KR970009077B1 - 디하이드로피리딘 화합물을 함유하는 뇌 뉴우론 보호제 - Google Patents

디하이드로피리딘 화합물을 함유하는 뇌 뉴우론 보호제 Download PDF

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Abstract

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Description

디하이드로피리딘 화합물을 함유하는 뇌 뉴우론 보호제
본 발명은 Ca2+길항 활성을 기본으로 하는 뇌 뉴우론 보호제에 관한 것이다.
본 발명에서 사용하는 하기 화학식(1)의 디하이드로피리딘 화합물 또는 약제학적으로 허용가능한 이의 염은 영국 특허 제2,036,722호에 기술되어 있는 바와 같이 공지된 화합물이다.
Figure kpo00001
상기식에서, R1은 니트로페닐 그룹이고, R2, R3및 R4는 각각 동일하거나 상이한 저급 알킬 그룹이다.
상기의 화합물은 약리학적 작용면에 있어서, 이들의 Ca2+길항 활성으로 인하여 협심증 치료제 또는 혈압 강하제로서 또는 뇌 순환 개선제 또는 동맥경화증 치료제로서 유용한 것으로 밝혀졌으며, 이와 관련된 특허가 본 출원인의 명의로 계류중에 있다[참조 : 일본국 특허원 제161648/1987호 및 일본국 공개특허공보 제155327/1986호].
본 발명의 목적은 Ca2+길항 활성에 의해, 두개내(intracranial) 허혈성 기능장애에 기인하는 뇌 신경세포 골격성 단백질의 분해를 억제하는 제제에 관한 것이며, 보다 상세하게는, 위에서 언급한 억제 활성을 나타내는 뇌 뉴우론 보호제를 제공하는 것이다.
본 발명에 따른 뇌 뉴우론 보호제는 활성 성분으로서 화학식(1)의 디하이드로피리딘 화합물 또는 약제학적으로 허용가능한 이의 염을 함유한다.
화학식(1)에서, R1의 니트로페닐 그룹에는 2-니트로페닐, 3-니트로페닐 및 4-니트로페닐이 포함되며, 바람직하게는 3-니트로페닐이다. R2, R3또는 R4의 저급 알킬 그룹은 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 2급-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, 1-메틸부틸, 2-메틸부틸 및 헥실과 같은 탄소수 1 내지 6의 알킬 그룹이며, 바람직하게는 탄소수 1 내지 4의 알킬 그룹이다. R2의 가장 바람직한 예는 이소프로필이고, R3및 R4의 가장 바람직한 예는 메틸이다.
화학식(1)의 디하이드로피리딘 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 알칼리 금속(예 : 나트륨, 칼륨 등), 알칼리 토금속(예 : 칼슘, 마그네슘 등), 암모늄 등과 같은 일반적인 무기 염기와의 염 및 유기 아민(예 : 트리에틸아민, 피리딘, 피콜린, 에탄올아민, 트리에탄올아민, 디클로로헥실아민, N,N'-디벤질에틸렌디아민 등)과 같은 일반적인 유기 염기와의 염과 같은 무독성 염일 수 있다.
전술한 디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ) 또는 약제학적으로 허용가능한 염은 협심증 치료제, 혈압 강하제, 뇌 순환 개선제 또는 동맥경화증 치료제로서 유용한 것으로 밝혀졌으며, 추가로 연구한 결과, 당해 화합물 또는 염은 본 발명 이전까지는 알려지지 않았던 약리학적 작용으로서, 뇌 뉴우론 보호작용을 지닌 것으로 밝혀졌다.
디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ)은 뇌혈관 확장 활성, 뇌 혈류 증가 활성 및 에너지 대사 촉진 활성을 지니는 것으로 확인되었으며, 뇌 혈관 질환으로 인한 뇌 허혈증에 대하여 임상적인 효능이 있을 것으로 기대된다. 그러나, 궁극적으로 뇌 허혈성 기능 장애에서 발생하는 문제는 뇌 신경세포의 손상이므로, 이러한 관점에서의 연구가 필요할 것이다. 야마시타 등[참조 : Yamashita et al. Neurochemistry
Figure kpo00002
31-33(1985)]에 따르면, 거빌(gerbil)의 뇌에 일시적인 허혈성 장애를 유발시키고 회복시킨 후, 두개내 단백질을 분획화하고 정량한 결과, Ca2+과 결합된 특정 단백질(이하에서 기술됨)만이 감소되며, 이러한 변화는 허혈증 발병의 극히 초기 단계에서 관찰되어 뇌 에너지 대사의 초기 증대와는 달리 장기간 지속되므로 조직병리학적 연구결과와 일치하는 것으로 밝혀졌다. 즉, 허혈성 기능장애와 관련되어 특정 단백질의 변화만이 시간과 밀접하게 관계되어 발견됨이 이미 명백해졌다. 한편, 디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ)의 약리학적 작용에 대하여 본 발명가들이 연구한 결과, 당해 디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ)은 허혈증의 발병시 세포의 Ca2+이 뇌 신경 세포내로 유입되는 것을 특이적으로 억제함으로써 뇌 신경 세포 골격 단백질이 분해되는 것을 억제하여 신경세포를 보호한다는 사실이 밝혀졌다. 즉, 뇌에서 허혈성 기능장애가 진행됨으로써 뇌 신경세포내 Ca2+농도가 증가하여 캘패인(calpain)(또는 CANP : 칼슘 활성화된 중성 프로테아제)의 활성을 증가시킴으로써 MAP-2(마이크로튜브 결합된 단백질-2) 및 캘스펙틴(calspectin)과 같은 신경 세포 골격 단백질의 분해를 유발한다. 상기에서 Ca2+농도의 증가는 세포의 환경으로부터 Ca2+가 유입됨에 기인하지만, 디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ)은 세포의 Ca2+이 유입되는 것을 차단함으로써 상기의 단백질이 분해되는 것을 억제하는 것으로 밝혀졌다.
디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ)의 작용원리는, 당해 화합물이 위에서 언급한 바와 같이 Ca2+길항제로서 작용하여 세포외 Ca2+이 뇌 신경세포내로 유입되는 것을 억제하는 것이지만, 본 발명가들에 의한 추가의 연구 결과, Ca2+길항제로서 알려져 있는 니칼디핀 및 니모디핀의 농도가 이러한 약리학적 작용에 있어서 과도하게 낮은 것으로 밝혀졌다. 따라서, 본 발명에 이르러 Ca2+길항제로서 통칭되던 물질은 화학구조가 다양하며 공통점이 없고 심지어 이들이 Ca2+길항제로서 분류될 수 있는 경우에도, 이들 물질은 이들의 특징적 화학 구조에 따라 각각의 약리학적 작용을 나타낸다.
디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ)의 위에서 언급한 특정 Ca2+길항작용은 주로 실험적인 허혈성 기능장애에 대한 예방효과로서 확인된다. 즉, 이하에서 기술된 약리학적 시험에서 알 수 있는 바와 같이, 화합물(Ⅰ)의 예방효과는 두개의 상이한 실험군을 이용하여 수행하였다 :
(A) 화합물을 허혈성 처리 1시간 전에 투여하고
(B) 화합물은 허혈성 처리 1시간 전 뿐만 아니라, 허혈성 처리후 4일간 연속하여 1일 1회 투여한다. 이들 실험결과에 근거하여, 추가의 시험을 하기 실험군에서 수행하였다.
(C) 화합물을 허혈성 처리전에는 투여하지 않고 허혈성 처리후 처음으로 투여한다. 그 결과, 위에서 언급한 특이적 Ca2+길항작용은 제3실험군(C)에서도 나타나는 것으로 밝혀졌다. 전술한 두개의 실험군(A) 및 (B)는 주로 예방효능을 입증하도록 고안되었고, 제3실험군(C)은 허혈성 기능장애(예 : 뇌졸증)의 발병후 예후개선에 대한 효능을 나타내고자 고안되었으며, 상기 3가지 실험 결과 디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ)은 허혈성 기능장애의 예방 및 치료 모두에 유용한 것으로 밝혀졌다.
본 발명에 따른 뇌 뉴우론 보호제는 경구 또는 기타 방법으로 사람을 포함한 포유동물에 캅셀, 마이크로 캅셀, 정제, 입제, 산제, 트로키제, 환제, 연고, 좌제, 주사제, 시럽 등과 같은 통상적인 형태로 투여될 수 있다.
본 발명의 뇌 뉴우론 보호제는 본 분야에 통상적으로 사용되는 유기 및/또는 무기 담체 또는 비히클, 예를 들어 부형제(예 : 자당, 전분, 만니트, 솔비트, 유당, 글루코스, 셀룰로스, 활석, 인산칼슘, 탄산칼슘 등), 결합제(예 : 셀룰로스, 메틸셀룰로스, 하이드록시메틸 셀룰로스, 폴리프로필피롤리돈, 젤라틴, 아라비아고무, 폴리에틸렌글리콜, 자당, 전분 등), 붕해제(예 : 전분, 카복시메틸셀룰로스, 하이드록시프로필-전분, 탄산 수소나트륨, 인산칼슘, 시트르산 칼슘 등), 활탁제(예 : 마그네슘 스테아레이트, 에어로졸, 활석, 나트륨 라우릴 설페이트 등), 교정제(예 : 시트르산, 메탄올, 글리신, 오렌지 분말 등), 보존제(예 : 나트륨 벤조에이트, 아황산나트륨, 메틸파라벤, 프로필파라벤 등), 안정화제(예 : 시트르산, 나트륨 시트레이트, 아세트산 등), 현탁제(예 : 메틸셀룰소스, 폴리비닐피롤리돈, 알루미늄 스테아레이트 등), 분산제(예 : 하이드록시프로필메틸 셀룰로스 등), 희석제(예 : 물등), 연고 기제(예 : 카카오 버터, 백색 페트로라툼, 폴리에틸렌 글리콜 등) 등을 사용하여 확립된 약제학적 공정을 통하여 제조될 수 있다.
디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ)의 용량은 환자의 체중 및/또는 연령, 질환의 중증도 및/또는 다른 다양한 요인(예 : 투여방법)에 따라 좌우된다. 그러나, 경구 투여시 1일에 통상적으로 0.1 내지 1000mg이고, 바람직하게는 0.5 내지 200mg이다. 체중 1kg당 유효 용량은 0.001 내지 20mg, 바람직하게는 0.01 내지 2mg이다.
본 발명의 뇌 뉴우론 보호제에 함유된 디하이드로피리딘 화합물(Ⅰ) 또는 약제학적으로 허용가능한 염의 유용성을 입증하기 위하여, 당해 화합물에 대한 약리학적 데이타를 하기에 나타내었다.
시험 화합물
이소프로필 6-시아노-5-메톡시카보닐-2-메틸-4-(3-니트로페닐)-1,4-디하이드로피리딘-3-캅복실레이트(이하에서, 디하이드로피리딘 화합물 A라고 함).
당해 화합물을 폴리에틸렌 글리콜 400(PEG 400)에 용해시켜 사용한다.
방법
[A] 디하이드로피리딘 화합물 A의 예방 효과
(1) 뇌 허혈증 모델에서의 세포 골격 단백질의 분해
거빌을 앙와 위치로 고정시키고 경부를 국부 마취하에 중앙 절개한다. 이어서, 평행으로 배열된 미주신경과 교감신경이 손상되지 않도록 조심하여 좌우 공통 경동맥을 떼어낸다. 이어서, 각 공통 경동맥을 작은 클립으로 차단하고 5, 10 또는 15분 후에, 클립을 제거한다. 클립을 제거한지 4일 또는 1주일 후에 동물을 즉시 참수시켜 뇌를 분리해낸다. 처리하지 않은 동물을 대조그룹으로 사용하고 모의수술(경동맥 절제 과정만 포함)을 받는 동물도 연구한다. 분리한 뇌를 빙냉하에 전(frontal) 피질(상부 2/3, 거의 1 내지 5층에 해당, 약 80mg), 선조체(약 20mg) 및 해마(약 50mg)를 절개하여 각 부위를 4배 용량의 0.01M 인산염 완충액(pH 7.2)(v/w) 중에서 균질화한다. 각 균질물을 100,000G에서 30분간 원심분리하여 상등액을 수득한다. 동일 분획의 상등액을 SDS-폴리아크릴아미드-겔(5%) 전기영동에 적용시키고 단백질, 즉 MAP-2(MW : 250-260K), 캘스펙틴(MW : 230-240K) 및 클래트린(MW : 180K)을 농도계(CS-930, Shimazu)를 사용하여 560nm에서의 흡광도를 측정함으로써 정량하고, 수용성 단백질 전체(엄밀하게는 흡광영역의 총합)에 대한 각 단백질의 비율을 계산한다. 추가로, 비처리 대조그룹의 값에 대한 상대적 백분율 %도 계산한다.
(2) 세포골격 단백질의 분해에 대한 디하이드로피리딘 화합물 A의 효과
2가지 실험을 시리즈로 수행하였다. 첫번째 실험에서, 디하이드로피리딘 화합물 A(0, 0.01, 0.1 내지 1mg/kg)를 폐쇄 1시간전 및 허혈개시 5분후에 피하투여하고 재관류시킨다. 재관류 1시간후, 동물을 참수시키고 뇌를 분리한다. 두번째 실험에서, 디하이드로피리딘 화합물 A(0, 0.1, 1 및 10mg/kg)를 5분 동안의 허혈을 개시하기 1시간 전에 유사한 방법으로 피하투여한 후에, 동일 용량을 4일간 계속 1일 1회(총 : 5회) 피하 투여한다. 최종 투여(5일째) 1시간후, 동물을 참수시키고 뇌를 분리한다. 분리한 뇌를 분획화하여 상술한 바와 같이 전기영동에 적용시킨다.
(3) 가요성 세포 골격 단백질의 칼슘-의존성 분해
비처리 동물의 뇌 전체를 균질화하여 원심분리한 후 생성된 상등액의 분취량을 하기의 3가지 조건하, 즉 2mM 염화칼슘 또는 1.4mM 에틸렌 글리콜-비스(β-아미노에틸 에테르)-N,N,N',N'-테트라이세트산(EGTA)의 존재하 또는 첨가제의 부재하에 37℃에서 60분간 배양한다. 단백질을 정량하기 위하여 배양물을 각각 전기영동에 적용시키고 농도를 측정한다.
[B] 디하이드로피리딘 화합물 A의 치료 효과
거빌을 앙와 위치로 고정시키고 경부를 국부 마취하에 중앙 절개한다. 이어서, 평행하게 배열된 미주신경과 교감신경에 손상이 가지 않도록 조심하면서 좌우 공통 경동맥을 떼어낸다. 각각의 공통 경동맥을 작은 클립으로 5분간 차단한후 클립을 제거한다. 1시간후 또는 4일후 동물을 참수시키고 뇌를 분리한다. 모의 수술된 동물을 대조그룹으로 사용하고 비처리 동물도 사용한다. 분리한 뇌를 방법(1)과 동일한 방법으로 처리하고 연구한다.
용량 투여 스케줄은 하기와 같다 :
한 실험에서는 디하이드로피리딘 화합물 A(0.1mg/kg)를 5분 동안의 허혈 0, 10 또는 30분후에 피하 투여하고 뇌를 분리하기 위하여 허혈이 완결된지 1시간 후에 참수시킨다. 다른 실험에서는, 디하이드로피리딘 화합물 A(0, 1 또는 10mg/kg)를 허혈이 완결된지 0, 10, 30 또는 60분후에 피하투여하고, 이어서 추가로 4일간 연속하여 1일 1회(총 5회 용량) 동일 용량으로 피하투여한다. 최종 투여(5일째) 1시간 후 동물을 참수시키고 뇌를 분리한다. 그러나, 두 실험에서, 비히클 그룹은 허혈 직후에 비이클만을 투여한다. 분리한 뇌를 분획화하고 기술된 방법에 따라서 전기영동에 적용시킨다.
결과
[A] 디하이드로피리딘 화합물 A의 예방 효과
(1) 뇌 허혈증 모델에서의 세포골격성 단백질의 분해
전기영동 결과, MAP-2는 250 내지 260K(킬로달톤) 범위의 분자량으로 2개의 밴드로서, 캘스펙틴은 230 내지 240K 범위의 분자량으로 3 내지 4개의 밴드로, 클래트린은 180K에서 단일 밴드로서 검출되었다. 이러한 결과는 니시무라(Nishimura), 야마시타(Yamashita) 등이 각각의 항체에 대하여 면역블롯팅하여 보고한 결과와 완전히 일치한다. 본 연구조건하에, 사이 3종류의 단백질은 모두 농도가 변화하는 것으로 밝혀졌으며, 이들의 합은 총 단백질의 5% 이하였다.
허혈증의 지속기간을 5분으로부터 10 내지 15분으로 변화시키고 혀혈 유발 1주 경과후 각 단백질 농도를 분석한 결과, 5분 동안의 허혈의 경우에 있어서, MAP-2 및 캘스펙틴의 농도만이 감소하였고 클래트린은 변하지 않았다. 10분 동안의 허혈의 경우에 있어서, 3종의 단백질이, 특히 MAP-2 및 캘스펙틴의 농도가 피질 및 선조체에서 감소하였다. 한편, 해마에서는 변화가 없었다. 15분 동안의 허혈의 경우에 있어서, MAP-2 및 캘스펙틴의 농도는 뇌의 모든 부위에서 감소하였으나, 클래트린은 감소되지 않았다. 허혈의 지속기간이 증가함에 따라 MAP-2 및 캘스펙틴의 농도는 현저하게 감소되는 경향이 있으나 클래트린의 경우에는 감소현상이 명백하게 관찰되지는 않았다. 치사율은 5분 동안의 허혈의 경우 0/5(0%), 10분 동안의 허혈의 경우 8/17(47%), 15분 동안의 허혈의 경우 31/33(94%)이었으며, 동물의 대부분은 허혈후 24시간내에 사망한다.
허혈의 지속기간을 5분으로 고정하고 허혈 직후, 4일후 또는 1주일후에 각각의 단백질을 정량한다. 허혈을 10분 이상 지속시키는 경우, 위에 언급한 치사율의 견지에서 볼 때 효과측정에 있어서 부적합한 것으로 생각되므로 허혈 지속기간은 5분으로 선택한다. 허혈 직후 또는 4일후 각각의 단백질의 농도는 몇몇 부위를 제외하고는 뇌의 모든 부위에서 감소하였다. 1주일후, MAP-2 및 캘스펙틴만이 감소되었지만 허혈 직후 또는 4일후에 비해 그 정도가 적으며, 더욱이 클래트린은 거의 감소되지 않았다.
정상적인 동물의 수용성 뇌 분획물에 대한, 칼슘 킬레이트화제인 칼슘 또는 EGTA의 효과, 즉 각 단백질의 분해도를 시험관내에서 측정하였다. MAP-2 및 캘스펙틴은 칼슘의 존재하에 현저히 감소되지만, 클래트린은 거의 변화가 없는 것으로 밝혀졌다. MAP-2는 칼슘 또는 EGTA의 부재하에서도 미소하게 감소되었다. MAP-2는 내열성 단백질인 것으로 공지되어 있으며, 이러한 MAP-2의 미소한 감소는 용액중에 함유된 미량의 내생성 칼슘에 기인한 것일 수 있다.
(2) 세포 골격 단백질의 허혈성 분해에 대한 효과
허혈 유발 1시간후 및 4일후 각 단백질을 정량한 결과, 디하이드로피리딘 화합물 A는 뇌의 모든 부위에서 MAP-2의 감소를 상당히 억제하는 것으로 밝혀졌다. 당해 화합물은 허혈 유발 1시간후 해마에서, 허혈 유발 4일후 해마 및 피질에서 캘스펙틴의 감소를 상당히 억제한다. 당해 화합물은 클래트린의 감소에 대해서는 영향을 주지 않았다. 유효 용량 범위는 0.01 내지 10mg/kg 이지만, 1mg/kg 이상의 용량에서는 인지할만한 효과의 증진은 관찰되지 않으며 최대 효과는 1 내지 10mg/kg의 범위에서 수득됨이 밝혀졌다. 비히클 그룹중의 3종의 단백질의 감소 정도는 피질에서보다 선조체 및 해마에서 보다 크게 감소되는 경향이 있으며, 디하이드로피리딘 화합물 A의 억제효과는 선조체에서 보다 강력한 경향이 있다. 비히클 그룹에서 허혈 유발 1시간후 단백질 농도와 허혈 유발 4일후 농도를 비교한 결과, 3종의 단백질의 농도는 변하지 않거나 경미하게 변하는 경향이 있는 것으로 나타났다. 단백질의 분해가 4일째에 추가로 진행되었고, 정상치와의 차이가 보다 커졌으며, 이러한 사실은 디하이드로피리딘 화합물 A의 효과가 허혈 유발 4일후에 용이하게 탐지될 수 있음을 암시한다. 그러나 디하이드로피리딘 화합물 A의 억제효과에 대한 허혈 유발 1시간후(단일 용량 복용)와 4일후(5회 반복된 용량 복용)의 명백한 차이점을 제시하는 데는 실패하였다.
상기의 실험결과를 하기와 같이 요약할 수 있다. 디하이드로피리딘 화합물 A는 CANP에 의해 분리되는 것으로 예기되는 MAP-2 및 캘스펙틴의 농도 감소는 억제하지만, 칼슘과는 무관한 클래트린의 농도 감소에는 영향을 주지 않는다. 이러한 사실은 뇌의 허혈성 기능장애에 대한 디하이드로피리딘 화합물 A의 예방효과를 암시할 뿐만 아니라 신경세포내로의 칼슘 유입이 실제로 허혈 상태에서 발생한다는 것을 암시한다.
참조 물질과의 비교
디하이드로피리딘 화합물 A의 작용을 통상적인 Ca2+길항제인 니모디핀 및 니카르딘핀의 작용과 비교하기 위하여, 방법(1)에 기술된 방법에 따라 실험을 수행하엿다. 결과는 표 1 내지 표 3에 요약하였다. 비히클로서, PEG-400을 전반에 걸쳐서 사용하였다. 니모디핀 및 니카르디핀의 작용은 극도로 약한 반면, 디하이드로피리딘 화합물 A만이 상당히 더 강력하게 억제함을 표로부터 알 수 있다.
[B] 하이드로피리딘 화합물 A의 치료 효과
허혈 유발 1시간후 각 단백질을 정량한 결과를 표 4에 나타내었다. 1mg/kg 용량에서, 허혈 유발 직후 디하이드로피리딘 화합물 A를 투여한 결과에 의하면 이들 화합물은 뇌의 3부위 모두에서 MAP-2의 감소를 상당히 억제시켰고, 심지어는 허혈 유발 10분후에 투여한 경우에도 해마에서 MAP-2의 감소를 상당히 억제시켰다. 캘스펙틴의 감소에 대하여, 디하이드로피리딘 화합물 A는 해마에서만 효과적이며 이러한 효과는 허혈 유발 30분 후에 투여한 경우에 조차도 관찰되었다. 디하이드로피리딘 화합물 A는 클래트린의 감소에는 영향을 주지 않았다.
허혈 유발 4일후 각 단백질을 정량한 결과를 표 5에 나타내었다. 선조체에서, MAP-2의 감소는 허혈 유발 직후 또는 10분후에 제1용량을 투여한 1일 1mg/kg 그룹 및 10mg/kg 그룹과 허혈 유발 30분후 제1용량을 투여한 1일 10mg/kg 그룹에 있어서 상당히 억제되었다. 해마에서, MAP-2의 감소는 허혈 유발 직후부터 60분후까지 투여한 그룹의 경우 1일 1mg/kg 및 10mg/kg으로 상당히 억제되었다.
상기의 결과에 근거하여, 디하이드로피리딘 화합물 A는 허혈 및 투여 개시와의 시간 간격이 상대적으로 길더라도 해마에서 MAP-2의 감소에 대해 효과적임이 명백하다. 한편 선조체 및 전 피질에 있어서, 디하이드로피리딘 화합물 A는 가능한 한 초기에 투여하는 것이 바람직한 것으로 나타났다.
Figure kpo00003
Figure kpo00004
각각의 값은 평균치±표준오차를 나타냄
≠, ≠≠ : P 0.05, 0.01(모의수술 대조그룹과의 비교)
*, ** : P0.05, 0.01(비히클 대조그룹과의 비교)
Figure kpo00005
Figure kpo00006
각각의 값은 평균치±표준오차를 나타냄
≠, ≠≠ : P0.05, 0.01(모의수술 대조그룹과의 비교)
*, ** : P0.05, 0.01(비히클 대조그룹과의 비교)
Figure kpo00007
+ : 통계학적으로 유의성 있음
- : 효과 없음
좌 : 허혈 유발 1시간전에 투여하고 허혈 유발 1시간후 참수시킴
우 : 허혈 유발 1시간전 및 4일 연속 투여하고 최종 투여 1시간 후에 참수시킴
Figure kpo00008
각각의 값은 평균치±표준오차를 나타낸다.
* : P0.05(모의수술 대조그룹과의 비교)
** : P0.01(비히클 대조그룹과의 비교)
Figure kpo00009
각각의 값은 평균치±표준오차를 나타냄
* : P0.05(모의수술 대조그룹과의 비교)
** : P0.01(비히클 대조그룹과의 비교)
[실시예]
[실시예 1]
디하이드로피리딘 화합물 A 100g
하이드록시프로필메틸셀룰로스 500g
디하이드로피리딘 화합물 A를 무수 에탄올(5ℓ)에 용해시키고, 이어서 하이드록시프로필메틸셀룰로스를 가하여 현탄액을 만든다. 이어서, 유기용매를 감압하에 제거하여 고체 분산제를 수득한다.
[실시예 2]
디하이드로피리딘 화합물 A 100g
하이드록시프로필메틸셀룰로스 500g
자당 9.4kg
자당을 무수 에탄올(5ℓ)중의 디하이드로피리딘 화합물 A 및 하이드록시프로필메틸셀룰로스를 함유하는 현탁액에 가하고, 혼합물을 교반한다. 이어서, 유기용매를 감압하에 제거하여 고체 분산제를 수득한다. 조성물을 통상적인 방법을 통하여 미소과립으로 가공한다.
[실시예 3]
디하이드로피리딘 화합물 A 100g
하이드록시프로필메틸셀룰로스 500g
유당 6.87kg
저치환도의 하이드록시프로필셀룰로스 1.5kg
마그네슘 스테아레이트 30g
무수 에탄올(5ℓ)중의 디하이드로피리딘 화합물 A 및 하이드록시프로필셀룰로스의 현탁액에 유당 및 저치환도의 하이드록시프로필셀룰로스를 가하고 생성된 혼합물을 교반한다. 이어서, 유기용매를 감압하에 제거하여 고체 분산제를 수득한다. 조성물을 통상적인 방법을 통하여 과립으로 가공하고 마그네슘 스테아레이트를 가한후 확립된 약제학적 공정에 따라 정제를 제조한다. 각각의 정제는 2mg의 디하이드로피리딘 화합물 A를 함유한다.
[실시예 4]
실시예 3에서 제조한 각 정제는 하이드록시프로필메틸셀룰로스(5.1mg), 이산화티탄(1.6mg), 폴리에틸렌 글리콜 6000(0.8mg), 활석(0.4mg) 및 황색 산화철(0.1mg)로 구성된 피복 조성물로 필름 피복하여 정제당 2mg의 디하이드로피리딘 화합물 A를 함유하는 필름 피복된 정제를 수득한다.

Claims (2)

  1. 하기 일반식(Ⅰ)의 디하이드로피리딘 화합물 또는 약제학적으로 허용가능한 이의 염을 함유함을 특징으로 하는 뇌 뉴우론 보호제.
    Figure kpo00010
    상기식에서, R1은 니트로페닐 그룹이고, R2, R3및 R4는 각각 동일하거나 상이한 저급 알킬 그룹이다.
  2. 제1항에 있어서, 디하이드로피리딘 화합물이 이소프로필 6-시아노-5-메톡시카보닐-2-메틸-4-(3-니트로페닐)-1,4-디하이드로피리딘-3-카복실레이트인 뇌 뉴우론 보호제.
KR1019880017619A 1987-12-29 1988-12-28 디하이드로피리딘 화합물을 함유하는 뇌 뉴우론 보호제 KR970009077B1 (ko)

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