KR20240018446A - 돌연변이 braf의 분해를 위한 요법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 돌연변이 BRAF에 의해 매개된 장애, 예컨대 암의 치료를 위해 그를 필요로 하는 숙주, 예컨대 인간에게 투여될 수 있는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 그의 제약 조성물을 제공한다. 화합물은 부류 I, II 및 III 돌연변이 BRAF 단백질을 효율적으로 분해한다.
Description
관련 출원에 대한 상호-참조
본 출원은 유럽 특허 출원 EP21178145.5, EP21178150.5 및 EP21178152.1 (이들 각각은 2021년 6월 8일에 출원됨) 및 미국 가출원 63/277,973 (2021년 11월 10일에 출원됨)을 우선권 주장하며; 각각의 전문은 모든 목적을 위해 참조로 포함된다.
발명의 분야
본 발명은 돌연변이 BRAF, 예컨대 부류 I, 부류 II 및/또는 부류 III 돌연변이 BRAF를 분해하는 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염, 용도, 조성물 및 제조 방법을 제공한다. 본 발명의 화합물은 돌연변이 BRAF에 의해 매개된 장애, 예컨대 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위해 그를 필요로 하는 숙주, 예컨대 인간에게 투여될 수 있다.
BRAF는 신호 전달 단백질 키나제의 구성원인 세린/트레오닌 단백질 키나제이다. BRAF는 MAPK 신호전달 경로에서 중요한 역할을 하고, 흑색종 (~60%), 갑상선 (~60%) 및 폐 선암종 (~10%)을 포함한 모든 인간 암의 대략 8%에서 돌연변이된다. BRAF 돌연변이는 또한 갑상선암, 결장직장암, 폐암 등에서 관찰된다. BRAF에서 가장 흔한 돌연변이는 악성 흑색종의 절반에서 발생하는 V600E (부류 I)이다. 이러한 돌연변이는 ERK를 과다활성화시키고, RAF 억제제-감수성 단량체로서 신호를 전달한다. 다른 흔한 활성화 돌연변이는 부류 II 돌연변이, 예컨대 G469A 및 부류 III 돌연변이, 예컨대 G466V를 포함한다. 부류 II 및 III 돌연변이는 RAF 동종- 또는 이종-이량체화를 촉진함으로써 ERK를 활성화시킨다.
이용가능한 BRAF 억제제의 치료 이익에도 불구하고, 이들 약물에 대한 항종양 반응의 지속기간은 약물 저항성의 획득에 의해 제한될 수 있다.
BRAF 단백질은 단백질 동종-이량체화 (BRAF-BRAF) 또는 다른 RAF 단백질과의 이종-이량체화 (BRAF-RAF1 또는 BRAF-ARAF)가 요구되는 신호전달 전파를 위한 메카니즘을 제시한다. BRAF V600E/K 치환을 갖는 종양학 적응증에서 관찰된 바와 같이, BRAF가 돌연변이되는 경우에, BRAF 신호전달은 동종이량체 및/또는 이종이량체와 독립적이 된다. 키나제 활성은 단량체 단백질로서 과다활성화되고, 세포 증식 신호를 유도한다.
단량체 BRAF는 억제할 수 있지만 이량체 BRAF는 억제하지 않는 여러 BRAF 억제제, 예컨대 베무라페닙, 다브라페닙 및 엔코라페닙이 기재되었지만, RAS 돌연변이, BRAFV600E 증폭 및 BRAFV600E 유전자내 결실 또는 스플라이스 변이체를 포함한 저항성이 통상적으로 1년 내에 출현한다. 이들 억제제는 또한 RAF 동종- 또는 이종-이량체화를 촉진함으로써 ERK를 활성화시키는 비-V600 BRAF 돌연변이체 (부류 II & III)에 대해 비효과적이다.
BRAF 억제제의 예는 WO2021/116055 및 WO2021/116050에 기재되어 있다.
BRAF 분해 화합물의 비제한적 예는 WO2018/119448, WO2019/199816, WO2020/051564 및 WO2022/047145에 기재된 것을 포함한다.
이들 노력에도 불구하고, BRAF 매개된 암을 치료하는 새로운 치료 약물, 특히 돌연변이 BRAF 매개된 암을 치료하는 약물에 대한 필요가 남아있다.
본 발명은 유비퀴틴 프로테아솜 경로를 통해 돌연변이 BRAF, 예를 들어 부류 I, 부류 II 및/또는 부류 III 돌연변이 BRAF를 분해하는 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염, 용도, 조성물 및 제조 방법을 제공한다. 본원에 제시된 화합물은 야생형 BRAF를 유의하게 분해하지 않는다. 이들 화합물은 편재적으로 발현된 E3 리가제 단백질 세레블론 (CRBN)에 결합하고, CRBN E3 유비퀴틴 리가제 복합체의 기질 특이성을 변경시켜, 돌연변이 BRAF, 예컨대, 예를 들어 BRAF V600E의 동원 및 유비퀴틴화를 유발한다. 본 발명의 화합물은 또한 WT BRAF, RAF1 및 ARAF의 결합제이지만, 이들 화합물에 의해 돌연변이 BRAF, 예컨대, 예를 들어 부류 I 돌연변이 BRAF, 예컨대 V600E, 부류 II 돌연변이 BRAF, 예컨대 G469A, 부류 III 돌연변이 BRAF, 예컨대 G466V 돌연변이 및 스플라이스 변이체, 예컨대 p61-BRAFV600E (실시예 231 참조)에 대한 보다 효과적인 표적화 분해가 촉발된다.
돌연변이 BRAF를 분해함으로써, 본 발명의 화합물은 돌연변이 BRAF 매개된 암, 예를 들어 흑색종, 예를 들어 비소세포 폐암을 포함한 폐암, 예를 들어 미소위성체 안정한 결장직장암을 포함한 결장직장암, 예를 들어 역형성 갑상선암을 포함한 갑상선암, 또는 난소암을 치료하는 데 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 V600X 돌연변이 BRAF에 의해 매개된 고형 종양을 치료하는 데 사용된다. 본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 장애의 추가의 비제한적 예는 흑색종, 비소세포 폐 암종, 갑상선암, 결장직장암 및 돌연변이 BRAF 유도인자를 갖는 다른 고형 종양 악성종양을 포함한다.
특정 실시양태에서 본 발명의 화합물, 예를 들어 화합물 157은 WT BRAF, KRAS 및/또는 CRAF에 비해 돌연변이 BRAF의 분해에 대해 약 10배, 100배 또는 심지어 1000배 초과의 선택성을 갖는다 (실시예 234 참조). 예를 들어, A375 세포에서, 화합물 157은 BRAFV600E를 강력하게 분해하고 (Emax = 26% (즉, BRAF 단백질의 74%가 분해됨); DC50 = 24시간에서 14nM), ERK 인산화를 억제하고 (IC50 = 24시간에서 11nM), 세포 성장을 억제하지만 (GI50 = 96시간에서 94nM), 돌연변이 KRAS 유도된 세포주 HCT-116에서는 효과가 없다 (실시예 235 및 236 참조). A375 이종이식편에서, 화합물 157의 경구 전달은 임상적으로 유의미한 용량의 엔코라페닙보다 더 효과적이었고, 10 mg/kg BID로 투여되었을 때 현저한 종양 퇴행을 제공하였다 (실시예 241 참조).
본 발명의 화합물은 BRAF에 1개의 돌연변이가 있는 치료하기 어려운 이중 돌연변이 암을 치료하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 화합물 157은 BRAF 억제제 저항성의 조작된 A375-BRAFV600E/NRASQ61K 이중 돌연변이 모델에서 BRAF를 분해하는 데 엔코라페닙보다 훨씬 더 효과적이었다 (실시예 231 및 241 참조). 이 모델에서, 단일 작용제 화합물 157의 생체내 투여는 강건한 종양 성장 억제를 유발하였고, MEK 억제제인 트라메티닙과 조합되어 종양 퇴행을 제공하였다. 엔코라페닙과 트라메티닙의 조합은 동일한 모델에서 활성을 나타내지 않았다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 부류 I, 부류 II, 부류 III의 BRAF 돌연변이체 및 그의 스플라이스 변이체를 분해하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 화합물 157은 HEK293T 세포에서의 이종 발현을 사용하여 G469A (부류 II), G466V (부류 III) 및 p61-BRAFV600E 스플라이스 변이체를 포함한 추가의 BRAF 돌연변이 단백질을 분해할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 BRAF 억제제에 대한 저항성이 발생한 암을 치료할 수 있다. 예를 들어, 화합물 157은 엔코라페닙이 활성을 갖지 않는 G466V 돌연변이 BRAF 폐 종양 세포주의 치료에 효과적이다 (실시예 231 참조). 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물, 예를 들어 화합물 157은 경구로 생체이용가능하다.
특정 측면에서, 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물, 예를 들어 화합물 157 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공된다:
다른 측면에서, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공된다:
여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐 (예를 들어 F), 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐 (예를 들어 F)으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐 (예를 들어 F)으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
A22는 -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
W1은 -N- 및 -CH-로부터 선택되고;
W2는 -N- 및 -CR26-으로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐 (예를 들어 F), 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
R26은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 알콕시 및 알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A23은 결합, -O- 및 -CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
A30은 결합, -CH2-, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
B2는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
B3은 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
n은 0 또는 1이고;
A4는 결합, -CH2-, -(SO2)-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
A14는 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH-, -O-, 시클로알킬 및 알킬아미노로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고; 여기서 C는 할로겐 (예를 들어 F), 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
D는 
로부터 선택되고;
R7은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 (예를 들어 F) 및 알콕시로부터 선택되고;
R8은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 (예를 들어 F) 및 알콕시로부터 선택되고;
R9는 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 (예를 들어 F) 및 알콕시로부터 선택되고;
R17은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R18은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R19는 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A5는 -CH- 또는 -N-이고;
A15는 결합, -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
A6은 -CH- 또는 -N-이고;
링커는 2가 화학적 기이다.
특정 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
여기서
X1 및 X2는 각각의 경우에 독립적으로 결합, 헤테로사이클, NR2, C(R2)2, O, C(O) 및 S로부터 선택되고;
R20, R21, R22, R23 및 R24는 각각의 경우에 독립적으로 결합, 알킬, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -SO2-, -S(O)-, -C(S)-, -C(O)NR2-, -NR2C(O)-, -O-, -S-, -NR2-, -C(R40R40)-, -P(O)(OR36)O-, -P(O)(OR36)-, 비사이클, 알켄, 알킨, 할로알킬, 알콕시, 아릴, 헤테로사이클, 지방족, 헤테로지방족, 헤테로아릴, 락트산, 글리콜산 및 카르보사이클로부터 선택된 2가 모이어티로 이루어진 군으로부터 선택되고; 이들 각각은 R40으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의로 치환되고;
R36은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬, 알켄, 알킨, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클, 지방족 및 헤테로지방족으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R40은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알켄, 알킨, 플루오로, 브로모, 클로로, 히드록실, 알콕시, 아지드, 아미노, 시아노, -NH(알킬을 포함한 지방족), -N(알킬을 포함한 지방족)2, -NHSO2(알킬을 포함한 지방족), -N(알킬을 포함한 지방족)SO2알킬, -NHSO2(아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클), -N(알킬)SO2(아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클), -NHSO2알케닐, -N(알킬)SO2알케닐, -NHSO2알키닐, -N(알킬)SO2알키닐, 할로알킬, 지방족, 헤테로지방족, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클 및 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.
특정 실시양태에서, 링커는 
이다.
화학식 I 및 화학식 II의 화합물의 비제한적 예는 하기 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
본 발명은 돌연변이 BRAF, 예컨대 돌연변이 V600E를 제시하는 BRAF를, 이러한 BRAF 단백질의 표적화된 유비퀴틴화 및 후속 프로테아솜 분해를 통해 특이적으로 분해하는 화합물을 제공한다. 본 발명의 화합물은 편재적으로 발현된 E3 리가제 단백질 세레블론 (CRBN)에 결합하고, CRBN E3 유비퀴틴 리가제 복합체의 기질 특이성을 변경시켜, 돌연변이 BRAF, 예컨대 BRAF V600E의 동원 및 유비퀴틴화를 유발한다. 본 발명의 화합물은 또한 WT BRAF, RAF1 및 ARAF의 효과적인 결합제이지만, 이들 화합물에 의해 돌연변이 BRAF, 예컨대 BRAF V600E에 대한 효과적인 표적화된 분해가 촉발된다.
특정 측면에서, 본 발명의 화합물은 BRAF가 야생형으로부터 돌연변이된 것인 BRAF 매개된 암을 치료하는 데 사용된다. BRAF 돌연변이에 대한 다수의 가능성이 존재한다. 특정의 비제한적 실시양태에서, 돌연변이는 부류 I 돌연변이, 부류 II 돌연변이 또는 부류 III 돌연변이 또는 그의 임의의 조합이다. 부류 I 돌연변이의 비제한적 예는 V600 돌연변이, 예컨대 V600E, V600K, V600R, V600D 및 V600N을 포함한다. 부류 II 돌연변이의 비제한적 예는 G469A, G469V, G469L, G469R, L597Q 및 K601E를 포함한다. 부류 III 돌연변이의 비제한적 예는 G466A, G466E, G466R, G466V, S467L, G469E, N581I, D594E, D594G 및 D594N을 포함한다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 BRAF 돌연변이체 매개된 장애를 치료하며, 여기서 돌연변이는 부류 I, 부류 II 또는 부류 III 돌연변이가 아니다. 돌연변이의 비제한적 예는 G464I, G464R, N581T, L584F, E586K, G593D, G596C, L597R, L597S, S605I, S607F, N684T, E26A, V130M, L745L 및 D284E를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 BRAF 돌연변이체 매개된 장애를 치료하며, 여기서 돌연변이는 스플라이스 변이체, 예를 들어 p61-BRAFV600E이다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 2종 이상의 돌연변이 단백질에 의해 매개된 장애, 예를 들어 BRAFV600E/NRASQ61K 이중 돌연변이체에 의해 매개된 암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 적어도 1종의 BRAF 억제제에 대해 저항성인 암, 예를 들어 다브라페닙, 트라메티닙, 베무라페닙 및 엔코라페닙으로부터 선택된 BRAF 억제제에 대해 저항성이거나 또는 그에 대한 저항성을 획득한 암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 화합물은 회피 돌연변이가 발생한 암, 예컨대 BRAF V600E/NRASQ61K 이중 돌연변이 암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 화합물은 흑색종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 선택된 화합물은 적어도 1종의 공지된 BRAF 억제제에 비해 개선된 효능 및/또는 안전성 프로파일을 제공한다. 예를 들어, 본 발명의 분해제는 단지 단백질 결합 모이어티만이 세레블론-활성화된 프로테아솜 분해의 촉매 분해 활성과 조합된 억제제의 효율을 갖는다. 이는 신속하게 "작용으로 복귀"하고 촉매 기능을 반복할 수 있는 활성 모이어티에 의해 돌연변이 BRAF 매개된 암에 대한 신속한 활성을 제공한다. 이러한 방식으로, BRAF는 공유 자살 억제제를 사용하여 행해진 바와 같이 신속하게 파괴되지만, 동시에 활성 약물을 파괴하지는 않는다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 분해제 화합물은 BRAF 매개된 장애의 치료에서 단지 효소 억제제만을 사용하는 것보다 하나 이상의 이점을 갖는다.
특정 실시양태에서, BRAF 표적화 리간드 부분 단독의 몰수보다 더 적은 몰수의 본원에 기재된 화합물이 BRAF 매개된 장애의 치료에 필요하다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 소정 몰수의 BRAF 표적화 리간드 부분 단독보다 BRAF 매개된 장애의 치료에서 더 적은 적어도 1종의 부작용을 갖는다.
본 발명의 또 다른 측면은 BRAF에 의해 매개된 장애를 억제 또는 예방하거나 또는 BRAF의 양을 조정 또는 감소시키기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 그의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 또는 입체이성질체 또는 그의 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물 또는 제약 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은 BRAF에 의해 매개된 질환을 치료 또는 예방하기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 그의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 또는 입체이성질체 또는 그의 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물 또는 그의 제약 조성물을 제공한다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 선택된 화합물은 비정상적 세포 증식, 예컨대 종양 또는 암을 포함하는 장애를 치료하는 데 유용하며, 여기서 BRAF는 종양원성 단백질 또는 비정상적 세포 증식 경로의 신호전달 매개자이고, 그의 분해는 비정상적 세포 성장을 감소시킨다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 동위원소의 천연 존재비 초과의, 즉 농축된 양의 원자의 적어도 1개의 목적하는 동위원소 치환을 갖는다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 중수소 원자 또는 다수의 중수소 원자를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 암의 치유적 및/또는 예방적 치료에 유용하다.
특정 측면에서, 본 발명의 화합물은 돌연변이 BRAF 매개된 암을 치료하기 위해 본원에 기재된 제2 활성제와 조합되어 사용된다. 본 발명의 화합물과 조합되어 사용될 수 있는 분자의 부류의 비제한적 예는 MEK 억제제, 면역 체크포인트 억제제 및 EGFR 항체를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 돌연변이 BRAF 매개된 암, 예를 들어 흑색종 또는 비소세포 폐암의 치료를 위해 트라메티닙과 조합되어 사용된다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 돌연변이 BRAF 매개된 암을 치료하기 위해 면역 체크포인트 억제제와 조합되어 사용된다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 돌연변이 BRAF 매개된 암, 예를 들어 결장직장암을 치료하기 위해 세툭시맙 또는 파니투무맙과 조합되어 사용된다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 돌연변이 BRAF 매개된 암, 예를 들어 결장직장암, 흑색종 또는 비소세포 폐암을 치료하기 위해 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 세미플리맙, 이필리무맙, 렐라틀리맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 또는 두르발루맙과 조합되어 사용된다.
다른 측면에서, 본 발명의 화합물은 돌연변이 BRAF 매개된 암을 치료하기 위해 본원에 기재된 2종 이상의 추가의 활성제와 조합되어 사용된다. 특정 실시양태에서 본원에 기재된 화합물은 흑색종 또는 비소세포 폐암을 치료하기 위해 MEK 억제제 및 면역 체크포인트 억제제와 조합되어 사용된다.
본 출원의 다른 특색 및 이점은 하기 상세한 설명으로부터 분명할 것이다.
따라서, 본 발명은 적어도 하기 특색을 포함한다:
(a) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 동위원소 유도체 (중수소화 유도체 포함);
(b) 돌연변이 BRAF 매개된 장애, 예컨대 암을 포함한 비정상적 세포 증식의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 장애를 치료하는 방법;
(c) 돌연변이 BRAF에 의해 매개된 장애, 예를 들어 비정상적 세포 증식, 예컨대 종양 또는 암의 치료에 사용하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 동위원소 유도체 (중수소화 유도체 포함);
(d) 돌연변이 BRAF 매개된 장애, 예를 들어 비정상적 세포 증식, 예컨대 종양 또는 암을 갖는, 그의 치료를 필요로 하는 환자, 전형적으로 인간의 치료에서의 유효량의 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도;
(e) 돌연변이 BRAF 매개된 장애, 예를 들어 비정상적 세포 증식, 예컨대 종양 또는 암의 치료를 위한 의약의 제조에서의 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 동위원소 유도체 (중수소화 유도체 포함)의 용도;
(f) 돌연변이 BRAF 매개된 장애, 예를 들어 비정상적 세포 증식, 예컨대 종양 또는 암을 갖는, 그의 치료를 필요로 하는 환자, 전형적으로 인간의 치료에서의 유효량의 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도;
(g) 유효한 환자-치료 양의 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 동위원소 유도체; 및 임의로 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물;
(h) 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체의 혼합물로서 (적절한 경우), 예컨대 라세미체로서의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물;
(i) 단리된 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체 (즉, 약 85, 90, 95, 97 또는 99% 초과의 순도)를 포함한 거울상이성질체적으로 또는 부분입체이성질체적으로 (적절한 경우) 풍부한 형태의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물; 및
(j) 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 함유하는 치료 제품의 제조 방법.
도면에 사용된 화합물 157 및 실시예 157은 둘 다 하기를 지칭한다:
화합물 157은 미국 가출원 63/277,973 및 유럽 특허 출원 21178150.5에서 화합물 14/실시예 14로서 지칭되었다.
도 1은 화합물 157로의 처리 24시간 후 HiBiT-BRAFV600E 단백질 수준을 보여주는 선 그래프이다. 화합물 157은 DC50이 ~100nM이고 분해 Emax가 ~25%이고 포스포-ERK (pERK)가 동반 상실되며, 이는 IC50 < 5 nM로 MAPK 경로의 차단을 입증한다. y-축은 %로 측정된 잔류 단백질이다. x-축은 나노몰로 측정된 화합물 157의 농도이다. 실험 절차는 실시예 229 및 실시예 230에 제공된다.
도 2는 다양한 농도의 화합물 157로의 처리 후 정상 GSPT1 단백질 수준을 보여주는 선 그래프이다. y-축은 %로 측정된 잔류 단백질이다. x-축은 나노몰로 측정된 화합물 157의 농도이다. 실험 절차는 실시예 229에 제공된다.
도 3은 다양한 농도의 화합물 157로의 처리 후 정상 SALL4 단백질 수준을 보여주는 선 그래프이다. y-축은 %로 측정된 잔류 단백질이다. x-축은 나노몰로 측정된 화합물 157의 농도이다. 실험 절차는 실시예 229에 제공된다.
도 4는 프로테아솜 의존성 분자의 기능과 관련된 억제제 또는 경쟁자에 의해 챌린지되는 동안 분해제 화합물 157에 반응한 A375 세포에서의 BRAF V600E 수준을 도시하는 웨스턴 블롯이다. (-/+)는 샘플 중 화합물 157의 존재를 나타낸다. DMSO 단독으로 처리된 경우에 BRAF V600E는 정상 수준이지만, 24시간 동안 화합물 157에 노출된 후에 BRAF V600E 수준은 유의하게 감소하였다. 이러한 분해는 분해제가 BRAF V600E에 결합하는 것을 방지하는 과량의 표적화 리간드의 첨가에 의해 차단된다. 분해는 또한 세포가 세레블론 상의 결합 부위에 특이적인 화합물 (IMID)로 전처리되는 경우에 차단된다. 종합하면, 이는 분해제가 BRAF V600E를 분해하기 위해서는 BRAF 및 CRBN 둘 다에 동시에 결합해야 한다는 것을 시사한다. 추가적으로, 세포가 화합물 157과 조합된 네딜화 억제제 MLN4962 또는 프로테아솜 억제제 보르테조밉으로 처리된 경우에, 분해는 차단되며, 이는 화합물 157에 의한 이러한 BRAF V600E 상실이 네딜화 및 프로테아솜 시스템에 의존성이라는 것을 나타낸다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 5는 다양한 농도의 화합물 157 또는 화합물 157NMe와 BRAF V600E 및 세레블론의 3원 복합체 형성을 보여주는 선 그래프이다. y-축은 3원 복합체의 분율이다. x-축은 나노몰로 측정된 화합물 157의 농도이다. 화합물 157NMe는 세레블론과의 상호작용이 최소이거나 전혀 없으므로 기능적 분해제가 아닌, 화합물 157의 유사체이다. 실험 절차는 실시예 232에 제공된다.
도 6은 여러 단백질에 결합하는 10 nM 화합물 157의 상대량을 보여주는 트리스팟(TREEspot)™ 상호작용 맵이다. 화합물 157에 대한 결합을 보여주는 키나제는 흑색 원형으로 강조되어 있다. 원형의 크기는 % 억제를 반영한다. 실험 절차는 실시예 233에 제공된다.
도 7은 여러 단백질에 결합하는 1,000 nM 화합물 157의 상대량을 보여주는 트리스팟™ 상호작용 맵이다. 화합물 157에 대한 결합을 보여주는 키나제는 흑색 원형으로 강조되어 있다. 원형의 크기는 % 억제를 반영한다. 실험 절차는 실시예 233에 제공된다.
도 8은 300nM 화합물 157로 24시간 동안 처리된 A375 또는 JURKAT 세포의 멀티플렉스화 정량적 프로테오믹스에 의해 분석된 세포 용해물로부터의 데이터를 보여주는 산점도이다 (실험 방법에 대해서는 하기 참조). 각각의 실험에 대해, 화합물 157 처리된 샘플 (생물학적 이중물)을 300nM 다브라페닙 (A375 세포) 또는 DMSO (JURKAT 세포)로 처리된 대조군 샘플과 비교함으로써 데이터를 분석하였으며, 생성된 산점도에 상대 존재비의 배수 변화가 도시되어 있다. Log2 배수 변화는 x 축에 제시되고, 음성 Log10 조정된 p-값 (벤자미니-호크베르크 보정을 통해 조정된, 화합물 157 대 DMSO 대조군의 T-검정)은 y 축에 제시된다. 수평 파선은 통계적 유의성을 표시하고 (p-값 ≤ 0.001), 수직선은 ≥ 2의 배수 변화 컷-오프를 표시한다. 실험 절차는 실시예 234에 제공된다.
도 9는 분해제 화합물 157 및 널 분해제 화합물 157NMe에 반응한 A375 세포에서의 BRAF V600E 및 pERK 수준을 도시하는 웨스턴 블롯이다. BRAF V600E 수준은 1 μM에서 후크에 도달할 때까지 화합물 157에 의해 용량 의존성 방식으로 감소하며, 이는 이중기능적 분해제의 특징과 같다. MAPK 신호전달은, ERK 인산화에 의해 판독된 바와 같이, 화합물 157로의 처리 후에 유의하게 하락하였다. 화합물 157NMe는 세레블론에 대해 최소 결합을 가지므로 기능적 분해제가 아닌, 화합물 157의 유사체이다. 예상된 바와 같이, BRAF V600E 수준은 변화되지 않은 채로 남아있고, ERK 인산화의 상실은 기능적 분해제만큼 현저하지 않다. 널 분해제에서 관찰된 ERK 인산화에 대한 영향은 이중기능적 분해제의 리간드 표적화 측면의 억제 기여로 인한 것이다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 10은 7일의 과정에 걸쳐 생존 세포 영상화에 의해 화합물 157 및 화합물 157NMe와 함께 배양된 A375 세포의 세포 전면생장률을 도시하는 선 그래프이다. DMSO 처리된 세포는 예상된 배가 시간으로 신속하게 성장하고, 제5일 정도에 100% 전면생장률에 도달하였다. BRAF 분해제 화합물 157로 처리 시에, 세포는 7일 실험의 종료까지 성장이 현저히 부진하였고 20% 전면생장률에 거의 도달하지 않았다. 세레블론 널 화합물 157NMe로 처리된 세포는 초기에 정상 속도로 성장하지만, 대략 70% 전면생장률로 성장이 억제된다. 두 화합물 사이의 이동은 BRAF V600E 분해가 동등한 BRAF V600E 억제 단독과 비교하여 세포 성장의 억제에 미치는 기여를 입증한다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 11은 제5일에 생존 세포 영상화에 의해 화합물 157 및 화합물 157NMe와 함께 배양된 A375 세포의 세포 전면생장률을 도시하는 선 그래프이다. 세포 성장에 있어서 BRAF V600E 분해가 동등한 BRAF V600E 억제 단독과 비교하여 세포 성장의 억제에 미치는 기여는 고정된 시점 (제5일)에서 농도에 따른 세포 성장을 관찰하는 것으로 추가로 입증되며, 분해제는 그의 세레블론 널 대응물로부터 우측으로 이동한다는 것을 주목한다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 12는 분해제 화합물 157에 반응한 내인성 WT BRAF를 갖는 HCT-116 세포에서의 WT BRAF 및 pERK 수준을 도시하는 웨스턴 블롯이다. 예상된 바와 같이, WT BRAF 수준 및 ERK의 인산화에 대한 영향은 최소이다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 13은 화합물 157 또는 범 RAF 억제제로의 처리 후 HCT-116 WT BRAF 세포를 예시하는 시간 경과에 따른 성장 실험이다. 이러한 세포주는 RAF 신호전달에 의존성인 것으로 문헌에 기재되었고, 세포 성장은 범 RAF 억제제로의 처리에 의해 유의하게 방해된다. 화합물 157은 처리된 세포에 대한 곡선이 DMSO 처리된 세포와 직접 중첩되는 바와 같이 세포 성장에 대해 영향을 미치지 않으며, 이는 화합물 157의 표현형 결과가 돌연변이 BRAF에 특이적이라는 가설을 지지한다. 실험 절차는 실시예 236에 제공된다.
도 14는 A375 종양을 보유하는 암컷 BALB/c 누드 마우스의 치료에서의 화합물 157 및 엔코라페닙의 생체내 효능을 보여주는 선 그래프이다. 마우스를 나타낸 바와 같이 1일 1회 (QD), 1일 2회 (BID) 또는 1일 3회 (TID) 경구 위관영양 (PO)에 의해 비히클 대조군, 엔코라페닙 (35mg/kg) 또는 화합물 157 (0.1, 0.3, 1, 2, 3 또는 10mg/kg)로 처리하였다. 효능 데이터는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 파선은 무투여 진행을 나타낸다. x-축은 일수 단위로 측정된 시간이고, y-축은 mm3 단위의 A375 종양 부피 측정치이다. 실험 절차는 실시예 238에 제공된다.
도 15는 A375 종양을 보유하는 암컷 BALB/c 누드 마우스의 치료에서의 화합물 157 및 엔코라페닙의 체중 변화를 보여주는 선 그래프이다. 마우스를 나타낸 바와 같이 1일 1회 (QD), 1일 2회 (BID) 또는 1일 3회 (TID) 경구 위관영양 (PO)에 의해 비히클 대조군, 엔코라페닙 (35mg/kg) 또는 화합물 157 (0.1, 0.3, 1, 2, 3 또는 10mg/kg)로 처리하였다. 효능 데이터는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 파선은 무투여 진행을 나타낸다. x-축은 일수 단위로 측정된 시간이고, y-축은 퍼센트 단위의 체중 변화이다. 실험 절차는 실시예 238에 제공된다.
도 16은 0.3, 1, 3 또는 10mg/kg의 단일 경구 (PO) 용량 후 혈장 중 화합물 157의 생체내 약동학적 활성을 보여주는 선 그래프이다. 혈장 및 종양을 나타낸 시점에 수거하고, 정량 분석을 위해 LC/MS/MS 시스템 내로 주입하였다. 혈장 중 화합물 157 농도 (ng/ml) 및 종양 중 화합물 157 농도 (ng/g)는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 실험 절차는 실시예 239에 제공된다.
도 17은 0.3, 1, 3 또는 10mg/kg의 단일 경구 (PO) 용량 후 A375 이종이식 종양에서의 화합물 157의 생체내 약동학적 활성을 보여주는 선 그래프이다. 혈장 및 종양을 나타낸 시점에 수거하고, 정량 분석을 위해 LC/MS/MS 시스템 내로 주입하였다. 혈장 중 화합물 157 농도 (ng/ml) 및 종양 중 화합물 157 농도 (ng/g)는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 실험 절차는 실시예 239에 제공된다.
도 18은 A375 이종이식 종양에서의 B-RAF의 상대 단백질 발현을 보여주는 선 그래프이다. BALB/c 누드 마우스의 우측 측복부에 A375 종양 세포를 주사하였다. 화합물 157을 0.3, 1, 3 또는 10mg/kg으로 단일 경구 (PO) 용량으로서 투여하고, A375 종양을 나타낸 시점에 수거하고, B-RAF의 단백질 발현을 웨스턴 블롯에 의해 측정하였다. x-축은 단일 용량 투여-후 시간으로 측정된 시간이고, y-축은 비히클-처리된 종양 대비 단백질의 퍼센트이다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 실험 절차는 실시예 239에 제공된다.
도 19는 A375 이종이식 종양에서의 포스포-ERK의 상대 단백질 발현을 보여주는 선 그래프이다. BALB/c 누드 마우스의 우측 측복부에 A375 종양 세포를 주사하였다. 화합물 157을 0.3, 1, 3 또는 10mg/kg으로 단일 경구 (PO) 용량으로서 투여하고, A375 종양을 나타낸 시점에 수거하고, pERK의 단백질 발현을 웨스턴 블롯에 의해 측정하였다. x-축은 단일 용량 투여-후 시간으로 측정된 시간이고, y-축은 비히클-처리된 종양 대비 단백질의 퍼센트이다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 실험 절차는 실시예 239에 제공된다.
도 20은 24시간 동안 화합물 157 또는 엔코라페닙으로 처리된, 1 nM 트라메티닙의 첨가 또는 비첨가 하의 5-포인트 용량 반응에 있어서의 종양원성 NRASQ61K 돌연변이체를 발현하는 A375 세포의 웨스턴 블롯이다. BRAF V600E에 추가로 NRASQ61K를 발현하는 것은 환자에서 관찰된 저항성 메카니즘을 나타내고, MAPK 신호전달의 억제를 극복하기 위한 더 큰 도전과제를 제시한다. 분해제인 화합물 157 단독은 ERK 인산화에 의해 판독된 바와 같이, MAPK 신호전달을 억제할 수 있다. MEK 억제제인 트라메티닙과의 조합에서, ERK 활성화는 10 nM의 화합물 157에 의해 완전히 억제되었다. 비교하면, BRAF V600E 억제제인 엔코라페닙은 트라메티닙과 조합되거나 또는 조합되지 않거나 ERK 인산화 수준을 유의하게 억제할 수 없다. 이 데이터는 화합물 157이 BRAF V600E 저항성 환경에서 MAPK 신호전달을 제어하는 데 유리할 수 있다는 것을 보여준다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 21은 종양원성 NRASQ61K 돌연변이를 발현하는 A375 세포의 시간 경과에 따른 세포 성장을 도시하는 선 그래프이다. DMSO 단독으로 처리된 세포는 정상 배가 시간을 나타낸다. BRAF V600E 분해제인 화합물 157로 처리된 경우에, 세포 성장은 억제되고, 세포는 50% 초과의 전면생장률을 달성할 수 없다. 세레블론에 대한 결합이 최소이거나 없는 매치 쌍 화합물 157NMe로 처리된 경우에, 세포 성장은 억제되지 않는다. 엔코라페닙은 저항성 모델 세포주에서 세포 성장을 억제하지 않는다. 실험 절차는 실시예 235에 제공된다.
도 22는 A375 NRASQ61K 돌연변이 흑색종 세포주 이종이식편을 보유하는 암컷 BALBc/누드 마우스에서의 종양에 대한 다양한 농도의 화합물의 효과를 입증하는 선 그래프이다. 마우스에게 비히클, 트라메티닙 (MEK 억제제 (MEKi) 0.1 mg/kg 1일 2회 (BID)), 엔코라페닙 (35 mg/kg 1일 1회 (QD) + MEKi), 화합물 157 (1, 3, 10 또는 30 mg/kg BID) 또는 동일한 용량의 화합물 157과 0.1 mg/kg BID의 MEKi의 조합을 경구 위관영양에 의해 투여하였다. 화합물 157은 10 및 30 mg/kg BID 용량에서 단일 작용제로서 효과적이었고, 0.1 mg/kg BID의 MEKi와 조합되어 투여된 경우에 퇴행을 유발하였다. 효능 데이터는 평균 종양 부피 ± SEM으로 표현되어 있다. 어떠한 군도 연구 전반에 걸쳐 평균 4.5% 초과의 체중 감소를 나타내지 않았기 때문에 모든 용량은 잘 허용되었다. 실험 절차는 실시예 241에 제공된다.
도 23은 BRAF V600E 이외의 화합물 157의 분해 잠재력을 입증하는 웨스턴 블롯이다. 렌티바이러스를 사용하여 HEK-293T (ATCC, CRL-3216) 세포가 BRAF V600E, WT, p61 스플라이스 변이체, 부류 II 돌연변이 G469A 및 부류 III 돌연변이 G466V를 발현하도록 조작하였다. 화합물 157은 WT BRAF를 제외한 모든 돌연변이체를 분해할 수 있다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 24는 부류 III 돌연변이 G466V를 내인성으로 발현하는 세포주 H1666 (ATCC, CRL-5885)의 웨스턴 블롯이다. H1666 세포를 화합물 157로 24시간 동안 처리하였다. H1666 세포를 화합물 157로 처리하는 것은 세포가 돌연변이에 대해 이형접합인 것에 기인하여 존재할 수 있는 임의의 WT BRAF를 포함한 BRAF 신호의 53% 감소를 유도하였으며, 화합물 157이 WT BRAF를 분해하지는 않는다. 인산화된 ERK 신호의 감소가 또한 존재하였으며, 이는 MAPK 경로의 억제를 나타낸다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 25는 부류 III BRAF 돌연변이 G466V를 내인성으로 발현하는 H1666 세포에서의 시간 경과에 따른 세포 성장을 입증하는 선 그래프이다. DMSO 단독으로 처리된 세포는 정상 배가 시간을 나타낸다. BRAF 분해제인 화합물 157로 처리된 경우에, 세포 성장은 억제되고, 세포는 7일의 과정에 걸쳐 30% 초과의 전면생장률을 달성할 수 없다. 세레블론에 대한 결합이 최소이거나 없는 매치 쌍 화합물 157NMe로 처리된 경우에, 세포 성장은 유의하게 억제되지 않는다. 추가적으로, 엔코라페닙은 BRAF 부류 III 돌연변이 세포주에서 세포 성장을 억제하지 않는다. 세포 성장에 대한 가장 유의한 파괴는 화합물 157과 1 nM 용량의 MEK 억제제인 트라메티닙과의 조합이었다. 세포는 확장하지 못하였고, 증식은 심하게 손상되었다. 실험 절차는 실시예 242에 제공된다.
화합물 157은 미국 가출원 63/277,973 및 유럽 특허 출원 21178150.5에서 화합물 14/실시예 14로서 지칭되었다.
도 1은 화합물 157로의 처리 24시간 후 HiBiT-BRAFV600E 단백질 수준을 보여주는 선 그래프이다. 화합물 157은 DC50이 ~100nM이고 분해 Emax가 ~25%이고 포스포-ERK (pERK)가 동반 상실되며, 이는 IC50 < 5 nM로 MAPK 경로의 차단을 입증한다. y-축은 %로 측정된 잔류 단백질이다. x-축은 나노몰로 측정된 화합물 157의 농도이다. 실험 절차는 실시예 229 및 실시예 230에 제공된다.
도 2는 다양한 농도의 화합물 157로의 처리 후 정상 GSPT1 단백질 수준을 보여주는 선 그래프이다. y-축은 %로 측정된 잔류 단백질이다. x-축은 나노몰로 측정된 화합물 157의 농도이다. 실험 절차는 실시예 229에 제공된다.
도 3은 다양한 농도의 화합물 157로의 처리 후 정상 SALL4 단백질 수준을 보여주는 선 그래프이다. y-축은 %로 측정된 잔류 단백질이다. x-축은 나노몰로 측정된 화합물 157의 농도이다. 실험 절차는 실시예 229에 제공된다.
도 4는 프로테아솜 의존성 분자의 기능과 관련된 억제제 또는 경쟁자에 의해 챌린지되는 동안 분해제 화합물 157에 반응한 A375 세포에서의 BRAF V600E 수준을 도시하는 웨스턴 블롯이다. (-/+)는 샘플 중 화합물 157의 존재를 나타낸다. DMSO 단독으로 처리된 경우에 BRAF V600E는 정상 수준이지만, 24시간 동안 화합물 157에 노출된 후에 BRAF V600E 수준은 유의하게 감소하였다. 이러한 분해는 분해제가 BRAF V600E에 결합하는 것을 방지하는 과량의 표적화 리간드의 첨가에 의해 차단된다. 분해는 또한 세포가 세레블론 상의 결합 부위에 특이적인 화합물 (IMID)로 전처리되는 경우에 차단된다. 종합하면, 이는 분해제가 BRAF V600E를 분해하기 위해서는 BRAF 및 CRBN 둘 다에 동시에 결합해야 한다는 것을 시사한다. 추가적으로, 세포가 화합물 157과 조합된 네딜화 억제제 MLN4962 또는 프로테아솜 억제제 보르테조밉으로 처리된 경우에, 분해는 차단되며, 이는 화합물 157에 의한 이러한 BRAF V600E 상실이 네딜화 및 프로테아솜 시스템에 의존성이라는 것을 나타낸다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 5는 다양한 농도의 화합물 157 또는 화합물 157NMe와 BRAF V600E 및 세레블론의 3원 복합체 형성을 보여주는 선 그래프이다. y-축은 3원 복합체의 분율이다. x-축은 나노몰로 측정된 화합물 157의 농도이다. 화합물 157NMe는 세레블론과의 상호작용이 최소이거나 전혀 없으므로 기능적 분해제가 아닌, 화합물 157의 유사체이다. 실험 절차는 실시예 232에 제공된다.
도 6은 여러 단백질에 결합하는 10 nM 화합물 157의 상대량을 보여주는 트리스팟(TREEspot)™ 상호작용 맵이다. 화합물 157에 대한 결합을 보여주는 키나제는 흑색 원형으로 강조되어 있다. 원형의 크기는 % 억제를 반영한다. 실험 절차는 실시예 233에 제공된다.
도 7은 여러 단백질에 결합하는 1,000 nM 화합물 157의 상대량을 보여주는 트리스팟™ 상호작용 맵이다. 화합물 157에 대한 결합을 보여주는 키나제는 흑색 원형으로 강조되어 있다. 원형의 크기는 % 억제를 반영한다. 실험 절차는 실시예 233에 제공된다.
도 8은 300nM 화합물 157로 24시간 동안 처리된 A375 또는 JURKAT 세포의 멀티플렉스화 정량적 프로테오믹스에 의해 분석된 세포 용해물로부터의 데이터를 보여주는 산점도이다 (실험 방법에 대해서는 하기 참조). 각각의 실험에 대해, 화합물 157 처리된 샘플 (생물학적 이중물)을 300nM 다브라페닙 (A375 세포) 또는 DMSO (JURKAT 세포)로 처리된 대조군 샘플과 비교함으로써 데이터를 분석하였으며, 생성된 산점도에 상대 존재비의 배수 변화가 도시되어 있다. Log2 배수 변화는 x 축에 제시되고, 음성 Log10 조정된 p-값 (벤자미니-호크베르크 보정을 통해 조정된, 화합물 157 대 DMSO 대조군의 T-검정)은 y 축에 제시된다. 수평 파선은 통계적 유의성을 표시하고 (p-값 ≤ 0.001), 수직선은 ≥ 2의 배수 변화 컷-오프를 표시한다. 실험 절차는 실시예 234에 제공된다.
도 9는 분해제 화합물 157 및 널 분해제 화합물 157NMe에 반응한 A375 세포에서의 BRAF V600E 및 pERK 수준을 도시하는 웨스턴 블롯이다. BRAF V600E 수준은 1 μM에서 후크에 도달할 때까지 화합물 157에 의해 용량 의존성 방식으로 감소하며, 이는 이중기능적 분해제의 특징과 같다. MAPK 신호전달은, ERK 인산화에 의해 판독된 바와 같이, 화합물 157로의 처리 후에 유의하게 하락하였다. 화합물 157NMe는 세레블론에 대해 최소 결합을 가지므로 기능적 분해제가 아닌, 화합물 157의 유사체이다. 예상된 바와 같이, BRAF V600E 수준은 변화되지 않은 채로 남아있고, ERK 인산화의 상실은 기능적 분해제만큼 현저하지 않다. 널 분해제에서 관찰된 ERK 인산화에 대한 영향은 이중기능적 분해제의 리간드 표적화 측면의 억제 기여로 인한 것이다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 10은 7일의 과정에 걸쳐 생존 세포 영상화에 의해 화합물 157 및 화합물 157NMe와 함께 배양된 A375 세포의 세포 전면생장률을 도시하는 선 그래프이다. DMSO 처리된 세포는 예상된 배가 시간으로 신속하게 성장하고, 제5일 정도에 100% 전면생장률에 도달하였다. BRAF 분해제 화합물 157로 처리 시에, 세포는 7일 실험의 종료까지 성장이 현저히 부진하였고 20% 전면생장률에 거의 도달하지 않았다. 세레블론 널 화합물 157NMe로 처리된 세포는 초기에 정상 속도로 성장하지만, 대략 70% 전면생장률로 성장이 억제된다. 두 화합물 사이의 이동은 BRAF V600E 분해가 동등한 BRAF V600E 억제 단독과 비교하여 세포 성장의 억제에 미치는 기여를 입증한다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 11은 제5일에 생존 세포 영상화에 의해 화합물 157 및 화합물 157NMe와 함께 배양된 A375 세포의 세포 전면생장률을 도시하는 선 그래프이다. 세포 성장에 있어서 BRAF V600E 분해가 동등한 BRAF V600E 억제 단독과 비교하여 세포 성장의 억제에 미치는 기여는 고정된 시점 (제5일)에서 농도에 따른 세포 성장을 관찰하는 것으로 추가로 입증되며, 분해제는 그의 세레블론 널 대응물로부터 우측으로 이동한다는 것을 주목한다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 12는 분해제 화합물 157에 반응한 내인성 WT BRAF를 갖는 HCT-116 세포에서의 WT BRAF 및 pERK 수준을 도시하는 웨스턴 블롯이다. 예상된 바와 같이, WT BRAF 수준 및 ERK의 인산화에 대한 영향은 최소이다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 13은 화합물 157 또는 범 RAF 억제제로의 처리 후 HCT-116 WT BRAF 세포를 예시하는 시간 경과에 따른 성장 실험이다. 이러한 세포주는 RAF 신호전달에 의존성인 것으로 문헌에 기재되었고, 세포 성장은 범 RAF 억제제로의 처리에 의해 유의하게 방해된다. 화합물 157은 처리된 세포에 대한 곡선이 DMSO 처리된 세포와 직접 중첩되는 바와 같이 세포 성장에 대해 영향을 미치지 않으며, 이는 화합물 157의 표현형 결과가 돌연변이 BRAF에 특이적이라는 가설을 지지한다. 실험 절차는 실시예 236에 제공된다.
도 14는 A375 종양을 보유하는 암컷 BALB/c 누드 마우스의 치료에서의 화합물 157 및 엔코라페닙의 생체내 효능을 보여주는 선 그래프이다. 마우스를 나타낸 바와 같이 1일 1회 (QD), 1일 2회 (BID) 또는 1일 3회 (TID) 경구 위관영양 (PO)에 의해 비히클 대조군, 엔코라페닙 (35mg/kg) 또는 화합물 157 (0.1, 0.3, 1, 2, 3 또는 10mg/kg)로 처리하였다. 효능 데이터는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 파선은 무투여 진행을 나타낸다. x-축은 일수 단위로 측정된 시간이고, y-축은 mm3 단위의 A375 종양 부피 측정치이다. 실험 절차는 실시예 238에 제공된다.
도 15는 A375 종양을 보유하는 암컷 BALB/c 누드 마우스의 치료에서의 화합물 157 및 엔코라페닙의 체중 변화를 보여주는 선 그래프이다. 마우스를 나타낸 바와 같이 1일 1회 (QD), 1일 2회 (BID) 또는 1일 3회 (TID) 경구 위관영양 (PO)에 의해 비히클 대조군, 엔코라페닙 (35mg/kg) 또는 화합물 157 (0.1, 0.3, 1, 2, 3 또는 10mg/kg)로 처리하였다. 효능 데이터는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 파선은 무투여 진행을 나타낸다. x-축은 일수 단위로 측정된 시간이고, y-축은 퍼센트 단위의 체중 변화이다. 실험 절차는 실시예 238에 제공된다.
도 16은 0.3, 1, 3 또는 10mg/kg의 단일 경구 (PO) 용량 후 혈장 중 화합물 157의 생체내 약동학적 활성을 보여주는 선 그래프이다. 혈장 및 종양을 나타낸 시점에 수거하고, 정량 분석을 위해 LC/MS/MS 시스템 내로 주입하였다. 혈장 중 화합물 157 농도 (ng/ml) 및 종양 중 화합물 157 농도 (ng/g)는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 실험 절차는 실시예 239에 제공된다.
도 17은 0.3, 1, 3 또는 10mg/kg의 단일 경구 (PO) 용량 후 A375 이종이식 종양에서의 화합물 157의 생체내 약동학적 활성을 보여주는 선 그래프이다. 혈장 및 종양을 나타낸 시점에 수거하고, 정량 분석을 위해 LC/MS/MS 시스템 내로 주입하였다. 혈장 중 화합물 157 농도 (ng/ml) 및 종양 중 화합물 157 농도 (ng/g)는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 실험 절차는 실시예 239에 제공된다.
도 18은 A375 이종이식 종양에서의 B-RAF의 상대 단백질 발현을 보여주는 선 그래프이다. BALB/c 누드 마우스의 우측 측복부에 A375 종양 세포를 주사하였다. 화합물 157을 0.3, 1, 3 또는 10mg/kg으로 단일 경구 (PO) 용량으로서 투여하고, A375 종양을 나타낸 시점에 수거하고, B-RAF의 단백질 발현을 웨스턴 블롯에 의해 측정하였다. x-축은 단일 용량 투여-후 시간으로 측정된 시간이고, y-축은 비히클-처리된 종양 대비 단백질의 퍼센트이다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 실험 절차는 실시예 239에 제공된다.
도 19는 A375 이종이식 종양에서의 포스포-ERK의 상대 단백질 발현을 보여주는 선 그래프이다. BALB/c 누드 마우스의 우측 측복부에 A375 종양 세포를 주사하였다. 화합물 157을 0.3, 1, 3 또는 10mg/kg으로 단일 경구 (PO) 용량으로서 투여하고, A375 종양을 나타낸 시점에 수거하고, pERK의 단백질 발현을 웨스턴 블롯에 의해 측정하였다. x-축은 단일 용량 투여-후 시간으로 측정된 시간이고, y-축은 비히클-처리된 종양 대비 단백질의 퍼센트이다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 실험 절차는 실시예 239에 제공된다.
도 20은 24시간 동안 화합물 157 또는 엔코라페닙으로 처리된, 1 nM 트라메티닙의 첨가 또는 비첨가 하의 5-포인트 용량 반응에 있어서의 종양원성 NRASQ61K 돌연변이체를 발현하는 A375 세포의 웨스턴 블롯이다. BRAF V600E에 추가로 NRASQ61K를 발현하는 것은 환자에서 관찰된 저항성 메카니즘을 나타내고, MAPK 신호전달의 억제를 극복하기 위한 더 큰 도전과제를 제시한다. 분해제인 화합물 157 단독은 ERK 인산화에 의해 판독된 바와 같이, MAPK 신호전달을 억제할 수 있다. MEK 억제제인 트라메티닙과의 조합에서, ERK 활성화는 10 nM의 화합물 157에 의해 완전히 억제되었다. 비교하면, BRAF V600E 억제제인 엔코라페닙은 트라메티닙과 조합되거나 또는 조합되지 않거나 ERK 인산화 수준을 유의하게 억제할 수 없다. 이 데이터는 화합물 157이 BRAF V600E 저항성 환경에서 MAPK 신호전달을 제어하는 데 유리할 수 있다는 것을 보여준다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 21은 종양원성 NRASQ61K 돌연변이를 발현하는 A375 세포의 시간 경과에 따른 세포 성장을 도시하는 선 그래프이다. DMSO 단독으로 처리된 세포는 정상 배가 시간을 나타낸다. BRAF V600E 분해제인 화합물 157로 처리된 경우에, 세포 성장은 억제되고, 세포는 50% 초과의 전면생장률을 달성할 수 없다. 세레블론에 대한 결합이 최소이거나 없는 매치 쌍 화합물 157NMe로 처리된 경우에, 세포 성장은 억제되지 않는다. 엔코라페닙은 저항성 모델 세포주에서 세포 성장을 억제하지 않는다. 실험 절차는 실시예 235에 제공된다.
도 22는 A375 NRASQ61K 돌연변이 흑색종 세포주 이종이식편을 보유하는 암컷 BALBc/누드 마우스에서의 종양에 대한 다양한 농도의 화합물의 효과를 입증하는 선 그래프이다. 마우스에게 비히클, 트라메티닙 (MEK 억제제 (MEKi) 0.1 mg/kg 1일 2회 (BID)), 엔코라페닙 (35 mg/kg 1일 1회 (QD) + MEKi), 화합물 157 (1, 3, 10 또는 30 mg/kg BID) 또는 동일한 용량의 화합물 157과 0.1 mg/kg BID의 MEKi의 조합을 경구 위관영양에 의해 투여하였다. 화합물 157은 10 및 30 mg/kg BID 용량에서 단일 작용제로서 효과적이었고, 0.1 mg/kg BID의 MEKi와 조합되어 투여된 경우에 퇴행을 유발하였다. 효능 데이터는 평균 종양 부피 ± SEM으로 표현되어 있다. 어떠한 군도 연구 전반에 걸쳐 평균 4.5% 초과의 체중 감소를 나타내지 않았기 때문에 모든 용량은 잘 허용되었다. 실험 절차는 실시예 241에 제공된다.
도 23은 BRAF V600E 이외의 화합물 157의 분해 잠재력을 입증하는 웨스턴 블롯이다. 렌티바이러스를 사용하여 HEK-293T (ATCC, CRL-3216) 세포가 BRAF V600E, WT, p61 스플라이스 변이체, 부류 II 돌연변이 G469A 및 부류 III 돌연변이 G466V를 발현하도록 조작하였다. 화합물 157은 WT BRAF를 제외한 모든 돌연변이체를 분해할 수 있다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 24는 부류 III 돌연변이 G466V를 내인성으로 발현하는 세포주 H1666 (ATCC, CRL-5885)의 웨스턴 블롯이다. H1666 세포를 화합물 157로 24시간 동안 처리하였다. H1666 세포를 화합물 157로 처리하는 것은 세포가 돌연변이에 대해 이형접합인 것에 기인하여 존재할 수 있는 임의의 WT BRAF를 포함한 BRAF 신호의 53% 감소를 유도하였으며, 화합물 157이 WT BRAF를 분해하지는 않는다. 인산화된 ERK 신호의 감소가 또한 존재하였으며, 이는 MAPK 경로의 억제를 나타낸다. 실험 절차는 실시예 231에 제공된다.
도 25는 부류 III BRAF 돌연변이 G466V를 내인성으로 발현하는 H1666 세포에서의 시간 경과에 따른 세포 성장을 입증하는 선 그래프이다. DMSO 단독으로 처리된 세포는 정상 배가 시간을 나타낸다. BRAF 분해제인 화합물 157로 처리된 경우에, 세포 성장은 억제되고, 세포는 7일의 과정에 걸쳐 30% 초과의 전면생장률을 달성할 수 없다. 세레블론에 대한 결합이 최소이거나 없는 매치 쌍 화합물 157NMe로 처리된 경우에, 세포 성장은 유의하게 억제되지 않는다. 추가적으로, 엔코라페닙은 BRAF 부류 III 돌연변이 세포주에서 세포 성장을 억제하지 않는다. 세포 성장에 대한 가장 유의한 파괴는 화합물 157과 1 nM 용량의 MEK 억제제인 트라메티닙과의 조합이었다. 세포는 확장하지 못하였고, 증식은 심하게 손상되었다. 실험 절차는 실시예 242에 제공된다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다:
여기서 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 I-A의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 A2는 -O-이고, n은 1이고, R4는 시아노이고, R5는 플루오로이고, 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 I-B의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 A2는 -NH-이고, n은 1이고, R4는 시아노이고, R5는 플루오로이고, 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 I-C의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 A2는 -O-이고, A3은 결합이고, A는 결합이고, n은 0이고, A4는 결합이고, R4는 시아노이고, R5는 플루오로이고, 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 I-D의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 A2는 -(C=O)-이고, A3은 결합이고, A는 결합이고, 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
본 발명의 화합물은 암의 치유적 및/또는 예방적 치료에 유용하다.
본 발명은 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 상기 언급된 화합물의 제조 방법, 그를 함유하는 의약 및 그의 제조 방법, 뿐만 아니라 암의 치유적 및/또는 예방적 치료에서의 상기 언급된 화합물의 용도를 제공한다.
용어
본 설명에 사용된 일반적 용어의 하기 정의는 해당 용어가 단독으로 나타나는지 또는 다른 용어와 조합되어 나타나는지 여부에 관계없이 적용된다.
달리 언급되지 않는 한, 명세서 및 청구범위를 포함한 본 출원에 사용된 하기 용어는 하기 주어진 정의를 갖는다. 명세서 및 첨부된 청구범위에 사용된 단수 형태는 문맥이 달리 명확하게 지시하지 않는 한 복수 지시대상을 포함한다는 것을 주목해야 한다.
용어 "알킬"은 단독으로 또는 조합되어, 1 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 알킬 기, 특히 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 알킬 기, 보다 특히 1 내지 4개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 알킬 기를 의미한다. 직쇄 및 분지쇄 C1-C8 알킬 기의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, tert.-부틸, 이성질체 펜틸, 이성질체 헥실, 이성질체 헵틸 및 이성질체 옥틸, 특히 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸이다. 직쇄 및 분지쇄 C1-C6 알킬의 예는 메틸, 에틸, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, tert.-부틸, 펜틸 및 헥실이다. 메틸 및 에틸은 "알킬"의 특정한 예이다.
용어 "시아노"는 단독으로 또는 다른 기와 조합되어, 기 -C≡N을 나타낸다.
용어 "할로겐" 또는 "할로"는 플루오린, 염소, 브로민 또는 아이오딘, 특히 플루오린, 염소 또는 브로민, 보다 특히 플루오린을 의미한다. 용어 "할로"는 또 다른 기와 조합되어, 적어도 1개의 할로겐, 특히 1 내지 5개의 할로겐, 특히 1 내지 4개의 할로겐, 즉 1, 2, 3 또는 4개의 할로겐으로 치환된 상기 기의 치환을 나타낸다.
용어 "할로알킬"은 단독으로 또는 다른 기와 조합되어, 알킬 기의 수소 원자 중 적어도 1개가 동일하거나 상이한 할로겐 원자에 의해 대체된 알킬 기를 나타낸다. 할로알킬의 예는 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 플루오로에틸, 디플루오로에틸 및 트리플루오로에틸을 포함한다. 특정한 할로알킬 기는 플루오로에틸 및 디플루오로에틸을 포함한다.
용어 "히드록실" 및 "히드록시"는 단독으로 또는 조합되어, -OH 기를 의미한다.
용어 "아미노"는 단독으로 또는 조합되어, 1급 아미노 기 (-NH2), 2급 아미노 기 (-NH-) 또는 3급 아미노 기 (-N-)를 의미한다.
용어 "카르보닐"은 단독으로 또는 조합되어, -(C=O)- 기를 의미한다.
용어 "알킬아미노"는 -NH- 기에 연결된 알킬 기이다. 용어 "디알킬아미노"는 -N- 원자에 연결된 2개의 알킬 기를 나타낸다.
용어 "알콕시" 또는 "알킬옥시"는 단독으로 또는 조합되어, 용어 "알킬"이 상기 주어진 의미를 갖는 것인 화학식 알킬-O-의 기, 예컨대 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, 이소부톡시, sec-부톡시 및 tert.-부톡시를 의미한다. "알콕시"의 특정한 예는 메톡시이다.
용어 "시클로알킬"은 단독으로 또는 다른 기와 조합되어, 3 내지 8개의 고리 탄소 원자, 특히 3 내지 6개의 고리 탄소 원자의 1가 포화 모노시클릭 또는 비시클릭 탄화수소 기를 나타낸다. 비시클릭은 1 또는 2개의 탄소 원자를 공통으로 갖는 2개의 포화 카르보사이클로 이루어진 고리계를 의미한다. 모노시클릭 "시클로알킬"의 예는 시클로프로필, 시클로부타닐, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸 및 시클로옥틸이다. 비시클릭 "시클로알킬"의 예는 스피로[3.3]헵타닐이다. 모노시클릭 "시클로알킬"의 보다 특정한 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실이다.
용어 "헤테로시클로알킬"은 단독으로 또는 다른 기와 조합되어, N, O 및 S로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 고리 헤테로원자를 포함하고 나머지 고리 원자는 옥소로 임의로 치환되는 탄소인, 4 내지 10개의 고리 원자의 1가 포화 또는 부분 불포화 모노- 또는 비시클릭 고리계를 나타낸다. 비시클릭은 1 또는 2개의 고리 원자를 공통으로 갖는 2개의 사이클로 이루어진 것을 의미한다. 헤테로시클로알킬은 바람직하게는 N, O 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 고리 헤테로원자를 포함하는, 4 내지 7개의 고리 원자의 1가 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 고리계 (4- 내지 7-원 헤테로시클로알킬)이다. 모노시클릭 포화 헤테로시클로알킬의 예는 4,5-디히드로-옥사졸릴, 옥세타닐, 아제티디닐, 피롤리디닐, 2-옥소-피롤리딘-4-일, 3-옥소-모르폴린-6-일, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로티오페닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 티아졸리디닐, 피페리디닐, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로티오피라닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 1,1-디옥소-티오모르폴린-4-일, 아제파닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 디아제파닐, 호모피페라지닐 및 옥사제파닐을 포함한다. 비시클릭 포화 헤테로시클로알킬의 예는 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 옥사비시클로[2.2.1]헵타닐, 옥사스피로[3.3]헵타닐, 8-아자-비시클로[3.2.1]옥틸, 퀴누클리디닐, 8-옥사-3-아자-비시클로[3.2.1]옥틸, 7-아자스피로[3.5]노닐, 9-아자-비시클로[3.3.1]노닐, 3-옥사-9-아자-비시클로[3.3.1]노닐, 3-티아-9-아자-비시클로[3.3.1]노닐, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 8-아자스피로[4.5]데실 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실 및 3-아자스피로[5.5]운데실을 포함한다. 부분 불포화 헤테로시클로알킬의 예는 디히드로푸릴, 이미다졸리닐, 디히드로-옥사졸릴, 테트라히드로-피리디닐 및 디히드로피라닐을 포함한다. "헤테로시클로알킬"의 특정한 예는 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페라지닐, 피페리디닐 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실이다.
용어 "술포닐"은 단독으로 또는 다른 기와 조합되어, 기 -SO2-이다.
용어 "제약상 허용되는"은 일반적으로 안전하고, 비-독성이고, 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않은 것이 아니고, 수의학적 용도뿐만 아니라 인간 제약 용도에 허용되는 제약 조성물을 제조하는 데 유용한 물질의 속성을 나타낸다.
용어 "제약상 허용되는 염"은 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 염을 지칭한다. 무기 및 유기 산과의 적합한 염의 예는 아세트산, 시트르산, 포름산, 푸마르산, 염산, 락트산, 말레산, 말산, 메탄-술폰산, 질산, 인산, p-톨루엔 술폰산, 숙신산, 황산 (황산), 타르타르산, 트리플루오로아세트산 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 특정한 산은 포름산, 트리플루오로아세트산 및 염산이다.
용어 "제약상 허용되는 보조 물질"은 제제의 다른 성분과 상용성인 담체 및 보조 물질, 예컨대 희석제 또는 부형제를 지칭한다.
용어 "제약 조성물"은 명시된 성분을 미리 결정된 양 또는 비율로 포함하는 생성물, 뿐만 아니라 명시된 성분을 명시된 양으로 조합함으로써 직접적으로 또는 간접적으로 생성되는 임의의 생성물을 포괄한다. 특히, 이는 1종 이상의 활성 성분 및 불활성 성분을 포함하는 임의적인 담체를 포함하는 생성물, 뿐만 아니라 성분 중 임의의 2종 이상의 조합, 복합체화 또는 응집으로부터 또는 성분 중 1종 이상의 해리로부터 또는 성분 중 1종 이상의 다른 유형의 반응 또는 상호작용으로부터 직접적으로 또는 간접적으로 생성되는 임의의 생성물을 포괄한다.
"치료 유효량"은 질환 상태를 치료하기 위해 대상체에게 투여되는 경우에 질환 상태에 대한 이러한 치료에 영향을 미치기에 충분한 화합물의 양을 의미한다. "치료 유효량"은 화합물, 치료되는 질환 상태, 치료되는 질환의 중증도, 대상체의 연령 및 상대적 건강, 투여 경로 및 형태, 담당 의학 또는 수의학 진료의의 판단 및 다른 인자에 따라 달라질 것이다.
가변기를 언급할 때 용어 "본원에 정의된 바와 같은" 및 "본원에 기재된 바와 같은"은 가변기의 광범위한 정의뿐만 아니라 존재하는 경우 특히, 보다 특히 및 가장 특히인 정의를 참조로 포함한다.
화학 반응을 언급할 때 용어 "처리하는", "접촉시키는" 및 "반응시키는"은 적절한 조건 하에 2종 이상의 시약을 첨가하거나 혼합하여 나타낸 생성물 및/또는 목적 생성물을 생성하는 것을 의미한다. 나타낸 생성물 및/또는 목적 생성물을 생성하는 반응은 반드시 초기에 첨가된 2종의 시약의 조합으로부터 직접 생성될 필요는 없으며, 즉 혼합물 중에 생성되는 1종 이상의 중간체가 존재할 수 있고, 이는 궁극적으로 나타낸 생성물 및/또는 목적 생성물의 형성으로 이어진다는 것이 인지되어야 한다.
용어 "제약상 허용되는 부형제"는 치료 활성을 갖지 않고 비-독성인 임의의 성분, 예컨대 제약 제품의 제제화에 사용되는 붕해제, 결합제, 충전제, 용매, 완충제, 등장화제, 안정화제, 항산화제, 계면활성제 또는 윤활제를 나타낸다.
용어 "억제제"는 특정한 리간드의 특정한 수용체에의 결합과 경쟁하거나, 그를 감소시키거나 방지하거나 또는 특정한 단백질의 기능을 감소시키거나 방지하는 화합물을 나타낸다.
출발 물질 또는 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 중 하나가 안정하지 않거나 또는 1개 이상의 반응 단계의 반응 조건 하에 반응성인 1개 이상의 관능기를 함유하는 경우에, 적절한 보호기 (예를 들어, 문헌 ["Protective Groups in Organic Chemistry" by T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd Ed., 1999, Wiley, New York]에 기재된 바와 같음)가 관련 기술분야에 널리 공지된 방법을 적용하여 결정적 단계 전에 도입될 수 있다. 이러한 보호기는 문헌에 기재된 표준 방법을 사용하여 합성의 후기 단계에서 제거될 수 있다. 보호기의 예는 tert-부톡시카르보닐 (Boc), 9-플루오레닐메틸 카르바메이트 (Fmoc), 2-트리메틸실릴에틸 카르바메이트 (Teoc), 카르보벤질옥시 (Cbz) 및 p-메톡시벤질옥시카르보닐 (Moz)이다.
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 및 화학식 VI의 화합물은 여러 비대칭 중심을 함유할 수 있고, 광학적으로 순수한 거울상이성질체, 거울상이성질체의 혼합물, 예컨대, 예를 들어 라세미체, 부분입체이성질체의 혼합물, 부분입체이성질체 라세미체 또는 부분입체이성질체 라세미체의 혼합물의 형태로 존재할 수 있다.
용어 "비대칭 탄소 원자"는 4개의 상이한 치환기를 갖는 탄소 원자를 의미한다. 칸-인골드-프렐로그 규정에 따르면, 비대칭 탄소 원자는 "R" 또는 "S" 배위일 수 있다.
키랄 탄소가 화학 구조에 존재할 때마다, 그 키랄 탄소와 연관된 모든 입체이성질체는 순수한 입체이성질체뿐만 아니라 그의 혼합물로서 구조에 포괄되는 것으로 의도된다.
본 발명의 화합물은 호변이성질체, 즉 특히 용액 중에서 본원에 도시된 바와 같은 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물과 상호전환하는 구조 이성질체로서 존재할 수 있다. 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물은 그의 모든 기존 호변이성질체 형태를 포괄하는 것으로 의도된다.
본 발명의 화합물은 용매화물로서 존재할 수 있다. 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물은 그의 모든 기존 용매화물을 포괄하는 것으로 의도된다.
본 발명은 또한 상기 언급된 화합물의 제약 조성물, 사용 방법 및 제조 방법을 제공한다.
본 발명의 화합물은 1개 이상의 비대칭 중심을 함유할 수 있고, 따라서 라세미체, 거울상이성질체의 혼합물, 단일 거울상이성질체, 부분입체이성질체 혼합물 및 개별 부분입체이성질체로서 발생할 수 있다. 추가의 비대칭 중심이 분자 상의 다양한 치환기의 성질에 따라 존재할 수 있다. 각각의 이러한 비대칭 중심은 독립적으로 2종의 광학 이성질체를 생성할 것이고, 혼합물 중 및 순수한 또는 부분적으로 정제된 화합물로서의 모든 가능한 광학 이성질체 및 부분입체이성질체가 본 발명 내에 포함되는 것으로 의도된다. 본 발명은 이들 화합물의 모든 이러한 이성질체 형태를 포괄하는 것으로 의도된다. 이들 부분입체이성질체의 독립적 합성 또는 그의 크로마토그래피 분리는 본원에 개시된 방법론의 적절한 변형에 의해 관련 기술분야에 공지된 바와 같이 달성될 수 있다. 이들의 절대 입체화학은, 필요한 경우에, 공지된 절대 배위의 비대칭 중심을 함유하는 시약을 사용하여 유도체화된 결정질 생성물 또는 결정질 중간체의 X선 결정학에 의해 결정될 수 있다. 원하는 경우에, 화합물의 라세미 혼합물은 개별 거울상이성질체가 단리되도록 분리될 수 있다. 분리는 관련 기술분야에 널리 공지된 방법, 예컨대 화합물의 라세미 혼합물을 거울상이성질체적으로 순수한 화합물에 커플링시켜 부분입체이성질체 혼합물을 형성하고, 이어서 표준 방법, 예컨대 분별 결정화 또는 크로마토그래피에 의해 개별 부분입체이성질체를 분리함으로써 수행될 수 있다.
광학적으로 순수한 거울상이성질체가 제공되는 실시양태에서, 광학적으로 순수한 거울상이성질체는 화합물이 90 중량% 초과의 목적하는 이성질체, 특히 95 중량% 초과의 목적하는 이성질체 또는 보다 특히 99 중량% 초과의 목적하는 이성질체를 함유한다는 것을 의미하며, 상기 중량%는 화합물의 이성질체(들)의 총 중량을 기준으로 한다. 키랄적으로 순수한 또는 키랄적으로 풍부한 화합물은 키랄적으로 선택적인 합성에 의해 또는 거울상이성질체의 분리에 의해 제조될 수 있다. 거울상이성질체의 분리는 최종 생성물에 대해 또는 대안적으로 적합한 중간체에 대해 수행될 수 있다.
화학식 I 및 화학식 II의 실시양태
특정 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 화학식 II의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 실시양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공된다:
여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
n은 0 또는 1이고;
A4는 결합, -CH2-, -(SO2)-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고; 여기서 C는 할로겐, 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
R7은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R8은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R9는 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A5는 -CH- 또는 -N-이다.
본 발명의 한 실시양태는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공하며, 여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
n은 0 또는 1이고;
A4는 결합, -CH2-, -(SO2)-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
C는 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐, 할로피페리디닐, 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택되고;
R7은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R8은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R9는 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A5는 -CH- 또는 -N-이다.
본 발명의 한 실시양태는 화학식 I의 화합물을 제공하며, 여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 알킬이고;
R2는 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 알킬이거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 할로겐 및 알콕시로부터 선택된다.
본 발명의 한 실시양태는 화학식 I의 화합물을 제공하며, 여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 메틸이고;
R2는 에틸, tert-부틸 및 시클로프로필로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 메틸이거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 플루오로 및 메톡시로부터 선택된다.
본 발명은 추가로 하기를 제공한다:
R1이 메틸인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R2가 에틸, tert-부틸 및 시클로프로필로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A1이 -NR2-인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A1이 -CHR2'-인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R1 및 R2가 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 형성한 헤테로시클로알킬이 피롤리디닐, 피페리디닐, 아제티디닐 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고, 여기서 헤테로시클로알킬이 각각의 경우에 플루오로 및 메톡시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R1 및 R2'가 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 형성한 시클로알킬이 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
각각의 R3이 독립적으로 플루오로 및 메톡시로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R4가 시아노인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R4가 플루오로인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 할로겐인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 플루오로인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A2가 -O- 및 -NH-로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A2가 -O-인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A2가 -NH-인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R6이 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 알콕시 및 디알킬아미노로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R6이 수소, 플루오로, 클로로, 히드록시, 아미노, 메톡시 및 디메틸아미노로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A3이 결합, -CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A3이 결합인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A가 결합 및 피리미디닐로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A가 결합인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A가 피리미디닐인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B가 피페리디닐, 피페라지닐, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B가 피페리딘-4-일, 피페라진-1-일, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B가 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B가 8-아자스피로[4.5]데실인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A4가 결합, -CH2- 및 -(SO2)-CH2-로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A4가 -CH2-인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 아제티디닐, 시클로헥실, 피페라지닐, 디플루오로피페리디닐, 히드록시피페리디닐, 포스페이트피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 아제티디닐, 시클로헥실, 피페라지닐, 디플루오로피페리디닐, 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 아제티딘-1-일, 시클로헥실, 피페라진-1-일, 3,3-디플루오로피페리딘-1-일, 4-히드록시피페리딘-4-일, 피페리딘-1-일 및 피페리딘-4-일로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 히드록시피페리딘-4-일, 피페리딘-1-일 및 피페리딘-4-일로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R7이 알킬인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R7이 메틸인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R8이 수소 및 할로겐으로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R8이 수소 및 플루오로로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R9가 수소 및 할로겐으로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R9가 수소 및 플루오로로부터 선택된 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A5가 -NH-인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A5가 -CH-인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
n이 1인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및
n이 0인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
본 발명은 하기로부터 선택된 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 추가로 제공한다:
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
6-[2-클로로-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[3-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]아제티딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-7-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-7-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3S)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-(디메틸아미노)-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-메톡시-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-히드록시-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로헥산술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시아제티딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]아제티딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-플루오로피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[(4R)-4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[(4S)-4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-8-[2-[1-[5-클로로-3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]메틸술포닐]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-3-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로벤조일]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸; 및
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-프로판-2-일인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸.
본 발명은 하기로부터 선택된 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 추가로 제공한다:
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로헥산술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸; 및
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드.
본 발명은 추가로 하기를 제공한다:
치료 활성 물질로서 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물;
암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도;
암의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 의약의 제조를 위한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도;
암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 암의 치유적 및/또는 예방적 치료 방법;
일부 실시양태에서 BRAF V600X 돌연변이된 종양인 암;
일부 실시양태에서 BRAF V600E/K 돌연변이된 종양인 암;
일부 실시양태에서 표적화 요법 나이브인 암; 및
일부 실시양태에서 흑색종, 결장직장암 및 폐암, 특히 비소세포 폐암으로부터 선택된 암.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하기 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
화학식 I의 추가의 실시양태
1. 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
n은 0 또는 1이고;
A4는 결합, -CH2-, -(SO2)-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고; 여기서 C는 할로겐, 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
R7은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R8은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R9는 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A5는 -CH- 또는 -N-이다.
2. 실시양태 1에 있어서, 하기인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
n은 0 또는 1이고;
A4는 결합, -CH2-, -(SO2)-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
C는 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐, 할로피페리디닐, 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택되고;
R7은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R8은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R9는 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A5는 -CH- 또는 -N-이다.
3. 실시양태 1 또는 2에 있어서, 하기인 화합물:
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 알킬이고;
R2는 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 알킬이거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 할로겐 및 알콕시로부터 선택된다.
4. 실시양태 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 하기인 화합물:
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 메틸이고;
R2는 에틸, tert-부틸 및 시클로프로필로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 메틸이거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 플루오로 및 메톡시로부터 선택된다.
5. 실시양태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, R1이 메틸인 화합물.
6. 실시양태 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, R2가 에틸, tert-부틸 및 시클로프로필로부터 선택된 것인 화합물.
7. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, A1이 -NR2-인 화합물.
8. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, A1이 -CHR2'-인 화합물.
9. 실시양태 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, R1 및 R2가 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 형성한 헤테로시클로알킬이 피롤리디닐, 피페리디닐, 아제티디닐 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고, 여기서 헤테로시클로알킬이 각각의 경우에 플루오로 및 메톡시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 것인 화합물.
10. 실시양태 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, R1 및 R2'가 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 형성한 시클로알킬이 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실로부터 선택된 것인 화합물.
11. 실시양태 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R3이 독립적으로 플루오로 및 메톡시로부터 선택된 것인 화합물.
12. 실시양태 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, R4가 시아노인 화합물.
13. 실시양태 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, R5가 할로겐인 화합물.
14. 실시양태 1 내지 13 중 어느 하나에 있어서, R5가 플루오로인 화합물.
15. 실시양태 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, A2가 -O- 및 -NH-로부터 선택된 것인 화합물.
16. 실시양태 1 내지 15 중 어느 하나에 있어서, A2가 -O-인 화합물.
17. 실시양태 1 내지 16 중 어느 하나에 있어서, R6이 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 알콕시 및 디알킬아미노로부터 선택된 것인 화합물.
18. 실시양태 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, R6이 수소, 플루오로, 클로로, 히드록시, 아미노, 메톡시 및 디메틸아미노로부터 선택된 것인 화합물.
19. 실시양태 1 내지 18 중 어느 하나에 있어서, A3이 결합, -CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-로부터 선택된 것인 화합물.
20. 실시양태 1 내지 19 중 어느 하나에 있어서, A3이 결합인 화합물.
21. 실시양태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, A가 결합 및 피리미디닐로부터 선택된 것인 화합물.
22. 실시양태 1 내지 21 중 어느 하나에 있어서, A가 결합인 화합물.
23. 실시양태 1 내지 22 중 어느 하나에 있어서, B가 피페리디닐, 피페라지닐, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화합물.
24. 실시양태 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, B가 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화합물.
25. 실시양태 1 내지 24 중 어느 하나에 있어서, A4가 결합, -CH2- 및 -(SO2)-CH2-로부터 선택된 것인 화합물.
26. 실시양태 1 내지 25 중 어느 하나에 있어서, A4가 -CH2-인 화합물.
27. 실시양태 1 내지 26 중 어느 하나에 있어서, C가 아제티디닐, 시클로헥실, 피페라지닐, 디플루오로피페리디닐, 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화합물.
28. 실시양태 1 내지 27 중 어느 하나에 있어서, C가 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화합물.
29. 실시양태 1 내지 28 중 어느 하나에 있어서, R7이 알킬인 화합물.
30. 실시양태 1 내지 29 중 어느 하나에 있어서, R7이 메틸인 화합물.
31. 실시양태 1 내지 30 중 어느 하나에 있어서, R8이 수소 및 할로겐으로부터 선택된 것인 화합물.
32. 실시양태 1 내지 31 중 어느 하나에 있어서, R8이 수소 및 플루오로로부터 선택된 것인 화합물.
33. 실시양태 1 내지 32 중 어느 하나에 있어서, R9가 수소 및 할로겐으로부터 선택된 것인 화합물.
34. 실시양태 1 내지 33 중 어느 하나에 있어서, R9가 수소 및 플루오로로부터 선택된 것인 화합물.
35. 실시양태 1 내지 34 중 어느 하나에 있어서, A5가 -NH-인 화합물.
36. 실시양태 1 내지 34 중 어느 하나에 있어서, A5가 -CH-인 화합물.
37. 실시양태 1 내지 36 중 어느 하나에 있어서, n이 1인 화합물.
38. 실시양태 1 내지 37 중 어느 하나에 있어서, 하기로부터 선택된 화합물:
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
6-[2-클로로-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[3-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]아제티딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-7-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-7-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3S)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-(디메틸아미노)-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-메톡시-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-히드록시-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로헥산술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시아제티딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]아제티딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-플루오로피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[(4R)-4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[(4S)-4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-8-[2-[1-[5-클로로-3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]메틸술포닐]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-3-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로벤조일]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸; 및
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-프로판-2-일인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
또는 그의 제약상 허용되는 염.
39. 실시양태 1 내지 38 중 어느 하나에 있어서, 하기로부터 선택된 화합물:
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로헥산술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸; 및
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드;
또는 그의 제약상 허용되는 염.
40. 실시양태 1 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 치료 활성 물질로서 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
41. 실시양태 1 내지 39 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
42. 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 실시양태 1 내지 39 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
43. 실시양태 1 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 암의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
44. 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 의약의 제조를 위한 실시양태 1 내지 39 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
45. 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 실시양태 1 내지 39 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 방법.
46. 본원에 기재된 바와 같은 본 발명.
화학식 III 및 화학식 IV의 실시양태
특정 실시양태에서, 화학식 III의 화합물은 화학식 III-A의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 A2는 -O-이고, n은 1이고, R4는 시아노이고, 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 III의 화합물은 화학식 III-B의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 A2는 -NH-이고, n은 1이고, R4는 시아노이고, R5는 플루오로이고, 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 III의 화합물은 화학식 III-C의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 A1은 -NR2-이고, A2는 -O-이고, n은 1이고, A14는 -CH2-이고, A15는 -NH-이고, A6은 -CH-이고, 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 IV의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
특정 측면에서, 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공된다:
여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B2는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
n은 0 또는 1이고;
A14는 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH-, -O-, 시클로알킬 및 알킬아미노로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고; 여기서 C는 할로겐, 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
R17은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R18은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R19는 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A15는 결합, -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
A6은 -CH- 또는 -N-이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 하기인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B2는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 할로피페리디닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
n은 0 또는 1이고;
A14는 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH-, -O-, 시클로알킬 및 알킬아미노로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 할로피페리디닐, 히드록시피페리디닐, 알콕시피페리디닐, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고;
R17은 수소, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R18은 수소, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R19는 수소, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A15는 결합, -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
A6은 -CH- 또는 -N-이다.
다른 실시양태에서, 본 발명은 하기인 화학식 III의 화합물이다:
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 알킬이고;
R2는 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 알킬이거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 할로겐 및 알콕시로부터 선택된다.
본 발명의 한 실시양태는 하기인 화학식 III의 화합물이다:
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 메틸이고;
R2는 에틸, 플루오로에틸, 디플루오로에틸 및 시클로프로필로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 알킬이거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 플루오로 및 메톡시로부터 선택된다.
본 발명의 추가의 실시양태는 하기를 포함한다:
R1이 메틸인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R2가 에틸, 플루오로에틸, 디플루오로에틸 및 시클로프로필로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A1이 -NR2-인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A1이 -CHR2'-인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R1 및 R2가 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 형성한 헤테로시클로알킬이 피롤리디닐, 피페리디닐, 아제티디닐 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고, 여기서 헤테로시클로알킬이 각각의 경우에 플루오로 및 메톡시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R1 및 R2'가 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 형성한 시클로알킬이 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
각각의 R3이 독립적으로 플루오로 및 메톡시로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R4가 시아노인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 시아노 및 할로겐으로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 시아노 및 플루오로로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 수소 및 할로겐으로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 수소 및 플루오로로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 할로겐인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 플루오로인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 시아노인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A2가 -O- 및 -NH-로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A2가 -O-인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R6이 수소, 플루오로, 클로로, 브로모, 히드록시, 아미노, 메톡시, 메틸 및 메톡시메틸로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R6이 수소인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A3이 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2- 및 -CH2-CH2-CH(CH3)-으로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A3이 결합인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A가 결합, 피리디닐 및 피리미디닐로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B2가 페닐, 피페리딘-4-일, 4-플루오로-피페리딘-4-일, 피페라진-1-일, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B2가 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B2가 페닐, 피페리딘-4-일, 피페라진-1-일, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B2가 피페라지닐 및 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B2가 피페라진-1-일 및 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A14가 -CH2-인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 아제판-1-일, 아제티딘-1-일, 시클로알킬, 피페라진-1-일, 피페라진-1-일, 피페리딘-4-일, 4-히드록시피페리딘-4-일, 3,3-디플루오로피페리딘-1-일 및 3-메톡시피페리딘-1-일로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 디플루오로피페리디닐, 히드록시피페리디닐, 메톡시피페리디닐, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 디플루오로피페리디닐, 히드록시피페리디닐, 메톡시피페리디닐, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 피페리딘-1-일인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R17이 수소, 플루오로 및 메톡시로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R17이 플루오로인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R18이 수소 및 플루오로로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R18이 수소인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R19가 수소, 플루오로 및 메톡시로부터 선택된 것인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R19가 수소인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A15가 -NH-인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A15가 -CH-인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
n이 1인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및
n이 0인 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
한 실시양태는 하기로부터 선택된 화학식 III의 화합물이다:
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]-2-옥소에틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[4-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]부탄-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]부틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-4-메틸피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-4-플루오로피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]-2-메틸프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-4-플루오로피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,6-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]-2-옥소에틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-9-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]메틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-2-아자스피로[4.5]데칸-8-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
4-[6-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]벤즈아미드;
3-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]메틸]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복스아미드;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복스아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[3-[3-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]아제티딘-1-일]시클로부탄카르보닐]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-메틸-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-메틸-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,5-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,3-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,3-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,5-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-5-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]아제판-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-6-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-5-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-6-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-5-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]-3-히드록시프로파노일]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[(2S)-2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]-3-히드록시프로파노일]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-메톡시-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-메톡시-4-옥소퀴나졸린;
5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[(3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]-3-메톡시피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[(3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]-3-메톡시피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로헥산술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
(3S)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3S)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시아제티딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[2,2-디플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[2-플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[2-플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[2,2-디플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]아제티딘-1-술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
(1S,5R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-술폰아미드;
(3R,4R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3,4-디플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]아제티딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-(메톡시메틸)-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-2,4-디플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-(메톡시메틸)-4-옥소퀴나졸린;
3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린;
3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-히드록시-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-히드록시-4-옥소퀴나졸린;
3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로벤조일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]-2-옥소-에틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로펜탄술폰아미드;
6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린; 및
6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
또는 그의 제약상 허용되는 염.
본 발명의 한 실시양태는 하기로부터 선택된 화학식 III의 화합물이다:
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드; 및
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
또는 그의 제약상 허용되는 염.
본 발명은 추가로 하기에 관한 것이다:
치료 활성 물질로서 사용하기 위한 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물;
암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도;
암의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 의약의 제조를 위한 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도;
암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 암의 치유적 및/또는 예방적 치료 방법;
일부 실시양태에서 BRAF V600X 돌연변이된 종양인 암;
일부 실시양태에서 BRAF V600E/K 돌연변이된 종양인 암;
일부 실시양태에서 표적화 요법 나이브인 암; 및
일부 실시양태에서 흑색종, 결장직장암 및 폐암, 특히 비소세포 폐암으로부터 선택된 암.
화학식 III의 추가의 실시양태
1. 화학식 III의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B2는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
n은 0 또는 1이고;
A14는 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH-, -O-, 시클로알킬 및 알킬아미노로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고; 여기서 C는 할로겐, 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
R17은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R18은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R19는 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A15는 결합, -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
A6은 -CH- 또는 -N-이다.
2. 실시양태 1에 있어서, 하기인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B2는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 할로피페리디닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
n은 0 또는 1이고;
A14는 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH-, -O-, 시클로알킬 및 알킬아미노로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 할로피페리디닐, 히드록시피페리디닐, 알콕시피페리디닐, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고;
R17은 수소, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R18은 수소, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R19는 수소, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A15는 결합, -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
A6은 -CH- 또는 -N-이다.
3. 실시양태 1 또는 2에 있어서, 하기인 화합물:
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 알킬이고;
R2는 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 알킬이거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 할로겐 및 알콕시로부터 선택된다.
4. 실시양태 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 하기인 화합물:
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 메틸이고;
R2는 에틸, 플루오로에틸, 디플루오로에틸 및 시클로프로필로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 알킬이거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 플루오로 및 메톡시로부터 선택된다.
5. 실시양태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, R1이 메틸인 화합물.
6. 실시양태 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, R2가 에틸, 플루오로에틸, 디플루오로에틸 및 시클로프로필로부터 선택된 것인 화합물.
7. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, A1이 -NR2-인 화합물.
8. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, A1이 -CHR2'-인 화합물.
9. 실시양태 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, R1 및 R2가 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 형성한 헤테로시클로알킬이 피롤리디닐, 피페리디닐, 아제티디닐 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고, 여기서 헤테로시클로알킬이 각각의 경우에 플루오로 및 메톡시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 것인 화합물.
10. 실시양태 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, R1 및 R2'가 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 형성한 시클로알킬이 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실로부터 선택된 것인 화합물.
11. 실시양태 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R3이 독립적으로 플루오로 및 메톡시로부터 선택된 것인 화합물.
12. 실시양태 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, R4가 시아노인 화합물.
13. 실시양태 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, R5가 수소 및 할로겐으로부터 선택된 것인 화합물.
14. 실시양태 1 내지 13 중 어느 하나에 있어서, R5가 수소 및 플루오로로부터 선택된 것인 화합물.
15. 실시양태 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, A2가 -O- 및 -NH-로부터 선택된 것인 화합물.
16. 실시양태 1 내지 15 중 어느 하나에 있어서, A2가 -O-인 화합물.
17. 실시양태 1 내지 16 중 어느 하나에 있어서, R6이 수소, 플루오로, 클로로, 브로모, 히드록시, 아미노, 메톡시, 메틸 및 메톡시메틸로부터 선택된 것인 화합물.
18. 실시양태 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, R6이 수소인 화합물.
19. 실시양태 1 내지 18 중 어느 하나에 있어서, A3이 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2- 및 -CH2-CH2-CH(CH3)-로부터 선택된 것인 화합물.
20. 실시양태 1 내지 19 중 어느 하나에 있어서, A3이 결합인 화합물.
21. 실시양태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, A가 결합, 피리디닐 및 피리미디닐로부터 선택된 것인 화합물.
22. 실시양태 1 내지 21 중 어느 하나에 있어서, B2가 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화합물.
23. 실시양태 1 내지 22 중 어느 하나에 있어서, B2가 피페라지닐 및 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화합물.
24. 실시양태 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, A14가 -CH2-인 화합물.
25. 실시양태 1 내지 24 중 어느 하나에 있어서, C가 디플루오로피페리디닐, 히드록시피페리디닐, 메톡시피페리디닐, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화합물.
26. 실시양태 1 내지 25 중 어느 하나에 있어서, C가 피페리디닐인 화합물.
27. 실시양태 1 내지 26 중 어느 하나에 있어서, R17이 수소, 플루오로 및 메톡시로부터 선택된 것인 화합물.
28. 실시양태 1 내지 27 중 어느 하나에 있어서, R18이 수소 및 플루오로로부터 선택된 것인 화합물.
29. 실시양태 1 내지 28 중 어느 하나에 있어서, R19가 수소, 플루오로 및 메톡시로부터 선택된 것인 화합물.
30. 실시양태 1 내지 29 중 어느 하나에 있어서, A15가 -NH-인 화합물.
31. 실시양태 1 내지 29 중 어느 하나에 있어서, A15가 -CH-인 화합물.
32. 실시양태 1 내지 31 중 어느 하나에 있어서, n이 1인 화합물.
33. 실시양태 1 내지 32 중 어느 하나에 있어서, 하기로부터 선택된 화합물:
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]-2-옥소에틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[4-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]부탄-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]부틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-4-메틸피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-4-플루오로피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]-2-메틸프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-4-플루오로피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,6-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]-2-옥소에틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-9-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸;
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]메틸]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-2-아자스피로[4.5]데칸-8-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
4-[6-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]벤즈아미드;
3-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]메틸]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복스아미드;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복스아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[3-[3-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]아제티딘-1-일]시클로부탄카르보닐]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-메틸-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-메틸-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,5-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,3-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,3-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,5-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-5-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]아제판-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-6-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-5-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-6-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-5-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]-3-히드록시프로파노일]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[(2S)-2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]-3-히드록시프로파노일]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-메톡시-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-메톡시-4-옥소퀴나졸린;
5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[(3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]-3-메톡시피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[(3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]-3-메톡시피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로헥산술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
(3S)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
(3S)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시아제티딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[2,2-디플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[2-플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[2-플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[2,2-디플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]아제티딘-1-술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
(1S,5R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-술폰아미드;
(3R,4R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3,4-디플루오로피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]아제티딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-(메톡시메틸)-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
N-[3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-2,4-디플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-(메톡시메틸)-4-옥소퀴나졸린;
3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린;
3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-히드록시-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-히드록시-4-옥소퀴나졸린;
3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로벤조일]-4-옥소퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]-2-옥소-에틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로펜탄술폰아미드;
6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린; 및
6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
또는 그의 제약상 허용되는 염.
34. 실시양태 1 내지 33 중 어느 하나에 있어서, 하기로부터 선택된 화합물:
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린;
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드;
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드; 및
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드;
또는 그의 제약상 허용되는 염.
35. 실시양태 1 내지 34 중 어느 하나에 있어서, 치료 활성 물질로서 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
36. 실시양태 1 내지 34 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
37. 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 실시양태 1 내지 34 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
38. 실시양태 1 내지 34 중 어느 하나에 있어서, 암의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
39. 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 의약의 제조를 위한 실시양태 1 내지 34 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
40. 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 실시양태 1 내지 34 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 방법.
화학식 V 및 화학식 VI의 실시양태
특정 실시양태에서, 화학식 V의 화합물은 화학식 V-A의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 V의 화합물은 화학식 V-B의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 V의 화합물은 화학식 V-C의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 V의 화합물은 화학식 V-D의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 V의 화합물은 화학식 V-E의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 V의 화합물은 화학식 V-F의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다:
여기서 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
특정 실시양태에서, 화학식 VI의 화합물은 하기로부터 선택된다:
또는 그의 제약상 허용되는 염.
화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A22는 -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
W1은 -N- 및 -CH-로부터 선택되고;
W2는 -N- 및 -CR26-으로부터 선택되고;
R26은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 알콕시 및 알킬로부터 선택되고;
A23은 결합, -O- 및 -CH2-로부터 선택되고;
A30은 결합, -CH2-, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B3은 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
A24는 결합, -CH2-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고; 여기서 C는 할로겐, 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
D는 로부터 선택된다.
본 발명의 한 실시양태는 하기인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다:
A1은 -NR2-이고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A22는 -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
W1은 -N- 및 -CH-로부터 선택되고;
W2는 -N- 및 -CR26-으로부터 선택되고;
R26은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 알콕시 및 알킬로부터 선택되고;
A23은 결합, -O- 및 -CH2-로부터 선택되고;
A30은 결합, -CH2-, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B3은 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
A24는 결합, -CH2-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
C는 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택되고;
D는 로부터 선택된다.
본 발명의 한 실시양태는 하기인 화학식 V의 화합물에 관한 것이다:
A1은 -NR2-이고;
R1은 알킬이고;
R2는 알킬이다.
본 발명의 한 실시양태는 하기인 화학식 V의 화합물에 관한 것이다:
A1은 -NR2-이고;
R1은 메틸이고;
R2는 에틸, tert-부틸 및 시클로프로필로부터 선택된다.
본 발명은 추가로 하기에 관한 것이다:
R1이 메틸인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R2가 에틸인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A1이 -NR2-인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R1 및 R2가 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 형성한 헤테로시클로알킬이 피롤리디닐, 피페리디닐, 아제티디닐 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고, 여기서 헤테로시클로알킬이 각각의 경우에 플루오로 및 메톡시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 것인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R1 및 R2'가 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 형성한 시클로알킬이 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실로부터 선택된 것인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
각각의 R3이 독립적으로 플루오로 및 메톡시로부터 선택된 것인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R4가 시아노인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 할로겐인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R5가 플루오로인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A22가 -O-인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
W1이 -CH-인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
W2가 -N-인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
W2가 -CR26-인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R26이 수소 및 알콕시로부터 선택된 것인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
R26이 수소 및 메톡시로부터 선택된 것인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A23이 결합 및 -O-로부터 선택된 것인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A23이 결합인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A30이 결합, -CH2- 및 피라졸릴로부터 선택된 것인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A30이 결합인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A30이 -CH2-인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A30이 피라졸릴인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B3이 피페리디닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
B3이 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
A24가 -CH2-인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
C가 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화학식 V의 화합물;
D가 
인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및
D가 
인 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
본 발명은 추가로 하기로부터 선택된 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다:
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[4-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1,4-디아제판-1-일]피라졸-1-일]퀴녹살린;
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]메톡시]퀴녹살린;
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[[(1R,5S)-3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]메톡시]퀴녹살린;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴놀린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일]퀴녹살린;
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]퀴녹살린;
3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-메톡시퀴놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-메톡시퀴놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸; 및
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]신놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸.
본 발명은 추가로 하기에 관한 것이다:
치료 활성 물질로서 사용하기 위한 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도;
암의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;
암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 의약의 제조를 위한 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도;
암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 암의 치유적 및/또는 예방적 치료 방법;
일부 실시양태에서 BRAF V600X 돌연변이된 종양인 암;
일부 실시양태에서 BRAF V600E/K 돌연변이된 종양인 암;
일부 실시양태에서 표적화 요법 나이브인 암; 및
일부 실시양태에서 흑색종, 결장직장암 및 폐암, 특히 비소세포 폐암으로부터 선택된 암.
화학식 V의 추가의 실시양태
1. 화학식 V의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A22는 -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
W1은 -N- 및 -CH-로부터 선택되고;
W2는 -N- 및 -CR26-으로부터 선택되고;
R26은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 알콕시 및 알킬로부터 선택되고;
A23은 결합, -O- 및 -CH2-로부터 선택되고;
A30은 결합, -CH2-, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B3은 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
A24는 결합, -CH2-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고; 여기서 C는 할로겐, 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
D는 
로부터 선택된다.
2. 실시양태 1에 있어서, 하기인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
A1은 -NR2-이고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A22는 -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
W1은 -N- 및 -CH-로부터 선택되고;
W2는 -N- 및 -CR26-으로부터 선택되고;
R26은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 알콕시 및 알킬로부터 선택되고;
A23은 결합, -O- 및 -CH2-로부터 선택되고;
A30은 결합, -CH2-, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B3은 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
A24는 결합, -CH2-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
C는 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택되고;
D는 
로부터 선택된다.
3. 실시양태 1 또는 2에 있어서, 하기인 화합물:
A1은 -NR2-이고;
R1은 알킬이고;
R2는 알킬이다.
4. 실시양태 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 하기인 화합물:
A1은 -NR2-이고;
R1은 메틸이고;
R2는 에틸이다.
5. 실시양태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, R4가 시아노인 화합물.
6. 실시양태 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, R5가 할로겐인 화합물.
7. 실시양태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, R5가 플루오로인 화합물.
8. 실시양태 1 내지 7 중 어느 하나에 있어서, A22가 -O-인 화합물.
9. 실시양태 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, W1이 -CH-인 화합물.
10. 실시양태 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, W2가 -N-인 화합물.
11. 실시양태 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, W2가 -CR26-인 화합물.
12. 실시양태 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, R26이 수소 및 알콕시로부터 선택된 것인 화합물.
13. 실시양태 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, R26이 수소 및 메톡시로부터 선택된 것인 화합물.
14. 실시양태 1 내지 13 중 어느 하나에 있어서, A23이 결합 및 -O-로부터 선택된 것인 화합물.
15. 실시양태 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, A23이 결합인 화합물.
16. 실시양태 1 내지 15 중 어느 하나에 있어서, A30이 결합, -CH2- 및 피라졸릴로부터 선택된 것인 화합물.
17. 실시양태 1 내지 16 중 어느 하나에 있어서, A30이 결합인 화합물.
18. 실시양태 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, B3이 피페리디닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택된 것인 화합물.
19. 실시양태 1 내지 18 중 어느 하나에 있어서, A24가 -CH2-인 화합물.
20. 실시양태 1 내지 19 중 어느 하나에 있어서, C가 히드록시피페리디닐 및 피페리디닐로부터 선택된 것인 화합물.
21. 실시양태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서,
D가 
인 화합물.
22. 실시양태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서,
D가 
인 화합물.
23. 실시양태 1 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 하기로부터 선택된 화합물:
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[4-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1,4-디아제판-1-일]피라졸-1-일]퀴녹살린;
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]메톡시]퀴녹살린;
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[[(1R,5S)-3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]메톡시]퀴녹살린;
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴놀린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일]퀴녹살린;
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]퀴녹살린;
3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-메톡시퀴놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-메톡시퀴놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸; 및
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]신놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸;
또는 그의 제약상 허용되는 염.
24. 실시양태 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 치료 활성 물질로서 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
25. 실시양태 1 내지 23 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
26. 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 실시양태 1 내지 23 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
27. 실시양태 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 암의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
28. 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 의약의 제조를 위한 실시양태 1 내지 23 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
29. 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 실시양태 1 내지 23 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 암의 치유적 및/또는 예방적 치료를 위한 방법.
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 및 화학식 VI의 실시양태
1. 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
A22는 -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
W1은 -N- 및 -CH-로부터 선택되고;
W2는 -N- 및 -CR26-으로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
R26은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 알콕시 및 알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A23은 결합, -O- 및 -CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
A30은 결합, -CH2-, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
B2는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
B3은 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
n은 0 또는 1이고;
A4는 결합, -CH2-, -(SO2)-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
A14는 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH-, -O-, 시클로알킬 및 알킬아미노로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고; 여기서 C는 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
D는 
로부터 선택되고;
R7은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R8은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R9는 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R17은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R18은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R19는 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A5는 -CH- 또는 -N-이고;
A15는 결합, -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
A6은 -CH- 또는 -N-이고;
링커는 2가 화학적 기이다.
2. 실시양태 1에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
3. 실시양태 1 또는 2에 있어서, A4가 결합인 화합물.
4. 실시양태 1 또는 2에 있어서, A4가 -NH-인 화합물.
5. 실시양태 1 또는 2에 있어서, A4가 -O-인 화합물.
6. 실시양태 1-5 중 어느 하나에 있어서, A5가 -CH-인 화합물.
7. 실시양태 1-5 중 어느 하나에 있어서, A5가 -N-인 화합물.
8. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, R7이 수소인 화합물.
9. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, R7이 알킬인 화합물.
10. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, R7이 메틸인 화합물.
11. 실시양태 1-10 중 어느 하나에 있어서, R8이 수소인 화합물.
12. 실시양태 1-10 중 어느 하나에 있어서, R8이 알킬인 화합물.
13. 실시양태 1-10 중 어느 하나에 있어서, R8이 할로겐인 화합물.
14. 실시양태 1-13 중 어느 하나에 있어서, R9가 수소인 화합물.
15. 실시양태 1-13 중 어느 하나에 있어서, R9가 알킬인 화합물.
16. 실시양태 1-13 중 어느 하나에 있어서, R9가 할로겐인 화합물.
17. 실시양태 1-13 중 어느 하나에 있어서, R9가 플루오린인 화합물.
18. 실시양태 1-17 중 어느 하나에 있어서, B가 
인 화합물.
19. 실시양태 1-17 중 어느 하나에 있어서, B가 
인 화합물.
20. 실시양태 1-17 중 어느 하나에 있어서, B가 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 페닐, 피페리디닐 또는 피페라지닐인 화합물.
21. 실시양태 1-17 중 어느 하나에 있어서, B가 페닐, 피페리디닐 또는 피페라지닐인 화합물.
22. 실시양태 1-17 중 어느 하나에 있어서, B가 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 또는 8-아자스피로[4.5]데실인 화합물.
23. 실시양태 1에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
24. 실시양태 1 또는 실시양태 23에 있어서, A6이 -CH-인 화합물.
25. 실시양태 1 또는 실시양태 23에 있어서, A6이 -N-인 화합물.
26. 실시양태 23-25 중 어느 하나에 있어서, A14가 결합인 화합물.
27. 실시양태 23-25 중 어느 하나에 있어서, A14가 -CH2-, -CH2-CH2- 또는 -CH(CH2OH)-인 화합물.
28. 실시양태 23-25 중 어느 하나에 있어서, A14가 -NH-인 화합물.
29. 실시양태 23-25 중 어느 하나에 있어서, A14가 -O-인 화합물.
30. 실시양태 23-25 중 어느 하나에 있어서, A14가 시클로알킬인 화합물.
31. 실시양태 23-25 중 어느 하나에 있어서, A14가 알킬아미노인 화합물.
32. 실시양태 23-31 중 어느 하나에 있어서, R17이 수소인 화합물.
33. 실시양태 23-31 중 어느 하나에 있어서, R17이 알킬인 화합물.
34. 실시양태 23-31 중 어느 하나에 있어서, R17이 할로겐인 화합물.
35. 실시양태 23-31 중 어느 하나에 있어서, R17이 플루오린인 화합물.
36. 실시양태 23-35 중 어느 하나에 있어서, R18이 수소인 화합물.
37. 실시양태 23-35 중 어느 하나에 있어서, R18이 알킬인 화합물.
38. 실시양태 23-35 중 어느 하나에 있어서, R18이 할로겐인 화합물.
39. 실시양태 23-35 중 어느 하나에 있어서, R18이 플루오린인 화합물.
40. 실시양태 23-39 중 어느 하나에 있어서, R19가 수소인 화합물.
41. 실시양태 23-39 중 어느 하나에 있어서, R19가 알킬인 화합물.
42. 실시양태 23-39 중 어느 하나에 있어서, R19가 할로겐인 화합물.
43. 실시양태 23-39 중 어느 하나에 있어서, R19가 플루오린인 화합물.
44. 실시양태 1-43 중 어느 하나에 있어서, A2가 -O-인 화합물.
45. 실시양태 1-43 중 어느 하나에 있어서, A2가 -NH-인 화합물.
46. 실시양태 1-43 중 어느 하나에 있어서, A2가 -(C=O)-인 화합물.
47. 실시양태 1-46 중 어느 하나에 있어서, A3이 결합인 화합물.
48. 실시양태 1-46 중 어느 하나에 있어서, A3이 -CH2-인 화합물.
49. 실시양태 1-46 중 어느 하나에 있어서, A3이 -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 또는 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-인 화합물.
50. 실시양태 1-49 중 어느 하나에 있어서, n이 0인 화합물.
51. 실시양태 1-49 중 어느 하나에 있어서, n이 1인 화합물.
52. 실시양태 1-51 중 어느 하나에 있어서, R6이 수소인 화합물.
53. 실시양태 1-51 중 어느 하나에 있어서, R6이 할로겐인 화합물.
54. 실시양태 1-51 중 어느 하나에 있어서, R6이 아미노 또는 디알킬아미노인 화합물.
55. 실시양태 1-51 중 어느 하나에 있어서, R6이 히드록시 또는 알콕시인 화합물.
56. 실시양태 1에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
57. 실시양태 56에 있어서, D가 
인 화합물.
58. 실시양태 56에 있어서, D가 
인 화합물.
59. 실시양태 56-58 중 어느 하나에 있어서, W1이 -N-인 화합물.
60. 실시양태 56-58 중 어느 하나에 있어서, W1이 -CH-인 화합물.
61. 실시양태 56-60 중 어느 하나에 있어서, W2가 -N-인 화합물.
62. 실시양태 56-60 중 어느 하나에 있어서, W2가 -CR26-인 화합물.
63. 실시양태 56-62 중 어느 하나에 있어서, R26이 수소인 화합물.
64. 실시양태 56-62 중 어느 하나에 있어서, R26이 할로겐인 화합물.
65. 실시양태 56-64 중 어느 하나에 있어서, A23이 결합인 화합물.
66. 실시양태 56-64 중 어느 하나에 있어서, A23이 -O-인 화합물.
67. 실시양태 56-64 중 어느 하나에 있어서, A23이 -CH2-인 화합물.
68. 실시양태 56-67 중 어느 하나에 있어서, A30이 결합인 화합물.
69. 실시양태 56-67 중 어느 하나에 있어서, A30이 -CH2-인 화합물.
70. 실시양태 56-67 중 어느 하나에 있어서, A30이 피리미디닐 또는 피리디닐인 화합물.
71. 실시양태 56-67 중 어느 하나에 있어서, A30이 피라졸릴인 화합물.
72. 실시양태 56-67 중 어느 하나에 있어서, A30이 3-아자비시클로[3.1.0]헥실인 화합물.
73. 실시양태 56-72 중 어느 하나에 있어서, B3이 페닐인 화합물.
74. 실시양태 56-72 중 어느 하나에 있어서, B3이 피페리디닐 또는 피페라지닐인 화합물.
75. 실시양태 56-72 중 어느 하나에 있어서, B3이 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 또는 8-아자스피로[4.5]데실인 화합물.
76. 실시양태 56-75 중 어느 하나에 있어서, A22가 -O-인 화합물.
77. 실시양태 56-75 중 어느 하나에 있어서, A22가 -NH-인 화합물.
78. 실시양태 1에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
79. 실시양태 78에 있어서, A5가 -CH-인 화합물.
80. 실시양태 78에 있어서, A5가 -N-인 화합물.
81. 실시양태 78-80 중 어느 하나에 있어서, R7이 수소인 화합물.
82. 실시양태 78-80 중 어느 하나에 있어서, R7이 알킬인 화합물.
83. 실시양태 78-80 중 어느 하나에 있어서, R7이 메틸인 화합물.
84. 실시양태 78-83 중 어느 하나에 있어서, R8이 수소인 화합물.
85. 실시양태 78-83 중 어느 하나에 있어서, R8이 알킬인 화합물.
86. 실시양태 78-83 중 어느 하나에 있어서, R8이 할로겐인 화합물.
87. 실시양태 78-86 중 어느 하나에 있어서, R9가 수소인 화합물.
88. 실시양태 78-86 중 어느 하나에 있어서, R9가 알킬인 화합물.
89. 실시양태 78-86 중 어느 하나에 있어서, R9가 할로겐인 화합물.
90. 실시양태 78-86 중 어느 하나에 있어서, R9가 플루오린인 화합물.
91. 실시양태 1에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
92. 실시양태 91에 있어서, A6이 -CH-인 화합물.
93. 실시양태 91에 있어서, A6이 -N-인 화합물.
94. 실시양태 91-93 중 어느 하나에 있어서, R17이 수소인 화합물.
95. 실시양태 91-93 중 어느 하나에 있어서, R17이 알킬인 화합물.
96. 실시양태 91-93 중 어느 하나에 있어서, R17이 할로겐인 화합물.
97. 실시양태 91-93 중 어느 하나에 있어서, R17이 플루오린인 화합물.
98. 실시양태 91-97 중 어느 하나에 있어서, R18이 수소인 화합물.
99. 실시양태 91-97 중 어느 하나에 있어서, R18이 알킬인 화합물.
100. 실시양태 91-97 중 어느 하나에 있어서, R18이 할로겐인 화합물.
101. 실시양태 91-97 중 어느 하나에 있어서, R18이 플루오린인 화합물.
102. 실시양태 91-101 중 어느 하나에 있어서, R19가 수소인 화합물.
103. 실시양태 91-101 중 어느 하나에 있어서, R19가 알킬인 화합물.
104. 실시양태 91-101 중 어느 하나에 있어서, R19가 할로겐인 화합물.
105. 실시양태 91-101 중 어느 하나에 있어서, R19가 플루오린인 화합물.
106. 실시양태 78-105 중 어느 하나에 있어서, A2가 -O-인 화합물.
107. 실시양태 78-105 중 어느 하나에 있어서, A2가 -NH-인 화합물.
108. 실시양태 78-105 중 어느 하나에 있어서, A2가 -(C=O)-인 화합물.
109. 실시양태 78-108 중 어느 하나에 있어서, n이 0인 화합물.
110. 실시양태 78-108 중 어느 하나에 있어서, n이 1인 화합물.
111. 실시양태 78-110 중 어느 하나에 있어서, R6이 수소인 화합물.
112. 실시양태 78-110 중 어느 하나에 있어서, R6이 할로겐인 화합물.
113. 실시양태 78-110 중 어느 하나에 있어서, R6이 아미노 또는 디알킬아미노인 화합물.
114. 실시양태 78-110 중 어느 하나에 있어서, R6이 히드록시 또는 알콕시인 화합물.
115. 실시양태 1에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
116. 실시양태 115에 있어서, D가 
인 화합물.
117. 실시양태 115에 있어서, D가 
인 화합물.
118. 실시양태 115-117 중 어느 하나에 있어서, W1이 -N-인 화합물.
119. 실시양태 115-117 중 어느 하나에 있어서, W1이 -CH-인 화합물.
120. 실시양태 115-119 중 어느 하나에 있어서, W2가 -N-인 화합물.
121. 실시양태 115-119 중 어느 하나에 있어서, W2가 -CR26-인 화합물.
122. 실시양태 115-121 중 어느 하나에 있어서, R26이 수소인 화합물.
123. 실시양태 115-121 중 어느 하나에 있어서, R26이 할로겐인 화합물.
124. 실시양태 115-123 중 어느 하나에 있어서, A22가 -O-인 화합물.
125. 실시양태 115-123 중 어느 하나에 있어서, A22가 -NH-인 화합물.
126. 실시양태 78-125 중 어느 하나에 있어서, 링커가 하기로부터 선택된 것인 화합물:
여기서
X1 및 X2는 각각의 경우에 독립적으로 결합, 헤테로사이클, NR2, C(R2)2, O, C(O) 및 S로부터 선택되고;
R20, R21, R22, R23 및 R24는 각각의 경우에 독립적으로 결합, 알킬, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -SO2-, -S(O)-, -C(S)-, -C(O)NR2-, -NR2C(O)-, -O-, -S-, -NR2-, -C(R40R40)-, -P(O)(OR36)O-, -P(O)(OR36)-, 비사이클, 알켄, 알킨, 할로알킬, 알콕시, 아릴, 헤테로사이클, 지방족, 헤테로지방족, 헤테로아릴, 락트산, 글리콜산 및 카르보사이클로부터 선택된 2가 모이어티로 이루어진 군으로부터 선택되고; 이들 각각은 R40으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의로 치환되고;
R36은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬, 알켄, 알킨, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클, 지방족 및 헤테로지방족으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R40은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알켄, 알킨, 플루오로, 브로모, 클로로, 히드록실, 알콕시, 아지드, 아미노, 시아노, -NH(알킬을 포함한 지방족), -N(알킬을 포함한 지방족)2, -NHSO2(알킬을 포함한 지방족), -N(알킬을 포함한 지방족)SO2알킬, -NHSO2(아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클), -N(알킬)SO2(아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클), -NHSO2알케닐, -N(알킬)SO2알케닐, -NHSO2알키닐, -N(알킬)SO2알키닐, 할로알킬, 지방족, 헤테로지방족, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클 및 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.
127. 실시양태 126에 있어서, 링커가 하기 화학식을 갖는 것인 화합물:
128. 실시양태 126 및 127 중 어느 하나에 있어서, X1이 결합인 화합물.
129. 실시양태 126 및 127 중 어느 하나에 있어서, X1이 헤테로사이클인 화합물.
130. 실시양태 126 및 127 중 어느 하나에 있어서, X1이 NR2인 화합물.
131. 실시양태 126 및 127 중 어느 하나에 있어서, X1이 C(O)인 화합물.
132. 실시양태 126-131 중 어느 하나에 있어서, X2가 결합인 화합물.
133. 실시양태 126-131 중 어느 하나에 있어서, X2가 헤테로사이클인 화합물.
134. 실시양태 126-131 중 어느 하나에 있어서, X2가 NR2인 화합물.
135. 실시양태 126-131 중 어느 하나에 있어서, X2가 C(O)인 화합물.
136. 실시양태 126-135 중 어느 하나에 있어서, R20이 결합인 화합물.
137. 실시양태 126-135 중 어느 하나에 있어서, R20이 CH2인 화합물.
138. 실시양태 126-135 중 어느 하나에 있어서, R20이 헤테로사이클인 화합물.
139. 실시양태 126-135 중 어느 하나에 있어서, R20이 아릴인 화합물.
140. 실시양태 126-135 중 어느 하나에 있어서, R20이 페닐인 화합물.
141. 실시양태 126-135 중 어느 하나에 있어서, R20이 비사이클인 화합물.
142. 실시양태 126-141 중 어느 하나에 있어서, R21이 결합인 화합물.
143. 실시양태 126-141 중 어느 하나에 있어서, R21이 CH2인 화합물.
144. 실시양태 126-141 중 어느 하나에 있어서, R21이 헤테로사이클인 화합물.
145. 실시양태 126-141 중 어느 하나에 있어서, R21이 아릴인 화합물.
146. 실시양태 126-141 중 어느 하나에 있어서, R21이 인 화합물.
147. 실시양태 126-141 중 어느 하나에 있어서, R21이 비사이클인 화합물.
148. 실시양태 126에 있어서, 링커가 하기 화학식을 갖는 것인 화합물.
149. 실시양태 126-148 중 어느 하나에 있어서, R22가 결합인 화합물.
150. 실시양태 126-148 중 어느 하나에 있어서, R22가 CH2인 화합물.
151. 실시양태 126-148 중 어느 하나에 있어서, R22가 헤테로사이클인 화합물.
152. 실시양태 126-148 중 어느 하나에 있어서, R22가 아릴인 화합물.
153. 실시양태 126-148 중 어느 하나에 있어서, R22가 페닐인 화합물.
154. 실시양태 126-148 중 어느 하나에 있어서, R22가 비사이클인 화합물.
155. 실시양태 126-154 중 어느 하나에 있어서, R23이 결합인 화합물.
156. 실시양태 126-154 중 어느 하나에 있어서, R23이 CH2인 화합물.
157. 실시양태 126-154 중 어느 하나에 있어서, R23이 헤테로사이클인 화합물.
158. 실시양태 126-154 중 어느 하나에 있어서, R23이 아릴인 화합물.
159. 실시양태 126-154 중 어느 하나에 있어서, R23이 페닐인 화합물.
160. 실시양태 126-154 중 어느 하나에 있어서, R23이 비사이클인 화합물.
161. 실시양태 126-160 중 어느 하나에 있어서, R24가 결합인 화합물.
162. 실시양태 126-160 중 어느 하나에 있어서, R24가 CH2인 화합물.
163. 실시양태 126-160 중 어느 하나에 있어서, R24가 헤테로사이클인 화합물.
164. 실시양태 126-160 중 어느 하나에 있어서, R24가 아릴인 화합물.
165. 실시양태 126-160 중 어느 하나에 있어서, R24가 페닐인 화합물.
166. 실시양태 126-160 중 어느 하나에 있어서, R24가 비사이클인 화합물.
167. 실시양태 126-160 중 어느 하나에 있어서, R24가 C(O)인 화합물.
168. 실시양태 1-167 중 어느 하나에 있어서, A1이 -NR2-인 화합물.
169. 실시양태 1-167 중 어느 하나에 있어서, A1이 -CHR2'-인 화합물.
170. 실시양태 1-167 중 어느 하나에 있어서, A1이 -NH-인 화합물.
171. 실시양태 1-167 중 어느 하나에 있어서, A1이 -NCH3-인 화합물.
172. 실시양태 1-167 중 어느 하나에 있어서, A1이 -CH2-인 화합물.
173. 실시양태 1-172 중 어느 하나에 있어서, R1이 수소인 화합물.
174. 실시양태 1-172 중 어느 하나에 있어서, R1이 알킬인 화합물.
175. 실시양태 1-172 중 어느 하나에 있어서, R1이 메틸인 화합물.
176. 실시양태 1-172 중 어느 하나에 있어서, R1이 에틸인 화합물.
177. 실시양태 1-176 중 어느 하나에 있어서, R4가 수소인 화합물.
178. 실시양태 1-176 중 어느 하나에 있어서, R4가 시아노인 화합물.
179. 실시양태 1-176 중 어느 하나에 있어서, R4가 할로겐인 화합물.
180. 실시양태 1-179 중 어느 하나에 있어서, R5가 수소인 화합물.
181. 실시양태 1-179 중 어느 하나에 있어서, R5가 할로겐인 화합물.
182. 실시양태 1-179 중 어느 하나에 있어서, R5가 플루오린인 화합물.
183. 실시양태 1-182 중 어느 하나에 있어서, C가 
인 화합물.
184. 실시양태 1-182 중 어느 하나에 있어서, C가 아제파닐인 화합물.
185. 실시양태 1-182 중 어느 하나에 있어서, C가 아제티디닐인 화합물.
186. 실시양태 1-182 중 어느 하나에 있어서, C가 피페라지닐인 화합물.
187. 실시양태 1-182 중 어느 하나에 있어서, C가 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 시클로알킬인 화합물.
188. 실시양태 1-182 중 어느 하나에 있어서, C가 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 피페리디닐인 화합물.
189. 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
190. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
191. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
192. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
193. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
194. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
195. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
196. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
197. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
198. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
199. 실시양태 189에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
200. 실시양태 1-199 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
201. 돌연변이 BRAF 매개된 장애의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 실시양태 1-199 중 어느 하나의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 실시양태 200의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 돌연변이 BRAF 매개된 장애를 치료하는 방법.
202. 실시양태 201에 있어서, 환자가 인간인 방법.
203. 실시양태 201 또는 202에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 암인 방법.
204. 실시양태 203에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 흑색종인 방법.
205. 실시양태 203에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 폐암인 방법.
206. 실시양태 203에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 비소세포 폐암인 방법.
207. 실시양태 203에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 결장직장암인 방법.
208. 실시양태 203에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 미소위성체 안정한 결장직장암인 방법.
209. 실시양태 203에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 갑상선암인 방법.
210. 실시양태 203에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 난소암인 방법.
211. 실시양태 201에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 담관암종, 에르드하임-체스터병, 랑게르한스 조직구증, 신경절교종, 신경교종, 교모세포종, 모발상 세포 백혈병, 다발성 골수종, 비소세포 폐암, 난소암, 필로믹소이드 성상세포종, 역형성 다형성 황색성상세포종, 성상세포종, 유두상 갑상선암, 역형성 갑상선암, 췌장암, 흉부 투명 세포 육종, 타액선암 또는 미소위성체 안정한 결장직장암인 방법.
212. 실시양태 201-211 중 어느 하나에 있어서, 환자가 또한 추가의 활성제를 받는 것인 방법.
213. 실시양태 212에 있어서, 추가의 활성제가 MEK 억제제인 방법.
214. 실시양태 213에 있어서, MEK 억제제가 트라메티닙인 방법.
215. 실시양태 212에 있어서, 추가의 활성제가 면역 체크포인트 억제제인 방법.
216. 실시양태 215에 있어서, 면역 체크포인트 억제제가 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 세미플리맙, 이필리무맙, 렐라틀리맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 두르발루맙으로부터 선택된 것인 방법.
217. 실시양태 212에 있어서, 추가의 활성제가 세툭시맙 또는 파니투무맙인 방법.
218. 실시양태 1-200 중 어느 하나에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애의 치유적 치료를 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물.
219. 실시양태 218에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 암인 화합물.
220. 실시양태 219에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 흑색종인 화합물.
221. 실시양태 219에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 폐암인 화합물.
222. 실시양태 219에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 비소세포 폐암인 화합물.
223. 실시양태 219에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 결장직장암인 화합물.
224. 실시양태 219에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 미소위성체 안정한 결장직장암인 화합물.
225. 실시양태 219에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 갑상선암인 화합물.
226. 실시양태 219에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 난소암인 화합물.
227. 실시양태 218에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 담관암종, 에르드하임-체스터병, 랑게르한스 조직구증, 신경절교종, 신경교종, 교모세포종, 모발상 세포 백혈병, 다발성 골수종, 비소세포 폐암, 난소암, 필로믹소이드 성상세포종, 역형성 다형성 황색성상세포종, 성상세포종, 유두상 갑상선암, 역형성 갑상선암, 췌장암, 흉부 투명 세포 육종, 타액선암 또는 미소위성체 안정한 결장직장암인 화합물.
228. 실시양태 1-200 중 어느 하나에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애의 치료에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물.
229. 실시양태 228에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 암인 화합물.
230. 실시양태 229에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 흑색종인 화합물.
231. 실시양태 229에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 폐암인 화합물.
232. 실시양태 229에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 비소세포 폐암인 화합물.
233. 실시양태 229에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 결장직장암인 화합물.
234. 실시양태 229에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 미소위성체 안정한 결장직장암인 화합물.
235. 실시양태 229에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 갑상선암인 화합물.
236. 실시양태 229에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 난소암인 화합물.
237. 실시양태 228에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 담관암종, 에르드하임-체스터병, 랑게르한스 조직구증, 신경절교종, 신경교종, 교모세포종, 모발상 세포 백혈병, 다발성 골수종, 비소세포 폐암, 난소암, 필로믹소이드 성상세포종, 역형성 다형성 황색성상세포종, 성상세포종, 유두상 갑상선암, 역형성 갑상선암, 췌장암, 흉부 투명 세포 육종, 타액선암 또는 미소위성체 안정한 결장직장암인 화합물.
238. 돌연변이 BRAF 매개된 장애의 치료를 위한 의약의 제조에서의 실시양태 1-199 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 실시양태 200의 제약 조성물의 용도.
239. 실시양태 238에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 암인 용도.
240. 실시양태 239에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 흑색종인 용도.
241. 실시양태 239에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 폐암인 용도.
242. 실시양태 239에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 비소세포 폐암인 용도.
243. 실시양태 239에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 결장직장암인 용도.
244. 실시양태 239에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 미소위성체 안정한 결장직장암인 용도.
245. 실시양태 239에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 갑상선암인 용도.
246. 실시양태 239에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 난소암인 용도.
247. 실시양태 238에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 담관암종, 에르드하임-체스터병, 랑게르한스 조직구증, 신경절교종, 신경교종, 교모세포종, 모발상 세포 백혈병, 다발성 골수종, 비소세포 폐암, 난소암, 필로믹소이드 성상세포종, 역형성 다형성 황색성상세포종, 성상세포종, 유두상 갑상선암, 역형성 갑상선암, 췌장암, 흉부 투명 세포 육종, 타액선암 또는 미소위성체 안정한 결장직장암인 용도.
248. 실시양태 1 내지 199 중 어느 하나에 있어서, 치료 활성 물질로서 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
치료 방법
본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물은 돌연변이 BRAF에 의해 매개된 임의의 장애를 갖는 환자를 치료하기 위한 유효량으로 사용될 수 있다.
BRAF는 신호 전달 단백질 키나제의 구성원인 세린/트레오닌 단백질 키나제이다. BRAF V600X 돌연변이, 특히 BRAF V600E/K 돌연변이는 종종 흑색종, 갑상선암, 결장직장암, 폐암 등을 포함한 다양한 인간 종양에서 관찰된다. V600X 돌연변이의 비제한적 예는 V600E, V600K, V600R, V600D 및 V600N을 포함한다. 많은 이들 적응증에 대해 클리닉에서 이용가능한 BRAF 억제제에 의해 발휘되는 치료 이익에도 불구하고, 이들 약물에 대한 항종양 반응의 지속기간은 약물 저항성의 획득에 의해 제한된다.
BRAF 단백질은 단백질 동종-이량체화 (BRAF-BRAF) 또는 다른 RAF 단백질과의 이종-이량체화 (BRAF-RAF1 또는 BRAF-ARAF)가 요구되는 신호전달 전파를 위한 메카니즘을 제시한다. BRAF가 돌연변이되는 경우에, BRAF V600X 치환을 갖는 종양학적 적응증에서 관찰된 바와 같이, BRAF 신호전달은 동종이량체 및/또는 이종이량체의 생성과 독립적이 된다. 이와 관련하여, 키나제는 단량체 단백질로서 과다활성화되고, 세포 증식 신호를 유도한다.
현재 이용가능한 억제제는 단량체 형태의 BRAF 활성만을 차단하고, BRAF 동종이량체 또는 이종이량체에 대해서는 비효과적이기 때문에, 많은 BRAF-저항성 유도 메카니즘이 RAF 동종이량체화 및 이종이량체화 매개된 신호전달을 회복시킴으로써 작용한다는 것은 놀랍지 않다.
표적화된 단백질 분해는 E3 리가제를 동원함으로써 표적 유비퀴틴화를 유도하고, 따라서 결속된 표적의 프로테아솜-매개된 파괴를 촉진한다. 표적화된 분해를 통한 BRAF의 분해는 BRAF V600E/K의 스캐폴딩 활성을 제거하고, 특히 BRAF 단백질 제거를 유도하기 때문에 통상적인 억제에 비해 이점을 제공한다. 이러한 활성은 저항성의 이량체화-매개된 메카니즘을 방지한다.
이러한 이론과 일치하게, 문헌 보고는 BRAF 단백질 폐기가 저항성 획득의 개시를 지연시킬 뿐만 아니라 이용가능한 억제제에 대한 저항성을 획득한 종양을 잠재적으로 표적화하는 전략을 나타낼 수 있다는 것을 입증하였다. 이러한 관찰은 흑색종, 결장직장암 및 폐암과 같은 BRAF V600X 돌연변이된 종양의 치료에서 신규 치료 기회를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은 암의 치료 또는 예방을 위해 BRAF 억제가 필요한, 암의 치료 또는 예방을 필요로 하는 환자에서 암을 치료 또는 예방하기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 그의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 또는 입체이성질체 또는 그의 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물 또는 제약 조성물을 제공한다.
특정 측면에서, 본 발명의 화합물은 BRAF가 야생형으로부터 돌연변이된 것인 BRAF 매개된 암을 치료하는 데 사용된다. BRAF 돌연변이에 대한 다수의 가능성이 존재한다. 특정의 비제한적 실시양태에서, 돌연변이는 부류 I 돌연변이, 부류 II 돌연변이 또는 부류 III 돌연변이 또는 그의 임의의 조합이다. 부류 I 돌연변이의 비제한적 예는 V600 돌연변이, 예컨대 V600E, V600K, V600R, V600D 및 V600N을 포함한다. 부류 II 돌연변이의 비제한적 예는 G469A, G469V, G469L, G469R, L597Q 및 K601E를 포함한다. 부류 III 돌연변이의 비제한적 예는 G466A, G466E, G466R, G466V, S467L, G469E, N581I, D594E, D594G 및 D594N을 포함한다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 BRAF 돌연변이체 매개된 장애를 치료하며, 여기서 돌연변이는 부류 I, 부류 II 또는 부류 III 돌연변이가 아니다. 돌연변이의 비제한적 예는 G464I, G464R, N581T, L584F, E586K, G593D, G596C, L597R, L597S, S605I, S607F, N684T, E26A, V130M, L745L 및 D284E를 포함한다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 엑손 11 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 엑손 15 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 G464 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 G466 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 G466R 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 G466E 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 G469 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 G469E 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 D594 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 D594A 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 L597 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 L597R 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 L597S 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 L597Q 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600E 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600K 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600R 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600D 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 K601 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 K601E 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 K601N 돌연변이이다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 BRAF 돌연변이체 매개된 장애를 치료하며, 여기서 돌연변이는 스플라이스 변이체, 예를 들어 p61-BRAFV600E이다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 2종 이상의 돌연변이 단백질에 의해 매개된 장애, 예를 들어 BRAFV600E/NRASQ61K 이중 돌연변이체에 의해 매개된 암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 적어도 1종의 BRAF 억제제에 대해 저항성인 암, 예를 들어 다브라페닙, 트라메티닙, 베무라페닙 및 엔코라페닙으로부터 선택된 BRAF 억제제에 대해 저항성이거나 또는 그에 대한 저항성을 획득한 암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 회피 돌연변이가 발생한 암, 예컨대 BRAF V600E NRASQ61K 이중 돌연변이 암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 흑색종을 치료하는 데 사용된다.
흑색종의 비제한적 예는 비말단 피부 흑색종, 말단 흑색종, 점막 흑색종, 포도막 흑색종 및 연수막 흑색종을 포함하며, 이들 각각은 원발성 또는 전이성일 수 있다.
특정 실시양태에서 본 발명의 화합물은 삼중 음성 유방암, 예를 들어 G464V BRAF 돌연변이체를 갖는 삼중 음성 유방암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 폐암, 예를 들어 G466V BRAF 돌연변이체를 갖는 폐 선암종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 V600 BRAF 돌연변이체를 갖는 흑색종을 치료하는 데 사용된다.
특정 측면에서, 화합물 157은 BRAF가 야생형으로부터 돌연변이된 것인 BRAF 매개된 암을 치료하는 데 사용된다. BRAF 돌연변이에 대한 다수의 가능성이 존재한다. 특정의 비제한적 실시양태에서, 돌연변이는 부류 I 돌연변이, 부류 II 돌연변이 또는 부류 III 돌연변이 또는 그의 임의의 조합이다. 부류 I 돌연변이의 비제한적 예는 V600 돌연변이, 예컨대 V600E, V600K, V600R, V600D 및 V600N을 포함한다. 부류 II 돌연변이의 비제한적 예는 G469A, G469V, G469L, G469R, L597Q 및 K601E를 포함한다. 부류 III 돌연변이의 비제한적 예는 G466A, G466E, G466R, G466V, S467L, G469E, N581I, D594E, D594G 및 D594N을 포함한다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 BRAF 돌연변이체 매개된 장애를 치료하며, 여기서 돌연변이는 부류 I, 부류 II 또는 부류 III 돌연변이가 아니다. 돌연변이의 비제한적 예는 G464I, G464R, N581T, L584F, E586K, G593D, G596C, L597R, L597S, S605I, S607F, N684T, E26A, V130M, L745L 및 D284E를 포함한다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 BRAF 돌연변이체 매개된 장애를 치료하며, 여기서 돌연변이는 스플라이스 변이체, 예를 들어 p61-BRAFV600E이다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 2종 이상의 돌연변이 단백질에 의해 매개된 장애, 예를 들어 BRAFV600E/NRASQ61K 이중 돌연변이체에 의해 매개된 암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 적어도 1종의 BRAF 억제제에 대해 저항성인 암, 예를 들어 다브라페닙, 트라메티닙, 베무라페닙 및 엔코라페닙으로부터 선택된 BRAF 억제제에 대해 저항성이거나 또는 그에 대한 저항성을 획득한 암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 회피 돌연변이가 발생한 암, 예컨대 BRAF V600E NRASQ61K 이중 돌연변이 암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 흑색종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 삼중 음성 유방암, 예를 들어 G464V BRAF 돌연변이체를 갖는 삼중 음성 유방암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 폐암, 예를 들어 G466V BRAF 돌연변이체를 갖는 폐 선암종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 V600 BRAF 돌연변이체를 갖는 흑색종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 담관암종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 에르드하임-체스터병을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 랑게르한스 조직구증을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 신경절교종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 신경교종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 GIST를 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 교모세포종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 모발상 세포 백혈병을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 다발성 골수종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 비소세포 폐암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 난소암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 필로믹소이드 성상세포종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 역형성 다형성 황색성상세포종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 성상세포종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 갑상선암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 유두상 갑상선암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 역형성 갑상선암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 췌장암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 흉부 투명 세포 육종을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 타액선암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 결장직장암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 미소위성체 안정한 결장직장암을 치료하는 데 사용된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 담관암종, 에르드하임-체스터병, 랑게르한스 조직구증, 신경절교종, 신경교종, GIST, 교모세포종, 모발상 세포 백혈병, 다발성 골수종, 폐암, 비소세포 폐암, 난소암, 필로믹소이드 성상세포종, 역형성 다형성 황색성상세포종, 성상세포종, 갑상선암, 유두상 갑상선암, 역형성 갑상선암, 췌장암, 흉부 투명 세포 육종, 타액선암, 결장직장암 및 미소위성체 안정한 결장직장암으로부터 선택된 장애를 치료하는 데 사용된다.
본 발명의 또 다른 측면은 증식성 질환을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 그를 필요로 하는 환자에게 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 그의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 또는 입체이성질체 또는 그의 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물 및 임의로 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함한다.
특정 실시양태에서, 질환 또는 장애는 암 또는 증식 질환이다.
특정 실시양태에서, BRAF 매개된 장애는 고형암 또는 혈액암을 포함하나 이에 제한되지는 않는 비정상적 세포 증식 질환이다.
특정 실시양태에서, 혈액암은 급성 골수 백혈병 (AML), 급성 림프모구성 백혈병 (ALL), 림프모구성 T-세포 백혈병, 만성 골수 백혈병 (CML), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 모발상-세포 백혈병, 만성 호중구성 백혈병 (CNL), 급성 림프모구성 T-세포 백혈병, 급성 단핵구성 백혈병, 형질세포종, 면역모세포성 대세포 백혈병, 외투 세포 백혈병, 다발성 골수종, 거핵모구성 백혈병, 급성 거핵구성 백혈병, 전골수구성 백혈병, 혼합 계열 백혈병 (MLL), 적백혈병, 악성 림프종, 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 림프모구성 T-세포 림프종, 버킷 림프종, 여포성 림프종, B 세포 급성 림프모구성 백혈병, 미만성 대 B 세포 림프종, Myc 및 B-세포 백혈병 (BCL)2 및/또는 BCL6 재배열/과다발현 [이중- 및 삼중-히트 림프종], 골수이형성/골수증식성 신생물, 외투 세포 림프종, 예컨대 보르테조밉 저항성 외투 세포 림프종이다.
본원에 기재된 화합물로 치료될 수 있는 고형 종양은 폐암, 예컨대 소세포 폐암 (SCLC) 및 비소세포 폐암 (NSCLC), 유방암, 예컨대 염증성 유방암, ER-양성 유방암, 예컨대 타목시펜 저항성 ER-양성 유방암 및 삼중 음성 유방암, 결장암, 정중선 암종, 간암, 신암, 전립선암, 예컨대 거세 저항성 전립선암 (CRPC), 뇌암, 예컨대 신경교종, 교모세포종, 신경모세포종 및 수모세포종, 예컨대 MYC-증폭된 수모세포종, 결장직장암, 윌름스 종양, 유잉 육종, 횡문근육종, 상의세포종, 두경부암, 흑색종, 편평 세포 암종, 난소암, 췌장암, 예컨대 췌장관 선암종 (PDAC) 및 췌장 신경내분비 종양 (PanNET), 골육종, 골의 거대 세포 종양, 갑상선암, 방광암, 요로상피암, 외음부암, 자궁경부암, 자궁내막암, 중피종, 식도암, 타액선암, 위암, 비인두암, 협부암, 구강암, GIST (위장 기질 종양), NUT-정중선 암종, 고환암, 편평 세포 암종, 간세포성 암종 (HCC), MYCN 유도된 고형 종양 및 NUT 정중선 암종 (NMC)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
추가 실시양태에서, 질환 또는 장애는 골, 근육, 힘줄, 연골, 신경, 지방 또는 혈관의 육종이다.
추가 실시양태에서, 질환 또는 장애는 연부 조직 육종, 골 육종 또는 골육종이다.
추가 실시양태에서, 질환 또는 장애는 혈관육종, 섬유육종, 지방육종, 평활근육종, 카포시 육종, 골육종, 위장 기질 종양, 활막 육종, 다형성 육종, 연골육종, 유잉 육종, 세망 세포 육종, 혈관육종, 포도상 육종, 횡문근육종 또는 배아성 횡문근육종이다.
특정 실시양태에서, 장애는 골, 근육, 힘줄, 연골, 신경, 지방 또는 혈관 육종이다.
다른 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 및 추가의 치료제를 포함하는 제약 조성물은 동시에 또는 순차적으로 투여된다.
다른 실시양태에서, 질환 또는 장애는 암이다. 추가 실시양태에서, 암은 폐암, 결장암, 유방암, 전립선암, 간암, 췌장암, 뇌암, 신장암, 난소암, 위암, 피부암, 골암, 위암, 유방암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 간세포성 암종, 유두상 신세포 암종, 두경부 편평 세포 암종, 백혈병, 림프종, 골수종, 고형 종양, 혈액암 또는 고형암이다.
본 출원의 한 측면은 과도한 또는 비정상적 세포 증식을 특징으로 하는 질환, 장애 및 상태의 치료에 유용한 화합물을 제공한다. 이러한 질환은 증식성 또는 과다증식성 질환을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 증식성 및 과다증식성 질환의 예는 암을 비제한적으로 포함한다. 용어 "암"은 하기 암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 유방암; 난소암; 자궁경부암; 전립선암; 고환암, 비뇨생식관암; 식도암; 후두암, 교모세포종; 신경모세포종; 위암; 피부암, 각화극세포종; 폐암, 표피양 암종, 대세포 암종, 소세포 암종, 폐 선암종; 골암; 결장암; 결장직장암; 선종; 췌장암, 선암종; 갑상선암, 여포성 암종, 미분화 암종, 유두상 암종; 정상피종; 흑색종; 육종; 방광 암종; 간 암종 및 담로암; 신장 암종; 골수성 장애; 림프성 장애, 호지킨병, 모발상 세포암; 협강 및 인두 (구강)암, 구순암, 설암, 구강암, 인두암; 소장암; 결장직장암, 대장암, 직장암, 뇌암 및 중추 신경계암; 만성 골수성 백혈병 (CML) 및 백혈병. 용어 "암"은 하기 암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 골수종, 림프종 또는 위암, 신암 또는 하기 암: 두경부암, 구인두암, 비소세포 폐암 (NSCLC), 자궁내막암, 간암종, 비-호지킨 림프종 및 폐암으로부터 선택된 암.
용어 "암"은 악성 신생물성 세포의 증식에 의해 유발된 임의의 암, 예컨대 종양, 신생물, 암종, 육종, 백혈병, 림프종 등을 지칭한다. 예를 들어, 암은 중피종, 백혈병 및 림프종 예컨대 피부 T-세포 림프종 (CTCL), 비피부 말초 T-세포 림프종, 인간 T-세포 림프친화성 바이러스 (HTLV)와 연관된 림프종, 예컨대 성인 T-세포 백혈병/림프종 (ATLL), B-세포 림프종, 급성 비림프구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수 백혈병, 급성 골수 백혈병, 림프종 및 다발성 골수종, 비-호지킨 림프종, 급성 림프성 백혈병 (ALL), 만성 림프성 백혈병 (CLL), 호지킨 림프종, 버킷 림프종, 성인 T-세포 백혈병 림프종, 급성-골수성 백혈병 (AML), 만성 골수성 백혈병 (CML) 또는 간세포성 암종을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 추가의 예는 골수이형성 증후군, 소아기 고형 종양, 예컨대 뇌 종양, 신경모세포종, 망막모세포종, 윌름스 종양, 골 종양 및 연부-조직 육종, 성인의 흔한 고형 종양, 예컨대 두경부암, 예컨대 구강암, 후두암, 비인두암 및 식도암, 비뇨생식기암, 예컨대 전립선암, 방광암, 신암, 자궁암, 난소암, 고환암, 폐암, 예컨대 소세포 및 비소세포 폐암, 유방암, 췌장암, 흑색종 및 다른 피부암, 위암, 뇌 종양, 골린 증후군과 관련된 종양, 예컨대 수모세포종 또는 수막종 및 간암을 포함한다.
암의 추가의 예시적인 형태는 골격근암 또는 평활근암, 위암, 소장암, 직장 암종, 타액선암, 자궁내막암, 부신암, 항문암, 직장암, 부갑상선암 및 뇌하수체암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 기재된 화합물이 예방, 치료 및 연구에 유용할 수 있는 추가의 암은, 예를 들어 결장 암종, 가족성 선종성 폴립증 암종 및 유전성 비-폴립증 결장직장암 또는 흑색종이다. 추가로, 암은 구순 암종, 후두 암종, 하인두 암종, 설 암종, 타액선 암종, 위 암종, 선암종, 갑상선암 (수질성 및 유두상 갑상선 암종), 신암종, 신장 실질 암종, 자궁경부 암종, 자궁체부 암종, 자궁내막 암종, 융모막 암종, 고환 암종, 비뇨기 암종, 흑색종, 뇌 종양 예컨대 교모세포종, 성상세포종, 수막종, 수모세포종 및 말초 신경외배엽 종양, 담낭 암종, 기관지 암종, 다발성 골수종, 기저세포암종, 기형종, 망막모세포종, 맥락막 흑색종, 정상피종, 횡문근육종, 두개인두종, 골육종, 연골육종, 근육종, 지방육종, 섬유육종, 유잉 육종 및 형질세포종을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 본 출원의 한 측면에서, 본 출원은 본원에 개시된 다양한 유형의 암을 비제한적으로 포함하는 암의 치료를 위한 의약의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 화합물의 용도를 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 출원의 화합물은 암, 예컨대 결장직장암, 갑상선암, 유방암 및 폐암; 및 골수증식성 장애, 예컨대 진성 다혈구혈증, 혈소판혈증, 골수섬유증을 동반한 골수 화생, 만성 골수 백혈병, 만성 골수단핵구성 백혈병, 과다호산구성 증후군, 소아 골수단핵구성 백혈병 및 전신 비만 세포 질환을 치료하는 데 유용하다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물은 조혈 장애, 특히 급성-골수 백혈병 (AML), 만성-골수 백혈병 (CML), 급성-전골수구성 백혈병 및 급성 림프구성 백혈병 (ALL)을 치료하는 데 유용하다.
특정 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 그의 상응하는 제약상 허용되는 염 또는 동위원소 유도체는 림프종 또는 림프구성 또는 골수구성 증식 장애 또는 이상을 갖는 숙주, 예를 들어 인간을 치료하기 위한 유효량으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 화합물은 호지킨 림프종 또는 비-호지킨 림프종을 앓고 있는 숙주에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 숙주는 비-호지킨 림프종, 예컨대 비제한적으로: AIDS-관련 림프종; 역형성 대세포 림프종; 혈관면역모세포성 림프종; 모구성 NK-세포 림프종; 버킷 림프종; 버킷-유사 림프종 (소 비분할 세포 림프종); 미만성 소분할 세포 림프종 (DSCCL); 만성 림프구성 백혈병/소림프구성 림프종; 피부 T-세포 림프종; 미만성 대 B-세포 림프종; 장병증-유형 T-세포 림프종; 여포성 림프종; 간비장 감마-델타 T-세포 림프종; 림프모구성 림프종; 외투 세포 림프종; 변연부 림프종; 비강 T-세포 림프종; 소아 림프종; 말초 T-세포 림프종; 원발성 중추 신경계 림프종; T-세포 백혈병; 형질전환된 림프종; 치료-관련 T-세포 림프종; 랑게르한스 세포 조직구증; 또는 발덴스트롬 마크로글로불린혈증을 앓고 있을 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 그의 상응하는 제약상 허용되는 염 또는 동위원소 유도체는 호지킨 림프종, 예컨대 비제한적으로: 결절성 경화성 전형적 호지킨 림프종 (CHL); 혼합 세포충실성 CHL; 림프구-고갈성 CHL; 림프구-충만성 CHL; 림프구 우세형 호지킨 림프종; 또는 결절성 림프구 우세형 HL을 갖는 환자, 예를 들어 인간을 치료하기 위한 유효량으로 사용될 수 있다.
본 출원은 세포 증식성 장애, 예컨대 증식증, 이형성증 및 전암성 병변의 치료 또는 예방을 추가로 포함한다. 이형성증은 병리학자에 의해 생검에서 인식가능한 가장 초기 형태의 전암성 병변이다. 화합물은 상기 증식증, 이형성증 또는 전암성 병변이 계속 확장되거나 또는 암성이 되는 것을 예방하기 위한 목적으로 투여될 수 있다. 전암성 병변의 예는 피부, 식도 조직, 유방 및 자궁경부 상피내 조직에서 발생할 수 있다.
상기에 따라, 본 출원은 상기 기재된 임의의 질환 또는 장애의 치료를 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 그의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 또는 입체이성질체 또는 그의 제약상 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 상기 기재된 임의의 질환 또는 장애를 예방 또는 치료하는 방법을 추가로 제공한다. 임의의 상기 용도를 위해, 요구되는 투여량은 투여 방식, 치료될 특정한 상태 및 목적하는 효과에 따라 달라질 것이다.
조합 요법
본원에 기재된 개시된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물은 본원에 기재된 것을 포함하나 이에 제한되지는 않는 돌연변이 BRAF 매개된 장애를 갖는 환자, 예컨대 인간을 치료하기 위해 단독으로 또는 본 발명의 또 다른 화합물 또는 또 다른 생물활성제 또는 제2 치료제와 조합되어 유효량으로 사용될 수 있다.
용어 "생물활성제" 또는 "추가의 활성제"는 요법의 목적하는 결과를 달성하기 위해 본 발명의 화합물과 조합되어 또는 교대로 사용될 수 있는, 본 발명에 따른 선택된 화합물 이외의 다른 작용제를 기재하는 데 사용된다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물 및 생물활성제는 이들이 중복되는 기간 동안 생체내 활성인 방식, 예를 들어 기간 중복되는 Cmax, Tmax, AUC 또는 또 다른 약동학적 파라미터를 갖는 방식으로 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 본 발명의 화합물 및 생물활성제는 중복되는 약동학적 파라미터를 갖지 않는, 그를 필요로 하는 환자에게 투여되지만, 하나는 다른 것의 치료 효능에 치료 영향을 미친다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 또 다른 BRAF 억제제, 예컨대 소라페닙, 베무라페닙 (젤보라프(ZELBORAF)®), 다브라페닙 (타핀라(TAFINLAR)®) 또는 엔코라페닙 (브라프토비(BRAFTOVI)®)과 조합되어 사용된다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 MEK 억제제이다. MEK 억제제는 널리 공지되어 있고, 예를 들어 트라메티닙/GSKl120212 (N-(3-{3-시클로프로필-5-[(2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노]-6,8-디메틸-2,4,7-트리옥소-3,4,6,7-테트라히드로피리도[4,3-d]피리미딘-l(2H-일}페닐)아세트아미드), 셀루메티닙 (6-(4-브로모-2-클로로아닐리노)-7-플루오로-N-(2-히드록시에톡시)-3-메틸벤즈이미다졸-5-카르복스아미드), 피마세르팁/AS703026/MSC 1935369 ((S)-N-(2,3-디히드록시프로필)-3-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)이소니코틴아미드), XL-518/GDC-0973 (1-({3,4-디플루오로-2-[(2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노]페닐}카르보닐)-3-[(2S)-피페리딘-2-일]아제티딘-3-올), 레파메티닙/BAY869766/RDEAl 19 (N-(3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-6-메톡시페닐)-1-(2,3-디히드록시프로필)시클로프로판-1-술폰아미드), PD-0325901 (N-[(2R)-2,3-디히드록시프로폭시]-3,4-디플루오로-2-[(2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노]-벤즈아미드), TAK733 ((R)-3-(2,3-디히드록시프로필)-6-플루오로-5-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-8-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-4,7(3H,8H)-디온), MEK162/ARRY438162 (5-[(4-브로모-2-플루오로페닐)아미노]-4-플루오로-N-(2-히드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복스아미드), R05126766 (3-[[3-플루오로-2-(메틸술파모일아미노)-4-피리딜]메틸]-4-메틸-7-피리미딘-2-일옥시크로멘-2-온), WX-554, R04987655/CH4987655 (3,4-디플루오로-2-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-N-(2-히드록시에톡시)-5-((3-옥소-1,2-옥사지난-2일)메틸)벤즈아미드), 또는 AZD8330 (2-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-N-(2 히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복스아미드), U0126-EtOH, PD184352 (CI-1040), GDC-0623, BI-847325, 코비메티닙, PD98059, BIX 02189, BIX 02188, 비니메티닙, SL-327, TAK-733, PD318088을 포함한다.
특정 실시양태에서, MEK 억제제는 트라메티닙이다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 결장직장암을 치료하기 위해 세툭시맙 또는 트라메티닙과 조합되어 사용된다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 결장직장암을 치료하기 위해 세툭시맙 및 BYL719와 조합되어 사용된다. 특정 실시양태에서 본 발명의 화합물은 결장직장암을 치료하기 위해 세툭시맙 및 이리노테칸과 조합되어 사용된다.
특정 실시양태에서, 화합물 157은 결장직장암을 치료하기 위해 세툭시맙 또는 트라메티닙과 조합되어 사용된다. 특정 실시양태에서, 화합물 157은 결장직장암을 치료하기 위해 세툭시맙 및 BYL719와 조합되어 사용된다. 특정 실시양태에서, 화합물 157은 결장직장암을 치료하기 위해 세툭시맙 및 이리노테칸과 조합되어 사용된다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 SHP2 억제제이다. 특정 실시양태에서, SHP2 억제제는 SHP099이다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 RAF 억제제이다. Raf 억제제의 비제한적 예는, 예를 들어 베무라페닙 (N-[3-[[5-(4-클로로페닐)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐]-1-프로판술폰아미드), 소라페닙 토실레이트 (4-[4-[[4-클로로-3-(트리플루오로메틸)페닐]카르바모일아미노]페녹시]-N-메틸피리딘-2-카르복스아미드;4-메틸벤젠술포네이트), AZ628 (3-(2-시아노프로판-2-일)-N-(4-메틸-3-(3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일아미노)페닐)벤즈아미드), NVP-BHG712 (4-메틸-3-(1-메틸-6-(피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일아미노)-N-(3-(트리플루오로메틸)페닐)벤즈아미드), RAF-265 (1-메틸-5-[2-[5-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸-2-일]피리딘-4-일]옥시-N-[4-(트리플루오로메틸)페닐]벤즈이미다졸-2-아민), 2-브로모알디신 (2-브로모-6,7-디히드로-1H,5H-피롤로[2,3-c]아제핀-4,8-디온), Raf 키나제 억제제 IV (2-클로로-5-(2-페닐-5-(피리딘-4-일)-1H-이미다졸-4-일)페놀), 소라페닙 N-옥시드 (4-[4-[[[[4-클로로-3(트리플루오로메틸)페닐]아미노]카르보닐]아미노]페녹시]-N-메틸-2피리딘카르복스아미드 1-옥시드), PLX-4720, 다브라페닙 (GSK2118436), GDC-0879, RAF265, AZ 628, SB590885, ZM336372, GW5074, TAK-632, CEP-32496, LY3009120, 및 GX818 (엔코라페닙 (브라프토비®))을 포함한다.
특정 실시양태에서 RAF 억제제는 엔코라페닙이다.
특정 실시양태에서 RAF 억제제는 베무라페닙이다.
특정 실시양태에서 RAF 억제제는 다브라페닙이다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 EGFR 억제제, 예컨대, 예를 들어 게피티닙 (이레사(IRESSA)®), 에를로티닙 (타르세바(TARCEVA)®), 라파티닙 (타이커브(TYKERB)®), 오시메르티닙 (타그리소(TAGRISSO)®), 네라티닙 (네르링스(NERLYNX)®), 반데타닙 (카프렐사(CAPRELSA)®), 다코미티닙 (비짐프로(VIZIMPRO)®), 로실레티닙 (제가프리(XEGAFRI)™), 아파티닙 (글로트리프(GLOTRIF)®, 글로트리프(GIOTRIFF)™, 아파닉스(AFANIX)™), 라제르티닙 또는 나자르팁이다.
EGFR 억제제의 추가의 예는 로실레티닙 (CO-1686), 올무티닙 (올리타(OLITA)™), 나쿠오티닙 (ASP8273), 나자르티닙 (EGF816), PF-06747775, 이코티닙 (BPI-2009), 네라티닙 (HKI-272; PB272); 아비티닙 (AC0010), EAI045, 타를록소티닙 (TH-4000; PR-610), PF-06459988 (화이자(Pfizer)), 테세바티닙 (XL647; EXEL-7647; KD-019), 트랜스티닙, WZ-3146, WZ8040, CNX-2006, 다코미티닙 (PF-00299804; 화이자), 브리가티닙 (알룬브리그(ALUNBRIG)®), 롤라티닙 및 PF-06747775 (PF7775)를 포함한다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 제1-세대 EGFR 억제제, 예컨대 에를로티닙, 게피티닙 또는 라파티닙이다. 특정 실시양태에서, 생물활성제는 제2-세대 EGFR 억제제, 예컨대 아파티닙 및/또는 다코미티닙이다. 특정 실시양태에서, 생물활성제는 제3-세대 EGFR 억제제, 예컨대 오시메르티닙이다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 오시메르티닙과 조합되어 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 로실레티닙과 조합되어 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 아비티닙과 조합되어 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 라제르티닙과 조합되어 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 나자르티닙과 조합되어 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 EGFR 항체, 예를 들어 세툭시맙, 파니투무맙 또는 네시투무맙과 조합되어 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 세툭시맙과 조합되어 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 파니투무맙과 조합되어 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 네시투무맙과 조합되어 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다.
이러한 실시양태의 한 측면에서, 생물활성제는 PD-1 억제제, PD-L1 억제제, PD-L2 억제제, CTLA-4 억제제, LAG-3 억제제, TIM-3 억제제, T-세포 활성화의 V-도메인 Ig 억제제 (VISTA) 억제제, 소분자, 펩티드, 뉴클레오티드 또는 또 다른 억제제를 비제한적 예로서 포함하는 체크포인트 억제제를 포함하나 이에 제한되지는 않는 면역 조정제이다. 특정 측면에서, 면역 조정제는 항체, 예컨대 모노클로날 항체이다.
PD-1 수용체에 결합함으로써 PD-1과 PD-L1의 상호작용을 차단하고, 차례로 면역 억제를 억제하는 PD-1 억제제는, 예를 들어 니볼루맙 (옵디보(OPDIVO)®), 펨브롤리주맙 (키트루다(KEYTRUDA)®), 피딜리주맙, AMP-224 (아스트라제네카(AstraZeneca) 및 메드이뮨(MedImmune)), PF-06801591 (화이자), MEDI0680 (아스트라제네카), PDR001 (노파르티스(Novartis)), REGN2810 (레게네론(Regeneron)), SHR-12-1 (지앙수 헹루이 메디신 캄파니 앤드 인사이트 코포레이션(Jiangsu Hengrui Medicine Company and Incyte Corporation)), TSR-042 (글락소스미스클라인 피엘씨(GlaxoSmithKline plc)) 및 PD-L1/VISTA 억제제 CA-170 (큐리스 인크.(Curis Inc.))을 포함한다. PD-L1 수용체에 결합함으로써 PD-1과 PD-L1의 상호작용을 차단하고, 차례로 면역 억제를 억제하는 PD-L1 억제제는, 예를 들어 아테졸리주맙 (테센트릭(TECENTRIQ)®), 두르발루맙 (아스트라제네카 및 메드이뮨), KN035 (알파맙 캄파니 리미티드(Alphamab Co. Ltd.)) 및 BMS-936559 (브리스톨-마이어스 스큅(Bristol-Myers Squibb))를 포함한다. CTLA-4에 결합하고 면역 억제를 억제하는 CTLA-4 체크포인트 억제제는 이필리무맙, 트레멜리무맙 (아스트라제네카 및 메드이뮨), AGEN1884 및 AGEN2041 (아제누스(Agenus))을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. LAG-3 체크포인트 억제제는 BMS-986016 (브리스톨-마이어스 스큅), GSK2831781 (글락소스미스클라인 피엘씨), IMP321 (프리마 바이오메드(Prima BioMed)), LAG525 (노파르티스) 및 이중 PD-1 및 LAG-3 억제제 MGD013 (마크로제닉스(MacroGenics))을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. TIM-3 억제제의 예는 TSR-022 (글락소스미스클라인 피엘씨)이다.
특정 실시양태에서, 체크포인트 억제제는 니볼루맙 (옵디보®); 펨브롤리주맙 (키트루다®); 및 피딜리주맙/CT-011, MPDL3280A/RG7446; MEDI4736; MSB0010718C; BMS 936559, PDL2/Ig 융합 단백질, 예컨대 AMP 224 또는 B7-H3의 억제제 (예를 들어, MGA271), B7-H4, BTLA, HVEM, TIM3, GAL9, LAG 3, VISTA, KIR, 2B4, CD160, CGEN-15049, CHK1, CHK2, A2aR, B-7 패밀리 리간드 또는 그의 조합으로부터 선택된다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 활성 화합물 중 1종 이상은 여성 생식기계의 비정상적 조직, 예컨대 유방암, 난소암, 자궁내막암 또는 자궁암의 치료를 위한 유효량으로, SERM (선택적 에스트로겐 수용체 조정제), SERD (선택적 에스트로겐 수용체 분해제), 완전 에스트로겐 수용체 분해제, 또는 또 다른 형태의 부분 또는 완전 에스트로겐 길항제 또는 효능제를 포함하나 이에 제한되지는 않는 에스트로겐 억제제의 유효량과 조합되어 또는 교대로 투여될 수 있다. 부분적 항에스트로겐, 예컨대 랄록시펜 및 타목시펜은 자궁 성장의 에스트로겐-유사 자극을 포함한 일부 에스트로겐-유사 효과, 및 또한 일부 경우에, 실제로 종양 성장을 자극하는 유방암 진행 동안의 에스트로겐-유사 작용을 보유한다. 대조적으로, 완전한 항에스트로겐인 풀베스트란트는 자궁에 대한 에스트로겐-유사 작용이 없고, 타목시펜-저항성 종양에 효과적이다.
항에스트로겐 화합물의 비제한적 예는 아스트라 제네카에게 양도된 WO 2014/19176, 올레마 파마슈티칼스(Olema Pharmaceuticals)에게 양도된 WO2013/090921, WO 2014/203129, WO 2014/203132 및 US2013/0178445, 및 미국 특허 번호 9,078,871, 8,853,423 및 8,703,810, 뿐만 아니라 US 2015/0005286, WO 2014/205136 및 WO 2014/205138에 제공된다.
항에스트로겐 화합물의 추가의 비제한적 예는 SERM, 예컨대 아노르드린, 바제독시펜, 브로파레스트리올, 클로로트리아니센, 클로미펜 시트레이트, 시클로페닐, 라소폭시펜, 오르멜록시펜, 랄록시펜, 타목시펜, 토레미펜 및 풀베스트란트; 아로마타제 억제제, 예컨대 아미노글루테티미드, 테스토락톤, 아나스트로졸, 엑세메스탄, 파드로졸, 포르메스탄 및 레트로졸; 및 항고나도트로핀, 예컨대 류프로렐린, 세트로렐릭스, 알릴에스트레놀, 클로르마디논 아세테이트, 시프로테론 아세테이트, 델마디논 아세테이트, 디드로게스테론, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 노메게스트롤 아세테이트, 노르에티스테론 아세테이트, 프로게스테론 및 스피로노락톤을 포함한다.
본 발명에 따라 사용될 수 있는 다른 에스트로겐 리간드는 미국 특허 번호 4,418,068; 5,478,847; 5,393,763; 및 5,457,117, WO2011/156518, 미국 특허 번호 8,455,534 및 8,299,112, 미국 특허 번호 9,078,871; 8,853,423; 8,703,810; US 2015/0005286; 및 WO 2014/205138, US2016/0175289, US2015/0258080, WO 2014/191726, WO 2012/084711; WO 2002/013802; WO 2002/004418; WO 2002/003992; WO 2002/003991; WO 2002/003990; WO 2002/003989; WO 2002/003988; WO 2002/003986; WO 2002/003977; WO 2002/003976; WO 2002/003975; WO 2006/078834; US 6821989; US 2002/0128276; US 6777424; US 2002/0016340; US 6326392; US 6756401; US 2002/0013327; US 6512002; US 6632834; US 2001/0056099; US 6583170; US 6479535; WO 1999/024027; US 6005102; EP 0802184; US 5998402; US 5780497, US 5880137, WO 2012/048058 및 WO 2007/087684에 기재되어 있다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 활성 화합물은 남성 생식기계의 비정상적 조직, 예컨대 전립선암 또는 고환암의 치료를 위한 유효량으로, 선택적 안드로겐 수용체 조정제, 선택적 안드로겐 수용체 분해제, 완전 안드로겐 수용체 분해제, 또는 또 다른 형태의 부분 또는 완전 안드로겐 길항제를 포함하나 이에 제한되지는 않는 안드로겐 (예컨대 테스토스테론) 억제제의 유효량과 조합되어 또는 교대로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 전립선암 또는 고환암은 안드로겐 저항성이다.
항안드로겐 화합물의 비제한적 예는 WO 2011/156518 및 미국 특허 번호 8,455,534 및 8,299,112에 제공된다. 항안드로겐 화합물의 추가의 비제한적 예는 엔잘루타미드, 아팔루타미드, 시프로테론 아세테이트, 클로르마디논 아세테이트, 스피로노락톤, 칸레논, 드로스피레논, 케토코나졸, 토필루타미드, 아비라테론 아세테이트 및 시메티딘을 포함한다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 ALK 억제제이다. ALK 억제제의 예는 크리조티닙 (잘코리(XALKORI)®), 알렉티닙 (알레센사(ALECENSA)®), 세리티닙, TAE684 (NVP-TAE684), GSK1838705A, AZD3463, ASP3026, PF-06463922, 엔트렉티닙 (RXDX-101) 및 AP26113을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 HER-2 억제제이다. HER-2 억제제의 예는 트라스투주맙, 라파티닙, 아도-트라스투주맙 엠탄신 및 페르투주맙을 포함한다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 CD20 억제제이다. CD20 억제제의 예는 오비누투주맙 (가지바(GAZYVA)®), 리툭시맙 (리툭산(RITUXAN)®), 오파투무맙, 이브리투모맙, 토시투모맙 및 오크렐리주맙을 포함한다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 JAK3 억제제이다. JAK3 억제제의 예는 타소시티닙을 포함한다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 BCL-2 억제제이다. BCL-2 억제제의 예는 베네토클락스, ABT-199 (4-[4-[[2-(4-클로로페닐)-4,4-디메틸시클로헥스-1-엔-1-일]메틸]피페라진-1-일]-N-[[3-니트로-4-[[(테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸]아미노]페닐]술포닐]-2-[(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일)옥시]벤즈아미드), ABT-737 (4-[4-[[2-(4-클로로페닐)페닐]메틸]피페라진-1-일]-N-[4-[[(2R)-4-(디메틸아미노)-1-페닐술파닐부탄-2-일]아미노]-3-니트로페닐]술포닐벤즈아미드) (나비토클락스), ABT-263 ((R)-4-(4-((4'-클로로-4,4-디메틸-3,4,5,6-테트라히드로-[1,1'-비페닐]-2-일)메틸)피페라진-1-일)-N-((4-((4-모르폴리노-1-(페닐티오)부탄-2-일)아미노)-3((트리플루오로메틸)술포닐)페닐)술포닐)벤즈아미드), GX15-070 (오바토클락스 메실레이트, (2Z)-2-[(5Z)-5-[(3,5-디메틸-1H-피롤-2-일)메틸리덴]-4-메톡시피롤-2-일리덴]인돌; 메탄술폰산))), 2-메톡시-안티마이신 A3, YC137 (4-(4,9-디옥소-4,9-디히드로나프토[2,3-d]티아졸-2-일아미노)-페닐 에스테르), 포고신, 에틸 2-아미노-6-브로모-4-(1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸)-4H-크로멘-3-카르복실레이트, 닐로티닙-d3, TW-37 (N-[4-[[2-(1,1-디메틸에틸)페닐]술포닐]페닐]-2,3,4-트리히드록시-5-[[2-(1-메틸에틸)페닐]메틸]벤즈아미드), 아포고시폴론 (ApoG2), HA14-1, AT101, 사부토클락스, 감보그산 또는 G3139 (오블리메르센)를 포함한다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 키나제 억제제이다. 특정 실시양태에서, 키나제 억제제는 포스포이노시티드 3-키나제 (PI3K) 억제제, 브루톤 티로신 키나제 (BTK) 억제제 또는 비장 티로신 키나제 (Syk) 억제제 또는 그의 조합으로부터 선택된다.
PI3 키나제 억제제의 예는 워트만닌, 데메톡시비리딘, 페리포신, 이델랄리십, 픽틸리십, 팔로미드 529, ZSTK474, PWT33597, CUDC-907 및 AEZS-136, 두벨리십, GS-9820, BKM120, GDC-0032 (타셀리십) (2-[4-[2-(2-이소프로필-5-메틸-1,2,4-트리아졸-3-일)-5,6-디히드로이미다조[1,2-d][1,4]벤족사제핀-9-일]피라졸-1-일]-2-메틸프로판아미드), MLN-1117 ((2R)-1-페녹시-2-부타닐 수소 (S)-메틸포스포네이트; 또는 메틸(옥소) {[(2R)-1-페녹시-2-부타닐]옥시}포스포늄)), BYL-719 ((2S)-N1-[4-메틸-5-[2-(2,2,2-트리플루오로-1,1-디메틸에틸)-4-피리디닐]-2-티아졸릴]-1,2-피롤리딘디카르복스아미드), GSK2126458 (2,4-디플루오로-N-{2-(메틸옥시)-5-[4-(4-피리다지닐)-6-퀴놀리닐]-3-피리디닐}벤젠술폰아미드) (오미팔리십), TGX-221 ((±)-7-메틸-2-(모르폴린-4-일)-9-(1-페닐아미노에틸)-피리도[1,2-a]-피리미딘-4-온), GSK2636771 (2-메틸-1-(2-메틸-3-(트리플루오로메틸)벤질)-6-모르폴리노-1H-벤조[d]이미다졸-4-카르복실산 디히드로클로라이드), KIN-193 ((R)-2-((1-(7-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-9-일)에틸)아미노)벤조산), TGR-1202/RP5264, GS-9820 ((S)-1-(4-((2-(2-아미노피리미딘-5-일)-7-메틸-4-모히드록시프로판-1-온), GS-1101 (5-플루오로-3-페닐-2-([S)]-1-[9H-퓨린-6-일아미노]-프로필)-3H-퀴나졸린-4-온), AMG-319, GSK-2269557, SAR245409 (N-(4-(N-(3-((3,5-디메톡시페닐)아미노)퀴녹살린-2-일)술파모일)페닐)-3-메톡시-4 메틸벤즈아미드), BAY80-6946 (2-아미노-N-(7-메톡시-8-(3-모르폴리노프로폭시)-2,3-디히드로이미다조[1,2-c]퀴나즈), AS 252424 (5-[1-[5-(4-플루오로-2-히드록시-페닐)-푸란-2-일]-메트-(Z)-일리덴]-티아졸리딘-2,4-디온), CZ 24832 (5-(2-아미노-8-플루오로-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-N-tert-부틸피리딘-3-술폰아미드), 부파를리십 (5-[2,6-디(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]-4-(트리플루오로메틸)-2-피리딘아민), GDC-0941 (2-(1H-인다졸-4-일)-6-[[4-(메틸술포닐)-1-피페라지닐]메틸]-4-(4-모르폴리닐)티에노[3,2-d]피리미딘), GDC-0980 ((S)-1-(4-((2-(2-아미노피리미딘-5-일)-7-메틸-4-모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘-6 일)메틸)피페라진-1-일)-2-히드록시프로판-1-온 (RG7422로도 또한 공지됨)), SF1126 ((8S,14S,17S)-14-(카르복시메틸)-8-(3-구아니디노프로필)-17-(히드록시메틸)-3,6,9,12,15-펜타옥소-1-(4-(4-옥소-8-페닐-4H-크로멘-2-일)모르폴리노-4-윰)-2-옥사-7,10,13,16-테트라아자옥타데칸-18-오에이트), PF-05212384 (N-[4-[[4-(디메틸아미노)-1-피페리디닐]카르보닐]페닐]-N'-[4-(4,6-디-4-모르폴리닐-1,3,5-트리아진-2-일)페닐]우레아) (게다톨리십), LY3023414, BEZ235 (2-메틸-2-{4-[3-메틸-2-옥소-8-(퀴놀린-3-일)-2,3-디히드로-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-1-일]페닐}프로판니트릴) (닥톨리십), XL-765 (N-(3-(N-(3-(3,5-디메톡시페닐아미노)퀴녹살린-2-일)술파모일)페닐)-3-메톡시-4-메틸벤즈아미드), 및 GSK1059615 (5-[[4-(4-피리디닐)-6-퀴놀리닐]메틸렌]-2,4-티아졸리덴디온), PX886 ([(3aR,6E,9S,9aR,10R,11aS)-6-[[비스(프로프-2-에닐)아미노]메틸리덴]-5-히드록시-9-(메톡시메틸)-9a,11a-디메틸-1,4,7-트리옥소-2,3,3a,9,10,11-헥사히드로인데노[4,5h]이소크로멘-10-일] 아세테이트 (소놀리십으로도 또한 공지됨)), LY294002, AZD8186, PF-4989216, 필라랄리십, GNE-317, PI-3065, PI-103, NU7441 (KU-57788), HS 173, VS-5584 (SB2343), CZC24832, TG100-115, A66, YM201636, CAY10505, PIK-75, PIK-93, AS-605240, BGT226 (NVP-BGT226), AZD6482, 복스탈리십, 알펠리십, IC-87114, TGI100713, CH5132799, PKI-402, 코판리십 (BAY 80-6946), XL 147, PIK-90, PIK-293, PIK-294, 3-MA (3-메틸아데닌), AS-252424, AS-604850, 아피톨리십 (GDC-0980; RG7422)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
BTK 억제제의 예는 이브루티닙 (PCI-32765로도 또한 공지됨) (임브루비카(IMBRUVICA)®) (1-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시-페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]피페리딘-1-일]프로프-2-엔-1-온), 디아닐리노피리미딘-기재 억제제, 예컨대 AVL-101 및 AVL-291/292 (N-(3-((5-플루오로-2-((4-(2-메톡시에톡시)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드) (아빌라 테라퓨틱스(Avila Therapeutics)) (미국 특허 공개 번호 2011/0117073 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), 다사티닙 ([N-(2-클로로-6-메틸페닐)-2-(6-(4-(2-히드록시에틸)피페라진-1-일)-2-메틸피리미딘-4-일아미노)티아졸-5-카르복스아미드], LFM-A13 (알파-시아노-베타-히드록시-베타-메틸-N-(2,5-디브로모페닐)프로펜아미드), GDC-0834 ([R-N-(3-(6-(4-(1,4-디메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-디히드로피라진-2-일)-2-메틸페닐)-4,5,6,7-테트라히드로벤조[b]티오펜-2-카르복스아미드], CGI-560 4-(tert-부틸)-N-(3-(8-(페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-6-일)페닐)벤즈아미드, CGI-1746 (4-(tert-부틸)-N-(2-메틸-3-(4-메틸-6-((4-(모르폴린-4-카르보닐)페닐)아미노)-5-옥소-4,5-디히드로피라진-2-일)페닐)벤즈아미드), CNX-774 (4-(4-((4-((3-아크릴아미도페닐)아미노)-5-플루오로피리미딘-2-일)아미노)페녹시)-N-메틸피콜린아미드), CTA056 (7-벤질-1-(3-(피페리딘-1-일)프로필)-2-(4-(피리딘-4-일)페닐)-1H-이미다조[4,5-g]퀴녹살린-6(5H)-온), GDC-0834 ((R)-N-(3-(6-((4-(1,4-디메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐)아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-디히드로피라진-2-일)-2-메틸페닐)-4,5,6,7-테트라히드로벤조[b]티오펜-2-카르복스아미드), GDC-0837 ((R)-N-(3-(6-((4-(1,4-디메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐)아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-디히드로피라진-2-일)-2-메틸페닐)-4,5,6,7-테트라히드로벤조[b]티오펜-2-카르복스아미드), HM-71224, ACP-196, ONO-4059 (오노 파마슈티칼(Ono Pharmaceuticals)), PRT062607 (4-((3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)페닐)아미노)-2-(((1R,2S)-2-아미노시클로헥실)아미노)피리미딘-5-카르복스아미드 히드로클로라이드), QL-47 (1-(1-아크릴로일인돌린-6-일)-9-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤조[h][1,6]나프티리딘-2(1H)-온), 및 RN486 (6-시클로프로필-8-플루오로-2-(2-히드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-디히드로-피리딘-3-일}-페닐)-2H-이소퀴놀린-1-온), 및 BTK 활성을 억제할 수 있는 다른 분자, 예를 들어 문헌 [Akinleye et ah, Journal of Hematology & Oncology, 2013, 6:59] (이의 전문은 본원에 참조로 포함됨)에 개시된 BTK 억제제를 포함한다.
Syk 억제제는 세르둘라티닙 (4-(시클로프로필아미노)-2-((4-(4-(에틸술포닐)피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-5-카르복스아미드), 엔토스플레티닙 (6-(1H-인다졸-6-일)-N-(4-모르폴리노페닐)이미다조[1,2-a]피라진-8-아민), 포스타마티닙 ([6-({5-플루오로-2-[(3,4,5-트리메톡시페닐)아미노]-4-피리미디닐}아미노)-2,2-디메틸-3-옥소-2,3-디히드로-4H-피리도[3,2-b][1,4]옥사진-4-일]메틸 디히드로겐 포스페이트), 포스타마티닙 이나트륨 염 (소듐 (6-((5-플루오로-2-((3,4,5-트리메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-2,2-디메틸-3-옥소-2H-피리도[3,2-b][1,4]옥사진-4(3H)-일)메틸 포스페이트), BAY 61-3606 (2-(7-(3,4-디메톡시페닐)-이미다조[1,2-c]피리미딘-5-일아미노)-니코틴아미드 HCl), RO9021 (6-[(1R,2S)-2-아미노-시클로헥실아미노]-4-(5,6-디메틸-피리딘-2-일아미노)-피리다진-3-카르복실산 아미드), 이마티닙 (글리벡(GLEEVEC)®; 4-[(4-메틸피페라진-1-일)메틸]-N-(4-메틸-3-{[4-(피리딘-3-일)피리미딘-2-일]아미노}페닐)벤즈아미드), 스타우로스포린, GSK143 (2-(((3R,4R)-3-아미노테트라히드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-(p-톨릴아미노)피리미딘-5-카르복스아미드), PP2 (1-(tert-부틸)-3-(4-클로로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민), PRT-060318 (2-(((1R,2S)-2-아미노시클로헥실)아미노)-4-(m-톨릴아미노)피리미딘-5-카르복스아미드), PRT-062607 (4-((3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)페닐)아미노)-2-(((1R,2S)-2-아미노시클로헥실)아미노)피리미딘-5-카르복스아미드 히드로클로라이드), R112 (3,3'-((5-플루오로피리미딘-2,4-디일)비스(아잔디일))디페놀), R348 (3-에틸-4-메틸피리딘), R406 (6-((5-플루오로-2-((3,4,5-트리메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-2,2-디메틸-2H-피리도[3,2-b][1,4]옥사진-3(4H)-온), 피세아타놀 (3-히드록시레스베라톨), YM193306 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), 7-아자인돌, 피세아타놀, ER-27319 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), 화합물 D (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), PRT060318 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), 루테올린 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), 아피게닌 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), 퀘르세틴 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), 피세틴 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), 미리세틴 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨), 모린 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조, 그 전문이 본원에 포함됨)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 c-MET 억제제, 예를 들어 크리조티닙 (잘코리®, 크리조닉스(CRIZONIX)™), 테포티닙 (XL880, EXEL-2880, GSK1363089, GSK089) 또는 티반티닙 (ARQ197)이다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 MK-2206, GSK690693, 페리포신 (KRX-0401), GDC-0068, 트리시리빈, AZD5363, 호노키올, PF-04691502 및 밀테포신을 포함하나 이에 제한되지는 않는 AKT 억제제, P406, 도비티닙, 퀴자르티닙 (AC220), 아무바티닙 (MP-470), 탄두티닙 (MLN518), ENMD-2076 및 KW-2449를 포함하나 이에 제한되지는 않는 FLT-3 억제제 또는 그의 조합이다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 mTOR 억제제이다. mTOR 억제제의 예는 라파마이신 및 그의 유사체, 에베롤리무스 (아피니토르(AFINITOR)®), 템시롤리무스, 리다포롤리무스, 시롤리무스 및 데포롤리무스를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 RAS 억제제이다. RAS 억제제의 예는 레올리신 및 siG12D LODER을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 HSP 억제제이다. HSP 억제제는 겔다나마이신 또는 17-N-알릴아미노-17-데메톡시겔다나마이신 (17AAG) 및 라디시콜을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
추가의 생물활성 화합물은, 예를 들어 에베롤리무스, 트라벡테딘, 아브락산, TLK 286, AV-299, DN-101, 파조파닙, GSK690693, RTA 744, ON 0910.Na, AZD 6244 (ARRY-142886), AMN-107, TKI-258, GSK461364, AZD 1152, 엔자스타우린, 반데타닙, ARQ-197, MK-0457, MLN8054, PHA-739358, R-763, AT-9263, FLT-3 억제제, VEGFR 억제제, 오로라 키나제 억제제, PIK-1 조정제, HDAC 억제제, c-MET 억제제, PARP 억제제, Cdk 억제제, IGFR-TK 억제제, 항-HGF 항체, 국소 부착 키나제 억제제, Map 키나제 (MEK) 억제제, VEGF 트랩 항체, 페메트렉세드, 파니투무맙, 암루비신, 오레고보맙, Lep-etu, 놀라트렉세드, azd2171, 바타불린, 오파투무맙, 자놀리무맙, 에도테카린, 테트란드린, 루비테칸, 테스밀리펜, 오블리메르센, 티실리무맙, 이필리무맙, 고시폴, Bio 111, 131-I-TM-601, ALT-110, BIO 140, CC 8490, 실렌기티드, 기마테칸, IL13-PE38QQR, INO 1001, IPdR1 KRX-0402, 루칸톤, LY317615, 뉴라디압, 비테스판, Rta 744, Sdx 102, 탈람파넬, 아트라센탄, Xr 311, 로미뎁신, ADS-100380, 수니티닙, 5-플루오로우라실, 보리노스타트, 에토포시드, 겜시타빈, 독소루비신, 리포솜 독소루비신, 5'-데옥시-5-플루오로우리딘, 빈크리스틴, 테모졸로미드, ZK-304709, 셀리시클립; PD0325901, AZD-6244, 카페시타빈, L-글루탐산, N-[4-[2-(2-아미노-4,7-디히드로-4-옥소-1H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)에틸]벤조일]-, 이나트륨 염, 7수화물, 캄프토테신, PEG-표지된 이리노테칸, 타목시펜, 토레미펜 시트레이트, 아나스트라졸, 엑세메스탄, 레트로졸, DES(디에틸스틸베스트롤), 에스트라디올, 에스트로겐, 결합형 에스트로겐, 베바시주맙, IMC-1C11, CHIR-258); 3-[5-(메틸술포닐피페라딘메틸)-인돌릴-퀴놀론, 바탈라닙, AG-013736, AVE-0005, 고세렐린 아세테이트, 류프롤리드 아세테이트, 트립토렐린 파모에이트, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 히드록시프로게스테론 카프로에이트, 메게스트롤 아세테이트, 랄록시펜, 비칼루타미드, 플루타미드, 닐루타미드, 메게스트롤 아세테이트, CP-724714; TAK-165, HKI-272, 라파타닙, 카네르티닙, ABX-EGF 항체, 에르비툭스, EKB-569, PKI-166, GW-572016, 이오나파르닙, BMS-214662, 티피파르닙; 아미포스틴, NVP-LAQ824, 수베로일 아닐리드 히드록삼산, 발프로산, 트리코스타틴 A, FK-228, SU11248, 소라페닙, KRN951, 아미노글루테티미드, 암사크린, 아나그렐리드, L-아스파라기나제, 바실루스 칼메트-게랭 (BCG) 백신, 아드리아마이신, 블레오마이신, 부세렐린, 부술판, 카르보플라틴, 카르무스틴, 클로람부실, 시스플라틴, 클라드리빈, 클로드로네이트, 시프로테론, 시타라빈, 다카르바진, 닥티노마이신, 다우노루비신, 디에틸스틸베스트롤, 에피루비신, 플루다라빈, 플루드로코르티손, 플루옥시메스테론, 플루타미드, 글리벡®, 겜시타빈, 히드록시우레아, 이다루비신, 이포스파미드, 이마티닙, 류프롤리드, 레바미솔, 로무스틴, 메클로레타민, 멜팔란, 6-메르캅토퓨린, 메스나, 메토트렉세이트, 미토마이신, 미토탄, 미톡산트론, 닐루타미드, 옥트레오티드, 옥살리플라틴, 파미드로네이트, 펜토스타틴, 플리카마이신, 포르피머, 프로카르바진, 랄티트렉세드, 리툭시맙, 스트렙토조신, 테니포시드, 테스토스테론, 탈리도미드, 티오구아닌, 티오테파, 트레티노인, 빈데신, 13-시스-레티노산, 페닐알라닌 머스타드, 우라실 머스타드, 에스트라무스틴, 알트레타민, 플록수리딘, 5-데옥시우리딘, 시토신 아라비노시드, 6-메르캅토퓨린, 데옥시코포르마이신, 칼시트리올, 발루비신, 미트라마이신, 빈블라스틴, 비노렐빈, 토포테칸, 라족신, 마리마스타트, COL-3, 네오바스타트, BMS-275291, 스쿠알라민, 엔도스타틴, SU5416, SU6668, EMD121974, 인터류킨-12, IM862, 안지오스타틴, 비탁신, 드롤록시펜, 이독시펜, 스피로노락톤, 피나스테리드, 시메티딘, 트라스투주맙, 데니류킨 디프티톡스, 게피티닙, 보르테조밉, 파클리탁셀, 크레모포르-유리 파클리탁셀, 도세탁셀, 에피틸론 B, BMS-247550, BMS-310705, 드롤록시펜, 4-히드록시타목시펜,피펜독시펜, ERA-923, 아르족시펜, 풀베스트란트, 아콜비펜, 라소폭시펜, 이독시펜, TSE-424, HMR-3339, ZK186619, 토포테칸, PTK787/ZK 222584, VX-745, PD 184352, 라파마이신, 40-O-(2-히드록시에틸)-라파마이신, 템시롤리무스, AP-23573, RAD001, ABT-578, BC-210, LY294002, LY292223, LY292696, LY293684, LY293646, 워트만닌, ZM336372, L-779,450, PEG-필그라스팀, 다르베포에틴, 에리트로포이에틴, 과립구 콜로니-자극 인자, 졸렌드로네이트, 프레드니손, 세툭시맙, 과립구 대식세포 콜로니-자극 인자, 히스트렐린, PEG화 인터페론 알파-2a, 인터페론 알파-2a, PEG화 인터페론 알파-2b, 인터페론 알파-2b, 아자시티딘, PEG-L-아스파라기나제, 레날리도미드, 겜투주맙, 히드로코르티손, 인터류킨-11, 덱스라족산, 알렘투주맙, 올-트랜스레티노산, 케토코나졸, 인터류킨-2, 메게스트롤, 면역 글로불린, 질소 머스타드, 메틸프레드니솔론, 이브리투모맙 티욱세탄, 안드로겐, 데시타빈, 헥사메틸멜라민, 벡사로텐, 토시투모맙, 삼산화비소, 코르티손, 에티드로네이트, 미토탄, 시클로스포린, 리포솜 다우노루비신, 에르위니아-아스파라기나제, 스트론튬 89, 카소피탄트, 네투피탄트, NK-1 수용체 길항제, 팔로노세트론, 아프레피탄트, 디펜히드라민, 히드록시진, 메토클로프라미드, 로라제팜, 알프라졸람, 할로페리돌, 드로페리돌, 드로나비놀, 덱사메타손, 메틸프레드니솔론, 프로클로르페라진, 그라니세트론, 온단세트론, 돌라세트론, 트로피세트론, 페그필그라스팀, 에리트로포이에틴, 에포에틴 알파, 다르베포에틴 알파 및 그의 혼합물을 포함한다.
특정 실시양태에서, 화합물은 이포스파미드와 조합되어 투여된다.
특정 실시양태에서, 생물활성제는 이마티닙 메실레이트 (글리벡(GLEEVEC)®), 다사티닙 (스프리셀(SPRYCEL)®), 닐로티닙 (타시그나(TASIGNA)®), 보수티닙 (보술리프(BOSULIF)®), 트라스투주맙 (헤르셉틴(HERCEPTIN)®), 트라스투주맙-DM1, 페르투주맙 (페르제타(PERJETA)®), 라파티닙 (타이커브(TYKERB)®), 게피티닙 (이레사(IRESSA)®), 에를로티닙 (타르세바(TARCEVA)®), 세툭시맙 (에르비툭스(ERBITUX)®), 파니투무맙 (벡티빅스(VECTIBIX)®), 반데타닙 (카프렐사(CAPRELSA)®), 베무라페닙 (젤보라프(ZELBORAF)®), 보리노스타트 (졸린자(ZOLINZA)®), 로미뎁신 (이스토닥스(ISTODAX)®), 벡사로텐 (타그레틴(TAGRETIN)®), 알리트레티노인 (판레틴(PANRETIN)®), 트레티노인 (베사노이드(VESANOID)®), 카르필조밉 (키프롤리스(KYPROLIS)®), 프랄라트렉세이트 (폴로틴(FOLOTYN)®), 베바시주맙 (아바스틴(AVASTIN)®), 지브-아플리베르셉트 (잘트랩(ZALTRAP)®), 소라페닙 (넥사바르(NEXAVAR)®), 수니티닙 (수텐트(SUTENT)®), 파조파닙 (보트리엔트(VOTRIENT)®), 레고라페닙 (스티바르가(STIVARGA)®) 및 카보잔티닙 (코메트리크(COMETRIQ)®)으로부터 선택되나 이에 제한되지는 않는다.
특정 측면에서, 생물활성제는 항염증제, 화학요법제, 방사선요법제, 추가의 치료제 또는 면역억제제이다.
적합한 화학요법 생물활성제는 방사성 분자, 세포의 생존에 유해한 임의의 작용제를 포함하는, 세포독소 또는 세포독성제로도 또한 지칭되는 독소, 및 화학요법 화합물을 함유하는 리포솜 또는 다른 소포를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일반적인 항암 제약 작용제는 빈크리스틴 (온코빈(ONCOVINE)®) 또는 리포솜 빈크리스틴 (마르퀴보(MARQIBO)®), 다우노루비신 (다우노마이신 또는 세루비딘(CERUBIDINE)®) 또는 독소루비신 (아드리아마이신(ADRIAMYCIN)®), 시타라빈 (시토신 아라비노시드, ara-C 또는 시토사르(CYTOSAR)®), L-아스파라기나제 (엘스파르(ELSPAR)®) 또는 PEG-L-아스파라기나제 (페가스파르가제 또는 온카스파르(ONCASPAR)®), 에토포시드 (VP-16), 테니포시드 (부몬(VUMON)®), 6-메르캅토퓨린 (6-MP 또는 퓨린톨(PURINETHOL)®), 메토트렉세이트, 시클로포스파미드 (시톡산(CYTOXAN)®), 프레드니손, 덱사메타손 (데카드론(DECADRON)®), 이마티닙 (글리벡(GLEEVEC)®), 다사티닙 (스프리셀(SPRYCEL)®), 닐로티닙 (타시그나(TASIGNA)®), 보수티닙 (보술리프(BOSULIF)®) 및 포나티닙 (이클루식(ICLUSIG)®)을 포함한다.
추가의 적합한 화학요법제의 예는 1-데히드로테스토스테론, 5-플루오로우라실 데카르바진, 6-메르캅토퓨린, 6-티오구아닌, 악티노마이신 D, 아드리아마이신, 알데스류킨, 알킬화제, 알로퓨리놀 소듐, 알트레타민, 아미포스틴, 아나스트로졸, 안트라마이신 (AMC), 항유사분열제, 시스-디클로로디아민 백금 (II) (DDP) (시스플라틴), 디아미노 디클로로 백금, 안트라시클린, 항생제, 항대사물, 아스파라기나제, 생 BCG (방광내), 베타메타손 인산나트륨 및 베타메타손 아세테이트, 비칼루타미드, 블레오마이신 술페이트, 부술판, 칼슘 류코보린, 칼리케아미신, 카페시타빈, 카르보플라틴, 로무스틴 (CCNU), 카르무스틴 (BSNU), 클로람부실, 시스플라틴, 클라드리빈, 콜키신, 접합형 에스트로겐, 시클로포스파미드, 시클로포스파미드, 시타라빈, 시토칼라신 B, 시톡산, 다카르바진, 닥티노마이신, 닥티노마이신 (이전에 악티노마이신), 다우노루비신 HCL, 다우노루비신 시트레이트, 데니류킨 디프티톡스, 덱스라족산, 디브로모만니톨, 디히드록시 안트라센 디온, 도세탁셀, 돌라세트론 메실레이트, 독소루비신 HCL, 드로나비놀, 이. 콜라이(E. coli) L-아스파라기나제, 에메틴, 에포에틴-α, 에르위니아 L-아스파라기나제, 에스테르화 에스트로겐, 에스트라디올, 에스트라무스틴 포스페이트 소듐, 브로민화에티듐, 에티닐 에스트라디올, 에티드로네이트, 에토포시드 시트로보룸 인자, 에토포시드 포스페이트, 필그라스팀, 플록수리딘, 플루코나졸, 플루다라빈 포스페이트, 플루오로우라실, 플루타미드, 폴린산, 겜시타빈 HCL, 글루코코르티코이드, 고세렐린 아세테이트, 그라미시딘 D, 그라니세트론 HCL, 히드록시우레아,이다루비신 HCL, 이포스파미드, 인터페론 α-2b, 이리노테칸 HCL, 레트로졸, 류코보린 칼슘, 류프롤리드 아세테이트, 레바미솔 HCL, 리도카인, 로무스틴, 메이탄시노이드, 메클로레타민 HCL, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 멜팔란 HCL, 메르캅토퓨린, 메스나, 메토트렉세이트, 메틸테스토스테론, 미트라마이신, 미토마이신 C, 미토탄, 미톡산트론, 닐루타미드, 옥트레오티드 아세테이트, 온단세트론 HCL, 파클리탁셀, 파미드로네이트 이나트륨, 펜토스타틴, 필로카르핀 HCL, 플리마이신, 폴리페프로산 20과 카르무스틴 이식물, 포르피머 소듐, 프로카인, 프로카르바진 HCL, 프로프라놀롤, 리툭시맙, 사르그라모스팀, 스트렙토조토신, 타목시펜, 탁솔, 테니포시드, 테노포시드, 테스토락톤, 테트라카인, 티오에파 클로람부실, 티오구아닌, 티오테파, 토포테칸 HCL, 토레미펜 시트레이트, 트라스투주맙, 트레티노인, 발루비신, 빈블라스틴 술페이트, 빈크리스틴 술페이트 및 비노렐빈 타르트레이트르를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 화학요법제 (예를 들어, 세포독성제 또는 암의 치료에 유용한 다른 화학적 화합물)와 조합되어 투여된다. 화학요법제의 예는 알킬화제, 항대사물, 폴산 유사체, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체 및 관련 억제제, 빈카 알칼로이드, 에피포도필로톡신, 항생제, L-아스파라기나제, 토포이소머라제 억제제, 인터페론, 백금 배위 착물, 안트라센디온 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신피질 억제제, 아드레노코르티코스테로이드, 프로게스틴, 에스트로겐, 항에스트로겐, 안드로겐, 항안드로겐 및 고나도트로핀-방출 호르몬 유사체를 포함한다. 또한, 5-플루오로우라실 (5-FU), 류코보린 (LV), 이리노테칸, 옥살리플라틴, 카페시타빈, 파클리탁셀 및 도세탁셀이 포함된다. 화학요법제의 비제한적 예는 알킬화제, 예컨대 티오테파 및 시클로포스파미드; 알킬 술포네이트, 예컨대 부술판, 임프로술판 및 피포술판; 아지리딘, 예컨대 벤조도파, 카르보쿠온, 메투레도파 및 우레도파; 에틸렌이민 및 메틸라멜라민, 예컨대 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포르아미드, 트리에틸렌티오포스포르아미드 및 트리메틸올로멜라민; 아세토게닌 (특히 불라타신 및 불라타시논); 캄프토테신 (합성 유사체 토포테칸 포함); 브리오스타틴; 칼리스타틴; CC-1065 (그의 아도젤레신, 카르젤레신 및 비젤레신 합성 유사체 포함); 크립토피신 (특히 크립토피신 1 및 크립토피신 8); 돌라스타틴; 두오카르마이신 (합성 유사체, KW-2189 및 CB1-TM1 포함); 엘레우테로빈; 판크라티스타틴; 사르코딕티인; 스폰지스타틴; 질소 머스타드, 예컨대 클로람부실, 클로르나파진, 콜로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥시드 히드로클로라이드, 멜팔란, 노벰비킨, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스타드; 니트로소우레아, 예컨대 카르무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴 및 라니무스틴; 항생제, 예컨대 에네디인 항생제 (예를 들어, 칼리케아미신, 특히 칼리케아미신 감마II 및 칼리케아미신 오메가II (예를 들어, 문헌 [Agnew, Chem. Inti. Ed Engl. 33:183-186 (1994)] 참조); 디네미신, 예컨대 디네미신 A; 비스포스포네이트, 예컨대 클로드로네이트; 에스페라미신; 뿐만 아니라 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 색소단백질 에네디인 항생제 발색단), 아클라시노마이신, 악티노마이신, 아우트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소-L-노르류신, 아드리아마이신(ADRIAMYCIN)® (독소루비신, 예컨대 모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신), 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신, 예컨대 미토마이신 C, 미코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포트피로마이신, 퓨로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 항대사물, 예컨대 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실 (5-FU); 폴산 유사체, 예컨대 데노프테린, 메토트렉세이트, 프테로프테린, 트리메트렉세이트; 퓨린 유사체, 예컨대 플루다라빈, 6-메르캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체, 예컨대 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카르모푸르, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록수리딘; 안드로겐, 예컨대 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤; 항부신제, 예컨대 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄; 폴산 보충제, 예컨대 프롤린산; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코시드; 아미노레불린산; 에닐우라실; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 엘포미틴; 엘립티늄 아세테이트; 에포틸론; 에토글루시드; 질산갈륨; 히드록시우레아; 렌티난; 로니다이닌; 메이탄시노이드, 예컨대 메이탄신 및 안사미토신; 미토구아존; 미톡산트론; 모피단몰; 니트라에린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 로속산트론; 포도필린산; 2-에틸히드라지드; 프로카르바진; PSK® 폴리사카라이드 복합체 (제이에이치에스 내츄럴 프로덕츠(JHS Natural Products), 오레곤주 유진); 라족산; 리족신; 시조푸란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠온; 2,2',2"-트리클로로트리에틸아민; 트리코테센 (특히 T-2 독소, 베라큐린 A, 로리딘 A 및 안구이딘); 우레탄; 빈데신; 다카르바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가시토신; 아라비노시드 ("Ara-C"); 시클로포스파미드; 티오테파; 탁소이드, 예를 들어 탁솔(TAXOL)® (파클리탁셀; 브리스톨-마이어스 스큅 온콜로지, 뉴저지주 프린스턴), 아브락산(ABRAXANE)®, 파클리탁셀의 크레모포르-무함유, 알부민-조작된 나노입자 제제 (아메리칸 파마슈티칼 파트너스(American Pharmaceutical Partners), 일리노이주 샤움버그) 및 탁소테레(TAXOTERE)® (도세탁셀; 롱-프랑 로러(Rhone-Poulenc Rorer), 프랑스 안토니); 클로람부실; 겜자르(GEMZAR)® (겜시타빈); 6-티오구아닌; 메르캅토퓨린; 메토트렉세이트; 백금 배위 착물, 예컨대 시스플라틴, 옥살리플라틴 및 카르보플라틴; 빈블라스틴; 백금; 에토포시드 (VP-16); 이포스파미드; 미톡산트론; 빈크리스틴; 나벨빈(NAVELBINE)® (비노렐빈); 노반트론; 테니포시드; 에다트렉세이트; 다우노마이신; 아미노프테린; 젤로다; 이반드로네이트; 이리노테칸 (예를 들어, CPT-11); 토포이소머라제 억제제 RFS 2000; 디플루오로메틸오르니틴 (DMFO); 레티노이드, 예컨대 레티노산; 카페시타빈; 및 상기 중 임의의 것의 제약상 허용되는 염, 산 또는 유도체를 포함한다. 2종 이상의 화학요법제가 본 발명의 화합물과 조합되어 투여될 칵테일에 사용될 수 있다. 조합 화학요법의 적합한 투여 요법은 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 조합 투여 요법은 문헌 [Saltz et al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol. 18:233a (1999) 및 Douillard et al., Lancet 355(9209): 1041 -1047 (2000)]에 기재되어 있다.
본원에 개시된 화합물과 조합되어 투여될 수 있는 추가의 치료제는 베바시주맙, 수니티닙, 소라페닙, 2-메톡시에스트라디올 또는 2ME2, 피나수네이트, 바탈라닙, 반데타닙, 아플리베르셉트, 볼로식시맙, 에타라시주맙 (MEDI-522), 실렌기티드, 에를로티닙, 세툭시맙, 파니투무맙, 게피티닙, 트라스투주맙, 도비티닙, 피기투무맙, 아타시셉트, 리툭시맙, 알렘투주맙, 알데스류킨, 아틀리주맙, 토실리주맙, 템시롤리무스, 에베롤리무스, 루카투무맙, 다세투주맙, HLL1, huN901-DM1, 아티프리모드, 나탈리주맙, 보르테조밉, 카르필조밉, 마리조밉, 타네스피마이신, 사퀴나비르 메실레이트, 리토나비르, 넬피나비르 메실레이트, 인디나비르 술페이트, 벨리노스타트, 파노비노스타트, 마파투무맙, 렉사투무맙, 둘라네르민, ABT-737, 오블리메르센, 플리티뎁신, 탈마피모드, P276-00, 엔자스타우린, 티피파르닙, 페리포신, 이마티닙, 다사티닙, 레날리도미드, 탈리도미드, 심바스타틴, 셀레콕시브, 바제독시펜, AZD4547, 릴로투무맙, 옥살리플라틴 (엘록사틴(ELOXATIN)®), PD0332991, 리보시클립 (LEE011), 아베마시클립 (LY2835219), HDM201, 풀베스트란트 (파슬로덱스(FASLODEX)®), 엑세메스탄 (아로마신(AROMASIN)®), PIM447, 룩솔리티닙 (INC424), BGJ398, 네시투무맙, 페메트렉세드 (알림타(ALIMTA)®) 및 라무시루맙 (IMC-1121B)을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 추가의 요법은 모노클로날 항체 (MAb)이다. 일부 MAb는 암 세포를 파괴하는 면역 반응을 자극한다. B 세포에 의해 자연적으로 생산된 항체와 유사하게, 이들 MAb는 암 세포 표면을 "코팅"하여, 면역계에 의한 그의 파괴를 촉발할 수 있다. 예를 들어, 베바시주맙은 종양 혈관의 발생을 촉진하는, 종양의 미세환경에서 종양 세포 및 다른 세포에 의해 분비되는 단백질인 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)를 표적화한다. 베바시주맙에 결합된 경우에, VEGF는 그의 세포 수용체와 상호작용할 수 없어, 새로운 혈관의 성장으로 이어지는 신호전달을 방지한다. 세포 표면 성장 인자 수용체에 결합하는 MAb는 표적화된 수용체가 그의 정상적인 성장-촉진 신호를 보내는 것을 방지한다. 이들은 또한 아폽토시스를 촉발하고 면역계를 활성화시켜 종양 세포를 파괴할 수 있다.
본 발명의 한 측면에서, 생물활성제는 면역억제제이다. 면역억제제는 칼시뉴린 억제제, 예를 들어 시클로스포린 또는 아스코마이신, 예를 들어 시클로스포린 A (네오랄(NEORAL)®), FK506 (타크롤리무스), 피메크롤리무스, mTOR 억제제, 예를 들어 라파마이신 또는 그의 유도체, 예를 들어 시롤리무스 (라파뮨(RAPAMUNE)®), 에베롤리무스 (세르티칸(CERTICAN)®), 템시롤리무스, 조타롤리무스, 비올리무스-7, 비올리무스-9, 라파로그, 예를 들어 리다포롤리무스, 아자티오프린, 캄파트 1H, S1P 수용체 조정제, 예를 들어 핑골리모드 또는 그의 유사체, 항 IL-8 항체, 미코페놀산 또는 그의 염, 예를 들어 나트륨 염 또는 그의 전구약물, 예를 들어 미코페놀레이트 모페틸 (셀셉트(CELLCEPT)®), OKT3 (오르토클론(ORTHOCLONE) OKT3®), 프레드니손, 아트감(ATGAM)®, 티모글로불린(THYMOGLOBULIN)®, 브레퀴나르 소듐, OKT4, T10B9.A-3A, 33B3.1, 15-데옥시스페르구알린, 트레스페리무스, 레플루노미드 (아라바(ARAVA)®), CTLAI-Ig, 항-CD25, 항-IL2R, 바실릭시맙 (시물렉트(SIMULECT)®), 다클리주맙 (제나팍스(ZENAPAX)®), 미조르빈, 메토트렉세이트, 덱사메타손, ISAtx-247, SDZ ASM 981 (피메크롤리무스, 엘리델(ELIDEL)®), CTLA4lg (아바타셉트), 벨라타셉트, LFA3lg, 에타네르셉트 (이뮤넥스(Immunex)에 의해 엔브렐(ENBREL)®로서 판매됨), 아달리무맙 (휴미라(HUMIRA)®), 인플릭시맙 (레미케이드(REMICADE)®), 항-LFA-1 항체, 나탈리주맙 (안테그렌(ANTEGREN)®), 엔리모맙, 가빌리모맙, 항흉선세포 이뮤노글로불린, 시플리주맙, 알레파셉트, 에팔리주맙, 펜타사, 메살라진, 아사콜, 코데인 포스페이트, 베노릴레이트, 펜부펜, 나프로신, 디클로페낙, 에토돌락 및 인도메타신, 아스피린 및 이부프로펜일 수 있다.
일부 실시양태에서, 생물활성제는 암 치료에 사용되는 생물제제, 예컨대 시토카인 (예를 들어, 인터페론 또는 인터류킨 (예를 들어, IL-2))인 치료제이다. 일부 실시양태에서, 생물제제는 항혈관신생제, 예컨대 항-VEGF 작용제, 예를 들어 베바시주맙 (아바스틴®)이다. 일부 실시양태에서, 생물제제는 이뮤노글로불린-기반 생물제제, 예를 들어 항암 반응을 자극하기 위해 표적에 효능작용하거나 또는 암에 중요한 항원에 길항작용하는 모노클로날 항체 (예를 들어, 인간화 항체, 완전 인간 항체, Fc 융합 단백질 또는 그의 기능적 단편)이다. 이러한 작용제는 리툭산(RITUXAN)® (리툭시맙); 제나팍스(ZENAPAX)® (다클리주맙); 시물렉트(SIMULECT)® (바실릭시맙); 시나기스(SYNAGIS)® (팔리비주맙); 레미케이드(REMICADE)® (인플릭시맙); 헤르셉틴(HERCEPTIN)® (트라스투주맙); 밀로타르그(MYLOTARG)® (겜투주맙 오조가미신); 캄파트(CAMPATH)® (알렘투주맙); 제발린(ZEVALIN)® (이브리투모맙 티욱세탄); 휴미라(HUMIRA)® (아달리무맙); 졸레어(XOLAIR)® (오말리주맙); 벡사르(BEXXAR)® (토시투모맙-l-131); 랩티바(RAPTIVA)® (에팔리주맙); 에르비툭스(ERBITUX)® (세툭시맙); 아바스틴(AVASTIN)® (베바시주맙); 티사브리(TYSABRI)® (나탈리주맙); 악템라(ACTEMRA)® (토실리주맙); 벡티빅스(VECTIBIX)® (파니투무맙); 루센티스(LUCENTIS)® (라니비주맙); 소우리스(SOURIS)® (에쿨리주맙); 심지아(CIMZIA)® (세르톨리주맙 페골); 심포니(SIMPONI)® (골리무맙); 일라리스(ILARIS)® (카나키누맙); 스텔라라(STELARA)® (우스테키누맙); 아르제라(ARZERRA)® (오파투무맙); 프롤리아(PROLIA)® (데노수맙); 누맥스(NUMAX)® (모타비주맙); 아비톡스(ABTHRAX)® (락시바쿠맙); 벤리스타(BENLYSTA)® (벨리무맙); 예르보이(YERVOY)® (이필리무맙); 애드세트리스(ADCETRIS)® (브렌툭시맙 베도틴); 페르제타(PERJETA)® (페르투주맙); 카드실라(KADCYLA)® (아도-트라스투주맙 엠탄신); 및 가지바(GAZYVA)® (오비누투주맙)를 포함한다. 또한, 항체-약물 접합체가 포함된다.
조합 요법은 비-약물 치료인 치료제를 포함할 수 있다. 예를 들어, 화합물은 방사선 요법, 동결요법, 고열요법 및/또는 종양 조직의 외과적 절제에 추가로 투여될 수 있다.
링커
링커는 세레블론 리간드를 BRAF 표적화 리간드에 공유 부착시키는 결합 또는 화학적으로 안정한 2가 기이다.
특정 실시양태에서, 링커는 세레블론 리간드를 BRAF 표적화 리간드에 부착시키는 임의의 화학적으로 안정한 기일 수 있다. 일부 실시양태에서, 링커는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20개 또는 그 초과의 탄소 원자의 쇄를 가지며, 이들 중 1개 이상의 탄소 원자는, 생성된 분자가 제약상 허용되는 투여 형태의 일부로서 적어도 2개월, 3개월, 6개월 또는 1년 동안 안정한 보관 수명을 갖고 그 자체가 제약상 허용되는 한, 헤테로원자, 예컨대 O, N, S 또는 P에 의해 대체될 수 있다. 특정 실시양태에서, 쇄는 쇄 내에 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 또는 14개의 인접 원자를 갖는다. 예를 들어, 쇄는 1개 이상의 에틸렌 글리콜 단위를 포함할 수 있고, 일부 실시양태에서, 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개 또는 그 초과의 인접, 부분 인접 또는 비-인접 에틸렌 글리콜 링커를 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, 쇄는 독립적으로 알킬, 헤테로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 알케닐 또는 알키닐 치환기일 수 있는 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 분지를 가지며, 한 실시양태에서, 각각의 분지는 10, 8, 6, 4, 3, 2 또는 1개의 탄소를 갖는다.
다른 실시양태에서, 링커는 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 락트산 및/또는 글리콜산 중 1종 이상을 포함하거나 또는 그로 구성될 수 있다. 일반적으로, 프로필렌 글리콜은 소수성을 부가하는 반면, 프로필렌 글리콜은 친수성을 부가한다. 락트산 절편은 글리콜산 절편보다 더 긴 반감기를 갖는 경향이 있다. 블록 및 랜덤 락트산-코-글리콜산 모이어티, 뿐만 아니라 에틸렌 글리콜 및 프로필렌 글리콜은 제약상 허용되는 것으로 관련 기술분야에 공지되어 있고, 목적하는 반감기 및 친수성을 얻기 위해 변형 또는 배열될 수 있다. 특정 측면에서, 이들 단위는 적절한 약물 특성을 달성하기 위해 원하는 경우에 다른 모이어티, 예컨대 지방족, 예컨대 알킬, 헤테로지방족, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 시클로알킬 등과 플랭킹되거나 또는 그가 산재될 수 있다.
특정 측면에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
여기서 모든 가변기는 상기와 같이 정의된다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
특정 실시양태에서, 링커는 
를 포함한다.
하기는 본 발명에서 사용될 수 있는 링커의 비제한적 예이다. 이러한 상세설명에 기초하여, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 본 발명의 목적을 달성할 전체 범위의 링커를 사용하는 방법을 이해할 것이다.
특정의 비제한적 예로서, 링커는 하기를 포함한다:
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
한 실시양태에서, X1은 BRAF 표적화 리간드에 부착된다. 또 다른 실시양태에서, X2는 BRAF 표적화 리간드에 부착된다.
R20, R21, R22, R23 및 R24의 모이어티의 비제한적 예는 하기를 포함한다: 
.
R20, R21, R22, R23 및 R24의 모이어티의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
R20, R21, R22, R23 및 R24의 모이어티의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
추가의 실시양태에서, 링커는 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 4개, 적어도 5개, 적어도 6개, 적어도 7개, 적어도 8개, 적어도 9개, 적어도 10개의 에틸렌 글리콜 단위 또는 임의로 치환된 O, N, S, P 또는 Si 원자가 산재된 임의로 치환된 알킬 기를 갖는 임의로 치환된 (폴리)에틸렌 글리콜이다. 특정 실시양태에서, 링커는 아릴, 페닐, 벤질, 알킬, 알킬렌 또는 헤테로사이클 기가 플랭킹되거나, 그로 치환되거나 또는 그가 산재되어 있다. 특정 실시양태에서, 링커는 비대칭 또는 대칭일 수 있다. 일부 실시양태에서, 링커는 약 1 내지 약 12개의 에틸렌 글리콜 단위, 1 내지 약 10개의 에틸렌 글리콜 단위, 약 2 내지 약 6개의 에틸렌 글리콜 단위, 약 2 내지 5개의 에틸렌 글리콜 단위, 약 2 내지 4개의 에틸렌 글리콜 단위 범위의 크기인 치환 또는 비치환된 폴리에틸렌 글리콜 기이다. 본원에 기재된 화합물의 임의의 실시양태에서, 링커 기는 본원에 기재된 바와 같은 임의의 적합한 모이어티일 수 있다.
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
-NR61(CH2)n1-(저급 알킬)-, -NR61(CH2)n1-(저급 알콕실)-,
-NR61(CH2)n1-(저급 알콕실)-OCH2-, -NR61(CH2)n1-(저급 알콕실)-(저급 알킬)-OCH2-,
-NR61(CH2)n1-(시클로알킬)-(저급 알킬)-OCH2-, -NR61(CH2)n1-(헤테로시클로알킬)-,
-NR61(CH2CH2O)n1-(저급 알킬)-O-CH2-, -NR61(CH2CH2O)n1-(헤테로시클로알킬)-O-CH2-,
-NR61(CH2CH2O)n1-아릴-O-CH2-, -NR61(CH2CH2O)n1-(헤테로아릴)-O-CH2-,
-NR61(CH2CH2O)n1-(시클로알킬)-O-(헤테로아릴)-O-CH2-,
-NR61(CH2CH2O)n1-(시클로알킬)-O-아릴-O-CH2-,
-NR61(CH2CH2O)n1-(저급 알킬)-NH-아릴-O-CH2-,
-NR61(CH2CH2O)n1-(저급 알킬)-O-아릴-CH2,
-NR61(CH2CH2O)n1-시클로알킬-O-아릴-, -NR61(CH2CH2O)n1-시클로알킬-O-헤테로아릴-,
-NR61(CH2CH2)n1-(시클로알킬)-O-(헤테로사이클)-CH2,
-NR61(CH2CH2)n1-(헤테로사이클)-(헤테로사이클)-CH2 및 -NR61-(헤테로사이클)-CH2;
여기서 n1은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이고;
R61은 H, 메틸 또는 에틸이다.
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
-N(R61)-(CH2)m1-O(CH2)n2-O(CH2)o1-O(CH2)p1-O(CH2)q1-O(CH2)r1-OCH2-,
-O-(CH2)m1-O(CH2)n2-O(CH2)o1-O(CH2)p1-O(CH2)q1-O(CH2)r1-OCH2-,
-O-(CH2)m1-O(CH2)n2-O(CH2)o1-O(CH2)p1-O(CH2)q1-O(CH2)r1-O-;
-N(R61)-(CH2)m1-O(CH2)n2-O(CH2)o1-O(CH2)p1-O(CH2)q1-O(CH2)r1-O-;
-(CH2)m1-O(CH2)n2-O(CH2)o1-O(CH2)p1-O(CH2)q1-O(CH2)r1-O-;
-(CH2)m1-O(CH2)n2-O(CH2)o1-O(CH2)p1-O(CH2)q1-O(CH2)r1-OCH2-;
-O(CH2)m1O(CH2)n2O(CH2)p1O(CH2)q1OCH2-;
-O(CH2)m1O(CH2)n2O(CH2)p1O(CH2)q1OCH2-;
여기서 m1, n2, o1, p1, q1 및 r1은 독립적으로 1, 2, 3, 4 또는 5이고;
R61은 H, 메틸 또는 에틸이다.
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
여기서 m1, n2, o1, p1, q2 및 r1은 독립적으로 1, 2, 3, 4 또는 5이다.
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
여기서 R71은 -O-, -NH, N알킬, 헤테로지방족, 지방족 또는 -NMe이다.
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
추가의 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
특정 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
특정 실시양태에서, 링커는 하기로부터 선택된다:
상기 구조에서, 
는 
를 나타낸다.
특정 실시양태에서, 링커는 4-24개의 탄소 원자 선형 쇄일 수 있고, 여기서 선형 쇄 내의 1개 이상의 탄소 원자는 산소, 질소, 아미드, 플루오린화 탄소 등으로 대체 또는 치환될 수 있으며, 예컨대 하기와 같다:
특정 실시양태에서, 링커는 비선형 쇄일 수 있고, 지방족 또는 방향족 또는 헤테로방향족 시클릭 모이어티일 수 있거나 또는 그를 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 링커는 약 1 내지 약 12개의 에틸렌 글리콜 단위, 1 내지 약 10개의 에틸렌 글리콜 단위, 약 2 내지 약 6개의 에틸렌 글리콜 단위, 약 2 내지 5개의 에틸렌 글리콜 단위, 약 2 내지 4개의 에틸렌 글리콜 단위, 예를 들어 1, 2, 3, 4, 6, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개의 에틸렌 글리콜 단위 범위의 크기인 인접, 부분 인접 또는 비-인접 에틸렌 글리콜 단위 기를 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 링커는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개의 플루오린 치환기를 가질 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 링커는 퍼플루오린화된다. 또 다른 실시양태에서, 링커는 부분적으로 또는 완전히 플루오린화된 폴리 에테르이다. 플루오린화 링커 모이어티의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
R20, R21, R22, R23 및 R24의 모이어티의 비제한적 예는 하기를 포함한다: 
.
R20, R21, R22, R23 및 R24의 모이어티의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
R20, R21, R22, R23 및 R24의 모이어티의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
특정 실시양태에서, 길이는 원하는 대로 또는 원하는 적용에 필요한 것으로 밝혀진 대로 조정될 수 있다.
본 발명의 추가의 실시양태
모든 별개의 실시양태는 조합될 수 있다.
R1의 실시양태
특정 실시양태에서, R1은 수소이다.
특정 실시양태에서, R1은 알킬이다.
특정 실시양태에서, R1은 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R1은 메틸이다.
특정 실시양태에서, R1은 에틸이다.
특정 실시양태에서, R1은 시클로프로필이다.
R2의 실시양태
특정 실시양태에서, R2는 수소이다.
특정 실시양태에서, R2는 알킬이다.
특정 실시양태에서, R2는 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R2는 메틸이다.
특정 실시양태에서, R2는 에틸이다.
특정 실시양태에서, R2는 시클로프로필이다.
특정 실시양태에서, R2는 할로알킬이다.
특정 실시양태에서, R2는 CF3이다.
특정 실시양태에서, R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성한다.
R2'의 실시양태
특정 실시양태에서, R2'는 수소이다.
특정 실시양태에서, R2'는 알킬이다.
특정 실시양태에서, R2'는 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R2'는 메틸이다.
특정 실시양태에서, R2'는 에틸이다.
특정 실시양태에서, R2'는 시클로프로필이다.
특정 실시양태에서, R2'는 할로알킬이다.
특정 실시양태에서, R2'는 CF3이다.
특정 실시양태에서, R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성한다.
R3의 실시양태
특정 실시양태에서, R3은 수소이다.
특정 실시양태에서, R3은 알킬이다.
특정 실시양태에서, R3은 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R3은 메틸이다.
특정 실시양태에서, R3은 에틸이다.
특정 실시양태에서, R3은 시클로프로필이다.
특정 실시양태에서, R3은 알콕시이다.
특정 실시양태에서, R3은 메톡시이다.
특정 실시양태에서, R3은 에톡시이다.
특정 실시양태에서, R3은 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R3은 F이다.
R4의 실시양태
특정 실시양태에서, R4는 수소이다.
특정 실시양태에서, R4는 알킬이다.
특정 실시양태에서, R4는 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R4는 메틸이다.
특정 실시양태에서, R4는 에틸이다.
특정 실시양태에서, R4는 시클로프로필이다.
특정 실시양태에서, R4는 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R4는 F이다.
특정 실시양태에서, R4는 시아노이다.
R5의 실시양태
특정 실시양태에서, R5는 수소이다.
특정 실시양태에서, R5는 알킬이다.
특정 실시양태에서, R5는 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R5는 메틸이다.
특정 실시양태에서, R5는 에틸이다.
특정 실시양태에서, R5는 시클로프로필이다.
특정 실시양태에서, R5는 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R5는 F이다.
특정 실시양태에서, R5는 시아노이다.
W1 및 W2의 실시양태
특정 실시양태에서, W1은 -N-이다.
특정 실시양태에서, W1은 -CH-이다.
특정 실시양태에서, W2는 -N-이다.
특정 실시양태에서, W2는 -CH-이다.
특정 실시양태에서, W2는 -CR26-이다.
특정 실시양태에서, W2는 -CCH3-이다.
특정 실시양태에서, W2는 -CF-이다.
R6 및 R26의 실시양태
특정 실시양태에서, R6은 수소이다.
특정 실시양태에서, R6은 알킬이다.
특정 실시양태에서, R6은 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R6은 메틸이다.
특정 실시양태에서, R6은 에틸이다.
특정 실시양태에서, R6은 시클로프로필이다.
특정 실시양태에서, R6은 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R6은 F이다.
특정 실시양태에서, R6은 히드록시이다.
특정 실시양태에서, R6은 아미노이다.
특정 실시양태에서, R6은 디알킬아미노이다.
특정 실시양태에서, R6은 알콕시이다.
특정 실시양태에서, R6은 알콕시알킬이다.
특정 실시양태에서, R26은 수소이다.
특정 실시양태에서, R26은 알킬이다.
특정 실시양태에서, R26은 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R26은 메틸이다.
특정 실시양태에서, R26은 에틸이다.
특정 실시양태에서, R26은 시클로프로필이다.
특정 실시양태에서, R26은 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R26은 F이다.
특정 실시양태에서, R26은 히드록시이다.
특정 실시양태에서, R26은 알콕시이다.
특정 실시양태에서, R26은 알콕시알킬이다.
R7아미노의 실시양태
특정 실시양태에서, R7은 수소이다.
특정 실시양태에서, R7은 알킬이다.
특정 실시양태에서, R7은 시아노이다.
특정 실시양태에서, R7은 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R7은 알콕시이다.
특정 실시양태에서, R7은 플루오린이다.
특정 실시양태에서, R7은 메톡시이다.
특정 실시양태에서, R7은 에톡시이다.
특정 실시양태에서, R7은 메틸이다.
특정 실시양태에서, R7은 에틸이다.
R8의 실시양태
특정 실시양태에서, R8은 수소이다.
특정 실시양태에서, R8은 알킬이다.
특정 실시양태에서, R8은 시아노이다.
특정 실시양태에서, R8은 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R8은 알콕시이다.
특정 실시양태에서, R8은 플루오린이다.
특정 실시양태에서, R8은 메톡시이다.
특정 실시양태에서, R8은 에톡시이다.
특정 실시양태에서, R8은 메틸이다.
특정 실시양태에서, R8은 에틸이다.
R9의 실시양태
특정 실시양태에서, R9는 수소이다.
특정 실시양태에서, R9는 알킬이다.
특정 실시양태에서, R9는 시아노이다.
특정 실시양태에서, R9는 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R9는 알콕시이다.
특정 실시양태에서, R9는 플루오린이다.
특정 실시양태에서, R9는 메톡시이다.
특정 실시양태에서, R9는 에톡시이다.
특정 실시양태에서, R9는 메틸이다.
특정 실시양태에서, R9는 에틸이다.
R17의 실시양태
특정 실시양태에서, R17은 수소이다.
특정 실시양태에서, R17은 알킬이다.
특정 실시양태에서, R17은 시아노이다.
특정 실시양태에서, R17은 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R17은 알콕시이다.
특정 실시양태에서, R17은 플루오린이다.
특정 실시양태에서, R17은 메톡시이다.
특정 실시양태에서, R17은 에톡시이다.
특정 실시양태에서, R17은 메틸이다.
특정 실시양태에서, R17은 에틸이다.
특정 실시양태에서, R17은 히드록시이다.
특정 실시양태에서, R17은 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R17은 시클로프로필이다.
R18의 실시양태
특정 실시양태에서, R18은 수소이다.
특정 실시양태에서, R18은 알킬이다.
특정 실시양태에서, R18은 시아노이다.
특정 실시양태에서, R18은 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R18은 알콕시이다.
특정 실시양태에서, R18은 플루오린이다.
특정 실시양태에서, R18은 메톡시이다.
특정 실시양태에서, R18은 에톡시이다.
특정 실시양태에서, R18은 메틸이다.
특정 실시양태에서, R18은 에틸이다.
특정 실시양태에서, R18은 히드록시이다.
특정 실시양태에서, R18은 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R18은 시클로프로필이다.
R19의 실시양태
특정 실시양태에서, R19는 수소이다.
특정 실시양태에서, R19는 알킬이다.
특정 실시양태에서, R19는 시아노이다.
특정 실시양태에서, R19는 할로겐이다.
특정 실시양태에서, R19는 알콕시이다.
특정 실시양태에서, R19는 플루오린이다.
특정 실시양태에서, R19는 메톡시이다.
특정 실시양태에서, R19는 에톡시이다.
특정 실시양태에서, R19는 메틸이다.
특정 실시양태에서, R19는 에틸이다.
특정 실시양태에서, R19는 히드록시이다.
특정 실시양태에서, R19는 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, R19는 시클로프로필이다.
A1의 실시양태
특정 실시양태에서, A1은 NR2이다.
특정 실시양태에서, A1은 -CHR2'-이다.
특정 실시양태에서, A1은 NH이다.
특정 실시양태에서, A1은 NCH3이다.
특정 실시양태에서, A1은 -CH2-이다.
A2 및 A22의 실시양태
특정 실시양태에서, A2는 -O-이다.
특정 실시양태에서, A2는 -NH-이다.
특정 실시양태에서, A2는 -(C=O)-이다.
특정 실시양태에서, A22는 -O-이다.
특정 실시양태에서, A22는 -NH-이다.
A3 및 A23의 실시양태
특정 실시양태에서, A3은 결합이다.
특정 실시양태에서, A3은 -CH2-이다.
특정 실시양태에서, A3은 -CH2-CH2-이다.
특정 실시양태에서, A3은 -CH2-CH2-CH2-이다.
특정 실시양태에서, A3은 -CH(CH3)-CH2-CH2-이다.
특정 실시양태에서, A3은 -CH2-CH(CH3)-CH2-이다.
특정 실시양태에서, A3은 -CH2-CH2-CH(CH3)-이다.
특정 실시양태에서, A3은 -CH2-CH2-CH2-CH2-이다.
특정 실시양태에서, A3은 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-이다.
특정 실시양태에서, A23은 결합이다.
특정 실시양태에서, A23은 -O-이다.
특정 실시양태에서, A23은 -CH2-이다.
A4 및 A14의 실시양태
특정 실시양태에서, A4는 결합이다.
특정 실시양태에서, A4는 -CH2-이다.
특정 실시양태에서, A4는 -(SO2)-CH2-이다.
특정 실시양태에서, A4는 -CH(CH2OH)-이다.
특정 실시양태에서, A4는 -NH-이다.
특정 실시양태에서, A4는 -O-이다.
특정 실시양태에서, A14는 결합이다.
특정 실시양태에서, A14는 -CH2-이다.
특정 실시양태에서, A14는 -CH2-CH2-이다.
특정 실시양태에서, A14는 -CH(CH2OH)-이다.
특정 실시양태에서, A14는 -NH-이다.
특정 실시양태에서, A14는 -O-이다.
특정 실시양태에서, A14는 시클로알킬이다.
특정 실시양태에서, A14는 알킬아미노이다.
A5, A6 및 A15의 실시양태
특정 실시양태에서, A5는 -CH-이다.
특정 실시양태에서, A5는 -N-이다.
특정 실시양태에서, A6은 -CH-이다.
특정 실시양태에서, A6은 -N-이다.
특정 실시양태에서, A15는 -O-이다.
특정 실시양태에서, A15는 -N-이다.
특정 실시양태에서, A15는 결합이다.
A 및 A30의 실시양태
특정 실시양태에서, A는 아미노 결합이다.
특정 실시양태에서, A는 피리미디닐이다.
특정 실시양태에서, A는 피리디닐이다.
특정 실시양태에서, A는 피라졸릴이다.
특정 실시양태에서, A는 3-아자비시클로[3.1.0]헥실이다.
특정 실시양태에서, A30은 결합이다.
특정 실시양태에서, A30은 피리미디닐이다.
특정 실시양태에서, A30은 피리디닐이다.
특정 실시양태에서, A30은 피라졸릴이다.
특정 실시양태에서, A30은 -CH2-이다.
B의 실시양태
1. 특정 실시양태에서, B는 페닐이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
2. 특정 실시양태에서, B는 피페리디닐이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
3. 특정 실시양태에서, B는 피페라지닐이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
4. 특정 실시양태에서, B는 1,4-디아자시클로헵틸이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
5. 특정 실시양태에서, B는 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
6. 특정 실시양태에서, B는 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
7. 특정 실시양태에서, B는 2,8-디아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
8. 특정 실시양태에서, B는 2-아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
9. 특정 실시양태에서, B는 3-아자비시클로[3.1.0]헥실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
10. 특정 실시양태에서, B는 3-아자스피로[5.5]운데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
11. 특정 실시양태에서, B는 7-아자스피로[3.5]노닐이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
12. 특정 실시양태에서, B는 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
13. 특정 실시양태에서, B는 1-옥사스피로[4.5]데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
14. 특정 실시양태에서, B는 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
15. 특정 실시양태에서, B는 1,8-디아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
16. 특정 실시양태에서, B는 8-아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
17. 실시양태 1-16 중 어느 하나에 있어서, B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개의 치환기로 치환된다.
18. 실시양태 1-16 중 어느 하나에 있어서, B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 2개의 치환기로 치환된다.
19. 실시양태 1-16 중 어느 하나에 있어서, B는 할로겐으로 치환된다.
20. 실시양태 1-16 중 어느 하나에 있어서, B는 플루오린으로 치환된다.
21. 실시양태 1-16 중 어느 하나에 있어서, B는 알킬로 치환된다.
22. 실시양태 1-16 중 어느 하나에 있어서, B는 알콕시로 치환된다.
23. 실시양태 1-16 중 어느 하나에 있어서, B는 치환되지 않는다.
B2의 실시양태
1. 특정 실시양태에서, B2는 페닐이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
2. 특정 실시양태에서, B2는 피페리디닐이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
3. 특정 실시양태에서, B2는 피페라지닐이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
4. 특정 실시양태에서, B2는 1,4-디아자시클로헵틸이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
5. 특정 실시양태에서, B2는 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
6. 특정 실시양태에서, B2는 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
7. 특정 실시양태에서, B2는 2,8-디아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
8. 특정 실시양태에서, B2는 2-아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
9. 특정 실시양태에서, B2는 3-아자비시클로[3.1.0]헥실이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
10. 특정 실시양태에서, B2는 3-아자스피로[5.5]운데실이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
11. 특정 실시양태에서, B2는 7-아자스피로[3.5]노닐이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
12. 특정 실시양태에서, B2는 8-아자스피로[4.5]데실이고, 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된다.
13. 실시양태 1-12 중 어느 하나에 있어서, B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개의 치환기로 치환된다.
14. 실시양태 1-12 중 어느 하나에 있어서, B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 2개의 치환기로 치환된다.
15. 실시양태 1-12 중 어느 하나에 있어서, B2는 할로겐으로 치환된다.
16. 실시양태 1-12 중 어느 하나에 있어서, B2는 플루오린으로 치환된다.
17. 실시양태 1-12 중 어느 하나에 있어서, B2는 알킬로 치환된다.
18. 실시양태 1-12 중 어느 하나에 있어서, B2는 알콕시로 치환된다.
19. 실시양태 1-12 중 어느 하나에 있어서, B2는 치환되지 않는다.
B3의 실시양태
특정 실시양태에서, B3은 페닐이다.
특정 실시양태에서, B3은 피페리디닐이다.
특정 실시양태에서, B3은 피페라지닐이다.
특정 실시양태에서, B3은 1,4-디아자시클로헵틸이다.
특정 실시양태에서, B3은 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실이다.
특정 실시양태에서, B3은 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실이다.
특정 실시양태에서, B3은 2,8-디아자스피로[4.5]데실이다.
특정 실시양태에서, B3은 2-아자스피로[4.5]데실이다.
특정 실시양태에서, B3은 3-아자비시클로[3.1.0]헥실이다.
특정 실시양태에서, B3은 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐이다.
특정 실시양태에서, B3은 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실이다.
특정 실시양태에서, B3은 1-옥사스피로[4.5]데실이다.
특정 실시양태에서, B3은 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실이다.
특정 실시양태에서, B3은 1,8-디아자스피로[4.5]데실이다.
특정 실시양태에서, B3은 8-아자스피로[4.5]데실이다.
n의 실시양태
특정 실시양태에서, n은 0이다.
특정 실시양태에서, n은 1이다.
C의 실시양태
1. 특정 실시양태에서, C는 할로겐 (예를 들어 F), 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 아제파닐이다.
2. 특정 실시양태에서, C는 할로겐 (예를 들어 F), 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 시클로알킬이다.
3. 특정 실시양태에서, C는 할로겐 (예를 들어 F), 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 피페라지닐이다.
4. 특정 실시양태에서, C는 할로겐 (예를 들어 F), 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 아제티디닐이다.
5. 특정 실시양태에서, C는 할로겐 (예를 들어 F), 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 피페리디닐이다.
6. 실시양태 1-5 중 어느 하나에 있어서, C는 할로겐 (예를 들어 F), 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개의 치환기로 치환된다.
7. 실시양태 1-5 중 어느 하나에 있어서, C는 할로겐 (예를 들어 F), 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 2개의 치환기로 치환된다.
8. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, C는 할로겐으로 치환된다.
9. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, C는 히드록시로 치환된다.
10. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, C는 알킬로 치환된다.
11. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, C는 알콕시로 치환된다.
12. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, C는 플루오린으로 치환된다.
13. 실시양태-15 중 어느 하나에 있어서, C는 치환되지 않는다.
D의 실시양태
특정 실시양태에서, D는 
이다.
특정 실시양태에서, D는 
이다.
알킬의 실시양태
한 실시양태에서, "알킬"은 C1-C10알킬, C1-C9알킬, C1-C8알킬, C1-C7알킬, C1-C6알킬, C1-C5알킬, C1-C4알킬, C1-C3알킬 또는 C1-C2알킬이다.
한 실시양태에서 "알킬"은 1개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "알킬"은 2개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "알킬"은 3개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "알킬"은 4개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "알킬"은 5개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "알킬"은 6개의 탄소를 갖는다.
"알킬"의 비제한적 예는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸 및 헥실을 포함한다.
"알킬"의 추가의 비제한적 예는 이소프로필, 이소부틸, 이소펜틸 및 이소헥실을 포함한다.
"알킬"의 추가의 비제한적 예는 sec-부틸, sec-펜틸 및 sec-헥실을 포함한다.
"알킬"의 추가의 비제한적 예는 tert-부틸, tert-펜틸 및 tert-헥실을 포함한다.
"알킬"의 추가의 비제한적 예는 네오펜틸, 3-펜틸 및 활성 펜틸을 포함한다.
시클로알킬의 실시양태
한 실시양태에서, "시클로알킬"은 C3-C8시클로알킬, C3-C7시클로알킬, C3-C6시클로알킬, C3-C5시클로알킬, C3-C4시클로알킬, C4-C8시클로알킬, C5-C8시클로알킬 또는 C6-C8시클로알킬이다.
한 실시양태에서, "시클로알킬"은 3개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "시클로알킬"은 4개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "시클로알킬"은 5개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "시클로알킬"은 6개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "시클로알킬"은 7개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "시클로알킬"은 8개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "시클로알킬"은 9개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "시클로알킬"은 10개의 탄소를 갖는다.
"시클로알킬"의 비제한적 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸 및 시클로데실을 포함한다.
할로알킬의 실시양태
한 실시양태에서, "할로알킬"은 C1-C10할로알킬, C1-C9할로알킬, C1-C8할로알킬, C1-C7할로알킬, C1-C6할로알킬, C1-C5할로알킬, C1-C4할로알킬, C1-C3할로알킬 및 C1-C2할로알킬이다.
한 실시양태에서 "할로알킬"은 1개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "할로알킬"은 1개의 탄소 및 1개의 할로겐을 갖는다.
한 실시양태에서, "할로알킬"은 1개의 탄소 및 2개의 할로겐을 갖는다.
한 실시양태에서, "할로알킬"은 1개의 탄소 및 3개의 할로겐을 갖는다.
한 실시양태에서, "할로알킬"은 2개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "할로알킬"은 3개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "할로알킬"은 4개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "할로알킬"은 5개의 탄소를 갖는다.
한 실시양태에서, "할로알킬"은 6개의 탄소를 갖는다.
"할로알킬"의 비제한적 예는 
를 포함한다.
"할로알킬"의 추가의 비제한적 예는
"할로알킬"의 추가의 비제한적 예는 
를 포함한다.
"할로알킬"의 추가의 비제한적 예는 
를 포함한다.
아릴의 실시양태
한 실시양태에서, "아릴"은 6-탄소 방향족 기 (페닐)이다.
한 실시양태에서, "아릴"은 10-탄소 방향족 기 (나프틸)이다.
한 실시양태에서, "아릴"은 헤테로사이클에 융합된 6-탄소 방향족 기이고, 여기서 부착 지점은 아릴 고리이다. "아릴"의 비제한적 예는 인돌린, 테트라히드로퀴놀린, 테트라히드로이소퀴놀린 및 디히드로벤조푸란을 포함하고, 여기서 각각의 기에 대한 부착 지점은 방향족 고리 상에 있다.
한 실시양태에서, "아릴"은 시클로알킬에 융합된 6-탄소 방향족 기이고, 여기서 부착 지점은 아릴 고리이다. "아릴"의 비제한적 예는 디히드로-인덴 및 테트라히드로나프탈렌을 포함하고, 여기서 각각의 기에 대한 부착 지점은 방향족 고리 상에 있다.
한 실시양태에서, "헤테로사이클"은 1개의 질소 및 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 갖는 시클릭 고리를 지칭한다.
헤테로사이클의 실시양태
한 실시양태에서, "헤테로사이클"은 1개의 질소 및 1개의 산소 및 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 갖는 시클릭 고리를 지칭한다.
한 실시양태에서, "헤테로사이클"은 2개의 질소 및 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 갖는 시클릭 고리를 지칭한다.
한 실시양태에서, "헤테로사이클"은 1개의 산소 및 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 갖는 시클릭 고리를 지칭한다.
한 실시양태에서, "헤테로사이클"은 1개의 황 및 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 갖는 시클릭 고리를 지칭한다.
"헤테로사이클"의 비제한적 예는 아지리딘, 옥시란, 티이란, 아제티딘, 1,3-디아제티딘, 옥세탄 및 티에탄을 포함한다.
"헤테로사이클"의 추가의 비제한적 예는 피롤리딘, 3-피롤린, 2-피롤린, 피라졸리딘 및 이미다졸리딘을 포함한다.
"헤테로사이클"의 추가의 비제한적 예는 테트라히드로푸란, 1,3-디옥솔란, 테트라히드로티오펜, 1,2-옥사티올란 및 1,3-옥사티올란을 포함한다.
"헤테로사이클"의 추가의 비제한적 예는 피페리딘, 피페라진, 테트라히드로피란, 1,4-디옥산, 티안, 1,3-디티안, 1,4-디티안, 모르폴린 및 티오모르폴린을 포함한다.
"헤테로사이클"의 추가의 비제한적 예는 인돌린, 테트라히드로퀴놀린, 테트라히드로이소퀴놀린 및 디히드로벤조푸란을 포함하고, 여기서 각각의 기에 대한 부착 지점은 헤테로사이클 고리 상에 있다.
"헤테로사이클"의 비제한적 예는 또한 하기를 포함한다:
"헤테로사이클"의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
"헤테로사이클"의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
"헤테로사이클"의 비제한적 예는 또한 하기를 포함한다:
"헤테로사이클"의 비제한적 예는 또한 하기를 포함한다:
"헤테로사이클"의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
"헤테로사이클"의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
헤테로아릴의 실시양태
한 실시양태에서, "헤테로아릴"은 1, 2, 3 또는 4개의 질소 원자를 함유하는 5원 방향족 기이다.
5원 "헤테로아릴" 기의 비제한적 예는 피롤, 푸란, 티오펜, 피라졸, 이미다졸, 트리아졸, 테트라졸, 이속사졸, 옥사졸, 옥사디아졸, 옥사트리아졸, 이소티아졸, 티아졸, 티아디아졸 및 티아트리아졸을 포함한다.
5원 "헤테로아릴" 기의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
한 실시양태에서, "헤테로아릴"은 1, 2 또는 3개의 질소 원자를 함유하는 6원 방향족 기 (즉, 피리디닐, 피리다지닐, 트리아지닐, 피리미디닐 및 피라지닐)이다.
1 또는 2개의 질소 원자를 갖는 6원 "헤테로아릴" 기의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
한 실시양태에서, "헤테로아릴"은 질소, 산소 및 황으로부터 선택된 1 또는 2개의 원자를 함유하는 9원 비시클릭 방향족 기이다.
비시클릭인 "헤테로아릴" 기의 비제한적 예는 인돌, 벤조푸란, 이소인돌, 인다졸, 벤즈이미다졸, 아자인돌, 아자인다졸, 퓨린, 이소벤조푸란, 벤조티오펜, 벤조이속사졸, 벤조이소티아졸, 벤조옥사졸 및 벤조티아졸을 포함한다.
비시클릭인 "헤테로아릴" 기의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
비시클릭인 "헤테로아릴" 기의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
비시클릭인 "헤테로아릴" 기의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
한 실시양태에서, "헤테로아릴"은 질소, 산소 및 황으로부터 선택된 1 또는 2개의 원자를 함유하는 10원 비시클릭 방향족 기이다.
비시클릭인 "헤테로아릴" 기의 비제한적 예는 퀴놀린, 이소퀴놀린, 퀴녹살린, 프탈라진, 퀴나졸린, 신놀린 및 나프티리딘을 포함한다.
비시클릭인 "헤테로아릴" 기의 추가의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
대안적 실시양태에서, "헤테로아릴"은 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 "임의로 치환된다".
비사이클의 실시양태
특정 실시양태에서, 용어 "비사이클"은 2개의 고리가 함께 융합되고 각각의 고리가 독립적으로 카르보사이클, 헤테로사이클, 아릴 및 헤테로아릴로부터 선택된 것인 고리계를 지칭한다. 비사이클 기의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
용어 "비사이클"이 2가 잔기, 예컨대 링커와 관련하여 사용되는 경우에, 부착 지점은 별개의 고리 상에 또는 동일한 고리 상에 있을 수 있다. 특정 실시양태에서, 두 부착 지점은 동일한 고리 상에 있다. 특정 실시양태에서, 두 부착 지점은 상이한 고리 상에 있다. 2가 비사이클 기의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
대안적 실시양태에서, "비사이클"은 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 "임의로 치환된"다.
분자의 BRAF 표적화 리간드 부분의 실시양태
특정 실시양태에서, R1은 CH3이다.
특정 실시양태에서, A1은 -N(CH2CH3)-이다.
특정 실시양태에서, R4는 시아노이다.
특정 실시양태에서, R5는 F이다.
특정 실시양태에서, A2는 O이다.
특정 실시양태에서, R6은 수소이다.
특정 실시양태에서, BRAF 표적화 리간드는 하기로부터 선택된다:
특정 실시양태에서, BRAF 표적화 리간드는 하기로부터 선택된다:
특정 실시양태에서, BRAF 표적화 리간드는 하기로부터 선택된다:
특정 실시양태에서, BRAF 표적화 리간드는 하기로부터 선택된다:
특정 실시양태에서, BRAF 표적화 리간드는 하기로부터 선택된다:
분자의 세레블론 리간드 부분의 실시양태
특정 실시양태에서, 세레블론 리간드는 하기로부터 선택된다:
특정 실시양태에서, 세레블론 리간드는 하기로부터 선택된다:
본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 화합물의 제조 방법은 또한 본 발명의 대상이다.
본 발명의 화합물은 하기 방법에 따라 제조될 수 있다. 하기 반응식 1 내지 3에 기재된 바와 같이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법을 사용한다.
본 발명의 화합물은 하기 방법에 따라 제조될 수 있다. 방법은 하기 반응식과 함께 보다 상세하게 기재된다. 일반적으로 말해서, 본 발명의 화합물을 합성하는 데 사용된 단계의 순서는 또한 특정 경우에 변형될 수 있다.
반응식 1
상기 반응식에서, A2는 -O-이고, n은 1이고, R4는 시아노이고, R5는 플루오로이다. 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
단계 A - 고리화: 약 110℃ 내지 약 140℃에서 12-18시간 동안 적합한 용매, 예컨대 톨루엔, 테트라히드로푸란 또는 그의 혼합물 중에서 2-아미노-5-히드록시-벤조산 또는 그의 유도체 (1)에 무수 트리에틸 오르토포르메이트 및 아민 (2)을 첨가함으로써 고리화에 의한 퀴나졸리논 중간체 (3) 수득을 달성할 수 있다. 아민 염 (HCl, TFA 등)을 사용한 고리화를 위해, 촉매 아세트산 (0.1 당량)을 사용할 수 있다.
단계 B - O-아릴화: 실온에서 적합한 용매, 예컨대, 예를 들어 N,N-디메틸포름아미드, THF 또는 그의 혼합물 중에서 적합한 염기, 예컨대 탄산세슘 또는 포타슘 tert-부톡시드의 존재 하에 퀴나졸리논 중간체 (3)에 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (4)을 첨가함으로써 O-아릴화에 의한 중간체 (5) 수득을 달성할 수 있다.
단계 C - 술포모일화: 적합한 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드 중에서 중간체 (5)에 술파모일 중간체 (상업적으로 입수가능하거나 또는 본원의 방법 I 및 II에 기재된 바와 같음) (6) 및 적합한 염기, 예컨대, 예를 들어 탄산세슘 등을 첨가하여 술포모일화를 통해 술폰아미드 중간체 (7)를 수득할 수 있다. 편리하게는 조건은 약 60℃ 내지 약 70℃에서 약 12시간 내지 약 18시간 동안이다.
단계 D - N-Boc 탈보호: 실온에서 적합한 용매, 예컨대 디클로로메탄 또는 디옥산 중에서 술폰아미드 중간체 (7)에 적합한 산, 예컨대 TFA 또는 HCl을 첨가하여 탈보호된 아민 (8)을 수득할 수 있다.
단계 E - 산-아민 커플링:
적합한 용매, 예컨대, 예를 들어 N,N-디메틸포름아미드 중에서 적합한 커플링제, 예컨대 HATU 또는 COMU의 존재 하에 아민 (8)에 N,N-디이소프로필에틸아민 및 산 (9)을 첨가하여 본 발명의 퀴나졸리논 유도체 (Ia)를 수득할 수 있다. 반응을 위한 편리한 조건은 약 0℃ 내지 약 50℃에서 약 2시간 내지 약 16시간 동안, 특히 약 10℃ 내지 약 40℃에서 약 4시간 내지 약 14시간 동안이다.
반응식 2
상기 반응식은 A2가 -NH-이고, n이 1이고, R4가 시아노이고, R5가 플루오로인 본 발명에 따른 화합물을 제공한다. 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
단계 F - 브로민화에 대한 일반적 절차: 적합한 용매, 예컨대, 예를 들어 DMF 중에서 벤조산 유도체 (11)에 브로민화제, 예컨대 NBS 등을 첨가하여 브로모벤질 유도체 (12)를 수득할 수 있다. 편리하게는 반응은 실온에서 이루어진다.
단계 G - 고리화에 대한 일반적 절차: 적합한 용매, 예컨대 톨루엔, 테트라히드로푸란 또는 그의 혼합물 중에서 브로모벤질 유도체 (12)에 무수 트리에틸 오르토포르메이트 및 아민 (13)을 첨가하여 고리화를 통해 퀴나졸리논 중간체 (14)를 수득할 수 있다. 반응을 위한 편리한 조건은 약 110℃ 내지 약 140℃에서 약 12시간 내지 약 18시간 동안이다. 아민 염 (HCl, TFA 등)을 사용한 고리화를 위해, 촉매 아세트산 (0.1 당량)을 사용할 수 있다.
단계 H & I - 아민-퀴나졸리논 커플링 및 Boc 보호에 대한 일반적 절차: 단계 H: Pd-PEPPSI-IHept 촉매를 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 적합한 염기, 예컨대 탄산세슘 등의 존재 하에 아민 (15) 및 퀴나졸리논 중간체 (14)에 첨가하여 (15)와 (14)의 커플링을 수득할 수 있다. 단계 I: 커플링 후에, 퀴나졸리논 중간체를 적합한 용매, 예컨대 아세토니트릴 중에서 적합한 염기, 예컨대 트리메틸아민 또는 DIPEA의 존재 하에 디-tert-부틸 디카르보네이트 및 DMAP의 첨가에 의해 Boc 보호하여 중간체 (5')를 수득할 수 있다. 중간체 (5')를 추가로 상기 반응식 1에 제시된 바와 같은 유사한 단계 C, D 및 E에 따라 본 발명에 따른 화학식 (Ib)의 화합물로 전환시킬 수 있다.
반응식 3
상기 반응식은 A2가 -O-이고, A3이 결합이고, A가 결합이고, n이 0이고, A4가 결합이고, R4가 시아노이고, R5가 플루오로인 본 발명에 따른 화합물을 제공한다. 나머지 치환기 및 가변기는 본원에 기재된 바와 같다.
단계 J: 적합한 용매 중에서 2-아미노-5-히드록시-벤조산 또는 그의 유도체 (15) 및 트리에틸 오르토포르메이트를 아민 (16)에 첨가하여 중간체 (17)를 수득할 수 있다. 편리하게는 용매는 톨루엔, 테트라히드로푸란 또는 그의 혼합물이다. 편리하게는 반응은 약 100℃ 내지 약 140℃에서 12시간 내지 16시간 동안 수행한다.
단계 K: 주위 온도에서 약 12시간 내지 약 18시간 동안 적합한 용매, 예컨대 메탄올 중에서 수소 및 Pd/C의 첨가에 의해 중간체 (17)로부터 Bn 기를 제거하여 중간체 (18)를 수득할 수 있다.
단계 L: 주위 온도에서 질소 분위기 하에 적합한 용매, 예컨대, 예를 들어 THF 중에서 중간체 (18)에 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (19) 및 탄산세슘을 첨가하여 중간체 (20)를 수득할 수 있다.
단계 M: 실온에서 질소 분위기 하에 약 12시간 내지 18시간 동안 적합한 용매, 예컨대, 예를 들어 디클로로메탄 중에서 중간체 (20)에 피리디늄 클로로크로메이트 (PCC)를 첨가하여 케톤 중간체 (21)를 수득할 수 있다.
단계 N: 대략 약 60℃ 내지 70℃에서 적합한 용매, 예컨대, 예를 들어 DMF 중에서 적합한 염기, 예컨대 탄산세슘의 존재 하에 중간체 (21)에 술파모일 (22)을 첨가하여 케톤 중간체 (23)를 수득할 수 있다.
단계 O: 약 60℃ 내지 약 80℃에서 적합한 용매, 예컨대 DMAc 중에서 적합한 염기, 예컨대 DIPEA의 존재 하에 케톤 중간체 (23) 및 Na(CN)BH3을 아민 (24)에 첨가하여 본 발명의 퀴나졸리논 유도체 (Ic)를 수득할 수 있다.
화합물의 단리 및 정제
본원에 기재된 화합물 및 중간체의 단리 및 정제는, 원하는 경우에, 임의의 적합한 분리 또는 정제 절차, 예컨대, 예를 들어 여과, 추출, 결정화, 칼럼 크로마토그래피, 박층 크로마토그래피, 후층 크로마토그래피, 정제용 저압 또는 고압 액체 크로마토그래피 또는 이들 절차의 조합에 의해 수행될 수 있다. 적합한 분리 및 단리 절차의 구체적 예시는 하기 본원의 제조예 및 실시예를 참조로 할 수 있다. 그러나, 다른 동등한 분리 또는 단리 절차가 물론 또한 사용될 수 있다. 본 발명의 키랄 화합물의 라세미 혼합물은 키랄 HPLC 및/또는 키랄 SFC를 사용하여 분리될 수 있다. 키랄 합성 중간체의 라세미 혼합물은 또한 키랄 HPLC 및/또는 키랄 SFC를 사용하여 분리될 수 있다.
본 발명의 화합물의 염
본 발명의 화합물이 염기성인 경우에, 이들은 상응하는 산 부가염으로 전환될 수 있다. 전환은 적어도 화학량론적 양의 적절한 산, 예컨대 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 인산 등 및 유기 산, 예컨대 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 옥살산, 말산, 말론산, 숙신산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 살리실산 등으로 처리함으로써 달성된다. 구체적 염은 푸마레이트이다. 전형적으로, 유리 염기를 불활성 유기 용매, 예컨대 디에틸 에테르, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 에탄올 또는 메탄올 등 중에 용해시키고, 산을 유사한 용매 중에 첨가한다. 온도를 0℃ 내지 50℃에서 유지한다. 생성된 염은 자발적으로 침전되거나 또는 덜 극성인 용매를 사용 시 용액으로부터 나올 수 있다.
그의 제조가 실시예에 기재되지 않는 한, 본 발명의 화합물 뿐만 아니라 모든 중간체 생성물은 유사한 방법에 따라 또는 본원에 제시된 방법에 따라 제조될 수 있다. 출발 물질은 상업적으로 입수가능하거나, 관련 기술분야에 공지되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 또는 그와 유사하게 제조될 수 있다.
본 발명에 있어서 본 발명의 화합물은 관능기에서 유도체화되어 생체내에서 모 화합물로 다시 전환될 수 있는 유도체를 제공할 수 있는 것으로 인지될 것이다.
약리학적 시험
본 발명의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 가치있는 약리학적 특성을 보유한다. 화합물을 하기에 주어진 시험에 따라 조사하였다.
물질
L-글루타민이 보충된 DMEM 페놀 레드 무함유 배지를 코닝(Corning)으로부터 구입하였다. 태아 소 혈청 (FBS)을 깁코(Gibco) (미국 뉴욕주 그랜드 아일랜드)로부터 구입하였다. 나노-글로(Nano-Glo)® HiBiT 용해 검정 완충제 및 시약을 프로메가(Promega) (미국 위스콘신주 매디슨)로부터 구입하였다. A375 (BRAF 동형접합 V600E 돌연변이를 보유함)를 ATCC로부터 구입하였다. ATCC로부터의 A375 세포주로부터 CRISPR 기술을 통해 BRAFV600E 단백질의 N-말단에 HiBiT 태그를 녹-인함으로써 A375.10 세포주를 생성하였다. 세포 배양 플라스크 및 384-웰 흑색 편평-바닥 폴리스티렌 TC-처리된 마이크로플레이트를 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 획득하였다.
HiBiT 세포 BRAFV600E 분해 검정
검정 전에, A375.10 세포주를 10% 태아 소 혈청 (FBS)이 보충된 DMEM 페놀 레드 무함유 배지에서 유지하였다. 화합물 처리 후, 세포를 용해시키고, 이어서 나노-글로® HiBiT 용해 검정 시약을 첨가함으로써 HiBiT 발광 신호의 정량화에 기초하여 BRAFV600E 분해를 결정하였다. 검출된 발광 신호는 세포 내 총 BRAFV600E 단백질 수준과 상관관계가 있다. 간략하게, 시험 화합물을 최고 농도 10 μM로부터 화합물의 11개의 반 로그 희석물과 함께 384-웰 플레이트에 첨가하고, 이중으로 플레이팅하였다. 이어서, A375.10 세포주의 현탁액 30 uL를 384-웰 플레이트의 칼럼 1-24 내로 웰당 7500개 세포의 세포 밀도로 분배하였다. 플레이트를 검정 지속기간 (6 또는 24시간) 동안 5% CO2 하에 37℃에서 유지하였다. 화합물과의 목적하는 인큐베이션 시간 후에, LgBiT 단백질 (1:100 희석됨) 및 발광 기질 (1:50 희석됨)을 함유하는 나노-글로® HiBiT 용해 완충제 30 uL를 검정 플레이트의 칼럼 1-23 내 세포에 첨가하였다. 플레이트를 실온에서 벤치 상에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 최종적으로, 엔비전(EnVision)™ 다중표지 판독기 (퍼킨엘머(PerkinElmer), 미국 캘리포니아주 산타 클라라) 상에서 HiBiT 발광 신호를 획득하였다.
화합물의 존재 하에 측정된 발광 반응의 정량화를 높은 신호/분해 부재 대조군 (비처리 세포 + 용해 검출 시약) 및 낮은 신호/완전 분해 대조군 (비처리 세포, 용해 검출 시약 부재)에 대해 정규화하였다. 데이터를 4-파라미터 로지스틱 피트로 분석하여 S자형 용량-반응 곡선을 생성하였다. DC50은 총 세포 BRAFV600E의 정확히 50%가 분해된 화합물의 농도이다. 각각의 화합물의 Emax 또는 최대 효과는 화합물 처리 후 세포에 남아있는 잔류 단백질의 양을 나타내며, 이는 표 1A, 표 1B, 표 1C 및 표 1D에 제공된다.
표 1A: DC50 값 및 Emax 값
표 2B: DC50 값 및 Emax 값
표 3C: DC50 값 및 Emax 값
표 4D: DC50 값 및 Emax 값
제약 조성물
본 발명의 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 순수한 화학물질로서 투여될 수 있지만, 종종 본원에 기재된 임의의 장애에 대한 이러한 치료를 필요로 하는 숙주, 전형적으로 인간을 위한 유효량을 포함하는 제약 조성물로서 투여된다. 따라서, 본 개시내용은 본원에 기재된 임의의 용도를 위한 유효량의 화합물 또는 제약상 허용되는 염을 적어도 1종의 제약상 허용되는 담체와 함께 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 제약 조성물은 유일한 활성제로서 화합물 또는 염을 함유할 수 있거나, 또는 대안적 실시양태에서 화합물 및 적어도 1종의 추가의 활성제를 함유할 수 있다.
특정 실시양태에서 제약 조성물은 단위 투여 형태 중에 약 0.001 mg 내지 약 1000 mg, 약 0.01 mg 내지 약 800 mg, 약 1 mg 내지 약 800 mg 또는 약 200 mg 내지 약 600 mg의 활성 화합물 및 임의로 약 0.1 mg 내지 약 2000 mg, 약 10 mg 내지 약 1000 mg, 약 100 mg 내지 약 800 mg 또는 약 200 mg 내지 약 600 mg의 추가의 활성제를 함유하는 투여 형태로 존재한다. 예는 적어도 약 또는 최대 0.001, 0.005, 0.010, 0.10, 1, 5, 10, 25, 50, 100, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700 또는 750 mg의 활성 화합물 또는 그의 염을 갖는 투여 형태이다.
특정 실시양태에서 제약 조성물은 약 70 mg의 활성 화합물 또는 그의 염을 함유하는 투여 형태로 존재한다. 특정 실시양태에서 제약 조성물은 약 400 mg의 활성 화합물 또는 그의 염을 함유하는 투여 형태로 존재한다. 특정 실시양태에서 제약 조성물은 약 800 mg의 활성 화합물 또는 그의 염을 함유하는 투여 형태로 존재한다.
특정 실시양태에서, 화합물은 그를 필요로 하는 환자에게 1일에 2회 투여된다.
본원에 개시된 화합물은 경구로, 국소로, 전신으로, 비경구로, 흡입 또는 분무에 의해, 설하로, 안구 이식물을 포함한 이식물을 통해, 경피로, 협측 투여를 통해, 직장으로, 안과용 용액으로서, 정맥내, 대동맥내, 두개내, 피하, 복강내, 피하, 경비, 설하 또는 직장을 포함한 주사에 의해 또는 다른 수단에 의해, 통상적인 제약상 허용되는 담체를 함유하는 투여 단위 제제로 투여될 수 있다.
제약 조성물은 임의의 제약상 유용한 형태, 예를 들어 고체 투여 형태, 액체, 에어로졸, 크림, 겔, 환제, 주사 또는 주입 용액, 캡슐, 정제, 시럽, 경피 패치, 피하 패치, 건조 분말, 흡입 제제, 의료 장치, 좌제, 협측 또는 설하 제제, 비경구 제제 또는 안과용 용액으로서 제제화될 수 있다. 일부 투여 형태, 예컨대 정제 및 캡슐은 적절한 양, 예를 들어 목적하는 목적을 달성하기 위한 유효량의 활성 성분을 함유하는 적합한 크기의 단위 용량으로 세분된다.
담체는 부형제 및 희석제를 포함하고, 치료될 환자에게 유효량으로 투여하기에 적합하도록 충분히 높은 순도 및 충분히 낮은 독성을 가져야 한다. 담체는 불활성일 수 있거나 또는 그 자체로 제약 이익을 보유할 수 있다. 화합물과 함께 사용되는 담체의 양은 화합물의 단위 용량당 투여를 위한 물질의 실제 양을 제공하기에 충분하다.
담체의 부류는 결합제, 완충제, 착색제, 희석제, 붕해제, 유화제, 향미제, 활택제, 윤활제, 보존제, 안정화제, 계면활성제, 정제화제 및 습윤제를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일부 담체는 1종 초과의 부류로 열거될 수 있으며, 예를 들어 식물성 오일은 일부 제제에서는 윤활제로서 사용될 수 있고, 다른 제제에서는 희석제로서 사용될 수 있다. 예시적인 제약상 허용되는 담체는 당, 전분, 셀룰로스, 분말화 트라가칸트, 맥아, 젤라틴; 활석 및 식물성 오일을 포함한다. 본 발명의 화합물의 활성을 실질적으로 방해하지 않는 임의적인 활성제가 제약 조성물에 포함될 수 있다.
제약 조성물/조합물은 경구 투여를 위해 제제화될 수 있다. 이들 조성물은 목적하는 결과를 달성하는 임의의 양의 활성 화합물, 예를 들어 0.1 내지 99 중량% (wt.%)의 화합물 및 통상적으로 적어도 약 5 중량%의 화합물을 함유할 수 있다. 일부 실시양태는 약 25 중량% 내지 약 50 중량% 또는 약 5 중량% 내지 약 75 중량%의 화합물을 함유한다.
특정 실시양태에서, LNP는 양이온성 또는 이온화성 한계를 함유한다. 예는 미국 특허 공개 번호 20060083780 및 20060240554; 미국 특허 번호 5,208,036; 5,264,618; 5,279,833; 5,283,185; 5,753,613; 및 5,785,992; 및 PCT 공개 번호 WO 96/10390을 포함하나 이에 제한되지는 않으며, 이들의 개시내용은 각각 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
직장 투여에 적합한 제제는 때때로 단위 용량 좌제로서 제공된다. 이들은 활성 화합물을 1종 이상의 통상적인 고체 담체, 예를 들어 코코아 버터와 혼합한 다음, 생성된 혼합물을 성형함으로써 제조될 수 있다.
피부에의 국소 적용에 적합한 제제는 바람직하게는 연고, 크림, 로션, 페이스트, 겔, 스프레이, 에어로졸 또는 오일의 형태를 취한다. 사용될 수 있는 담체는 석유 젤리, 라놀린, 폴리에틸렌 글리콜, 알콜, 경피 증진제 및 그의 2종 이상의 조합을 포함한다.
경피 투여에 적합한 제제는 장기간 동안 수용자의 표피와 밀접한 접촉을 유지하도록 적합화된 별개의 패치로서 제공될 수 있다. 경피 투여에 적합한 제제는 또한 이온영동에 의해 전달될 수 있고 (예를 들어, 문헌 [Pharmaceutical Research 3 (6):318 (1986)] 참조), 때때로 활성 화합물의 임의로 완충된 수용액의 형태를 취한다. 한 실시양태에서, 미세바늘 패치 또는 장치는 생물학적 조직, 특히 피부를 가로질러 또는 그 내로 약물을 전달하기 위해 제공된다. 미세바늘 패치 또는 장치는 조직에 대한 손상, 통증 또는 자극을 최소로 하거나 전혀 없게 하면서, 피부 또는 다른 조직 장벽을 가로질러 또는 그 내로 약물을 임상적으로 유의미한 속도로 전달하는 것을 허용한다.
폐로의 투여에 적합한 제제는 광범위한 수동 호흡 구동 및 능동 동력 구동 단일/다중 용량 건조 분말 흡입기 (DPI)에 의해 전달될 수 있다. 호흡 전달에 가장 통상적으로 사용되는 장치는 네뷸라이저, 계량-용량 흡입기 및 건조 분말 흡입기를 포함한다. 제트 네뷸라이저, 초음파 네뷸라이저 및 진동 메쉬 네뷸라이저를 포함한 여러 유형의 네뷸라이저가 이용가능하다. 적합한 폐 전달 장치의 선택은 파라미터, 예컨대 약물의 성질 및 그의 제제, 작용 부위 및 폐의 병리생리상태에 좌우된다.
추가의 제약 조성물
화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 및/또는 그의 제약상 허용되는 염은 치료 활성 물질로서, 예를 들어 제약 제제의 형태로 사용될 수 있다. 제약 제제는 경구로, 예를 들어 정제, 코팅된 정제, 당의정, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 에멀젼 또는 현탁액의 형태로 투여될 수 있다. 그러나, 투여는 또한 직장으로, 예를 들어 좌제의 형태로, 또는 비경구로, 예를 들어 주사 용액의 형태로 수행될 수 있다.
화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 및/또는 그의 제약상 허용되는 염은 제약 제제의 제조를 위해 제약상 불활성, 무기 또는 유기 담체와 함께 처리될 수 있다. 락토스, 옥수수 전분 또는 그의 유도체, 활석, 스테아르산 또는 그의 염 등은, 예를 들어 정제, 코팅된 정제, 당의정 및 경질 젤라틴 캡슐을 위한 이러한 담체로서 사용될 수 있다. 연질 젤라틴 캡슐에 적합한 담체는, 예를 들어 식물성 오일, 왁스, 지방, 반고체 및 액체 폴리올 등이다. 그러나, 활성 물질의 성질에 따라, 연질 젤라틴 캡슐의 경우에는 통상적으로 담체가 요구되지 않는다. 용액 및 시럽의 제조에 적합한 담체는, 예를 들어 물, 폴리올, 글리세롤, 식물성 오일 등이다. 좌제에 적합한 담체는, 예를 들어 천연 또는 경화 오일, 왁스, 지방, 반액체 또는 액체 폴리올 등이다.
또한, 제약 제제는 제약상 허용되는 보조 물질, 예컨대 보존제, 가용화제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 감미제, 착색제, 향미제, 삼투압 변경을 위한 염, 완충제, 차폐제 또는 항산화제를 함유할 수 있다. 이들은 또한 또 다른 치료상 가치있는 물질을 함유할 수 있다.
화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 및/또는 그의 제약상 허용되는 염 및 치료상 불활성 담체를 함유하는 의약이 또한 본 발명에 의해 제공되며, 그의 제조 방법은 화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 1종 이상의 화합물 및/또는 그의 제약상 허용되는 염 및 원하는 경우에 1종 이상의 다른 치료상 가치있는 물질을 1종 이상의 치료상 불활성 담체와 함께 생약 투여 형태로 만드는 것을 포함한다.
투여량은 넓은 한계 내에서 달라질 수 있고, 물론 각각의 특정한 경우에 개별 요건에 따라 조정되어야 할 것이다. 경구 투여의 경우에, 성인에 대한 투여량은 화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물의 1일에 약 0.01 mg 내지 약 1000 mg 또는 그의 제약상 허용되는 염의 상응하는 양으로 달라질 수 있다. 1일 투여량은 단일 용량으로서 또는 분할 용량으로 투여될 수 있고, 추가로 상한치는 이것이 지시되는 것으로 밝혀진 경우에 또한 초과될 수도 있다.
하기 실시예는 본 발명을 예시하며 그를 제한하지 않지만, 단지 그의 대표로서 제공된다. 제약 제제는 편리하게는 약 1-500 mg, 특히 1-100 mg의 화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 상응하는 양의 그의 제약상 허용되는 염을 함유한다. 본 발명에 따른 조성물의 예는 하기와 같다:
실시예 A
하기 조성의 정제를 통상적인 방식으로 제조한다:
표 5: 가능한 정제 조성
제조 절차
1. 성분 1, 2, 3 및 4를 혼합하고, 정제수와 함께 과립화한다.
2. 과립을 50℃에서 건조시킨다.
3. 과립을 적합한 밀링 장비에 통과시킨다.
4. 성분 5를 첨가하고, 3분 동안 혼합하고; 적합한 프레스 상에서 압축시킨다.
실시예 B-1
하기 조성의 캡슐을 제조한다:
표 6: 가능한 캡슐 성분 조성
제조 절차
1. 성분 1, 2 및 3을 적합한 혼합기에서 30분 동안 혼합한다.
2. 성분 4 및 5를 첨가하고, 3분 동안 혼합한다.
3. 적합한 캡슐 내로 충전한다.
화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물, 락토스 및 옥수수 전분을 먼저 혼합기에서 혼합한 다음, 분쇄 기계에서 혼합한다. 혼합물을 혼합기로 되돌려 보내고; 여기에 활석을 첨가하고, 철저히 혼합한다. 혼합물을 기계에 의해 적합한 캡슐, 예를 들어 경질 젤라틴 캡슐 내로 충전한다.
실시예 B-2
하기 조성의 연질 젤라틴 캡슐을 제조한다:
표 7: 가능한 연질 젤라틴 캡슐 성분 조성
표 8: 가능한 연질 젤라틴 캡슐 조성
제조 절차
화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물을 다른 성분의 따뜻한 용융물 중에 용해시키고, 혼합물을 적절한 크기의 연질 젤라틴 캡슐 내로 충전한다. 충전된 연질 젤라틴 캡슐을 통상의 절차에 따라 처리한다.
실시예 C
하기 조성의 좌제를 제조한다:
표 9: 가능한 좌제 조성
제조 절차
좌제 물질을 유리 또는 강철 용기에서 용융시키고, 철저히 혼합하고, 45℃로 냉각시킨다. 그 후, 여기에 미분된 화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물을 첨가하고, 완전히 분산될 때까지 교반한다. 혼합물을 적합한 크기의 좌제 금형에 붓고, 냉각되도록 둔 다음; 좌제를 금형으로부터 제거하고, 왁스지 또는 금속 호일로 개별적으로 패킹한다.
실시예 D
하기 조성의 주사 용액을 제조한다:
표 10: 가능한 주사 용액 조성
제조 절차
화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물을 폴리에틸렌 글리콜 400 및 주사용수의 혼합물 (부분) 중에 용해시킨다. pH를 아세트산에 의해 5.0으로 조정한다. 잔류 양의 물을 첨가하여 부피를 1.0 ml로 조정한다. 용액을 여과하고, 적절한 과량을 사용하여 바이알 내로 충전하고, 멸균한다.
실시예 E
하기 조성의 사쉐를 제조한다:
표 11: 가능한 사쉐 조성
제조 절차
화학식 I, 화학식, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물을 락토스, 미세결정질 셀룰로스 및 소듐 카르복시메틸 셀룰로스와 혼합하고, 물 중 폴리비닐피롤리돈의 혼합물을 사용하여 과립화한다. 과립을 스테아르산마그네슘 및 향미 첨가제와 혼합하고, 사쉐 내로 충전한다.
일반적 합성
본원에 기재된 화합물은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 하나의 비제한적 예에서, 개시된 화합물은 하기 반응식을 사용하여 제조될 수 있다.
입체중심을 갖는 본 발명의 화합물은 편의상 입체화학 없이 도시될 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 순수한 거울상이성질체 및 부분입체이성질체가 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 광학 활성 물질을 수득하는 방법의 예는 적어도 하기를 포함한다:
i) 결정의 물리적 분리 - 개별 거울상이성질체의 육안으로 보이는 결정을 수동으로 분리하는 기술. 이 기술은 개별 거울상이성질체의 결정이 존재하는 경우에, 즉 물질이 집성체이고 결정이 시각적으로 구별되는 경우에 사용될 수 있음;
ii) 동시 결정화 - 개별 거울상이성질체를 라세미체의 용액으로부터 개별적으로 결정화시키는 기술로, 단지 거울상이성질체가 고체 상태의 집성체인 경우에만 가능한 기술;
iii) 효소적 분해 - 거울상이성질체와 효소의 상이한 반응 속도에 의해 라세미체를 부분적으로 또는 완전히 분리하는 기술;
iv) 효소적 비대칭 합성 - 합성에서의 적어도 1개의 단계가 효소적 반응을 사용하여 목적하는 거울상이성질체의 거울상이성질체적으로 순수한 또는 풍부한 합성 전구체를 수득하는 합성 기술;
v) 화학적 비대칭 합성 - 키랄 촉매 또는 키랄 보조제에 의해 달성될 수 있는, 생성물에 비대칭 (즉, 키랄성)을 생성하는 조건 하에 비키랄 전구체로부터 목적 거울상이성질체를 합성하는 합성 기술;
vi) 부분입체이성질체 분리 - 라세미 화합물을 거울상이성질체적으로 순수한 시약 (키랄 보조제)과 반응시켜 개별 거울상이성질체를 부분입체이성질체로 전환시키는 기술. 이어서, 생성된 부분입체이성질체를 그의 현재 보다 뚜렷한 구조적 차이에 의해 크로마토그래피 또는 결정화에 의해 분리하고 이후 키랄 보조제를 제거하여 목적하는 거울상이성질체를 수득함;
vii) 1차 및 2차 비대칭 변환 - 라세미체로부터의 부분입체이성질체를 신속하게 평형화시켜 목적하는 거울상이성질체로부터의 부분입체이성질체의 용액에 우세도를 생성하는 기술로, 목적하는 거울상이성질체로부터의 부분입체이성질체의 우선적인 결정화가 평형을 교란시켜 결국 원칙적으로 모든 물질이 목적하는 거울상이성질체로부터 결정질 부분입체이성질체로 전환되도록 하는 기술. 이어서, 목적하는 거울상이성질체는 부분입체이성질체로부터 방출됨;
viii) 동역학적 분해 - 이 기술은 동역학적 조건 하에 거울상이성질체와 키랄, 비-라세미 시약 또는 촉매의 불균등한 반응 속도에 의해 라세미체의 부분적 또는 완전한 분해 (또는 부분적으로 분해된 화합물의 추가의 분해)를 달성하는 것을 지칭함;
ix) 비-라세미 전구체로부터의 거울상이성질체특이적 합성 - 목적하는 거울상이성질체를 비-키랄 출발 물질로부터 수득하는 합성 기술로, 여기서 입체화학적 완전성은 합성 과정에 걸쳐 손상되지 않거나 단지 최소로만 손상됨;
x) 키랄 액체 크로마토그래피 - 라세미체의 거울상이성질체를 액체 이동상에서 고정상과의 그의 상이한 상호작용에 의해 분리하는 기술 (키랄 HPLC를 통한 것 포함). 고정상은 키랄 물질로 제조될 수 있거나 또는 이동상은 상이한 상호작용을 유발하는 추가의 키랄 물질을 함유할 수 있음;
xi) 키랄 기체 크로마토그래피 - 라세미체를 휘발시키고 거울상이성질체를 기체 이동상에서 고정된 비-라세미 키랄 흡착제 상을 함유하는 칼럼과의 그의 상이한 상호작용에 의해 분리하는 기술;
xii) 키랄 용매를 사용한 추출 - 1종의 거울상이성질체의 특정한 키랄 용매 중으로의 우선적 용해에 의해 거울상이성질체를 분리하는 기술;
xiii) 키랄 막을 가로지르는 수송 - 라세미체를 박막 장벽과 접촉시켜 위치시키는 기술. 장벽은 2종의 혼화성 유체 (1종은 라세미체를 함유함)를 분리할 수 있고, 농도 또는 압력 차이와 같은 구동력은 막 장벽을 가로지르는 우선적 수송을 유발함. 분리는 라세미체의 단지 1종의 거울상이성질체만이 통과하도록 하는 막의 비-라세미 키랄 성질의 결과로서 발생함;
xiv) 모의 이동층 크로마토그래피가 한 실시양태에서 사용됨. 매우 다양한 키랄 고정상이 상업적으로 입수가능함.
본 발명의 대표적인 화합물의 합성
약어
ACN = 아세토니트릴; Boc = tert-부틸옥시카르보닐; dba = 디벤질리덴아세톤; COMU = (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트, 1-[(1-(시안-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시)-디메틸아미노-모르폴리노)]-우로늄-헥사플루오로포스페이트; DBU = 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔; DCM = 디클로로메탄; DMAc = 디메틸아세트아미드; DMAP = 4-디메틸아미노피리딘; DMF = 디메틸포름아미드; DMSO = 디메틸 술폭시드; dppf = 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센; ESI = 전기분무 이온화; EtOAc = 에틸 아세테이트; Ex = 실시예; HATU = 헥사플루오로포스페이트 아자벤조트리아졸 테트라메틸 우로늄; HPLC = 고성능 액체 크로마토그래피; IPA = 이소프로판올; LC-MS = 질량 분광측정법과 커플링된 액체 크로마토그래피; MS = 질량 분광측정법; MTBE = 메틸 tert-부틸 에테르; NBS = N-브로모숙신이미드; NIS = N-아이오도숙신이미드; NMR = 핵 자기 공명; PEPPSI = 피리딘-증강 전촉매 제조, 안정화 및 개시; PG = 보호기; pin = 피나콜레이토; rt = 실온; SFC = 초임계 유체 크로마토그래피; TEA = 트리에틸아민; Tf = 트리플레이트; TFA = 트리플루오로아세트산; THF = 테트라히드로푸란; TLC = 박층 크로마토그래피; Ts = 토실레이트; UPLC = 초고성능 액체 크로마토그래피.
중간체의 합성
반응식 I:
반응식 I에 대한 일반적 절차: 디옥산 (3 mL) 중 1-1 (1 mmol) 및 1-2 (2 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (2 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 밀봉 튜브에서 70-110℃에서 24시간 동안 가열하여 1-3을 생성하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 에틸 아세테이트 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (실리카, 구배: 디클로로메탄 중 0-3% 메탄올)에 의해 정제하여 1-3을 수득하였다.
중간체 tert-부틸 4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)피페리딘-1-카르복실레이트
tert-부틸 4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)피페리딘-1-카르복실레이트를 일반적 절차 (N,N-디이소프로필에틸아민/디옥산)에 따라 tert-부틸 4-(4-아미노페닐)-1-피페리딘카르복실레이트 (CAS# 170011-57-1)로부터 합성하였다. 수율-45%; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10.75 (s, 1H), 6.94 (d, J = 8.16 Hz, 2H), 6.60 (d, J = 7.88 Hz, 2H), 5.64 (d, J = 6.96 Hz, 1H), 4.28-4.24 (m, 1H), 4.07-4.00 (m, 2H ), 2.79-2.64 (m, 4H), 2.53-2.48 (m, 2H), 2.11-2.05 (m, 1H), 1.89-1.81 (m, 1H), 1.71-1.64 (m, 2H0, 1.40-1.34 (m, 10H); LC-MS (ES-): m/z 386.3 [M-H]-.
중간체 tert-부틸 4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)피페라진-1-카르복실레이트
tert-부틸 4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)피페라진-1-카르복실레이트를 일반적 절차 (DIPEA/DMF)에 따라 합성하였다. 수율-50%; LC-MS (ES+): m/z 389.2 [M+H]+.
반응식 II
반응식 II에 대한 일반적 절차: 실온에서 메탄올 (0.1 M) 중에 용해시킨 2-1에 염화수소 (1,4-디옥산 중 4M, 5 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 증발시켜 2-2를 수득하였다.
중간체 3-((4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드
3-((4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드를 일반적 절차에 따라 tert-부틸 4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)피페리딘-1-카르복실레이트로부터 합성하였다. 수율-88%; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 8.84 (brs, 1H), 8.77 (brs, 1H), 6.95 (d, J = 8.44 Hz, 2H), 6.66 (d, J = 8.48 Hz, 2H), 4.29 (dd, J = 11.4, 4.72 Hz, 1H), 3.35-3.29 (m, 2H), 2.99-2.91 (m, 2H), 2.71-2.53 (m, 3H), 2.10-2.05 (m, 1H), 1.89-1.71 (m, 5H); LC-MS (ES+): m/z 288.2 [M+H]+.
중간체 3-((4-(피페라진-1-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드
3-((4-(피페라진-1-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드를 일반적 절차 (Boc-탈보호)에 따라 합성하였다. 수율-92%; 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ = 7.38 (d, 8.52 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 4.71-4.65 (m, 1H), 3.53 (brs, 4H), 3.40 (brs, 4H), 2.74-2.66 (m, 2H), 2.04 (brs, 2H); LC-MS (ES+): m/z 289.1 [M+H]+.
중간체 3-(3-플루오로-4-피페리딘-4-일-페닐아미노)-피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드의 합성:
단계-1: 탄산나트륨 (6.14 g, 57.89 mmol)을 물 (12 mL), THF (60 mL) 및 메탄올 (24 mL) 중 4-브로모-3-플루오로-아닐린 (5.00 g, 26.3 mmol) 및 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (8.95 g, 29.0 mmol)의 교반 용액에 첨가하고, 플라스크를 아르곤으로 철저히 퍼징하였다. PdCl2(dppf).디클로로메탄 (430 mg, 526 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 질소로 탈기시킨 다음, 80℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 짧은 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (15% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (6.1 g, 20.9 mmol, 79% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 293 [M+H]+.
단계-2: 탄산세슘 (19.73 g, 60.54 mmol)을 t-BuOH (60 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (5.9 g, 20.2 mmol) 및 2,6-디벤질옥시-3-아이오도-피리딘 (9.26 g, 22.2 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 아르곤으로 탈기시키고, Pd2(dba)3 (924 mg, 1.01 mmol), RuPhos (942 mg, 2.02 mmol)를 불활성 분위기 하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 짧은 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (15% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (5.9 g, 10.1 mmol, 50% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 582 [M+H]+.
단계-3: 10% Pd-C (50% 습윤, 4.6 g)를 에틸 아세테이트 (40 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (4.6 g, 7.91 mmol)의 교반된 질소-탈기된 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 수소 풍선 압력 하에 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 작은 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 증발시키고, 칼럼 크로마토그래피 (헥산 중 40% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.6 g, 6.41 mmol, 81% 수율)를 청색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 406 [M+H]+.
단계-4: 디옥산-HCl (4M, 30 mL, 130 mmol)을 10℃에서 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.3 g, 3.21 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 에테르로 연화처리하고, 동결건조시켜 3-[3-플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (840 mg, 2.73 mmol, 85.25% 수율)을 녹색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 306 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.00 (br s, 1H), 8.85-8.83 (m, 1H), 6.96-6.91 (m, 1H), 6.50-6.45 (m, 2H), 4.34-4.30 (m, 1H), 3.32-3.29 (m, 2H), 2.98-2.93 (m, 3H), 2.77-2.69 (m, 1H), 2.60-2.56 (m, 1H), 2.08-2.05 (m, 1H), 1.92-1.81 (m, 5H).
2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 및 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산의 합성:
단계-1: 라세미 화합물 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (10 g, 23.67 mmol)를 키랄 SFC 분리 (이동상: 40% IPA-CO2; 유량: 120 mL/분; 사이클 시간: 7.6분; 배압: 100 bar; UV: 210 nm)로 처리하여 피크 1 (제1 용리) tert-부틸 4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.9 g, 7.13 mmol, 29% 수율, 99.252% ee)를 회백색 고체로서 수득하고, 피크 2 (제2 용리) tert-부틸 4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (3.1 g, 7.44 mmol, 30% 수율, 94.588% ee)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계-2: 무수 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (400 mg, 986.53 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 4.0 M HCl (4 mL)을 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 과량의 용매를 반응 혼합물로부터 감압 하에 제거하여 조 물질을 수득하였으며, 이를 디클로로메탄과 공증류시켜 (3S)-3-[3-플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (300 mg, 871.54 μmol, 88% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 306.2 [M+H]+.
단계-3: 디클로로메탄 (15 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (300 mg, 739.90 μmol)의 잘 교반된 용액에 0℃에서 디옥산 중 염화수소 용액 4.0M (3 mL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 디에틸 에테르로 세척하여 (3R)-3-[3-플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (250 mg, 699.96 μmol, 95% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 306.2 [M+H]+.
3-(2-플루오로-4-피페리딘-4-일-페닐아미노)-피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드의 합성:
단계-1: 탄산나트륨 (6.14 g, 57.89 mmol)을 물 (12 mL), THF (60 mL) 및 메탄올 (24 mL) 중 4-브로모-2-플루오로-아닐린 (5.00 g, 26.3 mmol) 및 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (8.95 g, 29.0 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 아르곤으로 탈기시키고, PdCl2(dppf).디클로로메탄 (430 mg, 526 μmol)을 불활성 분위기 하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 짧은 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 유기 추출물을 물, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (15% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-3-플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (6.1 g, 20.9 mmol, 79% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 293 [M+H]+.
단계-2: 탄산세슘 (19.73 g, 60.54 mmol)을 t-BuOH (60 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-3-플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (5.9 g, 20.2 mmol) 및 2,6-디벤질옥시-3-아이오도-피리딘 (9.26 g, 22.2 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 아르곤으로 탈기시키고, Pd2(dba)3 (924 mg, 1.01 mmol) 및 RuPhos (942 mg, 2.02 mmol)를 불활성 분위기 하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 짧은 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 유기 추출물을 물, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (10% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (5.9 g, 10.1 mmol, 50% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 582 [M+H]+.
단계-3: 10% Pd-C (50% 습윤, 4.6 g)를 에틸 아세테이트 (40 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (4.6 g, 7.91 mmol)의 교반된 탈기된 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 수소 풍선 압력 하에 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 짧은 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 증발시키고, 칼럼 크로마토그래피 (40% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.6 g, 6.41 mmol, 81% 수율)를 청색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 406 [M+H]+.
단계-4: 디옥산 HCl (4M, 10 mL, 40 mmol)을 10℃에서 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.3 g, 3.21 mmol)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 에테르로 연화처리하고, 동결건조시켜 3-[2-플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (840 mg, 2.73 mmol, 85% 수율)를 녹색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 306 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 8.85 (br s, 1H), 8.69-8.68 (m, 1H), 6.92-6.89 (m, 1H), 6.83-6.77 (m, 2H), 4.40-4.36 (m, 2H), 3.37-3.31 (m, 2H), 2.98-2.90 (m, 2H), 2.76-2.71 (m, 2H), 2.58-2.56 (m, 1H), 2.05-1.73 (m, 6H).
tert-부틸 2-브로모아세테이트를 사용한 중간체의 알킬화에 대한 일반적 절차: tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세테이트의 합성
3-[4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (1 g, 3.09 mmol)를 N,N-디메틸아세트아미드 (15 mL) 중에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민 (1.60 g, 12.4 mmol, 2.15 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, tert-부틸 2-브로모아세테이트 (663 mg, 3.40 mmol, 498 μL)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 0-10% 메탄올)에 의해 정제하여 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (0.84 g, 2.09 mmol, 68% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 402.2 [M+H]+.
하기 화합물을 3-[4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드로부터 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세테이트의 합성에 사용된 바와 같이 일반적 절차를 사용하여 합성하였다.
중간체의 tert-부틸 에스테르 절단에 대한 일반적 절차: 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산, 트리플루오로아세트산 염
tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세테이트를 디클로로메탄 (5 mL) 중에 용해시키고, TFA (1.61 mL, 20.9 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 4시간 동안 가열하였으며, 반응은 완료되었다. 휘발성 물질을 감압 하에 증발시켰다. 물질을 -78℃로 동결시키고, 고진공에 적용하고, 해동시켜 조밀한 고체를 수득하였다. 고체를 메탄올:디클로로메탄 (1:4) 중에 재용해시키고, 침전물이 형성될 때까지 MTBE를 적가하였다. 현탁액을 초음파처리에 적용하고, 고체를 흡인 하에 여과하였다. 녹색 고체를 여과에 의해 수집하여 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산, 트리플루오로아세트산 염 (0.95 g, 2.07 mmol, 97% 수율)을 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 346.4 [M+H]+.
하기 중간체를 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산, 트리플루오로아세트산 염 합성에 대한 일반적 절차를 사용하여 적절한 출발 물질로부터 합성하였다.
2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 및 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산의 합성:
단계 1. 디클로로메탄 (25 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (330 mg, 786.67 μmol)의 잘 교반된 용액에 0℃에서 디옥산 중 염화수소 용액 4.0M (3 mL)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 디에틸 에테르로 세척하여 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (300 mg, 750.29 μmol, 95% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 364.5 [M+H]+.
단계 2. 디클로로메탄 (30 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (350 mg, 834.35 μmol)의 잘 교반된 용액에 0℃에서 디옥산 중 염화수소 용액 4.0M (3 mL)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 디에틸 에테르로 세척하여 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (320 mg, 800.31 μmol, 96% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 364.5 [M+H]+.
2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세트산의 합성:
단계-1: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠 (2 g, 12.57 mmol, 1.39 mL), tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (2.34 g, 12.57 mmol)의 교반 용액에 실온에서 N,N-디이소프로필에틸아민 (8.12 g, 62.86 mmol, 10.95 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃로 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 20-25% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(2-플루오로-4-니트로-페닐)피페라진-1-카르복실레이트 (4 g, 12.30 mmol, 98% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.01-8.07 (m, 2H), 7.19 (t, J = 12.80 Hz, 1H), 3.49 (t, J = 7.20 Hz, 4H), 3.27 (t, J = 6.80 Hz, 4H), 1.43 (s, 9H).
단계-2: 에탄올 (30 mL), 물 (8 mL) 중 tert-부틸 4-(2-플루오로-4-니트로-페닐)피페라진-1-카르복실레이트 (4.1 g, 12.60 mmol)의 용액에 철 (3.52 g, 63.01 mmol, 447.70 μL), 염화암모늄 (2.02 g, 37.81 mmol, 1.32 mL)을 첨가하고, 70℃에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (200 mL)로 세척하였다. 여과물을 물 (80 mL), NaHCO3 용액 (60 mL) 및 염수 (60 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)피페라진-1-카르복실레이트 (3.7 g, 12.31 mmol, 98% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 296.1[M+H]+
단계-3: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)피페라진-1-카르복실레이트 (2 g, 6.77 mmol)의 용액에 중탄산나트륨 (1.99 g, 23.70 mmol, 921.76 μL)에 이어서 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (3.25 g, 16.93 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 14시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (60 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (10 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-카르복실레이트 (2.73 g, 4.96 mmol, 73% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 407.1 [M+H]+.
단계-4: 1,4-디옥산 (10 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-카르복실레이트 (2.7 g, 6.64 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4M, 10 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 디에틸 에테르로 연화처리하여 3-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-5-(6-피페라진-1-일-3-피리딜)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘 (1.6 g, 2.38 mmol, 97% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 307.0 [M+H]+.
단계-5: N,N-디메틸포름아미드 (15 mL) 중 3-(3-플루오로-4-피페라진-1-일-아닐리노)피페리딘-2,6-디온 (2 g, 6.53 mmol)을 밀봉 튜브에 넣고, 트리에틸아민 (2.64 g, 26.12 mmol, 3.64 mL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (1.40 g, 7.18 mmol, 1.05 mL)를 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 물 (50 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (2x100mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 세척하여 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세테이트 (1.7 g, 3.37 mmol, 52% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 421.2 [M+H]+.
단계-6: 1,4-디옥산 (10 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세테이트 (1.7 g, 4.04 mmol)의 교반 용액에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4M, 20 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하여 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세트산 (1.5 g, 3.28 mmol, 81% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 365.2 [M+H]+.
2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,6-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산의 합성:
단계-1: THF (20 mL), 메탄올 (5 mL) 및 물 (5 mL) 중 4-브로모-3,5-디플루오로-아닐린 (2.49 g, 11.96 mmol)의 교반 용액에 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (5.55 g, 17.94 mmol)를 첨가하고, N2로 20분 동안 탈기시켰다. Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (0.98 g, 1.20 mmol), 탄산나트륨 (3.80 g, 35.89 mmol, 1.50 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 20% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2,6-디플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (3 g, 7.06 mmol, 59% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 255.1 [M -56 + H]+.
단계-2: 1,4 디옥산 (25 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2,6-디플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (2.1 g, 6.77 mmol)의 용액을 N2로 15분 동안 탈기시켰다. Pd(OH)2 (2.1 g, 14.95 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고, H2 풍선 압력 하에 24시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(4-아미노-2,6-디플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (2 g, 5.51 mmol, 81% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 257.1 [M -56 + H]+.
단계-3: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2,6-디플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.60 mmol)의 교반 용액에 중탄산나트륨 (807 mg, 9.61 mmol, 373.61 μL) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (923 mg, 4.81 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 빙수 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,6-디플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (460 mg, 380.21 μmol, 24% 수율)를 점성 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 368.1 [M - 56+ H]+.
단계-4: 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,6-디플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (460 mg, 1.09 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 염화수소 용액 (디옥산 중 4M, 4.00 g, 109.71 mmol, 5 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하여 3-[3,5-디플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (100 mg, 255.53 μmol, 24% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 324.1 [M + H]+.
단계-5: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 3-[3,5-디플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (6, 300 mg, 927.82 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 TEA (470 mg, 4.64 mmol, 647.38 μL) 및 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (200 mg, 1.03 mmol, 150.38 μL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발시켜 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,6-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (310 mg, 666.09 μmol, 72% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 438.1 [M + H]+.
단계-6: 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,6-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (250 mg, 571.46 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 염화수소 용액 (디옥산 중 4M, 4.00 g, 109.71 mmol, 5 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하여 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,6-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (200 mg, 459.51 μmol, 80% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 382.1 [M + H]+.
2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]아세트산의 합성:
단계-1: N,N-디메틸포름아미드 (15 mL) 중 1,2-디플루오로-4-니트로-벤젠 (1.5 g, 9.43 mmol, 1.04 mL) 및 tert-부틸 2-(4-피페리딜)아세테이트 (1.88 g, 9.43 mmol)의 교반 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (6.09 g, 47.14 mmol, 8.21 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 빙수에 첨가한 다음, 고체를 수득하였다. 고체를 여과하고, 냉수로 세척하고, 감압 하에 건조시켜 tert-부틸 2-[1-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-4-피페리딜]아세테이트 (2.7 g, 5.67 mmol, 60% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 339.1 [M+H]+.
단계-2: 물 (10 mL) 및 에탄올 (25 mL) 중 tert-부틸 2-[1-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-4-피페리딜]아세테이트 (2.7 g, 7.98 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 철 분말 (2.23 g, 39.90 mmol, 283.47 μL) 및 염화암모늄 (2.13 g, 39.90 mmol, 1.39 mL)을 첨가하였다. 이어서, 반응물을 70℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x70 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 염수 용액 (100 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[1-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-4-피페리딜]아세테이트 (2.5 g, 5.27 mmol, 66% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 309.1 [M+H]+.
단계-3: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 tert-부틸 2-[1-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-4-피페리딜]아세테이트 (1.5 g, 4.86 mmol)의 교반 용액에 중탄산나트륨 (1.23 g, 14.59 mmol, 567.51 μL) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (2.1 g, 10.94 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]아세테이트 (900 mg, 2.10 mmol, 43% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 420.2 [M+H]+.
단계-4: 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]아세테이트 (950 mg, 2.26 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 염화수소 용액 (디옥산 중 4M, 2 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하여 2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]아세트산 (800 mg, 1.56 mmol, 69% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 364.2 [M+H]+.
2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산의 합성:
단계-1: 건조 THF (200 mL) 중 메틸 아세테이트 (4.46 g, 60.23 mmol, 4.78 mL)의 교반 용액에 -78℃에서 질소 분위기 하에 리튬 디이소프로필아미드 (10.75 g, 100.38 mmol, 50.19 mL)를 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반한 다음, THF (50 mL) 중 tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트 (10 g, 50.19 mmol) 용액을 -78℃에서 적가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 0℃에서 포화 염화암모늄 용액 (250 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 화합물을 칼럼 크로마토그래피 (60-120 실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-히드록시-4-(2-메톡시-2-옥소-에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.6 g, 16.75 mmol, 33% 수율)를 황색 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 174.1 [M-100+H]+.
단계-2: 디클로로메탄 (70 mL) 중 tert-부틸 4-히드록시-4-(2-메톡시-2-옥소-에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.5 g, 20.12 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 염화수소 용액 (디옥산 중 4M, 50 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 메틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (5.5 g, 26.23 mmol)를 담황색 점착성 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 174.1 [M + H]+.
단계-3: DMSO (70 mL) 중 메틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (5.5 g, 31.75 mmol)를 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 N,N-디이소프로필에틸아민 (14.36 g, 111.14 mmol, 19.36 mL) 및 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠 (6.06 g, 38.10 mmol, 4.21 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (70 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 칼럼 크로마토그래피 (60-120 실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 메틸 2-[1-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (2.7 g, 7.95 mmol, 25% 수율)를 황색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 313.1 [M + H]+.
단계-4: 에탄올 (200 mL) 및 물 (36 mL) 중 메틸 2-[1-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (6.1 g, 19.53 mmol)의 교반 용액에 실온에서 철 분말 (5.45 g, 97.66 mmol, 693.97 μL) 및 염화암모늄 (3.13 g, 58.60 mmol, 2.05 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 75℃에서 5시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 메틸 2-[1-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (5.5 g, 19.48 mmol, 100% 수율)를 담갈색 액체로서 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 6.75-6.80 (m, 1H), 6.27-6.34 (m, 2H), 4.93 (s, 2H), 4.53 (s, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.77-2.89 (m, 4H), 2.50 (s, 2H), 1.75-1.78 (m, 4H).
단계-5: 메틸 2-[1-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (5.5 g, 19.48 mmol)를 밀봉 튜브에 넣고, N,N-디메틸포름아미드 (70 mL) 중에 용해시키고, 중탄산나트륨 (4.91 g, 58.45 mmol, 2.27 mL) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (6.24 g, 48.71 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 75℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시키고, 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 칼럼 크로마토그래피 (60-120 실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 생성물을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르에 이어서 에틸 아세테이트로 세척하여 메틸 2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (3.8 g, 8.82 mmol, 45% 수율)를 담녹색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 394.0 [M + H]+.
단계-6: THF (20 mL) 중 메틸 2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (3.8 g, 9.66 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 6N HCl 용액 (1.14 mmol, 80 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 디에틸 에테르에 이어서 아세토니트릴로 세척하여 2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (4 g, 8.42 mmol, 87% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 380.1 [M + H]+.
(1r,3r)-3-(3-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실산 및 (1s,3s)-3-(3-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실산의 합성:
단계-1: 1,2-디브로모에탄 (5.60 g, 29.8 mmol, 2.25 mL, 1.88e-1 당량)을 N2 분위기 하에 THF (49.0 mL) 중 교반된 Zn 분말 (19.7 g, 301 mmol, 1.90 당량)에 첨가하고, 생성된 혼합물을 80℃에서 10분 동안 교반하고, 이어서 THF (18.0 mL) 중 TMSCl (2.57 g, 23.6 mmol, 3.00 mL, 1.49e-1 당량)의 용액을 25℃에서 첨가하고, 그 온도에서 4분 동안 교반하였다. 이어서, THF (102 mL) 중 화합물 tert-부틸 3-아이오도아제티딘-1-카르복실레이트 (45.0 g , 158 mmol, 1.00 당량)의 용액을 첨가하고, 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 트리스(2-푸릴)포스판 (2.17 g, 9.37 mmol, 5.89e-2 당량) 및 Pd2(dba)3 (2.33 g, 2.54 mmol, 1.60e-2 당량)을 첨가하고, 이어서 THF (216 mL) 중 2-플루오로-1-아이오도-4-니트로벤젠 (43.9 g, 164 mmol, 1.03 당량)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 50℃에서 8시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 10/1)는 tert-부틸 3-아이오도아제티딘-1-카르복실레이트 (Rf = 0.5)가 소모되었고 1개의 새로운 스팟 (Rf = 0.1)이 형성되었다는 것을 나타냈다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (300 mL)로 희석하고, H2O (500 mL)를 첨가하였다. 분리된 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 10/1, Rf = 0.1)에 의해 정제하여 tert-부틸 3-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘-1-카르복실레이트 (22.0 g, 74.2 mmol, 46.7% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계-2: DCM (50.0 mL) 중 tert-부틸 3-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘-1-카르복실레이트 (10.0 g, 33.7 mmol, 1.00 당량) 및 TFA (19.2 g, 168 mmol, 12.4 mL, 5.00 당량)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 0/1)는 출발 물질 (Rf = 0.5)이 완전히 소모되었고 1개의 새로운 스팟 (Rf = 0.1)이 형성되었다는 것을 나타냈다. 반응 혼합물을 농축시켜 3-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘 (10.0 g, 조 물질, TFA 염)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계-3: DCM (120 mL) 중 3-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘 (10.0 g, 32.2 mmol, 1.00 당량, TFA 염)의 용액에 AcOH (3.48 g, 57.9 mmol, 3.31 mL, 1.80 당량) 및 tert-부틸 3-옥소시클로부탄-1-카르복실레이트 (8 g, 47.00 mmol, 1.46 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 15분 동안 교반하였다. NaBH(OAc)3 (24.6 g, 116 mmol, 3.60 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30℃에서 6시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 0/1)는 출발 물질 (Rf ~ 0.1)이 완전히 소모되었고 2개의 새로운 스팟 (Rf = 0.4, Rf = 0.5)이 형성되었다는 것을 나타냈다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적 질량을 갖는 1개의 주요 피크 (RT = 0.777분)가 검출되었다는 것을 나타냈다. 반응 혼합물을 DCM (200 mL) 및 H2O (300 mL)로 희석하고, 포화 수성 NaHCO3에 의해 pH~6으로 염기성화시켰다. 분리된 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 0/1, Rf = 0.4, Rf = 0.5)에 의해 정제하여 tert-부틸 (1r,3r)-3-(3-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실레이트 (5.00 g, 14.2 mmol, 98.3% 수율) (HNMR 및 NOE에 의해 확인됨)를 황색 오일로서 수득하였다. tert-부틸 (1s,3s)-3-(3-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실레이트 (6.00 g, 17.1 mmol, 96.5% 수율) (HNMR 및 NOE에 의해 확인됨)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 351.1 [M+H]+.
시스 부분입체이성질체 1HNMR: δ 8.03 (dd, J = 2.1, 8.4 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 2.3, 9.7 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 3.93 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.66-3.65 (m, 1H), 3.73 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.26 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 3.17-3.08 (m, 1H), 2.74-2.59 (m, 1H), 2.26-2.18 (m, 2H), 2.16-2.07 (m, 2H), 1.44 (s, 9H).
단계-4: THF (20.0 mL) 중 tert-부틸 (1s,3s)-3-(3-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실레이트 (8.00 g, 24.8 mmol, 1.00 당량) 및 10% Pd/C (600 mg, 14.2 mmol, 1.00 당량)의 혼합물, 이어서 혼합물을 H2 (15 psi) 분위기 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 0/1)는 출발 물질 (Rf = 0.5)이 소모되었고 1개의 새로운 스팟 (Rf = 0.3)이 형성되었다는 것을 나타냈다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적 질량을 갖는 1개의 주요 새로운 피크 (RT = 0.685분)가 검출되었다는 것을 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (1s,3s)-3-(3-(4-아미노-2-플루오로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실레이트 (7.80 g, 24.3 mmol, 98.0% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계-5: 디옥산 (70.0 mL) 중 tert-부틸 (1s,3s)-3-(3-(4-아미노-2-플루오로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실레이트 (20.5 mmol, 1.00 당량), 2,6-비스(벤질옥시)-3-브로모피리딘 (22.6 mmol, 1.10 당량), Pd2(dba)3 (600 mg, 655 μmol, 5.25e-2 당량), XPhos (600 mg, 1.26 mmol, 1.01e-1 당량) 및 t-BuONa (28.6 mmol, 1.40 당량)의 혼합물을 N2 분위기 하에 100℃에서 8시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 0/1)는 출발 물질 (Rf = 0.4)이 소모되었고 1개의 새로운 스팟 (Rf = 0.3)이 형성되었다는 것을 나타냈다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적 질량을 갖는 1개의 주요 새로운 피크 (RT = 1.02분)가 검출되었다는 것을 나타냈다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석하고, H2O (200 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 50/1에서 5/1, Rf = 0.3)에 의해 정제하여 tert-부틸 (1s,3s)-3-(3-(4-((2,6-비스(벤질옥시)피리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실레이트 (6.30 g, 10.3 mmol, 50.9% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 610.3 [M+H]+.
단계-6: THF (40.0 mL) 중 tert-부틸 (1s,3s)-3-(3-(4-((2,6-비스(벤질옥시)피리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실레이트 (10.1 mmol, 1.00 당량) 및 10% Pd/C (600 mg, 656 μmol, 0.100 당량)의 혼합물을 H2 (50 psi) 분위기 하에 25℃에서 24시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 0/1)는 출발 물질 (Rf = 0.3)이 소모되었고 1개의 새로운 스팟 (Rf = 0.2)이 형성되었다는 것을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 10/1에서 디클로로메탄/메탄올 = 10/1)에 의해 정제하여 tert-부틸 (1s,3s)-3-(3-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실레이트 (2.20 g, 5.10 mmol, 51.8 수율)를 청색 오일로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 493.4 [M+H]+.
단계-7: DCM (10.0 mL) 중 tert-부틸 (1s,3s)-3-(3-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실레이트 (5.1 mmol, 1.00 당량) 및 TFA (15.4 g, 135 mmol, 10.0 mL, 29.1 당량)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. TLC (디클로로메탄/메탄올 = 10/1)는 출발 물질 (Rf = 0.6)이 소모되었고 1개의 새로운 스팟 (Rf = 0.3)이 형성되었다는 것을 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O (50 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (100 mL)으로 세척하였다. 분리된 유기 층을 버리고, 수층을 동결건조시키고, 역상-HPLC (HPLC:EW20037-26-p1c1, 0.1% TFA 조건)에 의해 추가로 정제하여 (1s,3s)-3-(3-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-1-일)시클로부탄-1-카르복실산 (1.35 g, 3.60 mmol, 70.54% 수율)을 청색 회색 고체로서 수득하였다. 1H NMR: (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.83-12.11 (m, 1H), 10.80 (s, 1H), 10.73-10.55 (m, 1H), 10.44-10.23 (m, 1H), 7.17 (br t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.58-6.46 (m, 2H), 6.41-6.14 (m, 1H), 4.37 (br dd, J = 4.7, 11.6 Hz, 2H), 4.28-3.86 (m, 5H), 2.87 (quin, J = 8.7 Hz, 1H), 2.80-2.68 (m, 1H), 2.58 (td, J = 3.8, 17.6 Hz, 1H), 2.46 (br s, 2H), 2.22 (br d, J = 9.2 Hz, 2H), 2.12-2.01 (m, 1H), 1.88 (dq, J = 4.5, 12.3 Hz, 1H).
주: 트랜스 부분입체이성질체를 상기 기재된 동일한 방식으로 제조하였다.
3-((4-(4-아미노피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온의 합성:
단계-1: t-BuOH (4.85 mL) 중 tert-부틸 N-[1-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-4-피페리딜]카르바메이트 (150 mg, 484.84 μmol) 및 2,6-디벤질옥시-3-아이오도-피리딘 (222.53 mg, 533.33 μmol)의 교반 용액에 탄산세슘 (473.92 mg, 1.45 mmol)을 첨가하고, 용액을 Ar로 퍼징하여 잘 탈기시켰다. 이어서, RuPhos Pd G3 (44.80 mg, 48.48 μmol)을 첨가하고, 반응물을 다시 탈기시켰다. 반응 혼합물을 100℃에서 18시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 작은 셀라이트 패드 상에서 여과하고, 에틸 아세테이트로 잘 세척하였다. 합한 유기부를 물 및 염수로 세척하고, 여과하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 오일로서 수득하였으며, 이를 실리카를 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 헥산 중 40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 N-[1-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]카르바메이트 (100 mg, 158.68 μmol, 33% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 600 [M+H]+
단계-2: EtOH (5 mL) 중 tert-부틸 N-[1-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]카르바메이트 (75 mg, 125.27 μmol)의 용액에 활성탄 상 5% 팔라듐 (4.00 mg, 37.58 μmol)을 첨가한 후, 플라스크를 H2 풍선으로 퍼징하였다. 반응물을 수소 분위기 (풍선 압력) 하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 셀라이트 상에서 여과하고, 셀라이트 패드를 3 x EtOH 및 3 x EtOAc로 세척한 후, 농축시켜 조 tert-부틸 N-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]카르바메이트 (50 mg, 112.97 μmol, 90% 수율)를 오일로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ES+): m/z 421 [M+H]+
단계-3: DCM (2 mL) 중 tert-부틸 N-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]카르바메이트 (50 mg, 118.91 μmol)의 용액에 TFA (740.00 mg, 6.49 mmol, 500 μL)를 첨가하였다. 용액을 3시간 동안 교반하고, 톨루엔으로부터 3x 농축시켜 3-[4-(4-아미노-1-피페리딜)-3-플루오로-아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (45 mg, 98.42 μmol, 83% 수율, TFA 염)을 조 오일로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 정제 없이 사용하였다. LCMS (ES+): m/z 321 [M+H]+.
2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산의 합성
단계-1: 디클로로메탄 (30 mL) 중 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-옥소-피페리딘-1-카르복실레이트 (2.5 g, 10.63 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (3.23 g, 31.8 mmol, 4.44 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 -20℃로 냉각시켰다. 디클로로메탄 (10 mL) 중 트리플루오로메틸술포닐 트리플루오로메탄술포네이트 (4.50 g, 15.94 mmol, 2.68 mL)의 용액을 질소 분위기 하에 -20℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응물을 0℃에서 냉수 (70 mL) 적가로 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 5-15% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(트리플루오로메틸술포닐옥시)-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (1.3 g, 2.16 mmol, 20% 수율)를 담황색 액체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 268.0 [M -CO2 tBu +H]+.
단계-2: 밀봉 튜브에 들은 1,4-디옥산 (30 mL) 및 물 (3 mL) 중 3-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린 (1.70 g, 7.19 mmol) 및 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(트리플루오로메틸술포닐옥시)-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (2.4 g, 6.53 mmol)의 용액에 무수 삼염기성 인산칼륨 (4.16 g, 19.60 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 탈기시킨 다음, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐 (II), 디클로로메탄과의 착물 (533.62 mg, 653.44 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 5분 동안 다시 퍼징하고, 80℃에서 마이크로웨이브 하에 1.5시간 동안 방사선조사하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3X70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 15-25% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,3-디플루오로-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (1.6 g, 4.84 mmol, 74% 수율)를 담녹색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 229.2 [M-CO2 tBu + H]+.
단계-3: 1,4-디옥산 (200 mL) 중 4-브로모-3-플루오로-아닐린 (5 g, 26.31 mmol)의 용액에 아세트산칼륨 (7.75 g, 78.94 mmol, 4.93 mL) 및 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란 (7.35 g, 28.95 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 탈기시킨 다음, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐 (II), 디클로로메탄과의 착물 (2.15 g, 2.63 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 10-20% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 3-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린 (5.5 g, 15.96 mmol, 61% 수율)을 담황색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 238.2 [M + H]+.
단계-4: 메탄올 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,3-디플루오로-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (1.6 g, 4.87 mmol)의 교반 용액에 20% Pd(OH)2 (2 g, 14.24 mmol)를 채우고, 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 실온에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하였다. 셀라이트 층을 메탄올 (200 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (1.45 g, 4.32 mmol, 89% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 231.2 [M+H- CO2 tBu]+
단계-5: 아세토니트릴 (6 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (800 mg, 2.42 mmol)의 교반 용액에 0-5℃에서 4-메틸벤젠술폰산 수화물 (1.40 g, 7.34 mmol, 1.13 mL)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 물 (2 mL) 중 아질산나트륨 (342.53 mg, 4.96 mmol, 157.85 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0-5℃에서 1시간 동안 교반하고, 동일한 온도에서 물 (2 mL) 중 아이오딘화칼륨 (848.24 mg, 5.11 mmol, 271.87 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 물 (8 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (3x8 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 25% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(2-플루오로-4-아이오도-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (896 mg, 1.94 mmol, 80% 수율)를 오렌지색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 342.0 [M+H-CO2 tBu]+
단계-6: 마이크로웨이브 바이알에 들은 1,4-디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(2-플루오로-4-아이오도-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (800 mg, 1.81 mmol) 및 2,6-디벤질옥시-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘 (1.71 g, 2.18 mmol)의 교반 용액에 무수 K3PO4 (962.18 mg, 4.53 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 퍼징한 다음, XPhos-Pd-G2 (142.66 mg, 181.31 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 5분 동안 다시 퍼징하고, 100℃에서 마이크로웨이브 하에 2시간 동안 방사선조사하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (810 mg, 835.91 μmol, 46% 수율)를 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 605.2 [M+H]+
단계-7: 에틸 아세테이트 (3 mL) 및 1,4-디옥산 (3 mL) 중 tert-부틸 4-[4-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (810 mg, 1.34 mmol)의 용액에 Pd(OH)2 (564.38 mg, 4.02 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 수소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (80 mL)로 세척하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (420 mg, 927.80 μmol, 69% 수율)를 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 327.0 [M+H-100]+
단계-8: 1,4-디옥산 (2 mL) 중 tert-부틸 4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (420 mg, 984.93 μmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 석유 에테르로 세척하여 조 3-[4-(3,3-디플루오로-4-피페리딜)-3-플루오로-페닐]피페리딘-2,6-디온 (340 mg, 937.22 μmol, 95% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.90 (s, 1H), 7.35 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 11.20 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 3.80-3.95 (m, 3H), 3.55-3.74 (m, 1H), 3.12-3.45 (m, 2H), 2.41-2.51 (m, 1H), 2.20-2.31 (m, 2H), 1.98-2.15 (m, 3H).
단계-9: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 3-[4-(3,3-디플루오로-4-피페리딜)-3-플루오로-페닐]피페리딘-2,6-디온 (340 mg, 1.04 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (421.74 mg, 4.17 mmol, 580.91 μL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (203.24 mg, 1.04 mmol, 152.81 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x10 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 이어서, 용액을 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (460 mg, 1.03 mmol, 99% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 441.2 [M+H]+.
단계-10: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (460 mg, 1.04 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 석유 에테르로 세척하여 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (355 mg, 811.22 μmol, 78% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 385.2 [M+H]+.
1-(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온의 합성:
단계-1: 수소화나트륨 (오일 중 60%, 2.38 g, 59.4 mmol)을 DMF (150 mL) 중 6-브로모-1H-인다졸-3-아민 (7 g, 33.0 mmol, 439 μL)의 교반 용액에 0℃에서 조금씩 첨가하고, 혼합물을 40분 동안 교반하였다. 아이오도메탄 (5.15 g, 36.3 mmol, 2.26 mL)을 냉각 하에 적가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피 (50% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 6-브로모-1-메틸-인다졸-3-아민 (4.2 g, 18.6 mmol, 56% 수율)을 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 227 [M+H]+.
단계-2: 에틸 아크릴레이트 (14.0 g, 139 mmol)를 80℃에서 6-브로모-1-메틸-인다졸-3-아민 (4.2 g, 18.6 mmol), [DBU][Lac] (DBU와 락트산의 등몰 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하면서 혼합함으로써 제조됨, 2.09 g, 14.9 mmol)의 혼합물에 5일에 걸쳐 5 부분으로 (각각 2.8 g) 첨가하였다. 완료된 후 (LCMS), 반응 혼합물을 차아염소산나트륨 (30% 수성, 5 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 합한 유기부를 물, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피 (50% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 에틸 3-[(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)아미노]프로파노에이트 (2.9 g, 8.89 mmol, 48% 수율)를 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 327 [M+H]+.
단계-3: 무수 아세트산나트륨 (1.46 g, 17.8 mmol)에 이어서 브로민화시아노겐 (1.41 g, 13.3 mmol)을 주위 온도에서 에탄올 (40 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)아미노]프로파노에이트 (2.9 g, 8.89 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 하에 48시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 합한 유기부를 물, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (45% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 에틸 3-[(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)-시아노-아미노]프로파노에이트 (1.65 g, 4.70 mmol, 53% 수율)를 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 352 [M+H]+.
단계-4: (1E)-아세트알데히드 옥심 (1.01 g, 17.1 mmol)에 이어서 염화인듐 (III) (126 mg, 569 μmol)을 주위 온도에서 톨루엔 (60 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)-시아노-아미노]프로파노에이트 (2 g, 5.69 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 하에 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물 및 염수로 세척하였다. 유기부를 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (60% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 에틸 3-[(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)-카르바모일-아미노]프로파노에이트 (1.4 g, 3.79 mmol, 67% 수율)를 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 370 [M+H]+.
단계-5: 트리톤-B (메탄올 중 40%, 2.4 mL, 5.69 mmol)를 주위 온도에서 MeCN (70 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)-카르바모일-아미노]프로파노에이트 (1.40 g, 3.79 mmol)의 교반 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 45분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기 층을 물, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (30% 에틸 아세테이트-헥산)에 의해 정제하여 1-(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (910 mg, 2.81 mmol, 74% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 324 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.60 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.61 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.26-7.23 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.93 (t, J=6.6 Hz, 2H), 2.76 (t, J=6.6 Hz, 2H).
1-(1-메틸-6-(피페리딘-4-일)-1H-인다졸-3-일)디히드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 히드로클로라이드의 합성:
단계 1: 1-(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (1.25 g, 3.87 mmol) 및 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (2.39 g, 7.74 mmol)의 용액을 N2로 10분 동안 버블링하였다. 이어서, 플루오린화세슘 (1.18 g, 7.74 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2 (566 mg, 774 μmol)를 첨가하고, 혼합물을 85℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 셀라이트/실리카 겔을 통해 여과하였다. 에틸 아세테이트로 세척한 후, 여과물을 물로 희석하고, 층을 분리하고, 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 정상 크로마토그래피 (헥산 중 5-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (1.04 g, 2.44 mmol, 63% 수율)를 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 426.3 [M+H]+.
단계 2: 팔라듐 (탄소 상 10%, 유형 487, 건조, 1.08 g, 1.02 mmol)을 메탄올 (30 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (1.44 g, 3.38 mmol)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 수소 풍선 분위기 하에 주위 온도에서 교반하였다. 24시간 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 디클로로메탄/메탄올의 혼합물 (1:1)로 세척하고, 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.42 g, 3.32 mmol, 98% 수율)를 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 372.3 [M - tert-부틸 + H]+.
단계 3: 1-(1-메틸-6-(피페리딘-4-일)-1H-인다졸-3-일)디히드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 히드로클로라이드를 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트로부터 tert-부톡시카르보닐 보호기 탈보호를 위해 염화수소 (1,4-디옥산 중 4M, 5 당량)를 사용하여 정량적 수율로 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 328.1 [M+H]+.
단계 4: DMF (30 mL) 중 1-[1-메틸-6-(4-피페리딜)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 히드로클로라이드 (2.8 g, 7.70 mmol) 및 트리에틸아민 (3.89 g, 38.48 mmol, 5.36 mL)의 교반 용액에 실온에서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (2.25 g, 11.54 mmol, 1.69 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 빙수 (100 mL)에 붓고, 즉시 에틸 아세테이트 (3X150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3X50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세테이트 (2.3 g, 4.57 mmol, 59% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 442.2 [M+H]+.
단계 5: DCM (20 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세테이트 (2.2 g, 4.98 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (4 M, 1.25 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (2.5 g, 5.12 mmol, 100% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 386.2 [M+H]+.
2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산의 합성:
단계-1: 디옥산 (480 mL) 및 H2O (120 mL) 중 화합물 6-브로모-1H-인다졸 (57.0 g, 289 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (134 g, 433 mmol), Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (12.0 g, 14.6 mmol) 및 Na2CO3 (100 g, 943 mmol)의 혼합물을 105℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (500 mL)로 세척하였다. 여과물을 염수 (150 mL x 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피 (0~30% 에틸 아세테이트/석유 에테르)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(1H-인다졸-6-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (80.0 g, 239 mmol, 83% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 300.1 [M+H]+.
단계-2: DMF (700 mL) 중 tert-부틸 4-(1H-인다졸-6-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (75.0 g, 224 mmol)의 용액에 KOH (37.7 g, 672 mmol) 및 I2 (85.3 g, 336 mmol, 67.7 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하고, 0℃로 냉각시켰다. 이어서, MeI (44.6 g, 314 mmol, 19.6 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (1500 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (500 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (500 mL x 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 크로마토그래피 (0~8% 에틸 아세테이트/석유 에테르)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(3-아이오도-1-메틸-1H-인다졸-6-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (23.0 g, 52.3 mmol, 23% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 440.1 [M+H]+
단계-3: THF (1.00 L) 중 t-BuOK (190 g, 1.69 mol)의 용액에 0℃에서 페닐메탄올 (73.4 g, 679 mmol, 70.6 mL)을 첨가하였다. 2,6-디클로로피리딘 (50.0 g, 338 mmol)을 25℃에서 혼합물에 첨가하고, 75℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃에서 포화 수성 NH4Cl (200 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (200 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (200 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (500 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 석유 에테르 (150 mL)로 연화처리하여 2,6-비스(벤질옥시)피리딘 (84.0 g, 85% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 292.2 [M+H]+
단계-4: 아세토니트릴 (100 mL) 중 2,6-비스(벤질옥시)피리딘 (34.0 g, 116 mmol)의 용액에 40℃에서 아세토니트릴 (200 mL) 중 NBS (21.0 g, 118 mmol, 1.01 당량)의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 85℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (500 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (300 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (200 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 잔류물을 석유 에테르 (60 ml)로 연화처리하여 2,6-비스(벤질옥시)-3-브로모피리딘 (27.7 g, 64% 수율)을 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 371.9 [M+H]+
단계-5: 디옥산 (500 mL) 중 2,6-비스(벤질옥시)-3-브로모피리딘 (52.4 g, 139 mmol)의 용액에 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (37.1 g, 146 mmol), KOAc (41.0 g, 418 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (5.69 g, 6.97 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 105℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 물 (500 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (500 mL x 2)로 추출하였다. 추출물을 염수 (400 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피 (0~100% 에틸 아세테이트/석유 에테르)에 의해 정제하여 2,6-비스(벤질옥시)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘 (35.0 g, 60% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 418.3 [M+H]+
단계-6: 디옥산 (200 mL) 및 H2O (40 mL) 중 2,6-비스(벤질옥시)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘 (20.0 g, 45.53 mmol), tert-부틸 4-(1H-인다졸-6-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (26.6 g, 63.7 mmol) 및 Cs2CO3 (44.5 g, 136 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (3.72 g, 4.55 mmol, 0.10 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여과물을 염수 (60 mL x 3 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피 (0~100% 에틸 아세테이트/석유 에테르)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(3-(2,6-비스(벤질옥시)피리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (20.0 g, 73% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 603.3 [M+H]+
단계-7: EtOH (270 mL) 및 EtOAc (270 mL) 중 tert-부틸 4-(3-(2,6-비스(벤질옥시)피리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (18.0 g, 29.8 mmol, 1.00 당량)의 용액에 N2 분위기 하에 10% Pd/C (4.00 g)를 첨가하였다. 현탁액을 탈기시키고, H2로 3회 퍼징하였다. 혼합물을 H2 (15 psi) 하에 30℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피 (에틸 아세테이트/석유 에테르)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.3 g, 41% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 427.2 [M+H]+
단계-8: 무수 DCM (5 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.17 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 25 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 0℃에서 TFA (668.35 mg, 5.86 mmol, 451.59 μL)를 첨가하였다. 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 톨루엔 (2 x 15 mL)과 공비혼합하고, 디에틸 에테르 (20 mL)로 연화처리하여 3-[1-메틸-6-(4-피페리딜)인다졸-3-일]피페리딘-2,6-디온 (500 mg, 1.12 mmol, 95% 수율, TFA 염)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 326.9 [M+H]+
단계-9: N,N-디메틸포름아미드 (4 mL) 중 3-[1-메틸-6-(4-피페리딜)인다졸-3-일]피페리딘-2,6-디온 (230 mg, 704.67 μmol)의 교반 용액에 실온에서 트리에틸아민 (213.92 mg, 2.11 mmol, 294.65 μL)에 이어서 tert-부틸 브로모아세테이트 (151.19 mg, 775.14 μmol, 113.68 μL)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC에 의해 용리액으로서 5% 메탄올-디클로로메탄을 사용하여 모니터링하였다. 완료된 후, 물을 첨가하고, 5% 메탄올- 디클로로메탄 (2x30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 빙냉수 (2x30 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 목적 조 화합물 tert-부틸 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세테이트 (260 mg, 576.44 μmol, 82% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 441.4 [M + H]+.
단계-10: 디클로로메탄 (5 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세테이트 (260 mg, 590.19 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 염화수소 용액 (디옥산 중 4.0 M, 590.19 μmol, 4 mL)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC에 의해 용리액으로서 5% 메탄올 - 디클로로메탄을 사용하여 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 수득된 잔류물을 톨루엔 (2x20 mL)과 공증류시키고, 디에틸 에테르 (2x5 mL)로 연화처리하고, 감압 하에 건조시켜 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (230 mg, 545.86 μmol, 92% 수율, HCl 염)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 385.3 [M + H]+.
2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산의 합성:
단계-1: 질소 분위기 하에 N,N-디메틸포름아미드 (15 mL) 중 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 557.35 mg, 23.22 mmol)의 현탁액에 0℃에서 N,N-디메틸포름아미드 (15 mL) 중 6-브로모-3-아이오도-1H-인다졸 (5.0 g, 15.48 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 10분 동안 교반하였다. 그 후, 반응 혼합물을 다시 0℃로 냉각시키고, 아이오도메탄 (4.40 g, 30.97 mmol, 1.93 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 반응 혼합물을 염화암모늄 (20 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 빙냉 염수 용액 (2 x 50 mL)으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시킨 다음, 증발시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르 중 20% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 6-브로모-3-아이오도-1-메틸-인다졸 (4.0 g, 11.79 mmol, 76% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 339.8 [M + H]+
단계-2: 물 (1.8 mL) 및 디옥산 (4.2 mL) 중 6-브로모-3-아이오도-1-메틸-인다졸 (1.56 g, 4.64 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 10 mL 밀봉-튜브에 실온에서 질소 하에 2,6-디벤질옥시-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘 (1.5 g, 3.09 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소를 5분 동안 퍼징하여 탈기시켰다. 후속적으로, Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (252.36 mg, 309.02 μmol) 및 탄산세슘 (2.01 g, 6.18 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 95℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 층 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르 중 20% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 6-브로모-3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸 (1.1 g, 1.77 mmol, 57% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 502.0 [M + H]+
단계-3: 1,4-디옥산 (10.0 mL) 중 6-브로모-3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸 (1.4 g, 2.80 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (602.34 mg, 2.80 mmol) 및 탄산세슘 (2.73 g, 8.39 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 15분 동안 탈기시킨 다음, RuPhos (130.56 mg, 279.78 μmol), RuPhosPdG3 (234.00 mg, 279.78 μmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 다시 질소로 5분 동안 탈기시켰다. 생성된 반응 혼합물을 100℃로 2.5시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (50 mL)로 희석하고, 물 (20.0 ml) 및 염수 용액 (30.0 mL)으로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (1.1 g, 1.64 mmol, 59% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 635.2 [M + H]+
단계-4: 질소 기체로 퍼징된 1,4-디옥산 (30 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (2.0 g, 3.15 mmol)의 교반 용액에, 이어서 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량% (건조 기준) (442.48 mg, 3.15 mmol)를 첨가하고, 실온에서 수소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (200 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 75% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (1.2 g, 2.59 mmol, 82% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 457.2 [M + H]+
단계-5: 1,4-디옥산 (15 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (1.2 g, 2.59 mmol)의 교반 용액에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (30 mL)을 0℃에서 적가하고, 실온에서 50시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 헥산 (100 mL)으로 연화처리하고, 건조시켜 2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜] 아세트산 (1.15 g, 2.16 mmol, 83% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 401.2 [M + H]+
2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세트산의 합성:
단계-1: tert-부틸 2-(4-피페리딜)아세테이트 (50 mg, 250.89 μmol) 및 6-브로모-3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸 (125.54 mg, 250.89 μmol)의 교반 용액에 1,4 디옥산 (3 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 탈기시키고, 이어서 Cs2CO3 (97.6 mg, 250.89 μmol)을 첨가하였다. 이어서, XPhos (9.1 mg, 250.89 μmol)를 첨가하고, 이어서 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0) (9.5 mg, 250.89 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 희석하고, 냉수 (5 mL)로 세척하였다. 유기 층을 염수 용액 (5 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 30% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세테이트 (40 mg, 46.54 μmol, 18.55% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 619.3 [M + H]+.
단계-2: 1,4 디옥산 (20 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세테이트 (500 mg, 808.06 μmol)의 교반 용액에 25℃에서 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량% 및 50% 물 (226.97 mg, 1.62 mmol)을 첨가하였다. 총 반응 혼합물을 수소 풍선 압력 하에 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 1,4 디옥산 (150 mL)으로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 디에틸 에테르 (20 mL)로 세척하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세테이트 (400 mg, 573.85 μmol, 71.02% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 441.2 [M + H]+.
단계-3: 디클로로메탄 (5 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세테이트 (300 mg, 680.99 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 트리플루오로아세트산 (388.24 mg, 3.40 mmol, 262.33 μL)을 첨가하였다. 총 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응을 LC-MS에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 디에틸 에테르 (20 mL)로 세척하여 2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세트산 (220 mg, 353.09 μmol, 51.85% 수율)을 담분홍색 고체로서 수득하였다.
tert-부틸 4-(3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)-3,3-디플루오로피페리딘-1-카르복실레이트의 합성:
단계-1: 1,4-디옥산 (20 mL) 중 6-브로모-3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸 (2 g, 4.00 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 밀봉 튜브에, 비스(피나콜레이토)디보란 (1.12 g, 4.40 mmol) 및 아세트산칼륨 (1.18 g, 11.99 mmol, 749.55 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시켰다. 반응 혼합물에 Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (326.40 mg, 399.69 μmol)을 첨가하고, 다시 5분 동안 탈기시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하고, 유기 층을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 20% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)인다졸 (1.9 g, 3.43 mmol, 86% 수율)을 점성 황색 액체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 548.2 [M + H]+.
단계-2a: -20℃에서 디클로로메탄 (25 mL) 중 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-옥소-피페리딘-1-카르복실레이트 (2.5 g, 10.63 mmol)의 교반 용액에 트리에틸 아민 (3.23 g, 31.88 mmol, 4.44 mL)에 이어서 트리플루오로메탄술폰산 무수물 (4.50 g, 15.94 mmol, 2.68 mL)을 적가하였다. 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 NaHCO3 (수성)으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 혼합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르 중 0-20% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(트리플루오로메틸술포닐옥시)-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (1.2 g, 2.29 mmol, 22% 수율)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ 6.59 (s, 1H), 4.29 (q, J = 4.3 Hz, 2H), 4.04 (t, J = 11.0 Hz, 2H), 1.51 (s, 9H).
단계-2: 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL) 중 3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)인다졸 (500 mg, 913.32 μmol), tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(트리플루오로메틸술포닐옥시)-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (436.09 mg, 1.19 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 ml 밀봉 튜브에 탄산나트륨 (290.41 mg, 2.74 mmol, 114.79 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 15분 동안 퍼징한 다음, Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (111.79 mg, 137.00 μmol)을 첨가하고, 80℃에서 2시간 동안 계속 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 층에 통과시키고, 에틸 아세테이트 (50 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 25% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (487 mg, 722.00 μmol, 79% 수율)를 황색 점착성 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 639.2 [M+H]+
단계-3: 무수 1,4-디옥산 (5 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (480 mg, 706.43 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 실온에서 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량% 및 50% 물 (545.66 mg, 777.08 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 주머니 하에 16시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 1,4 디옥산 (100 mL) 및 N,N-디메틸포름아미드 (20 mL)로 세척하고, 용매를 감압 하에 증발시켰다. 조 화합물을 디에틸 에테르 (20 mL)로 연화처리하고, 감압 하에 건조시켜 tert-부틸 4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (300 mg, 636.15 μmol, 90% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 463.2 [M+H]+
2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산의 합성:
단계-1: 에탄올 (250 mL) 중 4-브로모-2,5-디플루오로-벤조니트릴 (25 g, 114.68 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 메틸히드라진 (85% 수용액, 21.13 g, 458.72 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 80℃로 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 물 (80 ml)로 켄칭하고, 수득된 침전물을 여과하고, 건조시켜 6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-아민 (17.5 g, 70.71 mmol, 62% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ES+): m/z 246.0 [M + H]+.
단계-2a: 플라스크 (2.00 L) 내 DBU (200 g, 1.31 mol, 1.00 당량)와 락트산 (118 g, 1.31 mol, 97.5 mL, 1.00 당량)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼징하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 질소 분위기 하에 12시간 동안 교반하여 [DBU]를 수득하였다. 농후한 용액으로서의 [Lac] 이온성 액체 (316 g, 조 물질)를 추가 정제 없이 사용하였다.
단계-2: [DBU].[Lac] 이온성 액체 (18 g) 중 6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-아민 (17.5 g, 71.70 mmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 에틸 프로프-2-에노에이트 (50.25 g, 501.92 mmol, 54.38 mL)를 첨가하였다. 생성된 용액을 90℃로 48시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 물 (100 ml)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-60%)를 사용하여 정제하여 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)아미노]프로파노에이트 (11.0 g, 30.97 mmol, 43% 수율)를 적색 반고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 344.4 [M + H]+.
단계-3: 에탄올 (110 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)아미노]프로파노에이트 (11 g, 31.96 mmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 아세트산나트륨 (15.73 g, 191.76 mmol, 10.28 mL) 및 브로민화시아노겐 (16.93 g, 159.80 mmol, 8.38 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-시아노-아미노]프로파노에이트 (12 g, 25.98 mmol, 81% 수율)를 황색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ES+): m/z 371.0 [M+H]+
단계-4: 톨루엔 (120 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-시아노-아미노]프로파노에이트 (12 g, 32.50 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 염화인듐 (III) (718.91 mg, 3.25 mmol) 및 아세트알독심 (5.76 g, 97.51 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃로 1시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-80%)를 사용하여 정제하여 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-카르바모일-아미노]프로파노에이트 (8.0 g, 20.33 mmol, 63% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 387.0 [M + H]+.
단계-5: 아세토니트릴 (80 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-카르바모일-아미노]프로파노에이트 (8.0 g, 20.66 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 벤질 트리메틸암모늄 히드록시드 (메탄올 중 25% 용액, 4.15 g, 6.20 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 80 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 1-(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (5.2 g, 15.01 mmol, 73% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 343.0 [M + H]+.
단계-6a: THF (200 mL) 중 tert-부틸 아세테이트 (18.67 g, 160.76 mmol, 160.76 mL)의 잘 교반된 용액에 -78℃에서 리튬 디-이소프로필 아미드 (THF 중 2M, 64.30 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 동일한 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물에 -78℃에서 벤질 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트 (15 g, 64.31 mmol, 12.82 mL)의 용액을 천천히 첨가한 후, 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (200 mL)로 희석하고, 물 (40 mL) 및 염수 (40 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 벤질 4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (22.5 g, 64.02 mmol, 100% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 294.2 [M+H-56]+.
단계-6b: 1,4-디옥산 (200 mL) 중 벤질 4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (23 g, 65.82 mmol)의 교반 용액에 팔라듐 (7.00 g, 65.82 mmol)을 첨가하였으며, 이를 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 실온에서 20시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (14 g, 64.94 mmol, 99% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ES+): m/z 216.3 [M+H]+
단계-6: 1,4-디옥산 (80 mL) 중 1-(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (4.4 g, 12.90 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 질소 분위기 하에 탄산세슘 (10.51 g, 32.25 mmol) 및 tert-부틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (5.55 g, 25.80 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시킨 다음, 실온에서 Pd-PEPPSI-IHept 촉매 (626.85 mg, 644.39 μmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 105℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (20mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-80%)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (4.0 g, 7.67 mmol, 59% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 476.2 [M + H]+.
단계-7: 디클로로메탄 (5 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (0.5 g, 1.05 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 10.51 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (0.48 g, 884.68 μmol, 84% 수율)을 갈색빛 반고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (ES+): m/z 420.2 [M + H]+.
2-(4-(3-(2,4-디옥소테트라히드로피리미딘-1(2H)-일)-5-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-6-일)피페라진-1-일)아세트산의 합성:
단계-1: 아세토니트릴 (1.06 L) 중 4-아미노-2,5-디플루오로벤조니트릴 (52.0 g, 0.33 mol), 4-메틸벤젠술폰산 (208 g, 1.21 mol)의 혼합물을 15℃에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, NaNO2 (39.6 g, 0.57 mol) 및 KI (95.2 g, 0.57 mol)를 0℃에서 반응기에 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 혼합물을 수성 NaHSO3 (200 mL)으로 켄칭하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트 (500 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (200 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 2,5-디플루오로-4-아이오도벤조니트릴 (120 g, 48% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.39 (s, 1H), 7.12 - 7.00 (m, 1H).
단계-2: EtOH (600 mL) 중 2,5-디플루오로-4-아이오도벤조니트릴 (60.0 g, 0.22 mol) 및 메틸히드라진 (59.6 mL, 0.45 mol)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 15℃에서 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 80℃에서 N2 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 진공 하에 농축시켰다. 잔류물 황색 고체를 EtOH (120 mL)로 15℃에서 5시간 동안 연화처리하고, 여과하여 5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-1H-인다졸-3-아민 (109 g, 83% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계-3: 5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-1H-인다졸-3-아민 (54.5 g, 220 mmol), 에틸 아크릴레이트 (142 mL, 1.31 mol) 및 [DBU]·[Lac] (26.4 g, 180 mmol)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼징하고, 생성된 혼합물을 80℃에서 N2 분위기 하에 120시간 동안 교반하였다. 잔류물을 DCM (500 mL) 및 H2O (500 mL)로 희석하고, 유기 층을 염수 (300 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트=50/1에서 1/1)에 의해 정제하여 에틸 3-((5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-1H-인다졸-3-일)아미노)프로파노에이트 (70.0 g, 48% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계-4: HOAc (225 mL) 및 물 (75.0 mL) 중 에틸 3-((5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-1H-인다졸-3-일)아미노)프로파노에이트 (50.0 g, 0.39 mol), NaOCN (24.9 g, 0.38 mol)의 혼합물을 15℃에서 3시간 동안 교반하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트 (150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 NaHCO3 (150 mL, 3.00 X 부피)으로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 에틸 3-(1-(5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-1H-인다졸-3-일)우레이도)프로파노에이트 (32.0 g, 57% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계-5: 아세토니트릴 (320 mL) 중 에틸 3-(1-(5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-1H-인다졸-3-일)우레이도)프로파노에이트 (32.0 g, 73.0 mmol) 및 트리톤 B (22.0 mmol, 4.02 mL)의 혼합물을 15℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하여 케이크를 수득하고, 케이크를 감압 하에 농축시켜 1-(5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-1H-인다졸-3-일)디히드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 (24.0 g, 84% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 389.0 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.56 (s, 1H), 8.27 - 8.01 (m, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.95 - 3.90 (m, 2H), 2.79 - 2.73 (m, 2H).
단계-6: t-BuOH (50 mL) 중 1-(5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-1H-인다졸-3-일)디히드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 (2.5 g, 6.44 mmol)의 용액에 tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (2.40 g, 12.8 mmol), t-BuONa (1.86 g, 19.3 mmol), t-BuXphos (2.74 g, 6.44 mmol) 및 t-BuBrettphos Pd G3 (2.56 g, 3.22 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (50 mLx3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르 중 0-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(3-(2,4-디옥소테트라히드로피리미딘-1(2H)-일)-5-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-6-일)피페라진-1-카르복실레이트 (944 mg, 30% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 447.1 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.63 (s, 1H), 7.35 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.08 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.99-3.87 (m, 3H), 3.70-3.60 (m, 4H), 3.14-3.01 (m, 4H), 2.87 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.49 (s, 9H).
단계-7: 디옥산 (3 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.15 g, 335.97 μmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (4 M, 83.99 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 1-(5-플루오로-1-메틸-6-피페라진-1-일-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 히드로클로라이드 (0.125 g, 309.24 μmol, 92% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 347.1 [M + H]+.
단계-8: DMF (2 mL) 중 1-(5-플루오로-1-메틸-6-피페라진-1-일-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (146 mg, 421.53 μmol), TEA (127.96 mg, 1.26 mmol, 176.26 μL)의 용액에 t-부틸브로모 아세테이트 (83.07 mg, 421.53 μmol)를 첨가하고, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (10 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세테이트 (130 mg, 271.01 μmol, 64% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 461.2 [M + H]+.
단계-9: DCM (2 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세테이트 (120 mg, 260.59 μmol)의 용액에 0℃에서 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 (4 M, 3 mL)를 첨가하고, 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 석유 에테르로 연화처리하여 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세트산 히드로클로라이드 (110 mg, 209.59 μmol, 80% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 405.2 [M + H]+.
2-(1-(3-(2,4-디옥소테트라히드로피리미딘-1(2H)-일)-7-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-6-일)-4-히드록시피페리딘-4-일)아세트산의 합성:
단계-1: 에탄올 (450 mL) 중 4-브로모-2,3-디플루오로-벤조니트릴 (45 g, 206.42 mmol)의 용액에 40% 메틸히드라진 (45.48 g, 412.85 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 30℃로 냉각시키고, 진공 (40℃) 하에 농축시켜 용매를 제거하고, 여과하였다. 필터 케이크를 에탄올 (5 mLx2)로 세척하고, 40℃에서 진공 하에 농축시켜 6-브로모-7-플루오로-1-메틸-인다졸-3-아민 (44 g, 180.28 mmol, 87% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.46 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 8.5, 5.5 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 3.84 (s, 3H).
단계-2: 2N HCl (230 mL) 중 6-브로모-7-플루오로-1-메틸-인다졸-3-아민 (23.5 g, 96.29 mmol)의 용액에 아크릴산 (10.41 g, 144.43 mmol, 9.91 mL) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드 (3.10 g, 9.63 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 밤새 교반하고, 여과하고, 물 (250 mL)로 세척하였다. 케이크를 진공 하에 건조시켜 3-[(6-브로모-7-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)아미노]프로판산 (28.5 g, 89.25 mmol, 93% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.50 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.09 (dd, J = 8.5, 5.6 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.45 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.65 - 2.51 (m, 2H).
단계-3: AcOH (280 mL) 중 3-[(6-브로모-7-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)아미노]프로판산 (28.5 g, 90.15 mmol) 및 시안산나트륨 (11.72 g, 180.31 mmol)의 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물에 2 N HCl (280 mL)을 첨가하고, 60℃에서 추가로 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 밤새 교반하고, 여과하고, 물 (250 mL)로 세척하였다. 케이크를 진공 하에 건조시켜 1-(6-브로모-7-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (16 g, 46.43 mmol, 52% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.64 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 8.7, 5.7 Hz, 1H), 4.12 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.94 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 2H).
단계-4: 디옥산 (10 mL) 중 1-(6-브로모-7-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (1 g, 2.93 mmol) 및 tert-부틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (1.58 g, 7.33 mmol)의 용액에 Pd-PEPPSI-IHeptCl (80 mg, 146.57 μmol) 및 탄산세슘 (3.34 g, 10.26 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 105℃에서 N2 하에 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (10 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트=1/1에서 0/1)에 의해 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-7-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (0.8 g, 1.67 mmol, 57% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 420.2 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.57 (s, 1H), 7.33 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 8.9, 7.1 Hz, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.06 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.90 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.18 - 3.10 (m, 4H), 2.75 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.38 (s, 2H), 1.90 - 1.76 (m, 2H), 1.71 (d, J = 12.9 Hz, 2H), 1.43 (s, 9H).
단계-5: DCM (8 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-7-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (800 mg, 1.68 mmol)의 용액에 디옥산 중 HCl (4 M, 8 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-7-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 히드로클로라이드 (750 mg, 1.58 mmol, 94% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.58 (s, 1H), 7.37 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.02 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.90 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.29 - 3.09 (m, 4H), 2.75 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.97 - 1.85 (m, 2H), 1.75 (d, J = 13.1 Hz, 2H).
실시예
하기 실시예는 본 발명의 예시를 위해 제공된다. 이들은 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 간주되어서는 안되며, 단지 그를 대표하는 것으로 간주되어야 한다.
스캐폴드 A에 대한 반응식:
단계 A - 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A): 톨루엔: 테트라히드로푸란 (5:1) 중 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 무수 트리에틸 오르토포르메이트 (2 당량)를 첨가하고, 이어서 아민 (2, 1 당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 110℃ 내지 140℃에서 12 내지 18시간 동안 가열하였다. 아민 염 (HCl, TFA 등)을 사용한 고리화의 경우, 촉매 아세트산 (0.1 당량) 첨가는 보다 우수한 전환을 제공하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물에 수성 중탄산나트륨 용액을 첨가하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 목적 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 5% 메탄올 - 디클로로메탄을 사용하여 정제하여 퀴나졸리논 중간체 (3)를 수득하였다.
단계 B - O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B): N,N-디메틸포름아미드/THF (10 mL) 중 퀴나졸리논 중간체 (3, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 염기, 예컨대 탄산세슘 또는 포타슘 tert-부톡시드 (1.1 당량) 및 (4, 1.1 당량)의 존재 하에 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 약 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 중간체 (5)를 수득하였다.
단계 C - 술포모일화에 대한 일반적 절차 (절차 A-C): N,N-디메틸포름아미드 중 중간체 5 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (2.5 당량) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 약 60℃ 내지 70℃에서 12시간 내지 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20에서 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 술폰아미드 중간체 (7)를 수득하였다.
주: 대다수의 반응에 대해, 물의 첨가 후, 고체의 침전이 관찰되었다. 이들 고체를 여과지를 통해 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 적절한 순도의 술폰아미드 중간체 (7)를 수득하였다.
단계 D - N-Boc 탈보호에 대한 일반적 절차 (절차 A-D): 술폰아미드 중간체 (7, 1 당량)의 용액을 디클로로메탄 중에 넣고, TFA (5 당량) 또는 디옥산 중 4N HCl (10 당량)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르 (MTBE)로 연화처리하여 표적화 리간드 (8)를 수득하였다.
산-아민 커플링에 대한 일반적 절차 (절차 A-E):
N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 중간체 산 (9) (1 당량) 및 아민 (8) (1 당량)의 교반 용액에 실온에서 질소 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 정제에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 목적 화합물 (10)을 수득하였다.
산-아민 커플링에 대한 일반적 절차 (절차 A-F): N,N-디메틸포름아미드 중 산 (9) (1 당량) 및 아민 (8) (1 당량)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량) 및 COMU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올 (3x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 역상 정제에 의해 조 물질로부터 정제하고, 분획을 동결건조시켜 목적 화합물 (10)을 수득하였다.
실시예 1 - 3
단계 1: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 6-히드록시-3H-퀴나졸린-4-온 (5 g, 30.84 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (3.81 g, 33.92 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (5.33 g, 33.92 mmol, 3.92 mL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하여 화합물 3,6-디플루오로-2-[(4-옥소-3H-퀴나졸린-6-일)옥시]벤조니트릴 (6.8 g, 22.21 mmol, 72% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 300.20 [M + H]+
단계 2a: 디클로로메탄 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2 g, 8.72 mmol, 1.92 mL)의 교반 용액에 0℃에서 트리에틸아민 (882.54 mg, 8.72 mmol, 1.22 mL)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 p-톨루엔술포닐 클로라이드 (1.83 g, 9.59 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온으로 12시간 동안 가온하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[2-(p-톨릴술포닐옥시)에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.8 g, 조 물질)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 284.30 [M + H-CO2 tBu]+
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (15 mL) 중 3,6-디플루오로-2-[(4-옥소-3H-퀴나졸린-6-일)옥시]벤조니트릴 (1.5 g, 5.01 mmol)의 교반 용액에 실온에서 포타슘 tert-부톡시드 (618.75 mg, 5.51 mmol)에 이어서 tert-부틸 4-[2-(p-톨릴술포닐옥시)에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.92 g, 5.01 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.4 g, 3.93 mmol, 78% 수율)를 연갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 509.30 [M - H]-
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.5 g, 979.37 μmol), 탄산세슘 (797.75 mg, 2.45 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (270.68 mg, 1.96 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 242.32 μmol, 25% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 529.30 [M + H-CO2 tBu]+
단계 4: 필요한 아민을 tert-부틸 4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 286.30 μmol) 및 TFA (592.00 mg, 5.19 mmol, 0.4 mL)를 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[2-(4-피페리딜)에틸]퀴나졸린 (200 mg, 조 물질)을 연갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 529.20 [M + H]+
실시예 1
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[2-(4-피페리딜)에틸]퀴나졸린 (20 mg, 37.84 μmol), HATU (17.26 mg, 45.40 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (24.45 mg, 189.18 μmol, 32.95 μL) 및 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (13.75 mg, 37.84 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 (방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴 및 칼럼: 브리지 C8(19 x 150)MM, 5MIC)에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린 (9.77 mg, 10.93 μmol, 29% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 874.50 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.75 (bs, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.76 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 2.40, 8.80 Hz, 1H), 7.48-7.46 (m, 1H), 7.35-7.29 (m, 2H), 6.99 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.49-6.44 (m, 2H), 6.07 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 4.10-4.95 (m, 2H), 3.90-3.75 (m, 2H), 3.25-3.15 (m, 2H), 3.03 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.78-2.67 (m, 7H), 2.62 (s, 3H), 2.10-2.08 (m, 2H), 1.95-1.70 (m, 8H), 1.70-1.50 (m, 4H), 1.25-1.10 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 2
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[2-(4-피페리딜)에틸]퀴나졸린 (20 mg, 37.84 μmol), HATU (17.26 mg, 45.40 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (24.45 mg, 189.18 μmol, 32.95 μL) 및 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (13.18 mg, 37.84 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 (방법: 10mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴 및 칼럼: 브리지 C8(19 X150)MM, 5MIC)에 의해 다시 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린 (10.57 mg, 11.76 μmol, 31% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 859.40 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.86 (s, 1H), 9.79 (bs, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.63-7.62 (m, 1H), 7.35-7.27 (m, 3H), 7.07 (t, J = 3.20 Hz, 2H), 4.34-4.31 (m, 1H), 4.03-3.99 (m, 2H), 3.95-3.80 (m, 3H), 3.25-3.15 (m, 2H), 3.04 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.97-2.92 (m, 3H), 2.75-2.60 (m, 7H), 2.25-2.21 (m, 1H), 2.10-1.98 (m, 1H), 1.95-1.70 (m, 7H), 1.65-1.50 (m, 4H), 1.25-1.10 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 3
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[2-(4-피페리딜)에틸]퀴나졸린 (20 mg, 37.84 μmol), HATU (17.26 mg, 45.40 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (24.45 mg, 189.18 μmol, 32.95 μL) 및 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (13.75 mg, 37.84 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 (방법: 10mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴 및 칼럼: 브리지 C8(19 X150)MM, 5MIC)에 의해 다시 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린 (5.15 mg, 5.81 μmol, 15% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 874.30 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.46-7.44 (m, 1H), 7.35-7.29 (m, 2H), 6.95 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.86-6.84 (m, 1H), 6.80-6.76 (m, 1H), 5.45 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 4.39-4.31 (m, 2H), 4.31-4.01 (m, 3H), 3.90-3.75 (m, 2H), 3.25-3.15 (m, 3H), 3.02 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.82-2.70 (m, 2H), 2.70-2.55 (m, 6H), 2.08-1.97 (m, 3H), 1.90-1.70 (m, 5H), 1.70-1.50 (m, 4H), 1.24-1.15 (m, 2H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 4 - 6
단계 1: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 6-히드록시-3H-퀴나졸린-4-온 (5 g, 30.84 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (3.81 g, 33.92 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (5.33 g, 33.92 mmol, 3.92 mL)을 사용하여 절차 A-B에 따라 합성하여 화합물 3,6-디플루오로-2-[(4-옥소-3H-퀴나졸린-6-일)옥시]벤조니트릴 (6.8 g, 22.21 mmol, 72% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 300.20 [M + H]+
단계 2a: 디클로로메탄 (15 mL) 중 4-(3-히드록시프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.5 g, 10.27 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 트리에틸아민 (2.60 g, 25.68 mmol, 3.58 mL)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 p-톨루엔 술포닐 클로라이드 (2.15 g, 11.30 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온으로 12시간 동안 가온하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 15% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-(p-톨릴술포닐옥시)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.2 g, 5.42 mmol, 53% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 298.30 [M + H-CO2 tBu]+
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 3,6-디플루오로-2-[(4-옥소-3H-퀴나졸린-6-일)옥시]벤조니트릴 (1.5 g, 5.01 mmol)의 교반 용액에 실온에서 포타슘 tert-부톡시드 (618.75 mg, 5.51 mmol)에 이어서 tert-부틸 4-[3-(p-톨릴술포닐옥시)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.19 g, 5.51 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.4 g, 3.66 mmol, 73% 수율)를 연갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 523.30 [M - H]-
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (700 mg, 1.33 mmol), 탄산세슘 (1.09 g, 3.34 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (368.81 mg, 2.67 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 355.98 μmol, 27% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 641.30 [M - H]-
단계 4: 필요한 아민을 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 404.52 μmol) 및 TFA (740.00 mg, 6.49 mmol, 0.5 mL)를 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[3-(4-피페리딜)프로필]퀴나졸린 (280 mg, 조 물질)을 연갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 543.30 [M + H]+
실시예 4
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. TFA 염으로서의 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[3-(4-피페리딜)프로필]퀴나졸린 (20 mg, 30.46 μmol), TFA 염으로서의 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산 (14 mg, 30.47 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.50 mL) 및 HATU (14 mg, 36.82 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (9.98 mg, 11.08 μmol, 36% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 870.40 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.62 (bs, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.78 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 4.40, 6.00 Hz, 1H), 7.46 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.37-7.28 (m, 2H), 6.97 (d, J = 8.40 Hz, 2H), 6.67 (d, J = 10.80 Hz, 2H), 5.73 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.35-4.28 (m, 2H), 4.00-3.75 (m, 5H), 3.35-3.27 (m, 2H), 3.02 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.82-2.65 (m, 3H), 2.65-2.55 (m, 6H), 2.09-2.08 (m, 1H), 1.89-1.72 (m, 9H), 1.60-1.45 (m, 2H), 1.26-1.22 (m, 2H), 1.15-1.05 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 0.98-0.85 (m, 1H).
실시예 5
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. TFA 염으로서의 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[3-(4-피페리딜)프로필]퀴나졸린 (20 mg, 30.46 μmol), HCl 염으로서의 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (12 mg, 31.18 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.50 mL) 및 HATU (14 mg, 36.82 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (11.02 mg, 12.46 μmol, 41% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 873.40 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.86 (s, 1H), 9.80 (bs, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.92 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 3.04, 8.90 Hz, 1H), 7.62-7.52 (m, 1H), 7.37-7.34 (m, 2H), 7.29 (t, J = 8.16 Hz, 1H), 7.09-7.06 (m, 2H), 4.40-4.30 (m, 1H), 3.95 (t, J = 7.16 Hz, 2H), 3.88 (dd, J = 4.80, 11.98 Hz, 1H), 3.85-3.75 (m, 1H), 3.30-3.25 (m, 2H), 3.06 (q, J = 7.12 Hz, 2H), 3.00-2.85 (m, 2H), 2.80-2.65 (m, 4H), 2.67 (s, 3H), 2.60-2.55 (m, 2H), 2.24-2.21 (m, 1H), 2.08-1.82 (m, 5H), 1.80-1.65 (m, 5H), 1.65-1.50 (m, 1H), 1.27-1.23 (m, 2H), 1.15-1.10 (m, 2H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 6
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. TFA 염으로서의 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[3-(4-피페리딜)프로필]퀴나졸린 (20 mg, 30.46 μmol), HCl 염으로서의 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (13 mg, 32.51 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.50 mL) 및 HATU (14 mg, 36.82 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (6.90 mg, 7.20 μmol, 24% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 887.80 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.69 (bs, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.60-7.50 (m, 1H), 7.36-7.33 (m, 2H), 7.01-6.97 (m, 1H), 6.50-6.44 (m, 2H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.34-4.31 (m, 2H), 4.00-3.75 (m, 5H), 3.40-3.30 (m, 2H), 3.05 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.00-2.90 (m, 2H), 2.77-2.71 (m, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.67-2.59 (m, 2H), 2.08-2.07 (m, 1H), 1.91-1.80 (m, 3H), 1.76-1.72 (m, 6H), 1.60-1.50 (m, 1H), 1.26-1.23 (m, 2H), 1.20-1.05 (m, 1H), 1.10 (t, J = 6.80 Hz, 3H), 0.95-0.85 (m, 1H).
실시예 7
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]-2-옥소에틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 TFA 염으로서의 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[3-(4-피페리딜)프로필]퀴나졸린 (30 mg, 45.69 μmol)의 교반 용액에 실온에서 트리에틸아민 (23.12 mg, 228.43 μmol, 31.84 μL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (10 mg, 51.27 μmol, 7.52 μL)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 2-[4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-1-피페리딜]아세테이트 (25 mg, 31.94 μmol, 70% 수율)를 갈색빛 점성 액체로서 수득하였다. 이 조 화합물을 어떠한 정제도 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 657.40 [M + H]+
단계 2: 필요한 아민을 tert-부틸 2-[4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-1-피페리딜]아세테이트 (25 mg, 38.07 μmol) 및 TFA (43.40 mg, 380.65 μmol, 29.33 μL)를 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 2-[4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-1-피페리딜]아세트산을 그의 TFA 염 (22 mg, 24.40 μmol, 64% 수율)으로서 갈색빛 점성 액체로서 수득하였다. 이 조 화합물을 어떠한 정제도 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 601.40 [M + H]+
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. TFA 염으로서의 2-[4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-1-피페리딜]아세트산 (22 mg, 30.78 μmol), 3-[4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (13 mg, 32.39 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.50 mL) 및 HATU (15 mg, 39.45 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]-2-옥소-에틸]-4-피페리딜]프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (10.56 mg, 11.45 μmol, 37% 수율)을 녹색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 870.60 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.78 (s, 1H), 9.60 (bs, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.96 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 3.00, 8.92 Hz, 1H), 7.46 (t, J = 9.76 Hz, 1H), 7.34-7.28 (m, 2H), 6.95 (d, J = 8.56 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.60 Hz, 2H), 5.70 (d, J = 7.52 Hz, 1H), 5.70 (d, J = 7.52 Hz, 1H), 4.55-4.45 (m, 1H), 4.32-4.22 (m, 1H), 4.00-3.80 (m, 5H), 3.34-3.08 (m, 3H), 3.02 (q, J = 7.16 Hz, 2H), 2.74-2.67 (m, 5H), 2.64 (s, 3H), 2.09-2.08 (m, 1H), 1.95-1.65 (m, 8H), 1.60-1.45 (m, 1H), 1.39-1.24 (m, 5H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 8 및 9
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1 g, 6.53 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (1.45 g, 9.80 mmol, 1.63 mL) 및 tert-부틸 4-(2-아미노에틸)피페라진-1-카르복실레이트 (1.65 g, 7.18 mmol)를 사용하여 절차 A-A에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)에틸]피페라진-1-카르복실레이트 (750 mg, 2.00 mmol, 31% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 375.20 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)에틸]피페라진-1-카르복실레이트 (750 mg, 2.00 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (247.24 mg, 2.20 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (346.13 mg, 2.20 mmol, 254.51 μL)을 사용하여 절차 A-B에 따라 합성하여 화합물 tert-부틸 4-[2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페라진-1-카르복실레이트 (1 g, 1.80 mmol, 90% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 512.20 [M + H]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페라진-1-카르복실레이트 (1 g, 1.95 mmol), 탄산세슘 (1.59 g, 4.89 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하고, [메틸(술파모일)아미노]에탄 (540.31 mg, 3.91 mmol)을 첨가하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페라진-1-카르복실레이트 (770 mg, 1.10 mmol, 56.02% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 630.10 [M + H]+
단계 4: 필요한 아민을 tert-부틸 4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페라진-1-카르복실레이트 (770 mg, 1.22 mmol) 및 디옥산 중 4N HCl (2.0 mL)을 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일에틸)퀴나졸린을 그의 HCl 염 (630 mg, 974.42 μmol, 80% 수율)으로서 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 530.20 [M + H]+
실시예 8
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일에틸)퀴나졸린 (20 mg, 37.77 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (13.72 mg, 37.77 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (24.40 mg, 188.83 μmol, 32.89 μL) 및 HATU (17.23 mg, 45.32 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄: 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]에틸]-4-옥소-퀴나졸린 (7.34 mg, 8.34 μmol, 22% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 875.30 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.78 (bs, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.76 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.53 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.35-7.32 (m, 2H), 6.98 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.49-6.44 (m, 2H), 6.07 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.35-4.31 (m, 1H), 4.29-4.09 (m, 2H), 3.85-3.70 (m, 2H), 3.50-3.40 (m, 5H), 3.41-3.22 (m, 3H), 3.04 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.78-2.70 (m, 3H), 2.64 (s, 3H), 2.60-2.55 (m, 4H), 2.48-2.38 (m, 2H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.91-1.76 (m, 5H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 9
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일에틸)퀴나졸린 (20 mg, 37.77 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산 (13.04 mg, 37.77 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (24.40 mg, 188.83 μmol, 32.89 μL) 및 HATU (17.23 mg, 45.32 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 10 mm 아세트산암모늄: 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]에틸]-4-옥소-퀴나졸린 (7.97 mg, 9.28 μmol, 25% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 857.20 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.78 (s, 1H), 9.70 (bs, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.92 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.96, 8.92 Hz, 1H), 7.50 (t, J = 9.76 Hz, 1H), 7.35-7.30 (m, 2H), 6.96 (d, J = 8.32 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.44 Hz, 2H), 5.72 (d, J = 7.48 Hz, 1H), 4.30-4.25 (m, 1H), 4.10-4.07 (m, 2H), 3.90-3.78 (m, 2H), 3.45-3.35 (m, 5H), 3.25-3.15 (m, 3H), 3.03 (q, J = 7.12 Hz, 2H), 2.80-2.65 (m, 3H), 2.64 (s, 3H), 2.62-2.56 (m, 4H), 2.48-2.38 (m, 2H), 2.12-2.08 (m, 1H), 1.88-1.76 (m, 5H), 1.03 (t, J = 7.16 Hz, 3H).
실시예 10
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[4-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]부탄-2-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 디클로로메탄 (1.6 mL) 중 tert-부틸 4-(3-히드록시프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (100 mg, 410.94 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 피리디늄 클로로크로메이트 (132.87 mg, 616.41 μmol)를 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 계속 반응시켰다. 완료된 후, 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL)으로 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (15 mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 4-(3-옥소프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.07g, 174 μmol, 42.3% 수율)를 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 186.1 [M + H- tBu]+
단계 2: THF (12 mL) 중 tert-부틸 4-(3-옥소프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (3 g, 12.43 mmol)의 교반 용액에 -78℃에서 메틸 마그네슘 브로마이드 (2.17 g, 18.17 mmol, 2.10 mL)를 적가하고, -78℃에서 2시간 동안 계속 반응시켰다. 완료된 후, 반응 혼합물을 NH4Cl의 포화 용액 (50 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하고, 유기 상을 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 석유 에테르 중 0-40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(3-히드록시부틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.3 g, 8.49 mmol, 68% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 158.2 [M + H-CO2 tBu]+
단계 3: 디클로로메탄 (30 mL) 중 tert-부틸 4-(3-히드록시부틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.2 g, 8.55 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 피리디늄 클로로크로메이트 (2.76 g, 12.82 mmol)를 첨가하고, 실온에서 4시간 동안 계속 반응시켰다. 완료된 후, 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 (50 mL) 용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 석유 에테르 중 0-40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(3-옥소부틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2 g, 7.60 mmol, 89% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 156.1 [M + H-CO2 tBu]+
단계 4: 메탄올 (30 mL) 중 tert-부틸 4-(3-옥소부틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2 g, 7.83 mmol)의 교반 용액에 실온에서 아세트산암모늄 (6.04 g, 78.32 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 소듐 시아노보로히드라이드 (738.30 mg, 11.75 mmol)를 실온에서 상기 반응 혼합물에 조금씩 첨가하고, 16시간 동안 환류시켰다. 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 NH4Cl 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(3-아미노부틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.4 g, 4.70 mmol, 60% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 257.5 [M + H]+
단계 5: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-(3-아미노부틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.3 g, 5.07 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (776.48 mg, 5.07 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (1.88 g, 12.68 mmol, 2.11 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하여 tert-부틸 4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)부틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.6 g, 1.87 mmol, 37% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 402.3 [M + H]+
단계 6: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)부틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.5 g, 3.74 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (628.84 mg, 5.60 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (704.28 mg, 4.48 mmol, 517.85 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 반응 혼합물을 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 0-80% 에틸 아세테이트 / 석유 에테르로 용리시켜 정제하여 순수한 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]부틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (800 mg, 1.37 mmol, 37% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 483.2 [M + H- tBu]+
단계 7: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]부틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.7 g, 1.30 mmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (359.21 mg, 2.60 mmol) 및 탄산세슘 (1.27 g, 3.90 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 디클로로메탄 중 0-10% 메탄올로 용리시켜 정제하여 순수한 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]부틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (560 mg, 596.86 μmol, 46% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 655.1 [M -H]-
단계 8: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 트리플루오로아세트산 (4.44 g, 38.94 mmol, 3 mL)을 사용하여 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]부틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (560 mg, 852.66 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[1-메틸-3-(4-피페리딜)프로필]-4-옥소-퀴나졸린을 그의 TFA 염 (430 mg, 702.95 μmol, 82% 수율)으로서 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.3 [M + H]+
단계 9: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[1-메틸-3-(4-피페리딜)프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (430 mg, 772.48 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (308.87 mg, 772.48 μmol), HATU (440.58 mg, 1.16 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.50 g, 11.59 mmol, 2.02 mL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 생성된 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 [이동상 A: 0.1% 아세트산암모늄 물, 이동상 B: 아세토니트릴; 칼럼: 100g 레디셉(RediSep)® Rf C18]에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]-1-메틸-프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (75 mg, 80.66 μmol, 10% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.3 [M + H]+ 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.66 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 9.20 Hz, 1H), 7.48-7.57 (m, 1H), 7.33 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.30-7.34 (m, 1H), 6.97-7.02 (m, 1H), 6.48 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.85-4.72 (m, 1H), 4.28-4.37 (m, 1H), 3.71-3.82 (m, 1H), 3.20-3.40 (m, 2H), 2.92-3.11 (m, 3H), 2.52-2.81 (m, 6H), 2.62 (s, 3H), 2.05-2.11 (m, 2H), 1.60-1.98 (m, 10H), 1.40-1.52 (m, 2H), 1.42 (d, J = 6.80 Hz, 3H), 1.15-1.26 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 0.82-1.10 (m, 3H).
실시예 11
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]부틸]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 테트라히드로푸란 (40 mL) 중 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 1.21 g, 52.79 mmol)의 교반 용액에 에틸 2-디에톡시포스포릴아세테이트 (8.88 g, 39.60 mmol, 7.86 mL)를 테트라히드로푸란 (10 mL) 중에 용해시키고, 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, tert-부틸 4-아세틸피페리딘-1-카르복실레이트 (6 g, 26.40 mmol)를 실온에서 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 냉수 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 15-25% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[(E)-3-에톡시-1-메틸-3-옥소-프로프-1-에닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (4 g, 10.76 mmol, 41% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 198.20 [M+H-CO2 tBu]+
단계 2: 탈기된 무수 메탄올 (40 mL) 중 tert-부틸 4-[(E)-3-에톡시-1-메틸-3-옥소-프로프-1-에닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (4 g, 13.45 mmol)의 교반 용액에 실온에서 10% 탄소 상 팔라듐 (건조 기준) (400 mg, 1.35 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 수소 기체 주머니 하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(3-에톡시-1-메틸-3-옥소-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.9 g, 12.24 mmol, 91% 수율)의 조 혼합물을 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 200.1 [M+H-CO2 tBu]+
단계 3: 무수 에탄올 (30 mL) 중 tert-부틸 4-(3-에톡시-1-메틸-3-옥소-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (3 g, 10.02 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 염화칼슘 (1.11 g, 10.02 mmol) 및 수소화붕소나트륨 (568.58 mg, 15.03 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 냉수 (50 mL)로 처리하고, 에틸 아세테이트 (2 X 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기부를 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물 tert-부틸 4-(3-히드록시-1-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.8 g, 9.79 mmol, 98% 수율)를 황색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 158.1 [M+H-CO2 tBu]+
단계 4: 무수 디클로로메탄 (30 mL) 중 tert-부틸 4-(3-히드록시-1-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.7 g, 10.49 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (2.65 g, 26.23 mmol, 3.66 mL)에 이어서 메실 클로라이드 (1.80 g, 15.74 mmol, 1.22 mL)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 빙수로 처리하고, 디클로로메탄 (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기부를 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물 tert-부틸 4-(1-메틸-3-메틸술포닐옥시-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.8 g, 8.26 mmol, 79% 수율)를 황색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 236.0 [M+H-CO2 tBu]+
단계 5: 무수 N,N-디메틸포름아미드 (30 mL) 중 tert-부틸 4-(1-메틸-3-메틸술포닐옥시-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.8 g, 8.35 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 아지드화나트륨 (813.94 mg, 12.52 mmol)을 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응 혼합물을 70℃에서 질소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석하고, 물 (2 x 50 mL) 및 염수 (20 mL)로 연속적으로 세척하였다. 분리된 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발 건조시켜 tert-부틸 4-(3-아지도-1-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.35 g, 8.32 mmol, 100% 수율)의 조 잔류물을 갈색 액체로서 수득하였다. LCMS에 의해 이온화는 보이지 않았다. 이를 어떠한 정제도 없이 후속 단계에 사용하였다.
단계 6: 메탄올 (30 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아지도-1-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (3 g, 10.62 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄소 상 10% 팔라듐 (600 mg, 10.62 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 수소 분위기 주머니 하에 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 이를 메탄올 (100 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물 tert-부틸 4-(3-아미노-1-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2 g, 6.47 mmol, 61% 수율)를 연갈색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 157.2 [M+H-CO2 tBu]+
단계 7: 무수 톨루엔 (10 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-1-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (920.83 mg, 3.59 mmol) 및 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (500 mg, 3.27 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 트리에틸 오르토포르메이트 (629.05 mg, 4.24 mmol, 706.00 μL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. TLC에 의해 나타난 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (70 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기부를 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (900 mg, 1.68 mmol, 51% 수율)를 연갈색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 402.20 [M+H]+
단계 8: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (900 mg, 2.24 mmol), 탄산세슘 (1.10 g, 3.36 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (422.57 mg, 2.69 mmol, 310.71 μL)을 사용하여 절차 A-B에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-75% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (800 mg, 1.31 mmol, 58% 수율)를 황색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 439.1[M+H-CO2 tBu]+
단계 9: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (800 mg, 1.49 mmol), 탄산세슘 (1.21 g, 3.71 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (307.89 mg, 2.23 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 조 생성물 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (800 mg, 682.13 μmol, 46% 수율)를 황색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.10 [M+H-CO2 tBu]+
단계 10: 필요한 아민을 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (800 mg, 1.22 mmol) 및 디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (6 mL)을 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[3-(4-피페리딜)부틸]퀴나졸린을 그의 HCl 염 (600 mg, 778.94 μmol, 64% 수율)으로서 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.20 [M+H]+
단계 11: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (137.53 mg, 343.95 μmol), 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[3-(4-피페리딜)부틸]퀴나졸린 (170 mg, 286.62 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (222.26 mg, 1.72 mmol, 299.54 μL) 및 HATU (119.88 mg, 315.29 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 C18-역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 이솔레라 (100g 레디셉® Rf C18 (텔레다인 ISCO 코포레이션(Teledyne ISCO Corp.), 캘리포니아주 싸우전드 오크스), 방법: 물 중 10mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)를 사용하여 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]부틸]-4-옥소-퀴나졸린 (95 mg, 105.10 μmol, 37% 수율)을 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.30 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.64 (bs, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.76 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.34-7.32 (m, 2H), 7.05-6.90 (m, 1H), 6.47 (t, J = 12.00 Hz, 2H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.50-4.40 (m, 1H), 4.45-4.38 (m, 1H), 4.10-3.75 (m, 5H), 3.40-3.20 (m, 2H), 3.03 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.00-2.90 (m, 2H), 2.85-2.70 (m, 3H), 2.63 (s, 3H), 2.60-2.55 (m, 2H), 2.15-2.05 (m, 1H), 1.95-1.70 (m, 7H), 1.70-1.55 (m, 2H), 1.55-1.30 (m, 3H), 1.25-1.10 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 2.00 Hz, 3H).
실시예 12
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-4-메틸피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: THF (30 mL) 중 tert-부틸 4-포르밀-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (1.9 g, 8.36 mmol)의 교반 용액에 실온에서 2-디에톡시포스포릴아세토니트릴 (85.72 mg, 483.94 μmol, 77.93 μL)을 첨가하였다. 이어서, 포타슘 tert-부톡시드 (1.13g, 10.03 mmol)를 0℃에서 반응물에 첨가하고, 반응물을 실온에서 16시간 동안 계속 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 0-5% 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[(E)-2-시아노비닐]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (1 g, 3.79 mmol, 45% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ = 6.71 (d, J = 16.80 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 5.44 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 5.32 (d, J = -16.80 Hz, 1H), 3.64-3.70 (m, 2H), 3.42-3.47 (m, 4H), 3.17-3.23 (m, 2H), 1.94-1.98 (m, 2H), 1.53-1.62 (m, 4H), 1.49 (s, 18H), 1.28 (s, 3H), 1.10 (s, 3H).
단계 2: 에탄올 (10 mL) 및 수산화암모늄 (10 mL) 중 3-[1-(2-히드록시아세틸)-4-메틸-4-피페리딜]프로판니트릴 (1 g, 4.76 mmol)의 교반 용액에, 알루미나 상 로듐 (489.39 mg, 4.76 mmol)을 첨가하고, 반응물을 40℃로 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 에탄올을 사용하여 셀라이트 층을 통해 여과하고, 농축시켜 조 1-[4-(3-아미노프로필)-4-메틸-1-피페리딜]-2-히드록시-에타논 (1g, 4.67 mmol, 98% 수율)을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 3.41-3.45 (m, 2H), 3.10-3.22 (m, 2H), 2.65-2.80 (m, 2H), 1.49-1.54 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.21-1.31 (m, 6H), 0.88 (s, 3H).
단계 3: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-(3-아미노프로필)-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (1 g, 3.90 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (578.04 mg, 3.90 mmol, 648.76 μL) 및 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (597.29 mg, 3.90 mmol)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하여 tert-부틸 4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)프로필]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (650 mg, 1.30 mmol, 33% 수율)를 갈색빛 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 402.0 [M + H]+
단계 4: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)프로필]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (600 mg, 1.49 mmol), 탄산세슘 (1.46 g, 4.48 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (234.76 mg, 1.49 mmol, 172.62 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하여 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 459 μmol, 31% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 537.2 [M-H]-
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 482.75 μmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (100.06 mg, 724.12 μmol) 및 탄산세슘 (314.58 mg, 965.49 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트의 조 잔류물 (200 mg, 267.98 μmol, 56% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.2 [M + H]+
단계 6: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. TFA (694.45 mg, 6.09 mmol, 469.22 μL)를 사용하여 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (200 mg, 304.52 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-(4-메틸-4-피페리딜)프로필]-4-옥소-퀴나졸린을 그의 TFA 염 (200 mg, 271.37 μmol, 89% 수율)으로서 갈색빛 황색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 556.9[M + H]+
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-(4-메틸-4-피페리딜)프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (200 mg, 359.29 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (130.56 mg, 359.29 μmol), HATU (163.94 mg, 431.15 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (278.62 mg, 2.16 mmol, 375.49 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-메틸-4-피페리딜]프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (95 mg, 99.08 μmol, 28% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.3 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.79 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.78 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.52-7.69 (m, 2H), 7.34-7.41 (m, 2H), 6.94-7.04 (m, 1H), 6.49 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.30-4.36 (m, 1H), 3.91-4.15 (m, 4H), 3.65-3.75 (m, 1H), 3.15-3.41 (m, 3H), 3.02-3.11 (m, 2H), 2.61-2.95 (m, 4H), 2.68 (s, 3H), 2.52-2.61 (m, 2H), 2.02-2.12 (m, 1H), 1.71-2.01 (m, 5H), 1.62-1.71 (m, 2H), 1.21-1.40 (m, 7H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 0.92 (s, 3H).
실시예 13
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-4-플루오로피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-(2-아미노에틸)-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (1 g, 4.09 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (752.10 mg, 4.91 mmol) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (788.52 mg, 5.32 mmol, 884.98 μL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 생성물을 디에틸 에테르로 연화처리하여 목적 tert-부틸 4-히드록시-4-[2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (600 mg, 1.53 mmol, 37% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 388 [M - H]-
단계 2: 디클로로메탄 (5 mL) 중 tert-부틸 4-히드록시-4-[2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (600 mg, 1.54 mmol)의 용액에 -30℃에서 데옥소플루오르 (510.73 mg, 2.31 mmol, 425.61 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x 25mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발 건조시켜 목적 조 물질을 수득하였다. 조 혼합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 2% 메탄올/디클로로메탄으로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-플루오로-4-[2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (400 mg, 1.01 mmol, 66% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 390.2 [M - H]-
단계 3: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-플루오로-4-[2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (400 mg, 1.02 mmol), 탄산세슘 (998.84 mg, 3.07 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (192.64 mg, 1.23 mmol, 141.64 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 1% 메탄올 / 디클로로메탄으로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]-4-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (430 mg, 724.10 μmol, 71% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 473.1 [M + H- tBu]+
단계 4: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]-4-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (400 mg, 756.83 μmol), 탄산세슘 (739.77 mg, 2.27 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (209.17 mg, 1.51 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]-4-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (160 mg, 239.99 μmol, 32% 수율)를 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 645.2 [M + H]+
단계 5: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 (5 mL) 중 4.0 M 염화수소를 사용하여 tert-부틸 4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]-4-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (160 mg, 247.41 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-(4-플루오로-4-피페리딜)에틸]-4-옥소-퀴나졸린을 그의 HCl 염 (140 mg, 239.88 μmol, 97% 수율)으로서 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 545.1 [M - H]-
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-(4-플루오로-4-피페리딜)에틸]-4-옥소-퀴나졸린 (180 mg, 308.72 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (123.44 mg, 308.72 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (159.60 mg, 1.23 mmol, 215.09 μL) 및 HATU (129.1 mg, 339.59 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-플루오로-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린 (20 mg, 22.27 μmol, 7% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 890.3 [M -H]-; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.80 (s, 1H), 9.81 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.76 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.40-7.51 (m, 1H), 7.34 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.29-7.34 (m, 1H), 6.99 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.28-4.38 (m, 1H), 4.10-4.17 (m, 3H), 3.75-3.85 (m, 1H), 3.32-3.42 (m, 2H), 3.10-3.21 (m, 1H), 2.92-3.10 (m, 2H), 3.02 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.65-2.81 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 2.51-2.60 (m, 3H), 2.03-2.17 (m, 4H), 1.61-1.98 (m, 9H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 14
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]-2-메틸프로필]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: THF (40 mL) 중 tert-부틸 4-포르밀피페리딘-1-카르복실레이트 (3.58 g, 16.79 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 에틸 2-디에톡시포스포릴프로파노에이트 (5 g, 20.9 mmol)를 첨가하고, 동일한 온도에서 1시간 동안 교반하였다. THF (10 mL) 중 KOtBu (2.36 g, 20.99 mmol)를 반응물에 첨가하고, 실온에서 4시간 동안 계속 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액 (200mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x 150mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 물질을 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 30% 에틸 아세테이트 - 석유 에테르를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[(E)-3-에톡시-2-메틸-3-옥소-프로프-1-에닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (3.5 g, 11.65 mmol, 56% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 198.1 [M + H-CO2 tBu]+
단계 2: 메탄올 (50 mL) 중 tert-부틸 4-[(E)-3-에톡시-2-메틸-3-옥소-프로프-1-에닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (3.5 g, 11.77 mmol)의 교반 용액에 활성탄 상 10% 팔라듐 (1.88 g, 17.65 mmol)을 조금씩 첨가하고, 실온에서 H2 (1 atm) 하에 16시간 동안 계속 교반하였다. 반응이 완료된 후, 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 셀라이트를 메탄올 (100mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(3-에톡시-2-메틸-3-옥소-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.3 g, 11.01 mmol, 94% 수율)를 무색 액체로서 수득하였으며, 이를 어떠한 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 200.0 [M + H]+
단계 3: THF (30 mL) 중 tert-부틸 4-(3-에톡시-2-메틸-3-옥소-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.3 g, 11.02 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 수소화붕소리튬 (360.15 mg, 16.53 mmol)을 천천히 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 NH4Cl 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x25mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(3-히드록시-2-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.9 g, 10.68 mmol, 97% 수율)를 무색 액체로서 수득하였으며, 이를 어떠한 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 158.1 [M + H-CO2 tBu]+
단계 4: 디클로로메탄 (30 mL) 중 tert-부틸 4-(3-히드록시-2-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.1 g, 12.05 mmol)의 교반 용액에 4-메틸벤젠술포닐 클로라이드 (3.44 g, 18.07 mmol), 트리에틸아민 (3.05 g, 30.11 mmol, 4.20 mL) 및 N,N-디메틸피리딘-4-아민 (735 mg, 6.02 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 5시간 동안 계속 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (200 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[2-메틸-3-(p-톨릴술포닐옥시)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (3.5 g, 5.83 mmol, 48% 수율, 68.51% 순도)를 무색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 312.0 [M + H-CO2 tBu]+
단계 5: N,N-디메틸포름아미드 (40 mL) 중 tert-부틸 4-[2-메틸-3-(p-톨릴술포닐옥시)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (3.2 g, 7.78 mmol)의 교반 용액에 실온에서 아지드화나트륨 (1.26 g, 19.44 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 55℃에서 5시간 동안 계속 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (500mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x150mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(3-아지도-2-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.5 g, 7.57 mmol, 97% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 255.1 [M + H-N2]+
단계 6: 에탄올 (40 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아지도-2-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.8 g, 6.37 mmol)의 교반 용액에 탄소 상 10% 팔라듐 (1.02 g, 9.56 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 H2 (1 atm) 하에 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 셀라이트를 메탄올로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(3-아미노-2-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.5 g, 2.16 mmol, 34% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 257.1 [M + H]+
단계 7: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-(3-아미노-2-메틸-프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.5 g, 5.85 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (895.93 mg, 5.85 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (2.17 g, 14.63 mmol, 2.43 mL) 및 아세트산 (35.13 mg, 585.06 μmol, 33.46 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 0-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-2-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (400 mg, 895.85 μmol, 15% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 402.2 [M + H]+
단계 8: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-2-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (400 mg, 996.27 μmol), 탄산세슘 (649.21 mg, 1.99 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (187.81 mg, 1.20 mmol, 138.09 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 0-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-2-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (560 mg, 1.35 mmol, 31% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 439.1 [M + H]+
단계 9: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (370 mg, 686.99 μmol), 탄산세슘 (671.50 mg, 2.06 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (189.87 mg, 1.37 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 0-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (230 mg, 299.14 μmol, 44% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.0 [M + H-CO2 tBu]+
단계 10: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 2 mL)을 사용하여 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-메틸-프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (230 mg, 350.20 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 조 화합물을 디에틸 에테르로 연화처리하여 (6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-메틸-3-(4-피페리딜)프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (210 mg, 334.8 μmol, 96% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.2 [M + H]+
단계 11: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (121.35 mg, 303.48 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (196.11 mg, 1.52 mmol, 264.30 μL) 및 HATU (174.01 mg, 455.23 μmol) 및 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-메틸-3-(4-피페리딜)프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (180 mg, 303.5 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 [이동상 A: 물 중 0.1% 아세트산암모늄, 이동상 B: 아세토니트릴; 칼럼: 100g 레디셉® Rf C18]에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]-2-메틸-프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (155 mg, 168.13 μmol, 55% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.3 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.60-7.42 (m, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.30-7.34 (m, 1H), 6.91-7.00 (m, 1H), 6.49 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.29-4.40 (m, 2H), 3.61-4.05 (m, 5H), 3.21-3.35 (m, 2H), 3.03 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.92-3.11 (m, 2H), 2.61-2.82 (m, 5H), 2.67 (s, 3H), 2.02-2.16 (m, 2H), 1.55-1.95 (m, 8H), 1.09-1.20 (m, 2H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 0.81-1.01 (m, 2H), 0.85 (t, J = 6.00 Hz, 3H).
실시예 15
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-4-플루오로피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1.30 g, 8.52 mmol), tert-부틸 4-(3-아미노프로필)-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (2 g, 7.74 mmol) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (1.72 g, 11.61 mmol, 1.93 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하여 tert-부틸 4-히드록시-4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (770 mg, 1.76 mmol, 23% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 404.2 [M + H]+
단계 2: 디클로로메탄 (15 mL) 중 tert-부틸 4-히드록시-4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (770 mg, 1.91 mmol)의 교반 용액에 -30℃에서 데옥소-플루오르 (633 mg, 2.86 mmol)를 첨가하였다. 0℃에서 2시간 동안 반응물을 계속 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (2 x 15mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액 시스템으로서 0-100% 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-플루오로-4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (440 mg, 965.81 μmol, 51% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.11 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.54 (d, J = 11.60 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.27 (dd, J = 2.00, 11.80 Hz, 1H), 3.90-3.95 (m, 2H), 3.70-3.77 (m, 2H), 2.80-3.10 (m, 2H), 1.91-2.10 (m, 2H), 1.30-1.85 (m, 6H), 1.39 (s, 9H).
단계 3: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-플루오로-4-[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.23 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (232.47 mg, 1.48 mmol, 170.93 μL) 및 탄산세슘 (803.57 mg, 2.47 mmol)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액 시스템으로서 0-100% 에틸 아세테이트/석유 에테르로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-4-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (600 mg, 1.02 mmol, 83% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.39 (s, 1H), 7.96-8.01 (m, 1H), 7.72-7.80 (m, 2H), 7.56-7.62 (m, 2H), 3.97-4.06 (m, 2H), 3.65-3.80 (m, 2H), 2.91-2.98 (m, 2H), 1.91-2.10 (m, 2H), 1.30-1.85 (m, 6H), 1.35 (s, 9H).
단계 4: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-4-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (600 mg, 1.11 mmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (152.82 mg, 1.11 mmol) 및 탄산세슘 (720.64 mg, 2.21 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-4-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (200 mg, 206.52 μmol, 19% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 561 [M + H-CO2 tBu]+
단계 5: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 트리플루오로아세트산 (34.51 mg, 302.70 μmol, 23.32 μL)을 사용하여 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]-4-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (200 mg, 302.70 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-(4-플루오로-4-피페리딜)프로필]-4-옥소-퀴나졸린의 TFA 염 (200 mg, 278.67 μmol, 92% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 561.0 [M + H]+
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (129.64 mg, 356.75 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (138.32 mg, 1.07 mmol, 186.41 μL), HATU (203.47 mg, 535.13 μmol) 및 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-(4-플루오로-4-피페리딜)프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (200 mg, 356.75 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 HPLC [이동상 A: 물 중 0.1% 포름산, 이동상 B: 아세토니트릴; 칼럼: 100g 레디셉® Rf C18]에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-플루오로-4-피페리딜]프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (70 mg, 72.23 μmol, 20% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 904.2 [M - H]-; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.16 (bs, 1H), 9.51 (bs, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.86 (t, J = 9.20 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.92-6.98 (m, 1H), 6.50 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.18-4.40 (m, 4H), 3.91-4.05 (m, 2H), 3.45-3.60 (m, 2H), 3.15-3.30 (m, 1H), 3.17 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.00-3.15 (m, 2H), 2.85-2.96 (m, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.65-2.79 (m, 1H), 2.51-2.62 (m, 2H), 1.95-2.12 (m, 4H), 1.41-1.94 (m, 10H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 16-20
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1.5 g, 9.80 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (2.18 g, 14.69 mmol, 2.44 mL) 및 tert-부틸 4-(4-아미노피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.61 g, 9.80 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 3% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.2 g, 2.53 mmol, 26% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 409.90[M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[4-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (700 mg, 1.70 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (210.00 mg, 1.87 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (293.99 mg, 1.87 mmol, 216.17 μL)을 사용하여 절차 A-B에 따라 합성하여 tert-부틸 4-[4-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.8 g, 조 물질)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 547.20[M + H]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[4-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (300 mg, 546.91 μmol), 탄산세슘 (445.48 mg, 1.37 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (151.15 mg, 1.09 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (120 mg, 173.70 μmol, 32% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 665.10[M - H]+
단계 4: 필요한 아민을 tert-부틸 4-[4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (120 mg, 179.99 μmol) 및 TFA (20.52 mg, 179.99 μmol, 13.87 μL)를 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]퀴나졸린의 TFA 염 (150 mg, 조 물질)을 연갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): [M - H]+ 565.20
실시예 16
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]퀴나졸린 (20 mg, 35.30 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (12.83 mg, 35.30 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (22.81 mg, 176.49 μmol, 30.74 μL) 및 HATU (16.11 mg, 42.36 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]피라졸-4-일]-4-옥소-퀴나졸린 (10.11 mg, 10.80 μmol, 31% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 912.20[M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.90 (bs, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.60-7.50 (m, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.38-7.30 (m, 1H), 7.05-6.95 (m, 1H), 6.52-6.40 (m, 2H), 6.07-6.05 (m, 1H), 4.62-4.42 (m, 2H), 4.35-4.25 (m, 1H), 4.05-3.95 (m, 1H), 3.27-3.15 (m, 3H), 3.04 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.92-2.80 (m, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.60-2.51 (m, 5H), 2.20-2.00 (m, 4H), 1.95-1.72 (m, 6H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 17
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]퀴나졸린 (20 mg, 35.30 μmol), 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (12.30 mg, 35.30 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (22.81 mg, 176.49 μmol, 30.74 μL) 및 HATU (16.11 mg, 42.36 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]피라졸-4-일]-4-옥소-퀴나졸린 (9.34 mg, 9.87 μmol, 28% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 895.60[M - H]-; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.86 (s, 1H), 9.90 (bs, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.81 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.53 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.35-7.27 (m, 2H), 7.05-7.04 (m, 2H), 4.60-4.52 (m, 1H), 4.47 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 4.08-4.05 (m, 1H), 3.87 (dd, J = 4.80, 11.80 Hz, 1H), 3.80-3.60 (m, 2H), 3.34-3.21 (m, 4H), 3.04 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.88-2.72 (m, 2H), 2.71-2.67 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.24-2.01 (m, 6H), 1.99-1.84 (m, 6H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 18
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]퀴나졸린 (20 mg, 35.30 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산 (14 mg, 30.47 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (22.81 mg, 176.49 μmol, 30.74 μL) 및 HATU (16.11 mg, 42.36 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]피라졸-4-일]-4-옥소-퀴나졸린 (7.84 mg, 8.14 μmol, 28% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 894.20[M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.71 (bs, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.82 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.60-7.50 (m, 1H), 7.42 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.42-7.30 (m, 1H), 6.98 (d, J = 7.60 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.40 Hz, 2H), 5.72 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.45-4.25 (m, 4H), 4.15-3.95 (m, 2H), 3.03 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.95-2.82 (m, 2H), 2.80-2.65 (m, 6H), 2.63 (s, 3H), 2.12-2.08 (m, 5H), 1.91-1.76 (m, 6H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 19
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]퀴나졸린 (20 mg, 35.30 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (12.83 mg, 35.30 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.50 mL) 및 HATU (16.11 mg, 42.36 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm A: 물 중 0.1% 포름산, 이동상 B: 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]피라졸-4-일]-4-옥소-퀴나졸린 (4.42 mg, 4.51 μmol, 13% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 912.20[M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.83 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.65-7.50 (m, 1H), 7.43 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.36-7.33 (m, 1H), 6.97 (d, J = 13.20 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 6.78 (t, J = 8.80 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.47 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 4.56-4.36 (m, 4H), 4.10-3.90 (m, 2H), 3.20-3.20 (m, 3H), 3.05 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.95-2.80 (m, 1H), 2.80-2.70 (m, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.60-2.52 (m, 2H), 2.20-2.00 (m, 6H), 19.00-1.75 (m, 4H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 20
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,6-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]퀴나졸린 (20 mg, 35.30 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,6-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (13.46 mg, 35.30 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.50 mL) 및 HATU (16.11 mg, 42.36 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,6-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]피라졸-4-일]-4-옥소-퀴나졸린 (5.90 mg, 6.29 μmol, 18% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 930.00[M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ =10.83 (s, 1H), 9.91 (bs, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.60-7.50 (m, 1H), 7.43 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.37-7.33 (m, 1H), 6.40-6.32 (m, 3H), 4.55-4.45 (m, 2H), 4.35-4.40 (m, 1H), 4.15-3.95 (m, 1H), 3.29-3.24 (m, 4H), 3.06 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.95-2.80 (m, 2H), 2.80-2.68 (m, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.25-2.05 (m, 7H), 1.88-1.82 (m, 3H), 1.73-1.71 (m, 3H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 21
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]페닐]피페리딘-1-일]-2-옥소에틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 TFA 염으로서의 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]퀴나졸린 (30 mg, 44.08 μmol)의 교반 용액에 실온에서 트리에틸아민 (22.30 mg, 220.38 μmol, 30.72 μL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (10 mg, 51.27 μmol, 7.52 μL)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 혼합물을 물 (5 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[4-[4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]-1-피페리딜]아세테이트 (31 mg, 42.23 μmol, 96% 수율)를 갈색빛 점성 액체로서 수득하였다. 이 조 화합물을 어떠한 정제도 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 681.40[M+H]+
단계 2: 필요한 아민을 tert-부틸 2-[4-[4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]-1-피페리딜]아세테이트 (31 mg, 45.54 μmol) 및 TFA (51.92 mg, 455.38 μmol, 35.08 μL)를 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 2-[4-[4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]-1-피페리딜]아세트산의 TFA 염 (30 mg, 34.59 μmol, 76% 수율)을 갈색빛 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): [M + H]+ 625.40
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. TFA 염으로서의 2-[4-[4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]-1-피페리딜]아세트산 (30 mg, 40.61 μmol), 3-[4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (17 mg, 42.35 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.50 mL) 및 HATU (19 mg, 49.97 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mm 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]-2-옥소-에틸]-4-피페리딜]피라졸-4-일]-4-옥소-퀴나졸린 (8.56 mg, 9.28 μmol, 23% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 893.80[M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.78 (s, 1H), 9.95 (bs, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.92 Hz, 1H), 7.70-7.64 (m, 2H), 7.43 (d, J = 2.96 Hz, 1H), 7.40-7.37 (m, 1H), 6.96 (d, J = 8.52 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.60 Hz, 2H), 5.69 (d, J = 7.52 Hz, 1H), 4.52-4.49 (m, 1H), 4.35-4.20 (m, 2H), 4.15-4.05 (m, 1H), 3.75-3.62 (m, 2H), 3.25-3.10 (m, 4H), 3.08 (q, J = 7.12 Hz, 2H), 2.74-2.69 (m, 3H), 2.67 (s, 3H), 2.64-2.51 (m, 2H), 2.13-2.08 (m, 5H), 1.88-1.84 (m, 1H), 1.81-1.74 (m, 2H), 1.65-1.50 (m, 1H), 1.45-1.35 (m, 1H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 22 및 23
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-아미노-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (2.0 g, 8.32 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1.53 g, 9.99 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (1.60 g, 10.82 mmol, 1.80 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 물질을 230-400 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (1.2 g, 2.46 mmol, 30% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 386.1 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (0.75 g, 1.95 mmol), KOtBu (436.67 mg, 3.89 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (305.66 mg, 1.95 mmol, 224.75 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (0.6 g, 654.49 μmol, 34% 수율)를 담갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 523.1 [M + H]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (0.6 g, 1.15 mmol), 탄산세슘 (1.12 g, 3.44 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (158.67 mg, 1.15 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-100 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (0.45 g, 526.75 μmol, 46% 수율)를 오렌지색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 641.3 [M + H]+
단계 4: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 트리플루오로아세트산 (3.70 g, 32.45 mmol, 2.5 mL)을 사용하여 tert-부틸 2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (450 mg, 702.33 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린의 TFA 염 (0.4 g, 482.71 μmol, 69% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 541.2 [M + H]+
실시예 22
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (138.77 mg, 347.07 μmol), 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.25 g, 381.89 μmol), HATU (217.81 mg, 572.84 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (246.79 mg, 1.91 mmol, 332.60 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 [이동상 A: 0.1% 아세트산암모늄, 이동상 B: 아세토니트릴]에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소-퀴나졸린 (125 mg, 140.23 μmol, 37% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 886.3 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.77 (bs, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.51-7.60 (m, 1H), 7.34 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 6.95-7.05 (m, 1H), 6.49 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.95-5.05 (m, 1H), 4.24-4.35 (m, 1H), 3.60-4.10 (m, 2H), 3.46-3.55 (m, 1H), 3.20-3.45 (m, 6H), 3.05 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.60-2.81 (m, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.55-2.45(m, 2H), 2.30-2.45 (m, 5H), 2.05-2.12 (m, 1H), 1.55-1.92 (m, 8H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 23
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (400 mg, 611.03 μmol), 2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (231.81 mg, 557.46 μmol), HATU (302.03 mg, 794.34 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (394.86 mg, 3.06 mmol, 532.15 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 반응으로부터의 조 물질을 역상 칼럼 크로마토그래피 [이동상 A: 물 중 0.1% 포름산, 이동상 B: 아세토니트릴; 칼럼: 100g 레디셉® Rf C18] 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 37% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[7-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소-퀴나졸린 (142 mg, 149.40 μmol, 24% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.0 [M + H]+ 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.42 (d, J = 4.00 Hz, 1H), 7.78-7.83 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 3.60, 8.80 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.85 (t, J = 9.20 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 14.80 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 5.78 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.97 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 4.93-4.96 (m, 1H), 4.23-4.28 (m, 1H), 3.51-3.60 (m, 2H), 3.35-3.42 (m, 2H), 3.15 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.80-2.92 (m, 4H), 2.78 (s, 3H), 2.67-2.77 (m, 1H), 2.46-2.60 (m, 2H), 2.28-2.41 (m, 5H), 2.05-2.12 (m, 1H), 1.80-1.91 (m, 1H), 1.52-1.80 (m, 8H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 24
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (250 mg, 1.63 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (483.88 mg, 3.27 mmol, 543.08 μL) 및 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (418.49 mg, 1.63 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 반응 혼합물로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 5% 메탄올-디클로로메탄을 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (405 mg, 746.94 μmol, 46% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 400.2 [M - H]-
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (999 mg, 2.49 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (279.23 mg, 2.49 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (430.01 mg, 2.74 mmol, 316.18 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하여 조 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (665 mg, 975.51 μmol, 39% 수율)를 담갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 483.1 [M + H-tBu]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (250 mg, 464.22 μmol), 탄산세슘 (378.13 mg, 1.16 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (96.22 mg, 696.33 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (210 mg, 283.64 μmol, 61% 수율)를 연갈색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 655.2 [M - H]-
단계 4: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. TFA (36.46 mg, 319.77 μmol, 24.64 μL)를 사용하여 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (210 mg, 319.77 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸의 TFA 염 (210 mg, 259.90 μmol, 82% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.2 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (310 mg, 462.25 μmol), HATU (210.91 mg, 554.70 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (298.71 mg, 2.31 mmol, 402.58 μL) 및 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (203.3 mg, 508.4 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 20에서 30% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (106.4 mg, 115.66 μmol, 25% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.2 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ =10.80 (s, 1H), 9.81 (s, 1H), 8.34 (d, J = 1.20 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.35 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.29-7.34 (m, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.48 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 13.60 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.32-4.35 (m, 1H), 4.11-4.19 (m, 2H), 3.66-3.75 (m, 1H), 3.41-3.60 (m, 2H), 3.4-3.21(m, 3H), 3.01-3.10 (m, 2H), 2.62-2.81 (m, 2H), 2.62 (s, 3H), 2.58-2.41(m, 5H), 2.06-2.10 (m, 2H), 1.60-1.91 (m, 10H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 25
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (250 mg, 1.63 mmol), tert-부틸 6-아미노-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (485.51 mg, 2.45 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (241.94 mg, 1.63 mmol, 271.54 μL) 및 아세트산 (4.90 mg, 81.63 μmol, 4.67 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하여 tert-부틸 6-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (450 mg, 1.17 mmol, 71% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 344.1 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 6-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (450 mg, 1.31 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (161.76 mg, 1.44 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (226.46 mg, 1.44 mmol, 166.51 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 6-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (500 mg, 978.22 μmol, 75% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 481.1[M + H]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 6-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (500 mg, 1.04 mmol), 탄산세슘 (847.67 mg, 2.60 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (316.38 mg, 2.29 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 90-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 6-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (370 mg, 414.10 μmol, 40% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 579.2 [M - H]-
단계 4: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 (0.5 mL) 중 4M 염화수소 용액을 사용하여 tert-부틸 6-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (370 mg, 618.06 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-(3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린의 HCl 염 (320mg, 466.55 μmol, 75% 수율)을 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 499.1 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-(3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (310 mg, 579.45 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (374.45 mg, 2.90 mmol, 504.65 μL), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (231.69 mg, 579.45 μmol) 및 HATU (264.39 mg, 695.34 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 정제용-HPLC (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]-4-옥소-퀴나졸린 (20.1 mg, 22.13 μmol, 4% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 844.0 [M + H]+ 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.77 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.58 (ddd, J = 0.80, 3.00, 8.80 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.29 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.21-7.24 (m, 1H), 7.00 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.44-6.46 (m, 2H), 5.95-6.05 (m, 1H), 4.25-4.35 (m, 1H), 4.01-4.06 (m, 1H), 3.84 (d, J = 11.60 Hz, 2H), 3.70-3.75 (m, 2H), 3.41-3.55 (m, 1H), 3.10 (s, 2H), 2.96 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.85-2.90 (m, 3H), 2.70-2.81 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.05-2.25 (m, 5H), 1.80-1.91 (m, 1H), 1.58-1.71 (m, 4H), 1.02 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 26
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-아미노-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (2.0 g, 8.32 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1.53 g, 9.99 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (1.60 g, 10.82 mmol, 1.80 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 물질을 230-400 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (1.2 g, 2.46 mmol, 30% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 386.1 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (0.6 g, 1.56 mmol), 탄산세슘 (1.52 g, 4.67 mmol) 및 2,6-디플루오로벤조니트릴 (259.83 mg, 1.87 mmol, 207.87 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[6-(2-시아노-3-플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (500 mg, 828.46 μmol, 53% 수율)를 담갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 505.0 [M + H]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-[6-(2-시아노-3-플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (300 mg, 594.59 μmol), 탄산세슘 (581.18 mg, 1.78 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (98.60 mg, 713.50 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-100 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (150 mg, 180.66 μmol, 31% 수율)를 오렌지색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 623.2 [M + H]+
단계 4: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 트리플루오로아세트산 (1.48 g, 12.98 mmol, 1 mL)을 사용하여 tert-부틸 2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (0.15 g, 240.87 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린의 TFA 염 (125 mg, 129.59 μmol, 54% 수율)을 갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 523.2 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (125 mg, 196.34 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (78.48 mg, 196.28 μmol), HATU (111.98 mg, 294.51 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (126.88 mg, 981.71 μmol, 171.00 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 37% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소-퀴나졸린 (116 mg, 124.43 μmol, 63% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 868.0 [M + H]+ 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 9.51 (s, 1H), 8.47 (d, J = 4.40 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.62-7.70 (m, 3H), 7.33 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 6.93-7.01 (m, 1H), 6.90 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.95-5.08 (m, 1H), 4.23-4.41 (m, 3H), 3.42-3.61 (m, 3H), 3.25-3.35 (m, 3H), 3.19 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 3.01-3.12 (m, 2H), 2.81-2.92 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.67-2.75 (m, 1H), 2.41-2.60 (m, 4H), 1.92-2.10 (m, 4H), 1.58-1.92 (m, 7H), 1.07 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 27
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (350 mg, 521.90 μmol), 2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (260.43 mg, 626.28 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (337.25 mg, 2.61 mmol, 454.51 μL) 및 HATU (238.13 mg, 626.28 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 정제용 HPLC (이동상: H2O 중 10mM 포름산/아세토니트릴)에 의해 정제하여 목적 화합물 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (120 mg, 124.41 μmol, 24% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 918.4 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.87 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 4.00, 9.00 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.85 (t, J = 9.20 Hz, 1H), 6.50 (dd, J = 2.00, 15.00 Hz, 1H), 6.40-6.45 (m, 1H), 5.78 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.30-5.35 (m, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.21-4.31 (m, 1H), 4.05-4.20 (m, 2H), 3.70-3.81 (m, 1H), 3.58-3.67 (m, 1H), 3.44-3.55 (m, 1H), 3.40-3.29(m, 1H), 3.17 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.65-2.91 (m, 5H), 2.80 (s, 3H), 2.51-2.60 (m, 2H), 2.32-2.41 (m, 1H), 2.02-2.12 (m, 2H), 1.49-1.90 (m, 10H), 1.06 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 28
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-아미노-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (4 g, 15.73 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (5.83g, 39.3 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (2.41 g, 15.73 mmol)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (5.8 g, 11.56 mmol, 74% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 400.3 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (5.8 g, 14.52 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (3.26 g, 29.04 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (2.74 g, 17.42 mmol, 2.01 mL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (7.3 g, 6.80 mmol, 47% 수율)를 연황색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 481.1 [M + H- tBu]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (7.0 g, 13.05 mmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (3.61 g, 26.09 mmol) 및 탄산세슘 (12.75 g, 39.14 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (4.6 g, 4.71 mmol, 36% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 653.2[M-H]-
단계 4: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 중 4M HCl (41 mL)을 사용하여 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (4.1 g, 6.26 mmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 조 화합물을 석유 에테르 (2x20 mL)로 연화처리하고, 농축시켜 3-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린의 HCl 염 (3.5 g, 5.00 mmol, 80% 수율)을 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 555.1 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (1 g, 1.80 mmol), HATU (1.03 g, 2.70 mmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (655.17 mg, 1.80 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.17 g, 9.01 mmol, 1.57 mL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 정제에 의해 용리액으로서 아세토니트릴 중 0.1% 아세트산암모늄을 사용하여 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (505 mg, 553.48 μmol, 31% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 900.3 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.75 (bs, 1H), 8.43 (d, J = 3.60 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.41-7.60 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.30-7.34 (m, 1H), 6.95-7.08 (m, 1H), 6.48 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.01-5.11 (m, 1H), 4.29-4.38 (m, 1H), 3.56-3.66 (m, 1H), 3.18-3.50 (m, 3H), 3.04 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.61-2.85 (m, 5H), 2.67 (s, 3H), 2.46-2.55 (m, 2H), 2.05-2.20 (m, 5H), 1.70-1.95 (m, 8H), 1.40-1.65 (m, 5H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 29
4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-9-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-아미노-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (950.0 mg, 3.51 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (645.69 mg, 4.22 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (54.81 mg, 369.87 μmol, 61.52 μL) 및 촉매량의 아세트산을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (700 mg, 1.52 mmol, 43% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 416.2 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-(6-히드록시-4-옥소-8,8a-디히드로퀴나졸린-3-일)-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (650.0 mg, 1.56 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (192.17 mg, 1.71 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (269.03 mg, 1.71 mmol, 197.82 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (750.0 mg, 997.61 μmol, 64% 수율)를 황색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 497.0 [M + H]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (700.0 mg, 1.27 mmol), 탄산세슘 (1.03 g, 3.17 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (350.12 mg, 2.53 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 목적 tert-부틸 4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (570.0 mg, 674.74 μmol, 53% 수율)를 조 생성물로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 669.1 [M - H]-
단계 4: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 트리플루오로아세트산 (203.99 mg, 1.79 mmol, 137.83 μL)을 사용하여 tert-부틸 4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (600.0 mg, 894.52 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 수득된 생성물을 디에틸 에테르 (2 x 15 mL)로 연화처리하고, 감압 하에 건조시켜 4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸의 TFA 염 (650.0 mg, 652.22 μmol, 73% 수율)을 황색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 571.0 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸 (600.0 mg, 1.05 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (679.47 mg, 5.26 mmol, 915.73 μL), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (382.08 mg, 1.05 mmol) 및 HATU (1.26 mmol, 479.6 mg)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 37% 아세토니트릴을 사용하여 용리시켜 정제하여 4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-9-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데칸 (78.63 mg, 80.29 μmol, 8% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 916.3 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 8.47 (d, J = 6.00 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70-7.81 (m, 1H), 7.68 (dt, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.40-7.49 (m, 1H), 7.37 (t, J = 3.20 Hz, 1H), 6.93-7.01 (m, 1H), 6.50 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 14.00 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.96-5.01 (m, 1H), 3.95-4.35 (m, 4H), 3.78-3.90 (m, 2H), 3.30-3.55 (m, 4H), 3.08 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.85-3.20 (m, 3H), 2.65-2.80 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.48-2.60 (m, 2H), 2.20-2.35 (m, 1H), 1.70-2.12 (m, 10H), 1.30-1.65 (m, 3H), 1.00 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 30
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (520 mg, 3.40 mmol), tert-부틸 9-아미노-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (911.38 mg, 3.40 mmol) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (1.26 g, 8.49 mmol, 1.41 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (50 g 실리카; 석유 에테르 중 0-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 tert-부틸 9-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (1.05 g, 2.23 mmol, 66% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 414.3 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 9-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (1.05 g, 2.54 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (341.91 mg, 3.05 mmol), 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (438.79 mg, 2.79 mmol, 322.64 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (50 g 실리카; 석유 에테르 중 0-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 tert-부틸 9-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (1.08 g, 1.54 mmol, 61% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 550.9 [M + H]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 9-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (1.08 g, 1.96 mmol), 탄산세슘 (1.92 g, 5.88 mmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (542.12 mg, 3.92 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (580 mg, 793.42 μmol, 40% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 669.0 [M + H]+
단계 4: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 트리플루오로아세트산 (1.20 g, 10.53 mmol, 811.55 μL)을 사용하여 tert-부틸 9-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (580 mg, 1.05 mmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 조 화합물을 디에틸 에테르 (2 x 30 mL)로 연화처리하고, 건조시켜 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸의 TFA 염 (570 mg, 655.88 μmol, 62% 수율)을 담갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 569.2 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (570 mg, 834.94 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (333.84 mg, 834.94 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (539.54 mg, 4.17 mmol, 727.14 μL) 및 HATU (476.20 mg, 1.25 mmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 생성된 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 [이동상 A: 물 중 0.1% 아세트산암모늄, 이동상 B: 아세토니트릴; 칼럼: 100g 레디셉® Rf C18]에 의해 정제하여 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (287 mg, 312.32 μmol, 37% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 914.4 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.77 (s, 1H), 8.51 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.50-7.58 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31-7.35 (m, 1H), 6.99 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.52-4.60 (m, 1H), 4.30-4.38 (m, 1H), 3.60-3.95 (m, 2H), 3.40-3.51 (m, 4H), 3.21-3.31 (m, 2H), 3.04 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.57-2.79 (m, 3H), 2.64 (s, 3H), 2.48-2.57 (m, 2H), 1.98-2.15 (m, 3H), 1.60-1.95 (m, 11H), 1.22-1.45 (m, 4H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 31
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]메틸]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 톨루엔 (30 mL) 중 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (63 mg, 411.40 μmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (61 mg, 411.61 μmol, 68.46 μL), 아세트산 (2.51 mg, 41.75 μmol, 2.39 μL) 및 tert-부틸 2-(아미노메틸)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (104.11 mg, 409.28 μmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 반응물로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)메틸]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (120 mg, 222.29 μmol, 54% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 398.1 [M-H]-
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-[(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)메틸]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (650 mg, 1.63 mmol), 탄산세슘 (1.33 g, 4.07 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (300 mg, 1.91 mmol, 220.59 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 반응물로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (600 mg, 1.03 mmol, 63% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 481.0 [M-tBu+H]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-[[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (600 mg, 1.12 mmol), 탄산세슘 (364.34 mg, 1.12 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (154.52 mg, 1.12 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 혼합물로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 4% MeOH를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (320 mg, 420.31 μmol, 38% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 653.1 [M-H]-.
단계 4: 필요한 아민을 디옥산 중 4M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 99% 중 4M 염화수소 (4 M, 4 mL)를 사용하여 tert-부틸 2-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (320 mg, 488.74 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일메틸)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린의 HCl 염 (300 mg, 385.72 μmol, 79% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 555.3 [M+H]+.
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일메틸)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (300 mg, 507.53 μmol) 및 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (184.43 mg, 461.25 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (262.38 mg, 2.03 mmol, 353.61 μL) 및 HATU (192.98 mg, 507.53 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[[7-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]메틸]-4-옥소-퀴나졸린 (85 mg, 94.26 μmol, 19% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 900.3 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.75 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 9.00, 3.20 Hz, 1H), 7.40 (bs, 1H), 7.32 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.28 (bs, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.45 (d, J = 14.80 Hz, 2H), 6.05 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 4.02 (d, J = 4.40 Hz, 2H), 3.41-3.39 (m, 4H), 3.00 (d, J = 7.20 Hz, 3H), 2.74-2.70 (m, 2H), 2.68-2.67 (m, 7H), 2.08-2.07 (m, 1H), 1.87-1.85 (m, 5H), 1.72 (bs, 4H), 1.62-1.54 (m, 4H), 1.52-1.46 (m, 2H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 32
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-2-아자스피로[4.5]데칸-8-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (628.51 mg, 4.10 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (658.95 mg, 4.45 mmol, 739.56 μL), 아세트산 (20.54 mg, 342.02 μmol, 19.56 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 목적 생성물을 조 반응물로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40-55% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 8-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-2-아자스피로[4.5]데칸-2-카르복실레이트 (720 mg, 1.50 mmol, 44% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 400.2 [M + H]+.
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 8-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-2-아자스피로[4.5]데칸-2-카르복실레이트 (720.00 mg, 1.80 mmol), 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (311.45 mg, 1.98 mmol, 229.01 μL) 및 탄산세슘 (1.76 g, 5.41 mmol)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 목적 생성물을 조 반응물로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 8-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-아자스피로[4.5]데칸-2-카르복실레이트 (317 mg, 554.75 μmol, 31% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 537.2 [M + H]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 8-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-아자스피로[4.5]데칸-2-카르복실레이트 (300 mg, 559.11 μmol), 탄산세슘 (546.50 mg, 1.68 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (154.52 mg, 1.12 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 8-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-아자스피로[4.5]데칸-2-카르복실레이트 (285 mg, 385.48 μmol, 69% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 655.4 [M + H]+.
단계 4: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4.0M (99.19 μL)을 사용하여 tert-부틸 8-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-아자스피로[4.5]데칸-2-카르복실레이트 (285 mg, 435.28 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-(2-아자스피로[4.5]데칸-8-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린의 HCl 염 (300 mg, 407.56 μmol, 94% 수율)을 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 555.0 [M + H]+.
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-(2-아자스피로[4.5]데칸-8-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (300 mg, 540.90 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (196.55 mg, 540.90 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (349.53 mg, 2.70 mmol, 471.06 μL) 및 HATU (226.23 mg, 594.99 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 생성된 조 반응물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 100 g 스냅 칼럼을 사용하여 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 37% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-2-아자스피로[4.5]데칸-8-일]-4-옥소-퀴나졸린 (59.64 mg, 65.27 μmol, 12% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 900.3 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.76 (s, 1H), 8.50 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.48-7.60 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31-7.35 (m, 1H), 7.00 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.43 (d, J = 11.60 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.55-4.65 (m, 1H), 4.25-4.34 (m, 1H), 3.60-3.95 (m, 1H), 3.42-3.61 (m, 4H), 3.12-3.20 (m, 1H), 3.04 (q, J = 6.80 Hz, 1H), 2.60-2.81 (m, 6H), 2.63 (s, 3H), 2.51-2.58 (m, 2H), 1.61-2.11 (m, 14H), 1.57 (t, J = 12.80 Hz, 2H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 33
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2 g, 7.80 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1.19 g, 7.80 mmol) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (1.39 g, 9.36 mmol, 1.56 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.5 g, 3.09 mmol, 40% 수율)를 연갈색 농후한 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 402.3 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.8 g, 4.48 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (603.75 mg, 5.38 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (774.79 mg, 4.93 mmol, 569.70 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 80에서 90%로 용리시켜 정제하여 라세미 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다. 이 라세미 화합물을 키랄 SFC 방법 전개에 적용하고, 이어서 룩스 A1 키랄 칼럼 (용매계 -30%의 이소프로필 알콜 중 0.5% 이소프로필 아민, 온도 - 35℃)을 사용하여 정제하여 tert-부틸 (S)-3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (제1 용리 이성질체, 400 mg, 678.87 μmol, 15% 수율) 및 tert-부틸 (R)-3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (제2 용리 이성질체, 410 mg)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 483.1 [M + H- tBu]+
주: 키랄 SFC 정제 후 키랄 중심에서의 입체화학을 임의적으로 할당하였다. 제1 용리 이성질체 입체화학을 S-거울상이성질체로서 임의적으로 할당하였고, 제2 용리 이성질체 입체화학을 R-거울상이성질체로서 임의적으로 할당하였다.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3S)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (410 mg, 761.32 μmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (157.81 mg, 1.14 mmol) 및 탄산세슘 (620.1mg, 1.9 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (471 mg, 670.36 μmol, 88% 수율)를 연갈색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 655.21 [M - H]-
단계 4: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. TFA (408.02 mg, 3.58 mmol, 275.69 μL)를 사용하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (470 mg, 715.67 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸의 TFA 염 (436 mg, 494.10 μmol, 69% 수율)을 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.1 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (436 mg, 650.13 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (285.95 mg, 715.15 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (420.12 mg, 3.25 mmol, 566.19 μL) 및 HATU (271.92 mg, 715.15 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 정제용-HPLC (이동상:물/아세토니트릴 중 10 mM 포름산)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (220 mg, 231.12 μmol, 36% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.3 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 9.52 (bs, 1H), 8.36 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 7.78-7.81 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.95-7.05 (m, 1H), 6.50 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.28-5.38 (m, 1H), 4.10-4.40 (m, 5H), 3.76-3.85 (m, 1H), 3.32-3.61 (m, 5H), 3.15 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.02-3.11 (m, 1H), 2.85-2.95 (m, 1H), 2.65-2.81 (m, 1H), 2.78 (s, 3H), 2.50-2.62 (m, 2H), 2.38-2.48 (m, 1H), 1.96-2.15 (m, 4H), 1.52-1.95 (m, 7H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 34
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트.HCl (15 g, 51.23 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (7.85 g, 51.23 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (10.63 g, 71.72 mmol, 11.93 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 석유 에테르 중 20% 에틸 아세테이트로 연화처리하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (12.0 g, 25.29 mmol, 49% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 402.20[M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (12.0 g, 25.11 mmol), 탄산세슘 (24.54 g, 75.33 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (5.13 g, 32.64 mmol, 3.77 mL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (9.0 g, 16.54 mmol, 66% 수율)를 회백색 고체로서 1.8 g과 함께 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 539.2[M + H]+.
단계 3: tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (9.0 g, 16.54 mmol)를 키랄 SFC 정제에 적용하여 거울상이성질체를 분할하였다. 라세미 중간체를 룩스 A1 칼럼 (250 mm x 30 mm; 5마이크로미터)을 사용하는 키랄 SFC 방법을 사용하여 공용매로서의 메탄올 중 0.5% 이소-프로필아민과 40% 이소프로필 알콜/CO2 (유량: 4 ml/분; 유출구 압력: 100 bar)로 용리시키면서 키랄 분해하여 제1 용리 이성질체 3.5 g 및 제2 용리 이성질체 3.7 g을 수득하였다.
2종의 이성질체의 배위를 하기와 같이 임의적으로 할당하였다.
거울상이성질체 1: 제1 용리 이성질체를 tert-부틸 (S)-3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
거울상이성질체 2: 제2 용리 이성질체를 tert-부틸 (R)-3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
단계 4a: MeOH (20 mL) 중 N-에틸-N-메틸-술파모일 클로라이드 (10 g, 63.44 mmol, 7.81 mL)의 용액에 0℃에서 MeOH 중 7M 암모니아 (7 M, 30 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 물 (150 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (100 ml), 염수 (100 ml)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (7.0 g, 48.12 mmol, 76% 수율)을 무색 액체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 6.65 (s, 2H), 2.98 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.61 (s, 3H), 1.09 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
단계 4: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (3.7 g, 6.87 mmol), 탄산세슘 (5.60 g, 17.18 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (1.42 g, 10.31 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 석유 에테르 중 10% 디클로로메탄으로 연화처리하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2.8 g, 3.58 mmol, 52% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 601.0 [M+H- tBu]+
단계 5: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4M, 36.68 mL)을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2.7 g, 4.11 mmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸의 HCl 염 (2.7 g, 3.90 mmol, 95% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.0 [M+H]+
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (800 mg, 1.35 mmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (490.17 mg, 1.23 mmol), HATU (512.90 mg, 1.35 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (697.35 mg, 5.40 mmol, 939.83 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 반응 혼합물을 30g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (400 mg, 0.46mmol, 33% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.2[M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 10.20 (bs, 1H), 9.60 (bs, 1H), 8.36 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 7.79-7.85 (m, 2H), 7.71 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 4.00, 9.40 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.47-6.51 (m, 1H), 6.48 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.30-5.40 (m, 1H), 4.10-4.40 (m, 5H), 3.75-3.81 (m, 1H), 3.41-3.51 (m, 2H), 3.35-3.45 (m, 2H), 3.16 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 3.00-3.10 (m, 1H), 2.85-2.95 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.65-2.75 (m, 1H), 2.51-2.61 (m, 2H), 2.50-2.40 (m, 1H), 2.01-2.21 (m, 5H), 1.51-1.95 (m, 7H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 35
4-[6-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]벤즈아미드
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (1R,5S)-6-아미노-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.10 g, 5.55 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1.02 g, 6.66 mmol) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (1.07 g, 7.21 mmol, 1.20 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 생성물을 디에틸 에테르로 연화처리하여 목적 tert-부틸 (1R,5S)-6-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.1 g, 3.12 mmol, 56% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 344.2 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (1R,5S)-6-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1 g, 2.91 mmol), 탄산세슘 (2.85 g, 8.74 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (548.99 mg, 3.49 mmol, 403.67 μL)을 사용하여 O-아릴화 (절차 A-B)에 대한 일반적 절차에 따라 합성하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 1% 메탄올 / 디클로로메탄으로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 (1R,5S)-6-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.2 g, 2.46 mmol, 84% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 481.2 [M + H]+
단계 3: 디옥산 (15 mL) 중 tert-부틸 6-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.1 g, 2.29 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 디옥산 중 4.0M 염화수소 용액 (1.04 mL)을 첨가하고, 실온에서 3시간 동안 계속 반응시켰다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 이 조 화합물을 에틸 아세테이트로 연화처리하여 2-[3-(3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-3,6-디플루오로-벤조니트릴 (950 mg, 2.26 mmol, 99% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 381.0 [M + H]+
단계 4: 디옥산 (10 mL) 중 2-[3-[(1R,5S)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-3,6-디플루오로-벤조니트릴 (1.0 g, 2.40 mmol) 및 tert-부틸 4-브로모벤조에이트 (616.89 mg, 2.40 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 탄산세슘 (2.35 g, 7.20 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시킨 후, X-phos-Pd-G2 (188.74 mg, 239.92 μmol) 및 X-Phos (114.37 mg, 239.92 μmol)를 실온에서 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 후속적으로 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 물 (300 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 에틸 아세테이트 (3x200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (200 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50-60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[(1R,5S)-6-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]벤조에이트 (750 mg, 1.11 mmol, 46.06% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.2 [M + H]+
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[(1R,5S)-6-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]벤조에이트(750 mg, 1.35 mmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄(409.68 mg, 2.96 mmol) 및 탄산세슘(1.10 g, 3.37 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 디클로로메탄 및 석유 에테르로 연화처리하여 tert-부틸 4-[(1R,5S)-6-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]벤조에이트 (400mg, 397.19 μmol, 29% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 675.3 [M + H]+
단계 6: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 (204.72 μL)를 사용하여 디옥산 (5 mL) 중 tert-부틸 4-[(1R,5S)-6-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]벤조에이트 (250 mg, 449.19 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 조 화합물을 에틸 아세테이트로 연화처리하여 4-[(1R,5S)-6-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]벤조산의 HCl 염 (180 mg, 217.35 μmol, 48% 수율)을 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 619.2 [M + H]+
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 4-[6-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]벤조산 (150 mg, 242.47 μmol), 3-[4-(4-아미노-1-피페리딜)-3-플루오로-아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (103.82 mg, 290.96 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (156.68 mg, 1.21 mmol, 211.16 μL) 및 HATU (110.63 mg, 290.96 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하고, 분획을 동결건조시켜 4-[6-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]벤즈아미드 (33.93 mg, 35.00 μmol, 14% 수율)를 연녹색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 921.4 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 7.74-7.80 (m, 4H), 7.68 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.44-7.52 (m, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.87 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 6.52 (dd, J = 2.40, 15.20 Hz, 1H), 6.43 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 5.81 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.21-4.31 (m, 1H), 3.80-3.90 (m, 1H), 3.78 (d, J = 10.00 Hz, 1H), 3.31-3.48 (m, 4H), 3.11-3.20 (m, 4H), 2.77 (s, 3H), 2.58-2.76 (m, 4H), 2.42 (s, 2H), 2.05-2.15 (m, 1H), 1.81-1.91 (m, 3H), 1.68-1.78 (m, 2H), 1.06 (t, J = 6.80 Hz, 3H)ppm.
실시예 36
3-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]메틸]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 메탄올 (20 mL) 중 tert-부틸 3-옥소-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.5 g, 1.96 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 수소화붕소나트륨 (148.18 mg, 3.92 mmol)을 조금씩 첨가하고, 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 3-히드록시-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.4 g, 1.55 mmol, 79% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 158.1 [M + H]+.
단계 2: 디클로로메탄 (6 mL) 중 tert-부틸 3-히드록시-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.4 g, 1.55 mmol)의 용액에 N,N-디에틸에탄아민 (393.24 mg, 3.89 mmol, 541.65 μL) 및 N,N-디메틸피리딘-4-아민 (18.99 mg, 155.44 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 메탄 술포닐 클로라이드 (213.68 mg, 1.87 mmol, 144.38 μL)를 동일한 온도에서 반응 혼합물에 적가하고, 실온에서 45분 동안 계속 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄 (30mL)으로 희석하고, 물 (100 ml)에 이어서 염수 용액 (50mL)으로 세척하였다. 유기 상을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (0-60% 에틸 아세테이트/석유 에테르)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-메틸술포닐옥시-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.3 g, 885.47 μmol, 57% 수율)를 검으로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 236.0[M + H]+.
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 tert-부틸 3-메틸술포닐옥시-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.3 g, 894.41 μmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 시안화나트륨 (65.75 mg, 1.34 mmol)을 실온에서 1 부분으로 첨가하였다. 튜브를 밀봉하고, 생성된 반응 혼합물을 110℃로 16시간 동안 가열하였다. 16시간 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물로 희석하고, 5% 메탄올/디클로로메탄 (100mL)으로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 50% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-시아노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.15 g, 444.93 μmol, 50% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 166.9[M + H]+.
단계 4: 0℃에서 테트라히드로푸란 (25 mL) 중 tert-부틸 3-시아노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.40 g, 5.26 mmol)의 교반 용액에 보란 테트라히드로푸란 착물 용액 (1.13 g, 13.14 mmol, 1M)을 적가하고, 동일한 온도에서 10분 동안 계속 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온한 다음, 80℃에서 질소 분위기 하에 4시간 동안 환류시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 메탄올 (15mL)로 켄칭하고, 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 3-(아미노메틸)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.40 g, 4.82 mmol, 92% 수율)를 조 물질로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 171.1 [M + H]+.
단계 5: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(아미노메틸)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.4 g, 5.18 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (792.96 mg, 5.18 mmol) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (1.92 g, 12.95 mmol, 2.15 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)메틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.4 g, 2.92 mmol, 56% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 360.2[M + H]+.
단계 6: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)메틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.4 g, 3.37 mmol), 탄산세슘 (3.29 g, 10.11 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (1.06 g, 6.74 mmol, 778.44 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 혼합물로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 0-10% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.3 g, 2.12 mmol, 63% 수율)를 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 453.2 [M + H]+.
단계 7: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.2 g, 2.17 mmol), 탄산세슘 (2.12 g, 6.52 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (600.20 mg, 4.34 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 ml)로 희석하고, 고체를 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트 (2 x 60 ml)로 추출하고, 분리된 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 3-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.7 g, 726.46 μmol, 33% 수율)를 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 571.2 [M + H]+.
단계 8: 필요한 아민을 트리플루오로아세트산 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 0℃에서 질소 분위기 하에 트리플루오로아세트산 (1.19 g, 10.44 mmol, 804.02 μL)을 사용하여 tert-부틸 3-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.7 g, 1.04 mmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸의 TFA 염 (0.65 g, 818.46 μmol, 78% 수율)을 검으로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 571.2 [M + H]+.
단계 9: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (146.00 mg, 365.15 μmol), 3-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.25 g, 365.15 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (235.96 mg, 1.83 mmol, 318.00 μL) 및 HATU (208.26 mg, 547.72 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 43% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 3-[[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]메틸]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (98 mg, 101.70 μmol, 28% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 916.3 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.69 (dd, J = 8.80, 2.80 Hz, 1H), 7.48-7.45 (m, 1H), 7.37 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.48 (t, J = 13.60 Hz, 2H), 6.12 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.43-4.31 (m, 2H), 4.28-4.19 (m, 2H), 4.02 (d, J = 6.80 Hz, 2H), 3.85-3.84 (m, 2H), 3.58-3.51 (m, 2H), 3.38-3.30 (m, 2H), 3.14 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 3.09-3.01 (m, 2H), 2.76-2.68 (m, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.67-2.60 (m, 1H), 2.59-2.53 (m, 1H), 2.11-2.08 (m, 2H), 1.91-0.00 (m, 6H), 1.83-1.71 (m, 1H), 1.52-1.54 (m, 4H),1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 37
2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복스아미드
단계 1: THF (1 mL) 중 3-[4-(4-아미노-1-피페리딜)-3-플루오로-아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (50 mg, 140.13 μmol)의 용액에 0℃에서 트리에틸아민 (70.90 mg, 700.63 μmol, 97.65 μL) 및 (4-니트로페닐) 카르보노클로리데이트 (33.89 mg, 168.15 μmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 용액을 감압 하에 농축시켜 (4-니트로페닐)N-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]카르바메이트 (70 mg, 95.11 μmol, 68% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 486.0 [M+H]+
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (4 mL) 중 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (200.45 mg, 306.20 μmol)의 용액에 -30℃에서 질소 하에 트리에틸아민 (416.88 mg, 4.12 mmol, 574.21 μL) 및 (4-니트로페닐) N-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]카르바메이트 (0.4 g, 823.95 μmol)를 첨가하였다. 반응 용액을 실온으로 천천히 가온하고, 5시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복스아미드 (144 mg, 160.27 μmol, 19% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 887.4 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.89-7.84 (m, 1H), 7.80 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.85 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 6.50 (dd, J = 15.20, 2.40 Hz, 1H), 6.41 (dd, J = 8.80, 2.00 Hz, 1H), 6.23 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.80 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.94 (t, J = 8.80 Hz, 1H), 4.40-4.20 (m, 1H), 3.51-3.48 (m, 1H), 3.21-3.16 (m, 4H), 3.11 (t, J = 11.20 Hz, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.72-2.2.65, (m, 2H),2.64-2.56 (m, 3H), 2.36 (t, J = 8.80 Hz, 3H), 2.27 (t, J = 11.60 Hz, 3H), 2.08-1.92 (m, 1H), 1.84-1.77 (m, 3H), 1.61-1.54 (m, 5H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 38
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복스아미드
단계 1: THF (7 mL) 중 3-[4-(4-아미노-1-피페리딜)-3-플루오로-아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (0.7 g, 1.96 mmol)의 용액에 0℃에서 질소 하에 트리에틸아민 (992.55 mg, 9.81 mmol, 1.37 mL) 및 (4-니트로페닐) 카르보노클로리데이트 (474.50 mg, 2.35 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃ 내지 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응물을 감압 하에 농축시켜 (4-니트로페닐) N-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]카르바메이트 (1.27 g, 1.95 mmol, 99% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 486.2 [M + H]+.
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (137.44 mg, 231.74 μmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (416.88 mg, 4.12 mmol, 574.21 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -30℃로 냉각시키고, 10분 동안 교반하였다. (4-니트로페닐) N-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜) 아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜] 카르바메이트 (0.25 g, 514.97 μmol)를 -30℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-N-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복스아미드 (38.15 mg, 38.83 μmol, 8% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 901.3 [M - H]-; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.57 (s, 1H), 9.81 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.00 Hz, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (d, J = 3.20 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.20-4.13 (m, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.91 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.68-3.59 (m, 1H), 3.50 (m, 2H), 3.06 (d, J = 7.20 Hz, 2H), 2.86-2.80 (m, 3H), 2.76 (t, J = 6.80 Hz, 3H), 2.67 (d, J = 5.60 Hz, 4H), 2.49-2.40 (m, 3H), 2.14-2.07 (m, 1H), 1.96 (s, 4H), 1.83-1.56 (m, 5H), 1.04 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 39
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[3-[3-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]아제티딘-1-일]시클로부탄카르보닐]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[3-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]아제티딘-1-일]시클로부탄카르복실산 (173.60 mg, 462.44 μmol), 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.25 g, 462.44 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (298.84 mg, 2.31 mmol, 402.75 μL) 및 HATU (263.75 mg, 693.66 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산을 함유하는 43% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[7-[3-[3-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]아제티딘-1-일]시클로부탄카르보닐]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소-퀴나졸린 (215 mg, 222.10 μmol, 48% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 898.3 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 10.54 (bs, 1H), 8.40 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 9.00, 3.20 Hz, 2H), 7.40-7.37 (m, 1H), 7.34 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.18 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 6.51 (t, J = 14.00 Hz, 2H), 6.24 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 6.24 (q, J = 8.00 Hz, 1H), 4.37 (q, J = 44.00 Hz, 1H), 4.09-0.00 (m, 2H), 3.96-3.71 (m, 4H), 3.51-3.48 (m, 2H), 3.20-3.10 (m, 2H), 3.08 (q, J = 7.20 Hz, 3H), 2.78-2.61 (m, 5H), 3.17-3.07 (m, 8H), 2.07-1.91 (m, 1H), 1.91-1.90 (m, 1H), 1.66-1.56 (m, 4H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 40
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-아미노-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (5.0 g, 19.66 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (3.01 g, 19.66 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (7.28 g, 49.14 mmol, 8.17 mL) 및 아세트산 (118.04 mg, 1.97 mmol, 112.42 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (5.6 g, 13.72 mmol, 70% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. 라세미 고리화 화합물을 키랄 SFC 정제를 사용하여 키랄 분해하였다. 라세미 고리화 화합물 3.0 g을 키랄셀 OX-H 칼럼을 사용하는 SFC 정제에 적용하였다 (유량: 3 ml/분, 공용매: 30% 메탄올, 유출구 압력: 100 bar, 온도: 35℃). SFC 정제 후에, 제1 용리 이성질체 (거울상이성질체 1) 1.3 g 및 제2 용리 이성질체 (거울상이성질체 2) 1.3 g을 수득하였다. 제1 용리 이성질체의 입체화학을 S-거울상이성질체로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 이성질체를 R-거울상이성질체로서 임의적으로 할당하였다. LCMS m/z (ESI): 400.2 [M + H]+
2종의 거울상이성질체를 구별하고 별개의 등록 번호를 생성하기 위해, 배위를 하기와 같이 임의적으로 할당한다는 것을 주목한다.
거울상이성질체 1: 제1 용리 이성질체를 tert-부틸 3-[(3S)-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
거울상이성질체 2: 제2 용리 이성질체를 tert-부틸 3-[(3R)-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[(3S)-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.30 g, 3.25 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (730.32 mg, 6.51 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (511.21 mg, 3.25 mmol, 375.89 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.2 g, 1.71 mmol, 53% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 481.1 [M + H- tBu]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3S)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.20 g, 2.24 mmol), 탄산세슘 (1.82 g, 5.59 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (618.10 mg, 4.47 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (960.0 mg, 1.01 mmol, 45% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 653.2 [M - H]-
단계 4: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 염화수소 용액 (4M, 3.0 mL)을 사용하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400.00 mg, 610.92 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 수득된 잔류물을 디에틸 에테르 (2 x 10 mL)로 연화처리하고, 감압 하에 건조시켜 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (360.0 mg, 542.20 μmol, 89% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 555.2 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (400.00 mg, 721.20 μmol), HATU (411.33 mg, 1.08 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (466.05 mg, 3.61 mmol, 628.10 μL) 및 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (262.07 mg, 721.20 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 생성된 조 물질을 100 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 42% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (230.0 mg, 254.57 μmol, 35% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 900.4 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.74 (s, 1H), 8.43 (d, J = 3.60 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 6.00 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.45-7.61 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31-7.35 (m, 1H), 6.99 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.01-5.11 (m, 1H), 4.28-4.38 (m, 1H), 3.72-4.01 (m, 1H), 3.53-3.62 (m, 1H), 3.21-3.51 (m, 4H), 3.02-3.07 (m, 2H), 2.60-2.81 (m, 4H), 2.64 (s, 3H), 2.51-2.59 (m, 2H), 2.01-2.18 (m, 4H), 1.70-1.92 (m, 8H), 1.42-1.69 (m, 5H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 41
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.30 g, 3.25 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (730.32 mg, 6.51 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (511.21 mg, 3.25 mmol, 375.89 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 물질을 230-400 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.3 g, 1.94 mmol, 60% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 481.3 [M + H- tBu]+
단계 2: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.10 g, 2.05 mmol), 탄산세슘 (667.95 mg, 2.05 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (283.29 mg, 2.05 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (40 mL)로 켄칭하고, 여과하고, 건조시켰다. 여과물을 에틸 아세테이트 (2x30 mL)로 추출하고, 염수 (25 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켜 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.9 g, 934.71 μmol, 46% 수율)를 갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 599.1 [M + H- tBu]+
단계 3: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 HCl (4.0 M, 4 mL)을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400.00 mg, 610.92 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 수득된 조 물질을 디에틸 에테르 (2 x 10 mL)로 연화처리하고, 건조시켜 3-[(3R)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.4 g, 531.89 μmol, 87% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 555.2 [M + H]+
단계 4: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[(3R)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (400.00 mg, 721.20 μmol), HATU (411.33 mg, 1.08 mmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (262.07 mg, 721.20 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (466.05 mg, 3.61 mmol, 628.10 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 100 g C18 역상 칼럼 정제에 의해 용리액으로서 아세토니트릴 중 0.1% 아세트산암모늄을 사용하여 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (130 mg, 140.40 μmol, 19% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 898.3 [M - H]-; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 8.43 (d, J = 3.60 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.42-7.61 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.28-7.34 (m, 1H), 6.91-7.05 (m, 1H), 6.48 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.96-5.11 (m, 1H), 4.28-4.35 (m, 1H), 3.55-3.61 (m, 1H), 3.34-3.51 (m, 4H), 3.01-3.08 (m, 2H), 2.72-2.81 (m, 3H), 2.51-2.71 (m, 7H), 2.05-2.16 (m, 4H), 1.71-1.95 (m, 8H), 1.40-1.69 (m, 5H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 42
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (800 mg, 1.44 mmol), 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (548.40 mg, 1.51 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (928.77 mg, 7.19 mmol, 1.25 mL) 및 HATU (601.15 mg, 1.58 mmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40에서 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (270 mg, 295.42 μmol, 21% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.87 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 9.00, 2.80 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.35 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 6.99 (s, 1H), 6.47 (t, J = 12.80 Hz, 2H), 6.07 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.35-4.29 (m, 1H), 4.20-4.11 (m, 2H), 3.70 (d, J = 17.20 Hz, 2H), 3.58-3.48 (m, 3H), 3.05 (d, J = 7.20 Hz, 2H), 2.74-2.65 (m, 7H), 2.47-2.36 (m, 3H), 2.11-2.06 (m, 3H), 1.92-1.62 (m, 9H), 1.58-1.51 (m, 1H), 1.04 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 43
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.8 g, 1.35 mmol), 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (593.29 mg, 1.48 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (1.74 g, 13.49 mmol, 2.35 mL) 및 HATU (564.19 mg, 1.48 mmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (307 mg, 336.76 μmol, 25% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.78 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.35 (s, 2H), 6.99 (s, 1H), 6.47 (t, J = 13.60 Hz, 2H), 6.08 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.32 (s, 1H), 4.15 (d, J = 12.40 Hz, 3H), 3.72 (s, 1H), 3.47-3.34 (m, 4H), 3.06 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 2.79-2.66 (m, 5H), 2.42-2.34 (m, 4H), 2.10-2.07 (m, 3H), 1.92-1.55 (m, 11H), 1.04 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 44
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[(3R)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-(디메틸술파모일아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.15 g, 259.93 μmol), HATU (148.25 mg, 389.90 μmol), 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (94.46 mg, 236.23 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (167.97 mg, 1.30 mmol, 226.38 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 생성물을 C18 역상 칼럼 크로마토그래피 30 g에 의해 용리액으로서 아세토니트릴 중 0.1% 아세트산암모늄을 사용하여 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (75 mg, 81.07 μmol, 31% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 900.3 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.70 (s, 1H), 8.43 (d, J = 4.00 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.45-7.55 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.28-7.35 (m, 1H), 6.95-7.02 (m, 1H), 6.48 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.01-5.11 (m, 1H), 4.29-4.37 (m, 1H), 3.51-3.61 (m, 1H), 3.35-3.50 (m, 2H),3.35-3.14(m, 3H), 3.01-3.07 (m, 2H), 2.70-2.81 (m, 2H), 2.61-2.68 (m, 2H), 2.67 (s, 3H), 2.51-2.58 (m, 2H), 2.02-2.15 (m, 4H), 1.65-1.91 (m, 7H), 1.42-1.68 (m, 5H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 45
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (101.47 mg, 253.77 μmol), HATU (144.73 mg, 380.65 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (163.99 mg, 1.27 mmol, 221.01 μL) 및 3-[(3R)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (150.0 mg, 253.77 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 100 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 46% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (35.0 mg, 37.96 μmol, 15% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 900.4 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 8.43 (d, J = 3.60 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.42-7.56 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.28-7.34 (m, 1H), 6.95-7.02 (m, 1H), 6.48 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.01-5.11 (m, 1H), 4.28-4.38 (m, 1H), 3.55-3.62 (m, 1H), 3.11-3.51 (m, 5H), 3.01-3.08 (m, 2H), 2.71-2.81 (m, 3H), 2.51-2.68 (m, 4H), 2.63 (s, 3H), 2.01-2.15 (m, 4H), 1.65-1.95 (m, 7H), 1.40-1.65 (m, 5H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 46
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 아세토니트릴 (30 mL) 중 tert-부틸 니트라이트 (1.58 g, 15.29 mmol, 1.82 mL) 및 CuBr2 (4.55 g, 20.38 mmol, 966.58 μL)의 교반 용액에 0-5℃에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (3 g, 10.19 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (4.1 g, 4.89 mmol, 48% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 304.0 [M-tBu +3H]+.
단계 2: 1,4-디옥산 (40 mL) 중 tert-부틸 4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.9 g, 10.89 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 밀봉 튜브에 넣었다. 반응 혼합물에 아세트산칼륨 (2.14 g, 21.77 mmol, 1.36 mL) 및 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란 (4.15 g, 16.33 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 퍼징하고, Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (889.02 mg, 1.09 mmol)을 첨가한 후, 질소 기체로 5분 동안 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (60 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 60 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (4.6 g, 5.33 mmol, 49% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 306.2 [M+H]+.
단계 3: 밀봉 튜브에 들은 1,4-디옥산 (60 mL) 및 물 (10 mL) 중 tert-부틸 4-[2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (5 g, 12.34 mmol)의 용액에 K3PO4 (7.86 g, 37.01 mmol) 및 2,6-디벤질옥시-3-브로모-피리딘 (5.02 g, 13.57 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 퍼징하고, Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (1.01 g, 1.23 mmol)을 첨가한 후, 질소 기체로 5분 동안 퍼징하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (60 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 60 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.3 g, 3.79 mmol, 31% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 569.3 [M+H]+.
단계 4: 에틸 아세테이트 (3 mL) 및 1,4-디옥산 (3 mL) 중 tert-부틸 4-[4-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (1 g, 1.76 mmol)의 교반 용액에 Pd(OH)2 (493.90 mg, 3.52 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 수소 분위기 하에 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (650 mg, 1.54 mmol, 88% 수율)를 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 389.2 [M-H]-.
단계 5: 1,4-디옥산 (2 mL) 중 tert-부틸 4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.28 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 디옥산 중 염화수소 용액 (4 M, 4 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 조 화합물을 디에틸 에테르로 세척하여 3-[3-플루오로-4-(4-피페리딜)페닐]피페리딘-2,6-디온 (490 mg, 1.01 mmol, 79% 수율)을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 291.2 [M+H]+.
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (4 mL) 중 3-[3-플루오로-4-(4-피페리딜)페닐]피페리딘-2,6-디온 (490 mg, 1.69 mmol)의 용액에 실온에서 트리에틸아민 (683.12 mg, 6.75 mmol, 940.94 μL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (362.12 mg, 1.86 mmol, 272.27 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 물 (10 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 디에틸 에테르로 세척하여 tert-부틸 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (547 mg, 1.22 mmol, 72% 수율)를 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 405.2 [M+H]+.
단계 7: 1,4-디옥산 (3 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (547 mg, 1.35 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 디옥산 중 염화수소 용액 (4 M, 5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 조 화합물을 디에틸 에테르로 세척하여 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (800 mg, 1.21 mmol, 89% 수율)을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 349.2 [M+H]+.
단계 8: 목적 화합물을 COMU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-F)을 통해 제조하였다. 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (300 mg, 538.98 μmol), 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (206.54 mg, 592.88 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (348.29 mg, 2.69 mmol, 469.39 μL)에 이어서 COMU (253.91 mg, 592.88 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 아세토니트릴 중 40-45% 포름산 완충제로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (10.38 mg, 10.81 μmol, 2% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 887.2 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.88 (s, 1H), 10.17 (s, 1H), 9.53 (s, 1H), 8.36 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 7.79-7.89 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.40, 8.80 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.21-7.31 (m, 1H), 7.10 (d, J = 11.20 Hz, 2H), 5.29-5.36 (m, 1H), 4.12-4.45 (m, 1H), 4.11-4.18 (m, 2H), 3.89 (dd, J = 4.80, 11.80 Hz, 1H), 3.72-3.81 (m, 1H), 3.24-3.65 (m, 4H), 3.02-3.21 (m, 5H), 2.77 (s, 3H), 2.53-2.71 (m, 4H), 2.15-2.27 (m, 1H), 1.60-2.14 (m, 10H), 1.50-1.61 (m, 1H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 47
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (230 mg, 352.91 μmol), 2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]아세트산 (141.11 mg, 352.91 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (182.44 mg, 1.41 mmol, 245.88 μL) 및 HATU (134.19 mg, 352.91 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (100 mg, 100.94 μmol, 29% 수율)을 회분 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.78 (s, 1H), 10.18 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.86 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 9.00, 3.20 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 9.20, 4.00 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.83 (t, J = 8.80 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.48 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 5.79 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 4.29-4.21 (m, 1H), 4.15-4.12 (m, 2H), 3.74-3.66 (m, 1H), 3.53-3.42 (m, 3H), 3.18-3.14 (m, 2H), 3.10-3.08 (m, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.73-2.68 (m, 2H), 2.60-2.51 (m, 2H), 2.35-2.29 (m, 4H), 2.09-2.07 (m, 2H), 1.79-1.61 (m, 8H), 1.41-1.25 (m, 2H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 48
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 COMU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-F)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세트산 (33.91 mg, 70.87 μmol), 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (50 mg, 84.59 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (54.66 mg, 422.94 μmol, 73.67 μL) 및 (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트 (54.34 mg, 126.88 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (40 mg, 40.81 μmol, 48% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 900.8 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.78 (s, 1H), 9.98 (bs, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.69 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.48-7.44 (m, 1H), 7.36 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.86 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 6.53 (dd, J = 2.40, 14.80 Hz, 1H), 6.43 (dd, J = 2.00, Hz, 1H), 5.87 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.11-4.92 (m, 1H), 4.37-4.22 (m, 1H), 3.553.62 (m, 2H), 3.36 (q, J = 20.00 Hz, 2H), 3.11-2.74 (m, 9H), 2.60-2.51 (m, 5H), 2.34-2.07 (m, 5H), 1.87-1.82 (m, 3H), 1.65-1.45 (m, 6H), 1.05 (s, 3H).
실시예 49
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (70 mg, 98.87 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (35.93 mg, 89.85 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (51.11 mg, 395.46 μmol, 68.88 μL) 및 HATU (37.59 mg, 98.87 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (12 mg, 12.01 μmol, 12% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 932.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.47 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 7.68 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.96 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 6.49 (t, J = 12.40 Hz, 2H), 6.12 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.39-5.25 (m, 2H), 4.36-4.27 (m, 3H), 4.20-4.13 (m, 2H), 3.81-3.78 (m, 1H), 3.51-3.49 (m, 5H), 3.06-2.90 (m, 2H), 2.53-2.51 (m, 7H), 2.14-2.00 (m, 6H), 1.92-1.70 (m, 7H), 1.32-1.20 (m, 1H).
실시예 50
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 125.76 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세트산 (45.82 mg, 125.76 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (65.02 mg, 503.05 μmol, 87.62 μL) 및 HATU (47.82 mg, 125.76 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (20 mg, 20.81 μmol, 17% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 903.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 10.08 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.04 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 8.80, 2.80 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 9.20, 4.00 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.88 (t, J = 9.20 Hz, 1H), 6.49 (dd, J = 35.40, 8.40 Hz, 2H), 5.93 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.27 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 4.19-4.11 (m, 3H), 3.76 (s, 1H), 3.42-3.34 (m, 3H), 3.19-3.11 (m, 8H), 2.80 (s, 3H), 2.68-2.59 (m, 4H), 2.14-2.06 (m, 3H), 1.95-1.51 (m, 6H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 51
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 황산 (80.52 g, 820.99 mmol, 44.00 mL) 중 2,3-디플루오로벤조산 (10 g, 63.25 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 불활성 조건 하에 질산 (4.78 g, 75.90 mmol, 3.17 mL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 0-5℃에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (200 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 2,3-디플루오로-6-니트로-벤조산 (9.2 g, 44.39 mmol, 70% 수율)을 황색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 202.2 [M-H]-
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (40 mL) 중 2,3-디플루오로-6-니트로-벤조산 (2.7 g, 13.29 mmol)의 교반 용액에 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 2.55 g, 63.68 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 교반하고 1시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 0℃에서 포화 염화암모늄 용액 (50 mL)으로 적가 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 10-20% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 2-플루오로-3-히드록시-6-니트로-벤조산 (2.7 g, 10.91 mmol, 82% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 200.2 [M-H]-
단계 3: 1,4-디옥산 (30 mL) 중 2-플루오로-3-히드록시-6-니트로-벤조산 (2.7 g, 13.43 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량% (1.89 g, 13.43 mmol) 및 물을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 수소 분위기 주머니 하에 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올 (100 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시켜 6-아미노-2-플루오로-3-히드록시-벤조산 (2.7 g, 7.99 mmol, 60% 수율)을 갈색 점성 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 170.10 [M-H]-
단계 4: 톨루엔 (18 mL) 및 테트라히드로푸란 (3 mL) 중 6-아미노-2-플루오로-3-히드록시-벤조산 (1.2 g, 7.01 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.80 g, 7.01 mmol) 및 디에톡시 메톡시 에탄 (1.25 g, 8.41 mmol, 1.40 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (150 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 중탄산나트륨 용액 (3 x 100 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(5-플루오로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.460 g, 931.09 μmol, 13% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 420.2 [M+H]+
단계 5: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(5-플루오로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.440 g, 1.05 mmol), 탄산세슘 (1.03 g, 3.15 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (197.75 mg, 1.26 mmol, 145.40 μL)을 사용하여 절차 A-B에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.450 g, 749.43 μmol, 71% 수율)를 담갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 501.20 [M+H-tBu]+
단계 6: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.430 g, 772.64 μmol), 탄산세슘 (629.36 mg, 1.93 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (160.16 mg, 1.16 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.22 g, 292.80 μmol, 38% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 673.2 [M-H]-
단계 7: 필요한 아민을 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.22 g, 326.06 μmol) 및 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 3 mL)을 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.22 g, 346.01 μmol, 93% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 573.0 [M-H]-
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (53.12 mg, 146.19 μmol), 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.07 g, 121.82 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (61.64 mg, 609.12 μmol, 84.90 μL) 및 HATU (50.95 mg, 134.01 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 C18-역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 이솔레라 (100g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)를 사용하여 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (20.96 mg, 20.43 μmol, 17% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 920.20 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.75 (s, 1H), 10.20 (bs, 1H), 9.60 (bs, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.61 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 6.00 Hz, 1H), 6.98 (m, 1H), 6.55-6.46 (m, 2H), 6.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.38-5.27 (m, 1H), 4.40-4.10 (m, 5H), 2.85-2.75 (m, 1H), 3.60-3.40 (m, 2H), 3.30-2.85 (m, 5H), 2.76 (s, 3H), 2.70-2.60 (m, 2H), 2.45-2.35 (m, 2H), 2.20-1.50 (m, 12H), 1.06 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 52
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 1,4-디옥산 (30 mL) 중 2-플루오로-3-히드록시-6-니트로-벤조산 (2.7 g, 13.43 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량% (1.89 g, 13.43 mmol) 및 물을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 수소 분위기 주머니 하에 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올 (100 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물 6-아미노-2-플루오로-3-히드록시-벤조산 (2.7 g, 7.99 mmol, 60% 수율)을 갈색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 170.10 [M-H]-
단계 2: 톨루엔 (18 mL) 및 테트라히드로푸란 (3mL) 중 6-아미노-2-플루오로-3-히드록시-벤조산 (897.00 mg, 2.83 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 3-아미노-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 2.36 mmol) 및 디에톡시메톡시에탄 (524.36 mg, 3.54 mmol, 588.51 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (75 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 중탄산나트륨 용액 (3 x 50 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 90-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(5-플루오로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.3 g, 626.57 μmol, 27% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 362.20 [M+H-tBu]+
단계 3: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(5-플루오로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.3 g, 718.61 μmol), 탄산세슘 (702.41 mg, 2.16 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (135.47 mg, 862.33 μmol, 99.61 μL)을 사용하여 절차 A-B에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.190 g, 293.47 μmol, 41% 수율)를 갈색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 554.56 [M+H]+
단계 4: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.190 g, 342.61 μmol), 탄산세슘 (279.08 mg, 856.54 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (71.02 mg, 513.92 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 조 생성물 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.12 g, 126.80 μmol, 37% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 671.20 [M-H]-
단계 5: 필요한 아민을 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.12 g, 178.37 μmol) 및 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 3 mL)을 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 3-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린 (0.11 g, 139.23 μmol, 78% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 571.0 [M-H]-
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (83.77 mg, 230.52 μmol), 3-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린 (0.110 g, 192.10 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (97.19 mg, 960.49 μmol, 133.87 μL) 및 HATU (80.35 mg, 211.31 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 C18-역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 이솔레라 (100g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)를 사용하여 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린 (20 mg, 20.11 μmol, 10% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 918.20 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.70 (s, 1H), 9.50 (bs, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.47-7.38 (m, 2H), 7.26 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 6.90-6.80 (m, 1H), 6.43-6.34 (m, 2H), 6.00 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.95-4.93 (m, 1H), 4.30-4.10 (m, 3H), 3.55-3.45 (m, 2H), 3.45-3.30 (m, 3H), 2.96 (q, J = 12.40 Hz, 2H), 2.85-2.70 (m, 3H), 2.67 (s, 3H), 2.60-2.45 (m, 3H), 2.05-1.60 (m, 12H), 1.60-1.32 (m, 4H), 0.93 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 53
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 밀봉 튜브에 들은 디옥산 (50 mL) 중 4-브로모-2-플루오로-1-니트로-벤젠 (5.00 g, 22.73 mmol)의 교반 용액에 K3PO4 (14.47 g, 68.18 mmol) 및 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (7.73 g, 25.00 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 퍼징한 다음, Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (1.86 g, 2.27 mmol)를 첨가하고, 다시 질소 기체로 5분 동안 퍼징한 다음, 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3 x 70 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 목적 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(3-플루오로-4-니트로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (5.0 g, 14.80 mmol, 65% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 223.2 [M+H-CO2 tBu]+
단계 2: 에틸 아세테이트 (25 mL) 및 1,4-디옥산 (25 mL) 중 tert-부틸 4-(3-플루오로-4-니트로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (5.00 g, 15.51 mmol)의 교반 용액에 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량% (2.18 g, 15.51 mmol)를 채웠다. 반응물을 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 실온에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(4-아미노-3-플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (4.2 g, 14.05 mmol, 91% 수율)를 담갈색 액체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 195.20 [M+H-CO2 tBu]+
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-3-플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (1 g, 3.40 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 중탄산나트륨 (998.84 mg, 11.89 mmol, 462.43 μL)에 이어서 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (1.63 g, 8.49 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.6 g, 1.30 mmol, 38% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 350.20 [M+H-tBu]+
단계 4: 1,4-디옥산 (4 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.6 g, 1.48 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 3 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 3-[2-플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (0.5 g, 1.45 mmol, 98% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 306.2 [M+H]+
단계 5: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 3-[2-플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (0.5 g, 1.64 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디에틸 에탄아민 (662.79 mg, 6.55 mmol, 912.93 μL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모 아세테이트 (319.40 mg, 1.64 mmol, 240.15 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (0.120 g, 281.45 μmol, 17% 수율)를 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 420.2 [M+H]+
단계 6: 필요한 아민을 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (0.12 g, 286.06 μmol) 및 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 2 mL)을 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (0.14 g, 350.14 μmol)을 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 364.20 [M+H]+
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.08 g, 144.24 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (52.41 mg, 144.24 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (93.21 mg, 721.20 μmol, 125.62 μL) 및 HATU (60.33 mg, 158.66 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 생성물을 C18-역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 이솔레라 (100g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)를 사용하여 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (10 mg, 10.48 μmol, 7% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 900.20 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.83 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.80-7.75 (m, 2H), 7.68 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 6.95 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.87-6.78 (m, 2H), 5.55-5.45 (m, 1H), 5.15-4.95 (m, 1H), 4.45-4.30 (m, 2H), 4.28-4.15 (m, 1H), 3.65-3.50 (m, 2H), 3.20-3.05 (m, 3H), 2.76 (s, 3H), 2.70-2.60 (m, 2H), 2.20-2.20 (m, 6H), 2.00-1.80 (m, 7H), 1.70-1.40 (m, 6H), 1.27-1.24 (m, 2H), 1.05 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 54
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-3-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70.00 mg, 125.76 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (45.70 mg, 125.76 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (81.27 mg, 628.81 μmol, 109.53 μL) 및 HATU (52.60 mg, 138.34 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 생성물을 C18-역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 이솔레라 (100g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)를 사용하여 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-3-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (10 mg, 10.31 μmol, 8% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 902.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.77 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.52 (bs, 1H), 7.35 (s, 2H), 6.96 (d, J = 15.20 Hz, 1H), 6.86-6.76 (m, 2H), 5.55-5.40 (m, 1H), 5.35-5.25 (m, 1H), 4.45-4.35 (m, 1H), 4.25-4.10 (m, 2H), 3.75-3.65 (m, 3H), 3.50-3.40 (m, 4H), 3.15-3.00 (m, 3H), 2.85-2.70 (m, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.50-2.40 (m, 4H), 2.20-2.00 (m, 3H), 1.90-1.65 (m, 7H), 1.60-1.50 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 55
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: N,N-디메틸포름아미드 (40 mL) 중 1,2-디플루오로-4-니트로-벤젠 (5 g, 31.43 mmol, 3.47 mL)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (16.25 g, 125.71 mmol, 21.90 mL)에 이어서 tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (5.85 g, 31.43 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃로 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (60 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(2-플루오로-4-니트로-페닐)피페라진-1-카르복실레이트 (9.0 g, 27.66 mmol, 88% 수율)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.01-8.07 (m, 2H), 7.19 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 3.40-3.51 (m, 4H), 3.27 (t, J = 4.80 Hz, 4H), 1.43 (s, 9H).
단계 2: 에탄올 (70 mL), 물 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(2-플루오로-4-니트로-페닐)피페라진-1-카르복실레이트 (9.0 g, 27.66 mmol)의 용액에 실온에서 철 분말 (7.72 g, 138.32 mmol, 982.75 μL)에 이어서 암모늄 히드로클로라이드 (4.44 g, 82.99 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (250 mL)로 세척하였다. 여과물을 물 (150 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 [1-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-4-피페리딜]메탄올 (5.8 g, 17.84 mmol, 60% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 296.2 [M + H]+.
단계 3: 아세토니트릴 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)피페라진-1-카르복실레이트 (2 g, 6.77 mmol)의 교반 용액에 0-5℃에서 p-TSA.H2O (3.90 g, 20.52 mmol, 3.15 mL)에 이어서 동일한 온도에서 물 (5 mL) 중 아질산나트륨 (957.77 mg, 13.88 mmol, 441.37 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0-5℃에서 1시간 동안 교반하고, 동일한 온도에서 물 (5 mL) 중 아이오딘화칼륨 (2.37 g, 14.29 mmol, 760.21 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 물 (80 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (3 x 80 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 25% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(2-플루오로-4-아이오도-페닐)피페라진-1-카르복실레이트 (2.1 g, 4.84 mmol, 71% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 351.0 [M + H]+.
단계 4: 마이크로웨이브 바이알에 들은 1,4-디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중 tert-부틸 4-(2-플루오로-4-아이오도-페닐)피페라진-1-카르복실레이트 (1 g, 2.46 mmol) 및 2,6-디벤질옥시-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘 (2.05 g, 2.95 mmol)의 교반 용액에 무수 인산칼륨 (1.31 g, 6.15 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 퍼징한 다음, XPhos-Pd-G2 (193.68 mg, 246.16 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 5분 동안 다시 퍼징하고, 100℃에서 마이크로웨이브에서 2시간 동안 방사선조사하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 60 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 목적 생성물을 조 물질로부터 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-카르복실레이트 (1.12 g, 1.67 mmol, 68% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 570.2 [M + H]+.
단계 5: 1,4-디옥산 (12 mL) 중 tert-부틸 4-[4-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-카르복실레이트 (1.12 g, 1.97 mmol)의 용액에 Pd(OH)2 (700 mg, 4.98 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 수소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (80 mL)로 세척하였다. 유기 층을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.25 mmol, 63% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 336.2 [M-tBu + H]+.
단계 6: 1,4-디옥산 (4 mL) 중 tert-부틸 4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.28 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4 M, 4 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 석유 에테르로 세척하여 3-(3-플루오로-4-피페라진-1-일-페닐)피페리딘-2,6-디온 (417 mg, 1.27 mmol, 99% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 292.2 [M + H]+.
단계 7: N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 3-(3-플루오로-4-피페라진-1-일-페닐)피페리딘-2,6-디온 (520 mg, 1.78 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (722.49 mg, 7.14 mmol, 995.16 μL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (348.17 mg, 1.78 mmol, 261.78 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세테이트 (450 mg, 1.09 mmol, 61% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 406.2[M + H]+.
단계 8: 디클로로메탄 (3 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세테이트 (435 mg, 1.07 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4 M, 5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 조 물질을 석유 에테르로 세척하여 22-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세트산 (372 mg, 1.06 mmol, 99% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 350.2 [M + H]+.
단계 9: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (80 mg, 144.24 μmol), 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세트산 (60.47 mg, 173.09 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (93.21 mg, 721.20 μmol, 125.62 μL) 및 HATU (60.33 mg, 158.66 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40에서 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (27.35 mg, 28.69 μmol, 20% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 886.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.87 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 9.20 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 3.60, 9.20 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 6.99-7.11 (m, 3H), 5.01-5.11 (m, 1H), 4.20-4.55 (m, 2H), 3.83 (dd, J = 4.40, 12.00 Hz, 1H), 3.55-3.65 (m, 2H), 3.25-3.52 (m, 3H), 3.12-3.35 (m, 2H), 3.17 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.45-2.65 (m, 7H), 1.95-2.25 (m, 5H), 1.78-1.90 (m, 2H), 1.40-1.75 (m, 5H), 1.06 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 56
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (46.33 mg, 115.88 μmol), N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (0.07 g, 115.88 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (149.76 mg, 1.16 mmol, 201.83 μL) 및 HATU (48.47 mg, 127.46 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (34.94 mg, 35.66 μmol, 31% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 913.2 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.31 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 2H), 7.47 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.51-6.46 (m, 2H), 6.11 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.33 (t, J = 4.00 Hz, 2H), 4.20-4.13 (m, 3H), 3.82-3.60 (m, 3H), 3.52-3.40 (m, 4H), 2.91-2.72 (m, 3H), 2.49-2.40 (m, 1H), 2.13-2.06 (m, 3H), 1.95-1.83 (m, 11H), 1.75-1.24 (m, 7H).
실시예 57
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-메틸-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 진한 H2SO4 (2 mL) 중 3-플루오로-2-메틸-벤조산 (194.99 mg, 1.27 mmol)의 용액에 0℃에서 발연 질산 (159.42 mg, 2.53 mmol, 0.15 mL)을 첨가하였다. 생성된 반응 물질을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 냉수 (15 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (20 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 3-플루오로-2-메틸-6-니트로-벤조산 (0.24 g, 1.03 mmol, 81% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 198.2 [M - H]-.
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (120 mL) 중 3-플루오로-2-메틸-6-니트로-벤조산 (5 g, 25.11 mmol)의 용액에 2-메틸술포닐에탄올 (3.74 g, 30.13 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 8.71 g, 200.87 mmol)을 0℃에서 질소 분위기 하에 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 0℃에서 1.5N HCl 용액 (pH~1)으로 적가 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 3-히드록시-2-메틸-6-니트로-벤조산 (5 g, 21.54 mmol, 86% 수율)을 오렌지색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 196.2 [M - H]-.
단계 3: 1,4-디옥산 (70 mL) 중 3-플루오로-2-메틸-6-니트로-벤조산 (5 g, 25.11 mmol)의 용액에 10% 탄소 상 팔라듐 (습윤) (2.67 g, 25.11 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 실온에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하고, 메탄올 (500 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 6-아미노-3-히드록시-2-메틸-벤조산 (4.3 g, 16.95 mmol, 68% 수율)을 암갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 168.2 [M + H]+.
단계 4: 퀴나졸리논 중간체를 6-아미노-3-히드록시-2-메틸-벤조산 (0.6 g, 3.59 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (797.91 mg, 5.38 mmol, 895.52 μL), 아세트산 (21.55 mg, 358.93 μmol, 20.53 μL) 및 tert-부틸 3-아미노-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (821.71 mg, 3.23 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.4 g, 821.17 μmol, 23% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 414.2 [M + H]+.
단계 5: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.4 g, 967.33 μmol), 탄산세슘 (945.52 mg, 2.90 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (303.92 mg, 1.93 mmol, 223.47 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.37 g, 566.83 μmol, 59% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 551.2 [M + H]+.
단계 6: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (280 mg, 508.54 μmol), 탄산세슘 (497.08 mg, 1.53 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (105.41 mg, 762.81 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 희석하고, 생성된 고체를 여과지를 통해 여과하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (3X8 mL)로 추출하였다. 유기 층을 냉수 (3X10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (200 mg, 242.23 μmol, 48% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 667.2 [M - H]-.
단계 7: 필요한 아민을 디옥산 중 4M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 99% 중 4M 염화수소 (4 M, 3 mL)를 사용하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (200 mg, 299.05 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린 (206 mg, 294.81 μmol, 98.58% 수율, 87% 순도)을 황색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 569.2 [M + H]+.
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (58.15 mg, 145.43 μmol), 3-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린 (0.08 g, 132.20 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (170.87 mg, 1.32 mmol, 230.28 μL) 및 HATU (55.29 mg, 145.43 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린 (11.11 mg, 10.91 μmol, 8% 수율, 94.31% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 914.2 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.52-7.51 (m, 1H), 7.49 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 4.40 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.50-6.45 (m, 2H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.21-5.05 (m, 1H), 4.48-4.29 (m, 1H), 3.62-3.38 (m, 4H), 3.07 (d, J = 6.80 Hz, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.80-2.65 (m, 3H), 2.50-2.60 (m, 9H), 2.13-2.08 (m, 4H), 1.90-1.78 (m, 7H), 1.67-1.50 (m, 5H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 58
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디클로로메탄 (30 mL) 중 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-옥소-피페리딘-1-카르복실레이트 (2.5 g, 10.63 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (3.23 g, 31.8 mmol, 4.44 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 -20℃로 냉각시켰다. 디클로로메탄 (10 mL) 중 트리플루오로메틸술포닐 트리플루오로메탄술포네이트 (4.50 g, 15.94 mmol, 2.68 mL)의 용액을 -20℃에서 질소 분위기 하에 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응물을 0℃에서 냉수 (70 mL) 적가 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 5-15% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(트리플루오로메틸술포닐옥시)-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (1.3 g, 2.16 mmol, 20% 수율)를 담황색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 268.0 [M -CO2 tBu +H]+.
단계 1A: 1,4-디옥산 (200 mL) 중 4-브로모-3-플루오로-아닐린 (5 g, 26.31 mmol)의 용액에 아세트산칼륨 (7.75 g, 78.94 mmol, 4.93 mL) 및 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란 (7.35 g, 28.95 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 탈기시킨 다음, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐 (II), 디클로로메탄과의 착물 (2.15 g, 2.63 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 목적 생성물을 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 10-20% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 3-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린 (5.5 g, 15.96 mmol, 61% 수율)을 담황색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 238.2 [M + H]+.
단계 2: 밀봉 튜브에 들은 1,4-디옥산 (30 mL) 및 물 (3 mL) 중 3-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린 (1.70 g, 7.19 mmol) 및 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(트리플루오로메틸술포닐옥시)-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (2.4 g, 6.53 mmol)의 용액에 무수 삼염기성 인산칼륨 (4.16 g, 19.60 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 탈기시킨 다음, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐 (II), 디클로로메탄과의 착물 (533.62 mg, 653.44 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 5분 동안 다시 퍼징하고, 80℃에서 마이크로웨이브 하에 1.5시간 동안 방사선조사하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 목적 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 15-25% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,3-디플루오로-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (1.6 g, 4.84 mmol, 74% 수율)를 담녹색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 229.2 [M-CO2 tBu + H]+.
단계 3: 메탄올 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,3-디플루오로-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (1.6 g, 4.87 mmol)의 용액에 20% 디히드록시팔라듐 (2 g, 14.24 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시켰다. 이어서, 내용물을 실온에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올 (200 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (1.45 g, 4.32 mmol, 89% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 231.2 [M -CO2 tBu + H]+.
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (8 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.6 g, 1.82 mmol)의 용액에 탄산수소나트륨 (762.90 mg, 9.08 mmol, 353.19 μL) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (2.09 g, 10.90 mmol)을 첨가하였다. 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (2.09 g)을 12시간마다 조금씩 첨가하였다 (4 x 0.52 g). 반응 혼합물을 85℃에서 72시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (70 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3 x 70 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 목적 생성물을 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.3 g, 679.59 μmol, 37% 수율)를 담청색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 386.2 [M + H]+.
단계 5: 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.3 g, 679.59 μmol)의 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4 M, 5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 3-[4-(3,3-디플루오로-4-피페리딜)-3-플루오로-아닐리노]피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 염 (0.33 g, 873.50 μmol)을 담청색 점성 고체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.83 (s, 1H), 10.28 (s, 1H), 7.02 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.52 (t, J = 14.00 Hz, 2H), 4.38 (d, J = 4.80 Hz, 1H), 3.87-3.56 (m, 4H), 3.33 (d, J = 11.60 Hz, 1H), 3.22-3.12 (m, 1H), 2.75-2.62 (m, 1H), 2.60-2.56 (m, 2H), 2.43-1.88 (m, 3H)
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 및 트리에틸아민 (401.77 mg, 3.97 mmol, 553.41 μL) 중 3-[4-(3,3-디플루오로-4-피페리딜)-3-플루오로-아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (0.3 g, 794.10 μmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (232.34 mg, 1.19 mmol, 174.69 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3 x 30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (0.23 g, 387.37 μmol, 49% 수율)를 담갈색 액체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 456.2 [M + H]+.
단계 7: 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (0.23 g, 504.97 μmol)의 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 4.0M (5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (0.23 g, 448.63 μmol, 89% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 400.2 [M + H]+.
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (51.68 mg, 118.58 μmol), (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.06 g, 101.17 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (139.32 mg, 1.08 mmol, 187.76 μL) 및 HATU (45.09 mg, 118.58 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (16 mg, 15.62 μmol, 14% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 938.2 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.80 (t, J = 4.40 Hz, 2H), 7.70 (t, J = 5.60 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.47 (d, J = 14.80 Hz, 2H), 6.18 (d, J = 4.40 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.14 (s, 2H), 3.68-3.35 (m, 3H), 3.15 (d, J = 6.80 Hz, 4H), 2.92 (s, 1H), 2.77 (s, 3H), 2.59-2.34 (m, 6H), 2.15-2.00 (m, 3H), 1.90-1.49 (m, 8H), 1.05 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 59
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-메틸-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 6-아미노-3-히드록시-2-메틸-벤조산 (0.8 g, 4.79 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (1.06 g, 7.18 mmol, 1.19 mL), 아세트산 (28.74 mg, 478.58 μmol, 27.37 μL) 및 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.10 g, 4.31 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 목적 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.73 g, 1.36 mmol, 29% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 416.2 [M + H]+.
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (373 mg, 897.75 μmol), 탄산세슘 (877.52 mg, 2.69 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (211.55 mg, 1.35 mmol, 155.55 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 목적 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (250 mg, 399.95 μmol, 45% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 553.2 [M + H]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (250 mg, 452.43 μmol), 탄산세슘 (442.23 mg, 1.36 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (93.78 mg, 678.65 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (220 mg, 282.40 μmol, 62% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 671.2 [M + H]+.
단계 4: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 (4 mL) 중 4M 염화수소 용액을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (220 mg, 327.99 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (215 mg, 325.53 μmol, 99% 수율)을 담황색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 571.2 [M + H]+.
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (80.00 mg, 140.19 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (61.13 mg, 168.23 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (90.60 mg, 700.97 μmol, 122.10 μL) 및 HATU (58.64 mg, 154.21 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40에서 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메틸-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (10.74 mg, 10.96 μmol, 8% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 916.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.59-7.71 (m, 1H), 7.50 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.31-7.39 (m, 1H), 7.19 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.92-7.05 (m, 1H), 6.50 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 13.60 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.37 (t, J = 6.80 Hz, 1H), 4.31-4.38 (m, 1H), 4.17 (d, J = 3.20 Hz, 2H), 3.72-3.81 (m, 1H), 3.25-3.52 (m, 5H), 3.05-3.15 (m, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.65-2.74 (m, 1H), 2.41-2.58 (m, 6H), 2.01-2.12 (m, 2H), 1.52-2.01 (m, 10H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 60
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 118.03 μmol), 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세트산 (41.23 mg, 106.88 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (61.02 mg, 472.12 μmol, 82.23 μL) 및 HATU (44.88 mg, 118.03 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (28 mg, 29.51 μmol, 25% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 888.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.83 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 7.70 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.47 (dd, J = 3.60, 9.40 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.08-6.97 (m, 3H), 5.30 (s, 1H), 4.16-4.13 (m, 2H), 3.84-3.80 (m, 1H), 3.79-3.70 (m, 1H), 3.52-3.49 (m, 3H), 3.17-3.12 (m, 6H), 2.89-2.79 (m, 2H), 2.77 (s, 3H), 2.69-2.62 (m, 4H), 2.50-2.47 (m, 2H), 2.27-2.20 (m, 1H), 2.15-1.90 (m, 2H), 1.83-1.51 (m, 5H), 1.05 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 61
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (220 mg, 408.51 μmol), 탄산세슘 (332.75 mg, 1.02 mmol) 및 프로판-2-술폰아미드 (75.48 mg, 612.77 μmol)를 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-75% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(이소프로필술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (230 mg, 320.78 μmol, 79% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 640.20 [M-H]-
단계 2: 필요한 아민을 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(이소프로필술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (260 mg, 405.17 μmol) 및 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 용액 (2 mL)을 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]프로판-2-술폰아미드 (220 mg, 327.34 μmol, 80.79% 수율, 86% 순도)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 542.20 [M+H]+
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (65 mg, 162.56 μmol), N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]프로판-2-술폰아미드 (112.76 mg, 195.08 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (126.06 mg, 975.38 μmol, 169.89 μL) 및 HATU (67.99 mg, 178.82 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 C18-역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 이솔레라 (100g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)를 사용하여 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]프로판-2-술폰아미드 (39 mg, 41.22 μmol, 25.35% 수율, 99% 순도)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 887.20 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.67-7.65 (m, 2H), 7.38 (s, 2H), 6.98 (s, 1H), 6.47 (t, J = 12.80 Hz, 2H), 6.09 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 5.40-5.25 (m, 1H), 4.35-4.29 (m, 1H), 4.20-4.13 (m, 2H), 3.76-3.74 (m, 1H), 3.50-3.40 (m, 2H), 3.15-3.00 (m, 2H), 2.77-2.71 (m, 2H), 2.70-2.68 (m, 2H), 2.42-2.34 (m, 4H), 2.10-2.07 (m, 3H), 1.91-1.69 (m, 9H), 1.58-1.55 (m, 1H), 1.26 (d, J = 6.00 Hz, 6H).
실시예 62
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,5-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 1,4-디옥산 (80 mL), 물 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (8.92 g, 28.85 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 질소 분위기 하에 탄산세슘 (23.50 g, 72.11 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시키고, Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (1.96 g, 2.40 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (60 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2,5-디플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (6g, 18.61 mmol, 77% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 211.2 [M + H-CO2 tBu]+
단계 2: 1,4-디옥산 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2,5-디플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (3.5 g, 11.28 mmol)의 용액을 10분 동안 탈기시킨 다음, Pd(OH)2 (3.96 g, 28.20 mmol)를 질소 분위기 하에 반응 혼합물에 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 H2 풍선 압력 하에 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(4-아미노-2,5-디플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (3 g, 9.41 mmol, 83% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 213.2 [M+H-CO2 tBu]+
단계 3: 1,4-디옥산 (5 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2,5-디플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.60 mmol), 2,6-디벤질옥시-3-브로모-피리딘 (711.19 mg, 1.92 mmol) 및 탄산세슘 (1.56 g, 4.80 mmol)의 혼합물을 밀봉 튜브에 넣고, 생성된 반응 혼합물을 N2로 10분 동안 탈기시켰다. Pd2(dba)3(14.66 mg, 16.01 μmol) 및 X-Phos (7.63 mg, 16.01 μmol)를 반응 혼합물에 첨가하였으며, 이를 110℃에서 14시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 물 (50 mL), 포화 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (450 mg, 693.91 μmol, 43% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 546 [M+H- tBu]+
단계 4: 1,4-디옥산 (12 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (450 mg, 747.90 μmol)의 탈기된 용액에 N2 분위기 하에 Pd(OH)2 (420.13 mg, 2.99 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 H2 주머니 압력 하에 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (300 mg, 658.87 μmol, 88% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 324 [M + H-CO2 tBu]+
단계 5: 1,4-디옥산 (1.5 mL) 중 tert-부틸 4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2,5-디플루오로페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (460 mg, 1.09 mmol)의 교반 용액에 디옥산 중 4.0M 염화수소 용액 (49.51 μL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 (3-((2,5-디플루오로-4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (390 mg, 1.06 mmol, 98% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 324.2 [M + H]+
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 3-[2,5-디플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (520 mg, 1.61 mmol), N,N-디에틸 에탄아민 (162.74 mg, 1.61 mmol, 224.16 μL)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (439.17 mg, 2.25 mmol, 330.20 μL)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 포화 염수 용액 (10 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (390 mg, 797.60 μmol, 50% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 438.2 [M + H]+
단계 7: 디클로로메탄 (5 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (390 mg, 891.47 μmol)의 용액에 0℃에서 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 용액 (40.63 μL)을 첨가하고, 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 석유 에테르로 연화처리하여 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (385 mg, 838.49 μmol, 94% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 382.2 [M + H]+
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (50 mg, 131.11 μmol), (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (72.97 mg, 131.11 μmol), HATU (59.82 mg, 157.33 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (67.78 mg, 524.42 μmol, 91.34 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 생성물을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (5 mg, 5.37 μmol, 4% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 920.2 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.75-7.85 (m, 1H), 7.80 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.41-7.51 (m, 1H), 7.37 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 6.92-7.01 (m, 1H), 6.71 (dd, J = 7.60, 12.40 Hz, 1H), 5.86 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 5.38-5.48 (m, 1H), 4.42 (dd, J = 8.80, 16.80 Hz, 1H), 4.01-4.38 (m, 4H), 3.75-3.85 (m, 1H), 3.55-3.32(m, 3H), 3.10-3.18 (m, 2H), 2.85-3.10 (m, 2H), 2.77 (s, 3H), 2.65-2.81 (m, 1H), 2.34-2.65 (m, 4H), 1.92-2.15 (m, 5H), 1.51-1.91 (m, 7H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 63
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,3-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 COMU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-F)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,3-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (70.69 mg, 169.18 μmol), 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.1 g, 169.18 μmol), COMU (108.68 mg, 253.77 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (109.32 mg, 845.89 μmol, 147.34 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,3-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (52 mg, 55.57 μmol, 33% 수율)을 담분홍색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 918.2 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 9.81 (s, 1H), 8.43 (d, J = 3.60 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.41-7.61 (m, 1H), 7.34 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 7.29-7.34 (m, 1H), 6.81-6.90 (m, 1H), 6.64 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 5.75-5.85 (m, 1H), 5.01-5.12 (m, 1H), 4.49-4.40 (m, 1H), 3.32-3.61 (m, 4H), 3.21-3.31 (m, 2H), 3.01-3.09 (m, 2H), 2.60-2.92 (m, 8H), 2.49-2.58 (m, 2H), 2.01-2.20 (m, 5H), 1.68-1.95 (m, 6H), 1.40-1.68 (m, 5H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 64
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,3-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 1,4-디옥산 (30 mL) 및 물 (10 mL) 중 4-브로모-2,3-디플루오로-아닐린 (2.0 g, 9.62 mmol)의 용액에 실온에서 질소 하에 탄산세슘 (9.40 g, 28.85 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시킨 다음, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐 (II), 디클로로메탄과의 착물 (785.21 mg, 961.52 μmol)을 동일한 온도에서 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (50 ml)로 세척하였다. 수집된 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2,3-디플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (2.8 g, 8.73 mmol, 91% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 211.0 [M + H]+.
단계 2: 1,4-디옥산 (30 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2,3-디플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (2.8 g, 9.02 mmol)의 용액에 탄소 상 수산화팔라듐 (1.27 g, 9.02 mmol)을 첨가하고, 반응물을 수소 주머니 압력 하에 12시간 동안 두었다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올 (50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(4-아미노-2,3-디플루오로-페닐) 피페리딘-1-카르복실레이트 (2.8 g, 8.83 mmol, 98% 수율)를 액체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 213.2 [M + H]+.
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (14 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2,3-디플루오로-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.4 g, 4.48 mmol)의 용액에 실온에서 질소 하에 중탄산나트륨 (1.51 g, 17.93 mmol, 697.27 μL) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (1.72 g, 8.96 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃로 20시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 (50 g 스냅) 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-70%)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,3-디플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.23 g, 481.51 μmol, 11% 수율)를 청색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 324.2 [M + H]+.
단계 4: 디클로로메탄 (3 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,3-디플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.23 g, 543.15 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 2.00 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 3-[2,3-디플루오로-4-(4-피페리딜) 아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (0.2 g, 507.12 μmol, 93% 수율)을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 324.2 [M + H]+.
단계 5: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 3-[2,3-디플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (0.20 g, 555.87 μmol)의 용액에 실온에서 질소 하에 트리에틸아민 (140.62 mg, 1.39 mmol, 193.69 μL) 및 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (162.64 mg, 833.80 μmol, 122.28 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 20 mL)로 추출하였다. 분리된 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 (25 g 스냅) 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-80%)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,3-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (0.12 g, 246.76 μmol, 44% 수율)를 녹색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 438.2 [M + H]+.
단계 6: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,3-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (0.12 g, 274.30 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 1.37 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,3-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (0.11 g, 244.99 μmol, 89% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 382.2 [M + H]+.
단계 7: 목적 화합물을 COMU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-F)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,3-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (68.52 mg, 179.66 μmol), (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.1 g, 179.66 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (116.10 mg, 898.30 μmol, 156.47 μL) 및 (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트 (115.41 mg, 269.49 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,3-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (23 mg, 24.01 μmol, 13% 수율)을 담분홍색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 920.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 9.86 (bs, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.66 (dd, J = 9.00, 2.80 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 9.00, 2.80 Hz, 2H), 6.89-6.80 (m, 1H), 6.64 (t, J = 8.80 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.32-5.21 (m, 1H), 4.15 (q, J = 3.20 Hz, 1H), 4.12-4.09 (m, 2H), 3.51-3.50 (m, 1H), 3.49-3.42 (m, 2H), 3.38-3.33 (m, 3H), 3.06 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.76-2.67 (m, 4H), 2.66 (s, 3H), 2.34-2.33 (m, 2H), 2.08-2.04 (m, 4H), 1.92-1.68 (m, 9H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 65
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (80 mg, 143.73 μmol), 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (66.29 mg, 172.47 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (92.88 mg, 718.64 μmol, 125.17 μL) 및 HATU (60.11 mg, 158.10 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40에서 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (17.25 mg, 17.64 μmol, 12% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 923.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.87 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.87 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.35-7.41 (m, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.09-7.13 (m, 2H), 5.28-5.38 (m, 1H), 4.11-4.19 (m, 2H), 3.90 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 3.45-3.75 (m, 4H), 3.25-3.45 (m, 2H), 3.17 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.91-2.99 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.59-2.72 (m, 3H), 2.35-2.60 (m, 3H), 2.01-2.31 (m, 5H), 1.45-1.81 (m, 5H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 66
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-2-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (80 mg, 144.24 μmol), 2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (66.53 mg, 173.09 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (93.21 mg, 721.20 μmol, 125.62 μL) 및 HATU (60.33 mg, 158.66 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40에서 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-2-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (16.73 mg, 17.06 μmol, 12% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 921.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.87 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.81-7.90 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.37-7.40 (m, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 11.20 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 5.01-5.10 (m, 1H), 3.88-3.95 (m, 1H), 3.48-3.60 (m, 3H), 3.25-3.41 (m, 3H), 3.16 (q, J = 6.40 Hz, 2H), 2.91-2.98 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.60-2.72 (m, 3H), 2.41-2.60 (m, 3H), 2.18-2.31 (m, 1H), 2.01-2.20 (m, 5H), 1.72-1.91 (m, 3H), 1.41-1.71 (m, 5H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 67
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2,5-디플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (50 mg, 119.66 μmol), 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (70.73 mg, 119.66 μmol), HATU (68.25 mg, 179.50 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (77.33 mg, 598.32 μmol, 104.21 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2,5-디플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (4.21 mg, 4.17 μmol, 3% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 917.8 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.84 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.78-7.86 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.40, 9.00 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 5.20 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 6.95 (dd, J = 6.80, 12.40 Hz, 1H), 6.71 (dd, J = 7.60, 13.00 Hz, 1H), 5.87 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.01-5.11 (m, 1H), 4.39-4.48 (m, 1H), 4.21-4.38 (m, 2H), 3.45-3.68 (m, 3H), 3.25-3.43 (m, 2H), 3.15 (q, J = 6.40 Hz, 2H), 2.84-3.12 (m, 3H), 2.78 (s, 3H), 2.61-2.77 (m, 1H), 2.53-2.65 (m, 2H), 1.95-2.21 (m, 7H), 1.78-1.92 (m, 3H), 1.45-1.78 (m, 6H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 68
3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 메탄올 (50 mL) 중 2-브로모-3-히드록시-6-니트로-벤조산 (4.00 g, 15.27 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 염화니켈(II) 6수화물, 98% (434.01 mg, 1.53 mmol, 226.04 μL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃ 온도로 냉각시키고, 수소화붕소나트륨 (866.35 mg, 22.90 mmol, 809.67 μL)을 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 실온으로 가온하고, 5시간 동안 교반하였다. 디-tert-부틸 디-카르보네이트 (10.00 g, 45.80 mmol, 10.51 mL)를 0℃에서 적가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 NH4Cl 용액 (40 mL)으로 적가 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 2-브로모-6-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-히드록시-벤조산 (1.5 g, 2.89 mmol, 19% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 432.0 [M - H]-
단계 2: 디클로로메탄 (15 mL) 중 2-브로모-6-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-히드록시-벤조산 (1.5 g, 4.52 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 (4 M, 10.16 mL)를 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온한 후, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 직접 농축시켜 6-아미노-2-브로모-3-히드록시-벤조산 (1.1 g, 1.89 mmol, 42% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 232.0 [M + H]+.
단계 3: 퀴나졸리논 중간체를 6-아미노-2-브로모-3-히드록시-벤조산 (1. g, 4.31 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (1.60 g, 10.77 mmol, 1.79 mL), 아세트산 (25.88 mg, 430.98 μmol, 24.65 μL) 및 tert-부틸 3-아미노-7-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.10 g, 4.31 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (480 mg, 770.44 μmol, 18% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 480.0 [M + H]+.
단계 4: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (480 mg, 999.27 μmol), 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (156.98 mg, 999.27 μmol, 115.42 μL) 및 탄산세슘 (976.75 mg, 3.00 mmol)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-[5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400 mg, 469.04 μmol, 47% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 619.3 [M + H]+.
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (200.00 mg, 323.92 mol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (89.52 mg, 647.84 μmol) 및 탄산세슘 (316.62 mg, 971.76 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (170 mg, 171.24 μmol, 53% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 735.0 [M - H]-.
단계 6: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 중 염화수소 (4M, 1 mL)를 사용하여 tert-부틸 3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80.00 mg, 108.75 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (75 mg, 68.68 μmol, 63% 수율)을 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 635.0 [M + H]+.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (75.00 mg, 118.02 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (42.89 mg, 118.02 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (76.26 mg, 590.08 μmol, 102.78 μL) 및 HATU (67.31 mg, 177.02 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 반응 혼합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (13 mg, 12.25 μmol, 10% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 980.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.60-7.68 (m, 1H), 7.36 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.91-7.11 (m, 1H), 6.45-6.53 (m, 2H), 6.09 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 7.32-7.41 (m, 1H), 5.32-5.41 (m, 1H), 4.28-4.38 (m, 1H), 4.10-4.21 (m, 2H), 3.92-4.10 (m, 2H), 3.61-3.71 (m, 1H), 3.31-3.52 (m, 3H), 3.04-3.12 (m, 3H), 2.65-2.91 (m, 4H), 2.69 (s, 3H), 2.40-2.58 (m, 2H), 2.02-2.15 (m, 2H), 1.52-2.01 (m, 10H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 69
5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 황산 (90 mL) 중 2-브로모-3-플루오로-벤조산 (20.0 g, 91.32 mmol)의 교반 용액에 0℃ 온도에서 질소 조건 하에 질산 (5.75 g, 91.32 mmol, 0.35 mL)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 얼음을 함유하는 비커에 부었으며, 고체가 침전되었다. 수득된 고체를 여과하고, 물 (200 mL)로 세척하고, 감압 하에 건조시켜 2-브로모-3-플루오로-6-니트로-벤조산 (20 g, 58.41 mmol, 64% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 261.0 [M - 2H]-
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (400 mL) 중 2-브로모-3-플루오로-6-니트로-벤조산 (10.00 g, 37.88 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 2-메틸술포닐에탄올 (5.64 g, 45.45 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 교반하고, 0℃ 온도에서 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 5.8 g, 151.51 mmol, 2.53 mL)을 로트별로 첨가하고, 반응 혼합물을 실온이 되도록 하고, 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 0℃에서 1.5N HCl 용액 (pH~1)으로 적가 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 2-브로모-3-히드록시-6-니트로-벤조산 (7 g, 18.97 mmol, 50% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 260.0 [M - 2H]-.
단계 3: 테트라히드로푸란 (20 mL) 중 2-브로모-3-히드록시-6-니트로-벤조산 (2.50 g, 9.54 mmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 물 (6 mL) 중에 용해시킨 아디티온산나트륨 (4.98 g, 28.62 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 65℃ 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 6-아미노-2-브로모-3-히드록시-벤조산 (850 mg, 2.27 mmol, 24% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 230.0 [M - 2H]-.
단계 4: 퀴나졸리논 중간체를 6-아미노-2-브로모-3-히드록시-벤조산 (1.2 g, 5.17 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (1.92 g, 12.93 mmol, 2.15 mL), 아세트산 (31.05 mg, 517 μmol, 29.57 μL) 및 tert-부틸 3-아미노-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.32 g, 5.17 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (350 mg, 515.07 μmol, 10% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 422.0 [M - tBu +H]+.
단계 5: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (350 mg, 731.64 μmol), 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (114.94 mg, 731.64 μmol, 84.51 μL) 및 탄산세슘 (715.15 mg, 2.19 mmol)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-[5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (180 mg, 205.89 μmol, 28 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 599.0 [M -tBu +H]+.
단계 6: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3S)-3-[5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (180 mg, 292.46 μmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (80.83 mg, 584.92 μmol) 및 탄산세슘 (285.87 mg, 877.39 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3S)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (115 mg, 82.14 μmol, 28% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 677.0 [M -tBu +H]+.
단계 7: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 중 4 M HCl (4 M, 937.50 μL)을 사용하여 tert-부틸 3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (75.00 mg, 102.23 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (75 mg, 52.27 μmol, 51% 수율)을 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 635.0 [M + 2H]+.
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (75.00 mg, 118.38 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (43.02 mg, 118.38 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (76.50 mg, 591.92 μmol, 103.10 μL) 및 HATU (67.52 mg, 177.58 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 반응 혼합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (8 mg, 7.54 μmol, 6% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 978.2 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.61 (s, 1H), 8.51 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.60-7.71 (m, 1H), 7.67 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.00 Hz, 2H), 6.95-7.02 (m, 1H), 6.50 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.05-5.15 (m, 1H), 4.02-4.45 (m, 3H), 3.58-3.68 (m, 1H), 3.25-3.35 (m, 3H), 3.09-3.18 (m, 2H), 2.81-3.10 (m, 3H), 2.65-2.82 (m, 2H), 2.74 (s, 3H), 2.45-2.60 (m, 2H), 2.05-2.18 (m, 4H), 1.70-2.05 (m, 7H), 1.48-1.70 (m, 5H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 70
5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 아세토니트릴 (30 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2.2 g, 5.51 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N-클로로숙신이미드 (1.47 g, 11.01 mmol, 891.37 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20-30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(5-클로로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.5 g, 2.06 mmol, 37% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 378.2 [M-tBu+H]+.
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(5-클로로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (190.00 mg, 437.86 μmol), 탄산세슘 (427.99 mg, 1.31 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (82.54 mg, 525.43 μmol, 60.69 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.13 g, 189.10 μmol, 43% 수율)를 담갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 515.0 [M-tBu+H]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 280.20 μmol), 탄산세슘 (228.24 mg, 700.51 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (58.08 mg, 420.31 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 석유 에테르 중 10% 디클로로메탄으로 연화처리하여 tert-부틸 3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (150 mg, 154.53 μmol, 55% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI):633.4[M-tBu+H]+.
단계 4: 필요한 아민을 디옥산 중 4M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 0℃에서 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 (4 M, 2.20 mL)를 사용하여 tert-부틸 3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (155 mg, 159.68 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (130 mg, 155.87 μmol, 98% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 589.2 [M+H]+.
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (80 mg, 135.80 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (49.35 mg, 135.80 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (70.21 mg, 543.22 μmol, 94.62 μL) 및 HATU (51.64 mg, 135.80 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (14 mg, 13.76 μmol, 10% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 934.2 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.80 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.70-7.69 (m, 1H), 7.64 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 9.00, 4.00 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.51-6.46 (m, 2H), 6.10 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.18-5.06 (m, 1H), 5.46-4.35 (m, 1H), 4.30-4.21 (m, 1H), 3.64-3.38 (m, 6H), 3.14-3.12 (m, 3H), 3.10-2.81 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.70-2.65 (m, 2H), 2.16-2.08 (m, 6H), 2.05-1.80 (m, 6H), 1.68-1.51 (m, 5H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 71
3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (50 mg, 87.26 μmol), 탄산세슘 (113.73 mg, 349.05 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (36.18 mg, 261.79 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (51 mg, 54.80 μmol, 63% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 635.0 [M + H- tBu]+.
단계 2: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 2 mL)을 사용하여 tert-부틸 3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (51 mg, 73.79 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (53 mg, 73.48 μmol, 100% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 591.3 [M + H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (60 mg, 101.51 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (40.58 mg, 111.67 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (65.60 mg, 507.57 μmol, 88.41 μL) 및 HATU (42.46 mg, 111.67 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (4 mg, 3.97 μmol, 4% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 936.2 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.56 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.68 (d, J = 4.00 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.51-6.46 (m, 2H), 6.11 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.34 (m, 1H), 5.34 (m, 1H), 4.32-4.30 (m, 2H), 4.18-4.16 (m, 3H), 3.78 (m, 1H), 3.44-3.41 (m, 3H), 3.13-3.11 (m, 3H), 2.73 (s, 3H), 2.11-2.08 (m, 3H), 2.45-2.38 (m, 4H), 1.96-1.74 (m, 9H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 72
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 HCl 염 (17 mg, 27.82 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (10.11 mg, 25.28 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (14.38 mg, 111.28 μmol, 19.38 μL) 및 HATU (10.58 mg, 27.82 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (3 mg, 3.16 μmol, 11% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 920.2 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.73 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.51-7.40 (m, 3H), 7.29-7.22 (m, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.54-6.44 (m, 2H), 6.05 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 5.35-5.33 (m, 1H), 4.32 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 4.20-4.14 (m, 2H), 3.72-3.71 (m, 1H), 3.15-2.85 (m, 4H), 2.74 (q, J = 16.00 Hz, 2H), 2.46-2.32 (m, 4H), 2.16-2.04 (m, 5H), 1.97-1.72 (m, 9H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 73
(3R)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 아세토니트릴 (15 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.1 g, 2.74 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N-브로모숙신이미드 (487.68 mg, 2.74 mmol, 232.23 μL)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 230-400 실리카 겔을 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60-70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 1.19 mmol, 43% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 482.0 [M+H]+.
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 1.20 mmol), 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (188.18 mg, 1.20 mmol, 138.37 μL) 및 탄산세슘 (1.17 g, 3.59 mmol)을 사용하여 O-아릴화 (절차 A-B)에 대한 일반적 절차에 따라 합성하였다. 조 화합물을 230-400 실리카 겔을 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-[5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400 mg, 638.12 μmol, 53% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 618.0 [M-H]-.
단계 3: 라세미 혼합물 400 mg을 (R,R) 웰크-01 칼럼을 사용하는 키랄 SFC 정제에 적용하여 tert-부틸 (S)-3-(5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 99.8% 순도) 및 tert-부틸 (R)-3-(5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 99.8% 순도)를 수득하였다.
주: 제1 용리 이성질체를 S-이성질체로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 이성질체를 R-이성질체로서 임의적으로 할당하였다.
단계 4: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[(3R)-5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 259.14 μmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (35.81 mg, 259.14 μmol) 및 탄산세슘 (211.08 mg, 647.84 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 3-[(3R)-5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (120 mg, 125.89 μmol, 49% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 735.0, [M-H]-.
단계 5: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M HCl (4 M, 1.63 mL)을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (120 mg, 163.13 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (3R)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (105 mg, 132.35 μmol, 81% 수율)을 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 637.0 [M+H]+.
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (105 mg, 165.22 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (66.06 mg, 165.22 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (106.77 mg, 826.12 μmol, 143.89 μL) 및 HATU (94.23 mg, 247.83 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 C18-30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (27 mg, 25.74 μmol, 16% 수율)을 베이지색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 980.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.15 (bs, 1H), 9.45 (bs, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.78 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.41-7.45 (m, 2H), 6.91-7.02 (m, 1H), 6.50 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.31-5.41 (m, 1H), 4.12-4.41 (m, 5H), 3.75-3.85 (m, 1H), 3.31-3.61 (m, 4H), 3.02-3.21 (m, 4H), 2.85-2.95 (m, 1H), 2.78 (s, 3H), 2.68-2.78 (m, 1H), 2.41-2.62 (m, 2H), 1.60-2.15 (m, 12H), 1.07 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 74
(3S)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3S)-3-[5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 259.14 μmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (35.81 mg, 259.13 μmol) 및 탄산세슘 (211.08 mg, 647.84 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3R)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (120 mg, 130.34 μmol, 50% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 735.0, [M+H]+.
단계 2: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M HCl (4 M, 1.63 mL)을 사용하여 tert-부틸 (3S)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (120 mg, 163.13 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (3S)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (110 mg, 142.01 μmol, 87% 수율)을 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 635.0, [M+H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3S)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (110 mg, 163.70 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (65.45 mg, 163.70 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (105.78 mg, 818.50 μmol, 142.57 μL) 및 HATU (93.36 mg, 245.55 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 C18-30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3S)-3-[5-브로모-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (21 mg, 20.24 μmol, 12% 수율)을 베이지색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 980.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.15 (bs, 1H), 9.45 (bs, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.71-7.80 (m, 1H), 7.68 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.39-7.43 (m, 2H), 6.91-7.02 (m, 1H), 6.50 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 13.20 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.31-5.41 (m, 1H), 4.12-4.41 (m, 5H), 3.75-3.85 (m, 1H), 3.31-3.57 (m, 4H), 3.11-3.21 (m, 2H), 2.98-3.11 (m, 1H), 2.81-2.90 (m, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.65-2.76 (m, 1H), 2.40-2.65 (m, 2H), 1.56-2.18 (m, 12H), 1.06 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 75
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-5-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디옥산 (20 mL) 중 4-브로모-5-플루오로-2-메톡시-아닐린 (2 g, 9.09 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (3.37 g, 10.91 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 질소 분위기 하에 탄산세슘 (8.88 g, 27.27 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기시키고, 동일한 온도에서 Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (742.27 mg, 908.93 μmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔을 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-50% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-5-메톡시-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (2.1 g, 6.32 mmol, 70% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 223.2 [M+H-100]+
단계 2: 디옥산 (25 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-5-메톡시-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (2.1 g, 6.51 mmol)의 교반 용액에 탄소 상 수산화팔라듐 (20 중량%, 50% 물, 914.82 mg, 6.51 mmol)을 채우고, 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 실온에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-5-메톡시-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (2g, 6.13 mmol, 94% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 225.2 [M+H-100]+.
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-5-메톡시-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (337.89 mg, 1.04 mmol)의 교반 용액에 중탄산나트륨 (262.51 mg, 3.12 mmol, 121.53 μL)에 이어서 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (0.5 g, 2.60 mmol)을 첨가하고, 반응물을 60℃로 14시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (20mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50-70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.4 g, 889.02 μmol, 85% 수율)를 담녹색 점성 화합물로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 380.2 [M+H-56]+.
단계 4: 디옥산 (2 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-3-메톡시-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.225 g, 516.66 μmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4M, 2 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 3-[3-플루오로-2-메톡시-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (0.17 g, 413.94 μmol, 80% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 336.2 [M-H]-.
단계 5: N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 3-[5-플루오로-2-메톡시-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (0.30 g, 894.53 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (362.07 mg, 3.58 mmol, 498.72 μL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (174.48 mg, 894.53 μmol, 131.19 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x20 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (20 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 이어서, 용액을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (0.20 g, 442.96 μmol, 50% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 450.2 [M+H]+.
단계 6: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (0.14 g, 311.45 μmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4M, 1.5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 메틸 tert-부틸 에테르 (50 mL)로 세척하여 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (0.130 g, 296.02 μmol, 95% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 394.0 [M+H]+.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (70.68 mg, 179.66 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (92.88 mg, 718.64 μmol, 125.17 μL), HATU (68.31 mg, 179.66 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하고, (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.1 g, 179.66 μmol)을 첨가하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (21.34 mg, 21.21 μmol, 12% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 932.0 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.85 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 9.50 (s, 1H), 8.36 (d, J = 1.60 Hz, 1H), 7.78-7.85 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.42-7.51 (m, 1H), 7.38 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 6.52 (d, J = 13.20 Hz, 1H), 5.29-5.40 (m, 2H), 4.10-4.40 (m, 4H), 3.82 (s, 3H), 3.75-3.81 (m, 1H), 3.25-3.60 (m, 5H), 3.11-3.21 (m, 2H), 2.91-3.10 (m, 2H), 2.70-2.81 (m, 1H), 2.77 (s, 3H), 2.45-2.61 (m, 4H), 1.92-2.21 (m, 4H), 1.51-1.90 (m, 6H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 76
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]아제판-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 테트라히드로푸란 (30 mL) 중 tert-부틸 4-옥소아제판-1-카르복실레이트 (3 g, 14.07 mmol)의 용액에 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔 (6.42 g, 42.20 mmol, 6.30 mL)을 첨가하고, 이어서 -10℃에서 노나플루오로부탄술포닐 플루오라이드 (10.62 g, 35.17 mmol, 6.07 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 15-20% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부틸술포닐옥시)-2,3,6,7-테트라히드로아제핀-1-카르복실레이트 (3.8 g, 7.66 mmol, 54% 수율)를 연한색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 396.0 [M -CO2 tBu + H]+
단계 2: 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2 mL) 중 tert-부틸 4-(1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부틸술포닐옥시)-2,3,6,7-테트라히드로아제핀-1-카르복실레이트 (1.5 g, 3.03 mmol) 및 3-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린 (789.69 mg, 3.33 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 무수 삼염기성 인산칼륨 (1.93 g, 9.08 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 15분 동안 퍼징하고, 이어서 Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (247.29 mg, 302.81 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 마이크로웨이브에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 셀라이트 층을 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 65-70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-2,3,6,7-테트라히드로아제핀-1-카르복실레이트 (610 mg, 1.92 mmol, 63% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 207.20 [M -CO2 tBu + H]+
단계 3: 1,4-디옥산 (7 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-2,3,6,7-테트라히드로아제핀-1-카르복실레이트 (610 mg, 1.99 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄소 상 수산화팔라듐 (419.41 mg, 2.99 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 H2 압력 하에 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 촉매를 셀라이트 층을 통한 여과에 의해 제거하였다. 셀라이트 층을 에틸 아세테이트 (3x30 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)아제판-1-카르복실레이트 (560 mg, 1.78 mmol, 89% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 209.20 [M -CO2 tBu + H]+
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (6 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)아제판-1-카르복실레이트 (560 mg, 1.82 mmol)의 교반 용액에 실온에서 중탄산나트륨 (610.18 mg, 7.26 mmol, 282.49 μL) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (1.05 g, 5.45 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-65% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]아제판-1-카르복실레이트 (380 mg, 878.69 μmol, 48% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 418.30 [M - H]-
단계 5: 1,4-디옥산 (4 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]아제판-1-카르복실레이트 (380 mg, 905.86 μmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4.0M 염화수소 용액 (3 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 3-[4-(아제판-4-일)-3-플루오로-아닐리노] 피페리딘-2,6-디온 (310 mg, 848.54 μmol, 94% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 320.20 [M+H]+
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 3-[4-(아제판-4-일)-3-플루오로-아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (310 mg, 871.19 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (440.78 mg, 4.36 mmol, 607.13 μL) 및 tert-부틸 브로모아세테이트 (169.93 mg, 871.19 μmol, 127.77 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x10 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]아제판-1-일]아세테이트 (216 mg, 496.71 μmol, 57% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 434.20 [M+H]+
단계 7: 디클로로메탄 (5 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]아제판-1-일]아세테이트 (210 mg, 484.41 μmol)의 교반 용액에 1,4-디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (2 mL)을 첨가하였다. 내용물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 생성된 조 화합물을 감압 하에 건조시키고, 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]아제판-1-일]아세트산 (170 mg, 406.65 μmol, 84% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 378.20 [M+H]+
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (90 mg, 151.75 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]아제판-1-일]아세트산 (69.09 mg, 166.93 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (98.07 mg, 758.77 μmol, 132.16 μL) 및 HATU (69.24 mg, 182.10 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 55% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]아제판-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (9.5 mg, 10.14 μmol, 7% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 916.30 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.39-7.29 (m, 3H), 6.99 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.54-6.42 (m, 2H), 6.02 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.32-5.31 (m, 1H), 4.35-4.25 (m, 1H), 4.22-4.10 (m, 2H), 3.80-3.68 (m, 1H), 3.60-3.40 (m, 2H), 3.05-2.85 (m, 6H), 2.80-2.70 (m, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.55-2.53 (m, 1H), 2.45-2.35 (m, 2H), 2.15-2.05 (m, 3H), 1.95-1.50 (m, 12H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 77
(3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 아세토니트릴 (10 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 g, 2.49 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 1-클로로피롤리딘-2,5-디온 (399.15 mg, 2.99 mmol, 241.91 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (40 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 3-(5-클로로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.2 g, 2.16 mmol, 87% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 380.2 [M + H- tBu]+.
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(5-클로로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.2 g, 2.15 mmol), 탄산세슘 (2.10 g, 6.44 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (505.98 mg, 3.22 mmol, 372.05 μL)을 사용하여 O-아릴화 (절차 A-B)에 대한 일반적 절차에 따라 합성하여 tert-부틸 3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (140 mg, 239.45 μmol, 11% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 517.0 [M + H-tBu]+.
단계 3: tert-부틸 3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (250 mg, 239.45 μmol, 11.15% 수율)를 YMC 셀룰로스-SC 칼럼을 사용하는 SFC 키랄 분리에 의해 분리하였다. 키랄 정제 후, 2종의 이성질체를 진공 압력 하에 환원시켜 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100.00 mg, 174.52 μmol, 71.82% 수율) 및 tert-부틸 (3S)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80.00 mg, 139.62 μmol 28% 수율)를 수득하였다.
주: 키랄적으로 순수한 화합물을 참조 칼럼 (룩스 A1)으로 검사하였다. 룩스 A1 칼럼으로부터의 제1 용리 피크를 S-이성질체로서 임의적으로 할당하였고, 제2 용리 피크를 R-이성질체로서 임의적으로 할당하였다.
단계 4: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100.00 mg, 174.52 μmol), 탄산세슘 (227.45 mg, 698.10 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (72.35 mg, 523.57 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (135 mg, 173.84 μmol, 100% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 635.7 [M + H- tBu]+.
단계 5: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4M, 5 mL)을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (135 mg, 195.32 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (140 mg, 178.48 μmol, 91% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 591.7 [M + H]+.
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (140 mg, 236.87 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (86.07 mg, 236.87 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (153.07 mg, 1.18 mmol, 206.29 μL) 및 HATU (99.07 mg, 260.55 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 (3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (27.35 mg, 27.69 μmol, 12% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 936.2 [M + H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.81 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.56 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.64 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.50 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.11 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.34 (m, 1H), 4.36-4.29 (m, 1H), 4.18-4.16 (m, 2H), 3.51-3.45 (m, 4H), 3.18-3.01 (m, 4H), 2.94-2.82 (m, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.71 (m, 1H), 2.45-2.38 (m, 4H), 2.14-1.72 (m, 12H), 1.61-1.53 (m, 1H), 1.07 (t, J = 3.60 Hz, 3H).
실시예 78
(3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3S)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80.00 mg, 139.62 μmol), 탄산세슘 (181.96 mg, 558.48 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (57.88 mg, 418.86 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (109 mg, 138.78 μmol, 99% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 635.7 [M + H- tBu]+.
단계 2: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 43.40 μL)을 사용하여 tert-부틸 (3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (120 mg, 173.62 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (120 mg, 150.59 μmol, 87% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 591.7 [M + H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (120 mg, 203.03 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (73.78 mg, 203.03 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (26.24 mg, 203.03 μmol, 35.36 μL) 및 HATU (77.20 mg, 203.03 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 (3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (19.28 mg, 19.37 μmol, 10% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 936.0 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.82 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.56 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 3.60, 9.00 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.51-6.46 (m, 2H), 6.12 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.35-5.34 (m, 1H), 4.38-4.26 (m, 2H), 4.33-4.30 (m, 3H), 4.18-4.16 (m, 2H), 3.84-3.78 (m, 1H), 3.58-3.49 (m, 1H), 3.47-3.38 (m, 3H), 3.16 (q, J = 6.80 Hz, 3H), 3.12-3.03 (m, 2H), 2.93-2.85 (m, 1H), 2.78 (s, 3H), 2.08-2.01 (m, 4H), 1.89-1.76 (m, 7H), 1.64-1.53 (m, 1H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 79
5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 밀봉 튜브에 들은 톨루엔 (40 mL) 및 THF (10 mL) 중 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (3.2 g, 20.90 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 디에톡시-메톡시 에탄 (4.65 g, 31.34 mmol, 5.21 mL), 아세트산 (525.00 mg, 8.74 mmol, 0.5 mL) 및 tert-부틸 3-아미노-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (5.32 g, 20.90 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (70 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 중탄산나트륨 용액 (3x30 mL)으로 세척한 다음, 물 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (4 g, 8.59 mmol, 41% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 400.2 [M + H]+.
단계 2: 아세토니트릴 (30 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2.2 g, 5.51 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N-클로로숙신이미드 (1.47 g, 11.01 mmol, 891.37 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20-30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(5-클로로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.5 g, 2.06 mmol, 37% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 378.2 [M + H]+.
단계 3: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(5-클로로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.5 g, 3.46 mmol), 탄산세슘 (3.38 g, 10.37 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (1.09 g, 6.91 mmol, 798.59 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 라세미 생성물 tert-부틸 3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.7 g 80.39% 순도)를 수득하였다. 라세미 생성물 (0.5 g, 80.39% 순도)을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 10 mM 아세트산암모늄: 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 농축시켜 순수한 생성물 (0.28 g)을 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 515.0 [M + H-56]+.
단계 4: 라세미 생성물 (0.28 g)을 키랄 SFC 정제에 의해 정제하여 tert-부틸 (3S)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.13 g, 226.66 μmol, 6.56% 수율)를 회백색 고체로서, 그리고 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.09 g, 157.61 μmol, 5% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 515.0 [M + H-56]+.
주: 이성질체에 대한 절대 입체화학을 하기와 같이 제1 용리 피크를 S-이성질체로서, 그리고 제2 용리 피크를 R-이성질체로서 임의적으로 할당하였다.
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3S)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.13 g, 227.67 μmol), 탄산세슘 (222.53 mg, 683.00 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (62.92 mg, 455.33 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 (3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.12 g, 165.22 μmol, 73% 수율)를 무색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 687.0 [M - H]-.
단계 6: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 1.2 mL)을 사용하여 tert-부틸 tert-부틸 (3S)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (120.00 mg, 174.12 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 33-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.1 g, 145.28 μmol, 83% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 589.2 [M + H]+.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (70.31 mg, 175.85 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (206.61 mg, 1.60 mmol, 278.45 μL), HATU (66.86 mg, 175.85 μmol) 및 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.1 g, 159.86 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (59 mg, 62.92 μmol, 39% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 934.0 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.80 (s, 1H), 8.47 (d, J = -2.40 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 9.60 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 6.47 (t, J = 12.80 Hz, 2H), 6.07 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.09 (q, J = 52.00 Hz, 1H), 4.36-4.28 (m, 1H), 3.65-3.55 (m, 1H), 3.05 (q, J = 36.00 Hz, 2H), 2.78-2.69 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.20-2.03 (m, 5H), 1.95-1.70 (m, 8H), 1.70-1.55 (m, 4H), 1.55-1.45 (m, 1H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 80
5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.09 g, 157.61 μmol), 탄산세슘 (154.06 mg, 472.84 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (43.56 mg, 315.23 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.08 g, 105.94 μmol, 67% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 687.0 [M - H]-.
단계 2: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 1.2 mL)을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.09 g, 130.59 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 3-[(3R)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.08 g, 119.45 μmol, 91% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 589.0 [M + H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (56.25 mg, 140.68 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (165.28 mg, 1.28 mmol, 222.75 μL), HATU (53.49 mg, 140.68 μmol) 및 3-[(3R)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.08 g, 127.89 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (36 mg, 37.99 μmol, 30% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 934.0 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.81 (s, 1H), 8.47 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 20.00, 32.80 Hz, 2H), 7.02-6.92 (m, 1H), 6.47 (t, J = 13.20 Hz, 2H), 6.07 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.11 (q, J = 48.00 Hz, 1H), 4.38-4.28 (m, 1H), 3.65-3.40 (m, 8H), 3.02 (d, J = 7.20 Hz, 2H), 2.78-2.69 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.19-2.07 (m, 5H), 1.95-1.72 (m, 8H), 1.69-1.43 (m, 5H), 1.55-1.45 (m, 1H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 81
3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400 mg, 996.38 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 tert-부틸 니트라이트 (308.24 mg, 2.99 mmol, 355.52 μL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (3x30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (50 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-85% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (210 mg, 437.45 μmol, 44% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 445.6 [M - H]-
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 33.47 mg, 1.46 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (130 mg, 291.18 μmol)의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (137.23 mg, 873.55 μmol, 100.90 μL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 냉수 (10 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (60 mg, 90.48 μmol, 31% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 484.00 [M+H-CO2tBu]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (40 mg, 68.55 μmol), 탄산세슘 (67.00 mg, 205.64 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (28.42 mg, 205.64 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (25 mg, 27.79 μmol, 41% 수율)를 갈색 점성 물질로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 700.00 [M-H]-.
단계 4: 물 (1 mL) / 에탄올 (3 mL) 중 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (25 mg, 35.63 μmol)의 교반 용액에 실온에서 철 분말 (9.95 mg, 178.13 μmol) 및 염화암모늄 (9.53 mg, 178.13 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 이 조 물질을 물 (5 mL) 중에 용해시키고, 에틸 아세테이트 (2x10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (20 mg, 21.44 μmol, 60% 수율)를 갈색 점성 물질로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 672.20 [M+H]+
단계 5: 필요한 아민을 tert-부틸 3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (20 mg, 29.77 μmol) 및 디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (1 mL)을 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (18 mg, 29.60 μmol, 99% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 572.40 [M + H]+
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (20 mg, 32.89 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (19.73 mg, 49.34 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (42.51 mg, 328.90 μmol, 57.29 μL) 및 HATU (18.76 mg, 49.34 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (8.5 mg, 8.59 μmol, 26% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 917.00 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.30 (s, 1H), 10.79 (s, 1H), 8.16 (d, J = 9.20 Hz, 2H), 7.36 (s, 1H), 7.21 (d, J = 5.20 Hz, 2H), 7.01-6.97 (m, 1H), 6.90 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.49-6.43 (m, 2H), 6.04 (d, J = 4.40 Hz, 1H), 5.33 (s, 1H), 4.31 (t, J = 3.60 Hz, 1H), 4.14 (d, J = 4.80 Hz, 2H), 3.66-3.48 (m, 4H), 3.20-2.92 (m, 5H), 2.72-2.51 (m, 5H), 2.50-2.41 (m, 2H), 2.09-2.05 (m, 3H), 1.81-1.34 (m, 10H), 1.28-1.24 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 82
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2 g, 7.80 mmol), 2-아미노-5-니트로-벤조산 (1.42 g, 7.80 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (3.47 g, 23.41 mmol, 3.89 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 반응 완료 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (2 x 50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였으며, 이를 석유 에테르 중 10% 에틸 아세테이트로 연화처리하여 tert-부틸 3-(6-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (3 g, 5.44 mmol, 70% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 375.20 [M-CO2 tBu+ H]+
단계 2: 물 (5 mL) / 에탄올 (25 mL) 중 tert-부틸 3-(6-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (3 g, 6.97 mmol)의 교반 용액에 실온에서 철 분말 (1.95 g, 34.85 mmol, 247.59 μL) 및 염화암모늄 (1.86 g, 34.85 mmol, 1.22 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 물 (50 mL) 중에 용해시키고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-아미노-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.8 g, 4.45 mmol, 63.85% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. 라세미 화합물을 키랄 SFC (칼럼 룩스-A1 [250*30 mm, 5 마이크로미터]; 이동상: 50% IPA-CO2 + 메탄올 중 0.5% 이소프로필 아민; 유량: 120 mL/분; 사이클 시간: 7.6분; 배압: 100 bar ; UV: 210 nm)에 의해 키랄 분해하여 피크 1 (제1-용리, S-이성질체로서 임의적으로 할당) tert-부틸 (S)-3-(6-아미노-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (610 mg)를 회백색 고체로서, 그리고 목적 피크 2 (제2 용리, R-이성질체로서 임의적으로 할당) tert-부틸 (R)-3-(6-아미노-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 2.93 mmol, 10% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 401.20 [M + H]+
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 172.22 mg, 4.49 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중에 용해시킨 tert-부틸 (3R)-3-(6-아미노-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 1.50 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 다음에, 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (470.73 mg, 3.00 mmol, 346.12 μL)을 실온에서 반응 혼합물에 첨가하고, 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 냉수 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (720 mg, 688.05 μmol, 46% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 538.80 [M+H]+
단계 4: 무수 아세토니트릴 (8 mL) 중 tert-부틸(3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (700 mg, 1.30 mmol)의 용액에 실온에서 DMAP (79.54 mg, 651.09 μmol) 및 트리에틸아민 (395.31 mg, 3.91 mmol, 544.50 μL)을 첨가하였다. 디-tert-부틸 피로 카르보네이트 (568.40 mg, 2.60 mmol, 597.68 μL)를 0℃에서 적가하고, 내용물을 실온에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (60 mL)로 추출하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 용매를 증발시켰다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 412.59 μmol, 32% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 638.40 [M+H]+
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 940.92 μmol), 탄산세슘 (919.71 mg, 2.82 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (370.77 mg, 2.35 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 역상 정제용 HPLC (칼럼: 엑스-셀렉트 C18 (150*19) mm 5 마이크로미터 정제용 방법: 물 중 0.1% 아세트산암모늄 / 아세토니트릴)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 185.75 μmol, 20% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 754.10 [M - H]-
단계 6: 필요한 아민을 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 211.68 μmol) 및 염화수소 용액 (디옥산 중 4.0M, 3 mL)을 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (140 mg, 204.18 μmol, 96% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 556.70 [M + H]+
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 102.09 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (48.98 mg, 122.51 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (65.97 mg, 510.44 μmol, 88.91 μL) 및 HATU (58.23 mg, 153.13 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (21 mg, 23.09 μmol, 23% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 901.20 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.89 (bs, 1H), 8.88 (bs, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 7.35-7.23 (m, 3H), 6.98 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.44 (s, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.32-4.30 (m, 1H), 4.19 (d, J = 5.20 Hz, 2H), 3.49-3.68 (m, 4H), 3.10 (s, 5H), 2.85-2.75 (m, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.52-2.50 (m, 2H), 2.06 (s, 4H), 1.91-1.53 (m, 11H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 83
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 1,4-디옥산 (50 mL) 중 1-브로모-2-플루오로-4-니트로-벤젠 (4.0 g, 18.18 mmol) 및 2-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (5.80 g, 21.79 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 250 mL 밀봉-튜브에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 탄산나트륨 (1.0 M, 55.0 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 10분 동안 질소 기체를 반응 혼합물 내로 버블링함으로써 탈기시켰다. 후속적으로, Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (750 mg, 918.40 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (100 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 30-40%로 용리시켜 정제하여 8-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔 (4.40 g, 14.97 mmol, 82% 수율)을 황색 점성 액체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.03-8.09 (m, 2H), 7.63 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.05 (s, 1H), 3.94 (s, 4H), 2.52 (t, J = 1.60 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.82 (t, J = 6.40 Hz, 2H).
단계 2: 무수 1,4-디옥산 (50 mL) 중 8-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔 (4.40 g, 15.76 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 250 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 탄소 상 수산화팔라듐 (20 중량%, 50% 물, 1.50 g, 2.14 mmol, 20% 순도)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 주위 온도에서 32시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 4-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-플루오로-아닐린 (3.70 g, 14.28 mmol, 91% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 252.2 [M+H]+.
단계 3: 무수 디클로로메탄 (50 mL) 중 4-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-플루오로-아닐린 (3.70 g, 14.72 mmol)의 교반 용액에 0-5℃에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (4.50 g, 44.48 mmol, 6.20 mL)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 (2,2,2-트리플루오로아세틸) 2,2,2-트리플루오로아세테이트 (4.77 g, 22.70 mmol, 3.20 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 물 (100 mL)을 첨가하고, 수성 혼합물을 디클로로메탄 (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 50-60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 N-[4-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-플루오로-페닐]-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (4.40 g, 7.60 mmol, 52% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 346.2 [M - H]-
단계 4: 무수 디클로로메탄 (30 mL) 중 N-[4-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-플루오로-페닐]-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (4.40 g, 12.67 mmol)의 교반 용액에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 트리플루오로아세트산 (14.80 g, 129.80 mmol, 10 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 포화 중탄산나트륨 용액을 반응 혼합물에 첨가하고, 수성 혼합물을 디클로로메탄 (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 2,2,2-트리플루오로-N-[3-플루오로-4-(4-옥소시클로헥실)페닐]아세트아미드 (2.50 g, 8.16 mmol, 64% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 302.09 [M-H]-.
단계 5/단계 6: 무수 메탄올 (5.0 mL) 중 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (200 mg, 359.32 μmol) 및 2,2,2-트리플루오로-N-[3-플루오로-4-(4-옥소시클로헥실)페닐]아세트아미드 (220 mg, 725.47 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 25 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 무수 아세트산나트륨 (60 mg, 731.41 μmol, 39.22 μL), 아세트산 (21.58 mg, 359.32 μmol, 20.55 μL) 및 MP-CNBH3 (500 mg, 359.32 μmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 32시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 물질을 정제용-HPLC에 의해 방법: 이동상: A: MQ-물 중 0.1% 포름산; B: 아세토니트릴을 사용하여 정제하여 라세미 화합물 260 mg을 수득하였다. 이 라세미 화합물을 SFC-키랄 정제 (이 방법을 사용함: 유량: 5 ml/분; 칼럼: YMC 셀룰로스-SC; 공용매: 이소프로필 알콜 중 0.5% 이소프로필 아민; 주입 부피: 15 μl; 유출구 압력: 100 bar; 온도: 35℃)에 의해 정제하여 N-[4-(1s,4s)-[4-[(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일]시클로헥실]-3-플루오로-페닐]-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (120 mg, 137.94 μmol, 38% 수율, F1)를 연갈색 점성 액체로서, 그리고 N-[4-(1r,4r)-[[4-[(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일]시클로헥실]-3-플루오로-페닐]-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (110 mg, 126.18 μmol, 35% 수율, F2)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 844.0 [M+H]+
주: 제1 용리 이성질체 (F1)를 시스 이성질체로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 이성질체 (F2)를 트랜스 이성질체로서 임의적으로 할당하였다.
단계 7: 실온에서 메탄올 (5.0 mL) 및 물 (1.0 mL)의 혼합물 중 N-[4-(1r,4r)[4-[(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일]시클로헥실]-3-플루오로-페닐]-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (100 mg, 118.50 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 25 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 무수 탄산칼륨 (85 mg, 615.02 μmol, 37.12 μL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃로 16시간 동안 가열하였다. 물 (30 ml)을 첨가하고, 혼합물을 5% 메탄올/디클로로메탄 (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 10-15% 메탄올로 용리시켜 정제하여 (3R)-8-[4-(1r,4r)-(4-아미노-2-플루오로-페닐)시클로헥실]-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 85.18 μmol, 72% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 748.6 [M+H]+.
단계 8: 무수 N,N-디메틸포름아미드 (2.0 mL) 중 (3R)-8-[4-(1r,4r) (4-아미노-2-플루오로-페닐)시클로헥실]-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (60 mg, 80.23 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 10 mL 밀봉 튜브 반응기에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 중탄산나트륨 (42 mg, 499.96 μmol, 19.44 μL) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (80 mg, 416.64 μmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃로 48시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (20 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10% 이소프로필 알콜/디클로로메탄 (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 물질을 정제용-HPLC (엑스-셀렉트 C18 (250*19)MM 5 마이크로미터, 10MM ABC:ACN)에 의해 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[4-(1r,4r) [4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (4.0 mg, 4.40 μmol, 5% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 859.2 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.43-7.33 (m, 1H), 7.33 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.28-7.26 (m, 1H), 6.97 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.46-6.42 (m, 2H), 6.03 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.30-5.27 (m, 1H), 4.33-4.29 (m, 1H), 4.21-4.17 (m, 1H), 4.14-4.09 (m, 1H), 3.20-3.05 (m, 2H), 3.01 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.80-2.60 (m, 10H), 2.20-2.18 (m, 1H), 2.14-2.05 (m, 3H), 2.08-1.91 (m, 2H), 1.91-1.72 (m, 4H), 1.73-1.42 (m, 5H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
술폰아미드 합성에 대한 일반적 절차 (방법 I):
(3R)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드를 사용하는 술폰아미드 합성에 대한 대표적인 예가 하기에 기재된다:
단계 1: 디클로로메탄 (3 mL) 중 (R)-3-플루오로피롤리딘 히드로클로라이드 (2.0 g, 15.93 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (3.09 g, 23.89 mol, 4.16 mL)을 첨가하였다. 술푸릴 클로라이드 (5.37 g, 39.82 mmol, 3.24 mL)를 -30℃에서 첨가하고, 혼합물을 그 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 적가를 통해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 1.5N HCl 용액 (2 x 5 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 술포닐 클로라이드 중간체 (2.1 g, 11.19 mmol, 70% 수율)를 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.
단계 2: 메탄올 (5 mL) 중 (3R)-3-플루오로피롤리딘-1-술포닐 클로라이드 (1.8 g, 9.59 mmol)의 용액에 0℃에서 암모니아 (메탄올 중 7M) (163.38 mg, 9.59 mmol, 10 mL)를 첨가하고, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 물 (25 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (20 mL), 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시키고, 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (850 mg, 5.00 mmol, 52% 수율)를 담황색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z: 169.2 [M+H]+.
하기 술폰아미드를 방법 I의 단계 1/2 또는 단계 2로부터의 일반적 절차를 사용하여 합성하였다.
술폰아미드 합성에 대한 일반적 절차 (방법 II):
3,3-디플루오로피롤리딘-1-술폰아미드를 사용하는 술폰아미드 합성에 대한 대표적인 예가 하기에 기재된다:
단계 1: 디클로로메탄 (20 mL) 중 tert-부틸 알콜 (3.14 g, 42.39 mmol, 4.00 mL) 및 DMAP (7.77 g, 63.59 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 N-(옥소메틸렌) 술파모일 클로라이드 (3 g, 21.20 mmol, 1.84 mL)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 혼합물을 물 (3 x 20 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (3 x 50 mL)으로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 조 tert-부틸 N-클로로술포닐카르바메이트 (3.5 g, 16.09 mmol, 76% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 2: 질소 분위기 하에 디클로로메탄 (15 mL) 중 3,3-디플루오로피롤리딘 (1.0 g, 9.34 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 트리에틸 아민 (944.80 mg, 9.34 mmol, 1.30 mL) 및 tert-부틸 N-클로로술포닐카르바메이트 (2.01 g, 9.34 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (25 ml)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세척하고, 건조시키고 (무수 황산나트륨), 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 1-10% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 N-(3,3-디플루오로피롤리딘-1-일)술포닐 카르바메이트 (1.5 g, 5.19 mmol, 56% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ELSD-MS) m/z: 285.20 [M-H]-.
단계 3: 무수 1,4-디옥산 (5 mL) 중 tert-부틸 N-(3,3-디플루오로피롤리딘-1-일) 술포닐카르바메이트 (1.5 g, 5.24 mmol)의 교반 용액에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4.0M HCl (4.0 M, 1.31 mL)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 석유 에테르로 연화처리하여 3,3-디플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (0.9 g, 4.03 mmol, 77% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z: 185.2 [M-H]-
하기 술폰아미드를 방법 II의 일반적 절차를 사용하여 합성하였다.
실시예 84
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 밀봉 튜브에 들은 N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 2-클로로-5-니트로-피리미딘 (5 g, 31.34 mmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (5.84 g, 31.34 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (16.20 g, 125.37 mmol, 21.84 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 빙냉수에 부었다. 수득된 고체를 부흐너 깔때기를 통해 여과하고, 감압 하에 건조시켜 tert-부틸 4-(5-니트로피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (3.78 g, 12.15 mmol, 39% 수율)를 담갈색 고체 조 물질로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 254 [M + H- tBu]+
단계 2: 에탄올 (32 mL) 및 물 (4 mL) 중 tert-부틸 4-(5-니트로피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (3.78 g, 12.22 mmol)의 용액에 실온에서 불활성 분위기 하에 철 분말 (3.41 g, 61.10 mmol, 434.13 μL) 및 염화암모늄 (1.96 g, 36.66 mmol, 1.28 mL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (200 mL)로 세척하였다. 여과물을 물 (80 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (60 mL) 및 염수 (60 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(5-아미노피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (1.67 g, 4.18 mmol, 34% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 280.2 [M + H]+
단계 3: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-(5-아미노피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (1.4 g, 5.01 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (767.49 mg, 5.01 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (1.49 g, 10.02 mmol, 1.67 mL) 및 아세트산 (3.01 mg, 50.12 μmol, 2.87 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (260 mg, 569.68 μmol, 11% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 425.2 [M + H]+
단계 4: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (280 mg, 659.67 μmol), 탄산세슘 (537.34 mg, 1.65 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (155.45 mg, 989.51 μmol, 114.30 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (250 mg, 431.85 μmol, 65% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 562.2 [M + H]+
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (220 mg, 391.78 μmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (108.28 mg, 783.56 μmol) 및 탄산세슘 (319.12 mg, 979.4 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 석유 에테르 중 75% 에틸 아세테이트로 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (120 mg, 155.36 μmol, 40% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 624.2 [M + H- tBu]+
단계 6: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 용액 (디옥산 중 4.0M, 20 μL)을 사용하여 tert-부틸 4-(5-(6-(2-시아노-3-((N-에틸-N-메틸술파모일)아미노)-6-플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (60 mg, 88.27 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (53 mg, 75.71 μmol, 86% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 580.2 [M + H]+
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (43 mg, 74.19 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (26.96 mg, 74.19 μmol), HATU (42.31 mg, 111.28 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (47.94 mg, 370.94 μmol, 64.61 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 64%의 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (3 mg, 2.99 μmol, 4% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 925.2 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.95 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.85 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.36-7.45 (m, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.95-7.05 (m, 1H), 6.49 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 6.00 Hz, 1H), 7.61-7.81 (m, 1H), 4.29-4.38 (m, 1H), 3.84-3.95 (m, 4H), 3.57-3.68 (m, 4H), 3.06-3.17 (m, 3H), 2.64-2.75 (m, 3H), 2.51-2.62 (m, 3H), 2.52(s, 3H), 2.05-2.15 (m, 2H), 1.72-2.01 (m, 6H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 85
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 밀봉 튜브에 들은 N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 2-클로로-5-니트로-피리딘 (5 g, 31.54 mmol)의 용액에 실온에서 불활성 분위기 하에 tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (5.87 g, 31.54 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (16.30 g, 126.15 mmol, 21.97 mL)을 첨가하였다. 반응물을 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 빙냉수에 부었다. 생성된 고체를 부흐너 깔때기에서 여과하고, 감압 하에 건조시켜 tert-부틸 4-(5-니트로-2-피리딜)피페라진-1-카르복실레이트 (3.95 g, 12.63 mmol, 40% 수율)를 담갈색 고체 조 물질로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 253.2 [M + H- tBu]+
단계 2: 에탄올 (32 mL) 및 물 (4 mL) 중 tert-부틸 4-(5-니트로-2-피리딜)피페라진-1-카르복실레이트 (3.9 g, 12.65 mmol)의 용액에 실온에서 철 분말 (3.53 g, 63.24 mmol, 449.38 μL) 및 염화암모늄 (2.03 g, 37.95 mmol, 1.33 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 70℃에서 6시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (200 mL)로 세척하였다. 여과물을 물 (80 mL), 중탄산나트륨 용액 (60 mL) 및 염수 (60 mL)로 세척하였다. 생성된 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(5-아미노-2-피리딜)피페라진-1-카르복실레이트 (3.4 g, 11.85 mmol, 94% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 279 [M + H]+
단계 3: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-(5-아미노-2-피리딜)피페라진-1-카르복실레이트 (2 g, 7.19 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (2.13 g, 14.37 mmol, 2.39 mL), 아세트산 (4.31 mg, 71.85 μmol, 4.11 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-2-피리딜]피페라진-1-카르복실레이트 (460 mg, 1.05 mmol, 15% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 424.2 [M + H]+
단계 4: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-2-피리딜]피페라진-1-카르복실레이트 (514 mg, 1.21 mmol), 탄산세슘 (988.70 mg, 3.03 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (286.01 mg, 1.82 mmol, 210.30 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-피리딜]피페라진-1-카르복실레이트 (460 mg, 796.00 μmol, 66% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 505.2 [M + H- tBu]+
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-피리딜]피페라진-1-카르복실레이트 (460 mg, 820.62 μmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (226.80 mg, 1.64 mmol), 탄산세슘 (668.44 mg, 2.05 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 석유 에테르 중 75% 에틸 아세테이트로 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-피리딜]피페라진-1-카르복실레이트 (110 mg, 115.07 μmol, 14% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 677.2 [M - H]-
단계 6: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 용액 (디옥산 중 4.0M, 40 μL)을 사용하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-2-피리딜]피페라진-1-카르복실레이트 (110 mg, 162.07 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 (6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(6-피페라진-1-일-3-피리딜)퀴나졸린 (105 mg, 124.62 μmol, 77% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 579.0 [M + H]+
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(6-피페라진-1-일-3-피리딜)퀴나졸린 (42.93 mg, 74.19 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (26.96 mg, 74.19 μmol), HATU (42.31 mg, 111.28 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (47.94 mg, 370.94 μmol, 64.61 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 70%의 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]-3-피리딜]-4-옥소-퀴나졸린 포름산 염 (12 mg, 11.65 μmol, 16% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 924.2 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.83 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.53-7.68 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.32-7.39 (m, 1H), 7.03 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.96-7.04 (m, 1H), 6.48 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 6.00 Hz, 1H), 4.28-4.36 (m, 1H), 4.11 (q, J = 4.40 Hz, 1H), 3.61-3.75 (m, 8H), 3.17 (d, J = 5.20 Hz, 2H), 3.02-3.12 (m, 2H), 2.61-2.80 (m, 4H), 2.51 (s, 3H), 2.04-2.12 (m, 2H), 1.71-1.95 (m, 6H), 1.02 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 86
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린
단계 1: tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (5.84 g, 31.34 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (16.20 g, 125.37 mmol, 21.84 mL)을 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 2-클로로-5-니트로-피리미딘 (5 g, 31.34 mmol)의 잘 교반된 용액에 첨가하였다. 반응물을 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 빙냉수에 부었다. 침전물을 여과하고, 감압 하에 건조시켜 tert-부틸 4-(5-니트로피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (3.78 g, 12.15 mmol, 39% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.14 (s, 2H), 3.92 (t, J = 7.20 Hz, 4H), 3.46 (t, J = 6.80 Hz, 4H), 1.43 (s, 9H).
단계 2: 에탄올 (32 mL), 물 (4 mL) 중 tert-부틸 4-(5-니트로피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (3.78 g, 12.22 mmol)의 용액에 실온에서 불활성 분위기 하에 철 분말 (3.41 g, 61.10 mmol, 434.13 μL), 염화암모늄 (1.96 g, 36.66 mmol, 1.28 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 6시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (200 mL)로 세척하였다. 여과물을 물 (80 mL), 중탄산나트륨 용액 (60 mL) 및 염수 (60 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(5-아미노피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (1.67 g, 4.18 mmol, 34% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 280.2 [M+H]+
단계 3: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-(5-아미노피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (1.04 g, 3.73 mmol), 6-아미노-2-플루오로-3-히드록시-벤조산 (0.58 g, 3.39 mmol) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (753.44 mg, 5.08 mmol, 845.62 μL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하여 tert-부틸 4-[5-(5-플루오로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.950 g, 1.30 mmol, 38% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI-): 441.2 [M-H]-.
단계 4: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-(5-플루오로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.9 g, 2.03 mmol), 탄산세슘 (1.99 g, 6.10 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (319.55 mg, 2.03 mmol)을 사용하여 O-아릴화 (절차 A-B)에 대한 일반적 절차에 따라 합성하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.210 g, 362.36 μmol, 18% 수율)를 담갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 524.3 [M+H-56]+.
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.21 g, 362.36 μmol), 탄산세슘 (295.16 mg, 905.91 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (75.11 mg, 543.54 μmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.14 g, 162.59 μmol, 45% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 696.0 [M-H]-
단계 6: 필요한 아민을 염화수소-매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 용액 (1,4-디옥산 중 4M, 40 μL)을 사용하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.12 g, 171.99 μmol)에 대해 N-tert-부톡시카르바메이트 탈보호를 수행하여 조 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 히드로클로라이드 (0.12 g, 169.57 μmol, 99% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 598.0 [M+H]+.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (87.56 mg, 240.97 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (129.76 mg, 1.00 mmol, 174.88 μL), HATU (83.99 mg, 220.89 μmol) 및 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (0.12 g, 200.80 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린 (18.26 mg, 18.95 μmol, 9% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 943.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.58 (d, J = 5.60 Hz, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.57 (s, 2H), 7.45-7.56 (m, 1H), 7.31 (d, J = 4.80 Hz, 1H), 7.01 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.28-4.38 (m, 1H), 3.82-3.98 (m, 4H), 3.58-3.70 (m, 4H), 3.15-3.40 (m, 4H), 3.02-3.11 (m, 2H), 2.60-2.82 (m, 3H), 2.66 (s, 3H), 2.48-2.60 (m, 2H), 2.02-2.15 (m, 1H), 1.69-1.91 (m, 5H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 87
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-6-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(6-피페라진-1-일-3-피리딜)퀴나졸린 (85 mg, 146.90 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-6-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (57.79 mg, 146.90 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (75.94 mg, 587.61 μmol, 102.35 μL) 및 HATU (55.86 mg, 146.90 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-6-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]-3-피리딜]-4-옥소-퀴나졸린 (33 mg, 34.56 μmol, 24% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 954.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.25 (d, J = 2.80 Hz, 3H), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 2.40, 9.00 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.03 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 6.18-6.05 (m, 2H), 4.45 (t, J = 20.00 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.71-3.68 (m, 3H), 3.64-3.61 (m, 6H), 3.07-3.02 (m, 3H), 2.74-2.70 (m, 1H), 2.68 (q, J = 2.00 Hz, 2H), 2.60-2.59 (m, 1H), 2.34-2.33 (m, 2H), 2.09-2.06 (m, 2H), 1.60-1.58 (m, 2H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 88
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-5-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (100 mg, 172.53 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (67.88 mg, 172.53 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (89.19 mg, 690.13 μmol, 120.21 μL) 및 HATU (65.60 mg, 172.53 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (35 mg, 36.31 μmol, 21% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.0 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.87 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.70 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 5.33-5.32 (m, 1H), 4.31 (q, J = 6.40 Hz, 1H), 3.93-3.86 (m, 2H), 3.85-3.79 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.68-3.59 (m, 5H), 3.08-3.01 (m, 2H), 2.82-2.76 (m, 2H), 2.68-2.61 (m, 5H), 2.13-2.11 (m, 2H), 1.96-1.92 (m, 4H), 1.77-1.76 (m, 2H), 1.02 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 89
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-6-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 아세토니트릴 (20 mL) 중 3-플루오로-5-메톡시-아닐린 (2 g, 14.17 mmol)의 용액에 -10℃에서 질소 분위기 하에 1-브로모피롤리딘-2,5-디온 (2.52 g, 14.17 mmol, 1.20 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (70 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x75 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 4-브로모-3-플루오로-5-메톡시-아닐린 (2.2 g, 9.88 mmol, 70% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 220.0 [M + H]+.
단계 2: 1,4-디옥산 (20 mL) 중 4-브로모-3-플루오로-5-메톡시-아닐린 (2.2 g, 10.00 mmol)의 교반 용액에 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (3.71 g, 12.00 mmol), 탄산세슘 (9.77 g, 29.99 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (816.49 mg, 999.82 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 수득된 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-6-메톡시-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (3.0 g, 8.79 mmol, 88% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 223.2 [M + H-CO2 tBu]+
단계 3: 1,4-디옥산 (30 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-6-메톡시-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (3 g, 9.31 mmol)의 탈기된 용액에 N2 분위기 하에 수산화팔라듐(II) (목탄 상 20%, 습윤, 1.31 g, 9.31 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 H2 주머니 압력 하에 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-6-메톡시-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.8 g, 8.29 mmol, 89% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 225.2[M + H-CO2 tBu]+
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로-6-메톡시-페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.54 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 중탄산나트륨 (453.19 mg, 5.39 mmol, 209.81 μL), 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (739.89 mg, 3.85 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (60 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-6-메톡시-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (520 mg, 1.15 mmol, 74% 수율)를 담녹색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 380.5 [M + H-tBu]+.
단계 5: 1,4-디옥산 (5 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-6-메톡시-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (520 mg, 1.19 mmol)의 용액에 0℃에서 염화수소 용액 (디옥산 중 4M, 6 mL)을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 3-[3-플루오로-5-메톡시-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (410 mg, 1.03 mmol, 86% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 336.2 [M + H]+.
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 3-[3-플루오로-5-메톡시-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (470 mg, 1.40 mmol)의 용액에 0℃에서 트리에틸아민 (567.24 mg, 5.61 mmol, 781.33 μL), tert-부틸 2-브로모아세테이트 (273.35 mg, 1.40 mmol, 205.53 μL)를 첨가하고, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (40 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (20 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 30-45% 에틸 아세테이트 석유 에테르로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-6-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (250 mg, 546.03 μmol, 39% 수율)를 담녹색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 450.2 [M + H]+.
단계 7: 디클로로메탄 (5 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-6-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (250 mg, 556.16 μmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 염화수소 용액 (1,4-디옥산 중 4M, 4 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-6-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (140 mg, 299.63 μmol, 54% 수율)을 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 394.7 [M + H]+.
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (90 mg, 155.28 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-6-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (61.09 mg, 155.28 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (100.34 mg, 776.39 μmol, 135.23 μL) 및 HATU (64.95 mg, 170.81 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-6-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (17.99 mg, 18.72 μmol, 12% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.0[M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.52-7.31 (m, 2H), 7.38 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.17 (s, 1H), 6.06 (d, J = 13.60 Hz, 2H), 4.37-4.29 (m, 1H), 3.91-3.83 (m, 4H), 3.73 (s, 3H), 3.69-3.58 (m, 4H), 3.14-2.93 (m, 4H), 2.76-2.67 (m, 1H), 2.63-2.56 (m, 6H), 2.10-2.07 (m, 4H), 1.89-1.84 (m, 2H), 1.82-1.56 (m, 2H), 1.02 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 90
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로-5-메톡시페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (82.27 mg, 209.12 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (245.70 mg, 1.90 mmol, 331.13 μL), HATU (79.51 mg, 209.12 μmol) 및 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(6-피페라진-1-일-3-피리딜)퀴나졸린 (0.11 g, 190.11 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-5-메톡시-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]-3-피리딜]-4-옥소-퀴나졸린 (25.78 mg, 26.53 μmol, 14% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 954.2 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.86 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.24 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 2.40, 9.00 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.30-7.41 (m, 1H), 7.22-7.28 (m, 1H), 7.02 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 4.25-4.35 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.65-3.75 (m, 4H), 3.58-3.65 (m, 4H), 3.22-3.41 (m, 2H), 2.93-3.10 (m, 4H), 2.70-2.85 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.41-2.65 (m, 2H), 2.05-2.31 (m, 2H), 1.85-2.01 (m, 2H), 1.60-1.85 (m, 4H), 1.02 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 91
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]-3-히드록시프로파노일]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 빙냉수 (15 mL) 중 2-아미노-3-벤질옥시-프로판산 (3 g, 15.37 mmol) 및 브로민화칼륨 (6.40 g, 53.79 mmol, 2.33 mL)의 교반 용액에 -4℃에서 질소 분위기 하에 물 (15 mL) 중 아질산나트륨 (1.59 g, 23.05 mmol, 732.93 μL)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 약 45분 동안 교반한 다음, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (20 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하고, 목적 화합물을 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트로 용리시켜 3-벤질옥시-2-브로모-프로판산 (2.3 g, 8.43 mmol, 55% 수율)을 갈색 점성 물질로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 259.20 [M - H]-
단계 2: 메탄올 (10 mL) 중 3-벤질옥시-2-브로모-프로판산 (1.8 g, 6.95 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 티오닐 클로라이드 (826.51 mg, 6.95 mmol, 516.57 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 14시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해, 화합물을 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 메틸 3-벤질옥시-2-브로모-프로파노에이트 (1.8 g, 6.46 mmol, 93% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.37-7.30 (m, 5H), 4.76 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.89 (dd, J = 9.60, 14.20 Hz, 1H), 3.77 (dd, J = 8.00, 14.00 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H).
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 메틸 3-벤질옥시-2-브로모-프로파노에이트 (1.6 g, 5.86 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (1.78 g, 17.57 mmol, 2.45 mL)을 첨가하였다. 4-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-1,2,3,6-테트라히드로피리딘 (1.30 g, 5.86 mmol)을 첨가하고, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x15 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해, 화합물을 석유 에테르 중 30-45% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 메틸 3-벤질옥시-2-[4-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-일]프로파노에이트 (2.0 g, 4.78 mmol, 82% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 415.6 [M+H]+.
단계 4: 메탄올 (15 mL) 중 메틸 3-벤질옥시-2-[4-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-일]프로파노에이트 (1.00 g, 2.41 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 수산화팔라듐 (탄소 상 20 중량%, 습윤, 677.73 mg, 4.83 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 수소 분위기 주머니 하에 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 셀라이트 층을 메탄올 (50 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물 메틸 2-[4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-1-피페리딜]-3-히드록시-프로파노에이트 (300 mg, 347.24 μmol, 14% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 297.2 [M+H]+.
단계 5: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 메틸 2-[4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)-1-피페리딜]-3-히드록시-프로파노에이트 (500 mg, 1.69 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 중탄산나트륨 (566.99 mg, 6.75 mmol) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (971.92 mg, 5.06 mmol)을 첨가하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 C18-역상 칼럼 크로마토그래피 (30g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 메틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]-3-히드록시-프로파노에이트 (450 mg, 1.05 mmol, 62% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 406.00 [M-H]-.
단계 6: 디클로로에탄 (4 mL) 중 메틸 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]-3-히드록시-프로파노에이트 (400 mg, 981.75 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 트리메틸 주석 히드록시드 (177.52 mg, 981.75 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하고, C18-역상 칼럼 크로마토그래피 (30g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 10 mM 아세트산암모늄: 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조시켜 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]-3-히드록시-프로판산 (150 mg, 205.89 μmol, 21% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 392.20 [M-H]-
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]-3-히드록시-프로판산 (50 mg, 127.09 μmol), 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (71.18 mg, 115.54 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (74.66 mg, 577.70 μmol, 100.62 μL) 및 HATU (52.72 mg, 138.65 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 43% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]-3-히드록시-프로파노일]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (6.13 mg, 6.07 μmol, 5% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.20 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.75 (s, 1H), 10.79 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 10.00 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.32-7.30 (m, 1H), 6.97 (t, J = 8.80 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.46-6.42 (m, 2H), 6.00 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 4.49 (s, 1H), 4.31-4.29 (m, 1H), 4.07-3.99 (m, 2H), 3.81-3.76 (m, 6H), 3.65-3.62 (m, 2H), 3.50 (m, 1H), 3.10 (s, 3H), 2.98 (m, 1H), 2.68-2.61 (m, 1H), 2.67-2.59 (m, 4H), 2.50-2.35 (m, 2H), 2.10-2.06 (m, 1H), 1.88-1.84 (m, 1H), 1.50-1.70 (m, 5H) 1.02 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 92
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (300 mg, 486.96 μmol), 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (292.06 mg, 730.44 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (1.11 g, 8.61 mmol, 1.5 mL) 및 HATU (222.19 mg, 584.35 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (132 mg, 137.14 μmol, 28% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 925.25 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.93 (bs, 1H), 8.62 (s, 2H), 8.35 (s, 1H), 7.84 (dd, J = 5.20, 9.20 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.53-7.38 (m, 2H), 7.00-6.98 (m, 1H), 6.49-6.44 (m, 2H), 6.06 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.35-4.25 (m, 1H), 3.95-3.75 (m, 4H), 3.65-3.55 (m, 4H), 3.25-3.15 (m, 2H), 3.10-3.00 (m, 2H), 2.80-2.70 (m, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.62-2.55 (m, 2H), 2.45-2.35 (m, 1H), 2.10-2.06 (m, 2H), 1.91-1.89 (m, 1H), 1.88-1.76 (m, 5H), 1.02 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 93
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(6-피페라진-1-일-3-피리딜)퀴나졸린 (280 mg, 483.91 μmol), 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (175.85 mg, 483.91 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (250.17 mg, 1.94 mmol, 337.16 μL) 및 HATU (184.00 mg, 483.91 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]-3-피리딜]-4-옥소-퀴나졸린 (95 mg, 100.79 μmol, 21% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 924.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.24 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 2.40, 9.00 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.29 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.21 (dd, J = 4.40, 9.60 Hz, 1H), 7.03-6.98 (m, 2H), 6.46-6.45 (m, 2H), 6.01 (dd, J = 16.00, Hz, 1H), 4.34-4.28 (m, 1H), 3.72-3.66 (m, 4H), 3.59 (s, 4H), 3.22 (s, 2H), 2.98-2.92 (m, 4H), 2.76-2.70 (m, 1H), 2.69-2.67 (m, 1H), 2.62-2.53 (m, 2H), 2.34-2.33 (m, 4H), 2.10-2.06 (m, 6H), 1.88-1.65 (m, 4H), 1.01 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 94
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리딘-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 디클로로메탄 (20 mL) 중 tert-부틸 4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.2 g, 2.96 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 염화수소 용액 (1,4-디옥산 중 4 M, 15 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 (3S)-3-[3-플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (1.2 g, 3.48 mmol)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 306.2 [M + H]+.
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (15 mL) 및 트리에틸아민 (1.99 g, 19.65 mmol, 2.74 mL) 중 (3S)-3-[3-플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (1.2 g, 3.93 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (1.15 g, 5.89 mmol, 864.53 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 빙수 (50 mL)에 붓고, 즉시 에틸 아세테이트 (3x70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (1.4 g, 3.34 mmol, 85% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 420.2 [M + H]+.
단계 3: 디클로로메탄 (30 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세테이트 (1.4 g, 3.34 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 염화수소 용액 (1,4-디옥산 중 4 M, 15 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 히드로클로라이드 (1.3 g, 3.20 mmol, 96% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 364.2 [M + H]+.
단계 4: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (259.95 mg, 650.12 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (840.50 mg, 6.50 mmol, 1.13 mL), HATU (272.00 mg, 715.36 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하고, 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(6-피페라진-1-일-3-피리딜)퀴나졸린 (0.4 g, 650.32 μmol)을 첨가하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[6-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]-3-피리딜]-4-옥소-퀴나졸린 (122 mg, 127.07 μmol, 20% 수율)을 담녹색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 924.2 [M + H]+ 및 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 8.26 (d, J = 10.00 Hz, 2H), 8.04 (d, J = 161.60 Hz, 1H), 7.82-7.69 (m, 2H), 7.39 (s, 1H), 7.02 (d, J = 7.20 Hz, 2H), 6.47 (t, J = 12.00 Hz, 2H), 6.06 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.35-4.29 (m, 1H), 3.68-3.63 (m, 10H), 3.05 (d, J = 6.80 Hz, 2H), 2.85-2.70 (m, 1H), 2.68-2.65 (m, 4H), 2.11-2.06 (m, 1H), 1.95-1.68 (m, 5H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 95
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (300 mg, 517.59 μmol), 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (300 mg, 517.59 μmol), 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (188.08 mg, 517.59 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (334.47 mg, 2.59 mmol, 450.77 μL) 및 HATU (216.49 mg, 569.35 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (80 mg, 81.44 μmol, 16% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 925.2 [M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.85 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 6.00, 8.80 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.38 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.02-6.98 (m, 1H), 6.48-6.44 (m, 2H), 6.06 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 3.90-3.83 (m, 4H), 3.68-3.59 (m, 4H), 3.17 (m, 1H), 3.03-2.91 (m, 3H), 2.77-2.71 (m, 2H), 2.61-2.59 (m, 6H), 2.09-2.06 (m, 1H), 1.89-1.75 (m, 4H), 1.02 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 96
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (450 mg, 801.37 μmol), 탄산세슘 (261.10 mg, 801.37 μmol) 및 (3R)-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드 (144.43 mg, 801.37 μmol)를 사용하여 절차 A-C를 사용하여 합성하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[(3R)-3-메톡시피롤리딘-1-일]술포닐아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (400 mg, 509.87 μmol, 64% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 666.7 [M+H-tBu]+.
단계 2: 필요한 아민을 염화수소 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 용액 (1,4-디옥산 중 4M, 4 mL)을 사용하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[(3R)-3-메톡시피롤리딘-1-일]술포닐아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (420 mg, 581.91 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (3R)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (380 mg, 551.03 μmol, 95% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 622.3 [M+H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 HCl 염 (120 mg, 182.34 μmol), 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (66.26 mg, 165.71 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (94.27 mg, 729.37 μmol, 127.04 μL) 및 HATU (69.33 mg, 182.34 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 (3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (35 mg, 34.54 μmol, 19% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z(ESI): 967.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.23 (bs, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.84 (dd, J = 8.80, 14.40 Hz, 1H), 7.82-7.80 (m, 1H), 7.75 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 4.00, 8.80 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 6.52-6.46 (m, 3H), 6.12 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.34-4.32 (m, 1H), 3.97-3.93 (m, 6H), 3.67-3.63 (m, 2H), 3.59-3.51 (m, 4H), 3.29-3.25 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 3.15-3.05 (m, 1H), 2.97-2.85 (m, 1H), 2.75-2.67 (m, 1H), 2.11-1.82 (m, 8H).
실시예 97
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. (3R)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 HCl 염 (130 mg, 197.54 μmol), 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (71.78 mg, 179.52 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (102.12 mg, 790.15 μmol, 137.63 μL) 및 HATU (75.11 mg, 197.54 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 (3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (43 mg, 42.32 μmol, 21% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 967.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.19 (bs, 1H), 9.59 (bs, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.84-7.76 (m, 2H), 7.74 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.51-7.43 (m, 1H), 7.42 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 6.51-6.46 (m, 2H), 6.11 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.34-4.30 (m, 2H), 3.95-3.85 (m, 5H), 3.71-3.65 (m, 2H), 3.59-3.48 (m, 3H), 3.28-3.26 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.92-2.83 (m, 1H), 2.79-2.71 (m, 1H), 2.61-2.60 (m, 1H), 2.12-1.82 (m, 9H).
실시예 98
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[(2S)-2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]-3-히드록시프로파노일]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: H2O 중 트리플루오로아세트산 (0.7 M, 51.23 mL) 중 (2R)-2-아미노-3-벤질옥시-프로판산 (7 g, 35.86 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 아질산나트륨 (3.71 g, 53.79 mmol, 1.71 mL, 물 (50 mL) 중에 용해됨)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 염화나트륨을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 (2R)-3-벤질옥시-2-히드록시-프로판산 (6 g, 28.13 mmol, 78% 수율)을 무색 액체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 그대로 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 195.2 [M-H]-
단계 2: 톨루엔 (70 mL) 중 (2R)-3-벤질옥시-2-히드록시-프로판산 (6 g, 30.58 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 벤질 알콜 (16.53 g, 152.91 mmol, 15.75 mL) 및 p-TSA (526.61 mg, 3.06 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 역상 C-18 크로마토그래피 (물 중 0.1% 아세트산암모늄 및 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 순수한 분획을 감압 하에 농축시켜 벤질 (2R)-3-벤질옥시-2-히드록시-프로파노에이트 (5.8 g, 16.21 mmol, 53% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.27-7.39 (m, 10H), 5.69 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 5.20 Hz, 2H), 4.52 (t, J = 5.60 Hz, 2H), 4.31-4.35 (m, 1H), 3.63-3.70 (m, 2H).
단계 3 및 단계 4: 톨루엔 (3 mL) 중 벤질 (2R)-3-벤질옥시-2-히드록시-프로파노에이트 (562.62 mg, 1.96 mmol)의 교반 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (253.96 mg, 1.96 mmol, 342.26 μL)을 첨가하고, 이어서 0℃에서 불활성 분위기 하에 트리플루오로메탄술폰산 무수물 (554.40 mg, 1.96 mmol, 330.00 μL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 1시간 동안 천천히 가온하였다. 별개의 반응 용기에서, N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 (3S)-3-[3-플루오로-4-(4-피페리딜)아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (0.3 g, 982.49 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (253.96 mg, 1.96 mmol, 342.26 μL) 및 톨루엔 중 상기 제조된 용액의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고, 12시간 동안 계속 반응시켰다. 반응 혼합물을 물 (10 ml)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 벤질 (2S)-3-벤질옥시-2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]프로파노에이트 (0.22 g, 366.13 μmol, 37% 수율)를 갈색빛 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 574.2 [M+H]+
단계 5: 디옥산 (4 mL) 중 벤질 (2S)-3-벤질옥시-2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]프로파노에이트 (220.00 mg, 383.51 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL RB 플라스크에 탄소 상 수산화팔라듐 (0.22 g, 383.51 μmol)을 첨가하고, 반응물을 수소 주머니 압력 하에 16시간 동안 수소화시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 디클로로메탄 중 5% 메탄올 (50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 (2S)-2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]-3-히드록시-프로판산 (75 mg, 160.58 μmol, 42% 수율)을 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 394.5 [M + H]+.
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (1 mL) 중 (2S)-2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]-3-히드록시-프로판산 (31.93 mg, 81.16 μmol), 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (50 mg, 81.16 μmol)의 용액에 1-프로판포스폰산 무수물 용액 (619.76 ug, 97.39 μmol, 50% 순도) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (52.45 mg, 405.80 μmol, 70.68 μL)을 첨가하고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 그의 부피의 절반으로 농축시키고, 이를 30 g C18 칼럼을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[(2S)-2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]-3-히드록시-프로파노일]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (26 mg, 25.21 μmol, 31% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.0[M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.78 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.85 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 2H), 7.55-7.30 (m, 2H), 7.05-6.85 (m, 1H), 6.55-6.35 (m, 2H), 6.03 (s, 1H), 4.32-4.30 (m, 1H), 4.10-3.95 (m, 2H), 3.88-3.78 (m, 4H), 3.75-3.58 (m, 4H), 3.13-3.11 (m, 4H), 2.74-2.67 (m, 4H), 2.62-2.58 (m, 1H), 2.57-2.55 (m, 3H), 2.15-2.05 (m, 1H), 1.89-1.85 (m, 2H), 1.80-1.65 (m, 3H), 1.58-1.45 (m, 2H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 99
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-메톡시-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 질소 분위기 하에 디클로로메탄 (30 mL) 중 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (950 mg, 2.24 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 N-브로모숙신이미드, 99% (398.36 mg, 2.24 mmol, 189.70 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 ml)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x100 ml)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세척하고, 건조시키고 (무수 황산나트륨), 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (1.0 g, 1.89 mmol, 84% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 447.0, 449.0 [M+H-tBu] (브로모-동위원소 패턴).
단계 2: 무수 메탄올 (5 mL) 및 N,N-디메틸포름아미드 (7 mL) 중 tert-부틸 4-[5-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (400 mg, 794.68 μmol) 및 브로민화구리 (I) (57.00 mg, 397.34 μmol, 12.10 μL)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 소듐 메톡시드 (257.59 mg, 4.77 mmol, 265.83 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 130℃에서 마이크로웨이브 조건 하에 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액 (10 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (300 mg, 547.88 μmol, 69% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 계산치 455.20 [M+H]+ (Br-동위원소 패턴).
단계 3: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (50 mg, 110.02 μmol), 탄산세슘 (107.54 mg, 330.05 μmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (22.47 mg, 143.02 μmol, 16.52 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 A-B)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (40 mg, 64.91 μmol, 59% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 592.2 [M+H]+.
단계 4: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.9 g, 1.52 mmol), 탄산세슘 (1.49 g, 4.56 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (525.60 mg, 3.80 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 55% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (370 mg, 469.18 μmol, 31% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 708.0 [M-H]-
단계 5: 필요한 아민을 염화수소-매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 용액 (1,4-디옥산 중 4M, 1 mL)을 사용하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (250 mg, 352.24 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (215 mg, 272.21 μmol, 77% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 610.2 [M+H]+.
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (100 mg, 154.78 μmol), 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (56.24 mg, 154.78 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (60.01 mg, 464.33 μmol, 80.88 μL) 및 HATU (88.28 mg, 232.17 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린 (29 mg, 29.37 μmol, 19% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.26 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.50 (s, 2H), 7.29 (dd, J = 4.00, 8.80 Hz, 1H), 7.01 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.49-6.45 (m, 2H), 6.05 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.40-4.30 (m, 1H), 3.88 (d, J = 25.60 Hz, 4H), 3.82 (s, 3H), 3.64 (s, 5H), 3.27 (s, 2H), 3.11 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.80-2.60 (m, 6H), 2.49-2.53 (m, 3H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.92-1.77 (m, 5H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 100
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-메톡시-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (80 mg, 123.82 μmol) 및 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (49.51 mg, 123.82 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (80.01 mg, 619.11 μmol, 107.83 μL) 및 HATU (94.16 mg, 247.64 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린 (10 mg, 10.37 μmol, 8% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.26 (s, 1H), 7.51-7.46 (m, 3H), 7.50 (s, 2H), 7.27 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.01 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.49-6.45 (m, 2H), 6.05 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.40-4.30 (m, 1H), 3.88 (d, J = 25.60 Hz, 4H), 3.83 (s, 3H), 3.64 (d, J = 14.40 Hz, 5H), 3.27 (s, 2H), 3.11 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.80-2.50 (m, 6H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.92-1.77 (m, 6H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 101
5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 톨루엔 (35 mL) 중 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (2.19 g, 14.32 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (4.24 g, 28.64 mmol, 4.76 mL), 아세트산 (8.60 mg, 143.20 μmol, 8.19 μL) 및 tert-부틸 4-(5-아미노피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (4.0 g, 14.32 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (1.5 g, 3.53 mmol, 25% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 425.2 [M+H]+.
단계 2: 질소 분위기 하에 디클로로메탄 (100 mL) 중 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (1.5 g, 3.53 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 tert-부틸 니트라이트 (1.09 g, 10.60 mmol, 1.26 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 디클로로메탄 (2 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 (230-400 메쉬) 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하고, 목적 생성물을 석유 에테르 중 0-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (1 g, 2.02 mmol, 57% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): 468.2 [M-H]-.
단계 3: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (800 mg, 1.70 mmol), 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 156.71 mg, 6.82 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (535.41 mg, 3.41 mmol, 393.68 μL)을 사용하여 O-아릴화 (절차 A-B)에 대한 일반적 절차에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (480 mg, 783.47 μmol, 46% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 551.5 [M-tBu+H]+.
단계 4: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (480 mg, 791.38 μmol), 탄산세슘 (773.54 mg, 2.37 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (273.40 mg, 1.98 mmol)을 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (240 mg, 271.55 μmol, 34% 수율)를 갈색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 723.2 [M-H].
단계 5: 에탄올 (3 mL) 및 물 (0.5 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (210 mg, 289.77 μmol)의 교반 용액에 실온에서 염화암모늄 (93.00 mg, 1.74 mmol, 60.78 μL), 철 분말 (80.92 mg, 1.45 mmol, 10.29 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 셀라이트 층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르 중 0-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-[5-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (160 mg, 218.79 μmol, 76% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 639.7 [M+H-tBu]+.
단계 6: 필요한 아민을 디옥산 중 4M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 99% 중 4M 염화수소 (167.94 mg, 4.61 mmol, 209.93 μL)를 사용하여 tert-부틸 4-[5-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (160 mg, 230.30 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (160 mg, 223.11 μmol, 97% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 593.7 [M-H]-.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (50.42 mg, 138.74 μmol) 및 5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (75 mg, 126.13 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (48.90 mg, 378.39 μmol, 65.91 μL) 및 HATU (71.94 mg, 189.20 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (18 mg, 17.85 μmol, 14% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 940.2 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.11 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.30 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.01 (dd, J = 8.40, 12.20 Hz, 2H), 6.74 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 6.49-6.44 (m, 2H), 6.05 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 3.92-3.85 (m, 5H), 3.64 (s, 5H), 3.33-3.11 (m, 2H), 3.10-3.06 (m, 2H), 2.80-2.50 (m, 7H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.89-1.77 (m, 5H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 102
5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (70 mg, 110.92 μmol) 및 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (44.34 mg, 110.89 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (43.01 mg, 332.76 μmol, 57.96 μL) 및 HATU (63.26 mg, 166.38 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (14.5 mg, 14.98 μmol, 14% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 940.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.31 (t, J = 4.80 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.99 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 6.72 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 6.49-6.45 (m, 2H), 6.05 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.35-4.30 (m, 1H), 3.88 (d, J = 27.20 Hz, 5H), 3.64 (s, 5H), 3.40-3.20 (m, 3H), 2.78-2.59 (m, 11H), 2.11-2.08 (m, 1H), 1.91-1.77 (m, 5H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 103
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[(3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]-3-메톡시피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 무수 1,4-디옥산 (100 mL) 중 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (10 g, 32.34 mmol) 및 4-브로모-2-플루오로-1-아이오도-벤젠 (9.73 g, 32.34 mmol, 1.80 mL)의 잘 교반된 용액을 함유하는 250 mL 밀봉-튜브에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 물 (20 mL) 중 Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (2.64 g, 3.23 mmol) 및 탄산나트륨 (8.57g, 80.85mmol, 3.39 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 질소 기체를 반응 혼합물 내로 버블링함으로써 탈기시키고, 반응 혼합물을 110℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 ml)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르 중 90% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (8.4 g, 22.52 mmol, 70% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 256.2 [M + H]+.
단계 2: 질소 분위기 하에 테트라히드로푸란 (100 mL) 중 tert-부틸 4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (8.6 g, 21.49 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 250 mL 2구 둥근 바닥 플라스크에 0℃에서 보란 테트라히드로푸란 착물 용액 (THF 중 1M) (1 M, 35.11 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 25%의 수산화나트륨 용액 (859.45 mg, 21.49 mmol, 403.50 μL) 및 35%의 과산화수소 (730.74 mg, 21.49 mmol, 664.31 μL)를 첨가하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x100 ml)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 역상 정제용 HPLC (칼럼: 엑스브리지 C-18 20x150m; 이동상: A: 물 중 0.1% 포름산, B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 정제된 분획을 수득하였으며, 이를 동결건조시켜 tert-부틸 4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (4.3 g, 11.26 mmol, 52% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 274.0 [M+H-CO2 tBu]+
단계 3: tert-부틸 4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (4.6 g, 12.17 mmol)를 키랄 SFC (칼럼: 키랄셀 OD-H [250*30 mm, 5μm]; 이동상: [CO2 : MeOH (80:20)]; 유량: 70 g/분; 사이클 시간: 3.3분; 배압: 100 bar; UV: 220 nm)에 의해 정제하여 순수한 거울상이성질체 tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (2.2 g, 5.82 mmol, 48% 수율) 및 tert-부틸 (3S,4S)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (2.3 g, 6.08 mmol, 50% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 276.2 [M-CO2 tBu+2H]+
주: 제1 용리 이성질체를 tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 이성질체를 tert-부틸 (3S,4S)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
단계 4: 질소 분위기 하에 N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (920 mg, 2.43 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 0℃에서 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 139.88 mg, 3.65 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 메틸 아이오다이드 (690.88 mg, 4.87 mmol, 303.02 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x50 ml)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세척하고, 건조시키고 (무수 황산나트륨), 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물 tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (900 mg, 2.29 mmol, 94% 수율)를 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 332.0 [M-tBu+H]+.
단계 5: 무수 1,4-디옥산 (10 mL) 중 tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (850 mg, 2.17 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 ml 밀봉-튜브에 주위 온도에서 2,6-디벤질옥시피리딘-3-아민 (838.70 mg, 2.60 mmol), BrettPhos (232.67 mg, 433.46 μmol) 및 Pd(dba)3 (396.93 mg, 433.46 μmol) 및 탄산세슘 (2.12 g, 6.50 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 질소 기체를 반응 혼합물 내로 버블링함으로써 탈기시키고, 반응 혼합물을 100℃로 12시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x100 ml)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 90% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 생성물 tert-부틸 (3R,4R)-4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (900 mg, 1.10 mmol, 51% 수율)를 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 614.8 [M+H]+.
단계 6: 무수 1,4-디옥산 (20 mL) 중 tert-부틸 (3R,4R)-4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (960 mg, 1.17 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 탄소 상 수산화팔라듐 (20 중량%, 50% 물, 640.00 mg, 911.42 μmol, 20% 순도)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 주위 온도에서 수소 분위기 (1 atm) 하에 16시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 완전한 소모 후, 반응 혼합물을 여과 패드를 통해 여과하고, 여과 패드를 테트라히드로푸란(50 ml)으로 세척하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 역상 정제용 HPLC (칼럼: 엑스브리지 C-18 20x150 mm 이동상: A: 물 중 0.1% 포름산, B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 정제된 분획을 수득하였으며, 이를 동결건조시켜 tert-부틸 (3R,4R)-4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (515 mg, 1.17 mmol, 100% 수율)를 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 336.2 [M+H-CO2 tBu]+
단계 7: tert-부틸 (3R,4R)-4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (520 mg, 1.18 mmol)를 키랄 SFC (칼럼: YMC 셀룰로스-SC [250*30 mm, 5μm]; 이동상: [CO2 : 이소프로필 알콜 (60:40)]; 유량: 110 g/분; 사이클 시간: 8분; 배압: 100 bar; UV: 210 nm)에 의해 정제하여 순수한 거울상이성질체 tert-부틸 (3R,4R)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (230 mg, 512.30 μmol, 43% 수율) 및 tert-부틸 (3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (250 mg, 551.11 μmol, 47% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 336.2 [M+H-CO2 tBu]+.
주: 제1 용리 이성질체를 tert-부틸 (3R,4R)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 이성질체를 tert-부틸 (3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
단계 8: 무수 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 (3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (250 mg, 568.33 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (5.38 mL)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 완전한 소모 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 석유 에테르로 연화처리하여 (3R)-3-[3-플루오로-4-[(3R,4R)-3-메톡시-4-피페리딜]아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (200 mg, 505.60 μmol, 89% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI):336.2 [M+H]+.
단계 9: 질소 분위기 하에 N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 (3R)-3-[3-플루오로-4-[(3R,4R)-3-메톡시-4-피페리딜]아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (180 mg, 515.25 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 2구 둥근 바닥 플라스크에 0℃에서 tert-부틸 브로모아세테이트 (100.50 mg, 515.25 μmol, 75.56 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x100 ml)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[(3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세테이트 (200 mg, 440.48 μmol, 85% 수율)를 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 450.2 [M+H]+.
단계 10: 디클로로메탄 (3 mL) 중 tert-부틸 2-[(3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세테이트 (300 mg, 667.39 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4N HCl (2.0 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 2-[(3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세트산 (220 mg, 509.28 μmol, 76% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI):394.2 [M+H]+
단계 11: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (169.60 mg, 251.65 μmol), 2-[(3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세트산 (100 mg, 251.65 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (162.62 mg, 1.26 mmol, 219.16 μL) 및 HATU (143.53 mg, 377.47 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 사전-패킹된 실리카 칼럼을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피 (100g C18 패킹, 방법: 물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[(3R,4R)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (70 mg, 69.23 μmol, 28% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.08 (s, 1H), 8.60 (s, 2H), 8.35 (s, 1H), 7.90-7.85 (m, 2H), 7.76 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.52-7.50 (m, 1H), 7.41 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.09-6.62 (m, 1H), 7.42-7.41 (m, 2H), 6.10 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 4.34-4.32 (m, 2H), 3.93-3.87 (m, 5H), 3.67-3.57 (m, 6H), 3.19-3.13 (m, 6H), 2.76 (s, 3H), 2.71-2.67 (m, 3H), 2.61-2.60 (m, 2H), 2.12-2.08 (m, 1H), 1.91-1.85 (m, 3H), 1.05 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 104
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[(3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]-3-메톡시피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 tert-부틸 (3S,4S)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (900 mg, 2.40 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 138.22 mg, 3.61 mmol)을 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 아이오도메탄 (682.68 mg, 4.81 mmol, 299.42 μL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액 (40 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (3S,4S)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (880 mg, 2.27 mmol, 94% 수율)를 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 332.0 [M + H-tBu]+.
단계 2: 무수 1,4-디옥산 (10 mL) 중 tert-부틸 (3S,4S)-4-(4-브로모-2-플루오로-페닐)-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (880 mg, 2.27 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50-ml 밀봉-튜브에 주위 온도에서 2,6-디벤질옥시피리딘-3-아민 (1.04g, 3.40 mmol), 탄산세슘 (2.22 g, 6.80 mmol)에 이어서 Brett-Phos (243.33 mg, 453.29 μmol) 및 Pd2(dba)3 (415.09 mg, 453.29 μmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 질소 기체를 반응 혼합물 내로 버블링함으로써 탈기시키고, 반응 혼합물을 100℃로 12시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x100 ml)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 90% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 생성물 tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (730 mg, 689.89 μmol, 30% 수율)를 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 612.83 [M - H]-
단계 3: 1,4-디옥산 (10 mL) 중 tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-[(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (1 g, 1.63 mmol)의 용액에 실온에서 탄소 상 수산화팔라듐 (457.65 mg, 3.26 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 수소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (80 mL)로 세척하고, 진공을 통해 건조시켜 tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (665 mg, 1.53 mmol, 94% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 336.2 [M + H-CO2 tBu]+
단계 4: tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (665 mg, 1.53 mmol)를 키랄 SFC (칼럼: YMC 셀룰로스-SC [250*30mm, 5μm]; 이동상: [CO2 : 이소프로필 알콜 (60:40)]; 유량: 100 g/분; 배압: 100 bar; 파장: 210 nm; 사이클 시간: 9.0분)에 의해 정제하여 tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 593.39 μmol, 36% 수율) 및 tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 593.39 μmol, 36% 수율)를 수득하였다.
주: 키랄 SFC 정제로부터의 제1 용리 이성질체를 tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 이성질체를 tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
단계 5: 1,4-디옥산 (2 mL) 중 tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-피페리딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 597.03 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4M, 3.00 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 (3S)-3-[3-플루오로-4-[(3S,4S)-3-메톡시-4-피페리딜]아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (220 mg, 580.89 μmol, 97% 수율)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 336.2 [M + H]+.
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 (3S)-3-[3-플루오로-4-[(3S,4S)-3-메톡시-4-피페리딜]아닐리노]피페리딘-2,6-디온 (220 mg, 655.99 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (66.38 mg, 655.99 μmol, 91.43 μL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (127.95 mg, 655.99 μmol, 96.21 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x10 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 2-[(3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세테이트 (230 mg, 510.64 μmol, 78% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 450.2 [M + H]+.
단계 7: 디클로로메탄 (4 mL) 중 tert-부틸 2-[(3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세테이트 (230 mg, 511.66 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 127.92 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 2-[(3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세트산 (200 mg, 459.53 μmol, 90% 수율)을 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 394.5 [M + H]+.
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (120 mg, 207.04 μmol), 2-[(3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세트산 (81.45 mg, 207.04 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (133.79 mg, 1.04 mmol, 180.31 μL)에 이어서 HATU (86.59 mg, 227.74 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 아세토니트릴 중 40-45% 포름산 완충제로 용리시키면서 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[(3S,4S)-4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-3-메톡시-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (37.16 mg, 37.08 μmol, 18% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.0 [M + H]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 9.93 (s, 2H), 8.60 (s, 2H), 8.39 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 7.76 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 4.00, 9.00 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 0.00-6.53 (m, 2H), 5.92 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 4.37-4.29 (m, 1H), 4.19-4.05 (m, 6H), 3.93-3.87 (m, 3H), 3.75-3.73 (m, 3H), 3.17-3.12 (m, 6H), 2.79 (s, 3H), 2.75-2.61 (m, 3H), 2.09-2.08 (m, 2H), 1.90-1.84 (m, 3H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 105
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로헥산술폰아미드
단계 1: 아세톤 (5 mL) 중 시클로헥산 술포닐 클로라이드 (1 g, 5.47 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 수성 암모니아 (30% 수성, 10 mL, 5.47 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 시클로헥산 술폰아미드 (0.58 g, 3.55 mmol, 65% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 6.61 (s, 2H), 2.74 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 2.02-2.12 (m, 2H), 1.79 (d, J = 10.40 Hz, 2H), 1.64 (d, J = 11.60 Hz, 1H), 1.21-1.38 (m, 4H), 1.05-1.17 (m, 1H).
단계 2: tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.5 g, 890.41 μmol)를 밀봉 튜브에서 N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중에 용해시키고, 실온에서 탄산세슘 (870.34 mg, 2.67 mmol) 및 시클로헥산 술폰아미드 (363.37 mg, 2.23 mmol)를 용해시켰다. 반응 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하였다. 반응 혼합물을 여과지를 통해 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트 (3x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-(시클로헥실술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.45 g, 557.22 μmol, 63% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 703.4 [M - H]-.
단계 3: 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-(시클로헥실술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.44 g, 624.32 μmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 염화수소 (1,4-디옥산 중 4 M 용액, 4 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로헥산술폰아미드 (0.44 g, 585.07 μmol, 94% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 605.2 [M + H]+.
단계 4: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (143.44 mg, 358.75 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (463.66 mg, 3.59 mmol, 624.88 μL), HATU (150.05 mg, 394.62 μmol) 및 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로헥산술폰아미드 (0.23 g, 358.75 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로헥산술폰아미드 (108 mg, 112.53 μmol, 31% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 950.0 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.41 (t, J = 8.80 Hz, 3H), 7.00 (s, 1H), 6.47 (t, J = 12.00 Hz, 2H), 6.06 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.32 (s, 1H), 3.88 (d, J = 26.00 Hz, 4H), 3.63 (s, 4H), 2.72 (d, J = 42.80 Hz, 3H), 2.12-2.07 (m, 4H), 1.89-1.76 (m, 8H), 1.56 (d, J = 43.60 Hz, 2H), 1.42-1.39 (m, 2H), 1.24-1.12 (m, 4H).
실시예 106
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드
단계 1: 메탄올 (20 mL) 중 피페리딘-1-술포닐 클로라이드 (2 g, 10.89 mmol, 1.53 mL)의 교반 용액에 0℃에서 암모니아 용액 (7N 메탄올성 암모니아) (10.89 mmol, 10 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 빙수 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 조 생성물 피페리딘-1-술폰아미드 (1.2 g, 7.23 mmol, 66% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 165.20 [M+H]+.
단계 2: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (500 mg, 890.41 μmol), 탄산세슘 (1.02 g, 3.12 mmol) 및 피페리딘-1-술폰아미드 (365.57 mg, 2.23 mmol)를 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 조 생성물 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(1-피페리딜술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (400 mg, 498.75 μmol, 56% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 704.0 [M-H]-.
단계 3: 필요한 아민을 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(1-피페리딜술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (400 mg, 566.77 μmol) 및 디옥산 중 염화수소 용액 4.0M (3 mL)을 사용하여 절차 A-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]피페리딘-1-술폰아미드 (400 mg, 517.05 μmol, 91% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 606.2 [M+H]+
단계 4: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]피페리딘-1-술폰아미드 (200 mg, 330.23 μmol), 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (132.00 mg, 363.25 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (213.40 mg, 1.65 mmol, 287.60 μL) 및 HATU (150.68 mg, 396.27 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]피페리딘-1-술폰아미드 (72.14 mg, 71.44 μmol, 22% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 951.0 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.85 (bs, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 24.80 Hz, 3H), 7.00 (s, 1H), 6.48 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.04 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 3.87 (d, J = 27.20 Hz, 4H), 3.66-3.61 (m, 4H), 3.20-3.18 (m, 1H), 3.05-2.95 (m, 4H), 2.85-2.70 (m, 2H), 2.65-2.60 (m, 1H), 2.59-2.55 (m, 1H), 2.50-2.45 (m, 1H), 2.25-2.15 (m, 2H), 1.95-1.85 (m, 3H), 1.82-1.60 (m, 4H), 1.35-1.59 (m, 6H).
실시예 107
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드
단계 1/단계 2: 디클로로메탄 (5 mL) 중 피롤리딘 (5 g, 70.30 mmol, 5.84 mL)의 교반 용액에 -30℃에서 N,N-디이소프로필에틸아민 (13.63 g, 105.45 mmol, 18.37 mL), 술푸릴 클로라이드 (18.98 g, 140.61 mmol, 11.43 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 동일한 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (60 mL)로 적가 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 1.5N 염산 (2x50 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 피롤리딘-1-술포닐 클로라이드 (10 g, 44.21 mmol, 63% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. 메탄올 (30 mL) 중 피롤리딘-1-술포닐 클로라이드 (10 g, 58.95 mmol)의 용액에 0℃에서 메탄올 중 7N 암모니아 (1.00 g, 58.95 mmol)를 첨가하고, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (20 ml), 염수 (20 ml)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 피롤리딘-1-술폰아미드 (4.5 g, 29.82 mmol, 51% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 151.2 [M+H]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (500 mg, 890.41 μmol), 탄산세슘 (870.34 mg, 2.67 mmol) 및 피롤리딘-1-술폰아미드 (267.48 mg, 1.78 mmol)를 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(피롤리딘-1-일술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (440 mg, 535.62 μmol, 60% 수율)를 갈색 점성 화합물로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 690.0 [M-H]-
단계 4: 필요한 아민을 트리플루오르아세트산 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 트리플루오로아세트산 (72.53 mg, 636.09 μmol, 49.00 μL)을 사용하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(피롤리딘-1-일술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (440 mg, 636.09 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]피롤리딘-1-술폰아미드 (370 mg, 442.35 μmol, 70% 수율)를 갈색 점성 화합물로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 592.2 [M+H]+.
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]피롤리딘-1-술폰아미드 (185 mg, 312.70 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (202.07 mg, 1.56 mmol, 272.33 μL) 및 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (113.63 mg, 312.70 μmol) 및 HATU (130.79 mg, 343.97 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]피롤리딘-1-술폰아미드 (74.82 mg, 74.34 μmol, 24% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 937.0 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 9.61 (s, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.89-7.84 (m, 2H), 7.76 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 12.80 Hz, H), 6.12 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.38-4.50 (m, 3H), 3.82-3.95 (m, 4H), 3.65-3.71 (m, 2H), 3.49-3.62 (m, 4H), 3.21-3.31 (m, 4H), 3.05-3.18 (m, 1H), 2.82-2.92 (m, 1H), 2.71-2.81 (m, 1H), 2.50-2.65 (m, 2H), 1.95-2.15 (m, 3H), 1.75-1.92 (m, 7H).
실시예 108 및 109
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.5 g, 890.41 μmol), 탄산세슘 (725.28 mg, 2.23 mmol) 및 시클로펜탄 술폰아미드 (199.29 mg, 1.34 mmol)를 사용하여 절차 A-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-(시클로펜틸술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.47 g, 574.55 μmol, 65% 수율)를 무색 액체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 689.4 [M-H]-
단계 2: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4M, 5 mL)을 사용하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-(시클로펜틸술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.47 g, 680.43 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (0.42 g, 669.76 μmol, 98% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 591.6 [M+H]+
실시예 108
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (110.74 mg, 304.76 μmol), N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (0.18 g, 304.76 μmol), HATU (115.88 mg, 304.76 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (196.94 mg, 1.52 mmol, 265.42 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (90 mg, 88.45 μmol, 29% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 936.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.86-7.84 (m, 1H), 7.74 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 2H), 7.48-7.45 (m, 2H), 7.10-6.90 (m, 1H), 6.51-6.46 (m, 2H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.32-4.31 (m, 1H), 4.22-4.15 (m, 1H), 3.96-3.82 (m, 5H), 3.70-3.55 (m, 6H), 3.50-3.35 (m, 2H), 2.96-2.82 (m, 2H), 2.78-2.71 (m, 1H), 2.59-2.55 (m, 1H), 2.14-2.05 (m, 1H), 2.02-1.89 (m, 7H), 1.88-1.80 (m, 2H), 1.70-1.67 (m, 2H), 1.58-1.55 (m, 2H).
실시예 109
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드
단계 4: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (180 mg, 287.04 μmol), 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (104.31 mg, 260.87 μmol), HATU (109.14 mg, 287.04 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (37.10 mg, 287.04 μmol, 50.00 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (73 mg, 73.43 μmol, 26% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 937 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 10.10 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.85-7.83 (m, 1H), 7.72 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.43 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.07-6.98 (m, 1H), 6.52-6.45 (m, 2H), 6.06 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.38-4.30 (m, 1H), 3.98-3.90 (m, 2H), 3.90-3.82 (m, 2H), 3.68-3.58 (m, 4H), 3.58-3.47 (m, 1H), 3.29-3.10 (m, 2H), 2.95-2.70 (m, 3H), 2.62-2.58 (m, 1H), 2.57-2.55 (m, 1H), 2.54 (m, 2H), 2.15-2.05 (m, 1H), 1.85-1.98 (m, 7H), 1.83-1.75 (m, 2H), 1.72-1.63 (m, 2H), 1.60-1.49 (m, 2H).
실시예 110 - 130
실시예 110-130을 상기 방법 I 및 II 및 일반적 절차 C 내지 E를 사용하여 실시예 105-109와 동일한 방식으로 상응하는 술폰아미드를 사용하여 합성하였다.
실시예 110
(3S)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3S)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (33 mg, 30.71 μmol, 17% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 967.20 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.18 (bs, 1H), 8.60 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.76 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 3H), 7.50 (dd, J = 5.20, Hz, 1H), 7.42 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.50 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.35-4.30 (m, 4H), 3.96-3.87 (m, 5H), 3.67 (s, 3H), 3.55-3.43 (m, 4H), 3.28-3.23 (m, 3H), 3.22-3.20 (m, 3H), 3.18-3.02 (m, 1H), 2.98-2.92 (m, 2H), 2.80-2.70 (m, 1H), 2.65-2.60 (m, 1H), 2.58-2.55 (m, 1H), 2.15-2.05 (m, 2H), 2.10-1.95 (m, 1H), 1.80-0.30 (m, 5H).
실시예 111
(3S)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3S)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (20 mg, 20.21 μmol, 11% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 967.0 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.00 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 18.40 Hz, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.04 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.31 (m, 1H), 3.93-3.91 (m, 3H), 3.91-3.83 (m, 2H), 3.61 (m, 4H), 3.30-3.20 (m, 2H), 3.20-3.15 (m, 4H), 3.15-3.00 (m, 4H), 2.74-2.71 (m, 2H), 2.53-2.50 (m, 2H), 2.08-2.07 (m, 2H), 1.93-1.85 (m, 3H), 1.76-1.74 (m, 4H).
실시예 112
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드
조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]프로판-2-술폰아미드 (57 mg, 62.45 μmol, 21% 수율)를 담녹색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 910.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.75 (s, 1H), 8.51 (s, 2H), 8.24 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.32-7.29 (m, 1H), 7.95-6.89 (m, 1H), 6.46-6.37 (m, 2H), 5.99 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.29-4.20 (m, 1H), 3.80 (d, J = 25.60 Hz, 4H), 3.60 (d, J = 36.80 Hz, 4H), 2.75 (t, J = 5.20 Hz, 4H), 2.36-2.08 (m, 4H), 2.72-2.61 (m, 5H), 2.02 (d, J = 40.00 Hz, 6H).
실시예 113
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]피페리딘-1-술폰아미드 (60.25 mg, 60.10 μmol, 18% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 951.0 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.88 (bs, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.00 (s, 1H), 6.47 (t, J = 12.00 Hz, 2H), 6.07 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 3.91-3.84 (m, 4H), 3.70-3.55 (m, 4H), 3.29-3.15 (m, 2H), 3.09-3.03 (m, 4H), 2.79-2.71 (m, 2H), 2.70-2.59 (m, 3H), 2.34 (t, J = 2.00 Hz, 1H), 2.11-2.06 (m, 2H), 1.92-1.79 (m, 5H), 1.50-1.41 (m, 6H).
실시예 114
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드
조 생성물을 역상 정제용 HPLC (칼럼: 엑스브리지 C-18 20x150m 이동상: A: 물 중 0.1% 중탄산암모늄, B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로프로판술폰아미드 (80 mg, 82.56 μmol, 19% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 908.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.99 (bs, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.84 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.59-7.50 (m, 1H), 7.42-7.38 (m, 2H), 7.01 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 6.49-6.45 (m, 2H), 6.05 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 4.30-3.84 (m, 5H), 3.71-3.63 (m, 5H), 3.22-3.17 (m, 2H), 3.22-3.17 (m, 3H), 2.60-2.59 (m, 2H), 2.09-2.07 (m, 1H), 1.90-1.86 (m, 3H), 1.85-1.77 (m, 3H), 0.87-0.85 (m, 4H).
실시예 115
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드
표제 화합물을 역상 정제용 HPLC (칼럼: 엑스브리지 C-18 20x150m 이동상: A: 물 중 0.1% 중탄산암모늄, B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로프로판술폰아미드 (50 mg, 53.00 μmol, 15% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 908.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 1.60 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.41 (s, 2H), 7.01 (s, 1H), 6.49 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.06 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 4.32-4.31 (m, 1H), 3.91-3.85 (m, 5H), 3.63 (m, 5H), 3.24-3.23 (m, 2H), 2.79-2.70 (m, 3H), 2.51 (m, 3H), 2.10-2.08 (m, 1H), 1.89-1.84 (m, 4H), 1.78 (m, 1H), 0.87-0.85 (m, 4H).
실시예 116
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (59.79 mg, 57.83 μmol, 22% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 10.34 (s, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.86 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.75 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 3.60, 9.00 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.52-6.46 (m, 2H), 6.13 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.39-5.26 (m, 1H), 4.44-4.32 (m, 3H), 3.97-3.85 (m, 4H), 3.68 (s, 2H), 3.70-3.39 (m, 8H), 3.19-3.09 (m, 1H), 23.01-2.89 (m, 1H), 2.78-2.69 (m, 1H), 2.61-2.50 (m, 2H), 2.15-2.03 (m, 5H), 1.91-1.87 (m, 3H).
실시예 117
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시아제티딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-메톡시-아제티딘-1-술폰아미드 (89.43 mg, 92.81 μmol, 23% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 953.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.50-7.30 (m, 3H), 6.99 (s, 1H), 6.48 (t, J = 12.40 Hz, 2H), 6.09 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.35-4.31 (m, 1H), 4.03 (t, J = 5.60 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 25.20 Hz, 4H), 3.80-3.50 (m, 9H), 3.15 (s, 4H), 3.00-2.65 (m, 3H), 2.56 (t, J = 11.20 Hz, 2H), 2.11-1.83 (m, 6H).
실시예 118
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]프로판-2-술폰아미드 (97 mg, 104.46 μmol, 35% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 910.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.84-7.82 (m, 1H), 7.71-7.68 (m, 1H), 7.47-7.34 (m, 3H), 7.36 (t, J = 5.60 Hz, 1H), 6.49-6.44 (m, 2H), 6.05 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.31-4.30 (m, 1H), 3.95-3.80 (m, 4H), 3.76-3.58 (m, 5H), 3.24-3.15 (m, 1H), 3.14-3.00 (m, 2H), 2.80-2.68 (m, 2H), 2.64-2.56 (m, 2H), 2.15-2.06 (m, 1H), 1.91-1.76 (m, 7H), 1.24 (d, J = 6.80 Hz, 6H).
실시예 119
6-[2-시아노-3-[[2,2-디플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[2,2-디플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (41.5 mg, 42.89 μmol, 47% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 961.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.26 (d, J = 4.40 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.48 (d, J = 12.40 Hz, 2H), 6.15 (t, J = 4.40 Hz, 2H), 4.36-4.30 (m, 1H), 3.93-3.86 (m, 4H), 3.66-3.58 (m, 5H), 3.30 (t, J = Hz, 2H), 3.28 (t, J = Hz, 2H), 3.10 (s, 1H), 2.90 (s, 1H), 2.79-2.73 (m, 1H), 2.68 (s, 3H), 2.60 (d, J = 4.00 Hz, 2H), 2.56-2.53 (m, 2H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.92-1.83 (m, 4H).
실시예 120
6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[2-플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[2-플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (45.42 mg, 47.57 μmol, 18% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 943.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.76 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.49 (d, J = 7.20 Hz, 2H), 6.45 (s, 2H), 6.07 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 4.59 (t, J = 4.80 Hz, 1H), 4.49-4.31 (m, 1H), 3.89 (d, J = 17.60 Hz, 4H), 3.70-3.63 (m, 5H), 3.93-3.86 (m, 2H), 3.30-3.28 (m, 2H), 3.15 (s, 1H), 3.31-3.28 (m, 1H), 2.98-2.85 (m, 1H), 2.78-2.70 (m, 3H), 2.62-2.58 (m, 2H), 2.50-2.42 (m, 2H), 2.15-2.05 (m, 1H), 1.90-1.83 (m, 2H).
실시예 121
6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[2-플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[2-플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (51.25 mg, 49.89 μmol, 19% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 943.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.11 (bs, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.85 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 6.99 (bs, 1H), 6.54-6.46 (m, 2H), 6.11 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.58 (t, J = 4.80 Hz, 1H), 4.46 (t, J = 5.20 Hz, 1H), 4.35-4.30 (m, 2H), 3.92-3.85 (m, 4H), 3.69-3.52 (m, 6H), 3.37-3.35 (m, 1H), 3.30-3.28 (m, 1H), 2.95-2.85 (m, 3H), 2.78-2.70 (m, 4H), 2.69-2.57 (m, 2H), 2.11-2.07 (m, 2H), 1.90-1.89 (m, 1H), 1.87-1.83 (m, 3H).
실시예 122
6-[2-시아노-3-[[2,2-디플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[2,2-디플루오로에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (42.24 mg, 42.93 μmol, 47% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 961.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.64 (bs, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.27-7.23 (m, 1H), 7.00 (bs, 1H), 6.50-6.45 (m, 2H), 6.16 (t, J = 4.40 Hz, 2H), 4.36-4.30 (m, 1H), 3.89 (d, J = 25.20 Hz, 4H), 3.65-3.60 (m, 4H), 3.43-3.38 (m, 1H), 3.28-3.27 (m, 3H), 2.78-2.73 (m, 2H), 2.71-2.68 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.60-2.56 (m, 3H), 2.51-2.50 (m, 2H), 2.11-2.07 (m, 1H), 1.90-1.83 (m, 4H).
실시예 123
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3,3-디플루오로피롤리딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3,3-디플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (30 mg, 30.74 μmol, 19% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 973.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.55 (s, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.39 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.32-7.29 (m, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 6.48 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.35-4.31 (m, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.67 (s, 2H), 3.57 (s, 2H), 3.39 (t, J = 24.00 Hz, 3H), 3.26 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 3.12 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 2.76-2.72 (m, 1H), 2.68-2.61 (m, 2H), 2.38-2.32 (m, 3H), 2.11-2.10 (m, 1H), 2.09-2.07 (m, 1H), 1.87-1.83 (m, 3H).
실시예 124
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (48.54 mg, 47.81 μmol, 16% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.56 (s, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.86 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 2H), 7.51-7.50 (m, 1H), 7.43 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.51 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.11 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.39 (s, 1H), 5.26 (s, 1H), 4.36-4.30 (m, 3H), 3.94 (s, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.68 (s, 2H), 3.52 (m, 4H), 3.41 (s, 2H), 3.27-3.26 (m, 2H), 2.93-2.90 (m, 1H), 2.78-2.72 (m, 1H), 2.15-2.07 (m, 6H), 1.91-1.87 (m, 4H).
실시예 125
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]아제티딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]아제티딘-1-술폰아미드 (19 mg, 19.14 μmol, 15% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 923.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 10.40 (s, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.86 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 2H), 7.52-7.50 (m, 1H), 7.43 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.03-6.99 (m, 1H), 6.50 (t, J = 12.80 Hz, 2H), 6.11 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.34-4.30 (m, 2H), 3.98-3.90 (m, 2H), 3.93-3.83 (m, 2H), 3.81 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 3.70-3.60 (m, 2H), 3.60-3.45 (m, 4H), 3.08 (s, 1H), 2.89-2.82 (m, 1H), 2.80-2.72 (m, 1H), 2.62-2.58 (m, 1H), 2.57-2.53 (m, 3H), 2.15-2.06 (m, 5H), 1.91-1.87 (m, 3H).
실시예 126
6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (73 mg, 72.72 μmol, 38% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 937.0 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.34 (s, 1H), 7.86-7.84 (m, 1H), 7.74 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.47-7.41 (m, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.04-6.95 (m, 1H), 6.51-6.46 (m, 2H), 6.11 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.39-4.32 (m, 2H), 3.87-3.93 (m, 4H) 3.70-3.55 (m, 6H), 3.08-2.70 (m, 7H), 2.63-2.58 (m, 2H), 2.37-2.27 (m, 1H), 2.18-1.80 (m, 6H), 0.60 (d, J = 18.00 Hz, 4H).
실시예 127
6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (15 mg, 14.52 μmol, 7% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 937.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.99 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.86 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.76-7.73 (m, 2H), 7.47-7.46 (m, 1H), 7.39 (t, J = 2.80 Hz, 1H), 6.99 (m, 1H), 6.52-6.50 (m, 1H), 6.47-6.46 (m, 1H), 6.11 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.33-4.31 (m, 2H), 3.95-3.92 (m, 2H), 3.90-3.86 (m, 2H), 3.69-3.65 (m, 2H), 3.59-3.55 (m, 2H), 3.52-3.49 (m, 2H), 3.15-2.98 (m, 2H), 2.95-2.85 (m, 2H), 2.78 (s, 3H), 2.75-2.73 (m, 1H), 2.68-2.67 (m, 1H), 2.61-2.60 (m, 1H), 2.09-2.01 (m, 3H), 2.09-2.01 (m, 3H).
실시예 128
(1S,5R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (1S,5R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-술폰아미드 (67.69 mg, 69.16 μmol, 25% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 949.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 8.58 (d, J = 5.20 Hz, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.01 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 6.49-6.44 (m, 2H), 6.05 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.33-4.32 (m, 1H), 3.87 (d, J = 26.40 Hz, 5H), 3.64 (s, 4H), 3.17 (s, 5H), 2.77-2.71 (m, 2H), 2.10-2.08 (m, 1H), 1.90-1.74 (m, 5H), 1.47-1.46 (m, 2H), 0.48-0.47 (m, 1H), 0.33-0.32 (m, 1H).
실시예 129
(3R,4R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3,4-디플루오로피롤리딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R,4R)-N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3,4-디플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (52 mg, 53.21 μmol, 21% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 973.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.59 (s, 2H), 8.59 (s, 1H), 7.82 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.48-7.38 (m, 1H), 7.00 (t, J = 15.20 Hz, 1H), 6.51-6.46 (m, 2H), 6.20 (d, J = 40.00 Hz, 1H), 5.34-5.32 (m, 1H), 5.22-5.20 (m, 1H), 4.33-4.29 (m, 2H), 3.89 (d, J = 26.00 Hz, 4H), 3.66 (s, 3H), 3.59-3.50 (m, 4H), 3.35-3.21 (m, 4H), 2.70-2.60 (m, 2H), 2.60 (d, J = 16.00 Hz, 2H), 2.10-2.07 (m, 3H), 1.90-1.86 (m, 4H).
실시예 130
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]아제티딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]아제티딘-1-술폰아미드 (35 mg, 35.56 μmol, 21% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 923.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.75 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.50-7.40 (m, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.38-7.30 (m, 1H), 7.30-6.92 (m, 1H), 6.48 (t, J = 12.40 Hz, 2H), 6.08 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 3.91-3.85 (m, 5H), 3.70-3.50 (m, 9H), 2.79-2.70 (m, 3H), 2.60-2.52 (m, 2H), 2.10-1.99 (m, 4H), 1.93-1.80 (m, 6H).
실시예 131
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 1,4-디옥산 (50 mL) 중 1-브로모-2-플루오로-4-니트로-벤젠 (4.0 g, 18.18 mmol) 및 2-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (5.80 g, 21.79 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 250 mL 밀봉-튜브에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 탄산나트륨 (1.0 M, 55.0 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 10분 동안 질소 기체를 반응 혼합물 내로 버블링함으로써 탈기시켰다. 후속적으로, Pd(dppf)Cl2·디클로로메탄 (750 mg, 918.40 μmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 80℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (100 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 30-40%로 용리시켜 정제하여 8-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔 (4.40 g, 14.97 mmol, 82% 수율)을 황색빛 점성 액체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.03-8.09 (m, 2H), 7.63 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.05 (s, 1H), 3.94 (s, 4H), 2.51-2.55 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.82 (t, J = 6.40 Hz, 2H).
단계 2: 무수 1,4-디옥산 (50 mL) 중 8-(2-플루오로-4-니트로-페닐)-1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔 (4.40 g, 15.76 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 250 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 탄소 상 수산화팔라듐 (20 중량%, 50% 물, 1.50 g, 2.14 mmol)을 채우고, 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시키고, 주위 온도에서 32시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 4-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-플루오로-아닐린 (3.70 g, 14.28 mmol, 91% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. 이 조 생성물을 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 252.2 [M+H]+
단계 3: 무수 디클로로메탄 (50 mL) 중 4-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-플루오로-아닐린 (3.70 g, 14.72 mmol)의 교반 용액에 0-5℃에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (4.50 g, 44.48 mmol, 6.20 mL)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 (2,2,2-트리플루오로아세틸) 2,2,2-트리플루오로아세테이트 (4.77 g, 22.70 mmol, 3.20 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 물 (100 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 디클로로메탄 (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 화합물을 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 50-60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 N-[4-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-플루오로-페닐]-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (4.40 g, 7.60 mmol, 52% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 346.2 [M - H]-
단계 4: 무수 디클로로메탄 (30 mL) 중 N-[4-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-플루오로-페닐]-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (4.40 g, 12.67 mmol, 000)의 잘 교반된 용액을 함유하는 250 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 트리플루오로아세트산 (14.80 g, 129.80 mmol, 10 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 포화 중탄산나트륨 용액을 반응 혼합물에 첨가하고, 디클로로메탄 (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 40-50%로 용리시켜 정제하여 2,2,2-트리플루오로-N-[3-플루오로-4-(4-옥소시클로헥실)페닐]아세트아미드 (2.50 g, 8.16 mmol, 64% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 302.3 [M-H]-.
단계 5/단계 6: 무수 메탄올 (5.0 mL) 중 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (200 mg, 359.32 μmol) 및 2,2,2-트리플루오로-N-[3-플루오로-4-(4-옥소시클로헥실)페닐]아세트아미드 (220 mg, 725.47 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 25 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 무수 아세트산나트륨 (60 mg, 731.41 μmol, 39.22 μL), 아세트산 (21.58 mg, 359.32 μmol, 20.55 μL) 및 MP-CNBH3 (500 mg, 359.32 μmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 32시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 반응 조 물질을 정제용-HPLC에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 아세토니트릴을 사용하여 정제하여 라세미 화합물 260 mg을 수득하였다. 이 라세미 화합물을 SFC-키랄 정제 (칼럼 : YMC 셀룰로스-SC [(250*30)mm, 5μ]; 이동상: CO2 : IPA 중 0.5% 이소프로필아민 (50:50); 총 유량: 110 g/분; 배압: 100 bar; 파장: 254 nm; 사이클 시간: 11.0분)에 의해 정제하여 N-(4-((1S,4s)-4-((R)-3-(6-(2-시아노-3-((N-에틸-N-메틸술파모일)아미노)-6-플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)시클로헥실)-3-플루오로페닐)-2,2,2-트리플루오로아세트아미드 (제1 용리 이성질체, 120 mg, 137.94 μmol, 38% 수율)를 연갈색 점성 액체로서, 그리고 N-(4-((1R,4r)-4-((R)-3-(6-(2-시아노-3-((N-에틸-N-메틸술파모일)아미노)-6-플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)시클로헥실)-3-플루오로페닐)-2,2,2-트리플루오로아세트아미드 (제2 용리 이성질체, 110 mg, 126.18 μmol, 35% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 844.29 [M+H]+.
주: 제1 용리 이성질체를 -시스 이성질체로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 이성질체를 -트랜스 이성질체로서 임의적으로 할당하였다.
단계 7: 메탄올 (5.0 mL) 및 물 (2.0 mL)의 혼합물 중 N-(4-((1S,4s)-4-((R)-3-(6-(2-시아노-3-((N-에틸-N-메틸술파모일)아미노)-6-플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)시클로헥실)-3-플루오로페닐)-2,2,2-트리플루오로아세트아미드 (120 mg, 142.20 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 25 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 무수 탄산칼륨 (100 mg, 723.56 μmol, 43.67 μL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 물 (30 ml)을 반응 혼합물에 첨가하고, 5% 메탄올/ 디클로로메탄 (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 메탄올 10-15%로 용리시켜 정제하여 (3R)-8-[4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)시클로헥실]-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 84.24 μmol, 59% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 748.7 [M+H]+
단계 8: 무수 N,N-디메틸포름아미드 (3.0 mL) 중 (3R)-8-[4-(4-아미노-2-플루오로-페닐)시클로헥실]-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 93.60 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 10 mL 밀봉-튜브 반응기에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 중탄산나트륨 (50 mg, 595.19 μmol, 23.15 μL) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (90 mg, 468.72 μmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃로 48시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (20 mL)을 첨가하고, 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 화합물을 정제용-HPLC (엑스-브리지 C8(150*19)MM 5 마이크로미터, 물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (840.00 μg, 0.895 μmol, 1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 859.2[M + H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.47-7.36 (m, 1H), 7.33 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.29-7.23 (m, 1H), 7.12-7.08 (m, 1H), 6.46 (t, J = 14.40 Hz, 2H), 6.03 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.32-5.22 (m, 1H), 4.35-4.25 (m, 1H), 4.17-4.11 (m, 1H), 4.13-4.07 (m, 1H), 2.98 (q, J = 32.00 Hz, 3H), 2.92-2.81 (m, 2H), 2.67-2.51 (m, 5H), 2.50-2.35 (m, 2H), 2.14-2.07 (m, 3H), 1.95-1.73 (m, 11H), 1.59 (s, 3H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 132
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드
표제 화합물을 출발 물질로서 시클로부탄술폰아미드를 사용하여 실시예 105-130과 동일한 방식으로 합성하였다. 표제 화합물을 역상 정제용 HPLC (칼럼: 엑스-브리지 C18 20x150m; 이동상: A: 물 중 0.1% 포름산, B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로부탄술폰아미드 (60 mg, 60.99 μmol, 18% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 922.2 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.86 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.73-7.87 (m, 1H), 7.75 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.42-7.46 (m, 2H), 6.95-7.05 (m, 1H), 6.51 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.01-4.39 (m, 3H), 4.02 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 3.87-3.93 (m, 4H), 3.67 (m, 2H), 3.42-3.61 (m, 2H), 3.57 (m, 2H), 2.81-3.20 (m, 3H), 2.64-2.80 (m, 2H), 2.20-2.41 (m, 4H), 1.75-2.12 (m, 8H).
실시예 133
N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드
표제 화합물을 출발 물질로서 시클로부탄술폰아미드를 사용하여 실시예 105-130과 동일한 방식으로 합성하였다. 표제 화합물을 역상 정제용 HPLC (칼럼: 엑스-브리지 C18 20x150m; 이동상: A: 물 중 0.1% 중탄산암모늄, B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로부탄술폰아미드 (55 mg, 58.77 μmol, 34% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 922.2 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 10.05 (bs, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.46 (bs, 1H), 7.41 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.03-6.98 (m, 1H), 6.48 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 3.90-3.83 (m, 3H), 3.82-3.74 (m, 2H), 3.72-3.63 (m, 4H), 3.63-3.35 (m, 4H), 3.33-3.14 (m, 2H), 2.77-2.71 (m, 2H), 2.34-2.25 (m, 3H), 2.16-2.07 (m, 3H), 1.91-1.71 (m, 7H).
실시예 134 및 135
단계 1: 질소 분위기 하에 디클로로메탄 (50.12 mL) 중 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (3.0 g, 5.51 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 0℃에서 N-브로모숙신이미드 (883.10 mg, 4.96 mmol, 420.93 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 10%로 연화처리하여 tert-부틸 4-[5-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (2.5 g, 3.97 mmol, 72% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 503.0 [M+H]+.
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (40 mL) 중 tert-부틸 4-[5-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (2 g, 3.97 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 포타슘 tert-부톡시드 (3.88 g, 34.61 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (1.25 g, 7.95 mmol, 917.93 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x170 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-[5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (1.7 g, 2.17 mmol, 55% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 584.4[M+H-tBu]+
단계 3: 밀봉 튜브에 들은 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (1 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[5-브로모-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.8 g, 1.25 mmol)의 교반 용액에 탄산칼륨 (517.92 mg, 3.75 mmol, 226.17 μL) 및 포타슘 (메톡시메틸)트리플루오로보레이트 (474.57 mg, 3.12 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 퍼징한 다음, Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (102.01 mg, 124.92 μmol)을 첨가하고, 다시 질소 기체로 5분 동안 퍼징한 다음, 90℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 10 mM 중탄산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-(메톡시메틸)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.22 g, 340.58 μmol, 27% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 506.5[M+H-CO2 tBu]+
단계 4: 밀봉 튜브에 들은 N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-(메톡시메틸)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.22 g, 363.28 μmol)의 교반 용액에 실온에서 탄산세슘 (355.09 mg, 1.09 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (125.50 mg, 908.20 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 65℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하였다. 반응 혼합물을 여과지를 통해 여과하여 형광 불순물을 제거하였다. 여과물을 에틸 아세테이트 (3x30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(메톡시메틸)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.2 g, 255.47 μmol, 70% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 624.6[M+H-CO2 tBu]+
단계 5: 디클로로메탄 (4 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(메톡시메틸)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.2 g, 276.33 μmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (2 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(메톡시메틸)-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (0.19 g, 112.54 μmol, 41% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 624.7 [M+H]+
실시예 134
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-(메톡시메틸)-4-옥소퀴나졸린
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (54.50 mg, 136.30 μmol), N-에틸-N-이소프로필-프로판-2-아민 (176.21 mg, 1.36 mmol, 237.48 μL), HATU (57.02 mg, 149.97 μmol) 및 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(메톡시메틸)-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (0.09 g, 136.34 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-(메톡시메틸)-4-옥소-퀴나졸린 (7 mg, 6.55 μmol, 5% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 969.0[M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 8.60 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.30 (t, J = 8.80 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 16.00 Hz, 1H), 6.05 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.33-4.28 (m, 1H), 3.89 (d, J = 26.80 Hz, 5H), 3.71-3.66 (m, 5H), 3.06 (d, J = 6.40 Hz, 3H), 2.66 (d, J = 20.00 Hz, 4H), 2.10-2.05 (m, 2H), 1.87-1.82 (m, 2H), 1.82-1.68 (m, 3H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 135
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-(메톡시메틸)-4-옥소퀴나졸린
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[2-플루오로-4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산 (54.50 mg, 136.30 μmol), N-에틸-N-이소프로필-프로판-2-아민 (176.21 mg, 1.36 mmol, 237.48 μL), HATU (57.02 mg, 149.97 μmol) 및 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(메톡시메틸)-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (0.09 g, 136.34 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-(메톡시메틸)-4-옥소-퀴나졸린 (11 mg, 10.16 μmol, 7% 수율)을 담녹색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 969.2[M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.90 (bs, 1H), 8.60 (s, 2H), 8.30 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.59 (bs, 1H), 7.33 (d, J = 8.00 Hz, 2H), 7.01 (s, 1H), 6.49 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.07 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.32 (s, 1H), 3.93-3.87 (m, 5H), 3.64-3.51 (m, 4H), 2.99 (d, J = 13.20 Hz, 3H), 2.77-2.68 (m, 7H), 2.09 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 1.89-1.80 (m, 6H), 1.05 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 136
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-히드록시-4-옥소퀴나졸린
단계 1: -78℃에서 무수 디클로로메탄 (4 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (250 mg, 352.24 μmol)의 교반 용액에 메틸렌 클로라이드 중 1.0 M 삼염화붕소 용액 (3.52 mmol, 15 mL)을 적가하였다. 생성된 내용물을 실온에서 36시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하고, 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-히드록시-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (200 mg, 246.25 μmol, 70% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 596.3[M+H]+.
단계 2: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-히드록시-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (100 mg, 167.90 μmol), 2-[4-[2-플루오로-4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산 (61.01 mg, 167.90 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (108.49 mg, 839.48 μmol, 146.22 μL) 및 HATU (82.99 mg, 218.27 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 정제용 HPLC (방법: 물 중 0.1% 포름산: 아세토니트릴; 칼럼: 엑스 셀렉트 C18 (19 X150) mm, 5 마이크로미터)에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[2-플루오로-4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-히드록시-4-옥소-퀴나졸린 (7 mg, 6.76 μmol, 4% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 941.2 [M+H]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 11.73 (s, 1H), 10.81 (s, 1H), 8.63 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.51-7.46 (m, 2H), 7.27-7.24 (m, 1H), 7.20 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.47 (t, J = 12.00 Hz, 2H), 6.05 (s, 1H), 4.32-4.31 (m, 1H), 3.92-3.85 (m, 5H), 3.64-3.63 (m, 5H), 3.30-3.41 (m, 2H), 3.08 (s, 4H), 2.81-2.50 (m, 4H), 2.08-2.06 (m, 3H), 1.89-1.74 (m, 6H), 1.06-1.02 (m, 3H).
실시예 137
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-히드록시-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-히드록시-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (70 mg, 117.53 μmol), 2-[4-[2-플루오로-4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산 (42.71 mg, 117.53 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 75.95 mg, 587.64 μmol, 102.35 μL) 및 HATU (58.09 mg, 152.79 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 정제용 HPLC (방법: 물 중 0.1% 포름산: 아세토니트릴; 칼럼: 엑스 셀렉트 C18 (19 X150) mm, 5 마이크로미터)에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[2-플루오로-4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-5-히드록시-4-옥소-퀴나졸린 (6 mg, 5.91 μmol, 5% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 941.2 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 11.73 (s, 1H), 10.81 (s, 1H), 9.92 (s, 1H), 8.63 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.48 (t, J = 16.80 Hz, 2H), 7.27-7.20 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 6.46 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.35-4.29 (m, 1H), 3.91-3.85 (m, 5H), 3.64 (s, 5H), 3.30-3.41 (m, 1H), 3.08 (d, J = 7.20 Hz, 3H), 2.69-2.52 (m, 9H), 2.08 (t, J = 3.60 Hz, 1H), 1.91-1.76 (m, 5H), 1.02 (t, J = 5.20 Hz, 3H).
실시예 138
N-[3-[3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-2,4-디플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드
단계 1: 디클로로메탄 (40 mL) 중 2,4-디플루오로아닐린 (5.0 g, 38.73 mmol, 3.94 mL)의 냉각된 0℃ 용액에 트리플루오로 아세트산 무수물 (9.76 g, 46.47 mmol, 6.56 mL)에 이어서 트리에틸아민 (11.76 g, 116.18 mmol, 16.19 mL)을 첨가하고, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (100 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (30 mL), 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 10% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 N-(2,4-디플루오로페닐)-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (7.0 g, 30.97 mmol, 80% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 224.1 [M-H]-
단계 2: N-(2,4-디플루오로페닐)-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (7.0 g, 31.10 mmol)의 용액을 건조 테트라히드로푸란 (60 mL) 중에 넣고, -78℃에서 n-부틸 리튬 (1.6 M, 48.59 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 트리메틸 보레이트 (4.85 g, 46.64 mmol, 5.30 mL)를 동일한 온도에서 반응 혼합물에 첨가하고, 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 1.5N HCl (5 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (60 mL)로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 20% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 [2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페닐]보론산 (5.1 g, 18.36 mmol, 59% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 268.1 [M-H]-
단계 3: 테트라히드로푸란 (40 mL), 아세트산 (4 mL) 중 [2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페닐]보론산 (5.1 g, 18.96 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 과산화수소 (1.84 g, 18.96 mmol, 1.68 mL, 35%)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (30 mL)로 희석하고, 물 (10 mL), 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 25% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 N-(2,4-디플루오로-3-히드록시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (3.5 g, 14.18 mmol, 75% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 240.0, [M-H]-
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 N-(2,4-디플루오로-3-히드록시-페닐)-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (3.4 g, 14.10 mmol)의 용액에 탄산세슘 (4.59 g, 14.10 mmol)을 첨가하고, 이어서 실온에서 메틸 5-히드록시-2-니트로-벤조에이트 (2.78 g, 14.10 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (120 mL)로 희석하고, 물 (40 mL), 염수 (40 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 30% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 메틸 5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페녹시]-2-니트로-벤조에이트 (4.1 g, 9.09 mmol, 64% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 419.0 [M-H]-
단계 5: 물 중 메틸 5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페녹시]-2-니트로-벤조에이트 (4.1 g, 9.76 mmol)의 용액에 0-5℃에서 수산화리튬 1수화물 (695.99 mg, 16.59 mmol, 460.92 μL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 용매를 감압 하에 제거하여 조 화합물을 수득하였다. 조 화합물을 물로 희석하고, 1.5 N HCl로 산성화시키고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페녹시]-2-니트로-벤조산 (3.8 g, 8.53 mmol, 87% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 405.1 [M-H]-
단계 6: 에틸 아세테이트 (20 mL) 중 5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페녹시]-2-니트로-벤조산 (680 mg, 1.67 mmol)의 용액을 질소로 5분 동안 탈기시키고, 탄소 상 10% 팔라듐 (150 mg, 1.41 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, H2 풍선 압력 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 2-아미노-5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페녹시]벤조산 (510 mg, 1.24 mmol, 74% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 377.1 [M+H]+
단계 7: 톨루엔 (7.98 mL) 및 테트라히드로푸란 (3.99 mL) 중 tert-부틸 4-(5-아미노피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (890.95 mg, 3.19 mmol), 2-아미노-5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페녹시]벤조산 (1.2 g, 3.19 mmol)의 용액에 실온에서 트리에틸 오르토포르메이트 (945.37 mg, 6.38 mmol, 1.06 mL) 및 아세트산 (19.15 mg, 318.95 μmol, 18.26 μL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 110℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (5 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-30% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (1.0 g, 1.50 mmol, 47% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 648.6 [M+H]+
단계 8: 에탄올 (15 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (950 mg, 1.47 mmol)의 용액에 실온에서 트리에틸아민 (2.23 g, 22.01 mmol, 3.07 mL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 80℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하고, 조 생성물을 석유 에테르로 세척하여 tert-부틸 4-[5-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.8 g, 1.45 mmol, 99% 수율)를 갈색빛 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 552.2 [M+H]+
단계 9: 디클로로메탄 (7.89 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (400 mg, 725.24 μmol)의 냉각된 0℃ 용액에 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔 (110.41 mg, 725.24 μmol, 108.24 μL)을 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. 시클로펜탄 술포닐 클로라이드 (122.31 mg, 725.24 μmol, 92.28 μL)를 반응 혼합물에 첨가하고, 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (80 mL)으로 희석하고, 물 (30 mL), 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-[3-(시클로펜틸술포닐아미노)-2,6-디플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (230 mg, 303.70 μmol, 42% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 684.2 [M+H]+
단계 10: 1,4 디옥산 (2 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-[3-(시클로펜틸술포닐아미노)-2,6-디플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (230 mg, 336.39 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 (4 M, 3 mL)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하여 N-[2,4-디플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (210 mg, 327.16 μmol, 97% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 584.6, [M+H]+
단계 11: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. N-[2,4-디플루오로-3-[4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (100 mg, 161.27 μmol), 2-[4-[2-플루오로-4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산 (58.60 mg, 146.57 μmol), HATU (61.32 mg, 161.27 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (83.37 mg, 645.09 μmol, 112.36 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 생성된 조 물질을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2,4-디플루오로-3-[3-[2-[4-[2-[4-[2-플루오로-4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (15 mg, 14.68 μmol, 9% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 929.0 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 8.56 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.49-7.34 (m, 3H), 7.00 (s, 1H), 6.49-6.44 (m, 2H), 6.06 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 4.36-4.27 (m, 1H), 3.96-3.81 (m, 4H), 3.68-3.54 (m, 5H), 2.74-2.69 (m, 1H), 2.61-2.57 (m, 2H), 2.57-2.51 (m, 4H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.94-1.51 (m, 13H).
실시예 139
3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 디옥산 (2 mL) 중 N-에틸-N-메틸-술파모일 클로라이드 (342.93 mg, 2.18 mmol, 268.27 μL), tert-부틸 4-[5-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.2 g, 362.62 μmol)의 교반 용액에 실온에서 피리딘 (286.83 mg, 3.63 mmol, 293.28 μL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃로 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 수득된 고체를 여과하여 tert-부틸 4-[5-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.15 g, 180.17 μmol, 50% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS, m/z: 617.2 [M-tBu+H]+.
단계 2: 필요한 아민을 디옥산 중 4M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 (2 mL) 중 4.0 M 염화수소 용액을 사용하여 tert-부틸 4-[5-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (0.15 g, 222.98 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (0.13 g, 169.09 μmol, 76% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z: 573.6 [M+H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (65 mg, 113.52 μmol), 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (41.25 mg, 113.52 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (73.36 mg, 567.60 μmol, 98.87 μL) 및 HATU (43.16 mg, 113.52 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[2-플루오로-4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (17 mg, 18.20 μmol, 16% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI+): 918.0 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ= 10.78 (s, 1H), 9.80 (s, 1H), 8.55 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.45-7.35 (m, 3H), 7.00 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.46-6.42 (m, 2H), 6.00 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.33-4.27 (m, 1H), 3.95-3.78 (m, 4H), 3.75-3.65 (m, 2H), 3.62-3.53 (m, 2H), 3.28-3.18 (m, 3H), 3.09 (q, J = 36.00 Hz, 2H), 3.02-2.93 (m, 2H), 2.82-2.67 (m, 5H), 2.04-2.22 (m, 3H), 1.92-1.80 (m, 1H), 1.73-1.58 (m, 4H), 0.99 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 140
3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[2-플루오로-4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산 (42.67 mg, 106.72 μmol), 6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (65 mg, 106.72 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (68.97 mg, 533.62 μmol, 92.95 μL) 및 HATU (40.58 mg, 106.72 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[2-플루오로-4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (9 mg, 9.21 μmol, 9% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI+): 918.0 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ= 10.78 (s, 1H), 8.56 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.83 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.40-7.36 (m, 2H), 7.30 (t, J = 40.00 Hz, 1H), 7.00 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.47-6.42 (m, 2H), 6.01 (d, J = 7.60 Hz, 1H), -19.20-4.34 (m, 1H), 3.95-3.86 (m, 2H), 3.84-3.77 (m, 2H), 3.75-3.68 (m, 2H), 3.63-3.54 (m, 2H), 3.28-3.20 (m, 2H), 3.06 (q, J = 24.00 Hz, 2H), 2.98 (d, J = 36.00 Hz, 2H), 2.84-2.73 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.64-2.58 (m, 2H), 2.18-2.05 (m, 3H), 1.94-1.82 (m, 1H), 1.72-1.60 (m, 4H), 0.99 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 141
3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로벤조일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: THF (30 mL) 중 N-(2,4-디플루오로페닐)-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드 (3.01 g, 13.39 mmol)의 교반 용액에 헥산 중 2.2M n-부틸리튬을 첨가하고, -78℃에서 아르곤 하에 재밀봉가능한 켐실 병 (1.6 M, 17.57 mL)에 포장하고, 동일한 온도에서 1시간 동안 교반하였다. THF (10 mL) 중 메틸 5-[메톡시(메틸)카르바모일]-2-니트로-벤조에이트 (3.77 g, 14.06 mmol)의 용액을 -78℃에서 반응 혼합물에 적가하고, 동일한 온도에서 2시간 동안 추가로 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 빙냉수로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x100 mL)를 사용하여 추출하였다. 유기 층을 건조시키고, 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 메틸 5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]-2-니트로-벤조에이트 (2.6 g, 5.47 mmol, 41% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ES+): 430.8 [M-H]-.
단계 2: THF (20 mL) 중 메틸 5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]-2-니트로-벤조에이트 (2.6 g, 6.01 mmol)의 교반 용액에 실온에서 수산화리튬 1수화물 98% (1.0 M, 6.01 mL)를 첨가하였다. 내용물을 실온에서 3.5시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 혼합물을 1.5 N HCl에 의해 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]-2-니트로-벤조산 (2.2 g, 4.26 mmol, 71% 수율)을 회백색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ES): 417.3[M - H]-.
단계 3: 건조 에탄올 (20 mL) 중 5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]-2-니트로-벤조산 (750 mg, 1.79 mmol)의 교반 용액에 주위 온도에서 질소 하에 탄소 상 10% 팔라듐 (375.00 mg, 3.52 mmol)을 첨가하였다. 내용물을 25℃에서 수소 주머니 압력 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 혼합물을 디클로로메탄 중 10% 메탄올을 사용하여 질소 하에 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 2-아미노-5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸) 아미노] 벤조일] 벤조산 (400 mg, 813.92 μmol, 45% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ES+): 389.4 [M + H]+.
단계 4: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]벤조산 (404.13 mg, 1.04 mmol), tert-부틸 4-(5-아미노피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (290.76 mg, 1.04 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (308.52 mg, 2.08 mmol, 346.27 μL) 및 아세트산 (12.50 mg, 208.18 μmol, 11.92 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 A-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (90 mg, 88.23 μmol, 8% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI+): 658.0 [M-H]-.
단계 5: 에탄올 (1 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (80 mg, 121.29 μmol)의 용액에 트리에틸아민 (61.37 mg, 606.46 μmol, 84.53 μL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 혼합물을 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고, 농축시켜 생성물 tert-부틸 4-[5-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-벤조일)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (60 mg, 58.52 μmol, 48% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ES+): 508.2 [M-tBu+H]+.
단계 6: 1,4-디옥산 (1.01 mL) 중 tert-부틸 4-[5-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-벤조일)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (55 mg, 97.59 μmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 피리딘 (38.60 mg, 487.97 μmol, 39.47 μL) 및 N-에틸-N-메틸-술파모일 클로라이드 (15.38 mg, 97.59 μmol, 12.03 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 냉수 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 석유 에테르로 연화처리하여 tert-부틸 4-[5-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (60 mg, 76.85 μmol, 79% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ES): 683.0 [M-H]-.
단계 7: 필요한 아민을 디옥산 중 4 M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 A-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 중 4 M 염화수소 (4 M, 328.61 μL)를 사용하여 tert-부틸 4-[5-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (60 mg, 87.63 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (45 mg, 61.61 μmol, 70% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ES): 585.2 [M+H]+.
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 A-E)을 통해 제조하였다. 6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (20 mg, 32.20 μmol), 2-[4-[2-플루오로-4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세트산 (11.70 mg, 29.27 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (12.49 mg, 96.61 μmol, 16.83 μL) 및 HATU (18.37 mg, 48.30 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-3-[2-[4-[2-[4-[2-플루오로-4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (3 mg, 3.00 μmol, 9% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 930.3 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.80 (s, 1H), 8.57 (d, J = 14.40 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 20.00 Hz, 1H), 8.36 (dd, J = 2.40, 8.60 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 7.73-7.67 (m, 1H), 7.36 (t, J = 1.60 Hz, 1H), 7.00 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 12.00 Hz, 2H), 6.05 (s, 1H), 4.30-4.40 (m, 1H), 3.87 (d, J = 28.40 Hz, 4H), 3.66-3.62 (m, 3H), 3.39-3.34 (m, 2H), 2.74-2.73 (m, 3H), 2.60-2.53 (m, 8H), 2.08-2.07 (m, 2H), 1.71 (s, 2H), 1.24 (s, 4H), 1.01 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 142 및 143
단계 1: 출발 화합물을 실시예 84에서의 절차에 따라 합성하였다. N,N-디메틸포름아미드 중 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 포타슘 tert-부톡시드 (2.5 당량) 및 2-메틸-2-[메틸(술파모일)아미노]프로판 (2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 화합물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 2: 디클로로메탄 중 tert-부틸 4-[5-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 디옥산 중 4 N HCl (10 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 용매를 감압 하에 제거하고, 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르 (MTBE)로 연화처리하여 생성물 6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린을 수득하였다.
실시예 142
6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (1 당량) 및 6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (1 당량)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하였다. 이에 이어서, 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 역상 HPLC에 의해 정제하여 목적 화합물 6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3R)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린을 수득하였다.
실시예 143
6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (1 당량) 및 6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (1 당량)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하였다. 이에 이어서, 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 역상 HPLC에 의해 정제하여 목적 화합물 6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[4-[4-[[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린을 수득하였다.
실시예 A1 - A3
중간체 1
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[2-(4-피페리딜)에틸]퀴나졸린 히드로클로라이드
tert-부틸 4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (386 mg, 614 μmol)를 1,4-디옥산 (2.4 ml) 중에 용해시켰다. 1,4-디옥산 중 4 M HCl (3.07 mL, 12.3 mmol, 당량: 20)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 고진공 하에 건조시켜 표제 화합물을 무색 고체 (386 mg, 90% 순도, 100% 수율)로서 수득하였다. m/z 529.4 [M+H]+, ESI pos.
중간체 2
2-[4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]-1-피페리딜]아세트산, 2,2,2-트리플루오로아세트산 염
DMF (1 ml) 중 중간체 1 (100 mg, 142 μmol, 당량: 1), tert-부틸 2-브로모아세테이트 (55.2 mg, 283 μmol, 당량: 2) 및 DIPEA (110 mg, 148 μl, 849 μmol, 당량: 6)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 붓고, AcOEt (2x)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 물로 3회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 담황색 왁스상 고체 90 mg을 수득하였다. 잔류물을 DCM (1 ml) 중에 용해시키고, TFA (444 mg, 300 μl, 3.89 mmol, 당량: 27.8)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 진공 하에 농축시키고, 고진공 하에 건조시켜 표제 화합물을 황색 고체 (125 mg, 80% 순도, 100% 수율)로서 수득하였다.
중간체 3
N-[2-시아노-4-플루오로-3-[4-옥소-3-[2-(4-피페리딜)에틸]퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 히드로클로라이드
tert-부틸 4-(2-(6-(2-시아노-3-(시클로펜탄술폰아미도)-6-플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (380 mg, 595 μmol, 당량: 1)를 1,4-디옥산 (2.3 ml) 중에 용해시켰다. 1,4-디옥산 중 4 M HCl (2.97 ml, 11.9 mmol, 당량: 20)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시키고, 고진공 하에 건조시켜 표제 화합물을 황색 고체 (370 mg, 90% 순도, 97% 수율)로서 수득하였다. m/z 538.5 [M-H]-, ESI neg.
실시예 A1-A3에 대한 일반적 절차:
DMF (0.1 M) 중 아민 중간체 (또는 그의 염) (1 당량), 카르복실산 중간체 (1.2 당량), HATU (1.5 당량) 및 DIPEA (3-5 당량)의 용액을 실온에서 교반하였다. 반응물을 LCMS에 의해 모니터링하고, 추가의 반응물, HATU 및/또는 DIPEA를 필요한 경우에 첨가하였다. 조 반응 혼합물을 정제용 역상 HPLC에 의해 정제하였다.
실시예 A1
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린
실시예 A1 - A3에 대한 일반적 절차에 따라, 2-(4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)피페리딘-1-일)아세트산 히드로클로라이드 (30 mg, 53 μmol) 및 중간체 1 (30 mg, 69 μmol)로부터 표제 화합물을 담회색 고체 (33 mg, 73%)로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 856.7 [M+H]+.
실시예 A2
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]-2-옥소-에틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린, 2,2,2-트리플루오로아세트산 염
실시예 A1-A3에 대한 일반적 절차에 따라, 3-((4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (14 mg, 43 μmol) 및 중간체 2 (30 mg, 43 μmol)로부터 표제 화합물을 담회색 고체 (14 mg, 33%)로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 856.4 [M+H]+.
실시예 A3
N-[2-시아노-3-[3-[2-[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로펜탄술폰아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산 염
실시예 A1-A3에 대한 일반적 절차에 따라, 2-(4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)피페리딘-1-일)아세트산 히드로클로라이드 (38 mg, 62 μmol에 이어서 추가의 15 mg, 33 μmol) 및 중간체 1 (33 mg, 52 μmol)로부터 표제 화합물을 담녹색 고체 (18 mg, 34% 수율)로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 867.6 [M+H]+.
스캐폴드 B에 대한 반응식:
단계 A - 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A): 톨루엔: 테트라히드로푸란 (5:1) 중 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 무수 트리에틸 오르토포르메이트 (2 당량)를 첨가하고, 이어서 아민 (상업적으로 입수가능하거나 또는 본원에 기재된 바와 같음) (2, 1 당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 밀봉 튜브 내에서 110℃에서 18시간 동안 가열하였다. 아민 염 (HCl, TFA 등)을 사용한 고리화의 경우, 촉매 아세트산 (0.1 당량) 첨가는 보다 우수한 전환을 제공하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물에 수성 중탄산나트륨 용액을 첨가하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 목적 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 5% 메탄올 - 디클로로메탄을 사용하여 정제하여 퀴나졸리논 중간체 (3)를 수득하였다.
단계 B - O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 B-B): N,N-디메틸포름아미드/THF (10 mL) 중 퀴나졸리논 중간체 (3, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 탄산세슘/포타슘 tert-부톡시드 (1.1 당량) 및 상업적으로 입수가능한 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (4, 1.1 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 중간체 (5)를 수득하였다.
단계 C - 술포모일화에 대한 일반적 절차 (절차 B-C): N,N-디메틸포름아미드 중 중간체 5 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (2.5 당량) 및 술파모일 유도체 (상업적으로 입수가능하거나 또는 본원 방법 I 및 II에 기재된 바와 같음; 2 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20에서 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 술폰아미드 중간체 (7)를 수득하였다.
주: 대다수의 반응에 대해, 물의 첨가 후, 고체의 침전이 관찰되었다. 이들 고체를 여과지를 통해 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 적절한 순도의 술폰아미드 중간체 (7)를 수득하였다.
단계 D - N-Boc 탈보호에 대한 일반적 절차 (절차 B-D): 술폰아미드 중간체 (7, 1 당량)의 용액을 디클로로메탄 중에 넣고, 0℃에서 TFA (5 당량) 또는 디옥산 중 4N HCl (10 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 메틸 tert-부틸 에테르 (MTBE)로 연화처리하여 표적화 리간드 (8)를 수득하였다.
단계 E - 산-아민 커플링에 대한 일반적 절차 (절차 B-E): N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 중간체 산 (9, 1 당량) 및 아민 (8, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 질소 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 정제에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 목적 화합물 (10)을 수득하였다.
단계 E - 산-아민 커플링에 대한 대안적 일반적 절차 (절차 B-F): N,N-디메틸포름아미드 중 산 (9, 1 당량) 및 아민 (8, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량) 및 COMU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올 (3x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 역상 정제에 의해 조 물질로부터 정제하고, 분획을 동결건조시켜 목적 화합물 (10)을 수득하였다.
실시예 144
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]에틸]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 6-히드록시-3H-퀴나졸린-4-온 (5 g, 30.84 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (3.81 g, 33.92 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (5.33 g, 33.92 mmol, 3.92 mL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 B-B)에 따라 합성하여 화합물 3,6-디플루오로-2-[(4-옥소-3H-퀴나졸린-6-일)옥시]벤조니트릴 (6.8 g, 22.21 mmol, 72% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 300.20 [M + H]+
단계 2a: 디클로로메탄 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2 g, 8.72 mmol, 1.92 mL)의 교반 용액에 0℃에서 트리에틸아민 (882.54 mg, 8.72 mmol, 1.22 mL)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 p-톨루엔술포닐 클로라이드 (1.83 g, 9.59 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온으로 12시간 동안 가온하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[2-(p-톨릴술포닐옥시)에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.8 g, 조 물질)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 284.30 [M + H-CO2 tBu]+
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (15 mL) 중 3,6-디플루오로-2-[(4-옥소-3H-퀴나졸린-6-일)옥시]벤조니트릴 (1.5 g, 5.01 mmol)의 교반 용액에 실온에서 포타슘 tert-부톡시드 (618.75 mg, 5.51 mmol)에 이어서 tert-부틸 4-[2-(p-톨릴술포닐옥시)에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.92 g, 5.01 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.4 g, 3.93 mmol, 78% 수율)를 연갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 509.3 [M - H]-
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.5 g, 979.37 μmol), 탄산세슘 (797.75 mg, 2.45 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (270.68 mg, 1.96 mmol)을 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 242.32 μmol, 25% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 529.3 [M + H-CO2 tBu]+
단계 4: 필요한 아민을 tert-부틸 4-[2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]에틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 286.30 μmol) 및 TFA (592.00 mg, 5.19 mmol, 0.4 mL)를 사용하여 절차 B-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[2-(4-피페리딜)에틸]퀴나졸린 (200 mg, 조 물질)을 연갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 529.2 [M + H]+
단계 5: 표제 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[2-(4-피페리딜)에틸]퀴나졸린 (20 mg, 37.84 μmol), HATU (17.26 mg, 45.40 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (24.45 mg, 189.18 μmol, 32.95 μL) 및 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (14.55 mg, 37.84 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 표제 화합물을 조 생성물로서 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 (방법: 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴; 칼럼: 브리지 C8(19 X150)MM, 5MIC)에 의해 다시 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]에틸]-4-옥소-퀴나졸린 (6.93 mg, 7.65 μmol, 20% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 895.30 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.90 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.65-7.64 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.34 (s, 2H), 7.05 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.36-4.32 (m, 2H), 4.32-3.98 (m, 6H), 3.10-2.90 (m, 6H), 2.67 (s, 3H), 2.67-2.60 (m, 6H), 2.25-2.10 (m, 2H), 2.05-1.85 (m, 4H), 1.84-1.70 (m, 3H), 1.70-1.45 (m, 5H), 1.25-1.10 (m, 1H), 1.03 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 145
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]프로필]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 6-히드록시-3H-퀴나졸린-4-온 (5 g, 30.84 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (3.81 g, 33.92 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (5.33 g, 33.92 mmol, 3.92 mL)을 사용하여 절차 B-B에 따라 합성하여 화합물 3,6-디플루오로-2-[(4-옥소-3H-퀴나졸린-6-일)옥시]벤조니트릴 (6.8 g, 22.21 mmol, 72% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 300.2 [M + H]+
단계 2a: 디클로로메탄 (15 mL) 중 4-(3-히드록시프로필)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.5 g, 10.27 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 트리에틸아민 (2.60 g, 25.68 mmol, 3.58 mL)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 p-톨루엔 술포닐 클로라이드 (2.15 g, 11.30 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온으로 12시간 동안 가온하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 15% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-(p-톨릴술포닐옥시)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.2 g, 5.42 mmol, 53% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 298.30 [M + H-CO2 tBu]+
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 3,6-디플루오로-2-[(4-옥소-3H-퀴나졸린-6-일)옥시]벤조니트릴 (1.5 g, 5.01 mmol)의 교반 용액에 실온에서 포타슘 tert-부톡시드 (618.75 mg, 5.51 mmol)에 이어서 tert-부틸 4-[3-(p-톨릴술포닐옥시)프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.19 g, 5.51 mmol)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (2.4 g, 3.66 mmol, 73% 수율)를 연갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 523.3 [M - H]-
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (700 mg, 1.33 mmol), 탄산세슘 (1.09 g, 3.34 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (368.81 mg, 2.67 mmol)을 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 355.98 μmol, 27% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 641.3 [M - H]-
단계 4: 필요한 아민을 tert-부틸 4-[3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]프로필]피페리딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 404.52 μmol) 및 TFA (740.00 mg, 6.49 mmol, 0.5 mL)를 사용하여 절차 B-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[3-(4-피페리딜)프로필]퀴나졸린 (280 mg, 조 물질)을 연갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 543.3 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[3-(4-피페리딜)프로필]퀴나졸린 (20 mg, 30.46 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (13 mg, 30.89 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.50 mL) 및 HATU (14 mg, 36.82 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 표제 화합물을 조 생성물로서 수득하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조시켜 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[3-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]프로필]-4-옥소-퀴나졸린 (13.90 mg, 15.22 μmol, 50% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 909.20 [M + H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.90 (s, 1H), 9.73 (bs, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.92 Hz, 1H), 7.66-7.63 (m, 2H), 7.53 (t, J = 9.76 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.34 (dd, J = 6.92, 8.00 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 8.44 Hz, 1H), 4.36-4.32 (m, 2H), 3.98-3.93 (m, 5H), 3.82-3.79 (m, 3H), 3.04 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.98-2.81 (m, 1H), 2.75-2.70 (m, 3H), 2.68-2.67 (m, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.56-2.50 (m, 2H), 2.37-2.33 (m, 1H), 2.19-2.14 (m, 1H), 2.10-1.90 (m, 5H), 1.75-1.65 (m, 4H), 1.55-1.45 (m, 1H), 1.26-1.23 (m, 2H), 1.10-1.07 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.16 Hz, 3H).
실시예 146
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]피라졸-4-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1.5 g, 9.80 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (2.18 g, 14.69 mmol, 2.44 mL) 및 tert-부틸 4-(4-아미노피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.61 g, 9.80 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 3% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.2 g, 2.53 mmol, 26% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 409.9 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[4-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (700 mg, 1.70 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (210.00 mg, 1.87 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (293.99 mg, 1.87 mmol, 216.17 μL)을 사용하여 일반적 절차 (절차 B-B)에 따라 합성하여 tert-부틸 4-[4-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.8 g, 조 물질)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 547.2 [M + H]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[4-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (300 mg, 546.91 μmol), 탄산세슘 (445.48 mg, 1.37 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (151.15 mg, 1.09 mmol)을 사용하여 일반적 절차 (절차 B-C)에 따라 합성하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (120 mg, 173.70 μmol, 32% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 665.1 [M - H]+
단계 4: 필요한 아민을 tert-부틸 4-[4-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (120 mg, 179.99 μmol) 및 TFA (20.52 mg, 179.99 μmol, 13.87 μL)를 사용하여 일반적 절차 (절차 B-D)에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]퀴나졸린의 TFA 염 (150 mg, 조 물질)을 연갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): [M - H]+ 565.20
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]퀴나졸린 (20 mg, 35.30 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (13 mg, 30.89 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.50 mL) 및 HATU (14 mg, 36.82 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 표제 화합물을 조 생성물로서 수득하였다. 조 물질을 정제용 HPLC 정제 방법: 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조시켜 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[1-[1-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]피라졸-4-일]-4-옥소-퀴나졸린 (9.60 mg, 10.24 μmol, 35% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 933.20[M + H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.90 (s, 1H), 9.89 (bs, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 8.40, 13.00 Hz, 1H), 7.59 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 3.20 Hz, 2H), 7.38-7.34 (m, 1H), 7.06 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 4.57-4.50 (m, 1H), 4.41 (d, J = 43.60 Hz, 1H), 4.35-4.32 (m, 1H), 4.15-4.00 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.06 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.88-2.85 (m, 3H), 2.76-2.68 (m, 3H), 2.65 (s, 3H), 2.64-2.61 (m, 2H), 2.37-2.33 (m, 1H), 2.19-2.11 (m, 4H), 2.08-2.00 (m, 5H), 1.96-1.76 (m, 2H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 147
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (3.50 g, 22.88 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (3.70 g, 24.96 mmol, 4.15 mL) 및 tert-부틸 2-아미노-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (5 g, 20.80 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (4.5 g, 11.39 mmol, 55% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 386.0 [M + H]+.
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (4.5 g, 11.67 mmol), 포타슘 3급 부톡시드 (1.57 g, 14.01 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (2.02 g, 12.84 mmol, 1.48 mL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 B-B)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (6.0 g, 11.01 mmol, 94% 수율)를 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 523.2 [M + H]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 2-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (3.0 g, 5.74 mmol), 탄산세슘 (5.61 g, 17.22 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (1.59 g, 11.48 mmol)을 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 ml)로 희석하고, 생성된 고체를 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트 (2 x 60 ml)로 추출하고, 분리된 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (2.2 g, 3.23 mmol, 56% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 641.2 [M + H]+.
단계 4: 필요한 아민을 트리플루오로아세트산 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 트리플루오로아세트산 99% (3.92 g, 34.34 mmol, 2.65 mL)를 사용하여 tert-부틸 2-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트 (2.2 g, 3.43 mmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (2.1 g, 3.13 mmol, 91% 수율)을 액체 검으로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 539.0 [M + H]+.
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (161.11 mg, 381.89 μmol), 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.25 g, 381.89 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (246.79 mg, 1.91 mmol, 332.60 μL) 및 HATU (217.81 mg, 572.84 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 0.1% 포름산 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[7-[2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소-퀴나졸린 (194 mg, 213.29 μmol, 56% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 908.3[M + H]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ= 10.56 (s, 1H), 9.81 (bs, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.66-7.63 (m, 3H), 7.45 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 4.98 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.92 (t, J = 6.40 Hz, 3H), 3.53-3.43 (m, 5H), 3.05 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.76 (t, J = 6.80 Hz, 5H), 2.67 (s, 3H), 2.35-2.33 (m, 5H), 1.96-1.77 (m, 5H), 1.77-1.61 (m, 4H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 148
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 밀봉 튜브에 들은 N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 1-(6-브로모-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (1.5 g, 4.64 mmol)의 용액에 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (2.87 g, 9.28 mmol) 및 플루오린화세슘 (1.41 g, 9.28 mmol, 342.28 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 탈기시킨 후, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐 (II), 디클로로메탄과의 착물 (758.11 mg, 928.38 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (70 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3 x 70 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 혼합물을 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (1.85 g, 3.24 mmol, 70% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 426.3 [M + H]+.
단계 2: 메탄올 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (1.85 g, 4.35 mmol)의 용액에 디히드록시팔라듐 (3.5 g, 24.92 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시켰다. 내용물을 실온에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올 (200 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일] 피페리딘-1-카르복실레이트 (1.5 g, 2.47 mmol, 57% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 321.8 [M-Boc + H]+.
단계 3: 디클로로메탄 (20 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.5 g, 3.51 mmol)의 용액에 0℃에서 염화수소 용액 (디옥산 중 4.0 M, 15 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 1-[1-메틸-6-(4-피페리딜) 인다졸-3-일] 헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (1.45 g, 3.99 mmol)을 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.57 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.61 (d, J = 11.20 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.03 (d, J = 11.20 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.91 (t, J = 8.80 Hz, 2H), 3.03 (d, J = 14.40 Hz, 3H), 2.76 (t, J = 9.20 Hz, 2H), 2.44-2.32 (m, 3H), 1.98-1.87 (m, 3H).
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 및 트리에틸아민 (2.02 g, 19.93 mmol, 2.78 mL) 중 1-[1-메틸-6-(4-피페리딜)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (1.45 g, 3.99 mmol)의 용액에 실온에서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (1.17 g, 5.98 mmol, 876.70 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 빙냉수 (50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (3 x 70 mL)로 추출하였다. 유기 층을 냉수 (3 x 30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세테이트 (1.35 g, 2.99 mmol, 75% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 442.3 [M + H]+.
단계 5: 디클로로메탄 (15 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세테이트 (1.35 g, 3.06 mmol)의 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 염화수소 용액 (디옥산 중 4.0M, 14 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜] 아세트산 (1.45 g, 3.44 mmol)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 386.2 [M + H]+.
단계 6: 표제 화합물을 COMU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-F)을 통해 제조하였다. 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (195.62 mg, 463.69 μmol), 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.25 g, 421.54 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (272.40 mg, 2.11 mmol, 367.12 μL) 및 [[(Z)-(1-시아노-2-에톡시-2-옥소-에틸리덴)아미노]옥시-모르폴리노-메틸렌]-디메틸-암모늄;헥사플루오로포스페이트 (198.58 mg, 463.69 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (182 mg, 195.61 μmol, 46% 수율)을 분홍색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 922.3 [M - H]-; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.57 (s, 1H), 9.76 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.00 Hz, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (d, J = 3.20 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.20-4.13 (m, 2H), 3.98 (s, 1H), 3.91 (t, J = 6.80 Hz, 3H), 3.80-3.74 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.06 (d, J = 7.20 Hz, 2H), 2.78-2.70 (m, 6H), 2.66 (s, 4H), 2.49-2.38 (m, 4H), 2.14-2.07 (m, 1H), 2.05-1.89 (m, 4H), 1.83-1.50 (m, 5H), 1.04 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 149
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[7-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 3-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.25 g, 433.22 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (182.34 mg, 433.22 μmol), HATU (215.28 mg, 563.19 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (296.80 mg, 2.30 mmol, 0.4 mL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 생성된 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 [이동상 A: 물 중 0.1% 아세트산암모늄, 이동상 B: 아세토니트릴; 칼럼: 100 g 레디셉® Rf C18]에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[7-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-7-아자스피로[3.5]노난-2-일]-4-옥소-퀴나졸린 (130 mg, 139.43 μmol, 32% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 907.4 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.90 (s, 1H), 9.83 (bs, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.77 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 6.00, 7.20 Hz, 2H), 7.51-7.60 (m, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.34 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.91-5.01 (m, 1H), 4.34 (dd, J = 5.20, 9.80 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.41-3.55 (m, 4H), 3.3-3.21(m, 1H), 3.01-3.06 (m, 2H), 2.75-2.91 (m, 1H), 2.61-2.71 (m, 6H), 2.52-2.58 (m, 2H), 2.25-2.45 (m, 5H), 2.13-2.21 (m, 2H), 1.90-2.05 (m, 4H), 1.55-1.79 (m, 5H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 150
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트.HCl (15 g, 51.23 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (7.85 g, 51.23 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (10.63 g, 71.72 mmol, 11.93 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 석유 에테르 중 20% 에틸 아세테이트로 연화처리하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (12.0 g, 25.29 mmol, 49% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 402.20[M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (12.0 g, 25.11 mmol), 탄산세슘 (24.54 g, 75.33 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (5.13 g, 32.64 mmol, 3.77 mL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 B-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (9.0 g, 16.54 mmol, 66% 수율)를 회백색 고체로서 1.8 g과 함께 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 539.2[M + H]+.
단계 3: tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (9.0 g, 16.54 mmol)를 키랄 SFC 정제에 적용하여 거울상이성질체를 분할하였다. 라세미 중간체를 룩스 A1 칼럼 (250 mm x 30 mm; 5마이크로미터)을 사용하는 키랄 SFC 방법을 사용하여 공용매로서의 메탄올 중 0.5% 이소-프로필아민과 40% 이소프로필 알콜/CO2 (유량: 4 ml/분; 유출구 압력: 100 bar)로 용리시키면서 키랄 분해하여 제1 용리 이성질체 3.5 g 및 제2 용리 이성질체 3.7 g을 수득하였다.
2종의 이성질체의 배위를 하기와 같이 임의적으로 할당하였다.
거울상이성질체 1: 제1 용리 이성질체를 tert-부틸 (S)-3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
거울상이성질체 2: 제2 용리 이성질체를 tert-부틸 (R)-3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
단계 4a: MeOH (20 mL) 중 N-에틸-N-메틸-술파모일 클로라이드 (10 g, 63.44 mmol, 7.81 mL)의 용액에 0℃에서 MeOH 중 7M 암모니아 (7 M, 30 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 물 (150 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (100 ml), 염수 (100 ml)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (7.0 g, 48.12 mmol, 76% 수율)을 무색 액체로서 수득하였다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 6.65 (s, 2H), 2.98 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.61 (s, 3H), 1.09 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
단계 4: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (3.7 g, 6.87 mmol), 탄산세슘 (5.60 g, 17.18 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (1.42 g, 10.31 mmol)을 사용하여 일반적 절차 (절차 B-C)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 석유 에테르 중 10% 디클로로메탄으로 연화처리하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2.8 g, 3.58 mmol, 52% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 601.0 [M+H- tBu]+
단계 5: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4M, 36.68 mL)을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2.7 g, 4.11 mmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸의 HCl 염 (2.7 g, 3.90 mmol, 95% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 557.0 [M+H]+
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (300 mg, 404.67 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (155.57 mg, 404.67 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (209.21 mg, 1.62 mmol, 281.95 μL) 및 HATU (153.87 mg, 404.67 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (102 mg, 107.04 μmol, 26% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 923.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.89 (s, 1H), 9.86 (bs, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 8.80, 3.20 Hz, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.44 (bs, 1H), 7.35 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.35-4.32 (m, 1H), 4.18-4.13 (m, 2H), 3.98 (d, J = 2.00 Hz, 3H), 3.81-3.72 (m, 2H), 3.51 (bs, 2H), 3.47-3.36 (m, 3H), 3.05 (d, J = 7.60 Hz, 3H), 2.83-2.79 (m, 1H), 2.68-2.61 (m, 6H), 2.51-2.46 (m, 2H), 2.30-2.14 (m, 3H), 2.10-1.90 (m, 4H), 1.86-1.62 (m, 4H), 1.60-1.52 (m, 1H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 151
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (170 mg, 286.64 μmol), 2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세트산 (120.65 mg, 286.64 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (148.18 mg, 1.15 mmol, 199.71 μL) 및 HATU (108.99 mg, 286.64 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (68 mg, 68.42 μmol, 24% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 923.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.86 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.92-7.81 (m, 1H), 7.80 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 9.00, 3.20 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 9.20 Hz, 2H), 7.36 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.35-5.29 (m, 1H), 4.25 (dd, J = 9.40, 5.20 Hz, 1H), 4.17-4.10 (m, 2H), 3.88 (m, 3H), 3.79-3.70 (m, 3H), 3.51-3.49 (m, 1H), 3.35-3.40 (m, 2H), 3.18-3.13 (m, 2H), 2.78 (s, 3H), 2.73 (s, 1H), 2.70-2.51 (m, 2H), 2.60-2.54 (m, 1H), 2.34-2.28 (m, 3H), 2.18-2.15 (m, 1H), 2.08-2.05 (m, 1H), 1.89 (s, 1H), 1.80-1.64 (m, 7H), 1.35-1.24 (m, 2H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 152
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (180 mg, 292.88 μmol), 2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (127.96 mg, 292.88 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (151.41 mg, 1.17 mmol, 204.06 μL) 및 HATU (122.50 mg, 322.17 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 43% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (101 mg, 100.59 μmol, 34% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 939.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.85 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.87 (bs, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 9.00, 2.80 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 3.60 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.47-5.29 (m, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.32-4.25 (m, 1H), 4.30-4.20 (m, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.85-3.74 (m, 1H), 3.72-3.61 (m, 1H), 3.50 (d, J = 11.60 Hz, 3H), 3.28-3.16 (m, 4H), 2.79 (s, 3H), 2.63-2.56 (m, 4H), 2.40-2.28 (m, 4H), 2.19-2.10 (m, 2H), 2.09-2.01 (m, 1H), 1.76-1.68 (m, 7H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 153
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-아미노-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (5.0 g, 19.66 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (3.01 g, 19.66 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (7.28 g, 49.14 mmol, 8.17 mL) 및 아세트산 (118.04 mg, 1.97 mmol, 112.42 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (5.6 g, 13.72 mmol, 70% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. 라세미 고리화 화합물을 키랄 SFC 정제를 사용하여 키랄 분해하였다. 라세미 고리화 화합물 3.0 g을 키랄셀 OX-H 칼럼을 사용하는 SFC 정제에 적용하였다 (유량: 3 ml/분, 공용매: 30% 메탄올, 유출구 압력: 100 bar, 온도: 35℃). SFC 정제 후에, 제1 용리 이성질체 (거울상이성질체 1) 1.3 g 및 제2 용리 이성질체 (거울상이성질체 2) 1.3 g을 수득하였다. 제1 용리 이성질체의 입체화학을 S-거울상이성질체로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 이성질체를 R-거울상이성질체로서 임의적으로 할당하였다. LCMS m/z (ESI): 400.2 [M + H]+
2종의 이성질체의 배위를 하기와 같이 임의적으로 할당하였다.
거울상이성질체 1: 제1 용리 이성질체를 tert-부틸 3-[(3S)-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
거울상이성질체 2: 제2 용리 이성질체를 tert-부틸 3-[(3R)-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트로서 임의적으로 할당하였다.
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[(3S)-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.30 g, 3.25 mmol), 포타슘 tert-부톡시드 (730.32 mg, 6.51 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (511.21 mg, 3.25 mmol, 375.89 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 B-B)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.2 g, 1.71 mmol, 53% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 481.1 [M + H- tBu]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3S)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.20 g, 2.24 mmol), 탄산세슘 (1.82 g, 5.59 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (618.10 mg, 4.47 mmol)을 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (960.0 mg, 1.01 mmol, 45% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 653.2 [M - H]-
단계 4: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 염화수소 용액 (4M, 3.0 mL)을 사용하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400.00 mg, 610.92 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 수득된 잔류물을 디에틸 에테르 (2 x 10 mL)로 연화처리하고, 감압 하에 건조시켜 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (360.0 mg, 542.20 μmol, 89% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 555.2 [M + H]+
단계 5: 표제 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (100 mg, 156.86 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (60.30 mg, 156.86 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (81.09 mg, 627.44 μmol, 109.29 μL) 및 HATU (59.64 mg, 156.86 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (40 mg, 40.08 μmol, 26% 수율)을 회분 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 921.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.89 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 8.44 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 9.00, 3.20 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.36 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.12-5.01 (m, 1H), 4.35 (dd, J = 5.20, 10.00 Hz, 1H), 3.99 (s, 4H), 3.69-3.55 (m, 1H), 3.44-3.32 (m, 5H), 3.10-3.08 (m, 3H), 2.93-2.80 (m, 2H), 2.71-2.52 (m, 6H), 2.43-2.31 (m, 2H), 2.16-1.99 (m, 9H), 1.86-1.83 (m, 3H), 1.66-1.57 (m, 3H), 1.51-1.43 (m, 1H), 1.07-1.03 (m, 3H).
실시예 154
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (192.70 mg, 456.78 μmol), 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.27 g, 456.78 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (295.18 mg, 2.28 mmol, 397.81 μL) 및 HATU (260.52 mg, 685.17 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (18 mg, 18.52 μmol, 4% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 922.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.56 (s, 1H), 9.65 (bs, 1H), 8.44 (d, J = 4.00 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (s, 2H), 7.06 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 5.04 (t, J = 11.60 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.92 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.59-3.51 (m, 1H), 3.49-3.34 (m, 3H), 3.15 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.96-2.81 (m, 2H), 2.76 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.68-2.67 (m, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.12-2.09 (m, 4H), 1.98-1.96 (m, 4H), 1.85-1.65 (m, 3H), 1.64-1.47 (m, 6H), 1.03 (t, J = 10.80 Hz, 3H).
실시예 155
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (3.14 g, 20.49 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (4.14 g, 27.94 mmol, 4.65 mL) 및 tert-부틸 9-아미노-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (5 g, 18.63 mmol)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 9-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (5.6 g, 10.78 mmol, 58% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 414.2 [M + H]+.
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 9-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (5.5 g, 13.30 mmol), 탄산세슘 (13.00 g, 39.90 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (4.18 g, 26.60 mmol, 3.07 mL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 B-B)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 9-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (3.6 g, 6.05 mmol, 46% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 551.2 [M + H]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 tert-부틸 9-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (3.6 g, 6.54 mmol), 탄산세슘 (2.13 g, 6.54 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (903.53 mg, 6.54 mmol)을 사용하여 중간체를 절차 B-C에 따라 합성하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하였다. 반응 혼합물을 여과지를 통해 여과하여 형광 불순물을 제거하였다. 여과물을 에틸 아세테이트 (3 x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3 x 50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (1.8 g, 2.27 mmol, 35% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 669.2 [M + H]+.
단계 4: 필요한 아민을 디옥산 중 4M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 5℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 99% 중 염화수소 (4 M, 20 mL)를 사용하여 tert-부틸 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (1.8 g, 2.69 mmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (1.8 g, 2.41 mmol, 90% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 569.2 [M + H]+.
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (76.69 mg, 181.78 μmol), 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (0.1 g, 165.26 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (213.58 mg, 1.65 mmol, 287.85 μL) 및 HATU (69.12 mg, 181.78 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (36.54 mg, 37.20 μmol, 23% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 935.9 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.56 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.53 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 7.83-7.81 (m, 1H), 7.79 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.50-7.46 (m, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.38 (t, J = 2.40 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.92 (t, J = 6.80 Hz, 3H), 3.55 (s, 4H), 3.19-3.13 (m, 6H), 2.78-2.75 (m, 5H), 2.21-2.01 (m, 6H), 1.93-1.65 (m, 6H), 1.50-1.29 (m, 4H), 1.08-1.04 (m, 3H).
실시예 156
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (100 mg, 175.85 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (81.12 mg, 211.02 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (113.64 mg, 879.26 μmol, 153.15 μL) 및 HATU (73.55 mg, 193.44 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 아세토니트릴 중 40-45% 포름산 완충제로 용리시켜 정제하여 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (25 mg, 25.37 μmol, 14% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 935.2 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.91 (s, 1H), 10.20 (bs, 1H), 9.51 (bs, 1H), 8.54 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.81-7.90 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 2H), 7.48 (dd, J = 4.40, 9.00 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.37 (t, J = 2.40 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 4.56 (t, J = 12.40 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 5.20, 10.00 Hz, 2H), 4.21-4.51 (m, 1H), 3.99(s, 3H), 3.51-3.62 (m, 3H), 3.24-3.45 (m, 2H), 2.92-3.21 (m, 4H), 2.79 (s, 3H), 2.31-2.71 (m, 4H), 1.98-2.21 (m, 8H), 1.80-1.91 (m, 2H), 1.65-1.80 (m, 4H), 1.25-1.45 (m, 4H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 157
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 에탄올 (250 mL) 중 4-브로모-2,5-디플루오로-벤조니트릴 (25 g, 114.68 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 메틸히드라진 (85% 수용액, 21.13 g, 458.72 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 80℃로 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 물 (80 ml)로 켄칭하고, 수득된 침전물을 여과하고, 건조시켜 6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-아민 (17.5 g, 70.71 mmol, 62% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 246.0 [M + H]+
단계 2a: 플라스크 (2.00 L) 내 DBU (200 g, 1.31 mol, 1.00 당량)와 락트산 (118 g, 1.31 mol, 97.5 mL, 1.00 당량)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼징하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 질소 분위기 하에 12시간 동안 교반하여 [DBU]를 수득하였다. 농후한 용액으로서의 [Lac] 이온성 액체 (316 g, 조 물질)를 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 2: [DBU].[Lac] 이온성 액체 (18 g) 중 6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-아민 (17.5 g, 71.70 mmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 에틸 프로프-2-에노에이트 (50.25 g, 501.92 mmol, 54.38 mL)를 첨가하였다. 생성된 용액을 90℃로 48시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 물 (100 ml)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-60%)를 사용하여 정제하여 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)아미노]프로파노에이트 (11.0 g, 30.97 mmol, 43% 수율)를 적색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 344.4 [M + H]+.
단계 3: 에탄올 (110 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)아미노]프로파노에이트 (11 g, 31.96 mmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 아세트산나트륨 (15.73 g, 191.76 mmol, 10.28 mL) 및 브로민화시아노겐 (16.93 g, 159.80 mmol, 8.38 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-시아노-아미노]프로파노에이트 (12 g, 25.98 mmol, 81% 수율)를 황색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 371.0 [M+H]+
단계 4: 톨루엔 (120 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-시아노-아미노]프로파노에이트 (12 g, 32.50 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 염화인듐 (III) (718.91 mg, 3.25 mmol) 및 아세트알독심 (5.76 g, 97.51 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃로 1시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-80%)를 사용하여 정제하여 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-카르바모일-아미노]프로파노에이트 (8.0 g, 20.33 mmol, 63% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 387.0 [M + H]+.
단계 5: 아세토니트릴 (80 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)-카르바모일-아미노]프로파노에이트 (8.0 g, 20.66 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 벤질 트리메틸암모늄 히드록시드 (메탄올 중 25% 용액, 4.15 g, 6.20 mmol, 25% 순도)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 80 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 1-(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (5.2 g, 15.01 mmol, 73% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 343.0 [M + H]+.
단계 6a: THF (200 mL) 중 tert-부틸 아세테이트 (18.67 g, 160.76 mmol, 160.76 mL)의 잘 교반된 용액에 -78℃에서 리튬 디-이소프로필 아미드 (THF 중 2M, 64.30 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 동일한 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물에 -78℃에서 벤질 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트 (15 g, 64.31 mmol, 12.82 mL)의 용액을 천천히 첨가한 후, 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (200 mL)로 희석하고, 물 (40 mL) 및 염수 (40 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 벤질 4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (22.5 g, 64.02 mmol, 100% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI) = 294.2 [M+H-56]+.
단계 6b: 1,4-디옥산 (200 mL) 중 벤질 4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (23 g, 65.82 mmol)의 교반 용액에 팔라듐 (7.00 g, 65.82 mmol)을 첨가하였으며, 이를 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 실온에서 20시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (14 g, 64.94 mmol, 99% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 216.3 [M+H]+
단계 6: 1,4-디옥산 (80 mL) 중 1-(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (4.4 g, 12.90 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 질소 분위기 하에 탄산세슘 (10.51 g, 32.25 mmol) 및 tert-부틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (5.55 g, 25.80 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시킨 다음, 실온에서 Pd-PEPPSI-IHept 촉매 (626.85 mg, 644.39 μmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 105℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (20mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-80%)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (4.0 g, 7.67 mmol, 59% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 476.2 [M + H]+.
단계 7: 디클로로메탄 (5 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (0.5 g, 1.05 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 10.51 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (0.48 g, 884.68 μmol, 84% 수율)을 갈색빛 반고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 420.2 [M + H]+.
단계 8: N,N-디메틸포름아미드 (8 mL) 중 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (650 mg, 1.17 mmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (489.78 mg, 1.17 mmol)의 교반 용액에 HATU (444.03 mg, 1.17 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민디이소프로필에틸아민 (603.71 mg, 4.67 mmol, 813.63 μL)을 첨가하고, 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 그의 부피의 절반으로 농축시키고, 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시키면서 직접 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (310 mg, 320.23 μmol, 27% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 958.2 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.50 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.88 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.79-7.80 (m, 1H), 7.69-7.72 (m, 1H), 7.49-7.52 (m, 1H), 7.37 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 13.20 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.10-4.21 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.88-3.92 (m, 2H), 3.75-3.85 (m, 1H), 3.51-3.71 (m, 3H), 3.15-3.25 (m, 3H), 3.05-3.15 (m, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.65-2.75 (m, 3H), 2.32-2.56 (m, 3H), 2.00-2.12 (m, 1H), 1.50-1.90 (m, 8H), 1.06 (t, J = -6.80 Hz, 3H).
실시예 158
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (0.05 g, 109.68 μmol), 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (73.01 mg, 120.65 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (141.76 mg, 1.10 mmol, 191.04 μL) 및 HATU (45.87 mg, 120.65 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (28.24 mg, 28.83 μmol, 26% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 970.2 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.46 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.26 (d, J = 12.80 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.04 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.48 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.82 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.45 (s, 4H), 3.09-3.00 (m, 6H), 2.69-2.61 (m, 6H), 2.51-2.49 (m, 2H), 1.79 (d, J = 13.60 Hz, 2H), 1.66-1.50 (m, 10H), 1.30-1.17 (m, 4H), 0.97 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 159
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (42.57 mg, 93.39 μmol), 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (60 mg, 101.51 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (65.59 mg, 507.53 μmol, 88.40 μL) 및 HATU (57.89 mg, 152.26 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (38 mg, 38.36 μmol, 38% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 956.2 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.74 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.35 (d, J = Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.08-5.04 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.60-3.58 (m, 2H), 3.45-3.41 (m, 2H), 3.18-3.10 (m, 6H), 2.75-2.67(m, 4H), 2.56-2.51 (m, 2H), 2.10-2.05 (m, 3H), 1.73-1.52 (m, 12H), 1.05 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 160-161
단계 1: 1,4-디옥산 (2 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (215 mg, 464.88 μmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4 M, 4 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 석유 에테르로 세척하여 3-[6-(3,3-디플루오로-4-피페리딜)-1-메틸-인다졸-3-일]피페리딘-2,6-디온 (198 mg, 463.09 μmol, 100% 수율)을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 363.2 [M + H]+.
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 3-[6-(3,3-디플루오로-4-피페리딜)-1-메틸-인다졸-3-일]피페리딘-2,6-디온 (200 mg, 551.92 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (223.39 mg, 2.21 mmol, 307.71 μL)에 이어서 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (107.65 mg, 551.92 μmol, 80.94 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (230 mg, 413.84 μmol, 75% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 477.2 [M + H]+.
단계 3: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (230 mg, 482.67 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4 M, 4 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 조 물질을 석유 에테르로 연화처리하여 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (262 mg, 480.57 μmol, 100% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 421.2 [M + H]+.
실시예 160
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 4: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (100 mg, 180.30 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (90.96 mg, 216.36 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (116.51 mg, 901.49 μmol, 157.02 μL) 및 HATU (75.41 mg, 198.33 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40에서 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (16.44 mg, 15.76 μmol, 9% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 957.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.91 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.71-7.80 (m, 1H), 7.79 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.67 (t, J = 8.40 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.01-5.10 (m, 1H), 4.31-4.39 (m, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.51-3.61 (m, 2H), 3.25-3.45 (m, 4H), 3.10-3.25 (m, 4H), 2.99 (d, J = 9.60 Hz, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.60-2.71 (m, 3H), 2.38-2.58 (m, 2H), 2.02-2.31 (m, 5H), 1.78-1.91 (m, 3H), 1.40-1.77 (m, 5H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 161
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 125.76 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (63.45 mg, 150.91 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (81.27 mg, 628.81 μmol, 109.53 μL) 및 HATU (52.60 mg, 138.34 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40-50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (13.03 mg, 12.40 μmol, 10% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 959.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.90 (s, 1H), 10.21 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.81-7.91 (m, 1H), 7.83 (d, J = 11.60 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 2.80, 8.60 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.45-7.53 (m, 1H), 7.37 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 5.28-5.38 (m, 1H), 4.31-4.38 (m, 1H), 4.09-4.20 (m, 2H), 4.00 (d, J = 4.00 Hz, 3H), 3.50-3.74 (m, 3H), 3.30-3.45 (m, 3H), 3.11-3.31 (m, 4H), 2.95-3.05 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.35-2.71 (m, 4H), 2.05-2.31 (m, 5H), 1.51-1.91 (m, 5H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 162
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세트산 (35.04 mg, 79.48 μmol), 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-(디메틸술파모일아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (50 mg, 86.64 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (55.99 mg, 433.22 μmol, 75.46 μL) 및 HATU (49.42 mg, 129.97 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (16 mg, 16.65 μmol, 19% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 940.8 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.16 (bs, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.68 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.15 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 5.05 (t, J = 9.20 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.54-3.44 (m, 3H), 3.14-3.09 (m, 6H), 2.76-2.73 (m, 6H), 2.68 (s, 3H), 2.10-2.05 (m, 3H), 1.86-1.81 (m, 3H), 1.62-1.44 (m, 7H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 163
9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세트산 (0.035 g, 79.39 μmol), 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (49.66 mg, 82.07 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (102.61 mg, 793.91 μmol, 138.28 μL) 및 HATU (33.21 mg, 87.33 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 46% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 9-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-3-[2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-3-아자스피로[5.5]운데칸 (4.83 mg, 4.95 μmol, 6% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 956.2 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.55 (s, 1H), 10.17 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.78 (dd, J = 2.00, 8.80 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 9.60 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 3.60 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 14.40 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.55 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.90 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.49 (s, 5H), 3.15-3.11 (m, 6H), 2.87 (s, 7H), 2.50-2.49 (m, 3H), 2.06 (d, J = 11.20 Hz, 2H), 1.86 (d, J = 12.00 Hz, 2H), 1.74-1.64 (m, 4H), 1.40-1.24 (m, 5H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 164
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
표제 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (55 mg, 74.19 μmol), 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세트산 (34.89 mg, 68.05 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (38.35 mg, 296.76 μmol, 51.69 μL) 및 HATU (28.21 mg, 74.19 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페라진-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (6 mg, 5.71 μmol, 8% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 943.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.55 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.86 (t, J = 10.00 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.51-7.49 (m, 1H), 7.39 (d, J = 17.60 Hz, 2H), 7.19 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.15 (d, J = 15.20 Hz, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.90 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.81-3.72 (m, 2H), 3.48-3.34 (m, 3H), 3.17-3.15 (m, 5H), 2.79 (s, 3H), 2.75 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 2.50-2.3.47 (m, 4H), 2.12-2.11 (m, 1H), 1.83-1.56 (m, 5H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 165
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (70 mg, 99.99 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (38.44 mg, 91.33 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (12.92 mg, 99.99 μmol, 17.42 μL) 및 HATU (38.02 mg, 99.99 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (16 mg, 15.62 μmol, 16% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 953.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.91 (s, 1H), 9.59 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 24.40 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.40 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.39-5.26 (m, 2H), 4.37-4.33 (m, 2H), 4.18-4.14 (m, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.82-3.79 (m, 1H), 3.58-3.34 (m, 7H), 3.11-2.97 (m, 4H), 2.68-2.38 (m, 4H), 2.15-1.85 (m, 9H), 1.77-1.58 (m, 5H).
실시예 166
6-[2-클로로-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (3.31 g, 21.62 mmol), tert-부틸 3-아미노-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (5 g, 19.66 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (7.28 g, 49.14 mmol, 8.17 mL) 및 아세트산 (118.04 mg, 1.97 mmol, 112.42 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 라세미 tert-부틸 2-(6-히드록시-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (4.4 g)를 회백색 고체로서 수득하였다. 라세미 혼합물 3.7 g을 키랄 SFC 정제에 적용하고, 제2 용리 생성물 tert-부틸 (3S)-3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.2 g, 3.00 mmol, 15% 수율)를 회백색 고체로서 목적 이성질체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 400.3 [M + H]+.
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 tert-부틸 (3S)-3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.8 g, 2.00 mmol)의 용액에 실온에서 질소 하에 탄산세슘 (1.63 g, 5.01 mmol) 및 1-브로모-2-클로로-3,4-디플루오로-벤젠 (683.19 mg, 3.00 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 60℃로 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 물 (15 ml)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 30 ml)로 추출하였다. 분리된 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 (50 g 스냅) 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-70%)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-(3-브로모-2-클로로-6-플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.5 g, 720.78 μmol, 36% 수율)를 갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 607.8[[M + H]+.
단계 3: 디옥산 (5 mL) 중 디페닐메탄이민 (223.96 mg, 1.24 mmol, 207.37 μL) 및 tert-부틸(3S)-3-[6-(3-브로모-2-클로로-6-플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.5 g, 823.85 μmol)의 교반 용액에 탄산세슘 (805.27 mg, 2.47 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. Xantphos (95.34 mg, 164.77 μmol) 및 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0) (75.44 mg, 82.38 μmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응물을 물 (15 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 35 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 (25 g 스냅) 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-60%)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[3-(벤즈히드릴리덴아미노)-2-클로로-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.36 g, 331.22 μmol, 40% 수율)를 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 707.0 [M+H]+
단계 4: THF (5 mL) 중 tert-부틸 (3S)-3-[6-[3-(벤즈히드릴리덴아미노)-2-클로로-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.5 g, 706.98 μmol)의 교반 용액에 물 중 시트르산 (1.0 M, 5 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응물을 물 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)로 희석하였다. 분리한 후, 수성 층을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 역추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 (25 g) 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-60%)를 사용하여 정제하여 tert-부틸(3S)-3-[6-(3-아미노-2-클로로-6-플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.23 g, 331.47 μmol, 47% 수율)를 갈색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 543.2 [M + H]+.
단계 5: 1,4-디옥산 (3 mL) 중 tert-부틸 (3S)-3-[6-(3-아미노-2-클로로-6-플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.23 g, 423.55 μmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 피리딘 (335.03 mg, 4.24 mmol, 342.56 μL) 및 N-에틸-N-메틸-술파모일 클로라이드 (400.56 mg, 2.54 mmol, 312.94 μL)를 첨가하였다. 생성된 용액을 90℃에서 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (20 ml)로 희석하고, 물 (5 ml)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-클로로-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.11 g, 113.93 μmol, 27% 수율)를 갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 607.8 [M + H]+.
단계 6: 디클로로메탄 (1 mL) 중 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-클로로-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.11 g, 165.62 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 1 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-클로로-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (0.1 g, 117.23 μmol, 71% 수율)을 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 564.0 [M + H]+.
단계 7: 목적 화합물을 COMU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-F)을 통해 제조하였다. 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-클로로-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 (50 mg, 83.26 μmol), 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (32.01 mg, 76.05 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (53.80 mg, 416.30 μmol, 72.51 μL) 및 (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트 (53.49 mg, 124.89 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 6-[2-클로로-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (15 mg, 14.00 μmol, 17% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 930.2 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.89 (s, 1H), 8.42 (bs, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.77 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.63 (t, J = 8.00 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 7.60 Hz, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.04 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 5.03-5.02 (m, 1H), 4.33 (q, J = 4.80 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.55 (d, J = 12.80 Hz, 3H), 3.11 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.02-3.00 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.68-2.56 (m, 4H), 2.30-2.06 (m, 7H), 1.83-1.68 (m, 7H), 1.61-1.57 (m, 4H), 1.43-1.25 (m, 2H), 1.02 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 167
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드
단계 1a: 아세톤 (10 mL) 중 시클로펜탄 술포닐 클로라이드 (2.00 g, 11.86 mmol, 1.50 mL)의 용액에 5℃에서 암모니아 용액 25% (18.00 g, 513.55 mmol, 20 mL)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 시클로펜탄 술폰아미드 (0.74 g, 4.96 mmol, 42% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 6.69 (s, 2H), 1.89-1.99 (m, 4H), 1.66-1.57 (m, 4H).
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.22 g, 408.51 μmol), 탄산세슘 (399.30 mg, 1.23 mmol) 및 시클로펜탄 술폰아미드 (182.86 mg, 1.23 mmol)를 사용하여 일반적 (절차 B-C)에 따라 합성하였다. 반응 혼합물을 55℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 침전된 고체를 여과하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3 x 30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-(시클로펜틸술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.25 g, 319.06 μmol, 78% 수율)를 담갈색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 666.0 [M - H]-.
단계 2: 필요한 아민을 디옥산 중 4M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 1,4-디옥산 99% 중 4M 염화수소 (3 mL)를 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-(시클로펜틸술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.25 g, 374.39 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (0.25 g, 374.16 μmol, 100% 수율)를 담오렌지색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 568.2 [M + H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (48.77 mg, 115.88 μmol), N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (0.07 g, 115.88 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (149.76 mg, 1.16 mmol, 201.84 μL) 및 HATU (48.47 mg, 127.46 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 43% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (17.26 mg, 17.48 μmol, 15% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 935.2 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.90 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.77 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 9.00, 3.20, Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.38 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 7.60 Hz, 2H), 5.31 (s, 1H), 4.36-4.32 (m, 1H), 4.19-4.13 (m, 3H), 3.99 (s, 3H), 3.79-3.71 (m, 1H), 3.52-3.34 (m, 5H), 2.87-2.71 (m, 1H), 2.63-2.58 (m, 3H), 2.50-2.34 (m, 3H), 2.19-2.10 (m, 3H), 1.93-1.78 (m, 10H), 1.69-1.66 (m, 4H), 1.55-1.51 (m, 3H).
실시예 168
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (65 mg, 154.44 μmol), N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]프로판-2-술폰아미드 (107.13 mg, 185.32 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (119.76 mg, 926.61 μmol, 161.40 μL) 및 HATU (70.46 mg, 185.32 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 생성물을 C18-역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 이솔레라 (100g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)를 사용하여 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]프로판-2-술폰아미드 (23 mg, 23.81 μmol, 15% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 908.20 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.90 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.40 Hz, 2H), 7.44-7.38 (m, 4H), 7.06 (s, 1H), 5.40-5.25 (m, 1H), 4.40-4.30 (m, 2H), 4.25-4.10 (m, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.82-3.70 (m, 2H), 3.55-3.40 (m, 3H), 3.20-2.70 (m, 4H), 2.70-2.60 (m, 2H), 2.45-2.32 (m, 2H), 2.20-1.50 (m, 12H), 1.26 (d, J = 6.00 Hz, 6H).
실시예 169
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 1,4-디옥산 (30 mL) 중 3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-6-아이오도-1-메틸-인다졸 (1.9 g, 3.47 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 아세트산칼륨 (1.02 g, 10.41 mmol, 650.92 μL) 및 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란 (1.32 g, 5.21 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 퍼징한 다음, Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (283.46 mg, 347.10 μmol)을 첨가하고, 다시 질소 기체로 5분 동안 퍼징한 다음, 100℃에서 8시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (70 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20-30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)인다졸 (1.3 g, 1.87 mmol, 54% 수율)을 담황색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 548.2 [M + H]+.
단계 1a: 디클로로메탄 (40 mL) 중 메틸 2-(4-옥소시클로헥실)아세테이트 (2 g, 11.75 mmol)의 교반 용액에 2,6-디tert-부틸-4-메틸-피리딘 (2.90 g, 14.10 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 30분 동안 교반한 다음, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 반응 혼합물에 0℃에서 질소 분위기 하에 트리플루오로메탄술폰산 무수물 (3.48 g, 12.34 mmol, 2.07 mL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 0℃에서 포화 중탄산나트륨 용액 (70 mL)으로 적가 켄칭하고, 디클로로메탄 (3x100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 5-20% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 메틸 2-[4-(트리플루오로메틸술포닐옥시)시클로헥스-3-엔-1-일]아세테이트 (2.6 g, 8.60 mmol, 73% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 5.75 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.41-2.52 (m, 1H), 2.31-2.40 (m, 3H), 2.10-2.21 (m, 1H), 1.90-2.01 (m, 2H), 1.48-1.70 (m, 2H).
단계 2: 밀봉 튜브에 들은 1,4-디옥산 (20 mL) 및 물 (2 mL) 중 3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)인다졸 (1.2 g, 2.19 mmol)의 교반 용액에 탄산나트륨 (696.98 mg, 6.58 mmol, 275.49 μL) 및 메틸 2-[4-(트리플루오로메틸술포닐옥시)시클로헥스-3-엔-1-일]아세테이트 (993.84 mg, 3.29 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 퍼징한 다음, Pd(dppf)Cl2.디클로로메탄 (179.01 mg, 219.20 μmol)을 첨가하고, 다시 질소 기체로 5분 동안 퍼징한 다음, 85℃에서 5시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (70 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20-30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 메틸 2-[4-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥스-3-엔-1-일]아세테이트 (0.8 g, 1.24 mmol, 56% 수율)를 담녹색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 574.2 [M + H]+.
단계 3: 톨루엔 (4 mL) 중 메틸 2-[4-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥스-3-엔-1-일]아세테이트 (0.2 g, 348.63 μmol)의 교반 용액에 빙초산 (125.61 mg, 2.09 mmol) 및 탄소 상 5% 팔라듐 (0.1 g, 939.67 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 5분 동안 교반한 다음, 수소화붕소나트륨 (80 mg)을 첨가하고, 반응 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 다시, 수소화붕소나트륨 (80 mg)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 2시간 동안 교반하였다. 다시, 반응 혼합물을 5℃로 냉각시키고, 수소화붕소나트륨 (80 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 층을 THF:톨루엔 혼합물 (200 mL:50 mL) 및 에틸 아세테이트 (100 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20-30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 메틸 2-[4-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥실]아세테이트 (0.12 g, 203.69 μmol, 58% 수율)를 담녹색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 576.2 [M + H]+.
단계 4/단계 5: 테트라히드로푸란 (20 mL) 및 물 (5 mL) 중 메틸 2-[4-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥실]아세테이트 (0.35 g, 607.96 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 수산화리튬 수화물 (510.24 mg, 12.16 mmol, 337.91 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 0℃에서 1.5N HCl 용액 (pH~2)을 사용하여 산성화시켰다. 고체를 여과하고, 물 (50 mL)로 세척하고, 4시간 동안 진공 건조시켜 혼합물 (350 mg, 95% 순도)을 수득하였다. 혼합물을 키랄팩 OX-H 칼럼을 사용하는 키랄 SFC 정제에 의해 정제하여 2-((1R,4R)-4-(3-(2,6-비스(벤질옥시)피리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)시클로헥실)아세트산 (0.12 g, 208.93 μmol, 34% 수율) 및 2-((1S,4S)-4-(3-(2,6-비스(벤질옥시)피리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)시클로헥실)아세트산 (0.15 g, 267.06 μmol, 43.93% 수율)을 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 562.2 [M + H]+
주: 분리된 이성질체에 대한 절대 입체화학을 하기와 같이 임의적으로 할당하였다; 제1 용리 피크 (F1-3.99 RT)를 트랜스 화합물(1r,4r)로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 피크 (F2-4.92 RT)를 시스 화합물 (1s,4s)로서 임의적으로 할당하였다.
단계 6: 1,4-디옥산 (5 mL) 중 2-((1R,4R)-4-(3-(2,6-비스(벤질옥시)피리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)시클로헥실)아세트산 (0.12 g, 213.65 μmol)의 교반 용액에 20% Pd(OH)2 (0.1 g, 712.08 μmol)를 채우고, 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 실온에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하고, 1,4-디옥산 (200 mL)으로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 2-((1r,4r)-4-(3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)시클로헥실)아세트산 (0.08 g, 205.78 μmol, 96% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 384.2 [M + H]+.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-((1r,4r)-4-(3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)시클로헥실)아세트산 (54.52 mg, 129.83 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (152.55 mg, 1.18 mmol, 205.59 μL), HATU (49.37 mg, 129.83 μmol) 및 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.07 g, 118.03 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-(1r,4r)-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥실]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (27 mg, 27.30 μmol, 23% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 922.2 [M + H]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.88 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.36 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 5.35-5.25 (m, 1H), 4.39-4.30 (m, 1H), 4.20-4.09 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.78-3.65 (m, 1H), 3.65-3.45 (m, 2H), 3.17 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.72-2.60 (m, 4H), 2.40-2.30 (m, 3H), 2.28-2.12 (m, 2H), 2.12-2.02 (m, 2H), 1.88-1.58 (m, 13H), 1.06 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 170
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]시클로헥실]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 1,4-디옥산 (5 mL) 중 2-((1s,4s)-4-(3-(2,6-비스(벤질옥시)피리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)시클로헥실)아세트산 (0.15 g, 267.06 μmol)의 교반 용액에 20% Pd(OH)2/C (0.12 g, 854.49 μmol)를 채우고, 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 실온에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하고, 1,4-디옥산 (200 mL)으로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 2-((1s,4s)-4-(3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)시클로헥실)아세트산 (0.11 g, 246.71 μmol, 92% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 384.2 [M + H]+.
단계 2: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-((1s,4s)-4-(3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸-1H-인다졸-6-일)시클로헥실)아세트산 (45.26 mg, 118.03 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (91.53 mg, 708.18 μmol, 123.35 μL) 및 HATU (44.88 mg, 118.03 μmol) 및 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.07 g, 118.03 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-(1S,4S)-[4-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥실]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (34 mg, 35.53 μmol, 30% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 922.2 [M + H]+ 및 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.87 (s, 1H), 10.18 (s, 1H), 8.37 (d, J = 5.20 Hz, 1H), 7.82-7.84 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.40, 8.80 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 7.47 (dd, J = 26.40, 20.60 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 10.80 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.32 (q, J = 4.80 Hz, 1H), 4.16-4.12 (m, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.76-3.64 (m, 1H), 3.55-3.42 (m, 2H), 3.23 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.68-2.56 (m, 4H), 2.37-2.33 (m, 5H), 2.28-2.27 (m, 2H), 1.87-1.56 (m, 12H), 1.22-1.10 (m, 2H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 171
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[3-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-메틸인다졸-6-일]아제티딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 마이크로웨이브 바이알에 들은 이소프로필 알콜 (2.5 mL) 중 (1-메틸인다졸-6-일) 보론산 (621.60 mg, 3.53 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 하에 트랜스-2-아미노시클로헥산올 히드로클로라이드 (16.07 mg, 105.97 μmol), 디아이오도 니켈 (33.11 mg, 105.97 μmol) 및 소듐 tert-부톡시드 (1 M, 3.53 mL)를 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후, 이소프로필 알콜 (2.5 mL) 중 tert-부틸 3-아이오도아제티딘-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.77 mmol)의 용액을 동일한 온도에서 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 80℃에서 마이크로웨이브 하에 30분 동안 방사선조사하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 실리카 겔 및 석유 에테르 중 60-70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(1-메틸인다졸-6-일)아제티딘-1-카르복실레이트 (350 mg, 1.13 mmol, 64% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 288.20 [M + H]+
단계 2: 밀봉 튜브에 들은 아세토니트릴 (5 mL) 중 tert-부틸 3-(1-메틸인다졸-6-일) 아제티딘-1-카르복실레이트 (200 mg, 696.00 μmol)의 교반 용액에 실온에서 N-아이오도숙신이미드 (469.77 mg, 2.09 mmol, 29.49 μL)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 닫힌 밀봉 튜브에서 90℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 X 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 티오황산나트륨 용액에 이어서 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 3-(3-아이오도-1-메틸-인다졸-6-일)아제티딘-1-카르복실레이트 (260 mg, 548.62 μmol, 79% 수율)를 연갈색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 414.0 [M + H]+
단계 3: 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2 mL) 중 tert-부틸 3-(3-아이오도-1-메틸-인다졸-6-일)아제티딘-1-카르복실레이트 (300 mg, 725.95 μmol) 및 (2,6-디벤질옥시-3-피리딜)보론산 (218.98 mg, 653.35 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 삼염기성 인산칼륨 (385.24 mg, 1.81 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 15분 동안 퍼징하고, 이어서 XPhos Pd G2 (57.12 mg, 72.59 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 마이크로웨이브에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 셀라이트 층을 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]아제티딘-1-카르복실레이트 (320 mg, 439.76 μmol, 61% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 577.50 [M + H]+.
단계 4: 1,4-디옥산 (10 mL) 중 tert-부틸 3-[3-(2,6-디벤질옥시-3-피리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]아제티딘-1-카르복실레이트 (320 mg, 554.90 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 수산화팔라듐 (100 mg, 142.41 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 H2 압력 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 촉매를 셀라이트 층을 통한 여과에 의해 제거하였다. 셀라이트 층을 에틸 아세테이트 (2x30 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 90-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]아제티딘-1-카르복실레이트 (150 mg, 358.95 μmol, 65% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 399.0 [M + H]+
단계 5: 디클로로메탄 (1 mL) 중 tert-부틸 3-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]아제티딘-1-카르복실레이트 (150 mg, 376.45 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 트리플루오로아세트산 (740.00 mg, 6.49 mmol, 0.5 mL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 조 3-[6-(아제티딘-3-일)-1-메틸-인다졸-3-일]피페리딘-2,6-디온 (150 mg, 358.48 μmol, 95% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 299.10 [M+H]+
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 33-[6-(아제티딘-3-일)-1-메틸-인다졸-3-일]피페리딘-2,6-디온 (150 mg, 363.76 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (92.02 mg, 909.40 μmol, 126.75 μL)에 이어서 tert-부틸 브로모아세테이트 (85.14 mg, 436.51 μmol, 64.02 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x10 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 용액 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 디클로로메탄 중 5-10% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[3-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]아제티딘-1-일]아세테이트 (60 mg, 125.56 μmol, 35% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 431.20 [M+H]+
단계 7: 필요한 아민을 tert-부틸 2-[3-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]아제티딘-1-일]아세테이트 (60 mg, 145.46 μmol)를 사용하고 트리플루오로아세트산 (444.00 mg, 3.89 mmol, 0.3 mL)을 첨가하여 절차 B-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 조 2-[3-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]아제티딘-1-일]아세트산 TFA 염 (65 mg, 129.06 μmol, 89% 수율)을 연갈색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 357.20 [M+H]+.
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[3-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]아제티딘-1-일]아세트산 (65 mg, 138.18 μmol), (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (73.76 mg, 124.36 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (107.15 mg, 829.09 μmol, 144.41 μL) 및 HATU (57.79 mg, 152.00 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 46% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[3-[3-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1-메틸-인다졸-6-일]아제티딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (13.5 mg, 14.29 μmol, 10% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 894.8 [M + H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.90 (s, 1H), 10.38 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.35-7.32 (m, 2H), 7.18 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.39-4.33 (m, 5H), 4.21-4.10 (m, 5H), 4.01 (s, 3H), 3.73 (t, J = 4.40 Hz, 1H), 3.50-3.42 (m, 3H), 3.03 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.51-2.50 (m, 1H), 2.36-2.33 (m, 2H), 2.20-2.09 (m, 2H), 2.08-1.69 (m, 4H), 1.61-1.50 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 172
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-7-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-7-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 HCl 염 (75 mg, 164.52 μmol), 3-[(3S)-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린 HCl 염 (97.25 mg, 164.52 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (127.58 mg, 987.13 μmol, 171.94 μL) 및 HATU (75.07 mg, 197.43 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3S)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-7-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (24.1 mg, 25.13 μmol, 15% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 955.8 [M + H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ =10.57 (s, 1H), 10.18 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.87 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.95 (t, J = 8.80 Hz, 1H), 5.06-5.04 (m, 2H), 4.06 (s, 3H), 3.90 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.62-3.53 (m, 2H), 3.49-3.38 (m, 2H), 3.20-3.15 (m, 6H), 2.80 (s, 3H), 2.74 (t, J = 12.00 Hz, 2H), 2.59-2.52 (m, 2H), 2.12-2.06 (m, 3H), 1.83-1.71 (m, 4H), 1.68-1.45 (m, 7H), 1.06 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 173
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-7-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-7-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (40 mg, 87.74 μmol), (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 HCl 염 (52.04 mg, 87.74 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (68.04 mg, 526.47 μmol, 91.70 μL) 및 HATU (40.04 mg, 105.29 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-7-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (25 mg, 25.10 μmol, 29% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 958.00 [M + H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ =10.58 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.95 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 5.32-5.29 (m, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.15-4.11 (m, 2H), 4.05 (s, 3H), 3.90 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.82-3.71 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.51-3.48 (m, 1H), 3.16-3.14 (m, 6H), 2.79 (s, 3H), 2.76 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.52-2.51 (m, 2H), 2.37-2.33 (m, 1H), 2.10-2.06 (m, 1H), 1.90-1.51 (m, 9H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 174
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 황산 (80.52 g, 820.99 mmol, 44.00 mL) 중 2,3-디플루오로벤조산 (10 g, 63.25 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 불활성 조건 하에 질산 (4.78 g, 75.90 mmol, 3.17 mL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 0-5℃에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (200 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 2,3-디플루오로-6-니트로-벤조산 (9.2 g, 44.39 mmol, 70% 수율)을 황색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 202.2 [M-H]-
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (40 mL) 중 2,3-디플루오로-6-니트로-벤조산 (2.7 g, 13.29 mmol)의 교반 용액에 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 2.55 g, 63.68 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 교반하고 1시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 0℃에서 포화 염화암모늄 용액 (50 mL)으로 적가 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3 x 100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 10-20% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 2-플루오로-3-히드록시-6-니트로-벤조산 (2.7 g, 10.91 mmol, 82% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 200.2 [M-H]-
단계 3: 1,4-디옥산 (30 mL) 중 2-플루오로-3-히드록시-6-니트로-벤조산 (2.7 g, 13.43 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량% (1.89 g, 13.43 mmol) 및 물을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 수소 분위기 주머니 하에 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올 (100 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시켜 6-아미노-2-플루오로-3-히드록시-벤조산 (2.7 g, 7.99 mmol, 60% 수율)을 갈색 점성 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 170.10 [M-H]-
단계 4: 톨루엔 (18 mL) 및 테트라히드로푸란 (3 mL) 중 6-아미노-2-플루오로-3-히드록시-벤조산 (1.2 g, 7.01 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.80 g, 7.01 mmol) 및 디에톡시 메톡시 에탄 (1.25 g, 8.41 mmol, 1.40 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (150 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 중탄산나트륨 용액 (3 x 100 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(5-플루오로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.460 g, 931.09 μmol, 13% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 420.2 [M+H]+
단계 5: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(5-플루오로-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.440 g, 1.05 mmol), 탄산세슘 (1.03 g, 3.15 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (197.75 mg, 1.26 mmol, 145.40 μL)을 사용하여 절차 B-B에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.450 g, 749.43 μmol, 71% 수율)를 담갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 501.20 [M+H-tBu]+
단계 6/단계 7: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (700 mg, 1.26 mmol)의 교반 용액에 실온에서 탄산세슘 (1.02 g, 3.14 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (260.72 mg, 1.89 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 55℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (3 mL)로 희석하고, 수득된 고체를 여과지를 통해 여과하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (3x30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.25 g, 364.65 μmol, 29% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. 이 라세미 생성물을 룩스 A1 칼럼을 사용하는 키랄 SFC 정제에 적용하여 tert-부틸 (S)-3-(6-(2-시아노-3-((N-에틸-N-메틸술파모일)아미노)-6-플루오로페녹시)-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100 mg, 100% 순도, 제1 용리 이성질체, S-이성질체로서 임의적으로 할당) 및 tert-부틸 (R)-3-(6-(2-시아노-3-((N-에틸-N-메틸술파모일)아미노)-6-플루오로페녹시)-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (90 mg, 100% 순도, 제2 용리 이성질체, R-이성질체로서 임의적으로 할당)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 619.2[M+H-56]+.
주: 제1 용리 피크를 S-이성질체로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 피크를 R-이성질체로서 임의적으로 할당하였다.
단계 8: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 37.05 μL)을 사용하여 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100 mg, 148.21 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (100 mg, 129.35 μmol, 87% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 575.0 [M+H]+
단계 9: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (72.99 mg, 174.03 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (112.46 mg, 870.17 μmol, 151.57 μL), HATU (72.79 mg, 191.44 μmol) 및 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.100 g, 174.03 μmol)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (47.81 mg, 48.81 μmol, 28% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 976.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 10.18 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.50-7.75 (m, 2H), 7.51 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.29-7.40 (m, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.28-5.38 (m, 1H), 5.03 (d, J = 1.60 Hz, 1H), 4.11-4.19 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.71-3.81 (m, 1H), 3.61-3.70 (m, 1H), 3.48-3.60 (m, 1H), 3.25-3.45 (m, 1H), 3.02-3.21 (m, 6H), 2.60-2.77 (m, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.35-2.60 (m, 2H), 2.05-2.15 (m, 1H), 1.55-1.88 (m, 8H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 175
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드
단계 1/단계 2: 디클로로메탄 (5 mL) 중 3-메톡시피롤리딘 (0.500 g, 4.94 mmol)의 교반된 -30℃ 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (958.31 mg, 7.41 mmol, 1.29 mL) 및 술푸릴 클로라이드 (1.67 g, 12.36 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 -30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (60 mL)의 적가에 의해 켄칭한 다음, 에틸 아세테이트 (2x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 1.5N HCl 용액 (2x50 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 3-메톡시피롤리딘-1-술포닐 클로라이드를 수득하였다. 메탄올 (8 mL) 중 조 3-메톡시피롤리딘-1-술포닐 클로라이드 (0.6 g, 3.01 mmol)의 용액에 0℃에서 MeOH 중 7M 암모니아 (7 M, 429.31 μL)를 첨가하고, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (20 ml), 염수 (20 ml)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 잔류물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드 (0.230 g, 738.72 μmol, 25% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 181.2 [M+H]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드 (50.20 mg, 278.53 μmol), 탄산세슘 (226.88 mg, 696.33 μmol) 및 tert-부틸 3-[(3R)-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.15g, 278.53 μmol)를 사용하여 일반적 절차 B-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 3-[(3R)-6-[2-시아노-6-플루오로-3-[(3-메톡시피롤리딘-1-일)술포닐아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (135 mg, 168.77 μmol, 61% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 697.0 [M+H]+.
단계 4: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 4M 염화수소 용액 (4 M, 48.30 μL)을 사용하여 tert-부틸 3-[(3R)-6-[2-시아노-6-플루오로-3-[(3-메톡시피롤리딘-1-일)술포닐아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.135 g, 193.20 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[(3R)-3-(1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 히드로클로라이드 염 (125 mg, 189.54 μmol, 98% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 599.2 [M+H]+.
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (77.07 mg, 183.75 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (118.74 mg, 918.74 μmol, 160.03 μL), HATU (76.85 mg, 202.12 μmol) 및 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (0.11 g, 183.75 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 잔류물로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 아세트산암모늄: 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (51.52 mg, 49.44 μmol, 27% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 1000.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.51 (s, 1H), 10.21 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.75-7.90 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 5.20 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.25-5.35 (m, 1H), 5.02 (d, J = 1.60 Hz, 1H), 4.10-4.20 (m, 2H), 3.92-4.01 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.73-3.84 (m, 1H), 3.58-3.68 (m, 1H), 3.48-3.59 (m, 1H), 3.23-3.41 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 3.14-3.21 (m, 2H), 3.02-3.12 (m, 2H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.35-2.61 (m, 4H), 2.03-2.12 (m, 1H).
실시예 176
(3S)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드
단계 1: 테트라히드로푸란 (50 mL) 중에 용해시킨 tert-부틸 (3S)-3-히드록시피롤리딘-1-카르복실레이트 (5 g, 26.70 mmol)의 교반된 0℃ 용액에 수소화나트륨 (2.32 g, 53.41 mmol, 미네랄 오일 중 60% 분산액)을 첨가하였다. 0℃에서 1시간 동안 계속 교반하였다. 아이오도메탄 (5.69 g, 40.06 mmol, 2.49 mL)을 후속적으로 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 염화암모늄 용액의 적가에 의해 켄칭하였다. 상을 분리하고, 수성 층을 추가로 에틸 아세테이트 (3x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40-50% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 (3S)-3-메톡시피롤리딘-1-카르복실레이트 (5.5 g, 24.20 mmol, 91% 수율)를 담갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 102.0 [M+H-100]+.
단계 2: 디클로로메탄 (15 mL) 중 tert-부틸 (3S)-3-메톡시피롤리딘-1-카르복실레이트 (5.5 g, 27.33 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 (20 mL) 중 4M 염화수소 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 (3S)-3-메톡시피롤리딘 (4.5 g, 32.70 mmol)을 담갈색 고체로서 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.51 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 4.07 (q, J = 2.40 Hz, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.24 (s, 3H), 3.09-3.23 (m, 3H), 2.00-2.07 (m, 1H), 1.82-1.92 (m, 1H).
단계 3/단계 4: 디클로로메탄 (20 mL) 중 (3S)-3-메톡시피롤리딘 (4.5 g, 32.70 mmol)의 -30℃ 교반 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (6.34 g, 49.05 mmol, 8.54 mL) 및 술푸릴 클로라이드 (11.03 g, 81.75 mmol)를 첨가하였다. -30℃에서 2시간 동안 계속 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (60 mL)의 적가에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2x100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (3S)-3-메톡시피롤리딘-1-술포닐 클로라이드 (3.1 g, 15.53 mmol, 47% 수율)를 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. 메탄올 (10 mL) 중 (3S)-3-메톡시피롤리딘-1-술포닐 클로라이드 (3.1 g, 15.53 mmol)의 교반된 0℃ 용액에 메탄올 중 7M 암모니아 (7 M, 10 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (70 ml)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30-40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 (3S)-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드 (0.470, 2.55 mmol, 16% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 181.2 [M+H]+.
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100.00 mg, 185.69 μmol), 탄산세슘 (181.50 mg, 557.06 μmol) 및 (3S)-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드 (83.66 mg, 464.22 μmol)를 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[(3S)-3-메톡시피롤리딘-1-일]술포닐아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (130 mg, 142.21 μmol, 77% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 697.0 [M-H]-.
단계 6: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 46.51 μL)을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[(3S)-3-메톡시피롤리딘-1-일]술포닐아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (130.00 mg, 186.04 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (3S)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (130 mg, 168.28 μmol, 90% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 599.2 [M+H]+.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (91.08 mg, 217.16 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (140.33 mg, 1.09 mmol, 189.12 μL), HATU (82.57 mg, 217.16 μmol) 및 (3S)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (130.00 mg, 217.16 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 잔류물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3S)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (32.06 mg, 31.24 μmol, 14% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 1000.0 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.24 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.75-7.90 (m, 1H), 7.79 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.41-7.51 (m, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.25-5.35 (m, 1H), 5.03 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 4.10-4.20 (m, 2H), 3.92-4.01 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.73-3.84 (m, 1H), 3.58-3.68 (m, 1H), 3.48-3.59 (m, 1H), 3.23-3.41 (m, 4H), 3.34 (s, 3H), 3.14-3.21 (m, 2H), 3.06 (t, J = 10.80 Hz, 2H), 2.74 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 2.35-2.61 (m, 4H), 2.03-2.12 (m, 1H).
실시예 177
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드
단계 1: 테트라히드로푸란 (30 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-히드록시피롤리딘-1-카르복실레이트 (4 g, 21.36 mmol)의 교반된 0℃ 용액에 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 1.64 g, 42.73 mmol)을 첨가하였다. 0℃에서 1시간 동안 계속 교반하고, 메틸 아이오다이드 (4.55 g, 32.05 mmol, 1.99 mL)를 동일한 온도에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 포화 염화암모늄 용액 (30 mL)의 적가에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 조 잔류물로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 10-20% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-메톡시피롤리딘-1-카르복실레이트 (4 g, 19.81 mmol, 93% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. GCMS m/z (ESI): 201.1 [M+H]+.
단계 2: 디옥산 (3 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-메톡시피롤리딘-1-카르복실레이트 (4 g, 19.87 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 4.97 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 (3R)-3-메톡시피롤리딘 (3.3 g, 17.99 mmol, 91% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.60 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 4.07 (q, J = 2.40 Hz, 1H), 3.65 (s, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.09-3.25 m, 3H), 2.00-2.07 (m, 1H), 1.82-1.92 (m, 1H).
단계 3/단계 4: 디클로로메탄 (5 mL) 중 (3R)-3-메톡시피롤리딘 (3.5 g, 34.60 mmol)의 교반된 -30℃ 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (6.71 g, 51.90 mmol, 9.04 mL), 술푸릴 클로라이드 (11.68 g, 86.51 mmol)를 첨가하였다. -30℃에서 2시간 동안 계속 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (60 mL)의 적가에 의해 켄칭하였다. 층을 분리하고, 수층을 추가로 에틸 아세테이트 (2x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 1.5N HCl 용액 (2x50 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (3R)-3-메톡시피롤리딘-1-술포닐 클로라이드 (3.3 g, 12.40 mmol, 35.82% 수율)를 수득하였다. 메탄올 (8 mL) 중 (3R)-3-메톡시피롤리딘-1-술포닐 클로라이드 (3.3 g, 16.53 mmol)의 용액에 0℃에서 메탄올 중 7M 암모니아 (7 M, 2.36 mL)를 첨가하고, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였으며, 이를 물 (30 mL)과 에틸 아세테이트 (50 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (20 ml), 염수 (20 ml)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드 (1.2 g, 6.66 mmol, 40% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 181.2 [M+H]+.
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 (3R)-3-메톡시피롤리딘-1-술폰아미드 (150 mg, 832.29 μmol), 탄산세슘 (325.41 mg, 998.75 μmol) 및 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (179.29 mg, 332.92 μmol)를 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[(3R)-3-메톡시피롤리딘-1-일]술포닐아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (190 mg, 239.42 μmol, 72% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 700.0 [M+H]+.
단계 6: 필요한 아민을 염화수소 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 M, 67.98 μL)을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[(3R)-3-메톡시피롤리딘-1-일]술포닐아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (190.00 mg, 271.91 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 (3R)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (170 mg, 243.74 μmol, 90% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 599.2 [M+H]+.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (84.07 mg, 200.45 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (129.54 mg, 1.00 mmol, 174.58 μL) 및 HATU (83.84 mg, 220.50 μmol) 및 (3R)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (120.00 mg, 200.45 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 (3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-메톡시-피롤리딘-1-술폰아미드 (40.51 mg, 39.70 μmol, 20% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 1000[M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.52 (s, 1H), 10.22 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.75-7.90 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.45-7.55 (m, 1H), 7.38 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.25-5.35 (m, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.10-4.20 (m, 2H), 3.92-4.01 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.73-3.84 (m, 1H), 3.58-3.68 (m, 1H), 3.48-3.59 (m, 1H), 3.23-3.41 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 3.14-3.21 (m, 2H), 3.02-3.11 (m, 2H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.35-2.61 (m, 4H), 2.03-2.12 (m, 1H).
실시예 178
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2 g, 7.80 mmol), 2-아미노-5-니트로-벤조산 (1.42 g, 7.80 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (3.47 g, 23.41 mmol, 3.89 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 반응 완료 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (2 x 50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였으며, 이를 석유 에테르 중 10% 에틸 아세테이트로 연화처리하여 tert-부틸 3-(6-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (3 g, 5.44 mmol, 70% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 375.2 [M-CO2 tBu+ H]+
단계 2: 물 (5 mL) / 에탄올 (25 mL) 중 tert-부틸 3-(6-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (3 g, 6.97 mmol)의 교반 용액에 실온에서 철 분말 (1.95 g, 34.85 mmol, 247.59 μL) 및 염화암모늄 (1.86 g, 34.85 mmol, 1.22 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 물 (50 mL) 중에 용해시키고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-아미노-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.8 g, 4.45 mmol, 63.85% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. 라세미 화합물을 키랄 SFC (칼럼 룩스-A1 [250*30 mm, 5 마이크로미터]; 이동상: 50% IPA-CO2 + 메탄올 중 0.5% 이소프로필 아민; 유량: 120 mL/분; 사이클 시간: 7.6분; 배압: 100 bar ; UV: 210 nm)에 의해 키랄 분해하여 피크 1 (제1-용리, S-이성질체로서 임의적으로 할당) tert-부틸 (S)-3-(6-아미노-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (610 mg)를 회백색 고체로서, 그리고 목적 피크 2 (제2 용리, R-이성질체로서 임의적으로 할당) tert-부틸 (R)-3-(6-아미노-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 2.93 mmol, 10% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 401.2 [M + H]+
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 172.22 mg, 4.49 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중에 용해시킨 tert-부틸 (3R)-3-(6-아미노-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 1.50 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 다음에, 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (470.73 mg, 3.00 mmol, 346.12 μL)을 실온에서 반응 혼합물에 첨가하고, 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 냉수 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (720 mg, 688.1 μmol, 46% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 538.8 [M+H]+
단계 4: 무수 아세토니트릴 (8 mL) 중 tert-부틸(3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (700 mg, 1.30 mmol)의 용액에 실온에서 DMAP (79.54 mg, 651.09 μmol) 및 트리에틸아민 (395.31 mg, 3.91 mmol, 544.50 μL)을 첨가하였다. 디-tert-부틸 피로 카르보네이트 (568.40 mg, 2.60 mmol, 597.68 μL)를 0℃에서 적가하고, 내용물을 실온에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (60 mL)로 추출하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 용매를 증발시켰다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 412.59 μmol, 32% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 638.4 [M+H]+
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 940.92 μmol), 탄산세슘 (919.71 mg, 2.82 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (370.77 mg, 2.35 mmol)을 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 역상 정제용 HPLC (칼럼: 엑스-셀렉트 C18 (150*19) mm 5 마이크로미터 정제용 방법: 물 중 0.1% 아세트산암모늄 / 아세토니트릴)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 185.75 μmol, 20% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 754.1 [M - H]-
단계 6: 필요한 아민을 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 211.68 μmol) 및 염화수소 용액 (디옥산 중 4.0M, 3 mL)을 사용하여 절차 B-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (140 mg, 204.18 μmol, 96% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 556.7 [M + H]+
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 102.09 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (51.38 mg, 112.71 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (131.94 mg, 1.02 mmol, 177.82 μL) 및 HATU (58.23 mg, 153.13 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (21 mg, 20.74 μmol, 20% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 957.0 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 9.01 (bs, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.66-7.59 (m, 2H), 7.35-7.27 (m, 4H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.36-5.33 (m, 1H), 5.04-5.03 (m, 1H), 4.14-4.13 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.91-3.89 (m, 2H), 3.88-3.79 (m, 1H), 3.79-3.64 (m, 1H), 3.64-3.51 (m, 1H), 3.19-3.17 (m, 4H), 3.16-3.06 (m, 2H), 2.79-2.72 (m, 5H), 2.52 (s, 3H), 2.42-2.39 (m, 1H), 2.08-2.03 (m, 1H), 1.82-1.68 (m, 8H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 179
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-(디메틸아미노)-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400 mg, 996.38 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 tert-부틸 니트라이트 (308.24 mg, 2.99 mmol, 355.52 μL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (3x30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (50 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-85% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (210 mg, 437.45 μmol, 44% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 445.6 [M - H]-
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 33.47 mg, 1.46 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (130 mg, 291.18 μmol)의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (137.23 mg, 873.55 μmol, 100.90 μL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 냉수 (10 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (60 mg, 90.48 μmol, 31% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 484.0 [M+H-CO2tBu]+
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (40 mg, 68.55 μmol), 탄산세슘 (67.00 mg, 205.64 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (28.42 mg, 205.64 μmol)을 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (25 mg, 27.79 μmol, 41% 수율)를 갈색 점성 물질로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 700.0 [M-H]-.
단계 4: 물 (1 mL) / 에탄올 (3 mL) 중 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (25 mg, 35.63 μmol)의 교반 용액에 실온에서 철 분말 (9.95 mg, 178.13 μmol) 및 염화암모늄 (9.53 mg, 178.13 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 이 조 물질을 물 (5 mL) 중에 용해시키고, 에틸 아세테이트 (2x10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (20 mg, 21.44 μmol, 60% 수율)를 갈색 점성 물질로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 672.20 [M+H]+
단계 5: 메탄올 (4 mL) 중 tert-부틸 3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (150 mg, 223.30 μmol) 및 파라포름알데히드 (67.05 mg, 2.23 mmol, 62.08 μL)의 교반 용액에 실온에서 아세트산 (134.10 mg, 2.23 mmol, 127.71 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. MP-시아노보로히드라이드(2.04mmol/g) (264.20 mg, 538.98 μmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 추가로 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 C18-역상 칼럼 크로마토그래피 (15 g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(디메틸아미노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (50 mg, 44.30 μmol, 20% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 700.20 [M+H]+.
단계 6: 필요한 아민을 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(디메틸아미노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (25 mg, 35.72 μmol) 및 디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (1 mL)을 사용하여 절차 B-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(디메틸아미노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (25 mg, 24.76 μmol, 69% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 600.20 [M + H]+.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(디메틸아미노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (25 mg, 39.30 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (26.87 mg, 58.95 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (74.20 mg, 574.11 μmol, 0.1 mL) 및 HATU (17.93 mg, 47.16 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 43% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-(디메틸아미노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (5.5 mg, 5.05 μmol, 13% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 1001.20 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 8.23 (s, 2H), 7.45-7.05 (m, 6H), 6.65-6.50 (m, 1H), 5.40-5.30 (m, 1H), 5.05-5.04 (m, 1H), 4.18-4.10 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.93 (t, J = 7.20 Hz, 2H), 3.85-3.75 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.60-3.50 (m, 2H), 3.25-3.15 (m, 3H), 3.10-3.00 (m, 2H), 2.95 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.83 (s, 6H), 2.80-2.70 (m, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.45-2.35 (m, 1H), 2.05-1.95 (m, 1H), 1.85-1.60 (m, 7H), 1.01 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 180
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 1,4-디옥산 (4 mL) 중 1-(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (300 mg, 879.42 μmol), tert-부틸 2-(4-피페리딜)아세테이트 (175.26 mg, 879.42 μmol) 및 탄산세슘 (573.06 mg, 1.76 mmol)의 혼합물을 밀봉 튜브에서 합하고, N2로 10분 동안 탈기시켰다. Pd-PEPPSI-iHeptCl (42.82 mg, 43.97 μmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 밀봉하고, 100℃에서 14시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (60 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (120 mL)로 추출하였다. 유기 층을 물 (50 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 이와 같이 수득된 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세테이트 (160 mg, 311.95 μmol, 35% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 460.2 [M+H]+.
단계 2: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세테이트 (130 mg, 282.91 μmol)의 0℃ 용액에 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 (4 M, 3 mL)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하여 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세트산 (115 mg, 242.36 μmol, 86% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 404.5 [M+H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 HCl 염 (110 mg, 185.48 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세트산 (74.82 mg, 185.48 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (95.89 mg, 741.90 μmol, 129.23 μL) 및 HATU (70.52 mg, 185.48 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (32 mg, 33.87 μmol, 18% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 942.0 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.86 (bs, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 3.60, 9.00 Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 2.80, 6.80 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.09 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 5.33-5.26 (m, 1H), 4.12 (t, J = 3.60 Hz, 1H), 4.31-4.30 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.76-3.68 (m, 1H), 3.53-3.38 (m, 4H), 3.16 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.68-2.67 (m, 2H), 2.39-2.34 (m, 3H), 2.08-2.07 (m, 1H), 1.83-1.64 (m, 7H), 1.42-1.39 (m, 2H), 1.05 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 181
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-메톡시-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 무수 N,N-디메틸포름아미드 (6 mL) 및 메탄올 (3 mL) 중 tert-부틸 3-(5-브로모-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.1 g, 2.29 mmol) 및 소듐 메톡시드 (742.28 mg, 13.74 mmol, 766.03 μL)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 브로민화구리 (I) (164.25 mg, 1.14 mmol, 34.87 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 130℃에서 마이크로웨이브 반응기에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 용액 (30 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400 mg, 880.69 μmol, 38% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 432.20 [M + H]+
단계 2: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 3-(6-히드록시-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400 mg, 927.04 μmol), 포타슘 tert-부톡시드 (312.07 mg, 2.78 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (436.89 mg, 2.78 mmol, 321.24 μL)을 사용하여 절차 B-B에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 순수한 생성물을 수득하였다. 이 생성물을 SFC (칼럼 명칭: 룩스 A1)에 의해 키랄 분해하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (110 mg, 192.69 μmol, 21% 수율) (SOR:[α]D: -79.27, R-이성질체로서 할당, 제2 용리)를 회백색 고체로서 수득하고 LCMS m/z (ESI): 513.20 [M + H-CO2 tBu]+, tert-부틸 (3S)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100 mg, 170.41 μmol, 18% 수율, 제1 용리)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 513.20 [M + H-CO2tBu]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (110 mg, 193.47 μmol), 탄산세슘 (189.11 mg, 580.41 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (133.68 mg, 967.34 μmol)을 사용하여 일반적 절차 B-C에 따라 합성하였다. 조 물질을 이솔레라 (15 g 레디셉® Rf C18, 방법: 물 중 10 mM 아세트산암모늄 : 아세토니트릴)를 사용하는 C18-역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하고, 순수한 분획을 동결건조시켜 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (60 mg, 85.93 μmol, 44% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 685.00 [M - H]-
단계 4: 필요한 아민을 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (60.00 mg, 87.37 μmol) 및 디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (2 mL)을 사용하여 일반적 절차 B-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (50 mg, 74.39 μmol, 85% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 587.20 [M + H]+
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (50 mg, 85.23 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (58.28 mg, 127.85 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (236.43 mg, 1.83 mmol, 318.64 μL) 및 HATU (38.89 mg, 102.28 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (22 mg, 21.60 μmol, 25% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 988.00 [M + H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.10 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.68-7.65 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.46 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.00 Hz, 2H), 7.13 (s, 1H), 5.42-5.30 (m, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.15 (d, J = 5.20 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.69-3.51 (m, 2H), 3.19-3.02 (m, 5H), 2.76-2.69 (m, 4H), 2.58-2.51 (m, 4H), 2.42-2.40 (m, 3H), 2.12-2.01 (m, 1H), 1.82-1.43 (m, 8H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 182
(3R)-3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디클로로메탄 (20 mL) 중 tert-부틸 3-[(3R)-6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.50 g, 3.74 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 tert-부틸 니트라이트 (1.54 g, 14.95 mmol, 1.78 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (3x30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 수성 염수 용액 (50 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 85-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-(6-히드록시-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 g, 1.93 mmol, 52% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 445.2 [M - H]-.
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 343.30 mg, 8.96 mmol)의 교반된 0℃ 용액에 N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-(6-히드록시-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.00 g, 2.24 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (703.74 mg, 4.48 mmol, 517.45 μL)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (800 mg, 1.17 mmol, 52% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 484.00 [M-CO2 tBu +H]+.
단계 3: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (800 mg, 1.37 mmol), 탄산세슘 (1.34 g, 4.11 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (947.24 mg, 6.85 mmol)을 사용하여 일반적 절차 B-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-85% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 589.98 μmol, 43% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 700.80 [M-H]-.
단계 4: 물 (5 mL) 및 에탄올 (7 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-니트로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 855.04 μmol)의 교반 용액에 실온에서 철 분말 (477.50 mg, 8.55 mmol, 60.75 μL) 및 염화암모늄 (457.37 mg, 8.55 mmol, 298.94 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 이 조 잔류물을 물 (50 mL) 중에 용해시키고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (400 mg, 434.69 μmol, 51% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 670.20 [M-H]-.
단계 5: 필요한 아민을 tert-부틸 (3R)-3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100 mg, 148.87 μmol) 및 디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (4 mL)을 사용하여 일반적 절차 B-D에 따라 합성하였다. 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 (3R)-3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (100 mg, 110.18 μmol, 74% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 570.20 [M-H]-
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (100 mg, 164.45 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (112.45 mg, 246.68 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.5 mL) 및 HATU (75.04 mg, 197.34 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 43% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3R)-3-[5-아미노-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (34 mg, 33.83 μmol, 21% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 973.20 [M + H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.12 (bs, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.62 (bs, 1H), 7.33 (dd, J = 1.20, 12.80 Hz, 2H), 7.23 (s, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 2H), 6.97 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 5.35-5.31 (m, 1H), 5.04-5.04 (m, 1H), 4.15-4.14 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.85-3.75 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.60-3.45 (m, 1H), 3.20-3.00 (m, 5H), 2.78-2.70 (m, 5H), 2.59 (s, 3H), 2.45-2.35 (m, 2H), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.90-1.55 (m, 9H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 183
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (906.41 mg, 2.93 mmol)의 용액을 실온에서 밀봉 튜브에서 합하였다. 1-(6-브로모-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (0.5 g, 1.47 mmol) 및 플루오린화세슘 (667.93 mg, 4.40 mmol, 162.12 μL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 질소로 20분 동안 탈기시키고, 1,1-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 착물 (179.54 mg, 219.85 μmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 밀봉하고, 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (50 mL)로 희석하고, 셀라이트 층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 물 (20 mL)로 세척하고, 분리된 유기 층을 감압 하에 증발시켰다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피 (230-400 실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (0.42 g, 843.37 μmol, 58% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 388.2 [M+H-56]+
단계 2: 디옥산 (4 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,6-디히드로-2H-피리딘-1-카르복실레이트 (0.41 g, 924.53 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 탄소 상 수산화팔라듐 (0.2 g, 924.53 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 수소 주머니 (1 atm 압력)를 사용한 수소화에 적용하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 디클로로메탄 중 10% 메탄올 (40 ml)로 헹구었다. 용매를 감압 하에 제거하여 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.4 g, 884.25 μmol, 96% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z = 390.5 [M + H-56]+
단계 3: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.41 g, 920.34 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 조 1-[5-플루오로-1-메틸-6-(4-피페리딜)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (0.35 g, 916.63 μmol, 100% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z =346.5[M+H]+
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 1-[5-플루오로-1-메틸-6-(4-피페리딜)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (0.35 g, 1.01 mmol)의 교반 용액에 실온에서 N,N-디이소프로필에틸아민 (327.44 mg, 2.53 mmol, 441.29 μL) 및 tert-부틸 브로모아세테이트 (197.67 mg, 1.01 mmol, 148.62 μL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 ml)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 증발시켰다. 이와 같이 수득된 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피 (230-400 실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세테이트 (0.31 g, 649.3 μmol, 64% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 460.2 [M+H]+
단계 5: 디클로로메탄 (3 mL) 중 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세테이트 (0.31 g, 674.63 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4.0 M, 2.53 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 석유 에테르에서 16시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 조 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (0.27 g, 568.03 μmol, 84% 수율)을 갈색빛 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 404.2 [M+H]+
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.1 g, 168.61 μmol), 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세트산 (74.17 mg, 168.61 μmol), HATU (64.11 mg, 168.61 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (108.96 mg, 843.07 μmol, 146.85 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 물질을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (45 mg, 43.46 μmol, 26% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 942.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.57 (s, 1H), 9.91 (s, 1H), 8.36 (d, J = 1.20 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.68-7.81 (m, 1H), 7.53 (d, J = 5.20 Hz, 1H), 7.42-7.51 (m, 1H), 7.42 (d, J = 10.80 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 5.31-5.39 (m, 1H), 4.10-4.22 (m, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.91 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.71-3.80 (m, 1H), 3.25-3.60 (m, 5H), 3.19-3.20 (m, 3H), 2.81-3.11 (m, 2H), 2.71-2.78 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.35-2.56 (m, 3H), 1.91-2.21 (m, 5H), 1.51-1.91 (m, 5H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 184
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 이소프로판올 (8 mL) 중 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (3 g, 19.10 mmol, 2.21 mL)의 교반 용액에 80℃에서 소형 클레이브에서 수산화암모늄 (8.03 g, 229.16 mmol, 8.92 mL)을 16시간 동안 첨가하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 이와 같이 수득된 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 50-70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 2-아미노-3,6-디플루오로-벤조니트릴 (0.9 g, 5.84 mmol, 31% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. GCMS m/z (ESI): 154 [M-H]-.
단계 2a: 디클로로메탄 (50 mL) 중 2-아미노-6-플루오로-벤조산 (5 g, 32.23 mmol)의 용액에 -10℃에서 질소 분위기 하에 N-브로모숙신이미드 (5.74 g, 32.23 mmol, 2.73 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (70 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 0-70%를 사용하여 정제하여 6-아미노-3-브로모-2-플루오로-벤조산 (4 g, 16.61 mmol, 52% 수율)을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 232.0 [M-H]-.
단계 2b: 퀴나졸리논 중간체를 6-아미노-3-브로모-2-플루오로-벤조산 (608.62 mg, 2.60 mmol), tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 g, 3.90 mmol) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (1.16 g, 7.80 mmol, 1.30 mL)를 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 조 잔류물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-(6-브로모-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.2 g, 2.30 mmol, 89% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 426.0 [M+H-56]+.
단계 2: 밀봉 튜브에 들은 1,4-디옥산 (6 mL) 중 tert-부틸 3-(6-브로모-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 1.24 mmol, 21.78 μL) 및 2-아미노-3,6-디플루오로-벤조니트릴 (191.71 mg, 1.24 mmol)의 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시켰다. 탄산세슘 (1.01 g, 3.11 mmol) 및 Pd-PEPPSI-iHeptCl (60.50 mg, 62.20 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 질소로 5분 동안 탈기시킨 후, 110℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (30mL)로 추출하였다. 유기 층을 물 (10 mL), 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 혼합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-70%의 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.3 g, 516.09 μmol, 41% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 556.7 [M+H]+.
단계 3/단계 4: 아세토니트릴 (5 mL) 중 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (300 mg, 540.01 μmol)의 교반 용액에 실온에서 디-tert-부틸 디카르보네이트 (235.71 mg, 1.08 mmol, 247.86 μL), DMAP (32.99 mg, 270.00 μmol) 및 트리에틸아민 (163.93 mg, 1.62 mmol, 225.80 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 이와 같이 수득된 조 물질을 아세톤 및 석유 에테르로 연화처리하여 생성물 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (200 mg)를 담갈색 고체로서 수득하였다. 이 라세미 생성물을 룩스-A1 칼럼을 사용하는 키랄 SFC 정제에 의해 키랄 분해하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트, 분획-1 (75mg, 95.7% 순도, R-이성질체로서 임의적으로 할당) 및 tert-부틸 (3S)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (55mg, 91% 순도, S-이성질체로서 임의적으로 할당)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 671.2 [M+H]+.
주: 제1 용리 피크를 R-이성질체로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 피크를 S-이성질체로서 임의적으로 할당하였다. 이 할당은 SOR 데이터에 기초한다. 음의 SOR 값을 R-이성질체로 간주하고, 양의 SOR 값을 S-이성질체로 간주하였다.
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (75.00 mg, 114.39 μmol), 탄산세슘 (111.81 mg, 343.16 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (39.52 mg, 285.97 μmol)을 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (65 mg, 72.93 μmol, 64% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 772.2 [M-H]-
단계 6: 필요한 아민을 염화수소-매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 디옥산 (35 μL) 중 4M 염화수소 용액을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100.00 mg, 129.22 μmol)를 N-Boc 탈보호하여 조 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (80 mg, 117.31 μmol, 91% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 574.7 [M+H]+.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 122.03 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (78.86 mg, 610.17 μmol, 106.28 μL), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (51.18 mg, 122.03 μmol) 및 HATU (51.04 mg, 134.24 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 잔류물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 중탄산암모늄 : 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (14 mg, 14.13 μmol, 12% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 975.0 [M+H]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.42-7.61 (m, 1H), 7.41 (d, J = 7.60 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 4.00, 9.00 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 5.34 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 4.14 (d, J = 5.20 Hz, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.72-3.82 (m, 1H), 3.60-3.70 (m, 1H), 3.45-3.60 (m, 1H), 3.22-3.40 (m, 1H), 3.02-3.20 (m, 6H), 2.65-2.81 (m, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.38-2.61 (m, 2H), 2.01-2.10 (m, 1H), 1.51-1.88 (m, 8H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 185
(3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: N,N-디메틸포름아미드 (50 mL) 중 2-아미노-6-클로로-벤조산 (5 g, 29.14 mmol)의 교반 용액에 10℃에서 N-브로모숙신이미드 (6.22 g, 34.97 mmol, 2.96 mL)를 조금씩 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수 (400 mL)에 붓고, 생성물을 여과에 의해 수집하고, 건조시켜 6-아미노-3-브로모-2-클로로-벤조산 (5.7 g, 18.21 mmol, 62% 수율)을 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): 548.0 [M+H; 브로모 동위원소 패턴].
단계 2: 퀴나졸리논 중간체를 6-아미노-3-브로모-2-클로로-벤조산 (2.35 g, 9.36 mmol), tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2 g, 7.80 mmol), 디에톡시메톡시에탄 (3.47 g, 23.41 mmol, 3.89 mL) 및 아세트산 (93.71 mg, 1.56 mmol, 89.24 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 목적 화합물을 조 물질로부터 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 라세미 화합물을 수득하였다. 키랄 분리를 룩스 C2 칼럼을 사용하는 SFC에 의해 수행하여 분획-1 tert-부틸 (3S)-3-(6-브로모-5-클로로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (380 mg, 758.18 μmol, 9.72% 수율) (S-이성질체로서 할당) 및 분획-2 tert-부틸 (3R)-3-(6-브로모-5-클로로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (320 mg, 640.71 μmol, 8% 수율) (R-이성질체로서 할당)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 3: 밀봉 튜브에 들은 1,4-디옥산 (5 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-(6-브로모-5-클로로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (300 mg, 601.45 μmol) 및 2-아미노-3,6-디플루오로-벤조니트릴 (111.23 mg, 721.74 μmol)의 교반 용액에 탄산세슘 (391.93 mg, 1.20 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. Pd-PEPPSI-iHept-Cl (29.25 mg, 30.07 μmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 닫힌 밀봉 튜브에서 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (20 mL) 및 물 (20 mL)로 희석하였다. 유기 층을 분리하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 0-50% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 268.53 μmol, 45% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): 516.5 [M+H-tBu]+.
단계 4: 아세토니트릴 (3 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-[5-클로로-6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (160 mg, 279.72 μmol)의 교반 용액에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (84.91 mg, 839.16 μmol, 116.96 μL) 및 DMAP (17.09 mg, 139.86 μmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물에 디-tert-부틸 디카르보네이트 (122.10 mg, 559.44 μmol, 128.39 μL)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 빙냉수 (10mL)를 첨가하고, 수성 혼합물을 에틸 아세테이트 (2x10 mL)를 사용하여 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 이와 같이 수득된 조 화합물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 40-100% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-클로로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (130 mg, 164.41 μmol, 59% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): 672.3 [M+H]+.
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-클로로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (130 mg, 193.42 μmol), 탄산세슘 (189.06 mg, 580.26 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (66.82 mg, 483.55 μmol)을 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 230-400 실리카 겔을 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-클로로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (75 mg, 51.25 μmol, 27% 수율)를 갈색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): 788.3[M+H]+.
단계 6: 필요한 아민을 절차 B-D에 따라 합성하였다. 0℃에서 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 용액 (400 μL)을 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-클로로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (70 mg, 88.57 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 디에틸 에테르로 세척하여 (3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (58 mg, 38.88 μmol, 44% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z 590.3[M-H]-.
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (50 mg, 79.80 μmol) 및 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (36.82 mg, 80.76 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (30.94 mg, 239.41 μmol, 41.70 μL) 및 HATU (45.52 mg, 119.71 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 정제용 HPLC (엑스 셀렉트 C18 (10 X 150mm) 5.0 μ, 용매 A: 물 중 0.1% NH4HCO3; 용매 B; 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 순수한 분획을 수집하고, 동결건조시켜 (3R)-3-[5-클로로-6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (2.2 mg, 2.20 μmol, 3% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): m/z 991.2[M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 9.96 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.51 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.35-7.30 (m, 2H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 2H), 5.33 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.15 (d, J = 5.20 Hz, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.91 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 3.90-3.40 (m, 3H), 3.19-3.04 (m, 6H), 2.79-2.70 (m, 5H), 2.58-2.38 (m, 4H), 2.08-2.06 (m, 1H), 1.82-1.24 (m, 8H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 186
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-5-히드록시-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디클로로메탄 (3 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-메톡시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (40 mg, 58.25 μmol)의 교반 용액에 -50℃에서 메틸렌 클로라이드 중 삼염화붕소 용액 1.0 M (407.72 μmol, 0.4 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 조 잔류물을 메틸 tert-부틸 에테르 (3 x 10 mL)로 연화처리하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (35 mg, 37.35 μmol, 64% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): m/z 573.20 [M+H]+.
단계 2: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (35.00 mg, 37.35 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (20.43 mg, 44.82 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (148.40 mg, 1.15 mmol, 0.2 mL) 및 HATU (17.04 mg, 44.82 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 정제용 HPLC (방법: 물 중 0.1% 포름산: 아세토니트릴 및 칼럼: 브리지 C8(19 X150)MM, 5MIC)에 의해 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-5-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (3.5 mg, 3.57 μmol, 10% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 974.20 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.02 (s, 1H), 10.53 (s, 1H), 10.09 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.45-7.35 (m, 2H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.16-7.12 (m, 2H), 5.40-5.30 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.23-4.15 (m, 2H), 3.95-3.88 (m, 4H), 3.80-3.78 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.51-3.49 (m, 2H), 3.43-3.42 (m, 1H), 3.20-3.10 (m, 3H), 3.09-3.06 (m, 3H), 2.73 (q, J = 6.40 Hz, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.60-2.55 (m, 2H), 2.45-2.35 (m, 1H), 2.15-2.12 (m, 1H), 1.91-1.56 (m, 8H), 1.03 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
하기 기재된 실시예 187-191은 깊은 포켓 변형에 대한 대표적인 실시예이다.
실시예 187
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피페리딘-1-술폰아미드
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (250 mg, 464.22 μmol), 탄산세슘 (529.38 mg, 1.62 mmol) 및 피페리딘-1-술폰아미드 (190.59 mg, 1.16 mmol)를 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-85% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(1-피페리딜술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (180 mg, 238.91 μmol, 51% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 681.4 [M-H]-.
단계 2: 필요한 아민을 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(1-피페리딜술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (180 mg, 263.64 μmol) 및 염화수소 (1,4-디옥산 중 4.0 M) (4 M, 65.91 μL)를 사용하여 절차 B-D에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]피페리딘-1-술폰아미드 (160 mg, 205.77 μmol, 78% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 581.2 [M-H]-.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (83.77 mg, 230.52 μmol), N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]피페리딘-1-술폰아미드 (250 mg, 403.81 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (371.00 mg, 2.87 mmol, 0.5 mL) 및 HATU (191.92 mg, 504.76 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (아세토니트릴 : 물 중 0.1% 포름산으로 용리)에 의해 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]피페리딘-1-술폰아미드 (80 mg, 79.25 μmol, 24% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 984.2 [M + H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 10.27 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.71 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 4.00, 9.00 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.40-5.30 (m, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.16-4.11 (m, 2H), 4.12 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.80-3.70 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.16 (m, 6H), 3.09-3.04 (m, 2H), 2.71 (t, J = 1.60 Hz, 2H), 2.67 (s, 2H), 2.50-2.33 (m, 2H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.82-1.67 (m, 8H), 1.53-1.47 (m, 6H).
실시예 188
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로헥산술폰아미드
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.25 g, 464.22 μmol), 탄산세슘 (453.75 mg, 1.39 mmol) 및 시클로헥산 술폰아미드 (189.44 mg, 1.16 mmol)를 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-(시클로헥실술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.22 g, 290.16 μmol, 63% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 682.4 [M + H]+.
단계 2: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 (디옥산 중 4M) (4 M, 2 mL)를 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-(시클로헥실술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.22 g, 322.69 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로헥산술폰아미드 (0.22 g, 290.00 μmol, 90% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 582.2 [M + H]+
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (156.06 mg, 342.34 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (480.91 mg, 3.72 mmol, 648.13 μL), HATU (155.63 mg, 409.31 μmol) 및 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로헥산술폰아미드 (0.23 g, 372.10 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로헥산술폰아미드 (116 mg, 110.21 μmol, 30% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 983.0 [M + H]+ 및 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.52 (s, 1H), 10.30 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.80 (d, J = 9.20 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.15-7.48 (m, 1H), 7.40 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.03 (d, J = 1.60 Hz, 1H), 4.16-4.13 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.86-3.75 (m, 1H), 3.70-3.62 (m, 1H), 3.55-3.45 (m, 1H), 3.19-3.06 (m, 5H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 1.60 Hz, 3H), 2.50-2.33 (m, 1H), 2.16-2.08 (m, 3H), 1.82-1.61 (m, 10H), 1.42-1.31 (m, 5H), 1.30-1.27 (m, 1H).
실시예 189
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]프로판-2-술폰아미드
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.25 g, 464.22 μmol), 탄산세슘 (453.75 mg, 1.39 mmol) 및 프로판-2-술폰아미드 (142.95 mg, 1.16 mmol)를 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(이소프로필술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.21 g, 286.08 μmol, 62% 수율)를 갈색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 586.0 [M + H-56]+.
단계 2: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 (디옥산 중 4M) (4 M, 2 mL)를 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-(이소프로필술포닐아미노)페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.21 g, 327.25 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]프로판-2-술폰아미드 (0.21 g, 326.52 μmol, 100% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 542.2 [M + H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (159.62 mg, 350.15 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (491.88 mg, 3.81 mmol, 662.91 μL), HATU (159.18 mg, 418.65 μmol) 및 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]프로판-2-술폰아미드 (0.22 g, 380.59 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 목적 생성물을 조 물질로부터 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]프로판-2-술폰아미드 (109 mg, 108.25 μmol, 28% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 943.0 [M + H]+ 및 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.33 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.80 (d, J = 9.20 Hz, 2H), 7.71-7.68 (m, 1H), 7.51-7.50 (m, 1H), 7.41 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 1612.80 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.31 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.15-4.13 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.79 (m, 1H), 3.64 (m, 1H), 3.55-3.51 (m, 1H), 3.17 (d, J = 9.60 Hz, 2H), 3.08 (d, J = 11.20 Hz, 2H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 1.60 Hz, 3H), 2.11-2.07 (m, 1H), 1.82-1.71 (m, 8H), 1.33 (d, J = 6.40 Hz, 6H).
실시예 190
(3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (250.00 mg, 464.22 μmol), 탄산세슘 (605.00 mg, 1.86 mmol) 및 (3R)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (234.23 mg, 1.39 mmol)를 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하여 조 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[(3R)-3-플루오로피롤리딘-1-일]술파모일아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (210 mg, 260.35 μmol, 56% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 685.2 [M -H]-
단계 2: 필요한 아민을 TFA 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 (디옥산 중 4M) (4 M, 1.96 mL)를 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-6-플루오로-3-[[(3R)-3-플루오로피롤리딘-1-일]술파모일아미노]페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (210 mg, 299.26 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 조 3-플루오로-2-[4-옥소-3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]퀴나졸린-6-일]옥시-6-[[(3R)-3-플루오로피롤리딘-1-일]술파모일아미노]벤조니트릴 (200 mg, 285.23 μmol, 95% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 587.3 [M+H]+
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]-3-플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (185 mg, 315.37 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (132.27 mg, 315.37 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (203.80 mg, 1.58 mmol, 274.66 μL) 및 HATU (131.91 mg, 346.91 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3R)-N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-플루오로-피롤리딘-1-술폰아미드 (55.98 mg, 56.48 μmol, 18% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 988.0 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.52 (s, 1H), 10.34 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 2H), 7.69 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 6.00 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.41-5.25 (m, 2H), 5.02 (s, 1H), 4.21-4.09 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.82-3.73 (m, 1H), 3.67-3.59 (m, 1H), 3.54-3.46 (m, 4H), 3.21-3.12 (m, 2H), 3.12-3.01 (m, 2H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.62-2.56 (m, 2H), 2.37-2.33 (m, 2H), 2.16-2.07 (m, 4H), 1.82-1.68 (m, 8H).
실시예 191
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로펜탄술폰아미드
단계 1: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.5 g, 2.79 mmol), 탄산세슘 (2.27 g, 6.96 mmol) 및 시클로펜탄술폰아미드 (706.52 mg, 4.74 mmol)를 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-(시클로펜틸술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.35 g, 1.82 mmol, 65% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z(ESI): 612.4 [M+H-tBu]+.
단계 2: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 (1,4-디옥산 중 4M, 20 mL)를 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-(시클로펜틸술포닐아미노)-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.35 g, 2.02 mmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (1.21 g, 1.82 mmol, 90% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z(ESI): 568.5 [M+H]+
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. N-[2-시아노-4-플루오로-3-[3-[(3R)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (1.2 g, 2.11 mmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (886.65 mg, 2.11 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (1.09 g, 8.46 mmol, 1.47 mL) 및 HATU (803.83 mg, 2.11 mmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하여 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로펜탄술폰아미드 (600 mg, 615.28 μmol, 29% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z(ESI): 967.2 [M-H]-; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 10.30 (s, 1H), 8.36 (bs, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 4.40, 8.80 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.25-5.35 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.10-4.23 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.75-3.85 (m, 1H), 3.60-3.72 (m, 2H), 3.44-3.57 (m, 1H), 3.17 (d, J = 11.20 Hz, 2H), 3.06 (t, J = 10.40 Hz, 2H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.58 (s, 2H), 2.32-2.45 (m, 2H), 2.05-2.15 (m, 1H), 1.85-2.04 (m, 4H), 1.50-1.90 (m, 12H).
실시예 192-197을 상기 방법 I 및 II 및 일반적 절차 B-C 내지 B-E를 사용하여 실시예 187-191과 동일한 방식으로 상응하는 술폰아미드를 사용하여 합성하였다.
실시예 192
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로프로판술폰아미드
표제 화합물을 역상 정제용 HPLC (칼럼: 엑스브리지 C-18 20x150m 이동상: A: 물 중 0.1% 중탄산암모늄, B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로프로판술폰아미드 (160 mg, 162.39 μmol, 59% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 941.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 10.27 (bs, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.70 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.50-7.48 (m, 1H), 7.40 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80, Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.37-5.32 (m, 1H), 5.03 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 4.16-3.94 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.84-3.76 (m, 1H), 3.68-3.56 (m, 1H), 3.52-3.49 (m, 1H), 3.34-3.30 (m, 2H), 3.16-3.06 (m, 2H), 2.76-2.67 (m, 2H), 2.58-2.51 (m, 3H), 2.39-2.33 (m, 2H), 2.11-2.08 (m, 1H), 1.79-1.67 (m, 8H), 0.99-0.90 (m, 4H).
실시예 193
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-메톡시아제티딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산과 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-메톡시-아제티딘-1-술폰아미드 (53.8 mg, 54.54 μmol, 15% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 986.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.56 (s, 1H), 8.37 (s, 2H), 7.88 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 4.40, 9.20 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.30 (m, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.15 (q, J = 7.20 Hz, 3H), 4.03 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.76 (q, J = 4.80 Hz, 3H), 3.65 (m, 1H), 3.50 (m, 1H), 3.17 (d, J = 14.80 Hz, 5H), 3.07 (d, J = 10.80 Hz, 2H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.58-2.53 (m, 2H), 2.50-2.33 (m, 1H), 2.09-2.07 (m, 1H), 1.82-1.67 (m, 8H).
실시예 194
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-술폰아미드 (63.3 mg, 62.29 μmol, 19% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 982.0 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 10.36 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.38 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.26-5.25 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.26-4.06 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.79-3.71 (m, 1H), 3.68-3.59 (m, 1H), 3.56-3.48 (m, 1H), 3.17 (t, J = 4.40 Hz, 3H), 3.10-3.01 (m, 2H), 2.74 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 2.58-2.53 (m, 4H), 2.45-2.36 (m, 2H), 2.10-2.01 (m, 1H), 1.90-1.50 (m, 11H), 0.64-0.55 (m, 1H), 0.31 (s, 1H).
실시예 195
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]피롤리딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]피롤리딘-1-술폰아미드 (62.17 mg, 63.46 μmol, 14% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 970.02 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ =10.52 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.79 (d, J = 9.20 Hz, 2H), 7.69 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 4.80 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 12.80, 14.00 Hz, 2H), 7.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.02 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 4.16-4.12 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.78-3.77 (m, 1H), 3.63 (s, 1H), 3.63 (m, 1H), 3.27 (d, J = 43.60 Hz, 6H), 3.07 (t, J = 10.40 Hz, 2H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.40-2.39 (m, 1H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.84-1.79 (m, 7H), 1.73-1.68 (m, 5H).
실시예 196
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]아제티딘-1-술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 43% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]아제티딘-1-술폰아미드 (51.25 mg, 49.79 μmol, 28% 수율)를 회백색 고체 화합물로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 956.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.61 (q, J = 2.80 Hz, 1H), 7.35-7.27 (m, 4H), 7.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.39-5.25 (m, 1H), 5.03 (d, J = 3.60 Hz, 1H), 4.20-4.11 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.79-3.63 (m, 1H), 3.63-3.57 (m, 1H), 3.53 (t, J = 9.20 Hz, 4H), 3.19-3.16 (m, 2H), 3.15-3.06 (m, 2H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.57-2.33 (m, 4H), 2.15-2.05 (m, 1H), 2.05-1.91 (m, 2H), 1.85-1.50 (m, 9H).
실시예 197
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[시클로프로필(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (85 mg, 86.39 μmol, 27% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 970.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ= 10.99 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.86 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.76-7.73 (m, 2H), 7.47-7.46 (m, 1H), 7.39 (t, J = 2.80 Hz, 1H), 6.99 (m, 1H), 6.52-6.50 (m, 1H), 6.47-6.46 (m, 1H), 6.11 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.33-4.31 (m, 2H), 3.95-3.92 (m, 2H), 3.90-3.86 (m, 2H), 3.69-3.65 (m, 2H), 3.59-3.55 (m, 2H), 3.52-3.49 (m, 2H), 3.15-2.98 (m, 2H), 2.95-2.85 (m, 2H), 2.78 (s, 3H), 2.75-2.73 (m, 1H), 2.68-2.67 (m, 1H), 2.61-2.60 (m, 1H), 2.09-2.01 (m, 3H), 2.09-2.01 (m, 3H).
실시예 198
N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로페닐]시클로부탄술폰아미드
표제 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 N-[2-시아노-3-[3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-4-플루오로-페닐]시클로부탄술폰아미드 (65 mg, 67.55 μmol, 19% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 956.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.52 (s, 1H), 10.27 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.79 (d, J = 9.20 Hz, 2H), 7.70 (dd, J = 2.80, Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.16-4.14 (m, 2H), 4.13-3.94 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.88 (d, J = 6.80 Hz, 2H), 3.85-3.72 (m, 1H), 3.61-3.60 (m, 1H), 3.68-3.48 (m, 1H), 3.33-3.18 (m, 2H), 3.16 (m, 1H), 3.05 (d, J = 10.00 Hz, 1H), 2.74 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.51 (s, 2H), 2.37-2.30 (m, 3H), 2.27 (d, J = 8.40 Hz, 2H), 2.10 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 1.95-1.91 (m, 2H), 1.89-1.78 (m, 4H), 1.73-1.67(m, 4H).
실시예 199
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[2-[4-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 밀봉 튜브에 들은 N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 2-클로로-5-니트로-피리미딘 (5 g, 31.34 mmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (5.84 g, 31.34 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (16.20 g, 125.37 mmol, 21.84 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 빙냉수에 부었다. 수득된 고체를 부흐너 깔때기를 통해 여과하고, 감압 하에 건조시켜 tert-부틸 4-(5-니트로피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (3.78 g, 12.15 mmol, 39% 수율)를 담갈색 고체 조 물질로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 254 [M + H- tBu]+
단계 2: 에탄올 (32 mL) 및 물 (4 mL) 중 tert-부틸 4-(5-니트로피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (3.78 g, 12.22 mmol)의 용액에 실온에서 불활성 분위기 하에 철 분말 (3.41 g, 61.10 mmol, 434.13 μL) 및 염화암모늄 (1.96 g, 36.66 mmol, 1.28 mL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (200 mL)로 세척하였다. 여과물을 물 (80 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (60 mL) 및 염수 (60 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상의 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-(5-아미노피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (1.67 g, 4.18 mmol, 34% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 280.2 [M + H]+
단계 3: 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-(5-아미노피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (1.4 g, 5.01 mmol), 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (767.49 mg, 5.01 mmol), 트리에틸 오르토포르메이트 (1.49 g, 10.02 mmol, 1.67 mL) 및 아세트산 (3.01 mg, 50.12 μmol, 2.87 μL)을 사용하여 고리화에 대한 일반적 절차 (절차 B-A)에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (260 mg, 569.68 μmol, 11% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 425.2 [M + H]+
단계 4: O-아릴화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (280 mg, 659.67 μmol), 탄산세슘 (537.34 mg, 1.65 mmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (155.45 mg, 989.51 μmol, 114.30 μL)을 사용하여 O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 B-B)에 따라 합성하였다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (250 mg, 431.85 μmol, 65% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 562.2 [M + H]+
단계 5: 술파모일화 퀴나졸리논 중간체를 tert-부틸 4-[5-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (220 mg, 391.78 μmol), [메틸(술파모일)아미노]에탄 (108.28 mg, 783.56 μmol) 및 탄산세슘 (319.12 mg, 979.4 μmol)을 사용하여 절차 B-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 석유 에테르 중 75% 에틸 아세테이트로 정제하여 tert-부틸 4-[5-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]피리미딘-2-일]피페라진-1-카르복실레이트 (120 mg, 155.36 μmol, 40% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 624.2 [M + H- tBu]+
단계 6: 필요한 아민을 HCl 매개된 N-Boc 탈보호 (절차 B-D)에 의해 합성하였다. 염화수소 용액 (디옥산 중 4.0M, 20 μL)을 사용하여 tert-부틸 4-(5-(6-(2-시아노-3-((N-에틸-N-메틸술파모일)아미노)-6-플루오로페녹시)-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피리미딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트 (60 mg, 88.27 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (53 mg, 75.71 μmol, 86% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 580.2 [M + H]+
단계 7: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-(2-피페라진-1-일피리미딘-5-일)퀴나졸린 (80 mg, 129.86 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (59.91 mg, 142.84 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (83.91 mg, 649.28 μmol, 113.09 μL) 및 HATU (59.25 mg, 155.83 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 45% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[2-[4-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]피페라진-1-일]피리미딘-5-일]-4-옥소-퀴나졸린 (36.25 mg, 36.69 μmol, 28% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 981.00 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.34 (s, 1H), 7.84 (d, J = 14.80 Hz, 2H), 7.75 (dd, J = 3.20, 8.80 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.95 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.91-3.83 (m, 6H), 3.66-3.65 (m, 4H), 3.20-3.06 (m, 6H), 2.77-2.73 (m, 4H), 2.67 (s, 3H), 1.89-1.84 (m, 2H), 1.78-1.75 (m, 2H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 200
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-1-일]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 무수 테트라히드로푸란 (150 mL) 중 4-벤질옥시시클로헥사논 (10 g, 48.96 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 500 mL 2구 둥근 바닥 플라스크에 0-5℃에서 질소 분위기 하에 알릴 마그네슘 브로마이드 (1 M, 122.39 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 6시간 동안 교반하였다. TLC에 의해 나타난 바와 같이 반응이 완료된 후, 포화 염화암모늄 (100 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 화합물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 40-50%로 용리시켜 정제하여 1-알릴-4-벤질옥시-시클로헥산올 (3.7 g, 12.85 mmol, 26% 수율)을 무색 점성 액체로서 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.26-7.31 (m, 5H), 5.82-5.91 (m, 1H), 4.96-5.02 (m, 1H), 4.48 (s, 1H), 4.43 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.20-3.35 (m, 1H), 2.55-2.30(m, 2H), 2.10 (d, J = 9.60 Hz, 1H), 1.45-1.81 (m, 6H), 1.15-1.41 (m, 2H).
단계 2: tert-부탄올 (40 mL) 및 물 (20 mL)의 혼합물 중 1-알릴-4-벤질옥시-시클로헥산올 (3.70 g, 15.02 mmol, 000)의 잘 교반된 용액을 함유하는 250 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 0-5℃에서 메타과아이오딘산나트륨 (3.60 g, 16.83 mmol)를 첨가하였다. 이 반응 혼합물에, 물 (10 mL) 중 메타중아황산나트륨 (3.20 g, 16.83 mmol, 2.16 mL)을 동일한 온도에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (100 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 70-80%로 용리시켜 정제하여 8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-올 (1.10 g, 4.15 mmol, 28% 수율)을 갈색빛 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 263.4[M+H]+.
단계 3: 무수 디클로로메탄 (15 mL) 중 8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-올 (1.10 g, 4.19 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 0-5℃에서 트리에틸아민 (1.45 g, 14.35 mmol, 2.0 mL)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 메탄 술포닐 클로라이드 (740.00 mg, 6.46 mmol, 0.500 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 물 (50 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 디클로로메탄 (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 화합물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 40-50% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 (8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일) 메탄 술포네이트 (1.0 g, 2.35 mmol, 56% 수율)를 황색빛 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 341.4[M+H]+.
단계 4: 무수 N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 (8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일) 메탄 술포네이트 (1.0 g, 2.94 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 아지드화나트륨 (300 mg, 4.61 mmol, 162.16 μL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 물 (50 ml)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 잔류물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 70-80%로 용리시켜 정제하여 3-아지도-8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸 (780 mg, 2.23 mmol, 75.77% 수율, 82% 순도)을 갈색빛 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 288.4[M+H]+.
단계 5: 테트라히드로푸란 (10 mL) 및 물 (1.0 mL)의 혼합물 중 3-아지도-8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸 (780 mg, 2.71 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 트리페닐 포스핀 (1.10 g, 4.19 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 물 (50 ml)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 잔류물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 0-20% 메탄올로 용리시켜 정제하여 8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-아민 (510 mg, 1.85 mmol, 68% 수율)을 갈색빛 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 262.4[M+H]+.
단계 6: 톨루엔 (10.0 mL) 및 테트라히드로푸란 (3.0 mL)의 혼합물 중 8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-아민 (510 mg, 1.95 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 밀봉-튜브에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (370 mg, 2.42 mmol) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (801.90 mg, 5.41 mmol, 0.900 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 110℃로 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 5-10%의 메탄올로 용리시켜 정제하여 3-(8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)-6-히드록시-퀴나졸린-4-온 (560 mg, 1.30 mmol, 66% 수율)을 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 407.7 [M+H]+.
단계 7: 무수 1,4-디옥산 (10 mL) 중 3-(8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)-6-히드록시-퀴나졸린-4-온 (560 mg, 1.38 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 아세트산 (104.90 mg, 1.75 mmol, 0.100 mL)을 첨가하고, 탄소 상 10% 팔라듐 (150 mg, 140.95 μmol, 10% 순도)을 채우고, 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시키고, 주위 온도에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 메탄올 10-15%로 용리시켜 정제하여 6-히드록시-3-(8-히드록시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)퀴나졸린-4-온 (340 mg, 913.54 μmol, 66% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 317.2 [M+H]+.
단계 8: 무수 테트라히드로푸란 (10 mL) 중 6-히드록시-3-(8-히드록시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)퀴나졸린-4-온 (340 mg, 1.07 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 25 mL 밀봉 튜브에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (260 mg, 1.66 mmol, 191.18 μL) 및 탄산세슘 (1.10 g, 3.38 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 물 (50 ml)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (2 x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 잔류물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 3,6-디플루오로-2-[3-(8-히드록시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-벤조니트릴 (380 mg, 687.20 μmol, 64% 수율)을 황색빛 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 454.1 [M+H]+
단계 9/단계 10: 무수 디클로로메탄 (10 mL) 중 3,6-디플루오로-2-[3-(8-히드록시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-벤조니트릴 (380 mg, 838.04 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 피리디늄 클로로크로메이트 (460 mg, 2.13 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 잔류물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 90-95% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 320 mg의 라세미 화합물 (95% 순도)을 수득하였다. 이 화합물을 키랄 SFC 정제 (칼럼 : 키랄팩 ASH [(250*30)mm, 5μ]; 이동상: CO2 : 이소프로필 알콜 (70:30); 총 유량: 70 g/분; 파장: 220 nm; 사이클 시간: 8.2분; 배압: 100 bar)에 의해 정제하여 3,6-디플루오로-2-[4-옥소-3-[(3S)-8-옥소-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]퀴나졸린-6-일]옥시-벤조니트릴 (제1 용리 피크, 130 mg, 259.18 μmol, 31% 수율)을 갈색빛 점성 액체로서, 그리고 3,6-디플루오로-2-[4-옥소-3-[(3R)-8-옥소-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]퀴나졸린-6-일]옥시-벤조니트릴 (제2 용리 피크, 110 mg, 233.93 μmol, 28% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 452.2 [M + H]+. SOR 분석: F1 [α]d: 64.4 (CHCl3, 0.5M); F2 [α]d: -73.04 (CHCl3, 0.5M)
단계 11: 무수 N,N-디메틸포름아미드 (3.0 mL) 중 3,6-디플루오로-2-[4-옥소-3-[(3R)-8-옥소-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]퀴나졸린-6-일]옥시-벤조니트릴 (110 mg, 243.67 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 10 mL 밀봉 튜브에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (60 mg, 434.19 μmol) 및 탄산세슘 (250 mg, 767.30 μmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 65℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 물 (30 ml)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였다. 조 잔류물을 플래쉬 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 5-10%의 메탄올로 용리시켜 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[(3R)-8-옥소-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]퀴나졸린 (85 mg, 110.43 μmol, 45% 수율)을 갈색빛 점성 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 570.2[M+H]+
단계 12: 무수 N,N-디메틸아세트아미드 (5.0 mL) 중 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-3-[(3R)-8-옥소-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]퀴나졸린 (85 mg, 149.23 μmol) 및 1-[5-플루오로-1-메틸-6-(4-피페리딜)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 염산 염 (115 mg, 301.18 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 10 mL 밀봉-튜브에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (742.00 mg, 5.74 mmol, 1.0 mL) 및 소듐 시아노보로히드라이드 (100 mg, 1.59 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃로 16시간 동안 가열하였다.
완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 50 g 스냅 (고성능 레디셉 골드®Rf C18)을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 아세토니트릴로 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-8-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-1-피페리딜]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (6.0 mg, 6.30 μmol, 4% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 899.0 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.57 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 2.80, 9.20 Hz, 1H), 7.58-7.45 (m, 1H), 7.43-7.34 (m, 3H), 7.27-7.26 (m, 1H), 5.32-5.22 (m, 1H), 4.16-4.05 (m, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.91 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.20-2.99 (m, 5H), 2.76 (t, J = 6.40 Hz, 3H), 2.60-2.50 (m, 4H), 1.95-1.44 (m, 15H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 201
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-플루오로피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디클로로메탄 (3 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (200 mg, 420.60 μmol)의 용액에 -30℃에서 비스-(2-메톡시에틸)아미노황 트리플루오라이드 (139.58 mg, 630.90 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 디클로로메탄 (60 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 물 (20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 하에 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-플루오로-4-피페리딜]아세테이트 (140 mg, 210.22 μmol, 50% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 478.2 [M+H]+
단계 2: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-플루오로-4-피페리딜]아세테이트 (140 mg, 293.19 μmol)의 냉각된 0℃ 용액에 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 (4M, 3 mL)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 디에틸 에테르로 연화처리하여 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-플루오로-4-피페리딜]아세트산 (130 mg, 214.37 μmol, 73% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 422.2, [M+H]+
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (80 mg, 143.73 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-플루오로-4-피페리딜]아세트산 (60.57 mg, 143.73 μmol), HATU (54.65 mg, 143.73 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (74.30 mg, 574.91 μmol, 100.14 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% HCOOH 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-플루오로-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (14 mg, 14.45 μmol, 10.05% 수율, 99.06% 순도)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 960.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.21 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.64-7.75 (m, 1H), 7.68 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.38-7.46 (m, 1H), 7.35-7.38 (m, 2H), 7.17 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 5.23-5.33 (m, 1H), 4.11-4.21 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.71-3.81 (m, 1H), 3.55-3.65 (m, 1H), 3.44-3.55 (m, 1H), 3.25-3.35 (m, 4H), 3.08-3.18 (m, 2H), 2.88-2.98 (m, 2H), 2.78-2.88 (m, 2H), 2.62-2.70 (m, 5H), 2.54-2.60 (m, 2H), 2.31-2.41 (m, 1H), 1.98-2.18 (m, 5H), 1.50-1.81 (m, 4H).
실시예 202
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로아닐리노]-5-플루오로-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디클로로메탄 (20 mL) 중 2-아미노-6-플루오로-벤조산 (2.0 g, 12.89 mmol)의 교반 용액에 -10℃에서 질소 분위기 하에 N-브로모숙신이미드 (2.29 g, 12.89 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 0-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 6-아미노-3-브로모-2-플루오로-벤조산 (1.6 g, 6.23 mmol, 48% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z(ESI): 234.0 [M+H]+
단계 2: 톨루엔 (24.55 mL) 및 테트라히드로푸란 (4.09 mL) 중 6-아미노-3-브로모-2-플루오로-벤조산 (1.7 g, 7.26 mmol), tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.86 g, 7.26 mmol)의 용액에 실온에서 트리에틸 오르토포르메이트 (3.23 g, 21.79 mmol, 3.62 mL)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 110℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (50 ml)로 희석하고, 물 (10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 0-90%를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-브로모-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.58 g, 2.87 mmol, 39% 수율)를 갈색빛 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 484.4[M+H]+
단계 3a: 이소프로판올 (15 mL) 중 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (3 g, 19.10 mmol, 2.21 mL)의 용액을 소형 클레이브에 넣고, 실온에서 수산화암모늄 (8.03 g, 229.16 mmol, 8.92 mL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 용액 (20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 50-70%로 용리시켜 정제하여 2-아미노-3,6-디플루오로-벤조니트릴 (750 mg, 4.28 mmol, 22% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. GC-MS m/z: 154 [M-H]-.
단계 3: 1,4-디옥산 (5 mL) 중 tert-부틸 3-(6-브로모-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.56 g, 3.24 mmol), 2-아미노-3,6-디플루오로-벤조니트릴 (0.5 g, 3.24 mmol)의 용액에 탄산세슘 (477.55 mg, 1.47 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기로 10분 동안 탈기시키고, 실온에서 Pd-PEPPSI-IHept-Cl 3-클로로피리딘 (28.49 mg, 29.29 μmol)을 첨가하고, 110℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (5mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.6 g, 904.62 μmol, 28% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 556.4 [M + H]+.
단계 4 /단계 5: 아세토니트릴 (8 mL) 중 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.8 g, 1.44 mmol)의 교반 용액에 실온에서 디-tert-부틸 디카르보네이트 (628.56 mg, 2.88 mmol, 660.95 μL), DMAP (87.96 mg, 720.01 μmol) 및 트리에틸아민 (437.15 mg, 4.32 mmol, 602.13 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 30 g C18 칼럼을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 0.1% 중탄산암모늄을 함유하는 물 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 라세미 화합물을 수득하였다. 생성된 생성물을 키랄 SFC 정제 (칼럼: 룩스 셀룰로스-2 [(250*30)mm, 5μ]; 이동상: CO2 : 메탄올 (60:40); 총 유량: 100 g/분; 배압: 100 bar; 파장: 220 nm; 사이클 시간: 22.5분)에 의해 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (분획-1, R-이성질체로서 임의적으로 할당 (0.16 g, 100%) 및 tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (분획-2, S-이성질체로서 임의적으로 할당, 0.19 g, 99.7%)를 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 600.2 [M+H-56]+
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (84.30 mg, 610.07 μmol), tert-부틸 (3R)-3-[6-(N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3,6-디플루오로-아닐리노)-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.16 g, 244.03 μmol)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (238.53 mg, 732.08 μmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 60℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (5 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 30 g C18 칼럼을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80 mg, 103.38 μmol, 42% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 774.9[M+H]+
단계 7: 디클로로메탄 (1 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-[N-tert-부톡시카르보닐-2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80 mg, 103.38 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M HCl (4.0 M, 258.45 μL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 염산 염 (63 mg, 100.04 μmol, 97% 수율)을 갈색빛 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 574.7 [M+H]+.
단계 8a: 1,4-디옥산 (4 mL) 중 tert-부틸 2-(4-피페리딜)아세테이트 (154.04 mg, 772.93 μmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄산세슘 (419.72 mg, 1.29 mmol) 및 1-(5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (0.2 g, 515.28 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 탈기시킨 다음, 실온에서 Pd-PEPPSI-IHeptCl 3-클로로피리딘 (25.04 mg, 25.74 μmol)을 첨가하고, 80℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세테이트 (80 mg, 163.74 μmol, 32% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 460.3 [M+H]+.
단계 8b: 디클로로메탄 (1 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세테이트 (80 mg, 174.10 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (4.0 M, 435.24 μL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세트산 (76 mg, 157.83 μmol, 91% 수율)을 갈색빛 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 404.5[M+H]+.
단계 8: 표제 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세트산 (41.66 mg, 94.71 μmol), (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (63 mg, 103.27 μmol), HATU (39.26 mg, 103.27 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (66.73 mg, 516.33 μmol, 89.94 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 중탄산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-아닐리노]-5-플루오로-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (43 mg, 43.00 μmol, 42% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 959.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.53 (s, 1H), 9.88 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.50-7.60 (m, 1H), 7.42 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.32-7.43 (m, 1H), 7.34 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 4.00, 9.00 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 5.30-5.36 (m, 1H), 4.14 (d, J = 4.40 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.69-3.78 (m, 1H), 3.32-3.61 (m, 4H), 3.11-3.18 (m, 2H), 2.65-2.81 (m, 6H), 2.35-2.58 (m, 4H), 2.01-2.10 (m, 1H), 1.60-1.91 (m, 8H), 1.35-1.51 (m, 2H), 1.04 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 203
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[(4R)-4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: -10℃에서 THF (50 mL) 중 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-옥소-피페리딘-1-카르복실레이트 (3 g, 12.75 mmol)의 교반 용액에 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔 (5.82 g, 38.26 mmol, 5.71 mL)을 첨가하고, 이어서 THF (40 mL) 중 1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부탄-1-술포닐 플루오라이드 (7.71 g, 25.51 mmol, 4.40 mL)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물에 물 (50 ml)을 첨가하고, 에틸 아세테이트 (2X100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 혼합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-40% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부틸술포닐옥시)-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (1.5 g, 2.87 mmol, 23% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 6.60 (s, 1H), 4.29 (d, J = 4.00 Hz, 2H), 4.05 (t, J = 11.20 Hz, 2H), 1.51 (s, 9H).
단계 2: 디옥산 (8 ml) 중 1-[5-플루오로-1-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (500 mg, 1.29 mmol) 및 tert-부틸 3,3-디플루오로-4-(1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부틸술포닐옥시)-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (732.92 mg, 1.42 mmol)의 교반 용액에 물 (2 ml) 중 탄산나트륨 (409.54 mg, 3.86 mmol, 161.75 μL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시키고, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐 (II), 디클로로메탄과의 착물 (105.10 mg, 128.80 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃로 2시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (30 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트 (2X50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 혼합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 302.97 μmol, 24% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI+): 480.6 [M+H]+.
단계 3: 100 mL의 소형 클레이브 유리 용기에서 에탄올/에틸 아세테이트 (1:2)의 혼합물 중 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-2,6-디히드로피리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 375.43 μmol)의 용액에 질소 하에 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량% (60 mg, 427.24 μmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5 kg/cm3의 압력 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 디클로로메탄 중 10% 메탄올 (100 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (170 mg, 340.62 μmol, 91% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 426.2 [M-tBu+H]+.
단계 4: DCM (10 mL) 중 tert-부틸 4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트 (70 mg, 145.39 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 (1 mL)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 디에틸 에테르로 세척하여 생성물 1-[6-(3,3-디플루오로-4-피페리딜)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (60 mg, 119.77 μmol, 82% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI+): 382.2 [M+H]+.
단계 5: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 1-[6-(3,3-디플루오로-4-피페리딜)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (60 mg, 157.34 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (61.00 mg, 472.01 μmol, 82.21 μL)에 이어서 tert-부틸 브로모아세테이트 (33.76 mg, 173.07 μmol, 25.38 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 완료된 후, 반응 혼합물에 빙냉수 (5 mL)를 첨가하고, 에틸 아세테이트 (2 X 20 mL)를 사용하여 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시켰다. 수득된 조 생성물을 역상 HPLC를 사용하여 물 중 0.1% 포름산 중 0-50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (40 mg, 80.49 μmol, 51% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI+): 496.2 [M+H]+.
단계 6: 라세미 화합물 tert-부틸 2-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (40 mg, 80.73 μmol)를 키랄 SFC (칼럼: YMC 셀룰로스-SC; 이동상: CO2 : IPA (40:60); 유량: 5 ml/분; 배압: 100 bar; 파장: 210 nm)에 의해 키랄 분해하여 피크 1 (제1 용리) tert-부틸 2-[(4R)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (14 mg, 27.49 μmol, 34% 수율, 100% ee, R-거울상이성질체로서 임의적으로 할당)를 회백색 고체로서 및 피크 2 (제2 용리) tert-부틸 2-[(4S)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (13 mg, 25.83 μmol, 32% 수율, 100% ee, S-거울상이성질체로서 임의적으로 할당)를 회백색 고체로서 수득하였다.
단계 7: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 2-[(4R)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (14 mg, 28.25 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 디옥산 중 4.0M 염화수소 용액 (4 M, 105.95 μL)을 적가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 추가로 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 10 ml의 디클로로메탄과 감압 하에 공증류시켜 2-[(4R)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (12 mg, 26.63 μmol, 94% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI+): 438.1 [M-H]-.
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (15.21 mg, 27.32 μmol) 및 2-[(4R)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (13.00 mg, 27.32 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (10.59 mg, 81.96 μmol, 14.28 μL) 및 HATU (15.58 mg, 40.98 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[(4R)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (7 mg, 7.05 μmol, 26% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 978.2 [M+H]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.59 (s, 1H), 10.10 (s, 1H), 8.36 (d, J = 4.80 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.68 (t, J = 2.40 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 10.40 Hz, 2H), 7.36 (s, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.20-4.10 (m, 2H), 4.03 (d, J = 7.20 Hz, 3H), 3.92 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 3.69-3.34 (m, 6H), 3.40-3.20 (m, 4H), 3.10 (d, J = 6.80 Hz, 2H), 3.01 (d, J = 9.60 Hz, 1H), 2.80-2.60 (m, 4H), 2.40 (m, 4H), 2.40-2.00 (m, 1H), 1.90-1.80 (m, 2H), 1.68 (d, J = 9.20 Hz, 3H), 1.06 (t, J = Hz, 3H).
실시예 204
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[(4S)-4-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-3,3-디플루오로피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 2-[(4S)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세테이트 (12 mg, 24.22 μmol, 000)의 교반 용액에 0℃에서 디옥산 중 4.0M 염화수소 용액 (4 M, 90.82 μL)을 적가하고, 반응물을 실온에서 16시간 동안 추가로 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 10 ml의 디클로로메탄과 감압 하에 공증류시켜 2-[(4S)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (11 mg, 21.82 μmol, 90% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI+): 438.2 [M-H]-.
단계 2: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (12.87 mg, 23.12 μmol) 및 2-[(4S)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세트산 (11 mg, 23.12 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (8.96 mg, 69.35 μmol, 12.08 μL) 및 HATU (13.18 mg, 34.67 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[(4S)-4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-3,3-디플루오로-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (7 mg, 6.86 μmol, 30% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 978.2 [M+H]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.59 (s, 1H), 10.21 (s, 1H), 8.36 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.68 (t, J = -7.60 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 10.40 Hz, 2H), 7.36 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.20-4.10 (m, 2H), 4.03 (d, J = 6.40 Hz, 3H), 3.92 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 3.69-3.34 (m, 6H), 3.40-3.20 (m, 4H), 3.45 (d, J = 361.20 Hz, 1H), 3.01 (d, J = 9.60 Hz, 1H), 2.80-2.60 (m, 6H), 2.40 (m, 4H), 2.10-2.06 (m, 1H), 1.80-1.60 (m, 4H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 205
(3R)-8-[2-[1-[5-클로로-3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 디메틸 술폭시드 (10mL) 중 tert-부틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (1.24 g, 5.76 mmol)의 교반 용액에 실온에서 N,N-디이소프로필에틸아민 (2.23 g, 17.29 mmol, 3.01 mL) 및 5-클로로-2,4-디플루오로-벤조니트릴 (1 g, 5.76 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-20% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[1-(2-클로로-4-시아노-5-플루오로-페닐)-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (1.1 g, 2.93 mmol, 51% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z 369.2 [M+H]+.
단계 2: 에탄올 (10 mL) 중 tert-부틸 2-[1-(2-클로로-4-시아노-5-플루오로-페닐)-4-히드록시-4-피페리딜] 아세테이트 (1 g, 2.71 mmol)의 교반 용액에 실온에서 메틸 히드라진 (374.73 mg, 8.13 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 90℃에서 24시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 용매를 감압 하에 농축에 의해 제거하여 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[1-(3-아미노-5-클로로-1-메틸-인다졸-6-일)-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (580 mg, 1.39 mmol, 51% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES+): m/z 395.2 [M+H]+.
단계 3: 1,4-디옥산 (6 mL) 중 tert-부틸 2-[1-(3-아미노-5-클로로-1-메틸-인다졸-6-일)-4-히드록시-4-피페리딜] 아세테이트 (520 mg, 1.32 mmol)의 용액에 실온에서 아크릴산 (189.78 mg, 2.63 mmol, 180.57 μL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 36시간 동안 교반하였다. 36시간 후, 반응 혼합물을 수성 중탄산나트륨에 의해 염기성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 수성 층을 수성 1.5N HCl에 의해 추가로 산성화시키고, 화합물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 3-[[6-[4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-4-히드록시-1-피페리딜]-5-클로로-1-메틸-인다졸-3-일] 아미노] 프로판산 (300 mg, 501.12 μmol, 38% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z 467.3 [M+H]+.
단계 4: 아세트산 (4.05 mL) 중 3-[[6-[4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-4-히드록시-1-피페리딜]-5-클로로-1-메틸-인다졸-3-일]아미노]프로판산 (300 mg, 424.02 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 시안산나트륨 (137.82 mg, 2.12 mmol, 72.92 μL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밀봉 튜브에서 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 조 혼합물을 농축시키고, 수성 HCl (4M) 용액을 첨가하고, 50℃에서 12시간 동안 계속 가열하였다. 이어서, 조 반응 혼합물을 농축시키고, 역상 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 물 중 0.1% 포름산 중 48% 아세토니트릴을 사용하여 정제하여 2-[1-[5-클로로-3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (170 mg, 331.13 μmol, 78% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 436.10 [M+H]+.
단계 5: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 B-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[5-클로로-3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (80 mg, 166.01 μmol) 및 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (98.46 mg, 166.01 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (107.28 mg, 830.07 μmol, 144.58 μL) 및 HATU (82.06 mg, 215.82 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-8-[2-[1-[5-클로로-3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (11 mg, 10.73 μmol, 6% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): m/z 974.0. [M+H]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.65 (dd, J = 3.20, 8.60 Hz, 2H), 7.36 (d, J = 2.80 Hz, 2H), 5.41-5.31 (m, 1H), 5.06 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 4.21-4.11 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.92-3.89 (m, 2H), 3.81-3.72 (m, 1H), 3.68-3.50 (m, 2H), 3.12-3.01 (m, 7H), 3.79-3.70 (m, 2H), 2.65-2.50 (m, 4H), 2.49-2.34 (m, 2H), 2.11-2.01 (m, 1H), 1.90-1.50 (m, 9H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 206
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 톨루엔 중 벤질 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄산세슘 (2 당량) 및 메틸 2-(트리페닐-포스파닐리덴)아세테이트 (1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 10시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 4-(2-메톡시-2-옥소-에틸리덴)피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 2: DME (21.58 mL) 중 벤질 4-(2-메톡시-2-옥소-에틸리덴)피페리딘-1-카르복실레이트 (500 mg, 1.73 mmol)의 용액에 실온에서 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액) (1 당량)을 첨가하였다. 이에 이어서, -10℃에서 질소 분위기 하에 메틸 2-술파닐아세테이트 (1.5 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 LC-MS에 의해 모니터링하면서 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료되었을 때, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 O8-벤질 O4-메틸 3-옥소-1-티아-8-아자스피로[4.5]데칸-4,8-디카르복실레이트를 수득하였다.
단계 3: DMSO 중 O8-벤질 O4-메틸 3-옥소-1-티아-8-아자스피로[4.5]데칸-4,8-디카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 물 중 염화리튬 (3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 LC-MS에 의해 모니터링하면서 150℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 3-옥소-1-티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 4: DCM 중 벤질 3-옥소-1-티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 3-클로로벤젠카르보퍼옥시산 (3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 1,1,3-트리옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 5: 디옥산 중 벤질 1,1,3-트리옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 디-tert-부틸 데카르보네이트 (1 당량)를 첨가하였다. 용액을 아르곤으로 퍼징한 후, 탄소 상 10% 팔라듐 (2.5 당량)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 수소 분위기 하에 밤새 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 1,1,3-트리옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 6: 에탄올 중 tert-부틸 1,1,3-트리옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 히드록실아민;히드로클로라이드 (1.5 당량) 및 아세트산나트륨 (3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 65℃에서 6시간 동안 가열하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 진공 하에 농축시켰다. 이어서, 물을 잔류물에 첨가하고, 생성된 고체를 여과하고, 진공 하에 건조시켜 tert-부틸 (3Z)-3-히드록시이미노-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 7: 에탄올 중 tert-부틸 (3Z)-3-히드록시이미노-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량) 및 라니 니켈 (6 당량)의 용액을 실온에서 수소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 이를 에탄올로 세척하였다. 이어서, 합한 유기 층을 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 3-아미노-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 8: 톨루엔:테트라히드로푸란 (5:1) 중 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1 당량)의 용액에 실온에서 무수 트리에틸 오르토포르메이트 (2 당량)를 첨가하고, 이어서 tert-부틸 3-아미노-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 밀봉 튜브에서 110℃에서 18시간 동안 가열하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 후처리를 수행하였다. 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 9: THF 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 교반 용액에 실온에서 탄산세슘 (1.1 당량) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (1.1 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인한 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 10: 라세미 화합물 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 키랄 SFC 정제에 의해 분해하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 11: N,N-디메틸포름아미드 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (2.5 당량) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인한 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 12: 디클로로메탄 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 디옥산 중 4 N HCl (10 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응물을 진공 하에 농축시키고, 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸을 수득하였다.
단계 13: N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (1 당량) 및 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,1-디옥소-1티아-8-아자스피로[4.5]데칸 (1 당량)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하였다. 이에 이어서, 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 조 혼합물을 역상 HPLC에 의해 정제하여 목적 화합물 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데칸을 수득하였다.
실시예 207
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-8-[[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]메틸술포닐]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린
단계 1: THF 중 8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-아민 (1 당량)의 용액에 실온에서 물 중 중탄산나트륨 (3 당량) 및 tert-부틸 카르보네이트 (1.5 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 생성물 tert-부틸 N-(8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)카르바메이트를 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: tert-부틸 N-(8-벤질옥시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)카르바메이트 (1 당량)의 용액에 탄소 상 10% 팔라듐 (0.12 당량)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 N2로 탈기시키고, 실온에서 수소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 이를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 이어서, 여과물을 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 N-(8-히드록시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)카르바메이트를 수득하였다.
단계 3: 무수 DCM 중 tert-부틸 N-(8-히드록시-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)카르바메이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (2.5 당량)에 이어서 메실 클로라이드 (1.5 당량)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 [3-(tert-부톡시카르보닐아미노)-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일] 메탄술포네이트를 수득하였다.
단계 4: 무수 DMF 중 [3-(tert-부톡시카르보닐아미노)-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]메탄술포네이트 (1 당량)의 용액에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 티오아세트산칼륨 (2.5 당량)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 교반하고, LC-MS에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 N-(8-술파닐-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)카르바메이트를 수득하였다.
단계 5: THF 중 NaH (1.2 당량)의 현탁액을 0℃로 냉각시키고, 이어서 tert-부틸 N-(8-술파닐-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일)카르바메이트 (1 당량)를 적가하였다. 반응물을 30분 동안 교반한 후, 벤질 1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카르복실레이트 (1.2 당량)를 첨가하고, 반응물을 온도로 가온되도록 하고, 이 온도에서 4시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 0℃에서 MeOH로 조심스럽게 켄칭하고, 후처리를 수행하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 4-[[3-(tert-부톡시카르보닐아미노)-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술파닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 6: DCM 중 벤질 4-[[3-(tert-부톡시카르보닐아미노)-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술파닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 3-클로로벤젠카르보퍼옥시산 (3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 4-[[3-(tert-부톡시카르보닐아미노)-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 7: 디클로로메탄 중 벤질 4-[[3-(tert-부톡시카르보닐아미노)-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 디옥산 중 4 N HCl (10 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응물을 진공 하에 농축시키고, 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 4-[(3-아미노-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일)술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 8: 톨루엔:테트라히드로푸란 (5:1) 중 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1 당량)의 교반 용액에 실온에서 무수 트리에틸 오르토포르메이트 (2 당량)를 첨가하고, 이어서 벤질 4-[(3-아미노-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일)술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (1 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 밀봉 튜브에서 110℃에서 18시간 동안 가열하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 후처리를 수행하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 4-히드록시-4-[[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 9: THF 중 벤질 4-히드록시-4-[[3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (1 당량)의 교반 용액에 실온에서 탄산세슘 (1.1 당량) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (1.1 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 4-[[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 10: 라세미 화합물 벤질 4-[[3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트를 키랄 SFC 정제에 의해 분해하여 벤질 4-[[(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 11: N,N-디메틸포름아미드 중 벤질 4-[[(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (2.5 당량) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 4-[[(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 12: 메탄올 중 벤질 4-[[(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사스피로[4.5]데칸-8-일]술포닐메틸]-4-히드록시-피페리딘-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄소 상 10% 팔라듐 (0.1 당량)을 첨가하였다. 용액을 탈기시키고, 수소 분위기 하에 16시간 동안 또는 LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 후처리를 수행하였다. 이어서, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-8-[(4-히드록시-4-피페리딜)메틸술포닐]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린을 수득하였다.
단계 13: 디옥산 중 1-(5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (2.5 당량) 및 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-8-[(4-히드록시-4-피페리딜)메틸술포닐]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (1 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 10분 동안 탈기시킨 후, Pd-PEPPSI-IHeptCl (0.05 당량)을 첨가하였다. 반응물을 LC-MS에 의해 모니터링하면서 110℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물을 추가로 정제용 HPLC에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-8-[[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]메틸술포닐]-1-옥사스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린을 수득하였다.
실시예 208
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: DCM (142.00 mL) 중 tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트 (20 g, 100.38 mmol)의 교반 용액에 벤질 카르바메이트 (18.21 g, 120.45 mmol) 및 알릴트리메틸실란 (17.20 g, 150.57 mmol, 23.99 mL)을 첨가하고, 이어서 0℃에서 삼플루오린화붕소 에테레이트 (17.10 g, 120.45 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하고, 1M NaOH/아세톤 혼합물에 녹이고, 디-tert-부틸 디카르보네이트 (21.91 g, 100.38 mmol, 23.04 mL)를 실온에서 5시간 동안 첨가하였다. 반응 진행을 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, DCM으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 (100-200 메쉬) 바이오타지(Biotage)® 이솔레라 칼럼 크로마토그래피 (생성물을 29%에서 32% EtOAc/석유 에테르로 용리시킴)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-알릴-4-(벤질옥시카르보닐아미노)피페리딘-1-카르복실레이트 (24.6 g, 61.09 mmol, 60.86% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LC-MS (ES+): m/z 275.2 [M+H-CO2 tBu]+.
단계 2: DCM (200 mL) 중 tert-부틸 4-알릴-4-(벤질옥시카르보닐아미노)피페리딘-1-카르복실레이트 (24 g, 64.09 mmol)의 용액을 함유하는 1L 1구 둥근 바닥 플라스크에 0℃에서 1,4-디옥산 중 4M 염산 (4 M, 96.14 mL)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 UPLC에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 디에틸 에테르로 세척하고, 건조시켜 목적 생성물 벤질 N-(4-알릴-4-피페리딜)카르바메이트 (16.9 g, 61.52 mmol, 96.00% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ES-): m/z 275.2 [M+H]+.
단계 3: DCM (20 mL) 중 벤질 N-(4-알릴-4-피페리딜)카르바메이트 (16.5 g, 60.14 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (24.34 g, 240.56 mmol, 33.53 mL) 및 트리플루오로아세트산 무수물 (25.26 g, 120.28 mmol, 16.99 mL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, DCM으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 유기 층을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 실리카 겔 (100-200 메쉬) 바이오타지® 이솔레라 칼럼 크로마토그래피 (생성물을 55%에서 58% EtOAc/석유 에테르로 용리시킴)에 의해 정제하여 벤질 N-[4-알릴-1-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-4-피페리딜]카르바메이트 (8 g, 20.95 mmol, 34.84% 수율)를 갈색 액체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.43 (s, 5H), 5.79-5.72 (m, 1H), 5.28 (s, 2H), 5.05 (ddd, J = 10.6, 2.0 Hz, 2H), 3.77-3.62 (m, 2H), 3.45-3.39 (m, 2H), 2.70 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.53 (s, 1H), 2.25-2.20 (m, 2H), 2.10-2.05 (m, 2H) ppm.
단계 4: 100 mL 1구 둥근 바닥 플라스크, 벤질 N-[4-알릴-1-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-4-피페리딜]카르바메이트 (4 g, 10.80 mmol)에 0℃에서 트리플루오로아세트산 (12.31 g, 108.00 mmol, 8.32 mL)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 UPLC에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 바이오타지® 이솔레라 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르 중 100% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 생성물 1-(4-알릴-4-아미노-1-피페리딜)-2,2,2-트리플루오로-에타논 (2 g, 8.30 mmol, 76.82% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ESI+): m/z [M+H]+.
단계 5: 질소 분위기 하에 물 (401.20 μL) 및 tert-부틸 알콜 (1.20 mL) 중 1-(4-알릴-4-아미노-1-피페리딜)-2,2,2-트리플루오로-에타논 (1.3 g, 3.71 mmol, 061)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 밀봉 튜브에 과아이오딘산나트륨 (793.87 mg, 3.71 mmol) 및 메타중아황산나트륨 (705.59 mg, 3.71 mmol, 476.75 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. UPLC에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 조 생성물 2,2,2-트리플루오로-1-(3-히드록시-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)에타논 (2.6 g, 2.37 mmol, 63.88% 수율)을 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ES+): m/z 253.2 [M+H]+.
단계 6: THF (9.99 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(3-히드록시-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)에타논 (1.7 g, 6.74 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 밀봉 튜브에 중탄산나트륨 (3.40 g, 40.44 mmol) 및 디-tert-부틸 디카르보네이트 (2.21 g, 10.11 mmol, 2.32 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. UPLC에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 에틸 아세테이트 중에 용해시키고, 물로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 조 tert-부틸 3-히드록시-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1.9 g, 4.31 mmol, 64.01% 수율)를 수득하였다. LC-MS (ES+): m/z 297.2 [M-tBu+H]+.
단계 7: DCM (20 mL) 중 tert-부틸 3-히드록시-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1.9 g, 5.39 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 실온에서 질소 분위기 하에 트리에틸아민 (1.64 g, 16.18 mmol, 2.25 mL) 및 메탄술포닐 클로라이드 (926.55 mg, 8.09 mmol, 627.32 μL)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. TLC에 의해 나타난 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, 생성물을 DCM (2x100 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 화합물 tert-부틸 3-메틸술포닐옥시-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1.6 g, 3.23 mmol, 59.96% 수율)를 수득하였다. 조 물질을 단지 후속 단계에 사용하였다. LC-MS (ESI): m/z 331.0 [M+H-Boc]+.
단계 8: DMF (30 mL) 중 tert-부틸 3-메틸술포닐옥시-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (2.8 g, 6.50 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 실온에서 아지드화나트륨 (634.33 mg, 9.76 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. TLC에 의해 나타난 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)로 추출하고, 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 화합물 tert-부틸 3-아지도-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1.6 g, 4.07 mmol, 62.57% 수율)를 수득하였으며, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다. LC-MS (ESI): m/z 278.2 [M+H-Boc]+.
단계 9: 물 (0.5 mL) 및 THF (2 mL) 중 tert-부틸 3-아지도-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (150 mg, 397.50 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 25 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 트리페닐포스핀 (156.39 mg, 596.25 μmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. TLC에 의해 나타난 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 생성물을 에틸 아세테이트 (2x10 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시키고, 정제하여 tert-부틸 3-아미노-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (60 mg, 111.00 μmol, 27.92% 수율)를 수득하였다. LC-MS (ES+): m/z 296.1 [M+H-tBu]+.
단계 10: 톨루엔:테트라히드로푸란 (5:1) 중 2-아미노-5-히드록시-벤조산 (1 당량)의 교반 용액에 무수 트리에틸 오르토포르메이트 (2 당량)를 실온에서 첨가하고, 이어서 tert-부틸 3-아미노-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 밀봉 튜브에서 110℃에서 18시간 동안 가열하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 후처리를 수행하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 11: THF 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-옥소-퀴나졸린-3-일)-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1 당량)의 교반 용액에 실온에서 탄산세슘 (1.1 당량) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (1.1 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 12: 라세미 화합물 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트를 키랄 SFC 정제에 의해 분해하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 13: N,N-디메틸포름아미드 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (2.5 당량) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 14: 메탄올 및 물 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 무수 탄산칼륨 (5 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃로 16시간 동안 가열하고, LC-MS에 의해 모니터링하였다. 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 15: N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (1 당량) 및 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하였다. 이에 이어서, 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 조 혼합물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적 화합물 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 16: 디클로로메탄 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 디옥산 중 4 N HCl (10 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응물을 진공 하에 농축시키고, 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린을 수득하였다.
실시예 209
6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린
단계 1: 디클로로메탄 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 디옥산 중 4 N HCl (10 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응물을 진공 하에 농축시켜, 3,6-디플루오로-2-[4-옥소-3-[(3R)-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]퀴나졸린-6-일]옥시-벤조니트릴을 수득하였다.
단계 2: DMF 중 3,6-디플루오로-2-[4-옥소-3-[(3R)-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]퀴나졸린-6-일]옥시-벤조니트릴 (1 당량), 메틸 아이오다이드 (2 당량)의 용액에 DIPEA (3 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 3,6-디플루오로-2-[3-[(3R)-1-메틸-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-벤조니트릴을 수득하였다.
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 중 3,6-디플루오로-2-[3-[(3R)-1-메틸-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린-6-일]옥시-벤조니트릴 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (2.5 당량) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-1-메틸-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린을 수득하였다.
단계 4: 메탄올 및 물 중 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-1-메틸-8-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (1 당량)의 용액에 실온에서 무수 탄산칼륨 (5 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 16시간 동안 환류시키고, LC-MS에 의해 모니터링하였다. 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린을 수득하였다.
단계 5: N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (1 당량) 및 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-[(3R)-1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소-퀴나졸린 (1 당량)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하였다. 이에 이어서, 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 조 혼합물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 화합물 6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-3-[(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-3-일]-4-옥소퀴나졸린을 수득하였다.
실시예 210
(3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-3-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 톨루엔 (10 mL) 및 THF (3 mL) 중 2-아미노-5-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]벤조산 (1.09 g, 2.81 mmol) 및 tert-부틸 3-아미노-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (600 mg, 2.34 mmol)의 교반 용액에 주위 온도에서 디에톡시메톡시에탄 (693.76 mg, 4.68 mmol, 778.63 μL)에 이어서 아세트산 (28.11 mg, 468.13 μmol, 26.77 μL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 닫힌 밀봉 튜브에서 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 중탄산나트륨 용액 (10 mL)에 이어서 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (531 mg, 734.06 μmol, 31% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): m/z 637.7 [M+H]+ 및 581.1 [M -tBu+H]+.
단계 2: 메탄올 (6 mL) 중 tert-부틸 3-[6-[2,6-디플루오로-3-[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (360 mg, 565.54 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 n-부틸 아민 (206.82 mg, 2.83 mmol, 280.24 μL)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 60℃로 16시간 동안 가온하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 10% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-벤조일)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (170 mg, 279.90 μmol, 49% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): m/z 485.0 [M-tBu+H]+.
단계 3: 라세미 화합물 tert-부틸 3-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-벤조일)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (240 mg, 443.99 μmol)를 키랄 SFC (칼럼: YMC 아밀로스-SA [250*30 mm, 5 마이크로미터]; 이동상: 40% (메탄올 중 0.5% 이소프로필 아민) 및 60% CO2]; 유량: 70 g / 분; 사이클 시간: 8분; 배압: 100 bar; UV: 220 nm)에 의해 키랄 분해하여 피크 1 (제1 용리) tert-부틸 (3S)-3-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-벤조일)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (110 mg, 203.49 μmol, 46% 수율, 100% ee, SOR: +81.20)를 회백색 고체로서, 그리고 피크 2 (제2 용리) tert-부틸 (3R)-3-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-벤조일)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (98 mg, 177.96 μmol, 40% 수율, 96.2% ee, SOR: -79.12)를 회백색 고체로서 수득하였다.
단계 4: 디옥산 (2 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-(3-아미노-2,6-디플루오로-벤조일)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80 mg, 148.00 μmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 10 mL 밀봉 튜브에 실온에서 피리딘 (117.06 mg, 1.48 mmol, 119.70 μL) 및 N-에틸-N-메틸-술파모일 클로라이드 (139.96 mg, 887.97 μmol, 109.49 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 0-10% 메탄올을 사용하여 정제하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (13 mg, 19.06 μmol, 13% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): 660.3 [M-H]-.
단계 5: 디클로로메탄 (0.2 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (13 mg, 19.65 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (17.91 μL)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 디에틸 에테르로 세척하여 (3R)-3-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (12 mg, 17.66 μmol, 90% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI+): 562.3 [M+H]+.
단계 6: DMF 중 (3R)-3-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (1 당량) 및 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (1 당량)의 용액에 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (3 당량) 및 HATU (1.5 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 교반하고, LC-MS에 의해 모니터링하였다. 완료된 후, 조 혼합물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 화합물 (3R)-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-3-[6-[3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-2,6-디플루오로-벤조일]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸을 수득하였다.
실시예 211
(3R)-3-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로페녹시]-4-옥소퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 0℃에서 디클로로메탄 (50 mL) 중 N-(옥소메틸렌)술파모일 클로라이드 (5 g, 35.33 mmol, 3.08 mL)의 교반 용액에 디클로로메탄 (50 mL) 중 페닐 메탄올 (3.82 g, 35.33 mmol, 3.66 mL)의 용액을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 벤질 N-클로로술포닐카르바메이트 (8 g, 30.44 mmol, 86% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.43 (s, 1H), 7.42-7.33 (m, 5H), 5.23 (s, 1H), 4.97 (s, 1H).
단계 2: 디클로로메탄 (30 mL) 중 벤질 N-클로로술포닐카르바메이트 (3 g, 12.02 mmol) 및 N,2-디메틸프로판-2-아민 (1.05 g, 12.02 mmol, 1.44 mL)의 교반 용액에 트리에틸아민 (3.65 g, 36.05 mmol, 5.02 mL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 석유 에테르 중 에틸 아세테이트 50%로 용리시켜 정제하여 벤질 N-[tert-부틸(메틸)술파모일]카르바메이트 (1.5 g, 4.04 mmol, 34% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI+): m/z 299.2 [M+H]+.
단계 3: 에탄올 (20 mL) 중 벤질 N-[tert-부틸(메틸)술파모일]카르바메이트 (1.5 g, 4.99 mmol)의 교반 용액에 질소 하에 탄소 상 팔라듐, 10% (797.16 mg, 7.49 mmol)를 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 질소로 탈기시켰다. 혼합물을 실온에서 수소 주머니 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 디클로로메탄 중 10% 메탄올 (300 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 2-메틸-2-[메틸(술파모일)아미노]프로판 (900 mg, 4.60 mmol, 92% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 6.63 (s, 2H), 2.67 (s, 3H), 1.30 (s, 9H).
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (50 mg, 92.84 μmol)의 교반 용액에 포타슘 tert-부톡시드 (31.25 mg, 278.53 μmol) 및 2-메틸-2-[메틸(술파모일)아미노]프로판 (26.24 mg, 157.83 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉수 (10 mL)로 희석하고, 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 석유 에테르 중 10% 디클로로메탄으로 연화처리하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z: 683.2 [M-H]-.
단계 5: 디클로로메탄 중 tert-부틸 (3R)-3-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 디옥산 중 4 N HCl (10 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응물을 진공 하에 농축시키고, 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (3R)-3-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸을 수득하였다.
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (1 당량) 및 (3R)-3-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (1 당량)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하였다. 이에 이어서, 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 조 혼합물을 역상 HPLC에 의해 정제하여 목적 화합물 (3R)-3-[6-[3-[[tert-부틸(메틸)술파모일]아미노]-2-시아노-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸을 수득하였다.
실시예 212-213
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 시스-이성질체 및 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 트랜스-이성질체
단계 1: 밀봉 튜브에 들은 디옥산 (10 mL) 중 1-(5-플루오로-6-아이오도-1-메틸-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (2 g, 5.15 mmol)의 교반 용액에 실온에서 2-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (2.06 g, 7.73 mmol) 및 플루오린화세슘 (2.35 g, 15.46 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분 동안 퍼징한 후, Pd(dppf)Cl2·디클로로메탄 (420.80 mg, 515.28 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 5분 동안 다시 퍼징한 다음, 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (3x70 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 물질을 메틸 tert-부틸 에테르로 세척하여 1-[6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (1.5 g, 3.09 mmol, 60% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) = m/z 401.4 [M+H]+.
단계 2: 디클로로메탄 (4.90 mL) 중 1-[6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (700 mg, 1.75 mmol)의 교반 용액에 5℃에서 질소 분위기 하에 트리플루오로아세트산 (199.33 mg, 1.75 mmol, 134.69 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 목적 생성물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴)에 의해 정제하여 1-[5-플루오로-1-메틸-6-(4-옥소시클로헥센-1-일)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (270 mg, 633.57 μmol, 36% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) = m/z 357.2 [M+H]+.
단계 3: 1,4-디옥산 (10 mL) 중 1-[5-플루오로-1-메틸-6-(4-옥소시클로헥센-1-일)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (700 mg, 1.96 mmol)의 교반 용액에 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량%, 50% 물 (551.75 mg, 3.93 mmol)을 채웠다. 반응 혼합물을 10분 동안 수소 기체로 버블링한 다음, 실온에서 16시간 동안 수소화 (1 atm)에 적용하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 100%의 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 1-[5-플루오로-1-메틸-6-(4-옥소시클로헥실)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (300 mg, 734.25 μmol, 37% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) = m/z 359.4 [M+H]+.
단계 4: 메탄올 (2 mL) 및 1-[5-플루오로-1-메틸-6-(4-옥소시클로헥실)인다졸-3-일]헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (200 mg, 519.02 μmol) 중 앰버리스트 염기성화 아민 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (174.03 mg, 259.51 μmol)의 교반 용액에 아세트산 (15.58 mg, 259.51 μmol, 14.86 μL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 75℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, MP-시아노보로히드라이드 (100 mg, 259.51 μmol)를 첨가하고, 반응물을 75℃에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 중탄산암모늄: ACN)에 의해 정제하였다.
생성물을 추가로 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 분리된 부분입체이성질체 (분획 1 및 2)를 동결건조시켜 트랜스-이성질체 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (12.84 mg, 13.89 μmol, 5.35% 수율) 및 시스-이성질체 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[4-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]시클로헥실]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (11.1 mg, 11.70 μmol, 4.51% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다.
실시예 212 LCMS (ESI): m/z 899.2 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.56 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.25-7.55 (m, 2H), 7.49 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 11.20 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 5.26-5.32 (m, 1H), 3.96-4.22 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.91 (t, J = 6.40 Hz, 2H), 2.95-3.21 (m, 4H), 3.40-3.61 (m, 1H), 2.75 (t, J = 10.80 Hz, 2H), 2.38-2.65 (m, 6H), 1.52-2.21 (m, 14H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H) ppm.
실시예 213 LCMS (ESI): m/z 899.3 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.56 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 2.80, 8.80 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 6.00 Hz, 1H), 7.21-7.42 (m, 2H), 7.39 (d, J = 10.80 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 5.24-5.35 (m, 1H), 4.11-4.28 (m, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.91 (t, J = 6.80 Hz, 2H), 2.82-3.21 (m, 6H), 2.71-2.81 (m, 2H), 2.38-2.68 (m, 5H), 1.60-2.25 (m, 14H), 1.03 (t, J = 7.20 Hz, 3H) ppm.
실시예 214
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: DMF (100 mL) 중 4-브로모-2,5-디플루오로-벤조니트릴 (10 g, 45.87 mmol)의 용액에 실온에서 이소프로필히드라진 히드로클로라이드 (5.07 g, 45.87 mmol) 및 무수 탄산칼륨, 99% (15.85 g, 114.68 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 80℃로 12시간 동안 가열하고, LC-MS 및 TLC에 의해 모니터링하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (30 ml)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x60 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 (15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 60-120 메쉬 실리카 겔을 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-40% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 6-브로모-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-3-아민 (3.0 g, 10.65 mmol, 23.23% 수율)을 갈색빛 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) = m/z 272.1 [M+H]+
단계 2: [DBU][LAC] 이온성 액체를 제조하기 위해; 1 당량의 락트산을 실온에서 질소-분위기 하에 10 ml 1구 둥근 바닥 플라스크 내 1 당량의 DBU에 첨가하였다. 생성된 용액을 이 온도에서 12시간 동안 교반하였다. 수득된 농후한 용액을 하기 마이클 첨가에 직접 사용하였다.
[DBU][LAC] 이온성 액체 (1.0 g, 3.67 mmol) 중 6-브로모-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-3-아민 (1.0 g, 3.67 mmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 에틸 아크릴레이트 (2.58 g, 25.72 mmol, 2.79 mL)를 첨가하였다. 생성된 용액을 97℃로 72시간 동안 가열하고, LC-MS/TLC에 의해 모니터링하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 물 (10 ml)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x20 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 (25 g 스냅) 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-60%)를 사용하여 정제하여 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-3-일)아미노]프로파노에이트 (0.5 g, 1.21 mmol, 32.95% 수율)를 갈색빛 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) = m/z 372.4 [M+H]+
단계 3: THF (2 mL), 메탄올 (0.5 mL) 및 물 (0.5 mL) 중 에틸 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-3-일)아미노]프로파노에이트 (0.2 g, 537.30 μmol)의 용액에 28℃에서 수산화리튬 1수화물, 98% (33.82 mg, 805.95 μmol, 22.40 μL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, TLC/LC-MS에 의해 모니터링하였다. 완료된 후, 반응 용매를 감압 하에 제거하였다. 생성된 잔류물을 물로 희석하고, 아세트산에 의해 pH=5로 산성화시켜 고체를 수득하였으며, 이를 여과하고, 건조시켜 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-3-일)아미노]프로판산 (0.14 g, 376.71 μmol, 70.11% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) = m/z 344.1 [M+H]+
단계 4: 아세트산 (1 mL) 중 3-[(6-브로모-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-3-일)아미노]프로판산 (50 mg, 145.27 μmol)의 교반 용액에 실온에서 시안산나트륨 (18.89 mg, 290.55 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 140℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 1-(6-브로모-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (70 mg, 42.87 μmol, 29.51% 수율)을 갈색 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 371.2 [M+H]+
단계 5: 디옥산 (2 mL) 중 1-(6-브로모-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-3-일)헥사히드로피리미딘-2,4-디온 (90 mg, 243.78 μmol)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄산세슘 (198.57 mg, 609.44 μmol) 및 tert-부틸 2-(4-히드록시-4-피페리딜)아세테이트 (62.98 mg, 292.53 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 10분 동안 탈기시킨 후, Pd-PEPPSI-IHeptCl 3-클로로피리딘 (11.86 mg, 12.19 μmol)을 실온에서 첨가하였다. 이어서, 반응물을 110℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (5mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 칼럼 크로마토그래피 (230-400 메쉬 실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (40 mg, 78.54 μmol, 32.22% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. UPLC-MS (ESI): m/z 504.7 [M+H]+.
단계 6: DCM (1 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세테이트 (40 mg, 79.43 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디옥산 중 4.0M 염화수소 용액 (57.92 mg, 1.59 mmol, 72.41 μL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (38 mg, 72.29 μmol, 91.01% 수율, HCl 염)을 갈색 반고체로서 수득하였다. LC-MS (ESI): m/z 448.2 [M+H]+.
단계 7: DMF (1 mL) 중 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (50 mg, 84.31 μmol, HCl 염), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (37.72 mg, 77.96 μmol, HCl 염)의 교반 용액에 실온에서 HATU (32.06 mg, 84.31 μmol)에 이어서 DIPEA (54.48 mg, 421.54 μmol, 73.42 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 이 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (4 mL)로 희석하고, 10% 이소프로판올/디클로로메탄 (2x4 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 역상 칼럼 크로마토그래피 (CAN 중 중탄산암모늄 완충제)에 의해 정제하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-이소프로필-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (25 mg, 24.67 μmol, 29.26% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 986.2 [M+H]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.69 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.78-7.80 (m, 2H), 7.69 (dd, J = 2.40, 9.00 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 12.40 Hz, 2H), 7.36 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.38-5.22 (m, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.70-4.72 (m, 1H), 4.12-4.15 (m, 3H), 3.90 (m, 1H), 3.76-3.72 (m, 1H), 3.64-3.69 (m, 2H), 3.12-3.18 (m, 5H), 2.99 (t, J = 10.40 Hz, 2H), 2.86 (t, J = 6.80 Hz, 3H), 2.75 (s, 3H), 2.38-2.40 (m, 1H) 2.08 (m, 1H), 1.68-1.79 (m, 9H), 1.42-1.46 (m, 6H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H) ppm.
스캐폴드 C에 대한 반응식:
단계 A - SNAr 치환에 대한 일반적 절차 (절차 C-A): THF 중 아민 (2) (1 당량)의 교반 용액에 0℃에서 불활성 분위기 하에 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 1.5 당량)을 조금씩 첨가하였다. 대안적으로, 수소화나트륨 및 THF 대신에 Cs2CO3 및 DMF를 사용할 수 있었다. 30분 후, 7-브로모-2-클로로-퀴녹살린 또는 그의 적합한 유도체 (1) (1 당량)를 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고, 반응물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응물을 물로 적가 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 중간체 (3)를 수득하였다.
단계 B - 히드록실화에 대한 일반적 절차 (절차 C-B): 1,4-디옥산 중 중간체 (3) (1 당량)의 교반 용액에 물 중에 용해시킨 KOH (1 당량) 및 리간드 디-tert-부틸 Xphos 또는 Me4 t부틸Xphos (0.01-0.05 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시켰다. 이어서, Pd2(dba)3 (0.01-0.05 당량)를 첨가하고, 반응물을 약 100℃로 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여과물을 진공 하에 농축시켜 퀴녹살린 중간체 (6)를 수득하였다.
단계 A' - 히드록실화에 대한 일반적 절차 (절차 C-A'):
단계 A' - 1: 밀봉 튜브에서 물 및 1,4-디옥산의 혼합물 중 KOH (2.5 당량) 및 7-브로모-2-클로로-퀴녹살린 또는 그의 적합한 유도체 (1) (1 당량)의 교반 용액을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. Pd2dba3 (0.1 당량) 및 tBuXPhos (0.1 당량)를 반응 혼합물에 첨가하고, 생성된 혼합물을 닫힌 밀봉 튜브에서 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 1M KOH 용액 및 에틸 아세테이트로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 1.5N HCl 용액에 의해 pH ~3으로 산성화시켰다. 수득된 고체를 여과하고, 건조시켜 중간체 퀴녹살린-2,7-디올 또는 그의 유도체를 수득하였다.
단계 A' - 2: 1,4-디옥산 중 트리페닐포스핀 (2.5 당량)의 교반 용액에 실온에서 N-클로로숙신이미드 (NCS) (2.5 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 여기에, 퀴녹살린-2,7-디올 중간체 (1 당량)를 첨가하고, 110℃에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-30% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 중간체 3-클로로퀴녹살린-6-올 또는 그의 유도체 (4)를 수득하였다.
단계 B' - 교차 커플링에 대한 일반적 절차 (절차 C-B'): 1,4-디옥산 및 물 중 보론산 에스테르 (5) (2 당량) 및 3-클로로퀴녹살린-6-올 중간체 (4) (1 당량)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄산칼륨 (2.5 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 15분 동안 탈기시켰다. Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (0.1 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 45-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 퀴녹살린 중간체 (6)를 수득하였다.
단계 C - O-아릴화에 대한 일반적 절차 (절차 C-C): N,N-디메틸포름아미드/THF 중 퀴녹살린 중간체 (6, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 탄산세슘/포타슘 tert-부톡시드 (1.1 당량) 및 상업적으로 입수가능한 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (7, 1.1 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 중간체 (8)를 수득하였다.
단계 D - 술포모일화에 대한 일반적 절차 (절차 C-D): N,N-디메틸포름아미드 중 중간체 (8) (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (2.5 당량) 및 술파모일 유도체 (9) (상업적으로 입수가능하거나 또는 본원 방법 I 및 II에 기재된 바와 같음; 2 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20에서 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 술폰아미드 중간체 (10)를 수득하였다.
주: 대다수의 반응에 대해, 물의 첨가 후, 고체의 침전이 관찰되었다. 이들 고체를 여과지를 통해 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 적절한 순도의 술폰아미드 중간체 (10)를 수득하였다.
단계 E - N-Boc 탈보호에 대한 일반적 절차 (절차 C-E): 술폰아미드 중간체 (10, 1 당량)의 용액을 디클로로메탄 중에 넣고, 0℃에서 TFA (5 당량) 또는 디옥산 중 4N HCl (10 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 용매를 감압 하에 제거하여 조 생성물을 수득하였다. 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르 (MTBE)로 연화처리하여 표적화 리간드 (11)를 수득하였다.
단계 F - 산-아민 커플링에 대한 일반적 절차 (절차 C-F): N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 산 (12, 1 당량) 및 아민 (11, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 질소 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 화합물을 역상 정제에 의해 정제하고, 분획을 동결건조시켜 목적 화합물 (13)을 수득하였다.
실시예 215
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[4-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1,4-디아제판-1-일]피라졸-1-일]퀴녹살린
단계 1: 디메틸 술폭시드 (20 mL) 중 1-벤질-4-아이오도-피라졸 (2 g, 7.04 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 첨가하고, 이어서 실온에서 무수 탄산칼륨 (2.92 g, 21.12 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시킨 다음, 실온에서 아이오딘화구리 (I) (134.07 mg, 703.99 μmol, 23.86 μL), 구리 분말 (44.70 mg, 703.99 μmol) 및 L-프롤린 (162.10 mg, 1.41 mmol, 119.19 μL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 튜브 밀봉 후 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (500 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (200 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(1-벤질피라졸-4-일)-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (800 mg, 1.99 mmol, 29% 수율)를 갈색 점성 화합물로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 357.0 [M + H]+
단계 2: 메탄올 (20 mL) 중 tert-부틸 4-(1-벤질피라졸-4-일)-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (800 mg, 2.24 mmol)의 교반 용액에 탄소 상 10% 팔라듐 (300 mg, 2.82 mmol)을 첨가하였다. 용액을 10분 동안 수소 기체를 버블링함으로써 수소로 포화시킨 다음, 60℃에서 수소 (1 atm) 하에 10시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, 촉매를 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30-40% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(1H-피라졸-4-일)-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (350 mg, 1.25 mmol, 56% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 267.2 [M + H]+
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (6 mL) 중 tert-부틸 4-(1H-피라졸-4-일)-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (300 mg, 1.13 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 질소 분위기 하에 탄산세슘 (440.40 mg, 1.35 mmol)에 이어서 7-브로모-2-클로로-퀴녹살린 (274.26 mg, 1.13 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (100 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20에서 30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[1-(7-브로모퀴녹살린-2-일)피라졸-4-일]-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (250mg, 332.72 μmol, 30% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 416.8 [M + H- tBu]+
단계 4: 디옥산 (4 mL) 및 물 (1 mL) 중 tert-부틸 4-[1-(7-브로모퀴녹살린-2-일)피라졸-4-일]-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (200 mg, 422.51 μmol)의 용액을 밀봉 튜브에 첨가하고, 이어서 실온에서 질소 분위기 하에 수산화칼륨 (59.26 mg, 1.06 mmol, 29.05 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시킨 다음, 디벤질리덴아세톤 팔라듐(0) (7.74 mg, 8.45 μmol)을 첨가하고, 이어서 동일한 온도에서 디-tert-부틸-[2,3,4,5-테트라메틸-6-[2,4,6-트리(프로판-2-일)페닐]페닐]포스판 (10.16 mg, 21.13 μmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃로 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (100 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 20-30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[1-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)피라졸-4-일]-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (100 mg, 236.32 μmol, 56% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 411.1 [M + H]+
단계 5: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 tert-부틸 4-[1-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)피라졸-4-일]-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (100 mg, 243.62 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 불활성 분위기 하에 포타슘 tert-부톡시드 (30.07 mg, 267.99 μmol)에 이어서 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (42.10 mg, 267.99 μmol, 30.95 μL)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 냉수 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x 60 ml)로 추출하였다. 합한 유기 층을 냉수 (2 x 100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[1-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]피라졸-4-일]-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (130 mg, 170.94 μmol, 70% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 492.1 [M + H]+
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (7 mL) 중 화합물 tert-부틸 4-[1-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]피라졸-4-일]-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (130 mg, 237.42 μmol)의 교반 용액에 실온에서 탄산세슘 (193.39 mg, 593.55 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (72.18 mg, 522.32 μmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응물을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (50 mL) 및 에틸 아세테이트 (3x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[1-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]피라졸-4-일]-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (130 mg, 161.29 μmol, 68% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 664.2 [M - H]-
단계 7: 디클로로메탄 (10 mL) 중 tert-부틸 4-[1-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]피라졸-4-일]-1,4-디아제판-1-카르복실레이트 (130 mg, 195.27 μmol)의 교반 용액에 0-5℃에서 디옥산 중 4M 염화수소 용액 (71.20 mg, 1.95 mmol, 89.00 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-2-[4-(1,4-디아제판-1-일)피라졸-1-일]퀴녹살린의 HCl 염 (100 mg, 157.79 μmol, 81% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 566.1 [M + H]+
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-E)을 통해 제조하였다. 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-2-[4-(1,4-디아제판-1-일)피라졸-1-일]퀴녹살린 (100 mg, 166.09 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (107.33 mg, 830.45 μmol, 144.65 μL), HCl 염으로서의 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (73.05 mg, 182.70 μmol) 및 HATU (63.15 mg, 166.09 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 정제에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 25에서 30% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-2-[4-[4-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1,4-디아제판-1-일]피라졸-1-일]퀴녹살린 (32.29 mg, 33.07 μmol, 20% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 911.3 [M + H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.13-8.17 (m, 2H), 7.88 (d, J = 17.20 Hz, 1H), 7.70-7.80 (m, 1H), 7.67 (ddd, J = 1.20, 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.49-7.42 (m, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.75-6.85 (m, 1H), 6.41-6.46 (m, 2H), 6.09 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.30-4.34 (m, 1H), 4.16-4.30 (m, 1H), 3.74 (s, 1H), 3.60 (s, 2H), 3.42-3.55 (m, 6H), 3.35-3.24(m, 1H), 3.14 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.95-3.05 (m, 2H), 2.60-2.81 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.47-2.62 (m, 2H), 2.06-2.09 (m, 1H), 1.80-2.01 (m, 5H), 1.63-1.78 (m, 2H), 1.08 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 216
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]피페리딘-4-일]메톡시]퀴녹살린
단계 1: THF (5 mL) 중 tert-부틸 4-(히드록시메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (200 mg, 928.98 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 불활성 분위기 하에 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 32.04 mg, 1.39 mmol)을 조금씩 첨가하였다. 30분 후, 7-브로모-2-클로로-퀴녹살린 (226.20 mg, 928.98 μmol)을 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고, 반응물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응물을 물로 적가 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액 (15 mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[(7-브로모퀴녹살린-2-일)옥시메틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (250 mg, 562.38 μmol, 61% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 366.0 [M + H- tBu]+
단계 2: 1,4-디옥산 (1 mL) 중 tert-부틸 4-[(7-브로모퀴녹살린-2-일)옥시메틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.1 g, 236.79 μmol)의 교반 용액에 물 (1 mL) 중에 용해시킨 KOH (13.29 mg, 236.79 μmol, 6.51 μL) 및 디-tert-부틸 Xphos (5.03 mg, 11.84 μmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시켰다. 이어서, Pd2(dba)3 (2.17 mg, 2.37 μmol)을 첨가하고, 반응물을 100℃로 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (5 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 4-[(7-히드록시퀴녹살린-2-일)옥시메틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.1 g, 250.40 μmol, 100% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 358.2 [M - H]-
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 tert-부틸 4-[(7-히드록시퀴녹살린-2-일)옥시메틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.1 g, 278.23 μmol)의 교반 용액에 실온에서 불활성 분위기 하에 포타슘 tert-부톡시드 (62.44 mg, 556.45 μmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (43.71 mg, 278.23 μmol, 32.14 μL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (5 ml)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x10 ml)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 ml)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 화합물을 칼럼 정제에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-[[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]옥시메틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.09 g, 181.03 μmol, 65% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 441.0 [M + H- tBu]+
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 tert-부틸 4-[[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]옥시메틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.09 g, 181.27 μmol)의 교반 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 질소 분위기 하에 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (50.10 mg, 362.53 μmol) 및 탄산세슘 (147.65 mg, 453.17 μmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 50-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 메틸-tert-부틸 4-[[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]옥시메틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (70 mg, 101.81 μmol, 56% 수율)를 갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 613.2 [M - H]-
단계 5: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 4-[[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]옥시메틸]피페리딘-1-카르복실레이트 (0.07 g, 140.99 μmol)의 교반 용액에 0℃에서 1,4-디옥산 중 HCl (4.0 M, 0.7 mL)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 석유 에테르 (5 mL)로 세척하여 3,6-디플루오로-2-[3-(4-피페리딜메톡시)퀴녹살린-6-일]옥시-벤조니트릴 히드로클로라이드 (0.07 g, 154.09 μmol, 100% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 515.2 [M + H]+
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-E)을 통해 제조하였다. 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-2-(4-피페리딜메톡시)퀴녹살린 (70 mg, 127.03 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (46.16 mg, 127.03 μmol), HATU (241.51 mg, 635.17 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (16.42 mg, 127.03 μmol, 22.13 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 정제용 HPLC에 의해 용리액으로서 물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴을 사용하여 정제하여 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-2-[[1-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-4-피페리딜]메톡시]퀴녹살린 (10 mg, 10.57 μmol, 8% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 860.3 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.06 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.51-7.60 (m, 1H), 7.49 (dd, J = 2.80, 9.20 Hz, 1H), 7.31-7.39 (m, 1H), 6.95-7.02 (m, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.48 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 11.60 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 4.42-4.39 (m, 1H), 4.33-4.35 (m, 4H), 3.80-3.97 (m, 2H), 3.01-3.12 (m, 3H), 2.60-2.82 (m, 3H), 2.65 (s, 3H), 2.46-2.51 (m, 2H), 2.05-2.20 (m, 3H), 1.70-1.96 (m, 8H), 1.15-1.40 (m, 3H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 217
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[[(1R,5S)-3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]메톡시]퀴녹살린
단계 1: THF (20 mL) 중 수소화나트륨 (미네랄 오일 중 60% 분산액, 330 mg, 8.25 mmol)의 교반 현탁액에 0-5℃에서 질소 분위기 하에 THF (20 mL) 중 tert-부틸 (1R,5S)-6-(히드록시메틸)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (900 mg, 4.22 mmol) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다시 0-5℃로 냉각시킨 다음, 동일한 온도에서 THF (20 mL) 중 7-브로모-2-클로로-퀴녹살린 (1.0 g, 4.11 mmol) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 0-5℃로 냉각시킨 다음, 포화 염화암모늄 용액 (100 mL)을 첨가하고, 에틸 아세테이트 (2 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 이 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (1R,5S)-6-[(7-브로모퀴녹살린-2-일)옥시메틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.50 g, 3.35 mmol, 82% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 364.0 [M + H- tBu]+
단계 2: 1,4-디옥산 (20 mL) 및 물 (10 mL) 혼합물 중 tert-부틸 (1R,5S)-6-[(7-브로모퀴녹살린-2-일)옥시메틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.40 g, 3.33 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 수산화칼륨 (290 mg, 5.17 mmol, 142.16 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 15분 동안 탈기시킨 다음, tert-부틸 XPhos (71 mg, 167.20 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 다시 질소로 10분 동안 탈기시키고, 동일한 온도에서 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0) (61 mg, 66.61 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃로 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 포화 염화암모늄 용액 (100 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 이 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (1R,5S)-6-[(7-히드록시퀴녹살린-2-일)옥시메틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.10 g, 2.95 mmol, 89% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 356.1 [M - H]-
단계 3: N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 tert-부틸 (1S,5R)-6-[(7-히드록시퀴녹살린-2-일)옥시메틸]비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.0 g, 2.81 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 포타슘 tert-부톡시드 (350 mg, 3.12 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 다음, 동일한 온도에서 N,N-디메틸포름아미드 (20 mL) 중 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (490 mg, 3.12 mmol, 360.29 μL) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 물을 반응 혼합물 (50 mL)에 첨가하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (1S,5R)-6-[[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]옥시메틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (1.0 g, 1.96 mmol, 70% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 439.0 [M + H- tBu]+
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 tert-부틸 (1S,5R)-6-[[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]옥시메틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (900 mg, 1.82 mmol)의 용액을 밀봉 튜브에 넣고, 실온에서 질소 분위기 하에 탄산세슘 (1.50 g, 4.60 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃로 16시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 물 (50 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 (1S,5R)-6-[[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]옥시메틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (480 mg, 548.42 μmol, 30% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 611.2 [M -H]-
단계 5: 디클로로메탄 (5.0 mL) 중 tert-부틸 (1S,5R)-6-[[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]옥시메틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (480 mg, 783.45 μmol)의 교반 용액에 0-5℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 4.0 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 디에틸 에테르 (2 x 50 mL)로 연화처리하여 2-[[(1S,5R)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]메톡시]-7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린 (420 mg, 512.55 μmol, 65% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 513.2 [M + H]+
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-E)을 통해 제조하였다. 2-[[(1S,5R)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]메톡시]-7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린 (400 mg, 728.58 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (300 mg, 750.29 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (2.23 g, 17.22 mmol, 3.0 mL) 및 HATU (310 mg, 815.30 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 150 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-2-[[(1S,5R)-3-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일]메톡시]퀴녹살린 (110 mg, 126.79 μmol, 17% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 856.2 [M-H]-; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 9.79 (bs, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.05 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.46-7.52 (m, 1H), 7.33 (dd, J = 4.40, 9.40 Hz, 1H), 6.94-6.99 (m, 2H), 6.48 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 4.40, 9.40 Hz, 1H), 4.35-4.45 (m, 1H), 4.25-4.36 (m, 2H), 3.61-3.91 (m, 4H), 3.52-3.59 (m, 1H), 3.22-3.41 (m, 3H), 3.05 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 2.55-2.81 (m, 4H), 2.64 (s, 3H), 2.03-2.12 (m, 1H), 1.81-1.92 (m, 4H), 1.71-1.81 (m, 4H), 1.05-1.15 (m, 1H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 218
3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴놀린-3-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: THF (20 mL) 중 tert-부틸 3-옥소-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (2.0 g, 7.83 mmol)의 용액에 0℃에서 질소 하에 DBU (5.92 g, 23.50 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 0℃에서 1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부탄-1-술포닐 플루오라이드 (7.10 g, 23.50 mmol, 4.06 mL)를 10분 동안 적가하였다. 생성된 용액을 실온으로 1시간 동안 천천히 가온하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 분리된 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 (50 g 스냅) 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-40%)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부틸술포닐옥시)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (3.0 g, 5.57 mmol, 71% 수율)를 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 438.0[M + H]+.
단계 2: 1,4-디옥산 (25 mL) 중 tert-부틸 3-(1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부틸술포닐옥시)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (1.5 g, 2.79 mmol)의 용액에 실온에서 아세트산칼륨 (821.82 mg, 8.37 mmol, 523.45 μL), 비스(피나콜레이토)디보란 (1.06 g, 4.19 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 질소 기체로 탈기시키고, 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (60 ml)로 세척하였다. 수집된 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (1.65 g, 2.75 mmol, 99% 수율)를 암갈색 액체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 266.2[M + H]+.
단계 3: 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (2 mL) 중 tert-부틸 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (1.22 g, 3.35 mmol)의 용액에 실온에서 질소 하에 무수 탄산칼륨, 99% (925.26 mg, 6.69 mmol, 404.05 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시킨 다음, 동일한 온도에서 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐(II), 디클로로메탄과의 착물 (182.24 mg, 223.16 μmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (50 ml)로 세척하였다. 수집된 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (0.6 g, 1.43 mmol, 64% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 383.2[M + H]+.
단계 4: 1,4-디옥산 (1 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (0.1 g, 261.47 μmol)의 용액에 활성탄 상 수산화팔라듐 (18.63 mg, 130.74 μmol)을 첨가하고, 반응물을 수소 주머니 압력 하에 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 디클로로메탄 중 10% 메탄올 (20 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 3-(6-히드록시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (90 mg, 223.18 μmol, 85% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 385.6[M + H]+.
단계 5: THF (5 mL) 중 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (245.16 mg, 1.56 mmol, 180.26 μL), tert-부틸 3-(6-히드록시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (500 mg, 1.30 mmol)의 용액에 실온에서 질소 하에 탄산세슘 (1.06 g, 3.25 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 20 mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 실리카 겔 (25 g 스냅) 칼럼 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트-석유 에테르 (0-70%)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.57 g, 1.07 mmol, 83% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 522.2[M + H]+.
단계 6: N,N-디메틸포름아미드 (6 mL) 중 tert-부틸 3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.57 g, 1.09 mmol)의 용액에 실온에서 질소 하에 탄산세슘 (890.21 mg, 2.73 mmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (302.05 mg, 2.19 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃로 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 생성된 고체를 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하였다. 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.43 g, 576.84 μmol, 53% 수율)를 액체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 640.2[M + H]+.
단계 7: 디클로로메탄 (5 mL) 중 tert-부틸 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.43 g, 672.15 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 3.36 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 용액을 감압 하에 농축시켜 33-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.42 g, 515.96 μmol, 77% 수율)을 반고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 540.2[M + H]+.
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-E)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (80.81 mg, 222.38 μmol), 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (0.12 g, 222.38 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (143.70 mg, 1.11 mmol, 193.67 μL) 및 HATU (127.50 mg, 333.57 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 38% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-3-퀴놀릴]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (24 mg, 24.64 μmol, 11% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 885.2[M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.82 (s, 1H), 9.86 (bs, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.06 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.76-7.70 (m, 1H), 7.61 (dd, J = 2.80, 9.20 Hz, 1H), 7.44-7.41 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.97-6.91 (m, 1H), 6.48 (t, J = 13.20 Hz, 2H), 6.12 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.30-4.23 (m, 4H), 3.82-3.78 (m, 3H), 3.44-3.34 (m, 4H), 3.15-3.05 (m, 3H), 2.71 (s, 3H), 2.51-2.40 (m, 2H), 2.33-2.31 (m, 2H), 1.89-1.59 (m, 13H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 219
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일]퀴녹살린
단계 1: 테트라히드로푸란 (15 mL) 중 tert-부틸 2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 g, 4.16 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 7-브로모-2-클로로퀴녹살린 (1.01 g, 4.16 mmol) 및 탄산세슘 (3.39 g, 10.40 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (15 mL)로 희석하였다. 용액을 에틸 아세테이트 (3x20 mL)로 추출하고, 염수 (15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 2-(7-브로모퀴녹살린-2-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1.15 g, 2.52 mmol, 61% 수율)를 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 447.0 [M + H]+.
단계 2: 테트라히드로푸란 (12 mL) 중 tert-부틸 2-(7-브로모퀴녹살린-2-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (900 mg, 2.01 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 수산화칼륨 (282.18 mg, 5.03 mmol, 138.32 μL) 및 물 (1 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시키고, Pd2(dba)3 (184.22 mg, 201.18 μmol) 및 Me4 t부틸Xphos (96.71 mg, 201.18 μmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 조 생성물을 230-400 실리카 겔을 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 50-60% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (450 mg, 1.12 mmol, 56% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI): 385.2[M+H]+.
단계 3: 테트라히드로푸란 (6 mL) 중 tert-부틸 2-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (450 mg, 1.17 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (183.87 mg, 1.17 mmol, 135.20 μL) 및 탄산세슘 (1.14 g, 3.51 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (3 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 물질을 230-400 실리카 겔을 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 2-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (550 mg, 1.05 mmol, 90% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 522.2 [M+H]+.
단계 4: N,N-디메틸포름아미드 (5 mL) 중 tert-부틸 2-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (550 mg, 1.05 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (291.45 mg, 2.11 mmol) 및 탄산세슘 (1.03 g, 3.16 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉수 (5 mL)로 희석하고, 생성된 고체를 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하고, 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 유기 층을 감압 하에 증발시켜 tert-부틸 2-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (150 mg, 178.15 μmol, 17% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 640.2[M+H]+.
단계 5: 디클로로메탄 (2 mL) 중 tert-부틸 2-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (150 mg, 234.47 μmol)의 교반 용액에 0℃ 온도에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 염화수소 (4 M, 1.47 mL)를 적가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 직접 감압 하에 농축시켜 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-2-(2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)퀴녹살린 (135 mg, 163.21 μmol, 70% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 540.2 [M+H]+.
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-E)을 통해 제조하였다. 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-2-(2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)퀴녹살린 (130 mg, 240.91 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (87.54 mg, 240.91 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (155.68 mg, 1.20 mmol, 209.81 μL) 및 HATU (137.40 mg, 361.36 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 150 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일]퀴녹살린 (8 mg, 7.54 μmol, 6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 885.2 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.81 (s, 1H), 10.15 (bs, 1H), 9.51 (bs, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.88 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.85-7.89 (m, 1H), 7.48 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 6.95-7.01 (m, 1H), 6.74 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 12.40 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.22-4.41 (m, 4H), 3.61-3.80 (m, 3H), 3.31-3.61 (m, 5H), 3.17 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 3.01-3.12 (m, 1H), 2.85-2.95 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.68-2.81 (m, 1H), 2.51-2.61 (m, 2H), 2.55(s, 2H), 1.82-2.12 (m, 6H), 1.52-1.71 (m, 4H), 1.07 (t, J = 6.80 Hz, 3H).
실시예 220
7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-2-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]퀴녹살린
단계 1: 밀봉 튜브에 들은 물 (12 mL) 및 1,4-디옥산 (48 mL)의 혼합물 중 KOH (4.61 g, 82.14 mmol, 2.26 mL) 및 7-브로모-2-클로로-퀴녹살린 (8 g, 32.86 mmol)의 교반 용액을 질소로 5분 동안 탈기시켰다. Pd2dba3 (3.01 g, 3.29 mmol) 및 tBuXPhos (1.40 g, 3.29 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고, 생성된 혼합물을 닫힌 밀봉 튜브에서 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 1M KOH 용액 (100 mL) 및 에틸 아세테이트 (200 mL)로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 1.5N HCl 용액에 의해 pH ~3으로 산성화시켰다. 수득된 고체를 여과하고, 건조시켜 퀴녹살린-2,7-디올 (3.8 g, 20.43 mmol, 62% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 163.20 [M + H]+.
단계 2: 1,4-디옥산 (100 mL) 중 트리페닐포스핀 (7.28 g, 27.75 mmol)의 교반 용액에 실온에서 N-클로로숙신이미드 (3.71 g, 27.75 mmol, 2.25 mL)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 여기에, 퀴녹살린-2,7-디올 (1.8 g, 11.10 mmol)을 첨가하고, 110℃에서 4시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 0-30% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 3-클로로퀴녹살린-6-올 (350 mg, 1.64 mmol, 15% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 179.20 [M-H]-.
단계 3: 1,4-디옥산 (5 mL) 및 물 (1 mL) 중 tert-부틸 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (402.34 mg, 1.11 mmol) 및 3-클로로퀴녹살린-6-올 (100 mg, 553.74 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄산칼륨 (191.33 mg, 1.38 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 15분 동안 탈기시켰다. Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (45.22 mg, 55.37 μmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 45-50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (150 mg, 374.70 μmol, 68% 수율)를 갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 382.20 [M + H]+
단계 4: 1,4-디옥산 (10 mL) 중 tert-부틸 3-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (270 mg, 707.79 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 수산화팔라듐 (100 mg, 142.41 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 H2 압력 (주머니) 하에 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 촉매를 셀라이트 층을 통한 여과에 의해 제거하였다. 셀라이트 층을 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 세척하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50-60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (120 mg, 294.93 μmol, 42% 수율)를 갈색 점성 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 384.20 [M + H]+
단계 5: O-아릴화 퀴녹살린 중간체를 tert-부틸 3-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (120 mg, 312.92 μmol), 탄산세슘 (254.89 mg, 782.30 μmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (54.07 mg, 344.21 μmol, 39.76 μL)을 사용하여 절차 C-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 50-60% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80 mg, 136.47 μmol, 44% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 465.20 [M + H-tBu]+
단계 6: 술파모일화 퀴녹살린 중간체를 tert-부틸 3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80 mg, 153.68 μmol), 탄산세슘 (125.18 mg, 384.19 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (31.85 mg, 230.52 μmol)을 사용하여 절차 C-D에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 90-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (50 mg, 58.90 μmol, 38% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 637.20 [M - H]-.
단계 7: 필요한 아민을 tert-부틸 3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (50 mg, 78.28 μmol) 및 1,4-디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (1 mL)을 사용하여 절차 C-E에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 2-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린 (40 mg, 39.99 μmol, 51% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 537.0 [M - H]-
단계 8: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-F)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (25 mg, 62.52 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (48.49 mg, 375.15 μmol, 65.34 μL), 2-(8-아자스피로[4.5]데칸-3-일)-7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린 (39.55 mg, 68.78 μmol) 및 HATU (26.15 mg, 68.78 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-2-[8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-8-아자스피로[4.5]데칸-3-일]퀴녹살린 (18 mg, 20.27 μmol, 32% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 884.20 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.71 (s, 1H), 8.85 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 9.20, 2.80, Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.36-7.34 (m, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.50-6.45 (m, 2H), 6.08 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.40-4.25 (m, 1H), 4.00-3.75 (m, 2H), 3.70-3.35 (m, 4H), 3.04 (q, J = 6.80 Hz, 2H), 2.90-2.55 (m, 7H), 2.12-2.07 (m, 5H), 1.92-1.51 (m, 15H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 221
3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 1,4-디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중 3-클로로퀴녹살린-6-올 (0.2 g, 1.11 mmol) 및 tert-부틸 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (809.06 mg, 2.21 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 탄산칼륨 (382.66 mg, 2.77 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 15분 동안 퍼징하고, 이어서 Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (90.44 mg, 110.75 μmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 세척하였다. 합한 여과물을 감압 하에 농축시키고, 조 생성물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70-80% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (0.2 g, 323.39 μmol, 29% 수율)를 갈색 반고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 328.0 [M + H-tBu]+.
단계 2: 1,4-디옥산 (5 mL) 중 tert-부틸 3-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (0.2 g, 521.59 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 수산화팔라듐 (109.87 mg, 782.39 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 H2 압력 하에 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 촉매를 셀라이트 층을 통한 여과에 의해 제거하고, 에틸 아세테이트 (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시키고, 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 80-90% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.1 g, 210.95 μmol, 40% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 330.20 [M + H-tBu]+
단계 3: O-아릴화 퀴녹살린 중간체를 tert-부틸 3-(7-히드록시퀴녹살린-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.1 g, 259.43 μmol), 탄산세슘 (211.32 mg, 648.58 μmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (48.91 mg, 311.32 μmol, 35.96 μL)을 사용하여 절차 C-C에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.1 g, 186.30 μmol, 72% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 467.20 [M + H-tBu]+.
단계 4: 술파모일화 퀴녹살린 중간체를 tert-부틸 3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100 mg, 191.37 μmol), 탄산세슘 (155.88 mg, 478.43 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (39.67 mg, 287.06 μmol)을 사용하여 절차 C-D에 따라 합성하였다. 조 화합물을 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-70% 아세톤을 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (20 mg, 21.21 μmol, 11% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 639.0 [M - H]-
단계 5: 필요한 아민을 tert-부틸 3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (20 mg, 31.21 μmol) 및 1,4-디옥산 중 염화수소 용액 (4.0 M, 0.2 mL)을 사용하여 절차 C-E에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (17 mg, 20.08 μmol, 64% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 541.4 [M + H]+
단계 6: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-F)을 통해 제조하였다. 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (15 mg, 37.51 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (4.85 mg, 37.51 μmol, 6.53 μL), 3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (17.32 mg, 30.01 μmol) 및 HATU (14.26 mg, 37.51 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 46% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (10.7 mg, 11.52 μmol, 31% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 886.20 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (s, 1H), 9.66 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 2.80, 9.20 Hz, 1H), 7.64-7.56 (m, 1H), 7.35 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.50-6.45 (m, 2H), 6.07 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.33-4.28 (m, 2H), 4.03-3.98 (m, 2H), 3.90-3.70 (m, 1H), 3.48-3.46 (m, 2H), 3.06-3.05 (m, 2H), 2.80-2.60 (m, 6H), 2.40-2.13 (m, 2H), 2.11-2.07 (m, 2H), 2.00-1.60 (m, 13H), 1.24 (s, 2H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 222
(3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: tert-부틸 3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (0.4 g, 745.20 μmol)를 키랄 분해하여 상응하는 순수한 거울상이성질체 tert-부틸 (3R)-3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (제1 용리, 90 mg, 172.23 μmol) 및 tert-부틸 (3S)-3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (제2 용리, 90 mg, 172.23 μmol)를 수득하였다.
주: SFC 키랄 정제 후, 제1 용리 이성질체 (RT-3.0, (룩스 A1 칼럼에서 분리됨))를 R-이성질체로서 임의적으로 할당하고, 제2 용리 이성질체 (RT-3.78)를 S-이성질체로서 임의적으로 할당하였다. 제2 용리 이성질체 (s-이성질체 [α]D = +42.4 농도: 0.5M). LCMS(ES+): m/z 467.0[M+H-56]+
단계 2: N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 tert-부틸 (3S)-3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (90 mg, 172.23 μmol)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (140.29 mg, 430.59 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (47.60 mg, 344.47 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 65℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 생성된 고체를 여과하였다. 여과물을 에틸 아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 tert-부틸 (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80 mg, 103.30 μmol, 60% 수율)를 갈색 액체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 641.4 [M+H]+.
단계 3: 디클로로메탄 (1 mL) 중 tert-부틸 (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (80 mg, 124.86 μmol)의 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 1,4-디옥산 중 4M 염화수소 용액 (1 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 86.82 μmol, 70% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 541.6[M+H]+
단계 4: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-E)을 통해 제조하였다. 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (54.31 mg, 129.48 μmol), (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (70 mg, 129.48 μmol), HATU (49.23 mg, 129.48 μmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (83.67 mg, 647.42 μmol, 112.77 μL)을 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 30 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 35% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (43 mg, 43.38 μmol, 34% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 942.0[M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.18 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.89 (t, J = 9.60 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 4.00, 9.20 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.07-3.99 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.91 (t, J = 28.00 Hz, 3H), 3.72-3.62 (m, 1H), 3.57-3.45 (m, 1H), 3.23-3.12 (m, 4H), 3.12-3.03 (m, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.75 (t, J = 28.00 Hz, 2H), 2.68 (s, 1H), 2.58 (d, J = Hz, 2H), 2.42-2.33 (m, 2H), 2.17-2.12 (m, 1H), 1.82-1.80 (m, 3H), 1.74-1.67 (m, 5H), 1.62-1.53 (m, 1H), 1.07 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 223
(3R)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 술파모일화 퀴녹살린 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100 mg, 191.37 μmol), 탄산세슘 (155.88 mg, 478.43 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (39.67 mg, 287.06 μmol)을 사용하여 절차 C-D에 따라 합성하여 tert-부틸 (3R)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (60 mg, 33.71 μmol, 18% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 639.20 [M-H]-
단계 2: 필요한 아민을 tert-부틸 (3R)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (60 mg, 93.64 μmol) 및 디옥산 중 4.0 M 염화수소 용액 (2 mL)을 사용하여 절차 C-E에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 (3R)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (55 mg, 37.28 μmol, 40% 수율)을 연갈색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 541.40 [M+H]+
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-F)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (51.96 mg, 90.04 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (40 mg, 100.04 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (77.58 mg, 600.23 μmol, 104.55 μL) 및 HATU (41.84 mg, 110.04 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 50% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3R)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (14.8 mg, 15.93 μmol, 16% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 886.20 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.78 (s, 1H), 9.65 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.14 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.40, 8.80 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.47 (t, J = 12.40 Hz, 2H), 6.04 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.37-4.23 (m, 2H), 4.23-3.92 (m, 2H), 3.84-3.42 (m, 3H), 3.11-2.90 (m, 3H), 2.79-2.71 (m, 2H), 2.63-2.50 (m, 5H), 2.42-2.33 (m, 4H), 2.20-2.10 (m, 3H), 1.90-1.50 (m, 11H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 224
(3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐]피페리딘-1-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 술파모일화 퀴녹살린 중간체를 tert-부틸 (3S)-3-[7-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (100.00 mg, 191.37 μmol), 탄산세슘 (155.88 mg, 478.43 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (39.67 mg, 287.06 μmol)을 사용하여 절차 C-D에 따라 합성하여 tert-부틸 (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (60 mg, 33.99 μmol, 18% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 639.20 [M-H]-
단계 2: 필요한 아민을 tert-부틸 (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (60 mg, 93.64 μmol) 및 염화수소 용액 (1,4-디옥산 중 4.0 M, 2 mL)을 사용하여 절차 C-E에 따라 합성하였다. 생성된 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르로 연화처리하여 (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (55 mg, 38.79 μmol, 41% 수율)을 연갈색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 541.40 [M+H]+
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-F)을 통해 제조하였다. (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (51.96 mg, 90.04 μmol), 2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세트산 (40 mg, 100.04 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (77.58 mg, 600.23 μmol, 104.55 μL) 및 HATU (45.65 mg, 120.05 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 46% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 (3S)-3-[7-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]퀴녹살린-2-일]-8-[2-[4-[4-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]-2-플루오로-페닐]-1-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (17 mg, 18.36 μmol, 18% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 886.20 [M + H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 1H), 9.65 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.14 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 2.40, 8.80 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.49-6.45 (m, 2H), 6.07 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 4.32-4.28 (m, 2H), 4.03-3.98 (m, 2H), 3.84-3.72 (m, 1H), 3.53-3.42 (m, 2H), 3.29-3.16 (m, 2H), 3.04 (d, J = 6.80 Hz, 2H), 2.79-2.70 (m, 2H), 2.68-2.60 (m, 5H), 2.34-2.33 (m, 1H), 2.23-2.15 (m, 2H), 2.11-2.06 (m, 2H), 1.92-1.58 (m, 11H), 1.04 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 225
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-메톡시퀴놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 질소 분위기 하에 아세트산 (60 ml) 중 6-메톡시퀴놀린-4-올 (4.0 g, 22.83 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 N-브로모숙신이미드 (4.10 g, 23.06 mmol, 1.95 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (60 ml)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x50ml)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 생성물 3-브로모-6-메톡시-퀴놀린-4-올 (5.30 g, 20.44 mmol, 90% 수율)을 수득하였다. LCMS m/z (ESI+): 254.2 [M+H]+, 255.2 (Br-동위원소 패턴).
단계 2: 3-브로모-6-메톡시-퀴놀린-4-올 (5 g, 19.68 mmol)에 0℃에서 질소 분위기 하에 옥시염화인 (6.03 g, 39.36 mmol, 15 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물에 빙냉수를 첨가하고, 에틸 아세테이트 (50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 유기 층을 감압 하에 농축시켜 3-브로모-4-클로로-6-메톡시-퀴놀린 (5.2 g, 18.51 mmol, 94% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 272.0[M+H]+.
단계 3: 디클로로메탄 (20 mL) 중 3-브로모-4-클로로-6-메톡시-퀴놀린 (5.20 g, 19.08 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 디클로로메탄 중 삼브로민화붕소 (1 N, 19.08 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 200 mL의 빙냉수에 붓고, 유기 상을 분리하였다. 수성 층을 1 N HCl에 의해 pH 4로 산성화시키고, 목적 화합물을 에틸 아세테이트 (250 mL X 2)를 사용하여 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 3-브로모-4-클로로-퀴놀린-6-올 (3.7 g, 13.17 mmol, 69% 수율)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 260.0 [M+H]+.
단계 4: 1,4-디옥산 (165.51 μL) 및 물 (1.66 mL) 중 tert-부틸 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (890.22 mg, 2.44 mmol) 및 3-브로모-4-클로로-퀴놀린-6-올 (0.7 g, 2.71 mmol)의 용액에 실온에서 질소 하에 탄산칼륨 (935.66 mg, 6.77 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시킨 다음, 동일한 온도에서 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II), 디클로로메탄과의 착물 (221 mg, 0.271 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃로 12시간 동안 가열하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 셀라이트 층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (10 ml)로 세척하였다. 수집된 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(4-클로로-6-히드록시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (600 mg, 1.30 mmol, 48% 수율)를 갈색빛 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 417.2[M+H]+.
단계 5: 무수 THF (5 mL) 중 tert-부틸 3-(4-클로로-6-히드록시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (350 mg, 839.54 μmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 메탄올 중 25% 소듐 메톡시드 (90.71 mg, 1.68 mmol, 93.61 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 마이크로웨이브 조건 하에 6시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x10 mL)를 사용하여 추출하였다. 분리된 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 조 생성물을 120 g 스냅을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 포름산 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-메톡시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (270 mg, 353.47 μmol, 42% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 413.5[M+H]+.
단계 6: 1,4-디옥산 (3.5 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-메톡시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (270 mg, 654.58 μmol)의 교반 용액에 실온에서 불활성 분위기 하에 탄소 상 수산화팔라듐, 20 중량%, 50% 물 (91.93 mg, 654.58 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 수소 주머니 압력으로 32시간 동안 수소화시켰다. 완료된 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄 중 10% 메탄올 (200 mL)을 사용하여 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시키고, 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 70% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-메톡시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (270 mg, 547.17 μmol, 84% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 415.6[M+H]+.
단계 7/8: THF (4 mL) 중 tert-부틸 3-(6-히드록시-4-메톡시-3-퀴놀릴)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (271.32 mg, 654.58 μmol) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (133.68 mg, 850.96 μmol, 98.29 μL)의 용액에 탄산세슘 (639.82 mg, 1.96 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2x50 mL)를 사용하여 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물을 수득하였다. 수득한 조 생성물을 플래쉬 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 라세미 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. 라세미 화합물을 키랄 SFC (칼럼: 룩스 아밀로스-1 (250*30)mm, 5μ; 이동상: CO2 : 메탄올 중 0.5% 이소프로필 아민 (60:40); 유량: 70 g/분; 배압: 100 bar; 파장: 220; 사이클 시간: 8분)에 의해 키랄 분해하여 피크 1 (제1 용리) tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (71 mg, 127.43 μmol, 19% 수율, 99.36% ee, R 거울상이성질체로서 임의적으로 할당, SOR = +28.80)를 회백색 고체로서, 그리고 피크 2 (제2 용리) tert-부틸 (3S)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (65 mg, 116.66 μmol, 18% 수율, 97.2% ee, S 거울상이성질체로서 임의적으로 할당, SOR = -18.00)를 회백색 고체로서 수득하였다.
단계 9: 술파모일화 중간체를 tert-부틸 (3S)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (60.00 mg, 108.78 μmol), 탄산세슘 (106.33 mg, 326.34 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (25.55 mg, 184.92 μmol)을 사용하여 절차 C-D에 따라 합성하였다. 완료된 후, 반응물을 물 (10 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 중 10% 메탄올 (2x30 mL)을 사용하여 추출하였다. 분리된 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (48 mg, 52.32 μmol, 48% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였으며, 정제 없이 추가 단계에 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 670.5.[M+H]+.
단계 10: 필요한 아민을 디옥산 중 4 M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 절차 C-E에 따라 합성하였다. 1,4-디옥산 (1.5 mL) 중 4 M 염화수소를 사용하여 tert-부틸 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (48.00 mg, 71.67 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (40 mg, 46.86 μmol, 65% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ES+): 570.3[M+H]+.
단계 11: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-F)을 통해 제조하였다. (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (48 mg, 79.19 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (33.21 mg, 72.86 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (51.18 mg, 395.97 μmol, 68.97 μL) 및 HATU (39.15 mg, 102.95 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (15 mg, 14.41 μmol, 18% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 972.2 [M+H]+; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.91 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.60 (dd, J = 2.80, 9.00 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.20 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 4H), 3.86 (s, 3H), 3.74-3.62 (m, 1H), 3.61-3.50 (m, 1H), 3.21-3.10 (m, 4H), 2.80 (s, 3H), 2.75 (t, J = 8.00 Hz, 2H), 2.59-2.52 (m, 4H), 2.50-2.34 (m, 2H), 1.97-1.71 (m, 10H), 1.06 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 226
(3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로페녹시]-4-메톡시퀴놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-5-플루오로-1-메틸인다졸-6-일]-4-히드록시피페리딘-4-일]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: 술파모일화 중간체를 tert-부틸 (3R)-3-[6-(2-시아노-3,6-디플루오로-페녹시)-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (71.00 mg, 128.72 μmol), 탄산세슘 (125.82 mg, 386.16 μmol) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (30.24 mg, 218.83 μmol)을 사용하여 절차 C-D에 따라 합성하였다. 완료된 후, 반응물을 물 (10 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 중 10% 메탄올 (2x30 mL)을 사용하여 추출하였다. 분리된 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (42 mg, 47.66 μmol, 37% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였으며, 정제 없이 추가 단계에 사용하였다. LCMS m/z (ESI): 670.5 [M+H]+.
단계 2: 필요한 아민을 디옥산 중 4 M HCl 매개된 N-Boc 탈보호 절차 C-E에 따라 합성하였다. 1,4-디옥산 (1.5 mL) 중 4 M 염화수소를 사용하여 tert-부틸 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (40.00 mg, 59.72 μmol)에 대해 N-Boc 탈보호를 수행하여 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (32 mg, 31.68 μmol, 53% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ES+): 570.4 [M+H]+.
단계 3: 목적 화합물을 HATU 매개된 산-아민 커플링 반응 (절차 C-F)을 통해 제조하였다. (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (32 mg, 52.80 μmol), 2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세트산 (24.36 mg, 53.43 μmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (34.12 mg, 263.98 μmol, 45.98 μL) 및 HATU (26.10 mg, 68.63 μmol)를 사용하여 아미드 커플링을 수행하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피에 의해 물 중 0.1% 아세트산암모늄 중 40% 아세토니트릴로 용리시켜 정제하여 생성물 (3R)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-메톡시-3-퀴놀릴]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (6 mg, 5.94 μmol, 11% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS m/z (ESI): 972.2 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.54 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.90 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 9.20 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.59 (dd, J = 2.80, 9.20 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.27 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.22 (t, J = 6.80 Hz, 1H), 3.95 (s, 1H), 3.89 (t, J = 6.80 Hz, 4H), 3.86 (s, 3H), 3.73-3.62 (m, 1H), 3.60-3.49 (m, 1H), 3.29-3.04 (m, 7H), 2.76-2.72 (m, 4H), 2.59-2.51 (m, 4H), 2.40-2.37 (m, 1H), 2.01-1.98 (m, 2H), 1.82-1.71 (m, 9H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 227
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]신놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸
단계 1: THF (30 mL) 중 tert-부틸 3-옥소-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (3.0 g, 11.75 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 250 mL 둥근 바닥 플라스크에 0℃에서 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔 (8.94 g, 58.75 mmol, 8.77 mL)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 천천히 주위 온도가 되게 하고, 1시간 동안 교반하였다. 이에 이어서, 0℃에서 1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부탄-1-술포닐 플루오라이드 (10.65 g, 35.25 mmol, 6.09 mL)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. TLC에 의해 나타난 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x60 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 60-120 실리카 겔 및 0-15% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부틸술포닐옥시)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (4.5 g, 8.37 mmol, 71.23% 수율)를 백색 점착성 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES+): m/z 438.0 [M+H-100]+.
단계 2: 1,4-디옥산 (39.75 mL) 중 tert-부틸 3-(1,1,2,2,3,3,4,4,4-노나플루오로부틸술포닐옥시)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (1.4 g, 2.61 mmol)의 용액에 실온에서 아세트산칼륨 (767.03 mg, 7.82 mmol) 및 비스(피나콜레이토)디보론 (1.32 g, 5.21 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 질소 기체로 5분 동안 탈기시키고, 이 온도에서 (1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센)팔라듐(II) 디클로라이드 (2.13 g, 2.61 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃로 12시간 동안 가열하였다. 반응의 진행을 LCMS/TLC에 의해 모니터링하였다. 생성된 용액을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (60 ml)로 세척하였다. 수집된 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 칼럼 크로마토그래피 (230-400 메쉬 실리카 겔)에 의해 용리액으로서 석유 에테르 중 40% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 tert-부틸 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (750 mg, 1.50 mmol, 57.54% 수율)를 액체로서 수득하였다. LC-MS (ES+): m/z 266.0 [M-Boc+H]+.
단계 3: HCl (6 mL) 중 4-벤질옥시아닐린 (700.00 mg, 3.51 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 50 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 0℃에서 물 (2 mL) 중 아질산나트륨 (218.16 mg, 3.16 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 이 온도에서 HCl (6 mL) 중 염화주석(II) (1.73 g, 9.13 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. UPLC에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 냉수로 세척하고, 고진공 하에 건조시켜 생성물 (4-벤질옥시페닐)히드라진 (700 mg, 3.27 mmol, 92.99% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES+): m/z 215.0 [M+H]+.
단계 4: 에탄올 (15 mL) 중 (4-벤질옥시페닐)히드라진 (1.0 g, 4.67 mmol)의 잘 교반된 용액을 함유하는 100 mL 1구 둥근 바닥 플라스크에 주위 온도에서 질소 분위기 하에 소듐 메톡시드 (756.41 mg, 14.00 mmol) 및 에틸 2,2-디에톡시아세테이트 (1.23 g, 7.00 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. TLC에 의해 나타난 바와 같이 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2x20 mL)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 (230-400 메쉬) 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르 중 40% EtOAc)에 의해 정제하여 N'-(4-벤질옥시페닐)-2,2-디에톡시-아세토히드라지드 (570 mg, 1.56 mmol, 33.46% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES+): m/z 345.2 [M+H]+
단계 5: 아세트산 (2 mL) 중 N'-(4-벤질옥시페닐)-2,2-디에톡시-아세토히드라지드 (0.2 g, 580.71 μmol)의 용액에 실온에서 트리플루오로아세트산 (1.48 g, 12.98 mmol, 1 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응물을 LCMS/TLC에 의해 모니터링하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (20 ml) 중에 용해시키고, 10% 중탄산나트륨 용액 (10 ml)으로 세척하였다. 유기 상을 건조시키고 (무수 Na2SO4), 여과하고, 감압 하에 농축시켜 6-벤질옥시신놀린-3-올 (80 mg, 317.12 μmol, 54.61% 수율)을 갈색빛 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES+): m/z 253.3 [M+H]+
단계 6: 포스포릴 트리클로라이드 (45.59 mg, 297.30 μmol) 중 6-벤질옥시신놀린-3-올 (15 mg, 59.46 μmol)의 용액을 110℃로 4시간 동안 가열하였다. 반응물을 LCMS/TLC에 의해 모니터링하였다. 완료된 후, 생성된 용액을 감압 하에 농축시켜 6-벤질옥시-3-클로로-신놀린 (10 mg, 23.26 μmol, 39.13% 수율)을 갈색빛 고체로서 수득하였다. LC-MS (ES+): m/z 271.1 [M+H]+.
단계 7: 1,4-디옥산 중 6-(벤질옥시)-3-클로로신놀린 (1 당량) 및 tert-부틸 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (1.2 당량)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 물 중 탄산세슘 (3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 10분 동안 탈기시킨 후, 디클로로메탄과의 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 디클로로팔라듐 (II) 착물 (0.1 당량)을 첨가하고, 반응물을 100℃에서 가열하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 3-(6-(벤질옥시)신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 8: 메탄올 중 tert-부틸 3-(6-(벤질옥시)신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데스-2-엔-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 탄소 상 10% 팔라듐 (0.1 당량)을 실온에서 첨가하였다. 용액을 탈기시키고, 수소 분위기 하에 16시간 동안 또는 LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 후처리를 수행하였다. 이어서, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 3-(6-히드록시신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 9: THF 중 tert-부틸 3-(6-히드록시신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (1.1 당량) 및 2,3,6-트리플루오로벤조니트릴 (1.1 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 10: 라세미 화합물 tert-부틸 3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 키랄 SFC 정제에 의해 분해하여 tert-부틸 (S)-3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 11: N,N-디메틸포름아미드 중 tert-부틸 (S)-3-(6-(2-시아노-3,6-디플루오로페녹시)신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 실온에서 탄산세슘 (2.5 당량) 및 [메틸(술파모일)아미노]에탄 (2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS에 의해 확인된 바와 같이 반응이 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 (S)-3-(6-(2-시아노-3-((N-에틸-N-메틸술파모일)아미노)-6-플루오로페녹시)신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 수득하였다.
단계 12: 디클로로메탄 중 tert-부틸 (S)-3-(6-(2-시아노-3-((N-에틸-N-메틸술파모일)아미노)-6-플루오로페녹시)신놀린-3-일)-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (1 당량)의 용액에 0℃에서 디옥산 중 4 N HCl (10 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 용매를 감압 하에 제거하고, 조 화합물을 메틸 t-부틸 에테르 (MTBE)로 연화처리하여 최종 생성물 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]신놀린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸을 수득하였다.
단계 13: N,N-디메틸포름아미드 (4 mL/mmol) 중 2-(1-(3-(2,4-디옥소테트라히드로피리미딘-1(2H)-일)-5-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-6-일)-4-히드록시피페리딘-4-일)아세트산 (1 당량) 및 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]신놀린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (1 당량)의 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 N,N-디이소프로필에틸아민 (4 당량)을 첨가하였다. 이에 이어서, 동일한 온도에서 HATU (1.1 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 후처리를 수행하고, 조 생성물을 역상 HPLC에 의해 정제하여 목적 화합물 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]신놀린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸을 수득하였다.
실시예 228
(3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (실시예 228)
단계 1 및 단계 2:
절차는 실시예 150의 단계 4 및 단계 5의 것과 동일하였다. 화합물 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸을 담갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): m/z 557.3 [M + H]+.
단계-3:
절차는 실시예 157의 단계 8의 것과 동일하였다. 조 화합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (아세토니트릴 중 40-45% 중탄산암모늄 완충제)에 의해 정제하여 (3S)-3-[6-[2-시아노-3-[[에틸(메틸)술파모일]아미노]-6-플루오로-페녹시]-4-옥소-퀴나졸린-3-일]-8-[2-[1-[3-(2,4-디옥소헥사히드로피리미딘-1-일)-5-플루오로-1-메틸-인다졸-6-일]-4-히드록시-4-피페리딜]아세틸]-1-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 (69.16 mg, 70.93 μmol, 16.80% 수율)을 회백색 고체로서 수득하였다.
LCMS (ESI): m/z 958.2 [M + H]+.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.36 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.69 (dd, J = 3.20, 9.00 Hz, 1H), 7.52-7.45 (m, 1H), 7.37 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 12.80 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 5.31 (m, 1H), 5.02 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 4.16-4.13 (m, 2H), 3.94-3.88 (m, 6H), 3.89-3.72 (m, 1H), 3.71-3.61 (m, 1H), 3.60-3.48 (m, 1H), 3.42-3.32 (m, 1H), 3.19-3.06 (m, 6H), 2.76-2.67 (m, 5H), 2.58-2.38 (m, 3H), 2.34-2.33 (m, 1H), 2.12-2.01 (m, 1H), 1.82-1.67 (m, 8H), 1.05 (t, J = 7.20 Hz, 3H).
실시예 229 세포 HiBiT 검정
물질
A375 (BRAF 동형접합 V600E 돌연변이를 보유함) 세포주를 ATCC (미국 버지니아주 마나사스)로부터 구입하였다. RPMI 1640 배지 (페놀 레드 무함유), 태아 소 혈청 (FBS) 및 피루브산나트륨 (100mM)을 깁코 (미국 뉴욕주 그랜드 아일랜드)로부터 구입하였다. DMEM 배지 (페놀 레드 무함유 및 L-글루타민이 보충됨)를 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 구입하였다. 나노-글로® HiBiT 용해 검정 시스템을 프로메가 (미국 위스콘신주 매디슨)로부터 구입하였다. CRISPR을 통해 HiBiT 융합 태그를 갖는 BRAFV600E를 내인성으로 발현하는 A375.10 (HiBiT-BRAFV600E) 세포주를 내부적으로 제조하였다. CRISPR을 통해 HiBiT 융합 태그를 갖는 GSPT1을 내인성으로 발현하는 HEK293T.114 (HiBiT-GSPT1) 세포주를 내부적으로 제조하였다. CRISPR을 통해 HiBiT 융합 태그를 갖는 SALL4를 내인성으로 발현하는 KELLY.2 (SALL4-HiBiT) 세포주를 라이프니츠-인스티튜트(Leibniz-Institute) DSMZ (독일 브라운슈바이크)로부터 구입한 KELLY 세포주 (ACC-번호 355)로부터 내부적으로 제조하였다. 세포 배양 플라스크 및 384-웰 마이크로플레이트를 VWR (미국 펜실베니아주 래드너) 또는 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 입수하였다.
BRAFV600E 분해 분석
나노-글로® HiBiT 용해 검정 키트를 사용하여 발광 신호의 정량화에 기초하여 BRAFV600E 분해를 결정하였다. 시험 화합물을 384-웰 플레이트에 10 μM의 최고 농도로부터 11 포인트, 반 로그 적정으로 이중으로 첨가하였다. A375.10 세포를 384-웰 플레이트에 웰당 7500개 세포의 세포 밀도로 첨가하였다. 플레이트를 37℃에서 5% CO2 하에 24시간 동안 유지하였다. 시험 화합물의 부재 하에 처리된 세포는 음성 대조군이었고, 나노-글로® HiBiT 용해 시약이 없는 세포는 양성 대조군이었다. 24-시간 인큐베이션 후에, 나노-글로® HiBiT 용해 검정 시약을 세포에 첨가하였다. 엔비전™ 다중표지 판독기 (퍼킨엘머, 미국 캘리포니아주 산타 클라라) 상에서 발광을 획득하였다. 화합물 157에 대해 생성된 데이터가 도 1에 제시된다.
GSPT1 분해 분석
나노-글로® HiBiT 용해 검정 키트를 사용하여 발광 신호의 정량화에 기초하여 GSPT1 분해를 결정하였다. 시험 화합물을 384-웰 플레이트에 10 μM의 최고 농도로부터 11 포인트, 반 로그 적정으로 이중으로 첨가하였다. HEK293T.114 세포를 384-웰 플레이트에 웰당 6000개 세포의 세포 밀도로 첨가하였다. 플레이트를 37℃에서 5% CO2 하에 6시간 동안 유지하였다. 시험 화합물의 부재 하에 처리된 세포는 음성 대조군이었고, 나노-글로® HiBiT 용해 시약이 없는 세포는 양성 대조군이었다. 6-시간 인큐베이션 후에, 나노-글로® HiBiT 용해 검정 시약을 세포에 첨가하였다. 엔비전™ 다중표지 판독기 (퍼킨엘머, 미국 캘리포니아주 산타 클라라) 상에서 발광을 획득하였다. 화합물 157에 대해 생성된 데이터가 도 2에 제시된다.
SALL4 분해 분석
나노-글로® HiBiT 용해 검정 키트를 사용하여 발광 신호의 정량화에 기초하여 SALL4 분해를 결정하였다. 시험 화합물을 384-웰 플레이트에 10 μM의 최고 농도로부터 11 포인트, 반 로그 적정으로 이중으로 첨가하였다. KELLY.2 세포를 384-웰 플레이트에 웰당 6000개 세포의 세포 밀도로 첨가하였다. 플레이트를 37℃에서 5% CO2 하에 6시간 동안 유지하였다. 시험 화합물의 부재 하에 처리된 세포는 음성 대조군이었고, 나노-글로® HiBiT 용해 시약이 없는 세포는 양성 대조군이었다. 6-시간 인큐베이션 후에, 나노-글로® HiBiT 용해 검정 시약을 세포에 첨가하였다. 엔비전™ 다중표지 판독기 (퍼킨엘머, 미국 캘리포니아주 산타 클라라) 상에서 발광을 획득하였다. 화합물 157에 대해 생성된 데이터가 도 3에 제시된다.
실시예 230 HTRF ERK 억제 검정
물질
A375 (BRAF 동형접합 V600E 돌연변이를 보유함) 세포주를 ATCC (CRL-1619)로부터 구입하였다. L-글루타민이 보충된 페놀 레드 무함유 DMEM 배지를 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 구입하였다. 어드밴스드 포스포-ERK (Thr202/Tyr204) HTRF 검정 키트를 시스바이오(Cisbio) (미국 매사추세츠주 베드포드)로부터 구입하였다. 세포 배양 플라스크 및 384-웰 마이크로플레이트를 VWR (미국 펜실베니아주 래드너) 또는 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 입수하였다.
포스포-ERK (T202/Y204) 억제 분석
어드밴스드 포스포-ERK (T202/Y204) HTRF 검정 키트를 사용하여 FRET 신호의 정량화에 기초하여 활성화된 포스포-ERK (T202/Y204) 단백질의 억제를 결정하였다. 시험 화합물을 384-웰 플레이트에 10 μM의 최고 농도로부터 11 포인트, 반 로그 적정으로 이중으로 첨가하였다. A375 세포를 384-웰 플레이트에 웰당 8000개 세포의 세포 밀도로 첨가하였다. 플레이트를 37℃에서 5% CO2 하에 24시간 동안 유지하였다. 시험 화합물의 부재 하에 처리된 세포는 음성 대조군이었다. 모든 시약을 함유하지만 세포는 함유하지 않는 웰로 양성 대조군을 설정하였다. 엔비전™ 다중표지 판독기 (퍼킨엘머, 미국 캘리포니아주 산타 클라라) 상에서 FRET 신호를 획득하였다. 화합물 157에 대해 생성된 데이터가 도 1에 제시된다.
실시예 231 웨스턴 블롯 분석
방법: 웨스턴 블롯을 사용하여 화합물 157에 대한 BRAF V600E 분해 특징 및 작용 메카니즘을 결정하였다. 10% 열-불활성화 FBS가 보충된 DMEM 배지로 배양된 A375 (ATCC, CRL-1619) 세포를 6-웰 디쉬에 500,000개 세포/웰로 플레이팅하고, 16시간 동안 부착되도록 하였다. 세포를 기능 CRBN 측 없이 BRAF V600E를 표적화하는 화합물 10 μM, CRBN을 표적화하는 IMiD, MLN4924 또는 1 μM 보르테조밉으로 1시간 동안 전처리하였다. 사전-인큐베이션 후에, 세포를 100 nM의 화합물 157로 또는 그 없이 24시간 동안 처리하고, 이 시점에 세포를 PBS로 헹구고, 급속 동결시켰다. 세포 펠릿을 얼음 상에서 10분 동안 용해 완충제 [RIPA (써모(Thermo), Ref 89901), 1x 홀트 프로테아제 및 포스파타제 억제제 칵테일 (써모, Pro#1361281), 벤조나제 (시그마(Sigma), E1014-5JU)] 중에 용해시켰다. 불용성 단백질을 원심분리 (21.2 x g, 10분)에 의해 용해물로부터 제거하였다.
단백질 농도를 BCA 단백질 검정 키트 (써모, 23228)를 사용하여 측정하였다. BSA로 제조된 단백질 표준 곡선 및 샘플 단백질 농도를 엔비전 다중표지 판독기 (퍼킨엘머)를 사용하여 판독하였다. 용해물 농도를 용해 완충제 및 램리(Laemmli) 6X, SDS-샘플 완충제, 환원용 (보스톤 바이오프로덕츠, 인크.(Boston BioProducts, Inc.) 파트 #BP-111R-50ml)으로 정규화하였다. 정규화된 샘플 및 카멜레온(Chameleon)® 듀오 사전-염색된 단백질 래더 (LI-COR, 928-60000)를 4-15% 크리테리온(Criterion)™ 트리스-HCl 단백질 겔 (바이오-라드(Bio-Rad), #3450028) 상에 로딩하였다. 겔을 120 V에서 1.5시간 동안 전개시켰다. 트랜스-블롯 터보(Trans-Blot Turbo) 전달 시스템 (바이오-라드, 1704150EDU)에서 25 V에서 7분 동안 트랜스-블롯 터보 RTA 미디 0.2 μm 니트로셀룰로스 전달 키트 (바이오-라드, 카탈로그 #1704271)를 제조업체 권장사항에 따라 사용하여 단백질 전달을 완료하였다.
막을 인터셉트(Intercept)® 차단 완충제 (TBS) (리-코르(LI-COR), 카탈로그 # 927-50000) 중에서 1시간 동안 요동시키면서 차단하였다. 1차 항체 BRAF (1:1000; 셀 시그널링(Cell Signaling), D9T6S) 및 빈쿨린 (1:10,000; EMD, 05-386)을 인터셉트® T20 (TBS) 단백질-무함유 항체 희석제 (LI-COR, 카탈로그 #927-85001) 중에 희석하고, 4℃에서 밤새 요동시키면서 인큐베이션하였다. 막을 TBS-T 중에서 요동시키면서 5분 동안 3회 세척하였다. 2차 항체 IR 염료 800 CW 염소 항-토끼 (1:5000; 리코르, 926-32211/C91030-13) 및 IR 염료 680 RD 염소 항-마우스 (1:5000; 리코르, 926-68072/C90910-21)를 인터셉트® T20 (TBS) 단백질-무함유 항체 희석제 (리-코르, 카탈로그 # 927-85001) 중에 희석하고, 실온에서 요동시키면서 막 상에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 막을 이전에 기재된 바와 같이 세척하고, 오디세이(Odyssey) CLx 상에서 영상화하였다. 화합물 157에 대한 본 검정의 결과가 도 4에 제시된다.
이 절차를 또한 화합물 157 및 화합물 157NMe의 BRAF V600E 분해 특징을 결정하는 데 사용하였다. 10% 열-불활성화 FBS가 보충된 DMEM 배지로 배양된 A375 (ATCC, CRL-1619) 세포를 6-웰 디쉬에 500,000개 세포/웰로 플레이팅하고, 16시간 동안 부착되도록 하였다. 세포를 DMSO 중에 연속 희석된 화합물 157 또는 화합물 157NMe 화합물로 24시간 동안 처리하였다. 샘플을 하기 1차 항체로 프로빙하였다: BRAF (1:1000; 셀 시그널링, D9T6S), 빈쿨린 (1:10,000; EMD, 05-386), ERK (1:1000; 셀 시그널링, 4696S) 및 pERK T202/Y204 (1:1000; 셀 시그널링, 9101S). 생성된 데이터가 도 9에 제시된다.
이 절차를 또한 화합물 157의 WT BRAF 분해 특징을 결정하는 데 사용하였다. 10% 열-불활성화 FBS로 보충된 맥코이 5a 변형 배지 (ATCC, 30-2007)로 배양된 HCT-116 (ATCC, CCL-247) 세포를 6-웰 디쉬에 500,000개 세포/웰로 플레이팅하고, 16시간 동안 부착되도록 하였다. 세포를 DMSO 중에 연속 희석된 화합물 157 화합물로 24시간 동안 처리하였다. 샘플을 하기 1차 항체로 프로빙하였다: BRAF (1:1000; 셀 시그널링, D9T6S), 빈쿨린 (1:10,000; EMD, 05-386), ERK (1:1000; 셀 시그널링, 4696S) 및 pERK T202/Y204 (1:1000; 셀 시그널링, 9101S). 생성된 데이터가 도 12에 제시된다.
이 절차를 또한 트라메티닙과 조합된 BRAF 분해제 또는 억제제에 반응하는 BRAF V600E 및 NRASQ61K 이중 돌연변이체 저항성 모델을 연구하는 데 사용하였다. 10% 열-불활성화 FBS가 보충된 DMEM 배지로 배양된 A375 (ATCC, CRL-1619) 세포를 환자에서 관찰된 저항성 모델로서 NRASQ61K를 안정하게 발현하도록 CRISPR을 사용하여 조작하였다. 세포를 6-웰 디쉬에 500,000개 세포/웰로 플레이팅하고, 16시간 동안 부착되도록 하였다. 세포를 24시간 동안 DMSO 중에 연속 희석된 화합물 157 또는 엔코라페닙 화합물로 처리하였다. 이들을 또한 1 nM 트라메티닙과 조합하여 처리하였다. 샘플을 하기 1차 항체로 프로빙하였다: BRAF (1:1000; 셀 시그널링, D9T6S), 빈쿨린 (1:10,000; EMD, 05-386), ERK (1:1000; 셀 시그널링, 4696S) 및 pERK T202/Y204 (1:1000; 셀 시그널링, 9101S). 생성된 데이터가 도 20에 제시된다.
이 절차를 또한 화합물 157의 BRAF 분해 특징을 결정하는 데 사용하였다. 10% 열-불활성화 FBS가 보충된 DMEM 배지로 배양된 HEK-293T (ATCC, CRL-3216) 세포를 HA 태그부착된 형태의 BRAF V600E, WT, p61 스플라이스 변이체, 부류 II 돌연변이체 G469A 및 부류 III 돌연변이체 G466V를 발현하도록 조작하였다. 세포를 6-웰 디쉬에 500,000개 세포/웰로 플레이팅하고, 16시간 동안 부착되도록 하였다. 세포를 DMSO 중에 연속 희석된 화합물 157 화합물로 24시간 동안 처리하였다. 샘플을 하기 1차 항체로 프로빙하였다: HA (1:1000; 셀 시그널링, 3924) 및 빈쿨린 (1:10,000; EMD, 05-386). 생성된 데이터가 도 23에 제시된다.
이 절차를 또한 화합물 157의 BRAF 분해 특징을 결정하는 데 사용하였다. 부류 III 돌연변이 G466V를 내인성으로 발현하는 H1666 (ATCC, CRL-5885) 세포를 5% 열-불활성화 FBS가 보충된 RPMI-1640 배지에서 배양하였다. 세포를 6-웰 디쉬에 500,000개 세포/웰로 플레이팅하고, 16시간 동안 부착되도록 하였다. 세포를 DMSO 중에 연속 희석된 화합물 157 화합물로 24시간 동안 처리하였다. 샘플을 상기 도 2b에 기재된 것과 동일한 방법으로 웨스턴 블롯 분석을 위해 처리하였다. 샘플을 하기 1차 항체로 프로빙하였다: BRAF (1:1000; 셀 시그널링, D9T6S), 빈쿨린 (1:10,000; EMD, 05-386), ERK (1:1000; 셀 시그널링, 4696S) 및 pERK T202/Y204 (1:1000; 셀 시그널링, 9101S). 생성된 데이터가 도 24에 제시된다.
실시예 232 3원 복합체 형성 검정
BRAF V600E, 시험 화합물 및 CRBN 사이의 3원 복합체의 형성을 알파리사(AlphaLISA)® 검정을 사용하여 정량화하였다. GST-태그부착된 BRAF V600E 및 His-태그부착된 CRBN을 공여자/수용자 알파리사® 쌍으로 표지하고, 알파-신호의 변화를 통해 복합체 형성을 모니터링하였다. 대조군 웰로부터의 신호를 정규화 대조군으로서 사용하였다. 화합물 157에 대한 3원 복합체 형성의 농도 의존성은 특징적인 종-형상의 곡선을 가졌고, 불활성 버전의 화합물 (화합물 157NMe)에 대해서는 복합체 형성이 관찰되지 않았다.
방법
GST-BRAF V600E, 화합물 157 및 his-CRBN 사이의 3원 복합체 형성의 특징화를 알파리사® 검정을 사용하여 수행하였다. 화합물을 낮은 불감 부피 플레이트 내의 연속 희석된 DMSO 스톡으로부터 회색 384-웰 알파플레이트 내로 음향 기술을 사용하여 총 반응 부피의 1%로 분배하였다. 화합물을 A에서 P 줄까지 수직으로 배열하였다. 농도 시리즈는 수평: 칼럼 1-11이었고, 이어서 이중으로 칼럼 12-22였다. 칼럼 23 및 24열은 각각 0% (시험 화합물 없음, 따라서 단지 배경 신호) 및 100% 대조군 (1nM 이중-태그부착된 MBP 단백질은 10 nM의 복합체에 상응하는 신호를 생성함)에 대해 예비되었다.
공여자 비드의 여기는 일중항 산소 분자의 생성을 유발한다. BRAF V600E와 CRBN 사이의 3원 복합체가 형성되는 경우에, 이는 공여자/수용자 비드를 매우 근접하게 만들고, 공여자-방출된 일중항 산소는 수용자 비드로부터의 발광을 자극할 것이다. 3원 복합체의 부재 하에, 평균 공여자-수용자 거리는 수용자 방출을 자극하기에는 너무 크다.
50 mM HEPES (pH 7.4), 200 mM NaCl, 1 mM TCEP, 0.05% 플루론산, 0.1% BSA 중 16 nM의 BRAF V600E 및 64 nM의 CRBN을 함유하는 10 μL 혼합물을 시험 화합물을 함유하는 웰 (칼럼 1-22) 및 음성 대조군 웰 (칼럼 23)에 첨가하였다. 양성 대조군 웰 (칼럼 24)은 20 nM의 이중-태그부착된 MBP 10uL를 함유하였다. 플레이트를 30초 동안 원심분리하고, 2000 RPM으로 30초 동안 진탕시키고, 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션을 완료한 후, 각각 40ug/ml의 공여자 및 수용자 비드를 함유하는 혼합물 10uL를 모든 웰에 첨가하였다. 플레이트를 다시 30초 동안 원심분리하고, 2000 RPM으로 30초 동안 교반하고, 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 플레이트를 적절한 알파리사® 필터 세트가 구비된 엔비전 플레이트 판독기 상에서 판독하였다. 화합물 157에 대해 생성된 데이터가 도 5에 제시된다.
실시예 233 키놈 프로파일링
화합물 157을 많은 단백질 키나제에 대해 시험하여 BRAF에 대해 얼마나 선택적인지를 결정하였다. 도 6 및 7에 제시된 원형은 화합물 157과 함께 인큐베이션된 후 얼마나 많은 단백질 활성이 남아있는지를 나타낸다.
방법
키놈 스캔 프로파일링을 유로핀스 디스커버엑스 코포레이션(Eurofins DiscoverX Corporation)에서 수행하였다. 키나제-태그부착된 T7 파지 균주를 BL21 균주로부터 유래된 이. 콜라이 숙주의 24-웰 블록에서 병행 성장시켰다. 이. 콜라이를 대수기로 성장시키고, 동결 스톡으로부터의 T7 파지로 감염시키고 (감염 다중도 = 0.4), 용해될 때까지 (90-150분) 32℃에서 진탕시키면서 인큐베이션하였다. 용해물을 원심분리하고 (6,000 x g), 여과하여 (0.2μm) 세포 파편을 제거하였다. 나머지 키나제를 HEK-293 세포에서 생산하고, 후속적으로 qPCR 검출을 위해 DNA로 태그부착하였다. 스트렙타비딘-코팅된 자기 비드를 실온에서 30분 동안 비오티닐화 소분자 리간드로 처리하여 키나제 검정을 위한 친화성 수지를 생성하였다. 리간드화된 비드를 과량의 비오틴으로 차단하고, 차단 완충제 (시블록(SeaBlock) (피어스(Pierce)), 1% BSA, 0.05% 트윈(Tween) 20, 1 mM DTT)로 세척하여 미결합 리간드를 제거하고, 비-특이적 파지 결합을 감소시켰다. 1x 결합 완충제 (20% 시블록, 0.17x PBS, 0.05% 트윈 20, 6 mM DTT) 중에서 키나제, 리간드화된 친화성 비드 및 시험 화합물을 합하여 결합 반응물을 조립하였다. 시험 화합물을 100% DMSO 중 40x 스톡으로서 제조하고, 검정에서 직접 희석하였다. 모든 반응을 폴리프로필렌 384-웰 플레이트에서 0.02 ml의 최종 부피로 수행하였다. 검정 플레이트를 실온에서 1시간 동안 진탕시키면서 인큐베이션하고, 친화성 비드를 세척 완충제 (1x PBS, 0.05% 트윈 20)로 세척하였다. 이어서, 비드를 용리 완충제 (1x PBS, 0.05% 트윈 20, 0.5 μM 비-비오티닐화 친화성 리간드) 중에 재현탁시키고, 실온에서 30분 동안 진탕시키면서 인큐베이션하였다. 용리액 중 키나제 농도를 qPCR에 의해 측정하였다. 생성된 데이터가 도 6 및 도 7에 제시된다.
실시예 234 전반적 프로테오믹스 프로파일링 A375 및 JURKAT 세포주
A375 세포의 경우, 총 8,760개의 단백질이 2.65%의 단백질 오류 발견율로 확인되었다. 이 실험의 결과는, 300nM 다브라페닙 처리와 비교하여, BRAFV600E가 27% 단백질이 남도록 선택적으로 분해되는 반면, ARAF 및 RAF1 (일명 CRAF)은 크게 변화되지 않고 남아있다는 것을 입증한다. 감소된 것으로 밝혀진 유일한 다른 단백질은 LOXL4 (sp|Q96JB6|LOXL4_인간; 리실 옥시다제 상동체 4)였지만, 이는 또한 다브라페닙 처리된 샘플 상에서 보다 적은 정도로 감소된 것으로 관찰되었고, 따라서 화합물 157의 진정한 오프-타겟으로 간주되는 것이 아니라, 오히려 BRAFV600E 활성 상실의 결과이다. 야생형 BRAF를 함유하는 JURKAT 세포 (ATCC, TIB-152)에서 수행된 실험에서, 총 8,415개의 단백질이 2.8%의 단백질 오류 발견율로 확인되었다. 데이터 분석은 BRAF, ARAF 및 RAF1 (일명 CRAF)이 300nM 화합물 157로 24시간 동안 처리 시 변화되지 않는다는 것을 보여주며, 이는 화합물 157이 야생형 BRAF 및 밀접하게 관련된 단백질 ARAF 및 RAF1 (일명 CRAF)과 비교하여 BRAFV600E에 대해 고도로 특이적이라는 것을 나타낸다.
A375 및 JURKAT 세포주에서의 화합물 157에 대한 전반적 프로테오믹스 실험을 위한 실험 방법.
각각의 세포주를 DMSO 또는 화합물 157 (최종 농도 300nM)로 37℃에서 5% CO2 하의 인큐베이터에서 24시간 동안 이중으로 처리하였다. 24-시간 인큐베이션 후에, 세포를 수거하고, PBS로 2회 세척하고, 액체 질소에서 순간 동결시켰다. 샘플을 용해 완충제 [8 M 우레아, 50 mM HEPES (pH 8.5), 50 mM NaCl, 1x 프로테아제 억제제 칵테일] 중에 재현탁시키고, 4℃에서 5분의 총 초음파처리 시간 동안 30초 온 및 30초 오프로 설정된 펄스에서 85% 진폭으로 초음파처리에 의해 용해시켰다. 용해물을 4℃에서 10분 동안 최대 속도로 원심분리하고, 상청액을 수집하고, 실온에서 1시간 동안 5 mM TCEP로 환원시킨 다음, 시스테인 잔기를 15 mM 아이오도아세트아미드로 알킬화시켰다 (실온, 암실, 30분). 단백질 내용물을 메탄올-클로로포름 침전 및 후속 빙냉 아세톤 세척에 의해 추출하였다. 단백질 펠릿을 8 M 우레아, 50 mM HEPES (pH 8.5) 완충제 중에 재현탁시키고, 단백질 농도를 BCA 검정에 의해 측정하였다. 이어서, 샘플을 50 mM HEPES (pH 8.5)를 사용하여 4 M 우레아로 희석하고, 37℃에서 1시간 동안 엔도프로테이나제 Lys-C로 1/250 효소/단백질 비로 소화시켰다. 이어서, 혼합물을 50 mM HEPES (pH 8.5)를 사용하여 1 M 우레아로 희석하고, 트립신을 1/150 효소/단백질 비로 첨가하였다. 반응물을 37℃에서 밤새 인큐베이션하고, 5% (v/v)의 최종 농도로 포름산을 사용한 산성화에 의해 정지시켰다. 펩티드를 C18 셉팍(SepPak) 고체-상 추출 카트리지를 사용하여 정제하고, 스피드백(SpeedVac) 시스템을 사용하여 완전히 건조시켰다.
펩티드 탠덤 질량 태그 (TMT) 표지를 위해, 샘플당 100 μg의 펩티드를 200 mM HEPES (pH 8.5), 30% 아세토니트릴 (ACN) 및 각각의 특이적 TMT 시약 중 1 μg/μl 농도로 제조하였다. 실온에서 1시간 인큐베이션한 후, 반응물을 0.3% 히드록실아민으로 15분 동안 켄칭하고, 단백질 양에 기초하여 동등하게 혼합하였다. 혼합된 샘플을 C18 셉팍 고체-상 추출 카트리지를 사용하여 탈염시키고, 스피드백에서 완전히 건조시킨 다음, 3.5 μm 엑스브리지 펩티드 BEH C18 칼럼이 장착된 HPLC와 염기성 pH 역상 크로마토그래피를 사용하는 분획화를 위해 5% ACN, 10 mM NH4HCO3 pH 8 중에 재현탁시켰다. 96개의 분획을 수집하고, 12개의 샘플로 통합하고, 셉팍 C18 카트리지를 사용하여 탈염시킨 다음, 진공 원심분리를 통해 건조시켰다. 이어서, 샘플을 LC-MS/MS/MS 분석을 위해 16μL의 5% 포름산 중에 재구성하였다. 6 μL의 각각의 샘플을 오비트랩 퓨전 루모스 트리비드(Orbitrap Fusion Lumos Tribid) 질량 분광계에 커플링된 EASY-nLC 1200 LC 펌프에 탑재된 EASY-스프레이 C18 칼럼 (2 μm 입자 크기, 500 mm 길이 x 75 μm ID)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 분리하였다. 펩티드를 3개의 섹션 (300분 동안 5에서 25% ACN, 120분 동안 25-40% ACN 및 30분 동안 95% ACN)으로 나누어진 450분 구배를 사용하여 300 nL/분의 유량으로 분리하였다. TMT 리포터 이온 방출을 위한 동기 전구체 선택 기반 MS3 (SPS-MS3) 단편화를 위한 HCD 및 MS2 단편화를 위한 CID를 사용하여 데이터 의존성 획득 방법으로 펩티드를 수집하였다. 질량 분광계로부터 수득된 모든 데이터 파일을 하버드 메디칼 스쿨(Harvard Medical School)의 스티브 기기(Steve Gygi) 교수 실험실에 의해 개발된 SEQUEST-기반 소프트웨어를 사용하여 처리하였다. 간략하게, 역순의 모든 단백질 서열뿐만 아니라 공지된 오염물로 구성된 데이터베이스와 연결된 인간 비-중복 유니프롯 단백질 데이터베이스에 대해 질량 스펙트럼을 검색하였다. 모든 SEQUEST 검색에서, 전구체 이온 허용오차는 가변적 변형으로서 메티오닌 산화 (+15.9949 Da) 및 시스테인 카르바미도메틸화 (+57.0215 Da)를 포함하여 25 ppm으로 설정하였다. 리신 잔기 및 펩티드 N-말단 상의 TMT 태그 (+229.1629 Da)를 정적 변형으로서 설정하였다. 선형 판별 분석을 사용하여 펩티드-스펙트럼 매치 (PSM)를 수행하고, 2% 오류 발견율 (FDR)로 조정하였다. 각각에 대한 신호-대-잡음 비를 추출함으로써 TMT 리포터 이온 강도를 정량화하였다. 이어서, 펩티드를 4% 단백질 FDR 표적을 사용하여 단백질 군으로 붕괴시켰다. 생성된 데이터가 도 8에 제시된다.
실시예 235 A375 세포 성장 속도
10% 열-불활성화 FBS가 보충된 DMEM 배지로 배양된 A375 (ATCC, CRL-1619) 세포를 96-웰 디쉬에 3,000개 세포/웰로 플레이팅하였다. 화합물을 DMSO 중에 연속 희석하고, 플레이팅 시 배양 배지에 첨가하였다. 플레이트를 기체-투과성 막 브레더-이지(Breathe-Easy) 밀봉 막 (시그마, Z380059)으로 밀봉하고, 세포를 초기 영상화 전에 8시간 동안 침강되도록 하였다. 온도- 및 습도-제어 인큐베이터 (37℃, 5% CO2)에서 7-일 기간에 걸쳐 6-시간 간격으로 인큐사이트(IncuCyte) (S3, 사르토리우스(Sartorius))에 의해 영상화함으로써 전면생장률을 측정하였다. 인큐사이트 소프트웨어를 사용하여 분석을 수행하였다. 화합물 157을 사용한 A375 세포의 성장 속도가 도 10 및 도 11에 제시된다. NRASQ61K 돌연변이 (ATCC, CRL-1619IG-2)를 갖도록 CRISPR로 조작된 A375 세포를 사용하여 실험을 또한 수행하였다. 이 데이터가 도 21에 제시된다.
실시예 236 HCT-116 세포 전면생장률
10% 열-불활성화 FBS가 보충된 맥코이 5a 변형 배지 (ATCC, 30-2007) 배지로 배양된 HCT-116 (ATCC, CCL-247) 세포를 96-웰 디쉬에 3,000개 세포/웰로 플레이팅하였다. 화합물을 DMSO 중에 연속 희석하고, 플레이팅 시 배양 배지에 첨가하였다. 플레이트를 기체-투과성 막 브레더-이지 밀봉 막 (시그마, Z380059)으로 밀봉하고, 세포를 초기 영상화 전에 8시간 동안 침강되도록 하였다. 온도- 및 습도-제어 인큐베이터 (37℃, 5% CO2)에서 7-일 기간에 걸쳐 6-시간 간격으로 인큐사이트 (S3, 사르토리우스)에 의해 영상화함으로써 전면생장률을 측정하였다. 인큐사이트 소프트웨어를 사용하여 분석을 수행하였다. 이 데이터가 도 13에 제시된다.
실시예 237 HTRF ERK 억제 검정
물질
A375 (BRAF 동형접합 V600E 돌연변이를 보유함)를 ATCC로부터 구입하였다. L-글루타민이 보충된 페놀 레드 무함유 DMEM 배지를 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 구입하였다. 어드밴스드 포스포-ERK (Thr202/Tyr204) HTRF 검정 키트를 시스바이오 (미국 매사추세츠주 베드포드)로부터 구입하였다. 세포 배양 플라스크 및 384-웰 마이크로플레이트를 VWR (미국 펜실베니아주 래드너) 또는 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 입수하였다.
포스포-ERK (T202/Y204) 억제 분석
어드밴스드 포스포-ERK (T202/Y204) HTRF 검정 키트를 사용하여 FRET 신호의 정량화에 기초하여 활성화된 포스포-ERK (T202/Y204) 단백질의 분해를 결정하였다. 시험 화합물을 384-웰 플레이트에 10 μM의 최고 농도로부터 11 포인트, 반 로그 적정으로 이중으로 첨가하였다. A375 세포를 384-웰 플레이트에 각각 웰당 8000개 세포의 세포 밀도로 첨가하였다. 플레이트를 37℃에서 5% CO2 하에 24시간 동안 유지하였다. 시험 화합물의 부재 하에 처리된 세포는 음성 대조군이었다. 모든 시약을 함유하지만 세포는 함유하지 않는 웰로 양성 대조군을 설정하였다. 엔비전™ 다중표지 판독기 (퍼킨엘머, 미국 캘리포니아주 산타 클라라) 상에서 FRET 신호를 획득하였다.
세포 성장 억제 분석
대사-활성 세포의 존재를 신호로 나타내는 셀타이터-글로(CellTiter-Glo)® 2.0 발광 검정 키트를 사용하여 ATP의 정량화에 기초하여 A375 세포 생존율을 결정하였다. 간략하게, 시험 화합물을 384-웰 플레이트에 10 μM의 최고 농도로 14 포인트, 반 로그 적정으로 이중으로 첨가하였다. A375 세포를 384-웰 플레이트에 10% FBS를 함유하는 DMEM 배지 중에 웰당 250개 세포의 세포 밀도로 시딩하였다. 시험 화합물의 부재 하에 처리된 세포는 100% 생존율로 정규화된 음성 대조군이었고, 셀타이터-글로® 2.0의 부재 하에 처리된 세포는 0% 생존율로 정규화된 양성 대조군이었다. A375 세포를 37℃에서 5% CO2 하에 72시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 셀타이터-글로 시약을 세포에 첨가하고, 엔비전™ 다중표지 판독기 (퍼킨엘머, 미국 캘리포니아주 산타 클라라) 상에서 발광을 획득하였다. 생성된 데이터가 표 10에 제시된다.
표 10
표의 모든 데이터는 적어도 n=3 검정 결과의 평균 반응을 나타낸다.
표의 모든 pERK 데이터를 24시간에 수집하였다.
실시예 238 A375 이종이식 종양에서의 화합물 157의 생체내 효능 및 체중 변화.
A375 종양을 보유하는 암컷 BALB/c 누드 마우스에서 효능 연구를 수행하였다. 암컷 BALB/c 누드 마우스에게 종양 발생을 위해 매트리겔이 (1:1 비로) 보충된 PBS 0.2 mL 중 A375 종양 세포 (5x106개)를 우측 측복부에 피하로 접종하였다. 종양 부피를 캘리퍼를 사용하여 2차원으로 매주 2회 측정하고, 부피 (mm3)를 하기 식을 사용하여 계산하였다: V = 0.5 a x b2 (여기서 a 및 b는 각각 종양의 긴 직경 및 짧은 직경 (mm)임). 종양이 246 mm3의 평균 종양 부피에 도달하였을 때 (이식 16일 후), 동물을 6개의 군으로 무작위로 나누고, 각각의 처리군에서 거의 동일한 평균 종양 크기를 생성하도록 계층화하고, 제0일에 처리를 시작하였다.
모든 작용제를 A375 종양을 보유하는 마우스에게 21 또는 35일 동안 경구로 (PO), 매일 (QD; 엔코라페닙), 화합물 157의 경우에는 1일 2회 (BID) 또는 1일 3회 (TID) 투여하였다. 엔코라페닙을 35mg/kg으로 투여하고, 화합물 157을 0.1, 0.3, 1, 3 또는 10 mg/kg으로 1일 2회 또는 2mg/kg으로 1일 3회 투여하였다. 화합물 157을 20% PEG400 + 80% (25% SBECD) 중에 제제화하였다. 체중 및 MTV를 매주 2회 스케줄로 측정하고, 평균 ± SEM으로 보고하였다.
A375 이종이식 종양에서의 화합물 157 효능을 6가지 상이한 농도: 0.1-10mg/kg에서 평가하였다. 화합물 157을 BID (1일 2회) 또는 TID (1일 3회) 경구로 (PO) 투여하였다. 화합물 157의 효능을 엔코라페닙 (35mg/kg으로 1일 1회 (QD) 경구로 투여됨)과 비교하였다. 결과가 도 4에 제시된다. 화합물 157 1mg/kg PO BID, 2mg/kg PO TID 또는 3mg/kg PO BID로의 처리는 비히클-처리된 종양과 비교하여 강력한 종양 성장 억제를 유발하고, 10mg/kg PO BID로의 처리는 강건한 종양 성장 퇴행을 유발하였다. 어떠한 군도 연구 전반에 걸쳐 평균 3.5% 초과의 체중 감소를 나타내지 않았기 때문에 모든 용량은 내약성이 우수하였다. 생성된 데이터가 도 14 및 15에 제시된다.
실시예 239 혈장 및 A375 이종이식 종양에서의 화합물 157의 생체내 약동학적 활성
암컷 누드 마우스에게 종양 발생을 위해 매트리겔이 (1:1 비로) 보충된 PBS 0.2 mL 중 A375 종양 세포 (5x106개)를 우측 측복부에 피하로 접종하였다. 종양 부피를 캘리퍼를 사용하여 2차원으로 매주 2회 측정하고, 부피 (mm3)를 하기 식을 사용하여 계산하였다: V = 0.5 a x b2 (여기서 a 및 b는 각각 종양의 긴 직경 및 짧은 직경 (mm)임). 종양이 313 mm3의 평균 종양 부피에 도달하였을 때, 동물을 3개의 군으로 무작위로 나누고, 0.3, 1, 3 또는 10mg/kg의 화합물 157의 단일 경구 용량을 투여하였다. 화합물 157을 20% PEG400 + 80% (25% SBECD) 중에 제제화하였다. 마우스를 희생시키고, 혈장 및 종양을 단일 용량 1-, 4-, 10-, 24- 및 36-시간 후에 수집하였다. 샘플링된 각각의 시점마다 3개의 종양 및 혈장 샘플을 수집하였다. 정량 분석을 위해 혈장 및 종양 샘플을 LC/MS/MS 시스템 내로 주입하였다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타나 있다. 생성된 데이터가 도 16 및 17에 제시된다.
추가의 샘플을 후처리하였으며, 결과는 하기와 같이 도 18 및 19에 제시된다. 마우스를 희생시키고, 혈장 및 종양을 단일 용량 1-, 4-, 10-, 24- 및 36-시간 후에 수집하였다. 이어서, 종양을 기계적으로 균질화하고, RIPA 완충제 (시그마 알드리치)를 사용하여 단백질을 추출하였다. 단백질 농도를 피어스™ BCA 단백질 검정 키트를 사용하여 정량화하고, 샘플을 환원시킨 다음, 분석을 위해 동일한 단백질 양을 웨스턴 블롯 겔 상에 로딩하였다. 종양을 B-RAF (CST, 14814) 또는 포스포-ERK (CST, 4370) 발현에 대해 분석하였다. 데이터 분석을 위해 이미지 스튜디오 소프트웨어를 사용하여 개별 밴드의 강도를 측정하였다. 총 단백질 농도에 대한 대조군으로, 참조 단백질 GAPDH에 비해 단백질 발현을 정량화하였다. 이어서, 데이터를 비히클 대조군 샘플과 비교하여 화합물 157 처리된 샘플에서의 표적의 양에 대해 정규화하였다. 데이터는 비히클 대조군에 존재하는 표적의 퍼센트로서 나타내어지고, 총 단백질에 대해 정규화된다. 오차 막대는 ± SEM 값을 나타낸다.
실시예 240 HTRF ERK 억제 검정
물질
A375-NRASQ61K 세포 (BRAF 동형접합 V600E 돌연변이 및 NRAS 동형접합 Q61K 돌연변이를 보유함)를 ATCC로부터 구입하였다. L-글루타민이 보충된 페놀 레드 무함유 DMEM 배지를 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 구입하였다. 어드밴스드 포스포-ERK (Thr202/Tyr204) HTRF 검정 키트를 시스바이오 (미국 매사추세츠주 베드포드)로부터 구입하였다. 세포 배양 플라스크 및 384-웰 마이크로플레이트를 VWR (미국 펜실베니아주 래드너) 또는 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 입수하였다.
포스포-ERK (T202/Y204) 분해 분석
어드밴스드 포스포-ERK (T202/Y204) HTRF 검정 키트를 사용하여 FRET 신호의 정량화에 기초하여 활성화된 포스포-ERK (T202/Y204) 단백질의 분해를 결정하였다. 시험 화합물을 384-웰 플레이트에 10 μM의 최고 농도로부터 11 포인트, 반 로그 적정으로 이중으로 첨가하였다. A375-NRASQ61K 세포를 384-웰 플레이트에 웰당 2000개 세포의 세포 밀도로 첨가하였다. 플레이트를 37℃에서 5% CO2 하에 24시간 동안 유지하였다. 시험 화합물의 부재 하에 처리된 세포는 음성 대조군이었다. 모든 시약을 함유하지만 세포는 함유하지 않는 웰로 양성 대조군을 설정하였다. 엔비전™ 다중표지 판독기 (퍼킨엘머, 미국 캘리포니아주 산타 클라라) 상에서 FRET 신호를 획득하였다.
셀타이터-글로 성장 억제 검정을 위한 방법
물질
A375-NRASQ61K 세포 (BRAF 동형접합 V600E 돌연변이 및 NRAS 동형접합 Q61K 돌연변이를 보유함)를 ATCC로부터 구입하였다. DMEM 배지 (페놀 레드 무함유 및 L-글루타민이 보충됨)를 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 구입하였다. 셀타이터-글로® 2.0 검정을 프로메가 (미국 위스콘신주 매디슨)로부터 구입하였다. 세포 배양 플라스크 및 384-웰 마이크로플레이트를 VWR (미국 펜실베니아주 래드너) 또는 코닝 (미국 뉴욕주 코닝)으로부터 입수하였다.
세포 성장 억제 분석
대사-활성 세포의 존재를 신호로 나타내는 셀타이터-글로® 2.0 발광 검정 키트를 사용하여 ATP의 정량화에 기초하여 A375-NRASQ61K 세포 생존율을 결정하였다. 간략하게, 시험 화합물을 384-웰 플레이트에 10 μM의 최고 농도로 14 포인트, 반 로그 적정으로 이중으로 첨가하였다. A375-NRASQ61K 세포를 384-웰 플레이트에 10% FBS를 함유하는 DMEM 배지 중에 웰당 250개 세포의 세포 밀도로 시딩하였다. 시험 화합물의 부재 하에 처리된 세포는 100% 생존율로 정규화된 음성 대조군이었고, 셀타이터-글로® 2.0의 부재 하에 처리된 세포는 0% 생존율로 정규화된 양성 대조군이었다. A375 세포를 37℃에서 5% CO2 하에 96시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 셀타이터-글로 시약을 세포에 첨가하고, 엔비전™ 다중표지 판독기 (퍼킨엘머, 미국 캘리포니아주 산타 클라라) 상에서 발광을 획득하였다.
표 9
표의 모든 데이터는 적어도 n=3 검정 결과의 평균 반응을 나타낸다.
표의 모든 pERK 데이터를 24시간에 수집하였다.
실시예 241 NRASQ61K 종양 부피 검정
실시예 240에 기재된 A375 NRASQ61K 종양 V600E 이중 돌연변이 세포를 37℃에서 공기 중 5% CO2의 분위기 하에 시험관내에서 10% 태아 소 혈청 및 1% 페니실린-스트렙토마이신이 보충된 DMEM 배지 중에 유지하였다. 종양 세포를 매주 2회 상용적으로 계대배양하였다. 지수 성장기에서 성장하는 세포를 수거하고, 종양 접종을 위해 계수하였다.
A375 NRASQ61K 종양을 보유하는 암컷 BALB/c 누드 마우스에서 효능 연구를 수행하였다. 암컷 누드 마우스에게 종양 발생을 위해 매트리겔이 (1:1 비로) 보충된 PBS 0.2 mL 중 A375 NRASQ61K 종양 세포 (10x106개)를 우측 측복부에 피하로 접종하였다. 종양 부피를 캘리퍼를 사용하여 2차원으로 매주 2회 측정하고, 부피 (mm3)를 하기 식을 사용하여 계산하였다: V = 0.5 a x b2 (여기서 a 및 b는 각각 종양의 긴 직경 및 짧은 직경 (mm)임). 종양이 139 mm3의 평균 종양 부피에 도달하였을 때 (이식 40일 후), 동물을 8개의 군으로 무작위로 나누고, 각각의 처리군에서 거의 동일한 평균 종양 크기를 생성하도록 계층화하고, 제1일에 처리를 시작하였다.
모든 작용제를 A375 NRASQ61K 종양을 보유하는 마우스에게 경구로 (PO), 엔코라페닙의 경우에는 35mg/kg으로 매일 (QD) 또는 트라메티닙의 경우에는 0.1 mg/kg으로 1일 2회 (BID) 및 화합물 157의 경우에는 단일 작용제로서 3, 10 또는 30 mg/kg 또는 트라메티닙과 조합하여 1, 3, 10, 30 mg/kg으로 투여하였다. 용량을 21일 동안 투여하였다. 화합물 157을 20% PEG400 + 80% (25% SBECD) 중에 제제화하였다. 체중 및 MTV를 매주 2회 스케줄로 측정하고, 평균 ± SEM으로 보고하였다. 생성된 데이터가 도 22에 제시된다.
실시예 242 H1666 세포 전면생장률
5% 열-불활성화 FBS가 보충된 RPMI-1640 배지로 배양된 H1666 (ATCC, CRL-5885) 세포를 96-웰 디쉬에 3,000개 세포/웰로 플레이팅하였다. 화합물을 DMSO 중에 연속 희석하고, 플레이팅 시 배양 배지에 첨가하였다. 플레이트를 기체-투과성 막 브레더-이지 밀봉 막 (시그마, Z380059)으로 밀봉하고, 세포를 초기 영상화 전에 8시간 동안 침강되도록 하였다. 온도- 및 습도-제어 인큐베이터 (37℃, 5% CO2)에서 7-일 기간에 걸쳐 6-시간 간격으로 인큐사이트 (S3, 사르토리우스)에 의해 영상화함으로써 전면생장률을 측정하였다. 인큐사이트 소프트웨어를 사용하여 분석을 수행하였다. 생성된 데이터가 도 25에 제시된다.
본 명세서에 인용된 모든 공개 문헌 및 특허 출원은 각각의 개별 공개 문헌 또는 특허 출원이 구체적으로 및 개별적으로 참조로 포함되는 것으로 나타내어진 것처럼 본원에 참조로 포함된다.
상기 발명은 이해의 명확성의 목적으로 예시 및 실시예에 의해 일부 상세하게 기재되었지만, 본 발명의 교시에 비추어 첨부된 청구범위에 정의된 바와 같은 본 발명의 취지 또는 범주로부터 벗어나지 않으면서 그에 대해 특정 변화 및 변형이 이루어질 수 있다는 것이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 자명할 것이다. 추가적으로, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 단지 상용 실험을 사용하여 본원에 기재된 구체적 실시양태 및 방법에 대한 많은 등가물을 인식하거나 또는 확인할 수 있을 것이다. 이러한 등가물은 본 출원의 범주에 포괄되는 것으로 의도된다.
Claims (248)
- 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV, 화학식 V 또는 화학식 VI의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:
여기서
A1은 -NR2- 및 -CHR2'-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬 및 시클로알킬로부터 선택되고;
R2는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 헤테로시클로알킬을 형성하고;
R2'는 수소, 알킬, 시클로알킬 및 할로알킬로부터 선택되거나;
또는 R1 및 R2'는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 1 또는 2개의 R3으로 임의로 치환된 시클로알킬을 형성하고;
각각의 R3은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 시클로알킬 및 알콕시로부터 선택되고;
R4는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
R5는 수소, 알킬, 시아노 및 할로겐으로부터 선택되고;
A2는 -O-, -NH- 및 -(C=O)-로부터 선택되고;
A22는 -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
A24는 결합, -CH2-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
W1은 -N- 및 -CH-로부터 선택되고;
W2는 -N- 및 -CR26-으로부터 선택되고;
R6은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 디알킬아미노, 알콕시, 알킬 및 알콕시알킬로부터 선택되고;
R26은 수소, 할로겐, 히드록시, 아미노, 알콕시 및 알킬로부터 선택되고;
A3은 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 및 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-로부터 선택되고;
A23은 결합, -O- 및 -CH2-로부터 선택되고;
A는 결합, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
A30은 결합, -CH2-, 피리미디닐, 피리디닐, 피라졸릴 및 3-아자비시클로[3.1.0]헥실로부터 선택되고;
B는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
B2는 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고; 여기서 B2는 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
B3은 페닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 및 8-아자스피로[4.5]데실로부터 선택되고;
n은 0 또는 1이고;
A4는 결합, -CH2-, -(SO2)-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH- 및 -O-로부터 선택되고;
A14는 결합, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH2OH)-, -NH-, -O-, 시클로알킬 및 알킬아미노로부터 선택되고;
C는 아제파닐, 아제티디닐, 시클로알킬, 피페라지닐 및 피페리디닐로부터 선택되고; 여기서 C는 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환되고;
D는로부터 선택되고;
R7은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R8은 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R9는 수소, 알킬, 시아노, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R17은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R18은 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
R19는 수소, 알킬, 시아노, 히드록시, 시클로알킬, 할로겐 및 알콕시로부터 선택되고;
A5는 -CH- 또는 -N-이고;
A15는 결합, -O- 및 -NH-로부터 선택되고;
A6은 -CH- 또는 -N-이고;
링커는 2가 화학적 기이다. - 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, A4가 결합인 화합물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, A4가 -NH-인 화합물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, A4가 -O-인 화합물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, A5가 -CH-인 화합물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, A5가 -N-인 화합물.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, R7이 수소인 화합물.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, R7이 알킬인 화합물.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, R7이 메틸인 화합물.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, R8이 수소인 화합물.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, R8이 알킬인 화합물.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, R8이 할로겐인 화합물.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, R9가 수소인 화합물.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, R9가 알킬인 화합물.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, R9가 할로겐인 화합물.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, R9가 플루오린인 화합물.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, B가인 화합물.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, B가인 화합물.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, B가 할로겐, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 페닐, 피페리디닐 또는 피페라지닐인 화합물.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, B가 페닐, 피페리디닐 또는 피페라지닐인 화합물.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, B가 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 또는 8-아자스피로[4.5]데실인 화합물.
- 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제1항 또는 제23항에 있어서, A6이 -CH-인 화합물.
- 제1항 또는 제23항에 있어서, A6이 -N-인 화합물.
- 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, A14가 결합인 화합물.
- 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, A14가 -CH2-, -CH2-CH2- 또는 -CH(CH2OH)-인 화합물.
- 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, A14가 -NH-인 화합물.
- 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, A14가 -O-인 화합물.
- 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, A14가 시클로알킬인 화합물.
- 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, A14가 알킬아미노인 화합물.
- 제23항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, R17이 수소인 화합물.
- 제23항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, R17이 알킬인 화합물.
- 제23항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, R17이 할로겐인 화합물.
- 제23항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, R17이 플루오린인 화합물.
- 제23항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, R18이 수소인 화합물.
- 제23항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, R18이 알킬인 화합물.
- 제23항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, R18이 할로겐인 화합물.
- 제23항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, R18이 플루오린인 화합물.
- 제23항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, R19가 수소인 화합물.
- 제23항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, R19가 알킬인 화합물.
- 제23항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, R19가 할로겐인 화합물.
- 제23항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, R19가 플루오린인 화합물.
- 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, A2가 -O-인 화합물.
- 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, A2가 -NH-인 화합물.
- 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, A2가 -(C=O)-인 화합물.
- 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, A3이 결합인 화합물.
- 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, A3이 -CH2-인 화합물.
- 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, A3이 -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-CH2-CH2-, -CH2-CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 또는 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-인 화합물.
- 제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, n이 0인 화합물.
- 제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, n이 1인 화합물.
- 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, R6이 수소인 화합물.
- 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, R6이 할로겐인 화합물.
- 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, R6이 아미노 또는 디알킬아미노인 화합물.
- 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, R6이 히드록시 또는 알콕시인 화합물.
- 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제56항에 있어서, D가인 화합물.
- 제56항에 있어서, D가인 화합물.
- 제56항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, W1이 -N-인 화합물.
- 제56항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, W1이 -CH-인 화합물.
- 제56항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, W2가 -N-인 화합물.
- 제56항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, W2가 -CR26-인 화합물.
- 제56항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, R26이 수소인 화합물.
- 제56항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, R26이 할로겐인 화합물.
- 제56항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, A23이 결합인 화합물.
- 제56항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, A23이 -O-인 화합물.
- 제56항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, A23이 -CH2-인 화합물.
- 제56항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, A30이 결합인 화합물.
- 제56항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, A30이 -CH2-인 화합물.
- 제56항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, A30이 피리미디닐 또는 피리디닐인 화합물.
- 제56항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, A30이 피라졸릴인 화합물.
- 제56항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, A30이 3-아자비시클로[3.1.0]헥실인 화합물.
- 제56항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, B3이 페닐인 화합물.
- 제56항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, B3이 피페리디닐 또는 피페라지닐인 화합물.
- 제56항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, B3이 1,4-디아자시클로헵틸, 1-옥사-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사-9-아자스피로[5.5]운데실, 2,8-디아자스피로[4.5]데실, 2-아자스피로[4.5]데실, 3-아자비시클로[3.1.0]헥실, 3-아자스피로[5.5]운데실, 7-아자스피로[3.5]노닐, 1,1-디옥소-1람다6-티아-8-아자스피로[4.5]데실, 1-옥사스피로[4.5]데실, 1-메틸-1,8-디아자스피로[4.5]데실, 1,8-디아자스피로[4.5]데실 또는 8-아자스피로[4.5]데실인 화합물.
- 제56항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, A22가 -O-인 화합물.
- 제56항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, A22가 -NH-인 화합물.
- 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제78항에 있어서, A5가 -CH-인 화합물.
- 제78항에 있어서, A5가 -N-인 화합물.
- 제78항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, R7이 수소인 화합물.
- 제78항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, R7이 알킬인 화합물.
- 제78항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, R7이 메틸인 화합물.
- 제78항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, R8이 수소인 화합물.
- 제78항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, R8이 알킬인 화합물.
- 제78항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, R8이 할로겐인 화합물.
- 제78항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, R9가 수소인 화합물.
- 제78항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, R9가 알킬인 화합물.
- 제78항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, R9가 할로겐인 화합물.
- 제78항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, R9가 플루오린인 화합물.
- 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제91항에 있어서, A6이 -CH-인 화합물.
- 제91항에 있어서, A6이 -N-인 화합물.
- 제91항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, R17이 수소인 화합물.
- 제91항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, R17이 알킬인 화합물.
- 제91항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, R17이 할로겐인 화합물.
- 제91항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, R17이 플루오린인 화합물.
- 제91항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, R18이 수소인 화합물.
- 제91항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, R18이 알킬인 화합물.
- 제91항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, R18이 할로겐인 화합물.
- 제91항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, R18이 플루오린인 화합물.
- 제91항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, R19가 수소인 화합물.
- 제91항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, R19가 알킬인 화합물.
- 제91항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, R19가 할로겐인 화합물.
- 제91항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, R19가 플루오린인 화합물.
- 제78항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서, A2가 -O-인 화합물.
- 제78항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서, A2가 -NH-인 화합물.
- 제78항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서, A2가 -(C=O)-인 화합물.
- 제78항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, n이 0인 화합물.
- 제78항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, n이 1인 화합물.
- 제78항 내지 제110항 중 어느 한 항에 있어서, R6이 수소인 화합물.
- 제78항 내지 제110항 중 어느 한 항에 있어서, R6이 할로겐인 화합물.
- 제78항 내지 제110항 중 어느 한 항에 있어서, R6이 아미노 또는 디알킬아미노인 화합물.
- 제78항 내지 제110항 중 어느 한 항에 있어서, R6이 히드록시 또는 알콕시인 화합물.
- 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제115항에 있어서, D가인 화합물.
- 제115항에 있어서, D가인 화합물.
- 제115항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, W1이 -N-인 화합물.
- 제115항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, W1이 -CH-인 화합물.
- 제115항 내지 제119항 중 어느 한 항에 있어서, W2가 -N-인 화합물.
- 제115항 내지 제119항 중 어느 한 항에 있어서, W2가 -CR26-인 화합물.
- 제115항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서, R26이 수소인 화합물.
- 제115항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서, R26이 할로겐인 화합물.
- 제115항 내지 제123항 중 어느 한 항에 있어서, A22가 -O-인 화합물.
- 제115항 내지 제123항 중 어느 한 항에 있어서, A22가 -NH-인 화합물.
- 제78항 내지 제125항 중 어느 한 항에 있어서, 링커가 하기로부터 선택된 것인 화합물:
여기서
X1 및 X2는 각각의 경우에 독립적으로 결합, 헤테로사이클, NR2, C(R2)2, O, C(O) 및 S로부터 선택되고;
R20, R21, R22, R23 및 R24는 각각의 경우에 독립적으로 결합, 알킬, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -SO2-, -S(O)-, -C(S)-, -C(O)NR2-, -NR2C(O)-, -O-, -S-, -NR2-, -C(R40R40)-, -P(O)(OR36)O-, -P(O)(OR36)-, 비사이클, 알켄, 알킨, 할로알킬, 알콕시, 아릴, 헤테로사이클, 지방족, 헤테로지방족, 헤테로아릴, 락트산, 글리콜산 및 카르보사이클로부터 선택된 2가 모이어티로 이루어진 군으로부터 선택되고; 이들 각각은 R40으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의로 치환되고;
R36은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬, 알켄, 알킨, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클, 지방족 및 헤테로지방족으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R40은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알켄, 알킨, 플루오로, 브로모, 클로로, 히드록실, 알콕시, 아지드, 아미노, 시아노, -NH(알킬을 포함한 지방족), -N(알킬을 포함한 지방족)2, -NHSO2(알킬을 포함한 지방족), -N(알킬을 포함한 지방족)SO2알킬, -NHSO2(아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클), -N(알킬)SO2(아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클), -NHSO2알케닐, -N(알킬)SO2알케닐, -NHSO2알키닐, -N(알킬)SO2알키닐, 할로알킬, 지방족, 헤테로지방족, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클 및 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다. - 제126항에 있어서, 링커가 하기 화학식을 갖는 것인 화합물.
- 제126항 또는 제127항에 있어서, X1이 결합인 화합물.
- 제126항 또는 제127항에 있어서, X1이 헤테로사이클인 화합물.
- 제126항 또는 제127항에 있어서, X1이 NR2인 화합물.
- 제126항 또는 제127항에 있어서, X1이 C(O)인 화합물.
- 제126항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, X2가 결합인 화합물.
- 제126항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, X2가 헤테로사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, X2가 NR2인 화합물.
- 제126항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, X2가 C(O)인 화합물.
- 제126항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R20이 결합인 화합물.
- 제126항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R20이 CH2인 화합물.
- 제126항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R20이 헤테로사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R20이 아릴인 화합물.
- 제126항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R20이 페닐인 화합물.
- 제126항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R20이 비사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제141항 중 어느 한 항에 있어서, R21이 결합인 화합물.
- 제126항 내지 제141항 중 어느 한 항에 있어서, R21이 CH2인 화합물.
- 제126항 내지 제141항 중 어느 한 항에 있어서, R21이 헤테로사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제141항 중 어느 한 항에 있어서, R21이 아릴인 화합물.
- 제126항 내지 제141항 중 어느 한 항에 있어서, R21이 인 화합물.
- 제126항 내지 제141항 중 어느 한 항에 있어서, R21이 비사이클인 화합물.
- 제126항에 있어서, 링커가 하기 화학식을 갖는 것인 화합물.
- 제126항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, R22가 결합인 화합물.
- 제126항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, R22가 CH2인 화합물.
- 제126항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, R22가 헤테로사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, R22가 아릴인 화합물.
- 제126항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, R22가 페닐인 화합물.
- 제126항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, R22가 비사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서, R23이 결합인 화합물.
- 제126항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서, R23이 CH2인 화합물.
- 제126항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서, R23이 헤테로사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서, R23이 아릴인 화합물.
- 제126항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서, R23이 페닐인 화합물.
- 제126항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서, R23이 비사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, R24가 결합인 화합물.
- 제126항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, R24가 CH2인 화합물.
- 제126항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, R24가 헤테로사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, R24가 아릴인 화합물.
- 제126항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, R24가 페닐인 화합물.
- 제126항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, R24가 비사이클인 화합물.
- 제126항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, R24가 C(O)인 화합물.
- 제1항 내지 제167항 중 어느 한 항에 있어서, A1이 -NR2-인 화합물.
- 제1항 내지 제167항 중 어느 한 항에 있어서, A1이 -CHR2'-인 화합물.
- 제1항 내지 제167항 중 어느 한 항에 있어서, A1이 -NH-인 화합물.
- 제1항 내지 제167항 중 어느 한 항에 있어서, A1이 -NCH3-인 화합물.
- 제1항 내지 제167항 중 어느 한 항에 있어서, A1이 -CH2-인 화합물.
- 제1항 내지 제172항 중 어느 한 항에 있어서, R1이 수소인 화합물.
- 제1항 내지 제172항 중 어느 한 항에 있어서, R1이 알킬인 화합물.
- 제1항 내지 제172항 중 어느 한 항에 있어서, R1이 메틸인 화합물.
- 제1항 내지 제172항 중 어느 한 항에 있어서, R1이 에틸인 화합물.
- 제1항 내지 제176항 중 어느 한 항에 있어서, R4가 수소인 화합물.
- 제1항 내지 제176항 중 어느 한 항에 있어서, R4가 시아노인 화합물.
- 제1항 내지 제176항 중 어느 한 항에 있어서, R4가 할로겐인 화합물.
- 제1항 내지 제179항 중 어느 한 항에 있어서, R5가 수소인 화합물.
- 제1항 내지 제179항 중 어느 한 항에 있어서, R5가 할로겐인 화합물.
- 제1항 내지 제179항 중 어느 한 항에 있어서, R5가 플루오린인 화합물.
- 제1항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, C가인 화합물.
- 제1항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, C가 아제파닐인 화합물.
- 제1항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, C가 아제티디닐인 화합물.
- 제1항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, C가 피페라지닐인 화합물.
- 제1항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, C가 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 시클로알킬인 화합물.
- 제1항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, C가 히드록시, 알킬 및 알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의로 치환된 피페리디닐인 화합물.
- 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제189항에 있어서, 하기 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
- 제1항 내지 제199항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
- 돌연변이 BRAF 매개된 장애의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 제1항 내지 제199항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제200항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 돌연변이 BRAF 매개된 장애를 치료하는 방법.
- 제201항에 있어서, 환자가 인간인 방법.
- 제201항 또는 제202항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 암인 방법.
- 제203항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 흑색종인 방법.
- 제203항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 폐암인 방법.
- 제203항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 비소세포 폐암인 방법.
- 제203항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 결장직장암인 방법.
- 제203항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 미소위성체 안정한 결장직장암인 방법.
- 제203항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 갑상선암인 방법.
- 제203항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 난소암인 방법.
- 제201항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 담관암종, 에르드하임-체스터병, 랑게르한스 조직구증, 신경절교종, 신경교종, 교모세포종, 모발상 세포 백혈병, 다발성 골수종, 비소세포 폐암, 난소암, 필로믹소이드 성상세포종, 역형성 다형성 황색성상세포종, 성상세포종, 유두상 갑상선암, 역형성 갑상선암, 췌장암, 흉부 투명 세포 육종, 타액선암 또는 미소위성체 안정한 결장직장암인 방법.
- 제201항 내지 제211항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 또한 추가의 활성제를 받는 것인 방법.
- 제212항에 있어서, 추가의 활성제가 MEK 억제제인 방법.
- 제213항에 있어서, MEK 억제제가 트라메티닙인 방법.
- 제212항에 있어서, 추가의 활성제가 면역 체크포인트 억제제인 방법.
- 제215항에 있어서, 면역 체크포인트 억제제가 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 세미플리맙, 이필리무맙, 렐라틀리맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 두르발루맙으로부터 선택된 것인 방법.
- 제212항에 있어서, 추가의 활성제가 세툭시맙 또는 파니투무맙인 방법.
- 제1항 내지 제200항 중 어느 한 항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애의 치유적 치료를 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물.
- 제218항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 암인 화합물.
- 제219항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 흑색종인 화합물.
- 제219항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 폐암인 화합물.
- 제219항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 비소세포 폐암인 화합물.
- 제219항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 결장직장암인 화합물.
- 제219항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 미소위성체 안정한 결장직장암인 화합물.
- 제219항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 갑상선암인 화합물.
- 제219항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 난소암인 화합물.
- 제218항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 담관암종, 에르드하임-체스터병, 랑게르한스 조직구증, 신경절교종, 신경교종, 교모세포종, 모발상 세포 백혈병, 다발성 골수종, 비소세포 폐암, 난소암, 필로믹소이드 성상세포종, 역형성 다형성 황색성상세포종, 성상세포종, 유두상 갑상선암, 역형성 갑상선암, 췌장암, 흉부 투명 세포 육종, 타액선암 또는 미소위성체 안정한 결장직장암인 화합물.
- 제1항 내지 제200항 중 어느 한 항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애의 치료에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물.
- 제228항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 암인 화합물.
- 제229항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 흑색종인 화합물.
- 제229항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 폐암인 화합물.
- 제229항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 비소세포 폐암인 화합물.
- 제229항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 결장직장암인 화합물.
- 제229항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 미소위성체 안정한 결장직장암인 화합물.
- 제229항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 갑상선암인 화합물.
- 제229항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 난소암인 화합물.
- 제228항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 담관암종, 에르드하임-체스터병, 랑게르한스 조직구증, 신경절교종, 신경교종, 교모세포종, 모발상 세포 백혈병, 다발성 골수종, 비소세포 폐암, 난소암, 필로믹소이드 성상세포종, 역형성 다형성 황색성상세포종, 성상세포종, 유두상 갑상선암, 역형성 갑상선암, 췌장암, 흉부 투명 세포 육종, 타액선암 또는 미소위성체 안정한 결장직장암인 화합물.
- 돌연변이 BRAF 매개된 장애의 치료를 위한 의약의 제조에서의 제1항 내지 제199항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제200항의 제약 조성물의 용도.
- 제238항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 장애가 암인 용도.
- 제239항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 흑색종인 용도.
- 제239항에 있어서, 돌연변이 BRAF 매개된 암이 폐암인 용도.
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- 제1항 내지 제199항 중 어느 한 항에 있어서, 치료 활성 물질로서 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
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