de Nal anhydre dans 15 ml de méthyléthyl-cétone. On a évaporé le mélange à 35 l’évaporateur rotatif et on l’a fait réagir avecFor 24 hours * a mixture of 1,426 g of 4-chloro-3 (R)-octyl hydroxybutyrate (II) and 1.2 g of anhydrous Nal in 15 ml of methyl ethyl ketone was heated to reflux. The mixture was evaporated on a rotary evaporator and reacted with
LL
26 φ 100 ml d’éther et 50 ml d’eau. On a séparé la . phase organique et on l’a lavée avec 150 ml d’une solution de thiosulfate de sodium à 10% et 150 ml de saumure, puis on l’a séchée sur du sulfate de 5 sodium anhydre. On a évaporé le solvant sous pres sion réduite pour obtenir 1,762 g de IX sous forme d’une huile jaune pâle ; spectre d’absorption des ‘ rayons infrarouges (pellicule mince) 3460 cm * (0H) et I73O cm (ester 0=0) 5 spectre de résonance 10 magnétique protonique (CDCl^) : 3,93-4*27 (m, 3H), 3,17 (d, 2H), 2,50 (d, 2H), 1,50-1,87 (m, 2H), 1,30 (s large, 12H), 0,93 (m, 3H).26 φ 100 ml of ether and 50 ml of water. We separated the. organic phase and washed with 150 ml of 10% sodium thiosulfate solution and 150 ml of brine, then dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent was evaporated under reduced pressure to obtain 1.762 g of IX in the form of a pale yellow oil; absorption spectrum of infrared rays (thin film) 3460 cm * (0H) and 173O cm (ester 0 = 0) 5 resonance spectrum 10 proton magnetic (CDCl ^): 3.93-4 * 27 (m, 3H ), 3.17 (d, 2H), 2.50 (d, 2H), 1.50-1.87 (m, 2H), 1.30 (s wide, 12H), 0.93 (m, 3H ).
Transformation du 4-iodo-3(R)~hydroxybutyrate d’octyle (IX) en L—carnitine 15 QH R P CH3 J-CH,Transformation of 4-iodo-3 (R) ~ octyl hydroxybutyrate (IX) into L-carnitine 15 QH R P CH3 J-CH,
OC8H17 CH, ?H3 |Lh SOC8H17 CH,? H3 | Lh S
IX Th nHVIX Th nHV
3 ê och33 ê och3
20 X20 X
CH 0H 0 Ο'., 25- L-carnitine A une solution.de 1,593 g de IX dans 15 ml de méthanol, on a ajouté 8 ml d’une solution aqueuse à 25% de triméthylamine. On a agité le mélange à 27°C pendant 20 heures. On a séparé les solvants 30 et l’excès de triméthylamine par évaporation sous pression réduite pour obtenir un solide semi-cris-3 tallin X. On a lavé ce résidu avec de petites quan tités d’éther pour éliminer l’octanol, puis on l’a dissous dans l’eau et on l’a fait passer sur du 35 Dowex l-x4 [forme OH” - 50-100 mailles, volume de la h • 27 colonne : 2,5 x 15 cm]. On a lavé la colonne avec * de l'eau distillée. Par élimination du solvant sous vide hors des deux cents premiers millilitres de l'éluat, on a obtenu la L-carnitine sous forme 5 d'un solide cristallin blanc (490 mg, rendement : 65$) [oc]*3 -29,2° (c, 6,5 H20).CH 0H 0 Ο '., 25- L-carnitine To a solution of 1.593 g of IX in 15 ml of methanol, 8 ml of a 25% aqueous solution of trimethylamine were added. The mixture was stirred at 27 ° C for 20 hours. The solvents and the excess trimethylamine were separated by evaporation under reduced pressure to obtain a semi-Cree-3 tallin X solid. This residue was washed with small quantities of ether to remove the octanol, then dissolved in water and passed over Dowex l-x4 [OH form ”- 50-100 stitches, h • 27 column volume: 2.5 x 15 cm]. The column was washed with distilled water. By elimination of the solvent under vacuum outside the first two hundred milliliters of the eluate, the L-carnitine was obtained in the form of a white crystalline solid (490 mg, yield: $ 65) [oc] * 3-29, 2 ° (c, 6.5 H20).
Exemple 371 “ On a répété le procédé de l'exemple 370 en utilisant le 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrate 10 d'hexyle pour obtenir le 4“iodo-3(R)-hydroxybutyrate d'hexyle que l'on a ensuite transformé en L-carnitine.Example 371 “The process of Example 370 was repeated using 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyrate 10 to obtain the 4“ iodo-3 (R) -hydroxybutyrate which was then transformed into L-carnitine.
Exemple 372Example 372
On a répété le procédé de l'exemple 370 en utilisant le 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrate d'heptyle 15 pour obtenir le 4-i°do-3(R)-hydroxybutyrate d'heptyle que l'on a ensuite transformé en L-carnitine.The process of Example 370 was repeated using heptyl 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyrate to obtain the heptyl 4-do 3 (R) -hydroxybutyrate then transformed into L-carnitine.
Exemple 373Example 373
On a répété le procédé de l'exemple 370 en utilisant le 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrate de décyle 20 pour obtenir le 4-iodo-3(R)-hydroxybutyrate de décyle que l'on a ensuite transformé en L—carnitine.The process of Example 370 was repeated using decyl 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyrate to obtain decyl 4-iodo-3 (R) -hydroxybutyrate which was then transformed into L —Carnitine.
Exemple 374Example 374
On a répété le procédé de l'exemple 370 en utilisant le 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrate de méthy-25 le (VIII) pour obtenir le 4-iodo-3(R)-hydroxybutyrate de méthyle que l'on a ensuite transformé en L-carni-tine.The process of Example 370 was repeated using methyl 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyrate (VIII) to obtain the methyl 4-iodo-3 (R) -hydroxybutyrate which was then turned into L-carni-tine.
Exemple 375Example 375
On a répété le procédé de l'exemple 370 30 - en utilisant-le 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrate d'éthyle pour obtenir le 4-iodo-3(R)-hydroxybutyrate , d'éthyle que l'on a ensuite transformé en L-carni tine.The process of Example 370 was repeated using ethyl 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyrate to obtain the ethyl 4-iodo-3 (R) -hydroxybutyrate which was then turned into L-carni tine.
AAT
28 I Exemple 376 * On a répété le procédé de l’exemple 37028 I Example 376 * The process of Example 370 was repeated
Ien utilisant le 4“chloro-3(R)—hydroxybutyrate de n— propyle pour obtenir le 4-i°do-3(R)-hydroxybutyrate 5 de n-propyle que l'on a ensuite transformé en L- carnitine.Using the 4 “n-propyl chloro-3 (R) —hydroxybutyrate to obtain 4-n ° do-3 (R) -n-propyl hydroxybutyrate 5 which was then transformed into L-carnitine.
Exemple 377Example 377
On a répété le procédé de l'exemple 370 en utilisant le 4-chloro-3(R)-hydroxybutyrate de 10 n-butyle pour obtenir le 4-iodo-3(R)-hydroxybutyrate de n—butyle que l’on a ensuite transformé en L-carnitine.The process of Example 370 was repeated using 4 n-butyl 4-chloro-3 (R) -hydroxybutyrate to obtain the n-butyl 4-iodo-3 (R) -hydroxybutyrate which was obtained. then transformed into L-carnitine.
Les levures représentatives produisant l'enzyme désirée sont reprises dans le tableau 1, 20 tandis que des champignons représentatifs sont repris dans le tableau 2.Representative yeasts producing the desired enzyme are listed in Table 1, while representative fungi are listed in Table 2.
29 TABLEAU 1 (Levures) 1. Candida lipolytica NRRL Y-1095 2. Candida pseudotropiealis NRRL Y-1264 3· Mycoderma cerevisiae NRRL Y-l6l5 5 4. Torula lactosa NRRL Y-329 5· Geotrichum candidum NRRL Y-552 6. Hansenula anomala NRRL Y-366 7· Hansenula subpelliculosa NRRL Y-I683 8. Fichia alcoholophila NRRL Y-2026 10 9. Saccharomyces cerevisiae NRRL Y-12.632 10. Saccharomyces lactis NRRL Y-1140 11. Zygosaccharomyces priorianus NRRL Y—12.624 12. Saccharomyces acidifaciens NRRL Y—7253 13. Kloeckera corticis ATCC 20109 15 14* Cryptococus mascerans ATCC 24194 .15· Rhodotorula sp, ATCC 20254 16, Candida albicans ATCC 752 17· Dipodaseus albidus ATCC 12934 18. Saccharomyces cerevisiae ("Red Star" commercial) 20 19. Rhodotorula rubra NRRL Y-1592 20. Oospora lactis ATCC 14318 NRRL - Northern Regional Research Lab. à Peoria, Illinois· ATCC - American Type Culture Collection à Rockville, 25 Maryland.29 TABLE 1 (Yeasts) 1. Candida lipolytica NRRL Y-1095 2. Candida pseudotropiealis NRRL Y-1264 3 · Mycoderma cerevisiae NRRL Y-l6l5 5 4. Torula lactosa NRRL Y-329 5 · Geotrichum candidum NRRL Y-552 6. Hansenula anomala NRRL Y-366 7 · Hansenula subpelliculosa NRRL Y-I683 8. Fichia alcoholophila NRRL Y-2026 10 9. Saccharomyces cerevisiae NRRL Y-12.632 10. Saccharomyces lactis NRRL Y-1140 11. Zygosaccharomyces priorianus NRRL Y — 12.624 12. Saccharomyces acidifaciens NRRL Y — 7253 13. Kloeckera corticis ATCC 20109 15 14 * Cryptococus mascerans ATCC 24194 .15 · Rhodotorula sp, ATCC 20254 16, Candida albicans ATCC 752 17 · Dipodaseus albidus ATCC 12934 18. Saccharomyces cerevisiae ("Red Star" commercial) 20 19 Rhodotorula rubra NRRL Y-1592 20. Oospora lactis ATCC 14318 NRRL - Northern Regional Research Lab. in Peoria, Illinois · ATCC - American Type Culture Collection in Rockville, 25 Maryland.
^\ ·.^ \ ·.
30 TABLEAU 2 (Champignons) 1. Gliocladium virens ATCC 13362 2. Çaldariomyces fumago ATCC 16373 3. Linderina pennisopora ATCC 12442 5 4* Aspergillus ochraceus NRRL 405 5· Trichoderma lignorum ATCC 8678 6. Heterocephalum autantiacum ATCC 16328 7· Entomophthora coronata NRRL 1912 8. Scopulariopsis constantini NRRL l860 10 9· Zygorhynchus heterogamus ATCC 6743 10. Scopulariopsis brevicaulis NRRL 2157 11. Rhizopus arrhizus NRRL 2286 12. Pénicillium thomii NRRL 2077 13. Mucor hiemalis (-) NRRL 4088 15 14· Byssochlamys nivea ATCC 12550 ; 15· Pénicillium patulum NRRL 1952 l6. Metarrhizium anisopliae ATCC 24942 17* Pénicillium islandicum ATCC 10127 l8. .Cunninghamella elegans ATCC 10028a 20 19· Cunninghamella echinulata ATCC 11585a 20. Aspergillus fumigatus ATCC 16907 21. Aspergillus amstelodami NRRL 90 22. Gliocladium roseum ATCC 10521 23. Aspergillus giganteus ATCC 10059 25 24. Absidia blakeleeana ATCC 10148b 25. Pénicillium roqueforti NRRL 849a /1^, '30 TABLE 2 (Mushrooms) 1. Gliocladium virens ATCC 13362 2. Çaldariomyces fumago ATCC 16373 3. Linderina pennisopora ATCC 12442 5 4 * Aspergillus ochraceus NRRL 405 5 · Trichoderma lignorum ATCC 8678 6. Heterocephalum tantiacum ATCC 16328 7 · Entomophthora 12 Scopulariopsis constantini NRRL l860 10 9 · Zygorhynchus heterogamus ATCC 6743 10. Scopulariopsis brevicaulis NRRL 2157 11. Rhizopus arrhizus NRRL 2286 12. Penicillium thomii NRRL 2077 13. Mucor hiemalis (-) NRRL 4088 15 14 · Byssochlamys nivea 15 · Penicillium patulum NRRL 1952 l6. Metarrhizium anisopliae ATCC 24942 17 * Penicillium islandicum ATCC 10127 l8. .Cunninghamella elegans ATCC 10028a 20 19 · Cunninghamella echinulata ATCC 11585a 20. Aspergillus fumigatus ATCC 16907 21. Aspergillus amstelodami NRRL 90 22. Gliocladium roseum ATCC 10521 23. Aspergillus giganteus ATCC 10059 25 24. Absidia blakeleeana ATCC 10148b 25. Pénic 1 ^, '
Claims (26)
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/447,171 US4642290A (en) | 1982-12-06 | 1982-12-06 | Process for preparing a compound for use in the production of L-carnitine |
| US44717182 | 1982-12-06 | ||
| US54495783A | 1983-10-24 | 1983-10-24 | |
| US54495783 | 1983-10-24 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| LU85115A1 true LU85115A1 (en) | 1984-04-02 |
Family
ID=27034888
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| LU85115A LU85115A1 (en) | 1982-12-06 | 1983-12-05 | PROCESS FOR THE PREPARATION OF L-CARNITINE AND INTERMEDIATE CHEMICALS USED IN THIS PROCESS |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0767674A (en) |
| KR (1) | KR840008165A (en) |
| AT (1) | AT393136B (en) |
| AU (1) | AU566906B2 (en) |
| CA (1) | CA1225956A (en) |
| CH (1) | CH661498A5 (en) |
| DE (1) | DE3344085C2 (en) |
| DK (1) | DK163917C (en) |
| ES (1) | ES527807A0 (en) |
| FI (1) | FI81115C (en) |
| FR (1) | FR2537130B1 (en) |
| GB (1) | GB2132614B (en) |
| GR (1) | GR78767B (en) |
| IE (1) | IE56322B1 (en) |
| IL (1) | IL70352A (en) |
| IT (1) | IT1167289B (en) |
| LU (1) | LU85115A1 (en) |
| NL (1) | NL8304190A (en) |
| NO (1) | NO159291C (en) |
| PH (1) | PH20456A (en) |
| PT (1) | PT77780B (en) |
| SE (1) | SE455501B (en) |
| TR (1) | TR23136A (en) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK544284A (en) * | 1983-12-06 | 1985-06-07 | Hoffmann La Roche | PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF OPTIC ACTIVE PROPIONIC ACID DERIVATIVES |
| IT1181908B (en) * | 1984-07-12 | 1987-09-30 | Debi Derivati Biologici | PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF L-CARNITINA |
| IT1181812B (en) * | 1984-07-27 | 1987-09-30 | Sigma Tau Ind Farmaceuti | PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF THE GAMMA-DIMETHYLAMINE L-BETA-HYDROXYBUTIRRIC ACID |
| IT1190358B (en) * | 1985-05-24 | 1988-02-16 | Sclavo Spa | PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF L-CARNITINA |
| JPS62126997A (en) * | 1985-11-28 | 1987-06-09 | Nippon Synthetic Chem Ind Co Ltd:The | Method for producing optically active γ-halo-β hydroxybutyric acid ester |
| IT1189070B (en) * | 1986-03-14 | 1988-01-28 | Donegani Guido Ist | PROCESS FOR THE PREPARATION OF THE L (-) - CARNITINE CHLORIDE FROM FOREIGN 3,4-EPOXYBUTYRRICS |
| JPH0678277B2 (en) * | 1988-02-19 | 1994-10-05 | 高砂香料工業株式会社 | Process for producing optically active alcohol and its derivative |
| JP2939646B2 (en) * | 1990-07-17 | 1999-08-25 | チッソ株式会社 | 4-Substituted-2-hydroxybutanoic acid esters and production method |
| US5215919A (en) * | 1991-02-25 | 1993-06-01 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Process for producing optically active 2-hydroxycycloalkanecarboxylic acid esters using microbially derived reductase |
| US5324662A (en) | 1992-05-15 | 1994-06-28 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Stereoselective microbial or enzymatic reduction of 3,5-dioxo esters to 3-hydroxy-5-oxo, 3-oxo-5-hydroxy, and 3,5-dihydroxy esters |
| JP3155107B2 (en) * | 1993-01-12 | 2001-04-09 | ダイセル化学工業株式会社 | Method for producing optically active 4-halo-3-hydroxybutyrate |
| JP2000189170A (en) * | 1998-05-08 | 2000-07-11 | Daicel Chem Ind Ltd | Method for producing optically active 4-halo-3-hydroxybutyrate |
| EP1024139B1 (en) | 1998-08-05 | 2004-05-12 | Kaneka Corporation | Process for the preparation of optically active 2-(6-(hydroxymethyl)-1,3-dioxan-4-yl) acetic acid derivatives |
| US7125693B2 (en) * | 2002-08-09 | 2006-10-24 | Codexis, Inc. | Enzymatic processes for the production of 4-substituted 3-hydroxybutyric acid derivatives |
| DE10315760A1 (en) * | 2003-04-07 | 2004-10-21 | Basf Ag | L-carnitine dehydrogenases, their derivatives and a process for the preparation of substituted (S) -alkanols |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3931410A (en) * | 1974-02-28 | 1976-01-06 | The Upjohn Company | Composition and method of use |
| CH589604A5 (en) * | 1974-04-26 | 1977-07-15 | Lonza Ag | |
| JPS5139634A (en) * | 1974-09-27 | 1976-04-02 | Ono Pharmaceutical Co | Ganma amino beeta hidorokishibutansananirido no seizoho |
| JPS6017776B2 (en) * | 1979-11-07 | 1985-05-07 | 電気化学工業株式会社 | Production method of γ-chloro-β-hydroxybutyric acid alkyl ester |
| JPS5950661B2 (en) * | 1980-07-28 | 1984-12-10 | 電気化学工業株式会社 | Method for producing γ-amino-β-hydroxybutyric acid |
| JPS5950663B2 (en) * | 1981-04-28 | 1984-12-10 | 電気化学工業株式会社 | Method for producing γ-amino-β-hydroxybutyric acid |
-
1983
- 1983-11-22 IE IE2732/83A patent/IE56322B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-11-28 AU AU21758/83A patent/AU566906B2/en not_active Ceased
- 1983-11-29 CA CA000442170A patent/CA1225956A/en not_active Expired
- 1983-11-30 IL IL8370352A patent/IL70352A/en not_active IP Right Cessation
- 1983-12-01 GR GR73128A patent/GR78767B/el unknown
- 1983-12-02 CH CH6448/83A patent/CH661498A5/en not_active IP Right Cessation
- 1983-12-02 FI FI834419A patent/FI81115C/en not_active IP Right Cessation
- 1983-12-05 LU LU85115A patent/LU85115A1/en unknown
- 1983-12-05 PH PH29928A patent/PH20456A/en unknown
- 1983-12-05 NO NO834461A patent/NO159291C/en unknown
- 1983-12-05 SE SE8306714A patent/SE455501B/en not_active IP Right Cessation
- 1983-12-05 DK DK559283A patent/DK163917C/en not_active IP Right Cessation
- 1983-12-05 IT IT8324018A patent/IT1167289B/en active
- 1983-12-05 AT AT4237/83A patent/AT393136B/en not_active IP Right Cessation
- 1983-12-05 GB GB08332359A patent/GB2132614B/en not_active Expired
- 1983-12-05 ES ES83527807A patent/ES527807A0/en active Granted
- 1983-12-06 FR FR8319505A patent/FR2537130B1/en not_active Expired
- 1983-12-06 TR TR10354/83A patent/TR23136A/en unknown
- 1983-12-06 PT PT77780A patent/PT77780B/en not_active IP Right Cessation
- 1983-12-06 KR KR1019830005765A patent/KR840008165A/en not_active Ceased
- 1983-12-06 NL NL8304190A patent/NL8304190A/en not_active Application Discontinuation
- 1983-12-06 DE DE3344085A patent/DE3344085C2/en not_active Expired - Fee Related
-
1993
- 1993-09-01 JP JP21771093A patent/JPH0767674A/en active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6608185B1 (en) | Substances KF-1040T4A,KF-1040T4B, KF-1040T5A, and KF-1040T5B, and process for producing same | |
| JP4359349B2 (en) | Production method of vanillin | |
| LU85115A1 (en) | PROCESS FOR THE PREPARATION OF L-CARNITINE AND INTERMEDIATE CHEMICALS USED IN THIS PROCESS | |
| US4008125A (en) | New cyclopentene-diols and new acyl esters thereof and process for their preparation | |
| FR2483912A1 (en) | HYDROXYCARBOXYL DERIVATIVES OF THE ML-236B COMPOUND, PROCESS FOR PREPARING THEM AND THEIR THERAPEUTIC APPLICATION | |
| BE898396A (en) | Process for the preparation of L-carnitine and intermediates used therefor. | |
| CN1260344C (en) | Cultures | |
| CN1590555A (en) | Hydroxylation of compactin to pravastatin by micromonospora | |
| EP0808308B1 (en) | Method for separating carbinols | |
| KR100366258B1 (en) | Novel substances kf-1040 and process for producing the same | |
| US4710468A (en) | Process for preparing L-carnitine and chemical intermediates employed therein | |
| EP0599967B1 (en) | Arylalkanoic acid resolution | |
| US7294492B2 (en) | Process for the manufacture of spiroketals | |
| FR2558481A1 (en) | PROCESS FOR THE PREPARATION OF OPTICALLY ACTIVE 4-AMINO-3-HYDROXYBUTYRIC ACID | |
| FR2719308A1 (en) | Derivatives of purpurogalline and its process for obtaining | |
| US5118882A (en) | Streptenols from streptomycetes, and the preparation and use thereof | |
| JP2981250B2 (en) | Method for producing D-pantothenonitrile | |
| WO2003004666A2 (en) | Method for the enantioselective reduction of a prochiral aromatic ketone comprising at least one trifluoromethyl group on the aromatic cycle | |
| RUDROFF | P168 ENANTIODIVERGENT BAEYER-VILLIGER OXIDATION OF FUNCTIONALIZED PROCHIRAL CYCLOHEXANONE DERIVATIVES UTILIZING RECOMBINANT CELLS | |
| JPH11206395A (en) | New phthalaldehyde derivative, its production and use thereof | |
| JP2000139493A (en) | Production of optically active gamma-lactone | |
| FR2700537A1 (en) | Use of new 1-hydroxy-2-alkoxy carbonyl-tetralin derivs. |