KR970008483B1 - 신규한 n-4-살리실아미드-2-아미노-6-피페리디노피리미딘 3-옥사이드, 그의 제조방법 및 그를 함유하는 양모제 조성물 - Google Patents

Abstract

없음

Description

신규한 N-4-살리실아미드-2-아미노-6-피페리디노피리미딘 3-옥사이드, 그의 제조방법 및 그를 함유하는 양모제 조성물

제1도는 제모한 마우스에 30% 에탄올만을 도포한 경우의 모낭의 조직학적 변화를 나타낸 사진이다.

제2도는 제모한 마우스에 미녹시딜을 도포한 경우의 모낭의 조직학적 변화를 나타낸 사진이다.

제3도는 제모한 마우스에 본 발명의 화합물(I)을 도포한 경우의 모낭의 조직학적 변화를 나타낸 사진이다.

제4도는 본 발명의 화합물(I)을 랫트에 경구투여한 경우의 평균혈압을 나타낸 그래프이다.

제5도는 본 발명의 화합물(I)을 랫트에 경구투여한 경우의 심박수를 나타낸 그래프이다.

제6도는 본 발명의 화합물(I)을 랫트에 정맥주사한 경우의 평균혈압을 나타낸 그래프이다.

제7도는 본 발명의 화합물(I)을 랫트에 정맥주사한 경우의 심박수를 나타낸 그래프이다.

본 발명은 하기 구조식(I)의 신규한 N-4-살리실아미드-2-아미노-6-피페리디노피리미딘 3-옥사이드, 그의 제조방법 및 그를 함유하는 양모제 조성물에 관한 것이다.

탈모의 원인은 정확히 알 수 없으나 지금까지 밝혀진 내용에 의하면 국소혈류장해에 의한 영양장해설, 세균감염설, 자기면역질환설, 내분비장해설, 자율신경계장해설 등으로 나뉘고 있으나 무엇보다도 유전적인 요인이 가장 큰 것으로 생각되며 통상 여러가지 원인들이 복합적으로 작용하여 탈모가 나타나는 것으로 알려져 있다.

그러나, 탈모증의 원인에 대해서는 비교적 소상히 연구되어 있는 반면, 그 치료방법에 대해서는 아직 만족할만한 성과를 얻지 못하고 있는데 그 가장 큰 이유는 탈모의 원인이 단순하지 않기 때문인 것이다.

두발의 탈모방지 및 증모를 위하여 현재까지 사용되고 있는 방법은 증모제의 도포, 모근이 있는 피부에 물리적 자극 등이 있으며, 증모제로서 각종 제제, 예를들어 부산피질호르몬, 여성호르몬, 비타민, 아미노산, 생약추출물, 여러가지 살균제, 각질용 해제 피부기능 항진제 및 멘톨과 같은 말초신경 자극제가 사용되고 있다.

그러나, 여성호르몬 제제는 장기 사용시 각종 암을 유발할 우려가 있으며, 생약추출물로는 머위 또는 머위 민들레의 추출물을 함유한 것(일본 특허공고 소 58-11923), 다목나무, 구기자나무, 시호, 물거머리 등의 추출물을 함유한 것(일보 특허공고 소 58-40923)이 있으나 이들은 그 생약의 입수가 상당히 곤란하고, 그밖의 상기 다른 방법들도 탈모증도 예방치료 또는 완화하기 위한 효과가 만족스럽지 못하였다.

한편 1980년대에 들어 항고혈압제로 널리 사용되던 미녹시딜에 발모효과가 있음이 확인되었다. 즉, 미녹시딜을 4주 이상 복용한 거의 모든 환자에게 발모효과가 나타났으며, 그 효과는 종전의 발모제와는 달리 내분비계와 관련된 것이 아니라 피부의 혈류를 증가시키는데 원인이 있는 것으로 추측되고 있다[참고:Weiss, V. C., et al., J. Am. Acad. Dermatol. 5, 224-226(1981)].

그러나, 미녹시딜을 양모제로 사용할 경우, 미녹시딜의 혈관확장효과, 즉 항고혈압 작용에 의한 허탈감, 저혈압, 빈맥등이 유발되는 부작용을 일으킬 염려가 있어 장기 사용시에는 적합한 약물이 될 수 없다.

본 발명자는 기존 발모제들이 갖고 있는 부작용이 없으면서도 우수한 발모효과를 나타낼 수 있는 화합물을 개발하기 위하여 연구해온 결과, 상기 미녹시딜의 피리미딘환의 4 위치의 아미노기에 살리실산을 아미드 결합시킴으로써 상기 구조식(I)을 갖는 신규한 미녹시딜의 유도체를 합성하였고, 이 화합물이 우수한 양모 효과를 갖는 반면, 미녹시딜의 항고혈압 부작용은 전혀 나타내지 않음을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 신규한 화합물인 신규한 N-4-살리실아미드-2-아미노-6-피페리디노피리미딘 3-옥사이드는 하기 일반식(II)의 살리실산 유도체를 구조식(III)의 미녹시딜과 반응시킴으로써 제조할 수 있다.

상기 식에서, R은 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시 또는 아실옥시를 나타낸다.

본 발명에 따르는 구조식(I)의 화합물은 제조하기 위해 일반식(II)의 화합물과 구조식(III)의 미녹시딜의 축합반응은 적합한 용매의 존재하 및 필요하다면 적합한 반응보조제 존재하에서 통상의 아미드화 반응을 거쳐 수행한다.

일반식(II)의 살리실산 유도체는 유기화학분야에서 공지된 화합물이거나 또는 공지된 방법과 유사한 방법으로 수득할 수 있다.

본 발명의 제조방법을 수행하는데 적합한 용매는 통상의 불활성 유기용매로서, 예를들면 벤젠, 톨루엔, 클로로벤젠, 클로로포름과 같은 임의로 할로겐화된 지방족, 지환족 또는 방향족 탄화수소, 에테르, 케톤, 아세토니트릴, 벤조니트릴과 같은 니트릴아미드, 아세테이트 또는 디메틸설폭사이드와 같은 설폭사이드가 포함된다.

본 발명의 제조방법을 수행하는데 있어서 필요에 따라 사용할 수 있는 적합한 반응보조에는 통상의 무기 또는 유기염기들이 있다.

본 발명의 제조방법에서 상기 일반식(I)의 R이 하이드록시기인 경우(즉, 살리실산인 경우)에는 필요에 따라 적합한 축합제 즉, 티오닐클로라이드, 삼염화인, 오염화인, 삼브롬화인과 같은 산할라이드 형성제; 에틸클로로포르메이트 또는 메탄설포닐클로라이드와 같은 무수물성형제: N, N' 디사이클로헥실카르보디이미드(DCC)와 같은 카르보디아미드; 또는 N, N'-카르보닐이미다졸 또는 트리페닐포스핀/사염화탄소와 같은 통상의 축합제를 적당량 사용할 수 있으며, 반응온도는 비교적 넓은 범위내에서 변화시킬 수 있다. 일반적으로 -20℃ 내지 150℃의 온도, 바람직하게는 0℃ 내지 120℃의 온도를 사용한다.

본 발명의 방법은 통상, 대기압하에서 수행하거나 승압 또는 감압하에 수행할 수도 있으며 사용원료의 반응비율은 일반식(II)의 살리실산 유도체 1몰당 1.0 내지 5.0몰, 바람직하게는 1.0 내지 2.5몰의 미녹시딜을 반응시키고 후처리 및 반응생성물의 분리는 공지된 방법에 따라 진행할 수 있다.

구조식(I)의 최종 생성물의 정제는 통상의 방법, 예를 들어 칼럼크로마토그래피 또는 재결정화 등의 방법을 사용하여 수행한다. 특정화는 융점을 사용하거나, UV, IR, MS 등 통상의 특정화 방법을 사용하여 수행한다.

본 발명에 따르는 구조식(I)의 신규한 화합물은 우수한 양모효과를 나타낸다. 본 발명의 화합물(I)의 양모효과는 등부위를 제모한 마우스(C57BL/6)를 사용하여 털의 복원상태를 실험해본 결과 미녹시딜의 경우보다 우수한 양모효과를 가짐이 입증되었고 피부발적과 같은 부작용이 없음을 확인하였다. 한편 본 발명에 따르는 화합물(I)의 혈압에 대한 효과를 SD 랫트를 사용하여 본 화합물을 경구 및 정맥주사후 평균혈압(MAP) 및 심박수(HR)을 측정하여 본 결과 경구투여시 200mg/kg의 고용량에서만 평균혈압의 강하가 나타났고 그외에는 혈압에 대하여 유의적인 효과를 나타내지 않았다.

그리고, 이때 경구투여시의 평균혈압 강하효과가 나타난 용량도 본 발명의 화합물은 양모제로써 사용하는 경우 용량의 약 100배 이상의 고용량으로서 실제적인 사용량에서는 이러한 효과는 나타나지 않음이 확인된다.

따라서, 본 발명의 화합물은 기존의 미녹시딜을 양모제로 사용할 경우보다 양모효과가 훨씬 우수하며 혈압강하와 같은 부작용은 전혀 없는 우수한 양모제임이 밝혀졌다.

본 발명의 신규한 화합물(I)의 양모효과는 그 구조적 측면에서 볼때 미녹시딜에서와 같이 피부의 혈류를 증가시키는 작용과 살리실산의 피부자극작용이 상호 복합 상승적으로 작용하여 우수한 발모촉진효과를 나타내는 것으로 추측된다.

본 발명은 또한 활성성분으로서 구조식(I)의 신규한 화합물을 함유하는 약제학적 조성물을 제공한다. 이러한 약제학적 조성물은 예를들어 본 발명의 화합물(I)을 함유하는 고형, 반고형 또는 액체형태의 약제학적 외용제제의 형태로 사용할 수 있다.

본 발명의 활성성분은 예를들어 크림제, 연고제, 스프레이, 현탁제, 샴푸, 린스등 사용에 적합한 제형에 사용되는 통상의 약제학적으로 허용되는 담체와 혼합할 수 있다. 또한, 필요하다면 추가로 비타민류, 살균제등 공지의 양모제 성분, 보조제, 안정화제, 농조화제, 착색제 및 향료를 사용할 수도 있다.

본 발명의 조성물의 사용량은 적용부위의 면적, 상태등에 따라 달라지지만 통상 1 내지 3% 농도로 하여 액제 및 현탁제는 1일 2회, 1회 0.5 내지 1ml를, 환부에 도포하며 스프레이로 사용할 경우에는 1회 분무시 약 0.12ml 정도가 분사되므로 1회 4 내지 8회 분무하며, 연고제는 1일 2회, 1회 0.5 내지 1g을 환부에 도포하며 이들 제제는 3 내지 6개월 이상 지속적으로 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명은 다음 실시예에 의해 더 상세하게 설명되나 본 발명이 하기 실시예에 의하여 제한되는 것은 아니다.

제조 실시예

실시예 1

N-4-살리실아미드-2-아미노-6-피페리디노피리미딘 3-옥사이드 합성

살리실산 686mg(5mM)을 환저 플라스크에 넣고 SOCl₂3ml를 가하여 마그네틱 스터러를 사용하여 녹인 후 80℃에서 18시간 동안 환류 반응시킨다. 반응 완결후 여기에 적당량(약 10ml)의 CCl₄를 가하여 증류시켜 과량의 SOCl₂를 제거한 후 수득된 염화물을 데시케이터에서 하루 방치한다.

이 염화물은 무수 Na₂SO₄를 사용하여 수분을 제거한 CHCl₃500ml에 녹인다음 미녹시딜 250mg(1.2mM)을 가하고 실온에서 교반하면서(교반기는 저속으로 하고 플라스크 입구는 와트만(Whatman)지로 막는다) 3일간 반응시킨 후 증발 농축한 다음 데시케이터에서 하루 방치한다.

수득된 생성물을 전개용매 CHCl₃:MeOH=10:1를 사용하여 TLC한 후 드라겐도르프(Dragendorff) 시약으로 발색시켜 확인하고 목적화합물을 칼럼크로마토그래피(전개용매는 CHCl₃:MeOH=10:1을 사용)에 의하여 분리확인한 다음 CHCl₃:MeOH(2:1) 혼합용매로 재결정하여 융점 240℃의 백색분말을 수득한다(수율 47%).

용해도 시험

본 발명의 화합물(I) 1mg을 용해시키는데 필요한 용매의 양은 다음과 같다:

진한 NaOH; 매우 잘 녹음, DMSO; 1.2ml, DMF; 2ml,디클로로메탄; 5ml, 디옥산; 6ml, CHCl₃; 7ml, 메탄올>10ml, 아세톤>10ml, 헥산>10ml, 디에틸에테르>10ml,CCl₄>10ml, 아세토니트릴>10ml, H₂O, PEG 및 글리세린에는 불용

광학분석

일반식(I) 화합물의 분석확인 데이타는 다음과 같다.

UV λ(nm) : 261, 315

IR v(cm^-1) : 3473, 3182, 1685, 1646, 1450-1550, 1228, 880, 780

MS(EI, m/z, 상대강도) : 329[M]⁺(72.4), 313(29.1), 209(100), 192(41.3), 164(21.5), 84(87.5)

조성물예

실시예 2 : 연고제 조성물

성분함량

화합물(I)1.0g

덱스판테놀1.5g

스테아린산1.0g

유동파라핀5.0g

경납4.0g

세탄올3.0g

프로필렌글리콜13.0g

트리에탄올아민1.5g

디부틸하이드록시톨루엔0.025g

안식향산에틸0.0225g

안식향산프로필0.015g

폴리소르베이트 800.1g

정제수63.0g

상기와 같은 조성의 성분들은 통상의 연고제 제조방법에 따라 배합하여 연고제 조성물을 제조한다.

실시예 3 : 연고제 조성물

화합물(I)을 3.0g 사용하여 정제수 65.0g을 제외한 나머지 성분은 상기 실시예 2와 동일하게 하여 통상의 연고제 제조방법에 따라 연고제 조성물을 제조한다.

실시예 4 : 현탁제 조성물

성분함량(100ml당)

화합물(I)1.0g

덱스판테놀1.5g

글리세린0.6g

하이드록시프로필셀룰로오스0.085g

비검0.0255g

정제수총 100m로 한다.

통상의 현탁제 제조방법에 따라 교반하면서 배합하여 상기와 같은 조성의 현탁제 조성물을 제조한다.

실시예 5 : 현탁제 조성물

화합물을 3.0g 사용하고 나머지 성분은 실시예 4와 동일하게 사용하여 통상의 현탁제 제조방법에 따라 현탁제 조성물 100ml를 제조한다.

시리예 6 : 액제 및 스프레이제

성분함 량(100ml 당)

화합물(I)1.0g

덱스판테놀1.5g

프로필렌글리콜20.0g

에탄올64ml

정제수총 100ml로 한다.

통상의 액제 제조방법에 따라 배합하여 상기와 같은 조성의 액제 조성물을 제공한다. 또한 이 액제에 추가로 분사제를 첨가하여 통상의 방법으로 스프레이제를 제조한다.

실시예 7 : 액제 및 스프레이제

화합물(I)를 3g 사용하여 실시예 6과 동일한 방법으로 액제 및 스프레이제를 제조한다.

본 발명에 따르는 신규한 화합물(I)의 약물학적 활성, 즉 양모활성을 입증하기 위하여 마우스에 대한 양모효과 및 랫트의 혈압에 대한 효과를 하기와 같이 실험하였다.

실험 1 : 양모활성시험

생후 45 내지 53일 된 체중 23 내지 27g의 마우스(C57BL/6)를 각 시험군당 9마리로 하여 클리퍼(Oster #40) 및 전기면도기로 등부위의 털을 제모하여 실험동물로서 사용했다.

시험군은 대조군(무처치), 30% 알콜 사용군, 미녹시딜 사용군(2% 미녹시딜), 본 발명의 화합물(I) 사용군 2% 화합물(I)로 나누어 실험하였다.

본 실험에서 투여되는 시험물질의 부여량은 미녹시딜은 100mg, 본 발명의 화합물(I)은 100mg로 하였다.

실라스틱 튜브(ID:0.025in, OD:0.047in, L:10mm)에서 시험물질을 넣어 제모처리한 익일부터 시험물질을 넣은 실라스틱 튜브를 피부내에 이식시키고 3주간 동안 시간경과에 따른 털의 성장정도를 완전탈모상태를 0으로 하고, 완전히 모낭이 복원된 상태를 3으로 하여 그 사이를 모낭의 길이 및 면적을 측정하여 0.5 단위로 세분하여 헤어 스코어(hair score)를 부가하여 평균값을 계산하였다. 그 결과를 표 1에 나타내었다. 모닝의 조직학적 변화는 피부생김을 통하여 나타난 변화를 모낭의 길이 및 모주기상의 상태를 관찰하였고 그 결과가 제1 내지 3도이다.

[표 1]

양모활성 실험결과

상기 결과로부터 본 발명의 화합물(I)은 공지의 양모제인 미녹시딜과 유사한 우수한 양모효과를 나타내며, 약리활성을 나타내는 농도에서 피부발진과 같은 부작용이 나타나지 않음이 확인되었다.

또한 생검을 통하여 나타난 모낭의 길이 및 모주기상의 상태를 비교해볼때 본 발명의 화합물(I)(제3도)은 대조군(제1도)에 비하여 미녹시딜(제2도)에서 보다 모낭길이가 길고 양호하게 복원되었음을 관찰할 수 있었다.

실험 2 : 혈압에 미치는 효과

(1) 경구투여에 의한 혈압강하 작용시험

13주된 웅성랫트(SHR)를 비처치군, 3군의 본 발명의 화합물(I)의 투여군(100mg/kg, 200mg/kg, 400mg/kg)으로 구분하여 각각 케타민(100mg/kg, i.p.) 마취하에서 경부 중앙부위를 절개한 후 경동맥에 헤파린용액(501U/ml)를 채운 폴리에틸렌 튜브(PE 60, Clay Adams)를 삽입하여 튜브를 피하를 통하여 목 뒷부분으로 매어 고정하였다. 수술후 3시간이 경과되고 마취에서 완전히 회복된 실험동물에 대하여 다음 실험을 실시하였다.

경동맥 캐뉼라(cannula)를 압력변환장치(pressure transducer:P23×L, Gould, USA)에 연결하고 데이타 프로세싱 센터(M 4000, Modular Inc. USA)를 사용하여 평균혈압(MAP) 및 심박수(HR)을 측정하였다. 평균혈압 및 심박수가 일정하게 유지된 다음 실험물질을 경구투여하였으며, 매 30분 간격으로 10시간 동안 평균혈압 및 심박수를 측정하였다.

시험물질은 시험직전에 조제하였으며, 40% PEG 400 용액에 소량의 0.1N-NaOH 혹은 0.1N-HCl를 가하여 최대한 용해시킨 다음 2ml/kg 용적으로 용해하여 경구투여하였다.

시험결과는 평균±표준편차로 표시하였으며 ANOVA(Analysis of Varienc)로 유의성을 검정하여 하기 표 2, 제4도 및 제5도에 나타내었다.

[표 2]

T_max: 7.3hr,ED_20%(MAP) : 118.1mg/kg

ED_30mmHg: 115.1mg/kgAUC 200 : 514.6mg/kg

(2) 정맥투여에 의한 혈압강하 작용시험

10주된 웅성랫트(SHR)을 비처치군, 3군의 본 발명의 화합물(I) 투여군(10mg/kg, 30mg/kg, 100mg/kg)으로 나누어 케타민(100mg/kg, i.p.) 마취하에서 경부 중앙부위를 절개한 후, 약물투여를 위하여 우경정맥에 생리식염수 용액을 채운 폴리에틸렌 튜브를 삽입하고 혈압과 심박수를 측정하기 위하여 우경동맥에 헤파린(501U/ml)을 채운 폴리에틸렌 튜브를 삽입하여 피하를 통하여 목 뒷부분을 매어 고정하였다. 수술후 3시간이 경과되고 마취에서 완전히 회복된 실험동물에 대하여 하기 실험을 실시하였다.

시험물질을 정맥주사 케뉼라를 통해 투여하며 약물투여후 2시간 동안 혈압 및 심박수를 측정하였다. 측정장치 및 시험물질 조제는 실험(1)과 같은 방법을 사용하였다. 실험(1)과 같은 방법으로 분석 및 표시하였다.

그 결과를 표 3, 제6도 및 제7도에 나타내었다.

T_max: 3.0분ED_20%(MaP) : 59.4mg/kg

ED_30mmHg: 47.3mg/kg

상기 실험결과로부터 본 발명의 화합물(I)을 경구투여할 경우 혈압에 대한 작용은 제4도(평균혈압) 및 제5도(심박수)에 표시된 바와 같이 투여량이 증가함에 따라 강하시키는 양상을 보이고 있으나, 표 2의 결과로부터의 ED_20%(MAP) 및 ED_30mmHg로부터 알 수 있는 바와같이 이와같은 혈압강하 작용을 나타내기 위해서는 극히 고용량의 사용이 필요하다.

또한, 정맥주사에 의한 투여의 경우도 제6도(평균혈압) 및 제7도(심박수)에 표시된 바와같이 30mg/kg 이하 용량에서는 혈압강하작용이 나타나지 않았고, 100mg/kg에서는 약 30분간 지속되는 일시적 혈압강하작용이 있었으나 이 경우 역시 표 3의 결과로부터 알 수 있듯이 고용량에서 사용되는 경우에 나타나는 현상이므로 본 발명의 화합물(I)을 양모제로서 사용할 경우에는 혈압강하작용이 나타나지 않는다.

따라서, 본 발명의 화합물(I)은 공지의 양모제인 미녹시딜보다 그 양모효과가 뛰어나며, 미녹시딜을 정상인에 사용할 경우 유압될 수 있는 혈압강하로 인한 허탈등 부작용이 없는 우수한 양모제라는 사실을 알 수 있다.

Claims (4)

1. 하기 구조식(I)의 N-4-살리실아미드-2-아미노-6-피페리디노피리미딘 3-옥사이드.
2. 일반식(II)의 화합물을 구조식(III)의 미녹시딜과 반응시켜 구조식(I)의 N-4-살리실아미드-2-아미노-6-피페리디노피리미딘 3-옥사이드를 제조하는 방법.

   상기 식에서, R은 하이드록시, 할로겐, 알콕시, 아릴옥시 또는 아실옥시를 나타낸다.
3. 제2항에 있어서, R이 할로겐인 (I)의 화합물을 제조하는 방법.
4. 제1항에 있어서, 구조식(I)의 N-4-살리실아미드-2-아미노-6-피페리디노피리미딘 3-옥사이드를 함유하는 양모제 조성물.