KR20240072538A - Health functional composition using Hwangchil tree liquid - Google Patents

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KR20240072538A
KR20240072538A KR1020220154222A KR20220154222A KR20240072538A KR 20240072538 A KR20240072538 A KR 20240072538A KR 1020220154222 A KR1020220154222 A KR 1020220154222A KR 20220154222 A KR20220154222 A KR 20220154222A KR 20240072538 A KR20240072538 A KR 20240072538A
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이효진
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Abstract

황칠나무(Dendropanax Morbifera) 추출물을 포함하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 미세아교세포(microglia)에서 발생하는 신경독소 인자 또는 염증성 사이토카인의 생성 감소를 통해 신경 염증 질환을 보다 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있는 황칠나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것이다.본 발명의 황칠무 추출물은 세포에 독성을 나타내지 않을 뿐만 아니라, 신경염증과 관련된 미세아교세포의 활성을 효과적으로억제하므로, 알츠하이머병, 파킨슨병, 헌팅턴병, 루게릭병, 크로이츠펠트야콥병, 다발성 경화증등과 같은 신경 염 질환의 예방 또는 치료제 또는신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품으로 유용하게 활용될 수 있다It relates to a composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases containing an extract of Dendropanax Morbifera, and more specifically, to a composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases by reducing the production of neurotoxic factors or inflammatory cytokines generated in microglia. It relates to a composition containing Hwangchil tree extract as an active ingredient that can more effectively prevent or treat diseases. The Hwangchil radish extract of the present invention not only does not show toxicity to cells, but also effectively inhibits the activity of microglial cells related to neuroinflammation. Therefore, it can be useful as a health functional food for the prevention or treatment of neuritis diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, Lou Gehrig's disease, Creutzfeldt-Jakob disease, multiple sclerosis, etc., or for the prevention or improvement of neuroinflammatory diseases.

Description

황칠나무액을 이용한 건강기능 조성물{Health functional composition using Hwangchil tree liquid}Health functional composition using Hwangchil tree liquid}

황칠나무(Dendropanax Morbifera) 추출물을 포함하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 미세아교세포(microglia)에서 발생하는 신경독소 인자 또는 염증성 사이토카인의 생성 감소를 통해 신경 염증 질환을 보다 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있는 황칠나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것이다.It relates to a composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases containing an extract of Dendropanax Morbifera, and more specifically, to a composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases by reducing the production of neurotoxic factors or inflammatory cytokines generated in microglia. It relates to a composition containing Hwangchil tree extract as an active ingredient, which can prevent or treat diseases more effectively.

염증 반응은 조직(세포)의 손상이나 외부감염원(박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기유발물질)에 감염되었을 때 국소 혈관과 체액 중 각종 염증 매개인자 및 면역세포가 관련되어 효소 활성화, 염증매개물질 분비, 체액 침윤, 세포 이동, 조직 파괴 등 일련의 복합적인 생리적 반응과 홍반, 부종, 발열, 통증등 외적 증상을 나타낸다. 정상인 경우 염증 반응은 외부감염원을 제거하고 손상된 조직을 재생하여 생명체 기능회복작용을 하지만, 항원이 제거되지 않거나 내부물질이 원인이 되어 염증반응이 과도하거나 지속적으로 일어나면 오히려 점막손상을 촉진하고, 그 결과 일부에서는 암 발생 등의 질환을 이끈다.최근 염증반응이 신경퇴행을 유발하는 주요 기전의 하나라는 사실이 밝혀지고 있다.미세아교세포(microglia)는 중추신경계(Central Nervous System; CNS)에서 일차적인 면역 기능을 수행하는 세포로서, 가늘고 긴 가지와 얇은 세포체의 모양을 유지하고 있다가 외부에서 유입되거나 내부에서 발생하는 독소들이 존재하게 되면 이들 독소로부터 신경 세포를 보호하기 위해 굵고 짧은 가지와 둥근 모양 형태의 세포체를 가지는 활성화된 모양으로변화하게 된다. 활성화된 미세아교세포는 정상 상태의 미세아교세포와는 달리 포식작용을 활발히 하고, 세포증식을 하며, TNF-α, IL-1β 및 IL-6 등과 같은 사이토카인, 케모카인,iNOS(induciblenitricoxidesynthase),COX-2(cyclooxygenase-2) 등의 유전자를 발현시켜 염증매개물질들을 생성한다. 미세아교세포의 활성화는 손상된 세포를 제거하고 외부에서 침입하는 박테리아나 바이러스로부터 신경세포를 보호하는 일면이 있으나 과도하게 발현이 증가한 iNOS에 의해 생성되는 일산화질소와 COX-2에 의해 생성되는 프로스타글란딘들, TNFα 등은 신경세포에도 독성을 나타내기 때문에 결과적으로 미세아교세포의 활성화는 신경세포의 손상을 악화시키게 된다. 또 사멸 중인 신경세포가 방출하는 물질들이 미세아교세포의 활성을 다시 유발하게 되므로, 신경퇴행은 지속적인 악순환에 빠지게 된다. 실제로 미세아교세포의활성이알츠하이머병,파킨슨병,헌팅턴병,루게릭병,크로이츠펠트야콥병(Creutzfelt-Jakob Disease, CJD), 다발성 경화증 등의 다양한 퇴행성 신경질환과 관계가 있음이 보고되었다.미세아교세포의 활성화 물질로는 박테리아의 내독소인 리포폴리사카라이드(lipopolysaccharide, LPS)와 인터페론-γ, 베타아밀로이드, 갱글리오사이드 등이 있다. 미세아교세포의 활성화에 관여하는 신호 전달 체계로는 MAPK. PKC, ROS, NF-kB 등이 있다. 마이토젠 활성화 단백질(mitogen-activatied protein, MAP) kinase family는 세포내의 신호 전달 매개체로서 핵심적인 단백질이며 인체에서의 다양한 염증반응, 사멸, 세포 분화, 성장등의 세포외 신호에 반응하여 활성화되어 전사인자를 활성화시켜 필요한 유전자들의 전사를 조절한다. MAPkinase family는 Erk(extracellular signal regulated kinase), JNK(c-jun N-terminal kinase), p38 MAPkinase 등 3가지가 알려져 있다. Erk는 세포의 성장과 밀접한 관계를 보이고 있으며 많은 세포 성장 인자에 의해서 조절 받는다. JNK 및 p38 MAP kinase는 대부분의 염증 반응, 세포 스트레스 신호, 세포 사멸 신호 등과 밀접한 관계가 있다.Inflammatory reactions occur when tissue (cells) are damaged or infected with external infectious agents (bacteria, mold, viruses, various types of allergens), and various inflammatory mediators and immune cells in local blood vessels and body fluids are involved, resulting in enzyme activation and inflammation mediation. It shows a series of complex physiological reactions such as substance secretion, fluid infiltration, cell movement, and tissue destruction, as well as external symptoms such as erythema, edema, fever, and pain. In normal cases, the inflammatory response removes external infectious agents and regenerates damaged tissues to restore the function of the organism, but if the inflammatory response occurs excessively or continuously due to antigens not being removed or internal substances as the cause, it actually promotes mucosal damage, resulting in In some cases, it leads to diseases such as cancer. Recently, it has been revealed that inflammatory response is one of the main mechanisms causing neurodegeneration. Microglia are the primary immune system in the Central Nervous System (CNS). As a cell that performs a function, it maintains the shape of long, thin branches and a thin cell body. When toxins introduced from outside or generated internally are present, the cells form thick and short branches and a round shape to protect the nerve cells from these toxins. It changes into an activated shape with a cell body. Unlike normal microglia, activated microglia actively engage in phagocytosis, proliferate, and release cytokines such as TNF-α, IL-1β, and IL-6, chemokines, iNOS (induciblenitricoxide synthase), and COX. Genes such as -2 (cyclooxygenase-2) are expressed to produce inflammatory mediators. Activation of microglial cells removes damaged cells and protects nerve cells from invading bacteria or viruses. However, nitric oxide produced by excessively expressed iNOS and prostaglandins produced by COX-2, Since TNFα and other substances are also toxic to nerve cells, activation of microglial cells ultimately worsens damage to nerve cells. In addition, since substances released by dying nerve cells trigger the activity of microglial cells again, neurodegeneration falls into a continuous vicious cycle. In fact, it has been reported that the activity of microglial cells is related to various neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, Lou Gehrig's disease, Creutzfelt-Jakob Disease (CJD), and multiple sclerosis. Activating substances include lipopolysaccharide (LPS), a bacterial endotoxin, interferon-γ, beta-amyloid, and ganglioside. The signal transduction system involved in the activation of microglial cells is MAPK. These include PKC, ROS, and NF-kB. The mitogen-activated protein (MAP) kinase family is a key protein as an intracellular signal transduction mediator and is activated in response to various extracellular signals such as inflammatory response, death, cell differentiation, and growth in the human body, and acts as a transcription factor. Activates and regulates the transcription of necessary genes. There are three known MAPkinase families: Erk (extracellular signal regulated kinase), JNK (c-jun N-terminal kinase), and p38 MAPkinase. Erk is closely related to cell growth and is regulated by many cell growth factors. JNK and p38 MAP kinase are closely related to most inflammatory responses, cell stress signals, and cell death signals.

활성화된 미세아교세포에서 발현되는 iNOS와 TNF-α, COX-2 유전자들의 프로모터에는 공통적으로 NF-kB가 결합하는 부분이 있으며, NF-kB의 활성화에 의해 이들 유전자의 발현이 조절된다. 베타아밀로이드와 LPS가 미세아교 세포에서 NF-kB를 활성화시킨다는 것이 알려져 있으며, 갱글리오사이드와 트롬빈 역시 미세아교세포에서 NFkB를 활성화시킨다. 이들 활성화물질에 의한 NF-kB의 활성화는 15분 이내에 일어나 염증성 사이토카인의 생성을 촉진한다.미세아교세포의 활성화와 퇴행성 신경질환의 관계에 대해서는 아직 완전히 밝혀지지 않았으나, 일반적으로 미세아교세포의 활성이 퇴행성 신경질환의 발병과 진행에 관련되어 있다고 받아들여지고 있다. 그러므로 미세아교세포의 활성을 억제하는 것은 퇴행성 신경질환의 진행을 완화시킬 수 있는 효과적인 치료법이 될 것이다.한편, 황칠나무(Dendropanax morbifera Lev.)는 두릅나무과에 속하는 식물로써 세계에서 오직 한국의 해남, 완도와 같은 남부 해안 일부 지역과 제주도에서만 자생하는 상록 활엽교목이다. 황칠나무의 수피에 상처를 주면황색의 수지액이 나오는데 이것으로 황칠(黃漆)이라고 한다. 본초 강목에서는 황칠나무가 번열을 제거하고, 안질 및 화상치료에 효과가 있다고 알려졌으며, 최근 들어서는 황칠나무의 잎이 항암 작용에 효능이 있으며 또한 항산화 작용 및 신경 안정작용이 있는 것으로 보고되었으며, 또한, 황칠나무 추출물이 피부의 멜라닌 색소를 생성하는 타이로시나아제를 불활성화 시켜 피부 미백에 도움을 준다고 알려져 있다. 황칠나무는 비휘발 성분66.7%, 방향성분 10.8%, 수분 8.1% 및 고형분이 14.4% 로 구성되어 있으며 특히 방향성분은 주로 β-쿠베벤(cubebene), γ-셀리넨(selinene), δ-카디넨(cadiene)으로 이루어져 있다고 보고되고 있다.The promoters of the iNOS, TNF-α, and COX-2 genes expressed in activated microglial cells have a common region where NF-kB binds, and the expression of these genes is regulated by activation of NF-kB. It is known that beta-amyloid and LPS activate NF-kB in microglial cells, and gangliosides and thrombin also activate NFkB in microglial cells. Activation of NF-κB by these activators occurs within 15 minutes and promotes the production of inflammatory cytokines. Although the relationship between microglial activation and neurodegenerative diseases has not yet been fully elucidated, the activity of microglial cells is generally It is accepted that it is involved in the onset and progression of this neurodegenerative disease. Therefore, suppressing the activity of microglial cells will be an effective treatment that can alleviate the progression of degenerative neurological diseases. Meanwhile, Dendropanax morbifera Lev. is a plant belonging to the Araliaceae family and is only found in the world in Haenam, Korea, and Haenam, Korea. It is an evergreen broad-leaved tree that grows only in parts of the southern coast such as Wando and Jeju Island. When the bark of the Hwangchil tree is wounded, a yellow resin comes out, which is called Hwangchil (黃漆). In the herbal medicine class, Hwangchil tree is known to be effective in removing fever and treating eye problems and burns. Recently, it has been reported that the leaves of Hwangchil tree are effective in anti-cancer, and also have antioxidant and nerve stabilizing effects. It is known that Hwangchil tree extract helps whiten skin by inactivating tyrosinase, which produces melanin pigment in the skin. Hwangchil tree consists of 66.7% non-volatile components, 10.8% aromatic components, 8.1% moisture, and 14.4% solid content. In particular, the aromatic components are mainly β-cubebene, γ-selinene, and δ-cardio. It is reported to be composed of cadiene.

최근, 약용 식물로부터 분리된 천연 화합물은 다양한 인간의 치료에 연구되고 있다. 식물 생성물은 일반적으로 화학적으로 합성된 의약품보다 부작용 및 독성이 낮으므로, 식물 유래 물질은 신경염증을 포함하는 많은 질병의 치료에 생화학 활성제로 주목받고 있다.이에 본 발명자들은 미세아교세포의 활성을 효과적으로 억제하는 천연물질을 선별하기 위해 예의 노력한 결과,황칠나무 추출물이 세포에 독성을 나타내지 않을 뿐만 아니라, LPS에 의해 활성화된 미세아교세포에서 종양괴사Recently, natural compounds isolated from medicinal plants have been studied for various human treatments. Since plant products generally have lower side effects and toxicity than chemically synthesized medicines, plant-derived substances are attracting attention as biochemical active agents in the treatment of many diseases, including neuroinflammation. Accordingly, the present inventors effectively activated microglial cells. As a result of diligent efforts to select natural substances that inhibit Hwangchil tree extract, not only is it not toxic to cells, but it also causes tumor necrosis in microglial cells activated by LPS.

인자-α(TNF-α; tumor necrosis factor-alpha), 일산화질소(NO; nitric oxide) 및 인터루킨-6(IL-6;interleukin-6)와 같은 염증성 사이토카인의 증가를 현저하게 억제하고, MAPK(mitogen-activated proteinkinases)의 인산화 및 NF-κB(nuclear factor-kappaB)의 활성을 감소시켜, 효과적으로 미세아교세포에 의해 발생하는 신경염증을 감소시키는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.Significantly suppresses the increase in inflammatory cytokines such as factor-α (TNF-α; tumor necrosis factor-alpha), nitric oxide (NO), and interleukin-6 (IL-6), and increases MAPK It was confirmed that neuroinflammation caused by microglial cells was effectively reduced by reducing the phosphorylation of mitogen-activated proteinkinases and the activity of NF-κB (nuclear factor-kappaB), and the present invention was completed.

본 발명의 첫번째 해결하려는 과제는 황칠나무(Dendropanax Morbifera) 추출물을 유효성분으로 포함하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명의 두번째 해결하려는 과제는, 황칠나무(Dendropanax Morbifera) 추출물을 유효성분으로 포함하는 신경염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는 것이다.The first problem to be solved by the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases containing an extract of Dendropanax Morbifera as an active ingredient. The second problem to be solved by the present invention is to provide a health functional food for preventing or improving neuroinflammatory diseases containing Dendropanax Morbifera extract as an active ingredient.

황칠나무(Dendropanax Morbifera) 추출물을 유효성분으로Dendropanax Morbifera extract is used as an active ingredient.

포함하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 또는 신경염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 포함한다.본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 황칠나무 추출물은 황칠나무 잎으로부터 추출한 것일 수 있다.It includes a pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases or a health functional food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases. According to a preferred embodiment of the present invention, the Hwangchil tree extract is extracted from Hwangchil tree leaves. It could be.

본 발명의 바람직한 다른 실시예에 따르면, 상기 황칠나무 추출물은 물, 알코올, 에틸아세테이트, 클로로포름,부탄올 및 헥산으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 용매로 추출한 것일 수 있다.본 발명의 바람직한 또 다른 실시예에 따르면, 상기 황칠나무 추출물은 총 조성물에 1 내지 100 ㎍/㎖ 농도로 포함될 수 있다.본 발명의 바람직한 또 다른 실시예에 따르면, 상기 황칠나무 추출물은 신경계의 면역세포인 미세아교세포(microglia)의 활성을 억제하거나, 활성화된 미세아교세포가 신경세포에 미치는 손상에 대하여 보호 효과를 나타낼 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the Hwangchil tree extract may be extracted with one or more solvents selected from the group consisting of water, alcohol, ethyl acetate, chloroform, butanol, and hexane. Another preferred embodiment of the present invention According to, the Hwangchil tree extract may be included in the total composition at a concentration of 1 to 100 ㎍/㎖. According to another preferred embodiment of the present invention, the Hwangchil tree extract may be used in microglia, which are immune cells of the nervous system. It can inhibit the activity of or exert a protective effect against damage caused by activated microglial cells to nerve cells.

본 발명의 바람직한 또 다른 실시예에 따르면, 상기 황칠나무 추출물은 종양괴사 인자-α (TNF-α; tumornecrosis factor-alpha) 및인터루킨-6(IL-6;interleukin-6)으로 구성되는 군에서 선택되는 어느 하나 이상의염증성 사이토카인 또는 일산화질소(NO; nitric oxide)의 생성을 억제할 수 있다.본 발명의 바람직한 또 다른 실시예에 따르면, 상기 황칠나무 추출물은 Erk(extracellular signal regulated kinase), JNK(c-jun N-terminal kinase) 및 p38(p38 MAP kinase)로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 MAPK(mitogen-activated protein kinases)의 인산화를 억제하거나, NF-κB(nuclear factor-kappaB)의 활성을 감소시킬 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the Hwangchil tree extract is selected from the group consisting of tumor necrosis factor-α (TNF-α; tumornecrosis factor-alpha) and interleukin-6 (IL-6; interleukin-6). It can inhibit the production of one or more inflammatory cytokines or nitric oxide (NO). According to another preferred embodiment of the present invention, the Hwangchil tree extract contains Erk (extracellular signal regulated kinase), JNK ( Inhibits the phosphorylation of one or more MAPKs (mitogen-activated protein kinases) selected from the group consisting of c-jun N-terminal kinase) and p38 (p38 MAP kinase), or inhibits the activity of NF-κB (nuclear factor-kappaB). can be reduced.

본 발명의 바람직한 또 다른 실시예에 따르면, 상기 신경 염증 질환은 알츠하이머병, 파킨슨병, 헌팅턴병, 루게릭병, 크로이츠펠트야콥병 및 다발성 경화증으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the neuroinflammatory disease may be any one selected from the group consisting of Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, Lou Gehrig's disease, Creutzfeldt-Jakob disease, and multiple sclerosis.

황칠나무 추출물은 세포에 독성을 나타내지 않을 뿐만 아니라, LPS에 의해 활성화된 미세아교세포에 서 종양괴사 인자-α (TNF-α; tumor necrosis factor-alpha), 일산화질소(NO; nitric oxide) 및 인터루킨6(IL-6; interleukin-6)와 같은 염증성 사이토카인의 증가를 현저하게 억제하고, MAPK(mitogen-activated protein kinases)의 인산화 및 NF-κB(nuclear factor-kappaB)의 활성을 감소시켜 신경염증과 관련된 미세아교 세포의 활성을 효과적으로 억제하므로, 알츠하이머병, 파킨슨병, 헌팅턴병, 루게릭병, 크로이츠펠트야콥병, 다발성 경화증 등과 같은 신경 염증 질환의 예방 또는 치료제 또는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능Not only is the Hwangchil tree extract not toxic to cells, but it also inhibits tumor necrosis factor-α (TNF-α; tumor necrosis factor-alpha), nitric oxide (NO), and interleukin in microglial cells activated by LPS. Significantly suppresses the increase in inflammatory cytokines such as IL-6 (interleukin-6) and reduces the phosphorylation of MAPK (mitogen-activated protein kinases) and the activity of NF-κB (nuclear factor-kappaB), thereby reducing neuroinflammation. Since it effectively inhibits the activity of microglial cells related to the disease, it has health functions for preventing or treating neuroinflammatory diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, Lou Gehrig's disease, Creutzfeldt-Jakob disease, multiple sclerosis, etc., or for preventing or improving neuroinflammatory diseases.

식품으로 유용하게 활용될 수 있다Can be useful as food

도 1은 황칠헥산가용성 추추물(DMLH; A 및 D), 황칠수포화부탄올가용성 추출물(DMLB; B 및 E) 및 황칠클로로포름가용성 추출물(DMLC; C 및 F)에 의한 미세아교세포인 BV2 세포의 생존율(A, B 및 C) 차이 및 일산화질소(NO)생성량 변화(D, E 및 F)를 확인한 데이터이다.도 2는 본 발명의 황칠나무 에틸아세테이트 가용성 추출물에 의한 미세아교세포인 BV2 세포의 일산화질소(NO)생성량 변화(A) 및 세포 생존율(B)을 확인한 데이터이다.도 3은 본 발명의 황칠나무 추출물에 의한 미세아교세포인 BV2 세포의 TNF-α(A) 및 IL-6(B)의 생성량 변화를 확인한 데이터이다.
도 4는 미세아교세포인 BV2 세포를 LPS로 자극하였을 때, 시간에 따른 p38(A 및 B), JNK(C 및 D) 및 Erk(E 및 F)의 인산화 정도를 확인한 데이터이다.
도 5는 본 발명의 황칠나무 추출물에 의한 미세아교세포인 BV2 세포의 p38(A 및 B), JNK(C 및 D) 및 Erk(E 및 F)의 인산화 억제효과를 확인한 데이터이다.
도 6은 본 발명의 황칠나무 추출물에 의한 미세아교세포인 BV2 세포의 NF-κB 활성 억제효과를 확인한 데이터이다.
Figure 1 shows the survival rate of BV2 cells, which are microglial cells, by extracts containing hexane-soluble extract (DMLH; A and D), saturated butanol-soluble extracts (DMLB; B and E), and chloroform-soluble extracts (DMLC; C and F). (A, B, and C) This is data confirming the difference and the change in nitric oxide (NO) production (D, E, and F). Figure 2 shows the monooxidation of BV2 cells, which are microglial cells, by the ethyl acetate soluble extract of Hwangchil tree of the present invention. Data confirming the change in nitrogen (NO) production (A) and cell survival rate (B). Figure 3 shows TNF-α (A) and IL-6 (B) of BV2 cells, which are microglial cells, produced by the Hwangchil tree extract of the present invention. ) This is data confirming the change in production amount.
Figure 4 shows data confirming the degree of phosphorylation of p38 (A and B), JNK (C and D), and Erk (E and F) over time when BV2 cells, which are microglial cells, were stimulated with LPS.
Figure 5 shows data confirming the inhibitory effect on phosphorylation of p38 (A and B), JNK (C and D), and Erk (E and F) in BV2 cells, which are microglial cells, by the Hwangchil tree extract of the present invention.
Figure 6 is data confirming the inhibitory effect of NF-κB activity of BV2 cells, which are microglial cells, by the Hwangchil tree extract of the present invention.

활성화된 미세아교세포는 정상 상태의 미세아교세포와는 달리 TNF-α, IL-1β 및 IL-6 등과 같은 사이토카인 및 일산화질소 등의 염증매개물질들의 생성을 증가시키고, 마이토젠 활성화 단백질(mitogenactivatied protein, MAP) 및 NF-κB를 활성화시켜 신경세포의 손상을 악화시키게 되어 다양한 신경 염증 질환을 유발하게 되는 문제점이 있다. 본 발명은 황칠나무(Dendropanax Morbifera) 추출물을 유효성분으로 포함하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 또는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공함으로써 상술한 문제의 해결을 모색하였다. 이를 통해 활성화된 미세아교세포에서 발생하는 염증매개물질들의 생성을 현저하게 억제하고, 마이토젠 활성화 단백질(mitogen-activatied protein, MAP) 및 NF-kB의 활성을 현저하게 억제하여 보다 효과적으로 신경 염증성 질환을 예방 또는 치료하는 효과가 있다. 따라서, 본 발명은 황칠나무(Dendropanax Morbifera) 추출물을 유효성분으로 포함하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 포함한다.본 발명에 있어서, 상기 황칠나무 추출물은 황칠나무 잎으로부터 추출한 것일 수 있다. 황칠나무의 잎, 줄기,뿌리 및 종자 등 황칠나무의 모든 부위를 사용할 수 있지만, 황칠나무 잎 이외에 다른 부분은 신경 염증 억제효능이 미흡할 수 있어 황칠나무 잎을 사용하는 것이 가장 바람직하다. 상기 황칠나무 추출물은 물, 알코올, 에틸아세테이트, 클로로포름, 부탄올 또는 헥산 등의 단독 또는 혼합 형태Unlike normal microglia, activated microglia increase the production of cytokines such as TNF-α, IL-1β, and IL-6 and inflammatory mediators such as nitric oxide and mitogen activated proteins. protein, MAP) and NF-κB, which are activated to worsen damage to nerve cells, causing various neuroinflammatory diseases. The present invention seeks to solve the above-mentioned problems by providing a pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases or a food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases containing an extract of Dendropanax Morbifera as an active ingredient. Through this, the production of inflammatory mediators occurring in activated microglial cells is significantly suppressed, and the activity of mitogen-activated protein (MAP) and NF-kB is significantly suppressed to more effectively prevent neuroinflammatory diseases. It has a preventive or therapeutic effect. Therefore, the present invention includes a pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases containing an extract of Dendropanax Morbifera as an active ingredient. In the present invention, the extract of Dendropanax Morbifera may be extracted from leaves of Dendropanax Morbifera. there is. All parts of the Hwangchil tree, including leaves, stems, roots, and seeds, can be used, but parts other than the Hwangchil tree leaves may lack the effect of suppressing nerve inflammation, so it is most desirable to use the leaves of the Hwangchil tree. The Hwangchil tree extract is used alone or in a mixed form such as water, alcohol, ethyl acetate, chloroform, butanol, or hexane.

인 용매로 추출할 수 있으며, 보다 바람직하게는 에틸아세테이트을 사용할 수 있다. 상기 용매를 이용한 일반적인 용매 추출법을 적용하여 추출할 수 있으며, 또한 칼럼 크로마토그래피를 이용하여 정제한 분획물일 수도 있다. 본 발명에 따른 추출물의 제조방법은 본 기술분야에 속하는 통상의 지식을 가진 자에게 알려진 식물 추출방법을 모두 적용할 수 있으며, 예컨대 물, 알코올 또는 혼합용매에 의한 추출, 중탕이나 상온에 의한 추출법 등을 포함하나 이에 한정되지 않는다.It can be extracted with a phosphorus solvent, and more preferably, ethyl acetate can be used. It can be extracted by applying a general solvent extraction method using the above solvent, and can also be a fraction purified using column chromatography. The method for producing the extract according to the present invention can apply all plant extraction methods known to those skilled in the art, such as extraction with water, alcohol or mixed solvent, extraction with double boiling or room temperature, etc. Including, but not limited to.

본 발명의 일양태에서는 헥산(hexan), 부탄올(butanol), 클로로포름(chloroform) 및 에틸아세테이트(ethylacetate)를 용매로 사용하여 황칠나무 잎 추출물을 추출하였으며, 에틸아세테이트를 사용하여 추출하였을 경우,부탄올, 클로로포름 또는 헥산 등의 다른 용매에 비해 활성화된 미세아교세포의 신경염증 활성을 보다 효과적으로 억제하는 것을 확인하였다.본 발명의 일실시예에서, 각 추출물에 대한 신경염증 억제 효과를 알아보기 위해 쥐 유래 미세아교세포인 BV2세포에 황칠나무 추출물을 전처리한 다음, LPS로 BV2세포를 자극시켜 LPS 자극에 의해 발생되는 염증매개성 물질들의 생성 억제 효능 및 세포독성 여부를 관찰하였다.내독소로 잘 알려진 LPS(lipopolysaccharide)는 대식세포의 활성화에 관여하는 가장 잘 알려진 외부인자로서,특히 RAW 264.7 세포와 같은 대식세포나 단핵세포에서 TNF-α(tumor necrosis factor-alpha), IL6(interleukin-6), IL-1β(interleukin-1 beta)와 같은 전염증성 사이토카인(pro-inflammatory cytokine)을 분비하여 염증부위에서 증가되는 것으로 알려져 있다. 또한, LPS가 대식세포를 자극하게 되면iNOS(inducibleIn one embodiment of the present invention, hexan, butanol, chloroform, and ethyl acetate were used as solvents to extract Hwangchil tree leaf extract, and when extracted using ethyl acetate, butanol, It was confirmed that the neuroinflammatory activity of activated microglial cells was more effectively inhibited compared to other solvents such as chloroform or hexane. In one embodiment of the present invention, in order to determine the neuroinflammatory inhibitory effect of each extract, rat-derived microglia were used. After pre-treating BV2 cells, which are glial cells, with Hwangchil tree extract, the BV2 cells were stimulated with LPS to observe the efficacy of inhibiting the production of inflammatory mediators and cytotoxicity caused by LPS stimulation. LPS (well-known as an endotoxin) lipopolysaccharide) is the most well-known external factor involved in the activation of macrophages, especially tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin-6 (IL6), and IL-1β in macrophages such as RAW 264.7 cells and monocytes. It is known that pro-inflammatory cytokines such as (interleukin-1 beta) are secreted and increased in inflamed areas. Additionally, when LPS stimulates macrophages, iNOS (inducible

nitric oxide synthase)라는 효소에 의해 L-알기닌이 L-시트룰린으로 변하는 과정에서 일산화질소(NO)가 생성됨으로써 대식세포로부터 NO가 생성된다. 포유동물에서 NO는 세 가지 종류의 NO 합성효소(NOS, nitric oxidesynthase), 즉 nNOS(neuronal NOS), eNOS(endothelial NOS) 및 iNOS(inducible NOS)에 의해 합성된다. 이 중에Nitric oxide (NO) is produced in the process of converting L-arginine into L-citrulline by an enzyme called nitric oxide synthase, thereby producing NO from macrophages. In mammals, NO is synthesized by three types of nitric oxidesynthase (NOS): neuronal NOS (nNOS), endothelial NOS (eNOS), and inducible NOS (iNOS). Among these

서 nNOS와 eNOS에 의해 생성되는 NO는 정상적인 생체기능을 위해 생성되며, 조직 내에서의 농도는 일정수준으로 낮게 유지된다. 그러나 iNOS에 의해 생성된 NO는 과도하게 생성되어 병리적인 혈관확장, 세포독성, 조직 손상등과 같은 생체에 유해한 작용을 나타낸다.도 1A 및 도 1C에 나타난 바와 같이, 황칠헥산가용성 추출물(DMLH), 황칠클로로포름가용성 추출물(DMLC)을 50㎍/㎖ 이상 처리한 샘플에서는 세포독성이 관찰되었고, 도 1B와 도 2A에 나타난 바와 같이 황칠에틸아세테이트가용성 추출물 (DMLE), 황칠부탄올가용성 추출물(DMLB) 또는 LPS에 의한 세포독성은 관찰되지 않았다. 또한, 도 1D 내지 도 1F 및 도 2A에 나타난 바와 같이, 추출 용매와 관계없이 네 종류의 황칠나무 잎 추출물을 처리했을 때, 처리 농도 의존적으로 일산화질소의 생성이 감소하는 것을 확인하였으며, 황칠나무 잎 추출물을 1NO produced by nNOS and eNOS is produced for normal biological functions, and its concentration in tissues is maintained at a low level. However, NO produced by iNOS is excessively produced and exhibits harmful effects on the living body such as pathological vasodilatation, cytotoxicity, and tissue damage. As shown in Figures 1A and 1C, sulfur hexane soluble extract (DMLH), Cytotoxicity was observed in samples treated with more than 50㎍/㎖ of Chlorophyll chloroform-soluble extract (DMLC), and as shown in Figures 1B and 2A, ethyl acetate-soluble extract (DMLE), Butanol-soluble extract (DMLB), or LPS No cytotoxicity was observed. In addition, as shown in Figures 1D to 1F and Figure 2A, it was confirmed that when four types of Hwangchil tree leaf extracts were treated regardless of the extraction solvent, the production of nitrogen monoxide was reduced in a treatment concentration-dependent manner, and Hwangchil tree leaves extract 1

내지 100 ㎍/㎖ 농도로 처리하였을 경우 LPS로 자극된 대조군에 비해 약 10 내지 85% 정도 일산화질소의 생성이 감소하는 것을 확인하였다. 그 중 황칠에틸아세테이트가용성 추출물 (DMLE)의 일산화질소 감소 효과가 가장 두드러지게 나타난 것을 확인하였다 본 발명의 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 상기 황칠나무 추출물을 1 내지 100 ㎍/㎖의 농도로 포함할 수 있다. 상기 조성물의 용매로는 황칠나무 추출물의 신경염증 억제 효과를 방해하지 않는 것이라면 특별히 제한되지 않으나, 보다 바람직하게는 물, 에탄올, 프로필 알코올, DMSO 등일 수 있다. 상기 황칠나무추출물 조성물의 농도가 1 ㎍/㎖ 미만일 경우 미세아교세포의 염증매개물질들의 생성 저해 효과가 미흡하여 신경염증 억제 효능이 떨어질 수 있다. 또한, 100 ㎍/㎖보다 더 높은 양의 황칠나무 추출물이 포함될 수는 있지만, 상기 범위로도 충분한 신경염증 억제 활성을 확인할 수 있으며, 100 ㎍/㎖를 초과할 경우 농도 증가로 인한 효능의 향상이 적어 효율이 떨어지는 문제점이 있을 수 있다. 세포독성 효과가 없으면서 우수한 신경염증 억제 효능을 나타내는 황칠나무 추출물 조성물의 농도는 보다 바람직하게는 10 내지 100 ㎍/㎖일 수 있다. 본 발명에 있어서, 본 발명의 황칠나무 추출물은 신경세포의 면역세포인 미세아교세포(microglia)의 활성을 억제할 수 있으며, 활성화된 미세아교세포가 신경세포에 미치는 손상에 대하여 보호 효과를 나타낼 수 있다. 상기 황칠나무 추출물은 종양괴사 인자-α (TNF-α; tumor necrosis factor-alpha) 또는 인터루킨-6(IL-6;interleukin-6)의 염증성 사이토카인 및 일산화질소(NO; nitric oxide)의 증가를 억제할 수 있으며,When treated at a concentration of 100 to 100 ㎍/㎖, it was confirmed that the production of nitric oxide was reduced by about 10 to 85% compared to the control group stimulated with LPS. Among them, it was confirmed that the nitrogen monoxide-reducing effect of D. dwarf ethyl acetate soluble extract (DMLE) was most noticeable. The pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases of the present invention contains the D. D. Chil. ethyl acetate soluble extract (DMLE) at a concentration of 1 to 100 μg/ml. It can be included in concentration. The solvent of the composition is not particularly limited as long as it does not interfere with the neuroinflammation inhibitory effect of the Hwangchil tree extract, but more preferably, it may be water, ethanol, propyl alcohol, DMSO, etc. If the concentration of the Hwangchil tree extract composition is less than 1 ㎍/㎖, the effect of inhibiting the production of inflammatory mediators in microglial cells may be insufficient, and the efficacy of suppressing neuroinflammation may be reduced. In addition, although a higher amount of Hwangchil tree extract than 100 ㎍/㎖ may be included, sufficient neuroinflammation inhibitory activity can be confirmed even within the above range, and if it exceeds 100 ㎍/㎖, the efficacy is improved due to an increase in concentration. There may be problems with low efficiency. The concentration of the Hwangchil tree extract composition, which exhibits excellent neuroinflammation inhibition effect without cytotoxic effect, may be more preferably 10 to 100 ㎍/㎖. In the present invention, the Hwangchil tree extract of the present invention can inhibit the activity of microglia, which are immune cells of nerve cells, and can exhibit a protective effect against damage caused by activated microglia to nerve cells. there is. The Hwangchil tree extract increases the inflammatory cytokines of tumor necrosis factor-α (TNF-α; tumor necrosis factor-alpha) or interleukin-6 (IL-6; interleukin-6) and nitric oxide (NO). can be suppressed,

Erk(extracellular signal regulated kinase), JNK(c-jun N-terminal kinase) 및 p38(p38 MAP kinase)로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 MAPK(mitogen-activated protein kinases) 또는 NF-κB(nuclear factorkappaB)의 활성을 감소시킬 수 있다.도 2A에 나타난 바와 같이, 황칠나무 잎 추출물을 농도별로 전처리하였을 때, LPS에 의해 자극된 BV2 세포에서 생성되는 일산화질소의 농도를 측정한 결과, 황칠나무 잎 추출물 처리 농도 의존적으로 일산화질소의 생성이 감소하는 것을 확인하였으며, 황칠나무 잎 추출물을 1 내지 100 ㎍/㎖ 농도로 처리하였을 경우 LPS로 자극된 대조군에 비해 약 10 내지 85% 정도 일산화질소의 생성이 감소하는 것을 확인하였다. 또한, 상기와 같은 조건에서 황칠나무 잎 추출물에 의한 세포독성을 확인한 결과, 도 2B에 나타난 바와 같이 황칠나무 잎 추출물 또는 LPS에 의한 세포독성은 관찰되지 않았다.One or more mitogen-activated protein kinases (MAPKs) or nuclear factor kappaB (NF-κB) selected from the group consisting of extracellular signal regulated kinase (Erk), c-jun N-terminal kinase (JNK), and p38 MAP kinase (p38) As shown in Figure 2A, when the Hwangchil tree leaf extract was pretreated at different concentrations, the concentration of nitric oxide produced in BV2 cells stimulated by LPS was measured. As a result, the Hwangchil tree leaf extract treatment It was confirmed that the production of nitric oxide decreased in a concentration-dependent manner, and when the Hwangchil tree leaf extract was treated at a concentration of 1 to 100 ㎍/㎖, the production of nitric oxide was reduced by about 10 to 85% compared to the LPS-stimulated control group. confirmed. In addition, as a result of confirming the cytotoxicity of the Hwangchil tree leaf extract under the above conditions, no cytotoxicity due to the Hwangchil tree leaf extract or LPS was observed, as shown in Figure 2B.

황칠나무 잎 추출물을 농도별로 전처리하였을 때, LPS에 의해 자극된 BV2 세포에서 생성되는 TNF-α 및 IL-6의농도를 측정한 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, 황칠나무 잎 추출물 처리 농도 의존적으로 TNF-α 및 IL-6의 생성을 억제하는 것을 확인하였다. 황칠나무 잎 추출물을 10 내지 100 ㎍/㎖ 농도로 처리하였을 경우 TNF-α 및 IL-6 각각 LPS로 자극된 대조군에 비해 약 60 내지 85% 및 약 30 내지 85% 정도 생성이 감소하는 것을 확인하였다.또한, 본 발명의 일실시예에서 실시예 3과 동일한 방법으로 황칠나무 추출물에 의한 LPS로 자극된 BV2 세포의 MAPK의 활성 억제 효능을 관찰하였다. MAPK(mitogen-activatied protein kinase)는 세포 내의 신호 전달 매개체로서 핵심적인 단백질이며 인체에서의 다양한 염증반응, 사멸, 세포 분화, 성장 등의 세포외 신호에 반응하여 활성화되어 전사인자를 활성화시켜 필요When the Hwangchil tree leaf extract was pretreated at different concentrations, the concentrations of TNF-α and IL-6 produced in BV2 cells stimulated by LPS were measured. As shown in Figure 3, the Hwangchil tree leaf extract treatment concentration depended. It was confirmed that the production of TNF-α and IL-6 was suppressed. When treated with Hwangchil tree leaf extract at a concentration of 10 to 100 ㎍/㎖, it was confirmed that the production of TNF-α and IL-6 was reduced by about 60 to 85% and about 30 to 85%, respectively, compared to the LPS-stimulated control group. .In addition, in one embodiment of the present invention, the inhibitory effect of MAPK activity of BV2 cells stimulated with LPS by Hwangchil tree extract was observed in the same manner as Example 3. MAPK (mitogen-activated protein kinase) is a key protein as a signal transduction mediator within cells. It is activated in response to extracellular signals such as various inflammatory reactions, death, cell differentiation, and growth in the human body, and is required to activate transcription factors.

한 유전자들의 전사를 조절하며, Erk(extracellular signal regulated kinase), JNK(c-jun N-terminalkinase), p38 MAP kinase 등 3가지가 알려져 있다. Erk는 세포의 성장과 밀접한 관계를 보이고 있으며 많은 세포 성장 인자에 의해서 조절 받는다. JNK 및 p38 MAP kinase는 대부분의 염증 반응, 세포 스트레스 신호, 세포There are three known genes that regulate the transcription of genes, including Erk (extracellular signal regulated kinase), JNK (c-jun N-terminalkinase), and p38 MAP kinase. Erk is closely related to cell growth and is regulated by many cell growth factors. JNK and p38 MAP kinases regulate most inflammatory responses, cellular stress signals, and cell

사멸 신호 등과 밀접한 관계가 있다.먼저, LPS 자극에 의해 BV2 세포에서 MAPK(mitogen-activated protein kinases) 활성 변화가 발생하는지 확인하기 위해 LPS 처리 후 시간 변화에 따른 p38(p38 MAP kinase), JNK(c-jun N-terminal kinase) 및 Erk(extracellular signal regulated kinase)의 인산화 정도를 측정하였다. 도 4에 나타난 바와 같이, LPS 자극에 의해 BV2 세포에서 p38(도 4A 및 B), JNK(도 4C 및 D) 및 Erk(도 4E 및 F)의 인산화가 각각 5배, 10배,2.5배 증가하는 것을 확인하였다. 하지만, 도 5에 나타난 바와 같이, 황칠나무 잎 추출물을 전처리한 다음, LPS로 BV2를 자극시킨 경우, LPS로 자극된 대조군에 비해 p38, JNK 및 Erk의 인산화가 감소하는 것을 확인하였으며, 특히 p38 및 JNK의 인산화가 현It is closely related to death signals, etc. First, to determine whether changes in MAPK (mitogen-activated protein kinases) activity occur in BV2 cells due to LPS stimulation, p38 (p38 MAP kinase), JNK (c) changes over time after LPS treatment. The degree of phosphorylation of -jun N-terminal kinase) and Erk (extracellular signal regulated kinase) was measured. As shown in Figure 4, LPS stimulation increased the phosphorylation of p38 (Figures 4A and B), JNK (Figures 4C and D), and Erk (Figures 4E and F) by 5-, 10-, and 2.5-fold, respectively, in BV2 cells. It was confirmed that However, as shown in Figure 5, when BV2 was pretreated with Hwangchil tree leaf extract and then stimulated with LPS, it was confirmed that the phosphorylation of p38, JNK, and Erk decreased compared to the LPS-stimulated control group, especially p38 and Phosphorylation of JNK is present

저하게 억제되는 것을 확인하였다.p38 및 JNK의 경우, 황칠나무 잎 추출물을 처리하였을 경우 LPS로 자극된 대조군에 비해 각각 약 40 내지 50%(도 5A 및 B) 및 약 80 내지 90%(도 5C 및 D) 정도 인산화가 감소되는 것을 확인하였으며, Erk의 경우, 황칠나무 잎 추출물을 처리하였을 경우 LPS로 자극된 대조군에 비해 약 20 내지 25% 정도 인산화가 감소되는 것을 확인하였다 (도 5E 및 F).또한, 본 발명의 일실시예에서 실시예 4와 동일한 방법으로 황칠나무 추출물에 의한 LPS로 자극된 BV2 세포의 NF-κB의 활성 억제 효능을 관찰하였다.NF-κB는 염증에 중요한 전사인자로, NF-κB는 활성화된 미세아교세포에서 iNOS, TNF-α, COX-2 및 MARK 신호전달 기전을 포함하는 단백질의 발현을 조절하는 것으로 알려져 있다.It was confirmed that p38 and JNK were suppressed by about 40 to 50% (Figures 5A and B) and about 80 to 90% (Figure 5C), respectively, compared to the LPS-stimulated control group when treated with Hwangchil tree leaf extract. and D) It was confirmed that phosphorylation was reduced, and in the case of Erk, when treated with Hwangchil tree leaf extract, phosphorylation was confirmed to be reduced by about 20 to 25% compared to the LPS-stimulated control group (Figure 5E and F) .In addition, in one embodiment of the present invention, the inhibitory effect of NF-κB activity in BV2 cells stimulated with LPS by Hwangchil tree extract was observed in the same manner as in Example 4. NF-κB is an important transcription factor in inflammation. , NF-κB is known to regulate the expression of proteins including iNOS, TNF-α, COX-2, and MARK signaling mechanisms in activated microglia.

도 6에 나타난 바와 같이, BV2에 LPS만을 처리한 경우 NF-κB 활성은 약 4배 이상 증가한 반면, 황칠나무 잎 추출물을 전처리한 경우에는 LPS로 자극된 대조군에 비해 약 40 내지 70% 정도 NF-κB 활성이 감소하는 것을 확인하였다.따라서, 본 발명의 황칠나무 추출물은 세포에 독성을 나타내지 않을 뿐만 아니라, 활성화된 미세아교세포에서발생하는 염증 매개성 물질을 현저하게 감소시키고, MAPK의 인산화 및 NF-κB의 활성을 현저하게 감소시키는 효과가 있는 것을 확인하였으며, 이는 본 발명의 황칠나무 추출물은 미세아교세포에 의해 발생하는 신경염증을 효과적으로 억제한다고 볼 수 있다. 따라서, 본 발명의 황칠나무 추출물은 신경염증과 관련된 미세아교세포의 활성을 효과적으로 억제하므로, 알츠하이머병, 파킨슨병, 헌팅턴병, 루게릭병, 크로이츠펠트야콥병, 다발성 경화증 등과 같은 신경 염증 질환의 예방 또는 치료제 또는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품으로As shown in Figure 6, when BV2 was treated with only LPS, NF-κB activity increased by about 4-fold or more, whereas when pretreated with Hwangchil tree leaf extract, NF-κB activity decreased by about 40 to 70% compared to the LPS-stimulated control group. It was confirmed that κB activity was decreased. Therefore, the Hwangchil tree extract of the present invention not only does not show toxicity to cells, but also significantly reduces inflammatory mediators generated in activated microglial cells, phosphorylation of MAPK and NF. It was confirmed that it has the effect of significantly reducing the activity of -κB, which means that the Hwangchil tree extract of the present invention can be seen as effectively suppressing neuroinflammation caused by microglial cells. Therefore, the Hwangchil tree extract of the present invention effectively inhibits the activity of microglial cells related to neuroinflammation, and is therefore used for the prevention or treatment of neuroinflammatory diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, Lou Gehrig's disease, Creutzfeldt-Jakob disease, multiple sclerosis, etc. As a health functional food for preventing or improving neuroinflammatory diseases

유용하게 활용될 수 있다.본 발명에 따른 황칠나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 신경 염증질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물은 심경 염증을 억제 또는 감소시키는 다른 천연물질 또는 화합물을 추가로 포함할 수 있으며, 본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 경구, 경피, 피하, 정맥 또는 근육을 포함한 여러 경로를 통해투여될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 황칠나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 여러 가지 제형으로 제제화 할 수 있다. 제제화할 경우에는 통상적으로 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제제화할 수 있다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 황칠나무 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제(예를 들면, 전분, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴) 등이 섞여 조제될 수있다. 또한 단순한 부형제 이외에 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구 투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등을 들 수 있는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함될 수 있다. 비수용성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다.It can be usefully used. The pharmaceutical composition for preventing and treating neuroinflammatory diseases containing the extract of Hwangchil tree according to the present invention as an active ingredient may further include other natural substances or compounds that inhibit or reduce inflammation of the nerves. The pharmaceutical composition of the present invention can be administered to mammals such as rats, mice, livestock, and humans through various routes including orally, transdermally, subcutaneously, intravenously, or intramuscularly. In addition, the pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases containing the extract of Hwangchil tree according to the present invention as an active ingredient can be formulated into various dosage forms. When formulating, it can be formulated using diluents or excipients such as commonly used fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrants, and surfactants. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, and capsules. These solid preparations include Hwangchil tree extract and at least one or more excipients (e.g., starch, sucrose, lactose, and gelatin). These can be mixed and prepared. Additionally, lubricants other than simple excipients may also be used. Liquid preparations for oral administration include suspensions, oral solutions, emulsions, and syrups. In addition to the commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives are included. May be included. Formulations for parenteral administration may include sterile aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, lyophilized formulations, and suppositories. Non-aqueous solvents and suspensions may include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, and injectable ester such as ethyl oleate. Glycerol and gelatin can be used as a base for suppositories.

상기 약학적 조성물의 투여량은 대상의 연령, 성별, 상태, 체내에서 활성 성분의 흡수도, 불활성율 및 배설속도, 병용되는 약물에 따라 달리 적용될 수 있다.The dosage of the pharmaceutical composition may vary depending on the subject's age, gender, condition, absorption, inactivation rate, and excretion rate of the active ingredient in the body, and concomitant drugs.

본 발명의 황칠나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 인체에 투여하는 경우, 천연 추출물인 관계로 다른 합성 의약품에 비하여 부작용의 우려가 적어 안심하고 사용할수 있다.When administering to the human body a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of neuroinflammatory diseases containing the extract of Hwangchil tree of the present invention as an active ingredient, it can be used with confidence as there is less risk of side effects compared to other synthetic medicines since it is a natural extract. .

또한, 본 발명은 상기 황칠나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. 본 발명의 황칠나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 식품조성물을 포함하는 건강기능식품의 종류는 특별히 한정되지 않으며, 예를 들어 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차,드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등일 수 있다.상기 건강식품은 상기 황칠나무 추출물 이외에 다른 식품 또는 식품 첨가물과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기 황칠나무 추출물을 유효 성분으로 함유하는 신경 염증 질환 예방용 음료는 황칠나무 추출물이 유효성분으로 포함되는 것 이외에 칼슘, 가시오가피 농축액, 액상과당, 정제수 등을 첨가 혼합하여 드링크용 병에 충진하여 살균한 후 실온으로 냉각하여 음료를 제조할 수 있다. 또한, 상기황칠나무 추출물을 유효 성분으로 함유하는 신경 염증 질환 예방용 건강보조제는 황칠나무 추출물에 영양보조성분(비타민 B1, B2, B5, B6, E 및 초산에스테르, 니코틴산 아미드), 올리고당, 50% 에탄올, 정제수를 첨가 혼합하여 과립상으로 성형하여 진공건조기에서 건조시킨 후, 12~14 메쉬(mesh)를 통과시켜 균일하게 과립을 제조하여 적당량씩 압출 성형하여 정제 또는 분말로 하거나 경질캡슐에 충전하여 경질캡슐제품으로 제조할 수 있다.In addition, the present invention provides a food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases containing the Hwangchil tree extract as an active ingredient. The types of health functional foods containing the food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases containing the Hwangchil tree extract of the present invention as an active ingredient are not particularly limited, and include, for example, meat, sausages, bread, chocolate, candies, and snacks. , confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, dairy products including ice cream, various soups, beverages, teas, drinks, alcoholic beverages, and vitamin complexes. The health foods include foods or foods other than the Hwangchil tree extract. It is used with additives and can be used appropriately according to conventional methods. For example, the drink for preventing neuroinflammatory diseases containing the Hwangchil tree extract as an active ingredient is mixed with calcium, acanthophyllum concentrate, high fructose corn syrup, purified water, etc. in addition to the Hwangchil tree extract as an active ingredient and placed in a drink bottle. A beverage can be produced by filling and sterilizing the product and then cooling it to room temperature. In addition, the health supplement for preventing neuroinflammatory diseases containing the above Hwangchil tree extract as an active ingredient contains Hwangchil tree extract, nutritional supplements (vitamins B1, B2, B5, B6, E, acetic acid ester, nicotinic acid amide), oligosaccharides, 50% Ethanol and purified water are added and mixed to form granules and dried in a vacuum dryer. Then, pass through a 12 to 14 mesh to produce uniform granules. Extrude and mold in appropriate amounts to form tablets or powder or fill into hard capsules. It can be manufactured as a hard capsule product.

상기 건강식품에 함유된 상기 황칠나무 추출물의 유효용량은 상기 약학조성물의 유효용량에 준해서 사용할 수 있으며, 유효성분의 혼합양은 예방 또는 치료적 처치 등의 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있다.The effective dose of the Hwangchil tree extract contained in the health food can be used in accordance with the effective dose of the pharmaceutical composition, and the mixing amount of the active ingredients can be appropriately determined depending on the purpose of use, such as preventive or therapeutic treatment. In the case of long-term intake for health and hygiene purposes or health control, it may be below the above range.

Claims (16)

황칠나무(Dendropanax Morbifera) 추출물을 유효성분으로 포함하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.A pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases containing an extract of Dendropanax Morbifera as an active ingredient. 상기 황칠나무 추출물은 황칠나무 잎으로부터 추출한 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.The Hwangchil tree extract is a pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases, characterized in that it is extracted from Hwangchil tree leaves. 상기 황칠나무 추출물은 물, 알코올, 에틸아세테이트, 클로로포름, 부탄올 및 헥산으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 용매로 추출한 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of neuroinflammatory diseases, wherein the Hwangchil tree extract is extracted with one or more solvents selected from the group consisting of water, alcohol, ethyl acetate, chloroform, butanol, and hexane. 상기 황칠나무 추출물은 총 조성물에 10 내지 100 ㎍/㎖ 농도로 포함된 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.A pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases, wherein the Hwangchil tree extract is contained in a concentration of 10 to 100 μg/ml in the total composition. 상기 황칠나무 추출물은 신경세포의 면역세포인 미세아교세포(microglia)의 활성을
억제하거나,활성화된 미세아교세포가 신경세포에 미치는 손상에 대하여 보호효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 신경 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
The Hwangchil tree extract increases the activity of microglia, which are immune cells of nerve cells.
A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of neuroinflammatory diseases, characterized in that it exhibits a protective effect against damage caused to nerve cells by suppressed or activated microglial cells.
상기 황칠나무 추출물은 종양괴사 인자-α (TNF-α; tumor necrosis factor-alpha) 및 인터루킨-6(IL-6; interleukin-6)으로 구성되는 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 염증성 사이토카인 또는 일산화질소(NO; nitric oxide)의 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.The Hwangchil tree extract contains one or more inflammatory cytokines or nitric oxide selected from the group consisting of tumor necrosis factor-α (TNF-α; tumor necrosis factor-alpha) and interleukin-6 (IL-6; interleukin-6). A pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases, characterized in that it inhibits the production of (NO; nitric oxide). 상기 황칠나무 추출물은 Erk(extracellular signal regulated kinase), JNK(c-jun N-terminalkinase) 및 p38(p38 MAP kinase)로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 MAPK(mitogen-activated proteinkinases)의 인산화를 억제하거나,NF-κB(nuclear factor-kappaB)의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.The Hwangchil tree extract inhibits the phosphorylation of one or more MAPKs (mitogen-activated proteinkinases) selected from the group consisting of Erk (extracellular signal regulated kinase), JNK (c-jun N-terminalkinase), and p38 (p38 MAP kinase). , A pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases, characterized in that it reduces the activity of NF-κB (nuclear factor-kappaB). 상기 신경 염증 질환은 알츠하이머병, 파킨슨병, 헌팅턴병, 루게릭병, 크로이츠펠트야콥병 및 다발성 경화증으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.A pharmaceutical composition for preventing or treating neuroinflammatory diseases, wherein the neuroinflammatory diseases are at least one selected from the group consisting of Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, Lou Gehrig's disease, Creutzfeldt-Jakob disease, and multiple sclerosis. 황칠나무(Dendropanax Morbifera) 추출물을 유효성분으로 포함하는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.A health functional food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases containing extract of Dendropanax Morbifera as an active ingredient. 상기 황칠나무 추출물은 황칠나무 잎으로부터 추출한 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.The Hwangchil tree extract is a health functional food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases, characterized in that it is extracted from Hwangchil tree leaves. 상기 황칠나무 추출물은 물, 알코올, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 헥산으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 용매로 추출한 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.A health functional food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases, wherein the Hwangchil tree extract is extracted with one or more solvents selected from the group consisting of water, alcohol, ethyl acetate, chloroform and hexane. 상기 황칠나무 추출물은 총 조성물에 1 내지 100 ㎍/㎖ 농도로 포함된 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.A health functional food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases, characterized in that the Hwangchil tree extract is included in the total composition at a concentration of 1 to 100 ㎍/㎖. 상기 황칠나무 추출물은 신경세포의 면역세포인 미세아교세포(microglia)의 활성을
억제하거나,활성화된 미세아교세포가 신경세포에 미치는 손상에 대하여 보호효과을 나타내는 것을 특징으로 하는 신경 염증질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
The Hwangchil tree extract increases the activity of microglia, which are immune cells of nerve cells.
A health functional food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases, characterized in that it exhibits a protective effect against damage caused to nerve cells by suppressed or activated microglial cells.
상기 황칠나무 추출물은 종양괴사 인자-α (TNF-α; tumor necrosis factor-alpha) 및 인터루킨-6(IL-6; interleukin-6)으로 구성되는 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 염증성 사이토카인 또는 일산화질소(NO; nitric oxide)의 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.The Hwangchil tree extract contains one or more inflammatory cytokines or nitric oxide selected from the group consisting of tumor necrosis factor-α (TNF-α; tumor necrosis factor-alpha) and interleukin-6 (IL-6; interleukin-6). A health functional food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases, characterized in that it inhibits the production of (NO; nitric oxide). 상기 황칠나무 추출물은 Erk(extracellular signal regulated kinase), JNK(c-jun N-terminalkinase) 및 p38(p38 MAP kinase)로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 MAPK(mitogen-activated proteinkinases)의 인산화를 억제하거나,NF-κB(nuclear factor-kappaB)의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.The Hwangchil tree extract inhibits the phosphorylation of one or more MAPKs (mitogen-activated proteinkinases) selected from the group consisting of Erk (extracellular signal regulated kinase), JNK (c-jun N-terminalkinase), and p38 (p38 MAP kinase). , A health functional food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases, characterized in that it reduces the activity of NF-κB (nuclear factor-kappaB). 상기 신경 염증 질환은 알츠하이머병, 파킨슨병, 헌팅턴병, 루게릭병, 크로이츠펠트야콥병 및 다발성 경화증으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 신경 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.A health functional food composition for preventing or improving neuroinflammatory diseases, wherein the neuroinflammatory diseases are at least one selected from the group consisting of Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, Lou Gehrig's disease, Creutzfeldt-Jakob disease, and multiple sclerosis.
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