KR20240021925A

KR20240021925A - Cdk 억제제로서 치환된 피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민 화합물 및 이들의 치료적 용도

Info

Publication number: KR20240021925A
Application number: KR1020247001418A
Authority: KR
Inventors: 에드워드 아인스코우; 애쉬와니 발; 미히로 수노세; 데이미언 프란시스 필립 크레핀; 카말딥 카우르 초한; 지안나 토쉬
Original assignee: 캐릭 테라퓨틱스 리미티드
Priority date: 2021-06-16
Filing date: 2022-06-16
Publication date: 2024-02-19
Also published as: BR112023024892A2; WO2022263604A1; GB202108572D0; CN117940427A; EP4355426A1; AU2022294054A1; CA3219002A1

Abstract

본 발명은 일반적으로 치료용 화합물 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 특히 사이클린 의존성 단백질 키나제(CDK), 특히 CDK12 및/또는 CDK13을 억제하며, 예를 들어, CDK7과 비교하여 CDK12 및/또는 CDK13에 선택적인 특정의 치환된 피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민 화합물 PPA에 관한 것이다. CDK12 및/또는 CDK13을 선택적으로 억제하는 것 외에도, 화합물은 또한 선택적 사이클린 K 분해제로서 작용하여 CDK12 및/또는 CDK13 활성화에 필요한 핵심 보조 인자를 제거하고; 이는 추가의 세포 효능 및 선택성을 부여한다. 본 발명은 또한 이러한 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 시험관내 및 생체내 모두에서 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13을 억제하고; 다음을 포함하는 장애를 치료하기 위한 이러한 화합물 및 조성물의 용도에 관한 것이다: CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13과 관련된 장애; CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 부적절한 활성으로 인한 장애; CDK 돌연변이, 특히 CDK12 및/또는 CDK13 돌연변이와 관련된 장애; CDK 과발현, 특히 CDK12 및/또는 CDK13 과발현과 관련된 장애; CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 상류 경로 활성화와 관련된 장애; CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 억제로 개선되는 장애; 증식성 장애; 암; 바이러스 감염(HIV 포함); 신경퇴행성 장애(알츠하이머병 및 파킨슨병 포함); 허혈; 신장 질환; 심혈관 장애(죽상동맥경화증 포함); 자가면역 장애(류마티스 관절염 포함); 세포의 번역 기능 장애로 인한 장애(근위축증 포함). 임의로, 치료는 DNA 복구 억제제, 면역 체크포인트 억제제, 면역계를 자극하는 제제, 세포 주기 체크포인트 억제제, Her2 차단제, 전사 억제제, 세포독성 화학요법제 등과 같은 추가 활성제를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함한다.

Description

CDK 억제제로서 치환된 피라졸로[1,5-A]피리미딘-7-아민 화합물 및 이들의 치료적 용도

관련 출원

본 출원은 2021년 6월 16일에 출원된 영국(GB) 특허 출원 번호 2108572.5와 관련이 있으며, 이의 내용은 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.

기술 분야

본 발명은 일반적으로 치료용 화합물 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 특히 사이클린 의존성 단백질 키나제(CDK), 특히 CDK12 및/또는 CDK13을 억제하며, 예를 들어, CDK7과 비교하여 CDK12 및/또는 CDK13에 선택적인 특정의 치환된 피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민 화합물(본원에서 "PPA 화합물"로서 지칭됨)에 관한 것이다. CDK12 및/또는 CDK13을 선택적으로 억제하는 것 외에도, 화합물은 또한 선택적 사이클린 K 분해제로서 작용하여 CDK12 및/또는 CDK13 활성화에 필요한 핵심 보조 인자를 제거하고; 이는 추가의 세포 효능 및 선택성을 부여한다. 본 발명은 또한 이러한 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 시험관내 및 생체내 모두에서 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13을 억제하고; 다음을 포함하는 장애를 치료하기 위한 이러한 화합물 및 조성물의 용도에 관한 것이다: CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13과 관련된 장애; CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 부적절한 활성으로 인한 장애; CDK 돌연변이, 특히 CDK12 및/또는 CDK13 돌연변이와 관련된 장애; CDK 과발현, 특히 CDK12 및/또는 CDK13 과발현과 관련된 장애; CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 상류 경로 활성화와 관련된 장애; CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 억제로 개선되는 장애; 증식성 장애(proliferative disorder); 암(cancer); 바이러스 감염(viral infection)(HIV 포함); 신경퇴행성 장애(neurodegenerative disorder)(알츠하이머병(Alzheimer's disease) 및 파킨슨병(Alzheimer's disease) 포함); 허혈(ischaemia); 신장 질환(renal disease); 심혈관 장애(cardiovascular disorder)(죽상동맥경화증(atherosclerosis) 포함); 자가면역 장애(류마티스 관절염(rheumatoid arthritis) 포함); 및 세포의 번역 기능 장애로 인한 장애(근위축증(muscular dystrophy) 포함). 임의로, 치료는 DNA 복구 억제제, 면역 체크포인트 억제제(immune checkpoint inhibitor), 면역계를 자극하는 제제(agent), 세포 주기 체크포인트 억제제, Her2 차단제(blocker), 전사 억제제, 세포독성 화학요법제 등과 같은 추가 활성제를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함한다.

본 발명 및 본 발명이 관련된 기술 상태를 보다 완전하게 기재하고 개시하기 위해 다수의 간행물이 본원에 인용된다. 이러한 참고문헌 각각은 각 개별 참고 문헌이 구체적으로 그리고 개별적으로 참조로 포함되는 것으로 표시된 것과 동일한 정도로 본 개시내용에 그 전체가 참조로 포함된다.

문맥이 달리 요구하지 않는 한, 뒤따르는 청구범위를 포함하여, 본 명세서 전반에 걸쳐, 단어 "포함하다" 및 변형, 예를 들어, "포함한다" 및 "포함하는"은 명시된 정수 또는 단계 또는 정수 또는 단계의 그룹을 포함하지만 임의의 다른 정수 또는 단계 또는 정수 또는 단계의 그룹을 제외하지 않음을 의미하는 것으로 이해될 것이다.

명세서 및 첨부된 청구범위에 사용된 바와 같이, 단수 형태 "a", "an" 및 "the"는 문맥이 달리 명백하게 달리 지시하지 않는 한, 복수의 지시대상을 포함한다는 점에 유의해야 한다. 따라서, 예를 들어, "약제학적 담체"에 대한 참조는 두 개 이상의 이러한 담체의 혼합물 등을 포함한다.

범위는 종종 본원에서 "약" 하나의 특정 값으로부터 및/또는 "약" 또 다른 특정 값까지로서 표현된다. 이러한 범위가 표현될 때, 또 다른 구현예는 하나의 특정 값으로부터 및/또는 다른 특정 값까지를 포함한다. 유사하게, 값이 근사치로서 표현될 때, 선행 "약"의 사용에 의해, 특정 값이 또 다른 구현예를 형성하는 것으로 이해될 것이다.

본 개시내용은 본 발명을 이해하는 데 유용할 수 있는 정보를 포함한다. 본원에 제공된 임의의 정보가 선행 기술이거나 현재 청구된 발명과 관련이 있거나, 구체적으로 또는 암시적으로 참조된 임의의 간행물이 선행 기술이라는 것을 인정하는 것은 아니다.

사이클린 의존성 단백질 키나제 ( CDK )

사이클린 의존성 단백질 키나제(CDK)는 21개의 세린/트레오닌 단백질 키나제 계열의 촉매 아단위이며(참조: 예를 들어, Malumbres　et　al., 2009), 이 중 일부는 성장, DNA 복제 및 유사분열 단계를 통한 세포의 진행을 제어한다(참조: 예를 들어, Pines, 1995; Morgan, 1995). 특정 CDK의 활성화가 세포 주기의 상이한 단계를 통한 적절한 진행 및 세포 주기의 다음 단계로의 진입에 필요하다.

사이클린 의존성 키나제 12(CDK12) 및 이의 상동체 13(CDK13)은 전사 및 전사 후 과정을 조절하여 복수의 세포 기능을 조절하는 세린/트레오닌 단백질 키나제의 사이클린 의존성 키나제(CDK) 계열에 속한다. 연구는 CDK12 및 CDK13을 사이클린 K와 복합체화하여 RNA 중합효소 II를 인산화하여 유전자 전사를 매개하는 전사 CDK로서 특성화하였다(참조: 예를 들어, Li et al., 2016; Greifenberg et al., 2016). CDK12/사이클린 K 및 CDK13/사이클린 K 복합체는 Ser2에서 RNA Pol II(Ser2p-RNA Pol II)를 인산화하며, 이는 전사 개시로부터 신장으로의 전이에서 중요한 단계로 생각된다. CDK12는 DNA 손상, 스트레스 및 열 충격에 대한 반응에 관여하는 유전자의 발현을 특이적으로 상향 조절하는 것으로 입증되었다(참조: 예를 들어, Blazek　et　al., 2011; Li　et　al., 2016). 연구는 또한 mRNA 스플라이싱, 3'-말단 처리, 복제 전 복합체 조립 및 게놈 안정성을 조절하는 데 있어서 CDK12와 관련된다(참조: 예를 들어, Choi et al., 2020). CDK12의 게놈 변형이 식도암, 위암, 유방암, 자궁내막암, 자궁암, 난소암, 방광암, 결장직장암 및 췌장암에서 검출되었다(참조: 예를 들어, Gyl　et　al., 2018). 많은 연구는 종양 성장을 억제하는 효과적인 전략으로 CDK12 억제를 지적하고 있으며, 합성 치사 상호작용이 암 생존 및 진행과 관련된 다수의 경로와 함께 기재되어 있다(참조: 예를 들어, Johnson et al., 2016; Choi et al., 2019). CDK13은 CDK12와 다른 유전자 세트를 조절하며, CDK13 활성은 주로 티로신 키나제 신호전달을 포함한 성장 신호전달 경로에 관여한다(참조: Greifenberg et al., 2016).

사이클린 K 분해는 CDK 12의 모든 억제제는 아니지만 일부 억제제의 특성이다(참조: 예를 들어, Slabicki et al., 2020; Lv et al., 2020). 분해제 활성과 억제제의 결합시, CDK12는 CUL4-DDB1 유비퀴틴 리가제 복합체의 대리 기질 수용체 역할을 하여 CRL4에 의한 유비퀴틴화를 위한 사이클린 K를 제시하고 프로테오좀 분해를 초래한다. CDK12와 DDB1 사이의 상호 작용은 부분적으로 억제제와 DDB1의 상호작용으로 인해 유도된다. 따라서, 키나제 활성 부위를 동시에 점유하고 DDB1의 소수성 포켓을 충전시키는 CDK12 억제제만이 사이클린 K 분해를 촉진할 수 있다. 예를 들어, pan-CDK 억제제 CR8은 이 메커니즘에 의해 사이클린 K 분해를 유발하는 것으로 밝혀진 반면, CDK12 선택적 공유 결합 억제제 THZ-531은 사이클린 K 분해를 일으키지 않았다.

사이클린 K 분해는 세포에서 CDK12 및/또는 13의 직접적인 억제를 보완할 수 있다. 이는 여러 가지 이유로 유리하다. 첫째, 분해는, 세포 사멸 검정에서 분자의 증가된 효능에 의해 나타낸 바와 같이, 키나제 억제 단독에 비해 향상된 효능으로 이어질 수 있다. 향상된 세포 효능은 억제제와 CDK12 및/또는 CDK13보다 다른 키나제 사이의 감소된 표적외 상호 작용 및 효과로 이어질 수 있다. 둘째, 사이클린 K는 CDK12 및 CDK13 모두의 필수 파트너이며, 이들의 활성에 필요하다. 따라서, 사이클린 K 분해제는 화합물이 CDK12와 CDK13 사이의 차등 선택성을 나타내더라도 두 키나제의 활성을 손상시킨다. 마지막으로, 사이클린 K는 세포에서 12시간을 초과하는 반감기를 갖는 것으로 나타났다(참조: 예를 들어, Lei et al., 2018). 따라서, 분해제는 화합물에 대한 노출 기간 이상으로 확장될 수 있는 세포 및 종양에 영향을 미칠 수 있다.

공지된 화합물

쉐링 코퍼레이션(Schering Corporation)은 CDK 억제제로 작용하는 것으로 추정되는 특정 피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민 화합물을 기재하고 있다. 예를 들어, 문헌(Guzi et al., 2004a, 2004b, 2006, 2007, 2008a, 2008b, 2008c)을 참조한다. 여기에는 다음과 같은 화합물이 제시되는 것으로 나타난다:

.

CR8(또는 보다 구체적으로 (R)-CR8)로서 공지된 9H-퓨린-6-아민 유도체(아래 제시됨)는 CDK1/2/5/9/12 억제제이며, 사이클린 K의 프로테오좀 의존적 분해를 유발한다. 예를 들어, 문헌(Slabicki et al., 2020)을 참조한다.

문헌(Nam et al., 2019)은 CDK(특히 CDK7)를 억제하고 세포 증식성 질환, 염증성 질환 등의 치료에 유용한 것으로 추정되는 다음 화학식의 특정 화합물(여기서, X는 CH일 수 있고 R¹은수소일 수 있다)을 기재한다.

본원에 제공된 예들(예를 들어, 그 안의 139-183페이지의 표 11 참조) 중에는 아래에 제시된 화합물 1, 47 및 62가 있다. 그 안에 제공된 예들 중 어느 것도 본원에 기재된 화합물의 -Ar¹-Ar² 그룹에 의해 허용되는 -Z 그룹을 갖지 않는다.

문헌(Parratt et al., 2019)은 암, 건선(psoriasis) 및 재협착증(restenosis)을 포함하여 과도한 또는 부적절한 CDK2, PDK1 및/또는 CHK1 활성에 의해 매개되는 질환의 치료에 유용한 것으로 추정되는 다음 화학식의 특정 화합물을 기재한다. 여기에 제공된 예들 중 어느 것도 본원에 기재된 화합물의 -Ar¹-Ar² 그룹에 의해 허용되는 -A-Q 그룹을 갖지 않는다.

문헌(Samajdar et al., 2016)은 선택적 전사 CDK 억제제인 것으로 추정되는 다음 화학식의 특정 화합물(여기서, X는 CH일 수 있고, m은 1일 수 있고, R₆은수소일 수 있고, L₂는부재일 수 있다)을 기재한다. 여기에 제공된 예들 중 어느 것도 본원에 기재된 화합물의 -Ar¹-Ar² 그룹에 의해 허용되는 -A-L₂-B 그룹을 갖지 않는다.

문헌(Vankayalapati et al., 2020)은 CDK7을 억제하고 암의 치료에 유용하다고 추정되는 다음 화학식의 특정 화합물을 기재한다. 이들 화합물에서, R²는-C(=O)알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는, 예를 들어, 벤질(그 안의 19-20페이지 참조)을 포함하여 임의로 치환된 알킬아릴(그 안의 페이지 17 참조)로서 정의된다. 여기에 제공된 예들 중 어느 것도 본원에 기재된 화합물의 -Ar¹-Ar² 그룹에 의해 허용되는 R² 그룹을 갖지 않는다.

효능/선택성

본원에 기재된 PPA 화합물은, 예를 들어, CDK7과 비교하여 CDK12 및/또는 CDK13에 대해 또한 선택적인 강력한 CDK12 및/또는 CDK13 억제제이다.

CDK12 및/또는 CDK13을 선택적으로 억제하는 것 이외에, 본원에 기재된 PPA 화합물은 또한 선택적 사이클린 K 분해제로서 작용하여 CDK12 및/또는 CDK13 활성화에 필요한 주요 신호전달 메커니즘을 제거할 수 있으며; 이는 추가의 세포 효능 및 선택성을 부여한다.

본 발명의 하나의 양태는 본원에 기재된 바와 같은 특정의 치환된 피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민 화합물(본원에서 "PPA 화합물"로서 지칭됨)에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 조성물(예: 약제학적 조성물)에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물과 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 혼합하는 단계를 포함하는, 조성물(예: 약제학적 조성물)을 제조하는 방법에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물의 유효량을 세포와 접촉시키는 단계를 포함하는, 시험관내 또는 생체내에서 CDK12 및/또는 CDK13 기능(예: 세포 내)을 억제하는 방법에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물의 유효량을 세포와 접촉시키는 단계를 포함하는, 시험관내 또는 생체내에서 세포 증식(예: 세포의 증식)을 조절(예: 억제)하거나, 세포 주기 진행(cell cycle progression)을 억제하거나, 세포자멸사(apoptosis)를 촉진하는 방법, 또는 이들 중 하나 이상의 조합의 방법에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 요법에 의한 인간 또는 동물 신체의 치료 방법에 사용하기 위한, 예를 들어, 본원에 기재된 장애(예: 질환)의 치료 방법에 사용하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는, 예를 들어, 치료 방법에 사용하기 위한, 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 장애(예: 질환)의 치료 방법에 사용하기 위한 의약의 제조에 있어서, 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 치료가 필요한 대상체(subject)에게 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물의 치료적 유효량을, 바람직하게는 약제학적 조성물의 형태로 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법, 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 장애(예: 질환)의 치료 방법에 관한 것이다.

하나의 구현예에서, 치료는 본원에 기재된 바와 같이, DNA 복구 억제제, 면역 체크포인트 억제제, 면역계를 자극하는 제제, 세포 주기 체크포인트 억제제, Her2 차단제, 전사 억제제, 세포독성 화학요법제 등과 같은 추가 활성제를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함한다.

본 발명의 또 다른 양태는 (a) 바람직하게는 약제학적 조성물로서 적절한 용기에 및/또는 적절한 포장으로 제공된, 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물; 및 (b) 사용 지침, 예를 들어, 화합물을 투여하는 방법에 대한 서면 지침을 포함하는 키트에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 바와 같은 합성 방법 또는 본원에 기재된 바와 같은 합성 방법을 포함하는 방법에 의해 수득 가능한 PPA 화합물에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 바와 같은 합성 방법 또는 본원에 기재된 바와 같은 합성 방법을 포함하는 방법에 의해 수득된 PPA 화합물에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 합성 방법에 사용하기에 적합한 본원에 기재된 바와 같은 신규한 중간체에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 합성 방법에서 본원에 기재된 바와 같은 이러한 신규 중간체의 용도에 관한 것이다.

당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 본 발명의 한 양태의 특징 및 바람직한 구현예는 또한 본 발명의 다른 측면에 관련될 것이다.

도 1은 웨스턴 블롯팅에 의해 평가된 바와 같이, A673 세포에서 사이클린 K 분해에 대한 THZ-531, CR8, PPA-005 및 PPA-006의 효과뿐만 아니라 A673 세포에서 세포독성 효능에 대한 MLN4924의 효과를 보여준다.

화합물

본 발명은 피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민("PPA")과 구조적으로 관련되는 특정 화합물에 관한 것이다:

.

따라서, 본 발명의 하나의 양태는 다음 화학식의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이고, 여기서 -L⁷-, -Ar¹-, -Ar², -X⁵-, -L⁵-, -Cy⁵ 및 -R³은본원에서 정의된 바와 같다(편의상, 본원에서 "PPA" 화합물로서 총칭됨):

.

피라졸로[1,5-a]피리미딘 환에 -L⁷-Ar¹-Ar² 그룹을 연결하는 -NH- 그룹은 치환되지 않는 것으로 의도됨을 유의한다.

피라졸로[1,5-a]피리미딘 환은 2-위치 및 6-위치에서 치환되지 않는 것으로 의도됨을 유의한다.

일부 구현예는 다음을 포함한다:

(1) 다음 화학식의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물;

상기 식에서,

-L⁷-은 독립적으로 -CH₂-, -CH(R^L7)- 또는 -C(R^L7)₂-이고;

각 -R^L7은독립적으로 선형 또는 분지형(branched) 포화 C_1- ₄알킬이고;

-Ar¹-은 독립적으로 페닐렌, C₆헤테로아릴렌 또는 C₅헤테로아릴렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR1N으로 치환되고;

-Ar²는독립적으로 페닐, C₆헤테로아릴 또는 C₅헤테로아릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되고;

-X⁵-는 독립적으로 -NH-, -NR^X5-, -O- 또는 단일 결합이고;

-R^X5는선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬이고;

-L⁵-는 독립적으로 -CH₂-, -CH(R^L5)-, -C(R^L5)₂- 또는 단일 결합이고;

각 -R^L5는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬이고;

-Cy⁵는 독립적으로 -Cy^5A 또는 -Cy^5B이고;

-Cy^5A는적어도 하나의 질소 환 원자를 갖는 비방향족 C_4- ₁₀헤테로사이클릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되고;

-Cy^5B는적어도하나의 질소 환 원자를 갖는 C_5- ₆헤테로아릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5BC로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5BN으로 치환되고;

-R³은독립적으로 -R^3A, -R^3B, -R^3C 또는 -CN이고;

-R^3A는선형 또는 분지형 포화 C_1- ₆알킬이고,

임의로 하나 이상의 그룹 -R^R3으로 치환되고;

-R^3B는 포화 C_3- ₆사이클로알킬이고,

임의로 하나 이상의 그룹 -R^R3으로 치환되고;

-R^3C는-F, -Cl, -Br 또는 -I이고;

각 -R^R3은독립적으로 -F, -OH 또는 -OMe이고;

여기서,

각 -R^AR1C 및 각 -R^AR2C는 독립적으로

-R^TT,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^TT,

-L^T-OH, -L^T-OR^TT,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,

-NH₂, -NHR^TT, -NR^TT ₂, -R^TM,

-L^T-NH₂, -L^T-NHR^TT, -L^T-NR^TT ₂, -L^T-R^TM,

-C(=O)OH, -C(=O)OR^TT,

-OC(=O)R^TT,

-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^TT, -C(=O)NR^TT ₂, -C(=O)R^TM,

-NHC(=O)R^TT, -NR^TNC(=O)R^TT,

-NHC(=O)NH₂, -NHC(=O)NHR^TT, -NHC(=O)NR^TT ₂, -NHC(=O)R^TM,

-NR^TNC(=O)NH₂, -NR^TNC(=O)NHR^TT, -NR^TNC(=O)NR^TT ₂, -NR^TNC(=O)R^TM,

-NHC(=O)OR^TT, -NR^TNC(=O)OR^TT,

-OC(=O)NH₂, -OC(=O)NHR^TT, -OC(=O)NR^TT ₂, -OC(=O)R^TM,

-C(=O)R^TT,

-SR^TT, -S(=O)R^TT, -S(=O)₂R^TT,

-S(=O)NH₂, -S(=O)NHR^TT, -S(=O)NR^TT ₂, -S(=O)R^TM,

-S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NHR^TT, -S(=O)₂NR^TT ₂, -S(=O)₂R^TM,

-NHS(=O)₂R^TT, -NR^TNS(=O)₂R^TT,

-CN 및 -NO₂로부터 선택되고;

각 -R^AR1N 및 각 -R^AR2N은 독립적으로

-R^TT,

-L^T-OH, -L^T-OR^TT,

-L^T-NH₂, -L^T-NHR^TT, -L^T-NR^TT ₂, -L^T-R^TM,

-C(=O)R^TT,

-C(=O)OR^TT,

-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^TT, -C(=O)NR^TT ₂, -C(=O)R^TM, 및

-S(=O)₂R^TT로부터 선택되고;

여기서,

각 -L^T-는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬렌이고;

각 -R^TT는독립적으로 -R^TT1, -R^TT2, -L^TT-R^TT2, -R^TT3 또는 -L^TT-R^TT3이고;

각 -R^TT1은독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₆알킬이며, 임의로 -F, -OH 및 -OR^TTT로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

각 -R^TT2는포화 C_3- ₆사이클로알킬이며, 임의로 -F, -R^TTT, -OH 및 -OR^TTT로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

각 -R^TT3은독립적으로 페닐 또는 나프틸이며, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I, -R^TTT, OH, -OR^TTT, -OCF₃, -NH₂, -NHR^TTT 및 -NR^TTT ₂로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

각 -L^TT-는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬렌이고;

각 -R^TN은선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;

각 -R^TM은독립적으로 아제티디노, 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노, 모르폴리노, 아제파노 또는 디아제파노이며,

임의로 탄소 상에서 -R^TMM, -C(=O)R^TMM, -S(=O)₂R^TMM, -F, -NH₂, -NHR^TMM, -NR^TMM ₂, -OH 및 -OR^TMM으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 -R^TMM, -C(=O)R^TMM, -C(=O)OR^TMM 및 -S(=O)₂R^TMM으로부터 선택된 그룹으로 치환되고;

각 -R^TTT는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;

각 -R^TMM은독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;

여기서,

각 -R^Cy5AC 및 각 -R^Cy5BC는 독립적으로

-R^JJ,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^JJ,

-L^J-OH, -L^J-OR^JJ,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,

-NH₂, -NHR^JJ, -NR^JJ ₂, -R^JM,

-L^J-NH₂, -L^J-NHR^JJ, -L^J-NR^JJ ₂, -L^J-R^JM,

-C(=O)OH, -C(=O)OR^JJ,

-OC(=O)R^JJ,

-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^JJ, -C(=O)NR^JJ ₂, -C(=O)R^JM,

-NHC(=O)R^JJ, -NR^JNC(=O)R^JJ,

-NHC(=O)NH₂, -NHC(=O)NHR^JJ, -NHC(=O)NR^JJ ₂, -NHC(=O)R^JM,

-NR^JNC(=O)NH₂, -NR^JNC(=O)NHR^JJ, -NR^JNC(=O)NR^JJ ₂, -NR^JNC(=O)R^JM,

-NHC(=O)OR^JJ, -NR^JNC(=O)OR^JJ,

-OC(=O)NH₂, -OC(=O)NHR^JJ, -OC(=O)NR^JJ ₂, -OC(=O)R^JM,

-C(=O)R^JJ,

-SR^JJ, -S(=O)R^JJ, -S(=O)₂R^JJ,

-S(=O)NH₂, -S(=O)NHR^JJ, -S(=O)NR^JJ ₂, -S(=O)R^JM,

-S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NHR^JJ, -S(=O)₂NR^JJ ₂, -S(=O)₂R^JM,

-NHS(=O)₂R^JJ, -NR^JNS(=O)₂R^JJ,

-CN 및 -NO₂로부터 선택되고;

각 -R^Cy5AN 및 각 -R^Cy5BN은 독립적으로

-R^JJ,

-L^J-OH, -L^J-OR^JJ,

-L^J-NH₂, -L^J-NHR^JJ, -L^J-NR^JJ ₂, -L^J-R^JM,

-C(=O)R^JJ,

-C(=O)OR^JJ,

-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^JJ, -C(=O)NR^JJ ₂, -C(=O)R^JM, 및

-S(=O)₂R^JJ로부터 선택되고;

여기서,

각 -L^J-는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬렌이고;

각 -R^JJ는독립적으로 -R^JJ1, -R^JJ2, -L^JJ-R^JJ2, -R^JJ3 또는 -L^JJ-R^JJ3이고;

각 -R^JJ1은독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₆알킬이고, 임의로 -F, -OH 및 -OR^JJJ로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

각 -R^JJ2는포화 C_3- ₆사이클로알킬이며, 임의로 -F, -R^JJJ, -OH 및 -OR^JJJ로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

각 -R^JJ3은독립적으로 페닐 또는 나프틸이며, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I, -R^JJJ, OH, -OR^JJJ, -OCF₃, -NH₂, -NHR^JJJ 및 -NR^JJJ ₂로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

각 -L^JJ-는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬렌이고;

각 -R^JN은선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;

각 -R^JM은독립적으로 아제티디노, 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노, 모르폴리노, 아제파노 또는 디아제파노이며,

임의로 탄소 상에서 -R^JMM, -C(=O)R^JMM, -S(=O)₂R^JMM, -F, -NH₂, -NHR^JMM, -NR^JMM ₂, -OH 및 -OR^JMM으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 -R^JMM, -C(=O)R^JMM, -C(=O)OR^JMM 및 -S(=O)₂R^JMM으로부터 선택된 그룹으로 치환되고;

각 -R^JJJ는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;

각 -R^JMM은독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;

단,

-X⁵-가 단일 결합이고 -L⁵-가 단일 결합이고 -R³이-Br이면, -Ar²는옥사디아졸릴 또는 티아디아졸릴이 아니고;

-X⁵-가 단일 결합이고 -L⁵-가 단일 결합이면, -Ar²는 피라졸릴이 아니다.

의심의 여지를 없애기 위해:

"C_9- ₁₀헤테로아릴", "C_3- ₇헤테로사이클릴" 등과 같은 용어에서 지수 "C_x _-y"는 탄소 원자 또는 헤테로원자(예: 경우에 따라 N, O, S 등)일 수 있는 환 원자의 수를 지칭한다. 예를 들어, 피리딜은 C₆헤테로아릴 그룹의 예이고, 피페리디노는 C₆헤테로사이클릴 그룹의 예이다.

용어 "헤테로아릴"은 방향족 환의 일부인 원자에 의해 분자의 나머지에 부착되는 그룹을 지칭하며, 여기서 방향족 환은 방향족 환 시스템의 일부이고 방향족 환 시스템은 하나 이상의 헤테로원자(예: 경우에 따라, N, O, S 등)를 갖는다. 예를 들어, 피리딜은 C₆헤테로아릴 그룹의 예이고, 퀴놀릴은 C₁₀헤테로아릴 그룹의 예이다.

용어 "헤테로사이클릴"은 비방향족 환의 일부인 원자에 의해 분자의 나머지 부분에 부착된 그룹을 지칭하며, 여기서 비방향족 환은 비방향족 환 시스템의 일부이고, 비방향족 환 시스템은 하나 이상의 헤테로원자(예: 경우에 따라, N, O, S)를 갖는다. 달리 명시되지 않는 한, "헤테로사이클릴"은 모노사이클릭 헤테로사이클릴(예: 피페리디닐, 모노사이클릭 C₆헤테로사이클릴의 예), 융합된 헤테로사이클릴(예: 데카하이드로퀴놀리닐, 융합된 C₁₀헤테로사이클릴의 예), 가교된 헤테로사이클릴(예: 6-아자비사이클로[3.1.1]헵타닐, 가교된 C₇헤테로사이클릴의 예) 및 스피로 헤테로사이클릴(7-아자스피로[3.5]노닐, 스피로 C₉헤테로사이클릴의 예)을 포함한다.

임의의 치환체의 맥락에서, 문구 "하나 이상의 그룹"(예: "하나 이상의 그룹 -R^AR1C" 등)은 반드시 모 모이어티와 치환에 적합한 위치의 수에 의해 제한된다. 일부 모 모이어티(예: 테트라졸릴)에는, 치환에 이용 가능한 하나의 위치만이 있다. 그러나, 다른 모 모이어티의 경우, 여러 개가 있을 수 있다(예를 들어, 페닐은 5개를 갖는다). 모 모이어티에 의해 제한되는 경우를 제외하고, "하나 이상의 그룹"은, 예를 들어, 1, 2, 3, 4 등일 수 있지만, 더 바람직하게는 1, 2 또는 3이고, 더욱 더 바람직하게는 1 또는 2, 훨씬 더 바람직하게는 1일 수 있다.

문구 "탄소 상의 치환체"는 탄소 환 원자에 부착된 치환체를 지칭하도록 의도된다. 유사하게, 문구 "2차 질소 상의 치환체"는 치환체의 부재하에 2차 질소 환 원자(즉, -NH-)일 수 있는 질소 환 원자에 부착된 치환체를 지칭하도록 의도된다. 결과적으로, 피리딜 그룹은 "탄소 상의 치환체"만 가질 수 있는 반면, 1H-피롤은 아래 예시된 바와 같이 "탄소 상의 치환체"와 "2차 질소 상의 치환체"를 모두 가질 수 있다.

유사하게, 피페리디노 그룹은 아래 도시된 바와 같이 "탄소 상 치환체"만 가질 수 있는 반면, 피페리지노는 "탄소 상 치환체"와 "2차 질소 상 치환체"를 모두 가질 수 있다.

탄소 환 원자를 가지고 있음에도 불구하고 특정 그룹은 치환에 이용 가능한 임의의 탄소 환 원자를 갖지 않을 수 있다. 예를 들어, 테트라졸릴 그룹은 아래 예시된 바와 같이, "탄소 상 치환체"만을 허용할 수 있거나 "2차 질소 상 치환체"만을 허용할 수 있다.

달리 명시되지 않는 한, 하나 이상의 키랄 중심을 갖는 화합물이 제시되거나 기재되고 두 개 이상의 입체이성체가 가능한 경우, 이러한 모든 입체이성체는 개별적으로(예: 다른 입체이성체(들)로부터 단리된 바와 같음) 및 혼합물로서(예: 두 개 이상의 입체이성체의 등몰 또는 비등몰 혼합물로서) 개시되고 포함된다. 예를 들어, 달리 명시되지 않는 한, 화합물이 하나의 키랄 중심을 갖는 경우, 각 (R) 및 (S) 거울상이성체는 개별적으로(예: 다른 거울상이성체로부터 단리된 바와 같음) 및 혼합물로서(예: 두 거울상이성체의 등몰 또는 비등몰 혼합물로서) 개시되고 포함된다. 예를 들어, 펜던트 2급-부틸 그룹 -CH(CH₃)CH₂CH₃의 초기 탄소 원자는일반적으로 키랄성이며, 따라서 입체이성체, 예를 들어, 유일한 키랄 중심이 있는 경우 (R) 및 (S) 거울상이성체를 생성하며, 이들 각각은 개시되고 포함된다.

그룹 -L ⁷ -

(2) (1)에 있어서, -L⁷-이 독립적으로 -CH₂- 또는 -CH(R^L7)-인, 화합물.

(3) (1)에 있어서, -L⁷-이 -CH₂-인, 화합물.

그룹 -R ^L7

(4) (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^L7이 독립적으로 -Me, -Et, -nPr 또는 -iPr인, 화합물.

(5) (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^L7이 독립적으로 -Me 또는 -Et인, 화합물.

(6) (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^L7이 -Me인, 화합물.

그룹 -X ⁵ -

(7) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, -X⁵-가 독립적으로 -NH-, -NR^X5- 또는 단일 결합인, 화합물.

(8) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, -X⁵-가 독립적으로 -NH- 또는 -NR^X5-인, 화합물.

(9) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, -X⁵-가 -NH-인, 화합물.

(10) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, -X⁵-가 -NR^X5-인, 화합물.

(11) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, -X⁵-가 -O-인, 화합물.

(12) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, -X⁵-가 단일 결합인, 화합물.

그룹 -L ⁵ -

(13) (1) 내지 (12) 중 어느 하나에 있어서, -L⁵-가 독립적으로 -CH₂- 또는 단일 결합인, 화합물.

(14) (1) 내지 (12) 중 어느 하나에 있어서, -L⁵-가 -CH₂-인, 화합물.

(15) (1) 내지 (12) 중 어느 하나에 있어서, -L⁵-가 단일 결합인, 화합물.

-X ⁵ - 및 -L ⁵ -의 일부 바람직한 조합

(16) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, Cy⁵-L⁵-X⁵-가 독립적으로 다음과 같은, 화합물:

Cy⁵-CH₂-NH-(즉, -L⁵-는 -CH₂-이고, -X⁵-는 -NH-이다);

Cy⁵-CH₂-NR^X5-(즉, -L⁵-는 -CH₂-이고, -X⁵-는 -NR^X5-이다);

Cy⁵-CH₂-O-(즉, -L⁵-는 -CH₂-이고, -X⁵-는 -O-이다);

Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다);

Cy⁵-NR^X5-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NR^X5-이다);

Cy⁵-O-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -O-이다); 또는

Cy⁵-(즉, -L⁵- 및 -X⁵-는 각각 단일 결합이다).

(17) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, Cy⁵-L⁵-X⁵-가 독립적으로 다음과 같은, 화합물:

Cy⁵-CH₂-NH-(즉, -L⁵-는 CH₂-이고, -X⁵-는 -NH-이다);

Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다);

Cy⁵-O-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -O-이다); 또는

Cy⁵-(즉, -L⁵- 및 -X⁵-는 각각 단일 결합이다).

(18) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, Cy⁵-L⁵-X⁵-가 독립적으로 다음과 같은, 화합물:

Cy⁵-CH₂-NH-(즉, -L⁵-는 -CH₂-이고, -X⁵-는 -NH-이다);

Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다); 또는

Cy⁵-O-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -O-이다).

(19) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, Cy⁵-L⁵-X⁵-가 독립적으로 다음과 같은, 화합물:

Cy⁵-CH₂-NH-(예: -L⁵-는 CH₂-이고, -X⁵-는 -NH-이다); 또는

Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다).

(20) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, Cy⁵-L⁵-X⁵-가

Cy⁵-CH₂-NH-(즉, -L⁵-는 CH₂-이고, -X⁵-는 -NH-이다)인, 화합물.

(21) (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 있어서, Cy⁵-L⁵-X⁵-가

Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다)인, 화합물.

그룹 -R ^X5

(22) (1) 내지 (21) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^X5가 독립적으로 -Me, -Et, -nPr 또는 -iPr인, 화합물.

(23) (1) 내지 (21) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^X5가 독립적으로 -Me 또는 -Et인, 화합물.

(24) (1) 내지 (21) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^X5가 -Me인, 화합물.

그룹 -R ^L5

(25) (1) 내지 (24) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^L5가 독립적으로 -Me, -Et, -nPr 또는 -iPr인, 화합물.

(26) (1) 내지 (24) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^L5가 독립적으로 -Me 또는 -Et인, 화합물.

(27) (1) 내지 (24) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^L5가 -Me인, 화합물.

그룹 -R ³

(28) (1) 내지 (27) 중 어느 하나에 있어서, -R³이 -R^3A 또는 -R^3B인, 화합물.

(29) (1) 내지 (27) 중 어느 하나에 있어서, -R³이-R^3A인, 화합물.

(30) (1) 내지 (27) 중 어느 하나에 있어서, -R³이-R^3B인, 화합물.

(31) (1) 내지 (27) 중 어느 하나에 있어서, -R³이-R^3C인, 화합물.

(32) (1) 내지 (27) 중 어느 하나에 있어서, -R³이-CN인, 화합물.

그룹 - R ^3A

(33) (1) 내지 (32) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3A가 선형 또는 분지형 포화 C_1-6알킬인, 화합물.

(34) (1) 내지 (32) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3A가 독립적으로 -Me, -Et, -nPr, -iPr, -nBu, -iBu, -sBu 또는 -tBu, n-펜틸, t-펜틸, 네오-펜틸, 이소-펜틸, 2급-펜틸, 3-펜틸, 1-헥실, 2-헥실, 3-헥실, 3-메틸-1-펜틸-, 4-메틸-1-펜틸, 4-메틸-2-펜틸, 4-메틸-3-펜틸, 2-메틸-2-펜틸, 2-메틸-1-펜틸, 2-메틸-2-펜틸, 3,3-디메틸-1-부틸, 3,3-디메틸-2-부틸, 3-메틸-1-펜틸, 3-메틸-2-펜틸, 3-메틸-3-펜틸, 2,2-디메틸-1-부틸, 2,3-디메틸-1-부틸 또는 2,3-디메틸-2-부틸인, 화합물.

(35) (1) 내지 (32) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3A가 선형 또는 분지형 포화 C_1-4알킬인, 화합물.

(36) (1) 내지 (32) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3A가 독립적으로 -Me, -Et, -nPr, -iPr, -nBu, -iBu, -sBu 또는 -tBu인, 화합물.

(37) (1) 내지 (32) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3A가 독립적으로 -Me, -Et, -nPr 또는 -iPr인, 화합물.

(38) (1) 내지 (32) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3A가 독립적으로 -Et, -nPr 또는 -iPr인, 화합물.

(39) (1) 내지 (32) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3A가 -iPr인, 화합물.

그룹 - R ^3B

(40) (1) 내지 (39) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3B가 포화 C_3-6사이클로알킬, 예를 들어, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실인, 화합물.

(41) (1) 내지 (39) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3B가 독립적으로 사이클로프로필 또는 사이클로부틸인, 화합물.

(42) (1) 내지 (39) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3B가 사이클로프로필인, 화합물.

그룹 - R ^3C

(43) (1) 내지 (42) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3C가 독립적으로 -F 또는 -Cl인, 화합물.

(44) (1) 내지 (42) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -R^3C가 -Cl인, 화합물.

그룹 -R ^R3

(45) (1) 내지 (44) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^R3이 -F 및 -OH로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.

그룹 - Ar ¹ -: 페닐렌인 경우

(46) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 페닐렌이고; 임의로 하나 이상의 그룹 -R^AR1C-로 치환되는, 화합물.

(47) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 독립적으로 1,4-페닐렌, 1,3-페닐렌 또는 1,2-페닐렌이고; 임의로 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.

(48) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 1,4-페닐렌이고; 임의로 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.

(49) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 1,4-페닐렌인, 화합물.

그룹 - Ar ¹ -: C ₆ 헤테로아릴렌인 경우

(50) (1) 내지 (49) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 C₆헤테로아릴렌이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.

(51) (1) 내지 (49) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 독립적으로 피리딘-디-일, 피리미딘-디-일, 피리다진-디-일 또는 피라진-디-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.

피리딘-디-일:

(52) (1) 내지 (49) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 피리딘-디-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.

(53) (1) 내지 (49) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 독립적으로 피리딘-2,5-디-일, 피리딘-2,4-디-일, 피리딘-2,3-디-일, 피리딘-2,6-디-일, 피리딘-3,4-디-일 또는 피리딘-3,5-디-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.

(54) (1) 내지 (49) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 독립적으로 피리딘-2,5-디-일, 피리딘-2,4-디-일, 피리딘-2,6-디-일 또는 피리딘-3,5-디-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.

(55) (1) 내지 (49) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 피리딘-2,5-디-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.

(56) (1) 내지 (49) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 피리딘-2,5-디-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고; -Ar²가 5-위치에 부착되는, 화합물.

(57) (1) 내지 (49) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 피리딘-2,5-디-일이고; -Ar²가 5-위치에 부착되는, 화합물.

그룹 - Ar ¹ -: C ₅ 헤테로아릴렌인 경우

(58) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 C₅헤테로아릴렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR1N으로 치환되는, 화합물.

(59) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 독립적으로 피롤-디-일, 피라졸-디-일, 이미다졸-디-일, 트리아졸-디-일, 테트라졸-디-일, 푸란-디-일, 티오푸란-디-일, 옥사졸-디-일, 이속사졸-디-일, 티아졸-디-일, 이소티아졸-디-일, 옥사디아졸-디-일 또는 티아디아졸-디-일이고;

임의로, 존재하는 경우, 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

(60) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 독립적으로 피롤-디-일, 피라졸-디-일, 이미다졸-디-일, 트리아졸-디-일, 테트라졸-디-일, 푸란-디-일, 티오푸란-디-일, 옥사졸-디-일, 이속사졸-디-일, 티아졸-디-일, 이소티아졸-디-일이고;

(61) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 독립적으로 피롤-디-일, 피라졸-디-일, 이미다졸-디-일, 옥사졸-디-일 또는 이속사졸-디-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

(62) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 독립적으로 피롤-디-일, 피라졸-디-일 또는 이미다졸-디-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

이미다졸-디-일:

(63) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 이미다졸-디-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

(64) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 독립적으로 이미다졸-2,4-디-일 또는 이미다졸-1,4-디-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

(65) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 이미다졸-2,4-디-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR1N으로 치환되고;

-Ar²가 4-위치에 부착되는, 화합물.

(66) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 이미다졸-2,4-디-일이고; -Ar²가 4-위치에 부착되는, 화합물.

(67) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 이미다졸-1,4-디-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.

(68) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 이미다졸-1,4-디-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 1-위치에 부착되는, 화합물.

(69) (1) 내지 (57) 중 어느 하나에 있어서, -Ar¹-이 이미다졸-1,4-디-일이고; -Ar²가 1-위치에 부착되는, 화합물.

그룹 - Ar ² : 페닐인 경우

(70) (1) 내지 (69) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가페닐이고; 임의로 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

그룹 - Ar ² : C ₆ 헤테로아릴

(71) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가C₆헤테로아릴이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(72) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가독립적으로 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐 또는 피라지닐이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

피리디닐 :

(73) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리디닐(예: 피리딘-2-일, 피리딘-3-일 또는 피리딘-4-일)이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(74) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리딘-2-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(75) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리딘-2-일인, 화합물.

(76) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리딘-3-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(77) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리딘-4-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

피리미디닐 :

(78) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리미디닐(예: 피리미딘-2-일, 피리미딘-4-일 또는 피리미딘-5-일)-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(79) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리미딘-2-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(80) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리미딘-2-일인, 화합물.

(81) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리미딘-3-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(82) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리미딘-4-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

피리다지닐 :

(83) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리다지닐(예: 피리다진-3-일 또는 피리다진-4-일)이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(84) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리다진-3-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(85) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피리다진-4-일이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

피라지닐 :

(86) (1) 내지 (70) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피라지닐(예: 피라진-2-일)이고; 임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

그룹 - Ar ² : C ₅ 헤테로아릴

(87) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가C₅헤테로아릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되는, 화합물.

(88) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가독립적으로 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 푸라닐, 티오푸라닐, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사디아졸릴 또는 티아디아졸릴이고;

임의로, 존재하는 경우, 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

(89) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가독립적으로 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴 또는 티아졸릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

피롤릴 :

(90) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피롤릴(예: 피롤-1-일, 1H-피롤-2-일 또는 1H-피롤-3-일)이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

(91) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피롤-1-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.

(92) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가1H-피롤-2-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되는, 화합물.

(93) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가1H-피롤-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되는, 화합물.

피라졸릴 :

(94) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피라졸릴(예: 피라졸-1-일, 1H-피라졸-3-일, 1H-피라졸-4-일 또는 1H-피라졸-5-일)이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

(95) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피라졸-1-일이고;

(96) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가피라졸-1-일인, 화합물.

(97) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가 1H-피라졸-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되는, 화합물.

(98) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가 1H-피라졸-4-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되는, 화합물.

(99) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가 1H-피라졸-5-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되는, 화합물.

이미다졸릴 :

(100) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가이미다졸릴(예: 이미다졸-1-일, 1H-이미다졸-2-일, 1H-이미다졸-4-일 또는 1H-이미다졸-5-일)이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

(101) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가이미다졸-1-일이고;

(102) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가1H-이미다졸-2-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되는, 화합물.

(103) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가1H-이미다졸-4-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되는, 화합물.

(104) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가1H-이미다졸-5-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되는, 화합물.

옥사졸릴 :

(105) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가옥사졸릴(예: 옥사졸-2-일, 옥사졸-4-일 또는 옥사졸-5-일)이고;

(106) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가옥사졸-2-일이고;

(107) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가옥사졸-4-일이고;

(108) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가 옥사졸-5-일이고;

티아졸릴 :

(109) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가티아졸릴(예: 티아졸-2-일, 티아졸-4-일 또는 티아졸-5-일)이고;

(110) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가티아졸-2-일이고;

(111) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가 티아졸-2-일인, 화합물.

(112) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가 티아졸-4-일이고;

(113) (1) 내지 (86) 중 어느 하나에 있어서, -Ar²가 티아졸-5-일이고;

Ar ¹ 및 Ar ² 의 일부 바람직한 조합

피리디닐 - 페닐로서 Ar ² - Ar ¹ -:

(114) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피리디닐이고;

(115) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피리디닐이고;

(116) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피리딘-2-일이고;

(117) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피리딘-2-일인, 화합물.

(118) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

-Ar²가 피리딘-2-일이고;

(119) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

-Ar²가 피리딘-2-일인, 화합물.

피리미디닐 - 페닐로서 Ar ² - Ar ¹ -:

(120) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피리미디닐이고;

(121) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피리미디닐이고;

(122) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피리미딘-2-일이고;

(123) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피리미딘-2-일인, 화합물.

(124) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

-Ar²가 피리미딘-2-일이고;

(125) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

-Ar²가 피리미딘-2-일인, 화합물.

티아졸릴 - 페닐로서 Ar ² - Ar ¹ -:

(126) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 티아졸릴이고;

(127) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 티아졸릴이고;

(128) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 티아졸-2-일이고;

(129) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 티아졸-2-일인, 화합물.

(130) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

-Ar²가 티아졸-2-일이고;

(131) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

-Ar²가 티아졸-2-일인, 화합물.

피라졸릴 - 페닐로서 Ar ² - Ar ¹ -:

(132) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피라졸릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

(133) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피라졸릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

(134) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피라졸-1-일이고;

(135) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가 피라졸-1-일인, 화합물.

(136) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

-Ar²가 피라졸-1-일이고;

(137) (1) 내지 (45) 중 어느 하나에 있어서,

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

-Ar²가 피라졸-1-일인, 화합물.

치환체 - R ^AR1C 및 - R ^AR2C

(138) (1) 내지 (137) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1C, 및 존재하는 경우, 각 -R^AR2C가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^TT,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^TT,

-L^T-OH, -L^T-OR^TT,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,

-NH₂, -NHR^TT, -NR^TT ₂, -R^TM,

-L^T-NH₂, -L^T-NHR^TT, -L^T-NR^TT ₂, -L^T-R^TM,

-C(=O)OH, -C(=O)OR^TT,

-OC(=O)R^TT,

-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^TT, -C(=O)NR^TT ₂, -C(=O)R^TM,

-NHC(=O)R^TT, -NR^TNC(=O)R^TT,

-C(=O)R^TT,

-S(=O)₂R^TT,

-S(=O)NH₂, -S(=O)NHR^TT, -S(=O)NR^TT ₂, -S(=O)R^TM,

-S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NHR^TT, -S(=O)₂NR^TT ₂, -S(=O)₂R^TM,

-NHS(=O)₂R^TT, -NR^TNS(=O)₂R^TT,

-CN 및 -NO₂.

(139) (1) 내지 (137) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1C, 및 각 -R^AR2C가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^TT,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^TT,

-L^T-OH, -L^T-OR^TT,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,

-NH₂, -NHR^TT, -NR^TT ₂, -R^TM,

-L^T-NH₂, -L^T-NHR^TT, -L^T-NR^TT ₂, -L^T-R^TM,

-C(=O)OH, -C(=O)OR^TT,

-OC(=O)R^TT,

-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^TT, -C(=O)NR^TT ₂, -C(=O)R^TM,

-NHC(=O)R^TT, -NR^TNC(=O)R^TT,

-C(=O)R^TT,

-CN 및 -NO₂.

(140) (1) 내지 (137) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1C, 및 존재하는 경우, 각 -R^AR2C가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^TT,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^TT,

-L^T-OH, -L^T-OR^TT,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,

-NH₂, -NHR^TT, -NR^TT ₂, -R^TM,

-L^T-NH₂, -L^T-NHR^TT, -L^T-NR^TT ₂, -L^T-R^TM,

-CN 및 -NO₂.

(141) (1) 내지 (137) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1C, 및 존재하는 경우, 각 -R^AR2C가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^TT,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^TT,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,

-NH₂, -NHR^TT, -NR^TT ₂, -R^TM,

-CN 및 -NO₂.

(142) (1) 내지 (137) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1C, 및 존재하는 경우, 각 -R^AR2C가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^TT,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^TT,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃ 및 -OCHF₂.

(143) (1) 내지 (137) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1C, 및 존재하는 경우, 각 -R^AR2C가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-F, -Me, -OMe, -CF₃ 및 -OCF₃.

(144) (1) 내지 (137) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1C가 다음으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물:

-F, -Me 및 -OMe.

치환체 - R ^AR1N 및 - R ^AR2N

(145) (1) 내지 (144) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1N, 및 존재하는 경우, 각 -R^AR2N가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^TT, C(=O)R^TT-, C(=O)OR^TT 및 -S(=O)R₂ ^TT.

(146) (1) 내지 (144) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1N, 및 존재하는 경우, 각 -R^AR2N가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^TT, C(=O)R^TT 및 -C(=O)OR^TT.

(147) (1) 내지 (144) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^AR1N, 및 존재하는 경우, 각 -R^AR2N가 -R^TT인, 화합물:

그룹 - R ^TT

(148) (1) 내지 (147) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT가 독립적으로 -R^TT1, -R^TT2, -R^TT3 또는 -L^TT-R^TT3인, 화합물.

(149) (1) 내지 (147) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT가 독립적으로 -R^TT1, -R^TT3 또는 -L^TT-R^TT3인, 화합물.

(150) (1) 내지 (147) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT가 -R^TT1인, 화합물.

그룹 - R ^TT1

(151) (1) 내지 (150) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT1이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1-6알킬인, 화합물.

(152) (1) 내지 (150) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT1이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬이며, 임의로 -F, -OH 및 -OR^TTT로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되는, 화합물.

(153) (1) 내지 (150) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT1이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1-4알킬인, 화합물.

(154) (1) 내지 (150) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT1이 독립적으로 -Me, -Et, -nPr, -iPr, -nBu, -sBu, -iBu 또는 -tBu인, 화합물.

(155) (1) 내지 (150) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT1이 독립적으로 -Me, -Et, -nPr 또는 -iPr인, 화합물.

(156) (1) 내지 (150) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT1이 -Me인, 화합물.

그룹 - R ^TT2

(157) (1) 내지 (156) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT2가 포화 C_3- ₆사이클로알킬이고, 임의로 -F, -OH 및 -OR^TTT로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되는, 화합물.

(158) (1) 내지 (156) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT2가 포화 C_3-6사이클로알킬인, 화합물.

(159) (1) 내지 (156) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT2가 독립적으로 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실인, 화합물.

(160) (1) 내지 (156) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT2가 사이클로프로필인, 화합물.

그룹 - R ^TT3

(161) (1) 내지 (160) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT3이 페닐이고, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I, -R^TTT, OH, -OR^TTT, -OCF₃, -NH₂, -NHR^TTT 및 -NR^TTT ₂로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되는, 화합물.

(162) (1) 내지 (160) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT3이 페닐이고, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I, -R^TTT, OH, -OR^TTT 및 -OCF₃으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되는, 화합물.

(163) (1) 내지 (160) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT3이 페닐이고, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I 및 -R^TTT로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되는, 화합물.

(164) (1) 내지 (160) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TT3이 페닐인, 화합물.

그룹 - L ^T -

(165) (1) 내지 (164) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^T-가 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1-3알킬렌인, 화합물.

(166) (1) 내지 (164) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^T-가 독립적으로 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH(CH₃)-, -C(CH₃)₂-, -CH(CH₂CH₃)-, -CH(CH₃)CH₂- 또는 -CH₂CH(CH₃)-인, 화합물.

(167) (1) 내지 (164) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^T-가 독립적으로 -CH₂-, -CH₂CH₂- 또는 -CH₂CH₂CH₂-인, 화합물.

(168) (1) 내지 (164) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^T-가 -CH₂-인, 화합물.

그룹 - L ^TT -

(169) (1) 내지 (168) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^TT-가 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₃알킬렌인, 화합물.

(170) (1) 내지 (168) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^TT-가 독립적으로 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH(CH₃)-, -C(CH₃)₂-, -CH(CH₂CH₃)-, -CH(CH₃)CH₂- 또는 -CH₂CH(CH₃)-인, 화합물.

(171) (1) 내지 (168) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^TT-가 독립적으로 -CH₂-, -CH₂CH₂- 또는 -CH₂CH₂CH₂-인, 화합물.

(172) (1) 내지 (168) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^TT-가 -CH₂-인, 화합물.

그룹 - R ^TN

(173) (1) 내지 (172) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TN이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1-4알킬인, 화합물.

(174) (1) 내지 (172) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TN이 -Me인, 화합물.

그룹 - R ^TM

(175) (1) 내지 (174) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TM이 독립적으로 아제티디노, 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노, 모르폴리노, 아제파노 또는 디아제파노이고,

임의로 탄소 상에서 -R^TMM, -F, -OH 및 -OR^TMM으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 -R^TMM, -C(=O)R^TMM 및 -C(=O)OR^TMM으로부터 선택된 그룹으로 치환되는, 화합물.

(176) (1) 내지 (174) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TM이 독립적으로 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노 또는 모르폴리노이고,

(177) (1) 내지 (174) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TM이 독립적으로 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노 또는 모르폴리노이고,

임의로 탄소 상에서 -R^TMM으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

(178) (1) 내지 (174) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TM이 독립적으로 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노 또는 모르폴리노이고,

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 -R^TMM으로부터 선택된 그룹으로 치환되는, 화합물.

그룹 - R ^TTT

(179) (1) 내지 (178) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TTT가 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1-4알킬인, 화합물.

(180) (1) 내지 (178) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TTT가 -Me인, 화합물.

그룹 - R ^TMM

(181) (1) 내지 (180) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TMM이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1-4알킬인, 화합물.

(182) (1) 내지 (180) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^TMM이 -Me인, 화합물.

그룹 - Cy ⁵

(183) (1) 내지 (182) 중 어느 하나에 있어서, -Cy⁵가-Cy^5A인, 화합물.

(184) (1) 내지 (182) 중 어느 하나에 있어서, -Cy⁵가-Cy^5B인, 화합물.

그룹 - Cy ^5A

(185) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 독립적으로 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 아제파닐, 디아제파닐, 테트라하이드로피리디닐, 디하이드로피리디닐, 3,6-디아자비사이클로[3.1.1]헵타닐, 3-아자비사이클로[3.1.1]헵타닐, 3,8-디아자비사이클로[3.2.1]옥타닐, 3-아자비사이클로[3.2.1]옥타닐, 2,6-디아자스피로[3.3]헵타닐, 2,7-디아자스피로[3.4]옥타닐, 2,7-디아자스피로[3.5]노나닐, 2,7-디아자스피로[4.4]노나닐, 2,8-디아자스피로[4.5]데카닐 또는 3,9-디아자스피로[5.5]운데카닐이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(186) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 적어도 하나의 질소 환 원자를 갖는 비방향족 C_4-7헤테로사이클릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(187) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 독립적으로 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 테트라하이드로피리디닐, 디하이드로피리디닐, 아제파닐, 디아제파닐 또는 6-디아자비사이클로[3.1.1]헵타닐이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(188) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 적어도 하나의 질소 환 원자를 갖는 비방향족 C_4-6헤테로사이클릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(189) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 독립적으로 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐 또는 티오모르폴리닐이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(190) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 독립적으로 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

아제티디닐 :

(191) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 아제티디닐(예: 아제티딘-1-일, 아제티딘-2-일, 아제티딘-3-일)이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(192) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 아제티딘-1-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되는, 화합물.

(193) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 아제티딘-2-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(194) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 아제티딘-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

피롤리디닐 :

(195) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피롤리디닐(예: 피롤리딘-1-일, 피롤리딘-2-일, 피롤리딘-3-일)이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(196) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피롤리딘-1-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되는, 화합물.

(197) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피롤리딘-2-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(198) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피롤리딘-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(199) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피롤리딘-3-일인, 화합물.

(200) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 (3S)-피롤리딘-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(201) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 (3S)-피롤리딘-3-일인, 화합물.

피페리디닐 :

(202) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리디닐(예: 피페리딘-1-일, 피페리딘-2-일, 피페리딘-3-일, 피페리딘-4-일)이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(203) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리딘-1-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되는, 화합물.

(204) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리딘-2-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(205) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리딘-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(206) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리딘-3-일인, 화합물.

(207) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 (3S)-피페리딘-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(208) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 (3S)-피페리딘-3-일인, 화합물.

(209) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리딘-4-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(210) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리딘-4-일인, 화합물.

(211) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 3-하이드록시-피페리딘-4-일인, 화합물.

(212) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 (3R,4R)-3하이드록시피페리딘-4-일인, 화합물.

피페라지닐 :

(213) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페라지닐(예: 피페라진-1-일, 피페라진-2-일)이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(214) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페라진-1-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(215) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 피페라진-2-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

모르폴리닐 :

(216) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 모르폴리닐(예: 모르폴리닐-2-일, 모르폴리닐-3-일, 모르폴리닐-4-일)이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(217) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 모르폴리닐-4-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되는, 화합물.

(218) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 모르폴리닐-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(219) (1) 내지 (184) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5A가 모르폴리닐-2-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

그룹 - Cy ^5B

(220) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 독립적으로 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐 또는 피라지닐이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

C ₅ 헤테로아릴 :

(221) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 적어도 하나의 질소 환 원자를 갖는 C₅헤테로아릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

(222) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 독립적으로 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸, 이속사졸, 티아졸, 이소티아졸, 옥사디아졸릴 또는 티아디아졸릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

(223) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 독립적으로 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸, 이속사졸, 티아졸 또는 이소티아졸이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

피라졸릴 :

(224) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 피라졸릴(예: 피라졸-1-일, 1H-피라졸-3-일, 1H-피라졸-4-일 또는 1H-피라졸-5-일)이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

(225) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 1H-피라졸-4-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(226) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 1H-피라졸-5-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

C ₆ 헤테로아릴 :

(227) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 적어도 하나의 질소 환 원자를 갖는 C₆헤테로아릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5BC로 치환되는, 화합물.

(228) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 독립적으로 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐 또는 피라지닐이고;

피리디닐 :

(229) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 피리디닐(예: 피리딘-2-일, 피리딘-3-일 또는 피리딘-4-일)이고;

(230) (1) 내지 (219) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, -Cy^5B가 피리딘-3-일이고;

치환체 - R ^Cy5AC 및 - R ^Cy5BC

(231) (1) 내지 (230) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AC, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BC가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^JJ,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^JJ,

-L^J-OH, -L^J-OR^JJ,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,

-NH₂, -NHR^JJ, -NR^JJ ₂, -R^JM,

-L^J-NH₂, -L^J-NHR^JJ, -L^J-NR^JJ ₂, -L^J-R^JM,

-C(=O)OH, -C(=O)OR^JJ,

-OC(=O)R^JJ,

-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^JJ, -C(=O)NR^JJ ₂, -C(=O)R^JM,

-NHC(=O)R^JJ, -NR^JNC(=O)R^JJ,

-C(=O)R^JJ,

-S(=O)₂R^JJ,

-S(=O)NH₂, -S(=O)NHR^JJ, -S(=O)NR^JJ ₂, -S(=O)R^JM,

-S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NHR^JJ, -S(=O)₂NR^JJ ₂, -S(=O)₂R^JM,

-NHS(=O)₂R^JJ, -NR^JNS(=O)₂R^JJ,

-CN 및 -NO₂.

(232) (1) 내지 (230) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AC, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BC가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^JJ,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^JJ,

-L^J-OH, -L^J-OR^JJ,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,

-NH₂, -NHR^JJ, -NR^JJ ₂, -R^JM,

-L^J-NH₂, -L^J-NHR^JJ, -L^J-NR^JJ ₂, -L^J-R^JM,

-C(=O)OH, -C(=O)OR^JJ,

-OC(=O)R^JJ,

-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^JJ, -C(=O)NR^JJ ₂, -C(=O)R^JM,

-NHC(=O)R^JJ, -NR^JNC(=O)R^JJ,

-C(=O)R^JJ,

-CN 및 -NO₂.

(233) (1) 내지 (230) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AC, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BC가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^JJ,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^JJ,

-L^J-OH, -L^J-OR^JJ,

-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,

-NH₂, -NHR^JJ, -NR^JJ ₂, -R^JM,

-L^J-NH₂, -L^J-NHR^JJ, -L^J-NR^JJ ₂, -L^J-R^JM,

-CN 및 -NO₂.

(234) (1) 내지 (230) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AC, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BC가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^JJ,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^JJ,

-NH₂, -NHR^JJ, -NR^JJ ₂, -R^JM,

-CN 및 -NO₂.

(235) (1) 내지 (230) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AC, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BC가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^JJ,

-F, -Cl, -Br, -I,

-OH, -OR^JJ,

-NH₂, -NHR^JJ, -NR^JJ ₂ 및 -R^JM.

(236) (1) 내지 (230) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AC, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BC가 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-F, -Me, -OH, -OMe 및 -NH₂.

(237) (1) 내지 (230) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AC가 -OH인, 화합물.

(238) (1) 내지 (230) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BC가 -Me인, 화합물.

치환체 - R ^Cy5AN 및 - R ^Cy5BN

(239) (1) 내지 (238) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AN, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BN이 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^JJ, C(=O)R^JJ, C(=O)OR^JJ 및 -S(=O)R₂ ^JJ.

(240) (1) 내지 (238) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AN, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BN이 독립적으로 다음으로부터 선택되는, 화합물:

-R^JJ, C(=O)R^JJ 및 -C(=O)OR^JJ.

(241) (1) 내지 (238) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^Cy5AN, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BN이 -R^JJ인, 화합물.

그룹 - R ^JJ

(242) (1) 내지 (241) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ가 독립적으로 -R^JJ1, R^JJ2, R^JJ3 또는 -L^JJ-R^JJ3인, 화합물.

(243) (1) 내지 (241) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ가 독립적으로 -R^JJ1, -R^JJ3 또는 -L^JJ-R^JJ3인, 화합물.

(244) (1) 내지 (241) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ가 -R^JJ1인, 화합물.

그룹 - R ^JJ1

(245) (1) 내지 (244) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ1이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1-6알킬인, 화합물.

(246) (1) 내지 (244) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ1이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬이고, 임의로 -F, -OH 및 -OR^JJJ로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되는, 화합물.

(247) (1) 내지 (244) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ1이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1-4알킬인, 화합물.

(248) (1) 내지 (244) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ1이 독립적으로 -Me, -Et, -nPr, -iPr, -nBu, -sBu, -iBu 또는 -tBu인, 화합물.

(249) (1) 내지 (244) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ1이 독립적으로 -Me, -Et, -nPr 또는 -iPr인, 화합물.

(250) (1) 내지 (244) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ1이 -Me인, 화합물.

그룹 - R ^JJ2

(251) (1) 내지 (250) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ2가 포화 C_3- ₆사이클로알킬이고, 임의로 -F, -OH 및 -OR^JJJ로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되는, 화합물.

(252) (1) 내지 (250) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ2가 포화 C_3-6사이클로알킬인, 화합물.

(253) (1) 내지 (250) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ2가 독립적으로 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실인, 화합물.

(254) (1) 내지 (250) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ2가 사이클로프로필인, 화합물.

그룹 - R ^JJ3

(255) (1) 내지 (254) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ3이 페닐이고, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I, -R^JJJ, OH, -OR^JJJ, -OCF₃, -NH₂, -NHR^JJJ 및 -NR^JJJ ₂로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환된, 화합물.

(256) (1) 내지 (254) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ3이 페닐이고, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I, -R^JJJ, OH, -OR^JJJ 및 -OCF₃으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되는, 화합물.

(257) (1) 내지 (254) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ3이 페닐이고, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I 및 -R^JJJ로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되는, 화합물.

(258) (1) 내지 (254) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJ3이 페닐인, 화합물.

그룹 - L ^J -

(259) (1) 내지 (258) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^J-가 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₃알킬렌인, 화합물.

(260) (1) 내지 (258) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^J-가 독립적으로 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH(CH₃)-, -C(CH₃)₂-, -CH(CH₂CH₃)-, -CH(CH₃)CH₂- 또는 -CH₂CH(CH₃)-인, 화합물.

(261) (1) 내지 (258) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^J-가 독립적으로 -CH₂-, -CH₂CH₂- 또는 -CH₂CH₂CH₂-인, 화합물.

(262) (1) 내지 (258) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^J-가 -CH₂-인, 화합물.

그룹 - L ^JJ -

(263) (1) 내지 (262) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^JJ-가 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₃알킬렌인, 화합물.

(264) (1) 내지 (262) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^JJ-가 독립적으로 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH(CH₃)-, -C(CH₃)₂-, -CH(CH₂CH₃)-, -CH(CH₃)CH₂- 또는 -CH₂CH(CH₃)-인, 화합물.

(265) (1) 내지 (262) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^JJ-가 독립적으로 -CH₂-, -CH₂CH₂- 또는 -CH₂CH₂CH₂-인, 화합물.

(266) (1) 내지 (262) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -L^JJ-가 -CH₂-인, 화합물.

그룹 - R ^JN

(267) (1) 내지 (266) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JN이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1-4알킬인, 화합물.

(268) (1) 내지 (266) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JN이 -Me인, 화합물.

그룹 - R ^JM

(269) (1) 내지 (268) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JM이 독립적으로 아제티디노, 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노, 모르폴리노, 아제파노 또는 디아제파노이고;

임의로 탄소 상에서 -R^JMM, -F, -OH 및 -OR^JMM으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 -R^JMM, C(=O)R^JMM 및 -C(=O)OR^JMM으로부터 선택된 그룹으로 치환되는, 화합물.

(270) (1) 내지 (268) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JM이 독립적으로 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노 또는 모르폴리노이고,

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 -R^JMM, -C(=O)R^JMM 및 -C(=O)OR^JMM으로부터 선택된 그룹으로 치환되는, 화합물.

(271) (1) 내지 (268) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JM이, 독립적으로 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노 또는 모르폴리노이고,

임의로 탄소 상에서 -R^JMM으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;

(272) (1) 내지 (268) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JM이 독립적으로 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노 또는 모르폴리노이고,

임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 -R^JMM으로부터 선택된 그룹으로 치환되는, 화합물.

그룹 - R ^JJJ

(273) (1) 내지 (272) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJJ가 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬인, 화합물.

(274) (1) 내지 (272) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JJJ가 -Me인, 화합물.

그룹 - R ^JMM

(275) (1) 내지 (274) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JMM이 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬인, 화합물.

(276) (1) 내지 (274) 중 어느 하나에 있어서, 존재하는 경우, 각 -R^JMM이 -Me인, 화합물.

일부 바람직한 조합

(277) (1)에 있어서,

-L⁷-이 -CH₂-이고;

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Cy⁵가-Cy^5A이고;

-Cy^5A가 적어도 하나의 질소 환 원자를 갖는 비방향족 C_4- ₆헤테로사이클릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(278) (1)에 있어서,

-L⁷-이 -CH₂-이고;

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

Cy⁵-L⁵-X⁵-가독립적으로

Cy⁵-CH₂-NH-(즉, -L⁵-는 -CH₂-이고, -X⁵-는 -NH-이다);

Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다);

Cy⁵-O-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -O-이다); 또는

Cy⁵-(즉, -L⁵- 및 -X⁵-는 각각 단일 결합이다)이고;

-Cy⁵가-Cy^5A이고;

-Cy^5A가 독립적으로 아제티디닐, 피롤리디닐 또는 피페리디닐이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(279) (1)에 있어서,

-L⁷-이 -CH₂-이고;

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가독립적으로 피리디닐, 피리미디닐, 티아졸릴 또는 피라졸릴이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

Cy⁵-L⁵-X⁵-가독립적으로

Cy⁵-CH₂-NH-(즉, -L⁵-는 -CH₂-이고, -X⁵-는 -NH-이다); 또는

Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다)이고;

-Cy⁵가-Cy^5A이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

(280) (1)에 있어서,

-L⁷-이 -CH₂-이고;

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가독립적으로 피리딘-2-일, 피리미딘-2-일, 티아졸-2-일 또는 피라졸-1-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

Cy⁵-L⁵-X⁵-가독립적으로

Cy⁵-CH₂-NH-(즉, -L⁵-는 -CH₂-이고, -X⁵-는 -NH-이다); 또는

Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다)이고;

-Cy⁵가-Cy^5A이고;

-Cy^5A가 독립적으로 피롤리딘-3-일, 피페리딘-3-일 또는 피페리딘-4-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.

(281) (1)에 있어서,

-L⁷-이 -CH₂-이고;

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

Cy⁵-L⁵-X⁵-가독립적으로

Cy⁵-CH₂-NH-(즉, -L⁵-는 -CH₂-이고, -X⁵-는 -NH-이다); 또는

Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다)이고;

-Cy⁵가-Cy^5A이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되고;

-R³이 -R^3B인, 화합물.

(282) (1)에 있어서,

-L⁷-이 -CH₂-이고;

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;

-Ar²가독립적으로 피리딘-2-일 또는 피리미딘-2-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;

Cy⁵-L⁵-X⁵-가Cy⁵-NH-(즉, -L⁵-는 단일 결합이고, -X⁵-는 -NH-이다)이고;

-Cy⁵가-Cy^5A이고;

-Cy^5A가 피페리딘-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되고;

-R³이 -R^3B이고;

-R^3B가사이클로프로필인, 화합물.

(283) (1)에 있어서,

-L⁷-이 -CH₂-이고;

-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;

-Ar²가독립적으로 피리딘-2-일 또는 피리미딘-2-일이고;

-Cy⁵가-Cy^5A이고;

-Cy^5A가 피페리딘-3-일이고;

임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;

임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되고;

-R³이 -R^3B이고;

-R^3B가사이클로프로필인, 화합물.

특정 화합물

(284) (1)에 있어서, 다음 화학식의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 용매화물로부터 선택되는, 화합물:

조합

명확성을 위해, 별개의 구현예의 맥락에서 기재되는 본 발명의 특정 특징들은 단일 구현예로 조합하여 제공될 수도 있다는 것이 인식된다. 반대로, 간결성을 위해 단일 구현예의 맥락에서 기재되는 본 발명의 다양한 특징은 또한 개별적으로 또는 임의의 적절한 하위 조합으로 제공될 수 있다. 변수(예: -L⁷-, -Ar¹-, -Ar², -X⁵-, -L⁵-, -Cy⁵, -R³ 등)로 표시되는 화학적 그룹에 관련된 구현예의 모든 조합은 본 발명에 의해 구체적으로 포함되며, 각각 및 모든 조합이 이러한 조합이 안정한 화합물인 화합물(즉, 단리, 특성화 및 생물학적 활성에 대해 시험될 수 있는 화합물)을 포함하는 정도까지 개별적이고 명백하게 개시된 것처럼 본원에 개시된다. 이러한 맥락에서, 당업자는 그룹의 특정 조합(예: 치환체)이 쉽게 합성되지 않을 수 있고/있거나 화학적으로 불안정한 화합물을 발생시킬 수 있음을 쉽게 인식할 것이다. 또한, 이러한 변수를 기재하는 구현예에 나열된 화학적 그룹의 모든 하위 조합도 본 발명에 의해 구체적으로 포함되며, 마치 화학적 그룹의 각각 및 모든 하위 조합이 개별적으로 그리고 명시적으로 본원에 개시된 것처럼 본원에 개시된다.

실질적으로 정제된 형태

본 발명의 하나의 양태는 실질적으로 정제된 형태 및/또는 실질적으로 오염물질이 없는 형태의 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물에 관한 것이다.

하나의 구현예에서, 실질적으로 정제된 형태는 적어도 50중량, 예를 들어, 적어도 60중량%, 예를 들어, 적어도 70중량%, 예를 들어, 적어도 80중량%, 예를 들어, 적어도 90중량%, 예를 들어, 적어도 95중량%, 예를 들어, 적어도 97중량%, 예를 들어, 적어도 98중량%, 예를 들어, 적어도 99중량%이다.

달리 명시되지 않는 한, 실질적으로 정제된 형태는 임의의 입체이성체 또는 거울상 이성체 형태의 화합물을 지칭한다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, 실질적으로 정제된 형태는 입체이성체의 혼합물, 즉 다른 화합물에 대하여 정제된 것을 지칭한다. 하나의 구현예에서, 실질적으로 정제된 형태는 하나의 입체이성체, 예를 들어, 광학적으로 순수한 입체이성체를 지칭한다. 하나의 구현예에서, 실질적으로 정제된 형태는 거울상 이성체의 혼합물을 지칭한다. 하나의 구현예에서, 실질적으로 정제된 형태는 거울상 이성체의 등몰 혼합물(즉, 라세미 혼합물, 라세미체)을 지칭한다. 하나의 구현예에서, 실질적으로 정제된 형태는 하나의 거울상 이성체, 예를 들어, 광학적으로 순수한 거울상 이성체를 지칭한다.

하나의 구현예에서, 오염물질은 50중량% 이하, 예를 들어, 40중량% 이하, 예를 들어, 30중량% 이하, 예를 들어, 20중량% 이하, 예를 들어, 10중량% 이하, 예를 들어, 5중량% 이하, 예를 들어, 3중량% 이하, 예를 들어, 2중량% 이하, 예를 들어, 1중량% 이하를 나타낸다.

명시되지 않는 한, 오염물질은 다른 화합물, 즉 입체이성체 또는 거울상 이성체 이외의 다른 화합물을 지칭한다. 하나의 구현예에서, 오염물질은 다른 화합물 및 다른 입체이성체를 지칭한다. 하나의 구현예에서, 오염물질은 다른 화합물 및 다른 거울상 이성체를 지칭한다.

하나의 구현예에서, 실질적으로 정제된 형태는 적어도 60% 광학적으로 순수(즉, 몰 기준으로, 화합물의 60%가 목적하는 입체이성체 또는 거울상 이성체이고, 40%는 바람직하지 않은 입체이성체 또는 거울상 이성체이다), 예를 들어, 적어도 70% 광학적으로 순수, 예를 들어, 적어도 80% 광학적으로 순수, 예를 들어, 적어도 90% 광학적으로 순수, 예를 들어, 적어도 95% 광학적으로 순수, 예를 들어, 적어도 97% 광학적으로 순수, 예를 들어, 적어도 98% 광학적으로 순수, 예를 들어, 적어도 99% 광학적으로 순수하다.

이성체

특정 화합물은 시스- 및 트랜스-형태를 포함하지만, 이에 제한되지 않는 하나 이상의 특정 기하학적, 광학적, 거울상 이성체, 부분입체이성체, 에피머, 아트로픽, 입체이성체, 토오토머, 구조적 또는 아노머 형태; E- 및 Z-형태; c-, t- 및 r-형태; 엔도- 및 엑소-형태; R-, S- 및 메조-형태; D- 및 L-형태; d- 및 l-형태; (+) 및 (-) 형태; 케토-, 에놀- 및 에놀레이트-형태; syn- 및 anti-형태; 향사(synclinal)- 및 배사(anticlinal) 형태; α- 및 β-형태; 축 및 적도 형태; 보트-, 의자-, 트위스트-, 엔벨롭- 및 하프체어 형태; 및, 이하 "이성체"(또는 "이성체 형태")로서 총칭되는 이들의 조합으로 존재할 수 있다.

구조체 부류에 대한 참조는 그 부류 내에 속하는 구조적 이성체 형태를 잘 포함할 수 있다(예: C_1- ₇알킬은 n-프로필 및 이소프로필을 포함하고; 부틸은 n-, 이소-, 2급- 및 3급-부틸을 포함하고; 메톡시페닐은 오르토-, 메타- 및 파라-메톡시페닐을 포함한다). 그러나, 특정 그룹 또는 치환 패턴에 대한 참조는 공간에서의 위치에 의해서가 아닌 원자 간의 연결과 관련하여 상이한 다른 구조적 이성체(또는 구성적 이성체)를 포함하는 것으로 의도되지 않는다. 예를 들어, 메톡시 그룹 -OCH₃에 대한 참조는 이의 구조적 이성체인 하이드록시메틸 그룹 -CH₂OH에 대한 참조로서 해석되지 않아야 한다. 유사하게, 구체적으로 오르토-클로로페닐에 대한 참조는 이의 구조적 이성체인 메타-클로로페닐에 대한 참조로서 해석되지 않아야 한다.

상기 제외는 토오토머 형태, 예를 들어, 다음 토오토머 쌍; 케토/에놀(이하 예시됨), 이민/엔아민, 아미드/이미노 알코올, 아미딘/아미딘, 니트로소/옥심, 티오케톤/에네티올, N-니트로소/하이드록시아조 및 니트로/아시-니트로에서와 같이, 예를 들어, 케토-, 에놀- 및 에놀레이트 형태에 관한 것은 아니다. 하나의 토오토머에 대한 본원에서의 참조는 두 토오토머 형태를 포함하는 것으로 의도된다.

예를 들어, 1H-피리딘-2-온-5-일과 2-하이드록실-피리딘-5-일(아래 제시됨)은 서로 토오토머이다. 본원에서 하나에 대한 참조는 둘 다를 포함하는 것으로 의도된다.

용어 "이성체"에 구체적으로 포함되는 것은 하나 이상의 동위원소 치환을 갖는 화합물임을 유의한다. 예를 들어, H는 ¹H, ²H(D) 및 ³H(T)를 포함한 임의의 동위원소 형태일 수 있으며; C는 ¹²C, ¹³C 및 ¹⁴C를 포함한 임의의 동위원소 형태일 수 있으며; O는 ¹⁶O 및¹⁸O를 포함한 임의의 동위원소 형태일 수 있고; 등등이다.

달리 명시되지 않는 한, 특정 화합물에 대한 참조는 이들의 혼합물(예: 라세미 혼합물)을 포함하여 이러한 모든 이성체 형태를 포함한다. 이러한 이성체 형태의 제조(예: 비대칭 합성) 및 분리(예: 분별 결정화 및 크로마토그래피 수단) 방법은 당업계에게 공지되어 있거나, 본원에 교시된 방법 또는 공지된 방법을 공지된 방식으로 적용하여 쉽게 수득된다.

염

화합물의 상응하는 염, 예를 들어, 약제학적으로 허용되는 염을 제조, 정제 및/또는 취급하는 것이 편리하거나 바람직할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 염의 예는 문헌(참조: Berge et al., 1977, "Pharmaceutically Acceptable Salts," J.　Pharm. Sci., Vol. 66, pp. 1-19)에서 논의된다.

예를 들어, 화합물이 음이온성이거나 음이온성일 수 있는 작용성 그룹을 갖는 경우(예를 들어, -COOH는 -COO^-일 수 있다), 염은 적절한 양이온으로 형성될 수 있다. 적합한 무기 양이온의 예는 알칼리 금속 이온, 예를 들어, Na⁺ 및 K⁺, 알칼리 토금속 양이온, 예를 들어, Ca² ⁺ 및 Mg² ⁺, 및 다른 양이온, 예를 들어, Al³ ⁺ 뿐만 아니라 암모늄 이온(즉, NH₄ ⁺)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 적합한 유기 양이온의 예는 치환된 암모늄 이온(예: NH₃R⁺, NH₂R₂ ⁺, NHR₃ ⁺, NR₄ ⁺)을 포함하지만, 이에 제한되지 않으며, 예를 들어, 각 R은 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₁₈알킬, C_3-8사이클로알킬, C_3- ₈사이클로알킬-C_1- ₆알킬 및 페닐-C_1-6 알킬이고, 여기서 페닐 그룹은 임의로 치환된다. 일부 적절한 치환된 암모늄 이온의 예는 에틸아민, 디에틸아민, 디사이클로헥실아민, 트리에틸아민, 부틸아민, 에틸렌디아민, 에탄올아민, 디에탄올아민, 피페라진, 벤질아민, 페닐벤질아민, 콜린, 메글루민 및 트로메타민뿐만 아니라 아미노산, 예를 들어, 리신 및 아르기닌으로부터 유도된 것들이다. 일반적인 4급 암모늄 이온의 예는 N(CH₃)₄ ⁺이다.

화합물이 양이온성이거나 양성자화시 양이온성으로 될 수 있는 작용성 그룹을 갖는 경우(예를 들어, -NH₂는 -NH₃ ⁺가 될 수 있다), 염은 적절한 음이온으로 형성될 수 있다.

예를 들어, 모 구조가 양이온성 그룹(예: -NMe₂ ⁺)을 함유하거나, 양성자화시 양이온성이 될 수 있는 작용성 그룹을 갖는 경우(예를 들어, -NH₂는 NH₃ ⁺가 될 수 있다), 염은 적절한 음이온으로 형성될 수 있다. 4급 암모늄 화합물의 경우, 일반적으로 양전하의 균형을 맞추기 위해 항상 반대 음이온이 존재한다. 양이온성 그룹(예: -NMe₂ ⁺, NH₃ ⁺) 이외에, 화합물이 또한 음이온을 형성할 수 있는 그룹(예: -COOH)을 함유하는 경우, 내부 염(양쪽성 이온으로 지칭되기도 함)이 형성될 수 있다.

적합한 무기 음이온의 예는 다음 무기산; 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 아황산, 질산, 아질산, 인산 및 아인산으로부터 유래된 것들을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.

적합한 유기 음이온의 예는 다음 유기산: 2-아세틸옥시벤조산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 아스코르브산, 아스파르트산, 벤조산, 캄포설폰산, 신남산, 시트르산, 에데트산, 1,2-에탄디설폰산, 에탄설폰산, 푸마르산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루탐산, 글리콜산, 하이드록시말레산, 하이드록시나프탈렌 카르복실산, 이세티온산, 락트산, 락토비온산, 라우르산, 말레산, 말산, 메탄설폰산, 점액산, 올레산, 옥살산, 팔미트산, 파모산, 판토텐산, 페닐아세트산, 페닐설폰, 프로피온산, 피루브산, 살리실산, 스테아르산, 석신산, 설파닐산, 타르타르산, 톨루엔설폰 및 발레르산으로부터 유래된 것들을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 적합한 중합체 유기 음이온의 예는 다음 중합체 산: 탄닌산, 카르복시메틸 셀룰로스로부터 유래된 것들을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.

특히 4급 암모늄 화합물(예: -NMe₂ ⁺ 그룹이 있는 것들)에 특히 적합한 적합한 반대 이온의 예는 1-아다만탄설포네이트, 벤젠설포네이트, 바이설페이트, 브로마이드, 클로라이드, 요오디드, 메탄설포네이트, 메틸설페이트, 1,5-나프탈렌-비스-설포네이트, 4-니트로벤젠설포네이트, 포르메이트, 타르트레이트, 토실레이트, 트리플루오로아세테이트, 트리플루오로메틸설포네이트, 설페이트를 포함한다. 다시, 화합물이 또한 음이온을 형성할 수 있는 그룹(예: -COOH)을 함유하면, 내부 염이 형성될 수 있다.

달리 명시되지 않는 한, 특정 화합물에 대한 참조는 또한 이의 염 형태를 포함한다.

용해화물 및 수화물

화합물의 상응하는 용매화물을 제조, 정제 및/또는 취급하는 것이 편리하거나 바람직할 수 있다. 용어 "용매화물"은 용질(예: 화합물, 화합물의 염) 및 용매의 복합체를 지칭하기 위해 본원에서 통상적인 의미로 사용된다. 용매가 물인 경우, 용매화물은 편리하게 수화물, 예를 들어, 일수화물, 이수화물, 삼수화물 등으로 지칭될 수 있다.

달리 명시되지 않는 한, 특정 화합물에 대한 참조는 또한 이의 용매화물 및 수화물 형태를 포함한다.

화학적으로 보호된 형태

화합물을 화학적으로 보호된 형태로 제조, 정제 및/또는 취급하는 것이 편리하거나 바람직할 수 있다. 용어 "화학적으로 보호된 형태"는 본원에서 통상적인 화학적 의미로 사용되며, 하나 이상의 반응성 작용성 그룹이 특정 조건하(예: pH, 온도, 방사선, 용매 등)에서 바람직하지 않은 화학 반응으로부터 보호되는 화합물에 관한 것이다. 실제로, 익히 공지된 화학적 방법을 사용하여 특정 조건하에서 달리 반응성인 작용성 그룹을 가역적으로 비반응성이도록 한다. 화학적으로 보호된 형태에서, 하나 이상의 반응성 작용성 그룹은 보호된 또는 보호 그룹(대안적으로, 마스킹된 또는 마스킹 그룹 또는 차단된 또는 차단 그룹)의 형태이다. 반응성 작용성 그룹을 보호함으로써, 보호 그룹에 영향을 미치지 않고 다른 보호되지 않은 반응성 작용성 그룹을 포함하는 반응이 수행될 수 있으며; 보호 그룹이 일반적으로 분자의 나머지 부분에 실질적으로 영향을 미치지 않고 후속 단계에서 제거될 수 있거나 마스킹 그룹이 형질전환될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Protective Groups in Organic Synthesis (T.　Green and P.　Wuts; 4th Edition; John Wiley and Sons, 2006)]을 참조한다.

이러한 다양한 "보호", "차단" 또는 "마스킹" 방법은 유기 합성에서 널리 사용되며 익히 공지되어 있다. 예를 들어, 둘 다 특정 조건에서 반응성인 두 개의 비등가 반응성 작용성 그룹을 갖는 화합물을 유도체화하여 작용성 그룹 중 하나를 "보호된" 것으로 하고, 따라서 특정 조건하에 반응성이지 않도록 할 수 있으며; 이렇게 보호된 화합물은 효과적으로 하나의 반응성 작용성 그룹만을 갖는 반응물로서 사용될 수 있다. 목적하는 반응(다른 작용성 그룹을 포함하는)이 완료된 후, 보호된 그룹을 "탈보호"하여 원래의 작용성으로 되돌릴 수 있다.

예를 들어, 하이드록시 그룹은 에테르(-OR) 또는 에스테르(-OC(=O)R), 예를 들어, t-부틸 에테르; 벤질, 벤즈하이드릴(디페닐메틸) 또는 트리틸(트리페닐메틸) 에테르; 트리메틸실릴 또는 t-부틸디메틸실릴 에테르; 또는 아세틸 에스테르(-OC(=O)CH₃, -OAc)로서 보호될 수 있다.

예를 들어, 알데히드 또는 케톤 그룹은 각각 아세탈(RCH-(OR)₂) 또는 케탈(R₂ C(OR)₂)로서 보호될 수 있으며, 여기서 카보닐 그룹(>C=O)은, 예를 들어, 산의 존재 하에 1차 알코올과의 반응에 의해 1,1-디에테르(>C(OR)₂)로 전환된다. 알데히드 또는 케톤 그룹은, 예를 들어, 산의 존재하에 물을 사용하여 가수분해에 의해 쉽게 재생된다.

예를 들어, 아민 그룹은, 예를 들어, 아미드(-NRCO-R) 또는 우레탄(-NRCO-OR), 예를 들어, 아세트아미드(-NHCOCH₃); 벤질옥시 아미드((-NHCO-OCH₂C₆H₅, -NH-Cbz); t-부톡시 아미드((-NHCO-OC(CH₃)₃, -NH-Boc); 2-비페닐-2-프로폭시 아미드(-NHCO-OC(CH₃)₂C₆H₄C₆H₅, -NH-Bpoc), 9-플루오레닐메톡시 아미드(-NH-Fmoc), 6-니트로베라트릴옥시 아미드(-NH-Nvoc), 2-트리메틸실릴에틸옥시 아미드(-NH-Teoc), 2,2,2-트리클로로에틸옥시 아미드(-NH-Troc), 알릴옥시 아미드(-NH-Alloc), 2(-페닐설포닐)에틸옥시 아미드(-NH-Psec)로서; 또는 적절한 경우(예: 사이클릭 아민), 니트록사이드 라디칼(>N-O·)로서 보호될 수 있다.

예를 들어, 카르복실산 그룹은, 예를 들어, C_1- ₇알킬 에스테르(예: 메틸 에스테르; t-부틸 에스테르); C_1- ₇할로알킬 에스테르(예: 2,2,2-트리할로에틸 에스테르); 2-트리(C_1-7알킬)실릴-에틸 에스테르; 또는 C_5- ₂₀아릴-C_1- ₇알킬 에스테르(예: 벤질 에스테르; 니트로벤질 에스테르); 또는 아미드 또는 하이드라지드, 예를 들어, 아세트아미드 또는 N,N,N'-트리메틸하이드라지드로서 보호될 수 있다.

예를 들어, 티올 그룹은 티오에테르(-SR), 예를 들어, 벤질 티오에테르; 아세트아미도메틸 에테르(-S-CH₂NHC(=O)CH₃)로서 보호될 수 있다.

프로드럭

화합물을 프로드럭의 형태로 제조, 정제 및/또는 취급하는 것이 편리하거나 바람직할 수 있다. 본원에서 사용된 용어 "프로드럭"은 생체내에서 목적하는 활성 화합물을 생성하는 화합물에 관한 것이다. 전형적으로, 프로드럭은 비활성이거나 목적하는 활성 화합물보다 덜 활성이지만, 유리한 취급, 투여 또는 대사 특성을 제공할 수 있다.

예를 들어, 일부 프로드럭은 활성 화합물의 에스테르(예: 생리적으로 허용되는 대사적으로 불안정한 에스테르)이다. 대사 동안, 에스테르 그룹(-C(=O)OR)이 절단되어 활성 약물을 생성한다. 이러한 에스테르는, 예를 들어, 모 화합물 중 임의의 카르복실산 그룹(-C(=O)OH)의 에스테르화에 의해 형성될 수 있으며, 적절한 경우, 모 화합물에 존재하는 임의의 다른 반응성 그룹의 사전 보호와 함께, 필요한 경우, 탈보호가 뒤따른다.

또한, 일부 프로드럭은 효소적으로 활성화되어 활성 화합물, 또는 추가 화학 반응시 활성 화합물을 생성하는 화합물을 생성한다(예를 들어, 항체 지시된 효소 프로드럭 요법(ADEPT), 유전자 지시된 효소 프로드럭 요법(GDEPT), 지질 지시된 효소 프로드럭 요법(LIDEPT) 등에서와 같이). 예를 들어, 프로드럭은 당 유도체 또는 기타 글리코사이드 접합체일 수 있거나 아미노산 에스테르 유도체일 수 있다.

조성물

본 발명의 하나의 양태는 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 조성물(예: 약제학적 조성물)에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물과 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 혼합하는 단계를 포함하는, 조성물(예: 약제학적 조성물)을 제조하는 방법에 관한 것이다.

용도

본원에 기재된 PPA 화합물은, 예를 들어, 증식성 장애("항증식제"로서), 암("항암제"로서), 바이러스 감염("항바이러스제"로서), 신경퇴행성 질환("항신경퇴행성 제제"로서) 등의 치료에 유용하다.

CDK를 억제하는 방법에 사용

본 발명의 하나의 양태는, 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물의 유효량과 세포를 접촉시키는 단계를 포함하는, 시험관내 또는 생체내에서 CDK(예: CDK12 및/또는 CDK13) 기능(예: 세포내)을 억제하는 방법에 관한 것이다.

당업자는 후보 화합물이 CDK(예: CDK12 및/또는 CDK13)를 억제하는지 여부를 쉽게 결정할 수 있다. 예를 들어, 적합한 검정은 본원에 기재되어 있거나 당업계에 공지되어 있다.

하나의 구현예에서, 상기 방법은 시험관내에서 수행된다.

하나의 구현예에서, 상기 방법은 생체내에서 수행된다.

하나의 구현예에서, PPA 화합물은 약제학적으로 허용되는 조성물의 형태로 제공된다.

지방, 폐, 위장(예를 들어, 장, 결장 포함), 유방(유선), 난소, 전립선, 간(간), 신장(신장), 방광, 췌장, 뇌 및 피부를 포함한 임의 유형의 세포를 치료할 수 있다.

예를 들어, 세포 샘플을 시험관내에서 성장시키고, 화합물을 상기 세포와 접촉시킨 후 이들 세포에 대한 화합물의 효과를 관찰할 수 있다. "효과"의 예로서, 세포의 형태학적 상태(예: 살아있거나 죽은 상태 등)가 결정될 수 있다. 화합물이 세포에 대해 영향을 발휘하는 것으로 밝혀진 경우, 이는 동일한 세포 유형의 세포를 수반하는 환자를 치료하는 방법에서 화합물의 효능에 대한 예후 또는 진단 마커로서 사용될 수 있다.

세포 증식 억제 방법 등에 사용

본원에 기재된 PPA 화합물은, 예를 들어, (a) 세포 증식을 조절(예: 억제)하고; (b) 세포 주기 진행을 억제하고; (c) 아폽토시스를 촉진하거나; 또는 (d) 이들 중 하나 이상의 조합이다.

본 발명의 하나의 양태는 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물의 유효량과 세포를 접촉시키는 단계를 포함하는, 시험관내 또는 생체내에서 세포 증식(예: 세포의 증식)을 조절(예: 억제)하거나, 세포 주기 진행을 억제하거나, 세포자멸사를 촉진하거나, 또는 이들 중 하나 이상의 조합에 관한 것이다.

하나의 구현예에서, 상기 방법은 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물의 유효량과 세포를 접촉시키는 단계를 포함하는, 시험관내 또는 생체내에서 세포 증식(예: 세포의 증식)을 조절(예: 억제)하는 방법이다.

하나의 구현예에서, 상기 방법은 시험관내에서 수행된다.

하나의 구현예에서, 상기 방법은 생체내에서 수행된다.

폐, 위장(예: 장, 결장 포함), 유방(유선), 난소, 전립선, 간(간), 신장(신장), 방광, 췌장, 뇌 및 피부를 포함하는 임의 유형의 세포를 치료할 수 있다.

당업자는 후보 화합물이 세포 증식 등을 조절(예: 억제)하는지 여부를 쉽게 결정할 수 있다. 예를 들어, 특정 화합물에 의해 제공되는 활성을 평가하는 데 편리하게 사용될 수 있는 검정이 본원에 기재되어 있다.

예를 들어, 세포 샘플(예: 종양으로부터)을 시험관내에서 성장시킬 수 있고, 화합물을 상기 세포와 접촉시킨 후 이들 세포에 대한 화합물의 효과를 관찰할 수 있다. "효과"의 예로서, 세포의 형태학적 상태(예: 살아있거나 죽은 상태 등)가 결정될 수 있다. 화합물이 세포에 대한 영향을 발휘하는 것으로 밝혀진 경우, 이는 동일한 세포 유형의 세포를 수반하는 환자를 치료하는 방법에서 화합물의 효능에 대한 예후 또는 진단 마커로 사용될 수 있다.

치료 방법에 사용

본 발명의 또 다른 양태는 요법에 의해 인간 또는 동물 신체를 치료하는 방법에 사용하기 위한, 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 장애(예: 질환)의 치료 방법에 사용하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물에 관한 것이다.

의약의 제조에 사용

하나의 구현예에서, 의약은 PPA 화합물을 포함한다.

치료 방법

본 발명의 또 다른 양태는 치료가 필요한 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 치료적 유효량의 PPA 화합물을, 바람직하게는 약제학적 조성물의 형태로 투여하는 단계를 포함하는, 치료 방법, 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 장애(예: 질환)의 치료 방법에 관한 것이다.

치료된 장애 - CDK와 관련된 장애

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13과 관련된 장애(예: 질환); CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 부적절한 활성으로 인한 장애(예: 질환); CDK 돌연변이, 특히 CDK12 및/또는 CDK13 돌연변이와 관련된 장애(예: 질환); CDK 과발현, 특히 CDK12 및/또는 CDK13 과발현과 관련된 장애(예: 질환); CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 상류 경로 활성화와 관련된 장애(예: 질환); CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 억제(예: 선택적 억제)에 의해 개선되는 장애(예: 질환)의 치료이다.

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13과 관련된 장애(예: 질환)의 치료이다.

하나의 구현예에서, 치료는 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 부적절한 활성으로 인한 장애(예: 질환)의 치료이다.

하나의 구현예에서, 치료는 CDK 돌연변이, 특히 CDK12 돌연변이; CDK 과발현, 특히 CDK12 및/또는 CDK13 과발현(예: 상응하는 정상 세포와 비교하여, 예를 들어, 과발현은 1.5, 2, 3, 5, 10, 20 또는 50배이다) 또는 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 상류 경로 활성화와 연관된 장애(예: 질환)의 치료이다.

하나의 구현예에서, 치료는 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 억제(예: 선택적 억제)에 의해 개선되는 장애(예: 질환)의 치료이다.

치료된 장애

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 증식성 장애, 암, 바이러스 감염(예: HIV), 신경퇴행성 장애(예: 알츠하이머병, 파킨슨병), 허혈, 신장 질환, 심혈관 장애(예: 죽상동맥경화증) 또는 자가면역 장애(예: 류마티스 관절염)의 치료이다.

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 세포에서 번역 기능 장애로 인한 장애(예: 질환), 예를 들어, 근이영양증, 근위축성 측삭 경화증, 척추 근위축증 및 취약성 X 증후군)의 치료이다.

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 이전 치료적 치료를 받았지만, 그러한 치료로부터 추가의 임상적 혜택을 거의 또는 전혀 받지 못한 환자의 장애(예: 질환)의 치료이다. 이는, 예를 들어, PARP 억제제, CDK 억제제 및/또는 HER2 지시 요법을 사용한 이전 치료적 치료를 받은 적이 있는 환자를 포함한다(참조: 예를 들어, Johnson　et　al., 2016; Choi　et　al., 2019).

치료된 장애 - 증식성 장애

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 증식성 장애의 치료이다.

본원에서 사용되는 용어 "증식성 장애"는 신생물 또는 과형성 성장과 같은 바람직하지 않은 과도하거나 비정상적인 세포의 원치 않는 또는 통제되지 않는 세포 증식과 관련된다.

하나의 구현예에서, 치료는 양성, 전악성 또는 악성 세포 증식을 특징으로 하는 증식성 장애의 치료이다.

하나의 구현예에서, 치료는 과형성(hyperplasia); 신생물(neoplasm); 종양(예: 조직세포종(histocytoma), 신경교종(glioma), 성상세포종(astrocyoma), 골종(osteoma)); 암; 건선; 뼈 질환; 섬유증식성 장애(fibroproliferative disorder)(예: 결합 조직의); 폐 섬유증(pulmonary fibrosis); 죽상동맥경화증; 또는 혈관의 평활근 세포 증식(예: 혈관성형술(angioplasty) 후 협착증(stenosis) 또는 재협착증)의 치료이다.

치료된 장애 - 암

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 암의 치료이다.

하나의 구현예에서, 치료는 암 전이의 치료이다.

암에는 다음이 포함된다:

(1) 층상 편평 상피로부터 유래된 종양(편평 세포 암종) 및 장기 또는 샘 내에서 발생하는 종양(선암종)을 포함하는 암종(carcinoma). 예는 유방, 결장, 폐, 전립선, 난소를 포함한다.

(2) 다음을 포함하는 육종: 골육종(osteosarcoma) 및 골형성 육종(osteogenic sarcoma)(뼈); 연골육종(chondrosarcoma)(연골); 평활근육종(leiomyosarcoma)(평활근); 횡문근육종(rhabdomyosarcoma)(골격근); 중피 육종(mesothelial sarcoma) 및 중피종(mesothelioma)(체강의 막성 내막); 섬유육종(fibrosarcoma)(섬유 조직); 혈관육종(angiosarcoma) 및 혈관내피종(haemangioendothelioma)(혈관); 지방육종(liposarcoma)(지방 조직); 신경교종 및 성상세포종(뇌에서 발견되는 신경인성 결합 조직); 점액육종(myxosarcoma)(원시 배아 결합 조직); 중간엽 및 혼합 중배엽 종양(혼합 결합 조직 유형).

(3) 골수종(myeloma).

(4) 다음을 포함하는 조혈 종양(Haematopoietic tumour): 골수성 및 과립구성 백혈병(myelogenous and granulocytic leukaemia)(골수성 및 과립구 백혈구 계열의 악성 종양), 예를 들어, 만성 골수성 백혈병(chronic myeloid leukemia; CML), 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia; AML); 림프, 림프구 및 림프모구성 백혈병(lymphatic, lymphocytic, and lymphoblastic leukaemia)(림프 및 림프구 혈액 세포 계열의 악성 종양), 예를 들어, 급성 림프모구성 백혈병(acute lymphoblastic leukemia; ALL), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukemia; CLL); 진성적혈구증가증(polycythaemia vera)(다양한 혈액 세포 산물의 악성 종양이지만 적혈구가 우세함).

(5) 다음을 포함한 림프종(Lymphoma): 호지킨 및 비호지킨 림프종(Hodgkin and Non-Hodgkin lymphoma).

(6) 예를 들어, 선편평 암종(adenosquamous carcinoma); 혼합 중배엽 종양; 발암육종(carcinosarcoma); 기형암종(teratocarcinoma)을 포함하는 혼합 유형.

예를 들어, 하나의 구현예에서, 치료는 유방암의 치료이다.

하나의 구현예에서, 암은 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13과 연관되어 있다.

하나의 구현예에서, 암은 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 부적절한 활성을 특징으로 하거나, 추가로 특징으로 한다.

하나의 구현예에서, 암은 CDK, 특히 CDK12 및/또는 CDK13의 과발현을 특징으로 하거나, 추가로 특징으로 한다.

하나의 구현예에서, 암은, 예를 들어, 17q12-q21 유전자좌가 증폭되는 단백질 HER2를 과발현하는 암을 포함하여, CDK12 및/또는 CDK13 유전자의 증폭을 특징으로 하거나, 추가로 특징으로 한다(참조: 예를 들어, Choi et al., 2019).

하나의 구현예에서, 암은, 예를 들어, EWS-FLI(참조: 예를 들어, Inigues　et　al., 2018), BCR-ABL, EML4-ALK, FGFR3-TACC3, KIF5B-RET, ETV6-RUNX1 또는 TMPRSS2-ERG의 유전자 융합을 갖는 암을 포함하여, 암을 출현시키는 유전자 융합을 특징으로 하거나, 추가로 특징으로 한다.

항암 효과는 세포 증식의 조절, 세포 주기 진행의 억제, 혈관신생(새로운 혈관의 형성)의 억제, 전이(종양의 원점으로부터의 확산)의 억제, 세포 이동(암 세포의 신체의 다른 부위로의 확산)의 억제, 침습(종양 세포의 이웃하는 정상 구조체로의 확산)의 억제, 아폽토시스(프로그램된 세포 사멸)의 촉진, 괴사에 의한 사망 또는 자가포식에 의한 사망의 유도를 포함하지만, 이에 제한되지 않는 하나 이상의 메카니즘을 통해 발생할 수 있다. 본원에 기재된 화합물은 본원에서 논의된 메커니즘과 무관하게 본원에 기재된 암의 치료에 사용될 수 있다.

치료된 장애 - DNA 복구

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는, 예를 들어, BRCA1, BRCA2, ATM, ATR, BAP1, CDK12, CDK13, CHK1, CHK2, FANCA, FANCC, FANCD2, FANCE, FANCF, FANCI, PALB2, NBS1, WRN, RAD51B, RAD51C, RAD51D, MRE11A, BLM, BRIP1을 포함하는 DNA 복구에 관여하는 단백질의 유전자의 과소 발현, 결함 및/또는 돌연변이를 갖는 환자의 장애(예: 질환)의 치료이다. 이는, 예를 들어, 종양이 "BRCAness"를 나타내는 암 환자를 포함한다(참조: 예를 들어, Lord et al., 2016).

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는, 예를 들어, XLF, RAD50, NBS1, MRE11, LIG4, XRCC4, POLL, POLM을 포함하는 비상동성 DNA 복구에 관여하는 단백질의 유전자의 과소 발현, 결함 및/또는 돌연변이를 갖는 환자 장애(예: 질환)의 치료이다.

치료된 장애 - 바이러스 감염

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에 사용하기 위한, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 바이러스 감염의 치료이다.

하나의 구현예에서, 치료는 다음에 의한 바이러스 감염의 치료이다:

(그룹 I:) dsDNA 바이러스, 예를 들어, 아데노바이러스, 헤르페스바이러스, 폭스바이러스;

(그룹 II:) ssDNA 바이러스, 예를 들어, 파보바이러스;

(그룹 III:) dsRNA 바이러스, 예를 들어, 레오바이러스;

(그룹 IV:) (+)ssRNA 바이러스, 예를 들어, 피코로나바이러스, 토가바이러스;

(그룹 V:) (-)ssRNA 바이러스, 예를 들어, 오르토믹소바이러스, 랍도바이러스);

(그룹 VI:) ssRNA-RT 바이러스, 예를 들어, 레트로바이러스; 또는

(그룹 VII:) dsDNA-RT 바이러스, 예를 들어, 헤파드나바이러스.

상기 사용된 바와 같이: ds: 이중 가닥; ss: +가닥; (+)ssRNA: +가닥 RNA; (-)ssRNA: -가닥 RNA; ssRNA-RT: 수명 주기에서 DNA 중간체를 갖는 (+가닥)RNA.

하나의 구현예에서, 치료는 인간 면역결핍 바이러스(HIV); B형 간염 바이러스(HBV); C형 간염 바이러스(HCV); 인간 유두종 바이러스(HPV); 사이토메갈로바이러스(CMV); 또는 엡스타인-바 바이러스(EBV); 카포시 육종(Kaposi sarcoma)과 관련된 인간 헤르페스바이러스 8(HHV); 콕사키바이러스 B3; 보르나 바이러스; 인플루엔자 바이러스의 치료이다.

치료된 장애 - 자가면역 장애

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 자가면역 장애의 치료이다.

하나의 구현예에서, 치료는 결합 조직, 관절, 피부 또는 눈과 관련된 자가면역 장애의 치료이다.

하나의 구현예에서, 치료는 류마티스 관절염, 전신성 홍반성 루푸스(systemic lupus erythematosus), 건선 또는 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome)의 치료이다.

치료된 장애 - 세포의 번역 기능 장애로 인한 장애

하나의 구현예에서(예: 치료 방법에서의 용도의, 의약 제조에서의 용도의, 치료 방법의), 치료는 세포의 번역 기능 장애로 인한 장애의 치료이다.

하나의 구현예에서, 치료는 근이영양증, 근긴장성 이영양증, 근위축성 측삭 경화증, 척수성 근위축증 또는 취약성 X 증후군의 치료이다.

치료

장애를 치료하는 맥락에서 본원에서 사용되는 용어 "치료"는 일반적으로 사람 또는 동물의 치료(예: 수의학적 적용)에 관한 것이며, 여기서 일부 목적하는 치료 효과가, 예를 들어, 장애의 진행의 억제를 달성하고, 진행 속도의 감소, 진행 속도의 중단, 장애의 증상의 완화, 장애의 개선 및 장애의 치료를 포함한다. 예방 조치(즉, 예방)로서의 치료도 포함된다. 예를 들어, 아직 장애가 발병하지는 않았지만 장애가 발병할 위험이 있는 환자에게 사용은 용어 "치료"에 포함된다.

예를 들어, 치료는 암의 예방, 암 발생률 감소, 암의 증상 완화 등을 포함한다.

본원에서 사용되는 용어 "치료적 유효량"은 목적하는 치료 섭생에 따라 투여되었을 때 합리적인 이익/위험 비율에 상응하는 일부 목적하는 치료 효과를 생성하는 데 효과적인 화합물, 또는 화합물을 포함하는 물질, 조성물 또는 투여 형태의 양에 관한 것이다.

병용 요법

용어 "치료"는 병용 치료 및 요법을 포함하고, 여기서 둘 이상의 치료 또는 요법이, 예를 들어, 순차적으로 또는 동시에 조합된다. 예를 들어, 본원에 기재된 화합물은 또한 병용 요법으로, 예를 들어, 다른 제제와 함께 사용될 수 있다. 치료 및 요법의 예는 화학요법(예를 들어, 약물, 항체(예: 면역요법에서와 같이), 프로드럭(예: 광역학 요법, GDEPT, ADEPT 등에서와 같이 포함)을 포함한 활성제의 투여); 수술; 방사선 요법; 광역학 요법; 유전자 요법; 및 조절 식이를 포함한다.

본 발명의 하나의 양태는 아래에 기재된 바와 같이, 하나 이상(예: 1, 2, 3, 4 등)의 추가 치료제와 조합된 본원에 기재된 화합물에 관한 것이다.

특정 조합은 숙련된 의사에게 공지된 일반적인 지식과 투약 섭생을 사용하여 투여량을 선택하는 의사의 재량에 따른다.

제제(즉, 본원에 기재된 화합물 및 하나 이상의 다른 약제)는 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있으며, 개별적으로 다양한 투여 스케줄로 상이한 경로를 통해 투여될 수 있다. 예를 들어, 순차적으로 투여될 때, 제제는 촘촘한 간격(예: 5-10분 기간에 걸쳐)으로 또는 더 긴 간격(예: 1, 2, 3, 4시간 이상 간격 또는 필요한 경우 심지어 더 긴 간격)으로 투여될 수 있으며, 정확한 투여 섭생은 치료제(들)의 특성에 상응한다.

제제(즉, 여기에 기재된 화합물 및 하나 이상의 다른 제제)는 단일 투여 형태로 함께 제형화될 수 있거나, 또는 대안적으로, 개별 제제는 개별적으로 제형화되어 임의로 사용 지침과 함께 키트 형태로 함께 제공될 수 있다.

본원에 기재된 PPA 화합물에 의한 치료와 함께 공동투여/병용될 수 있는 추가 제제/요법의 예는 다음을 포함한다:

DNA 복구 억제제; 예를 들어, PARP 억제제, 예를 들어, 올라파립, 니라파립 등;

면역 체크포인트 억제제; 예를 들어, PD1, PD1L, CTLA4 등의 억제제, 예를 들어, 펨브롤리주맙, 아테졸리주맙, 이필리무맙 등;

면역계를 자극하는 제제; 예를 들어, 톨-유사 수용체(TLR1-13) 작용제, 인터페론 유전자 자극제(STING) 작용제 등;

세포 주기 체크포인트 억제제; 예를 들어, ATM, ATR, Wee1 등의 억제제, 예를 들어, AZD0156, AZD1390, AZD6738, 아다보세르팁 등;

Her2 차단제; 예를 들어, 허셉틴, 퍼투주맙, 라파티닙 등;

전사 억제제; 예를 들어, BRD4, BRD2, CDK9 등의 억제제, 예를 들어, JQ-1, OTX015, AZD4573 등; 및

세포독성 화학요법제; 예를 들어, 탁산(탁솔이라고도 하는 파클리탁셀; 탁소테레라고도 하는 도세탁셀), 사이클로포스파미드, 항대사산물(예: 카보플라틴, 카페시타빈, 젬시타빈, 독소루비신, 에피루비신, 5-플루오로우라실 등).

따라서, 하나의 구현예에서, 치료는, 예를 들어, DNA 복구 억제제, 면역 체크포인트 억제제, 면역계를 자극하는 제제, 세포 주기 체크포인트 억제제, Her2 차단제, 전사 억제제, 세포독성 화학요법제 등인 추가의 활성제를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함한다.

본원에 기재된 PPA 화합물에 의한 치료와 함께 공동투여/병용될 수 있는 추가 제제/요법의 추가 예는 다음을 포함한다:

아로마타제 억제제; 예를 들어, 엑세메스탄(아로마신으로도 공지됨), 레트로졸(페마라로서도 공지됨), 아나스트로졸(아리미덱스로서도 공지됨) 등;

항에스트로겐; 예를 들어, 파슬로덱스(풀베스트란트 및 ICI182780으로도 공지됨), 타목시펜(놀바덱스로서도 공지됨), 하이드록시타목시펜 등; 및

항안드로겐; 예를 들어, 전립선암의 치료에 사용되는 항안드로겐, 예를 들어, 플루타미드, 엔잘루타미드, 아팔루타미드, 비칼루타미드, 닐루타미드 등.

기타 용도

본원에 기재된 PPA 화합물은 또한 CDK(예: CDK12 및/또는 CDK13)를 억제하기 위한 세포 배양 첨가제로서 사용될 수 있다.

본원에 기재된 PPA 화합물은 또한, 예를 들어, 후보 숙주가 문제의 화합물에 의한 치료로부터 혜택을 받을 수 있는지 여부를 결정하기 위해 시험관내 검정의 일부로서 사용될 수 있다.

본원에 기재된 PPA 화합물은 또한, 예를 들어, 다른 활성 화합물, 다른 CDK12 및/또는 CDK13 억제제 등을 식별하기 위해 검정에서 표준으로 사용될 수 있다.

키트

본 발명의 하나의 양태는 (a) 예를 들어, 바람직하게는 적절한 용기에 및/또는 적절한 포장으로 제공된, 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물, 또는 본원에 기재된 바와 같은 PPA 화합물을 포함하는 조성물; 및 (b) 사용 지침, 예를 들어, 화합물 또는 조성물의 투여 방법에 대한 서면 지침을 포함하는 키트에 관한 것이다.

서면 지침은 또한 활성 성분이 적합한 치료인 적응증의 목록도 포함할 수 있다.

투여 경로

PPA 화합물 또는 PPA 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 전신적/말초적이든 국소적이든(즉, 목적하는 작용 부위에) 임의의 편리한 투여 경로를 통해 대상체에게 투여될 수 있다.

투여 경로의 예는 경구(예: 섭취에 의해); 협측; 설하; 경피(예를 들어, 패치, 플라스터 등에 의함 포함); 경점막(예를 들어, 패치, 플라스터 등에 의함 포함); 비강 내(예: 비강 스프레이에 의해); 안구(예: 점안액에 의해); 폐(예: 예를 들어, 에어롤졸을 통해, 예를 들어, 입 또는 코를 통해 사용하는 흡입 또는 주입 요법에 의해); 직장(예: 좌약 또는 관장에 의해); 질(예: 페서리에 의해); 비경구, 예를 들어, 피하, 피내, 근육내, 정맥내, 동맥내, 심장내, 척수강내, 척추내, 캡슐내, 캡슐하, 안와내, 복강내, 기관내, 피하, 관절내, 지주막하 및 흉골내를 포함한 주사에 의해; 데포 또는 병원소의 이식에 의해, 예를 들어, 피하 또는 근육내를 포함한다.

대상체 /환자

대상체/환자는 척삭동물, 척추동물, 포유동물, 태반 포유동물, 유대류(예: 캥거루, 웜뱃), 설치류(예: 기니피그, 햄스터, 래트, 마우스), 뮤린(예: 마우스), 라고모프(예: 토끼), 조류(예: 새), 개과(예: 개), 고양이과(예: 고양이), 말과(예: 말), 돼지과(예: 돼지), 양과(예: 양), 소과(예: 소), 영장류, 시미안(예: 원숭이 또는 유인원), 원숭이(예: 마모셋, 개코원숭이), 유인원(예: 고릴라, 침팬지, 오랑우탄, 긴팔원숭이) 또는 인간일 수 있다.

또한, 대상체/환자는 이의 발달 형태 중의 어느 하나, 예를 들어, 태아일 수 있다.

하나의 바람직한 구현예에서, 대상체/환자는 인간이다.

제형

PPA 화합물이 단독으로 투여되는 것이 가능하지만, 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제, 부형제, 보조제, 충전제, 완충제, 방부제, 항산화제, 윤활제, 안정제, 가용화제, 계면활성제(예: 습윤제), 마스킹제, 착색제, 향미제 및 감미료를 포함하는, 당업자에게 익히 공지된 하나 이상의 다른 약제학적으로 허용되는 성분과 함께 본원에 기재된 바와 같은 적어도 하나의 PPA 화합물을 포함하는 약제학적 제형(예: 조성물, 제제, 의약)으로 제시하는 것이 바람직하다. 제형은 다른 활성제, 예를 들어, 다른 치료제 또는 예방제를 추가로 포함할 수 있다.

따라서, 본 발명은 상기 정의된 바와 같은 약제학적 조성물, 및 본원에 기재된 바와 같은 적어도 하나의 PPA 화합물을 당업자에게 익히 공지된 하나 이상의 다른 약제학적으로 허용되는 성분, 예를 들어, 담체, 희석제, 부형제 등과 함께 혼합하는 단계를 포함하는 약제학적 조성물을 제조하는 방법을 추가로 제공한다. 별개의 단위(예: 정제 등)로 제형화되는 경우, 각 단위는 소정량(투여량)의 화합물을 함유한다.

본원에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는"은 건전한 의학적 판단 범위 내에서 합리적인 이익/위험 비율에 상응하는, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 또는 기타 문제나 합병증 없이 해당 대상체(예: 인간)의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 화합물, 성분, 재료, 조성물, 투여 형태 등에 관한 것이다. 각 담체, 희석제, 부형제 등도 또한 제형의 다른 성분과 호환성이다는 의미에서 "허용 가능"해야 한다.

적합한 담체, 희석제, 부형제 등은 표준 약학 텍스트, 예를 들어, 문헌(Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th edition, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1990; 및 Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5th edition, 2005)에서 찾을 수 있다.

제형은 약학 분야에 익히 공지된 임의의 방법으로 제조될 수 있다. 이러한 방법은 화합물을 하나 이상의 보조 성분을 구성하는 담체와 결합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 제형은 화합물을 담체(예: 액체 담체, 미분된 고체 담체 등)와 균일하고 긴밀하게 결합시킨 다음, 필요한 경우, 생성물을 성형함으로써 제조된다.

제형은 신속 또는 느린 방출; 즉시, 지연, 시간 제한 또는 지속 방출; 또는 이들의 조합을 제공하도록 제조될 수 있다.

제형은 적합하게는 액체, 용액(예: 수성, 비수성), 현탁액(예: 수성, 비수성), 에멀젼(예: 수중유, 유중수), 엘릭서, 시럽, 연약, 구강청결제, 점적제, 정제(예를 들어, 코팅 정제 포함), 과립, 분말, 로젠지, 향정, 캡슐(예를 들어, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐 포함), 카셰, 환제, 앰플, 볼러스, 좌약, 페서리, 팅크제, 젤, 페이스트, 연고, 크림, 로션, 오일, 폼, 스프레이, 미스트 또는 에어로졸의 형태일 수 있다.

제형은 적합하게는 하나 이상의 화합물 및 임의로, 예를 들어, 침투, 투과 및 흡수 증진제를 포함하는 하나 이상의 다른 약제학적으로 허용되는 성분으로 함침되는 패치, 접착 플라스터, 붕대, 드레싱 등으로 제공될 수 있다. 제형은 또한 적합하게는 데포 또는 병원소의 형태로 제공될 수 있다.

화합물은 하나 이상의 다른 약제학적으로 허용되는 성분에 용해되거나, 이에 현탁되거나, 이와 혼합될 수 있다. 화합물은 화합물을 표적으로 하도록 설계된 리포좀 또는 기타 미립자, 예를 들어, 혈액 성분 또는 하나 이상의 장기에 제시될 수 있다.

경구 투여(예: 섭취에 의해)에 적합한 제형은 액체, 용액(예: 수성, 비수성), 현탁액(예: 수성, 비수성), 에멀젼(예: 수중유, 유중수), 엘릭서, 시럽, 연약, 정제, 과립, 분말, 캡슐, 카셰, 환제, 앰플, 볼러스를 포함한다.

협측 투여에 적합한 제형은 구강 청결제, 로젠지, 향정뿐만 아니라 패치, 접착 플라스터, 데포 및 병원소를 포함한다. 로젠지는 전형적으로 향이 첨가된 화합물, 일반적으로 수크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트를 포함한다. 향정은 전형적으로 젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로스 및 아카시아와 같은 불활성 매트릭스 에 화합물을 포함한다. 구강 청결제는 전형적으로 적절한 액체 담체에 화합물을 포함한다.

설하 투여에 적합한 제형은 정제, 로젠지, 향정, 캡슐 및 환제를 포함한다.

경구 경점막 투여에 적합한 제형은 액체, 용액(예: 수성, 비수성), 현탁액(예: 수성, 비수성), 에멀젼(예: 수중유, 유중수), 구강 청결제, 로젠지, 향정뿐만 아니라 패치, 접착 플라스터, 데포 및 병원소를 포함한다.

비경구 경점막 투여에 적합한 제형은 액체, 용액(예: 수성, 비수성), 현탁액(예: 수성, 비수성), 에멀젼(예: 수중유, 유중수), 좌약, 페서리, 젤, 페이스트, 연고, 크림, 로션, 오일뿐만 아니라 패치, 접착 플라스터, 데포 및 병원소를 포함한다.

경피 투여에 적합한 제형은 젤, 페이스트, 연고, 크림, 로션 및 오일뿐만 아니라 패치, 접착 플라스터, 붕대, 드레싱, 데포 및 병원소를 포함한다.

정제는 임의로 하나 이상의 보조 성분과 함께 통상적인 수단, 예를 들어, 압축 또는 성형에 의해 제조될 수 있다. 압축 정제는 적절한 기계로 화합물을 임의로 하나 이상의 결합제(예: 포비돈, 젤라틴, 아카시아, 소르비톨, 트라가칸트, 하이드록시프로필메틸 셀룰로스); 충전제 또는 희석제(예: 락토스, 미세결정성 셀룰로스, 인산수소칼슘); 윤활제(예: 마그네슘 스테아레이트, 활석, 실리카); 붕해제(예: 나트륨 전분 글리콜레이트, 가교결합된 포비돈, 가교결합된 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스); 표면 활성제 또는 분산제 또는 습윤제(예: 나트륨 라우릴 설페이트); 방부제(예: 메틸 p-하이드록시벤조에이트, 프로필 p-하이드록시벤조에이트, 소르브산); 향료, 향미 증진제 및 감미료와 혼합된, 분말 또는 과립과 같은 자유 유동성 형태로 압축시켜 제조할 수 있다. 정제는 불활성 액체 희석제로 습윤된 분말화 화합물의 혼합물을 적절한 기계로 성형하여 제조할 수 있다. 정제는 임의로 코팅되거나 스코어링될 수 있으며, 예를 들어, 목적하는 방출 프로파일을 제공하기 위해 다양한 비율로 하이드록시프로필메틸 셀룰로스를 사용하여 그 안의 화합물의 느린 또는 제어된 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다. 정제는 임의로, 예를 들어, 방출에 영향을 미치는 코팅, 예를 들어, 장용 코팅을 제공하여 위 이외의 장의 일부에 방출을 제공할 수 있다.

연고는 전형적으로 화합물과 파라핀계 또는 수혼화성 연고 기제로부터 제조된다.

크림은 전형적으로 화합물과 수중유 크림 기제로부터 제조된다. 원하는 경우, 크림 기제의 수성 상은, 예를 들어, 적어도 약 30% w/w의 다가 알코올, 즉 둘 이상의 하이드록실 그룹을 갖는 알코올, 예를 들어, 프로필렌 글리콜, 부탄-1,3-디올, 만니톨, 소르비톨, 글리세롤 및 폴리에틸렌 글리콜 및 이의 혼합물을 포함할 수 있다. 국소 제형은 바람직하게는 피부 또는 기타 영향을 받은 부위를 통한 화합물의 흡수 또는 침투를 향상시키는 화합물을 포함할 수 있다. 이러한 피부 침투 증진제의 예는 디메틸설폭사이드 및 관련 유사체를 포함한다.

에멀젼은 전형적으로 화합물과 유성 상으로부터 제조되며, 이는 임의로 단지 유화제(또는 유화제(emulgent)라고도 함)만 포함할 수 있거나 적어도 하나의 유화제와 지방 또는 오일 또는 지방과 오일 둘 다와의 혼합물을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 친수성 유화제는 안정제 역할을 하는 친유성 유화제와 함께 포함된다. 또한 오일과 지방을 모두 포함하는 것이 바람직하다. 안정제(들)를 포함하거나 포함하지 않고 유화제(들)는 함께 소위 유화성 왁스를 구성하고, 왁스는 오일 및/또는 지방과 함께 크림 제형의 유성 분산 상을 형성하는 소위 유화성 연고 기제를 구성한다.

적합한 유화제 및 에멀젼 안정제는 트윈 60, 스팬 80, 세토스테아릴 알코올, 미리스틸 알코올, 글리세릴 모노스테아레이트 및 나트륨 라우릴 설페이트를 포함한다. 제형에 적합한 오일 또는 지방의 선택은 약제학적 에멀젼 제형에 사용될 가능성이 높은 대부분의 오일에서 화합물의 용해도가 매우 낮을 수 있기 때문에 목적하는 화장품 특성을 달성하는 데 기반한다. 따라서, 크림은 바람직하게는 튜브 또는 기타 용기에서 누출되지 않도록 적절한 조도를 갖는 기름기가 없고 얼룩이 생기지 않으며 세척 가능한 제품이어야 한다. 직쇄 또는 분지형 쇄, 일- 또는 이염기성 알킬 에스테르, 예를 들어, 디-이소아디페이트, 이소세틸 스테아레이트, 코코넛 지방산의 프로필렌 글리콜 디에스테르, 이소프로필 미리스테이트, 데실 올레에이트, 이소프로필 팔미테이트, 부틸 스테아레이트, 2-에틸헥실 팔미테이트 또는 크로다몰 CAP로 공지된 분지형 쇄 에스테르의 블렌드가 사용될 수 있으며, 마지막 3개가 바람직한 에스테르이다. 이들은 필요한 특성에 따라 단독으로 또는 조합하여 사용될 수 있다. 대안적으로, 백색 연질 파라핀 및/또는 액체 파라핀 또는 기타 미네랄 오일과 같은 고융점 지질이 사용될 수 있다.

담체가 액체인 비강내 투여에 적합한 제형은, 예를 들어, 비강 스프레이, 비강 점적제를 포함하거나, 분무기에 의한 에어로졸 투여에 의해, 화합물의 수성 또는 유성 용액을 포함한다.

담체가 고체인 비강내 투여에 적합한 제형은, 예를 들어, 약 20 내지 약 500미크론 범위의 입자 크기를 갖는 조악한 분말로 제공되는 것들을 포함하며, 이는 코담배를 취하는 방식, 즉 코에 근접하여 유지되는 분말의 용기로부터 비강 통로를 통해 급속 흡입에 의해 투여된다.

폐 투여(예: 흡입 또는 주입 요법에 의한)에 적합한 제형은 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로-테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 기타 적합한 기체와 같은 적절한 추진제를 사용하여 가압 팩으로부터 에어로졸 스프레이로서 제공된 것들을 포함한다.

안구 투여에 적합한 제형은 화합물이 적절한 담체, 특히 화합물의 수성 용매에 용해되거나 현탁되는 점안액을 포함한다.

직장 투여에 적합한 제형은, 예를 들어, 천연 또는 경화 오일, 왁스, 지방, 반액체 또는 액체 폴리올, 예를 들어, 코코아 버터 또는 살리실레이트를 포함하는 적절한 염기를 갖는 좌약으로서; 또는 관장에 의한 치료를 위한 용액 또는 현탁액으로 제공될 수 있다.

질 투여에 적합한 제형은 페서리, 탐폰, 크림, 젤, 페이스트, 폼 또는 화합물 이외에 당업계에 적절하다고 공지된 이러한 담체를 함유하는 스프레이 제형으로서 제공될 수 있다.

비경구 투여(예: 주사에 의한)에 적합한 제형은 화합물이 용해, 현탁 또는 달리 제공되는(예: 리포좀 또는 기타 미립자에) 수성 또는 비수성, 등장성, 발열원 비함유 멸균 액체(예: 용액, 현탁액)를 포함한다. 이러한 액체는 제형을 의도된 수령자의 혈액(또는 기타 관련 체액)과 등장성이도록 하는 다른 약제학적으로 허용되는 성분, 예를 들어, 항산화제, 완충제, 방부제, 안정제, 정균제, 현탁제, 증점제 및 용질을 추가로 함유할 수 있다. 부형제의 예는, 예를 들어, 물, 알코올, 폴리올, 글리세롤, 식물성 오일 등을 포함한다. 이러한 제형에 사용하기에 적합한 등장성 담체의 예는 염화나트륨 주사제, 링거액 또는 락테이트화 링거 주사제를 포함한다. 전형적으로, 액체 내 화합물의 농도는 약 1ng/mL 내지 약 10μg/mL, 예를 들어, 약 10ng/mL 내지 약 1μg/mL이다. 제형은 단위 용량 또는 다중 용량 밀봉 용기, 예를 들어, 앰플 및 바이알에 제공될 수 있으며, 사용 직전에 멸균 액체 담체, 예를 들어, 주사용수의 첨가만을 필요로 하는 동결 건조(동결건조) 상태로 저장될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.

투여량

PPA 화합물, 및 PPA 화합물을 포함하는 조성물의 적절한 투여량은 환자마다 다를 수 있음이 당업자에 의해 인식될 것이다. 최적의 투여량을 결정하는 것은 일반적으로 임의의 위험 또는 유해한 부작용에 대한 치료적 이점 수준의 균형을 맞추는 것을 포함할 것이다. 선택된 투여량 수준은 특정 PPA 화합물의 활성, 투여 경로, 투여 시간, PPA 화합물의 배설 속도, 치료 기간, 조합하여 사용되는 다른 약물, 화합물 및/또는 재료, 장애의 중증도, 및 환자의 종, 성별, 나이, 체중, 상태, 일반 건강 및 이전 병력을 포함하는 다양한 요인에 따라 달라질 것이다. PPA 화합물의 양과 투여 경로는 궁극적으로 의사, 수의사 또는 임상의의 재량에 달려 있지만, 일반적으로 투여량은 상당한 유해하거나 해로운 부작용을 일으키지 않으면서 목적하는 효과를 달성하는 작용 부위에 국소 농도를 달성하기 위해 선택될 것이다.

투여는 치료 과정 전반에 걸쳐 연속적 또는 간헐적으로(예: 적절한 간격으로 분할된 용량으로) 1회 투여로 이루어질 수 있다. 투여의 가장 효과적인 수단 및 투여량을 결정하는 방법은 당업자에게 익히 공지되어 있으며, 요법에 사용되는 제형, 요법의 목적, 치료될 표적 세포(들) 및 치료될 대상체에 따라 달라질 것이다. 단일 또는 다중 투여는 치료 의사, 수의사 또는 임상의에 의해 선택된 용량 수준과 패턴으로 수행될 수 있다.

일반적으로, PPA 화합물의 적절한 용량은 1일당 대상체의 체중 1kg당 약 10μg 내지 약 250mg(보다 전형적으로 약 100μg 내지 약 25mg) 범위 내이다. 화합물이 염, 에스테르, 아미드, 프로드럭 등인 경우, 투여량은 모 화합물을 기준으로 계산되며, 따라서 사용되는 실제 중량은 비례적으로 증가된다.

화학적 합성

약어

aq: 수성;

BOC: 3급-부톡시카보닐;

Boc₂O: 디-3급-부틸 디카보네이트;

br: 넓은;

ca.: 약

d: 이중선;

^tBuBrettPhos Pd G3: [(2-디-3급-부틸포스피노-3,6-디메톡시-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-비페닐)-2-(2'-아미노-1,1'-비페닐)]팔라듐(II) 메탄설포네이트;

DCM: 디클로로메탄;

DCE: 1,2-디클로로에탄;

디옥산: 1,4-디옥산;

DIPEA: 디이소프로필에틸아민;

DMAP: 4-(디메틸아미노)피리딘;

EtOAc: 에틸 아세테이트;

EtOH: 에탄올;

h: 시간;

HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피;

IPA: 2-이소프로판올;

LCMS: 액체 크로마토그래피 - 질량 분석법;

LiHMDS: 리튬 헥사메틸디실라지드;

m: 다중선;

M: 몰, 분자 이온;

mCPBA: 3-클로로퍼벤조산;

MeCN: 아세토니트릴;

MeOH: 메탄올;

min: 분;

MS: 질량 분석법;

NCS: N-클로로석신이미드;

NIS: N-요오도석신이미드;

NMR: 핵 자기 공명;

Pd(dppf)Cl₂·DCM: [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II), 디클로로메탄과 복합체;

Pd-162: 클로로(크로틸)(트리-3급-부틸포스핀) 팔라듐(II);

Pd-171: 클로로(크로틸)(2-디사이클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시-1,1'-비페닐) 팔라듐(II)

q: 4중선;

RT: 실온(약 20℃);

R_T: 체류 시간;

Ruphos: 2-디사이클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시비페닐;

s: 단일선, 실선;

SCX: 강한 양이온 교환;

t: 삼중선;

TBME: 3급-부틸 메틸 에테르;

TFA: 트리플루오로아세트산;

THF: 테트라하이드로푸란;

UPLC/MS: 초고성능 액체 크로마토그래피 - 질량 분석법.

기타 약어는 이들의 일반적으로 허용되는 의미를 전달하도록 의도된다.

구조의 명명법은 ChemDraw® Professional 20(PerkinElmer)의 '구조 대 명칭' 변환을 사용하여 생성되었다.

일반적인 합성 방법

PPA 화합물의 화학적 합성 방법이 본원에 기재되어 있다. 이러한 방법 및/또는 기타 익히 공지된 방법은 PPA 화합물의 대안적인 또는 개선된 합성 방법을 제공하기 위해 공지된 방식으로 변형 및/또는 적응될 수 있다.

첫 번째 방법에서, 합성은 5,7-디클로로-3-피라졸로[1,5-a]피리미딘 유도체 I-1로 시작한다. 아민을 사용한 친핵성 방향족 치환은 상응하는 5-아미노-피라졸로피리미딘 I-2를 제공한다. 아미노 그룹의 Boc-보호는 중간체 I-3을 제공한다. 후자는 1차 또는 2차 아민과의 부흐발트-하르트비히(Buchwald-Hartwig) 교차 결합에 사용되어 중간체 I-4를 생성한다. 최종 글로벌 Boc-탈보호는 표적 화합물 I-5를 생성한다.

이 방법은 다음 화학식에 예시되어 있다.

반응식 1

상기 반응식에 대한 대표적인 반응 조건은 다음과 같다: (a) RNH₂, DIPEA, EtOH 또는 IPA, 50℃ 내지 90℃; (b) Boc₂O, DMAP, THF, RT 내지 60℃; (c) ^tBuBrettPhos Pd G3, LiHMDS, THF, 60℃; 또는 Pd-171, Cs₂CO₃, 디옥산, 90℃; (d) TFA, DCM, RT; 또는 HCl, 디옥산, RT 내지 40℃.

두 번째 방법에서, 중간체 I-3을 알코올과 함께 부흐발트-하르트비히 교차 결합에 사용하여 중간체 I-6을 생성한다. 최종 글로벌 Boc-탈보호는 표적 화합물 I-7을 생성한다.

이 방법은 다음 화학적 반응식에 예시되어 있다.

반응식 2

상기 반응식에 대한 대표적인 반응 조건은 다음과 같다: (a) RNH₂, DIPEA, EtOH 또는 IPA, 50℃ 내지 90℃; (b) Boc₂O, DMAP, THF, RT 내지 60℃; (c) Pd-171, Cs₂CO₃, 디옥산, 90℃; (d) TFA, DCM, RT; 또는 HCl, 디옥산, RT 내지 40℃.

세 번째 방법에서, 중간체 I-2를 1차 또는 2차 아민과 함께 부흐발트-하르트비히 교차 결합에 사용하여 중간체 I-8을 생성한다. 최종 글로벌 Boc-탈보호는 표적 화합물 I-5를 생성한다.

이 방법은 다음 화학적 반응식에 예시되어 있다.

반응식 3

상기 반응식에 대한 대표적인 반응 조건은 다음과 같다: (a) RNH₂, DIPEA, EtOH 또는 IPA, 50℃ 내지 90℃; (b) ^tBuBrettPhos Pd G3, LiHMDS, 디옥산, 90℃; (c) TFA, DCM, RT; 또는 HCl, 디옥산, RT 내지 40℃.

네 번째 방법에서, 중간체 I-2를 아민과 함께 친핵성 방향족 치환에 사용하여 I-8을 생성한다. 최종 글로벌 Boc-탈보호는 표적 화합물 I-5를 생성한다.

이 방법은 다음 화학적 반응식에 예시되어 있다.

반응식 4

상기 반응식에 대한 대표적인 반응 조건은 다음과 같다: (a) RNH₂, DIPEA, EtOH 또는 IPA, 50℃ 내지 90℃; (b) DIPEA, NMP, 120℃, 마이크로파; (c) TFA, DCM, RT; 또는 HCl, 디옥산, RT 내지 40℃.

다섯 번째 방법에서, 중간체 I-3을 내기시 교차 결합(Negishi cross-coupling)에 사용하여 I-12를 생성한다. 최종 글로벌 Boc-탈보호는 표적 화합물 I-13을 생성한다.

이 방법은 다음 화학적 반응식에 예시되어 있다.

반응식 5

상기 반응식에 대한 대표적인 반응 조건은 다음과 같다: (a) RNH₂, DIPEA, EtOH 또는 IPA, 50℃ 내지 90℃; (b) Boc₂O, DMAP, THF, RT 내지 60℃; (c) Pd(dppf)Cl₂, THF, 50℃; (d) TFA, DCM, RT; 또는 HCl, 디옥산, RT 내지 40℃.

여섯 번째 방법에서, 중간체 I-3을 스즈키 교차 결합(Suzuki cross-coupling)에 사용하여 I-12를 생성한다. 최종 글로벌 Boc-탈보호는 표적 화합물 I-13을 생성한다.

이 방법은 다음 화학 반응식에 예시되어 있다.

반응식 6

상기 반응식에 대한 대표적인 반응 조건은 다음과 같다: (a) RNH₂, DIPEA, EtOH , 50℃ 내지 90℃; (b) Boc₂O, DMAP, THF, RT 내지 60℃; (c) Pd(dppf)Cl₂, 제삼인산칼륨, 디옥산, 물, 90℃; (d) TFA, DCM, RT; 또는 HCl, 디옥산, RT 내지 40℃.

화학적 합성 실시예

다음 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위해 제공되며, 본원에 기재된 바와 같이 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 의도되지 않는다.

일반적 실험 조건

모든 출발 물질과 용매는 상업적 공급원으로부터 수득되거나 문헌 인용에 따라 제조되었다. 반응 혼합물은 달리 명시되지 않는 한 자기적으로 교반했다.

컬럼 크로마토그래피는 달리 명시되지 않는 한, Grace^TM GraceResolv^TM 사전 포장된 실리카(40μm) 카트리지를 사용하여 CombiFlash Rf 시스템과 같은 자동화 플래시 크로마토그래피 시스템에서 수행했다.

¹H NMR 스펙트럼은 브루커 Avance III 분광기(400MHz) r 브루커(500MHz)를 사용하여 기록했다. 화학적 이동은 잔류 양성자성 용매의 중심 피크 또는 테트라메틸실란의 내부 표준을 기준으로 사용하여 백만당 부로 표현했다. 스펙트럼은 달리 명시되지 않는 한 주위 온도에서 기록하였다.

체류 시간 및 관련 질량 이온을 결정하기 위한 분석적 LCMS 실험은 아래에 기재된 방법 1-8을 실행하는 질량 분석기와 결합된 Agilent 또는 Waters HPLC/UPLC 시스템을 사용하여 수행했다.

MeCN과 10mM 중탄산암모늄(aq)의 구배를 사용하여 Waters X-Bridge BEH C18, 5μm, 19x50mm 컬럼을 사용하여 분취용 HPLC 정제를 수행했다. 가변 파장 검출기로 측정된 단일 파장에서 UV로 검출한 후 분획을 수집했다.

SCX 수지는 시그마 알드리치(Sigma Aldrich) 또는 실리사이클(Silicycle)로부터 구입하였고, 사용 전에 MeOH로 세척했다.

분석 방법

방법 1:

LCMS_산성, 장치: Agilent 1260; 4차 펌프, HiP 샘플러, 컬럼 구획, DAD:260+/- 90nm, G6150 MSD: ESI; 컬럼: Waters Cortecs C18, 30 x 2.1mm, 2.7μm, 온도: 40℃, 유속: 1.35mL/min, 구배: t0 = 5% B, t2.5min = 100% B, t3.0min = 100% B, 용출액 A: 물 중 0.1% 포름산, 용출액 B: 아세토니트릴.

방법 2:

UPLC_산성, 장치: Waters HClass; 4차 용매 펌프, SM-FTN, CMA, PDA:210-400 nm, QDa: ACQ-QDa ESI; 컬럼: Waters CSH C18, 30 x 2.1mm, 1.7μm, 온도: 40℃, 유속: 0.77mL/min, 구배: t0 = 5% B, t3.0min = 95% B, 용출액 A: 물 중 0.1% 포름산, 용출액 B: 아세토니트릴.

방법 3:

UPLC_염기성, 장치: Waters HClass; 이진 용매 펌프, SM-FTN, CMA, PDA:210-400 nm, QDa: ACQ-QDa ESI; 컬럼: Waters BEH C18, 30 x 2.1mm, 1.7μm, 온도: 40℃, 유속: 0.77mL/min, 구배: t0 = 5% B, t3.0min = 95% B, 용출액 A: 물 중 0.1% NH₃ 또는 10nM 중탄산암모늄), 용출액 B: 아세토니트릴.

방법 4:

UPLC_산, 장치: Waters HClass; 4차 용매 펌프, SM-FTN, CMA, PDA:210-400 nm, QDa: ACQ-QDa ESI; 컬럼: Waters CSH C18, 30 x 2.1mm, 1.7μm, 온도: 40℃, 유속: 0.77mL/min, 구배: t0 = 2% B, t2.5min = 100% B, t3.0min = 100% B, 용출액 A: 물 중 0.1% 포름산, 용출액 B: 아세토니트릴.

방법 5:

UPLC_염기성, 장치: Waters HClass; 이진 용매 펌프, SM-FTN, CMA, PDA:210-400 nm, QDa: ACQ-QDa ESI; 컬럼: Waters BEH C18, 30 x 2.1mm, 1.7μm, 온도: 40℃, 유속: 0.77mL/min, 구배: t0 = 2% B, t2.5min = 100% B, t3.0min = 100% B, 용출액 A: 물 중 0.1% NH₃또는 10nm 중탄산암모늄, 용출액 B: 아세토니트릴.

방법 6:

UPLC_염기성, 장치: Waters HClass; 이진 용매 펌프, SM-FTN, CMA, PDA:210-400 nm, QDa: ACQ-QDa ESI; 컬럼: Waters BEH C18, 30 x 2.1mm, 1.7μm, 온도: 40℃, 유속: 0.77mL/min, 구배: t0 = 2% B, t9.5min = 100% B, t10.0min = 100% B, 용출액 A: 물 중 0.1% NH₃, 용출액 B: 아세토니트릴.

방법 7:

LCMS_산성, 장치: Agilent 1260; 이진 펌프, HiP 샘플러, 컬럼 구획, DAD:260+/- 90nm, G6150 MSD: ESI; 컬럼: Waters Cortecs C18, 30 x 2.1mm, 2.7μm, 온도: 40℃, 유속: 1.35mL/min, 구배: t0 = 5% B, t2.5min = 100% B, t3.0min = 100% B, 용출액 A: 물 중 0.1% 포름산, 용출액 B: 아세토니트릴.

방법 8:

LCMS_염기성, 장치: Agilent 1260; 이진 펌프, HiP 샘플러, 컬럼 구획, DAD:260+/- 90nm, G6150 MSD: ESI; 컬럼: Waters XBridge C18, 30 x 2.1mm, 2.5μm, 온도: 40℃, 유속: 1.35mL/min, 구배: t0 = 5% B, t2.5min = 100% B, t3.0min = 100% B, 용출액 A: 물 중 0.1% NH3, 용출액 B: 아세토니트릴.

합성 001

(3R,4R)-4-(((3-(이소프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -001)

단계 1/2

3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

DIPEA(0.34mL, 1.95mmol)를 디옥산(5.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(150mg, 0.65mmol) 및 (4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민, 2HCl(184mg, 0.72mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃로 2시간 동안 가열하였다. RT에서, DCM(25mL)과 물(10mL)을 첨가했다. 유기층을 분리하고, Na₂SO₄로 건조시키고 여과하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 THF(4.0mL)에 용해시켰다. DMAP(3.9mg, 33μmol) 및 BOC-무수물(171mg, 0.78mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 RT에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(219mg, 0.45mmol, 69% 수율, 99% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

LCMS(방법 1): m/z 478(M+H)⁺, R_T 2.80분.

단계 3/4

THF(3.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(58mg, 251μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(8.9mg, 10.5μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(209μL, 209μmol)를 첨가했다. 반응물을 진공하에 농축시켰고, 잔류물은 디옥산(3.0mL)에 용해시켰다. 염화수소(디옥산 중 4M)(5.0mL, 20mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 RT에서 1시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(28mg, 59μmol, 28% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 1): m/z 472(M+H)⁺, R_T 0.98분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.65 (ddd, J = 4.8, 1.8, 1.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.00 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.93 (dt, J = 8.1, 1.2 Hz, 1H), 7.90 - 7.81 (m, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.34 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.85 - 6.73 (m, 1H), 5.62 - 5.48 (m, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.62 - 3.46 (m, 1H), 3.23 - 3.14 (m, 1H), 3.13 - 3.04 (m, 1H), 3.00 - 2.89 (m, 2H), 2.89 - 2.82 (m, 1H), 2.44 - 2.35 (m, 1H), 2.30 - 2.21 (m, 1H), 1.63 - 1.55 (m, 1H), 1.45 - 1.31 (m, 1H), 1.23 (dd, J = 6.9, 5.8 Hz, 6H), 1.19 - 1.13 (m, 1H). 수중 1H.

합성 002

(3R,4R)-4-(((3-(이소프로필-7-((4-(피리딘-4-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -002)

단계 1:

5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(피리딘-4-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(1.5mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(80mg, 0.35mmol) 및 (4-(피리딘-4-일)페닐)메탄아민(77mg, 0.42mmol)의 용액에 DIPEA(0.35mL, 2.0mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(120mg, 0.25mmol, 73% 수율, 80% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 378(M+H)⁺, R_T 0.78분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-4-일)벤질)카바메이트

무수 THF(5.0mL) 중의 5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(피리딘-4-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(120mg, 255μmol) 및 BOC-무수물(98mg, 0.45mmol)의 용액에 DMAP(9mg, 74.6μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM(15mL)에서 희석시키고 염수(3 x 10mL)로 세척했다. 결합된 유기물을 상 분리기를 통해 여과하고, 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(76mg, 0.15mmol, 59% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 478(M+H)⁺, R_T 1.57분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-4-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-4-일)벤질)카바메이트(76mg, 135μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(38mg, 166μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(12mg, 13.5μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(195μL, 195μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 2시간 동안 60-65℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세척하였다. 여과액을 물(10mL)로 희석하고, 수성 층을 EtOAc(3 x 20mL)로 추출했다. 결합된 유기물을 염수(20mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 30-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(39mg, 55μmol, 17% 수율, 95% 순도)을 무색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 672(M+H)⁺, R_T 1.48분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.31mL, 1.22mmol)를 디옥산(0.5mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-4-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(43mg, 61μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(21mg, 42μmol, 69% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 472 (M+H)⁺, R_T 0.51분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.64 - 8.58 (m, 2H), 7.96 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.81 - 7.75 (m, 2H), 7.71 - 7.67 (m, 2H), 7.65 (s, 1H), 7.53 - 7.46 (m, 2H), 6.78 - 6.72 (m, 1H), 5.55 - 5.45 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.63 - 3.43 (m, 1H), 3.27 - 3.18 (m, 1H), 3.18 - 3.07 (m, 1H), 3.03 - 2.82 (m, 3H), 2.47 - 2.37 (m, 1H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 1.66 - 1.57 (m, 1H), 1.45 - 1.33 (m, 1H), 1.26 - 1.17 (m, 7H). 수중 1H.

합성 003

(3R,4R)-4-(((3-(이소프로필-7-((4-(피리딘-3-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -003)

단계 1:

5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(피리딘-3-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(1.5mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(80mg, 0.35mmol) 및 (4-(피리딘-3-일)페닐)메탄아민(77mg, 0.42mmol)의 용액에 DIPEA(0.35mL, 2.0mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(124mg, 0.26mmol, 75% 수율, 80% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.03 - 8.95 (m, 1H), 8.90 - 8.84 (m, 1H), 8.55 (dd,　J　= 4.7, 1.6 Hz, 1H), 8.08 - 8.01 (m, 2H), 7.75 - 7.67 (m, 2H), 7.58 - 7.49 (m, 2H), 7.49 - 7.45 (m, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.68 (d,　J　= 6.1 Hz, 2H), 3.09 (p,　J　= 6.9 Hz, 1H), 1.28 (d,　J　= 6.9 Hz, 6H).

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-3-일)벤질)카바메이트

무수 THF(5mL) 중의 5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(피리딘-3-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(124mg, 255μmol) 및 BOC-무수물(98mg, 0.45mmol)의 용액에 DMAP(9mg, 74.6μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM(15mL)에서 희석하고, 염수(3 x 10mL)로 세척했다. 결합된 유기물을 상 분리기를 통해 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(103mg, 183μmol, 66% 수율, 85% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 478(M+H)⁺, R_T 1.79분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-3-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-3-일)벤질)카바메이트(103mg, 183μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(52mg, 225μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(15.6mg, 18.3μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(225μL, 225μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 2시간 동안 60-65℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세척하였다. 여과액을 물(10mL)로 희석하고, 수성 층을 EtOAc(3 x 20mL)로 추출했다. 결합된 유기물을 염수(20mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 30-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(79mg, 110μmol, 33% 수율, 90% 순도)을 무색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 672(M+H)⁺, R_T 1.66분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.47mL, 1.89mmol)를 디옥산(1.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-3-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(79mg, 94μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(38mg, 76μmol, 80% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 2): m/z 472(M+H)⁺, R_T 0.58분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.89 - 8.86 (m, 1H), 8.56 (dd, J = 4.7, 1.6 Hz, 1H), 8.07 - 8.01 (m, 1H), 7.97 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.65 (s, 1H), 7.53 - 7.43 (m, 3H), 6.79 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.56 - 3.46 (m, 1H), 3.28 - 3.15 (m, 3H), 3.08 - 2.99 (m, 1H), 2.99 - 2.88 (m, 2H), 2.43 - 2.31 (m, 1H), 1.71 - 1.61 (m, 1H), 1.53 - 1.38 (m, 1H), 1.34 - 1.26 (m, 1H), 1.23 (dd, J = 6.9, 5.2 Hz, 6H). 수중 1H.

합성 004

(3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -004)

단계 1:

N-([1,1'-비페닐]-4-일메틸)-5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(1.4mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(81mg, 0.35mmol) 및 [1,1'-비페닐]-4-일메탄아민(77mg, 0.42mmol)의 용액에 DIPEA(0.37mL, 2.1mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 80℃로 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(95mg, 0.24mmol, 68% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 377(M+H)⁺, R_T 1.97분.

단계 2:

3급-부틸 ([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트

무수 THF(4.8mL) 중의 N-([1,1'-비페닐]-4-일메틸)-5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(95mg, 239μmol) 및 BOC-무수물(63mg, 287μmol)의 용액에 DMAP(5.8mg, 48μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열한 후, 더 많은 BOC-무수물(45mg, 210μmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 65℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM(15mL)에서 희석하고, 염수(3 x 10mL)로 세척했다. 결합된 유기물을 상 분리기를 통해 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(91mg, 180μmol, 75% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 421(M-^tBu+H)⁺, R_T 2.20분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 ([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(91mg, 180μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(62mg, 271μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(15.4mg, 18.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(217μL, 217μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 1.5시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세척하였다. 여과액을 물(10mL)로 희석하고, 수성 층을 EtOAc(3 x 20mL)로 추출했다. 결합된 유기물을 염수(20mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(95mg, 130μmol, 74% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 671(M+H)⁺, R_T 2.10분.

단계 4:

DCM(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(94mg, 130μmol)의 용액에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 Et₂O(2 x 3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(50mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(60mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(43mg, 90μmol, 67% 수율, 98% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 471(M+H)⁺, RT 1.57분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.91 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 5H), 7.49 - 7.41 (m, 4H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 6.74 - 6.68 (m, 1H), 5.34 - 5.27 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.49 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.59 - 3.45 (m, 1H), 3.25 - 3.15 (m, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.98 - 2.87 (m, 2H), 2.83 - 2.73 (m, 1H), 2.37 - 2.26 (m, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 1.62 - 1.51 (m, 1H), 1.37 - 1.28 (m, 1H), 1.23 (dd, J = 6.9, 5.0 Hz, 6H), 1.18 - 1.11 (m, 1H). 수중 1H.

합성 005

(3R,4R)-4-(((3-에틸-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -005)

단계 1:

5-클로로-3-에틸-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(4.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘(176mg, 0.81mmol) 및 (4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(150mg, 814μmol)의 용액에 DIPEA(0.99mL, 5.70mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 50℃로 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(179mg, 0.48mmol, 59% 수율, 98% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 365(M+H)⁺, R_T 1.58분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(5.0mL) 중의 5-클로로-3-에틸-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(179mg, 482μmol) 및 BOC-무수물(126mg, 579μmol)의 용액에 DMAP(11.8mg, 96μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-5% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(95mg, 180μmol, 38% 수율, 90% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 465(M+H)⁺, R_T 1.94분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(95mg, 200μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(57mg, 250μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(17mg, 20.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(270μL, 270μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 4시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하고, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 0-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(76mg, 110μmol, 55% 수율, 97% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 658(M+H)⁺, R_T 1.80분.

단계 4:

DCM(0.8mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(76mg, 120μmol)의 용액에 TFA(0.2mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 Et₂O(2 x 3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(38mg, 83μmol, 72% 수율, 99% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 458(M+H)⁺, RT 1.20분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.65 (dt, J = 4.6, 1.6 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.96 - 7.90 (m, 2H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.3, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.74 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 5.47 - 5.38 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.60 - 3.46 (m, 1H), 3.19 - 3.11 (m, 1H), 3.05 - 2.95 (m, 1H), 2.89 (dd, J = 11.6, 4.5 Hz, 1H), 2.82 - 2.73 (m, 1H), 2.48 - 2.44 (m, 2H), 2.34 - 2.25 (m, 1H), 2.15 (dd, 1H), 1.57 - 1.49 (m, 1H), 1.35 - 1.26 (m, 1H), 1.17 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 1.15 - 1.07 (m, 1H). 수중 1H.

합성 006

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -006)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(4.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(186mg, 814μmol) 및 (4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(150mg, 814μmol)의 용액에 DIPEA(0.99mL, 5.70mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 50℃로 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(239mg, 0.52mmol, 64% 수율, 82% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 376(M+H)⁺, R_T 1.59분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(6.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(239mg, 521μmol) 및 BOC-무수물(167mg, 765μmol)의 용액에 DMAP(15mg, 0.12mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-5% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(164mg, 0.32mmol, 62% 수율, 94% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 476(M+H)⁺, R_T 1.94분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(164mg, 345μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(95mg, 413μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(29mg, 34.5μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(448μL, 448μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 3시간 동안 60℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 0-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(124mg, 0.17mmol, 50% 수율, 93% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 670(M+H)⁺, R_T 1.80분.

단계 4:

DCM(1.2mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(124mg, 185μmol)의 용액에 TFA(0.3mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(44mg, 93μmol, 50% 수율, 99% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 470(M+H)⁺, RT 1.22분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.65 (ddd, J = 4.8, 1.9, 1.0 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.96 - 7.91 (m, 1H), 7.90 - 7.83 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.71 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 5.33 - 5.26 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.56 - 3.44 (m, 1H), 3.24 - 3.13 (m, 1H), 3.06 - 2.97 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 11.5, 4.5 Hz, 1H), 2.81 - 2.73 (m, 1H), 2.33 - 2.24 (m, 1H), 2.21 - 2.08 (m, 1H), 1.76 - 1.66 (m, 1H), 1.58 - 1.51 (m, 1H), 1.38 - 1.26 (m, 1H), 1.19 - 1.09 (m, 1H), 0.79 - 0.72 (m, 2H), 0.70 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 007

(3R,4R)-4-(((3-(이소프로필-7-((4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -007)

단계 1:

5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(피리미딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(75mg, 0.33mmol) 및 (4-(피리미딘-2-일)페닐)메탄아민(63mg, 0.34mmol)의 용액에 DIPEA(0.34mL, 2.0mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 75℃로 밤새 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(120mg, 0.30mmol, 92% 수율, 95% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 401(M+Na)⁺, R_T 1.65분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리미딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(피리미딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(120mg, 0.32mmol) 및 BOC-무수물(104mg, 0.48mmol)의 용액에 DMAP(2.1mg, 17μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(130mg, 0.26mmol, 81% 수율, 95% 순도)을 황색 폼으로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.98 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 8.89 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.37 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.06 (s, 1H), 7.53 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.72 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 3.09 (p, J = 6.9 Hz, 1H), 1.28 (d, J = 6.9 Hz, 6H).

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.5mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리미딘-2-일)벤질)카바메이트(130mg, 0.26mmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(69mg, 0.30mmol)의 용액을 5분 동안 N₂에서 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(23mg, 27.1μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(285μL, 285μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 1.5시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 15-75% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(108mg, 150μmol, 56% 수율, 95% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 673(M+H)⁺, R_T 1.83분.

단계 4:

(3R,4R)-4-(((3-이소프로필-7-((4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

염화수소(디옥산 중 4M)(0.61mL, 2.4mmol)를 디옥산(1.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(108mg, 0.16mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 2시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(60mg, 120μmol, 76% 수율, 96% 순도)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 3): m/z 473 (M+H)+, RT 1.24분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.89 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 8.37 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.94 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 6.70 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.31 - 5.24 (m, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.53 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.59 - 3.43 (m, 1H), 3.22 - 3.13 (m, 1H), 3.05 - 2.96 (m, 1H), 2.96 - 2.92 (m, 1H), 2.92 - 2.85 (m, 1H), 2.79 - 2.73 (m, 1H), 2.32 - 2.23 (m, 1H), 2.18 - 2.10 (m, 1H), 1.56 - 1.49 (m, 1H), 1.36 - 1.27 (m, 1H), 1.25 - 1.20 (m, 6H), 1.18 - 1.12 (m, 1H). 수중 1H.

합성 008

(3R,4R)-4-(((3-(이소프로필-7-((4-(피리미딘-4-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -008)

단계 1:

5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(피리미딘-4-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(1.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(34mg, 150μmol) 및 (4-(피리미딘-4-일)페닐)메탄아민(29mg, 74μmol)의 용액에 DIPEA(90μL, 520μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃로 2시간 동안 가열였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(32mg, 73μmol, 100% 수율, 87% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 379(M+H)⁺, R_T 1.54분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리미딘-4-일)벤질)카바메이트

무수 THF(1.0mL) 중의 5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(피리미딘-4-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(32mg, 84μmol) 및 BOC-무수물(22mg, 100μmol)의 용액에 DMAP(2.1mg, 17μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(23mg, 47μmol, 55% 수율, 97% 순도)을 무색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 379(M-Boc+H)⁺, R_T 1.87분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-4-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(1.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리미딘-4-일)벤질)카바메이트(23mg, 48μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(13mg, 58μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(4.1mg, 4.8μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(62μL, 62μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 75℃로 2시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(26mg, 37μmol, 78% 수율, 97% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 673(M+H)⁺, R_T 1.76분.

단계 4:

DCM(0.4mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-4-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(26mg, 37μmol)의 용액에 TFA(0.10mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(16mg, 32μmol, 86% 수율, 95% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 473(M+H)⁺, RT 1.15분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.23 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 8.84 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.06 (dd, J = 5.4, 1.4 Hz, 1H), 7.95 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.69 (s, 1H), 5.30 - 5.23 (m, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.54 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.57 - 3.43 (m, 1H), 3.22 - 3.14 (m, 1H), 3.06 - 2.97 (m, 1H), 2.97 - 2.92 (m, 1H), 2.92 - 2.85 (m, 1H), 2.79 - 2.72 (m, 1H), 2.32 - 2.22 (m, 1H), 2.19 - 2.10 (m, 1H), 1.58 - 1.49 (m, 1H), 1.30 (s, 1H), 1.23 (dd, J = 6.9, 5.0 Hz, 6H), 1.14 - 1.07 (m, 1H). 수중 1H.

합성 009

(4-(피리미딘-4-일)페닐)메탄아민

단계 A:

4-(피리미딘-4-일)벤조니트릴

4-클로로피리미딘, HCl(100mg, 662μmol), Pd(Ph₃P)₄(23mg, 19.9μmol), (4-시아노페닐)보론산(107mg, 729μmol) 및 탄산나트륨(211mg, 1.99mmol)을 톨루엔(5.0mL), 메탄올(2.5mL) 및 물(2.5mL)에 용해시켰다. 혼합물을 N₂로 15분 동안 살포한 다음, 100℃로 24시간 동안 가열한 후 RT로 냉각시켰다. 혼합물을 EtOAc(20mL)와 물(20mL)로 희석시켰다. 층을 분리하고 유기층을 염수(10mL)로 세척한 다음, MgSO₄로 건조시키고 여과한 다음 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(42mg, 220μmol, 33% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 182 (M+H)+, R_T 0.953분.

단계 B:

(4-(피리미딘-4-일)페닐)메탄아민

MeOH(20mL) 중의 4-(피리미딘-4-일)벤조니트릴(42mg, 0.23mmol)을 라니 니켈 카트리지를 사용하여 RT에서 4시간 동안 H-큐브에서 수소화하여 카트리지를 통해 혼합물을 재순환시켰다(유속: 1mL/min). 용매를 진공하에 농축시켜 표제 화합물(27mg, 69μmol, 30% 수율, 47% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 186 (M+H)+, R_T 0.67분.

합성 010

(3R,4R)-4-(((7-((4-(1H-피라졸-1-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -009)

단계 1:

N-(4-(1H-피라졸-1-일)벤질)-5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(120mg, 0.53mmol) 및 (4-(1H-피라졸-1-일)페닐)메탄아민(100mg, 0.58mmol)의 용액에 DIPEA(0.64mL, 3.67mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(170mg, 0.44mmol, 84% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 365(M+H)⁺, R_T 1.54분.

단계 2:

3급-부틸 (4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트

무수 THF(4.0mL) 중의 N-(4-(1H-피라졸-1-일)벤질)-5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(122mg, 466μmol) 및 BOC-무수물(122mg, 559μmol)의 용액에 DMAP(11mg, 93μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(158mg, 290μmol, 63% 수율, 86% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 365(M-Boc+H)⁺, R_T 1.87분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.0mL) 중의 3급-부틸 (4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(158mg, 340μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피리딘-1-카르복실레이트(86mg, 374μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(29mg, 34μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(0.44mL, 0.44mmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 3시간 동안 60℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(182mg, 0.26mmol, 77% 수율, 95% 순도)을 갈색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 659(M+H)⁺, R_T 1.76분.

단계 4:

DCM(2.2mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(182mg, 276μmol)의 용액에 TFA(0.80mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(81mg, 170μmol, 62% 수율, 97% 순도)을 크림색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 459 (M+H)+, RT 1.20분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.45 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.88 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.70 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 6.56 - 6.49 (m, 1H), 5.35 - 5.26 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.47 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.59 - 3.44 (m, 1H), 3.23 - 3.15 (m, 1H), 3.07 - 2.98 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 11.7, 4.5 Hz, 1H), 2.83 - 2.72 (m, 1H), 2.35 - 2.24 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 11.6, 9.9 Hz, 1H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.59 - 1.51 (m, 1H), 1.40 - 1.26 (m, 1H), 1.20 - 1.11 (m, 1H), 0.76 (dq, J = 8.2, 1.3 Hz, 2H), 0.69 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 011

5-((((3R,4R)-3-하이드록시피페리딘-4-일)메틸)아미노)-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

(PPA -010)

단계 1:

5-클로로-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

EtOH(4.0mL) 중의 5,7-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(173mg, 0.81mmol) 및 (4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(150mg, 0.81mmol)의 용액에 DIPEA(0.99mL, 5.70mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 50℃로 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(166mg, 0.45mmol, 55% 수율, 98% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 361(M+H)⁺, R_T 1.35분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(4.0mL) 중의 5-클로로-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(160mg, 443μmol) 및 BOC-무수물(116mg, 532μmol)의 용액에 DMAP(10.8mg, 89μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-5% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(120mg, 250μmol, 56% 수율, 95% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 461(M+H)⁺, R_T 1.71분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(120mg, 247μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(72mg, 310μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(22mg, 26μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(0.34mL, 0.34mmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(24g 카트리지, 20-80% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(113mg, 0.16mmol, 65% 수율, 93% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 655(M+H)⁺, R_T 1.67분.

단계 4:

DCM(0.90mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(113mg, 173μmol)의 용액에 TFA(0.30mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄했다. RP 분취용 HPLC(물 중 45-100% MeCN/0.3% NH₃)로 정제하여 표제 화합물(22mg, 46μmol, 27% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 455(M+H)⁺, RT 1.12분.

¹H는 50℃에서 수행했다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.65 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.05 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.99 - 7.91 (m, 1H), 7.91 - 7.81 (m, 2H), 7.50 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.38 - 7.26 (m, 1H), 7.03 - 6.94 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 4.62 - 4.53 (m, 3H), 3.50 (dt, J = 13.6, 4.8 Hz, 1H), 3.38 - 3.27 (m, 1H), 3.26 - 3.17 (m, 1H), 2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.41 (td, J = 12.1, 2.9 Hz, 1H), 2.33 - 2.25 (m, 1H), 1.78 - 1.66 (m, 1H), 1.54 - 1.43 (m, 1H), 1.24 - 1.11 (m, 1H). 수중 2H.

합성 012

(3R,4R)-4-(((3-이소프로필-7-((3-메틸-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -011)

단계 1:

5-클로로-3-이소프로필-N-(3-메틸-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(4.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(128mg, 217μmol) 및 (3-메틸-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(110mg, 555μmol)의 용액에 DIPEA(0.68mL, 3.89mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 50℃로 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(49mg, 88μmol, 40% 수율, 70% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 392(M+H)⁺, R_T 1.79분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(3-메틸-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(1.0mL) 중의 5-클로로-3-이소프로필-N-(3-메틸-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(49mg, 88μmol) 및 BOC-무수물(23mg, 110μmol)의 용액에 DMAP(2.1mg, 18μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(55mg, 75μmol, 86% 수율, 67% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 392(M-Boc+H)⁺, R_T 2.03분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(3-메틸-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(1.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(3-메틸-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(55mg, 75μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(31mg, 130μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(9.5mg, 11μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(0.14mL, 0.14mmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 2시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시키고, 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(4g 카트리지, 0-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(33mg, 48μmol, 64% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 686(M+H)⁺, R_T 1.89분.

단계 4:

DCM(0.75mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(3-메틸-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(33mg, 48μmol)의 용액에 TFA(0.25mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(13mg, 25μmol, 53% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 486 (M+H)+, RT 1.35분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.64 (ddd, J = 4.9, 1.8, 0.9 Hz, 1H), 7.94 - 7.81 (m, 2H), 7.64 (s, 1H), 7.54 - 7.46 (m, 1H), 7.39 - 7.31 (m, 2H), 7.31 - 7.21 (m, 2H), 6.78 - 6.68 (m, 1H), 5.47 - 5.23 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.47 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.62 - 3.45 (m, 1H), 3.24 - 3.16 (m, 1H), 3.09 - 2.99 (m, 1H), 2.99 - 2.87 (m, 2H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.36 - 2.25 (m, 4H), 2.17 (t, J = 10.6 Hz, 1H), 1.61 - 1.51 (m, 1H), 1.40 - 1.29 (m, 1H), 1.27 - 1.19 (m, 6H), 1.18 - 1.12 (m, 1H). 수중 1H.

합성 013

(3-메틸-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

3-메틸-4-(피리딘-2-일)벤조니트릴

2-브로모피리딘(250mg, 1.58mmol), (4-시아노-2-메틸페닐)보론산(331mg, 2.06mmol) Pd(dppf)Cl₂.DCM(129mg, 158μmol) 및 탄산칼륨(656mg, 4.75mmol)을 디옥산(9.0mL) 및 물(1.0mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 N₂로 15분 동안 살포시킨 다음, 90℃로 2시간 동안 가열한 후 RT로 냉각시켰다. 혼합물을 EtOAc(20mL)와 물(20mL)로 희석시켰다. 층을 분리하고 유기층을 염수(10mL)로 세척한 다음 MgSO₄로 건조시키고 여과한 다음 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(290mg, 1.3mmol, 85% 수율, 90% 순도)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.70 (ddd,　J　= 4.8, 1.8, 0.9 Hz, 1H), 7.98 - 7.91 (m, 1H), 7.87 - 7.80 (m, 1H), 7.76 (dd,　J　= 8.0, 1.7 Hz, 1H), 7.63 - 7.54 (m, 2H), 7.44 (ddd,　J　= 7.6, 4.8, 1.1 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H).

단계 B:

(3-메틸-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

MeOH/0.7M NH₃(20mL) 중의 3-메틸-4-(피리딘-2-일)벤조니트릴(143mg, 736μmol)을 라니 니켈 카트리지를 사용하여 40℃에서 3시간 동안 H-큐브에서 수소화하여 카트리지를 통해 혼합물을 재순환시켰다(유속: 1mL/min). 용매를 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(128mg, 250μmol, 34% 수율, 39% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 199(M+H)⁺, R_T 0.99분.

합성 014

(3R,4R)-4-(((3-이소프로필-7-((4-(3-메틸피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -012)

단계 1:

5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(3-메틸피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(40mg, 0.17mmol) 및 (4-(3-메틸피리딘-2-일)페닐)메탄아민(34mg, 0.17mmol)의 용액에 DIPEA(0.18mL, 1.0mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 75℃로 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(59mg, 150μmol, 86% 수율, 99% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 392 (M+H)+, R_T 1.73분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-메틸피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(3-메틸피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(59mg, 150μmol) 및 BOC-무수물(60mg, 270μmol)의 용액에 DMAP(4.0mg, 33μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(68mg, 0.13mmol, 88% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 492 (M+H)+, R_T 2.03분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-메틸피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-메틸피리딘-2-일)벤질)카바메이트(67mg, 129μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(36mg, 155μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(11.1mg, 12.9μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(155μL, 0.155mmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 4시간 동안 가열했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과한 후 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(67mg, 84μmol, 65% 수율, 85% 순도)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 686(M+H)⁺, R_T 1.98분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.40mL, 1.6mmol)를 디옥산(1.2mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-메틸피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(65mg, 81μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 염화수소(MeOH 중 1.25M)(1.0mL, 1.3mmol)를 첨가한 후 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄했다. RP 분취용 HPLC(물 중 55-100% MeCN/0.3% NH₃)로 추가 정제하여 표제 화합물(29mg, 59μmol, 73% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 3): m/z 486(M+H)⁺, RT 1.36분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.50 - 8.42 (m, 1H), 7.99 - 7.85 (m, 1H), 7.70 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.56 - 7.49 (m, 2H), 7.44 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.31 - 7.22 (m, 1H), 6.77 - 6.64 (m, 1H), 5.34 - 5.26 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.55 - 4.48 (m, 2H), 3.61 - 3.46 (m, 1H), 3.22 - 3.14 (m, 1H), 3.08 - 2.85 (m, 3H), 2.82 - 2.72 (m, 1H), 2.36 - 2.22 (m, 4H), 2.19 - 2.06 (m, 1H), 1.62 - 1.49 (m, 1H), 1.40 - 1.28 (m, 1H), 1.27 - 1.17 (m, 6H), 1.18 - 1.08 (m, 1H). 수중 1H.

합성 015

(4-(3-메틸피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

(4-(3-메틸피리딘-2-일)페닐)메탄아민

디옥산(2.5mL) 중의 2-클로로-3-메틸피리딘(60mg, 470μmol), (4-(아미노메틸)페닐)보론산, HCl(97mg, 517μmol) 및 Pd(dppf)Cl₂(34.4mg, 47.0μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(1.1mL) 중의 제삼인산칼륨(399mg, 1.88mmol)의 용액을 첨가하고 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 60℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 물(3mL)과 DCM/MeOH 90:10(10mL)으로 희석시켰다. 층을 분리하고 수성 층을 DCM/MeOH 90:10(5mL)으로 추출했다. 결합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(36mg, 0.18mmol, 38% 수율, 99% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 199(M+H)⁺, R_T 0.93분.

합성 016

(3R,4R)-4-(((3-이소프로필-7-((4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -013)

단계 1:

5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(2.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(60mg, 0.26mmol) 및 (4-(3-메톡시피리딘-2-일)페닐)메탄아민(62mg, 0.29mmol)의 용액에 DIPEA(0.27mL, 1.57mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 75℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(91mg, 0.19mmol, 73% 수율, 86% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 408 (M+H)+, R_T 1.68분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(3.8mL) 중의 5-클로로-3-이소프로필-N-(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(90mg, 190μmol) 및 BOC-무수물(53mg, 240μmol)의 용액에 DMAP(4.6mg, 38μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(80mg, 160μmol, 83% 수율, 99% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 508(M+H)⁺, R_T 2.01분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)카바메이트(80mg, 157μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(44mg, 189μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(13.5mg, 15.7μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(189μL, 189μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 2시간 동안 가열했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOH(EtOAc 중의 0-100% EtOH 25:75/이소헥산)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 30-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(83mg, 110μmol, 72% 수율, 96% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 702(M+H)⁺, R_T 1.86분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.59mL, 2.37mmol)을 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(83mg, 118μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(2 x 2mL)에서 분쇄한 다음, SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄했다. RP 분취용 HPLC(물 중 55-100% MeCN/0.3% NH₃)로 추가 정제하여 표제 화합물(53mg, 100μmol, 88% 수율, 98% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 3): m/z 502(M+H)⁺, RT 1.32분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.23 (dd, J = 4.6, 1.3 Hz, 1H), 7.90 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.64 (s, 1H), 7.54 (dd, J = 8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.34 (dd, J = 8.4, 4.6 Hz, 1H), 6.76 - 6.68 (m, 1H), 5.33 - 5.26 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.58 - 3.46 (m, 1H), 3.23 - 3.15 (m, 1H), 3.06 - 2.98 (m, 1H), 2.98 - 2.91 (m, 1H), 2.91 - 2.86 (m, 1H), 2.81 - 2.73 (m, 1H), 2.32 - 2.25 (m, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 1.61 - 1.50 (m, 1H), 1.37 - 1.27 (m, 1H), 1.23 (dd, J = 6.9, 5.1 Hz, 6H), 1.19 - 1.11 (m, 1H). 수중 1H.

합성 017

(4-(3-메톡시피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

(4-(3-메톡시피리딘-2-일)페닐)메탄아민

디옥산(8.0mL) 중의 2-클로로-3-메톡시피리딘(200mg, 1.39mmol), (4-(아미노메틸)페닐)보론산, HCl(287mg, 1.53mmol) 및 Pd(dppf)Cl₂(102mg, 139μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(3.4mL) 중 제삼인산칼륨 용액(1.18g, 5.57mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 밤새 60℃로 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 염수(15mL)와 DCM/IPA 70:30(30mL)으로 희석시켰다. 층을 분리하고, 수성 층을 DCM/IPA 70:30(2 x 30mL)으로 추출했다. 결합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(110mg, 0.52mmol, 38% 수율, 99% 순도)을 적색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 215(M+H)⁺, R_T 0.96분.

합성 018

(3R,4R)-4-(((7-((4-(3-플루오로피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -014)

단계 1:

5-클로로-N-(4-(3-플루오로피리딘-2-일)벤질)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(2.8mL) 중의 5,7-디클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(75mg, 0.33mmol) 및 (4-(3-플루오로피리딘-2-일)페닐)메탄아민(80mg, 0.38mmol)의 용액에 DIPEA(0.34mL, 1.96mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 80℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(111mg, 0.27mmol, 82% 수율, 96% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 396(M+H)⁺, R_T 1.78분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-플루오로피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(5.4mL) 중의 5-클로로-N-(4-(3-플루오로피리딘-2-일)벤질)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(110mg, 278μmol) 및 BOC-무수물(79mg, 361μmol)의 용액에 DMAP(6.8mg, 56μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(136mg, 0.25mmol, 89% 수율, 90% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 396(M-Boc+H)⁺, R_T 2.08분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-플루오로피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.2mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-이소프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-플루오로피리딘-2-일)벤질)카바메이트(136mg, 247μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(68mg, 296μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(21.1mg, 24.7μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(296μL, 296μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 2시간 동안 가열했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, EtOAc 중의 0-100% EtOH 25:75/이소헥산)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 30-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(152mg, 0.20mmol, 82% 수율, 92% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 690(M+H)⁺, R_T 1.92분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.10mL, 4.41mmol)를 디옥산(2.2mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-플루오로피리딘-2-일)벤질)아미노)-3- 이소프로필피라졸[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(152mg, 220μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반한 후 염화수소(MeOH 중 1.25M)(1.0mL, 1.3mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 30분 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(2 x 2mL)에서 분쇄한 다음, SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(83mg, 0.17mmol, 75% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 490(M+H)⁺, RT 1.74분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.53 (dt, J = 4.6, 1.7 Hz, 1H), 7.94 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 8.3, 1.7 Hz, 2H), 7.82 (ddd, J = 11.7, 8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.53 - 7.43 (m, 3H), 6.75 - 6.68 (m, 1H), 5.31 - 5.25 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.52 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.57 - 3.45 (m, 1H), 3.21 - 3.14 (m, 1H), 3.06 - 2.98 (m, 1H), 2.97 - 2.91 (m, 1H), 2.91 - 2.85 (m, 1H), 2.81 - 2.73 (m, 1H), 2.31 - 2.23 (m, 1H), 2.14 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.59 - 1.50 (m, 1H), 1.39 - 1.26 (m, 1H), 1.23 (dd, J = 6.9, 5.0 Hz, 6H), 1.19 - 1.11 (m, 1H). 수중 1H.

합성 019

(4-(3-플루오로피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

(4-(3-플루오로피리딘-2-일)페닐)메탄아민

디옥산(6.7mL) 중의 2-브로모-3-플루오로피리딘(200mg, 1.14mmol), (4-(아미노메틸)페닐)보론산, HCl(234mg, 1.25mmol) 및 Pd(dppf)Cl₂(83mg, 114μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(2.9mL) 중 제삼인산칼륨 용액(965mg, 4.55mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 밤새 60℃로 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 물(5mL)과 DCM/MeOH 90:10(15mL)으로 희석시켰다. 층을 분리하고 수성 층을 DCM/MeOH 90:10(2 x 10mL)으로 추출했다. 결합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 진공하에 농축시켰다. 오일을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켜 표제 화합물(165mg, 0.79mmol, 61% 수율, 97% 순도)을 적색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 203(M+H)⁺, R_T 0.93분.

합성 020

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -015)

단계 1: 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(6.0mL) 중의 3-메톡시-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(140mg, 653μmol) 및 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(135mg, 594μmol)의 용액에 DIPEA(0.73mL, 4.16mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(105mg, 0.25mmol, 41% 수율, 95% 순도)을 백색 결정성 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 406(M+H)⁺, R_T 1.59분.

단계 2: 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(105mg, 259μmol) 및 DMAP(6.3mg, 52μmol)의 용액에 BOC-무수물(68mg, 310μmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(112mg, 0.21mmol, 81% 수율, 95% 순도)을 녹색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 506(M+H)⁺, R_T 1.91분.

단계 3: 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(112mg, 221μmol) 및 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(61mg, 266μmol)의 용액을 N₂로 10분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(19mg, 22μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(288μL, 288μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 2.5시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(147mg, 0.18mmol, 81% 수율, 85% 순도)을 갈색 유리로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 663(M+H)⁺, R_T 1.61분.

단계 4: (3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

TFA(1.0mL)를 DCM(3.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(147mg, 210μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(73mg, 0.14mmol, 66% 수율, 95% 순도)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 500 (M+H)+, R_T 1.59분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.65 - 8.60 (m, 1H), 7.88 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.85 - 7.74 (m, 2H), 7.69 (d, J = 7.9, 2.1 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.03 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.76 - 6.69 (m, 1H), 5.36 - 5.27 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.49 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.58 - 3.45 (m, 1H), 3.25 - 3.17 (m, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.95 - 2.87 (m, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.35 - 2.26 (m, 1H), 2.20 - 2.12 (m, 1H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.60 - 1.52 (m, 1H), 1.39 - 1.28 (m, 1H), 1.20 - 1.11 (m, 1H), 0.79 - 0.74 (m, 2H), 0.70 - 0.59 (m, 2H). 수중 1H.

합성 021

(3-메톡시-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

4-시아노-2-메톡시페닐 트리플루오로메탄설포네이트

트리플루오로메탄설폰산 무수물(0.73mL, 4.36mmol)을 0℃에서 DCM(15mL) 중의 3,4-하이드록시-3-메톡시벤조니트릴(500mg, 3.35mmol) 및 트리에틸아민(509mg, 701μL, 1.5 Eq, 5.03mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 포화 NaHCO₃(20mL)로 희석하고, DCM(3 x 10mL)으로 추출했다. 결합된 유기 분획을 염수(50mL)로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고 여과한 후, 진공하에 농축시켜 표제 화합물(938mg, 3.20mmol, 95% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.91 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H).

단계 B:

3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤조니트릴

DMF(15.0mL) 중의 2-(트리부틸스타닐)피리딘(1.47g, 4.00mmol), 4-시아노-2-메톡시페닐트리플루오로메탄설포네이트(938mg, 3.34mmol), Pd(Ph₃P)₄(385mg, 334μmol) 및 염화리튬(141mg, 3.34mmol)의 용액을 15분 동안 N₂로 탈기시켰다. 버블링을 중단하고, 반응 혼합물을 90℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 혼합물을 RT로 냉각시킨 다음, 물(50mL)과 염수(50mL)로 희석하고 MTBE(3 x 50mL)로 추출했다. 결합된 유기층을 염수(50mL)로 세척한 다음, MgSO₄로 건조시키고 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(233mg, 0.94mmol, 28% 수율, 85% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 211(M+H)⁺, R_T 1.16분.

단계 C:

(3-메톡시-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

0℃에서 THF(8.0mL) 중의 3-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤조니트릴(155mg, 627μmol)의 용액에 LiAlH₄(Et2O 중 4M)(180μL, 720μmol)를 첨가했다. 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반한 후 RT로 예열하고 15분 동안 추가로 교반했다. 발포가 중단될 때까지 혼합물을 메탄올로 급냉시킨 다음 혼합물을 물(100mL)로 희석하고 DCM(3 x 50mL)으로 추출했다. 결합된 유기층을 염수(50mL)로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고 여과하고 진공하에 농축시켜 표제 화합물(140mg, 0.52mmol, 83% 수율, 80% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 215(M+H)⁺, R_T 0.93분.

합성 022

(3R,4R)-4-(((3-클로로-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -016)

단계 1:

3,5-디클로로-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(10.0mL) 중의 3,5,7-트리클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘(240mg, 1.08mmol) 및 (4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민, HCl(238mg, 1.08mmol)의 용액에 DIPEA(1.1mL, 6.47mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 70℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(206mg, 0.55mmol, 51% 수율, 99% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 370(M+H)⁺, R_T 1.52분.

단계 2:

3급-부틸 (3,5-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

THF(10mL) 중의 3,5-디클로로-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(207mg, 560μmol) 및 BOC-무수물(175mg, 802μmol)의 용액에 DMAP(13.7mg, 0.112mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 1.5시간 20분 동안 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 25% EtOH)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(274mg, 0.55mmol, 98% 수율, 94% 순도)을 황색 검으로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 470(M+H)⁺, R_T 1.87분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.5mL) 중의 3급-부틸 (3,5-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(270mg, 574μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(145mg, 631μmol)의 용액을 5분 동안 N₂로 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(49mg, 57μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(603μL, 603μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 2시간 동안 60℃로 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(324mg, 0.46mmol, 81% 수율, 95% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 664(M+H)⁺, R_T 2.15분.

단계 4:

HCl(디옥산 중 4M)(1.81mL, 7.23mmol)을 디옥산(3.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(320mg, 482μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(87mg, 0.17mmol, 36% 수율, 93% 순도)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 464(M+H)⁺, R_T 1.55분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.62 (m, 1H), 8.13 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.96 - 7.91 (m, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.89 - 7.83 (m, 1H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.37 - 7.30 (m, 1H), 6.96 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 5.29 (s, 1H), 5.08 - 5.00 (m, 1H), 4.52 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.46 - 3.35 (m, 1H), 3.29 - 3.22 (m, 1H), 3.07 - 2.99 (m, 1H), 2.94 - 2.86 (m, 1H), 2.81 - 2.73 (m, 1H), 2.35 - 2.23 (m, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 1.62 - 1.54 (m, 1H), 1.38 - 1.27 (m, 1H), 1.17 - 1.03 (m, 1H). 수중 1H.

합성 023

(3R,4R)-4-(((7-((4-(1H-피롤-1-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -017)

단계 1:

N-(4-(1H-피롤-1-일)벤질)-5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(2.5mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(90.0mg, 395μmol) 및 (4-(1H-피롤-1-일)페닐)메탄아민(81.6mg, 474μmol)의 용액에 DIPEA(412μL, 2.37mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(135mg, 0.35mmol, 88% 수율, 93% 순도)을 황색 검으로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 364(M+H)⁺, R_T 2.12분.

단계 2:

3급-부틸 (4-(1H-피롤-1-일)벤질)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트

DMAP(8.98mg, 73.5μmol)를 THF(6.80mL) 중의 N-(4-(1H-피롤-1-일)벤질)-5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(135mg, 367μmol) 및 BOC-무수물(104mg, 478μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc 중 25% EtOH/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(183mg, 0.35mmol, 96% 수율, 89% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 408(M+H-tBu)⁺, R_T 2.04분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((4-(1H-피롤-1-일)벤질)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(4.0mL) 중의 3급-부틸 (4-(1H-피롤-1-일)벤질)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(183mg, 0.351mmol) 및 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(97mg, 0.421mmol)를 5분 동안 N₂로 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(30mg, 35μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(421μL, 0.421mmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 3시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 75:25/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(139mg, 0.20mmol, 57% 수율, 94% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 658(M+H)⁺, R_T 1.91분.

단계 4:

HCl(디옥산 중 4M)(1.08mL, 4.33mmol)을 디옥산(2.80mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((4-(1H-피롤-1-일)벤질)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(150mg, 217μmol)의 용액에 첨가했다. 현탁액을 40℃에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 DCM/MeOH(1:2; 120mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(1:2; 150mL) 중의 DCM/0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(71mg, 0.15mmol, 69% 수율, 97% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 458(M+H)⁺, R_T 1.41분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.87 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.56 - 7.50 (m, 3H), 7.42 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.32 (t, J = 2.2 Hz, 2H), 6.74 - 6.67 (m, 1H), 6.24 (t, J = 2.2 Hz, 2H), 5.34 - 5.29 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.45 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.55 - 3.45 (m, 1H), 3.24 - 3.15 (m, 1H), 3.07 - 2.98 (m, 1H), 2.95 - 2.87 (m, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.32 - 2.26 (m, 1H), 2.16 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.76 - 1.66 (m, 1H), 1.59 - 1.52 (m, 1H), 1.40 - 1.27 (m, 1H), 1.20 - 1.11 (m, 1H), 0.79 - 0.72 (m, 2H), 0.68 - 0.59 (m, 2H). 수중 1H.

합성 024

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(티아졸-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -018)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(티아졸-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(1.2mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(80.0mg, 351μmol) 및 (4-티아졸-2-일페닐)메탄아민 HCl(95.4mg, 421μmol)의 용액에 DIPEA(550μL, 3.16mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 25% EtOH)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(125mg, 0.31mmol, 90% 수율, 96% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 382(M+H)⁺, R_T 1.63분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(티아졸-2-일)벤질)카바메이트

THF(6.4mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(티아졸-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(124mg, 0.325mmol) 및 BOC-무수물(92mg, 423μmol)의 용액에 DMAP(7.9mg, 65.0μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 25% EtOH)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(151mg, 0.29mmol, 90% 수율, 93% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 482(M+H)⁺, R_T 2.04분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(티아졸-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.8mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(티아졸-2-일)벤질)카바메이트(148mg, 286μmol) 및 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(79mg, 343μmol)의 용액을 5분 동안 N₂로 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(24.4mg, 28.6μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(343μL, 343μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 2시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 25% EtOH/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(150mg, 0.21mmol, 73% 수율, 94% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 676(M+H)⁺, R_T 1.84분.

단계 4:

HCl(디옥산 중 4M)(1.05mL, 4.22mmol)을 디옥산(2.80mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(티아졸-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(150mg, 211μmol)의 용액에 첨가했다. 현탁액을 40℃에서 1시간 동안 교반한 후 HCl(메탄올 중 1.25M)(1.00mL, 1.25mmol)을 첨가하고, 40℃에서 30분 동안 추가로 교반했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(150mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(150mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(90mg, 0.18mmol, 88% 수율, 98% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 476(M+H)⁺, R_T 1.42분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.95 - 7.88 (m, 4H), 7.77 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.70 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.32 - 5.26 (m, 1H), 5.15 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.23 - 3.14 (m, 1H), 3.07 - 2.97 (m, 1H), 2.93 - 2.86 (m, 1H), 2.81 - 2.73 (m, 1H), 2.34 - 2.23 (m, 1H), 2.18 - 2.10 (m, 1H), 1.75 - 1.66 (m, 1H), 1.59 - 1.50 (m, 1H), 1.38 - 1.26 (m, 1H), 1.19 - 1.05 (m, 1H), 0.81 - 0.71 (m, 2H), 0.70 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 025

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(5-플루오로피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -019)

단계 1/2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(5-플루오로피리딘-2-일)벤질)카바메이트

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(100mg, 438μmol) 및 (4-(5-플루오로피리딘-2-일)페닐)메탄아민(102mg, 504μmol)의 용액에 DIPEA(0.46mL, 2.63mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃에서 밤새 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피 실리카 겔(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 중간체 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(5-플루오로피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민을 수득하였다.

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(5-플루오로피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민을 THF(2.5mL)에 용해시킨 후, BOC-무수물(87.3mg, 400μmol) 및 DMAP(3.26mg, 26.7μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피 실리카 겔(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(115mg, 0.22mmol, 50% 수율, 95% 순도)을 황색 폼으로 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.62 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.00 (dd, J = 8.9, 4.4 Hz, 1H), 7.99 - 7.92 (m, 2H), 7.79 (td, J = 8.8, 3.0 Hz, 1H), 7.45 - 7.39 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 1.96 (tt, J = 8.3, 5.1 Hz, 1H), 1.28 (s, 9H), 0.97 - 0.86 (m, 2H), 0.82 - 0.72 (m, 2H).

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(5-플루오로피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.8mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(5-플루오로피리딘-2-일)벤질)카바메이트(116mg, 222μmol) 및 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(61mg, 266μmol)의 용액을 N₂로 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(19mg, 22μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(267μL, 267μmol)를 버블링 N₂하에 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 2시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 25% EtOH/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(97mg, 0.14mmol, 61% 수율, 96% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 688(M+H)⁺, R_T 1.88분.

단계 4:

HCl(디옥산 중 4M)(0.67mL, 2.7mmol)을 디옥산(1.8mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(5-플루오로피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(96mg, 0.13mmol)의 용액에 첨가했다. 현탁액을 40℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, HCl(MeOH 중 1.25M)(1.00mL, 1.25mmol)을 첨가하고 40℃에서 30분 동안 추가로 교반했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 DCM/MeOH(1:2; 120mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH 중의 DCM/0.7M NH3(1:2; 150mL)로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(61.5mg, 0.12mmol, 91% 수율, 97% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3: m/z 488 (M+H)⁺, R_T 1.49분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.63 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 8.05 - 7.97 (m, 3H), 7.90 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.84 - 7.77 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.74 - 6.68 (m, 1H), 5.36 - 5.26 (m, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.56 - 3.44 (m, 1H), 3.23 - 3.16 (m, 1H), 3.07 - 2.98 (m, 1H), 2.94 - 2.87 (m, 1H), 2.81 - 2.74 (m, 1H), 2.32 - 2.24 (m, 1H), 2.19 - 2.12 (m, 1H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.59 - 1.50 (m, 1H), 1.39 - 1.27 (m, 1H), 1.19 - 1.11 (m, 1H), 0.79 - 0.73 (m, 2H), 0.69 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 026

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -020)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(38mg, 0.15mmol) 및 (2-플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(30mg, 0.15mmol)의 용액에 DIPEA(0.15mL, 0.88mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃에서 밤새 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(40mg, 96μmol, 66% 수율, 95% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 394(M+H)⁺, R_T 1.68분.

단계 2:

3급-부틸 (5-아미노-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(40mg, 0.10mmol) 및 DMAP(2.5mg, 20μmol)의 용액에 BOC-무수물(27mg, 0.12mmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(43mg, 86μmol, 85% 수율, 99% 순도)을 진한 녹색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 494(M+H)⁺, R_T 1.99분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(1.5mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(40.0mg, 81.0μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(28.0mg, 121μmol) 및 탄산세슘(79.2mg, 243μmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(1.6mg, 2.4μmol)과 Ruphos 포스판(1.3mg, 2.8μmol)을 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시킨 후, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(39mg, 50μmol, 62% 수율, 89% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 688(M+H)⁺, R_T 1.92분.

단계 4:

((3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(39mg, 50μmol)의 용액에 HCl(디옥산 중 4M)(126μL, 505μmol)를 첨가했다. 현탁액을 35℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(140mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(16mg, 32μmol, 64% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 488(M+H)⁺, R_T 1.53분.

합성 027

(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

디옥산(9.0mL) 및 물(1.0mL) 중의 2-브로모피리딘(60μL, 633μmol), (4-(아미노메틸)-3-플루오로페닐)보론산(118mg, 696μmol), Pd(dppf)Cl₂.DCM(52mg, 63μmol) 및 탄산세슘(206mg, 633μmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 물(50mL)로 희석시키고, EtOAc(2 x 25mL)로 추출하고 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 결합된 유기층을 MgSO₄로 건조시키고 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(38mg, 0.17mmol, 26% 수율, 88% 순도)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 6): m/z 203(M+H)⁺, R_T 1.98분.

합성 028

(3R,4R)-4-(((7-(([2,3'-비피리딘]-6'-일메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -021)

단계 1:

N-([2,3'-비피리딘]-6'-일메틸)-5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(8.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(130mg, 572μmol) 및 [2,3'-비피리딘]-6'-일메탄아민, 2HCl(211mg, 572μmol)의 용액에 DIPEA(698μL, 4.01mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(96mg, 0.24mmol, 42% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.25 - 9.20 (m, 1H), 8.82 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 8.73 - 8.66 (m, 1H), 8.44 (dd, J = 8.2, 2.3 Hz, 1H), 8.08 - 8.00 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.92 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 1H), 7.41 (ddd, J = 7.5, 4.8, 1.1 Hz, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.79 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 1.96 - 1.84 (m, 1H), 0.93 - 0.80 (m, 2H), 0.84 - 0.71 (m, 2H).

단계 2:

3급-부틸 ([2,3'-비피리딘]-6'-일메틸)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트

BOC-무수물(67mg, 0.31mmol)을 THF(3.0mL) 중의 N-([2,3'-비피리딘]-6'-일메틸)-5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(96mg, 0.25mmol) 및 DMAP(6.2mg, 51μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(84mg, 0.16mmol, 62% 수율, 90% 순도)을 녹색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 477(M+H)⁺, R_T 2.15분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([2,3'-비피리딘]-6'-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 ([2,3'-비피리딘]-6'-일메틸)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(84mg, 0.18mmol)(150mg, 311μmol) 및 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(49mg, 0.21mmol)의 용액을 5분 동안 N₂로 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(15mg, 18μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(0.23mL, 0.23mmol)를 첨가했다. 반응물을 10분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 2시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(93mg, 0.13mmol, 75% 수율, 95% 순도)을 갈색 유리로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 671(M+H)⁺, R_T 2.03분.

단계 4:

TFA(0.5mL)를 DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([2,3'-비피리딘]-6'-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(93mg, 0.14mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(150mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(39.9mg, 81μmol, 58% 수율, 96% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 471(M+H)⁺, R_T 0.62분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.23 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.74 - 8.66 (m, 1H), 8.42 (dd, J = 8.2, 2.4 Hz, 1H), 8.06 - 8.01 (m, 1H), 7.94 - 7.90 (m, 1H), 7.90 - 7.82 (m, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.43 - 7.38 (m, 1H), 6.79 - 6.72 (m, 1H), 5.38 - 5.26 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.66 - 4.56 (m, 2H), 3.60 - 3.43 (m, 1H), 3.24 - 3.16 (m, 1H), 3.09 - 3.00 (m, 1H), 2.91 (dd, J = 11.5, 4.6 Hz, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.36 - 2.27 (m, 1H), 2.22 - 2.13 (m, 1H), 1.77 - 1.68 (m, 1H), 1.60 - 1.51 (m, 1H), 1.41 - 1.28 (m, 1H), 1.26 - 1.10 (m, 1H), 0.81 - 0.73 (m, 2H), 0.71 - 0.59 (m, 2H). 수중 1H.

합성 029

[2,3'-비피리딘]-6'-일메탄아민 2HCl

단계 A:

[2,3'-비피리딘]-6'-카보니트릴

2-(트리부틸스타닐)피리딘(529μL, 1.64mmol), 5-브로모피콜리노니트릴(250mg, 1.37mmol), Pd(Ph₃P)₄(158mg, 137μmol) 및 염화리튬(58mg, 1.37mmol)을 DMF(5.0mL)에 용해시켰다. 혼합물을 N₂로 10분 동안 살포한 다음 90℃로 18시간 동안 가열한 후 RT로 냉각시켰다. 혼합물을 포화 LiCl 수용액(40mL)과 물(40mL)로 희석시킨 다음, MTBE(2 x 40mL)로 추출했다. 유기층을 염수(40mL)로 세척한 다음 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(146mg, 0.76mmol, 56% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 182 (M+H)+, R_T 1.23분.

단계 B:

[2,3'-비피리딘]-6'-일메탄아민 2HCl

HCl(MeOH 중 1.25M)(20mL) 중의 [2,3'-비피리딘]-6'-카보니트릴(139mg, 767μmol)을 탄소 카트리지 상 10% 팔라듐을 사용하여 RT에서 1.5시간 동안 H-큐브에서 수소화하여 혼합물을 카트리지를 통해 재순환시켰다(유속: 1mL/min). 용매를 진공하에 농축시켜 표제 화합물(211mg, 0.57mmol, 75% 수율, 70% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 186(M+H)⁺, R_T 0.75분.

합성 030

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((3-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -022)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(3-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(1.4mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(80mg, 351μmol) 및 (3-플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(82mg, 389μmol)의 용액에 DIPEA(367μL, 2.10mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 25% EtOH)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(93mg, 0.21mmol, 59% 수율, 88% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 394(M+H)⁺, R_T 1.60분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(3-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

THF(4.6mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(3-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(93mg, 208μmol) 및 BOC-무수물(59mg, 270μmol)의 용액에 DMAP(5.1mg, 42μmol)를 첨가했다. 생성된 반응 혼합물을 65℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 25% EtOH)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(94mg, 0.16mmol, 79% 수율, 87% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 494(M+H)⁺, R_T 1.98분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(3-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(3-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(93mg, 185μmol) 및 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(51mg, 221μmol)의 용액을 5분 동안 N₂로 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(15.8mg, 18.5μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(221μL, 221μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 4시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 25% EtOH)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(36mg, 50μmol, 27% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 688(M+H)⁺ , R_T 1.84분.

단계 4:

디옥산(1.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(3-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(33.5mg, 48.7μmol)의 용액에 HCl(디옥산 중 4M)(244μL, 974μmol)을 첨가했다. 현탁액을 40℃에서 2시간 동안 교반한 후 메탄올 중 HCl(MeOH 중 1.25M)(1.00mL, 1.25mmol)을 첨가하고 30분 동안 추가로 교반했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(100mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(20mg, 40μmol, 82% 수율, 97% 순도)을 회색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 488 (M+H)+, R_T 1.31분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.73 - 8.65 (m, 1H), 7.99 - 7.85 (m, 3H), 7.79 - 7.73 (m, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.43 - 7.36 (m, 1H), 7.34 - 7.25 (m, 2H), 6.72 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.31 - 5.24 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.57 - 3.41 (m, 1H), 3.25 - 3.17 (m, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.94 - 2.86 (m, 1H), 2.82 - 2.74 (m, 1H), 2.35 - 2.24 (m, 1H), 2.18 - 2.11 (m, 1H), 1.76 - 1.67 (m, 1H), 1.59 - 1.51 (m, 1H), 1.38 - 1.26 (m, 1H), 1.18 - 1.06 (m, 1H), 0.79 - 0.73 (m, 2H), 0.70 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 031

(3-플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

3-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤조니트릴

2-브로모피리딘(250mg, 151μL, 1.58mmol), (4-시아노-2-플루오로페닐)보론산(346mg, 2.06mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(116mg, 158μmol)를 디옥산(7.0mL)에 용해시켰다. 혼합물을 10분 동안 N₂로 살포한 다음, 물(778μL) 중 탄산칼륨(656mg, 4.75mmol)의 용액을 첨가하고, N2를 추가로 5분 동안 반응 혼합물을 통해 버블링시켰다. 혼합물을 90℃ ON으로 가열한 후 RT로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc(20mL)로 희석하고, 셀라이트 상에서 여과했다. 여과물을 물(10mL)로 추가로 희석시키고, EtOAc(2x 15mL)로 추출했다. 결합된 유기물을 염수(2 x 15mL)로 세척하고 MgSO₄로 건조시키고 여과하고 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc 중의 25% EtOH/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(297mg, 1.4mmol, 89% 수율, 94% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 199 (M+H)+, R_T 1.16분.

단계 B:

(3-플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

MeOH(19mL) 중의 3-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤조니트릴(142mg, 573μmol)과 아세트산(1.00mL, 17.4mmol)을 탄소 카트리지 상 10% 팔라듐을 사용하여 45℃에서 2.5시간 동안 H-큐브에서 수소화(수소 압력은 30bar로 설정됨)하여 카트리지를 통해 혼합물을 재순환했다(유속: 1mL/min). 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다(MeCN과 동시 증발). 조물질을 침전시키고 빙욕에서 MeCN으로 분쇄하였다. 현탁액을 여과하고 고체를 감압하에 건조시켜 표제 화합물(82mg, 0.33mmol, 48% 수율, 80% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 203(M+H)⁺, R_T 1.12분.

합성 032

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(2-메틸-1H-이미다졸-1-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -023)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(2-메틸-1H-이미다졸-1-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(1.4mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(80.0mg, 351μmol) 및 (4-(2-메틸-1H-이미다졸-1-일)페닐)메탄아민(78.8mg, 421μmol)의 용액에 DIPEA(367μL, 2.10mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 25% EtOH)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(121mg, 0.31mmol, 89% 수율, 97% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 379(M+H)⁺, R_T 1.69분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(2-메틸-1H-이미다졸-1-일)벤질)카바메이트

THF(6.2mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(2-메틸-1H-이미다졸-1-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(121mg, 310μmol) 및 BOC-무수물(88mg, 403μmol)의 용액에 DMAP(7.6mg, 62μmol)를 첨가했다. 생성된 반응 혼합물을 65℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 25% EtOH)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(105mg, 0.21mmol, 67% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 479(M+H)⁺, R_T 2.04분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(2-메틸-1H-이미다졸-1-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.4mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(2-메틸-1H-이미다졸-1-일)벤질)카바메이트(105mg, 219μmol) 및 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(60.6mg, 263μmol)의 용액을 5분 동안 N₂로 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(18.7mg, 21.9 μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(263μL, 263μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60-65℃로 2시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 25% EtOH)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(90mg, 0.13mmol, 59% 수율, 96% 순도)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 673(M+H)⁺, R_T 1.20분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(631μL, 2.52mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(2-메틸-1H-이미다졸-1-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(87mg, 126μmol)의 용액에 첨가했다. 현탁액을 40℃에서 2시간 동안 교반하였다. 염화수소(MeOH 중 1.25M)(0.80mL, 1.00mol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 30분 동안 교반했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(150mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(150mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(53mg, 0.11mmol, 84% 수율, 95% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 473(M+H)⁺, R_T 1.12분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.92 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.51 - 7.47 (m, 2H), 7.43 - 7.39 (m, 2H), 7.24 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.71 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.32 - 5.25 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.54 - 3.44 (m, 1H), 3.27 - 3.19 (m, 1H), 3.09 - 2.99 (m, 1H), 2.95 - 2.88 (m, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.35 - 2.23 (m, 4H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 1.76 - 1.66 (m, 1H), 1.62 - 1.54 (m, 1H), 1.39 - 1.27 (m, 1H), 1.19 - 1.08 (m, 1H), 0.79 - 0.71 (m, 2H), 0.69 - 0.61 (m, 2H). 수중 1H.

합성 033

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-(((1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -024)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-((1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(70mg, 0.31mmol) 및 (1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메탄아민(58mg, 0.31mmol)의 용액에 DIPEA(0.32mL, 1.8mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(87mg, 0.23mmol, 74% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.70 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 8.47 (ddd, J = 4.8, 1.8, 1.0 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.84 - 7.72 (m, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.17 (ddd, J = 6.8, 4.8, 1.7 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.71 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 3.73 (s, 3H), 1.89 (tt, J = 8.4, 5.2 Hz, 1H), 0.92 - 0.83 (m, 2H), 0.78 - 0.70 (m, 2H).

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)카바메이트

THF(1.5mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-((1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(85mg, 0.22mmol) 및 DMAP(1.5mg, 45μmol)의 용액에 BOC-무수물(73mg, 0.34mmol)을 첨가했다. 생성된 반응 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(105mg, 0.21mmol, 95% 수율, 97% 순도)을 황색 폼으로 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 480(M+H)⁺, R_T 1.83분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.5mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)카바메이트(104mg, 217μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(55mg, 238μmol) 및 ^tBuBrettPhos Pd G3(18.5mg, 21. 7μmol )의 용액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. LiHMDS(THF 중 1M)(228μL, 228μmol)를 버블링 N₂하에 한번에 첨가했다. 5분 후 버블링을 중단하고, 반응 혼합물을 60℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 크로마토그래피(12g 카트리지, 15-80% MeCN/10mM 중탄산암모늄)로 정제하여 표제 화합물(57mg, 84μmol, 39% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 674(M+H)⁺, R_T 1.88분.

단계 4:

염산(디옥산 중 4M)(0.32mL, 1.3mmol)을 디옥산(1.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(57mg, 85μmol)의 용액에 첨가했다. 현탁액을 35℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(14mg, 29μmol, 34% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 474(M+H)⁺, R_T 1.04분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.50 - 8.42 (m, 1H), 7.90 - 7.84 (m, 1H), 7.76 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.66 - 7.59 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.21 - 7.12 (m, 1H), 6.89 - 6.74 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 5.36 - 5.20 (m, 1H), 4.55 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.60 - 3.45 (m, 1H), 3.28 - 3.18 (m, 1H), 3.10 - 3.00 (m, 1H), 2.94 - 2.86 (m, 1H), 2.82 - 2.74 (m, 1H), 2.34 - 2.25 (m, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.63 - 1.55 (m, 1H), 1.42 - 1.31 (m, 1H), 1.22 - 1.08 (m, 1H), 0.80 - 0.71 (m, 2H), 0.71 - 0.58 (m, 2H). 수중 1H.

합성 034

(1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메탄아민

단계 A:

3급-부틸 ((4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)카바메이트

물(400μL) 중의 K₂CO₃(330mg, 2.38mmol)의 용액을 THF(4.0mL) 중의 3급-부틸 (2-아미노-2-이미노에틸)카바메이트, HCl(100mg, 477μmol) 및 2-브로모-1-(피리딘-2-일)에탄-1-온, HBr(134mg, 477μmol)의 혼합물에 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃에서 밤새 교반했다. 반응 혼합물을 물(2mL)로 희석시키고, EtOAc(10mL, 2 x 5mL)로 추출했다. 결합된 유기 분획을 염수(50mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고 여과시킨 다음, 진공하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 상 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(80mg, 0.28mmol, 58% 수율, 95% 순도)을 갈색 오일로서 수득했다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 275(M+H)⁺, R_T 0.96분.

단계 B:

3급-부틸 ((1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)카바메이트

0℃에서, 수소화나트륨(66mg, 1.65mmol)을 DMF(4.0mL) 중의 3급-부틸 ((4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)카바메이트(432mg, 1.57mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 후 요오도메탄(224mg, 1.57mmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(10mL)로 희석시킨 후, DCM/MeOH(90:10)(40ml)로 추출했다. 유기 분획을 염수(3 x 15mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고 여과한 다음, 진공하에 농축시켰다. 조생성물을 RP 플래시 C18 상(40g 카트리지, 15-50% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(204mg, 0.67mmol, 43% 수율, 95% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 289(M+H)⁺, R_T 1.16분.

단계 C:

(1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메탄아민

디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 ((1-메틸-4-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-2-일)메틸)카바메이트(200mg, 694μmol)의 용액에 HCl(디옥산 중 4M)(2.60mL, 10.4mmol)을 첨가했다. 현탁액을 35℃에서 밤새 교반했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(133mg, 0.64mmol, 92% 수율, 90% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.79 (s, 2H), 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.26 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.60 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 4.29 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.85 (s, 3H).

합성 035

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-(((1-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -025)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-((1-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(50mg, 219μmol) 및 (1-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-일)메탄아민(47mg, 241μmol)의 용액에 DIPEA(0.23mL, 1.32mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(43mg, 0.12mmol, 53% 수율, 99% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 366(M+H)⁺, R_T 1.32분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((1-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-일)메틸)카바메이트

THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-((1-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(43mg, 0.12mmol) 및 DMAP(2.9mg, 24μmol)의 용액에 BOC-무수물(31mg, 0.14mmol)을 첨가했다. 생성된 반응 혼합물을 RT에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(38mg, 80μmol, 68% 수율, 98% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 466(M+H)⁺, R_T 1.67분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((1-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((1-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-일)메틸)카바메이트(38mg, 81.6μmol) 및 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(23mg, 98μmol)의 용액을 N₂로 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3 (7.0mg, 8.2μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(106μL, 106μmol)를 첨가했다. 반응물을 10분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 3시간 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(46mg, 56μmol, 69% 수율, 81% 순도)을 무색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 660(M+H)⁺, R_T 1.59분.

단계 4:

염산(디옥산 중 4M)(0.17mL, 0.70mmol)을 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((1-(피리딘-2-일)-1H-이미다졸-4-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(46mg, 70μmol)의 용액에 첨가했다. 현탁액을 35℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(21mg, 44μmol, 63% 수율, 96% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 6): m/z 460(M+H)⁺, R_T 2.67분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.52 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 8.48 - 8.45 (m, 1H), 8.00 - 7.95 (m, 1H), 7.83 - 7.78 (m, 2H), 7.50 (s, 1H), 7.47 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 7.40 - 7.32 (m, 1H), 6.81 - 6.73 (m, 1H), 5.36 (s, 1H), 4.44 - 4.35 (m, 2H), 3.60 - 3.46 (m, 1H), 3.26 - 3.17 (m, 1H), 3.10 - 2.98 (m, 2H), 2.98 - 2.88 (m, 1H), 2.85 - 2.76 (m, 1H), 2.33 - 2.28 (m, 1H), 2.22 - 2.12 (m, 1H), 1.76 - 1.68 (m, 1H), 1.62 - 1.56 (m, 1H), 1.39 - 1.30 (m, 1H), 1.22 - 1.13 (m, 1H), 0.80 - 0.70 (m, 2H), 0.68 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 036

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-(((6-페닐피리딘-3-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -026)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-((6-페닐피리딘-3-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(4.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(169mg, 740μmol) 및 (6-페닐피리딘-3-일)메탄아민(150mg, 814μmol)의 용액에 DIPEA(902μL, 5.18mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(219mg, 0.52mmol, 71% 수율, 90% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 376(M+H)⁺ , R_T 2.04분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((6-페닐피리딘-3-일)메틸)카바메이트

THF(5.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-((6-페닐피리딘-3-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(219mg, 583μmol) 및 DMAP(14.2mg, 117μmol)의 용액에 BOC-무수물(153mg, 699μmol)을 첨가했다. 생성된 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반하고, 추가의 BOC-무수물(153mg, 699μmol)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 추가로 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(200mg, 0.34mmol, 58% 수율, 80% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 476(M+H)⁺, R_T 1.98분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((6-페닐피리딘-3-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(5.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(116mg, 504μmol) 및 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((6-페닐피리딘-3-일)메틸)카바메이트(200mg, 420μmol)의 용액을 10분 동안 N₂로 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(36mg, 42μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(546μL, 546μmol)를 첨가했다. 반응물을 10분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 3시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제한 후, RP 플래시 C18 크로마토그래피(12g 카트리지, 25-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)로 정제하여 표제 화합물(131mg, 0.19mmol, 44% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 670(M+H)⁺, R_T 2.22분.

단계 4:

DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((6-페닐피리딘-3-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(131mg, 196μmol)의 용액에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시킨 다음, 고체를 Et₂O(3 x 2mL)로 분쇄하여 표제 화합물(75mg, 0.16mmol, 80% 수율, 98% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 470(M+H)⁺, R_T 1.71분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.68 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.09 - 8.02 (m, 2H), 7.97 - 7.90 (m, 2H), 7.84 (dd, J = 8.2, 2.3 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 2H), 7.45 - 7.39 (m, 1H), 6.72 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.32 - 5.19 (m, 2H), 4.50 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.54 - 3.43 (m, 1H), 3.26 - 3.18 (m, 1H), 3.07 - 2.98 (m, 1H), 2.94 - 2.88 (m, 1H), 2.82 - 2.75 (m, 1H), 2.34 - 2.25 (m, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 1.75 - 1.66 (m, 1H), 1.60 - 1.52 (m, 1H), 1.37 - 1.27 (m, 1H), 1.19 - 1.11 (m, 1H), 0.80 - 0.70 (m, 2H), 0.70 - 0.59 (m, 2H). 수중 1H.

합성 037

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -027)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(1.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(57mg, 250μmol) 및 (4-(3-메톡시)피리딘-2-일)페닐)메탄아민(57mg, 250μmol)의 용액에 DIPEA(0.26mL, 1.50mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃로 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시킨 후, 잔류물을 EtOH(1.0mL)에 재용해시키고, 추가의 DIPEA(0.17mL, 1.00mmol) 및 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(20mg, 88μmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, EtOAc 중 0-100% EtOH 25:75/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(126mg, 0.30mmol, 90% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 406(M+H)⁺, R_T 1.60분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(6.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(124mg, 304μmol) 및 BOC-무수물(100mg, 456μmol)의 용액에 DMAP(7.4mg, 61μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 4시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, EtOAc 중의 0-100% EtOH 25:75/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(151mg, 0.29mmol, 96% 수율, 98% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 506(M+H)⁺, R_T 1.92분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.3mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)카바메이트(149mg, 295μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(81mg, 353μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(25.2mg, 29.5μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(353μL, 353μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, EtOAc 중 0-100% EtOH 25:75/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(114mg, 0.15mmol, 52% 수율, 95% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 700(M+H)⁺, R_T 1.89분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.77mL, 3.07mmol)를 디옥산(2.4mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-메톡시피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(113mg, 153μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반한 후 염화수소(MeOH 중 1.25M)(1.0mL, 1.3mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 30분 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(2 x 2mL)에서 분쇄한 다음, SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(68mg, 0.13mmol, 87% 수율, 97% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 2): m/z 500(M+H)⁺, RT 0.65분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.23 (dd, J = 4.6, 1.3 Hz, 1H), 7.89 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.54 (dd, J = 8.4, 1.4 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.40 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.34 (dd, J = 8.3, 4.6 Hz, 1H), 6.73 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.42 - 5.29 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.49 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.57 - 3.44 (m, 1H), 3.24 - 3.16 (m, 1H), 3.09 - 2.99 (m, 1H), 2.91 (dd, J = 11.6, 4.6 Hz, 1H), 2.84 - 2.73 (m, 1H), 2.36 - 2.27 (m, 1H), 2.17 (dd, J = 11.6, 9.9 Hz, 1H), 1.78 - 1.65 (m, 1H), 1.61 - 1.53 (m, 1H), 1.39 - 1.29 (m, 1H), 1.21 - 1.08 (m, 1H), 0.83 - 0.71 (m, 2H), 0.70 - 0.59 (m, 2H). 수중 1H.

합성 038

(4-(3-메톡시피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

(4-(3-메톡시피리딘-2-일)페닐)메탄아민

디옥산(2.5mL) 중의 2-클로로-3-메톡시피리딘(60mg, 418μmol), (4-(아미노메틸)페닐)보론산, HCl(86mg, 460μmol) 및 Pd(dppf)Cl₂(31mg, 42μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(1.1mL) 중 제삼인산칼륨(355mg, 1.67mmol)의 용액을 첨가하고 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 90℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM/MeOH 90:10(10mL)과 물(3mL)로 희석시켰다. 층을 분리하고, 수성 층을 더 많은 DCM/MeOH 90:10(5mL)으로 추출했다. 결합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(59mg, 0.27mmol, 64% 수율, 97% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 215(M+H)⁺, R_T 0.87분.

합성 039

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(3-(트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -028)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(3-(트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(60mg, 263μmol) 및 (4-(3-트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)페닐)메탄아민(71mg, 263μmol)의 용액에 DIPEA(0.28mL, 1.58mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(92mg, 0.19mmol, 73% 수율, 96% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 460(M+H)⁺, R_T 1.78분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-(트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(3-(트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(92mg, 200μmol) 및 BOC-무수물(52mg, 240μmol)의 용액에 DMAP(4.9mg, 40μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 1.5시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(110mg, 0.19mmol, 95% 수율, 97% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 560(M+H)⁺, R_T 2.05분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-(트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.2mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-(트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)벤질)카바메이트(106mg, 189μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(52mg, 227μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(16.2mg, 18.9μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(246μL, 246μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 3시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(135mg, 0.16mmol, 85% 수율, 90% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 754(M+H)⁺, R_T 2.01분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.84mL, 3.34mmol)를 디옥산(2.4mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-(트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(134mg, 167μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반한 후, 염화수소(MeOH 중 1.25M)(1.0mL, 1.3mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 40℃에서 30분 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(2 x 2mL)에서 분쇄한 다음, SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(67mg, 0.11mmol, 69% 수율, 95% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 2): m/z 554(M+H)⁺, RT 0.88분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.69 (dd, J = 4.6, 1.4 Hz, 1H), 7.98 (dt, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.90 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.55 (dd, J = 8.4, 4.6 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.76 - 6.68 (m, 1H), 5.37 - 5.28 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.52 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.60 - 3.42 (m, 1H), 3.25 - 3.16 (m, 1H), 3.09 - 2.98 (m, 1H), 2.91 (dd, J = 11.5, 4.6 Hz, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.33 - 2.25 (m, 1H), 2.17 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.75 - 1.67 (m, 1H), 1.61 - 1.51 (m, 1H), 1.38 - 1.28 (m, 1H), 1.18 - 1.11 (m, 1H), 0.80 - 0.71 (m, 2H), 0.69 - 0.59 (m, 2H). 수중 1H.

합성 040

(4-(3-(트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

(4-(3-(트리플루오로메톡시)피리딘-2-일)페닐)메탄아민

디옥산(9.0mL) 중의 2-클로로-3-(트리플루오로메톡시)피리딘(150mg, 759μmol), (4-(아미노메틸)페닐)보론산(206mg, 1.37mmol) 및 Pd(dppf)Cl₂.DCM(62mg, 76μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(1.0mL) 중 탄산세슘(990mg, 3.04mmol)의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 N₂로 5분 동안 살포했다. 혼합물을 90℃로 2시간 동안 가열하였다. RT에서, 물(50mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 25mL)로 추출했다. 결합된 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(160mg, 0.55mmol, 72% 수율, 92% 순도)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 1): m/z 269(M+H)⁺, R_T 1.15분.

합성 041

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -029)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(피리미딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(62mg, 272μmol) 및 (4-(피리미딘-2-일)페닐)메탄아민(60mg, 324μmol)의 용액에 DIPEA(0.28mL, 1.63mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(67mg, 0.18mmol, 65% 수율, 99% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 377(M+H)⁺, R_T 1.56분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리미딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(피리미딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(60mg, 159μmol) 및 BOC-무수물(42mg, 191μmol)의 용액에 DMAP(3.9mg, 32μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 1.5시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(69mg, 0.14mmol, 86% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 477(M+H)⁺, R_T 1.98분

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리미딘-2-일)벤질)카바메이트(65mg, 136μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(38mg, 164μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(11.6mg, 13.6μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(177μL, 177μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 3시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(95mg, 0.12mmol, 90% 수율, 87% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 671(M+H)⁺, R_T 1.87분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.62mL, 2.5mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(95mg, 0.12mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반한 후, 염화수소(MeOH 중 1.25M)(1.0mL, 1.3mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 30분 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(2 x 2mL)에서 분쇄한 다음, SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(42mg, 86μmol, 69% 수율, 96% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 2): m/z 471(M+H)⁺ , RT 0.68분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.89 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 8.36 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.92 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 6.76 - 6.67 (m, 1H), 5.38 - 5.28 (m, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.53 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.58 - 3.43 (m, 1H), 3.24 - 3.14 (m, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.91 (dd, J = 11.5, 4.4 Hz, 1H), 2.82 - 2.74 (m, 1H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.16 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.77 - 1.66 (m, 1H), 1.59 - 1.50 (m, 1H), 1.39 - 1.26 (m, 1H), 1.21 - 1.06 (m, 1H), 0.80 - 0.72 (m, 2H), 0.69 - 0.59 (m, 2H). 수중 1H.

합성 042

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((2-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -030)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(2-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(90mg, 0.39mmol) 및 (2-메톡시-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(110mg, 0.51mmol)의 용액에 DIPEA(0.41mL, 2.4mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(150mg, 0.33mmol, 84% 수율, 90% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.74 - 8.62 (m, 2H), 7.97 (dt, J = 8.1, 1.1 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.87 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 7.9, 1.6 Hz, 1H), 7.35 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.1 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.61 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.98 (s, 3H), 1.95 - 1.84 (m, 1H), 0.92 - 0.83 (m, 2H), 0.80 - 0.70 (m, 2H).

단계 2:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(2.5mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(2-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(130mg, 320μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(81mg, 352μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(27mg, 32μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(416μL, 416μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 90℃로 밤새 가열했다. RT에서, 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 15-75% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(94mg, 150μmol, 46% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 600(M+H)⁺, R_T 1.19분.

단계 3:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.59mL, 2.4mmol)를 디옥산(1.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(94mg, 160μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 2시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(61mg, 0.11mmol, 73% 수율, 94% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 2): m/z 500(M+H)⁺, RT 0.71분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.66 (ddd, J = 4.7, 1.9, 0.9 Hz, 1H), 8.00 - 7.93 (m, 1H), 7.87 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.71 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.35 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.1 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.82 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 5.89 - 5.79 (m, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.46 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.59 - 3.48 (m, 1H), 3.29 - 3.22 (m, 2H), 3.12 (dd, J = 11.8, 4.3 Hz, 1H), 3.08 - 3.00 (m, 1H), 2.66 - 2.58 (m, 1H), 2.49 - 2.44 (m, 1H), 1.77 - 1.67 (m, 2H), 1.56 - 1.45 (m, 1H), 1.39 - 1.28 (m, 1H), 0.82 - 0.72 (m, 2H), 0.72 - 0.61 (m, 2H). 수중 1H.

합성 043

(2-메톡시-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

2-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤조니트릴

2-클로로피리딘(250mg, 2.20mmol), (4-시아노-3-메톡시페닐)보론산(423mg, 1.98mmol), Pd(dppf)Cl₂(161mg, 220μmol) 및 제삼인산칼륨(1.87g, 8.81mmol)을 디옥산(16mL)과 물(4.0mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 N₂로 15분 동안 살포시킨 다음, 60℃로 4시간 동안 가열한 후 RT로 냉각시켰다. 혼합물을 EtOAc(30mL)와 물(10mL)로 희석시켰다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc(2 x 15mL)로 추출했다. 결합된 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 여과한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(320mg, 1.3mmol, 63% 수율, 85% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.74 (ddd, J = 4.8, 1.8, 0.9 Hz, 1H), 8.20 - 8.10 (m, 1H), 7.96 (td, J = 7.8, 1.8 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.88 - 7.78 (m, 2H), 7.46 (ddd, J = 7.5, 4.8, 1.1 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H).

단계 B:

(2-메톡시-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

2-메톡시-4-(피리딘-2-일)벤조니트릴(200mg, 951μmol)을 THF(8.0mL)에 용해시키고, 용액을 0℃로 냉각시켰다. LiAlH₄(Et₂O 중 4M)(238μL, 951μmol)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반한 후 RT에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 1시간 동안 가열한 후 0℃로 냉각시키고, 몇 방울의 수성 포화 Na₂SO₄로 급냉시켰다. 혼합물을 짧은 셀라이트 패드를 통해 여과하고 THF(30mL)로 세정했다. 여과액을 농축시켜 표제 화합물(217mg, 0.91mmol, 96% 수율, 90% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.65 (ddd, J = 4.8, 1.8, 0.9 Hz, 1H), 8.03 - 7.93 (m, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.1 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.71 (s, 2H), 1.72 (s (br), 2H).

합성 044

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(옥사졸-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -031)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(옥사졸-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(1.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(42mg, 186μmol) 및 (4-(옥사졸-2-일)페닐)메탄아민(36mg, 207μmol)의 용액에 DIPEA(0.22mL, 1.24mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(62mg, 0.16mmol, 75% 수율, 92% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 366(M+H)⁺, R_T 1.61분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(옥사졸-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(옥사졸-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(62mg, 169μmol) 및 BOC-무수물(44mg, 203μmol)의 용액에 DMAP(4.1mg, 34μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 1시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(52mg, 0.11mmol, 63% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 466(M+H)⁺, R_T 1.95분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(옥사졸-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(옥사졸-2-일)벤질)카바메이트(50mg, 0.11mmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(30mg, 0.13mmol)의 용액을 5분 동안 N₂에서 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(9.2mg, 11μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(140μL, 140μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 3시간 동안 가열하였다. RT에서, 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(78mg, 95μmol, 88% 수율, 80% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 660(M+H)⁺, R_T 1.80분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.21mL, 0.85mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(옥사졸-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(70mg, 85μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(10mg, 21μmol, 25% 수율, 97% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 2): m/z 460(M+H)⁺, RT 0.98분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.20 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.94 - 7.89 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.36 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.71 - 6.67 (m, 1H), 5.30 - 5.25 (m, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.53 - 3.43 (m, 1H), 3.23 - 3.15 (m, 1H), 3.06 - 2.95 (m, 1H), 2.89 (dd, J = 11.6, 4.5 Hz, 1H), 2.80 - 2.73 (m, 1H), 2.33 - 2.22 (m, 1H), 2.14 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.77 - 1.65 (m, 1H), 1.58 - 1.50 (m, 1H), 1.36 - 1.25 (m, 1H), 1.18 - 1.06 (m, 1H), 0.80 - 0.70 (m, 2H), 0.70 - 0.58 (m, 2H). 수중 1H.

합성 045

(R)-3-사이클로프로필-N⁵-(모르폴린-2-일메틸)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -032)

단계 3:

3급-부틸 (S)-2-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)모르포린-4-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(90mg, 189μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-2-(아미노메틸)모르폴린-4-카르복실레이트(61mg, 284μmol) 및 탄산세슘(185mg, 567μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(3.8mg, 5.7μmol) 및 Ruphos(3.1mg, 6.62μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물에 추가 5분 동안 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다, RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(66mg, 96μmol, 51% 수율, 95% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 656(M+H)⁺, RT 2.17분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(252μL, 1.01mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-2-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)모르폴린-4-카르복실레이트(66mg, 101μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(22mg, 47μmol, 47% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 2): m/z 456(M+H)⁺, RT 0.89분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.68 - 8.61 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.96 - 7.90 (m, 1H), 7.90 - 7.81 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.3, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.65 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.49 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.76 - 3.69 (m, 1H), 3.54 - 3.46 (m, 1H), 3.46 - 3.36 (m, 1H), 3.29 - 3.15 (m, 1H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.73 - 2.59 (m, 2H), 2.45 - 2.35 (m, 1H), 1.82 - 1.71 (m, 1H), 0.80 - 0.73 (m, 4H). 수중 2H.

합성 046

3-사이클로프로필-5-모르폴리노-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -033)

단계 3:

3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-모르폴리노피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 모르폴린(92mg, 1.05mmol) 및 탄산세슘(205mg, 630μmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(4.2mg, 6.30μmol) 및 Ruphos(3.4mg, 7.35μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(105mg, 0.16mmol, 76% 수율, 80% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 527(M+H)⁺, RT 2.00분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(404μL, 1.61mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-모르포리노피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(105mg, 161μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(24mg, 53μmol, 33% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 427(M+H)⁺, RT 1.41분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.07 - 7.98 (m, 3H), 7.96 - 7.89 (m, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.56 (s, 1H), 4.62 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 3.64 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.45 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 1.84 - 1.73 (m, 1H), 0.82 - 0.70 (m, 4H).

합성 047

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-(((5-페닐피리딘-2-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -034)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-((5-페닐피리딘-2-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(4.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(150mg, 814mmol), (5-페닐피리딘-2-일)메탄아민(150mg, 814μmol)의 용액에 DIPEA(902μL, 5.18mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃로 3시간 동안 가열하였다. RT에서, 생성되는 고체를 여과 수집하고 EtOH(2mL)로 세정하여 표제 화합물(237mg, 0.60mmol, 81% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 376(M+H)⁺, R_T 2.11분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((5-페닐피리딘-2-일)메틸)카바메이트

무수 THF(6.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-((5-페닐피리딘-2-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(235mg, 594μmol) 및 BOC-무수물(156mg, 713μmol)의 용액에 DMAP(14.5mg, 119μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(275mg, 0.46mmol, 78% 수율, 80% 순도)을 녹색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 476(M+H)⁺, R_T 2.01분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((5-페닐피리딘-2-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(8.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((5-페닐피리딘-2-일)메틸)카바메이트(275mg, 462μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(160mg, 695μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(60mg, 70μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(753μL, 753μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(294mg, 0.37mmol, 81% 수율, 85% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 670(M+H)⁺, R_T 1.85분.

단계 4:

DCM(3.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((5-페닐피리딘-2-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(294mg, 373μmol)의 용액에 TFA(1.0mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(114mg, 0.24mmol, 64% 수율, 99% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 470(M+H)⁺, RT 1.34분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.86 (dd, J = 2.4, 0.8 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 8.2, 2.4 Hz, 1H), 7.86 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 7.76 - 7.68 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.53 - 7.47 (m, 2H), 7.45 - 7.38 (m, 2H), 6.76 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.34 - 5.25 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.59 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 3.59 - 3.43 (m, 1H), 3.25 - 3.18 (m, 1H), 3.10 - 2.98 (m, 1H), 2.91 (dd, J = 11.6, 4.5 Hz, 1H), 2.83 - 2.73 (m, 1H), 2.37 - 2.25 (m, 1H), 2.16 (dd, J = 11.6, 9.9 Hz, 1H), 1.78 - 1.68 (m, 1H), 1.60 - 1.51 (m, 1H), 1.40 - 1.27 (m, 1H), 1.20 - 1.11 (m, 1H), 0.83 - 0.72 (m, 2H), 0.72 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 048

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(티아졸-4-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -035)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(티아졸-4-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(5.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(173mg, 759mmol), (4-(티아졸-4-일)페닐)메탄아민(170mg, 759μmol)의 용액에 DIPEA(926μL, 5.32mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃로 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(210mg, 0.53mmol, 70% 수율, 96% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 382(M+H)⁺, R_T 2.02분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(티아졸-4-일)벤질)카바메이트

무수 THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(티아졸-4-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(100mg, 262μmol) 및 BOC-무수물(69mg, 314μmol)의 용액에 DMAP(6.4mg, 52μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(136mg, 0.24mmol, 92% 수율, 85% 순도)을 녹색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 382(M-Boc+H)⁺, R_T 1.90분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(티아졸-4-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(티아졸-4-일)벤질)카바메이트(136mg, 240μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(66mg, 288μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(20.5mg, 24.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(312μL, 312μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(113mg, 0.14mmol, 59% 수율, 85% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 676(M+H)⁺, R_T 1.81분.

단계 4:

DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(티아졸-4-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(180mg, 207μmol)의 용액에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(50mg, 0.10mmol, 71% 수율, 96% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 476(M+H)⁺, RT 1.25분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.18 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.87 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.45 - 7.40 (m, 2H), 6.71 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.38 - 5.27 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.47 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.57 - 3.44 (m, 1H), 3.24 - 3.15 (m, 1H), 3.07 - 2.98 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 11.5, 4.5 Hz, 1H), 2.82 - 2.73 (m, 1H), 2.36 - 2.25 (m, 1H), 2.16 (dd, J = 11.6, 9.9 Hz, 1H), 1.76 - 1.67 (m, 1H), 1.60 - 1.50 (m, 1H), 1.38 - 1.27 (m, 1H), 1.20 - 1.11 (m, 1H), 0.82 - 0.71 (m, 2H), 0.70 - 0.59 (m, 2H). 수중 1H.

합성 049

(4-(티아졸-4-일)페닐)메탄아민

단계 A:

(4-(티아졸-4-일)페닐)메탄아민

디옥산(9.0mL) 중의 4-브로모티아졸(200mg, 1.22mmol), (4-(아미노메틸)페닐)보론산, HCl(251mg, 1.34mmol) 및 Pd(dppf)Cl₂(89mg, 122μmol)의 혼합물을 N₂로 5분 동안 살포했다. 물(1.0mL) 중 제삼인산칼륨 용액(1.04g, 4.88mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 70℃로 2시간 동안 가열하였다. RT에서, 물(100mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(3 x 25mL)으로 추출했다. 결합된 유기 층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시켰다. 오일을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켜 표제 화합물(170mg, 0.76mmol, 62% 수율, 85% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 191(M+H)⁺, R_T 0.85분.

합성 050

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -036)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(5.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(195mg, 0.86mmol) 및 (4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)페닐)메탄아민(240mg, 0.86mmol)의 용액에 DIPEA(1.04mL, 5.99mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃로 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(270mg, 0.58mmol, 68% 수율, 96% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 444(M+H)⁺, R_T 2.12분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(3.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(100mg, 225μmol) 및 BOC-무수물(59mg, 270μmol)의 용액에 DMAP(5.5mg, 45μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(128mg, 0.21mmol, 93% 수율, 89% 순도)을 녹색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 444(M-Boc+H)⁺, R_T 1.97분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)벤질)카바메이트(128mg, 209μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(58mg, 251μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(17.9mg, 20.9μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(272μL, 272μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(180mg, 0.21mmol, 99% 수율, 85% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 738(M+H)⁺, R_T 1.88분.

단계 4:

TFA(0.5mL)를 DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(180mg, 207μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(96mg, 0.17mmol, 83% 수율, 96% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 538(M+H)⁺, RT 1.38분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.91 - 8.87 (m, 1H), 8.29 (dd, J = 8.1, 1.6 Hz, 1H), 7.90 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.68 - 7.61 (m, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.47 - 7.40 (m, 4H), 6.78 - 6.68 (m, 1H), 5.38 - 5.26 (m, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.53 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.59 - 3.43 (m, 1H), 3.26 - 3.17 (m, 1H), 3.09 - 2.99 (m, 1H), 2.95 - 2.87 (m, 1H), 2.85 - 2.74 (m, 1H), 2.36 - 2.26 (m, 1H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 1.78 - 1.67 (m, 1H), 1.61 - 1.52 (m, 1H), 1.40 - 1.28 (m, 1H), 1.22 - 1.11 (m, 1H), 0.80 - 0.71 (m, 2H), 0.71 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 051

(4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

(4-(3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)페닐)메탄아민

디옥산(9.0mL) 중의 2-클로로-3-(트리플루오로메틸)피리딘(200mg, 1.10mmol), (4-(아미노메틸)페닐)보론산, HCl(227mg, 1.21mmol) 및 Pd(dppf)Cl₂ (81mg, 110μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(1.0mL) 중의 제삼인산칼륨(935mg, 4.41mmol)의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 70℃로 2시간 동안 가열하였다. RT에서, 물(100mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(3 x 25mL)으로 추출했다. 결합된 유기 층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시켰다. 오일을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켜 표제 화합물(244mg, 0.87mmol, 79% 수율, 90% 순도)을 적색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 253(M+H)⁺, R_T 1.06분.

합성 052

(S)-3-사이클로프로필-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)-N⁵-(피롤리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -037)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(117mg, 630μmol) 및 탄산세슘(205mg, 630μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(4.2mg, 6.30μmol) 및 Ruphos(3.4mg, 7.35μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(90mg, 0.13mmol, 62% 수율, 90% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 626(M+H)⁺, RT 1.94분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.36mL, 1.4mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트(90mg, 0.14mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(10mg, 23μmol, 16% 수율, 96% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 426(M+H)⁺, RT 1.68분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.68 - 8.61 (m, 1H), 8.08 - 8.01 (m, 2H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.91 - 7.80 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.3, 4.7, 1.2 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.18 - 4.14 (m, 1H), 2.98 (dd, J = 11.1, 6.5 Hz, 1H), 2.87 - 2.77 (m, 1H), 2.75 - 2.69 (m, 1H), 2.00 - 1.83 (m, 1H), 1.81 - 1.70 (m, 1H), 1.55 - 1.44 (m, 1H), 0.81 - 0.71 (m, 4H). 수중 2H.

합성 053

3-사이클로프로필-5-(피페라진-1-일)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -038)

단계 3:

3급-부틸 4-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)피페라진-1-카르복실레이트

디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸피페라진-1-카르복실레이트(43mg, 231μmol) 및 탄산세슘(205mg, 630μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(7.0mg, 10.5μmol) 및 Ruphos(5.4mg, 11.6μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과한 후 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH3 함유)/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 15-75% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(59mg, 91μmol, 44% 수율, 97% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 626(M+H)⁺, RT 2.02분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.34mL, 1.3mmol)를 디옥산(0.5mL) 중의 3급-부틸 4-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)피페라진-1-카르복실레이트(56mg, 89μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 2시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 15-75% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 정제하여 표제 화합물(15mg, 33μmol, 37% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 2): m/z 426(M+H)⁺, RT 0.79분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.66 - 8.62 (m, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.98 - 7.90 (m, 2H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.50 (s, 1H), 4.61 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.40 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 2.75 - 2.67 (m, 4H), 1.83 - 1.72 (m, 1H), 0.80 - 0.71 (m, 4H). 수중 1H.

합성 054

3-사이클로프로필-N⁵-메틸-N⁵-(피페리딘-4-일)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -039)

단계 3:

3급-부틸 4-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)(메틸)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 4-(메틸아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(180mg, 840μmol) 및 탄산세슘(205mg, 630μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(4.2mg, 6.3μmol) 및 Ruphos(3.4mg, 7.4μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(100mg, 0.13mmol, 64% 수율, 88% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 654(M+H)⁺, RT 2.09분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.38mL, 1.53mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 4-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)(메틸)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(100mg, 153μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 분취용 HPLC(물 중 35-100% MeCN/0.3% NH₃)로 정제하여 표제 화합물(11mg, 24μmol, 15% 수율, 97% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 454(M+H)⁺, RT 1.70분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.95 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.93 - 7.90 (m, 1H), 7.85 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.60 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 4.25 - 4.12 (m, 1H), 2.98 - 2.90 (m, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.56 - 2.52 (m, 1H), 2.48 - 2.44 (m, 1H), 1.82 - 1.70 (m, 1H), 1.55 - 1.35 (m, 4H), 0.83 - 0.70 (m, 4H). 수중 1H.

합성 055

3-사이클로프로필-N⁵-(피페리딘-4-일메틸)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -040)

단계 3:

3급-부틸 4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 4-(아미노메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(180mg, 840μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, tBuBrettPhos Pd G3(18.0mg, 21.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(273μL, 273μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 3시간 동안 가열한 다음 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(64mg, 94μmol, 45% 수율, 96% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 654(M+H)⁺, R_T 1.99분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.23mL, 0.92mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(60mg, 92μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(16mg, 35μmol, 38% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 454(M+H)⁺, RT 0.91분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.68 - 8.61 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.96 - 7.90 (m, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.84 - 7.76 (m, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.3, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.61 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.07 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.93 - 2.86 (m, 2H), 2.43 - 2.32 (m, 2H), 1.82 - 1.69 (m, 1H), 1.58 (d, J = 12.8 Hz, 3H), 1.06 - 0.94 (m, 2H), 0.75 (d, J = 8.1 Hz, 4H). 1H 수중.

합성 056

3-사이클로프로필-N⁵-((3,3-디플루오로피페리딘-4-일)메틸)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -041)

단계 3:

3급-부틸 4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3,3-디플로오로피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(175mg, 368μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 4-(아미노메틸)-3,3-디플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(147mg, 588μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, tBuBrettPhos Pd G3(47.1mg, 55.1μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(386μL, 386μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 15-75% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(135mg, 0.18mmol, 48% 수율, 90% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 690(M+H)⁺, R_T 1.99분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.62mL, 2.47mmol)를 디옥산(3.0mL) 중의 3급-부틸 4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3,3-디플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(126mg, 164μmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 35℃에서 2시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 20-80% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 정제하여 표제 화합물(20mg, 39μmol, 24% 수율, 95% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 3): m/z 490(M+H)⁺, RT 1.49분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.62 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.93 (dt, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.89 - 7.83 (m, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.68 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.68 - 3.58 (m, 1H), 3.18 - 3.08 (m, 1H), 3.05 - 2.95 (m, 1H), 2.89 - 2.79 (m, 1H), 2.73 - 2.61 (m, 1H), 2.43 - 2.33 (m, 1H), 2.25 - 2.08 (m, 1H), 1.82 - 1.70 (m, 2H), 1.33 - 1.20 (m, 1H), 0.84 - 0.70 (m, 4H). 수중 1H.

합성 057

3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)-5-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -042)

단계 3:

3급-부틸 2-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트

디옥산(2.0mL) 중의 용액 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(71mg, 315μmol)를 5분 동안 N₂에서 탈기시킨 후, tBuBrettPhos Pd G3(18.0mg, 21.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(221μL, 221μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 90℃로 3시간 동안 가열한 다음 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(68mg, 98μmol, 47% 수율, 98% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 666(M+H)⁺, R_T 2.51분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.38mL, 1.5mmol)를 디옥산(3.0mL) 중의 3급-부틸 2-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(68mg, 0.10mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 2시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(44mg, 90μmol, 88% 수율, 95% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 5): m/z 466(M+H)⁺, RT 1.54분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.66 - 8.62 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 8.00 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.95 - 7.91 (m, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.57 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.59 (s, 4H), 2.65 - 2.57 (m, 4H), 1.81 - 1.71 (m, 1H), 1.62 - 1.54 (m, 4H), 0.81 - 0.72 (m, 2H), 0.71 - 0.66 (m, 2H). 수중 1H.

합성 058

(R)-3-사이클로프로필-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)-N⁵-(피롤리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -043)

단계 3:

3급-부틸 (R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (R)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(117mg, 630μmol) 및 탄산세슘(205mg, 630μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(4.2mg, 6.30μmol) 및 Ruphos(3.4mg, 7.35μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(91mg, 0.11mmol, 53% 수율, 78% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 627(M+H)⁺, RT 2.39분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.32mL, 1.3mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트(80mg, 128mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(11mg, 26μmol, 수율 20%, 순도 99%)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 1): m/z 426(M+H)⁺, RT 0.80분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.68 - 8.61 (m, 1H), 8.08 - 8.01 (m, 2H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.90 - 7.80 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 6.63 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.20 - 4.11 (m, 1H), 2.97 (dd, J = 11.0, 6.4 Hz, 1H), 2.86 - 2.75 (m, 1H), 2.75 - 2.67 (m, 1H), 2.00 - 1.86 (m, 1H), 1.81 - 1.70 (m, 1H), 1.54 - 1.43 (m, 1H), 0.80 - 0.72 (m, 4H). 수중 2H.

합성 059

(S)-3-사이클로프로필-N⁵-(피페리딘-3-일)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -044)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피리딘-1-카르복실레이트(126mg, 630μmol) 및 탄산세슘(205mg, 630μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(4.2mg, 6.30μmol) 및 Ruphos(3.4mg, 7.35μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(90mg, 0.13mmol, 60% 수율, 90% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 641(M+H)⁺, RT 2.44분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.35mL, 1.4mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(90mg, 0.14mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(28mg, 61μmol, 43% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 2): m/z 426(M+H)⁺, RT 0.68분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.90 - 7.77 (m, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 6.41 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.49 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.77 - 3.68 (m, 1H), 3.04 - 2.97 (m, 1H), 2.77 - 2.69 (m, 1H), 2.44 - 2.34 (m, 1H), 2.29 - 2.19 (m, 1H), 1.86 - 1.69 (m, 2H), 1.61 - 1.51 (m, 1H), 1.43 - 1.21 (m, 2H), 0.79 - 0.69 (m, 4H). 수중 1H.

합성 060

(R)-3-사이클로프로필-N⁵-(피페리딘-3-일)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -045)

단계 3:

3급-부틸 (R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(76mg, 135μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (R)-3-아미노피페리딘-1-카르복실레이트(51mg, 252μmol)의 용액을 5분 동안 N2에서 탈기시킨 후, tBuBrettPhos Pd G3(18mg, 21.0μmol) 및 LiHMDS(THF 1M)(273μL, 273μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 20시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 더 많은 3급-부틸 (R)-3-아미노피페리딘-1-카르복실레이트(101mg, 504μmol), ^tBuBrettPhos Pd G3(36mg, 42.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(0.55mL, 0.55mmol)로 재충전했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 3시간 동안 가열했다. 반응물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(122mg, 0.17mmol, 82% 수율, 90% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 640(M+H)⁺, R_T 2.45분.

단계 4:

DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(120mg, 178μmol)의 용액에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(45mg, 98μmol, 55% 수율, 96% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 440(M+H)⁺, RT 1.51분.

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8.64 (ddd, J = 4.8, 1.8, 1.0 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.93 (dt, J = 8.1, 1.1 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.81 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.49 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.79 - 3.69 (m, 1H), 3.05 - 2.98 (m, 1H), 2.78 - 2.71 (m, 1H), 2.45 - 2.37 (m, 1H), 2.29 - 2.22 (m, 1H), 1.86 - 1.79 (m, 1H), 1.78 - 1.71 (m, 1H), 1.61 - 1.54 (m, 1H), 1.43 - 1.33 (m, 1H), 1.33 - 1.23 (m, 1H), 0.79 - 0.71 (m, 4H). 수중 1H.

합성 061

1-(4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-1-일)에탄-1-온

(PPA -046)

단계 3:

3급-부틸 (5-(((1-아세틸피페리딘-4-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 1-(4-(아미노메틸)피페리딘-1-일)에탄-1-온(39mg, 252μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(18mg, 21.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(273μL, 273μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(81mg, 0.11mmol, 83% 수율, 82% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.69 - 8.62 (m, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.94 (dt, J = 8.0, 1.1 Hz, 1H), 7.87 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.34 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 7.24 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.94 - 4.80 (m, 2H), 4.40 - 4.29 (m, 1H), 3.82 - 3.73 (m, 1H), 3.24 - 3.15 (m, 2H), 2.99 - 2.89 (m, 1H), 2.48 - 2.41 (m, 1H), 1.95 (s, 3H), 1.84 - 1.61 (m, 3H), 1.32 (s, 9H), 1.15 - 1.08 (m, 1H), 1.03 - 0.92 (m, 1H), 0.83 - 0.73 (m, 4H). 수중 1H.

단계 4:

DCM(0.75mL) 중의 3급-부틸 (5-(((1-아세틸피페리딘-4-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(81mg, 0.11mmol)의 용액에 TFA(0.25mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(48mg, 92μmol, 83% 수율, 95% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 496(M+H)⁺, RT 1.18분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.64 (ddd, J = 4.8, 1.8, 0.9 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.93 (dt, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.89 - 7.79 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.66 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.37 - 4.26 (m, 1H), 3.11 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 2.47 - 2.38 (m, 1H), 1.93 (s, 3H), 1.80 - 1.58 (m, 4H), 1.11 - 1.03 (m, 1H), 1.01 - 0.88 (m, 1H), 0.75 (d, J = 6.9 Hz, 4H). 수중 1H.

합성 062

N⁵-(아제티딘-3-일)-3-사이클로프로필-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -047)

단계 3:

3급-부틸 3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)아제티딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 3-아미노아제티딘-1-카르복실레이트(109mg, 630μmol) 및 탄산세슘(205mg, 630μmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(4.2mg, 6.3μmol) 및 Ruphos(3.4mg, 7.4μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(90mg, 0.13mmol, 63% 수율, 90% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 612(M+H)⁺, RT 2.36분.

단계 4:

N⁵-(피리딘-3-일)-3-사이클로프로필-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

염화수소(디옥산 중 4M)(0.41mL, 1.63mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)아제티딘-1-카르복실레이트(100mg, 0.16mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 30℃에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(12mg, 28μmol, 17% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 412(M+H)⁺, RT 1.02분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.63 (m, 1H), 8.07 - 8.00 (m, 3H), 7.96 - 7.82 (m, 3H), 7.56 (s, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.7, 1.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.62 - 4.53 (m, 1H), 4.51 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.55 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.81 - 1.69 (m, 1H), 0.76 (d, J = 6.9 Hz, 4H). 수중 2H.

합성 063

3-사이클로프로필-N⁵-(피페리딘-4-일)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -048)

단계 3:

3급-부틸 4-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 4-아미노피페리딘-1-카르복실레이트(126mg, 630μmol) 및 탄산세슘(205mg, 630μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(4.2mg, 6.3μmol) 및 Ruphos(3.4mg, 7.4μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(100mg, 0.14mmol, 67% 수율, 90% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 640(M+H)⁺, RT 2.48분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.39mL, 1.56mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 4-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(100mg, 0.156mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(24mg, 54μmol, 34% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 440(M+H)⁺, RT 0.94분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.93 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.90 - 7.77 (m, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 6.47 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.49 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.75 - 3.65 (m, 1H), 2.92 - 2.84 (m, 2H), 2.49 - 2.41 (m, 1H), 1.81 - 1.75 (m, 1H), 1.78 - 1.69 (m, 2H), 1.24 - 1.11 (m, 2H), 0.78 - 0.72 (m, 4H). 수중 2H.

합성 064

5-(아제티딘-3-일옥시)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -049)

단계 3:

3급-부틸 3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)아제티딘-1-카르복실레이트

디옥산(5.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(200mg, 420μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸-3-하이드록시아제티딘-1-카르복실레이트(291mg, 1.68mmol) 및 탄산세슘(548mg, 1.68mmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(28mg, 42μmol) 및 Ruphos(20mg, 42μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(180mg, 0.27mmol, 65% 수율, 93% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 613(M+H)⁺, RT 2.20분.

단계 4:

DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)아제티딘-1-카르복실레이트(180mg, 294μmol)의 용액에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(50mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(80mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(70mg, 160μmol, 55% 수율, 96% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 413(M+H)⁺, RT 1.44분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.41 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 8.08 - 8.01 (m, 2H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 5.38 (s, 1H), 5.30 - 5.22 (m, 1H), 4.63 - 4.57 (m, 2H), 4.36 - 4.28 (m, 1H), 3.67 (dd, J = 9.0, 6.8 Hz, 2H), 3.50 - 3.38 (m, 2H), 1.85 - 1.76 (m, 1H), 0.84 - 0.77 (m, 4H).

합성 065

1-(3-사이클로프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)피페리딘-4-올

(PPA -050)

단계 3:

3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(4-하이드록시피페리딘-1-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 피페리딘-4-올(64mg, 630μmol) 및 탄산세슘(205mg, 630μmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(4.2mg, 6.3μmol) 및 Ruphos(3.4mg, 7.4μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(105mg, 0.19mmol, 91% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 541(M+H)⁺, RT 1.90분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.49mL, 1.94mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(4-하이드록시피페리딘-1-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(105mg, 194μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 30℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(35mg, 78μmol, 40% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 441(M+H)⁺, RT 1.14분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.96 - 7.89 (m, 2H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 5.54 (s, 1H), 4.63 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 4.03 - 3.95 (m, 2H), 3.69 - 3.59 (m, 1H), 3.11 - 2.99 (m, 2H), 1.85 - 1.63 (m, 3H), 1.33 - 1.21 (m, 2H), 0.81 - 0.71 (m, 4H).

합성 066

4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-2-온

(PPA -051)

단계 3:

3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(((2-옥소피페리딘-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 4-(아미노메틸)피페리딘-2-온, HCl(42mg, 252μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(18mg, 21.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(273μL, 273μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 밤새 가열한 다음 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(50mg, 85μmol, 41% 수율, 97% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 568(M+H)⁺, RT 1.76분.

단계 4:

DCM(0.75mL) 중의 3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(((2-옥소피페리딘-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(50mg, 88μmol)의 용액에 TFA(0.25mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 분취용 HPLC(물 중 25-100% MeCN/0.3% NH₃)로 정제하여 표제 화합물(11mg, 22μmol, 25% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 468(M+H)⁺, RT 1.28분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.62 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.96 - 7.90 (m, 1H), 7.89 - 7.80 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.41 - 7.36 (m, 1H), 7.33 (ddd, J = 7.3, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.70 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.23 - 3.11 (m, 3H), 3.04 (td, J = 11.2, 4.3 Hz, 1H), 2.21 (dd, J = 17.0, 5.1 Hz, 1H), 2.05 - 1.92 (m, 1H), 1.87 - 1.71 (m, 3H), 1.38 - 1.25 (m, 1H), 0.80 - 0.71 (m, 4H).

합성 067

1-(3-사이클로프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-아제티딘-3-올

(PPA -052)

단계 3:

3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(3-하이드록시아제티딘-1-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 아제티딘-3-올, HCl(69mg, 630μmol) 및 탄산세슘(411mg, 1.26mmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(4.2mg, 6.3μmol) 및 Ruphos(3.4mg, 7.4μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(85mg, 0.17mmol, 79% 수율, 99% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 513(M+H)⁺, RT 1.74분.

단계 4:

1-(3-사이클로프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아제티딘-3-올

0℃에서, 염화수소(디옥산 중 4M)(0.41mL, 1.7mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸(3-사이클로프로필-5-(3-하이드록시아제티딘-1-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(85mg, 0.17mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 1.5시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 분취용 HPLC(물 중 25-100% MeCN/0.3% NH₃)로 정제하여 표제 화합물(22mg, 53μmol, 32% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 413(M+H)⁺, RT 1.04분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.64 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.08 - 7.98 (m, 3H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.90 - 7.82 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 5.60 - 5.56 (m, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.60 - 4.54 (m, 2H), 4.50 - 4.46 (m, 1H), 4.13 - 4.05 (m, 2H), 3.62 (dd, J = 8.8, 4.6 Hz, 2H), 1.82 - 1.70 (m, 1H), 0.81 - 0.73 (m, 2H), 0.73 - 0.64 (m, 2H).

합성 068

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)(메틸)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -053)

단계 A:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-((3급-부틸디메틸실릴)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

3급-부틸클로로디메틸실란(47mg, 311μmol)을 DMF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(130mg, 194μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨) 및 1H-이미다졸(26mg, 388μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반한 다음, 1H-이미다졸(26mg, 388μmol) 및 3급-부틸클로로디메틸실란(47mg, 311μmol)으로 재충전하고 RT에서 24시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 염수(20mL)로 희석하고 TBME(3 x 20mL)로 추출하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하여 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(130mg, 0.16mmol, 82% 수율, 96% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 785(M+H)⁺, RT 2.50분.

단계 B:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)(메틸)아미노)메틸)-3-((3급-부틸디메틸실릴)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.00mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-((3급-부틸디메틸실릴)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(130mg, 166μmol)의 빙냉 용액에 LiHMDS(THF 중 1M)(199μL, 199μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반한 후 요오도메탄(12μL, 199μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 RT에서 1시간 동안 교반한 후 빙수(30mL)에 붓고 에틸 아세테이트(2 x 20mL)로 추출했다. 유기물을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하여 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(130mg, 0.15mmol, 88% 수율, 90% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 799(M+H)⁺ , RT 1.77분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.41mL, 1.63mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)(메틸)아미노)메틸)-3-((3급-부틸디메틸실릴)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(130mg, 0.163mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(28mg, 55μmol, 34% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 484(M+H)⁺, RT 0.99분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.04 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.98 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.94 - 7.89 (m, 1H), 7.89 - 7.81 (m, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.53 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 5.36 (s, 1H), 5.05 - 5.01 (m, 1H), 4.57 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.60 - 3.46 (m, 2H), 3.09 - 2.98 (m, 1H), 2.97 (s, 3H), 2.97 - 2.89 (m, 1H), 2.70 - 2.62 (m, 1H), 2.15 (q, J = 9.9 Hz, 2H), 1.99 - 1.84 (m, 1H), 1.81 - 1.68 (m, 1H), 1.49 - 1.42 (m, 2H), 1.04 - 0.94 (m, 1H), 0.79 - 0.66 (m, 4H).

합성 069

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((2-플루오로-4-(티아졸-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -054)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(2-플루오로-4-(티아졸-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

IPA(1.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(92mg, 0.40mmol) 및 (2-플루오로-4-(티아졸-2-일)페닐)메탄아민(80mg, 0.38mmol)의 용액에 DIPEA(0.20mL, 1.20mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 80℃로 2시간 동안 가열하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(30mL)와 물(30mL) 사이에 분할했다. 유기층을 분리하고, 물(30mL), 염수(10mL)로 세척하고 Na₂SO₄로 건조시키고 여과하여 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 50-100% TBME/이소헥산에 이어 0-5% MeOH/TBME)로 정제하여 표제 화합물(140mg, 0.33mmol, 85% 수율, 93% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 400(M+H)⁺, R_T 2.21분.

단계 2:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((2-플루오로-4-(티아졸-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(1.2mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(2-플루오로-4-(티아졸-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(138mg, 345μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(95mg, 414mmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(29.5mg, 34.5μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(449μL, 449μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 밤새 90℃로 가열한 다음 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 40-100% TBME/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(122mg, 201μmol, 58% 수율, 98% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 594(M+H)⁺, RT 1.61분.

단계 3:

0℃에서, DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((2-플루오로-4-(티아졸-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(118mg, 189μmol)의 용액에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(81mg, 0.16mmol, 85% 수율, 98% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 494(M+H)⁺, RT 1.45분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.94 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.80 - 7.73 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.42 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 6.73 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 5.35 - 5.21 (m, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.54 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.56 - 3.42 (m, 1H), 3.25 - 3.14 (m, 1H), 3.11 - 2.96 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 11.5, 4.5 Hz, 1H), 2.84 - 2.71 (m, 1H), 2.37 - 2.23 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 11.6, 9.9 Hz, 1H), 1.78 - 1.66 (m, 1H), 1.61 - 1.49 (m, 1H), 1.41 - 1.25 (m, 1H), 1.22 - 1.03 (m, 1H), 0.80 - 0.72 (m, 2H), 0.71 - 0.61 (m, 2H). 수중 1H.

합성 070

(2-플루오로-4-(티아졸-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

3급-부틸 (2-플루오로-4-(티아졸-2-일)벤질)카바메이트

2-브로모티아졸(62μL, 683μmol), (4-(((3급-부톡시카보닐)아미노)메틸)-3-플루오로페닐)보론산(175mg, 650μmol), Pd(dppf)Cl₂.DCM(26.6mg, 32.5μmol) 및 제삼인산칼륨(276mg, 1.30mmol)을 디옥산(2.0mL)과 물(0.4mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포한 다음, 100℃에서 1시간 동안 마이크로파 조사하에 가열한 후 RT로 냉각시켰다. 혼합물을 EtOAc(20mL)와 물(20mL)로 희석시켰다. 층을 분리하고, 유기층을 염수(10mL)로 세척한 다음 Na₂SO₄로 건조시키고 여과하여 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% TBME/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(131mg, 332μmol, 51% 수율, 78% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 309(M+H)⁺, R_T 1.93분.

단계 B:

(2-플루오로-4-(티아졸-2-일)페닐)메탄아민

0℃에서, DCM(1.0mL) 중의 3급-부틸 (2-플루오로-4-(티아졸-2-일)벤질)카바메이트(128mg, 415μmol)의 용액에 TFA(0.95mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(80mg, 361μmol, 88% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 209(M+H)⁺, RT 0.99분.

합성 071

5-(아제티딘-3-일메톡시)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -055)

단계 3:

3급-부틸 3-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트

디옥산(2.6mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 3-(하이드록시메틸)아제티딘-1-카르복실레이트(175mg, 840μmol) 및 탄산세슘(274mg, 840μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(13.9mg, 21.0μmol) 및 Ruphos(9.8mg, 21.0μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(117mg, 0.18mmol, 84% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 627(M+H)⁺, RT 2.23분.

단계 4:

0℃에서, TFA(1.0mL)를 DCM(2.0mL) 중의 3급-부틸 3-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트(69mg, 106μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 0℃에서 3시간 동안, RT에서 1시간 동안 교반하고, 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(33mg, 75μmol, 71% 수율, 97% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 427(M+H)⁺, RT 2.00분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.62 (m, 1H), 8.36 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.3, 4.7, 1.2 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H), 4.59 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 4.36 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 3.50 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.27 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.99 - 2.88 (m, 1H), 1.89 - 1.80 (m, 1H), 0.89 - 0.80 (m, 2H), 0.80 - 0.73 (m, 2H). 수중 1H.

합성 072

3-사이클로프로필-N⁵-((1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메틸)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -056)

단계 3:

3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(((1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), (1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메탄아민, HCl(58mg, 252μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(18mg, 21.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(546μL, 546μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 1시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 더 많은 LiHMDS(THF 중 1M)(546μL, 546μmol)로 재충전했다. 반응 혼합물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 밤새 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(87mg, 0.13mmol, 60% 수율, 92% 순도)을 황갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 632(M+H)⁺, RT 2.03분.

단계 4:

DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(((1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(87mg, 0.13mmol)의 용액에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(69mg, 0.13mol, 91% 수율, 97% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 532(M+H)⁺, RT 1.55분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.68 - 8.62 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.93 (dt, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.89 - 7.81 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.69 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.58 - 3.47 (m, 2H), 3.13 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.78 (s, 3H), 2.59 (t, J = 11.7 Hz, 2H), 1.81 - 1.70 (m, 3H), 1.66 - 1.51 (m, 1H), 1.25 - 1.12 (m, 2H), 0.75 (d, J = 7.4 Hz, 4H).

합성 073

5-(3-아미노아제티딘-1-일)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -057)

단계 3:

3급-부틸 (5-(3-아미노아제티딘-1-일)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

디옥산(3.2mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(120mg, 252μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 아제티딘-3-일카바메이트(174mg, 1.01mmol) 및 탄산세슘(329mg, 1.01mmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(16.7mg, 25.2μmol) 및 Ruphos(11.8mg, 25.2μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(122mg, 0.19mmol, 76% 수율, 87% 순도)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 512(M+H)⁺, RT 1.74분.

단계 4:

0℃에서, DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (5-(3-아미노아제티딘-1-일)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(122mg, 0.19mmol)의 용액에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반한 후 RT에서 1시간 동안 교반하고, 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(42mg, 98μmol, 44% 수율, 97% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 412(M+H)⁺, RT 1.30분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.60 (m, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.99 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 7.93 (dt, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.56 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 4.04 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.75 - 3.65 (m, 1H), 3.52 - 3.43 (m, 2H), 2.13 - 1.94 (m, 2H), 1.81 - 1.70 (m, 1H), 0.82 - 0.72 (m, 2H), 0.71 - 0.64 (m, 2H).

합성 074

5-(아제티딘-3-일)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -058)

단계 3:

3급-부틸 3-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아제티딘-1-카르복실레이트/5-(아제티딘-3-일)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(1/0.94)

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(200mg, 420μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), (1-(3급-부톡시카보닐)아제티딘-3-일)아연(II) 요오디드(THF 중 0.5M)(2.10mL, 1.05mmol), Pd(dppf)Cl₂·DCM(34mg, 42.0μmol)의 혼합물을 15분 동안 N₂로 살포한 후, 50℃로 72시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 3-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아제티딘-1-카르복실레이트/5-(아제티딘-3-일)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(1/0.94)(140mg, 175μmol, 41% 수율, 56% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 497(M+H)⁺, RT 1.76분; m/z 397(M+H)⁺, RT 1.03분

단계 4:

0℃에서, TFA(0.5mL)를 DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 3-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아제티딘-1-카르복실레이트/5-(아제티딘-3-일)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(1/0.94)(140mg, 175μmol)의 혼합물에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 분취용 HPLC(물 중 30-100% MeCN/0.3% NH₃)로 추가 정제하여 고체를 수득하고, 이를 MeOH(0.50mL)에 용해시켰다. 용액을 2M 수산화나트륨 수용액(59μL, 117μmol)으로 처리하고, 반응 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반했다. 포화 수성 NH₄Cl(0.5mL)을 첨가하고 용액을 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(50mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(60mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(8mg, 20μmol, 20% 수율, 97% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 397(M+H)⁺, RT 1.03분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.66 - 8.63 (m, 1H), 8.44 - 8.40 (m, 1H), 8.04 (d, J = 8.1 Hz, 3H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.90 - 7.81 (m, 2H), 7.49 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.66 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.83 - 3.70 (m, 2H), 3.63 - 3.55 (m, 2H), 1.99 - 1.90 (m, 1H), 0.90 - 0.76 (m, 4H). 수중 1H.

합성 075

(3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -059)

단계 1:

N-([1,1'-비페닐]-4-일메틸)-5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(5.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(124mg, 0.55mmol) 및 [1,1'-비페닐]-4-일메탄아민(100mg, 545mmol)의 용액에 DIPEA(0.67mL, 3.82mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 50℃로 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 50-100% TBME/이소헥산에 이어, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(182mg, 0.39mmol, 71% 수율, 80% 순도)을 녹색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 375(M+H)⁺, R_T 2.06분.

단계 2:

3급-부틸 ([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트

무수 THF(4.0mL) 중의 N-([1,1'-비페닐]-4-일메틸)-5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(182mg, 388μmol) 및 BOC-무수물(127mg, 583μmol)의 용액에 DMAP(9.5mg, 78μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(218mg, 0.39mmol, 100% 수율, 85% 순도)을 녹색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 419(M-tBu+H)⁺, R_T 2.35분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(5.0mL) 중의 3급-부틸([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(215mg, 385μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(98mg, 423μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(33mg, 39μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(385μL, 385μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(252mg, 377μmol, 97% 수율, 99% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 669(M+H)⁺, RT 2.53분.

단계 4:

DCM(3.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(252mg, 377μmol)의 혼합물에 TFA(1.0mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. 추가 정제 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 표제 화합물(115mg, 240mmol, 64% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 제공했다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 469(M+H)⁺, RT 1.66분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.89 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 4H), 7.52 (s, 1H), 7.48 - 7.40 (m, 4H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 6.72 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.34 - 5.27 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.48 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.57 - 3.42 (m, 1H), 3.24 - 3.15 (m, 1H), 3.08 - 2.97 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 11.6, 4.5 Hz, 1H), 2.84 - 2.74 (m, 1H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.16 (dd, J = 11.6, 9.9 Hz, 1H), 1.78 - 1.65 (m, 1H), 1.61 - 1.51 (m, 1H), 1.38 - 1.26 (m, 1H), 1.20 - 1.06 (m, 1H), 0.80 - 0.71 (m, 2H), 0.69 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 076

(R)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)-5-(피롤리딘-3-일옥시)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -060)

단계 3:

3급-부틸 (R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트

디옥산(2.6mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (R)-3-하이드록시피롤리딘-1-카르복실레이트(162mg, 840μmol) 및 탄산세슘(274mg, 840μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(13.9mg, 21.0μmol) 및 Ruphos(9.8mg, 21.0μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(86mg, 0.13mmol, 64% 수율, 98% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 627(M+H)⁺, RT 2.26분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.68mL, 2.7mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트(85mg, 0.14mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 염화수소(MeOH 중 1.25M)(2.0mL, 2.50mmol)를 첨가하고 생성된 반응 혼합물을 40℃에서 1.5시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN/Et₂O 1:1(3mL)로 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(44mg, 100μmol, 75% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 427(M+H)⁺, RT 1.61분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.66 - 8.62 (m, 1H), 8.35 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.34 - 5.28 (m, 2H), 4.59 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.08 (dd, J = 12.3, 5.7 Hz, 1H), 2.89 - 2.70 (m, 3H), 2.06 - 1.94 (m, 1H), 1.87 - 1.79 (m, 1H), 1.76 - 1.67 (m, 1H), 0.89 - 0.76 (m, 4H). 수중 1H.

합성 077

(R)-3-사이클로프로필-5-(피페리딘-3-일옥시)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -061)

단계 3:

3급-부틸 (R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(2.6mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(103mg, 216μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (R)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(183mg, 866μmol) 및 탄산세슘(282mg, 866μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(14.4mg, 21.6μmol) 및 Ruphos(10.1mg, 21.6μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(202mg, 88μmol, 41% 수율, 28% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 641(M+H)⁺, RT 2.56분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.88mL, 3.5mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(202mg, 88μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 염화수소(MeOH 중 1.25M)(2.0mL, 2.50mmol)를 첨가하고 생성된 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN/Et₂O 1:1(3mL)로 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(37mg, 82μmol, 93% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 441(M+H)⁺, RT 1.68분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.66 - 8.62 (m, 1H), 8.34 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.95 - 7.91 (m, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.3, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.94 - 4.86 (m, 1H), 4.59 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.10 (dd, J = 11.9, 3.9 Hz, 1H), 2.79 - 2.71 (m, 1H), 2.48 - 2.39 (m, 1H), 2.06 - 1.98 (m, 1H), 1.88 - 1.78 (m, 1H), 1.67 - 1.58 (m, 1H), 1.51 - 1.37 (m, 2H), 0.87 - 0.76 (m, 4H). 수중 2H.

합성 078

3-사이클로프로필-N⁵-((4-플루오로피페리딘-4-일)메틸)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -062)

단계 3:

3급-부틸 4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-4-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(101mg, 200μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 4-(아미노메틸)-4-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(56mg, 240μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(17mg, 20.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(240μL, 240μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 6시간 동안 가열했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(92mg, 0.13mmol, 65% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 672(M+H)⁺, RT 2.13분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.64mL, 2.6mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-4-플루오로피리딘-1-카르복실레이트(91mg, 0.13mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 염화수소(MeOH 중 1.25M)(2.0mL, 2.50mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 40℃에서 1.5시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(47mg, 96μmol, 75% 수율, 97% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 472(M+H)⁺, RT 1.48분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.62 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.93 (dt, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.89 - 7.83 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.76 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.49 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.51 (dd, J = 21.1, 6.1 Hz, 2H), 2.78 - 2.60 (m, 4H), 1.81 - 1.70 (m, 1H), 1.67 - 1.45 (m, 4H), 0.80 - 0.70 (m, 4H). 수중 1H.

합성 079

3-사이클로프로필-N⁵-((4-메틸피페리딘-4-일)메틸)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -063)

단계 3:

3급-부틸 4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-4-메틸피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(101mg, 200μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 4-(아미노메틸)-4-메틸피페리딘-1-카르복실레이트(57mg, 240μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(17.1mg, 20.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(240μL, 240μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 6시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 더 많은 3급-부틸 4-(아미노메틸)-4-메틸피페리딘-1-카르복실레이트(23mg, 100μmol), ^tBuBrettPhos Pd G3(17.1mg, 20.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(100μL, 100μmol)로 재충전했다. 반응 혼합물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 2.5시간 동안 가열했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(78mg, 0.11mmol, 56% 수율, 97% 순도)을 황갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 668(M+H)⁺, R_T 2.22분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.56mL, 2.2mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-4-메틸피페리딘-1-카르복실레이트(77mg, 0.11mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 1.5시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 염화수소(MeOH 중 1.25M)(2.0mL, 2.50mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 40℃에서 30분 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 DCM/MeOH 30/70(80mL)으로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(42mg, 85μmol, 76% 수율, 96% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 468(M+H)⁺, RT 1.95분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.60 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89 - 7.83 (m, 1H), 7.77 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.33 (dd, J = 7.2, 4.9 Hz, 1H), 6.51 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.18 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 2.80 - 2.65 (m, 2H), 2.63 - 2.54 (m, 2H), 1.81 - 1.71 (m, 1H), 1.40 - 1.28 (m, 2H), 1.18 - 1.09 (m, 2H), 0.86 (s, 3H), 0.80 - 0.71 (m, 4H). 수중 1H.

합성 080

(S)-3-사이클로프로필-5-(피페리딘-3-일옥시)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -064)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(2.6mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 216μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(178mg, 841μmol) 및 탄산세슘(274mg, 841μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(13.9mg, 21.0μmol) 및 Ruphos(9.8mg, 21.0μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(110mg, 140μmol, 66% 수율, 81% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 641(M+H)⁺, RT 2.56분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.72mL, 6.9mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(110mg, 172μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(53mg, 120μmol, 68% 수율, 97% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 441(M+H)⁺, RT 1.21분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.34 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.93 - 4.84 (m, 1H), 4.59 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.13 - 3.05 (m, 1H), 2.77 - 2.68 (m, 1H), 2.43 (ddd, J = 16.4, 12.0, 8.9 Hz, 1H), 2.24 - 2.13 (m, 1H), 2.03 - 1.99 (m, 1H), 1.88 - 1.77 (m, 1H), 1.66 - 1.58 (m, 1H), 1.51 - 1.37 (m, 2H), 0.87 - 0.75 (m, 4H). 수중 1H.

합성 081

(S)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)-5-(피롤리딘-3-일옥시)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -065)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트

디옥산(3.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-하이드록시피롤리딘-1-카르복실레이트(157mg, 840μmol) 및 탄산세슘(274mg, 840μmol)을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(13.9mg, 21.0μmol) 및 Ruphos(9.8mg, 21.0μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(120mg, 160μmol, 74% 수율, 81% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 627(M+H)⁺, RT 2.49분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.91mL, 7.7mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트(120mg, 191μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(58mg, 130μmol, 69% 수율, 97% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 427(M+H)⁺, RT 1.17분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.35 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 5.33 - 5.28 (m, 2H), 4.59 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.07 (dd, J = 12.3, 5.8 Hz, 1H), 2.88 - 2.78 (m, 1H), 2.78 - 2.68 (m, 2H), 2.06 - 1.92 (m, 1H), 1.89 - 1.78 (m, 1H), 1.75 - 1.66 (m, 1H), 0.86 - 0.79 (m, 4H). 수중 1H.

합성 082

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -066)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(10mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(227mg, 0.99mmol) 및 (3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메탄아민(200mg, 0.99mmol)의 용액에 DIPEA(1.21mL, 6.96mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃로 3시간 동안 가열하였다. 생성되는 고체를 여과하여 수집하고, 물(3 x 2mL)로 세척했다. 고체를 MeCN(10mL)에 용해시키고, 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(346mg, 0.87mmol, 88% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 393(M+H)⁺, R_T 2.45분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)카바메이트

무수 THF(9.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(346mg, 872μmol) 및 BOC-무수물(228mg, 1.05mmol)의 용액에 DMAP(21mg, 174μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(415mg, 0.72mmol, 83% 수율, 86% 순도)을 녹색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 437(M-tBu+H)⁺, R_T 2.71분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)카바메이트(200mg, 349μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(88mg, 384μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(29.8mg, 35μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(454μL, 454μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(291mg, 0.32mmol, 91% 수율, 75% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 687(M+H)⁺, R_T 2.19분.

단계 4:

TFA(1.0mL)를 DCM(3.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(291mg, 0.32mmol)의 혼합물에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(40mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(157mg, 0.32mmol, 99% 수율, 98% 순도)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 487(M+H)⁺, RT 1.27분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.80 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.70 - 7.65 (m, 2H), 7.58 - 7.49 (m, 2H), 7.49 - 7.43 (m, 3H), 7.41 - 7.35 (m, 2H), 6.75 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.31 - 5.23 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.53 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.56 - 3.44 (m, 1H), 3.26 - 3.18 (m, 1H), 3.09 - 2.97 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 11.5, 4.5 Hz, 1H), 2.83 - 2.72 (m, 1H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 11.6, 9.9 Hz, 1H), 1.77 - 1.68 (m, 1H), 1.60 - 1.51 (m, 1H), 1.37 - 1.27 (m, 1H), 1.20 - 1.11 (m, 1H), 0.82 - 0.73 (m, 2H), 0.71 - 0.60 (m, 2H). 수중 1H.

합성 083

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-((2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -067)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-(2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

IPA(3.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(110mg, 0.47mmol) 및 (2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)페닐)메탄아민(91mg, 0.45mmol)의 용액에 DIPEA(0.23mL, 1.3mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 70℃로 2시간 동안 가열하였다. RT에서, 물(1mL)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반했다. 생성된 침전물을 여과하여 수집하고, IPA/물 2:1(3mL)로 세척했다. 고체를 DCM(15mL)에 용해시키고, 용액을 Na₂SO₄로 건조시키고 여과하고 진공하에 농축시켜 표제 화합물(127mg, 0.32mmol, 70% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 395(M+H)⁺, R_T 2.14분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(1.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-(2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(125mg, 317μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(88mg, 380μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(27mg, 32μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(412μL, 412μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 밤새 90℃로 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 100% TBME)로 정제하여 표제 화합물(109mg, 0.18mmol, 57% 수율, 98% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 589(M+H)⁺, R_T 1.58분.

단계 4:

0℃에서, TFA(0.7mL)를 DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(107mg, 173μmol)의 혼합물에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(40mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(55mg, 0.11mmol, 65% 수율, 99% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 489(M+H)⁺, RT 1.24분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.92 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.20 (dd, J = 8.1, 1.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 11.5, 1.6 Hz, 1H), 7.85 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.50 - 7.42 (m, 2H), 6.73 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.35 - 5.21 (m, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.58 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.49 (s, 1H), 3.26 - 3.15 (m, 1H), 3.06 - 2.97 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 11.6, 4.6 Hz, 1H), 2.82 - 2.72 (m, 1H), 2.40 - 2.23 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 11.6, 9.9 Hz, 1H), 1.77 - 1.68 (m, 1H), 1.61 - 1.49 (m, 1H), 1.38 - 1.27 (m, 1H), 1.18 - 1.06 (m, 1H), 0.85 - 0.72 (m, 2H), 0.71 - 0.59 (m, 2H). 수중 1H.

합성 084

(2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

3급-부틸 (2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)벤질)카바메이트

2-클로로피리미딘(75mg, 650μmol), (4-(((3급-부톡시카보닐)아미노)메틸)-3-플루오로페닐)보론산(175mg, 650μmol), Pd(dppf)Cl₂.DCM(27mg, 32.5μmol) 및 제삼인산칼륨(276mg, 1.30mmol)을 디옥산(2.0mL)과 물(0.4mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포한 다음 100℃에서 1시간 동안 마이크로파 조사하에 가열한 후 RT로 냉각시켰다. 혼합물을 EtOAc(25mL)와 물(25mL)로 희석시켰다. 층을 분리하고 유기층을 염수(10mL)로 세척한 다음 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(140mg, 0.46mmol, 70% 수율, 99% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 248 (M-tBu+H)+, R_T 1.82분.

단계 B:

(2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)페닐)메탄아민

0℃에서, DCM(1.0mL) 중의 3급-부틸 (2-플루오로-4-(피리미딘-2-일)벤질)카바메이트(138mg, 455μmol)의 용액에 TFA(1.05mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(91mg, 0.44mmol, 97% 수율, 99% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 204(M+H)⁺, RT 0.90분.

합성 085

(3R,4R)-4-(((3-에틸-7-((2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -068)

단계 1:

5-클로로-3-에틸-N-(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(5mL) 중의 5,7-디클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘(100mg, 0.46mmol) 및 (2-플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(103mg, 0.51mmol)의 용액에 DIPEA(0.56mL, 3.24mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃로 밤새 가열했다. RT에서, 물(2mL)을 첨가하고, 고체를 여과하여 수집하고, 물(5mL)로 세척하여 표제 화합물(170mg, 0.42mmol, 91% 수율, 95% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 382(M+H)⁺, R_T 2.08분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(4.0mL) 중의 5-클로로-3-에틸-N-(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(170mg, 423μmol) 및 BOC-무수물(111mg, 508μmol)의 용액에 DMAP(10.3mg, 84.6μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(174mg, 0.34mmol, 81% 수율, 95% 순도)을 녹색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 382(M-Boc+H)⁺, R_T 2.49분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(174mg, 361μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(92mg, 397μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(30.8mg, 36μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(469μL, 469μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(217mg, 321μmol, 89% 수율, 99% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 676(M+H)⁺, R_T 2.00분.

단계 4:

DCM(3.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(214mg, 317μmol)의 용액에 TFA(1.0mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(136mg, 0.28mmol, 89% 수율, 98% 순도)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 476(M+H)⁺, RT 1.29분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.71 - 8.62 (m, 1H), 7.99 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.95 - 7.82 (m, 4H), 7.67 (s, 1H), 7.42 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.38 (ddd, J = 7.5, 4.8, 1.1 Hz, 1H), 6.76 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 5.48 - 5.34 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.56 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.60 - 3.46 (m, 1H), 3.21 - 3.13 (m, 1H), 3.06 - 2.96 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 11.5, 4.5 Hz, 1H), 2.84 - 2.73 (m, 1H), 2.48 - 2.44 (m, 2H), 2.37 - 2.26 (m, 1H), 2.16 (dd, J = 11.6, 9.9 Hz, 1H), 1.59 - 1.50 (m, 1H), 1.37 - 1.26 (m, 1H), 1.18 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 1.14 - 1.08 (m, 1H). 수중 1H.

합성 086

(3R,4R)-4-(((3-에틸-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -069)

단계 1:

5-클로로-3-에틸-N-((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(5.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘(100mg, 0.46mmol) 및 (3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메탄아민(102mg, 0.51mmol)의 용액에 DIPEA(0.56mL, 3.24mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 50℃로 가열했다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 물(3 x 2mL)로 세척하였다. 고체를 MeCN(10mL)에 용해시키고, 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(175mg, 0.44mmol, 94% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 381(M+H)⁺, R_T 2.45분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)카바메이트

무수 THF(4.0mL) 중의 5-클로로-3-에틸-N-((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(175mg, 437μmol) 및 BOC-무수물(114mg, 524μmol)의 용액에 DMAP(10.7mg, 87μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(192mg, 0.35mmol, 80% 수율, 88% 순도)을 녹색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 425(M-tBu+H)⁺, R_T 2.73분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(4.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)카바메이트(192mg, 399μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(101mg, 439μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(34.1mg, 40μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(519μL, 519μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 4시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(214mg, 0.30mmol, 75% 수율, 95% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 675(M+H)⁺, R_T 2.18분.

단계 4:

TFA(1.0mL)를 DCM(3.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)아미노)-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(217mg, 305μmol)의 혼합물에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(130mg, 0.26mmol, 85% 수율, 95% 순도)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 475(M+H)⁺, RT 1.56분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.84 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.72 - 7.63 (m, 3H), 7.58 - 7.50 (m, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 3H), 7.42 - 7.35 (m, 2H), 6.78 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 5.49 - 5.36 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.54 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.62 - 3.46 (m, 1H), 3.23 - 3.13 (m, 1H), 3.08 - 2.97 (m, 1H), 2.91 (dd, J = 11.6, 4.5 Hz, 1H), 2.85 - 2.75 (m, 1H), 2.49 - 2.44 (m, 2H), 2.36 - 2.26 (m, 1H), 2.17 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.60 - 1.50 (m, 1H), 1.38 - 1.27 (m, 1H), 1.22 - 1.09 (m, 4H). 수중 1H.

합성 087

7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)-5-((((3R,4R)-3-하이드록시피페리딘-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

(PPA -070)

단계 1:

5-클로로-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

EtOH(5.0mL) 중의 5,7-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(250mg, 1.17mmol) 및 (3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메탄아민(300mg, 1.34mmol)의 용액에 DIPEA(1.42mL, 8.17mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 50℃로 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(270mg, 0.66mmol, 57% 수율, 93% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 378(M+H)⁺, R_T 2.20분.

단계 2:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((3-시아노-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

NMP(1.5mL) 중의 5-클로로-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(50mg, 0.13mmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(61mg, 0.26mmol) 및 DIPEA(69μL, 0.40mmol)의 용액을 120℃에서 2시간 동안 마이크로파 조사하에 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. RP 플래시 C18 상(24g 카트리지, 0-100% MeCN 중 0.1% 포름산/물 중 0.1% 포름산)에서 정제하여 표제 화합물(75mg, 0.12mmol, 94% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 572(M+H)⁺, R_T 2.23분.

단계 3:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.6mL, 6.4mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((3-시아노-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(75mg, 0.16μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(28mg, 59μmol, 37% 수율, 99% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 472(M+H)⁺, RT 1.43분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.28 (s, 1H), 8.26 - 8.22 (m, 1H), 7.72 - 7.65 (m, 2H), 7.55 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 7.53 - 7.43 (m, 3H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 7.28 - 7.23 (m, 1H), 5.44 - 5.39 (m, 1H), 4.76 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.59 - 3.43 (m, 1H), 3.14 - 3.02 (m, 1H), 2.97 - 2.88 (m, 1H), 2.81 - 2.74 (m, 1H), 2.30 - 2.25 (m, 2H), 2.15 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.68 - 1.60 (m, 1H), 1.42 - 1.31 (m, 1H), 1.14 - 0.99 (m, 1H). 수중 1H.

합성 088

(S)-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)-5-(피롤리딘-3-일아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

(PPA -071)

단계 2:

3급-부틸 (S)-3-((3-시아노-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

NMP(1.5mL) 중의 5-클로로-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(70mg, 185μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(138mg, 741μmol) 및 DIPEA(97μL, 0.56mmol)의 용액을 120℃에서 2시간 동안 마이크로파 조사하에 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. RP 플래시 C18 상(24g 카트리지, 0-100% MeCN 중의 0.1% 포름산/물 중 0.1% 포름산)에서 정제하여 표제 화합물(80mg, 0.14mmol, 78% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 550(M+Na)⁺, R_T 2.33분.

단계 3:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.5mL, 6.1mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((3-시아노-7-(((3-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트(80mg, 0.15μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(26mg, 58μmol, 38% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 428(M+H)⁺, RT 1.42분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.29 (s, 1H), 8.35 - 8.23 (m, 1H), 7.72 - 7.65 (m, 2H), 7.56 (dd, J = 11.7, 1.7 Hz, 1H), 7.53 - 7.34 (m, 6H), 5.30 (s, 1H), 4.61 - 4.51 (m, 2H), 4.45 - 4.13 (m, 1H), 3.01 (s, 1H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 2.80 - 2.73 (m, 1H), 2.58 - 2.51 (m, 1H), 2.02 - 1.92 (m, 1H), 1.58 - 1.46 (m, 1H). 수중 1H.

합성 089

(S)-3-사이클로프로필-N⁷-(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)-N⁵-(피롤리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -072)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

디옥산(2.6mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 202μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(155mg, 810μmol) 및 탄산세슘(264mg, 810μmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(13.4mg, 20.2μmol) 및 Ruphos(9.5mg, 20.2μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(90mg, 0.13mmol, 63% 수율, 91% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 644(M+H)⁺, RT 2.49분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.4mL, 5.6mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트(90mg, 0.14μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(18mg, 39μmol, 28% 수율, 97% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 444(M+H)⁺, RT 1.10분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.69 - 8.63 (m, 1H), 7.99 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.95 - 7.86 (m, 3H), 7.84 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.45 - 7.34 (m, 2H), 6.77 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.55 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.25 - 4.20 (m, 1H), 3.16 - 3.07 (m, 1H), 2.98 - 2.91 (m, 1H), 2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.73 - 2.65 (m, 1H), 2.06 - 1.96 (m, 1H), 1.83 - 1.71 (m, 1H), 1.66 - 1.54 (m, 1H), 0.83 - 0.71 (m, 4H). 수중 1H.

합성 090

3-사이클로프로필-5-(((3R,4R)-4-플루오로피롤리딘-3-일)옥시)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민/

3-사이클로프로필-5-(((3S,4S)-4-플루오로피롤리딘-3-일)옥시)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(1:1)

(PPA -073)

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)-4-플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트/3급-부틸 (3S,4S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)-4-플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트(1:1)

디옥산(2.6mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 라세미 트랜스-3급-부틸 3-플루오로-4-하이드록시피롤리딘-1-카르복실레이트(178mg, 841μmol) 및 탄산세슘(274mg, 840μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(13.9mg, 21.0μmol) 및 Ruphos(9.8mg, 21.0μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(120mg, 0.15mmol, 73% 수율, 82% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 645(M+H)⁺, RT 2.52분.

단계 4:

3-사이클로프로필-5-(((3R,4R)-4-플루오로피롤리딘-3-일)옥시)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민/3-사이클로프로필-5-((((3S,4S)-4-플루오로피롤리딘-3-일)옥시)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(1:1)

염화수소(디옥산 중 4M)(1.9mL, 7.4mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)-4-플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트/3급-부틸 (3S,4S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)-4-플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트(1:1)(120mg, 186μmol))의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(78mg, 0.17mmol, 92% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 445(M+H)⁺, RT 1.20분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.64 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.46 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 5.36 (s, 1H), 5.34 - 5.26 (m, 1H), 5.19 - 5.02 (m, 1H), 4.60 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.36 (dd, J = 12.6, 6.0 Hz, 1H), 3.00 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 2.92 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 2.70 (dd, J = 12.7, 3.7 Hz, 1H), 1.90 - 1.79 (m, 1H), 0.92 - 0.78 (m, 4H). 수중 1H.

합성 091

(3R,4R)-4-(((3-클로로-7-((2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -074)

단계 1:

3,5-디클로로-N-(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

IPA(2.0mL) 중의 3,5,7-트리클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘(133mg, 0.60mmol) 및 (2-플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민(115mg, 0.57mmol)의 용액에 DIPEA(0.30mL, 1.71mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사하에 30분 동안 80℃로 가열했다. 반응 혼합물을 EtOAc(20mL)와 물(20mL) 사이에 분할했다. 층을 분리하고 유기층을 염수(10mL)로 세척하고 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-5% MeOH/TBME)로 정제하여 표제 화합물(173mg, 0.42mmol, 73% 수율, 95% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.16 - 9.10 (m, 1H), 8.68 - 8.65 (m, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.06 - 7.81 (m, 4H), 7.52 - 7.27 (m, 2H), 6.36 (s, 1H), 4.77 (d,　J　= 5.0 Hz, 2H).

단계 2:

3급-부틸 (3,5-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

무수 THF(1.5mL) 중의 3,5-디클로로-N-(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(170mg, 438μmol) 및 BOC-무수물(105mg, 482μmol)의 용액에 DMAP(5.4mg, 44μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 1시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% TBME/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(210mg, 0.42mmol, 96% 수율, 98% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.69 - 8.61 (m, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.99 (d,　J　= 8.0 Hz, 1H), 7.92 - 7.79 (m, 3H), 7.58 (t,　J　= 8.0 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.39 - 7.36 (m, 1H), 5.08 (s, 2H), 1.28 (s, 9H).

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(1.0mL) 중의 3급-부틸 (3,5-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(150mg, 307μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(85mg, 369mmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(26.2mg, 30.7μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(399μL, 399μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 밤새 60℃로 가열했다. RT에서, 염수(2mL)와 DCM(10mL). 층을 분리하고, 유기층을 Na₂SO₄에서 건조시키고 여과하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(100g, 0.14mmol, 47% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 683(M+H)⁺, R_T 2.31분.

단계 4:

0℃에서, DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(2-플루오로-4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(86mg, 0.12mmol)의 용액에 TFA(0.66mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(40mg, 81μmol, 58% 수율, 98% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 482(M+H)⁺, RT 1.25분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.72 - 8.62 (m, 1H), 8.05 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.96 - 7.86 (m, 4H), 7.49 - 7.32 (m, 2H), 7.00 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 5.29 (s, 1H), 5.16 - 4.93 (m, 1H), 4.57 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.51 - 3.36 (m, 1H), 3.12 - 2.98 (m, 1H), 2.92 (dd, J = 11.6, 4.6 Hz, 1H), 2.86 - 2.71 (m, 1H), 2.39 - 2.24 (m, 1H), 2.23 - 2.09 (m, 1H), 1.66 - 1.52 (m, 1H), 1.42 - 1.27 (m, 1H), 1.20 - 1.00 (m, 1H). 수중 2H.

합성 092

(S)-4-((3-사이클로프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-2-온

(PPA -075)

단계 3:

3급-부틸 (S)-(3-사이클로프로필-5-((5-옥소피롤리딘-3-일)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(120mg, 252μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), (S)-4-아미노피롤리딘-2-온(114mg, 1.13mmol)의 용액을 5분 동안 N₂에서 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(21.5mg, 25.2μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(378μL, 378μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 5시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(90mg, 0.16mmol, 65% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 540(M+H)⁺, R_T 1.68분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.70mL, 6.7mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-(3-사이클로프로필-5-((5-옥소피롤리딘-3-일)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(90mg, 0.17mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(26mg, 58μmol, 35% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 440(M+H)⁺, RT 1.07분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.96 - 7.89 (m, 2H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.33 (dd, J = 7.3, 4.8 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 3.56 (dd, J = 9.9, 6.8 Hz, 1H), 3.04 (dd, J = 9.9, 4.5 Hz, 1H), 2.04 (dd, J = 16.7, 5.6 Hz, 1H), 1.82 - 1.71 (m, 1H), 0.85 - 0.72 (m, 4H). 수중 1H.

합성 093

(3R,4R)-4-(((3-사이클로프로필-7-(((3,5-디플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -076)

단계 1:

5-클로로-3-사이클로프로필-N-((3,5-디플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(7.0mL) 중의 5,7-디클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘(145mg, 637μmol) 및 (3,5-디플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메탄아민(160mg, 701μmol)의 용액에 DIPEA(0.78mL, 4.46mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 60℃로 72시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100%0 EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(250mg, 0.24mmol, 37% 수율, 39% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 411(M+H)⁺, R_T 2.51분.

단계 2:

3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((3,5-디플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)카바메이트

무수 THF(6.0mL) 중의 5-클로로-3-사이클로프로필-N-((3,5-디플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(250mg, 237μmol) 및 BOC-무수물(159mg, 729μmol)의 용액에 DMAP(15mg, 120μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(24g 카트리지, 20-80% MeCN/10nM 중탄산암모늄)에서 정제하여 표제 화합물(71mg, 0.13mmol, 53% 수율, 90% 순도)을 녹색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 455(M-tBu+H)⁺, R_T 2.70분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((3,5-디플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(1.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)((3,5-디플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)카바메이트(71mg, 0.14mmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(35mg, 0.15mmol)의 용액을 5분 동안 N₂에서 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(12mg, 14μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(180μL, 180μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 2.5시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(89mg, 0.12mmol, 88% 수율, 97% 순도)을 갈색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 705(M+H)⁺, R_T 2.53분.

단계 4:

DCM(0.75mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)((3,5-디플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(86mg, 0.12mmol)의 혼합물에 TFA(0.25mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(35mg, 66μmol, 54% 수율, 95% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 505(M+H)⁺, RT 1.34분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.80 - 7.72 (m, 2H), 7.52 - 7.38 (m, 7H), 6.90 - 6.81 (m, 1H), 5.33 (s, 1H), 5.32 - 5.24 (m, 1H), 4.54 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.59 - 3.46 (m, 0H), 3.28 - 3.20 (m, 1H), 3.11 - 3.01 (m, 1H), 2.92 (dd, J = 11.8, 4.5 Hz, 1H), 2.85 - 2.75 (m, 1H), 2.40 - 2.26 (m, 1H), 2.17 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.74 - 1.66 (m, 1H), 1.65 - 1.55 (m, 1H), 1.43 - 1.32 (m, 1H), 1.23 - 1.12 (m, 1H), 0.80 - 0.70 (m, 2H), 0.68 - 0.58 (m, 2H). 수중 2H.

합성 094

(2,6-디플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

단계 A:

(2,6-디플루오로-4-(피리딘-2-일)페닐)메탄아민

(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)메탄아민(210mg, 946μmol), 페닐보론산(138mg, 1.13mmol), Pd(dppf)Cl₂(69mg, 95μmol) 및 탄산칼륨(261mg, 1.89mmol)을 THF(9.0mL)와 물(1.0mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포시킨 다음 60℃에서 2시간 동안 가열한 후 RT로 냉각시켰다. 혼합물을 DCM(30mL)과 물(30mL)로 희석시켰다. 층을 분리하고 수성 층을 DCM(2 x 30mL)으로 추출했다. 결합된 유기층을 MgSO₄로 건조시키고 여과한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(160mg, 0.70mmol, 74% 수율, 96% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 220(M+H)⁺, R_T 1.03분.

합성 095

3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)-5-(4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-7-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -077)

단계 3:

3급-부틸 7-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트

디옥산(2.6mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 4-카바모일피페리딘-1-카르복실레이트(48mg, 210μmol) 및 탄산세슘(274mg, 840μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(13.9mg, 21.0μmol) 및 Ruphos(9.8mg, 21.0μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(60mg, 88μmol, 42% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 668(M+H)⁺, RT 2.36분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.20mL, 4.9mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 7-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트(60mg, 92μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(17mg, 37μmol, 40% 수율, 97% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 452(M+H)⁺, RT 1.17분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.03 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.95 - 7.87 (m, 2H), 7.86 (td, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 5.45 (s, 1H), 4.59 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.51 - 3.44 (m, 2H), 2.77 - 2.71 (m, 2H), 1.76 (tt, J = 8.1, 5.4 Hz, 1H), 0.80 - 0.68 (m, 4H), 0.42 - 0.32 (m, 4H). 수중 3H.

합성 096

(S)-4-아미노-1-(3-사이클로프로필-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)피롤리딘-2-온

(PPA -078)

단계 3:

3급-부틸 (S)-(5-(4-아미노-2-옥소피롤리딘-1-일)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

디옥산(2.6mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), (S)-4-아미노피롤리딘-2-온(84mg, 840μmol) 및 탄산세슘(274mg, 840μmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(13.6mg, 21.0μmol) 및 Ruphos(9.8mg, 21.0μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(40mg, 73μmol, 35% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 540(M+H)⁺, RT 1.36분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.74mL, 3.0mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-(5-(4-아미노-2-옥소피롤리딘-1-일)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(40mg, 74μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(18mg, 41μmol, 55% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 440(M+H)⁺, RT 1.07분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.66 - 8.62 (m, 1H), 8.52 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 7.6, 1.9 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.36 - 7.30 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 4.58 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.99 (dd, J = 11.4, 6.1 Hz, 1H), 3.71 (dd, J = 11.3, 3.4 Hz, 1H), 3.59 - 3.52 (m, 1H), 2.75 (dd, J = 16.8, 6.9 Hz, 1H), 2.21 (dd, J = 16.8, 3.9 Hz, 1H), 2.09 - 1.93 (m, 2H), 1.92 - 1.83 (m, 1H), 0.84 (d, J = 8.5 Hz, 4H).

합성 097

3-사이클로프로필-5-(1H-피라졸-5-일)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -079)

단계 3:

3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(1H-피라졸-5-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

디옥산(3.0mL) 중의 3-(테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(44mg, 227μmol), 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(90mg, 189μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨) 및 Pd(dppf)Cl₂(27.7mg, 37.8μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(0.75mL) 중의 제삼인산칼륨(120mg, 567μmol)의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 90℃로 6시간 동안 가열하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(102mg, 0.19mmol, 76% 수율, 96% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 508(M+H)⁺, R_T 1.79분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.96mL, 3.8mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(1H-피라졸-5-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(101mg, 191μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 1.5시간 동안 교반한 후 염화수소(MeOH 중 125M)(2.0mL, 2.5mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(63mg, 151μmol, 80% 수율, 99% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 408(M+H)⁺, RT 1.42분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) - 토오토머의 0.80/0.20 혼합물 - δ 13.43 (s, 0.2H), 12.99 (s, 0.8H), 8.69 - 8.59 (m, 1.2H), 8.58 - 8.45 (m, 0.8H), 8.09 - 8.01 (m, 2H), 7.96 - 7.81 (m, 3.2H), 7.78 (s, 0.8H), 7.61 - 7.45 (m, 2H), 7.32 (ddd, J = 7.3, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.91 - 6.74 (m, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.72 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.09 - 1.93 (m, 1H), 0.97 - 0.79 (m, 4H).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) - 90℃에서 VT - δ 13.40 - 12.40 (m, 1H), 8.69 - 8.59 (m, 1H), 8.15 - 8.00 (m, 3H), 7.90 - 7.79 (m, 3H), 7.75 - 7.61 (m, 1H), 7.54 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.30 (ddd, J = 7.3, 4.8, 1.4 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 4.75 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.09 - 1.98 (m, 1H), 0.97 - 0.85 (m, 4H).

합성 098

5-(3,6-디아자비사이클로[3.1.1]헵탄-3-일)-3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -080)

단계 3:

3급-부틸 3-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-3,6-디아자비사이클로[3.1.1]헵탄-6-카르복실레이트

디옥산(2.7mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(106mg, 209μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 6-(3급-부틸옥시카보닐)-3,6-디아자비사이클로[3.1.1]헵탄(87.38mg, 419μmol) 및 탄산세슘(136mg, 419μmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(20.8mg, 31.4μmol) 및 Ruphos(14.7mg, 31.4μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 8시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(20mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중의 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(72mg, 0.11mmol, 50% 수율, 94% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 638(M+H)⁺, RT 2.11분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.56mL, 2.2mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 3-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-3,6-디아자비사이클로[3.1.1]헵탄-6-카르복실레이트(71mg, 0.11mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 1.5시간 동안 교반한 후 염화수소(MeOH 중 1.25M)(2.0mL, 2.5mmol)를 교반하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 분취용 HPLC(물 중 30-100% MeCN/0.3% NH₃)로 정제하여 표제 화합물(17mg, 39μmol, 35% 수율, 98% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 438(M+H)⁺, RT 1.22분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.64 (ddd, J = 4.8, 1.8, 0.9 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.99 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 7.92 (dt, J = 8.1, 1.2 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.61 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.62 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.59 - 3.48 (m, 4H), 2.47 - 2.40 (m, 1H), 1.83 - 1.73 (m, 1H), 1.67 - 1.58 (m, 1H), 1.38 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 0.81 - 0.71 (m, 4H).

합성 099

7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-5-((((3R,4R)-3-하이드록시피페리딘-4-일)메틸)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

(PPA -081)

단계 1:

7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-5-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

EtOH(3.6mL) 중의 5,7-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(205mg, 0.96mmol) 및 [1,1'-비페닐]-4-일메탄아민(218mg, 1.16mmol)의 용액에 DIPEA(1.01mL, 5.77mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃로 밤새 가열했다. 고체를 여과하여 수집하고, 빙냉 EtOH(5mL)에 이어, Et₂O(3 x 8mL)로 분쇄하여 표제 화합물(343mg, 0.89mmol, 92% 수율, 93% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 360(M+H)⁺, R_T 1.76분.

단계 2:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

NMP(2.0mL) 중의 7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-5-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(170mg, 444μmol), 3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피리딘-1-카르복실레이트(205mg, 888μmol) 및 DIPEA(0.23mL, 1.33mmol)의 용액을 120℃에서 2.5시간 동안 마이크로파 조사하에 가열하였다. RT에서, 반응 혼합물을 물(5mL)의 첨가로 침전시켰다. 고체는 물(2 x 2mL)로 여과 세정하여 수집했다. RP 플래시 C18 상(24g 카트리지, 0-100% MeCN/10nM 중탄산암모늄)에서 정제하여 표제 화합물(197mg, 0.34mmol, 77% 수율, 96% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 498(M-tBu+H)⁺, R_T 2.15분.

단계 3:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.76mL, 7.04mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페라딘-1-카르복실레이트(195mg, 352μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 1.5시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(139mg, 0.30mmol, 85% 수율, 98% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 454(M+H)⁺, RT 1.37분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.44 - 8.29 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.71 - 7.58 (m, 4H), 7.53 - 7.39 (m, 4H), 7.39 - 7.31 (m, 1H), 7.29 - 7.17 (m, 1H), 5.42 (s, 1H), 4.78 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.59 - 4.42 (m, 2H), 3.55 - 3.43 (m, 1H), 3.14 - 3.04 (m, 1H), 2.93 (dd, J = 11.5, 4.5 Hz, 1H), 2.84 - 2.72 (m, 1H), 2.34 - 2.22 (m, 1H), 2.16 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.69 - 1.58 (m, 1H), 1.42 - 1.31 (m, 1H), 1.13 - 0.98 (m, 1H). 수중 2H.

합성 100

(3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -082)

단계 1:

N-([1,1'-비페닐]-4-일메틸)-5-클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.6mL) 중의 5,7-디클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘(205mg, 0.95mmol) 및 [1,1'-비페닐]-4-일메탄아민(215mg, 1.14mmol)의 용액에 DIPEA(0.99mL, 5.70mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃로 밤새 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% (EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(329mg, 0.82mmol, 86% 수율, 90% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 363(M+H)⁺, R_T 2.40분.

단계 2:

3급-부틸 ([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3-에틸-5-메틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트

무수 THF(4.4mL) 중의 N-([1,1'-비페닐]-4-일메틸)-5-클로로-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(329mg, 816μmol) 및 BOC-무수물(267mg, 1.22mmol)의 용액에 DMAP(19.9mg, 163μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% (EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(358mg, 0.71mmol, 87% 수율, 92% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 3): m/z 407(M-tBu+H)⁺, R_T 2.30분.

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.8mL) 중의 3급-부틸 ([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3-에틸-5-메틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(170mg, 338μmol), (3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(93mg, 405μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(28.9mg, 33.8μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(405μL, 405μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 65℃로 4.5시간 동안 가열했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(5mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(127mg, 0.18mmol, 53% 수율, 92% 순도)을 황갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 657(M+H)⁺, R_T 2.12분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.05mL, 4.20mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-에틸피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(127mg, 0.18mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(78mg, 0.17mmol, 94% 수율, 98% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 457(M+H)⁺, RT 1.16분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.91 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.68 - 7.60 (m, 5H), 7.49 - 7.40 (m, 4H), 7.38 - 7.31 (m, 1H), 6.75 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 5.48 - 5.38 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.49 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.63 - 3.46 (m, 1H), 3.21 - 3.11 (m, 1H), 3.05 - 2.96 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 11.5, 4.6 Hz, 1H), 2.82 - 2.74 (m, 1H), 2.48 - 2.43 (m, 2H), 2.30 (dd, J = 13.4, 10.7 Hz, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 1.61 - 1.50 (m, 1H), 1.39 - 1.25 (m, 1H), 1.17 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 1.14 - 1.09 (m, 1H). 수중 1H.

합성 101

(3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-3-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)피페리딘-3-올

(PPA -083)

단계 1:

N-([1,1'-비페닐]-4-일메틸)-3,5-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

EtOH(3.6mL) 중의 3,5,7-트리클로로[1,5-a]피리미딘(235mg, 0.95mmol) 및 [1,1'-비페닐]-4-일메탄아민(215mg, 1.14mmol)의 용액에 DIPEA(0.99mL, 5.70mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃로 밤새 가열했다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(349mg, 0.88mmol, 93% 수율, 93% 순도)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 369(M+H)⁺, R_T 2.33분.

단계 2:

3급-부틸 ([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3,5-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트

무수 THF(4.6mL) 중의 N-([1,1'-비페닐]-4-일메틸)-3,5-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민(349mg, 879μmol) 및 BOC-무수물(288mg, 1.32mmol)의 용액에 DMAP(21.5mg, 176μmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(315mg, 0.65mmol, 74% 수율, 97% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.53 (s, 1H), 7.65 - 7.55 (m, 4H), 7.47 - 7.38 (m, 5H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 5.05 (s, 2H), 1.29 (s, 9H).

단계 3:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트

THF(3.6mL) 중의 3급-부틸 ([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3,5-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(155mg, 320μmol), (3급-부틸 (3R,4R)-4-(아미노메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(89mg, 384μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(27.4mg, 32.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(384μL, 384μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 65℃로 4.5시간 동안 가열했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(5mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(172mg, 0.24mmol, 76% 수율, 94% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.96 (s, 1H), 7.65 (td, J = 5.9, 3.1 Hz, 4H), 7.51 (s, 1H), 7.45 (dd, J = 8.4, 6.9 Hz, 2H), 7.41 - 7.31 (m, 3H), 6.23 (s, 1H), 5.14 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.86 (s, 2H), 4.00 (s, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.59 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 3.13 (tt, J = 10.0, 5.0 Hz, 1H), 1.71 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 1.50 (d, J = 21.9 Hz, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.31 (s, 9H), 1.16 - 1.03 (m, 2H). 수중 2H.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.05mL, 4.20mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(170mg, 0.24mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 40℃에서 1.5시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(103mg, 0.22mmol, 91% 수율, 99% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 463(M+H)⁺, RT 1.39분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.11 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 4H), 7.49 - 7.40 (m, 4H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 6.97 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.09 - 4.97 (m, 1H), 4.50 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.48 - 3.35 (m, 1H), 3.10 - 2.98 (m, 1H), 2.91 (dd, J = 11.7, 4.6 Hz, 1H), 2.82 - 2.73 (m, 1H), 2.35 - 2.23 (m, 1H), 2.15 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.63 - 1.53 (m, 1H), 1.39 - 1.28 (m, 1H), 1.18 - 1.04 (m, 1H). 수중 2H.

합성 102

3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)-5-(2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -084)

단계 3:

3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트/3급-부틸 6-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-카르복실레이트(1:0.24)

디옥산(2.6mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(80mg, 168μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-카르복실레이트, 0.5옥살산(164mg, 672μmol) 및 탄산세슘(438mg, 1.34mmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(11.2mg, 16.8μmol) 및 Ruphos(7.8mg, 16.8μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트/3급-부틸 6-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-카르복실레이트(1:0.24)의 혼합물(80mg, 136μmol, 84% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득했다.

UPLC/MS(방법 2): m/z 638(M+H)⁺, RT 2.32분; m/z 538(M+H)+, RT 1.51분.

단계 4:

DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트/3급-부틸 6-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-카르복실레이트(1:0.24)(80mg, 136μmol)의 혼합물에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(40mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(3 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(30mg, 68μmol, 54% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 438(M+H)⁺, RT 0.88분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.62 (m, 1H), 8.07 - 8.02 (m, 3H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.3, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.59 - 4.55 (m, 2H), 3.97 (s, 4H), 3.67 (s, 4H), 1.80 - 1.71 (m, 1H), 0.80 - 0.73 (m, 2H), 0.72 - 0.66 (m, 2H). 수중 1H.

합성 103

(S)-7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-5-(피롤리딘-3-일아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

(PPA -085)

단계 2:

3급-부틸 (S)-3-((7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

NMP(1.0mL) 중의 7-(([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-5-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(70mg, 183μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(68mg, 366μmol) 및 DIPEA(50μL, 0.29mmol)의 용액을 120℃에서 3시간 동안 마이크로파 조사하에 가열하였다. 반응 혼합물을 DIPEA(50μL, 0.29mmol)로 재충전하고, 120℃에서 1.5시간 동안 마이크로파 조사하에 가열했다. 반응 혼합물을 3급-부틸 (S)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(17mg, 91μmol), DIPEA(50μL, 0.29mmol) 및 NMP(0.25mL)로 재충전하고 120℃에서 2시간 동안 마이크로파 조사하에 가열했다. RT에서, 반응 혼합물은 물(5mL)의 첨가로 침전시켰다. 고체는 물(2mL)로 여과 세정하여 수집했다. RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 0-100% MeCN/10nM 중탄산암모늄)에서 정제하여 표제 화합물(62mg, 0.11mmol, 61% 수율, 92% 순도)을 황갈색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 410(M-Boc+H)⁺, R_T 1.89분.

단계 3:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.55mL, 2.2mmol)를 디옥산(1.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-([1,1'-비페닐]-4-일메틸)아미노)-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트(61mg, 0.11mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-20% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(27mg, 64μmol, 58% 수율, 98% 순도)을 베이지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 410(M+H)⁺, RT 1.51분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.42 - 8.30 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.68 - 7.61 (m, 5H), 7.48 - 7.41 (m, 5H), 7.40 - 7.32 (m, 2H), 5.30 (s, 1H), 4.58 - 4.44 (m, 2H), 4.39 - 4.15 (m, 1H), 3.02 - 2.90 (m, 1H), 2.86 - 2.77 (m, 1H), 2.77 - 2.68 (m, 1H), 2.00 - 1.89 (m, 1H), 1.54 - 1.43 (m, 1H).

합성 104

(S)-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-5-(피롤리딘-3-일아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

(PPA -086)

단계 2:

3급-부틸 (S)-3-((3-시아노-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

NMP(1.0mL) 중의 5-클로로-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(80mg, 217μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(162mg, 869μmol) 및 DIPEA(189μL, 1.09mmol)의 용액을 120℃에서 1시간 동안 마이크로파 조사하에 가열하였다. RT에서, 반응 혼합물을 물(5mL)을 첨가하여 침전시켜 표제 화합물(104mg, 0.19mmol, 88% 수율, 94% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 411(M-Boc+H)⁺, R_T 1.62분.

단계 3:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.96mL, 3.8mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((3-시아노-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트(104mg, 191μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 3시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(80mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(100mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(4g 카트리지, 0-20% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(40mg, 95μmol, 50% 수율, 98% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 411(M+H)⁺, RT 1.20분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.69 - 8.62 (m, 1H), 8.45 - 8.32 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.06 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.97 - 7.91 (m, 1H), 7.87 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.41 - 7.29 (m, 2H), 5.28 (s, 1H), 4.62 - 4.46 (m, 2H), 4.39 - 4.19 (m, 1H), 3.00 (s, 1H), 2.89 - 2.80 (m, 1H), 2.80 - 2.70 (m, 1H), 2.03 - 1.91 (m, 1H), 1.58 - 1.46 (m, 1H). 수중 2H.

합성 105

3-사이클로프로필-N⁵-(((3R,4R)-3-메톡시피페리딘-4-일)메틸)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -087)

단계 A:

3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-메톡시피페리딘-1-카르복실레이트

톨루엔(3.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(300mg, 448μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드(14.4mg, 44.8μmol)의 혼합물에 수산화나트륨(12.5M)(322μL, 4.03mmol) 및 요오도메탄(252, 4.03mmol)의 수용액을 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. RT에서, 물(30mL)과 EtOAc(25mL)를 첨가했다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc(2 x 25mL)로 추출했다. 결합된 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 여과하여 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(130mg, 0.19mmol, 42% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 684(M+H)⁺, RT 2.11분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.48mL, 1.9mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (3R,4R)-4-(((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)메틸)-3-메톡시피페리딘-1-카르복실레이트(130mg, 0.19mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 MeCN(3mL)에서 분쇄하고, 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(40mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(38mg, 77μmol, 41% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 484(M+H)⁺, RT 1.36분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.68 - 8.61 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.92 (dt, J = 8.2, 1.2 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.81 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.51 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.53 - 4.47 (m, 2H), 3.56 - 3.47 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 3.25 - 3.20 (m, 1H), 3.19 - 3.11 (m, 1H), 2.90 (td, J = 9.2, 4.2 Hz, 1H), 2.84 - 2.77 (m, 1H), 2.39 - 2.28 (m, 1H), 2.19 (dd, J = 11.7, 9.2 Hz, 1H), 1.81 - 1.64 (m, 2H), 1.59 - 1.48 (m, 1H), 1.19 - 1.06 (m, 1H), 0.80 - 0.70 (m, 4H). 수중 1H.

합성 106

3-사이클로프로필-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)-5-(1,2,5,6-테트라하이드로피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -088)

단계 3:

3급-부틸 5-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-3,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트

디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디하이드로-1(2H)-피리딘카르복실레이트(78mg, 252μmol), 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨) 및 Pd(dppf)Cl₂(30.8mg, 39.4μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(0.50mL) 중 제삼인산칼륨 용액(134mg, 630μmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 90℃로 6시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(137mg, 0.21mmol, 99% 수율, 95% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 623(M+H)⁺, R_T 2.60분.

단계 4:

DCM(0.60mL) 중의 3급-부틸 5-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)-3,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트(27mg, 43μmol)의 혼합물에 TFA(0.20mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(10mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(14mg, 31μmol, 73% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 423(M+H)⁺, RT 1.12분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67 - 8.61 (m, 1H), 8.35 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.92 (dt, J = 8.2, 1.2 Hz, 1H), 7.89 - 7.82 (m, 2H), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.65 (t, J = 4.1 Hz, 1H), 6.16 (s, 1H), 4.70 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.63 - 3.59 (m, 2H), 2.77 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.20 - 2.09 (m, 2H), 1.93 (p, J = 6.8 Hz, 1H), 0.90 - 0.80 (m, 4H). 수중 1H.

합성 107

(S)-3-사이클로프로필-N⁵-(피페리딘-3-일)-N⁷-(4-(피리미딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -089)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리미딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피페리딘-1-카르복실레이트(50mg, 252μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(17.9mg, 21.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(273μL, 273μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 밤새 가열한 다음 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(59mg, 92μmol, 44% 수율, 99% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 641(M+H)⁺, RT 2.44분.

단계 4:

DCM(0.75mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(59mg, 92μmol)의 혼합물에 TFA(0.25mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(16mg, 35μmol, 38% 수율, 97% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 441(M+H)⁺, RT 1.08분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.89 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 8.36 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.83 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.52 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.78 - 3.66 (m, 1H), 3.05 - 2.95 (m, 1H), 2.79 - 2.69 (m, 1H), 2.43 - 2.35 (m, 1H), 2.23 (dd, J = 11.7, 8.7 Hz, 1H), 1.86 - 1.71 (m, 2H), 1.61 - 1.51 (m, 1H), 1.44 - 1.19 (m, 2H), 0.80 - 0.69 (m, 4H). 수중 1H.

합성 108

(S)-3-사이클로프로필-N⁷-(4-(피리미딘-2-일)벤질)-N⁵-(피롤리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -090)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리미딘-2-일)벤질)카바메이트(100mg, 210μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(47mg, 252μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(17.9mg, 21.0μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(273μL, 273μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 2시간 동안 가열한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(61mg, 97μmol, 46% 수율, 99% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 627(M+H)⁺, RT 2.39분.

단계 4:

DCM(0.75mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트(61mg, 97μmol)의 혼합물에 TFA(0.25mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 1mL)로 분쇄했다. RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 20-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 정제하여 표제 화합물(7mg, 20μmol, 20% 수율, 95% 순도)을 황갈색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 427(M+H)⁺, RT 1.08분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.89 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.36 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.86 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.52 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.21 - 4.09 (m, 1H), 2.97 (dd, J = 11.1, 6.4 Hz, 1H), 2.80 (dt, J = 10.8, 7.5 Hz, 1H), 2.75 - 2.69 (m, 1H), 2.01 - 1.87 (m, 1H), 1.81 - 1.70 (m, 1H), 1.54 - 1.42 (m, 1H), 0.84 - 0.69 (m, 4H). 수중 2H.

합성 109

(S)-N⁷-(4-(1H-피라졸-1-일)벤질)-3-사이클로프로필-N⁵-(피롤리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -091)

단계 3:

3급-부틸 (S)-(4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(3-사이클로프로필-5-(피롤리딘-3-일아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(150mg, 323μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(180mg, 968μmol) 및 탄산세슘(315mg, 968μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(21.4mg, 32.3μmol) 및 Ruphos(15.1mg, 32.3μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(5mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(30mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제한 후, 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-20% EtOAc/DCM)로 추가 정제하여 표제 화합물(27mg, 44μmol, 14% 수율, 99% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 7): m/z 615(M+H)⁺, RT 2.72분.

단계 4:

DCM(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-(4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(3-사이클로프로필-5-(피롤리딘-3-일아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(27mg, 44μmol)의 혼합물에 TFA(0.13mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(18mg, 42μmol, 95% 수율, 96% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 7): m/z 415(M+H)⁺, RT 1.02분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.44 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.92 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.81 - 7.77 (m, 2H), 7.71 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.54 - 6.49 (m, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.56 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.55 - 3.42 (m, 3H), 3.11 - 3.01 (m, 1H), 2.05 - 1.96 (m, 1H), 1.79 - 1.72 (m, 1H), 1.71 - 1.61 (m, 1H), 0.80 - 0.70 (m, 4H). 수중 3H.

합성 110

(S)-5-(피페리딘-3-일아미노)-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

(PPA -092)

단계 2:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 5-클로로-7-((4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(200mg, 554μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피페리딘-1-카르복실레이트(333mg, 1.66mmol) 및 탄산세슘(542mg, 1.66mmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(18.4mg, 27.7μmol) 및 Ruphos(15.5mg, 33.3μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반한 다음 105℃에서 24시간 동안 교반했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(5mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc(60mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(170mg, 0.31mmol, 56% 수율, 95% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 425(M-Boc+H)⁺, R_T 1.69분.

단계 3:

TFA(1.5mL)를 DCM(6.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-시아노피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(170mg, 324μmol)의 혼합물에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-20% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(15g 카트리지, 15-55% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(41mg, 93μmol, 29% 수율, 96% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 425(M+H)⁺, R_T 1.30분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.65 (dt, J = 5.0, 1.3 Hz, 1H), 8.39 - 8.28 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.06 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.87 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.34 (ddd, J = 7.3, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.33 (s, 1H), 4.64 - 4.42 (m, 2H), 3.98 - 3.77 (m, 1H), 3.05 - 2.91 (m, 1H), 2.74 (dt, J = 12.1, 3.9 Hz, 1H), 2.35 (s, 1H), 2.26 (dd, J = 11.6, 9.0 Hz, 1H), 1.88 - 1.73 (m, 1H), 1.63 - 1.52 (m, 1H), 1.45 - 1.21 (m, 2H). 수중 1H.

합성 111

(S)-3-클로로-N⁵-(피페리딘-3-일)-N⁷-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -093)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (3,5-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(본원에 기재된 바와 같이 제조)(200mg, 425μmol), 3급-부틸 (S)-3-아미노피페리딘-1-카르복실레이트(255mg, 1.28mmol) 및 탄산세슘(416mg, 1.28mmol)의 현탁액을 5분 동안 N₂로 탈기시켰다. Pd-171(14.1mg, 21.3μmol) 및 Ruphos(11.9mg, 25.5μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(5mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(60mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(220mg, 0.28mmol, 67% 수율, 82% 순도)을 갈색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 635(M+H)⁺, R_T 2.11분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(1.58mL, 6.31mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(400mg, 631μmol)의 용액에 첨가했다. 반응물을 35℃에서 9시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(40mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 플래시 C18 상(15g 카트리지, 0-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 정제한 후, 실리카 겔 상 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% (0.7M NH₃/MeOH)/TBME)로 정제하여 표제 화합물(99mg, 0.23mmol, 36% 수율, 99% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 435(M+H)⁺, R_T 1.39분.

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8.68 - 8.63 (m, 1H), 8.10 - 8.04 (m, 3H), 7.94 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.91 - 7.84 (m, 2H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.34 (dd, J = 7.4, 4.8 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.52 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.02 - 2.96 (m, 1H), 2.78 - 2.70 (m, 1H), 2.43 - 2.35 (m, 1H), 2.28 - 2.20 (m, 1H), 2.14 - 2.05 (m, 1H), 1.84 - 1.78 (m, 1H), 1.60 - 1.54 (m, 1H), 1.41 - 1.22 (m, 2H). 수중 1H.

합성 112

(S)-5-(피페리딘-3-일아미노)-7-((4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

(PPA -094)

단계 1:

5-클로로-7-((4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴

EtOH(2.0mL) 중의 5,7-디클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(99mg, 0.46mmol) 및 (4-(피리미딘-2-일)페닐)메탄아민(86mg, 0.46mmol)의 용액에 DIPEA(0.40mL, 2.3mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(97mg, 0.26mmol, 57% 수율, 98% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.57 (s, 1H), 8.89 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.72 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.44 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.77 (s, 2H).

단계 2:

3급-부틸 (S)-3-((3-시아노-7-((4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트

NMP(2.0mL) 중의 5-클로로-7-((4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로 [1,5-a]피리미딘-3-카보니트릴(97mg, 0.26mmol), 3급-부틸 (S)-3-아미노피페리딘-1-카르복실레이트(210mg, 1.1mmol) 및 DIPEA(0.18mL, 1.1mmol)의 용액을 120℃에서 3시간 동안 마이크로파 조사하에 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(77mg, 0.14mmol, 54% 수율, 97% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 526(M+H)⁺, R_T 1.99분.

단계 3:

DCM(1.5mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((3-시아노-7-((4-(피리미딘-2-일)벤질)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(77mg, 0.14mmol)의 혼합물에 TFA(0.5mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(30mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(30mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 플래시 C18 상(12g 카트리지, 20-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(35mg, 80μmol, 57% 수율, 97% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 426(M+H)⁺, R_T 1.17분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.89 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 8.37 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 8.35 - 8.30 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.60 - 4.48 (m, 2H), 4.03 - 3.71 (m, 1H), 3.06 - 2.90 (m, 1H), 2.77 - 2.69 (m, 1H), 2.44 - 2.34 (m, 1H), 2.28 - 2.20 (m, 1H), 1.87 - 1.73 (m, 1H), 1.63 - 1.49 (m, 1H), 1.45 - 1.19 (m, 2H). 수중 1H.

합성 113

3-사이클로프로필-5-(3-메틸-1H-피라졸-4-일)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -095)

단계 3:

3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(3-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

디옥산(3.0mL) 중의 3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(66mg, 315μmol), 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(125mg, 263μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨) 및 Pd(dppf)Cl₂(28.8mg, 39.4μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(0.75mL) 중의 제삼인산칼륨(167mg, 788μmol)의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 90℃로 6시간 동안 가열하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-100%(EtOAc 중 EtOH 25:75)/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(130mg, 0.20mmol, 79% 수율, 80% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 522(M+H)⁺, R_T 1.76분.

단계 4:

DCM(4.0mL) 중의 3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(3-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(130mg, 249μmol)의 혼합물에 TFA(1.0mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-20% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(49mg, 0.11mmol, 44% 수율, 95% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 422(M+H)⁺, RT 1.27분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) - 토오토머의 0.65/0.35 혼합물 - δ 12.76 (s, 0.65H), 12.67 (s, 0.35H), 8.66 - 8.60 (m, 1H), 8.41 - 8.29 (m, 1H), 8.25 (s, 0.35H), 8.08 - 8.02 (m, 2H), 7.94 - 7.89 (m, 1.65), 7.88 - 7.81 (m, 2H), 7.60 - 7.46 (m, 2H), 7.32 (ddd, J = 7.4, 4.8, 1.2 Hz, 1H), 6.29 (s, 0.35H), 6.25 (s, 0.65H), 4.76 - 4.66 (m, 2H), 2.54 (s, 2H), 2.47 (s, 1H), 2.00 - 1.89 (m, 1H), 0.98 - 0.89 (m, 2H), 0.88 - 0.82 (m, 2H).

합성 114

3-사이클로프로필-5-(2-메틸피리딘-3-일)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -096)

단계 3:

3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(2-메틸피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트

디옥산(3.0mL) 중의 2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘(69.0mg, 315μmol), 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(125mg, 263μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨) 및 Pd(dppf)Cl₂(28.8mg, 39.4μmol)의 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 물(0.75mL) 중의 제삼인산칼륨(167mg, 788μmol)의 용액을 첨가하고 반응 혼합물을 5분 동안 N₂로 살포했다. 혼합물을 90℃로 6시간 동안 가열하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(15mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제하여 표제 화합물(130mg, 0.23mmol, 92% 수율, 95% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 533(M+H)⁺, R_T 1.88분.

단계 4:

DCM(4.0mL) 중의 3급-부틸 (3-사이클로프로필-5-(2-메틸피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(130mg, 244μmol)의 혼합물에 TFA(1.0mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-20% MeOH(0.7M NH₃ 함유)/DCM)로 정제한 후, RP 플래시 C18 상(15g 카트리지, 30-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(59mg, 0.13mmol, 54% 수율, 97% 순도)을 회백색 고체로서 생성하였다.

UPLC/MS(방법 5): m/z 422(M+H)⁺, RT 1.27분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.69 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 8.66 - 8.62 (m, 1H), 8.48 (dd, J = 4.8, 1.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.96 (s, 1H), 7.92 (dt, J = 8.1, 1.2 Hz, 1H), 7.85 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 7.8, 1.8 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 4.72 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.02 - 1.92 (m, 1H), 0.92 - 0.81 (m, 4H).

합성 115

N-(4-(1H-피라졸-1-일)벤질)-5-(아제티딘-3-일옥시)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -097)

단계 3:

3급-부틸 3-((7-((4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)아제티딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(150mg, 323μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 3-하이드록시아제티딘-1-카르복실레이트(168mg, 968μmol) 및 탄산세슘(315mg, 968μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(21.4mg, 32.3μmol) 및 Ruphos(15.1mg, 32.3μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(5mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(30mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(180mg, 299μmol, 93% 수율, 99% 순도)을 황색 유리 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 7): m/z 602(M+H)⁺, RT 2.35분.

단계 4:

0℃에서, TFA(0.9mL)를 DCM(2.0mL) 중의 3급-부틸 3-((7-((4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)옥시)아제티딘-1-카르복실레이트(180mg, 299μmol)의 혼합물에 첨가했다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안, 이어서 RT에서 4시간 동안 교반하였다. 더 많은 TFA(1mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시키고, 고체를 Et₂O(2 x 2mL)에서 분쇄하여 표제 화합물(22mg, 52μmol, 17% 수율, 95% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 7): m/z 402(M+H)⁺, RT 1.25분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.44 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.39 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 7.81 - 7.76 (m, 3H), 7.72 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.54 - 6.50 (m, 1H), 5.40 (s, 1H), 5.28 (p, J = 6.4 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.72 - 3.66 (m, 2H), 3.51 - 3.45 (m, 2H), 1.84 - 1.76 (m, 1H), 0.83 - 0.78 (m, 4H). 수중 1H.

합성 116

(S)-3-사이클로프로필-N⁵-(피롤리딘-3-일)-N⁷-(4-(티아졸-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -098)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(티아졸-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(티아졸-2-일)벤질)카바메이트(80mg, 166μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트(62mg, 332μmol)의 용액을 N₂에서 5분 동안 탈기시킨 후, ^tBuBrettPhos Pd G3(14.2mg, 16.6μmol) 및 LiHMDS(THF 중 1M)(249μL, 249μmol)를 첨가했다. 반응물을 5분 동안 추가로 탈기시킨 후, 60℃로 2시간 동안 가열했다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(5mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(30mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(12g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(50mg, 73μmol, 44% 수율, 92% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 8): m/z 632(M+H)⁺, RT 2.26분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.79mL, 3.17mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((3급-부톡시카보닐)(4-(티아졸-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트(50mg, 79.1μmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 플래시 C18 상(15g 카트리지, 0-100%(MeCN 중 0.1% 포름산/(물 중 0.1% 포름산))에서 정제하여 표제 화합물(25mg, 57μmol, 72% 수율, 98% 순도)을 오렌지색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 7): m/z 432(M+H)⁺, RT 1.05분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.29 (s, 1H), 8.02 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 7.98 - 7.89 (m, 3H), 7.77 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.54 - 7.49 (m, 2H), 7.19 - 6.46 (m, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.60 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.69 - 3.61 (m, 1H), 3.59 - 3.52 (m, 1H), 3.51 - 3.45 (m, 1H), 3.25 - 3.21 (m, 1H), 2.15 - 2.05 (m, 1H), 1.84 - 1.73 (m, 2H), 0.81 - 0.73 (m, 4H). 수중 1H.

합성 117

(S)-N⁷-(4-(1H-피라졸-1-일)벤질)-3-사이클로프로필-N⁵-(피페리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-5,7-디아민

(PPA -099)

단계 3:

3급-부틸 (S)-3-((7-((4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트

디옥산(4.0mL) 중의 3급-부틸 (4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)카바메이트(140mg, 256μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 3급-부틸 (S)-3-아미노피페리딘-1-카르복실레이트(154mg, 768μmol) 및 탄산세슘(250mg, 768μmol)의 현탁액을 N₂로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-171(17.0mg, 25.6μmol) 및 Ruphos(11.9mg, 25.6μmol)를 첨가하고, N₂를 반응 혼합물을 통해 5분 동안 추가로 버블링시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. RT에서, 반응 혼합물을 EtOAc(10mL)로 희석시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 EtOAc(30mL)로 세정했다. 여과액을 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-10% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물(140mg, 0.21mmol, 84% 수율, 96% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 8): m/z 629(M+H)⁺, RT 2.27분.

단계 4:

염화수소(디옥산 중 4M)(0.56mL, 2.23mmol)를 디옥산(2.0mL) 중의 3급-부틸 (S)-3-((7-((4-(1H-피라졸-1-일)벤질)(3급-부톡시카보닐)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(140mg, 0.22mmol)의 용액에 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(20mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(20mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물(72mg, 0.16mmol, 72% 수율, 95% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

LCMS(방법 7): m/z 429(M+H)⁺, RT 1.05분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.45 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.83 - 7.77 (m, 3H), 7.72 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.53 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.47 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.79 - 3.68 (m, 1H), 3.04 - 2.99 (m, 1H), 2.77 - 2.71 (m, 1H), 2.45 - 2.37 (m, 1H), 2.26 (dd, J = 11.6, 8.6 Hz, 1H), 1.83 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 1.80 - 1.71 (m, 1H), 1.61 - 1.55 (m, 1H), 1.41 - 1.35 (m, 1H), 1.34 - 1.24 (m, 1H), 0.81 - 0.70 (m, 4H). 수중 1H.

합성 118

3-사이클로프로필-5-(피페리딘-4-일)-N-(4-(피리딘-2-일)벤질)피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-아민

(PPA -100)

단계 3:

3급-부틸 4-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(2.0mL) 중의 3급-부틸 (5-클로로-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)(4-(피리딘-2-일)벤질)카바메이트(200mg, 420μmol)(본원에 기재된 바와 같이 제조됨), 1-(3급-부톡시카보닐)피페리딘-4-일)아연(II) 브로마이드(THF 중 0.74M)(2.84mL, 2.11mmol), Pd(dppf)Cl₂(22.2mg, 30.3μmol)의 혼합물을 N₂로 15분 동안 살포한 후, 50℃로 2시간 동안 가열하였다. RT에서, 반응 혼합물을 MeOH(1mL)로 급냉시킨 후 진공하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(24g 카트리지, 0-100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 표제 화합물(250mg, 0.39mmol, 92% 수율, 98% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 525(M-Boc+H)⁺, RT 2.53분.

단계 4:

DCM(3.0mL) 중의 3급-부틸 4-(7-((3급-부톡시카보닐)(4-(피리딘-2-일)벤질)아미노)-3-사이클로프로필피라졸로[1,5-a]피리미딘-5-일)피페리딘-1-카르복실레이트(250mg, 400μmol)의 혼합물에 TFA(1.0mL)를 첨가했다. 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반한 후 진공하에 농축시켰다. 고체를 SCX의 컬럼에 로딩했다. 컬럼을 MeOH(40mL)로 세척하고, 생성물을 MeOH(40mL) 중의 0.7M NH₃로 용출시켰다. 암모니아성 메탄올 용액을 진공하에 농축시켰다. RP 플래시 C18 상(24g 카트리지, 20-100% MeCN/10mM 중탄산암모늄)에서 추가 정제하여 표제 화합물(80mg, 0.18mmol, 46% 수율, 98% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다.

UPLC/MS(방법 4): m/z 425(M+H)⁺, RT 1.01분.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.66 - 8.61 (m, 1H), 8.35 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 8.08 - 8.01 (m, 2H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.86 (td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.33 (dd, J = 7.4, 4.8 Hz, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.65 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.01 - 2.91 (m, 2H), 2.63 - 2.53 (m, 2H), 1.96 - 1.88 (m, 1H), 1.72 - 1.62 (m, 2H), 1.55 (qd, J = 12.0, 3.9 Hz, 2H), 0.88 - 0.76 (m, 4H). 수중 2H.

생물학적 방법

IC ₅₀ 검정

재료 및 용액:

- HEPES-NaOH (Sigma, H-3375)

- 나트륨 오르토바나데이트 (Sigma, S-6508)

- DTT (Sigma, D-0632)

- MgCl₂ (M-3634)

- MnCl₂ (VWR, 1.05927.1000)

- PEG-20000 (SERVA, 33138)

- ATP (Sigma, A-7699)

- [γ-33P]-ATP (Hartmann Analytic, FF301T)

- H₃PO₄ (VWR, 1.00563.1000)

- NaCl (Merck, 1.06404)

- 인간 CDK12 wt/CycK (ProQinase, 1483-1484-1 - Lot 2)

- RBER-IRStide (ProQinase, 0863-0000-1 - Lot 036)

- 96-웰 FlashPlates^TM (PerkinElmer, SMP200)

추가로, CDK12 검정용:

- 인간 CDK12 wt/CycK (ProQinase, 1483-1484-1 - Lot 2)

- RBER-IRStide (ProQinase, 0863-0000-1 - Lot 036)

추가로, CDK7 검정용:

- 인간 CDK7/CycH/MAT1 (ProQinase, 0366-0360-4 - Lot 2).

- RBER-CHKtide (ProQinase, 0581-0000-5 - Lot 106).

검정 절차:

두 단백질 키나제(CDK12/CDK7)의 키나제 활성을 측정하기 위해 방사 측정 단백질 키나제 검정(³³PanQinase^® 활성 검정)을 사용했다. 모든 키나제 검정은 50μL의 반응 용적으로 PerkinElmer(Boston, MA, USA)의 96-웰 FlashPlates^TM에서 수행되었다.

반응 칵테일을 다음 순서로 4단계로 피펫팅했다:

- 20μL의 검정 완충액(표준 완충액)

- 5μL의 ATP 용액(H2O 중)

- 5μL의 시험 화합물(10% DMSO 중)

- 10μL의 기질/10μL의 효소 용액(사전 혼합됨)

CDK7 검정을 위해, 다음 성분을 함유하는 반응 혼합물(50μL)을 제조했다:

- 70mM HEPES-NaOH(pH 7.5);

- 나트륨 오르토바나데이트(3μM);

- PEG-20000(50μg/mL);

- DTT(1.2mM);

- MgCl₂(3mM);

- MnCl₂(3mM);

- 정제된 인간 CDK7/CycH/MAT1(3.3nM - Lot 02);

- RBER-CHKtide 기질(40μg/mL - Lot 106);

- ATP(3μM);

- [γ-33P]-ATP(웰당 약 8 x 10⁵cpm); 및

- DMSO의 최종 농도가 10% w/w이도록 하는 적합한 농도의 시험 화합물.

- 70mM HEPES-NaOH(pH 7.5);

- 나트륨 오르토바나데이트(3μM);

- PEG-20000(50μg/mL);

- DTT(1.2mM);

- MgCl₂(3mM);

- MnCl₂(3mM);

- 정제된 인간 CDK12 wt/CycK(14.7 nM - Lot 02);

- RBER-IRStide 기질(40μg/mL - Lot 036);

- ATP(0.3μM);

- [γ-33P]-ATP(웰당 약 8 x 10⁵cpm); 및

반응 혼합물을 30℃에서 60분 동안 배양한 후, 2% (v/v) H₃PO₄를 첨가하여 정지시켰다. 플레이트를 흡인시키고, 200μL 0.9%(w/v) NaCl로 두 번 세척했다. ³³Pi의 통합은 마이크로플레이트 섬광 계수(Microbeta, Wallac)로 결정했다.

각 농도에 대한 잔류 활성과 화합물 IC₅₀ 값은 Quattro Workflow V3.1.1(Quattro Research GmbH, 뮌헨, 독일)을 사용하여 계산했다. IC₅₀ 결정에 대한 피팅 모델은 매개변수 "상단"을 100%로 고정하고 "하단"을 0%로 고정하는 "S자형 반응(가변 기울기)"이었다. 사용된 피팅 방법은 최소 제곱 피팅이었다.

세포 배양에서 사이클린 K 고갈에 대한 웨스턴 블롯팅 분석

A673 세포를 10μM의 NAE(NEDD8 활성화 효소) 억제제 MLN4924(Cell Signalling Technologies)의 존재 또는 부재하에 1μM의 화합물과 함께 2시간 동안 배양했다. 세포를 차가운 인산염 완충 식염수(PBS, Sigma Aldrich)로 2회 세척한 후, 얼음 위에서 15분 동안 용해 완충액을 첨가한 후 수확 및 원심분리했다.

세포 용해물 중 단백질 함량은 BCA 검정(Thermo Fisher)으로 평가했다. 그런 다음, 샘플을 4x Laemmlli 완충액(Bio-Rad)으로 제조하고, 95℃로 5분 동안 가열했다. 각 샘플을 50μg 단백질/웰로 미니-단백질 TGX 얼룩 부재 겔(Bio-Rad)에 로딩했다. SDS-PAGE를 수행한 다음, 단백질을 Trans-Blot® Turbo^TM Midi PVDF 전송 팩(Bio-Rad)을 사용하여 PVDF 멤브레인으로 옮겼다. 멤브레인을 4℃에서 밤새 TBS-T(Invitrogen), 5%(w/v) 분유(Marvel)로 차단했다.

멤브레인을 항-CCNK 항체(토끼) 1차 항체(Abcam) 및 항-GAPDH 항체(토끼)와 함께 TBS-T에서 2시간 동안 배양했다. 그런 다음, 멤브레인을 TBS-T로 3회 세척한 후, 2차 염소 항-토끼 HRP 항체(Cell Signalling Technologies) 배양 후, TBS-T에서 3회 세척했다. 블롯을 Chemidoc 이미저(Bio-Rad)를 사용하여 이미지화했다. 사이클린 K 고갈은 프로테아좀 억제제 처리 샘플과 비교하여 화합물 처리 샘플에서 밴드 강도의 관찰 가능한 강하로서 측정되었다.

A673 세포의 세포독성

시험 화합물에 의한 세포 생존력의 억제는 A673 세포(ATCC CRL1598)에서 평가되었으며, 화합물의 작용 방식은 NEDD8 활성화 효소 억제제인 MLN4924의 존재 하에 화합물 효능의 손실을 프로빙하여 "분자 접착제"/사이클린 K-분해 메커니즘에 기인하였다.

세포를 96-웰 플레이트에 200μL 완전 보충 성장 배지(DMEM + 10% 열 비활성화 태아 소 혈청)에 웰당 1.2 x 10⁵ 생존 세포의 밀도로 플레이팅하고, 표준 조직 배양 조건에서 24시간 동안 배양했다. MLN4924를 포함한 화합물을 DMSO에 용해시킨 다음, 최종 DMSO 농도가 0.1%가 되도록 이들의 최종 검정 농도의 2배로 완전 보충 성장 배지로 희석했다. 검정 플레이트의 성장 배지는 2X MLN4924(최종 검정 농도: 30nM, 시험된 경우) 또는 비히클 단독을 함유하는 성장 배지 50μL 및 각 화합물이 100μL에서 최종 검정 농도의 1배가 되도록 2X 화합물 농도 시리즈 또는 비히클 단독을 함유하는 성장 배지 50μL로 대체되었다.

그런 다음, 세포를 표준 조직 배양 조건에서 72시간 동안 배양한 후, 웰당 50μL의 세포 역가 글로 시약(Promega)을 사용하여 생존력을 평가하고, EnVision 플레이트 판독기에서 발광을 측정했다. 데이터는 비히클 대조군(100%)으로 정규화하고, 세포를 1시간 동안 0.1% 트리톤 x-100으로 처리한 후, 생존력을 측정했다(0%, 완전 세포 사멸). IC₅₀ 값은 매개변수 "상단"을 100%로 고정하고 "하단"을 0% 이하로 고정하여 반-로지스틱 곡선 피팅을 사용하여 결정하였다. MLN4924의 존재하에 생성된 생존력 곡선을 정규화하고 MLN4924로 처리된 대조군에 고정시켰다.

생물학적 데이터

PPA 화합물은 상기 기재된 생물학적 방법을 사용하여 평가했다.

비교 목적으로 다음 참조 화합물 CR8을 또한 평가했다. CR8은 사이클린 K를 고갈시키는 분자 접착제 분해제로서 작용한다, 예를 들어, 문헌(Slabicki et al., 2020)을 참조한다.

결과 데이터는 다음 표에 요약되어 있다. 1 초과의 CDK7/CDK12의 비율은 CDK12에 대한 선택도를 나타냈다.

데이터는, PPA 화합물이 CDK12의 매우 강력한 억제제이며, 또한 일부가 또한 CDK7과 비교하여 CDK12에 대해 상당한 선택도를 갖는다는 것을 입증하였다.

사이클린 K 분해

본원에 기재된 많은 화합물은 CDK12를 억제하는 능력뿐만 아니라 사이클린 K 분해를 유발하는 능력을 특징으로 한다.

사이클린 K 분해는 10μM MLN4924(프로테오좀 활성을 억제하는)의 부재 및 존재하에 2시간 동안 1μM 시험 화합물에 노출된 A673 세포에서 사이클린 K에 대해 웨스턴 블롯팅에 의해 평가했다.

문헌(Slabicki et al., 2020)에 의해 보고된 바와 같이, 공지된 CDK12/13 억제제인 THZ-531은 프로테오좀 의존성 사이클린 K 분해를 나타내지 않는 반면, 공지된 CDK1/2/5/9/12 억제제인 CR8은 사이클린 K의 프로테오좀 의존성 분해를 일으켰다. 또한, 30nM MLN4924의 존재 및 부재하에 72시간 동안 배양된 A673 세포에서 THZ-531 및 CR8에 대한 세포독성의 평가는 CR8에 대한 효능의 감소를 나타냈지만, THZ-531에 대해서는 감소를 나타내지 않았으며, 이는 사이클린 K 분해가 CR8의 세포독성 효능의 요인이지만 THZ-531은 그렇지 않음을 입증한다.

도 1에 제시된 바와 같이, 화합물 PPA-005 및 PPA-006은 또한 웨스턴 블롯에 의해 A673 세포에서 사이클린 K를 분해하고, MLN4924의 존재하에 세포독성 효능을 현저히 감소시키는 것으로 밝혀졌다.

CR8과 같은 사이클린 K 분해제인 화합물도 또한 생화학적 검정보다 세포 검정에서 더 강력한 것으로 밝혀졌다. 대조적으로, 사이클린 K의 강력한 생화학적 억제제임에도 불구하고 사이클린 K를 분해하지 않는 것으로 공지된 THZ-531 및 디나시클립은 세포 검정 및 생화학적 검정에서 유사한 효능을 갖는다.

MLN4924의 존재하에 A673 세포에서 세포독성 효능의 감소로 평가된 생화학적 및 세포 효능뿐만 아니라 사이클린 K 분해제 활성을 요약하는 데이터는 다음 표에 제시되어 있다.

데이터는 본원에 기재된 많은 화합물이 생화학적 효능에 비해 향상된 세포 효능을 나타내고, 이들의 효능이 프로테오좀 활성에 의존한다는 것을 보여준다. 따라서, 그들은 모두 CDK12의 직접적인 억제제이자 사이클린 K 분해 유도제로 작용하여 암세포에서 세포독성 효과를 유도한다.

* * *

상기한 내용은 본 발명의 원리, 바람직한 구현예 및 작동 방식을 기재하였다. 그러나, 본 발명은 논의된 특정 구현예에 제한되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 대신에, 상기 기재된 구현예는 제한적이기보다는 예시적인 것으로 간주되어야 한다. 본 발명의 범위를 벗어나지 않고 당업자에 의해 이러한 구현예에서 변동이 이루어질 수 있음을 인식해야 한다.

참고문헌

다수의 간행물이 본 발명과 본 발명이 관련된 기술 상태를 보다 완전하게 기재하고 개시하기 위해 본원에 인용되어 있다. 이러한 참고문헌에 대한 전체 인용은 아래에 제공된다.

이들 참고문헌 각각은 각각의 개별적 참고문헌이 구체적으로 그리고 개별적으로 참조로 포함되는 것으로 표시된 것과 동일한 정도로 본 개시내용에 그 전체가 참조로 본원에 포함된다.

Claims

다음 화학식의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물;

상기 식에서,
-L⁷-은 독립적으로 -CH₂-, -CH(R^L7)- 또는 -C(R^L7)₂-이고;
각 -R^L7은독립적으로 선형 또는 분지형(branched) 포화 C_1- ₄알킬이고;
-Ar¹-은 독립적으로 페닐렌, C₆헤테로아릴렌 또는 C₅헤테로아릴렌이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;
임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR1N으로 치환되고;
-Ar²는독립적으로 페닐, C₆헤테로아릴 또는 C₅헤테로아릴이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되고;
임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^AR2N으로 치환되고;
-X⁵-는 독립적으로 -NH-, -NR^X5-, -O- 또는 단일 결합이고;
-R^X5는선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬이고;
-L⁵-는 독립적으로 -CH₂-, -CH(R^L5)-, -C(R^L5)₂- 또는 단일 결합이고;
각 -R^L5는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬이고;
-Cy⁵는 독립적으로 -Cy^5A 또는 -Cy^5B이고;
-Cy^5A는적어도 하나의 질소 환 원자를 갖는 비방향족 C_4- ₁₀헤테로사이클릴이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;
임의로 탄소 상에서 =O로 치환되고;
임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되고;
-Cy^5B는 적어도 하나의 질소 환 원자를 갖는 C_5- ₆헤테로아릴이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5BC로 치환되고;
임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5BN으로 치환되고;
-R³은독립적으로 -R^3A, -R^3B, -R^3C 또는 -CN이고;
-R^3A는선형 또는 분지형 포화 C_1- ₆알킬이고,
임의로 하나 이상의 그룹 -R^R3으로 치환되고;
-R^3B는 포화 C_3- ₆사이클로알킬이고,
임의로 하나 이상의 그룹 -R^R3으로 치환되고;
-R^3C는-F, -Cl, -Br 또는 -I이고;
각 -R^R3은독립적으로 -F, -OH 또는 -OMe이고;
여기서,
각 -R^AR1C 및 각 -R^AR2C는 독립적으로
-R^TT,
-F, -Cl, -Br, -I,
-OH, -OR^TT,
-L^T-OH, -L^T-OR^TT,
-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,
-NH₂, -NHR^TT, -NR^TT ₂, -R^TM,
-L^T-NH₂, -L^T-NHR^TT, -L^T-NR^TT ₂, -L^T-R^TM,
-C(=O)OH, -C(=O)OR^TT,
-OC(=O)R^TT,
-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^TT, -C(=O)NR^TT ₂, -C(=O)R^TM,
-NHC(=O)R^TT, -NR^TNC(=O)R^TT,
-NHC(=O)NH₂, -NHC(=O)NHR^TT, -NHC(=O)NR^TT ₂, -NHC(=O)R^TM,
-NR^TNC(=O)NH₂, -NR^TNC(=O)NHR^TT, -NR^TNC(=O)NR^TT ₂, -NR^TNC(=O)R^TM,
-NHC(=O)OR^TT, -NR^TNC(=O)OR^TT,
-OC(=O)NH₂, -OC(=O)NHR^TT, -OC(=O)NR^TT ₂, -OC(=O)R^TM,
-C(=O)R^TT,
-SR^TT, -S(=O)R^TT, -S(=O)₂R^TT,
-S(=O)NH₂, -S(=O)NHR^TT, -S(=O)NR^TT ₂, -S(=O)R^TM,
-S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NHR^TT, -S(=O)₂NR^TT ₂, -S(=O)₂R^TM,
-NHS(=O)₂R^TT, -NR^TNS(=O)₂R^TT,
-CN 및 -NO₂로부터 선택되고;
각 -R^AR1N 및 각 -R^AR2N은 독립적으로
-R^TT,
-L^T-OH, -L^T-OR^TT,
-L^T-NH₂, -L^T-NHR^TT, -L^T-NR^TT ₂, -L^T-R^TM,
-C(=O)R^TT,
-C(=O)OR^TT,
-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^TT, -C(=O)NR^TT ₂, -C(=O)R^TM, 및
-S(=O)₂R^TT로부터 선택되고;
여기서,
각 -L^T-는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬렌이고;
각 -R^TT는독립적으로 -R^TT1, -R^TT2, -L^TT-R^TT2, -R^TT3 또는 -L^TT-R^TT3이고;
각 -R^TT1은독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₆알킬이며, 임의로 -F, -OH 및 -OR^TTT로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;
각 -R^TT2는포화 C_3- ₆사이클로알킬이며, 임의로 -F, -R^TTT, -OH 및 -OR^TTT로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;
각 -R^TT3은독립적으로 페닐 또는 나프틸이며, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I, -R^TTT, OH, -OR^TTT, -OCF₃, -NH₂, -NHR^TTT 및 -NR^TTT ₂로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;
각 -L^TT-는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬렌이고;
각 -R^TN은선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;
각 -R^TM은독립적으로 아제티디노, 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노, 모르폴리노, 아제파노 또는 디아제파노이며,
임의로 탄소 상에서 -R^TMM, -C(=O)R^TMM, -S(=O)₂R^TMM, -F, -NH₂, -NHR^TMM, -NR^TMM ₂, -OH 및 -OR^TMM으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;
임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 -R^TMM, -C(=O)R^TMM, -C(=O)OR^TMM 및 -S(=O)₂R^TMM으로부터 선택된 그룹으로 치환되고;
각 -R^TTT는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;
각 -R^TMM은독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;
여기서,
각 -R^Cy5AC 및 각 -R^Cy5BC는 독립적으로
-R^JJ,
-F, -Cl, -Br, -I,
-OH, -OR^JJ,
-L^J-OH, -L^J-OR^JJ,
-CF₃, -CHF₂, -OCF₃, -OCHF₂,
-NH₂, -NHR^JJ, -NR^JJ ₂, -R^JM,
-L^J-NH₂, -L^J-NHR^JJ, -L^J-NR^JJ ₂, -L^J-R^JM,
-C(=O)OH, -C(=O)OR^JJ,
-OC(=O)R^JJ,
-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^JJ, -C(=O)NR^JJ ₂, -C(=O)R^JM,
-NHC(=O)R^JJ, -NR^JNC(=O)R^JJ,
-NHC(=O)NH₂, -NHC(=O)NHR^JJ, -NHC(=O)NR^JJ ₂, -NHC(=O)R^JM,
-NR^JNC(=O)NH₂, -NR^JNC(=O)NHR^JJ, -NR^JNC(=O)NR^JJ ₂, -NR^JNC(=O)R^JM,
-NHC(=O)OR^JJ, -NR^JNC(=O)OR^JJ,
-OC(=O)NH₂, -OC(=O)NHR^JJ, -OC(=O)NR^JJ ₂, -OC(=O)R^JM,
-C(=O)R^JJ,
-SR^JJ, -S(=O)R^JJ, -S(=O)₂R^JJ,
-S(=O)NH₂, -S(=O)NHR^JJ, -S(=O)NR^JJ ₂, -S(=O)R^JM,
-S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NHR^JJ, -S(=O)₂NR^JJ ₂, -S(=O)₂R^JM,
-NHS(=O)₂R^JJ, -NR^JNS(=O)₂R^JJ,
-CN 및 -NO₂로부터 선택되고;
각 -R^Cy5AN 및 각 -R^Cy5BN은 독립적으로
-R^JJ,
-L^J-OH, -L^J-OR^JJ,
-L^J-NH₂, -L^J-NHR^JJ, -L^J-NR^JJ ₂, -L^J-R^JM,
-C(=O)R^JJ,
-C(=O)OR^JJ,
-C(=O)NH₂, -C(=O)NHR^JJ, -C(=O)NR^JJ ₂, -C(=O)R^JM, 및
-S(=O)₂R^JJ로부터 선택되고;
여기서,
각 -L^J-는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬렌이고;
각 -R^JJ는독립적으로 -R^JJ1, -R^JJ2, -L^JJ-R^JJ2, -R^JJ3 또는 -L^JJ-R^JJ3이고;
각 -R^JJ1은독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₆알킬이고, 임의로 -F, -OH 및 -OR^JJJ로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;
각 -R^JJ2는포화 C_3- ₆사이클로알킬이며, 임의로 -F, -R^JJJ, -OH 및 -OR^JJJ로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;
각 -R^JJ3은독립적으로 페닐 또는 나프틸이며, 임의로 -F, -Cl, -Br, -I, -R^JJJ, OH, -OR^JJJ, -OCF₃, -NH₂, -NHR^JJJ 및 -NR^JJJ ₂로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;
각 -L^JJ-는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬렌이고;
각 -R^JN은선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;
각 -R^JM은독립적으로 아제티디노, 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노, 모르폴리노, 아제파노 또는 디아제파노이며,
임의로 탄소 상에서 -R^JMM, -C(=O)R^JMM, -S(=O)₂R^JMM, -F, -NH₂, -NHR^JMM, -NR^JMM ₂, -OH 및 -OR^JMM으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 치환되고;
임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 -R^JMM, -C(=O)R^JMM, -C(=O)OR^JMM 및 -S(=O)₂R^JMM으로부터 선택된 그룹으로 치환되고;
각 -R^JJJ는 독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;
각 -R^JMM은독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬, 페닐 또는 벤질이고;
단,
-X⁵-가 단일 결합이고 -L⁵-가 단일 결합이고 -R³이-Br이면, -Ar²는옥사디아졸릴 또는 티아디아졸릴이 아니고;
단,
-X⁵-가 단일 결합이고 -L⁵-가 단일 결합이면, -Ar²는 피라졸릴이 아니다.
제1항에 있어서,
-L⁷-이 -CH₂-인, 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
-X⁵-가 독립적으로 -NH-, -NR^X5- 또는 단일 결합인, 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
-X⁵-가 -NH-인, 화합물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
-L⁵-가 독립적으로 -CH₂- 또는 단일 결합인, 화합물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
-L⁵-가 -CH₂-인, 화합물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
-R³-이 -R^3A인, 화합물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
-R³-이 -R^3B인, 화합물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -R^3A가 -iPr인, 화합물.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -R^3B가 사이클로프로필인, 화합물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고, 임의로 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar¹-이 1,4-페닐렌인, 화합물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar¹-이 피리딘-2,5-디-일이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;
-Ar²가 5-위치에 부착되는, 화합물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar¹-이 피리딘-2,5-디-일이고;
-Ar²가 5-위치에 부착되는, 화합물.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar²가페닐이고;
임의로 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar²가C₆헤테로아릴이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar²가 피리디닐이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar²가 피리딘-2-일이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar²가 피리딘-2-일인, 화합물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR1C로 치환되고;
-Ar²가 피리딘-2-일이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^AR2C로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
-Ar¹-이 1,4-페닐렌이고;
-Ar²가 피리딘-2-일인, 화합물.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, 각 -R^AR1C, 및 존재하는 경우, 각 -R^AR2C가 독립적으로 -F, -Me, -OMe, -CF₃ 및 -OCF₃으로부터 선택되는, 화합물.
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
-Cy⁵가-Cy^5A인, 화합물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -Cy^5A가 독립적으로 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;
임의로 탄소 상에서 =O로 치환되며;
임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -Cy^5A가 피롤리디닐이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;
임의로 탄소 상에서 =O로 치환되며;
임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리디닐이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;
임의로 탄소 상에서 =O로 치환되며;
임의로, 존재하는 경우, 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리딘-3-일이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;
임의로 탄소 상에서 =O로 치환되며;
임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -Cy^5A가 피페리딘-3-일인, 화합물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -Cy^5A가 (3S)-피페리딘-3-일이고;
임의로 탄소 상에서 하나 이상의 그룹 -R^Cy5AC로 치환되고;
임의로 탄소 상에서 =O로 치환되며;
임의로 2차 질소 상에서 그룹 -R^Cy5AN으로 치환되는, 화합물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -Cy^5A가 (3S)-피페리딘-3-일인, 화합물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, -Cy^5A가 (3R,4R)-3-하이드록시-피페리딘-4-일인, 화합물.
제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, 각 -R^Cy5AC, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BC가 독립적으로 -F, -Me, -OH, -OMe 및 -NH₂로부터 선택되는, 화합물.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서,
존재하는 경우, 각 -R^Cy5AN, 및 존재하는 경우, 각 -R^Cy5BN이 독립적으로 -R^JJ-, C(=O)R^JJ 및 -C(=O)OR^JJ로부터 선택되고;
각 -R^JJ가-R^JJ1이고;
각 -R^JJ1이독립적으로 선형 또는 분지형 포화 C_1- ₄알킬인, 화합물.
제1항에 있어서, 다음 화학식의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 용매화물로부터 선택되는, 화합물:
PPA-001 내지 PPA-100.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 조성물.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 따른 화합물과 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 혼합하는 단계를 포함하는, 조성물을 제조하는 방법.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 유효량을 세포와 접촉시키는 단계를 포함하는, 시험관내 또는 생체내에서 세포 중 사이클린 의존성 단백질 키나제(CDK)(예: CDK12 및/또는 CDK13) 기능을 억제하는 방법.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 유효량을 세포와 접촉시키는 단계를 포함하는, 시험관내 또는 생체내에서 세포 증식(예: 세포의 증식)을 조절(예: 억제)하거나, 세포 주기 진행(cell cycle progression)을 억제하거나, 세포자멸사(apoptosis)를 촉진하는 방법, 또는 이들 중 하나 이상의 조합의 방법.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 요법에 의한 인간 또는 동물 신체의 치료 방법에 사용하기 위한, 화합물.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 장애의 치료 방법에 사용하기 위한, 화합물.
장애의 치료 방법에 사용하기 위한 의약을 제조하는 데 있어서의, 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 대상체(subject)에게 투여하는 단계를 포함하는, 장애의 치료 방법.
제40항, 또는 제41항, 또는 제42항에 있어서, 상기 장애가 사이클린 의존성 단백질 키나제(CDK)(예: CDK12 및/또는 CDK13)와 관련된 장애; CDK(예: CDK12 및/또는 CDK13)의 부적절한 활성으로 인한 장애; CDK(예: CDK12 및/또는 CDK13) 돌연변이와 관련된 장애; CDK(예: CDK12 및/또는 CDK13) 과발현과 관련된 장애; CDK(예: CDK12 및/또는 CDK13)의 상류 경로 활성화와 관련된 장애; 또는 CDK(예: CDK12 및/또는 CDK13)의 억제로 개선되는 장애인, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항, 또는 제41항, 또는 제42항에 있어서, 상기 장애가 증식성 장애(proliferative disorder); 암(cancer); 바이러스 감염(viral infection)(예: HIV); 신경퇴행성 장애(neurodegenerative disorder)(예: 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 파킨슨병(Alzheimer's disease)); 허혈(ischaemia); 신장 질환(renal disease); 심혈관 장애(cardiovascular disorder)(예: 죽상동맥경화증(atherosclerosis); 자가면역 장애(예: 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 전신성 홍반성 루푸스(systemic lupus erythematosus), 건선(psoriasis), 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome)); 또는 세포의 번역 기능 장애로 인한 장애(예: 근이영양증(muscular dystrophy), 근긴장성 이영양증(myotonic dystrophy), 근위축성 측삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis), 척수성 근위축증(spinal muscular atrophy), 허약성 X 증후군(Fragile　X syndrome))인, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항, 또는 제41항, 또는 제42항에 있어서, 상기 장애가 증식성 장애인, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항, 또는 제41항, 또는 제42항에 있어서, 상기 장애가 암인, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제41항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제42항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 DNA 복구 억제제를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함하는, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제41항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제42항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 면역 체크포인트 억제제(immune checkpoint inhibitor)를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차 치료)를 추가로 포함하는, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제41항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제42항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 면역계를 자극하는 제제(agent)를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함하는, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제41항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제42항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 세포 주기 체크포인트 억제제를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함하는, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제41항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제42항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 Her2 차단제(blocker)인 추가 활성제를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함하는, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제41항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제42항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 전사 억제제를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함하는, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.
제40항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제41항 및 제43항 내지 제46항 중 어느 한 항, 또는 제42항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료가 추가 세포독성 화학요법제를 사용한 치료(예: 동시 또는 순차적 치료)를 추가로 포함하는, 화합물, 또는 용도, 또는 방법.