Claims (30)
제1a도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드 잔기 약1번에서 약1326번까지의 뉴클레오티드 암호 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체를 코딩 하는 뉴클레오티드 배열.A nucleotide sequence encoding a transforming growth factor-β2 precursor consisting of a nucleotide coding sequence from nucleotide residues about 1 to about 1326 as shown in FIG. 1a.
제1a도에 도시된 바와 같이 그 사이의 뉴클레오티드 잔기 346번에서 432번까지가 설정되고 그대신 뉴클레오티드 배열"AAT"로 대치된 뉴클레오티드 잔기 약1번에서 약 1326번까지의 뉴클레오티드 암호 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체를 코딩하는 뉴클레오티드 배열.Transformation consisting of the nucleotide coding sequence of about 1 to about 1326 nucleotide residues set between nucleotide residues 346 to 432 between them and replaced by the nucleotide sequence "AAT" as shown in FIG. Nucleotide sequence encoding Growth Factor-β2 precursor.
제1a도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드 잔기 약991번에서 약 1326번까지의 뉴클레오티드 배열로 이루어진 성숙한 형질전환 성장인자-β2 를 코딩하는 뉴클레오티드 배열.A nucleotide sequence encoding mature transforming growth factor-β2 consisting of a nucleotide sequence of about 991 to about 1326 nucleotide residues as shown in FIG. 1A.
제1a도에서 도시된 바와 같이 아미노산잔기 약1번에서 약44번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.As shown in FIG. 1a, a transforming growth factor-β2 precursor consisting of an amino acid residue of about 1 to about 44 amino acid residues.
제1a도에 도시된 바와 같이 그 사이의 아미노산 잔기 116번에서 144번까지가 결실되고 그 대신 하나의 아스파라긴 잔기로 대치된 아미노산 잔기 약 1번에서 약442번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.Transformation growth factor consisting of amino acid residues from about 1 to about 442 in which amino acid residues 116 to 144 are deleted and replaced with one asparagine residue in between, as shown in FIG. -β2 precursor.
제1a도에 도시된 바와 같이 아미노산 잔기 약 20번에서 약 442번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.A transforming growth factor-β2 precursor consisting of an amino acid sequence of about 20 to about 442 amino acid residues as shown in FIG. 1A.
제1a도에 도시된 바와 같이 그 사이의 아미노산 잔기 116번에서 144번까지가 결실되고 그 대신 하나의 아스파라긴 잔기로 대치된 아미노산 잔기 약 20번에서 약442번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.Transformation growth factor consisting of amino acid residues from about 20 to about 442 in which amino acid residues 116 to 144 in between are deleted and replaced by one asparagine residue as shown in FIG. -β2 precursor.
제1a도에 도시된 바와 같이 아미노산 잔기 약331번에서 약 442번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.A transforming growth factor-β2 precursor consisting of an amino acid sequence of amino acid residues from about 331 to about 442 as shown in FIG. 1a.
제1b도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드 잔기 약-70번에서 약 1755번까지의 뉴클레오티드 암호 배열로 이루어진 하이브리드 형질전환 성장인자-β1/형질전환 성장인자-β2를 코딩 하는 뉴클레오티드 배열.Nucleotide sequence encoding a hybrid transforming growth factor-β1 / transformation growth factor-β2 consisting of a nucleotide coding sequence of about -70 to about 1755 nucleotide residues as shown in FIG.
제1b도에 도시된 바와 같이 아미노산 잔기 약 1번에서 약 390번까지의 아미노산 배열로 이루어진 하이브리드 형질전환 성장인자-β1/형질전환 성장인자-β2전구체.A hybrid transforming growth factor-β1 / transformation growth factor-β2 precursor consisting of an amino acid sequence from amino acid residues about 1 to about 390 as shown in FIG. 1b.
제1b도에 도시된 바와 같이 아미노산 잔기 약 30번에서 약 390번까지의 아미노산 배열로 이루어진 하이브리드 형질전환 성장인자-β1/형질전환 성장인자-β2전구체.A hybrid transforming growth factor-β1 / transformation growth factor-β2 precursor consisting of an amino acid sequence of about 30 to about 390 amino acid residues as shown in FIG.
(a)형질전환 성장인자-β2활성을 갖는 펩티드 또는 단백질이 성숙핵 세포에 의해 생산되도록 유전자 발현을 조절 하는 제2 뉴클레오티드 배열의 조절하에서 형질전환 성장인자-β2를 코딩하는 뉴클레오티드 배열을 함유 하는 성숙핵 세포를 배양하고; (b) 이 배양체로부터 형질전환 성장인자-β2를 회수 하는 단계로 이루어지는 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.(a) maturation containing a nucleotide sequence encoding transforming growth factor-β2 under the control of a second nucleotide sequence that regulates gene expression such that a peptide or protein having transforming growth factor-β2 activity is produced by mature nucleus cells Culturing nuclear cells; (b) A method for producing transforming growth factor-β2, comprising recovering transforming growth factor-β2 from the culture.
제12항에 있어서, 형질전환 성장인자-β2를 코딩 하는 뉴클레오티드 배열이 제1a도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드 1번에서 1339번까지의 뉴클레오티드 배열로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.The method of claim 12, wherein the nucleotide sequence encoding the transforming growth factor-β2 is a nucleotide sequence from nucleotides 1 to 1339 as shown in FIG. 1a. .
제12항에 있어서, 형질전환 성장인자-β2를 코딩하는 뉴클레오티드 배열이 제1b도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드-70번에서 1775번까지의 뉴클레오티드 배열로 이루어진 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.13. The production of transforming growth factor-β2 according to claim 12, wherein the nucleotide sequence encoding transforming growth factor-β2 is composed of nucleotide sequences of nucleotides 70 to 1775 as shown in FIG. 1B. Way.
제12항에 있어서, 성숙핵 세포가 중국산 햄스터 난소 세포로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.The method of claim 12, wherein the mature nucleus cells are made of Chinese hamster ovary cells.
제12항에 있어서, 유전자 발현을 조절 하는 제2 뉴클레오티드 배열이 SV 40프로모터로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.The method of claim 12, wherein the second nucleotide sequence that regulates gene expression is the SV 40 promoter.
제12항에 있어서, 형질전환 성장인자-β2암호 배열을 함유 하는 성숙핵 세포가 동정될 수 있도록, 제 2뉴클레오티드 배열이 성숙핵 세포에는 결여된 선택 가능한 표식자와 프로모터로 이루어진 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.13. The transgenic growth of claim 12, wherein the second nucleotide sequence consists of selectable markers and promoters lacking the mature nucleus cells such that the nucleus cells containing the transforming growth factor-β2 code sequence can be identified. Method of Making Factor-β2.
제17항에 있어서,선별 가능한 표식자가 디히드로폴레이트 환원효소(dihydrofolate reductase)로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.The method of claim 17, wherein the selectable marker is dihydrofolate reductase.
제18항에 있어서, 디히드로폴레이트 환원효소와 형질전환 성장인자-β2에 대한 암호 배열을 증폭된 수준으로 함유 하는 저항성 집락이 선택되도록, 성숙핵 세포를 메토트랙세이트에 노출시키는 단계가 추가됨을 특징으로 하는 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.19. The method of claim 18, further comprising exposing the mature nucleus cells to methotrexate such that a resistant colony containing amplified levels of coding sequences for dihydrofolate reductase and transforming growth factor-β2 is selected. Method for producing a transforming growth factor-β2 characterized in that.
제19항에 있어서, 성숙핵 세포가 디히드로폴레이트 환원효소가 결여된 중국산 햄스터 난소 세포로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.20. The method of claim 19, wherein the mature nucleus cells are made of Chinese hamster ovary cells lacking dihydrofolate reductase.
(a)ATCC에 기탁된 형질도입체 1β9,12,5, 클론 36을 배양하여, (b) 이 배양체로부터 형질전환 성장인자-β2를 회수 하는 단계로 이루어지는 형질전환 성장인자 β2의 제조방법.(a) culturing the transfectants 1β9,12,5 and clone 36 deposited in ATCC, and (b) recovering the transforming growth factor-β2 from the culture.
제21항에 있어서, 형질도입체를 메토트랙세이트 존재하에서 배양함을 특징으로 하는 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.22. The method of claim 21, wherein the transductor is cultured in the presence of methotrexate.
성숙핵 세포가 활성 형질전환 성장인자-β2를 생산하도록 유전자 발현을 조절 하는 제2 뉴클레오티드 배열의 조절하에서 형질전환 성장인자-β2를 코딩하는 뉴클레오티드 배열을 함유 하는 성숙핵 세포.A mature cell containing a nucleotide sequence encoding transforming growth factor-β2 under the control of a second nucleotide sequence that regulates gene expression such that the mature cell produces active transforming growth factor-β2.
제23항에 있어서, 형질전환 성장인자-β2를 코딩하는 뉴클레오티드 배열이 제1b도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드-70번에서 1755번까지의 뉴클레오티드 배열로 이루어진 것이 특징인 성숙핵 세포.24. The mature nucleus cell of claim 23, wherein the nucleotide sequence encoding transforming growth factor-β2 consists of a nucleotide sequence from nucleotide-70 to 1755, as shown in FIG. 1B.
제23항에 있어서, 중국산 햄스터 난소 세포로 된 것이 특징인 성숙핵 세포.24. The nucleus cell according to claim 23, characterized in that it is of Chinese hamster ovary cells.
제23항에 있어서, 유전자 발현을 조절 하는 제2 뉴클레오티드 배열이 SV 40 프로모터로 된 것이 특징인 성숙핵 세포.24. The nucleus cell of claim 23, wherein the second nucleotide sequence that regulates gene expression is the SV 40 promoter.
제23항에 있어서, 제2 뉴클레오티드 배열이 시미안 형질전환 성장인자-β2 암호 배열을 함유 하는 성숙핵 세포가 동정될 수 있도록 성숙핵 세포에는 결여된 선택 가능한 표식자와 프로모터로 이루어진 것이 특징인 성숙핵 세포.24. The mature nucleus of claim 23, wherein the second nucleotide sequence consists of a selectable marker and promoter lacking the mature nucleus cell such that the mature cell can contain a Simian transforming growth factor-β2 coding sequence. cell.
제27항에 있어서, 선택 가능한 표식자가 디히드로폴레이트 환원효소로 된 것이 특징인 성숙핵 세포.28. The nucleus cell of claim 27, wherein the selectable marker is a dihydrofolate reductase.
제28항에 있어서, 디히드로폴레이트 환원효소가 결여된 중국산 햄스터 난소 세포로 된 것이 특징인 성숙핵 세포.29. The nucleus cell according to claim 28, which is made of Chinese hamster ovary cells lacking dihydrofolate reductase.
ATCC에 기탁된 1β9,12,5, 클론 36 세포주.1β9,12,5, clone 36 cell line deposited with ATCC.
※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.※ Note: The disclosure is based on the initial application.