KR930021787A - 재조합 대장균을 이용한 가용성 림포톡신의 제조방법 - Google Patents

재조합 대장균을 이용한 가용성 림포톡신의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 인체 림포톡신을 암호화하는 유전자를 포함하는 재조합 플라스미드에 의해 형질전환된 대장균을 18내지 22℃에서 배양하여 가용성 림포톡신을 제조하는 방법 및 제조된 림포톡신을 양이온 및 음이온 교환 컬럼크로마토그라피하여 신속하게 고수율 고순도로 정제된 림포톡신을 제조하는 방법을 제공한다.

Description

재조합 대장균을 이용한 가용성 림포톡신의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 림포톡신을 암호화하는 유전자를 함유하는 플라스미드인 pLTI의 제조과정을 나타내는 계통도이다.
제2도는 플라스미드 pLTI의 제한효소 지도이다.
제3도는 림포톡신의 발현용 플라스미드인 pT7LT3의 제조과정을 나타내는 계통도이다.

Claims (10)

  1. 인체 림포톡신을 암호화하는 유전자를 포함하는 재조합 플라스미드에 의해 형질전환된 대장균을 18 내지 22℃에서 배양함을 특징으로 하는, 대장균을 이용한 가용성 림포톡신의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 대장균을 20 내지 21℃에서 배양함을 특징으로 하는 방법.
  3. 인체 림포톡신을 암호화하는 유전자를 포함하는 재조합 플라스미드 pT7LT3(KCTC 8513P).
  4. 제3항의 플라스미드에 의해 형질 전환된 대장균.
  5. 제4항에 있어서, 이 콜라이 MM294/pT7LT3(KCTC 8513P).
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 재조합 플라스미드로 pT7LT3(KCTC 8513P)을 사용하는 방법.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, 플라스미드 pT7LT3에 의해 형질전환된 대장균을 사용하는 방법.
  8. 제7항에 있어서, 형질전환된 대장균으로, 이 콜라이 MM294/pT7LT3(KCTC 8513P)를 사용하는 방법.
  9. 가용성 림포톡신이 생산된 대장균을 수확후 분쇄용 완충액에 용해시키고 초음파처리로 세포막을 분쇄시킨후, 원심 분리하여 세포가 제거된 조추출액을 수득하고, 이를 음이온 교환 컬럼 크로마토그라피 및 양이온 교환컬럼 크로마토그라피하는 단계를 포함하는, 정제된 림포톡신의 제조방법.
  10. 제9항에 있어서, 음이온 교환 컬럼으로 모노 큐 컬럼을 사용하고, 양이온 교환 컬럼으로 모노 에스 컬럼을 사용하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개되는 것임.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR100469661B1 (ko) * 2000-03-28 2005-02-02 한스바이오메드 주식회사 이식용 무세포 진피층 및 이의 제조방법

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