LT4793B - Štamas candida lipolytica c. 6.1-5, oksiduojantis naftą ir jos produktus - Google Patents
Štamas candida lipolytica c. 6.1-5, oksiduojantis naftą ir jos produktus Download PDFInfo
- Publication number
- LT4793B LT4793B LT2000059A LT2000059A LT4793B LT 4793 B LT4793 B LT 4793B LT 2000059 A LT2000059 A LT 2000059A LT 2000059 A LT2000059 A LT 2000059A LT 4793 B LT4793 B LT 4793B
- Authority
- LT
- Lithuania
- Prior art keywords
- oil
- strain
- candida lipolytica
- products
- soil
- Prior art date
Links
Landscapes
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Soil Conditioners And Soil-Stabilizing Materials (AREA)
Description
Išradimas priklauso ekologijos ir mikrobiologijos sritims, būtent mikroorganizmų štamams, oksiduojantiems naftą ir jos produktus. Siūlomas štamas gali būti panaudotas grunto, vandens, užteršto nafta arba naftos produktais, biologiniam valymui.
Žinomas mielių Candida guillermondii ΒΚΠΜ Y- 241 štamas, aprašytas patento RU 2 007 372, C'02F 3/34, E02B 15/04, aprašyme (deponuotas Ι4ΜΠΜ BHHH Sintezbelok). Šis štamas naudojamas vandens ir grunto, užterštų nafta arba naftos produktais, valymui. Užterštą aplinką apdoroja mielių Candida guillermondii ΒΚΓΙ.Μ Y- 241 ląstelių suspensija mineralinių azoto ir fosforo trąšų terpėje.
Šio štamo trūkumas yra tas, kad jis yra nepakankamai efektyvus sunkių naftos frakcijų, pavyzdžiui, mazuto biovalymui.
Žinomas naftos produktais užteršto grunto ir vandens mikrobiologinio valymo būdas, aprašytas patento RU 2 014 286,C02F 3/34, E02B 15/04, aprašyme, kai naftos produktais užterštas vanduo arba gruntas apvalomi naftą oksiduojančių mikroorganizmų asociacija: Candida [ropicalis .V/ycoccocw.y arba Micococcus lactis + Micococcus lactis, arba Candida guillermondii + Acinetobacter oleovorum subsp. parafinium.
Minėtos mikroorganizmų kompozicijos trūkumas yra nepakankamas skirtingos sudėties naftos teršalų bei kitų angliavandenilių ardymas. Be to mikroorganizmų asociacija nėra stabili gamtinėje aplinkoje. Sunku parinkti kiekybinę mikroorganizmų asociacijos sudėtį, kuri leistų pilnai ir greitai suardyti teršalus.
Žinoma mikroorganizmų asociacija, pavadinta “Devouroil’’, aprašyta patento RU 2 023 686, C02F 3/34, E02B 15/04, aprašyme. Į šią asociaciją įeina Rhodococcus sp., Rhodococcus maris, Rhodococcus erythropolis, Pseudomonas stutzeri ir Candida sp.. Šis mikroorganizmų rinkinys skirtas vandens paviršiaus ir grunto, užteršto naftos produktais, išvalymui.
Šios mikroorganizmų asociacijos pagrindinis trūkumas tas, kad ji labiau tinka sūriam jūros vandeniui ar druskingam gruntui išvalyti. Be to ši asociacija aromatinius angliavandenilius ir naftenus oksiduoja silpnai.
Išradimo tikslas - išskirti naftą ir jos produktus oksiduojantį mielių štamą, kurį galima būtų panaudoti užteršto grunto ir vandens išvalymui suintensyvinti.
Siūlomas mielių Candida lipolytica C. 6.1-5 štamas buvo išskirtas iš Vilniaus miesto Naftos bazės teritorijos dirvožemio. Išskyrimo būdas apima dirvožemio vandeninės suspensijos paruošimą, paruoštos dirvožemio suspensijos užsėjimą ant agarizuotos sintetinės gliukozėsatnonio terpės tokios sudėties (g/1): gliukozė - 20; (NHjjiSOj - 5; KH2PO4 - 0.85; K.2HPO4 0.15: \lgSO4 - 0.5; NaCI - 0.1; CaCl· - 0.1; levomicetinas - 0.1; agaras - 20; vanduo - 1000 ml. Mielių kultūra buvo auginama 4 paras, termostate 26 ± 2°C temperatūroje. Mielių identifikacija atlikta remiantis morfologiniais, fiziologiniais ir biocheminiais požymiais, naudojant N. J. W. Kreger - van Rij (1984) klasifikacinę sistemą.
Štamas Candida lipolytica C. 6.1-5 deponuotas Botanikos instituto Biodestruktorių tyrimo laboratorijos mikroorganizmų kolekcijoje 1998 m. rugsėjo mėn. 6 d., kolekcinis numeris IBL: Y - 12.
Siūlomas mielių Candida lipolytica C. 6.1-5 štamas pasižymi žemiau išvardintomis savybėmis.
Morfologinės savybės. Po 3 parų kultivavimo skystoje salyklo ekstrakto terpėje, esant 25°C temperatūrai, ląstelės ovališkos arba ištemptos, (2-4.5) x (4-22) pm. Pumpuruoja siauru, kartais plačiu pagrindu. Skystoje terpėje formuoja plėvelę ir nuosėdas. Stebimas pseudomicelis arba tikras micelis.
Agarizuotoje salyklo terpėje po 1 mėnesio kultivavimo kultūra kreminės spalvos, drėgna, minkšta, švelniai raukšlėta arba klostėta. Mikroskopuojant stebimas pseudomicelis ir šakotas, septuotas tikras micelis. Kartais formuoja artrosporas. Blastosporos yra sujungtos į mažas grandinėles.
Fiziologinės savybės. Rūgimo proceso nevykdo. Kaip vienintelį anglies šaltinį gali asimiliuoti: gliukozę. L - sorbozę, etanolį, glicerolį, eritritolį, D - manitą, pieno, gintaro ir citrinos rūgštį, nheksadekaną. n- dekaną, naftaliną, naftą, mazutą. Neasimiliuoja: galaktozes, D - ribozės, L ramnozės, sacharozės, maltozės, celobiozės, tregahozės, laktozės, melibiozės, rafinozės, melecitozės, inulino. krakmolo, D - ksilozės, L ir D - arabinozės, adonitolio (ribitolio), salicilo, inozito. Arbutino hidrolize nepasižymi. Produkuoja rūgštis. Bevitamininėje terpėje (Vitamin free yeast base DIFCO”, JAV) auga. Augimą stimuliuoja tiaminas. Optimali augimo temperatūra 27°C. Maksimali augimo temperatūra 33-37°C. Optimalus pH 5,0 - 5.5.
Fermentinis aktyvumas. Kokybiniais atrankos metodais nustatyta, kad štamas pasižymi ureaziniu ir Iipaziniu fermentiniu aktyvumu.
Štamo laikymas. Štamas laikomas ant agarizuotos gliukozės-amonio terpės, mėgintuvėliuose. Reguliariai persėjamas. Į saugomo štamo mitybinę terpę įterpiami naftos angliavandeniliai. Štamai laikomi ±4°C temperatūroje.
Siūlomo štamo pirmine atranka buvo atlikta panaudojant kokybinius metodus. Atranka buvo atliekama ant agarizuotos mitybinės terpės tokios sudėties (g/1): mazutas - 10; (NFLhSCL - 5; KH2PO4 - 0.85; K2HPO4 - 0.15; MgSO4 - 0.5; NaCI - 0.1; CaCl2 - 0.1; agaras - 20; vanduo 1000 ml. Štamas augintas 5 paras termostate. 26 ± 2°C temperatūroje. Terpės pH 5. Naftą ir jos produktus oksiduojančio štamo aktyvumas buvo įvertintas pagal susidariusias skaidrias zonas aplink mikroorganizmą.
Terpes sudėties optimizavimo metodu, modifikuotoje Čapeko terpėje pagal absoliučiai sausos biomasės (ASB) kiekį buvo įvertinta įvairių fosforo šaltinių (kaulamilčių, superfosfato, Kemira Horti - 2 (NPK 6-i2-24)) įtaka naftos produktus oksiduojančių mielių Candida lipolytica C. 6.15 štamo augimui. Tyrimų duomenys pateikiami 1 lentelėje.
lentelė. Įvairių fosforo šaltinių įtaka Candida lipolytica C. 6.1-5 štamo augimui
| ; Fosforo šaltinio pavadinimas i į | Fosforo kiekis, g/1 | Absoliučiai sausos biomasės svoris, g/1 |
| Kontrolė (KH2PO4) | 0.23 | 8.2 ±0.1 |
| Kaulamilčiai | 0.115 | 11.1 =0.1 |
| 0.23 | 13.6 = 0.2 | |
| 0.345 | 12.4 = 0.1 | |
| Kemira Horti -2 | 0.115 | 6.2 = 0.1 |
| i (NPK 6-12-24) | 0.23 | 7.5 = 0.2 |
| 0.345 | 5.1 =0.1 | |
| Superfosfatas | 0.115 | 2.36 ± 0.04 |
| 0.23 | 2.90 ±0.03 | |
| 0.345 | 5.70 ±0.10 |
fš pateiktų duomenų matyti, kad įvairūs fosforo šaltiniai nevienodai veikia atrinkto štamo augimą. Nustatyta, kad didžiausias ASB kiekis buvo gautas kultivuojant atrinktą štamą su 4 LT 4793 B kaulamilčiais. Kultivuojant su superfosfatu ir Kemira Horti - 2 trąšomis ASB kiekis buvo mažesnis nei kontrolėje (1 lentelė).
Siūlomo mielių štamo gebėjimas ardyti naftą ir jos produktus bei kai kuriuos aromatinius angliavandenilius pateikiamas pavyzdžiuose.
pavyzdys
Siūlomas mielių Candida lipolytica C. 6.1-5 štamas kultivuojamas modifikuotoje Čapeko terpėje giluminiu būdu, kratyklėse.Terpės vieninteliu anglies šaltiniu buvo nafta. Terpės sudėtis (g/1): kaulamilčiai - 1.75; Mg SO4 - 0.5; Fe SO4 - 0.001; NH4NO3 - 1.5; KC1 - 0.5; vanduo - 1000 ml. Terpės pH 5.0 - 5.5. Kultivavimo temperatūra 26±2° C. Kiekybinė naftos analizė po 7 ir-20 parų mielių kultivavimo buvo atlikta spektrometrijos metodu panaudojant naftos analizatorių ANVP -79.
Nustatyta, kad po 7 parų kultivavimo naftos kiekis sumažėjo 82.18%, o po 20 parų - 90.67 %.
pavyzdys
Atrinktas mielių štamas buvo kultivuojamas terpėje, kurioje vieninteliu anglies šaltiniu buvo mazutas. Terpės sudėtis (g/1): mazutas - 10; (NH4)2SO4 - 5; KH2PO4 - 0.85; K2HPO4 - 0.15; MgSO4 - 0.5; NaCI - 0.1; CaCl2 - 0.1; vanduo - 1000 ml. Terpės pH 5.0-6.5. Štamas kultivuotas giluminiu būdu, kratyklėse. Auginimo temperatūra 26 ± 2° C. Mazuto kiekybinis įvertinimas atliktas po 7 ir 20 parų Candida lipolytica C. 6.1-5 štamo kultivavimo. Nustatyta, kad po 7 parų kultivavimo mazuto kiekis sumažėjo 51.89 %, o po 20 parų - 81.68 %.
lp.ayy.zdys
Atliktas bandymas, kuris savo parametrais atitinka 1 pavyzdyje aprašytą bandymą. Atrinktas štamas buvo kultivuojamas tos pačios sudėties terpėje, kaip ir 1 pavyzdyje. Skirtumas tas, kad vieninteliu anglies šaltiniu buvo pasirinktas aromatinis angliavandenilis - naftalinas 10 g/1. Kiekybinė naftalino analizė, po Candida lipolytica C. 6.1-5 štamo kultivavimo, atlikta dujų chromatografijos masspektrometrijos metodu panaudojant dujų chromatografą masspektrometrą“Satum 3”.
Nustatyta, kad po 7 parų kultivavimo naftalino kiekis sumažėjo 64.91 %, o po 20 parų net 85.01%.
pavyzdys
Naftos produktais užteršto grunto valymas. Valymo aikštelėje yra 100 tonų užteršto grunto, kurio pH 5.0 - 5.5. Naftos produktų 35 g/kg.Gruntas paskleidžiamas 0.5 m storio sluoksniu. Paruošiama Candida lipolytica C. 6.1-5 štamo suspensija ir sumaišoma su vandeniniu druskų tirpalu, į kurio sudėtį įeina 30 mg/I azoto (naudojamas amonio sulfatas) ir 25 mg/1 fosforo (kaulamilčiai). Ląstelių titras tirpale apie 3 x 10' ląstelių/ml. Paruoštas tirpalas įterpiamas į valomą gruntą jį išpurškiant 3 1/m2 kiekiu. Valomas ir tręšiamas NPK mineralinėmis trąšomis gruntas perkasamas, o vėliau kultivuojamas kas savaitę. Natūraliomis sąlygomis, esant oro temperatūrai ne žemesnei kaip 14 °C, dirvožemio išvalymo procesas trunka 1.5-2.5 mėnesio. Teršalų kiekis sumažėja 91.02 %.
Claims (3)
1. Štamas Candida lipolytica C. 6.1-5 (deponuotas Botanikos instituto Biodestruktorių tyrimo laboratorijoje (LT), kolekcinis numeris IBL:Y - 12), oksiduojantis naftą ir jos produktus, pasižymintis stipriai išreikštu angliavandenilių destrukciniu aktyvumu.
2. Štamas Candida lipolytica C. 6.1-5, skirtas naftos produktais užteršto vandens ir grunto valymui.
3. Štamo Candida lipolytica C. 6.1-5 pagal 1 punktą gavimo būdas, beskiriantis tuo, kad štamo biomasę augina laboratorinėmis sąlygomis, naudojant skirtingas mitybines terpes, jos augimui palaiko temperatūrą ribose 14 - 29 °C ir pH ribose 5.0 - 6.5, po to ruošia suspensiją kurią sumaišo su vandeniniu druskų tirpalu, į kurio sudėtį įeina 30 mg/l azoto ir 25 mg/l fosforo, ląstelių titras tirpale 3 χ 107 ląstelių/ml natūraliomis sąlygomis, tinkamomis mieliagrybiui daugintis.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LT2000059A LT4793B (lt) | 2000-07-04 | 2000-07-04 | Štamas candida lipolytica c. 6.1-5, oksiduojantis naftą ir jos produktus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LT2000059A LT4793B (lt) | 2000-07-04 | 2000-07-04 | Štamas candida lipolytica c. 6.1-5, oksiduojantis naftą ir jos produktus |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| LT2000059A LT2000059A (lt) | 2001-01-25 |
| LT4793B true LT4793B (lt) | 2001-05-25 |
Family
ID=19721477
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| LT2000059A LT4793B (lt) | 2000-07-04 | 2000-07-04 | Štamas candida lipolytica c. 6.1-5, oksiduojantis naftą ir jos produktus |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| LT (1) | LT4793B (lt) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015056110A1 (en) | 2013-10-14 | 2015-04-23 | Uab "Biocentras" | Complex method for cleaning environment from oil pollutants |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112663562B (zh) * | 2020-11-19 | 2022-02-18 | 见嘉环境科技（苏州）有限公司 | 一种河道生态修复用人工河床 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2007372C1 (ru) | 1992-04-15 | 1994-02-15 | Марьям Бекжановна Биттеева | Способ очистки воды и почвы от загрязнений нефтью и нефтепродуктами |
| RU2014286C1 (ru) | 1990-05-24 | 1994-06-15 | Государственный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ | Способ очистки воды и почвы от нефтепродуктов |
| RU2023686C1 (ru) | 1992-04-13 | 1994-11-30 | Научно-производственное объединение "Биотехинвест" | Консорциум микроорганизмов rhodococcus sp., rhodococcus maris, rhodococcus erythropolis, pseudomonas stutzeri, candida sp., используемый для очистки почвенных и солоноватоводных экосистем от загрязнения нефтепродуктами |
-
2000
- 2000-07-04 LT LT2000059A patent/LT4793B/lt not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2014286C1 (ru) | 1990-05-24 | 1994-06-15 | Государственный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ | Способ очистки воды и почвы от нефтепродуктов |
| RU2023686C1 (ru) | 1992-04-13 | 1994-11-30 | Научно-производственное объединение "Биотехинвест" | Консорциум микроорганизмов rhodococcus sp., rhodococcus maris, rhodococcus erythropolis, pseudomonas stutzeri, candida sp., используемый для очистки почвенных и солоноватоводных экосистем от загрязнения нефтепродуктами |
| RU2007372C1 (ru) | 1992-04-15 | 1994-02-15 | Марьям Бекжановна Биттеева | Способ очистки воды и почвы от загрязнений нефтью и нефтепродуктами |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015056110A1 (en) | 2013-10-14 | 2015-04-23 | Uab "Biocentras" | Complex method for cleaning environment from oil pollutants |
| LT6162B (lt) | 2013-10-14 | 2015-06-25 | Uab "Biocentras" | Kompleksinis aplinkos valymo nuo naftos teršalų būdas |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| LT2000059A (lt) | 2001-01-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109207413B (zh) | 一种高效石油降解复合菌剂及其制备方法与应用 | |
| Delille et al. | Effects of temperature warming during a bioremediation study of natural and nutrient-amended hydrocarbon-contaminated sub-Antarctic soils | |
| Burghal et al. | Mycodegradation of crude oil by fungal species isolated from petroleum contaminated soil | |
| Kobayashi et al. | Contribution to nitrogen fixation and soil fertility by photosynthetic bacteria | |
| Sawhney et al. | Congo Red (Azo dye) decolourization by local isolate VT-II inhabiting dye_effluent exposed soil | |
| Susilowati et al. | Characterization of phosphate solubilizing bacteria isolated from Pb contaminated soils and their potential for dissolving tricalcium phosphate | |
| JPWO2020009097A1 (ja) | 石油関連物質により汚染された環境の除染方法および使用する資材 | |
| CN108102979A (zh) | 一种含油污泥中石油烃类的降解菌株jn5及其应用 | |
| Ugochukwu et al. | Lipase activities of microbial isolates from soil contaminated with crude oil after bioremediation | |
| CN108048374A (zh) | 一种含油污泥中石油烃类的降解菌株jn4及其应用 | |
| Kannaiyan et al. | Immobilization of Anabaena azollae from Azolla filiculoides in polyvinyl foam for ammonia production in a photobioreactor system | |
| Luo et al. | Bioremediation of oily seawater by Bacteria immobilization on a novel carrier material containing nutrients | |
| Janzen et al. | Compost extract added to microcosms may simulate community-level controls on soil microorganisms involved in element cycling | |
| LT4793B (lt) | Štamas candida lipolytica c. 6.1-5, oksiduojantis naftą ir jos produktus | |
| JP3728721B2 (ja) | 新規微生物及び排水の処理方法 | |
| CN108034625A (zh) | 一种含油污泥中石油烃类的降解菌株jn7及其应用 | |
| CA3228616A1 (en) | Microorganisms for treatment of hydrocarbons or oil | |
| RU2142997C1 (ru) | Штамм arthrobacter sp. для разложения сырой нефти и нефтепродуктов | |
| RU2142996C1 (ru) | Штамм arthrobacter sp. для разложения сырой нефти и нефтепродуктов | |
| Rana et al. | Utilization of microalgae for agricultural runoff remediation and sustainable biofuel production through an integrated biorefinery approach | |
| Satoh et al. | Two kinds of ammonia-oxidizing bacteria isolated from biologically deodorizing plants in cold district | |
| RU2816706C1 (ru) | Нефтебиосорбент для очистки и восстановления нефтезагрязненных земель | |
| KR100301525B1 (ko) | 등유분해용 복합균주 ｈｐｌｋ(기탁번호 : ｋｃｔｃ ０６２６ｂｐ) 및 그 제조방법 | |
| RU2039714C1 (ru) | Способ очистки воды и почвы от нефтяных загрязнений | |
| Kudinova et al. | Diversity and viability of prokaryotes in primitive soils of the Larsemann oasis (East Antarctica) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM9A | Lapsed patents |
Effective date: 20020704 |