KR20240067539A - Composition for treating of dental caries comprising Magnolia flower extract - Google Patents

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KR20240067539A
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Abstract

본 발명은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 치료용 구강용 조성물 및 건강식품에 관한 것으로, 신이 추출물은 치아 우식균에 대한 항균 효과가 우수하고, 치아 우식균의 생육 및 균 성장시 방출되는 효소인 글루코실트랜스퍼라제의 활성을 억제하며, 치아 우식균의 치아 부착을 억제함으로써 치아우식증 예방 또는 치료하기 위한 구강용 조성물 및 건강기능식품으로 유용하게 사용될 수 있다.The present invention relates to an oral composition and health food for the prevention or treatment of dental caries containing a kidney extract as an active ingredient. The kidney extract has an excellent antibacterial effect against dental caries bacteria, and is effective in inhibiting the growth and growth of dental caries bacteria. It can be usefully used as an oral composition and health functional food to prevent or treat dental caries by inhibiting the activity of glucosyltransferase, an enzyme released, and inhibiting the attachment of dental caries bacteria to teeth.

Description

신이 추출물을 포함하는 치아우식증 치료용 조성물{Composition for treating of dental caries comprising Magnolia flower extract}Composition for treating dental caries comprising Magnolia flower extract}

본 발명은 신이(magnolia flower) 추출물을 포함하는 치아우식증 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for treating dental caries containing magnolia flower extract.

구강은 인체에 중요한 기관으로 외부와 직접적으로 통하고 있어 많은 미생물에 노출되어 잇다. 또한, 환경적으로 세균들이 증식하기에 알맞은 조건을 가지고 있어 많은 세균들로부터 공격 받게 된다. 구강내 상주균은 특정한 환경하에서 법랑질 탈회의 원인이되며, 치아우식증을 촉발시킬 수 있다. 치아우식증(충치)는 구강 연쇄구균인에 의해 발생하는 구강질환 중의 하나로, 최근 감미료 사용 증대로 인해 우리나라는 물론 전 세게적으로도 발병률이 증가되고 있는 실정이다.The oral cavity is an important organ in the human body and is directly exposed to the outside world, so it is exposed to many microorganisms. In addition, environmental conditions are suitable for bacteria to proliferate, so they are attacked by many bacteria. Oral bacteria can cause enamel demineralization under certain circumstances and trigger dental caries. Dental caries (cavities) is one of the oral diseases caused by oral streptococci, and the incidence rate is increasing not only in Korea but also around the world due to the recent increase in the use of sweeteners.

치아우식증이란 치은연상 및 치은연하의 치면 세균막에 존재하는 미생물들에 의해 음식물 중의 탄수화물이 대사되어 국소적으로 생산된 유기산의 작용으로 인해 치아의 경조직이 파괴되는 질환으로, 그 예방 및 치료제의 개발은 우리나라뿐만 아니라 세계적인 관심사 중 하나이다. 치아우식증은 인간의 생명에는 직접적인 관계가 없지만, 음식물의 저작기능이 저하되므로 소화계통의 질병에 직간접으로 영향을 미친다. 치아우식증의 이환율은 특히 어린이에게 많은데, 5세 어린이의 85%에 이르고 있을 정도로 대부분의 사람들이 치아우식증으로 인한 고통을 경험했거나 경험하고 있다.Dental caries is a disease in which the hard tissues of teeth are destroyed due to the action of organic acids produced locally through the metabolism of carbohydrates in food by microorganisms present in the supragingival and subgingival dental plaque. Development of prevention and treatment is needed. It is a topic of interest not only in our country but also globally. Dental caries is not directly related to human life, but it directly or indirectly affects diseases of the digestive system because the chewing function of food is reduced. The morbidity rate of dental caries is particularly high in children, and most people have experienced or are experiencing pain due to dental caries, reaching 85% of 5-year-old children.

치아우식증의 발생 원인은 다양하나, 일반적으로 구강 내에 상주하는 세균의 발효 작용에 의해 치아에 부착된 음식물 찌꺼기의 당분이나 전분 등의 탄수화물이 분해되어 생기는 젖산이 치아 경조직의 석회를 탈각시켜 치아우식증이 발생하게 된다. 이러한 치아우식증을 일으키는 병원성 미생물로는 여러 종들이 알려져 있지만, 특히 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans), 스트렙토코커스 소브리누스(Streptococcus sobrinus) 등이 치아우식증 발생의 주된 병원체로 작용한다. There are various causes of dental caries, but in general, lactic acid, which is produced when carbohydrates such as sugar or starch in food residue attached to the teeth are broken down by the fermentation action of bacteria residing in the oral cavity, decomposes limestone from the hard tissues of the teeth, causing dental caries. It happens. Several species of pathogenic microorganisms that cause dental caries are known, but in particular, Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus act as the main pathogens in the occurrence of dental caries.

스트렙토코커스 뮤탄스는 균체외 또는 균체 표층에 글루코실트랜스퍼라제(glucosyltransferase, GTase)라는 효소를 분비하여 음식물 내 수크로오스를 기질로 하여 글루코오스와 프럭토오스를 생성하고, 동시에 글루코오스의 중합체인 불용성 글루칸(insoluble glucan)을 치면에 형성하게 된다. 이 글루칸에 의해 구강 내 다른 미생물들이 치면에 부착함으로써 치면 세균막, 즉 치태(dental plaque)를 형성하게 된다. 이 치태 내에서 스트렙토코커스 뮤탄스균을 포함한 젖산균이 증식하여 프럭토오스를 탄소원으로 젖산을 생성하고, 부착성 글루칸에 젖산이 포집, 농축된다. 이렇게 농축된 고농도의 산은 치아의 구성성분인 인산칼슘 중 Ca2+를 녹아내리게 하여 치아의 외막인 법랑질을 용해시킴으로서 치아우식증을 유발하게 되는 것이다.Streptococcus mutans secretes an enzyme called glucosyltransferase (GTase) outside the cell or on the surface of the cell to produce glucose and fructose using sucrose in food as a substrate, and at the same time insoluble glucan, a polymer of glucose. ) is formed on the tooth surface. This glucan causes other microorganisms in the oral cavity to attach to the tooth surface, forming a dental plaque. Within this plaque, lactic acid bacteria, including Streptococcus mutans, proliferate and produce lactic acid using fructose as a carbon source, and lactic acid is captured and concentrated in adhesive glucan. This concentrated, high-concentration acid dissolves Ca2+ in calcium phosphate, a component of teeth, and dissolves enamel, the outer layer of teeth, causing dental caries.

이러한 치아우식증을 억제하기 위해 사용되는 방법으로는 스포라마이신(sporamycin), 반코마이신(vancomycin), 클로로헥시딘(chlorhexidine) 등의 항생물질을 이용하는 방법, 유기 또는 무기 불소에 의한 병원성 세균의 억제방법 등이 이용되고 있다(비특허문헌 3). 그러나, 항생물질을 계속 이용하면 미생물이 내성을 갖게 되거나, 설사, 구토 등의 부작용을 유발할 수 있는 단점이 있을 뿐만 아니라, 이러한 항생물질의 남용으로 인해 구강 내 상재하는 세균들의 생육이 저해되는 문제점이 있다. 따라서, 효과적이고 안정성이 있는 치아우식증의 예방 및치료제의 개발이 절실히 요구되고 있다.Methods used to suppress dental caries include methods using antibiotics such as sporamycin, vancomycin, and chlorhexidine, and methods for suppressing pathogenic bacteria using organic or inorganic fluorine. etc. are used (Non-patent Document 3). However, continued use of antibiotics not only has the disadvantage of causing microorganisms to become resistant or cause side effects such as diarrhea and vomiting, but also the overuse of antibiotics inhibits the growth of bacteria residing in the oral cavity. there is. Therefore, there is an urgent need for the development of effective and safe dental caries prevention and treatment agents.

치아우식증 치료제에 관한 선행기술로는 한국등록특허 제10-1544939호 "진교의 추출물을 포함하는 치아우식증의 예방 또는 치료용 조성물"에 진교 추출물이 치아우식균에 대한 항균 효과가 우수하고, 치아우식균의 생육 및 균성장시 방출되는 효소인 글루코실트랜스퍼라제의 활성을 억제함이 개시되어 있다. 또한 한국등록특허 제10-1846512호 "광에 활성화되는 잔토리자 추출물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 및 치료용 약학 조성물"에는 구강 내 치아우식증, 치주질환 또는 방선균증과 같은 질환을 유발하는 균을 사멸시킬 수 있는 광에 활성화 되는 잔토리자 추출물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 및 치료용 약학 조성물이 개시되어 있다.Prior art regarding dental caries treatment includes Korean Patent No. 10-1544939, “Composition for preventing or treating dental caries containing extract of Jinkyo,” which states that Jinkyo extract has an excellent antibacterial effect against dental caries bacteria and dental caries extract. It is disclosed that it inhibits the activity of glucosyltransferase, an enzyme released during phagocytic growth and bacterial growth. In addition, Korean Patent No. 10-1846512, “Pharmaceutical composition for preventing and treating oral diseases containing light-activated extract of Zantoriza as an active ingredient,” contains bacteria that cause diseases such as dental caries, periodontal disease, or actinomycosis in the oral cavity. A pharmaceutical composition for preventing and treating oral diseases is disclosed, which contains as an active ingredient a light-activated extract of Zantoriza that can kill.

신이(Magnolia flower)는 목련과(Magnoliaceae)에 속하는 목련꽃의 봉우리를 이르는 말로, 꽃봉우리가 약간 매운 맛이 나기 때문에 신이(辛夷)라고 한다. 한국에서는 목련과의 백목련(Magnolia denudata Desrousseaux) 또는 동속식물의 꽃봉우리를 말려서 사용하며, 일본에서는 백목련(M. denudata Desr.), 망춘화(M. flower Pamp., 望春花), 일본신이(M. kobus DC., 日本辛夷), 향신이(M. salicifolia Maxim.:香辛夷) 및 무당 옥란(M. sprengeri Pamp.: 武當玉蘭)을 사용하며, 중국에서는 백목련(M. denudata Desr), 망춘화(M. flower Pamp., 望春花) 및 무당옥란(M. sprengeri Pamp., 武當玉蘭)을 사용한다. 신이에 대해 한방에서는 그 성질을 따뜻하다고 보며 두통, 요통 및 비염에 효능이 있고 또한 축농증을 치료해주고 진통제의 약성이 있다고 보고되어 있다. Magnolia flower refers to the bud of a magnolia flower belonging to the Magnoliaceae family. The flower bud has a slightly spicy taste, so it is called 辛夷. In Korea, dried flower buds of Magnolia denudata Desrousseaux or similar plants are used, and in Japan, white magnolia (M. denudata Desr.), M. flower Pamp. (望春花), and Nippon Shini (M. denudata Desr.) kobus DC., 日本辛夷), M. salicifolia Maxim.:香辛夷, and Mudang okran (M. sprengeri Pamp.: 武當玉蘭) are used, and in China, white magnolia (M. denudata Desr) and Mangchunhwa. (M. flower Pamp., 望春花) and Mudang jade orchid (M. sprengeri Pamp., 武當玉蘭) are used. In Oriental medicine, it is considered to have warm properties and is effective in treating headaches, back pain, and rhinitis. It is also reported to treat sinusitis and have analgesic properties.

본 발명자들은 부작용에 대한 우려가 없으면서도 치아우식, 치주질환, 치통, 시린이, 구취와 같은 구강질환 예방 및 개선에 효과가 뛰어난 천연소재를 도출하기 위해 연구를 수행하던 중, 신이 추출물의 스트렙토코커스 뮤탄스 성장억제효과, 항균활성, 산 생성 억제 효과 및 치아 표면에 치아 우식균의 부착억제 가능성을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.While the present inventors were conducting research to derive a natural material that was effective in preventing and improving oral diseases such as dental caries, periodontal disease, toothache, sensitive teeth, and bad breath without concerns about side effects, the Streptococcus The present invention was completed by confirming the mutans growth inhibition effect, antibacterial activity, acid production inhibition effect, and the possibility of inhibiting the attachment of dental caries bacteria to the tooth surface.

본 발명의 목적은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 치료용 조성물 및 이의 치아우식증 치료 용도를 제공하는 것이다.The purpose of the present invention is to provide a composition for the treatment of dental caries containing a kidney extract as an active ingredient and its use for the treatment of dental caries.

상기 목적을 달성하기 위해서,In order to achieve the above purpose,

본 발명은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. The present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating dental caries containing a kidney extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 개선용 구강용 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides an oral composition for preventing or improving dental caries containing kidney extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a health functional food composition for preventing or improving dental caries containing kidney extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 개선용 사료첨가제 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a feed additive composition for preventing or improving dental caries containing kidney extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 1) 신이에 용매를 첨가하여 추출물을 얻는 단계; In addition, the present invention includes the steps of 1) adding a solvent to the kidney to obtain an extract;

2) 상기 추출물을 농축하여 농축액을 얻는 단계; 및2) Concentrating the extract to obtain a concentrate; and

3) 상기 농축액을 건조시키는 단계;를 포함하는 신이 추출물 제조 방법을 제공한다.3) drying the concentrate.

본 발명의 신이 추출물은 치아우식증 원인균의 성장을 억제하고 산 생성을 억제하며, 치아우식증 원인균에 대해 항균 활성을 나타내며, 치아 표면에 치아 우식균의 부착억제 활성을 나타내는 바, 본 발명의 신이 추출물은 치아우식증 치료 및 예방에 사용할 수 있다.The Xixi extract of the present invention inhibits the growth of dental caries-causing bacteria and inhibits acid production, exhibits antibacterial activity against dental caries-causing bacteria, and exhibits activity to inhibit the adhesion of dental caries bacteria to the tooth surface. It can be used to treat and prevent dental caries.

도 1은 신이 추출물의 스트렙토코커스 뮤탄스 성장 억제 효과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 신이 추출물의 스트렙토코커스 뮤탄스 부착 억제 효과를 나타낸 그래프이다.
Figure 1 is a graph showing the inhibitory effect of Streptococcus mutans growth of Shinyi extract.
Figure 2 is a graph showing the effect of Shinyi extract on inhibiting Streptococcus mutans adhesion.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. The present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating dental caries containing a kidney extract as an active ingredient.

본 발명의 신이는 Magnolia flower 의 학명을 가지며, 목련과(Magnoliaceae)에 속하는 목련꽃의 봉우리를 이르는 말이다. 신이에 대해 한방에서는 그 성질을 따뜻하다고 하며 두통, 요통 및 비염에 효능이 있고 축농증을 치료해주고 진통제의 약성이 있다고 알려져 있다.The flower of the present invention has the scientific name of Magnolia flower , which refers to the bud of a magnolia flower belonging to the Magnoliaceae family. In Oriental medicine, it is said to have warm properties and is effective for headaches, back pain, and rhinitis, and is known to treat sinusitis and have painkilling properties.

상기 치아우식증은 스트렙토코커스 뮤탄스(strepcococcus mutans) 및 스트렙토코커스 소브리누스(Streptococcus sobrinus) 중에서 선택된 어느 하나 이상의 균에 의해 유발될 수 있다.The dental caries may be caused by one or more bacteria selected from Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus.

본 발명의 용어 "치아우식증"은 치아면에 서식하는 세균으로 인한 감염성 질환으로서, 충치라고도 하며, 치아의 경조직이 침식되어 결손하는 증세를 보인다. 구체적으로 치아의 머리 부분 표면을 덮고 있고, 치아 상아질을 보호하는 유백색의 반투명하고 단단한 물질을 치아 법랑질 또는 에나멜질이라고 하는데, 입 안에 서식하는 구강병원균에 의해 설탕, 전분 등이 분해되면서 생기는 산에 의해 치아의 법랑질이 손상되어 충치가 생기는 것을 말한다. The term "dental caries" of the present invention is an infectious disease caused by bacteria living on the surface of the teeth, also called cavities, and shows symptoms of erosion and loss of the hard tissue of the teeth. Specifically, the milky-white, translucent, hard substance that covers the surface of the head of the tooth and protects the dentin of the tooth is called tooth enamel or enamel. It is damaged by acids produced when sugar, starch, etc. are broken down by oral pathogens living in the mouth. This means that the enamel of the teeth is damaged, resulting in cavities.

치아우식증을 일으키는 주요 원인으로는 치아 표면에 생성된 세균막인 치태(dental plaque, 플라크)를 들 수 있는데, 타액이 치아에 얇고 끈적한 막을 형성하고, 그 위에 연쇄상구균의 일종인 스트렙토코쿠스 소브리누스(Streptococcus sobrinus)균 및 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 등의 구강 미생물이 부착해 바이오 필름(biofilm)을 형성함으로써 치태(dental plaque, 플라크)가 만들어지고 푸조박테리움(Fusobacterium)에 의해 더욱 두꺼워진다. The main cause of dental caries is dental plaque, which is a bacterial film formed on the surface of teeth. Saliva forms a thin, sticky film on the teeth, and Streptococcus sobrinus, a type of streptococcus, forms on top of it. Oral microorganisms such as Streptococcus sobrinus and Streptococcus mutans attach to form a biofilm, creating dental plaque, which is further thickened by Fusobacterium. .

본 발명의 치아우식증은 치아우식증을 일으키는 원인균이라면 그 종류에 관계없이 모두 포함되나, 구체적으로는 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans), 스트렙토코커스 산구이니스(Streptococcus sanguinis), 스트렙토코커스 소브리누스(Streptococcus sobrinus), 스트렙토코커스 라티(Streptococcus ratti), 스트렙토코커스 크리세티(Streptococcus criceti), 스트렙토코커스 안지노서스(Streptococcus anginosus) 및 유산균으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균일 수있으며, 보다 구체적으로는 스트렙토코커스 뮤탄스일 수 있다.Dental caries of the present invention includes all causative bacteria that cause dental caries regardless of their type, but specifically, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, and Streptococcus sobrinus. ), Streptococcus ratti, Streptococcus criceti, Streptococcus anginosus, and one or more species selected from the group consisting of lactic acid bacteria, and more specifically, Streptococcus mutans. You can.

상기 스트렙토코커스 뮤탄스는 연쇄상구균의 일종으로 그람양성균이며 충치균이라도 불린다. 상기 스트렙토코커스 뮤탄스는 치아의 표면에서만 증식하는데, 생후 30개월 전후까지는 유치가 완성되지 않는다. 따라서 이 시기까지는 유아기 이후처럼 뮤탄스 균이 증식하기 어렵다. 유아기 동안 어른들의 입으로부터 뮤탄스 균에 감염되지 않아 입 안에 다른 구강 세균이 자리를 잡게 되면 이미 균형이 잡힌 구강 내의 생태계에 뮤탄스균이 새로이 진입하기 어려워져 유아기 이후 일생동안 충치에 걸릴 확률이 현저히 낮아지게 된다. 이미 어른들의 입을 통해 원인균에 전염되었을 경우에는 양치질을 자주하고 입 안을 청결하게 유지하는 것이 충치 예방에 도움이 된다. 다만, 일단 뮤탄스균이 구강 내에 자리잡았다면 뮤탄스 균 박멸은 불가능하다.The Streptococcus mutans is a type of streptococcus, a gram-positive bacterium, and is also called a caries bacteria. The Streptococcus mutans grows only on the surface of teeth, and deciduous teeth are not completed until around 30 months of age. Therefore, until this period, it is difficult for mutans bacteria to proliferate like after infancy. If a child is not infected with mutans bacteria from an adult's mouth during infancy and other oral bacteria take up residence in the mouth, it becomes difficult for new mutans bacteria to enter the already balanced oral ecosystem, so the probability of developing cavities after infancy and throughout life is significantly lower. You lose. If you have already been infected with the causative bacteria through the mouth of an adult, brushing your teeth frequently and keeping your mouth clean will help prevent cavities. However, once mutans bacteria have established themselves in the oral cavity, eradication of mutans bacteria is impossible.

또한, 이들 박테리아는 치아 표면에 잘 부착되고, 다른 박테리아 유형보다 많은 양의 산을 당으로부터 생산하며, 산성 환경에서 다른 박테리아보다 더욱 효과적으로 생존하고, 자당으로부터 세포외 다당류를 생산한다. 치태에서 스트렙토코커스 뮤탄스의 비율이 높으면, 치아우식증의 위험이 높아진다. Additionally, these bacteria adhere well to the tooth surface, produce greater amounts of acid from sugars than other bacterial types, survive more effectively than other bacteria in acidic environments, and produce extracellular polysaccharides from sucrose. If the proportion of Streptococcus mutans in plaque is high, the risk of dental caries increases.

상기 신이 추출물은 스트렙토코커스 뮤탄스의 성장을 억제할 수 있다.The Xinyi extract can inhibit the growth of Streptococcus mutans.

상기 신이 추출물은 스트렙토코커스 뮤탄스에 의한 유기산 생성을 억제할 수 있다.The Shinyi extract can inhibit the production of organic acids by Streptococcus mutans.

상기 신이 추출물은 스트렙토코커스 뮤탄스에 대한 항균 활성을 나타낼 수 있다.The Xinyi extract may exhibit antibacterial activity against Streptococcus mutans.

상기 신이 추출물은 스트렙토코커스 뮤탄스의 치아 부착을 억제할 수 있다.The Shinyi extract can inhibit the attachment of Streptococcus mutans to teeth.

본 발명의 약학적 조성물은 조성물 전체 중량에 대하여 유효성분인 신이 추출물을 10 내지 95 중량%로 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 상기 유효성분 이외에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 추가로 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may contain 10 to 95% by weight of the active ingredient, Siniga extract, based on the total weight of the composition. In addition, the pharmaceutical composition of the present invention may further include one or more active ingredients that exhibit the same or similar functions in addition to the above-mentioned effective ingredients.

본 발명의 용어 "유효성분으로 포함하는"은 신이 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다.The term "comprising an active ingredient" in the present invention means that the extract contains a sufficient amount to achieve the efficacy or activity of the extract.

본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 첨가물을 추가로 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may further include pharmaceutically acceptable additives.

상기 첨가물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.The additives may further include suitable carriers, excipients, and diluents commonly used in the preparation of pharmaceutical compositions.

본 발명의 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용할 수 있다. 상세하게는 제형화할 경우 통상 사용하는 충진제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention can be formulated and used in the form of oral dosage forms such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, external preparations, suppositories, or sterile injection solutions according to conventional methods. You can. In detail, it can be prepared using commonly used diluents or excipients such as fillers, weighting agents, binders, wetting agents, disintegrants, and surfactants.

적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed, 1995)에 상세히 기재되어 있다.Suitable pharmaceutically acceptable carriers and formulations are described in detail in Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed, 1995).

본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally, and in case of parenteral administration, it can be administered by intravenous injection, subcutaneous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, transdermal administration, etc.

본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성, 환자의 골 손실 정도와 같은 요인들에 따라 다르며, 당 업자에 의하여 적절하게 선택될 수 있고, 구체적으로 0.001 mg/kg 내지 50 mg/kg이며, 필요에 따라 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.The appropriate dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is determined by factors such as formulation method, administration method, patient's age, weight, sex, pathological condition, food, administration time, administration route, excretion rate and response sensitivity, and degree of bone loss of the patient. It varies depending on the dose, and can be appropriately selected by a person skilled in the art. Specifically, the amount is 0.001 mg/kg to 50 mg/kg, and can be administered once or several times a day as needed.

본 발명의 "투여 대상"은 인간, 원숭이, 소, 말, 돼지, 양, 닭, 고양이, 개, 마우스, 토끼 등을 포함하지만, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.The “administration subject” of the present invention includes, but is not particularly limited to, humans, monkeys, cows, horses, pigs, sheep, chickens, cats, dogs, mice, rabbits, etc.

본 발명은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 개선용 구강용 조성물을 제공한다.The present invention provides an oral composition for preventing or improving dental caries containing a kidney extract as an active ingredient.

상기 신이 추출물은 물, 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 제조된 추출물일 수 있고, 바람직하게는 신이 에탄올 추출물 또는 물 추출물 일 수 있다. 상기 에탄올 추출물은 30 내지 99% 에탄올, 40 내지 90% 에탄올, 50 내지 80% 에탄올, 또는 60 내지 75% 에탄올을 이용한 추출물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The kidney extract may be an extract prepared by extraction with water, alcohol, or a mixture thereof, and preferably, kidney kidney extract may be an ethanol extract or a water extract. The ethanol extract may be an extract using 30 to 99% ethanol, 40 to 90% ethanol, 50 to 80% ethanol, or 60 to 75% ethanol, but is not limited thereto.

본 발명의 신이 추출물을 포함하는 구강용 조성물의 제형은 치약, 구강세정제, 구강청정제, 껌, 캔디류, 구강스프레이, 구강용 연고제, 구강용 바니쉬, 구강양치액 및 잇몸 마사지 크림으로 이루어진 군에서 선택될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The formulation of the oral composition containing the extract of the present invention may be selected from the group consisting of toothpaste, mouthwash, mouthwash, gum, candy, oral spray, oral ointment, oral varnish, oral rinse, and gum massage cream. However, it is not limited to this.

상기 상기 치약류는 연마제, 점결제, 보습제, 발포제, 감미료, 향미제 등의 성분을 하나 이상 포함할 수 있다. The toothpaste may contain one or more ingredients such as abrasives, binders, moisturizers, foaming agents, sweeteners, and flavoring agents.

상기 연마제로는 수산화알루미늄, 무수규산, 규산알루미늄, 제2인산칼슘, 제2수산화물 및 무수물, 제3인산칼슘, 탄산칼슘, 피로인산칼슘, 불용성 메타인산나트륨, 제3인산마그네슘, 탄산마그네슘, 황산칼슘, 폴리메타아크릴산메틸, 기타 합성수지 등에서 1종 또는 2종 이상을 전체 조성물의 약 20∼90%의 양으로 배합하여 사용할 수 있다(페이스트 치약의 경우에는 20∼60%가 된다). The abrasives include aluminum hydroxide, anhydrous silicic acid, aluminum silicate, dicalcium phosphate, dihydroxide and anhydride, tricalcium phosphate, calcium carbonate, calcium pyrophosphate, insoluble sodium metaphosphate, tribasic magnesium phosphate, magnesium carbonate, and sulfuric acid. One or two or more of calcium, polymethyl methacrylate, and other synthetic resins can be mixed and used in an amount of about 20 to 90% of the total composition (in the case of paste toothpaste, it is 20 to 60%).

상기 점결제로는 가라기닌, 각종 점증용 셀룰로오스 유도체, 잔탄검, 트라가칸트 검(Tragacanth gum) 등의 검류, 폴리비닐 알코올, 폴리아크릴산 나트륨, 폴리아크릴산/말레인산 공중합체, 카르복시비닐 폴리머 등의 합성 고분자 유도체 등의 유기계 점결제와 실리카, 라포나이트 등의 무기계 점결제에서 1종 또는 2종 이상을 전체 조성물의 약 03∼5%의 양으로 배합하여 사용할 수 있다. The binders include garragynin, various cellulose derivatives for thickening, gums such as xanthan gum and tragacanth gum, polyvinyl alcohol, sodium polyacrylate, polyacrylic acid/maleic acid copolymer, carboxyvinyl polymer, etc. One or two or more types of organic binders such as polymer derivatives and inorganic binders such as silica and laponite can be mixed and used in an amount of about 03 to 5% of the total composition.

치약류 중 페이스트상과 액상 구강용 조성물에서는 그 제조시 보습제로 솔비톨, 글리세린, 에틸렌글리콜, 프로필렌 글리콜, 폴리에테르 글리콜, 폴리프로필렌글리콜 등에서 1종 또는 2종 이상을 전체 조성물의 약 10∼70%의 양으로 배합하여 사용할 수 있다.Among toothpastes, paste and liquid oral compositions contain one or two or more types of moisturizers such as sorbitol, glycerin, ethylene glycol, propylene glycol, polyether glycol, and polypropylene glycol in approximately 10 to 70% of the total composition during manufacture. It can be used in mixed quantities.

본 발명의 구강용 조성물에는 멘톨(Mentol), [0015] 아네톨(Anetol), 오이게놀(Eugenol), 리모넨(Limonene), 오시멘(Ocimene), n-도데실알코올(n-Dodecy Alcohol), 시트로네놀(Citronenol), 알파터피네올(α-Terpineol), 살리실메틸(Methyl salycilate), 메틸아세테이트(Methyl Acetate), 시트로네릴 아세테이트(Citronelyl Acetate), 시네올(Cineol), 리나롤(Linalool), 에틸리나롤(Ethyl Linalool), 바닐린(Vanillin), 티몰(Thymol), 스피아민트(Speamint)유, 세지(Sage)유, 로즈마리(Rosemary)유, 계피(Cinamon)유 등의 항료를 단독 또는 조합하여 전체 조성물의 01∼10%, 바람직하게는 0.5∼5%의 양으로 배합하여 사용할 수 있다. The oral composition of the present invention includes menthol, Anetol, Eugenol, Limonene, Ocimene, and n-Dodecy Alcohol. , Citronenol, α-Terpineol, Methyl salycilate, Methyl Acetate, Citronolyl Acetate, Cineol, Linalol Perfumes such as Linalool, Ethyl Linalool, Vanillin, Thymol, Spearmint Oil, Sage Oil, Rosemary Oil, Cinamon Oil, etc. It can be used alone or in combination in an amount of 01 to 10%, preferably 0.5 to 5%, of the total composition.

또한, 사카린나트륨, 스테비오사이드, 아스파탐, D-자일로오스(D-Xylose) 등과 같은 감미제 등을 전체 조성물의 0∼1%, 바람직하게는 0.01∼0.5%의 양으로 배합하여 사용할 수 있다.In addition, sweeteners such as sodium saccharin, stevioside, aspartame, D-Xylose, etc. can be mixed and used in an amount of 0 to 1%, preferably 0.01 to 0.5%, of the total composition.

또한, 본 발명의 구강용 조성물에는 트리클로산, 클로로 헥시딘, 벤제토늄클로라이드, 벤잘코늄클로라이드, 세틸피리듐 클로라이드과 같은 양이온성 살균제, 모노플루오로인산나트륨과 모노플루오로 인산칼륨 등과 같은 알칼리금속 모노플루오로 포스페이트와 불화나트륨, 불화제일주석 등의 불소화물, 트라넥삼산, 입실론 아미노 카프론산, 알루미늄 클로로 히드록실 알란토인, 디히드로 콜레스타놀, 클리틸리친산류, 글리세로 포스테이트, 염화나트륨, 수용성 무기인산 화합물, 아스코르빈산(나트륨), 초산 dl-a-토코페롤, 자일리톨, 염산피리독신, 폴리비닐 피롤리돈 등의 각종 효능 성분 중 1종 또는 2종 이상을 선택 배합하여 사용할 수 있다.In addition, the oral composition of the present invention includes cationic disinfectants such as triclosan, chlorhexidine, benzethonium chloride, benzalkonium chloride, and cetylpyridium chloride, and alkali metal monofluorocarbons such as sodium monofluorophosphate and potassium monofluorophosphate. Fluorides such as phosphate, sodium fluoride, and stannous fluoride, tranexamic acid, epsilon amino caproic acid, aluminum chlorohydroxy allantoin, dihydrocholestanol, clitylic acid, glycerophosphatate, sodium chloride, and water-soluble inorganic phosphoric acid compounds. , ascorbic acid (sodium), dl-a-tocopherol acetate, xylitol, pyridoxine hydrochloride, polyvinyl pyrrolidone, etc., one or two or more of various effective ingredients can be selected and used.

또한, 본 발명의 구강용 조성물에서 발포 성분으로 사용하는 계면활성제로는 음이온성 계면활성제, 비이온성 계면활성제 및/또는 양이온성 계면활성제를 사용할 수 있다. Additionally, the surfactant used as a foaming component in the oral composition of the present invention may include an anionic surfactant, a nonionic surfactant, and/or a cationic surfactant.

여기서, 음이온성 계면활성제로는 라우릴 황산나트륨, 미리스틸 황산나트륨 등의 알킬 황산나트륨, N-라우로일 사르코신산나트륨(Sodium N-Lauroyl sarcosinate), N-미리스틸 사르코신산나트륨(Sodium N-miristyl sarcosinate) 등의 N-아실 사르코신산나트륨(Sodium N-acyl sarcosinate) 등을 사용할 수 있고, 비이온성 계면활성제로는 슈가지방산 에스테르, 말토스 지방산 에스테르, 락토스 지방산 에스테르 등과 같은 당(糖)유래 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유, 폴리옥시에틸렌고급알코올 에테르, 폴리옥시 에틸렌 폴리옥시 프로필렌 공중합체, 폴리옥시 에틸렌 폴리프로필렌 지방산 에스테르 등을 사용할 수 있다. Here, the anionic surfactant includes sodium alkyl sulfate such as sodium lauryl sulfate, sodium myristyl sulfate, sodium N-Lauroyl sarcosinate, and sodium N-myristyl sarcosinate. Sodium N-acyl sarcosinate, etc. can be used, and nonionic surfactants include sugar-derived fatty acid esters such as sugar fatty acid ester, maltose fatty acid ester, and lactose fatty acid ester, and poly Oxyethylene hydrogenated castor oil, polyoxyethylene higher alcohol ether, polyoxyethylene polyoxypropylene copolymer, polyoxyethylene polypropylene fatty acid ester, etc. can be used.

양이온성 계면활성제로는 N-라우릴 디 아미노에틸글리신, N-미리스틸 디아미노에틸글리신 등과 같은 N-알킬 디 아미노에틸글리신, N-알킬-N-카르복시메틸 암모늄 베타인, 2-알킬-1-히드록시에틸 이미다졸린 베타인 나트륨 등을 사용할 수 있다. Cationic surfactants include N-alkyl diaminoethylglycine such as N-lauryl diaminoethylglycine, N-myristyl diaminoethylglycine, N-alkyl-N-carboxymethyl ammonium betaine, and 2-alkyl-1. -Hydroxyethyl imidazoline betaine sodium, etc. can be used.

이 경우 발포 성분으로는 음이온성 계면활성제를 주로 사용하며 대표적인 것으로는 라우릴 황산나트륨과 같은 알킬황산 나트륨을 가장 널리 사용하고 있다. 또한 이들 계면활성제는 1종 단독 또는 2종 이상 혼합하여 사용하는 것이 바람직하며, 배합량은 통상 전체 조성물의 0.01∼0.5%, 보다 바람직하게는 0.05∼0.3%를 사용한다.In this case, anionic surfactants are mainly used as foaming ingredients, and sodium alkyl sulfate such as sodium lauryl sulfate is most widely used. In addition, these surfactants are preferably used singly or in combination of two or more, and the mixing amount is usually 0.01 to 0.5%, more preferably 0.05 to 0.3%, of the total composition.

상기 신이 추출물은 본 발명의 구강용 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 50 중량%로 포함될 수 있으나, 그 함량은 활성 성분의 흡수도, 환자의 연령, 성별, 상태, 치아우식증의 정도 등에 따라 적절히 조절될 수 있다.The kidney extract may be included in an amount of 0.01 to 50% by weight based on the total weight of the oral composition of the present invention, but the content can be appropriately adjusted depending on the absorption of the active ingredient, the patient's age, gender, condition, degree of dental caries, etc. You can.

본 발명의 용어 "유효성분으로 포함하는"은 신이 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다.The term "comprising an active ingredient" in the present invention means that the extract contains a sufficient amount to achieve the efficacy or activity of the extract.

상기 신이 추출물은 치아우식증을 유발하는 스트렙토코커스 뮤탄스 균을 사멸시키고, 성장을 억제하며, 뮤탄스 균에 의한 유기산 생성을 억제하며, 치아 표면 부착을 억제하는 바, 구강질환 예방 및 개선에 이용될 수 있다.The Shinyi extract kills Streptococcus mutans bacteria that cause dental caries, inhibits their growth, inhibits the production of organic acids by mutans bacteria, and inhibits attachment to the tooth surface, so it can be used to prevent and improve oral diseases. You can.

본 발명은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.The present invention provides a health functional food composition for preventing or improving dental caries containing a kidney extract as an active ingredient.

본 발명의 용어 "유효성분으로 포함하는"은 신이 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다.The term "comprising an active ingredient" in the present invention means that the extract contains a sufficient amount to achieve the efficacy or activity of the extract.

본 발명의 건강기능식품 조성물은 투여를 위하여 조성물 총 중량에 대하여 본 발명의 추출물을 0.1 내지 99.9 중량%를 유효성분으로 함유할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 상기 유효성분 이외에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 추가로 포함할 수 있다.For administration, the health functional food composition of the present invention may contain 0.1 to 99.9% by weight of the extract of the present invention as an active ingredient based on the total weight of the composition. In addition, the composition of the present invention may further include one or more active ingredients that exhibit the same or similar functions in addition to the above-mentioned effective ingredients.

본 발명의 용어 "건강기능식품" 이란, 일상 식사에서 결핍되기 쉬운 영양소나 또는 인체에 유용한 기능을 가진 원료나 성분 (기능성 원료)을 사용하여 제조하는 것으로, 인체의 정상적인 기능을 유지하거나 생리 기능 활성화를 통하여 건강을 유지하고 개선하는 식품을 의미하나, 이에 제한되는 것은 아니다.The term "health functional food" in the present invention refers to a product manufactured using nutrients that are easily deficient in daily diet or raw materials or ingredients (functional raw materials) with useful functions for the human body, which maintain the normal function of the human body or activate physiological functions. It refers to food that maintains and improves health through, but is not limited to, food.

본 발명의 건강기능식품은 당업계에 공지된 다양한 제조방법에 따라 적절한 유효 농도 범위에서 신이 추출물을 첨가하여 제조 가능하다.The health functional food of the present invention can be manufactured by adding kidney extract in an appropriate effective concentration range according to various manufacturing methods known in the art.

본 발명의 건강기능식품은 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 액제 등의 형태로 제조될 수 있다. The health functional food of the present invention can be manufactured in the form of powder, granules, tablets, capsules, or liquid.

본 발명의 건강기능식품 조성물은 구강 질환의 예방 또는 개선 효능을 가지므로 구강 질환의 예방 또는 개선을 목적으로 하는 개체에게 꾸준히 섭취하게 함으로써 상기 구강 질환을 예방할 수 있고, 이미 발생한 구강 질환을 개선시킬 수 있다.Since the health functional food composition of the present invention has the effect of preventing or improving oral diseases, it can prevent the oral diseases and improve oral diseases that have already occurred by continuously ingesting it in an individual for the purpose of preventing or improving oral diseases. there is.

상기 건강기능식품은 구강 질환의 예방 또는 개선을 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 개체에도 적용 가능하다. 예를 들면, 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 비 인간동물, 조류, 또는 어류 등 어떠한 개체에도 적용 가능하다.The health functional food is not particularly limited as long as it is intended for the prevention or improvement of oral diseases, and can be applied to any entity. For example, it can be applied to any entity, including non-human animals such as monkeys, dogs, cats, rabbits, guinea pigs, rats, mice, cows, sheep, pigs, goats, birds, or fish.

본 발명은 신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 개선용 사료첨가제 조성물을 제공한다.The present invention provides a feed additive composition for preventing or improving dental caries containing kidney extract as an active ingredient.

구체적으로 본 발명의 구강질환은 치아우식증일 수 있다.Specifically, the oral disease of the present invention may be dental caries.

상기 치아우식증은 스트렙토코커스 뮤탄스(strepcococcus mutans)에 의하여 유발될 수 있다.The dental caries can be caused by Streptococcus mutans.

본 발명의 용어 "사료 첨가제"란 영양소 보충 및 체중감소 예방, 사료내 섬유소의 소화 이용성 증진, 유질 개선, 번식장애 예방 및 수태율 향상, 하절기 고온 스트레스 예방 등 다양한 효과를 목적으로 사료에 첨가하는 물질을 의미한다. The term "feed additive" in the present invention refers to substances added to feed for the purpose of various effects such as supplementing nutrients and preventing weight loss, improving the digestibility of fiber in feed, improving oil quality, preventing reproductive disorders and improving conception rates, and preventing high temperature stress in the summer. it means.

본 발명의 사료첨가제는 구강 질환의 예방 또는 개선 효능을 가지므로 가금류, 가축 등에게 꾸준히 섭취하게 함으로써 구강 심혈관 질환을 예방할 수 있고, 이미 발생한 구강 질환을 개선시킬 수 있다.The feed additive of the present invention has the effect of preventing or improving oral diseases, so it can prevent oral cardiovascular diseases and improve oral diseases that have already occurred by continuously ingesting it in poultry, livestock, etc.

상기 사료 첨가제를 공급하는 경우, 가금류 및 가축 등에 대하여 단독으로 공급하거나 사료에 혼합하여 공급할 수 있다.When supplying the above feed additive, it can be supplied alone to poultry and livestock, or mixed with feed.

또한, 본 발명의 사료 첨가제는 당업계에 공지된 다양한 사료 제조방법에 따라 적절한 유효 농도 범위에서 신이 추출물을 첨가하여 제조 가능하다.In addition, the feed additive of the present invention can be manufactured by adding kidney extract in an appropriate effective concentration range according to various feed production methods known in the art.

상기 첨가제는 구강 질환의 예방 또는 개선을 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 개체에도 적용 가능하다. 예를 들면, 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 비 인간동물, 조류, 또는 어류 등 어떠한 개체에도 적용 가능하다.The additive is not particularly limited as long as it is intended for the prevention or improvement of oral diseases, and can be applied to any object. For example, it can be applied to any entity, including non-human animals such as monkeys, dogs, cats, rabbits, guinea pigs, rats, mice, cows, sheep, pigs, goats, birds, or fish.

본 발명은 1) 신이에 용매를 첨가하여 추출물을 얻는 단계; The present invention includes the steps of 1) adding a solvent to the kidney to obtain an extract;

2) 상기 추출물을 농축하여 농축액을 얻는 단계; 및2) Concentrating the extract to obtain a concentrate; and

3) 상기 농축액을 건조시키는 단계;를 포함하는 신이 추출물 제조 방법을 제공한다.3) drying the concentrate.

본 발명의 신이는 신이의 뿌리, 줄기, 잎 또는 꽃일 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.The soybeans of the present invention may be, but are not limited to, the roots, stems, leaves or flowers of the axils.

본 발명의 신이 추출물은 물, 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 제조될 수 있다.The kidney extract of the present invention can be prepared by extraction with water, alcohol, or a mixture thereof.

상기 알코올은 C1-2의 저급 알코올일 수 있고, 바람직하게는 에탄올일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The alcohol may be a C 1-2 lower alcohol, preferably ethanol, but is not limited thereto.

상기 알코올은 30 내지 99% 에탄올일 수 있고, 40 내지 90% 에탄올일 수 있고, 50 내지 80% 에탄올일 수 있으며, 60 내지 75% 에탄올일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The alcohol may be 30 to 99% ethanol, 40 to 90% ethanol, 50 to 80% ethanol, and 60 to 75% ethanol, but is not limited thereto.

상기 단계 1)의 추출은 90 내지 100°C에서 1 내지 3시간 동안 수행될 수 있다.The extraction in step 1) may be performed at 90 to 100°C for 1 to 3 hours.

상기 단계 2)의 농축은 감압농축일 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.The concentration in step 2) may be reduced pressure concentration, but is not limited thereto.

상기 단계 3)의 건조는 분무건조일 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.The drying in step 3) may be spray drying, but is not limited thereto.

구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 신이 추출물의 치아우식증 원인균에 대한 성장 억제 활성 및 산 생성 억제 효과를 확인하기 위하여, 스트렙토코커스 뮤탄스균에 신이 추출물을 첨가하여 24시간 배양 후 흡광도를 측정하였고, 그 결과, 신이 추출물이 유의하게 뮤탄스균의 성장을 억제함을 확인하였고(도 1), 신이 추출물이 뮤탄스균에 의한 유기산 생성을 억제함을 확인하였다(표 1). 또한, 디스크확산법을 사용하여 신이 추출물의 항균 활성을 확인한 결과, 신이 추출물이 뮤탄스균의 생장을 강하게 억제하는 항균 효과를 가지고 있음을 확인하였다(표 2). 아울러, hydroxypatite beads에 대한 부착억제 효과를 통해 치아 표면에 뮤탄스균의 부착억제 가능성을 확인함으로써(도 2), 본 발명의 신이 추출물은 치아우식증 치료 및 예방에 사용할 수 있음을 증명하였다.In a specific example, the present inventors added the Shinni extract to Streptococcus mutans bacteria and measured the absorbance after culturing for 24 hours to confirm the growth inhibitory activity and acid production inhibitory effect of the Shinni extract on dental caries-causing bacteria. As a result, , it was confirmed that the Shiny extract significantly inhibited the growth of Mutans bacteria (Figure 1), and it was confirmed that the Shiny extract inhibited the production of organic acids by Mutans bacteria (Table 1). In addition, as a result of confirming the antibacterial activity of the Shinni extract using the disk diffusion method, it was confirmed that the Shinni extract has an antibacterial effect that strongly inhibits the growth of mutans bacteria (Table 2). In addition, by confirming the possibility of inhibiting the adhesion of mutans bacteria to the tooth surface through the adhesion inhibitory effect on hydroxypatite beads (Figure 2), it was proven that the Shinyi extract of the present invention can be used for the treatment and prevention of dental caries.

이하, 본 발명을 하기 실시예에 의하여 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail through the following examples.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 이들에 의하여 한정되는 것은 아니다.However, the following examples are only for illustrating the present invention, and the present invention is not limited thereto.

<실시예 1> 신이 추출물 제조<Example 1> Preparation of Xingi extract

본 발명에서는, 신이 꽃봉오리를 이의 중량 8배에 해당하는 물을 첨가하여 95°C에서 2시간 추출하였다. 이후, 추출액을 감압 농축기를 이용하여 농축한 후 농축된 추출액을 분무건조하여 고상의 신이 추출물 5 kg을 수득하였다.In the present invention, fresh flower buds were extracted at 95°C for 2 hours by adding water equivalent to 8 times its weight. Afterwards, the extract was concentrated using a reduced pressure concentrator, and then the concentrated extract was spray dried to obtain 5 kg of solid Xingar extract.

<실험예 1> 신이 추출물의 치아우식증 원인균에 대한 성장 억제 활성 및 산 생성 억제 실험<Experimental Example 1> Growth inhibitory activity and acid production inhibition test on dental caries-causing bacteria of Shingi extract

본 실험에 사용한 균주는 Streptococcus mutans KCTC 3065를 분양받아 사용하였다. S mutans 균주에 대한 생육배지는 brain heart infusion agar (difco Lab, Detroit, MI, USA)를 사용하였다. 균주는 BHI 액체배지에 신이추출물을 첨가한 후, 균을 1X10^8 CFU/mL이 되도록 접종하였다. 37°C 의 항온기에서 24시간 배양한 후 ELISAreader (Molecular Devices Co, CF, USA)를 이용하여 550 nm에서 흡광하였으며, pH meter (ORIONSA 720, USA)를 이용하여 pH를 측정, 산 생성억제 효과를 관찰하였다.The strain used in this experiment was Streptococcus mutans KCTC 3065. Brain heart infusion agar (difco Lab, Detroit, MI, USA) was used as a growth medium for S mutans strains. The strain was inoculated to 1X10^8 CFU/mL after adding kidney extract to BHI liquid medium. After culturing in a thermostat at 37°C for 24 hours, light absorption was performed at 550 nm using an ELISA reader (Molecular Devices Co, CF, USA), and the pH was measured using a pH meter (ORIONSA 720, USA) to determine the acid production inhibition effect. observed.

상기 실시예 1에 의하여 제조된 신이추출물의 S.mutans에 대한 항균활성을 관찰하기 위해 BHI 액체배지에 신이추출물을 0.125, 0.25, 0.5, 1 mg/mL의 농도로 첨가한 후, Smutans를 접종하여 37°C 의 항온기에서 24시간 배양한 후 흡광도를 측정한 결과, 신이추출물을 넣지 않은 대조군에서 0.198±0.03 의 흡광도를 나타내었다. 그러나, 신이추출물 0.5, 1 mg/mL의 농도에서는 각각 0.108±0.021, 0.075±0.019의 흡광도를 나타내었고 대조군 대비 농도의존적으로 유의한 차이를 보이며 성장 억제효과를 나타내었다(도 1).In order to observe the antibacterial activity of the S. mutans extract prepared in Example 1, the S. mutans extract was added to the BHI liquid medium at a concentration of 0.125, 0.25, 0.5, and 1 mg/mL, and then inoculated with S. mutans. As a result of measuring the absorbance after culturing in a thermostat at 37°C for 24 hours, the control group without the kidney extract showed an absorbance of 0.198 ± 0.03. However, at concentrations of 0.5 and 1 mg/mL, the extract showed absorbance of 0.108 ± 0.021 and 0.075 ± 0.019, respectively, showing a significant concentration-dependent difference compared to the control group, showing a growth inhibitory effect (Figure 1).

또한, 신이추출물 처리에 따른 Smutans에 의한 유기산 생성 억제 효과를 알아보기 위해 0.125, 0.25, 0.5, 1 mg/mL의 농도의 시료에 Smutans를 접종하여 24시간 배양후에 pH meter로 pH를 측정한 결과를 표 1에 기재하였다.In addition, in order to determine the effect of inhibiting the production of organic acids by Smutans according to the treatment of Sinicis extract, Smutans were inoculated into samples at concentrations of 0.125, 0.25, 0.5, and 1 mg/mL, and the pH was measured with a pH meter after incubation for 24 hours. It is listed in Table 1.

신이추출물을 넣지 않은 대조군에서 pH는 5.12±0.04를 나타내었고, 0.125 mg/ml의 농도에서는 5.26±0.01, 0.25 mg/ml의 농도에서는 5.19±0.07로 대조군 대비 유의한 차이가 없었으나, 0.5 mg/ml의 농도에서 5.57±0.02, 1 mg/ml의 농도에서 6.49±0.05로 0.5 mg/ml이상의 농도에서 대조군 대비 유의하게 산 생성이 억제되었다 (p<005).In the control group without kidney extract, the pH was 5.12 ± 0.04, at a concentration of 0.125 mg/ml it was 5.26 ± 0.01, and at a concentration of 0.25 mg/ml it was 5.19 ± 0.07, which was not a significant difference compared to the control group, but at a concentration of 0.5 mg/ml. Acid production was significantly suppressed compared to the control group at a concentration of 0.5 mg/ml or higher, with 5.57±0.02 at a concentration of 1 mg/ml and 6.49±0.05 at a concentration of 1 mg/ml (p<005).

신이 추출물 농도(MKE Conc.) (mg/ml)Xinyi Extract Concentration (MKE Conc.) (mg/ml) 대조군control group 5.12±0.045.12±0.04 0.1250.125 5.26±0.015.26±0.01 0.250.25 5.19±0.075.19±0.07 0.50.5 5.57±0.02*5.57±0.02* 1One 6.49±0.05*6.49±0.05*

<실험예 2> 신이 추출물의 치아우식증 원인균에 대한 항균 활성 측정<Experimental Example 2> Measurement of antibacterial activity of Shingi extract against bacteria causing dental caries

상기 실시예 1에 의하여 제조된 신이추출물의 항균효과를 측정하기 위하여 디스크확산법을 사용하였다. S mutans 균주는 20 mL 생육배지에서 18시간 정도 비양하여 620 nm에서 흡광도값이 0.5가 되도록 조절 후 도말봉으로 회전하면서 배지 전면에 균을 골고루 도말하였다. 신이추출물은 멸균된 Eppendorf tube에 50 mg/mL이 되도록 멸균된 증류수를 녹여 시료를 만들었다. 시료는 멸균된 paper disc; 8mm (Advantec, Tokyo Roshi Kaisha Ltd, Tokyo, Japan)에 1mg 흡수시킨 후 평판배지에 paper disc를 밀착시키고, 37°C 의 항온기에서 24시간 배양한 다음 paper disc 주변의 생육 저해환(Inhibitory zone, clear zone)의 직경을 측정하여 항균력을 확인하였다.Disc diffusion method was used to measure the antibacterial effect of the Siniculi extract prepared in Example 1. The S mutans strain was grown in 20 mL of growth medium for about 18 hours, adjusted to an absorbance value of 0.5 at 620 nm, and the bacteria were evenly smeared on the entire surface of the medium while rotating with a smear rod. A sample of the kidney extract was prepared by dissolving it in sterilized distilled water to 50 mg/mL in a sterilized Eppendorf tube. Samples were sterilized paper discs; After 1mg was absorbed into 8mm (Advantec, Tokyo Roshi Kaisha Ltd, Tokyo, Japan), the paper disc was adhered to the plate medium, cultured in a thermostat at 37°C for 24 hours, and a growth inhibition zone (inhibitory zone, clear) around the paper disc was added. The antibacterial activity was confirmed by measuring the diameter of the zone).

신이추출물의 항균효과를 알아보기 위하여 Smutans 균 배양 한 후, 신이추출물을 처리하여 42시간 후의 항균활성에 대하여 확인한 결과, 신이추출물을 처리한 부분에서 35 mm의 생육저해환이 형성되었으며, 직경을 측경을 측정하였을 때 35 mm의 생육저해환이 형성되어 치아우식균의 생장을 강하게 억제하고 있음을 확인하였다. 상기 결과는 표 2에 기재하였다.To determine the antibacterial effect of the kidney extract, Smutans bacteria were cultured, and the kidney extract was treated. As a result, the antibacterial activity was checked 42 hours later. As a result, a growth inhibition ring of 35 mm was formed in the area treated with the kidney extract, and the diameter was When measured, it was confirmed that a growth inhibition ring of 35 mm was formed, strongly suppressing the growth of dental caries bacteria. The results are listed in Table 2.

Test strainTest strain 신이 추출물god extract Zone of inhibition (mm)Zone of inhibition (mm) S. mutansS. mutans 35 35

8.0 mm의 디스크 직경을 포함한 클리어 존의 직경.The diameter of the clear zone including the disc diameter of 8.0 mm.

<실험예 3> 신이 추출물의 치아우식증 원인균의 부착 억제 효과 평가<Experimental Example 3> Evaluation of the effect of Xingi extract on inhibiting attachment of dental caries-causing bacteria

타액 준비Saliva preparation

타액은 건강한 성인 남자로부터 파라핀왁스로 자극하여 분비된 것을 냉각된 비이커에 채취한 다음, 채취된 타액은 원심분리 (Mega 17R, Hanil, Korea, 12,000 rpm, 4°C, 15분) 하여 상층액을 취한 다음, 분해효소를 불활성화 시키기 위하여 60°C에서 30분간 처리한 후, -20°C에 보관하여 사용하였다.Saliva was collected from a healthy adult male by stimulation with paraffin wax and secreted in a cooled beaker. The collected saliva was then centrifuged (Mega 17R, Hanil, Korea, 12,000 rpm, 4°C, 15 minutes) and the supernatant was separated. After taking, it was treated at 60°C for 30 minutes to inactivate the degrading enzyme, and then stored at -20°C before use.

S-HA 부착억제 실험S-HA attachment inhibition experiment

Hydropatite beads (Bio-Rad Lab., U.S.A.) 30 mg을 중류수로 5회 세척하여 작은 입자를 제거한 후 37°C에서 건조시켜 사용하였다. 건조된 hydroxypatite bead 30 mg을 1 mL의 타액으로 37°C에서 60분간 처리하여 타액을 bead에 코팅시켰다. 그 후 S-HA를 0.1 M potasium phosphate buffer (KPB, pH 7.0)으로 3회 세척한 후 실시예 1에 의해 제조된 신이 추출물을 농도별로 넣고, S. mutans를 1X10^7 CFU/mL이 되게 넣은 다음 37°C 의 흔들리는 배양기에서 90분 동안 S-HA에 부착시켰다. 그 후 0.1M KPB(pH7.0)로 3회 세척한 후 초음파장치 (50W, 30초)를 이용하여 S-HA에 부착된 균을 떨어지도록 하였다. 그 다음 균액을 희석하여 Mitis salivarius agar plate (Difco Laboratories, U.S.A.)에 도말하여 37°C 항온기에서 24시간 동안 배양시켜 집락수를 세었다. 대조군에는 신이추출물을 넣지 않고 시행하였다.30 mg of Hydropatite beads (Bio-Rad Lab., U.S.A.) were washed five times with neutral water to remove small particles and dried at 37°C before use. 30 mg of dried hydroxypatite beads were treated with 1 mL of saliva at 37°C for 60 minutes, and the saliva was coated on the beads. Afterwards, S-HA was washed three times with 0.1 M potasium phosphate buffer (KPB, pH 7.0), and then the Siniga extract prepared in Example 1 was added at various concentrations, and S. mutans was added to 1X10^7 CFU/mL. Next, it was attached to S-HA for 90 minutes in a shaking incubator at 37°C. Afterwards, it was washed three times with 0.1M KPB (pH 7.0) and then an ultrasonic device (50 W, 30 seconds) was used to dislodge the bacteria attached to S-HA. Next, the bacterial solution was diluted, spread on a Mitis salivarius agar plate (Difco Laboratories, U.S.A.), incubated in a 37°C thermostat for 24 hours, and the number of colonies was counted. The control group was conducted without adding kidney extract.

실험 결과Experiment result

신이추출물이 S-HA에 S. mutans 부착 억제 효과가 있는지 알아보기 위하여 24시간 배양 후 CFU를 측정하였다. 신이추출물 0.25 mg/mL의 농도에서는 179±10.58 (X10⁴) CFU/mL, 0.5 mg/mL의 농도에서는 138±11.21 (X10⁴) CFU/mL, 1 mg/mL 신이추출물 처리시 92.67±11.15 (X10⁴) CFU/mL로 신이추출물 0.25 mg/mL 이상의 농도에서 대조군 대비 유의적으로 S.mutans와의 부착이 억제되었음을 확인할 수 있었으며, 농도별로 대조군에 비해 각각 23%, 41%, 60% 부착 억제율을 보였다(도 2).To determine whether the kidney extract had an inhibitory effect on S. mutans adhesion to S-HA, CFU was measured after 24 hours of culture. At a concentration of 0.25 mg/mL, 179 ± 10.58 ( It was confirmed that adhesion to S. mutans was significantly inhibited compared to the control group at concentrations of 0.25 mg/mL or more of the kidney extract in CFU/mL, and adhesion inhibition rates of 23%, 41%, and 60% were observed, respectively, compared to the control group at each concentration (Figure 2).

상기와 같이, 구강 내 세균에 대한 항세균제로서의 이용가치를 확인하고 치아우식 예방 및 치료제로서 신이추출물의 활용가치를 확인하고자 항균활성을 탐색하였다. 치아우식증에 가장 큰 영향을 미치는 Smutans에 대한 성장억제효과를 관찰한 결과 S mutans의 성장률이 대조군에 비해 신이추출물 0.5, 1 mg/mL 처리군에서 유의적인 성장억제 효과를 나타내었고, 또한 0.5, 1 mg/mL 처리군에서 유기산 생성을 억제하였음을 확인하였다. 또한, 신이추출물 처리는 높은 항균활성(생육저해환 35mm 관찰)을 나타내었으며, 0.25 mg/mL이상의 농도에서 S.mutans 부착 억제 효과를 확인함으로서 신이추출물의 향후, 구강 내 우식원성 세균 치료물질 및 우식증 예방 및 치료제로서 사용할 수 있음을 확인하였다.As mentioned above, the antibacterial activity was explored to confirm the value of the kidney extract as an antibacterial agent against oral bacteria and as a preventive and therapeutic agent for dental caries. As a result of observing the growth inhibition effect on Smutans, which has the greatest impact on dental caries, the growth rate of S mutans showed a significant growth inhibition effect in the groups treated with kidney extract 0.5 and 1 mg/mL compared to the control group, and also 0.5 and 1 mg/mL. It was confirmed that organic acid production was suppressed in the mg/mL treatment group. In addition, the treatment with the renal extract showed high antibacterial activity (observation of 35 mm of growth-inhibiting rings), and the effect of inhibiting S.mutans adhesion at a concentration of 0.25 mg/mL or higher was confirmed, making it possible for the renal extract to be used as a treatment material for oral cariogenic bacteria and caries in the future. It was confirmed that it can be used as a preventive and therapeutic agent.

Claims (15)

신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
A pharmaceutical composition for preventing or treating dental caries containing kidney extract as an active ingredient.
제1항에 있어서,
상기 치아우식증을 유발하는 균은 스트렙토코커스 뮤탄스(strepcococcus mutans) 또는 스트렙토코커스 소브리누스(Streptococcus sobrinus)인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
According to paragraph 1,
A pharmaceutical composition, wherein the bacteria causing dental caries is Streptococcus mutans or Streptococcus sobrinus.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 치아우식증을 유발하는 균의 성장을 억제하는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
According to paragraph 1,
The composition is a pharmaceutical composition, characterized in that it inhibits the growth of bacteria that cause dental caries.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 치아우식증을 유발하는 균에 의한 유기산 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
According to paragraph 1,
The composition is a pharmaceutical composition, characterized in that it inhibits the production of organic acids by bacteria that cause dental caries.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 치아우식증을 유발하는 균에 대한 항균 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
According to paragraph 1,
A pharmaceutical composition, characterized in that the composition has antibacterial activity against bacteria that cause dental caries.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 치아우식증을 유발하는 균의 치아 부착 억제 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
According to paragraph 1,
A pharmaceutical composition, characterized in that the composition has the activity of inhibiting tooth attachment of bacteria that cause dental caries.
신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증의 예방 또는 개선용 구강용 조성물.
An oral composition for preventing or improving dental caries containing kidney extract as an active ingredient.
제7항에 있어서,
상기 구강용 조성물의 제형은 치약, 구강세정제, 구강청정제, 껌, 캔디류, 구강스프레이, 구강용 연고제, 구강용 바니쉬, 구강양치액 및 잇몸 마사지 크림으로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 제형인 것을 특징으로 하는, 구강용 조성물.
In clause 7,
The formulation of the oral composition is characterized in that it is one or more formulations selected from the group consisting of toothpaste, mouthwash, mouthwash, gum, candy, oral spray, oral ointment, oral varnish, oral rinse, and gum massage cream. , oral composition.
신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
A health functional food composition for preventing or improving dental caries containing kidney extract as an active ingredient.
신이 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증의 예방 또는 개선용 사료첨가제 조성물.
A feed additive composition for preventing or improving dental caries containing kidney extract as an active ingredient.
1) 신이에 용매를 첨가하여 추출물을 얻는 단계;
2) 상기 추출물을 농축하여 농축액을 얻는 단계; 및
3) 상기 농축액을 건조시키는 단계;를 포함하는 신이 추출물 제조 방법.
1) Obtaining an extract by adding a solvent to the kidney;
2) Concentrating the extract to obtain a concentrate; and
3) Drying the concentrate.
제11항에 있어서,
상기 신이는 신이의 뿌리, 줄기, 잎 또는 꽃인 것을 특징으로 하는, 신이 추출물 제조 방법.
According to clause 11,
A method for producing an extract of Xinyi, characterized in that the Xinyi is the root, stem, leaf or flower of Xinyi.
제11항에 있어서,
상기 단계 1)의 용매는 물, C1 내지 C2 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는, 신이 추출물 제조 방법.
According to clause 11,
A method for producing Shinyi extract, wherein the solvent in step 1) is water, C1 to C2 lower alcohol, or a mixture thereof.
제11항에 있어서,
상기 단계 1)의 추출은 90 내지 100°C에서 1 내지 3시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는, 신이 추출물 제조 방법.
According to clause 11,
A method for preparing a Shinyi extract, characterized in that the extraction in step 1) is performed at 90 to 100 ° C for 1 to 3 hours.
제11항에 있어서,
상기 단계 3)의 건조는 분무건조인 것을 특징으로 하는, 신이 추출물 제조 방법.

According to clause 11,
A method for producing Shinyi extract, characterized in that the drying in step 3) is spray drying.

KR1020220148656A 2022-11-09 Composition for treating of dental caries comprising Magnolia flower extract KR20240067539A (en)

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