KR960010862A - 재조합 인간 성장 호르몬의 개선된 정제 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 재조합 효모에 의해 생산된 인간 성장 호르몬을 효율적으로 정제하는 방법에 있어서, 효모 세포 파쇄액의 pH를 상승시킨 후 교반하여 가용성 단백질을 용해시키고; 용해액에 증류수를 가하여 부피를 증가시키고; 용액의 pH를 저하시킨 후 원심 분리하여 상층액을 얻고; 상층액의 pH를 상승시킨 후 원심 분리하여 얻은 상층액을 1차 음이온 교환 크로마토그래피, 젤 여과 크로마토그래피, 2차 음이온 교환 그로마토그래피 및 비극성 크로마토그래피를 통해 정제하는 단계들을 포함 하는 방법에 관한 것이다.

Description

재조합 인간성장 호르몬의 개선된 정제방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 본 발명의 방법에 의해 정제된 인간 성장 호르몬을 SDS-PAGE 한 결과를 나타낸 것이고,
제2도는 최종 정제된 인간 성장 호르몬을 C18역상 고압 액체 크로마토그래피(RP-HPLC)한 결과를 나타낸 것이다.

Claims (6)

  1. 효모에서 발현된 재조합 인간 성장 호르몬을 정제하는데 있어서,
    a) 효모 세포 파쇄액의 pH를 상승시킨 후 교반하여 가용성 단백질을 용해시키고,
    b) 단계 a)에서 얻은 용해액애 증류수를 가하여 부피를 증가시키고,
    c) 단계 b)에서 얻은 용액의 pH를 저하시킨 후 원심분리하여 상층액을 얻고,
    d) 단계 c)에서 얻은 상층액의 pH를 상승시킨 후 원심분리하여 상층액을 얻는 단계들을 포함하는 방법.
  2. 제 1 항에 있어서, 단계 d)에서 얻은 상층액을 1차 음이온 교환 크로마토그래피, 젤 여과 크로마토그래피, 2차 음이온 교환 크로마토그래피 및 비극성 크로마토그래피를 통해 정제하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  3. 제 1항에 있어서, 단계 a)에서 pH를 10 내지 12로 조정하고 30분 내지 1시간 동안 교반하는 방법.
  4. 제 1항에 있어서, 단계 b)에서 용해액의 부피를 3내지 5배 까지 증가시키는 방법.
  5. 제 1항에 있어서, 단계 c)에서 pH를 5.5 내지 6.5가 되도록 저하시키는 방법.
  6. 제 1항에 있어서, 단계 d)에서 pH를 8.5 내지 10.5가 되도록 상승시키는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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