KR930703463A - 올리고뉴클레오타이드를 3' 표지시키기 위한 방법, 키트 및 반응성 지지체 - Google Patents
올리고뉴클레오타이드를 3' 표지시키기 위한 방법, 키트 및 반응성 지지체Info
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- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
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Abstract
제1양상으로, 본 발명은 올리고뉴클레오타이드의 자동 합성에 유용한 반응성 지지체를 수반한다. 반응성 지지체는 삼작용가 스페이서에 안정한 결합을 통해 공유적으로 결합된 표지 잔기(예: 합텐)를 포함한다. 표지된 삼작용가 스페이서 컴플렉스는 절단가능한 결합을 통해 고체 지지체에 공유적으로 결합된다. 삼작용가 스페이서중의 하나의 아암은 고체상을 결합하고, 다른 아암은 표지물을 결합하며, 제3의 아암은 표지된 올리고뉴클레오티드의 합성에 유용한 하이드록실 그룹을 제공한다. 합성완결시, 절단가능한 결합을 분해시켜 표지된 올리고뉴클레오타이드를 수득한다. 올리고뉴클레오타이드의 표지 방법 및 유용한 키트도 제공된다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
Claims (20)
- 하이드록실 그룹을 포함하는 삼작용가 스페이서에 안정한 결합을 통해 공유적으로 결합되어 표지된 링커 컴플렉스를 형성하는 표지 잔기를 포함하고 표지된 링커 컴플렉스가 절단가능한 결합을 통해 고체 지지체에 공유적으로 결합되는, 올리고뉴클레오타이드 합성에 유용한 유리되거나 보호된 하이드록실 그룹을 갖는 반응성 지지체.
- 제1항에 있어서, 하기 일반식을 갖는 반응성 지지체.상기식에서, n 및 m은 독립적으로 1 내지 약 30의 정수이고, p는 0 내지 약 30의 정수이며, G는 H 또는 보호 그룹이고, Z는 절단가능한 결합을 갖는 연결 그룹이다.
- 제1항에 있어서, 고체 지지체가 조절된 세공 유리 및 중합체 수지로 이루어진 그룹중에서 선택되는 반응성 지지체.
- 제1항에 있어서, n 및 m이 독립적으로 1내지 약8의 정수이고, p가 0 내지 약8의 정수인 반응성 지지체.
- 제4항에 있어서, n 및 m이 독립적으로 1내지 약3의 정수이고, p가 0 내지 약3의 정수인 반응성 지지체.
- 제1항에 있어서, Z가 산에 안정하고, 염기에 불안정한 절단가능한 결합을 포함하는 반응성 지지체.
- 제1항에 있어서, Z가 에스테르 연결부를 포함하는 절단가능한 결합을 포함하는 반응성 지지체.
- 제1항에 있어서, 표지 잔기가 합텐인 반응성 지지체.
- 제1항에 있어서, 삼작용가 스페이서가 사이클릭 또는 헤테로사이클릭 분자인 반응성 지지체.
- ⒜ 3개의 작용기(이중 제1작용기는 하이드록실 그를 또는 보호된 하이드록실 그룹이고, 이들 각각은 상이한 반응성을 갖거나 갖도록 제조될 수 있다)를 갖는 삼작용가 링커를 제공하고, ⒝삼작용가 링커의 제2작용기를 제2작용기와 반응할 수 있는 반응성 그룹을 갖는 표지 잔기와 반응시켜 표지 잔기를 삼작용가 링커에 연결시키는 안정한 결합을 형성시킨 후, ⒞ 삼작용가 링커가 절단가능한 결합을 통해 고체 지지체에 공유적으로 결합되는 조건하에, 삼작용가 링커의 제3작용기를 삼작용가 링커에 절단가능한 결합을 부여할 수 있는 하나 이상의 시약, 및 작용화된 고체 지지체와 반응시킴을 특징으로 하여, 표지된 올리고뉴클레오타이드를 합성하는 데 유용한 표지물 및 하이드록실 그룹을 갖는 반응성 지지체를 제조하는 방법.
- 제10항에 있어서, 삼작용가 링커의 제2 및 제3 반응성 작용기가 독립적으로 하이드록실, 아미노 및 티올로 이루어진 그룹중에서 선택되는 방법.
- 제10항에 있어서, 삼작용가 링커에 절단가능한 결합을 부여할 수 있는 단계 C의 시약이 절단가능한 에스테르를 부여하는 숙신산 무수물 및 말레산 무수물로 이루어진 그룹중에서 선택되는 방법.
- 제10항에 있어서, 삼작용가 링커가 하기 일반식을 갖는 방법.상기식에서, n 및 m은 독립적으로 1 내지 약 30의 정수이고, p는 0 내지 약 30의 정수이며, G는 H 또는 보호 그룹이고, X 및 Y는 독립적으로 하이드록실, 아미노, 티올 및 카복실로 이루어진 그룹중에서 선택된다.
- 제10항의 방법에 의해 제조된 반응성 지지체.
- ⒜ 3개의 작용기(이중 제1작용기는 하이드록실 그를 또는 보호된 하이드록실 그룹이고, 이들 각각은 상이한 반응성을 갖거나 갖도록 제조될 수 있다)를 갖는 삼작용가 링커를 제공하고, ⒝ 삼작용가 링커의 제2작용기를 제2작용기와 반응할 수 있는 반응성 그룹을 갖는 표지 잔기와 반응시켜 표지 잔기를 삼작용가 링커에 연결시키는 안정한 결합을 형성시킨 후, ⒞ 삼작용가 링커가 절단가능한 결합을 통해 고체 지지체에 공유적으로 결합되는 조건하에, 삼작용가 링커의 제3작용기를 삼작용가 링커에 절단가능한 결합을 부여할 수 있는 하나 이상의 시약, 및 작용화된 고체 지지체와 반응시키고, ⒟ 하이드록실 그룹을 탈보호시키며, 이어서 ⒠ 보호된 하이드록실 그룹으로부터 올리고뉴클레오타이드를 합성함을 특징으로 하여, 고체 지지체상에 합성된 올리고뉴클레오타이드의 3´말단을 표지하는 방법.
- 제15항에 있어서, 합성된 올리고뉴클레오타이드를 절단가능한 결합에서 지지체로부터 절단시키는 추가의 단계를 포함하는 방법.
- 제15항에 있어서, 삼작용가 링커의 제2 및 제3 반응성 작용기가 독립적으로 하이드록실, 아미노, 티올 및 카복실로 이루어진 그룹중에서 선택되는 방법.
- 제15항에 있어서, 삼작용가 표지 생성물에 절단가능한 결합을 부여할 수 있는 단계(b)의 시약이 숙신산 무수물 및 말레산 무수물로 이루어진 그룹중에서 선택되는 방법.
- ⒜ 표지물이 합텐을 포함하는, 제1항의 반응성 지지체 및 ⒝ 검정가능한 마커 또는 고체상에 결합된 항합텐 항체를 포함하는 키트.
- 제19항에 있어서, 분리 용기에 데옥시리보뉴클레오사이드 트리포스페이트 또는 리보뉴클레오사이드 트리포스페이트를 추가로 포함하는 키트.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/630,908 | 1990-12-20 | ||
| PCT/US1991/009657 WO1992011388A1 (en) | 1990-12-20 | 1991-12-19 | Methods, kits and reactive supports for 3' labeling of oligonucleotides |
| US63090892A | 1992-12-20 | 1992-12-20 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR930703463A true KR930703463A (ko) | 1993-11-30 |
| KR950014923B1 KR950014923B1 (ko) | 1995-12-18 |
Family
ID=66865847
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1019930701867A KR950014923B1 (ko) | 1990-12-20 | 1991-12-19 | 올리고뉴클레오타이드를 3'표지시키기 위한 방법, 키트 및 반응성 지지체 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR950014923B1 (ko) |
-
1991
- 1991-12-19 KR KR1019930701867A patent/KR950014923B1/ko active IP Right Grant
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR950014923B1 (ko) | 1995-12-18 |
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