KR970006497A - 재조합 발현벡터를 이용한 인간 부갑상선 호르몬의 제조방법 - Google Patents
재조합 발현벡터를 이용한 인간 부갑상선 호르몬의 제조방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR970006497A KR970006497A KR1019950023572A KR19950023572A KR970006497A KR 970006497 A KR970006497 A KR 970006497A KR 1019950023572 A KR1019950023572 A KR 1019950023572A KR 19950023572 A KR19950023572 A KR 19950023572A KR 970006497 A KR970006497 A KR 970006497A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- expression vector
- coli
- parathyroid hormone
- transformed
- human parathyroid
- Prior art date
Links
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 101001135770 Homo sapiens Parathyroid hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 14
- 101001135995 Homo sapiens Probable peptidyl-tRNA hydrolase Proteins 0.000 title claims abstract description 14
- 102000058004 human PTH Human genes 0.000 title claims abstract description 10
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 title abstract 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 7
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 claims abstract 8
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 8
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract 6
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 claims abstract 6
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 claims abstract 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims abstract 6
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims abstract 6
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 claims abstract 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims abstract 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract 4
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 claims abstract 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract 4
- 230000010076 replication Effects 0.000 claims abstract 4
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims abstract 3
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 claims description 2
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 claims description 2
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 claims description 2
- 241001288713 Escherichia coli MC1061 Species 0.000 claims 6
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 abstract description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 abstract description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/635—Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/50—Fusion polypeptide containing protease site
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
본 발명은 융합파트너로 대장균의 복제개시 억제 단백질(Ici A)의 단편을 함유한 L-arabinose 유도성 벡터에, 유로키나제 절단부위의 뉴클레오티드 서열을 포함한 인간 부갑상선 호르몬의 유전자를 삽입하여 제조한 재조합 발현벡터, 그로부터 형질전환된 재조합 미생물 및 전기 미생물을 L-arabinose가 첨가된 배지에서 배양함으로써 인간 부갑상선 호르몬을 대량으로 제조하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에서 제조된 재조합 인간 PTH는 천연형 인간 PTH의 활성을 가지고 있음을 확인하였다. 따라서, 본 발명의 재조합 발현벡터로 형질전화된 미생물을 배양하여 L-arabinose로 발현을 유도함으로써, 천연형 인간 PTH가 지닌 활성을 그대로 유지하고 있는 재조합 인간 PTH를 정확한 유도조절을 통하여 고수율로 제조할 수 있다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 발현벡터 △pMA의 유전자 지도를 나타낸다, 제2(A)도는 발현벡터 △pMA5S의 유전자 지도를 나타낸다. 제2(B)도는 발현벡터 △pMA3S의 유전자 지도를 나타낸다. 제3도는 인간 부갑상선 호르몬(PTH)의 유전자를 제조하기 위한 올리고머들의 염기서열을 나타낸다.
Claims (12)
- 융합파트너로 대장균의 복제개시 억제 단백질(Ici A)의 단편을 함유하는 L-arabinose 유도성 발현벡터에 유로키나제 절단부위를 포함하는 인간 부갑상선 호르몬 유전자를 삽입하여 제조된 융합 단백질의 발현벡터.
- 제1항에 있어서, 융합파트너로 대장균의 복제개시 억제 단백질(Ici A)의 단편을 함유하는 L-arabinose 유도성 발현벡터는 재조합 대장균 MC1061:△pMA5S(KCCM-10072)로 부터 분리되는 △pMA5S인 것을 특징으로 하는 발현벡터.
- 제1항에 있어서, 융합파트너로 대장균의 복제개시 억제 단백질(Ici A)의 단편을 함유하는 L-arabinose 유도성 발현벡터는 재조합 대장균 MC1061:△pMA3S(KCCM-10069)로 부터 분리되는 △pMA3S인 것을 특징으로 하는 발현벡터.
- 제1항에 있어서, 유로키나제 절단부위는 하기와 같은 아미노산 서열로부터 유추되는 DNA 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 발현벡터:-X-Gly-Arg상기에서, X는 pro, Thr, Ile, Phe 또는 Leu이다.
- 제1항에 있어서, 유로키나제 절단부위는 -Thr-Gly-Arg의 아미노산 서열로부터 유추되는 DNA 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 발현벡터.
- 제1항에 있어서, 인간 부갑상선 호르몬의 유전자는 하기와 같은 DNA 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 발현벡터:TCT GTT TCG GAA ATC CAG CTT ATG CAT AAC CTG GGT AAA 39CAT CTG AAC TCG ATG GAA CGT GTT GAA TGG CTG CGT AAA 78AAA CTG CAG GAT GTT CAT AAC TTC GTT GCG CTG GGG GCT 117CCA CTG GCG CCG CGC GAG GCG GGT TCG CAG CGC CCA CGT 156AAA AAG GAA GAT AAC GTT CTG GTA GAG TCG CAT GAA AAG 195TCT CTT GGC GAG GCT GAT AAA GCA GAC GTA GAC GTT TTG 234ACT AAA GCA AAA TCT CAA TAA TGA 258
- 발현벡터 △pMA5S로 형질전환된 대장균 MC1061:△pMA5S(KCCM-10072)로부터 분리한 전기 발현벡터에 유로키나제 절단부위 -Thr-Gly-Arg를 포함하는 인간 부갑상선 호르몬 유전자를 삽입하여 제조한 융합 단백질의 발현벡터 pAI5UP.
- 발현벡터 △pMA3S로 형질전환된 대장균 MC1061:△pMA3S(KCCM-10069)로부터 분리한 전기 발현벡터에 유로키나제 절단부위 -Thr-Gly-Arg를 포함하는 인간 부갑상선 호르몬 유전자를 삽입하여 제조한 융합 단백질의 발현벡터 pAI3UP.
- 제7항의 발현벡터 pAI5UP로 형질전환된 대장균 MC1061:pAI5UP(KCCM-10071).
- 제8항의 발현벡터 pAI3UP로 형질전환된 대장균 MC1061:pAI3UP(KCCM-10070).
- 제9항 는 제10항의 형질전환된 대장균을 배양하여 L-arabinose로 부갑상선 호르몬의 발현을 유도하고 이를 수득하는 공정을 포함하는 인간 부갑상선 호르몬의 제조방법.
- 제9항 는 제10항의 형질전환된 대장균을 배양하여 L-arabinose로 발현을 유도하는 공정을 포함하는 방법에 의해 제조된 인간 부갑상선 호르몬.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1019950023572A KR0180804B1 (ko) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | 재조합 발현벡터를 이용한 인간 부갑상선 호르몬의 제조방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1019950023572A KR0180804B1 (ko) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | 재조합 발현벡터를 이용한 인간 부갑상선 호르몬의 제조방법 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR970006497A true KR970006497A (ko) | 1997-02-21 |
| KR0180804B1 KR0180804B1 (ko) | 1999-04-01 |
Family
ID=19422505
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1019950023572A KR0180804B1 (ko) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | 재조합 발현벡터를 이용한 인간 부갑상선 호르몬의 제조방법 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR0180804B1 (ko) |
-
1995
- 1995-07-31 KR KR1019950023572A patent/KR0180804B1/ko not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR0180804B1 (ko) | 1999-04-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Larson et al. | Activation in vitro of sequence-specific DNA binding by a human regulatory factor | |
| Zhang et al. | Expression of eukaryotic proteins in soluble form inEscherichia coli | |
| EP0198015B1 (en) | Production of streptavidin-like polypeptides | |
| KR920008186A (ko) | 이. 콜라이에서 써머스 아쿠아티커스 dna 폴리머라제의 생산을 증가시키는 방법 | |
| JPH05268962A (ja) | 任意の箇所で２本鎖ｄｎａを切断する方法 | |
| HUP9802383A2 (hu) | Transzkripciós szabályozó szekvenciák és eljárások alkalmazásukra | |
| KR860006546A (ko) | 인체 단벡질 c의 활성을 발현시키는 벡터의 제조방법 | |
| US4832959A (en) | Preparation of polypeptides having human γ-interferon activity | |
| AU1884888A (en) | Inducible virus resistance in plants | |
| Christie et al. | Gene structure in the tryptophan operon of Escherichia coli: nucleotide sequence of trpC and the flanking intercistronic regions | |
| JPS62500074A (ja) | バチルス スリンギエンシス 結晶タンパク質遺伝子毒素セグメント | |
| NO327165B1 (no) | Rekombinant mistellectin, fremgangsmate for fremstilling derav, nukleinsyre som koder for dette, vektor, vertscelle samt legemiddel og diagnostisk blanding. | |
| KR870010193A (ko) | 인체 췌장 엘라스타제 i | |
| IE870782L (en) | Ribosome binding site | |
| CA2298106A1 (en) | A recombinant expression vector of human parathyroid hormone | |
| JPH05328992A (ja) | ペプチドの製造方法 | |
| FI971100A0 (fi) | Menetelmä yhdistelmä-DNA-proteiinien, plasmidien ja modifioitujen solujen tuottamiseksi | |
| KR970006497A (ko) | 재조합 발현벡터를 이용한 인간 부갑상선 호르몬의 제조방법 | |
| Yabuta et al. | High expression of a recombinant human calcitonin precursor peptide in Escherichia coli | |
| Rosenberg et al. | T7 RNA polymerase can direct expression of influenza virus cap-binding protein (PB2) in Escherichia coli | |
| IT1247484B (it) | Metodo per la preparazione di interleuchina 6 | |
| CA2009917A1 (en) | Cold shock protein, gene coding therefor, promoter for gene encoding cold shock and other proteins, methods and uses as antifreeze protein in agriculture and other applications | |
| EP0121569A1 (en) | Novel vector | |
| Dykes et al. | A comparison of the nucleotide sequence of the A subunit of heat-labile enterotoxin and cholera toxin | |
| JPH0928380A (ja) | ニトリラーゼ遺伝子発現に関わる調節因子およびその遺伝子 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| J202 | Request for trial for correction [limitation] | ||
| J301 | Trial decision |
Free format text: TRIAL DECISION FOR CORRECTION REQUESTED 20060125 Effective date: 20080118 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20091030 Year of fee payment: 12 |
|
| LAPS | Lapse due to unpaid annual fee |