KR920702418A - 염증국소 유래 포스포리파제 a_2저해 단백생산을 위한 플라스미드, 미생물세포 및 그 단백의 제조 및 사용 - Google Patents

염증국소 유래 포스포리파제 a_2저해 단백생산을 위한 플라스미드, 미생물세포 및 그 단백의 제조 및 사용

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KR920702418A
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dna
phospholipase
plasmid
fragment
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KR1019920700763A
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요리마사 수와
아쯔시 이마이즈미
마사히 오까다
요지 스즈끼
이찌로 구도
게이조 이노우에
찌에꼬 아즈마
마꼬또 무라까미
Original Assignee
이다가끼 히로시
데이진 가부시끼가이샤
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
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Abstract

내용 없음

Description

염증국소 유래 포스포리파제 A2저해 단백생산을 위한 플라스미드, 미생물세포 및 그 단백의 제조 및 사용
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 쥐 C3α웅합 단백 발현 플라스미드의 구축의 개략도이다. 제2도(a) 및 (b)는 쥐 Met-C3dg발현 플라스미드의 구축의 개략도이다. 제3도 (a) 및 (b)는 사람 Met-C3dg 발현 플라스미드의 구축의 개략도이다.

Claims (21)

  1. 염증국소유래 포스포리파제 A2저해 단백을 코드하는 DNA배열과, 이 단백의 발현을 조절하는 프로모터 기능을 갖는 DNA 배열을 함유하여 구성된 플라스미드.
  2. 제1항에 있어서, 상기 저해 단백을 코드하는 DNA 배열이, 쥐 또는 사람에서 유래하는 플라스미드.
  3. 제1항에 있어서, 상기 저해 단백을 코드하는 DNA 배열이, 배열 번호1에 나타내는 아미노산 배열 또는 이 배열에 있어서 1이상의 아미노산 잔기가 치환, 결실 또는 새로 삽입된 아미노산 배열을 함유하는 단백을 코드하는 DNA 배열인 플라스미드.
  4. 제1항에 있어서 상기 저해단백을 코드하는 DNA 배열이 , 배열 번호 3에 나타내는 아미노산 배열 또는 이 배열에 있어서 1이상의 아미노산 잔기가 치환, 결실 또는 새로 삽입된 아미노산 배열인 플라스미드.
  5. 제3항에 있어서, 상기 저해 단백을 코드하는 DNA배열이, 배열번호 2에 나타내는 DNA 배열인 플라스미드.
  6. 제4항에 있어서, 상기 저해단백을 코드하는 DNA배열이, 배열번호 4에 나타내는 DNA배열인 플라스미드.
  7. 제5항에 있어서, 상기 저해단백을 코드하는 DNA 배열이, 쥐간 cDNA λgt11라이브러리를 EcoRI로 소화하여 얻어지는 2.0 kbp의 DNA 단편과, 또 하나의 0.7 kbp의 DNA 단편을 BamHI로 소화하여 얻어지는 0.1 kbp의 DNA 단편으로부터 재구축된 것인 플라스미드.
  8. 제1항에 있어서, 상기 저해 단백을 코드하는 DNA 단편이, 제7항 기재의 2.0kbp의 DNA 단편에서 유래하고, 이 DNA단편을 FokI 소화함으로서 얻어지는 1.0kbp의 EcoRI-FokI단편의 상류역에 개시코돈의 하류에 쥐 C2dg유전자의 5' 말단 59를 연결하여 조제한 2개 사슬 DNA를 라이게이션하고, 하류역에 종결 코돈의 상류에 쥐 C3dg 유전자의 3'말단 14bp를 연결하여 조제한 2개 사슬 DNA를 라이게이션하여 재 구축한 DNA배열인 플라스미드.
  9. 제1항에 있어서, 상기 저해단백을 코드하는 DNA단편이, 사람 cDNA클론 pHLC 3.11에서 유래하고, 이 cDNA클론을 EcoRI 및 KpnI로 소화하여 얻어지는 약 1.2 kb의 EcoRI-Kpnl단편의 상류역에, 개시코돈과 C3dg유전자의 5'말단 약 70bp를 연결하여 조제한 2개 사슬 DNA의 Ncol-EcoRI단편을 라이게이션하고, 다시 이 DNA단편을 EcoT14I로 부분소화하여 얻어지는 약 0.97kb의 NcoI-EcoT14I단편의 하류역에, 사람 C3dg유전자의 3'말단 약 80bp와 종결 코돈을 연결하여 조제한 2개 사슬 DNA EcoT14I-KpnI단편을 라이게이션하여 재구축한 DNA 배열인 플라스미드.
  10. 제1항에 있어서, 플라스미드가 ppTC3/2.1, pTRC3/1.035 및 pTHC3/1.05로 구성된 선택되는 플라스미드.
  11. 제1항 기재의 플라스미드에 의하여 형질전환된 재조합 미생물 세포.
  12. 제11항에 있어서, 숙주세포가 에스케리키아 속에 속하는 미생물 재조합 미생물 세포.
  13. 제11항에 있어서, 숙주세포가 에스케리키아 콜리 JM109인 재조합 생물세포.
  14. 제13항에 있어서, 상기 미생물 세포가 에스케리키아 콜리 pTC3/2.1, J9THC3/1.035 및 J9THC3/1.050으로 구성된 군에서 선택되는 재조합 미생물 세포.
  15. 제11항 기재의 재조합 미생물세포를 영양배지에서 염증국소유래 포스포리파제 A2저해단백을 생성하기까지 배양하고, 배양물에서 이 염증국소 유래 포스포리파 제A2저해단백을 채취하는 것을 특징으로하는 염증국소 유래 포스포리파제 A2저해단백의 제조방법.
  16. 제15항에 있어서, 상기 재조합 미생물 세포가 제14항 기재의 것인 방법.
  17. 제15항 기재의 제조방법으로 제조된 염증 국소 유래 포스포리파제 A2저해단백.
  18. 제17항에 있어서, 제16항 기재의 제조방법으로 제조된 염증 국소 유래의 포스포리파제 A2저해단백.
  19. 염증 국소 유래 포스포리파제 A2저해단백을 유효성분으로 함유하여 구성된 알레르기 반응 억제제.
  20. 제19항에 있어서, 염증 국소 유래 포스포리파제 A2저해 단백이 제17항 기재의 저해단백인 알레르기 반응 억제제.
  21. 제19항에 있어서, 상기 알레르기 반응이 즉시형 알레르기 반응인 억제제.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019920700763A 1990-08-03 1991-08-03 염증국소 유래 포스포리파제 a_2저해 단백생산을 위한 플라스미드, 미생물세포 및 그 단백의 제조 및 사용 KR920702418A (ko)

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JP90-205164 1990-08-03
JP20516490 1990-08-03
JP41159490 1990-12-19
JP90-411594 1990-12-19
PCT/JP1991/001040 WO1992002619A1 (fr) 1990-08-03 1991-08-03 Plasmide destine a la production d'une proteine inhibant la phospholipase a2 derivee d'une region enflammee, cellule microbienne, et production et utilisation de ladite proteine

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EP0495995A1 (en) 1992-07-29
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