KR910004806A - 신규의 고알칼리성 프로테아제 - Google Patents

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Abstract

내용 없음.

Description

신규의 고알칼리성 프로테아제
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제2도 플라스미드 pCLEANO의 제한도,
제3도 플라스미드 pCLEAN4의 제한도.

Claims (31)

  1. 아미노산 서열이 제1도에 표시된 아미노산 서열과 80% 이상의 상동성을 가지며 제1도의 18,27,42,57,96,107,114,115,135,238,166,176,188,189,198,238,255,266번의 위치중 하나이상에서, 바람직하게는 18,27,42,57,96,107,114,115,135,166,238,255,259,266번 위치중 하나이상에서 다르며, 아미노산이 보다 강한 염기성 아미노산으로 치환된 것에 의해서 구별됨을 특징으로 하는 고알칼리성 프로테아제.
  2. 제1항에 있어서, 제항에서 표시된 위치중 1개 내지 3개, 바람직하게는 1개 혹은 2개위치의 아미노산이 보다 강한 염기성 아미노산으로 치환된 서열을 가짐을 특징으로 하는 고알칼리성 프로테아제.
  3. 전항의 어느 한항에 있어서, 최적 pH가 10-12.5이며 분자량은 26000-28000g/mol임을 특징으로 하는 고알칼리성 프로테아제.
  4. 제1도에 표시된 아미노산서열과 90%이상, 바람직하게는 95%이상이 상동한 서열을 가짐을 특징으로 하는 고알칼리성 프로테아제.
  5. 전항의 어느 한항에 있어서, 보다 강한 염기성 아미노산 리신 혹은 아르기닌인 것을 특징으로 하는 고알칼리성 프로테아제.
  6. 전항의 어느 한항에 있어서, 아미노산 서열이 18번 혹은 259번 위치중 하나이상이 리신으로 치환됨을 특징으로 하는 고알칼리성 프로테아제.
  7. 제1항 내지 제5항에 있어서, 27,42,57,96,107,114,115,135,138,166,238,255 혹은266번 위치중 하나이상에서 아미노산이 아르기닌으로 치환됨을 특징으로 하는 고알칼리성 프로테아제.
  8. 제1도에 표시한 아미노산 서열과 80% 이상의 상동성을 가지며 제1도의 18,27,42,57,96,107,114,115,135,138, 166, 176, 179,188,189, 198, 238,255,266번의 위치중 하나이상에서, 바람직하게는 18,27,42,57,96,107,114,115,135,138,166,238,255,259,266번 위치중 하나이상에서 아미노산이 보다 강한 염기성 아미노산으로 치환됨을 특징으로 하는 아미노산 서열을 갖는 고알칼리성 프로테아제를 암호하는 DNA 서열.
  9. 제8항에 있어서, 제8항에서 표시된 이치중 1개 내지 3개, 바람직하게는 1개 혹은 2개위치의 아미노산이 보다 강한 염기성 아미노산으로 치환된 서열을 가짐을 특징으로 하는 DNA 서열.
  10. 제8항에 있어서, 제1도에 나타난 아미노산서열과 90% 이상, 바람직하게는 95% 이상의 상동한 서열을 가짐으로 특징으로 하는 DNA 서열.
  11. 제8항 내지 제10항에 있어서, 제8항중 표시된 위치의 아미노산이 보다 강한 염기성 아미노산인 리신 혹은 아르기닌으로 치환됨을 특징으로 하는 DNA 서열.
  12. 제8항 내지 제10항에 있어서, 아미노산 서열의 18번 혹은 259번 위치중 하나이상에서 리신으로 치환됨을 특징으로 하는 DNA 서열.
  13. 제8항 내지 제11항에 있어서, 아미노산이 27,42,57,96,107,114,115,135,138,166,238,255 혹은 266번 위치중 하나이상에서 아르기닌으로 치환됨을 특징으로 하는 DNA 서열.
  14. 제8항에 따른 DNA 서열을 가짐을 특징으로 하는 미생물의 형질전환에 적합한 벡터.
  15. 제14항에 있어서, 벡터가 플라스미드임을 특징으로 하는 벡터.
  16. 제15항에 있어서, 제8항에 따른 DNA 서열, 대장균 선택성의 마아커 및 복제를 위한 DNA 서열, 그리고 고알칼리성 프로테아제의 발현을 위해 적합한 배열에서 간균 선택성의 마아커 및 복제를 위한 DNA 서열을 함유함을 특징으로 하는 플라스미드.
  17. 제16항에 있어서, 제14도에 따른 제한도를 가짐을 특징으로 하는 플라스미드.
  18. 배열에 있어서, 하기 a)에서 e)를 포함하고 부족된 DNA 서열부위의 도입으로 고알칼리성 프로테아제를 위한 발현벡터를 생성함을 특징으로 하는 플라스미드. a)제1도의 아미노산서열과 80% 이상 상동한 서열을 가지는 고알칼리성 프로테아제로 암호된 DNA 서열의 일부 b)고알칼리성 프로테아제의 프로모터나 프리프로 영역에서 암호된 DNA 서열 c)제29항에 따른 프로테아제를 암호한 DNA 서열의 일부분의 도입을 위한 제한효소 인식부위를 가지는 DNA 이중나선링커의 일부분 d)대장균에서 선택성의 마아커 및 복제를 위한 DNA 서열 e)간균에서 선택성의 마아커 및 복제를 위한 DNA 서열.
  19. 제18항에 있어서, a)에 의해 표시되고, 플라스미드에 포함되며, 고알칼리성 프로테아제를 암호하는 DNA 서열 부분이 이 DNA 서열의 N-터미날 Nco/XbaI 단편임을 특징으로 하는 플라스미드.
  20. 제18항에 있어서, a)항에 의해 표시되고, 플라스미드에 포함되며, 고알칼리성 프로테아제를 암호하는 DNA 서열 부분이 이 DNA 서열의 C-터이날 XbaI/Asp 718 단편임을 특징으로 하는 플라스미드.
  21. 배열에 있어서, 하기 a)서 d)를 포함하고 DNA 이중나선링커를 대신하여 완전한 고알칼리성 프로테아제를 암호하는 DNA 서열을 도입하여 프로테아제 발현을 위한 발현벡터가 생성됨을 특징으로 하는 플라스미드. a)제1도의 아미노산서열과 80%이상 상동한 DNA 서열의 도입을 위한 제한효소 인식부위를 갖는 제29항에 따른 DNA 이중나선링커 b)고알칼리성 프로테아제의 프로모너타 프리프로영역의 DNA 서열 c)대장균 선택성인 마아커 및 복제를 위한 DNA 서열 d)간균 선택성인 마아커 및 복제를 위한 DNA 서열.
  22. 제21항에 있어서, a)항에 의해 표시된 DNA 이중나선링커는 제30항에 따른 DNA 이중나선링커임을 특징으로 하는 플라스미드.
  23. 제14항 내지 제22항의 어느 한항에 따른 벡터나 플라스미드로 형질전환됨을 특징으로 하는 미생물.
  24. 제23항에 있어서, 박테리아, 특히 간균임을 특징으로 하는 미생물.
  25. 제24항에 있어서, 바실리스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실리스 알칼로필러스(Bacillus alcalophilus), 바실리스 리세니포미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens)를 포함하는 그룹으로 부터 선택된 간균임을 특징으로 하는 미생물.
  26. 제1항 내지 제7항에 있어서, 고알칼리성 프로테아제를 포함함을 특징으로 하는 세제.
  27. 제26항에 있어서, 보통 세제의 조성 성분 즉, 장력제, 지지제 및 계면활성제 또, 경우에 따라서 기타 일반적인 첨가물 및 보조제를 함유함을 특징으로 하는 세제.
  28. 제4도에 표시된 DNA 서열 Ⅰ-ⅩⅤ중 하나를 포함함을 특징으로하는 합성올리고 뉴클레오타이드.
  29. 제한효소 NcoI, XbaI, Asp 178 및 HindⅢ에 대해 순서에 따라 가깝게 혹은 연속된 인식부위를 가지는 DNA 서열을 특징으로 하는 돌출 5′말단(protruding 5′ends)을 가지는 이중나선 DNA 링커.
  30. 제29항에 있어서, 이중나선 DNA 서열 즉,
    를 제한효소 NcoI, XbaI, Asp 178 및 HindⅢ에 대한 인식부위로서 포함함을 특징으로 하는 이중나선 DNA링커.
  31. 형질전환된 미생물 즉, 제1도에 표시된 아미노산 서열과 80% 이상의 상동성을 가지며 제1도의 18,27,42,57,95,107,114,115,135,238,166,176,179,188,189, 198, 238,255,266번의 위치중 하나이상에서, 바람직하게는 18,27,42,57,96,107,114,115,135,138,166,238,255,259,266번의 위치중 하나이상에서 다르며, 아미노산이 보다 강한 염기성 아미노산으로 치환된 DNA 서열을 가지는 미생물을 배향하고, 이 배양배지로부터 제1도에 나타난 아미노산 서열과 80% 이상 상동한, 아울러 상기된 위치의 하나이상에서 보다 강한 염기성 아미노산으로 치환된 아미노산 서열을 가지는 최적의 고알칼리성 프로테아제를 분리하는 것을 특징으로하는, 제1항에 표시된 아미노산 서열을 가지는 최적의 고알칼리성 프로테아제의 제조방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE159757T1 (de) * 1990-12-21 1997-11-15 Novo Nordisk As Enzym-mutanten mit einer geringen variation der molekularladung über einen ph-bereich
US5482849A (en) * 1990-12-21 1996-01-09 Novo Nordisk A/S Subtilisin mutants
DE4106525A1 (de) * 1991-03-01 1992-09-10 Solvay Enzymes Gmbh & Co Kg Verfahren zur verbesserung der stabilitaet von hochalkalischen proteasen
DK58391D0 (da) * 1991-04-03 1991-04-03 Novo Nordisk As Hidtil ukendte proteaser
EP0995801A1 (de) * 1991-07-27 2000-04-26 Genencor International GmbH Verfahren zur Verbesserung des Stabilität von Enzymen und stabilisierte Enzyme
DE69223562T2 (de) * 1991-08-27 1998-06-04 Hoffmann La Roche Verfahren und Reagenzien zum Nachweis von Hepatitis C
US5371198A (en) * 1991-12-16 1994-12-06 Novo Nordisk A/S Method for protection of proteolysis-susceptible protein during protein production in a fluid medium
US5256557A (en) * 1991-12-27 1993-10-26 Solvay Enzymes, Inc. Purified alkaline protease concentrate and method of preparation
US5623059A (en) * 1992-03-09 1997-04-22 Novo Nordisk A/S Method for protection of proteolysis-susceptible protein during protein production in a fluid medium
DE69333463D1 (de) * 1992-05-18 2004-05-06 Genencor Int Alkalische Proteasen produzierende Bakterien, und Verfahren zur Herstellung dieser alkalischen Proteasen
ATE376061T1 (de) * 1992-07-17 2007-11-15 Genencor Int Hochalkalische serinproteasen
DE4304161A1 (de) * 1993-02-12 1994-08-25 Solvay Enzymes Gmbh & Co Kg Verbesserte hochalkalische Proteasen
DE4411223A1 (de) * 1994-03-31 1995-10-05 Solvay Enzymes Gmbh & Co Kg Verwendung alkalischer Proteasen in gewerblichen Textilwaschverfahren
DK2258836T3 (en) 2004-09-10 2016-07-25 Novozymes North America Inc Methods for the prevention, elimination, reduction or destruction of biofilms
CN105925556B (zh) 2010-05-06 2020-11-13 丹尼斯科美国公司 包含枯草杆菌蛋白酶变体的组合物和方法
EP2588665B1 (en) 2010-07-01 2019-05-08 Novozymes A/S Bleaching of pulp
BR112013027963A2 (pt) 2011-05-05 2016-11-29 Danisco Us Inc "variante de subtilisina com atividade proteolítica, ácido nucleico, vetor de expressão, célula hospedeira, composição e método de limpeza".
BR112014005290B1 (pt) 2011-09-09 2021-11-09 Novozymes A/S Método para melhoramento da resistência do papel
CN104822830B (zh) 2012-10-03 2021-07-09 谷万达公司 内含肽修饰的蛋白酶、其制备方法和工业用途
EP2740840A1 (en) 2012-12-07 2014-06-11 Novozymes A/S Improving drainage of paper pulp
WO2016007309A1 (en) 2014-07-07 2016-01-14 Novozymes A/S Use of prehydrolysate liquor in engineered wood
BR112022001394A2 (pt) 2019-07-26 2022-03-22 Novozymes As Tratamento enzimático de polpa de papel
US20230212822A1 (en) 2020-05-29 2023-07-06 Novozymes A/S Method for controlling slime in a pulp or paper making process
WO2022263553A1 (en) 2021-06-16 2022-12-22 Novozymes A/S Method for controlling slime in a pulp or paper making process
WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3770587A (en) * 1971-02-09 1973-11-06 Pfizer Chemically modified proteolytic enzymes
NZ208612A (en) * 1983-06-24 1991-09-25 Genentech Inc Method of producing "procaryotic carbonyl hydrolases" containing predetermined, site specific mutations
FR2598430B1 (fr) * 1986-05-06 1990-02-02 Roussel Uclaf Nouveaux vecteurs d'expression, leur procede d'obtention et leur application pour exprimer une proteine quelconque dans escherichia coli
DK6488D0 (da) * 1988-01-07 1988-01-07 Novo Industri As Enzymer
CN1056187C (zh) * 1988-02-11 2000-09-06 金克克国际有限公司 新的蛋白水解酶及其在洗涤剂中的应用
DK316989D0 (da) * 1989-06-26 1989-06-26 Novo Nordisk As Enzymer

Also Published As

Publication number Publication date
DE4023458A1 (de) 1991-03-07
ES2093624T3 (es) 1997-01-01
JPH03139277A (ja) 1991-06-13
ATE143689T1 (de) 1996-10-15
EP0415296B1 (de) 1996-10-02
DK0415296T3 (da) 1996-11-18
EP0415296A3 (en) 1991-10-02
KR100196785B1 (ko) 1999-06-15
DE59010522D1 (de) 1996-11-07
ES2093624T5 (es) 2001-08-16
DK0415296T4 (da) 2001-11-12
EP0415296A2 (de) 1991-03-06
EP0415296B2 (de) 2001-04-25

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