KR960040374A - 매우 약독화된 일본 뇌염 비루스를 생성하는 감염성 일본 뇌염 비루스 cDNA 클로 및 이의 백신 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 엔벨로프단백질내에 단일 아미노산변이를 포함하는 재조합되고, 약독화된 일본뇌염비루스에 관한것이다. 구체적으로, 본 발명은 상기 일본뇌염비루스 변종의 게놈을 암호화하는 분리된 DNA분자에 관한 것이다. 또한 본 발명은 배양된 동물세포로 부터 일본뇌염비루스 변종을 제조하는 방법에 관한 것이다.
이외에, 본 발명은 독성 일본뇌염비루스를 예방하기 위한 약학조성물에 관한 것이다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 JEV게놈 뿐만 아니라 재조합 JEV비루스의 다이아그램을 도시하는 도면이다. 제2도는 cDNA로부터 재조합야생형 JEV를 회수하는 실험계획안을 도시하는 도면이다. 제3도는 BHK세포내에서 모 JEV, 재조합야생형(IC37) 및 재조합 돌연변이 JEV(IC47)의 증식속도를 도시하는 도면이다. 제4도는 N18 세포내에서 재조합 야생형(IC37) 및 재조합 돌연변이 JEV(IC47)의 증식속도를 도시하는 도면이다. 제5도는 배양매질내에서 모 JEV 또는 재조합돌연변이 JEV(IC47)의 안정성을 도시하는 도면이다.
Claims (22)
- 엔벨로프단백질의 위치138에서 산성아미노산(글루탐산 또는 아스파르트산)이 염기성아미노산(라이신또는 아스파라긴)으로 대체된 것으로서 상응하는 야생형 JEV와 구별되는 분리된, 돌연변이 일본뇌염비루스(LEV).
- 제1항에 있어서, 야생형 JEV가 JEV 균주 JaOArS982이고, 산성아미노산이 글루탐산인 돌연변이 JEV.
- 제2항에 있어서, 염기성아미노산이 라이신인 돌연변이 JEV.
- 제3항에 있어서, JEV가 IC47(ATCC No.VR 2412)인 돌연변이 JEV.
- 제2항에 있어서, 염기성 아미노산이 아르기닌인 돌연변이 JEV.
- 엔벨로프단백질을 암호화하는 유전자내에서 하나 또는 두개의 뉴클레오티드 치환으로 구성되는 돌연변이에 의해 상응하는 야생형 JEV와 구별되는 돌연변이 JEV의 게놈을 암호화하는 분리된 DNA분자.
- 제6항에 있어서, 돌연변이에 의해 야생형 JEV의 엔벨로프단백질내의 위치138의 산성아미노산(글루탐산 또는 아스파르트산)이 돌연변이 JEV의 엔벨로프 단백질내의 위치138의 염기성 아미노산(라이신 또는 아르기닌)으로 대체된, 분리된 DNA분자.
- 제7항에 있어서, 염기성아미노산이 라이신인 분리된 DNA분자.
- 제8항에 있어서, pM433(ATCC No. 75491)의 cDNA삽입물을 포함하는 분리된 DNA분자.
- 제9항에 있어서, pM433 의 cDNA 삽입물 및 pH756(ATCC No. 75492)의 cDNA삽입물로 구성되는 분리된 DNA분자.
- (ａ)주형으로서 제6항의 DNA분자를 이용하여 완전길이의 비루스 게놈 RNA를 시험관내에서 합성하는 단계;(ｂ) 상기 비루스게놈 RNA를 이용하여 배양된 동물세포를 형질감염시켜 비루스를 제조하는 단계; 및 (ｃ)상기 배양된 동물세포로부터 비루스를 분리하는 단계를 포함하는, 배양된 동물 세포로부터 돌연변이 JEV를 제조하는 방법.
- (ａ)제1항의 돌연변이 JEV 및 (ｂ)약학적으로 허용가능한 비히클을 포함하는 약학조성물의 치료유효량을 투여함을 포함하는, 동물내에서 JEV에 대한 중화항체를 제조하는 방법.
- 제12항에 있어서, 돌연변이 JEV가 IC47(ATCC No. VR2412)인방법.
- 제12항에 있어서, 염기성 아미노산이 아르기닌인 방법.
- 제12항에 있어서, 약학조성물을 점막에 투여하는 방법.
- 제12항에 있어서, 약학조성물을 피하주사, 피내주사 및 근육내주사로 구성되는 군으로부터 선택되는 주사형태로 투여하는 방법.
- (ａ)제1항의 돌연변이 JEV 및 (ｂ)의 약학적으로 허용 가능한 비히클을 포함하며, 독성 일본뇌염 비누스에 대한 예방을 제공하는 약학조성물.
- 제17항에 있어서, 염기성 아미노산이 라이신인 약학조성물.
- 제18항에 있어서, 돌연변이 JEV가 IC47(ATCC No. VR2412)인 약학조성물.
- 제17항에 있어서, 염기성 아미노산이 아르기닌인 약학조성물.
- (ａ) pM343(ATCC No. 75490)의 cDNA삽입물을 포함하는 주형을 이용하여 제6항의 완전길이의 비루스게놈 RNA를 시험관내에서 합성하는 단계; (ｂ) 상기 비루스 게놈 RNA를 이용하여 동물세포의 단층배양물을 형질감염시켜 상기 단층배양물내에 여러 가지 크기의 비루스-함유플라크를 형성하는 단계; 및 (ｃ)상기 단층배양물내의 더작은 플라크로부터 비루스를 분리하는 단계를 포함하는, 돌연변이 JEV를 제조하는 방법.
- 야생형 플라비비루스의 엔벨로프 단백질내의 산성 아미노산(글루탐산 또는 아스파르트산)이 돌연변이 플라비비루스의 엔벨로프단백질내의 염기성아미노산(라이신 또는 아르기닌)으로 대체된 것으로서 상응하는 야생형 플라비비루스와 구별되며, 상기 플라비비루스는 무레이 발리뇌염비루스, 세인트루이스 뇌염비루스, 참진드기 매개된 뇌염비루스 및 중부유럽 뇌염비루스로 구성되는 군으로부터 선택되는 분리된, 돌연변이 플라비비루스.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개되는 것임.
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