KR950025096A - 신규한 내열성 티오피 디엔에이(Top DNA) 중합효소의 대량 제조방법 - Google Patents

신규한 내열성 티오피 디엔에이(Top DNA) 중합효소의 대량 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 고온성 균주 테르무스 테르모필루스(Thermus thermophilus)HB27로부터 분리된 신규한 내열성 Top DNA중합효소, 그의 유전자의 뉴클레오티드 서열 및 그에 의해 코드화된 아미노산 서열, 그의 유전자를 함유하는 발현 벡터 및 상기 발현벡터로 형질 전환된 대장균을 배양한 후 발현된 중합효소를 정제함을 포함하는 신규한 내열성 Top DNA 중합효소의 제조방법에 관한 것이다.

Description

신규한 내열성 티오피 디엔에이(Top DNA) 중합효소의 대량 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도의 A는 써머스 써모필러스(Thermus thermophilus) HB27의 염색체 DNA를 BamHI, BamHI/HindIII, HindIII, HindIII/BamHI, PstI/HindIII, PstI/BamHI의 제한효소로 절단하여 전기영동한 결과를 나타낸 것이고,
제1도의 B는 상기 전기영동 겔을 방사성 동위원소로 표지된 Tca DNA 중합효소 유전자와 하이브리드화(hybridization)한 결과를 나타낸 것이며,
제2도는 Top DNA 중합효소 유전자의 제한효소 지도와 함께 플라스미드 pTTB와 pTTH가 포함하고 있는 Top DNA중합효소 유전자의 위치를 나타낸 것이고,
제3도는 Top DNA 중합효소 유전자의 뉴클레오티드 서열과 그에 의해 코드화된 아미노산 서열을 나타낸 것이다.

Claims (11)

  1. 써머스 써모필러스(Thermus thermophilus)HB27로부터 유래된 내열성 DNA 중합효소.
  2. 제1항에 있어서, 제3도의 아미노산 서열을 갖는 Top DNA 중합효소.
  3. 제1항에 있어서, 제3도의 아미노산 서열중 아미노 말단의 일부를 제거하거나 변형시킨 아미노산 서열을 갖는 Top DNA 중합효소.
  4. 제1항의 DNA 중합효소를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 갖는 DNA.
  5. 제4항에 있어서, 제3도의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 DNA.
  6. 제4항에 있어서, 제3도의 뉴클레오티드 서열의 일부 또는 그이 변형을 포함하는 DNA.
  7. 제4항 내지 제6항중 어느 한 항의 DNA를 포함하는 발현벡터.
  8. 제7항에 있어서, 발현벡터 pTOP 또는 pTOPM.
  9. 제7항 또는 8항의 발현벡터로 형질전환된 대장균.
  10. 제9항에있어서, pTOP/대장균 MV1184(KCTC 8542P) 또는 pTOPM/대장균 MV1184 (KCTC 8543P).
  11. 제9항 또는 10항의 대장균을 배양함을 포함하는, 써머스 써모필러스 HB27 유래의 DNA 중합효소의 제조방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20010079080A (ko) * 2001-06-12 2001-08-22 김유삼 신규한 dna 중합효소의 dna 서열 및 그로부터 유래된 단백질
CN111733145A (zh) * 2020-07-01 2020-10-02 济南国科医工科技发展有限公司 重组酶的纯化方法

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