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Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms
(AREA)
Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof
(AREA)
Abstract
본 발명은 B형 간염 바이러스의 복제를 억제하는 화합물의 역가를 측정하는 방법에 관한 것으로, B형 간염 바이러스를 생성하는 세포주에 역자를 분석하고자 하는 화합물을 처리하여 배양하고, 상기 세포 배양액을 수산 화나트륨 및 β-머캅토에탄올로 처리한 후 중화 및 가열처리하고, b형 간염 바이러스에 특이적인 프라이머를 사용하여 중합효소 연쇄 반응 (PCR)을 시행하는 방법은, HBV 복제를 억제하는 화합물에 의한 HBV 게놈 DNA의 감소를 PCR에 의해 정량적으로 나타낼 수 있으므로, B형 간염 치료제의 선별을 위한 역가 측정 방법으로 사용할 수 있다.
Description
B형 간염 바이러스 복제를 억제하는 화합물의 역가 측정 방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 B형 간염 바이러스를 생성하는 숙주 세포인 2.2.15 세포의 배양액을 1/2씩 6회 연수 희석하여 PCR한 것을 전기영동한 결과(A) 및 이를 수치화하여 나타낸 그래프 (B)이다.
제2도는 B간염 바이러스 복제를 억제하는 화합물인 D4T를 100㎛로부터 1/10씩 4회 연속 회석하여 2.2.15 세포 배양액에 처러한 후 PCR한 것을 전기영동한 결과(A) 및 이를 수치화하여 나타낸 그래프 (B)이다.
Claims (4)
B형 간염 바이러스를 생성하는 세포주에 역가를 분석하고자 하는 화합물을 처리하여 배양하고, 상기 세포 배양액을 수산화나트륨 및 β-머캅토에탄을 처리한 후 중화 및 가열처리하고, B형 간염 바이러스에 특이적인 프라이머를 사용하여 중합효소 연쇄 반응 (PCR)을 시행하는 것을 특징으로 하는 B형 간염 바이러스 복제를 억제하는 화합물의 역가 측정방법.
제1항에 있어서, 상기 B형 간염 바이러스를 생성하는 세포주에 역가를 측정하고자 하는 화합물을 처리하여 2% FBS를 함유한 RPMI1640 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 세포 배양액을 0.05N 수산화나트륨 및 0.5mM β-머캅토에탄올 처리한 후 0.05N 염산으로 중화시키고, 100℃에서 10분 동안 가열처리하는 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 프라이머가 다음 염기서열을 갖는 것임을 특징으로 하는 방법.
HBV2001 :
5′-CGC CTC AGC TCT GTA TCG-3′ 18량체
HBV2319 :
5′GAT AGG GGC ATT TGG TGG TC-3′ 20량체
※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019960005075A1996-02-281996-02-28B형 간염 바이러스 복제를 억제하는 화합물의 역가 측정 방법
KR100194003B1
(ko)
Herpes simplex virus processivity factor UL42 imparts increased DNA-binding specificity to the viral DNA polymerase and decreased dissociation from primer-template without reducing the elongation rate
Fragmento de dna;polipeptideo;vacina;vetor de expressao;microorganismo;celula de inseto,reagente para detectar a presenca de antigenos;processo de tratamento ou prevencao de uma infeccao de hiv,de reacao alergica e de infeccao ou condicao patologica em um mamifero e processo para deteccao de antigenos
An in vitro activity assay using the 5' oligonucleotide of human HBV DNA polymerase which has been incorporated into the SP6 viral polymerase promoter