KR970703163A - 모락셀라 카타랄리스에 대한 백신(Vaccine for Moraxella catarrhalis) - Google Patents
모락셀라 카타랄리스에 대한 백신(Vaccine for Moraxella catarrhalis) Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 모락셀라 카타랄리스의 외막 단백질 "E", 및 이의 펩타이드 및 올리고펩타이드를 포함하는 조성물에 관한 것이다. 또한 단백질, 펩타이드 또는 올리고펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열, 및 이들 서열을 포함하는 재조합 벡터에 관한 것이다. 단백질, 펩타이드 또는 올리고펩타이드는 이러한 재조합 벡터를 포함하는 숙주 세포 시스템으로부터 생산할 수 있다. 펩타이드 및 올리고펩타이드는 또한 화학적으로 합성할 수 있다. 븐 발명은 백신 제제용 항원으로서, 및 진단 면역검정시 항원으로서 단백질, 펩타이드 및 올리고펩타이드의 용도에 관한 것이다. 뉴클레오타이드 서열은 백신으로 사용하기 위한 벡터의 작제시, 재조합 세균 백신을 제조하는데 있어 약독화된 세균내로 삽입시 및 재조합 바이러스 백신을 제조하는데 있어 바이러스 벡터내로 삽입시에 유용하다. 또한, 본 발명은 엠. 카타랄리스를 검출하기 위한 분자 진단 검정시 프라이머 및/또는 프로브로서 E를 암호화하는 유전자와 관련된 뉴클레오타이드 서열의 용도에 관한 것이다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 E를 암호화하는 유전자의 뉴클레오타이드 서열로부터 유추된 아미노산 서열을 사용하여 측정된 것으로서 엠. 카타랄리스의 외막 단백질 E의 카이-돌리틀(Kay-Doolittle) 소수성 프로파일을 도시한 것이다. 양성치는 소수성 영역을 나타내며 음성치는 친수성 영역을 나타낸다,
제2도는 각종 제한 효소로 분해한 후 엠. 카타랄리스의 상이한 균주의 게놈으로부터의 증폭 산물을 포함하는, 에티디움 브로마이드로 염색한 폴리아크틸아미드 겔을 나타낸다. 레인 1은 DNA 크기 표준물을 나타내고, 레인 2 내지 20은 각각 표1에 나열한 균주로부터의 증폭 산물을 나타낸다,
제2a도는 Sau96 Ⅰ로 제한 분해한 증폭 산물을 나타내는 겔이고,
제2b도는 Bs1 Ⅰ로 제한 분해한 증폭 산물을 나타내는 겔이다.
Claims (34)
- SDS-PAGE에 의한 겉보기 분자량이 약 35,000 내지 약 50,000달톤이고 실질적으로 서열 11에 도시된 아미노산 잔기 26번 내지 460번의 아미노산 서열을 갖는 모락셀라 카타랄리스(Moraxella catarrhalis)의 외막 단백질 E의 하나 이상의 에피토프를 갖는, 실질적으로 순수한 펩타이드, 또는 올리고펩타이드 또는 단백질을 면역학적 유효량으로 포함하는 백신 제제.
- 제1항에 있어서, 펩타이드. 올리고펩타이드 또는 단액질이. E 에피트프를 암호화하는 DNA 서열의 발현을 조절하는 뉴클레오타이드 서열을 함유하는 벡터를 포함하도록 유전적으로 조작된, 세균, 효모, 섬유상 진균, 곤충 세포주 및 포유동물 세포주로 이루어진 그룹으로부터 선택된 숙주 세포계로부터 배양된 세포로부터 재조합적으로 생산되는 백신 제제.
- 제1항에 있어서, 펩타이드 또는 올리고펩타이드가 E 단백질의 화학적 분해 또는 효소적 분해에 의해 생산되는 백신 제제.
- 제1항에 있어서, 펩타이드 또는 올리고펩타이드가 화학적 합성에 의해 생산되는 백신 제제.
- 제1항에 있어서, 약재학적 담체를 추가로 포함하는 백신 제제.
- 제2항에 있어서, 배양된 세포가 세균인 백신 제제.
- 제2항에 있어서, 배양된 세포가 효모인 백신 제제.
- 제2항에 있어서, 배양된 세포가 섬유산 진균인 백신 제제.
- 제2항에 있어서, 배양된 세포가 곤충 세포주인 백신 제제.
- 제2항에 있어서, 배양된 세포가 포유동물 세포주인 백신 제제.
- SDS-PAGE에 의한 겉보기 분자량이 약 35,000 내지 약 50,000달톤이고 실질적으로 서열 11에 도시된 아미노산 잔기 26번 내지 460번의 아미노산 서열을 갖는 모락셀라 카타랄리스의 외막 단백질 E의 하나 이상의 에피토프를 갖는, 실질적으로 순수한 항원성 펩타이드, 올리고펩타이드 또는 단백질.
- 제11항에 있어서, E 에피토프를 암호화하는 DNA 서열의 발현을 조절하는 뉴클레오타이드 서열을 함유하는 벡터를 포함하도록 유전적으로 조작된, 세균, 효모, 섬유상 진균, 곤충 세포주 및 포유동물 세포주로 이루어진 그룹으로부터 선택된 숙주 세포계로의 배양된 세포로부터 재조합적으로 생산되는, 펩타이드, 올리고펩타이드 또는 단백질.
- 제12항에 있어서, 배양된 세포가 세균인 펩타이드, 올리고펩타이드 또는 단백질.
- 제12항에 있어서, 배양된 세포가 효모인 펩타이드, 올리고펩타이드 또는 단백질.
- 제12항에 있어서, 배양된 세포가 섬유상 진균인 펩타이드, 올리고펩타이드 또는 단백질.
- 제12항에 있어서, 배양된 세포가 곤충 세포주인 펩타이드, 올리고펩타이드 또는 단백질.
- 제12항에 있어서, 배양된 세포가 포유동물 세포주인 펩타이드, 올리고펩타이드 또는 단백질.
- SDS-PAGE에 의한 겉보기 분자량이 약 35,000 내지 약 50,000달톤이고 실질적으로 서열 11에 도시된 아미노산 잔기 26번 내지 460번의 아미노산 서열을 갖는 모락셀라 카타랄리스의 외막 단백질 E의 하나 이상의 에피토프 또는 결정인자를 암호화하는 DNA 서열을 포함하는 재조합 벡터.
- 제18항에 있어서, 플라스미드 벡터, 파아지미드 벡터, 코스미드 벡터 및 바이러스 벡터로 이루어진 그룹으로부터 선택된 재조합 벡터.
- SDS-PAGE에 의한 겉보기 분자량이 약 35,000 내지 약 50,000달톤이고 실질적으로 서열 11에 도시된 아미노산 잔기 26번 내지 460번의 아미노산 서열을 갖는 엠. 카타랄리스의 외막 단백질 E의 하나 이상의 에피토프를 인지하는 정제된 항혈청을 포함하는, 엠. 카타랄리스에 의해 유발된 감염을 앓는 개체를 수동면역화시키는데 유용한 조성물.
- 서열 11의 1377개 염기쌍의 개방 판독 프레임을 포함하는 유전자 또는 이의 상응하는 상보성 쇄의 보존된 영역에 대해 상보성이며 이와 특이적으로 하이브리드화하는 핵산 서열로 필수적으로 이루어진, 엠. 카타랄리스의 검출에 유용한 정제된 올리고뉴클레오타이드.
- 제21항에 있어서, 서열1, 서열2, 서열3, 서열4, 서열5, 서열6, 서열7, 서열8, 서열9, 서열10, 서열12, 서열13, 서열14, 서열15, 서열16, 서열17 및 서열18로 이루어진 군으로부터 선택된 핵산 서열로 필수적으로 이루어진 올리고뉴클레오타이드.
- (a) 시료중에 모락셀라 카타랄리스 세포를 분해하여 세균 유전 물질을 방출시키는 단계; (b) 올리고뉴클레오타이드가 유전 물질에 하이브리드화하기에 적합한 조건하에서 유전 물질을 2개의 올리고뉴클레오타이드와 접촉시킴으로서, 제1올리고뉴클레오타이드는 서열 11의 1377개 염기쌍 개방 판독 프레임을 포함하는 유전자내 영역과 하이브리드화되고, 제2올리고뉴클레오타이드는 상응하는 상보적인 쇄내 영역과 하이브리드화되는 단계; (c) 프라이머로서 단계(b)의 올리고뉴클레오타이드를 사용하여 유전자와 이의 상응하는 쇄를 포함하는 유전 물질의 서열중 특정 영역을 효소적으로 증폭시키는 단계; 및 (d) 시료중에 엠. 카타랄리스의 존재와 연관되는, 유전자 및 이의 상응하는 쇄의 증폭된 서열의 존재를 검출하는 단계들을 포함하여, 임상 시료중에서 모락셀라 카타랄리스의 존재 또는 부재를 검출하는 방법.
- 제23항에 있어서, 특히32P와 같은 방사활성 표지 및 바이오틴과 같은 효소 표지중에서 선택된 올리고뉴클레오타이드중에 혼입되는 것으로 공지된 표지물로 표지될 수도 있는, 증폭된 서열중의 영역에 상응하는 뉴클레오타이드 서열로 이루어진 표지된 올리고뉴클레오타이드 프로브를 사용하여 증폭된 서열을 하이브리드화시킴에 의해 검출이 더욱 용이해지는 방법.
- 제23항에 있어서, 시료가 중이염 유액; 객담; 혈액 및 비인강, 안구 또는 아데노이드로부터의 유액으로 이루어진 그룹으로부더 선택된 체액인 방법.
- (a) 체액의 시료를 수득하는 단계; (b) 시료중의 모락셀라 카타랄리스 세포를 분해하여 세균 유전 물질을 방출시키는 단계; (c) 유전 물질과 서열 11의 1377개 염기쌍 개방 판독 프레임을 포함하는 유전자 또는 이의 상응하는 상보적 쇄의 영역에 상응하도록 합성된 올리고뉴클레오타이드 프로브를, 올리고뉴클레오타이드가 유전 물질에 하이브리드화되도록 하는데 적합한 조건하에서 접촉시키는 단계; 및 (d) 엠. 카타랄리스의 유전 물질과 프로브간의 상호작용인 시료와 프로브 사이의 상호작용을 검출하는 단계들을 포함하는, 임상 시료중에서 모락셀라 카타랄리스를 검출하는 방법.
- 제26항에 있어서, 시료가 중이염 유액; 객담; 혈액 및 비인강, 안구 또는 아데노이드부로부터이 유액으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 체액인 방법.
- 체액중에서 엠. 카타랄리스-특이적인 항혈청과 상호작용하여 이를 검출하는 면역검정에 있어서, SDS-PAGE에 의한 겉보기 분자량이 약 35,000 내지 약 50,000달톤이고 실질적으로 서열11에 도시된 아미노산 잔기 26번 내지 460번의 아미노산 서열을 갖는 모락셀라 카타랄리스의 외막 단백질인 E의 하나이상의 에피토프를 갖는 펩타이드 또는 단백질을 항원으로서 사용함을 특징으로 하는, 개체의 체액중에서 엠. 카타랄리스-특이적인 항혈청을 검출하는 방법.
- 제28항에 있어서, 면역검정이 방사선면역검정, 효소-결합된 면역흡착 검정, "샌드위치" 검정, 침전 반응, 응집 검정, 형광성-기본 면역검정 및 화학발광체-기본 면역검정으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 검정인 방법.
- SDS-PAGE에 의한 겉보기 분자량이 약 35,000 내지 약 50,000달톤인 모락셀라 카타랄리스의 외막 단백질 E의 에피토프를 암호화하는, 서열 11의 1377개 염기쌍의 개방 판독 프레임을 포함하는, 분리된 유전자 또는 이의 단편.
- E 단백질을 암호화하고, 조절 서열과 작동적으로 연결된 핵산 분자, 또는 하나 이상의 E펩타이드 또는 E올리고펩타이드를 암호화하는 하나 이상의 유전자 단편; 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 백신 제제.
- 엠. 카타랄리스의 E 단백질, E 펩타이드 또는 E 올리고펩타이드를 발현할 수 있는, 감염성의 재조합 미생물.
- 제32항에 있어서, 박시니아 바이러스, 아데노바이러스 또는 사이토메갈로바이러스인 미생물.
- 제32항에 있어서, 살모넬라 속의 세균인 미생물.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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