KR930702507A - C형 간염 바이러스에 대한 모노클로날 항체 및 이의 사용 방법 - Google Patents

C형 간염 바이러스에 대한 모노클로날 항체 및 이의 사용 방법

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Abstract

C형 간염 바이러스 C-100 단백질, C형 간염 바이러스 33C 단백질 및 C형 간염 바이러스 CORE단백질 어느것과도 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체, 및 이들 모노클로날 항체를 생성하는 하이브리도마. 이들 모노클로날 항체를 사용하는 방법 및 이들 항체를 함유하는 분석 키트도 제공된다.

Description

C형 간염 바이러스에 대한 모노클로날 항체 및 이의 사용 방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1A는 본 발명에 따른 하이브리도마의 생성을 위한 면역원으로 사용된, HCV게놈상의 재조합 단백질의 위치 및 본 발명에 따른 모노클로날 항체의 에피토프 유전자 지도 작성을 위해 사용된 아단편의 위치를 나타내는 위치 선정도이다, 제1B도는 비-구조(NS)유전자 및 구조 유전자, 코어(C)및 외피(E)를 나타내는 HCV게놈/지도이다, 제2A도는 모노클로날 항체 H11C130의 특이적 결합 및 에피토프 유전자 지도, 작성을 설명하는 웨스턴 블롯 분석의 사진 촬영도이며, 여기에서 제1레인은 pHCV29(1192 내지 1457번 아미노산), 제2레인은 33Ca·CKS(1192 내지 1331번 아미 제3레인은 CKS이다, 제2E도는 모노클로날 항체 H28C110의 특이적 결합 및 에피토프 유전자 지도 작성을 설명하는 웨스턴 블롯 분석의 사진 촬영도이며, 여기에서 제1레인은 C-100B·CKS(1676 내지 1790번 아미노산), 제2레인은 C-100C·CS(1789 내지 1863번 아미노산), 제3레이온 C-100D·CKS(1861 내지 1931번 아미노산), 제4레인은 C-100(PL, 1676 내지 1790번 아미노산), 및 제5레이온 CKS이다. 제2F도는 모노클로날 항체 H4C20의 특이적 결합 및 에피토프유전자 지도작성을 설명하는 웨스톤 블롯 분석의 사진 촬영도이며, 여기에서 제1레인은 C-100B·CKS(1676 내지 1790번 아미노산), 제2레인은 C-100C·CS(1789 내지 1863번 아미노산), 제3레인은 C-100·CKS(1861 내지 1931번 아미노산), 제4레인은 C-100S(PL, 1676 내지 1790번 아미노산), 및 제5레인은 CKS이다. 제3도는 모노클로날 항체 H28C110에 의하여 인지된 HCV게놈의 에피토프 특이성 및 아미노산 서열을 설명하는, 모노클로날 항체 H28C110의 중첩성 6량체 펩타이드(1694 내지 1735번 아미노산)을 사용한 PEPSCAN분석의 양태도이다.

Claims (26)

  1. HCV단백질 C-100에는 특이적을 결합하나 HCV단백질 33C및 CORE와는 현저하게 결합하지 않는 모노클로날 항체.
  2. 제1항에 있어서, ATCC 기탁번호 HB 10593 및 HB 10587로 이루어진 그룹중에서 선택된 하이브리도마에 의해 분비되는 모노클로날 항체.
  3. HCV단백질 33C에는 특이적으로 결합하나 HCV단백질 C-100 및 CORE와는 현저하게 결합하지 않는 모노클로날 항체.
  4. 제3항에 있어서, ATCC 기탁번호 HB 10594, HB 10589, HB 10607 및 HB 10600으로 이루어진 그룹중에서 선택된 하이브리도마에 의해 분비되는 모노클로날 항체.
  5. HCV CORE 단백질에는 특이적으로 결합하나 HCV단백질 C-100 및 33C와는 현저하게 결합하지 않는 모노클로날 항체.
  6. 제5항에 있어서, ATCC기탁번호 HB 10592, HB 10588, HB 10608 HB 10604 및 HB 10602로 이루어진 그룹중에서 선택된 하이브리도마에 의해 분비되는 모노클로날 항체.
  7. HCV단백질 C-100에는 특이적으로 결합하나 HCV 33C 및 HCV CORE 단백질과는 현저하게 결합하지 않는 모노클로날 항체를 생성하는 하이브리도마.
  8. 제7항에 있어서, ATCC 기탁번호 HB 10593 및 HB 10587로 이루어진 그룹중에서 선택된 하이브리도마.
  9. HCV단백질 33C에는 특이적으로 결합하나 HCV C-100 및 HCV CORE 단백질과는 현저하게 결합하지 않는 모노클로날 항체를 생성하는 하이브리도마.
  10. 제9항에 있어서, ATCC 기탁번호 HB 10594, HB 10589, HB 10607 및 HB 10600로 이루어진 그룹중에서 선택된 하이브리도마.
  11. HCV CORE 단백질에는 특이적으로 결합하나 HCV C-100 및 HCV 33C단백질과는 현저하게 결합하지 않는 모노크로날 항체를 생성하는 하이브리도마.
  12. 제11항에 있어서, ATCC기탁번호 HB 10592, HB 10588, HB 10608 HB 10604 및 HB 10602로 이루어진 그룹중에서 선택되는 하이브리도마.
  13. (a)시험 샘플을 항체가 HCV단백질에 특이적으로 결합하는 고체성에 결합된 HCV C-100단백질, 또는 HCV 33C단백질 또는 HCV CORE단백질에 특이적으로 결합하는 항-HCV항체와 접촉시켜 혼합물을 형성시키고; b)형성된 혼합물을 잠시동안, 항원/항체 복합체를 형성시키기에 충분한 조건하에서 배양하며; c)형성된 복합체를 HCV C-100단백질, 또는 HCV 33C단백질 또는 HCV CORE 단백질에 특이적으로 결합하는 항-HCV 항체에 결합된, 측정가능한 검출성 시그날을 발생시킬 수 있는 시그날-발생 화합물을 포함하는 지시제와 접촉시켜 2차 혼합물을 형성시키며; d)형성된 2차 혼합물을 잠시동안, 항체/항원/항체 복합체를 형성시키기에 충분한 조건하에서 배양한 다음; e)발생된 측정가능한 시그날을 검출해냄으로써 시험 샘플내 C형 간염 바이러스의 존재 유무를 측정함을 특징으로 하여, C형 간염 바이러스를 함유할 수 있는 시험 샘플내 C형 간염 바이러스 HCV C-100단백질, 또는 HCV 33C단백질 또는 HCV CORE 단백질의 존재 유무(여기에서, 시험 샘플에 존재하는 HCV C-100단백질, 또는 HCV 33C단백질 또는 HCV CORE단백질의 양은 측정 가능한 시그날에 비례한다)를 측정하는 방법.
  14. a)HCV항체를 함유하는 것으로 추정되는 시험 샘플을 HCV 33C, C-100 또는 HCV CORE 단백질로 피복시킨 고체상 및 시그날-발생 화합물 및 전술한 단백질에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체를 포함하는 지시제와 잠시 동안, 시험 샘플과 고체상의 항원/항체 복합체 및/또는 지시제와 고체상의 항원/항체 복합체를 형성시키기에 충분한 조건하에서 접촉시키고; b)시험 샘플내 HCV항체의 존재 유무를 지시하도록, 음성 시험 샘플로부터 발생된 시그날과 비교하여 고체상에 대한 지시제 결합의 감소를 검출해냄으로써 시험 심플에 존재하는 HCV항체의 존재 유무를 측정함을 특징으로 하여, 시험 샘플에 존재할 수 있는 HCV항체의 존재 유무 및 이의 양을 측정하는 경쟁적 검정 방법.
  15. 제13항에 있어서, 단계(a)와 (c)를 동시에 수행하는 방법.
  16. 제13항에 있어서, 고체상에 결합된 항-HCV항체가 폴리클로날 항체인 방법.
  17. 제13항 또는 제14항에 있어서, 시그날-발생 화합물이 발광성 화합물, 화학발광성 화합물, 효소 및 방사능 원소로 이루어진 그룹중에서 선택되는 방법.
  18. 제13항에 있어서, 고체상에 결합된 항-HCV항체가 모노클로날 항체인 방법.
  19. 제13항에 있어서, 지시제가 폴리클로날 체에 결합된 시그날-발생 화합물을 포함하는 방법.
  20. 제13항에 있어서, 지시제가 모노클로날 항체에 결합된 시그날-발생 화합물을 포함하는 방법.
  21. 제14항, 제18항 또는 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 모노클로날 항체가 ATCC 기탁번호 HB 10593, HB 10587, HB 10594, HB 10589, HB 10592, HB 10588, HB 10607, HB 10600, HB 10608, HB 10604 및 HB 10602로 이루어진 그룹중에서 선택된 하이브리도마에 의해 분비되는 모노클노날 항체인 방법.
  22. HCV C-100 단백질, HCV 33C 단백질 또는 HCV CORE 단백질에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체를 함유하는 용기를 포함함을 특징으로 하는, 시험 샘플내의 HCV존재 유무 검출용 검정 키트.
  23. 제22항에 있어서, 모노클로날 항체가 ATCC 기탁번호 HB 10593, HB 10587, HB 10594, HB 10598, HB 10592, HB 10588, HB 10607, HB 10600, HB 10608, HB 10604 및 HB 10602 또는 이들의 배합물로 이루어진 그룹중에서 선택된 하이브리도마에 의해 분비되는 검정 키트.
  24. ATCC 기탁번호 HB 10593, HB 10587, HB 10594, HB 10589, HB 10592, HB 10588, HB 10607, HB 10600, HB 10608, HB 10604 및 HB 10602로 이루어진 그룹중에서 선택되는 하이브리도마 세포주.
  25. ATCC 기탁번호 HB 10593, HB 10587, HB 10594, HB 10589, HB 10592, HB 10588, HB 10607, HB 10600, HB 10608, HB 10604 및 HB 10602로 이루어진 그룹중에서 선택되는 모노클로날 항체.
  26. ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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