KR830002378B1

KR830002378B1 - 1-(3-메르캅토-2-메틸프로파노일)프롤릴 아미노산 유도체의 제조방법

Info

Publication number: KR830002378B1
Application number: KR7902281A
Authority: KR
Inventors: 다다히로 사와야마; 히로아끼 기누가사; 하루끼 니시무라; 구니히꼬 다께야마; 가노오 호소끼
Original assignee: 미야다께 도꾸지로; 다이니홍 세이야꾸 가부시끼가이샤
Priority date: 1979-07-10
Filing date: 1979-07-10
Publication date: 1983-10-25
Also published as: KR830002377B1; KR830001204A

Abstract

내용 없음.

Description

1-(3-메르캅토-2-메틸프로파노일)프롤릴 아미노산 유도체의 제조방법

제1도 : 화합물A 및 B와 화합물 1(SQ-14225)의 경구 투여 (0.015 밀리몰/kg)후 2-신장 고혈압 쥐의 혈압 변화.

제2도 : 화합물A 및 B와 화합물 1의 경구투여 (0.1밀리몰/kg)후 2-신장 고혈압의 혈압 변화.

본 발명은 고혈압 치료 작용을 갖는 새로운 프롤린 유도체에 관한 것이다. 더 상세히 설명하면 본 발명은 1-(3-메르캅토-2-메틸프로파노일)프롤릴 아미노산 유도체의 제조방법에 관한 것이다.

최근에는 온데티(Ondetti)의 공동 연구자들은 여러가지의 메르캅토 알카노일 아미노산을 합성하고 이를 혈관 협착- I -전환 효소의 금지를 생체외에서 측정했다.

이 연구에 기초로 하여 그들은 1-(D-3-메르캅토-2-메틸프로파노일)-L-프롤린(그들은 이를 "SQ-14225"라 칭함)이 혈관 협착 I -전환 효소의 특별히 양호한 금지제라고 보고 했다〔Biochemistry, 16, 5484(1977)〕.

온데티의 공동 연구자 등은 또한 SQ-14225 및 관련 화합물을 발견하고 SQ-14225는 또한 혈관 협착 I -전환 효소에 대해 생체내에서 우수한 금지 작용을 가지며 그의 금지 작용에 기초로 하여 실험적 고혈압 동물에서 우수한 고혈압 치료 작용을 나타낸다고 보고했다〔Science 196, 441, (1977)〕미국특허 제 4, 046, 889 및 독일 공개 출원 공보 제 2, 703, 828에서 온데티의 공동연구자들은 SQ-14225 및 관련 화합물을 발표했다.

우리는 SQ-14225 및 그 관련 화합물의 약학적으로 더 우수한 유도체를 발견하기 위해 광범위하게 연구하고 SQ-14225 또는 그의 유도체의 프롤린 잔기의 카르복실기에 어떤 아미노기를 도입하므로서 새로운 펩타이드 결합의 생성은 SQ-14225 또는 이들 유도체보다 더 완화한 고혈압 치료 작용과 지속적인 것을 나타내는 바람직한 화합물임을 발견했다.

본 발명은 다음 일반식 (Ⅰ)의 1-(3-메르캅토-2-메틸 프로파노일)프롤릴 아미노산 유도체 및 그들의 염의 제조방법에 관한 것이다.

식중 R은 수소원자 또는 저급 알킬기를 나타내고 R₁은 저급알킬기를 나타낸다.

일반식(Ⅰ) 화합물과 약학적으로 무독한 이들의 염은 혈관 협착 I -전환 효소의 금지 기능에 기초로 하여 우수한 고혈압 치료 작용을 갖는다. 이 고혈압 치료 작용은 완화하여 지속적인 것에 의해 특정지워진다. 따라서 본 발명에 따른 화합물은 안정한 효율을 가진 고혈압 치료제로 임상 치료에 매우 유용하다. 그들의 특징적 작용 때문에 이들 화합물은 고혈압의 급작스런 치료에 의해 발생되는 급성 저혈압으로 인한 임상적인 문제를 제거하고 종래의 화합물의 짧은 지속성 때문에 빈번한 투여를 해야하는 불편함을 제거시키는 것이 기대된다.

일반식(Ⅰ) 화합물은 3개의 부제 탄소원자를 포함한다. 3-메르캅토-2-메틸프로파노일기의 2-위치의 탄소원자, 프롤린 잔기의 2-위치의 탄소원자 및 벤질기가 결합된 탄소원자는 부제탄소이다. 이들 탄소 원소는상기 일반식(Ⅰ)에서 별표(*)가 붙여져 있다. 따라서 본 발명에 따른 화합물은 입체 이성체 또는 이들의 혼합물로 존재한다. 이려한 입체 이성체 및 이들의 혼합물은 일반식(Ⅰ)에 의해 나타내어지는 본 발명에 따른 화합물의 범위내에 든다고 이해되어야 한다.

"저급 알킬기"란 탄소수 1 내지 6개의 직쇄 또는 측쇄의 알킬기를 말하며 이들의 예로는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 2급 부틸, 3급 부틸, 펜틸, 이소펜틸 및 헥실이다. R₁에 의해 나타낸 저급 알킬기는 1 내지 6개의 탄소원자를 갖는 것이 바람직하다. R에 의해 나타낸 저급 알킬기는 1 내지 4개의 탄소원자를 갖는 것이 바람직하고 1 또는 2개의 탄소원자를 갖는 것이 더욱 바람직하다.

상술한 바와 같이 일반식(Ⅰ) 화합물은 3개의 부제탄소 즉, 3-메르캅토-2-메틸프로파노일의 2위치의 탄소, 프롤린 잔기의 2-위치의 탄소 및 벤질기가 결합된 탄소원자이다. 이들 부제 탄소 원자에서 화합물의 배위는 D-형, L-형 및 DL-형의 하나가 될 것이다. 일반적으로 프롤린 잔기 및 벤질기의 배위는 바람직하기로는 L-형이며, 3-메르캅토-2-메틸프로파노일기의 2-위치에 메틸기의 배위는 바람직하기로는 D-형이다.

일반식(Ⅰ) 화합물의 적당한 예는 아래에 기재되어 있다.

1-(D-3-아세틸티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌,

1-(D-3-프로파노일티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌,

일반식(Ⅰ)에서 R은 수소원자이고, 일반식(Ⅰ)의 화합물은 무기 또는 유기 염기의 염의 형태로 존재한다.

무기 염기를 갖는 염은 알칼리 금속염(예, 나트륨 또는 칼륨염), 알칼리토 금속염(예, 칼슘 또는 마그네슘염) 및 암모늄염을 함유한다. 유기 염기를 갖는 염은 디사이클로헥실아민, 벤자틴(benzathine), 하이드라바민(hydrabamine) 및 리신을 갖는 염을 함유한다. 약학적으로 무독한 염이 특별히 바람직하다.

본 발명에 따라 일반식(Ⅰ) 화합물 및 그들의 염은 다음 일반식(Ⅱ)의 화합물 또는 그의 카르복실기에 있어서의 반응성 유도체를 다음 일반식 (Ⅲ)의 화합물과 반응시키고 필요하다면 일반식(Ⅰ)의 화합물을 그의 염으로 전환시킴으로써, 및/또는 필요하다면 구조식(Ⅰ)의 화합물이 입체 이성질체의 혼합물로 존재할 때 이것을 각 입체 이성질체로 분리함으로써 제조될 수 있다.

(상기식에서 R 및 R₁은 상기와 같다)

일반식(Ⅱ) 화합물 또는 그의 카르복실기에 있어서의 반응성 유도체와 일반식(Ⅲ)화합물 사이의 반응은 펩타이드 합성 분야에서 기지의 아미드화 방법에 따라 수행될 수 있다.

이들 방법은 예를들면 유기 화학 합성에 상세히 기록되어 있다〔Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), Vol. XV. Parts Ⅰ 및 Ⅱ (1974)〕.

반응은 통상 불활성 용매 중 두개의 출발 물질을 접촉시키므로써 수행될 수 있다. 사용된 불활성 용매는 출발 물질등의 종류에 따라 적당히 선택될 수 있다. 예를 들면, 테트라하이드로푸란, 디옥산, 클로로포름, 디클로로메탄, 에틸 아세테이트, 아세톤, 아세토니트릴, 디메틸포름아미드, 디메틸설폭사이드, 피리딘 및 물이다. 이들 용매는 단독으로 또는 혼합물로서 사용된다. 필요하면 이들 반응은 염기 존재하 수행될 수 있다. 염기의 예로는 중탄산나트륨 및 중탄산칼륨과 같은 알칼리 금속 증 탄산염, 탄산나트륨 및 탄산칼륨과 같은 알칼리 금속의 탄산염, 수산화나트륨 및 수산화칼륨과 같은 알칼리 금속의 수산화물 및 트리에틸아민, 트리-n-부틸아민, N-메틸모르폴린 및 디사이클로헥실아민과 같은 유기 염기이다.

일반식(Ⅲ)의 화합물은 산부가염의 형태로 사용된다. 이러한 경우 유리 형태의 일반식(Ⅲ)의 화합물은 반응계에 등량의 전술한 염기를 가하므로서 수득될 수 있다.

반응 온도는 출발 화합물 등의 종류에 따라 넓은 범위에서 변하나 통상 약 -50℃내지 약 60℃의 범위이다.

일반식(Ⅲ) 및 일반식(Ⅱ) 화합물 또는 이들의 반응성기를 가진 유도체 사이의 비는 절대적인 것은 아니고 사용된 출발 물질의 종류에 따라 넓은 범위에서 변한다. 일반적으로 약1 내지 약 1.5몰의 일반식(Ⅱ) 화합물 또는 그의 반응성기를 갖는 유도체가 일반식(Ⅲ)의 화합물 1몰당 사용되는 것이 유익하다.

일반식(Ⅱ) 화합물이 일반식(Ⅲ) 화합물과 반응될 때, 이 반응은 디사이클로 헥실카르보디이미드, N,N'-카르보닐디이미다졸, 우드워드(Woodward) 시약 K 또는 1-에톡시카르보닐-2-에톡시-1, 2-디하이드로퀴놀린과 같은 커플링 시약 존재하 수행하는 것이 바람직하다.

일반식(Ⅱ) 화합물의 카르복실기에 반응성기를 가진 유도체는 펩타이드 합성 분야에 통상 사용되는 반응성 유도체를 포함한다. 이들의 예로는 알킬카르본산(예, 에틸카르본산 또는 이소부틸카르본산), 아릴카르본산(예, 페닐카르본산), 알킬카르복실산(예, 이소발레르산 또는 피바린산), 포스포린산(예, 디에틸포스포린산), 및 설폰산(예, 메탄설폰산 또는 p-톨루엔설폰산)과 같은 산으로 이루어진 혼합산 무수물, p-니트로페닐에스테르, 2, 4, 5-트리클로로페닐에스테르, 펜타클로로페닐에스테르, p-니트로페닐티오에스테르, 시아노 메틸에스테르, N-하이드록시피페리딘에스테르, N-하이드록시석신이미드에스테르 및 N-하이드록시프탈이미드 에스테르와 같은 반응성 에스테르 ; 대칭 산무수물 ; 산염화물과 같은 산할라이드 ; 및 산아자이드를 들 수 있다. 산할라이드(특히 산염화물), 혼합 산무수물 또는 반응성 에스테르는 일반식(Ⅱ) 화합물의 반응성 유도체로 특별히 바람직하다. 이들 반응성 유도체는 통상의 방법에 따라 합성될 수 있다.

R이 수소인 일반식(Ⅰ) 화합물은 에스테르화 반응에 의해 여러가지의 상응하는 에스테르로 전환될 수 있다. 예를들면, 이들 화합물 또는 카르복실산에 반응성기를 갖는 유도체(예, 혼합된 산무수물 또는 반응성 에스테르)를 R'가 R(수소제외)과 같은 구조식 R'OH의 화합물과 반응시키므로서 얻어질 수 있다.

R이 3급 부틸기인 일반식(Ⅰ) 화합물은 이를 트리플루오로아세트산 및 아니솔로 처리하므로서 R이 수소인 일반식(Ⅰ)의 상응하는 화합물로 전환할 수 있다.

전술한 반응에 의해 형성된 일반식(Ⅰ) 화합물은 추출, 크로마토그라피 및 재결정에 의해 분리될 수 있다.

상기 제조 방법 중 출발물질(Ⅱ), 또는(Ⅲ)은 라세미 혼합물 또는 입체 이성체이 하나이다. 원하는 입체 이성체를 얻기 위해서 출발물질(Ⅲ)내의 프롤릴 잔기 및 벤질기의 배위는 최종 원하는 생성물의 것과 동일한 것이 바람직하다. 이 경우에 출발 물질(Ⅱ)의 3-메르캅토-2-메틸프로파노일기의 2-위치에 메틸기의 배위는 DL-형이다. 이 경우, 생성물에서 얻어진 입체 이성체는 통상의 크로마토그라피 또는 분별 결정 방법에 의해 분리될 수 있다.

R이 수소원자인 일반식(Ⅰ) 화합물은 여러가지의 무기염기나 유기 염기와 염을 형성할 수 있으며 염 형성은 통상의 방법으로 수행될 수 있다.

본 발명에 따른 화합물을 제조하는 더 특정한 방법은 후술하는 실시예에 의해 명백하게 될 것이다.

반응에서 출발 물질로 사용된 일반식(Ⅱ)의 화합물 중 일부는 기지이며 일반식(Ⅳ) 화합물 중 신규의 것은 미국 특허 제 4, 046, 889호 및 독일 공개 특허 공보 제 2, 703, 828호에 기술된 방법에 따라 제조될 수 있다. 또 다른 출발 물질인 일반식(Ⅲ) 화합물은 펩타이드의 합성에서 통상의 방법에 따라 프롤린 및 페닐알라닌 또는 그의 알킬 에스테르로부터 용이하게 제조될 수 있다.

본 발명에 따른 일반식(Ⅰ) 화합물과 그들의 약학적으로 무독한 염은 혈관 협착Ⅰ-전환 효소를 금지하는 능력을 기초로 우수한 고혈압 치료 작용을 갖는다.

본 발명에 따른 전형적인 화합물의 약학적인 시험 결과는 아래와 같다.

다음 화합물이 이 실험에 사용되었다.

본 발명에 따른 화합물

A : 1-(D-3-아세틸티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌

1-(D-3-프로파노일티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌

대조 화합물

1 : 1-(D-3-메르캅토-2-메틸프로파노일)-L-프롤린 (SQ-14225)

2 : 1-(D-3-메르캅토-2-메틸프로파노일)-L-프롤린아미드(미국 특허 제 4, 046, 889호에 기술된 화합물)

3 : 1-(D-3-아세틸티오-2-메틸프로파노일-L-프롤린아미드(이 화합물은 신규의 것이다. 미국 특허 제 4, 046, 889의 일반식의 범위내 화합물이다)

시험 1 : 고혈압 치료 작용

생후 8주이고 185내지 195g 나가는 STD위스타 종 숫쥐를 에테르로 마취하고 0.2mm 폭의 실버 클립을 옆구리를 절개하여 왼쪽 신장 동맥에 놓았다. 반대쪽 신장과 그의 신장 동맥은 그대로 두었다. 이 쥐를 시판용 쥐 사료와 수도물을 복용시켰다.

이를 실험 쥐를 골드 브라트(Gold blatt) 2-신장 고혈압 쥐로 하고 레닌-혈관 협착제〔Science, 188, 1316(1975)〕의 증가 작용에 따르는 전형적인 고혈압을 갖는다.

이 동물들은 클립을 낀 후 10내지 21후에 사용되었는데 혈압이 180내지 220mmHg되었다. 시험 화합물은 체중 kg당 0.1 밀리몰을 경구 투여하였다. 혈압은 마취하지 않고 말단 용적 묘사기법(ail-plethysmographic method)에 의해 투여 직전 및 1, 2, 3, 5, 7, 12, 14, 16, 18, 20, 22 및 24 시간 후 측정했다.

다음 표에 시험 동물의 초기 혈압, 최대 혈압 강하 효과가 관측되는 시간(피크 타임), 투여 후 피크 타임과 7시간 후 혈압 변화를 요약했다. 7시간에서 혈압 강하 작용의 범위는 시험 화합물의 지속성을 측정하기에 양호했다.

상기 표는 화합물 A 및 B는 약물 투여 후 5시간에서 최대 혈압 강하 반응(초기 혈압에서 17~18% 감소)을 나타낸 반면 화합물 1(SQ-14225)은 약물 투여 후 1시간에서 최대 반응(18% 감소)을 나타냈다.

약물 투여 7시간 후에 화합물 A 및 B 는 초기 혈압에서 약 16~17%의 감소로 상당한 혈압 강하 반응을 나타낸 반면 화합물 1(SQ-14225)은 초기 혈압에서 단지 8%의 감소를 나타냈다. 이들 자료는 화합물 A 및 B의 혈압 강하능(降下能)이 화합물 1의 강하능과 비교되고 화합물 A 및 B의 혈압 강하 작용이 화합물 1보다 더 완만하고 이들 화합물의 지속 작용이 더 긴 것을 제시하고 있다. 다시 말해서 화합물 2(SQ-14225의 단순한 아미드 유도체)및 화합물(S-아세틸 SQ-14225의 단순한 아미드 유도체)은 혈압을 강하시키지 않았다.

첨부된 제1도 및 제2도는 화합물 A 및 화합물 B와 화합물 1(SQ-14225)의 일회 경구 투여 (0.015밀리몰/kg 및 0.1 밀리몰/kg)후 두개의 신장 고혈압 쥐의 혈압 변화의 시간 경로를 나타낸다. 각 도면에서종 좌표는 혈압(mmHg)의 변화를 나타내고 횡 좌표는 경구 투여 후 경과된 시간(시)를 나타낸다. 각 점은 6마리의 쥐의 평균치를 나타내고 수직선은 표준 오차를 나타낸다.

이들 그라프는 화합물 A 및 B가 화합물 1(SQ-14225)보다 더 완화되고 더 지속적으로 고혈압 치료 작용을 나타낸다.

시험 2 : 독성

STD-ddy종 생쥐 21 내지 24g 나가는 숫쥐를 사용했다. 생쥐에서 화합물 A 및 B의 경구 투여 LD₅₀치는 체중 kg당 6g 이상임을 발견하였고 이들 화합물의 정맥 투여 LD₅₀은 체중 kg당 1g이었다. 이들 자료는 화합물 A 및 B의 독성이 극히 약하다는 것을 나타냈다.

전술한 실험적 결과는 일반식(Ⅰ) 화합물과 그들의 약학적으로 무독한 염은 매우 약한 독성을 갖는 우수한 고혈압 치료 작용을 나타내어 인간을 포함한 포유 동물에서 고혈압 치료용 약물로 사용될 수 있음을 나타냈다. 이들 화합물은 특별히 레닌-혈관협착계의 증가 작용에 기초로 하여 고혈압 치료에 특별히 유용하다.

본 발명에 따른 화합물의 투여 경로는 경구투여, 비경구투여, 직장내투여로 될 수 있으며 바람직하기로는 경구 투여하는 것이다. 일반식(Ⅰ) 화합물 또는 그들의 약학적으로 무독한 염의 투여량은 이와 같은 고혈압 치료 화합물 종류, 투여 방법 및 환자의 조건, 나이 등에 따라 변한다. 일일 투여량은 체중 kg 당 0.1 내지 200mg 바람직하기로 0.2 내지 50mg을 일반적으로 인간에게 투여한다. 이 약물은 지시된 총투 여량을 하루 1회 또는 2회로 투여한다.

보통 일반식(Ⅰ) 화합물 또는 그들의 약학적으로 무독한 염은 이와 같은 화합물의 약학적으로 효과있고 비독성인 양을 함유하는 약학적 조성물의 형태로 대상에 투여된다. 약학적 조성물은 일반식(Ⅰ) 화합물 또는 그들의 약학적으로 무독한 염을 약학적으로 무독한 담체와 혼합하여 제제한다. 적당한 담체는 제제약학에서 통상 사용되며 일반식(Ⅰ) 화합물 또는 이들의 염과 반응하지 않는 것이다. 이들 담체의 예로는 락토오즈, 전분, 백당, 미세 결정 셀룰로오즈, 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오즈, 칼슘 카르복시메틸 셀룰로오즈, 메틸 셀룰로오즈, 젤라틴, 아카시아검, 하이드록시프로필 셀룰로오즈, 하이드록시프로필메틸셀룰로오즈, 폴리비닐 피롤리돈, 경성(輕性) 무수 실리실산, 스테아린산 마그네슘, 탈크, 이산화티타늄, 소르비탄 지방산 에스테르, 포화 지방산의 글리세라이드, 마크로골(macrogol), 프로필렌글리콜 및 물이다. 약학적 조성물은 여러 가지 형태, 즉 정제, 캡슐제, 과립제, 미세 과립제, 분말제, 시럽제, 좌제 및 통상의 방법으로 제제되는 주사제 등으로 될 수 있다. 액제는 물이나 상기한 적당한 담체로 용해 또는 현탁하여 만들어질 수 있다. 정제는 통상의 방법으로 피복될 수 있다. 필요하면 약학적 조성물은 향료, 방향제, 보존제, 완충제, 조성물 등장액을 만드는 염 등을 함유할 수 있다.

보통 약학적 조성물은 활성 성분으로 일반식(Ⅰ) 화합물이나 그들의 약학적으로 무독한 염을 적어도 0.5% 바람직하기로는 1 내지 60%를 함유할 수 있다. 조성물은 또한 다른 치료적으로 효과있는 화합물을 함유할 수 있다.

다음 실시예와 비교 실시예는 본 발명을 더욱 상세히 예시한다. 그러나, 본 발명이 이들 실시예에 한정되어서는 안된다.

[실시예 1]

1-(D-3--2-아세틸티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-N-페닐알라닌 :

빙욕 중에 냉각시킨 IN수산화나트륨(2ml) 중의 L-프롤릴-L-페닐알라닌(0.52g) 용액에 3-아세틸티오-2-메틸프로파노일클로라이드(0.36g) 및 2N수산화나트륨(1ml)을 심하게 교반하며 가한다. 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 이 용액을 디에틸에테르로 세척하고 산성화한 후 에틸아세테이트로 추출한다. 유기층을 황산나트륨상 탈수하고 감압하 농축 건고한다. 잔류물을 소량의 에탄올에 용해시키고, 적당량의 n-헥산을 가한다. 침전된 결정을 수집하고 에탄올-n-헥산으로 반복 재결정하여 표제 화합물을 수득한다.융점 155~156℃〔α〕²⁵ _D=-81.3°(c=1.02, 에탄올)

[실시예 2]

1-(3-아세틸티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌 3급 부틸에스테르 :

약 30℃에서 디클로로메탄에 L-프롤릴-L-페닐알라닌 3급 부틸에스테르 1.0g〔Ann. Chem, 680, 132~41(1964)에 기술된 방법에 의해 제조〕을 녹인 용액을 교반하면서 N-메틸포르 폴린(0.32g)에 가하고 3-아세틸티오-2-메틸프로파노일클로라이드(0.57g)을 점적 가한다. 이 혼합물을 같은 온도에서 30분간 교반하고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 4% 중탄산나트륨, 물, 10% 시트르산 및 물의 순서로 연속해서 세척하고 황산나트륨상에서 탈수하고 감압하 농축 건고시켰다. 이 잔류물을 클로로포름으로 실리카겔상 크로마 토그라피하여 표제 화합물을 수득한다.

1-(3-아세틸티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌 에틸에스테르를 실시예 2와 같은 방법으로 제조한다.

[실시예 3]

1-(3-프로파노일티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌 3급 부틸에스테르 :

약 -30℃에서 디클로로메탄에 녹인 L-프롤릴-L-페닐알라닌 3급 부틸에스테르 (0.70g) 교반용액에 N-메틸모르폴린(0.22g)을 가하고 3-프로파노일티오-2-메틸프로파노일 클로라이드(0.43g)를 적가한다. 혼합물을 같은 온도에서 30분간 실온에서 1시간 동안 교반한다. 반응 혼합물을 4% 중탄산나트륨, 물, 10%시트르산 및 물의 순서로 세척하고 황산나트륨으로 감압하 건고 농축시킨다. 이 잔류물을 클로로포름으로 실리카겔상 크로마토그라피하여 표제 화합물을 수득한다.

[실시예 4]

1-(3-프로파노일티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌 4급 부틸에스테르 : -

L-프롤릴-L-페닐알라닌 3급 부틸에스테르(0.54g)을 디클로로메탄(10ml)에 3-프로파노일티오-2-메틸프로파노인산(0.30g)과 디사이클로 헥실카르보디이미드(0.35g)을 녹인 용액의 빙용중 냉각시킨 것에 가한다. 이 혼합물을 1시간 동안 빙용상에서 교반하고 실온에서 밤새 교반한 후 감압하 농축시킨다. 에틸아세테이트를 잔류물에 가한다. 냉각 후 침전물을 여거한다. 여액을 4% 중탄산나트륨, 물10% 시트르산 및 물의 순서로 세척하고 황산나트륨으로 감압하 건고 농축시킨다. 이 잔류물을 클로로포름으로 크로마 토그라피하여 표제 화합물을 수득한다.

[실시예 5]

1-(D-3-아세틸티오-2-메틸프로파노일) L-프롤릴-L-페닐알라닌 : -

1-(D-3-아세틸티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌 3급 부틸에스테르를 아니솔(10ml)및 트리플루오로아세트산(20ml)의 혼합물에 용해시킨다. 이 용액을 실온에서 1시간 동안 방치하고 감압하 건고농축시킨다.

잔류물을 소량의 에탄올에 용해시키고, 적당량을 n-헥산을 가한다. 침전된 결정을 수집하고, 에탄올-n-헥산으로 재결정하여 표제 화합물을 수득한다. 융점 155~156℃.

[실시예 6]

1-(D-3-프로파노일티오-2-메틸프로파노일) L-프롤릴-L-페닐알라닌 : -

1-(3-프로파노일티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌 3급 부틸에스테르를 아니솔(10ml) 및 트리 플루오로아세트산(20ml)의 혼합물에 용해시킨다.

용액을 실온에서 1시간동안 방치하고 감압하 건조 농축시킨다. 잔류물을 클로로포름-메탄올(98:2)로 실리카겔 크로마토그래피하여 1-(3-프로파노일티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤릴-L-페닐알라닌을 수득한다. 수득된 기하 이성체 혼합물을 적당량의 디에틸에스테르에 용해시킨다. 표제화합물 결정을 종자로 하여 용액에 넣고 냉장고에 보관한다.

침전된 결정을 수집하여 디에틸에스테르-석유 에테르로 반복 재결정하여 표제 화합물을 수득한다. 융점 107~114℃,

실시예 3및 4에서 사용된 출발물질은 다음과 같이 제조된다.

[비교 실시예 1]

3-프로파노일티오-2-메틸프로파노인산 : -

티오프로파노인산(50g)과 메타아크릴산(34.1g)을 3시간 동안 증기욕상에서 가열하고 실온에서 밤새 정치한다. 반응 혼합물을 감압하 증류하면 표제 화합물을 얻는다. 비점 135~138℃ (42mmHg)

[비교실시예 2]

3-프로파노일티오-2-메틸프로파노일클로라이드 : -

3-프로파노일티오-2-메틸프로파노인산(19.7g)과 티오닐클로라이드(16g)을 실온에서 밤새 교반했다. 반응 혼합물을 감압하 증류하면 표제 화합물을 얻는다. 비점 135~137℃ (35mmHg)

약리적 시험에 사용된 화합물 3은 다음과 같이 제조될 수 있다.

[비교실시예 3]

1-(D-3-아세틸티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤린아미드 : -

1-(D-3-아세틸티오-2-메틸프로파노일)-L-프롤린(2.0g)과 N-메틸모르폴린(0.78g)을 디클로로메틸에 녹이고 이 용액을 약 -30℃까지 냉각시켰다. 페닐클로로포르메이트(1.2g)을 교반하며 가하고 5분 후 암모니아 기체를 2분 동안 혼합물을 통해 통과시켰다. 이 혼합물을 다시 15분간 약 -30℃에서 교반하고, 10% 염산을 냉각시키면서 가했다. 생성 혼합물을 완전히 교반했다. 유기층을 분리하고 10% 염산으로 세척한 후 물로 세척하고 탈수한 후 감압한 농축시켰다. 이 잔류물을 클로로포름-메탄올 (99:1)로 실리카겔상 크로마토로그라피하면 표제 화합물이 얻어진다.

Claims

하기 일반식(Ⅱ)의 화합물 또는 그 카르복실기에 있어서의 반응성 유도체를 하기 일반식(Ⅲ)의 화합물과 반응시킴을 특징으로 하는 하기 일반식(Ⅰ)의 화합물의 제조방법.

상기식중 R은 수소원자 또는 저급알킬기를 나타내고 R₁은 저급알킬기를 나타낸다.