KR930702365A - 비-a형, 비-b형 간염 바이러스 항원, 진단 방법 및 백신 - Google Patents
비-a형, 비-b형 간염 바이러스 항원, 진단 방법 및 백신Info
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Abstract
본 발명은 재조합 비-A형, 비-B형 구조 단백질 또는 융합 단백질을 암호화하는 DNA절편 및 이들 단백질을 발현할 수 있는 재조합 DNA(rDNA)분자에 관한 것이다. rDNA로 형질전환된 세포, 이들 단백질을 제조하는 방법, 이들 단백질을 포함하는 조성물, 및 진단 방법 및 시스템, 및 백신에서의 이들의 용도도 또한 기술되어 있다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 HCV-Hc59 게놈의 도식 및 0 내지 39의 HCV-Hc59cDNA 클론의 위치를 나타낸다. 플라비바이러스에 의해 암호화되는 단백질의 배열 및 HCV 암호화된 게놈에서 추정의 도메인이 나타나 있다. Dengue타입 2 Ns3 바이러스 및 Ccrnation mottle 바이러스(CARMV)과 아미노산 상동성을 갖는 영역이 각각및로 나타나 있다.
Claims (48)
- Hutch 아그룹에 속하는 비-A형, 비-B형 간염 바이러스(NANBV)의 게놈을 암호화하고, (a) 서열 확보번호 46에 나타난 Hutch c59 DNA 서열, (b) DNA 서열 (a)와 동일한 폴리단백질을 암호화하나 DNA 서열 (a)와는 유전 코드의 축퇴에 상이한 DNA서열, (c) DNA 서열(a) 또는 (b)와 하이브리드화하고, 실질적으로 동일한 특이적 면역 특성을 나타내는 NANBV Hut c59 균주(strain)의 돌연변이체 또는 변이체를 나타내는 DNA 서열, (d) DNA 서열 (a) 또는 (b)에 하이브리드화하고, Hutch 아그풉의 면역 특성을 갖는 NANBV 스트레인을 나타내는 DNA 서열의 그룹중에서 선택되는 DNA서열.
- 제1항의 DNA 서열의 일부분에 상응하는 약 10 내지 100개의 뉴클레오타이드 길이를 갖고, HCV-1, HCV-BK, HCV-J, HC-J1, HC-J4, HCV-JH 및 HCV-Hh로 이루어진 그룹중에서 선택된 NANBV스트레인의 뉴클레오타이드 서열과 비교하여 1개이상의 뉴클레오타이드가 차이나며, 이러한 뉴클레오타이드의 차이가 침묵(silent) 돌연변이 또는 1개 이상의 아미노산에서 차이를 유발하는 돌연변이인 DNA 서열.
- NANBV 게놈의 가변 영역 또는 이의 일부분을 암호화하고, 이 영역 또는 이의 일부분이 (a) V가변 영역 : HVTGGNAGRTTAGLVGLLTPGAKQNI-(46:386-411), (b) V의 일부분:-NAGRTTAGLVGLLT-(46:391-404), (c) V1가변영역 : -VATRDGKLPTTQLRRHIDLLVGSAT
- LGSAL-(46:246-275), (d) V1일부분 : -VATRDGKLPTT-(46:246-256), (e) V2가변영역 : -LASCRRLTDFAQGWGPISYANGSGLDE-(46:456-482), (f) V3일부분 : -RLTDFA-(46:461-466), (g) V2일부분 : -SYANGSGLDE-(46:473-482), 및 (h)V3가변영역 : -STSGITGDN
- TTTSSEPAPSGCPPD-(46:2356-2379)로 이루어진 그룹중에서 선택된 아미노산 서열 (이의 서열 확인 번호 및 상용하는 잔기가 괄호안에 나타나있다)를 갖는 DNA 서열.
- NANBV 게놈으로부터 유도되고, 제3항의 DNA 서열중 어느 하나에 의해 암호화되는 가변 영역 또는 이의 일부분에 상용하는 가변 영역 또는 이의 일부분을 암호화하는 DNA 서열.
- 제3항 또는 4항의 DNA 서열을 포함하는 약 18개 내지 200개의 뉴클레오타이드 길이를 갖는 DNA 서열.
- 제3항 또는 5항에 있어서, 서열 확인 번호 46에 나타난 서열에 상응하는 DNA 서열.
- 서열 확인 번호 1의 잔기 1 내지 120에 포함된 아미노산 서열을 갖는 NANBV 켑시드 구조 단백질을 암호화하거나 아 단백질의 면역학적 활성 부분을 암호화하는 DNA 서열.
- 제7항의 DNA 서열에 하이브리드화하고, NANBV 캡시드 구조 단백질 또는 이의 면역학적 활성 부분을 암호화하는 DNA 서열.
- 서열 확인 번호 1의 잔기 1내지 20에 포함된 아미노산 서열을 갖는 NANBV캡시드 구조 단백질의 일부분을 암호화하는 DNA 서열.
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- 제14항의 DNA 서열에 하이브리드화하고, NANBV캡시드 구조 단백질의 일부분을 암호화하거나 이 단백질의 면역학적 활성 부분을 암호화하는 DNA 서열.
- 서열 확인 번호 1의 잔기 121내지 176에 포함된 아미노산 서열을 갖는 NANBV캡시드 구조 단백질의 일부분을 암호화하거나 이 단백질의 면역학적 활성 부분을 암호화하는 DNA 서열.
- 서열 확인 번호 1의 잔기 1내지 326에 포함된 아미노산 서열을 암호화하거나 이 단백질의 면역학적 활성 부분을 암호화하는 DNA 서열.
- 제1항 내지 17항중 어느 한 항의 DNA 서열을 포함하는 DNA 서열.
- 제1항 내지 18항중 어느 한 항에 따른 DNA 서열에 작동적으로 결합된 벡터를 포함하는 재조합 DNA 분자.
- 제19항에 있어서, 벡터가 발현 벡터이고, 재조합 DNA 분가가 적합한 숙주내에서 단백질을 발현할 수 있으며, NANBV구조 단백질이 서열 확인 번호 2의 잔기 1내지 잔기 315에 나타난 아미노산 잔기 서열을 갖는 제조합 DNA 분자.
- 제19항에 있어서, 벡터가 발현 벡터이고, 재조합 DNA 분가가 적합한 숙주내에서 단백질을 발현할 수 있으며, NANBV구조 단백질이 서열 확인 번호 3의 잔기 1내지 잔기 252에 나타난 아미노산 잔기 서열을 갖는 제조합 DNA 분자.
- 제19항에 있어서, 벡터가 발현 벡터이고, 재조합 DNA 분가가 적합한 숙주내에서 단백질을 발현할 수 있으며, NANBV구조 단백질이 서열 확인 번호 4의 잔기 1내지 잔기 252에 나타난 아미노산 잔기 서열을 갖는 제조합 DNA 분자.
- 제19항에 있어서, 벡터가 발현 벡터이고, 재조합 DNA 분가가 적합한 숙주내에서 단백질을 발현할 수 있으며, NANBV구조 단백질이 서열 확인 번호 6의 잔기 1내지 잔기 271에 나타난 아미노산 잔기 서열을 갖는 제조합 DNA 분자.
- 제1항 내지 18항중 어느 한 항에 따른 DNA 서열 또는 제19항 내지 제23항중 어느 한 항에 따른 재조합 DNA 분자를 포함하는 형질전환 숙주 세포.
- 제1항 내지 18항중 어느 한 항에 따른 DNA 서열 또는 제19항 내지 제23항중 어느 한 항에 따른 재조합 DNA 분자에 의해 암호화되는 폴리펩타이드 또는 펩타이드.
- 제25항에 있어서, 약 7개 내지 약 200개의 아미노산 잔기 길이를 갖는 폴리펩타이드 또는 펩타이드.
- 제25항에 있어서, 20개 이상의 아미노산 길이를 갖는 NANBV 구조 단백질인 폴리펩타이드 또는 펩타이드.
- 제25항에 내지 27항중 어느 한 항에 따른 하나 이상의 폴리펩타이드 또는 펩타이드를 포함하는 조성물.
- 제25항 내지 27항중 어느 한 항에 따른 폴리펩타이드 또는 펩타이드와는 면역반응하나 NANBV 분리물 HCV-1, HCV-BK, HCV-J, HC-J1, HC-J4, HCV-JH 또는 HCV-Hh 와는 면역반응하지 않는 항체.
- NANBV의 Hutch c59 분리물 또는 이의 일부분과 면역반응하나 NANBV 분리물 HCV-1, HCV-BK, HCV-J, HC-J1, HC-J4, HCV-JH 또는 HCV-Hh 와는 면역반응하지 않는 항체.
- 제25항 내지 27항중 어느 한 항에 따른 하나 이상의 폴리펩타이드 또는 펩타이드를 1회 이상의 검정을 수행하기에 충분한 양으로 포함하는, NANBV구조 항원에 대한 항체의 존재에 대해 체액 샘플을 검정하기 위한 진단 키트.
- 제31항에 있어서, 폴리펩타이드 또는 펩타이드를 고체 메트릭스에 고정시킨 진단 키트.
- (ⅰ) (a) NANBV의 Hutch c59 분리물, (b) 제25항 내지 27항중 어느 한 항에 따른 폴리펩타이드 또는 펩타이드와는 면역 반응하나, (ⅱ) (c) NANBV 분리물 HCV-BK, HCV-J, HC-J1, HC-J4, HCV-JH 또는 HCV-Hh 또는 (d) C-100항원관느 면역반응하지 않는, 항-NANBV 구조 단백질 항체를 1회이상의 검정을 수행하기에 충분한 양으로 포함하는, NANBV 구조 항원의 존재에 대해 체액 샘플을 검정하기 위한 진단 키트.
- 제33항에 있어서, 항체를 고체 메트릭스에 고정시킨 진단 키트.
- (a) 체액 샘플을 제25항 내지 27항중 어느 한 항의 폴리펩타이드 또는 펩타이드와 혼합하여 수성 면역반응 혼합물을 형성하고, (b) 체액샘플중에 존재하는 항체가 폴리펩타이드 또는 펩타이드와 면역반응하여 면역반응 생성물을 형성하기에 충분한 시간 동안 수성 면역반응 혼합물을 유지시킨후, (c) 형성된 면역반응 생성물의 존재 및 이로써 항체의 존재를 검출함을 특징으로 하여, NANBV의 구조항원에 대한 항체의 존재에 대해 체액샘플을 검정하는 방법
- 제35항에 있어서, 폴리펩타이드 또는 펩타이드를 고체 메트릭스에 고정시키는 방법.
- 제36항에 있어서, 단계 (c)에서의 검출이 (i) 단계 (c)에서 형성된 면역반응 생성물을 특정 결합제 및 표지물을 포함하는 표지된 특정 결합제와 혼합하여 표지된 혼합물을 형성하고, (ⅱ) 존해하는 면역반응 생성물이 표지된 특정 결합제와 결합하여 표지된 생성물을 형성하기에 충분한 기간동안 표지된 혼합물을 유지시킨후, (ⅲ) 형성된 표지된 생성물 및 이로써 면역반응 생성물의 존재를 검출하는 단계를 포함하는 방법.
- 제37항에 있어서, 특정 결합제가 단백질 A 및 항체항-사람 1gG 및 항-사람1gM중 하나 이상으로 이루어 진 그룹 중에서 선택되는 방법.
- 제37항에 있어서, 표지물이 란타나이드 킬레이트몰, 바이오틴, 효소 및 방사성 동위원소로 이루어진 그룹중에서 선택되는 방법.
- 신체 샘플을 제1항 내지 18항중 어느 한항에 따른 서열을 갖는 폴리뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드와 혼합하여 수성 하이브리드화 혼합물을 형성하고, (b) 신체 샘플중에 존재하는 NANBV폴리핵산이 폴리뉴클레오타이드 또는 뉴클레오타이드와 하이브리드화하여 하이브리드화 생성물을 형성하기에 충분한 하이브리드화 조건 및 기간 동안 수성 하이브리드화 혼합물을 유지시킨후, (c) 형성된 하이브리드화 생성물의 존재 및 이로써 NANBV폴리핵산의 존재를 검출함을 특징으로 하여, NANBV폴리핵산의 존재에 대해 신체 샘플을 검정하는 방법.
- 체액 샘플을 제29항 또는 30항에 따른 항체와 반응시킴을 특징으로 하여, NANBV구조항원의 존재에 대해 체액 샘플을 검정하는 방법.
- 제25항 내지 27항중 어느 한 항에 따른 폴리펩타이드 또는 펩타이드 (이는 단독으로 존재하거나 항원성담체에 결합된다)의 면역학적 유효량을 포함하고 양제학적으로 허용되는 부형제중에 분산된 접종물.
- 제25항 내지 27항중 어느 한 항에 따른 폴리펩타이드 또는 펩타이드 (이는 단독으로 존재하거나 항원성담체에 결합된다)의 면역학적 유효량을 포함하고 양제학적으로 허용되는 부형제중에 분산된 백신.
- (a) 제24항에 따른 형질전환된 숙주 세포를 포함하는 영양 배지로 구성된 배양물로 시작하여 (b) 형질전환 숙주 세포가 NANBV 구조 단백질을 발현하기에 충분한 기간동안 배양물을 유지시킨후, (c) 배양물로부터 NANBV 구조 단백질을 회수함을 특징으로 하여, NANBV구조 단백질을 제조하는 방법.
- (a) 제42항에 따른 접종물 또는 제43항에 따른 백신을 포유동물에 투여하고 (b) 포유동물이 면역학적으로 반응하여 항-NANBV 항체를 생성하기에 충분하 기간 동안 포유동믈을 유지시킴을 특징으로 하여, 포유동물에서 NANBV 와 면역반응하는 항체를 유도하는 방법.
- ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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