KR20240020021A - 석창포 추출물 및 아사론을 포함하는 항바이러스 조성물 - Google Patents
석창포 추출물 및 아사론을 포함하는 항바이러스 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20240020021A KR20240020021A KR1020220097954A KR20220097954A KR20240020021A KR 20240020021 A KR20240020021 A KR 20240020021A KR 1020220097954 A KR1020220097954 A KR 1020220097954A KR 20220097954 A KR20220097954 A KR 20220097954A KR 20240020021 A KR20240020021 A KR 20240020021A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- asarone
- extract
- alpha
- beta
- composition
- Prior art date
Links
- RKFAZBXYICVSKP-AATRIKPKSA-N alpha-asarone Chemical compound COC1=CC(OC)=C(\C=C\C)C=C1OC RKFAZBXYICVSKP-AATRIKPKSA-N 0.000 title claims abstract description 209
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 132
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 58
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 title claims abstract description 41
- 244000001632 Acorus gramineus Species 0.000 title claims description 12
- 235000013073 Acorus gramineus Nutrition 0.000 title claims description 12
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 36
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 19
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 239000002778 food additive Substances 0.000 claims abstract description 10
- RKFAZBXYICVSKP-UHFFFAOYSA-N beta- asarone Natural products COC1=CC(OC)=C(C=CC)C=C1OC RKFAZBXYICVSKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 99
- RKFAZBXYICVSKP-WAYWQWQTSA-N beta-asarone Chemical compound COC1=CC(OC)=C(\C=C/C)C=C1OC RKFAZBXYICVSKP-WAYWQWQTSA-N 0.000 claims description 99
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 208000006339 Caliciviridae Infections Diseases 0.000 claims description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 241000714198 Caliciviridae Species 0.000 claims description 5
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000019730 animal feed additive Nutrition 0.000 claims description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 3
- 238000007906 compression Methods 0.000 claims description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 claims description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 claims description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 2
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims description 2
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 claims description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 2
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 claims description 2
- 241001263478 Norovirus Species 0.000 abstract description 50
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 31
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 21
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 abstract description 7
- 241000714201 Feline calicivirus Species 0.000 abstract description 5
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 abstract description 2
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 abstract description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 abstract description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 39
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 32
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 26
- 241001105894 Murine norovirus Species 0.000 description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 17
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 17
- 206010016952 Food poisoning Diseases 0.000 description 15
- 208000019331 Foodborne disease Diseases 0.000 description 15
- 241000286253 Norovirus GII.4 Species 0.000 description 15
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 12
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 12
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 230000036541 health Effects 0.000 description 10
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 10
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 9
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 8
- -1 respectively Proteins 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 7
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 238000002022 differential scanning fluorescence spectroscopy Methods 0.000 description 6
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 5
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 241001161139 Aspergillus chinensis Species 0.000 description 4
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 4
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 4
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 description 4
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 4
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 3
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 3
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 3
- 102000006381 STAT1 Transcription Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010044012 STAT1 Transcription Factor Proteins 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- DYLIWHYUXAJDOJ-OWOJBTEDSA-N (e)-4-(6-aminopurin-9-yl)but-2-en-1-ol Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2C\C=C\CO DYLIWHYUXAJDOJ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- GJTBSTBJLVYKAU-XVFCMESISA-N 2-thiouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=S)NC(=O)C=C1 GJTBSTBJLVYKAU-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 101000768957 Acholeplasma phage L2 Uncharacterized 37.2 kDa protein Proteins 0.000 description 2
- 101000823746 Acidianus ambivalens Uncharacterized 17.7 kDa protein in bps2 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101000916369 Acidianus ambivalens Uncharacterized protein in sor 5'region Proteins 0.000 description 2
- 101000769342 Acinetobacter guillouiae Uncharacterized protein in rpoN-murA intergenic region Proteins 0.000 description 2
- 101000823696 Actinobacillus pleuropneumoniae Uncharacterized glycosyltransferase in aroQ 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101000786513 Agrobacterium tumefaciens (strain 15955) Uncharacterized protein outside the virF region Proteins 0.000 description 2
- 101000618005 Alkalihalobacillus pseudofirmus (strain ATCC BAA-2126 / JCM 17055 / OF4) Uncharacterized protein BpOF4_00885 Proteins 0.000 description 2
- 102100020724 Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 2
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 101000967489 Azorhizobium caulinodans (strain ATCC 43989 / DSM 5975 / JCM 20966 / LMG 6465 / NBRC 14845 / NCIMB 13405 / ORS 571) Uncharacterized protein AZC_3924 Proteins 0.000 description 2
- 101000823761 Bacillus licheniformis Uncharacterized 9.4 kDa protein in flaL 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101000819719 Bacillus methanolicus Uncharacterized N-acetyltransferase in lysA 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101000789586 Bacillus subtilis (strain 168) UPF0702 transmembrane protein YkjA Proteins 0.000 description 2
- 101000792624 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YbxH Proteins 0.000 description 2
- 101000790792 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YckC Proteins 0.000 description 2
- 101000819705 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YlxR Proteins 0.000 description 2
- 101000948218 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YtxJ Proteins 0.000 description 2
- 101000718627 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Putative RNA polymerase sigma-G factor Proteins 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 101000641200 Bombyx mori densovirus Putative non-structural protein Proteins 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 101000947633 Claviceps purpurea Uncharacterized 13.8 kDa protein Proteins 0.000 description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 2
- 101000948901 Enterobacteria phage T4 Uncharacterized 16.0 kDa protein in segB-ipI intergenic region Proteins 0.000 description 2
- 101000805958 Equine herpesvirus 4 (strain 1942) Virion protein US10 homolog Proteins 0.000 description 2
- 101000790442 Escherichia coli Insertion element IS2 uncharacterized 11.1 kDa protein Proteins 0.000 description 2
- 101000788354 Escherichia phage P2 Uncharacterized 8.2 kDa protein in gpA 5'region Proteins 0.000 description 2
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000770304 Frankia alni UPF0460 protein in nifX-nifW intergenic region Proteins 0.000 description 2
- 101000797344 Geobacillus stearothermophilus Putative tRNA (cytidine(34)-2'-O)-methyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 101000748410 Geobacillus stearothermophilus Uncharacterized protein in fumA 3'region Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 101000772675 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) UPF0438 protein HI_0847 Proteins 0.000 description 2
- 101000631019 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) Uncharacterized protein HI_0350 Proteins 0.000 description 2
- 101000768938 Haemophilus phage HP1 (strain HP1c1) Uncharacterized 8.9 kDa protein in int-C1 intergenic region Proteins 0.000 description 2
- 101000785414 Homo sapiens Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000782488 Junonia coenia densovirus (isolate pBRJ/1990) Putative non-structural protein NS2 Proteins 0.000 description 2
- 101000811523 Klebsiella pneumoniae Uncharacterized 55.8 kDa protein in cps region Proteins 0.000 description 2
- 101000818409 Lactococcus lactis subsp. lactis Uncharacterized HTH-type transcriptional regulator in lacX 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101000878851 Leptolyngbya boryana Putative Fe(2+) transport protein A Proteins 0.000 description 2
- 101000758828 Methanosarcina barkeri (strain Fusaro / DSM 804) Uncharacterized protein Mbar_A1602 Proteins 0.000 description 2
- 101001122401 Middle East respiratory syndrome-related coronavirus (isolate United Kingdom/H123990006/2012) Non-structural protein ORF3 Proteins 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 101001055788 Mycolicibacterium smegmatis (strain ATCC 700084 / mc(2)155) Pentapeptide repeat protein MfpA Proteins 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 101000740670 Orgyia pseudotsugata multicapsid polyhedrosis virus Protein C42 Proteins 0.000 description 2
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 101000769182 Photorhabdus luminescens Uncharacterized protein in pnp 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101710159752 Poly(3-hydroxyalkanoate) polymerase subunit PhaE Proteins 0.000 description 2
- 101710130262 Probable Vpr-like protein Proteins 0.000 description 2
- 101000961392 Pseudescherichia vulneris Uncharacterized 29.9 kDa protein in crtE 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101000731030 Pseudomonas oleovorans Poly(3-hydroxyalkanoate) polymerase 2 Proteins 0.000 description 2
- 101001065485 Pseudomonas putida Probable fatty acid methyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 2
- 101000711023 Rhizobium leguminosarum bv. trifolii Uncharacterized protein in tfuA 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101000948156 Rhodococcus erythropolis Uncharacterized 47.3 kDa protein in thcA 5'region Proteins 0.000 description 2
- 101000917565 Rhodococcus fascians Uncharacterized 33.6 kDa protein in fasciation locus Proteins 0.000 description 2
- 101000790284 Saimiriine herpesvirus 2 (strain 488) Uncharacterized 9.5 kDa protein in DHFR 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101000936719 Streptococcus gordonii Accessory Sec system protein Asp3 Proteins 0.000 description 2
- 101000788499 Streptomyces coelicolor Uncharacterized oxidoreductase in mprA 5'region Proteins 0.000 description 2
- 101001102841 Streptomyces griseus Purine nucleoside phosphorylase ORF3 Proteins 0.000 description 2
- 101000708557 Streptomyces lincolnensis Uncharacterized 17.2 kDa protein in melC2-rnhH intergenic region Proteins 0.000 description 2
- 101000649826 Thermotoga neapolitana Putative anti-sigma factor antagonist TM1081 homolog Proteins 0.000 description 2
- 240000003243 Thuja occidentalis Species 0.000 description 2
- 235000008109 Thuja occidentalis Nutrition 0.000 description 2
- 101000827562 Vibrio alginolyticus Uncharacterized protein in proC 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101000778915 Vibrio parahaemolyticus serotype O3:K6 (strain RIMD 2210633) Uncharacterized membrane protein VP2115 Proteins 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N adipic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(O)=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 235000020510 functional beverage Nutrition 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 2
- 208000015684 norovirus infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N (9Z)-octadecen-1-ol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCO ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N (R)-alpha-Tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFNFTGFTYYZZRD-VYXAABIESA-N 1-[(3s,5s,6s,8s,10s,13s,14s,17s)-3,6-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]ethanone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)C3=CC[C@]4(C)[C@@H](C(=O)C)CC[C@H]4[C@@H]3C[C@H](O)[C@H]21 KFNFTGFTYYZZRD-VYXAABIESA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KMVWNDHKTPHDMT-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tripyridin-2-yl-1,3,5-triazine Chemical compound N1=CC=CC=C1C1=NC(C=2N=CC=CC=2)=NC(C=2N=CC=CC=2)=N1 KMVWNDHKTPHDMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]ethanone Chemical compound C1CN(CC2=NNN=C21)CC(=O)N3CCN(CC3)C4=CN=C(N=C4)NCC5=CC(=CC=C5)OC(F)(F)F LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FMYBFLOWKQRBST-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(carboxymethyl)amino]acetic acid;nickel Chemical compound [Ni].OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O FMYBFLOWKQRBST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dithiobis(6-nitrobenzoic acid) Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(C(=O)O)=CC(SSC=2C=C(C(=CC=2)[N+]([O-])=O)C(O)=O)=C1 KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000427159 Achyranthes Species 0.000 description 1
- 102100033770 Alpha-amylase 1C Human genes 0.000 description 1
- 241000209524 Araceae Species 0.000 description 1
- 241000893451 Arthroderma Species 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000312932 Bovine nebovirus Species 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241001198387 Escherichia coli BL21(DE3) Species 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 229920000855 Fucoidan Polymers 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010063907 Glutathione Reductase Proteins 0.000 description 1
- 102100036442 Glutathione reductase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 101710121996 Hexon protein p72 Proteins 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N Inositol-hexakisphosphate Chemical compound OP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 102100034574 P protein Human genes 0.000 description 1
- 101710181008 P protein Proteins 0.000 description 1
- 240000004371 Panax ginseng Species 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 101710177166 Phosphoprotein Proteins 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N Phytic acid Natural products OP(O)(=O)OC1C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000000432 Pistacia chinensis Species 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 241000526894 Porcine sapovirus Species 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 230000010757 Reduction Activity Effects 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 108010026386 Salivary alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 241000369757 Sapovirus Species 0.000 description 1
- 206010039897 Sedation Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001104043 Syringa Species 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 240000002383 Vandopsis gigantea Species 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000001361 adipic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011037 adipic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- KFNFTGFTYYZZRD-UHFFFAOYSA-N asterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3=CCC4(C)C(C(=O)C)CCC4C3CC(O)C21 KFNFTGFTYYZZRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 229940045110 chitosan Drugs 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000007370 cognitive improvement Effects 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQAIPTBBCVQRMD-UHFFFAOYSA-L dipotassium;phosphono phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP(O)(=O)OP([O-])([O-])=O CQAIPTBBCVQRMD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229940094952 green tea extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020688 green tea extract Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 231100001261 hazardous Toxicity 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 208000011140 intestinal infectious disease Diseases 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940069445 licorice extract Drugs 0.000 description 1
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 1
- 229940040145 liniment Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012263 liquid product Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 235000021096 natural sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 1
- XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N oleyl alcohol Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCO XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940055577 oleyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 235000015927 pasta Nutrition 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 238000005453 pelletization Methods 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000467 phytic acid Substances 0.000 description 1
- 229940068041 phytic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000002949 phytic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000013550 pizza Nutrition 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 1
- OQZCJRJRGMMSGK-UHFFFAOYSA-M potassium metaphosphate Polymers [K+].[O-]P(=O)=O OQZCJRJRGMMSGK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 235000021067 refined food Nutrition 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 235000020748 rosemary extract Nutrition 0.000 description 1
- 229940092258 rosemary extract Drugs 0.000 description 1
- 239000001233 rosmarinus officinalis l. extract Substances 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 235000012045 salad Nutrition 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013535 sea water Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000036280 sedation Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N tocofersolan Chemical compound OCCOC(=O)CCC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/882—Acoraceae (Calamus family), e.g. sweetflag or Acorus calamus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/111—Aromatic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/075—Ethers or acetals
- A61K31/085—Ethers or acetals having an ether linkage to aromatic ring nuclear carbon
- A61K31/09—Ethers or acetals having an ether linkage to aromatic ring nuclear carbon having two or more such linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/30—Other Organic compounds
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Botany (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Physiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
본 발명은 석창포 추출물 및 아사론을 포함하는 항바이러스 조성물 및 이의 용도에 관한 것으로, 본 발명에 따르면, 본 발명의 항바이러스용 조성물은, 부작용 및 독성이 없어 생체에 안전할 뿐만 아니라, 칼리시바이러스의 부착, 증식 및 복제를 저해하는 활성이 매우 우수하여 칼리시바이러스를 저감화시킬 수 있으므로, 아직까지 백신이나 치료제가 개발되어 있지 않은 칼리시바이러스(바람직하게는, 노로바이러스 또는 고양이 칼리시바이러스)에 효과적인 치료제제로서, 의약, 식품, 식품첨가제, 소독제 등의 유효성분으로서 다양하게 활용할 수 있다.
Description
본 발명은 석창포 추출물 및 아사론을 포함하는 항바이러스 조성물에 관한 것이다.
식품 위해 병원체는 박테리아와 바이러스로 크게 나눌 수 있다. 이중 노로바이러스는 선진국의 경우 비세균성 장염의 90% 이상 발병원인으로 알려져 있으며, 전 세계 모든 연령층에 발생하는 식중독의 주요 원인체이다. 노로바이러스 식중독에 의한 직접적인 의료 및 사회적 비용이 전세계적으로 매년 약 65 조원에 달한다. 미국 질병관리본부 2021년 3월 보고에 따르면, 식중독 원인 가운데 노로바이러스가 58%로 1위를 차지하고 있으며, 노로바이러스 식중독 발생 시설은 장기요양원이 가장 높았고, 식당, 선박 및 학교 순으로 나타나 노로바이러스 식중독은 주로 집단급식 시설에서 발생함을 알 수 있다. 노로바이러스로 인하여 미국에서 매년 미국인 900명이 사망하는데 대부분은 65세 이상의 고령자이다. 또한 109,000명이 입원하고 465,000명이 응급실을 방문하며 약 2천만명이 설사와 구토를 경험한다. 우리나라의 경우, 식약처 식품안전나라 2021년 11월 통계에 따르면, 노로바이러스 식중독 발생건수는 계속적으로 증가하여 2006년 이후 신종플루 영향을 받은 2009년을 제외하고는 전체 식중독 발생의 1위를 차지하며, 병원성 대장균과 함께 집단급식소 식중독 발생의 주요 원인체로 집계되고 있다.
노로바이러스는 건조하고 기온이 낮은 겨울철에 생존할 수 있는 바이러스로 물리·화학적으로 안정한 구조를 가지고 있어 실온에서 10일, 10℃ 해수 등에서 30-40일, 영하 20℃ 이하의 조건에서 장기간 생존할 수 있다. 이는 음식물과 물을 통해 사람에게 전달될 수도 있고, 환자와의 직접 접촉이나 공기를 통해서도 감염될 수 있다. 노로바이러스 10개 입자만 섭취해도 질병이 유발될 수 있고, 증상이 소멸된 이후에도 2주간 전염이 가능할 정도로 강력한 감염력을 갖고 있다.
이러한 노로바이러스는 분류학상 칼리시바이러스과(Caliciviridae)에 속하며 단일가닥(single strand) 양성(positive) RNA 바이러스로서 7.5 kb RNA 게놈(genome)을 가지고 있다. 노로바이러스는 10개의 유전자그룹(genogroup; GI ~ GX)과 48개의 유전자형(genotypes)로 분류되며, GI, GII, GIV, GVIII 및 GIX이 인체에 감염되며 이 중에서 GII.4 genotype이 세계적으로 가장 많은 식중독의 원인이다. 노로바이러스는 3개의 주된(primary) open reading frame(ORF) 중에서 ORF2와 ORF3가 캡시드(capsid) 단백질 유전정보를 가지고 있다. ORF2와 ORF3는 각각 VP1, VP2를 발현하며, VP1은 주요 캡시드(major capsid) 단백질로 shell(S) 및 protruding(P) 도메인으로 나뉜다. P 도메인은 숙주 세포 수용체(histo-blood group antigen, HBGA)와 결합하여 바이러스의 인체 감염 초기 단계에 중요한 역할을 한다. VP2의 기능은 아직까지 불확실하다. HBGA는 적혈구, 점막 상피세포 표면에 존재하는 복합 글리칸(complex glycan)으로 모유, 타액 및 장에 함유되어 있다.
특히, 인간 노로바이러스는 사람의 장(腸)에서만 증식하고, 현재까지 세포배양이 매우 복잡하고 어렵기 때문에 관련 연구가 미흡하여 아직까지 백신이나 치료제가 없다. 이에 대한 대체물(surrogate)로서 뮤린 노로바이러스(MNV)를 이용하여 RAW 264.7 세포에서 배양이 가능하므로 이를 기반으로 관련 바이러스 연구가 활발하게 이루어지고 있다. RAW 264.7 세포는 면역력이 약해진 STAT1-결핍(STAT1-/-) 마우스로부터 얻은 마우스 단핵 백혈구 대식세포주(mouse leukemic monocyte macrophage cell line)로서, 뮤린 노로바이러스가 배양되는 유일한 세포 시스템이다. STAT1은 항바이러스 인터페론 신호전달에 의하여 고발현되는 유전자 단백질 중의 하나이다.
박테리아로 인한 식중독 치료와 관련하여 항생제(antibiotic drug)는 탁월한 효과를 발휘하지만 바이러스로 인한 식중독에는 항생제의 치료 효과가 없으며, 특히, 바이러스로 인한 식중독의 주된 원인이 되는 노로바이러스의 감염을 예방할 수 있는 백신 또는 치료제가 아직 개발되지 않은 실정으로, 이에 대한 요구가 절실하다. 특히 선진국형 생활패턴 변화로 인한 노로바이러스 감염이 급증하고 있는 시점에서, 노로바이러스를 제어할 수 있는 천연물을 발굴하여 적용한다면 노로바이러스 식중독을 감소시킬 수 있으므로 사회경제적으로 매우 의미있는 개발이 될 것으로 기대된다.
상술한 상황하에서, 본 발명자들은 뮤린 노로바이러스 세포배양 및 인간 노로바이러스 P 단백질 발현 연구에 기반을 둔 천연물 바이오 소재 개발을 위하여 예의 연구 노력한 결과, 세포기반 항바이러스 활성연구를 이용한 저해제 연구를 통해 석창포 추출물 뿐만 아니라, 이로부터 유래된 알파-아사론 또는 베타-아사론이 우수한 항 바이러스 활성을 발휘하는 것을 규명함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 일 목적은 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론을 유효성분으로 포함하는 항바이러스용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 유효성분으로 포함하는 칼리시바이러스과(Caliciviridae family)에 속하는 칼리시바이러스 감염에 의한 질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 데 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 유효성분으로 포함하는, 노로바이러스를 포함한 항바이러스용 의약외품 조성물을 제공하는 데 있다.
또한, 본 발명의 또 다른 목적은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 유효성분으로 포함하는, 항바이러스용 식품 조성물 및 식품 첨가제 조성물을 제공하는 데 있다.
또한, 본 발명의 또 다른 목적은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 유효성분으로 포함하는, 항바이러스용 동물 사료 첨가제 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기에 기재된 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 실시예가 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
이하, 본 발명에 대하여 보다 상세히 설명한다.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 석창포(Acorus gramineus) 추출물, 알파-아사론(α-Asarone) 또는 베타-아사론(β-Asarone)을 포함하는 항바이러스용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 항바이러스 조성물은 척추동물, 바람직하게는 인간을 포함하는 포유류에 투여되는 의약 조성물의 형태이거나 식품 조성물, 통상의 항바이러스제 등 통상적으로 알려진 모든 형태로의 적용이 가능하다.
본 발명에서 용어 "추출물"은 생약을 적절한 침출액으로 짜내고 침출액을 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 유효성분으로서 석창포 추출물의 분획물을 포함할 수 있다. 상기 "분획물"은 다양한 구성성분을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 의하여 얻어진 결과물을 의미한다. 본 발명에서는 석창포 추출물로부터 특정 성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 의하여 얻어진 결과물을 의미하며, 본 발명에서는 알파-아사론과 베타-아사론을 포함한다.
본 발명의 유효 성분인 ‘석창포 추출물’은 Acorus gramineus Solander 뿌리줄기로부터 추출한 추출물로서, 본 발명의 목적을 달성할 수 있는 한, 당업계에 공지된 추출, 분리 및 분획하는 방법을 사용하여 천연으로부터 추출, 분리 및 분획하여 수득한 것을 사용할 수 있다. 본 발명에서 정의된 '추출물'은 적절한 용매를 이용하여 석창포로부터 추출한 것이며, 예를 들어 석창포 추출물의 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다.
석창포 추출물은, 석창포 뿌리줄기를 용매추출법, 상온추출법, 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법 및 압착법 등 통상의 천연 추출물의 제조방법에 사용되는 다양한 방법에 따라 추출된 것일 수 있으며, 바람직하게는 용매 추출된 것일 수 있다.
상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군으로부터 선택된 1 종 이상일 수 있다.
상기 석창포로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등의 탄소수 1 내지 4의 알코올 등을 단독 또는 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다. 바람직하게, 상기 용매로는 물 또는 에탄올을 사용하는 것이 바람직하며, 특히, 70%(v/v) 에탄올을 사용하는 것이 더욱 바람직하다.
상기와 용매를 이용하여 추출물을 얻은 이후에는 당업계에서 알려진 통상의 방법으로 상온에서 냉침, 가열 및 여과하여 액상물을 얻을 수 있으며, 또는 추가로 용매를 증발, 분무건조 또는 동결건조할 수도 있다.
또한, 본 발명의 조성물에 유효성분으로 포함되는 석창포 추출물 또는 분획물은 전술한 바와 같이 추출 및 분획된 추출물이나 분획물을 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수도 있다. 있다. 또한 상기 추출물 또는 분획물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획으로도 얻을 수 있다.
따라서, 본 발명에서 사용되는 석창포 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출물, 분획물 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.
본 발명의 일 실시예에서 Acorus gramineus Solander 뿌리줄기의 분말에 70% 에탄올을 혼합하여 초음파 bath (42 kHz)에서 20℃, 1시간 추출한 후 원심분리하여 취한 상등액을 동결건조하여 제조한 것이나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명자들은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을, 각각 전처리(바이러스에 처리전) 또는 바이러스와 동시처리하여 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정하였으며, 상기 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론 시료의 바이러스의 용균반 형성 저해 활성이 바이러스에 전처리한 경우 매우 뛰어난 것을 확인하였다(도 3A 및 도 3B).
또한, 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론이 농도 의존적으로 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 수용체 결합을 강력하게 감소시킴으로써 바이러스가 숙주세포 수용체에 부착하는 바이러스 감염 초기에 저해함을 확인하였다(도 4).
또한, 알파-아사론과 베타-아사론이 GII.4 P 도메인의 녹는 온도를 크게 감소시킴으로써 P 도메인의 안정성 (stability)에 영향을 주어 수용체 결합을 억제 시킴을 확인하였다(도 5A 및 도 5B).
또한, 석창포 추출물은 뮤린 노로바이러스가 감염된 세포에서 글루타티온(glutathione; GSH)을 증가시켰고 항산화 활성을 나타내었다 (도 6A, 도 6B 및 도 6C).
또한, 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론 시료는 모의 소화실험에서 뮤린 노로바이러스를 유의적으로 감소시켰다(도 7)
이에 따라 본 발명의 구체적인 일구현예는 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 포함하는 노로바이러스 감염 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다. 상기 감염 질환은 바람직하게는 노로바이러스에 의한 식중독 또는 장염일 수 있다.
또한, 구체적으로 본 발명 조성물의 일구현예는 노로바이러스 세포 부착, 세포내 침입 또는 바이러스의 복제를 저해하는 활성을 나타낼 수 있다.
석창포는 Acorus gramineus Solander(천남성과 Araceae)의 뿌리줄기이다. 석창포는 중국, 우리나라 및 일본에 분포되어 있으며, 인지개선, 진정 및 설사 치료를 위한 목적으로 민간에서 이용되어 왔다. 석창포에는 알파-아사론, 베타-아사론 및 알칼로이드가 함유되어 있으며, 베타-아사론의 인지기능 개선, 항알레르기 작용 및 항진균 작용이 보고되어 있다. 또한 알파-아사론은 신경보호작용이 있는 것으로 연구되어 있다. 알파-아사론은 아사론의 트랜스-이성질체(isomer)로서 한국식품의약품안전처에 등록되어 있는 생약 성분이다.
본 발명에서는 석창포 추출물, 알파-아사론과 베타-아사론은 바이러스, 특히 칼리시바이러스과(Caliciviridae)에 속하는 노로바이러스에 대해 우수한 항바이러스 활성을 가짐을 최초로 밝혔다.
이에, 본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 유효성분으로 포함하는 칼리시바이러스과(Caliciviridae family)에 속하는 칼리시바이러스 감염에 의한 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공할 수 있다.
상기 칼리시바이러스는, 본 발명의 목적을 달성할 수 있는 한, 임의의 칼리시바이러스에 대해서 항바이러스 효과를 나타낼 수 있으며, 예컨대, 인간 노로바이러스, 인간 사포바이러스, 돼지 사포바이러스, 돼지노로바이러스, 개 노로바이러스, 소 노로바이러스, 소 네보바이러스 및 고양이 칼리시바이러스로 이루어진 군으로부터 선택된 1 종 이상일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 칼리시바이러스는 바람직하게는 노로바이러스(norovirus)이나, 이에 한정되지 않는다.
또한, 칼리시바이러스 감염 질환은 바람직하게는 노로바이러스성 식중독, 노로바이러스성 장염 또는 고양이 칼리시바이러스에 의한 고양이과 동물의 호흡기 질환일 수 있다.
본 명세서에서, '치료'는 증상의 경감 또는 개선, 질환의 범위의 감소, 질환 진행의 지연 또는 완화, 질환 상태의 개선, 경감 또는 안정화, 부분적 또는 완전한 회복, 생존의 연장 기타 다른 이로운 치료 결과 등을 모두 포함하는 의미로 사용된다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 석창포 추출물, 석창포 추출물로부터 유래된 알파-아사론과 베타-아사론은, 칼리시바이러스의 GII.4 P 도메인의 수용체 결합을 저해함으로써, 칼리시바이러스의 세포 부착, 증식, 세포내 침입과 복제를 저해하는 항바이러스 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명의 일 구현예에 따른 칼리시바이러스 감염 질환의 예방 또는 치료용 조성물은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 단독으로 포함할 수 있음은 물론이나, 이외에도 제형, 사용 방법 및 사용 목적에 따라 당 분야에 사용되는 통상의 방법에 따라 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다. 상기 조성물은 통상의 방법에 따라 경구 또는 비경구로 투여될 수 있으며, 예컨대 경구 투여시에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽 등의 제형으로 제공될 수 있다.
상기 조성물에 상기 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론 외에 다른 성분이 첨가된 혼합물로 제공되는 경우, 상기 칼리시바이러스 감염 질환의 예방 또는 치료용 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 0.001 중량% 내지 99.9 중량%, 바람직하게는 0.1 중량% 내지 99 중량 %, 더욱 바람직하게는 1 중량% 내지 50 중량%로 포함할 수 있다.
바람직한 투여량은 투여대상 및/또는 질환의 치료 또는 예방에 적합한 함량이 될 수 있으며, 이는 투여대상의 연령, 성별, 일반 건강 상태 및 체중, 질병의 종류 및 중증도, 제형의 종류, 조성물에 함유된 다른 성분의 종류 및 함량, 조성물의 분비율, 투여경로 및 기간 등을 비롯한 다양한 인자에 따라 조절될 수 있으며, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있으나, 바람직하게는 성인기준(70 kg) 1일 50 ~ 100 mg이 투여될 수 있다.
한편, 본 발명의 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 다양한 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 예컨대, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형으로 제형화할 수 있고, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 액제, 연고제, 크림제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 겔제 또는 에어로졸제 등의 피부외용제의 형태로 사용될 수 있다.
또한 각각의 제형에 따라 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 또한 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경구제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제 제형을 가질 수 있다. 예컨대, 해당 부위에 국부적으로 사용되는 피부외용제인 경우에는 통상적인 첨가제, 예를 들어 보존제, 의약 침투를 보조하는 용매, 연고 및 크림의 경우 연화제 등을 포함할 수 있으며, 에탄올 또는 올레일 알코올과 같은 통상적 담체를 함유할 수 있다. 해당 기술 분야에 알려진 적합한 제제는 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 최근, Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 것을 사용하는 것이 바람직하나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 조성물은 1~10,000㎎/㎏/일의 양으로 투여할 수 있으며, 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수 회에 나누어 투여할 수도 있다.
또한, 본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상술한 유효성분을 포함하는, 항바이러스용 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어, "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 제품 또는 이와 유사한 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 아니하며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미한다.
본 발명의 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
또한, 본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 포함하는 항바이러스용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론은 건강기능식품, 식품 첨가제 또는 식이보조제로 사용될 수 있다.
상기 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론이 식품 첨가제로 사용할 경우, 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 그대로 첨가하거나, 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 혼합하여 사용되는 등 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품이란, 석창포 추출물 또는 그의 분획물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다. 이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 건강기능식품은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 매우 유용하다. 이와 같은 건강식품에 있어서의 석창포 추출물 또는 그의 분획물의 첨가량은, 대상인 건강식품의 종류에 따라 달라 일률적으로 규정할 수 없지만, 식품 본래의 맛을 손상시키지 않는 범위에서 첨가하면 되며, 대상 식품에 대하여 통상 0.01 내지 50 중량%, 바람직하기로는 0.1 내지 20 중량%의 범위이다. 또한, 과립, 정제 또는 캡슐형태의 식품의 경우에는 통상 0.1 내지 100 중량% 바람직하기로는 0.5 내지 80 중량%의 범위에서 첨가하면 된다. 한 구체예에서, 본 발명의 건강기능식품은 음료의 형태일 수 있다.
또한, 상기 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 변경될 수 있음은 물론이며, 식품 조성물 총 중량에 대하여 0.01~95중량%로 포함되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 1~80중량%로 포함되는 것이다. 그 함량이 0.01중량% 미만일 경우에는 복용의 효율성이 떨어질 수 있으며, 95중량%를 초과할 경우에는 사용량 대비 효과 상승률이 낮아 비경제적일 수 있다.
구체적인 예로, 식품 또는 음료의 제조 시에는 본 발명의 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론은 원료에 대하여 15중량% 이하, 바람직하게는 10중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하여 장기간 섭취할 경우에는 상기 범위 이하의 양으로 첨가될 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없으나, 본 발명의 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료, 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 식품 조성물이 음료로 제조될 경우 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등의 추가 성분을 포함할 수 있다. 상기 천연 탄수화물로는 포도당, 과당 등의 모노사카라이드; 말토오스, 수크로오스 등의 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린 등의 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐 등의 합성 감미제 등이 사용될 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 본 발명의 식품 조성물 총 중량에 대하여 0.01~10중량%, 바람직하게는 0.01~0.1중량%로 포함된다.
본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있으며, 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있으나 이에 제한되지 않는다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 상기의 첨가제 비율은 크게 제한되지는 않으나, 본 발명의 식품 조성물 총 중량에 대하여 0.01~0.1중량% 범위내로 포함되는 것이 바람직하다.
건강 및 위생을 목적으로 하거나 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취인 경우, 본 발명의 식품 조성물은 안전성 면에서 세포 독성이 거의 없기 때문에 장기간 복용이 가능하다.
본 명세서에서 식품이란 함은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서의 식품, 식품 첨가제, 건강 기능성 식품, 음료 및 음료 첨가제 등을 모두 포함하는 의도이다.
또한, 본 발명은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 포함하는 항바이러스용 식품첨가제 조성물을 제공할 수 있다.
예컨대, 노로바이러스는 채소, 과일, 패류 등의 식품을 씻거나 가열하지 않은 채 섭취하는 경우 감염될 확률이 높다. 특히, 굴은 가열 조리하지 않고 날 것으로 먹는 대표적인 패류로서 노로바이러스 감염 위험이 매우 높은 식품으로 알려져 있다. 또한 소비자들의 편의를 위해 씻거나 썰지 않고 먹도록 포장된 샐러드나 과일류 등에도 노로바이러스의 감염 위험이 존재한다. 따라서, 이렇게 노로바이러스의 감염 위험이 높은 식품류에 대해 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 포함하는 항바이러스용 식품첨가제 조성물을 처리함으로써 노로바이러스를 저감화시키는 효과를 거둘 수 있다.
상기 항바이러스용 식품첨가제 조성물은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론 외에도 생리학적으로 허용가능한 담체를 포함한다. 예를 들어, 굴의 노로바이러스 저감화를 위해서는 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론 외에 담체로서 염수 등을 포함하는 것이 바람직할 것이다.
본 발명은 또한 상기 조성물이 처리된 식품 가공품을 제공한다. 본 발명의 한 구체예에서, 상기 조성물이 처리되는 식품은 이에 제한되는 것은 아니나, 채소, 과일 또는 패류일 수 있다. 예를 들어, 상기 조성물을 채소, 과일 또는 패류 등의 식품의 세척시 사용하거나 식품의 유통시 1회 또는 수회 분주 또는 분사 등의 방법으로 처리함으로써 바이러스의 저감화 효과를 거둘 수 있다.
또한, 본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 포함하는 항바이러스용 동물 사료 첨가제 조성물 및 이를 포함하는 사료를 제공한다.
본 발명의 상기 사료 첨가제는 상술한 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 유효성분으로 포함하고 있어, 항바이러스 및 항산화 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 안전하므로, 이를 사료 첨가제로 사용할 경우 동물의 바이러스 감염, 예컨데, 노로바이러스 또는 고양이 칼리시바이러스 예방 및 개선에 기여할 수 있다.
본 발명의 상기 사료 첨가제는 본 발명의 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 그대로 사용하거나 또는 추가적으로 가축에 허용되는 곡류 및 그 부산물 등의 공지된 담체, 안정제 등을 가할 수 있으며, 필요에 따라 구연산, 후말산, 아디픽산, 젖산, 사과산 등의 유기산이나 인산나트륨, 인산칼륨, 산성 피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나, 폴리페놀, 카테킨, 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물, 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 탄닌산, 피틴산 등의 천연 항산화제, 항생물질, 항균제 및 기타의 첨가제 등을 가할 수도 있으며, 그 형상으로서는 분체, 과립, 펠릿, 현탁액 등의 적당한 상태일 수 있으며, 상기 사료첨가제를 공급하는 경우는 가축 등에 대하여 단독으로 또는 사료에 혼합하여 공급할 수 있다.
상기 사료 첨가제는 다른 사료 첨가제와 조합되어 투여될 수 있으며, 또한 이들은 항바이러스 효과를 나타내거나, 예컨대, 노로바이러스 감염 질환의 예방 또는 개선에 유용한 것으로 공지되어 있는 다른 물질을 함유할 수 있다.
또한, 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론이 사료 첨가제로 포함되는 사료는 동물의 식이 요구를 충족시키는데 통상적으로 사용되는 임의의 단백질-함유 유기 곡분일 수 있다. 이러한 단백질-함유 곡분은 통상적으로 옥수수, 콩 곡분 또는 옥수수/콩 곡분 믹스로 주로 구성되어 있다.
상기 사료 첨가제는 침지, 분무 또는 혼합하여 상기 사료에 첨가하여 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 사료 첨가제 또는 이를 포함하는 사료는 포유류, 조류를 포함하는 다수의 동물 식이에 적용할 수 있다. 보다 상세하게, 본 발명에 따른 사료 첨가제 또는 사료는 상업상 중요한 포유류, 예를 들어 돼지, 소, 양, 염소, 실험용 설치 동물 (랫트, 마우스, 햄스터 등), 뿐만 아니라 가축 (예, 고양이 및 개)에게 사용할 수 있다. 통상적으로 상업상 중요한 조류에는 닭, 오리, 칠면조, 거위, 꿩 및 메추라기가 포함된다.
본 발명에 따른 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 포함하는 사료 첨가제를 포함하는 사료는 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 포함하는 사료 첨가제를 사료에 건조 중량 기준으로 사료 1 ㎏당 약 1 g 내지 100 g의 양으로 혼합함으로써 얻을 수 있다. 사료 혼합물은 완전히 혼합한 후, 성분들의 분쇄 정도에 따라 경점성의 조립 또는 과립 물질이 얻어진다. 이것을 매시로서 공급하거나, 또는 추가 가공 및 포장을 위해 원하는 분리된 형상으로 형성한다. 이 때, 저장 중에 분리되는 것을 방지하기 위해, 사료에 물을 첨가하고, 이어서 통상의 펠릿화, 팽창화, 또는 압출 공정을 거치는 것이 바람직하다. 과잉의 물은 건조 제거될 수 있다.
본 발명은 상술한 석창포 추출물, 이로부터 유래된 함유 성분인 알파-아사론 또는 베타-아사론을 이용하므로, 중복된 내용은 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여 그 기재를 생략한다.
본 발명에 따르면, 본 발명의 항바이러스용 조성물은, 부작용 및 독성이 없어 생체에 안전할 뿐만 아니라, 칼리시바이러스의 부착, 증식 및 복제를 저해하는 활성이 매우 우수하여 칼리시바이러스를 저감화시킬 수 있으므로, 아직까지 백신이나 치료제가 개발되어 있지 않은 칼리시바이러스(바람직하게는, 노로바이러스 또는 고양이 칼리시바이러스)에 효과적인 치료제제로서, 의약, 식품, 식품첨가제, 소독제 등의 유효성분으로서 다양하게 활용할 수 있다.
도 1A는 석창포 추출물의 HPLC 분석 크로마토그람(검은색)과 석창포 추출물과 알파-아사론 표준품을 혼합하여 HPLC로 분석한 크로마토그람(파란색)을 합하여 나타낸 것이다. 파란색의 알파-아사론 peak이 증가되었음을 확인할 수 있으며 이로써 석창포 추출물에 알파-아사론이 함유되었음을 나타낸 것이다. 도 1B는 석창포 추출물의 HPLC 분석 크로마토그람(검은색)과 석창포 추출물과 베타-아사론 표준품을 혼합하여 HPLC로 분석한 크로마토그람(파란색)을 합하여 나타낸 것이다. 파란색의 베타-아사론 peak이 증가되었음을 확인할 수 있으며, 이로써 석창포 추출물에 베타-아사론이 함유되었음을 나타낸 것이다.
도 2A는 석창포 추출물의 농도에 따른 RAW 264.7 세포주에 미치는 세포독성 결과를 나타낸 것이다. 도 2B는 석창포 추출물의 성분인 알파-아사론 또는 베타-아사론의 농도에 따른 RAW 264.7 세포주에 미치는 세포독성 결과를 나타낸 것이다.
도 3A는 MNV에 석창포 추출물 시료를 전처리한 경우의 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정하여 나타낸 것이다. 도 3B는 MNV에 알파-아사론 또는 베타-아사론 시료를 전처리한 경우의 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정하여 나타낸 것이다.
도 3C는 MNV에 석창포 추출물 시료를 동시처리한 경우의 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정하여 나타낸 것이다. 도 3D는 MNV에 알파-아사론 또는 베타-아사론 시료를 동시처리한 경우의 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정하여 나타낸 것이다.
도 4는 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 수용체 (타액 HBGA) 결합에 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론 시료가 미치는 영향을 ELISA로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 5A는 알파-아사론이 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인에 미치는 영향을 DSF로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 5B는 베타-아사론이 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인에 미치는 영향을 DSF로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 6A는 석창포 추출물의 항산화활성을 GSH로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 6B는 석창포 추출물의 항산화활성을 DPPH 소거활성으로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 6C는 석창포 추출물의 항산화활성을 FRAP으로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 모의 소화실험에서 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론의 항바이러스 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 2A는 석창포 추출물의 농도에 따른 RAW 264.7 세포주에 미치는 세포독성 결과를 나타낸 것이다. 도 2B는 석창포 추출물의 성분인 알파-아사론 또는 베타-아사론의 농도에 따른 RAW 264.7 세포주에 미치는 세포독성 결과를 나타낸 것이다.
도 3A는 MNV에 석창포 추출물 시료를 전처리한 경우의 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정하여 나타낸 것이다. 도 3B는 MNV에 알파-아사론 또는 베타-아사론 시료를 전처리한 경우의 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정하여 나타낸 것이다.
도 3C는 MNV에 석창포 추출물 시료를 동시처리한 경우의 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정하여 나타낸 것이다. 도 3D는 MNV에 알파-아사론 또는 베타-아사론 시료를 동시처리한 경우의 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정하여 나타낸 것이다.
도 4는 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 수용체 (타액 HBGA) 결합에 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론 시료가 미치는 영향을 ELISA로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 5A는 알파-아사론이 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인에 미치는 영향을 DSF로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 5B는 베타-아사론이 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인에 미치는 영향을 DSF로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 6A는 석창포 추출물의 항산화활성을 GSH로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 6B는 석창포 추출물의 항산화활성을 DPPH 소거활성으로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 6C는 석창포 추출물의 항산화활성을 FRAP으로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 모의 소화실험에서 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론의 항바이러스 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 석창포 추출물 시료의 제조
본 발명자들은, 석창포(Acorus gramineus) 뿌리줄기를 1 mm 이하의 입자 크기로 분쇄하고 10 g을 취하여 70% 에탄올 200 mL를 첨가하여 초음파 bath (42 kHz)에서 20℃, 1시간 추출한 후 원심분리하여 취한 상등액을 동결건조하여 PBS (phosphate buffered saline)에 용해하여 본 실시예에 사용하였다.
이하 실시예에서 뮤린 노로바이러스 및 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 수용체 결합 억제에 대한 활성을 평가하기 위한 시료로서, 상기 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론을 0.2 μm 시린지 필터(syringe filter)로 여과한 후, 분주하여 초저온 냉동고에 보관하며 사용하였다.
실시예 2. 석창포 추출물의 알파-아사론 및 베타-아사론 분석
본 발명자들은 식품의약품안전평가원 (2018) (석창포의 감별 자료집)의 방법을 사용하여 석창포 추출물에 함유된 알파-아사론 및 베타-아사론 분석을 수행하였다.
간략하게는, ACE 5 C18-300 column (150 x 4.6 mm; Apex Scientific Limited, Maynooth, Ireland)이 장착된 액상 크로마토그래피 UHPLC system (Thermo Scientific™ Dionex™ UltiMate™ 3000, MA, USA)를 이용하여 분석하였으며, 이동상은 용매 A(증류수)와 용매 B(100% 메탄올)을 사용하였고, 용매 A와 B를 0~3분은 50% B; 3-12분, 50-60% B; 12-24 분, 60% B; 24-24.6 분, 60-100% B; 24.6-30 분은 100% B로 하였으며 이동상의 유속은 1 mL/min, 검출 파장은 211 nm이었다.
석창포 추출물을 UHPLC로 분리하여 chromatogram에 나타난 피크가 알파-아사론 및 베타-아사론인지 확인하기 위하여, 표준품의 co-injection, 즉, 석창포 추출물에 알파-아사론 표준품(Aktin Chemicals, Inc., Chengdu, China) 또는 베타-아사론 표준품(Aktin Chemicals, Inc.)을 각각 첨가하여 UHPLC로 분석하였다.
또한, 석창포 추출물에 함유된 알파-아사론과 베타-아사론의 함량을 분석하기 위하여, 이들 각각을 200 mM 용액으로 만들어 연속적으로 희석하여 HPLC를 분석하여 검량선(calibration curve)을 작성하였다. 알파-아사론과 베타-아사론 검량선 각각의 R2 값은 0.994 및 0.997이었다.
그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 석창포 추출물에 알파-아사론 표준품을 혼합하여 분석하였을 때 13.022분의 피크가 증가하였으며(도 1A), 석창포 추출물에 베타-아사론 표준품을 혼합하여 분석하였을 때 10.912분의 피크가 증가하여(도 1B), 석창포 추출물 크로마토그람의 12.022분 및 10.912분의 피크가 각각 알파-아사론 및 베타-아사론임을 확인하였다. 검량선을 이용한 분석에서 석창포 추출물에 알파-아사론 61.3 ± 1.9 μg/mL 및 베타-아사론 857.2 ± 31.9 μg/mL 이 함유되었음을 확인하였다.
이하, 실시예에서는 구입한 알파-아사론 (Aktin Chemicals, Inc., Chengdu, China) 및 베타-아사론 (Aktin Chemicals, Inc.)과 실시예 1에서 제조된 석창포 추출물을 이용하였다.
실시예 3. 항바이러스 활성 평가
3-1. 바이러스의 배양
본 발명자들은, 분리 및 배양이 어려운 인간 노로바이러스의 대체물로서 뮤린 노로바이러스인 MNV((Dr. Herbert Virgin (Vir Biotechnology, San Francisco, CA, USA 로부터 분양받음)를 사용하였다. 뮤린 노로바이러스의 숙주세포로는 RAW 264.7 세포주(ATCC TIB-71)를 사용하였으며 상기 숙주세포는 1% penicillin-streptomycin (PS, Gibco BRL) 및 10% 우태아혈청 (fetal bovine serum;FBS, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)이 첨가된 DMEM(Gibco BRL, Karlsruhe, Germany)를 기본 배지로 하여 37℃, 5% CO2 배양기 (incubator)에서 48시간 간격으로 계대 배양하였다.
RAW 264.7 세포를 조직 배양 플레이트(tissue culture plate)에 각각 2.0x106, 2.0x105 cell/mL로 분주하여 24 시간 동안 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하고, MNV 5.0x105 PFU/mL를 실험조건 감염다중도(multiplicity of infection, MOI)에 맞게 희석하여 접종시킨 후, 37℃, 5% CO2 배양기에서 1시간 동안 배양하여 각 바이러스를 감염시켰다.
3-2. 세포 독성 측정
3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT) assay를 이용하여, 세포 생존율 (cell viability)을 측정함으로써 항바이러스 실험에 사용할 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료의 세포 독성을 측정하였다.
구체적으로, 96 웰(well)에 RAW 264.7 세포를 웰당 각각 1.5x106 cells/mL로 분주(seeding)하고 24시간 후에 각 시료를 농도별로 첨가하여 24시간 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. 이후, MTT를 최종 농도 0.5 mg/mL로 첨가하여 1시간 후 microplate reader (SpectraMax M2, Molecular Devices, San Jose, CA, USA) 570 nm에서 흡광도(absorbance)를 측정하였다. 세포 생존율은 무첨가군에 대한 상대적인 %로 계산하여 나타내었다.
상기 분석을 수행한 결과, 석창포 추출물은 0.125-1 mg/mL 농도범위, 알파-아사론 및 베타-아사론은 0.125-1 mM 농도 범위에서 RAW 264.7 세포에 대해 94% 이상의 세포 생존율을 나타내어 세포독성이 없음을 확인하였다(도 2A 및 도 2B).
따라서, 각 석창포 추출물, 석창포 추출물로부터 유래된 알파-아사론 및 베타-아사론 시료는 상기 농도 범위에서 매우 안전하게 사용 가능함을 확인할 수 있었다.
3-3. 용반균 검사에 의한 항바이러스 활성 측정
석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료를, 상기 실시예 3-2에 따라 세포에 독성이 없는 것으로 확인된 범위의 농도로 각각 시점을 다르게 첨가하고, 후보물질이 첨가된 것과 무첨가군의 용균반 차이에 따라 시료의 첨가 시점에 따른 항바이러스 활성을 비교 분석하였다. 이때, 무첨가군의 용균반 형성 정도를 100%로 하여 산정하였다.
바이러스에 시료 전처리(pre-treatment)시 항바이러스 활성 측정을 위하여, 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료와 바이러스를 각각 혼합하여 3시간씩 실온에서 인큐베이션한 후 바이러스 저해 정도를 확인함으로써 바이러스 감염 전에 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료가 바이러스에 미치는 영향을 확인하였다. 즉, RAW 264.7 세포를 24 웰(well)에 well 당 1.5x106로 분주하고, 상기와 같이 시료와 MNV(7-8 log PFU/mL)를 1:1로 혼합하여 실온에서 3시간동안 인큐베이션한 후 10-배 연속 희석하여 37℃에서 세포에 1시간 동안 감염시켰다. 이후, 1.5%(w/v) 아가로스 (agarose), 5%(v/v) FBS, 그리고 1%(v/v) PS(penicillin-streptomycin)가 포함된 DMEM 배지를 넣고 42시간 동안 37℃ 배양기에서 배양하고 0.5%(v/v) 크리스탈 바이올렛 (crystal violet)으로 염색하여 용균반을 측정하였다.
또한, 바이러스 감염과 시료를 동시에 처리시(co-treatment) 항바이러스 활성 측정을 위하여, RAW 264.7 세포를 상기 바이러스에 시료 전처리와 같이 24 웰에 분주하여 배양한 후 바이러스(2-3 log PFU/mL )와 시료를 동시에 첨가하여 37℃에서 1시간 동안 감염시켰다. 이후 1.5%(w/v) 아가로스, 5%(v/v) FBS, 그리고 1%(v/v) PS(penicillin-streptomycin)가 포함된 DMEM 배지를 넣고 42시간 동안 37℃ 배양기에서 배양한 후 0.5%(v/v) 크리스탈 바이올렛으로 염색하여 용균반을 측정하였다.
상기 바이러스에 시료 전처리 및 바이러스 감염과 시료 동시처리의 실험은 정확성을 고려하여 3회 반복 실험하였고 용균반 계수(plaque counting) 결과는 IBM SPSS Statistics (version 26, IBM Corp, New York, NY, USA)를 이용하여 ANOVA 분석을 하였으며, Duncan's multiple range test로 결과를 도출해 내었다. 결과 자료는 오차 p<0.05의 신뢰도를 갖고 있다.
석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료를 이용하여, 상술한 방법으로 바이러스 저해 활성을 측정한 결과를 도 3에 나타내었다.
그 결과, MNV에 시료 전처리의 경우, 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정한 결과, 석창포 추출물(도 3A), 알파-아사론 및 베타-아사론 시료(도 3B)의 바이러스 용균반 형성 저해 활성은 매우 높게 나타났다.
그러나, 바이러스 감염과 시료를 동시에 처리한 경우, 바이러스의 용균반 형성 저해 활성을 측정한 결과, 석창포 추출물(도 3C), 알파-아사론 및 베타-아사론 시료(도 3D)의 바이러스 용균반 형성 저해 활성이 나타났으나, 바이러스에 시료 전처리의 결과 보다는 낮은 수준으로 나타났다.
이로부터, 본 발명자들은 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료가 노로바이러스의 생활사(life cycle) 중 특히 바이러스의 세포 부착 및 세포 내부로 들어가는(internalization) 기작에 중요한 저해활성을 나타내는 것임을 확인하였다.
도 3A 내지 도 3B내의 2-TU(2-thiouridine)(Berry & Associates, Inc., USA)는 양성대조군(positive control)으로 사용하였다.
3-4. 인간 노로바이러스 P 도메인의 수용체 결합 억제 활성 측정
석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료가 상기 실시예 3-3에서 MNV의 세포 부착 및 세포내부로 들어가는(internalization) 기작에 중요한 저해활성을 보였으므로, 인간 노로바이러스의 세포 부착 단계를 저해하는지 확인하기 위한 실험을 수행하였다. 인간 노로바이러스의 숙주세포 부착에 P 도메인이 관여하므로 세계적으로 노로바이러스 식중독을 가장 많이 일으키는 GII.4의 P 도메인을 발현 및 분리 정제하였다.
인간 노로바이러스 GII.4의 P 도메인(Hu/GII.4/Hiroshima/55/2005/JPN; GenBank BAI49908.1) 유전자조합의 N-말단에 히스티딘을 붙여서 Escherichia coli BL21(DE3)에 형질전환시켰다(마크로젠, 서울, 한국). 히스티딘이 붙은 P 도메인은 0.4 mM isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside를 넣고 유도시킨 후 3,500 g에서 20분간 원심분리 하여 배양 배지를 회수하였다. 세포는 초음파처리한 후 12,000 g에서 30분간 원심분리 하여 상등액을 취하였다. 상등액은 니켈-니트릴로트리아세트산 친화 컬럼(Qiagen, Hilden, Germany)에서 20 mM Tris-HCl, pH 8.0 및 200 mM NaCl을 이용하여 평형시키고, 30 mM imidazole을 이용하여 컬럼을 세척하고 P 도메인은 imidazole gradient(30-400 mM)로 용출시켰다. 용출된 P 도메인은 size exclusion 크로마토그래피를 이용하여 정제하였다. 정제된 노로바이러스 GII.4 P domain은 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)에 이용하였다.
인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인이 숙주 세포 수용체(HBGA)와 결합하여 인체에 감염되는 단계를 시료가 억제하는 지 확인하기 위하여, 숙주 세포 수용체로 A 및 O 형의 타액을 사용하였다. 노로바이러스 P 도메인 저해 확인을 위한 ELISA 분석은 Weichert S 등(2016)의 방법을 일부 변형하여 이용하였다. 타액은 95℃에서 10분간 가열 후 원심분리하여 상등액에 PBS를 첨가하여 1:500으로 희석후 사용하였다. 농도를 달리한 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료와 GII.4 P 도메인(3 μg/mL)을 1:1의 비율로 혼합하여 4℃에서 하룻밤 방치하였다. ELISA용 96-well 플레이트(maxisorp)에 타액 100 μL를 넣고 4℃에서 하룻밤 방치하여 코팅하였다. 세척 완충용액으로 타액을 제거한 후 5% 탈지유 200 μL를 넣고 37℃에서 1시간 동안 블록킹하였다. Tween20 0.1%가 함유된 PBS를 이용하여 탈지유를 제거하고 시료와 P 도메인 혼합물 100 μL를 넣고 37℃에서 3시간 반응시켰다. 세척 완충용액을 이용하여 P 도메인을 제거하고 1차 항체를 100 μL 넣고 실온에서 1시간 반응 후 세척 완충용액으로 1차 항체를 제거하고 2차 항체를 100 μL 넣고 실온에서 30분간 반응시켰다. 반응 후 세척 완충용액으로 2차 항체를 제거한 뒤, 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine을 100 μL 넣고 15분간 반응 후 반응 정지 시약을 넣어 반응을 종결시키고 Spectrophotometer(SpectraMax M2)를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료의 인간 노로바이러스 P 도메인 수용체 결합 저해(%)는 다음과 같이 계산하였다(Weichert S 등 2016). 저해 (%) = 〔1 - (흡광도시료첨가군/흡광도시료무첨가군)〕× 100.
정확성을 고려하여 3회 반복 실험하였고 시료의 인간 노로바이러스 P 도메인 수용체 결합 저해 결과는 IBM SPSS Statistics(version 26, IBM Corp, New York, NY, USA)를 이용하여 ANOVA 분석을 하였으며 Duncan's multiple range test로 결과를 도출해 내었다. 결과 자료는 오차 p<0.05의 신뢰도를 갖고 있다.
상술한 방법으로 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료를 이용하여, 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 수용체(A 및 O 형의 타액) 결합 저해 활성을 측정한 결과를 도 4에 나타내었다.
그 결과, 석창포 추출물은, 양성대조군인 fucoidan(Sigma Aldrich)보다 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 A 및 O 형의 타액에 대한 결합을 높게 억제하였다. 알파-아사론과 베타-아사론은 석창포 추출물보다 높은 수용체 결합 억제 활성을 보였으며, 특히, 알파-아사론은 농도의존적인 저해활성을 보였을 뿐만 아니라 낮은 농도에서도 저해활성이 높게 확인되었다.
이로부터, 본 발명자들은 석창포 추출물, 알파-아사론, 및 베타-아사론 시료가 노로바이러스의 생활사(life cycle) 중 특히 바이러스의 세포 부착에 크게 억제함을 확인하였다.
3-5. 인간 노로바이러스 P 도메인에 미치는 시료의 영향 분석
상기 실시예 3-4에서 확인한 바와 같이, 본 발명의 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료가 인간 노로바이러스 P 도메인의 수용체 결합을 억제하였으므로, 본 발명자들은 이들 시료가 인간 노로바이러스 P 도메인 자체에 영향을 미치는 지 확인하고자 DSF (differential scanning fluorimetry)로 분석하였다.
간략하게는, 인간 노로바이러스 GII.4의 P 도메인(0.2 mg/mL)과 알파-아사론(2 mM) 또는 베타-아사론(2mM)을 각각 혼합하여 4℃에서 하룻밤 방치하였다. 여기에 0.5 μL SYPRO Orange를 첨가하여 25℃에서 30초 간 반응시킨 후, 80분간 0.5℃/30초씩 온도를 상승시키면서 excitation 및 emission 파장을 각각 492 nm 및 610 nm로 하여 relative fluorescence unit를 Mx3005P DSF(Stratagene, CA, USA)로 분석하였다. 녹는 온도(melting temperature;Tm)은 MxPro QPCR software를 이용하여 계산하였다.
그 결과, 알파-아사론과 베타-아사론은 0.5-1 mM 농도에서 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 Tm을 유의적으로 감소시켰다(도 5A, 5B).
이로부터, 본 발명자들은 알파-아사론 및 베타-아사론 시료가 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 안정성을 크게 감소시킴을 확인하였다.
3-6. 석창포 추출물의 항산화 활성 측정
세포에 바이러스가 감염되면 ROS는 증가하고 glutathione(GSH)이 감소하는데, GSH는 ROS로부터 세포를 보호하는 항산화 작용을 한다. ROS를 감소시킬 수 있는 항산화활성이 높은 물질이 항바이러스 작용을 할 수 있다고 보고된바 있다((Ghezzi P 2011, Amatore D 등 2015, Di Sotto A 등 2018).
이에, 본 발명자들은 본 발명의 석창포 추출물이 노로바이러스가 감염된 세포에서 GSH 증가 여부 및 항산화작용을 나타내는지 분석하였다.
간략하게는, 노로바이러스 감염 세포에서 GSH 분석은 Rahman I 등(2007)의 방법을 일부 변형하여 실시하였다. 즉, 24-웰 플레이트에 RAW 264.7 세포를 5 X 105/well로 분주하여 24시간 배양한 후 MNV를 감염시키면서 동시에 PBS에 녹인 석창포 추출물을 농도별로 첨가한 후 3시간 동안 37℃ 및 5% CO2에서 배양하였다. 3시간 후 이를 원심분리 튜브에 옮겨 900 X g에서 4분간 원심분리하여 세포만 취한 후 5-sulfosalicylic acid가 함유된 GSH 추출 완충액을 넣고 -70℃에서 30분간 얼리고 실온에서 녹이는 과정을 2회 반복한 다음 900 X g에서 4분간 원심분리하여 상등액(세포 분해액)을 얻었다. 세포 분해액에 DTNB 60 μL와 glutathione reductase 60 μL를 첨가하여 30초 동안 반응시킨 후 NADPH 60 μL를 첨가하여 microplate reader(Molecular Devices)를 이용하여 412 nm에서 흡광도를 측정하였다. GSH 함량은 % nM/106 cells로 나타내었으며, 바이러스를 감염시키지 않은 대조군 세포의 GSH 수준을 100으로 하였다.
DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼 소거활성은 Shimada K 등(1992)의 방법을 일부 변형하여 분석하였다. 증류수에 녹인 시료 100 μL와 0.3 mM DPPH 용액 100 μL를 혼합하여 30분간 반응시킨 후 515 nm에서 흡광도를 측정하였다. 검량선은 1-50 μg/mL 농도의 ascorbic acid를 이용하여 작성하였다(R2 = 0.999), DPPH 소거활성(%) = (흡광도대조군 - 흡광도시료/흡광도대조군)× 100.
FRAP (Ferric reducing antioxidant power) 분석 방법은 Benzie IF & Strain JJ (1996)의 방법을 일부 수정하여 이용하였다. HCl 40 mM을 첨가하여 제조한 10 mM 2,4,6-tris(2-pyridyl)-1,3,5-triazine 용액 1 mL, 20 mM FeCl36H2O 용액 1 mL 및 0.3 M acetate buffer (pH 3.6) 1 mL을 혼합하여 FRAP 시약을 제조하였다. FRAP 시약 150 μL와 증류수에 녹인 시료 50 μL를 혼합하여 10분간 반응시킨 후, microplate reader(Molecular Devices)를 이용하여 593 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조군은 시료 대신 증류수를 사용하였다. Fe (II) 농도는 15.6-125 μM (FeSO47H2O)로 하여 검량선을 작성하였다(R2= 0.999). Ascorbic acid는 양성대조군으로 이용하였으며 시료의 흡광도는 FeSO4 검량곡선과 비교한 후, FRAP 값[Fe(III) 환원 활성 또는 제2철 환원력]을 μM Fe(II) equivalent로 나타내었다.
그 결과, MNV를 세포에 감염시키면서 동시에 석창포 추출물을 첨가하였을 때 GSH 함량은 MNV 대조군에 비하여 유의적으로 증가하였다(도 6A). 석창포 추출물의 DPPH 라디칼 소거활성(도 6B) 및 FRAP 값(도 6C)은 농도의존적으로 증가하였다.
이로부터, 본 발명자들은 석창포 추출물이 항산화 효능을 발휘함을 확인하였다.
3-7. 모의 소화실험에서 항바이러스 작용 측정
상기 실시예 3-3 및 3-4에서 확인한 바와 같이, 본 발명의 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료가 노로바이러스 저해 작용을 나타냈으므로, 본 발명자들은 인체 소화 시스템에서도 항바이러스 활성이 지속되는지 확인하기 위하여 모의 소화 실험을 실시하였다.
간략하게는, 모의 소화실험을 위하여 모의 타액(simulated saliva fluid; SSF), 모의 위액(simulated gastric fluid; SGF) 및 모의 장액(simulated intestinal fluid; SIF)을 Minekus 등 (2014) 방법을 참조하여 제조하였다. 모의 타액은 salivary α-amylase(Sigma-Aldrich) 150 unit/mL를 함유하며 pH 7로 조절하였고, 모의 위액은 porcine pepsin(Sigma-Aldrich) 4,000 unit/mL를 함유하며 pH 3으로 제조하였고 모의 장액은 pancreatin(Sigma-Aldrich) 200 unit/mL 및 bile(Sigma-Aldrich) 20 mM을 함유하며 pH 7로 제조하였다. 이후 진행되는 모의 소화실험은 암소 및 37℃ 수조의 90 stroke/min 조건에서 진행하였다. 먼저, 모의 위액에 MNV (최종농도 6 log PFU/mL)와 알파-아사론 또는 베타-아사론을 각각 혼합하여 2분간 반응시켰다. 반응시킨 혼합물에 모의 위액을 1:1로 혼합하여 2시간동안 incubation 시킨 후, 여기에 모의 장액을 1:1로 혼합하여 2시간 동안 반응시켰다. 최종 반응액은 DMEM을 이용하여 10-배 연속 희석하여 상기의 3-3과 같이, RAW 264.7 세포에 넣고 5% CO2, 37℃에서 1시 동안 감염시켰다. 이후 1.5%(w/v) 아가로스, 5%(v/v) FBS, 그리고 1%(v/v) PS(penicillin-streptomycin)가 포함된 DMEM 배지를 넣고 42시간 동안 37℃ 배양기에서 배양한 후 0.5%(v/v) 크리스탈 바이올렛으로 염색하여 용균반을 측정하였다. 석창포 추출물, 알파-아사론 또는 베타-아사론을 첨가하지 않고 MNV만 넣은 대조군에 비하여 용균반 형성의 감소 정도를 비교하였다.
그 결과, 석창포 추출물 1 mg/mL과 알파-아사론 및 베타-아사론 1 mM 농도는 MNV에 대하여 높은 항바이러스 작용을 나타내었다(도 7).
이로부터, 본 발명자들은 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 시료가 인체의 모의 소화조건에서도 매우 높은 항바이러스 작용을 나타냄을 확인하였다.
이성질체인 알파-아사론과 베타-아사론은 다양한 생물학적 기능이 알려져 있다. 즉, 베타-아사론의 인지기능 개선, 항알레르기 작용 및 항진균 작용이 보고되었고, 알파-아사론은 신경보호작용이 있는 것으로 연구되어 있다. 특히 알파-아사론은 아사론의 트랜스-이성질체(isomer)로서 한국식품의약품안전처에 등록되어 있는 생약 성분이다. 그러나 이들 이성질체의 항바이러스 활성은 아직 세계적으로 보고된 바 없다.
특히, 본 발명에서 알파-아사론은 안전한 생약 성분으로서 특히 낮은 농도에서도 베타-아사론에 비해서 유의성있는 농도의존성을 보여줌과 동시에 더욱 높은 항바이러스 활성을 보여주고 있다. 따라서, 본 발명의 석창포 추출물 및 알파-아사론 함유 조성물은 노로바이러스 저해에 안정성과 함께 유용하게 적용 가능할 것으로 판단된다.
종합적으로, 본 발명은 본 발명의 석창포 추출물, 이로부터 유래된 그 함유 성분인 알파-아사론 또는 베타-아사론이 바이러스, 특히 노로바이러스에 대한 우수한 저해 효과가 있음을 보여주었다. 첫째, 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론은 뮤린 노로바이러스를 이용한 용균반 형성 실험 (plaque assay)과 모의 소화실험 (simulated digestive condition)에서 현저한 노로바이러스 저해 효과를 보였다. 둘째, 알파-아사론과 베타-아사론은 효소결합면역흡착검사(enzyme-linked immunosorbent assay; ELISA)를 이용한 분석에서 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 수용체 결합을 저해하였다. 또한, 알파-아사론과 베타-아사론이 GII.4 P 도메인에 미치는 영향을 Differential scanning fluorimetry로 분석하였을 때, 녹는 온도(melting temperature, Tm)를 감소시킴을 확인하였다. 셋째, 석창포 추출물은 항산화 활성을 보였고, 뮤린 노로바이러스가 감염된 세포에서 글루타티온(glutathione; GSH)을 증가시켰다.
즉, 본 발명의 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론의 MNV 저해활성 및 인간 노로바이러스 GII.4 P 도메인의 수용체 결합 저해활성이 대조군에 비하여 월등하게 우수함을 확인하였는바, 본 발명의 석창포 추출물, 알파-아사론 및 베타-아사론 함유 조성물은 노로바이러스 저해에 유용하게 적용 가능할 것으로 판단된다.
진술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해되어야 한다.
Claims (9)
- 석창포(Acorus gramineus) 추출물, 알파-아사론(α-Asarone) 또는 베타-아사론(β-Asarone)을 유효성분으로 포함하는 항바이러스용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 석창포 추출물은, 석창포 뿌리줄기 추출물인 것을 특징으로 하는, 조성물.
- 제2항에 있어서,
상기 석창포 추출물은, 석창포 뿌리줄기를 용매추출법, 상온추출법, 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법 및 압착법으로 이루어진 군으로부터 선택된 1 종 이상의 방법으로 추출한 것을 특징으로 하는, 조성물.
- 제3항에 있어서,
상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군으로부터 선택된 1 종 이상인 것을 특징으로 하는, 조성물.
- 석창포(Acorus gramineus) 추출물, 알파-아사론(α-Asarone) 또는 베타-아사론(β-Asarone)을 유효성분으로 포함하는 칼리시바이러스과(Caliciviridae family)에 속하는 칼리시바이러스 감염에 의한 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 석창포(Acorus gramineus) 추출물, 알파-아사론(α-Asarone) 또는 베타-아사론(β-Asarone)을 유효성분으로 포함하는, 항바이러스용 의약외품 조성물.
- 석창포(Acorus gramineus) 추출물, 알파-아사론(α-Asarone) 또는 베타-아사론(β-Asarone)을 유효성분으로 포함하는, 항바이러스용 식품 조성물.
- 석창포(Acorus gramineus) 추출물, 알파-아사론(α-Asarone) 또는 베타-아사론(β-Asarone)을 유효성분으로 포함하는, 항바이러스용 식품 첨가제 조성물.
- 석창포(Acorus gramineus) 추출물, 알파-아사론(α-Asarone) 또는 베타-아사론(β-Asarone)을 유효성분으로 포함하는, 항바이러스용 동물 사료 첨가제 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220097954A KR20240020021A (ko) | 2022-08-05 | 2022-08-05 | 석창포 추출물 및 아사론을 포함하는 항바이러스 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220097954A KR20240020021A (ko) | 2022-08-05 | 2022-08-05 | 석창포 추출물 및 아사론을 포함하는 항바이러스 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20240020021A true KR20240020021A (ko) | 2024-02-14 |
Family
ID=89896282
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020220097954A KR20240020021A (ko) | 2022-08-05 | 2022-08-05 | 석창포 추출물 및 아사론을 포함하는 항바이러스 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20240020021A (ko) |
-
2022
- 2022-08-05 KR KR1020220097954A patent/KR20240020021A/ko unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102204299B1 (ko) | 담팔수 추출물을 유효성분으로 포함하는 코로나 바이러스 치료제 | |
| KR100950445B1 (ko) | 감초로부터 얻은 조류, 돼지 인플루엔자 및 신종플루에 대한 항바이러스제 | |
| KR101612051B1 (ko) | 단삼 추출물을 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR101138461B1 (ko) | 감초 추출물을 포함하는 로타바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR102485608B1 (ko) | 노다케닌 또는 노다케네틴을 포함한 인플루엔자 바이러스 억제용 조성물 | |
| KR20170062421A (ko) | 귤나무속 열매 발효물을 유효성분으로 포함하는 항바이러스용 조성물 | |
| KR101443510B1 (ko) | 치커리 추출물을 유효성분으로 함유하는 인플루엔자 바이러스 감염 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이의 제조방법 | |
| KR20240020021A (ko) | 석창포 추출물 및 아사론을 포함하는 항바이러스 조성물 | |
| KR101188581B1 (ko) | 향부자 메탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 패혈증 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR20190044171A (ko) | 고미신 유도체를 유효성분으로 포함하는 간질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR20140106198A (ko) | 귤나무속 열매 발효물을 유효성분으로 포함하는 항바이러스용 조성물 | |
| KR101636608B1 (ko) | 산수유 추출물을 포함하는 항산화용 조성물 | |
| KR20110086473A (ko) | 감태 추출물을 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물 및 3ｃｌ 프로테아제 활성의 억제용 조성물 | |
| KR20210145591A (ko) | 코로나바이러스 중화용 조성물 | |
| KR20150070070A (ko) | 복분자를 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 조성물 | |
| KR100792626B1 (ko) | 카테킨 유도체 화합물을 유효성분으로 하는 독감 바이러스감염성 질환 예방 및 치료제 | |
| KR102583001B1 (ko) | 클로렐라(Chlorella sp.)추출물 및 이의 페오피틴화 분획물 또는 이로부터 수득한 폴피린계 또는 카로테논계 화합물을 유효성분으로 포함하는 신종코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR20130094553A (ko) | 진저레논 에이를 포함하는 암 예방용 식품 조성물, 암 치료용 약학조성물 및 암 치료용 동물용 의약품 | |
| EP4151226A1 (en) | Coronavirus therapeutic agent comprising zanthoxylum piperitum leaf extract as active ingredient | |
| RU2780346C1 (ru) | Терапевтический агент против коронавируса, включающий экстракт elaeocarpus sylvestris | |
| KR102326439B1 (ko) | 인삼을 포함하는 항균, 항염, 항바이러스 및 면역 기능 개선용 조성물 | |
| JP2018118959A (ja) | クロモジを原料とする抗微生物用組成物 | |
| KR102176394B1 (ko) | 타히보 추출물을 유효성분으로 함유하는 면역 증진용 조성물 | |
| JP7474432B2 (ja) | 抗アレルギー剤 | |
| KR20230054297A (ko) | 산자나무 열매 추출물 또는 분획물을 포함하는 항바이러스용 약학적 조성물 |