KR790001313B1 - 클라뷰란산 화합물의 제법 - Google Patents

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Description

클라뷰란산 화합물의 제법

본 발명은 β-락탐 함유 화합물, 이들 화합물의 제제 및 이들 화합물을 함유한 조성물에 관한 것이다.

다음 일반식(Ⅰ)의 클라뷰란산 및 그 염류와 에스테르류에 관해서는 특히 벨기에 특허 제827,926호에 발표되어 있다.

상기 일반식(Ⅰ)의 클라뷰란산 및 그 염류와 에스테르류는 각종의 박테리아로부터 β-락타마아제를 저지할 수 있으며, 이와같은 유용한 성질로 인해 다수의 그람-양성균과 그람-음성균에 대하여 항균 작용을 가진 페니실린류 및 세팔로스포린류의 효과를 증강시킬 수 있다.

이러한 사실에 입각하여 본 발명은 클라뷰란산의 특정한 유도체가 유용한 항균 작용과 β-락타마아제 저지 작용을 가지고 있음을 발견하게 되었다.

따라서 본 발명은 다음 일반식(Ⅱ)의 에테르류를 제공한다.

식중, R는 탄소원자수 18개까지의 불활성 유기기이고, A는 CO₂A가 카복실산기 또는 그 염이나 에스테르를 나타낼 수 있는 기이다.

일반식(Ⅱ)의 화합물에 내포된 R기로서 적당한 불활성 유기기는 탄화수소기 및 할로겐으로 치환된 탄화수소기, 에테르, 아실옥시, 아실, 에스테르, 카복실 또는 염류화된 카복실, 하이드록실, 니트로, 시아노, 아미노 및 치환된 아미노 등으로서, 다시 말해서 R기로서 적당한 것은 탄화수소와 할로겐으로 치환된 탄화수소 및(또는) 일반식 OR¹, OH, OCOR¹, COㆍR¹, CO₂R¹, NR²ㆍCOㆍR¹, NR²ㆍCO₂R₁, SOR¹, SO₂R¹, NH₂, NR¹R², NO₂, CN 또는 COㆍNR¹R²으로 표시된 기를 포함한다. 이 경우 R¹은 탄소원자수 8개까지의 탄화수소기이고, R²는 탄소원자수 4개까지의 탄화수소기이다.

본 명세서에서 "탄화수소"라 함은 알킬, 일케닐 및 알키닐기와 이러한 기들의 페닐로 치환된 기 또는 탄화수소로 치환된 페닐기등을 말한다.

일반식(Ⅱ)의 화합물에 내포된 R기로서 적당한 불활성 유기기는 탄화수소기와 할로겐에 의해 불활성적으로 치환된 탄화수소기 및(또는) 일반식 OR¹, OㆍCOR¹, COㆍR¹, CO₂R¹로 표시된 기이다. 이 경우 R¹은 탄소원자수 8개까지의 탄화수소기이다.

R¹기로서 가장 적합한 것은 탄소원자수 1-4개의 알킬기 또는 페닐이나 벤질기이다. R¹기로서 적합한 것은 메틸기이며 R²기로서 적합한 것은 메틸기이다.

일반식(Ⅱ)의 화합물에서 상술한 일반식으로 표시된 기중 적당한 것은 R가 CR⁴R⁵R⁶기로된 것이다. 이 경우 R⁴및 R⁵는 각각 탄소원자수 3개까지의 알킬기 또는 할로겐에 의해 임의로 치환된, 페닐기이거나 일반식 R⁷또는 OR⁷의 기(여기서 R⁷은 탄소원자수 3개까지의 알킬기임)이고 R⁶는 수소원자 또는 탄소원자 3개까지의 알킬기이거나 할로겐에 의해 임의로 치환된 페닐 또는 일반식 R⁸또는 OR⁸의 기(여기서 R⁸은 탄소원자수 8개까지의 알킬기임)이다.

본 발명의 화합물중에 스타피로코크스 아우레우스(staphylococcus aureus)의 균주를 산생하는 혹종의 β-락타아마제에 대하여 특히 양호한 저지 작용을 가진 화합물로서 특히 적당한 것은 R가 CH₂R⁹(여기서 R⁹는 나프틸, 페닐, 또는 할로겐에 의해 임의로 치환된 페닐임)이거나 R¹⁰또는 OR¹⁰(여기서 R¹⁰은 탄소원자수 3개까지의 알킬기임)인 화합물이다.

본 명세서에서 "불활성적으로 치환된" 것이라 함은 내포된 치환기가 의약품으로서 사용될 수 없는 고유적으로 불안정한 화합물을 생성하지 않는 것을 말한다.

A기로서 적당한 것은 수소 및 리티움, 나트륨, 칼리움, 칼시움, 마그네슘, 암모니움 및 모노알킬아민, 디알킬아민, 트리알킬아민(트리메틸 또는 트리에틸암모니움 등), 4급 알킬아민등과 같은 염형성이온 등이다.

본 발명의 화합물중에 특히 적당한 것은 일반식(Ⅱ)에서 A가 리티움, 나트륨 또는 칼리움이온, 특히 나트륨 또는 칼리움, 바람직하기로는 나트륨을 나타내는 화합물이다.

일반식(Ⅱ)로 표시된 화합물의 에스테르로서 적당한 것은 다음 일반식(Ⅲ) 및 (Ⅳ)의 화합물이다.

R는 일반식(Ⅱ)에 관련하여 상술한 바와 같고,

A¹는 할로겐에 의해 임의로 치환된 탄소원자수 8개까지의 알킬기 또는 일반식 OA⁴, OCOA⁴, SA⁴, SO₂A₄의 기이다. 이 경우 A⁴는 탄소원자수 6개까지의 탄소수소기이다.

A²는 수소원자, 탄소원자수 4개까지의 알킬기, 또는 할로겐이나 일반식 A⁵또는 OA⁵의 기(여기서 A⁵는 탄소원자수 6개까지의 알킬기임)에 의해 임의로 치환된 페닐기이며,

A³는 할로겐이나 일반식 A⁵또는 OA⁵의 기(여기서는 알킬기임)에 의해 임의로 치환된 페닐기이다.

특히 본 발명의 에스테르류는 생체내에서 가수분해될 수 있다. 적당한 에스테르류는 클라뷰란산에 부착될때 생체내에서 가수분해될 수 있는 것으로서 벨기에특허 제 827, 926 호에 발표된 것들이다.

생체내에서 가수분해될 수 있는 에스테르류로서 특히 적당한 것은 아세톡시에틸,

-아세톡시에틸, 피발로일옥시메틸, 프탈리딜, 에톡시카보닐옥시메틸, 에톡시카보닐옥시메틸 동이다.

일반식(Ⅱ)의 화합물중에 벤질에스테르는 특히 가수분해될 수 있는 에스테르로서 유용하다.

상술한 에스테르부분은 후술한 바와 같이 일반식(Ⅴ)-(Ⅸ)의 화합물로 결합시키는데도 적당하다.

또한 본 발명의 화합물중에 특히 적당한 것은 다음 일반식(Ⅴ)으로 표시된 화합물 및 그 염류와 에스테르류이다.

식중,

R¹¹은 할로겐 및(또는) OR¹², OCOR¹², COㆍR¹²또는 OH기에 의해 임의로 불활성적으로 치환된 탄소원자수 1-8개의 탄소수소기이다. 여기에서 R¹²는 탄소원자수 1-4개의 알킬기이다.

R¹¹기로서 가장 적당한 것은 탄소원자수 1-4개의 알킬렌기, 페닐렌기 또는 페닐이나 페닐렌기로 치환된 탄소원자수 1-4개의 알킬렌기이다.

R¹¹기로서 적당한 것은 -CH₂- 또는 -CH₂ㆍCH₂-기와 같은 탄소원자수 1-4개의 알킬렌기이다.

일반식(Ⅴ)의 화합물중에 특히 적당한 것은 다음 일반식(Ⅵ)으로 표시된 화합물 및 그 염류와 에스테르류이다.

식중,

R¹²는 탄소원자수 1-4개의 알킬렌기이고,

R¹³는 수소원자 또는 탄소원자수 1-4개의 알킬기이거나 페닐기로 치환된 탄소원자수 1-4개의 알킬기이다.

R¹²기로서 적당한 것은 -CH₂- 또는 -CH₂, CH₂-기이다.

일반식(Ⅵ)의 화합물은 약리학상 허용되는 염의 형태가 가장 적당하다.

또한 본 발명의 화합물중에 특히 적당한 것은 다음 일반식(Ⅶ)으로 표시된 화합물 및 그 염류와 에스테르류이다.

식중,

R¹⁴는 탄소원자수 2-8개의 2가 탄화수소기이고, R¹⁵는 수소원자 또는 탄소원자수 1-4개의 알킬기이며, R¹⁶는 수소원자 또는 R¹⁷, COㆍR¹⁷또는 CO₂R¹⁷기이다.

이 경우 R¹⁷은 페닐기에 의해 임의로 치환된 탄소원자수 1-4개의 알킬기이다.

R¹⁴기로서 가장 적당한 것은 탄소원자수 2-4개의 알킬렌기 페닐렌기 또는 페닐이나 페닐렌기로 치환된 탄소원자수 2-4개의 알킬렌기이다.

또한 본 발명의 화합물중에 특히 적당한 것은 다음 일반식(Ⅷ)으로 표시된 화합물이다.

식중,

A는 일반식(Ⅱ)과 관련하여 상술한 바와 같으며,

R¹⁸은 일반식(Ⅱ)과 관련하여 상술한 바와 같이 CH₂R¹⁸이 기로될 수 있는 기이다.

일반식(Ⅷ)의 화합물로서 특히 적당한 것은 후술한 형태의 염류와 에스테르류등이다.

일반식(Ⅷ)의 화합물로서 바람직한 것은 다음 일반식(Ⅸ)으로 표시된 화합물 및 이의 약리학상 허용되는 염류이다.

식중,

R¹⁹은 탄소원자수 1-4개의 알킬기 또는 페닐기이거나 카복실산기 또는 이의 염이나 C_1-4알킬에스테르로 치환된 상술한 기중의 하나이고, 또는 R¹⁹는 카복실산기이거나 이의 염류 또는 C_1-4알킬에스테르이다.

또한 일반식(Ⅸ)로 표시된 화합물의 에스테르는 생체내에서 가수분해될 수 있는 것일때 본 발명의 바람직한 화합물이다.

또한 본 발명은 본 발명의 화합물과 약리학상 허용되는 담체를 함유한 약제 조성물을 함유한다.

본 발명의 조성물은 경구용, 국소용 또는 비경구용으로 적합한 형태의 조성물을 포함한다.

본 발명의 조성물 형태로서 적당한 것은 정제, 캅셀제, 크림제, 시럽제, 현탁제 액제, 재제가 가능한 분말제 및 주사용 또는 주입용으로 적당한 멸균형태이다.

이러한 조성물은 희석제, 결합제, 착색제, 향미제, 보존제, 붕해제 둥과 같은 통상의 약리학상 허용되는 물질을 항생물질의 제제기술분야에 알려진 방법으로 통상의 제약 방법에 의해 함유할 수 있다.

일반식(Ⅱ)로 표시된 화합물의 염류를 함유한 주사용 또는 주입용 조성물은 주사 또는 주입후에 일반식(Ⅱ)의 화합물을 체조직내에 고농도로 유지시키고저 할때 특히 적당하다. 따라서 본 발명의 적합한 화합물중의 하나는 일반식(Ⅱ)으로 표시된 화합물의 염을 멸균형태로 함유한다.

일반식(Ⅱ)의 화합물을 함유한 단위용량 조성물로서 경구투여용으로 적합한 것은 본 발명의 적합한 조성물중의 하나이다.

일반식(Ⅱ)의 화합물 및 그 염과 에스테르는 단일 치료제로서 조성물중에 함유되거나, 또는 β-락탐 항생물질과 같은 기타 치료제와 함께 함유될 수 있다.

본 발명의 조성물중에 함유시키기에 적당한 β-락탐 항생물질은 벤질페니실린, 페녹시메틸페니실린, 카르베니실린, 아지도실린, 프로피실린, 암피실린, 아목시실린, 에미실린, 티카실린, 싸이클아실린, 세파트리아진, 피르베니실린,

-설포닐옥시벤질페니실린, 세팔로리딘, 세팔로틴, 세파졸린, 세파렉신, 세폭시틴, 세파세트릴, 세파만돌 나페이트(nafateJ), 세파피린, 세프라딘, 4-하이드록시 세팔렉신, 세파파롤(cefaparole) 세팔로글리신 및 기타 공지의 페니실린류와 세팔로스포린류, 즉 헤타실린, 메탐피실린, 4-아세톡시암피실린, 벤질페니실린, 암피실린, 아목시실린 아세톡시메틸, 에톡시카보닐, 옥시메틸 피발로일 옥시메틸 또는 프탈리딜 에스테르, 또는 세팔로글리신, 또는 카르베니실린이나 티카르실린의 페닐, 톤릴 또는 인다닐

-에스테르 등과 같은 전문치료제 등이다. 이러한 화합물은 대개 염 또는 수화물의 형태로 사용된다.

조성물중에 존재하는 페니실린 또는 세팔로스포린이 경구투여용으로 적당하지 않다면 자연적으로 조성물은 비경구투여용으로 적합하다.

일반식(Ⅱ)의 화합물은 β-락탐 항생물질과 함께 약제 조성물중에 존재할때 존재하는 β-락탐 항생물질에 대한 일반식(Ⅱ)의 화합물 비율은 광범위하여 예컨대 10 : 1-1 : 3 범위이며, 유리한 것은 5:1-1:2, 예컨대 3:1-1:1일때이다.

어느 형태이든간에 단위 용량중에 존재하는 항생제의 총량은 일반적으로 50-1,500mg 범위이며 통상적으로 100-1,000mg 범위이다.

본 발명의 조성물은 특히 호흡기 계통 비뇨기계통, 및 연조직의 감염과 가축의 유선염 치료에 사용될수 있다.

본 발명의 화합물은 일반적으로 1일 50-3,000mg 범위로 투여하지만 통상적으로 1일 100-1,000mg, 예컨대 1-6회분 복량, 적합하기로는 1일 2-4회 분복량으로 투여한다.

본 발명의 상승작용 조성물중 페니실린 또는 세팔로스포린은 일반적으로 통상 사용되는 양과 대략 동일한 량으로 존재한다.

특히 본 발명의 바람직한 조성물은 아목시실린, 암피실린, 또는 전문치료제를 150-1,000mg 함유하고 일반식(Ⅱ)의 화합물 및 그 염과 생체내 가수분해 가능한 에스테르를 50-500mg 함유하며, 특히 아목시실린, 암피실린 또는 전문치료제 200-500mg 및 일반식(Ⅱ)의 화합물, 그 염과 생체내 가수분해가능한 에스테르 50-250mg을 함유한 것이 적당하다.

이러한 조성물중에 존재하는 물질은 필요에 따라 수화될 수 있다. 예컨대 암피실린 3수화물 또는 아목시실린 3수화물을 사용할 수 있다. 이러한 조성물중 항생물질의 무게는 전문치료제의 무게를 기준으로 하지 않고 조성물로부터 이론적으로 이용되는 항생물질을 기준으로 하여 표시한다.

본 발명은 상술한 바와 같은 일반식(Ⅱ)로 표시된 화합물의 제조방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 클라뷰란산의 이스테르를 에테르화 시킨후 필요에 따라 공지방법으로 에스테르기를 카복실산기 또는 그 염이나 다른 에스테르기로 전환시키는 것으로 구성되어 있다.

일반적으로 에테르화 반응은 모핵(母核)산으로 용이하게 가수분해될 수 있는 클라뷰란산의 에스테르 예컨대 벤질에스테르 또는 그 화학적 동일물에서 일어난다.

일반식(Ⅱ)에 속하는 에스테르류는 다음 일반식(Ⅹ)의 알콜을 보론 트리플루오라이드 에테레이트, 예컨대 BF₃ㆍO(C₂H₅)₂와 같은 보론 트리플루오라이드 또는 이와 유사한 화합물과 같은 루이스산(Lewis acid)의 존재하에 일반식(Ⅰ)로 표시된 화합물의 해당하는 에스테르와 반응시켜 제조한다.

R-OH (Ⅹ)

식중,

R는 일반식(Ⅱ)과 관련하여 상술한 바와 같다.

일반적으로 상기 반응은 하강된 온도 또는 상승되지 않은 온도, 예컨대 -80℃~ +30℃, 적합하기로는 하강된 온도 예컨대 -50℃~0℃, 편리하기로는 약 -30℃에서 클로로포름, 디클로로메탄, 테트라하이드로푸란, 또는 디옥산과 같은 반응조건하에 불활성 용매중에서 실시한다.

일반식(Ⅱ)에 속하는 에스테르류의 또 다른 제법은 상기 방법의 편법으로서 다음 일반식(Ⅹ)의 알콜을 루이스산의 존재하에 하이드록시기가 차단된 다음 일반식(XI)의 클라뷰란산의 해당하는 에스테르와 반응시키는 것으로 구성되어 있다.

식중,

R²⁰은 1종 또는 그 이상의 할로원자에 의해 임의로 불활성적으로 치환된 C_1-6알킬기이고, CO₂A°는 에스테르기이다.

이 반응에 대한 조건은 일반식(Ⅹ)의 화합물과 일반식(Ⅰ)로 표시된 화합물의 에스테르와를 반응시킬때와 유사하다.

일반식(XI)의 화합물은 벨기에특허 제834,645호에 기술된 방법에 따라 제조할 수 있다. 즉 다음 일반식의 화합물 또는 그 반응성 아실화 유도체를 클라뷰란산의 해당하는 에스테르와 반응시켜 제조한다.

일반식(Ⅱ)에서 R가 일반식 CH₂R¹⁸의 기(여기서 R¹⁸은 R기의 잔여기임)인 에스테르류는 클라뷰란산의 해당하는 에스테르를 일반식 N₂-CHR¹⁸의 디아졸칸과 반응시켜 제조한다.

이 반응은 보론 트리플루오라이드의 존재하에 실시하는 것이 가장 적합하다.

이러한 반응은 -30℃ 내지 22℃와 같이 상승되지 않은 온도에서 테트라하이드로푸란 등과 같은 불활성 용매중에서 실시한다.

일반식(Ⅱ)에 속하는 에스테르류의 제법으로서 적합한 것은 다음 일반식(XII)의 화합물을 클라뷰란산의 해당하는 에스테르와 반응시키는 방법이다.

N₂R²¹(XII)

식중,

R²¹은 디아조화합물에 대하여 비반응성인 R의 정의에 속하는 기이다.

R²¹기로서 적당한 것은 알킬, 알케닐, 아릴 또는 예컨대 할로겐에 의해 분활성적으로 치환된 탄소원자수 18개까지의 아랄킬기이다.

R²¹기로서 바람직한 것은 일반식 CH₂R²²의 기이다. 이 경우 R²²는 R²¹기의 잔여기이다.

일반적으로 상기 반응은 루이스산 촉매의 존재하에 실시하는 것이 가장 적당하다. 루이스산 촉매로서 적당한 것은 보론 트리플루오라이드 에테레이트, 예컨대 BF₃ㆍO(C₂H₅)₂와 같은 보론 트리플루오타이드 또는 그 동등물이다.

일반적으로 상기 반응은 클로로포름, 디클로로메탄, 테트라하이드로푸란, 디옥산등과 같은 반응 조건하에 불활성 용매중에서 실시한다.

반응은 강하된 온도 또는 상승되지 않은 온도, 예컨대 -80℃내지 +30℃, 적합하기로는 강하된 온도, 예컨대 -30℃내지 +10℃에서 실시하는 것이 가장 적당하다. 본 발명자들은 반응을 약 -20℃ 내지 0℃에서 실시하는 것이 편리하고 적당한 온도임을 발견하였다.

일반식(Ⅱ)에 속하는 염류는 아주 온화한 염기성 가수분해, 예컨대 염기를 서서히 첨가하여 PH7-9로 유지된 수용액중에서 가수분해하여 일반식(Ⅱ)에 속하는 에스테르류로 부터 제조할 수 있다.

일반식(Ⅱ)에 속하는 산류와 염류는 천이금속촉매의 존재하에 중압 또는 저압 수소로 수소화하여 일반식(Ⅱ)에 속하는 수소화가능한 에스테르류로부터 제조할 수 있다.

특히 유용한 촉매로서 인정된 것은 팔라듐, 예컨대 탄소상에 담지된 10%팔라듐이다. 본 발명자들은 사용되는 에테르 중량에 대한 탄소상 10% 팔라듐의 적당한 중량비는 1 : 3임을 발견하였다.

수소화 반응은 테트라하이드로푸란을 함유한 용매중에서 용액으로 실시하는 것이 바람직하다.

수소화가능한 에스테르류로서 적당한 것은 상술한 바와 같은 일반식(Ⅳ)의 에스테르류이다. 특히 수소화 가능한 에스테르로서 적합한 것은 벤질에스테르이다.

만일 중탄산나트륨, 중탄산칼리움, 탄산리티움, 탄산칼시움 등과 같은 염기가 반응 혼합물중에 존재하면 생성되는 화합물은 염의 형태이다. 만일 이러한 염기가 함유되어 있지 않으면 생성물은 유리산의 형태이다.

또한 일반식(Ⅱ)에 속하는 산류는 해당하는 나트륨등의 염을 주의하여 산성화시켜 제조할 수 있다.

이상 언급한 바와 같이 본 발명은 식중 CO₂A가 카복실산 또는 그 염인 일반식(Ⅱ)으로 표시된 화합물의 제조방법을 제공하는 바로서 이 방법은 식중 CO₂A가 에스테르기인 일반식(Ⅱ)의 해당하는 화합물을 탈에스테르화 시키는 것으로 구성되어 있다.

일반식(Ⅱ)의 화합물로서 아미노, 카복실산, 또는 하이드록실기와 같은 비교적 반응성 부분을 함유한 것일때는 반응성 부분이 축합반응시에 보호된 경우이면 상술한 방법으로 제조할 수 있다.

보호기로서 적당한 것은 아미노 또는 하이드록실기일 경우이면 벤질옥시카보닐 유도체이고 카복실기일 경우이면 벤질에스테르이다. 이러한 보호기는 통상의 방법으로 수소화에 의해 제거된다.

일반식(Ⅱ)에 속하는 에스테르류는 일반식(Ⅱ)에 속하는 알카리금속염과 같은 해당하는 염을 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 메탄설폰네이트, 톨루엔설폰네이트 등의 할라이드 또는 활성 에스테르와 같은 에스테르화제와 반응시키거나, 일반식(Ⅱ)에 속하는 산을 디아조화합물과 반응시켜 제조한다. 이러한 반응은 통상의 조건으로 행해진다.

따라서 본 발명은 식중 CO₂A가 에스테르기인 일반식(Ⅱ)으로 표시된 화합물의 제조방법을 제공하는 바로서, 이 방법은 식중 CO₂A가 카복실산 또는 그 염인 일반식(Ⅱ)의 해당하는 화합물을 에스테르화시키는 것으로 구성되어 있다.

일반적으로 본 발명의 방법은 본 발명의 적합한 화합물로서 상술한 바와 같은 일반식(Ⅱ)-(Ⅸ)의 화합물을 제조하는데 채용하는 것이 좋다.

또한 일반식(Ⅱ)에 속하는 에스테르류는 다음 일반식(XIII)의 화합물과의 반응에 의해 클라뷰란산의 해당하는 에스테르를 에테르화시켜 제조할 수 있다.

식중,

Q는 전자가 풍부한 부분에 의해 용이하게 치환될 수 있는 기이다.

Q기로서 적당한 것은 염소, 브롬 또는 요드원자, 또는 메탄설폰네이트, 톨루엔 설폰네이트 또는 이들의 화학적 동등물과 같은 활성 에스테르이다.

Q-R로서 가장 적당한 것은 일반식 Q-CH₂R¹⁸의 기이다. 이 경우 R¹⁸은 상술한 바와 같다.

일반적으로 반응은 콜리딘, 디싸이클로헥실아민 등과 같은 산수용체의 존재하에 실시한다.

〔디아조화합물의 제조에 대해서는 Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemic Vol 10/4 4th Edition에 기술되어 있음〕

이하 실시예에 의하여 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.

[실시예 1]

메틸 클라뷰라닐 0-메틸 에테르의 구조

메탄올(10ml)중의 벤질 클라뷰란네이트(e1)(1.5g)를 상온 상압에서 30분간 탄소상 10% 팔라듐(0.4g)으로 수소화시키고, 용액을 셀라이트(Celite)로 여과하여 0℃에서 에테르중의 디아조메탄으로 처리한후, 용액을 0℃에서 철야 방치하고 용매를 증발시켜 유상물을 실리카겔상에서 크로마토그래피를 행하여 조제 생성물(e2)(35mg)을 제 2 용출물로서 얻은 다음, 이 조제 생성물을 다시 크로마토그래피에 의해 정제한 결과 주제 화합물(15mg)이 무색 유상물로서 얻어졌다.

I.r.(CHCl₃) : 1,800, 1,750, 1,695㎝^-1;

N.m.r.(CDCl₃) : 3.03(1H, dd, J17Hz, J´1Hz 9β-CH), 3.53(1H, dd, J17Hz, J'2.5Hz, 6

-CH), 3.31(3H, s, OCH₃), 3.79(3H, s, CO₂CH₃), 4.03(2H, d, J7Hz, CH₂OCH₃), 4.88(1H, brt, J7Hz, 올레핀 CH), 5.08(1H, m, 3-CH), 5.70δ(1H, dd, J2.5Hz, 5-CH).

(e2)에 대한 대략적인 β-락타마아제 저지치 I₅₀(㎍/ml)는 다음과 같다.

에스케리키아 코리 JT4(Escherichia coli) 0.9

크레브시엘라 아에로게네스 E70(Klebsiella aeorgenes) 0.25

스타피로코크스 아우레우스 루쎌(Staphylococcus aureus Russell) 0.5

에스케리키아 코리 JT410(Escherichia Coli) 3.1

피 모이그 씨아르(P. moig, Cr.) 0.68

프세우도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa) 1.9

시트로박테르 만티오(Citrobacter mantio) 0.45

[실시예 2]

벤질 클라뷰라닐 0-메틸 에테르의 제조

벤질 클라뷰란네이트(e1)(300mg)을 건조메틸렌 디클로라이드(25ml)에 용해시켜 0℃로 냉각시키고, 이 용액에 보론 트리플루오라이드 에테레이트(5적)을 0℃에서 첨가한 다음에 에테르중의 디아조메탄 용액을 가한후, 반응혼합물을 1시간동안 0℃에서 교반하여 3% 중탄산나트륨 용액(2 ×25ml)으로 세척하고, 유기층을 황산 마그네슘상에서 건조하여 증발시킨후 크로마토그래피에 의해 정제한 결과 주제 화합물(e3)(66㎎)이 얻어졌다.

I.r.(CHCl₃) : 1,800, 1,745, 1,695㎝^-1;

N.m.r(CDCl₃) : 3.10(1H, d, J17Hz, 6β-CH) 3.35(3H, s, OCH₃), 3.60(1H, dd, J17Hz, J'2.5Hz, 6

-CH), 4.12(2H, d, J8Hz, CH₂OCH₃), 4.94(1H, t, J8Hz, =CH-CH₂), 5.24(1H, br, s, 3-CH), 5.32(2H, s, CO₂CH₂Ph), 5.82(1H, d, J2.5Hz, 5-CH), 7.51δ(5H, s, CO₂CH₂Ph).

(e3)에 대한 대략적인 β-락타마아제 저지치 I₅₀(㎍/ml)는 다음과 같다.

에스케리키아 코리 JT4(Escherichia Coli) 0.1

크레브시엘라 아에로게네스 E70(Klebsiella aerogenes) 0.05

스타피로코크스 아우레우스 루쎌(Staphylococcus aureus Russell) 0.05

프로테우스 미라비리스 C889(Proteus mirabilis) 〈0.07

프세우도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa) 1.4

프세우도모나스 달그레이쉬(Pseudomonas dalgleish) 〈0.07

시트로박테르 만티오(Catrobacter mantio) 1.1

[실시예 3]

소디움 클라뷰타닐 0-메틸 에테르의 제조

에테르(e3)(30㎎)를 테트라하이드로푸란(3ml)에 용해시키고 이 용액에 탄소상 10% 팔라듐(10㎎)을 가하여 용액을 상온상압에서 15분간 수소화시킨후 여과하여 물 0.5ml중의 중탄산 나트륨(8.4㎎)을 가하고, 용매를 증발시켜 에테르(15㎎)와 혼련시킨 결과 나트륨염(e4)이 무정형고체로서 얻어졌다.

I.r.(KBr disc) : 1,790, 1,690, 1,615㎝^-1;

N.m.r.(D₂O) : 3.07(1H, d, J17Hz, 6β-CH), 3.27(3H, s, OCH₃), 3.54(1H, dd, J17Hz, J'2.5Hz, 6

-CH), 4.04(2H, d, J8Hz, CH₂OCH₃), 4.87(1H, t, J8Hz, =CH-CH₂), 4.93(1H, s, 3-CH), 5.69δ(1H, d, J2.5Hz, 5-CH).

(e4)에 대한 개략적인 β-락타마아제 저지치 I₅₀(㎍/ml)는 다음과 같다.

에스케리키아 코리 JT4(Escherichia Coli) 0.18

크레브시엘라 아에로게네스 E70(Klebsiella aerogenes) 0.07

스타피로코크스 아우레우스 루쎌(Staphylococcus aureus Russell) 0.05

프로테우스 미라비리스 C889(Proteus mirabilis) 0.01

[실시예 4]

메틸 클라뷰라닐 0-메틸 에테르의 제조

메틸렌 클로라이드(25ml)중의 벤질 클라뷰란네이트(e1)(300㎎)을 -30℃로 냉각시켜 보론 트리플루오라이드 에테레이트(5적)로 처리하고 이어서 에테르중의 디아조톨루엔의 용액으로 처리한후 용액을 -30℃에서 1시간동안 교반하여 3% 중탄산 나트륨 용액(3×25ml)으로 세척하고, 유기층을 황산 마그네슘상에서 건조후 증발시켜 크로마토그래피를 행한 결과 조제 벤질 3-(2-벤질옥시에틸리덴)-7-옥소-4-옥사-1아자비싸클로〔3,2,0〕 헵탄-2-카복실레이트(e5)(150㎎)가 유상물로서 얻어졌다. 이 유상물을 테트라하이드로푸란(5ml)에 용해시켜 상온상압에서 20분간 10% pd/c(20㎎)으로 수소화시키고, 용액을 여과하여 0℃에서 에테르중의 디아조메탄 용액으로 처리한 다음, 용매를 증발시켜 크로마토그래피를 행한 결과 주제 화합물(e5)(30㎎)이 무색 유상물로서 얻어졌다.

I.r.(CHCl₃) : 1,800, 1,750, 1,695㎝^-1;

N.m.r.(CDCl₃) : 3.12(1H, d, J17Hz, 6β-CH) 3.62(1H, dd, J17Hz, J´2.5Hz, 6

-CH), 3.89(3H, s, CO₂CH₃), 4.25(2H, d, J8Hz, =CH-CH₂O), 4.61(2H, s, OCH₂Ph), 5.02(1H, brㆍt, J8Hz, =CH-CH₂), 5.18(1H, m, 3-CH), 5.82(1H, d, J2.5Hz, 5-CH), 7.49δ(5H, s, OCH₂Ph) :

=+15℃(C=1.37; MeOH).

시험관내 항균작용(μg/ml)(Antibacterial Activity In Vitro)

스타피로코크스 아우레우스 옥스포드(Staphylococcus aureus Oxford) 15-31

스타피로코크스 아우레우스 루쎌(Staphylococcus aureus Russell) 8-15

크레브시엘라 아오레게네스 에이(Klebsiella aerogenes A) 〉500

β-락타마아제 저지 I₅₀(μg/ml)(β-Lactamase Inhibition)

에스케리키아 코리 JT4(Escherichia Coli) 0.8

크레브시엘라 아에로게네스 E70(Klebsiella aerogenes) 0.8

스타피로코크스 아우테우스 러쎌(Staphylococcus aureus Russell) 0.005

[실시예 5]

소디움 클라뷰라닐 0-벤질 에테르의 제조

조제 벤질 3-(2-벤질에틸리덴)-7-옥소-4-아자-1-아자비싸이클로 〔3, 2, 0〕헵탄-2-카복실레이트(e1)(150㎎)을 테트라하이드로푸란(5ml)에 용해시켜 상온상압에서 20분간 10% pd/c(20㎎)으로 수소화시키고, 용액을 여과하여 물 1ml중의 중탄산나트륨(15㎎)으로 처리한후, 용매를 증발시키고 잔류물을 물(10ml)에 용해시켜 에틸아세테이트(3 ×10ml)로 세척한 다음, 수성층을 증발시켜 에테르(e6)(35㎎)와 혼련시킨 결과 소망하는 나트륨 염이 무정형 고체로서 얻어졌다.

I.r.(KBr) : 1,790, 1,690, 1,615㎝^-1;

N.m.r.(D₂O) : 3.09(1H, d, J17Hz, 6β-CH) 3.59(1H, dd, J17Hz, J2.5Hz, 6

-CH), 4.20(2H, d, J8Hz, =CH-CH₂O), 4.48(2H, s, OCH₂ph), 4.97(1H, brㆍt, J8Hz, =CH-CH₂O), 4.99(1H, m, 3-CH), 5.74(1H, d, J2.5Hz, 5-CH), 7.42δ(5H, s, OCH₂Ph);

=+22.5°(C=1.15; 수성 MeOH).

시험관내 항균작용(μg/ml)(Antibacterial Activity In Vitro)

크레브시엘라 아에로게네스 에이(Klebsiella aerogenes A) 125

스타피로코크스 아우레우스 옥스포드(Staphylococcus aureus Oxford) 4.0

스타피로코크스 아우레우스 러쎌(Staphylococcus aureus Russell) 8.0

β-락타마아제 저지 I₅₀(㎍/ml)(β-Lactamase Inhibition)

에스케리키아 코리 JT4(Escherichia Cali) 0.1

크레브시엘라 아에로게네스 E70(Klebsiella aerogenes) 0.04

스타피로코크스 아우레우스 루쎌(Staphylococcus aureus Russell) 0.005

프로테우스 미라비리스 C889(Proteus mirabilis) 0.02

프세우도모나스 달그레이쉬(Pseudomonas dagleish) 0.008

[실시예 6]

벤질클라뷰라닐〔에톡시카보닐 메틸〕 에테르의 제조

벤질 클라뷰란네이트(e1)(1.44g)를 건조 메틸렌 디클로라이드(100ml)에 용해시키고 이 용액에 보론 트리플루오라이드 에테레이트(25적 0.3ml)를 -30℃에서 가한후 메틸렌 디클로라이드 (10ml)중의 에틸 디아조아세테이트(2.90g 5당량)를 1시간에 걸쳐 가하고, 혼합물을 -30℃ 내지 -10℃에서 1시간동안 교반하여 용액을 3% 중탄산 나트륨 용액(3×300ml)으로 세척후 황산 마그네슘상에서 건조시켜 용매를 실온에서 증발시키고 잔류물을 크로마토그래피에 의해 정제한 결과 주제 화합물(e6)(600㎎)이 무색 유상물로서 얻어졌다.

I.r.(CHCl₃) : 1,800, 1,745, 1,695㎝^-1;

N.m.r.(CDCl₃) : 1.29(3H, t, J8Hz, -CO₂CH₂CH₃)_,3.00(1H, d, J17Hz, 6β-CH) 3.50(1H, dd, J17Hz, J'2.5Hz, 6

-CH), 3.97(2H, s, CH₂CO₂Et), 3.90 to 4.50(4H, 복합패턴, =CH-CH₂and CO₂CH₂CH₃), 4.79(1H, t, J8Hz, =CH-CH₂), 5.14(1H, brs, 3-CH), 5.23(2H, s, CO₂CH₂Ph), 5.72(1H, d, 2.5Hz, 5-CH), 7.37δ(5H, s, COCH₂Ph).

=+35.3°(C=1.29; MeOH).

(e7)에 대한 대략적인 β-락타마아제 저지치 I₅₀(μg/ml)는 다음과 같다.

에스케리키아 코리 JT4(Escherichia Cali) 0.14

크레브시엘라 아에로게네스 E70(Klebsiella aerogenes) 0.30

스타피로코크스 아우레우스 루쎌(Staphylococcus aureus Russell) 0.12

프로테우스 미라비리스 C889(Proteus mirabilis) 1.0

시험관내 항균작용(μg/ml)(Antibacterial Activity In Vitro)

크레브시엘라 아에로게네스 에이(Klebsiella aerogenes A) 〉500

스타피로코크스 아우레우스 옥스포드(Staphylococcus aureus Oxford) 125

스타피로코크스 아우레우스 루쎌(Staphylococcus aureus Russell) 125

[실시예 7]

소디움 클라뷰라닐〔에톡시카보닐 메틸〕 에테르의 제조

에스테르(e7)(188㎎)를 건조 테트라하이드로푸란(5ml)에 용해시키고 10% pd/c(65㎎)를 가하여 용액을 상온 상압에서 15분간 수소화시킨후, 용액을 키젤구르(Kiselguhr)로 여과하여 수(1ml)중의 중탄산 나트륨(42㎎)을 가하고 용매를 증발시켜 잔류물을 용출제로서 부탄올/에탄올/물(4/1/1)을 사용하여 실리카 겔상에서 크로마토그라피를 행하고 생성물을 에테르와 혼련시킨 결과 나트륨염(e8)(95㎎)이 무정형 고체로서 얻어졌다.

I.r.(KBr) : 1,790, 1,740, 1,690, 1,600㎝^-1;

N.m.r.(D₂O) : 1.27(3H, t, J8Hz, CO₂CH₂CH_3),3.00(1H, d, J17Hz, 6β-CH) 3.57(1H, dd, J17Hz, J'2.5Hz, 6

-CH), 4.14(2H, s, OCH₂CO₂Et), 4.21(4H, 중첩된 2중선 및 4중선, J=J'8Hz, =CH-CH₂-and CO₂CH₂CH₃), 4.86(1H, t, J8Hz, =CH-CH₂-), 4.96(1H, brs, 3-CH), 4.71δ(1H, d, J2.5Hz, 5-CH).

=36.5°(C=1.15; 50% 수성 MeOH).

(e8)에 대한 대략적인 β-락타마아제 저지치 I₅₀는 다음과 같다.

에스케리키아 코리 JT4(Escherichia Cali) 0.16

크레브시엘라 아에토로네스 E70(Klebsiella aerogenes) 0.034

스타피로코크스 아우레우스 루쎌(Staphylococcus aureus Russell) 0.044

프로테우스 미라비리스 C889(Proteus mirabilis) 0.025

시험관내 항균작용(㎍/ml)(Antibacterial Activity In Vitro)

에스케리키아 코리 10418(Escherichia Coli) 31.0

크레브시엘라 아에로게네스 에이(Klebsiella aerogenes A) 15.0

프로테우스 미라비리스 C977(Proteus mirabilis) 62.0

스타피로코크스 아우레우스 옥스포드(Staphylococcus aureus Oxford) 15.0

스타피로코크스 아우레우스 루쎌(Staphylococcus aureus Russell) 15.0

[실시예 8]

소디움 클라뷰라닐〔에톡시카보닐 메틸〕 에테르의 제조

에스테르(e7)(112㎎)를 가수분해가 완료될때까지 pH스타트를 사용하여 일정한 pH에서 1N NaOH로 가수분해시키고 크로마토그래피를 행하여 에테르와 혼련시킨 결과 나트륨염(e8)(15㎎)이 무정형 고체로서 얻어졌다.

[실시예 9]

벤질 클라뷰라닐〔벤질카보닐 메틸〕 에테르의 제조

벤질 클라뷰란네이트(e1)(1.8g)를 건조메틸렌 클로라이드(100ml)에 용해시키고 보론 트리풀루오로라이드 에테레이트(25적, 0.3ml)를 -30℃에서 가한후 메틸렌 클로라이드(20ml)중의 벤질 디아조아세테이트(66% 순수한 물질 5g)를 -30℃에서 30분간에 걸쳐 적가하고 혼합물을 -30℃ 내지 -10℃에서 1시간동안 교반한 다음, 용액을 3% 중탄산 나트륨용액(2 ×50ml)으로 세척하여 환산 마그네슘상에서 건조시키고, 용매를 실온에서 증발시킨후 잔류물을 용출제로서 헥산/에틸아세테이트를 사용하여 실리카겔상에서 크로마토그래피를 행하고 이와같이 하여 얻어진 다소 불순한 유상물을 크로마토그래피에 의해 정제한 결과 순수한 주제 화합물(e9)(0.32g)이 무색 유상물로서 얻어졌다.

I.r.(박막) : 1,800, 1,760, 1,750, 1,695㎝^-1;

N.m.r.(CDCl₃) : 7.29(10H, 방향족H), 5.58(1H, d, J2.5Hz, 5-CH), 5.13(4H, CH₂Ph), 5.03(1H, 3-CH), 4.79(1H, t, J7Hz, =CH-CH₂), 4.16(2H, d, J8Hz, =CH-CH₂-), 4.00(2H, s, =CH-CH₂-O-CH₂-), 3.40-2.95δ(2H, dd, J18Hz, 6-CH₂).

벤질 디아조아세테이트는 벤질클클로포름에이트와 디아조메탄을 4℃에서 3일간 반응시켜 제조하였으며 순도 66%의 유상물로서 얻어졌다.

[실시예 10]

디-소디움 클라뷰라닐〔카복시메틸〕에테르의 제조

에스테르(e9)(260㎎)를 테르라하이드로푸란과 물의 혼합액(5 : 1, 12ml)에 용해시키고 중탄산 나트륨(100㎎)과 10% pd/c(150㎎)을 가한후, 이 용액을 상온상압에서 30분간 수소화기키고, 여과하여 증발시킨 결과 소망하는 디소디움염(e10)이 얻어졌다.

I.r.(KBr) : 1,780, 1,685, 1,600, 1,425㎝^-1.

[실시예 11]

벤질 9-(0-시아노메틸) 클라뷰란네이트의 제조

메틸렌 니클로라이드(50ml)에 용해시킨 벤질 클라뷰란네이트(e1)(5.18g)의 용액을 4A분자체 상에서 건조시켜 여과하고, 용액을 -40℃내지 -30℃로 냉각시켜 보론트리플루오리이드 에테레이트 1ml를 가한후, 디아조아세토니트릴의 용액(Houben -Weyl vol. 10/4에서와 같이 아미노아세토니트릴 염산염 9.3g으로부터 제조함)을 -40℃ 내지 -30℃의 온도로 유지하면서 1시간에 걸쳐 적가하고, 혼합물을 -10℃로 가온하여 -10℃에서 1시간 경과후 용액을 중탄산 나트륨 희용액(200ml)으로 분할하여 3회 세척하고 염화칼슘상에서 건조시켜 증발시킨 결과 갈색 점상 물질이 얻어졌으며, 이 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제한 결과(키젤구르; 용출제로서 싸이클로헥산 : 에틸아세테이트 3 : 1를 사용하고 이어서 1 : 1을 사용하였음) 약간 불순한 생성물이 얻어졌다. 이 생성물을 반복하여 크로마토그래피(동일시스템)에 의해 정제한 결과 소망하는 생성물(e11)(1.56g)이 얻어졌다.

I.r.(박막) : 1,805, 1,750, 1,698㎝^-1

N.m.r.(CDCl₃) : δ3.02(1H, 이중선, J17Hz), 3.45(1H, 중복이중선, J17Hz 및 3Hz), 4.01(2H, 단일선), 4.14(2H, 이중선, J7Hz), 4.70(1H, 화인(fine) 카플링일때 3중선, J trip 7Hz) 5.06(1H, 단일선), 5.14(2H, 단일선), 5.66(1H, 화인(fine) 카플링일때 단일선), 3.28(5H, 단일선).

[실시예 12]

소디움 9-(0-시아노메틸)-클라뷰란네이트의 제조

테트라하이드로푸란/물(5 : 1 30ml)에 용해시킨 벤질9-(0-시아노메틸) 클라뷰란네이트(e11)(1.56g) 및 중탄산 나트륨(0.399g)의 혼액을 수소의 요구량이 흡수될때까지 상온 상압에서 10% pd/c(0.5g)로 수소화시키고, 혼합물을 여과하여 촉매를 수세한후, 합친 여액을 테트라하이드로푸란의 대부분이 제거될때까지 증발시켜 잔여 수용액을 에틸아세테이트로 세척하고 냉동 건조시킨 결과 소망하는 생성물(e12)(913㎎)이 갈색 고체로서 얻어졌다. 다음 샘플(535㎎)을 취하여 용출제로서 n-부탄올 : H₂O : 에탄올(4 : 1 : 1) 용매를 사용하여 키젤구르를 함유한 짧은 칼럼에 통과시킨 결과 주제 화합물(e12)(213㎎)이 담황색 고체로서 얻어졌다.

N.m.r.(D₂O) : δ3.24(1H, 이중선, J16Hz), 3.66(1H, 중복이중선, J16Hz 및 3Hz), 4.30(2H, 이중선, J7Hz), 4.40(2H, 단일선), 4.91(1H, 화인카플링일때 3중선, J17Hz), 5.00(1H, 단일선), 5.78(1H, 이중선, 3Hz).

I.r. (KBr disc) : 1,780, 1,610(broad)㎝^-1,

[실시예 13]

벤질9-〔0-(4-니트로벤질)〕 클라뷰란네이트의 제조

메틸렌 클로라이드(50ml)에 용해시킨 벤질 클라뷰란네이트(e1)(4.33g)의 용액을 30분간 4A 분자체상에서 건조시킨후 용액을 여과하여 -30℃로 냉각시키고 보론트리플루오라이드 에테레이트(0.8ml)를 가하여 -30℃에서 1시간에 걸쳐 교반한 용액에 메틸렌 클로라이드(150ml)에 용해시킨 4-니트로페닐 디아조메탄(7.34g)의 용액을 가한 다음, 혼합물을 1시간에 걸쳐 -10℃로 가온하고, 용액을 중탄산나트륨용액(3×150ml)으로 세척하여 황산마그네슘상에서 건조후 증발시켜 키젤구르 H상에서 반복하여 크로마토그래피를 행한 결과(용출재로서 싸이클로헥산 : 에틸아세테이트 1:1를 사용하여 2회, 메틸렌클로라이드를 사용하여 1회) 순수한 에테르(e13)(230㎎)가 얻어졌다.

I.r.(박막) : 1,800, 1,750, 1,700, 1,520㎝^-1.

N.m.r.(CDCl₃) : 2.98(1H, 이중선, J17Hz), 3.44(1H, 중복이중선, J17Hz 및 3Hz), 4.09(2H, 이중선, J7Hz), 3.45(2H, 단일선), 4.8(1H, 화인카플링일때 3중선, J7Hz), 5.05(1H, 단일선), 5.14(2H, 단일선), 5.63(1H, 화인카플링일때 이중선) 7.27(5H, 단일선), 7.38(2H, 이중선, J9Hz), 8.11(2H, 이중선, J9Hz).

[실시예 14]

벤질9-(0)-알릴클라뷰란네이트의 제조

(1) N-니트로소-N-알릴벤즈아미드

4염화탄소(150ml)에 용해시킨 이산화 질소(24.1g)의 용액을 -20℃에서 무수 초산나트륨과 4염화탄소(150ml)의 교반한 혼합물에 가하고 -0℃에서 교반한 혼합물에 N-알릴벤즈아미드(28.4g)를 가하여 -℃에서 30분간 교반한 다음, 이 혼합물을 중탄산 나트륨 수용액(2×400ml)으로 세척, 건조, 증발시킨 결과 N-니트로소-N-알릴벤즈아미드(28.5g)가 얻어졌다.

υ_max(액상 박막) : 1,710, 1,650, 1,600, 1,570, 1,355, 1,285, 1,155, 1,040 및 920㎝^-1,

δ(CDCl₃) : 7.83-7.20(5H, m, ArH), 6.03-4.83(3H, m, =H), 및 4.33(2H, broad d, J4Hz).

(2) 3-디아조프로프-1-엔

피롤리딘(4.53ml)을 -20℃에서 메틸렌 클로라이드(100ml)에 용해시킨 N-니트로소-N-알릴벤즈아미드(9.5g)의 용액에 가하고 혼합물을 -20℃에서 15분간 교반한 결과 3-디아조프로프-1-엔의 용액이 얻어졌다.

υ_max(CH₂Cl₂) : 2, 030㎝^-1, 이 용액은 사용할 때까지 -0℃에서 보존하였다.

(3) 벤질9-(0)-알릴클라뷰란네이트

보론 트리플루오라이드 에테라이트(1ml)를 -30℃에서 메틸렌 클로라이드(150ml)에 용해시킨 벤질 클라뷰란네이트(2.89g)의 용액에 가하고, 이 혼합물에 -30℃에서 위에서 제조한 3-디아조프로프-1-엔의 용액을 가한후 용액을 -30℃ 내지 -10℃에서 1시간동안 교반하여 중탄산 나트륨 수용액(2×200ml)으로 세척, 건조, 증발시켜 유상물로서 얻어진 조제 생성물을 싸이클로헥산-에틸아세테이트를 사용하여 실리카겔상(50g)에서 크로마토그래피를 행한 결과 벤질 9-(0)-알릴클라뷰란네이트(e14)(0.92g)가 무색 액체로서 얻어졌다.

〔

〕_D+45.3°(CHCl₃; C, 1.0), υ_max(액상 박막) : 1,800, 1,750, 1,695, 1,300, 1,175, 1,030, 1,010, 995㎝^-1.

δ(CDCl₃) : 7.37 (5H, s, Ar-H), 6.05-5.70(1H, m,

), 5.60(1H, d, J2.5Hz, 5-CH), 5.30-5.10(2H, m,

) 5.13(2H, s, -CH₂Ph), 5.03(1H, m, 3-CH), 4.79(1H, broad t, J8Hz, 8-CH), 4.01(2H, d, J8Hz, 9-CH₂), 3.86(2H, broad d, J7Hz, -CH₂-CH=CH₂), 3.41(1H, dd, J18Hz, J'2.5Hz, 6α-CH), 2.98(1H, d, J18Hz, 6β-CH). (분석치 : C, 65.85; H, 8.65; N, 4.45%ㆍC₁₈H₁₉NO₅의 이론치는 C, 65.65; H, 5.8; N, 4.25%임)

[실시예 15]

벤질 9-〔2-벤질옥시카보닐에틸〕 클라뷰란네이트의 제조

(1) 벤질 N-니트로소-N-벤질옥시카보닐-β-아란네이트

4염화탄소(40ml)에 용해시킨 이산화질소(6.9g)의 용액을 -20℃에서 무수 초산나트륨(12.3g)과 4염화탄소(40ml)의 교반용액에 가하고, 이 혼합물에 4염화탄소(50ml)중의 벤질 N-벤질옥시카보닐-β-아란네이트(12.95g)를 -5℃에서 가하여 0℃에서 30분간 교반한후, 반응혼합물을 중탄산나트륨 수용액(2×100ml)으로 세척하고 4염화탄소 용액을 건조시켜 증발시킨 결과 벤질 N-니트로소-N-벤질옥시카보닐-β-아란네이트(12.5g)가 유상물로서 얻어졌다.

υ_max(CCl₄) : 1,745, 1,705, 1,520, 1,400, 1,350, 1,175, 1,140, 1,095, 960㎝^-1, δ(CDCl₃) : 7.30(10H, s, ArH), 5.46, 2H, s, CH₂Ph), 4.90(2H, s, CH₂Ph), 3.92(2H, t, J7Hz), 및 2.36(2H, t, J7Hz),

(n. m. r 스펙트럼은 출발물질과 본 유상물의 순도가 약 73%임을 나타냈음).

(2) 벤질 9-〔0-(2-벤질옥시카보닐에틸)〕 플라뷰란네이트

-20℃에서 메틸렌 클로라이드(25ml)에 용해시킨 벤질 N-니트로소-N-벤질옥시카보닐-β-아란네이트(3.24g)의 용액에 피롤리딘(0.58ml)을 가하고, 환합물을 -20℃에서 15분간 교반하여 얻어진 벤질 3-디아조프로피온네이트 용액을 0℃로 유지시켜 다음 단계에 사용하였다.

-30℃에서 메틸렌클로라이드(150ml)에 용해시킨 벤질클라뷰란네이트(1g)의 용액에 보론 트리플루오라이드 에테레이트(0.5ml)를 가하고, 이 용액에 -30℃에서 상기에서 얻어진 벤질 3-디아조프로피온네이트의 용액을 가한후 용액을 1시간 동안 -30℃ 내지 -10℃에서 교반하고 중탄산나트륨 수용액(2×50ml)으로 세척, 건조, 증발시켜 유상물로서 얻어진 조제생성물을 용출제로서 싸이클로헥산-에틸 아세테이트를 사용하여 실리카겔(30g)상에서 크로마토그래피를 행한 결과 벤질 9-〔0-(2-벤질옥시카보닐에틸)〕 클라뷰란네이트(e15)(0.21g)가 무색 액체로서 얻어졌다.

〔

〕_D29.3°(CHCl₃: C, 1.0), υ_max(액상 박막); 1,805, 1,740, 1700, 1,240, 1,170, 1,100, 1,040 및 1,020㎝^-1, δ(CDCl₃) : 7.28(10H, s, Ar-H), 5.60(1H, d, J2.5Hz, 5-CH), 5.14(2H, s, CH₂Ph), 5.09(2H, s, CH₂Ph), 5.02(1H,₂m, 3-CH), 4.74(1H, broad t, J8Hz 8-CH), 4.01(2H, broad d, J8Hz, 9-CH₂), 3.60(2H, t, J7Hz), 3.41(1H, dd, J18Hz, J'2.5Hz, 6

-CH), 2.99(1H, d, J18Hz, 6β-CH) 및 2.57(2H, t, J7Hz). M⁺451. 1626, C₂₅H₂₅NO₇은 M⁺451. 1631을 요함.

[실시예 16]

디소디움 9-〔0-(2-카복시에틸)〕 클라뷰란네이트

테트라하이드로푸란/물(5:1, 12ml)중의 벤질 9-〔0-(벤질옥시카보닐에틸)〕 클라뷰란네이트(e15)(0.17g)와 중탄산 나트륨(0.063g) 혼합물을 상온상압에서 30분간 10% Pd/c(0.1g)의 존재하에 수소화시키고, 혼합물을 여과하여 여액을 증발시킨 결과 디소디움 9-〔0-(카보시에틸)〕 클란뷰란네이트(e16)(0.084g)가 얻어졌다.

υ_max(KBr) : 1,780, 1,690, 1,620, 1,390, 1,310, 1,195, 1,155, 1,05, 1,040 및 895㎝^-1.

δ(D₂O) : 5.65(1H, d, J2.5Hz, 5-CH), 4.87(1H, s, 3-CH), 4.81(1H, broad t, J8Hz, 8-CH), 4.06(2H, d, J8Hz, 9-CH₂), 3.63(3H, t, J7Hz), 3.51(1H, dd, J18Hz, J'2.5Hz, 6α-CH), 3.05(1H, d, J18Hz, 6β-CH) 및 2.49(3H, t, J7Hz).

[실시예 17]

벤질 9-아세토닐 클라뷰란네이트의 제조

메틸렌 클로라이드(30ml)에 용해시킨 벤질클라뷰란네이트(e1)(1.0g)와 디아조아세톤(1.4g)의 용액에 보론 트리플루오라이드 디에틸에테레이드(20적)을 가하고, 이 용액을 -10℃에서 2시간 동안 교반하여 반응화합물을 중탄산염 희용액으로 급냉시킨후 유기추출물을 염화나트륨 용액으로 세척하여 황산 마그네슘상에서 건조, 증발시켜 용출제로서 에틸 아세테이트/싸이클로헥산을 사용하여 실리카겔상에서 크로마토그래피를 행한 결과 주제 화합물(e17)(190㎎)이 무색 유상물로서 얻어졌다.

I.r.(HCCl₃) : 1,800, 1,730-1,760, 1,695㎝^-1

N.m.r.(CDCl₃) : 2.10(3H, s, -CH₃), 2.96(1H, d, J17Hz, 6β-CH), 3.36(1H, dd, J17Hz, J'2.5Hz, 6

-CH), 3.99(2H, d, J7Hz, =CH-CH₂), 4.68(1H, t, J7Hz, =CH-CH₂), 5.03(1H, brs, 3-CH), 5.20(2H, s, -CH₃Ph), 5.70(1H, d, J2.5Hz, 5-CH), 7.33(5H, s, CO₂CH₂Ph). M(질량 분공) 345.

[실시예 18]

소디움 9-아세토닐 클라뷰란네이트의 제조

아세토닐 에테르 벤질에스테르(e17)(80㎎)을 중탄산나트륨(5㎎)과 10% pd/c(30㎎)의 존재하에 테트라하이드로푸란/물 혼합물(5 : 1)중에서 수소화시키고 20분후에 촉매를 여과제거한 다음, 여액을 물로 희석하여 냉동건조전에 에틸아세테이트로 추출한 결과 주체 화합물이 황갈색을 띈 백색 고체로서 얻어졌다.

I.r.(KBr) : 1,780, 1,720, 1,690, 1,610㎝^-1

N.m.r.(CDCl₃) : 2.09(3H, s, -CH₃), 3.00(1H, d, J17Hz, 6β-CH), 3.45(1H, dd, J17Hz, J'2.5Hz, 6

-CH), 4.08(2H, d, J8Hz, =CH-CH₂), 4.18(2H, s,

, 4.80(1H, t, J8Hz, =CH), 4.90(1H, s, 3-CH), 5.65(1H, d, J2.5Hz, 5-CH).

[실시예 19]

벤질 9-(4-클로로페나실) 클라뷰란네이트의 제조

벤질 클라뷰란네이트(e1)(500㎎)를 메틸렌 클로라이드(25㎎)에 용해시켜 α-디아조-P-클로로아세토페논(0.90g)으로 처리하고, -20℃에서 교반용액에 보론 트리플루오라이드 에테레이트(0.1ml)를 가한후 이 용액을 중탄산나트륨 희용액(X2)으로 세척하여 유기 추출물을 황산 마그네슘상에서 건조기키고, 용매를 증발시켜 용출제로서 클로로포름을 사용하여 실리카겔상에서 크로마토그래피를 행한 결과 주제화합물(e19)(130㎎)이 얻어졌다.

I.r.(CHcCl₃) : 1,805, 1,750, 1,695㎝^-1;

N.m.r.(CDCl₃) : 3.10(1H, d, J17Hz, 6β-CH), 3.60(1H, dd, J17Hz, J'2.5Hz, 6

-CH), 4.36(2H, s, J7Hz, =CH-CH₂O-), 4.74(2H, s,

), 5.00(1H, t, J7Hz, =CH-CH₂), 5.26(1H, brs, 3-CH), 5.37(2H, s, CO₂CH₂Ph), 5.82(1H, d, J2.5Hz, 5-CH), 7.48-8.12(9H, m, 아릴).

[실시예 20]

생물학적 작용

(가) 본 발명의 화합물을 마우스에 투여할때 독성을 높은 수준으로 나타내지 않는다. 예컨대 실시예 5 및 12의 화합물은 피하 투여시 250㎎/㎏ 이상의 LD₅₀치를 갖는다.

(나) 본 발명의 화합물은 앰피실린과 배합하여 표준 MIC테스트로 시험할때 스타피로코크스 아우레우스 루셀(Staphylococcus aureus Russell), 크레브시엘라 아에로게네스(Klebsiella aerogenes), 프로테우스 미라비리스(Proteus mirabilis) 및 에스케리키아 코리(Escherichia coli)의 균주와 같은 각종의 그람-양성균과 그람-음성균에 대해 페니실린의 효과를 증강시킨다. 예컨대 본 발명의 특정 화합물 /㎍/ml의 존재하에 암피실린의 경우에 얻어진 스타피로코크스 아우레우스(Staphylococcus aureus Russell) 루셀에 대한 MIC치는 다음과 같다.

실시예 No의 화합물; 3 5 9 10 11 14 15 16 MIC(㎍/ml) : 2 0.3 1.6 3 1.25 1.25 1 1암피실린은 상승효과제의 부재시에 250㎍/ml의 농도에서 시험 미생물의 성장을 억제하지 않았으며, 상승효과제는 5㎍/ml에서 시험미생물의 성장을 억제하였다.

Claims (1)

1. 다음 일반식(Ⅰ)로 표시된 화합물 또는 이의 아실유도체를 에테르화시켜 일반식(Ⅱ)의 에스테르를 얻고, 제조함을 특징으로 하는 다음 일반식(Ⅱ)로 표시된 화합물 및 그의 염의 제조방법.

   

   식중,

   R는 탄소원자수 18개까지의 불활성 유기기이고,

   A는 CO₂A가 카복실산기 또는 염이나 에스테르가 될수 있는 기이다.