KR20240016938A - 포스포이노시티드 3 키나아제 베타 억제제 및 그 조성물 및 방법 - Google Patents

포스포이노시티드 3 키나아제 베타 억제제 및 그 조성물 및 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20240016938A
KR20240016938A KR1020237029259A KR20237029259A KR20240016938A KR 20240016938 A KR20240016938 A KR 20240016938A KR 1020237029259 A KR1020237029259 A KR 1020237029259A KR 20237029259 A KR20237029259 A KR 20237029259A KR 20240016938 A KR20240016938 A KR 20240016938A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
alkyl
compound
morpholino
group
substituted
Prior art date
Application number
KR1020237029259A
Other languages
English (en)
Inventor
진 자오
치 왕
시앙 와이. 유
후이민 쳉
페이유 장
쯔슝 린
레이 팽
송링 마
Original Assignee
지오드 테라퓨틱스 인크.
크리스탈파이, 인크.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 지오드 테라퓨틱스 인크., 크리스탈파이, 인크. filed Critical 지오드 테라퓨틱스 인크.
Publication of KR20240016938A publication Critical patent/KR20240016938A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/22—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

본 발명은 고체 종양과 같은 다양한 질병 및 상태의 치료에서, 신규한 포스포이노시티드 3 키나아제 베타-선택적 억제제 및 이의 약제학적 조성물뿐만 아니라 이의 제조 방법 및 용도를 제공한다.

Description

포스포이노시티드 3 키나아제 베타 억제제 및 그 조성물 및 방법
우선권 주장 및 관련 특허 출원
본 출원은 2021년 2월 1일에 출원된 미국 가출원 제63/144,287에 대한 우선권의 이익을 주장하며, 그 전문이 참조로 본문에 포함된다.
본 발명은 일반적으로 약제 및 치료 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 다양한 유형의 종양과 같은 다양한 질병 및 상태의 치료에서, 신규한 포스포이노시티드 3 키나아제 베타 억제제 및 이의 약제학적 조성물뿐만 아니라 이들의 제조 방법 및 용도를 제공한다.
포스포이노시티드 3-키나아제(PI3K)는 세포 생존, 증식, 분화, 운동성 및 대사를 포함하는 많은 세포 과정에서 중요한 조절 역할을 하는 지질 키나아제 계열이다(문헌 [Thorpe LM et al., Nat Rev Cancer, 2015,1,7-14]). PI3K에는 특성 및 기질 특이성에 따라 클래스 I, 클래스 II 및 클래스 III의 세 가지 클래스가 있다. 클래스 I PI3K는 수용체 티로신 키나아제(RTK), G 단백질 결합 수용체(GPCR) 및 종양 단백질에 의해 활성화되는 클래스 IA 효소와 GPCR에 의해 독점적으로 조절되는 클래스 IB 효소로 더 나뉜다. 클래스 IA PI3K는 p110 촉매 서브유닛과 p85 조절 서브유닛의 이종이량체이다. 3개의 고도로 상동적인 p110 촉매 이소형 p110α, p110β, 및 p110δ는, 각각 유전자 PIK3CA, PIK3CB, 및 PIK3CD에 의해 코딩되며, 5개의 p85 조절 이소형 p85α(및 PIK3R1로 코딩된 그 스플라이싱 변이체 p55α 및 p50α), p85β(PIK3R2), p55γ(PIK3R3) 중 어느 하나와 연관되어 있다. 클래스 IB PI3K는 조절 이소형(isoform) p101(PIK3R5) 또는 p87(PIK3R6에 의해 코딩되는 p84 또는 p87PIKAP)에 결합된 p110γ 촉매 서브유닛(PIK3CG에 의해 코딩됨)의 이종이량체(heterodimer)이다(문헌 [Engelman JA et al. Nat Rev Genet, 2006,7, 606-19]). p110α 및 p110β는 어디에서나 발현되는 반면, p110δ 및 p110γ 발현은 대부분 백혈구로 제한된다(문헌 [OKKenhaug K et al., Nat Rev Immunol, 2003, 3, 317-30]).
리간드 자극 및 RTK 또는 GPCR의 후속 활성화에 대한 응답으로, p110 촉매 서브유닛은 p85 조절 서브유닛의 상호작용을 통해 활성화되고 포스파티딜이노시톨 4,5-비포스페이트(PIP2)를 기질로 사용하여 포스파티딜이노시톨 3,4,5-트리포스페이트(PIP3)를 생성하며, 이는 차례로 AKT-의존적 및 AKT-독립적 하류 신호 전달 경로를 활성화한다. 포스파타제 및 텐신 상동체(phosphatase and tensin homolog(PTEN)) 지질 포스파타제는 PtdIns(3,4,5)P3에서 3'-포스페이트를 제거하여 PI3K의 활성화에 대응한다(문헌 [Engelman JA et al. Nat Rev Genet, 2006, 7,606-19]).
PI3K 경로의 과활성화는 인간 암에서 가장 흔한 현상 중 하나이다. 비정상적인 PI3K 신호 전달 활성화는, 주로 유전적 또는 후생적 변경, RTK의 활성화 또는 PI3K의 이소형에서의 변경을 통한 PTEN의 체세포 손실로 인해 발생한다. 이러한 변경은 다양한 종양 유형에서 빈번하게 감지되며 경로의 치료적 타겟화 기회를 제공한다(문헌 [Parsons R et al., Semin Cell Dev Biol, 2004,15,171-6; Janku F et al., Nat Rev Clin Oncol, 2018, 15, 273-291]). 유효한 PI3K 억제제 개발에 엄청난 노력을 기울여 왔다. 그러나, 비-이소형-선택적 pan-PI3K 억제제는 기능에 대해 p110δ 및 p110γ에 크게 의존하는 면역계에 대한 잠재적인 심각한 독성으로 인해 흥미로운 결과를 얻지 못했다. 최근 임상전 연구는 상이한 PI3K 이소형이 세포 신호 전달 및 암에서 다양한 역할을 한다는 것을 나타냈고(문헌 [Jia S et al., Curr Opin Cell Biol, 2009, 2, 199-208]), 개별 이소형을 타겟화 하는 억제제가 더 큰 치료적 효능을 달성할 수 있음을 시사한다.
비정상적인 PI3K 신호 전달로 이어지는 가장 일반적인 메커니즘인 PTEN 결핍은, 전립선암, 결장암, 유방암, 갑상선암, 자궁내막암, 신장암, 흑색종암 및 백혈병과 같은 다수의 인간 악성 종양에서 빈번하게 발생한다(문헌 [Michele Milella et al., Front Oncol, 2015, 5, 24]). p110β 이소형은 약리학적 제제 및 유전 모델의 사용을 통해 PTEN-결핍 종양에서 지배적인 역할을 한다. p110β 절제는 PTEN 결핍에 의한 마우스 전립선 종양 모델에서 수반되는 AKT 활성화 감소와 함께 전방 전립선에서 종양 형성을 충분히 억제한다(문헌 [Jia S et al., Nature, 2008, 454, 776-9]). 세포 배양-기반 연구는 이 발견을 다른 유형의 인간 암 세포(전립선, 뇌 및 유방)까지 확인하고 확장했다. p110β의 녹다운은 AKT의 하류 활성화, 세포 형질전환, 및 이들 PTEN-결핍 세포 및 종양 이종이식의 성장을 억제한다(문헌 [Wee S et al., Proc Natl Acad Sci U S A, 2008, 105, 13057-13062]). 마우스 모델에서, PTEN 손실로 인한 골수성 종양은 p110β-Rac-양성-피드백 루프를 통해 p110β에 의존한다. 이 루프의 중단(disruption)은 PTEN-결핍 백혈병에 대한 새롭고 유효한 치료 전략을 제공할 수 있다(문헌 [(Yuzugullu H et al. Nat Commun, 2015, 6, 8501]).
PIK3CB 유전자 증폭 또는 돌연변이는 유방암, 폐암, 전립선암, 식도암 및 교모세포종을 포함하는 다수의 인간 암 유형에서 발생함에 주목할 가치가 있다. 기능-획득 돌연변이를 발현하는 종양 세포, 예를 들어 p110βE1051K는, p110β 억제에 민감하다(문헌 [Whale AD et al. Signal Transduct Target Ther, 2017, 2, 17063]).
종양 형성 외에도, p110β가 혈전증, 남성 생식력 및 취약 X-증후군을 포함하는 다양한 기타 질병 및 생리학적 과정에서 필수적인 역할을 한다는 증거가 있다.상당한 출혈 증가를 일으키지 않으면서 혈소판의 전단(shear) 활성화, 안정한 혈소판 응집 및 혈전 형성을 억제하는 능력에 기초한 항혈전 타겟으로서 p110β가 제안되어 왔다(문헌 [Jackson SP et al. J Thromb Haemost, 2012, 10, 2123-2126]). p110β 불활성화는 정자 형성 줄기 세포 풀에 영향을 주지 않으면서 정자 발달의 특정 차단으로 이어져, 남성 피임약의 잠재적인 약물 타겟이 된다(문헌 [Julie Guillermet-Guibert J et al., PLoS Genet, 2015,11, e1005304]). 취약 X 증후군은 취약 X 정신 지체 단백질의 기능 상실로 인해 발생한다. 임상전 결과는, 취약 X 증후군의 마우스 모델에서 p110β가 전두엽 피질(PFC)-의존적 인지 결함에 중요한 역할을 한다는 것을 나타냈다(문헌 [Gross C et al. Cell Rep. 2015, 11, 681-688]). 종합하면, 이러한 발견은 PTEN 결핍 종양과 PI3Kβ에 크게 의존하는 질병에 대한 매우 유효한 치료 방식으로서 PI3Kβ-특이적 타겟화 치료의 가능성을 시사함과 동시에, pan-PI3K 억제제의 심각한 독성 영향을 완화한다.
PI3Kβ-선택적 억제제는 이제 임상에서 등장하고 있지만, 앞으로 엄청난 도전에 직면해 있다. 예를 들어, PI3Kβ-선택적 억제제 SAR260301(WO2011001114A1)에 대한 연구는 지속되지 않는 약역학 효과로 인해 림프종 환자에 대한 I상 임상 시험에서 영구적으로 종료되었다. AZD6482(WO2009093972A1)의 한 피험자는 투입 부위의 가려움증 및 발진으로 인해 혈전증 환자에 대한 1상 임상 시험에서 중단되었다.
따라서, 감소된 부작용으로 향상된 임상 효과를 제공하는, PTEN-결핍 암 및 PI3Kβ 의존성 질병에 대한 신규한 PI3Kβ 억제제 및 치료 방법이 시급히 필요하다.
본 발명은, 예를 들어 유방암, 결장암, 자궁내막암, 신장암, 폐암, 흑색종, 전립선암, 갑상선암 및 백혈병의 암을 포함하는 다양한 질병을 치료하는 데 유용한 신규한 선택적 PI3Kβ 억제제를 제공한다.
일 국면에서, 본 발명은 일반적으로 하기 구조식 (I)을 갖는 화합물에 관한 것이고:
여기서
A는 탄소를 나타내고 B는 산소를 나타내거나, 또는 A 및 B는 각각 질소를 나타내고;
W는 -CHR-Q- 또는 -Q-CHR-을 나타내고; 여기서 Q는 결합, O, S, CH2 또는 NR'을 나타내고; R 및 R'은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되고;
Rw는 Ar 또는 치환 또는 비치환된 인돌린기를 나타내고, 여기서 Ar은 치환 또는 비치환된 6원 방향족 또는 헤테로-방향족 고리를 포함하는 기이고;
R2는 C1-3알킬, CN, CH2OH, CH2F 또는 CONH2를 나타내고;
R1 은 H, NH2, OH, CN, CF3, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, C1-4알킬, O-C1-4알킬, Het, Ar, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p , P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; 단, A가 탄소이고, B가 산소이고 Rw가 Ar일 때, R1 은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; A 및 B가 질소이고, Rw는 Ar일 때, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe, C(=O)-NR1qR1r을 나타내고, 여기서 R1q 및 R1r은 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하고;
여기서 R1a, R1b, R1c, R1d, R1e, R1h, R1i, R1j, R1k, R1l, R1m, R1n, R1o, R1p는 H, C1-4알킬, C3-8사이클로알킬, C3-8헤테로사이클로알킬, 또는, 하이드록실, OMe, CN, 플루오로, NR3aR3b, C3-8사이클로알킬, C3-8 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4알킬에서 각각 독립적으로 선택되고; R1a 및 R1b, R1d 및 R1e, R1n 및 R1o는 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성해도 되고;
C1-4알킬은 비치환되거나 또는 OH, F, NR1dR1e로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R3a 및 R3b는 H, 및 C1-4알킬로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되고;
Het는 O, S, S(=O)p 및 N에서 각각 독립적으로 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 3원 내지 8원 포화 또는 부분 포화 모노사이클릭, 브릿지된 또는 스피로 헤테로사이클릴을 나타내고; 이는 할로, NR3aR3b, C1-4알킬, OH, OMe 및 CN으로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4를 나타내고; 및
p는 1 또는 2를 나타낸다,
또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태 또는 이의 동위원소 유도체에 관한 것이다.
다른 국면에서, 본 발명은 일반적으로 인간을 포함하는 포유동물에서 하나 이상의 질병 또는 장애를 치료하거나 또는 감소시키는 데 유효한 본원에 개시된 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
또 다른 국면에서, 본 발명은 일반적으로 인간을 포함하는 포유동물에서 하나 이상의 질병 또는 장애를 치료하거나 또는 감소시키는 데 유효한 하기 구조식 (I)을 갖는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태 또는 이의 동위원소 유도체, 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체, 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이고:
여기서
A는 탄소를 나타내고 B는 산소를 나타내거나, 또는 A 및 B는 각각 질소를 나타내고;
W는 -CHR-Q- 또는 -Q-CHR-을 나타내고; 여기서 Q는 결합, O, S, CH2 또는 NR'을 나타내고; R 및 R'은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되고;
Rw는 Ar 또는 치환 또는 비치환된 인돌린기를 나타내고, 여기서 Ar은 치환 또는 비치환된 6원 방향족 또는 헤테로-방향족 고리를 포함하는 기이고;
R2는 C1-3알킬, CN, CH2OH, CH2F 또는 CONH2를 나타내고;
R1은 H, NH2, OH, CN, CF3, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, C1-4알킬, O-C1-4알킬, Het, Ar; NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O) NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; 단, A가 탄소이고, B가 산소이고 Rw가 Ar일 때, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; A 및 B가 질소일 때, Rw는 Ar이고, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe, C(=O)-NR1qR1r를 나타내고, 여기서 R1q 및 R1r은 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하고;
여기서 R1a, R1b, R1c, R1d, R1e, R1h, R1i, R1j, R1k, R1l, R1m, R1n, R1o, R1p는 H, C1-4알킬, C3-8사이클로알킬, C3-8헤테로사이클로알킬, 또는, 하이드록실, OMe, CN, 플루오로, NR3aR3b, C3-8사이클로알킬, C3-8 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4알킬에서 각각 독립적으로 선택되고; R1a 및 R1b, R1d 및 R1e, R1n 및 R1o는 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성해도 되고;
C1-4알킬은 비치환되거나 또는 OH, F, NR1dR1e로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R3a 및 R3b는 H, 및 C1-4알킬로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되고;
Het는 O, S, S(=O)p 및 N에서 각각 독립적으로 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 3원 내지 8원 포화 또는 부분 포화 모노사이클릭, 브릿지된 또는 스피로 헤테로사이클릴을 나타내고; 이는 할로, NR3aR3b, C1-4알킬, OH, OMe 및 CN으로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4를 나타내고; 및
p는 1 또는 2를 나타낸다.
또 다른 국면에서, 본 발명은 일반적으로 본원에 개시된 약제학적 조성물을 포함하는 단위 투약 형태에 관한 것이다.
또 다른 국면에서, 본 발명은 일반적으로 인간을 포함하는 포유동물에서, 암, 또는 관련 질병 또는 장애를 치료하는 데 유효한 하기 구조식 (I)을 갖는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 형태 또는 이의 동위원소 유도체를 포함하는 약제학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 질병 또는 장애를 치료 또는 감소시키는 방법에 관한 것이고:
여기서
A는 탄소를 나타내고 B는 산소를 나타내거나, 또는 A 및 B는 각각 질소를 나타내고;
W는 -CHR-Q- 또는 -Q-CHR-을 나타내고; 여기서 Q는 결합, O, S, CH2 또는 NR'을 나타내고; R 및 R'은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되고;
Rw는 Ar 또는 치환 또는 비치환된 인돌린기를 나타내고, 여기서 Ar은 치환 또는 비치환된 6원 방향족 또는 헤테로-방향족 고리를 포함하는 기이고;
R2는 C1-3알킬, CN, CH2OH, CH2F 또는 CONH2를 나타내고;
R1은 H, NH2, OH, CN, CF3, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, C1-4알킬, O-C1-4알킬, Het, Ar; NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O) NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; 단, A가 탄소이고, B가 산소이고 Rw가 Ar일 때, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; A 및 B가 질소일 때, Rw는 Ar이고, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe, C(=O)-NR1qR1r를 나타내고, 여기서 R1q 및 R1r은 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하고;
여기서 R1a, R1b, R1c, R1d, R1e, R1h, R1i, R1j, R1k, R1l, R1m, R1n, R1o, R1p는 H, C1-4알킬, C3-8사이클로알킬, C3-8헤테로사이클로알킬, 또는, 하이드록실, OMe, CN, 플루오로, NR3aR3b, C3-8사이클로알킬, C3-8 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4알킬에서 각각 독립적으로 선택되고; R1a 및 R1b, R1d 및 R1e, R1n 및 R1o는 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성해도 되고;
C1-4알킬은 비치환되거나 또는 OH, F, NR1dR1e로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R3a 및 R3b는 H, 및 C1-4알킬로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되고;
Het는 O, S, S(=O)p 및 N에서 각각 독립적으로 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 3원 내지 8원 포화 또는 부분 포화 모노사이클릭, 브릿지된 또는 스피로 헤테로사이클릴을 나타내고; 이는 할로, NR3aR3b, C1-4알킬, OH, OMe 및 CN으로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4를 나타내고; 및
p는 1 또는 2를 나타낸다.
정의
달리 정의되지 않는 한, 여기에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 유기 화학의 일반 원리뿐만 아니라 특정 기능적 모이어티 및 반응성은 문헌 ["Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 2006]에 설명되어 있다.
본원에서 사용되는 "적어도" 하나의 특정한 값은 그 값 및 그 값보다 큰 모든 값으로 이해된다.
용어 "포함하는"은, 조성물 및 방법을 정의하기 위해 사용되는 경우, 그 조성물 및 방법이, 언급된 요소를 포함하지만 다른 요소를 배제하지는 않음을 의미하는 것으로 의도된다. 용어 "필수적으로 이루어지는"은, 조성물 및 방법을 정의하기 위해 사용되는 경우, 그 조성물 및 방법이, 언급된 요소를 포함하고 조성물 및 방법에 필수적으로 중요한 다른 요소를 배제함을 의미한다. 예를 들어, "필수적으로 이루어지는"은, 명시적으로 언급된 약리학적 활성제의 투여를 지칭하고 명시적으로 언급되지 않은 약리학적 활성제는 배제한다. 용어 "필수적으로 이루어지는"은 약리학적으로 비활성 또는 불활성인 제제, 예를 들어, 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 배제하지 않는다. 용어 "~으로 이루어지는"은, 조성물 및 방법을 정의하기 위해 사용되는 경우,　다른 성분의 추적 요소 및 실질적 방법 단계를 배제함을 의미한다. 이러한 전환 용어 각각에 의해 정의된 양태는 본 발명의 범위 내에 있다.
문맥상 구체적으로 언급되거나 명백하지 않은 한, 본원에서 사용되는 용어 "약(about)"은 당업계의 일반적인 허용 범위 내, 예를 들어, 평균의 2 표준 편차 내로 이해된다. "약"은 명시된 값의 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.1%, 0.05%, 또는 0.01% 내에 있는 것으로 이해될 수 있다. 문맥상 달리 명확하지 않은 한, 본원에 제공되는 모든 수치는 용어 "약"에 의해 변경될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어로서 개시된 화합물의 "투여"는, 본원에서 논의되는 임의의 적합한 제형 또는 투여 경로를 사용하여, 본원에 설명된 바와 같은 화합물, 또는 그의 전구약물(prodrug) 또는 다른 약제학적으로 허용가능한 형태를 대상체에게 전달하는 것을 포함한다.
용어 "질병", "장애" 및 "상태"는 달리 명시되지 않는 한 상호교환적으로 사용된다.
본원에서 사용되는 용어 "유효량" 또는 "치료적 유효량"은, 하기 예시된 바와 같이, 질병 치료를 포함하지만 이에 제한되지 않는 의도된 적용에 효과를 발휘하기에 충분한 본원에 설명된 화합물 또는 약제학적 조성물의 양을 지칭한다.
일부 양태에서, 그 양은 암세포의 성장 또는 확산의 검출가능한 사멸 또는 억제; 종양의 크기 또는 수; 또는 암의 수준, 병기, 진행 또는 중증도의 기타 측정치에 유효한 것이다.
치료적 유효량은 의도된 적용, 또는 대상체 및 치료되는 질병 상태, 예를 들어, 통상의 기술자에 의해 쉽게 결정될 수 있는 원하는 생물학적 종점, 화합물의 약동학, 치료되는 질병, 투여 방식, 및 환자의 체중 및 연령에 따라 달라질 수 있다. 이 용어는 또한 타겟 세포에서 특정 반응, 예를 들어 세포 이동 감소를 유도하는 용량에 적용된다. 특정 용량은 예를 들어, 선택된 특정 화합물, 대상체의 종 및 연령/기존 건강 상태 또는 건강 상태에 대한 위험, 따라야 할 투여 요법, 질병의 중증도, 다른 제제와 조합하여 투여되는지 여부, 투여 시기, 투여되는 조직 및 전달되는 물리적 전달 시스템에 따라 달라질 것이다.
용어 "치환되어도 되는"은 주어진 화학적 모이어티(예를 들어, 알킬기)가 다른 치환기(예를 들어, 헤테로원자)에 결합하는 것을 의미하는 것으로 이해된다. 예를 들어, 치환되어도 되는 알킬기는 완전히 포화된 알킬쇄(즉, 순수한 탄화수소)일 수 있다. 대안적으로, 동일한 치환되어도 되는 알킬기는 수소와 다른 치환기를 가질 수 있다. 예를 들어, 동일한 치환되어도 되는 알킬기는, 쇄를 따라 임의의 지점에서, 할로겐 원자, 하이드록실기 또는 본원에 설명된 임의의 다른 치환기에 결합될 수 있다. 따라서, 용어 "치환되어도 되는"은 주어진 화학적 모이어티가 다른 작용기를 함유할 가능성이 있지만 반드시 추가 작용기를 가질 필요는 없다는 것을 의미한다. 설명된 기의 임의의 치환에 사용되는 적합한 치환기는 제한 없이 할로겐, 옥소, CN, -COOH, -CH2CN, -O-C1-C6알킬, C1-C6알킬, -OC1-C6알케닐, -OC1-C6알키닐, -C1-C6알케닐, -C1-C6알키닐, -OH, -OP(O)(OH)2, -OC(O)C1-C6알킬, -C(O)C1-C6알킬, -OC(O)OC1-C6알킬, NH2, NH(C1-C6알킬), N(C1-C6알킬)2, -NHC(O)C1-C6알킬, -C(O)NHC1-C6알킬, -S(O)2-C1-C6알킬, -S(O)NHC1-C6알킬, 및 S(O)N(C1-C6알킬)2를 포함한다.
본원에서 사용되는 개시된 화합물의 "약제학적으로 허용가능한 형태"는, 개시된 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물, 이성질체, 전구약물 및 동위원소 표지된 유도체를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 일 양태에서, "약제학적으로 허용가능한 형태"는 개시된 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 이성질체, 전구약물 및 동위원소 표지된 유도체를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 일부 양태에서, "약제학적으로 허용가능한 형태"는 개시된 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 입체이성질체, 전구약물 및 동위원소 표지된 유도체를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
특정 양태에서, 약제학적으로 허용가능한 형태는 약제학적으로 허용가능한 염이다. 본원에서 사용되는 용어 "약제학적으로 허용가능한 염"은 건전한 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등 없이 대상체의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 염을 지칭하며, 이상적인 이익/위험 비율에 비례한다. 약제학적으로 허용가능한 염은 당업계에 잘 공지되어 있다. 예를 들어, Berge et al.이 문헌 [J. Pharmaceutical Sciences (1977) 66:1-19]에서 약제학적으로 허용가능한 염을 상세히 설명한다. 본원에서 제공되는 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 적합한 무기 및 유기 산 및 염기로부터 유도된 것들을 포함한다. 약제학적으로 허용가능한 무독성 산 부가염의 예로는 염산, 브롬화수소산, 인산, 황산 및 과염소산과 같은 무기산, 또는 아세트산, 옥살산, 말레산, 타르타르산, 구연산, 숙신산 또는 말론산과 같은 유기산, 또는 이온 교환과 같은 당업계에서 사용되는 다른 방법을 사용하여 형성된 아미노기의 염이 있다. 다른 약제학적으로 허용가능한 염은 아디페이트, 알지네이트, 아스코르베이트, 아스파르테이트, 벤젠설포네이트, 베실레이트, 벤조에이트, 비설페이트, 보레이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포설포네이트, 시트레이트, 사이클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실설페이트, 에탄설포네이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루코헵토네이트, 글리세로포스페이트, 글루코네이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 하이드로아이오다이드, 2-하이드록시에탄설포네이트, 락토비오네이트, 락테이트, 라우레이트, 라우릴설페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메탄설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 올레이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, p-톨루엔설포네이트, 운데카노에이트, 발레레이트 염 등을 포함한다. 일부 양태에서, 염이 유도될 수 있는 유기산은 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 옥살산, 락트산, 트리플루오르아세트산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, p-톨루엔설폰산, 살리실산 등을 포함한다.
염은 개시된 화합물의 분리 및 정제 동안 원위치에서 또는 개별적으로, 예를 들어 모체 화합물의 유리 염기 또는 유리 산을 각각 적합한 염기 또는 산과 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 적절한 염기로부터 유도된 약제학적으로 허용가능한 염은 알칼리 금속, 알칼리 토금속, 암모늄 및 N+(C1-4알킬)4 염을 포함한다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리 토금속 염은 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간, 알루미늄 등을 포함한다. 추가의 약제학적으로 허용가능한 염은 적절한 경우, 비독성 암모늄, 4급 암모늄, 및 할라이드, 하이드록사이드, 카르복실레이트, 설페이트, 포스페이트, 니트레이트, 저급 알킬 설포네이트 및 아릴 설포네이트와 같은 반대이온을 사용하여 형성된 아민 양이온을 포함한다. 염이 유도될 수 있는 유기 염기는 예를 들어 1차, 2차 및 3차 아민, 자연적으로 발생하는 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 사이클릭 아민, 염기성 이온 교환 수지 등, 예컨대 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민 및 에탄올아민을 포함한다. 일부 양태에서, 약제학적으로 허용가능한 염기 부가염은 암모늄, 칼륨, 나트륨, 칼슘 및 마그네슘 염에서 선택될 수 있다.
특정 양태에서, 약제학적으로 허용가능한 형태는 약제학적으로 허용가능한 에스테르이다. 본원에서 사용되는 용어 "약제학적으로 허용가능한 에스테르"는 생체내에서 가수분해되는 에스테르를 지칭하고, 인체에서 쉽게 분해되어 모체 화합물 또는 이의 염을 남기는 것들을 포함한다. 이러한 에스테르는 본원에 정의된 전구약물로서 작용할 수 있다. 약제학적으로 허용가능한 에스테르는 산성기의 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아랄킬 및 사이클로알킬 에스테르를 포함하지만 이에 제한되지 않고, 카르복시산, 인산, 포스핀산, 설핀산, 설폰산 및 보론산을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 에스테르의 예는 포르메이트, 아세테이트, 프로피오네이트, 부티레이트, 아크릴레이트 및 에틸숙시네이트를 포함한다. 에스테르는 모체 화합물의 하이드록시 또는 카르복시산기와 함께 형성될 수 있다.
특정 양태에서, 약제학적으로 허용가능한 형태는 "용매화물"(예를 들어, 수화물)이다. 본원에서 사용되는 용어 "용매화물"은 비공유 분자간 힘에 의해 결합된 화학량론적 또는 비화학량론적 양의 용매를 추가로 포함하는 화합물을 지칭한다. 용매화물은 개시된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염일 수 있다. 용매가 물인 경우, 용매화물은 "수화물"이다. 약제학적으로 허용가능한 용매화물 및 수화물은 예를 들어, 1개 내지 약 100개, 또는 1개 내지 약 10개, 또는 1개 내지 약 2개, 약 3개 또는 약 4개의 용매 또는 물 분자를 포함할 수 있는 착물이다. 본원에서 사용되는 용어 "화합물"은 화합물 및 화합물의 용매화물뿐만 아니라 그 혼합물도 포함하는 것으로 이해될 것이다.
특정 양태에서, 약제학적으로 허용가능한 형태는 전구약물이다. 본원에서 사용되는 용어 "전구약물"(또는 "전구-약물")은, 개시된 화합물 또는 화합물의 약제학적으로 허용가능한 형태를 제공하기 위해 생체내에서 형질전환되는 화합물을 지칭한다. 전구약물은 대상체에게 투여될 때 비활성일 수 있지만, 예를 들어, 가수분해(예컨대, 혈액 내 가수분해)에 의해 생체내에서 활성 화합물로 전환된다. 특정 경우에, 전구약물은 모체(parent) 화합물에 비해 물리적 및/또는 전달 특성이 개선되었다. 전구약물은 대상체에 투여될 때(예를 들어, 경구 투여 후 혈액으로 향상된 흡수를 허용함으로써) 화합물의 생체활용성을 증가시키거나 또는 관심 있는 생물학적 구획(예를 들어, 뇌 또는 림프계)으로의 전달을 모체 화합물에 비해 향상시킬 수 있다. 예시적인 전구약물은 모체 화합물에 비해 향상된 수성 물질 용해도 또는 소화관 막을 통한 능동 수송을 갖는 개시된 화합물의 유도체를 포함한다.
전구약물 화합물은 종종 포유류 유기체에서 용해도, 조직 융화성 또는 지연 방출의 이점을 제공한다(예를 들어, 문헌 [Bundgard, H., Design of Prodrugs (1985), pp. 7- 9, 21-24 (Elsevier, Amsterdam)] 참조). 전구약물에 대한 논의는 문헌 [Higuchi, T., et al., "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," A.C.S. Symposium Series, Vol. 14, and in Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987]에서 제공되며, 이들 모두 그 전체가 본원에 참조로 포함된다. 전구약물의 예시적인 이점은, 모체 화합물과 비교하여 생리학적 pH에서 비경구 투여를 위해 향상된 수용성과 같은 물리적 특성을 포함할 수 있거나, 또는 소화관으로부터의 흡수를 향상시킬 수 있거나, 또는 장기 저장을 위해 약물 안정성을 향상시킬 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "약제학적으로 허용가능한" 부형제, 담체 또는 희석제는, 하나의 기관 또는 신체의 일부에서 다른 기관 또는 신체의 일부로 대상 약제학적 제제를 운반하거나 수송하는 것에 관여되는, 약학적으로 허용가능한 물질, 조성물 또는 비히클, 예컨대 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제, 용매 또는 캡슐화 물질을 지칭한다. 각각의 담체는 제형의 다른 성분들과 융화성이며 환자에게 상해를 입히지 않는 점에서 "허용가능해야" 한다. 약제학적으로 허용가능한 담체로서 작용할 수 있는 물질들의 일부 예는, 락토스, 글루코스 및 수크로스와 같은 당; 옥수수 전분 및 감자 전분과 같은 전분; 소듐 카르복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트와 같은 셀룰로스 및 이의 유도체; 분말화된 트라가칸트; 맥아; 젤라틴; 탈크; 코코아 버터 및 좌제 왁스와 같은 부형제; 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참깨유, 올리브유, 옥수수유 및 대두유와 같은 오일; 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜; 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리올; 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르; 한천; 마그네슘 하이드록사이드 및 알루미늄 하이드록사이드와 같은 완충제; 알긴산; 피로젠-프리(pyrogen-free) 물; 등장성 식염수; 링거액; 에틸 알코올; 포스페이트 완충액; 및 약제학적 제형에 사용되는 기타 비-독성의 융화성 성분들을 포함한다. 습윤제, 유화제 및 윤활제, 예를 들어 소듐 라우릴 설페이트, 마그네슘 스테아레이트 및 폴리에틸렌 옥사이드-폴리프로필렌 옥사이드 공중합체뿐만 아니라 착색제, 이형제, 코팅제, 감미료, 착향제 및 향료, 방부제 및 항산화제 또한 조성물에 존재할 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "대상체"는, 특정 치료를 받는 인간, 비인간 영장류, 설치류 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 임의의 동물(예를 들어, 포유동물)을 지칭한다. 일반적으로, 용어 "대상체" 및 "환자"는 인간 대상체와 관련하여 본원에서 상호교환적으로 사용된다.
본원에서 사용되는 용어 "치료" 또는 질병 또는 장애를 "치료하는 것"은, 그러한 상태가 발생하기 전 또는 후에 그러한 상태를 감소, 지연 또는 개선하는 방법을 지칭한다. 치료는 질병 및/또는 기저 병리학의 하나 이상의 영향 또는 증상에 대한 것일 수 있다. 치료는 치료적 이점 및/또는 예방적 이점을 포함하지만 이에 제한되지 않는 유익하거나 또는 원하는 결과를 얻는 것을 목표로 한다. 치료적 이점은 치료되는 기저 장애의 근절 또는 개선을 의미한다. 또한, 환자가 여전히 기저 장애를 앓을 수 있음에도 불구하고, 환자에게서 개선이 관찰되도록 기저 장애와 관련된 하나 이상의 생리학적 증상의 근절 또는 개선으로 치료적 이점이 달성된다. 예방적 이점을 위해, 약제학적 화합물 및/또는 조성물은 특정 질병이 발병할 위험이 있는 환자, 또는 질병의 진단이 불가능할지라도 질병의 하나 이상의 생리학적 증상을 보고하는 환자에게 투여될 수 있다. 치료는 임의의 감소일 수 있고, 질병 또는 질병 증상의 완전한 제거일 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 동등한 미처리 대조군과 비교하여, 예방의 이러한 감소 또는 정도는 임의의 표준 기술에 의해 측정된 적어도 5%, 10%, 20%, 40%, 50%, 60%, 80%, 90%, 95% 또는 100%이다.
본원에서 사용되는 용어 "치료 효과"는 본원에 설명된 바와 같은 치료적 이점 및/또는 예방적 이점을 지칭한다. 예방적 효과는 질병 또는 상태의 출현을 지연시키거나 제거하는 것, 질병 또는 상태의 증상의 개시를 지연시키거나 제거하는 것, 질병 또는 상태의 진행을 늦추거나 중단시키거나 역전시키는 것, 또는 이들의 조합을 포함한다.
본 발명의 화합물은 그의 제조 후에 바람직하게는 분리 및 정제되어 95중량% 이상의 양("실질적으로 순수한")을 함유하는 조성물을 얻은 다음, 본원에 설명된 바와 같이 사용되거나 제형화된다. 특정 양태에서, 본 발명의 화합물은 99% 초과의 순도이다.
본 발명의 화합물의 용매화물 및 다형체가 또한 본원에서 고려된다. 본 발명의 화합물의 용매화물은 예를 들어 수화물을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "분리된" 또는 "실질적으로 분리된" 분자(예를 들어 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드)는 자연에서보다 더 높은 농도로 존재하도록 조작되었거나 천연 환경에서 제거된 분자이다. 예를 들어, 대상 항체는 자연에서 관련된 비대상-항체 물질의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 40%, 또는 50%, 또는 70%, 또는 90%가 제거되었을 때 분리, 정제, 실질적으로 분리, 또는 실질적으로 정제된다. 예를 들어, 살아있는 동물에 자연적으로 존재하는 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리펩티드는 "분리된" 것이 아니지만, 자연 상태의 공존하는 물질로부터 분리된 동일한 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리펩티드는 "분리된" 것이다. 또한, 벡터에 포함된 재조합 DNA 분자는 본 발명의 목적을 위해 분리된 것으로 간주된다. 분리된 RNA 분자는 DNA 및 RNA 분자의 생체내 또는 시험관내 RNA 복제 생성물을 포함한다. 분리된 핵산 분자는 합성적으로 생성된 분자를 추가로 포함한다. 또한, 재조합 숙주 세포에 포함된 벡터 분자도 분리된다. 따라서, 모든 "분리된" 분자가 "정제"될 필요는 없다.
본원에서 사용되는 용어 "정제된"은, 분자와 관련하여 사용될 때, 자연 환경 또는 분자가 생성, 발견, 또는 합성된 환경에서 해당 분자와 관련된 분자에 비해 정제되는 분자의 농도가 증가되었음을 의미한다. 자연적으로 관련된 분자에는 단백질, 핵산, 지질 및 당이 포함되지만 일반적으로 물, 완충액 및 온전성을 유지하거나 정제되는 분자의 정제를 용이하게 하기 위해 첨가되는 시약은 포함되지 않는다. 이 정의에 따르면, 물질은 오염 물질과 비교했을 때, 5% 이상, 10% 이상, 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 98% 이상, 99% 이상 또는 100%의 순도이다.
특정 작용기 및 화학 용어의 정의는 이하 더 상세하게 설명되어 있다. 값의 범위가 나열되면, 범위 내의 각 값과 하위-범위를 포함하도록 의도된다. 예를 들어, "C1-4알킬"은, C1, C2, C3, C4, C1-3, C1-2, C2-4, C3-4 및 C2-3알킬기를 포함하도록 의도된다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬"은 탄소 및 수소 원자로만 구성되고 불포화를 함유하지 않으며 1개 내지 10개의 탄소 원자(예를 들어, C1-10알킬)를 갖는 직선 또는 분지형의 탄화수소쇄 라디칼을 지칭한다. 본원에 등장할 때마다, "1 내지 10"과 같은 숫자 범위는 주어진 범위의 각 정수를 지칭한다; 예를 들어, "1개 내지 10개의 탄소 원자"는 알킬기가 1개의 탄소 원자, 2개의 탄소 원자, 3개의 탄소 원자 등, 최대 10개의 탄소 원자로 구성될 수 있음을 의미하지만, 본 정의는 또한 숫자 범위가 지정되지 않은 용어 "알킬"의 발생을 포함한다. 일부 양태에서, "알킬"은 C1-6알킬기일 수 있다. 일부 양태에서, 알킬기는 1개 내지 10개, 1개 내지 8개, 1개 내지 6개, 또는 1개 내지 3개의 탄소 원자를 갖는다. 대표적인 포화 직쇄 알킬은 -메틸, -에틸, -n-프로필, -n-부틸, -n-펜틸 및 -n-헥실을 포함하지만 이에 제한되지 않으며; 포화 분지형 알킬은 -이소프로필, -sec-부틸, -이소부틸, -tert-부틸, -이소펜틸, 2-메틸부틸, 3-메틸부틸, 2-메틸펜틸, 3-메틸펜틸, 4-메틸펜틸, 2-메틸헥실, 3-메틸헥실, 4-메틸헥실, 5-메틸헥실, 2,3-디메틸부틸 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 알킬은 단일 결합에 의해 모체 분자에 부착된다. 본 명세서에서 달리 언급하지 않는 한, 알킬기는 하기를 독립적으로 포함하는 하나 이상의 치환기: 아실, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 알킬아릴, 사이클로알킬, 아랄킬, 아릴, 아릴옥시, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미노, 아자이드, 카르보네이트, 카르바메이트, 카르보닐, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클로알킬, 하이드록시, 시아노, 할로, 할로알콕시, 할로알킬, 에스테르, 에테르, 메르캅토, 티오, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르보닐, 니트로, 옥소, 포스페이트, 포스포네이트, 포스피네이트, 실릴, 설피닐, 설포닐, 설폰아미딜, 설폭실, 설포네이트, 우레아, -Si(Ra)3, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tN(Ra)2 (여기서 t는 1 또는 2), -P(=O)(Ra)(Ra), 또는 -O-P(=O)(ORa)2 여기서 각각의 Ra 은 독립적으로 수소, 알킬, 할로알킬, 카르보사이클릴, 카르보사이클릴알킬, 아릴, 아랄킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬에 의해 임의로 치활될 수 있고, 이들 각각의 모이어티는 본원에 설명된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 비제한적인 양태에서, 치환된 알킬은 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 2-플루오로에틸, 3-플루오로프로필, 하이드록시메틸, 2-하이드록시에틸, 3-하이드록시프로필, 벤질 및 페네틸에서 선택될 수 있다.
달리 구체적으로 정의되지 않는 한, 용어 "방향족" 또는 "아릴"은, 페닐, 비페닐 또는 나프틸과 같은 모노사이클릭 또는 바이사이클릭기를 포함하고 1개 내지 2개의 방향족 고리를 갖는 사이클릭, 방향족 탄화수소기를 지칭한다. 2개의 방향족 고리(바이사이클릭 등)를 포함하는 경우, 아릴기의 방향족 고리는 단일 지점에서 연결되거나(예를 들어, 비페닐), 또는 융합(예를 들어, 나프틸)될 수 있다. 아릴기는 임의의 부착 지점에서 하나 이상의 치환기, 예를 들어 1개 내지 5개의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 예시적인 치환기는 H, 할로겐, -O-C1-C6알킬, C1-C6알킬, -C1-C6알케닐, -OC1-C6알키닐, -C1-C6알케닐, -C1-C6알키닐, -OH, -OP(O)(OH)2, -OC(O)C1-C6알킬, -C(O)C1-C6알킬, -OC(O)OC1-C6알킬, NH2, NH(C1-C6알킬), N(C1-C6알킬)2, -S(O)2-C1-C6알킬, -S(O)NHC1-C6알킬, 및 S(O)N(C1-C6알킬)2를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 치환기는 그 자체가 임의로 치환될 수 있다. 또한, 2개의 융합된 고리를 포함하는 경우, 본원에서 정의된 아릴기는 완전히 불포화된 고리와 융합된, 불포화 또는 부분적으로 포화된 고리를 가질 수 있다. 이들 아릴기의 예시적인 고리계는 인다닐, 인데닐, 테트라하이드로나프탈렌일, 및 테트라하이드로벤조안눌렌일(tetrahydrobenzoannulenyl)을 포함한다.
용어 "할로겐" 또는 "할로"는 플루오린(F), 염소(Cl), 브로민(Br) 및 요오드(I)를 지칭한다.
달리 구체적으로 정의되지 않는 한, 본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴" 또는 "헤테로-방향족"은, 모노사이클릭 헤테로아릴 고리 또는 바이사이클릭 헤테로아릴 고리를 의미한다. 모노사이클릭 헤테로아릴 고리는 5원 또는 6원 고리이다. 5원 고리는 2개의 이중 결합을 갖고, N, O, 및 S로 이루어지는 군에서 독립적으로 선택되는 1개, 2개, 3개 또는 4개의 헤테로원자를 함유한다. 6원 고리는 3개의 이중 결합을 갖고, N, O 및 S로 이루어지는 군에서 독립적으로 선택되는 1개, 2개, 3개 또는 4개의 헤테로원자를 함유한다. 바이사이클릭 헤테로아릴 고리는 페닐기에 융합된 5원 또는 6원 헤테로아릴 고리, 또는 사이클로알킬기에 융합된 5원 또는 6원 헤테로아릴 고리, 또는 사이클로알케닐기에 융합된 5원 또는 6원 헤테로아릴 고리, 또는 또 다른 5원 또는 6원 헤테로아릴 고리에 융합된 5원 또는 6원 헤테로아릴 고리로 이루어진다. 헤테로아릴 내에 함유된 질소 헤테로원자는 N-옥사이드로 임의로 산화되거나 또는 통상의 기술자에게 공지된 질소 보호기로 임의로 보호될 수 있다. 헤테로아릴은 헤테로아릴 내에 함유된 임의의 탄소 원자 또는 임의의 질소 원자를 통해 모체 분자 모이어티에 연결된다. 헤테로아릴의 대표적인 예는 벤조티에닐, 벤조옥사디아졸릴, 시르몰리닐, 5,6-디하이드로이소퀴놀리닐, 7,8-디하이드로이소퀴놀리닐, 5,6-디하이드로퀴놀리닐, 7,8-디하이드로퀴놀리닐, 푸로피리디닐, 푸릴, 이미다졸릴, 인다졸릴, 인돌릴, 이속사졸릴, 이소퀴놀리닐, 이소티아졸릴, 나프티리디닐, 옥사디아졸릴, 옥사졸릴, 피리디닐, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 피라졸릴, 피롤릴, 피리디늄 N-옥사이드, 퀴놀리닐, 5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀리닐, 5,6,7,8 -테트라하이드로퀴놀리닐, 테트라졸릴, 티아디아졸릴, 티아졸릴, 티에노피리디닐, 티에닐, 트리아졸릴 및 트리아지닐을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어 "헤테로아릴" 또는 "헤테로-방향족"기는 알케닐, 알콕시, 알콕시알콕시, 알콕시알킬, 알콕시카르보닐, 알콕시카르보닐알킬, 알킬, 알킬카르보닐, 알킬카르보닐알킬, 알킬카르보닐옥시, 알킬티오, 알킬티오알킬, 알키닐, 카르복시, 카르복시알킬, 시아노, 시아노알킬, 포르밀, 할로알콕시, 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 하이드록시알킬, 메르캅토, 니트로, -NZ1Z2, 및 (NZ1Z2)카르보닐에서 독립적으로 선택되는 0개, 1개, 2개, 3개 또는 4개의 치환기로 치환된다. 본원에서 사용되는 용어 " NZ1Z2"는, 질소 원자를 통해 모체 분자 모이어티에 부착된 2개의 기 Z1 및 Z2를 의미한다. Z1 및 Z2는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 알킬카르보닐 및 포르밀로 이루어지는 군에서 선택된다. NZ1Z2의 대표적인 예는 아미노, 메틸아미노, 아세틸아미노 및 아세틸메틸아미노를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "알콕시"는 -O-알킬 라디칼을 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "사이클로알킬" 및 "카르보사이클릴"은 각각 탄소 및 수소만을 함유하고 포화되거나 부분적으로 불포화될 수 있는 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 라디칼을 지칭한다. 본 명세서에서 달리 언급하지 않는 한, 용어는 치환 및 비치환된 사이클로알킬기 둘 모두를 포함하는 것으로 의도된다. 부분적으로 불포화된 사이클로알킬기는 카르보사이클이 적어도 하나의 이중 결합을 포함하는 경우 "사이클로알케닐"로 지칭될 수 있고, 또는 카르보사이클이 적어도 하나의 삼중 결합을 포함하는 경우 "사이클로알키닐"로 지칭될 수 있다. 사이클로알킬기는 3개에서 13개의 고리 원자(즉, C3-13사이클로알킬)를 갖는 기를 포함한다. 본원에 등장할 때마다, "3 내지 10"과 같은 숫자 범위는 주어진 범위의 각 정수를 지칭한다; 예를 들어, "3개 내지 13개의 탄소 원자"는 사이클로알킬기가 3개의 탄소 원자, 4개의 탄소 원자, 5개의 탄소 원자 등, 최대 13개의 탄소 원자로 구성될 수 있음을 의미한다. 용어 "사이클로알킬"은 또한 헤테로원자를 함유하지 않는 브릿지된 및 스피로-융합된 사이클릭 구조를 포함한다. 이 용어는 또한 모노사이클릭 또는 융합된 고리 폴리사이클릭(즉, 인접한 고리 원자 쌍을 공유하는 고리)기를 포함한다. 폴리사이클릭 아릴기는 비사이클, 트리사이클, 테트라사이클 등을 포함한다. 일부 양태에서, "사이클로알킬"은 C3-8사이클로알킬 라디칼일 수 있다. 일부 양태에서, "사이클로알킬"은 C3-5사이클로알킬 라디칼일 수 있다. 사이클로알킬기의 예시적인 예는 하기 모이어티를 포함하지만 이에 제한되지 않는다: C3-6카르보사이클릴기는 제한없이 사이클로프로필(C3), 사이클로부틸(C4), 사이클로펜틸(C5), 사이클로펜테닐(C5), 사이클로헥실(C6), 사이클로헥세닐(C6), 사이클로헥사디에닐(C6) 등을 포함한다. C3-7카보사이클릴기의 예는 노르보르닐(C7)을 포함한다. C3-8카르보사이클릴기의 예는 상술한 C3-7카르보사이클릴기뿐만 아니라 사이클로헵틸(C7), 사이클로헵타디에닐(C7), 사이클로헵타트리에닐(C7), 사이클로옥틸(C8), 비사이클로[2.2.1]헵타닐, 비사이클로[2.2.2]옥타닐 등을 포함한다. C3-13카르보사이클릴기의 예는 상술한 C3-8카르보사이클릴기뿐만 아니라 옥타하이드로-1H 인덴일, 데카하이드로나프탈레닐, 스피로[4.5]데카닐 등을 포함한다. 본 명세서에서 달리 언급하지 않는 한, 사이클로알킬기는 하기를 독립적으로 포함하는 하나 이상의 치환기: 아실, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 알킬아릴, 사이클로알킬, 아랄킬, 아릴, 아릴옥시, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미노, 아자이드, 카르보네이트, 카르바메이트, 카르보닐, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클로알킬, 하이드록시, 시아노, 할로, 할로알콕시, 할로알킬, 에스테르, 에테르, 메르캅토, 티오, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르보닐, 니트로, 옥소, 포스페이트, 포스포네이트, 포스피네이트, 실릴, 설피닐, 설포닐, 설폰아미딜, 설폭실, 설포네이트, 우레아, -Si(Ra)3, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)2, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tN(Ra)2 (여기서 t는 1 또는 2), -P(=O)(Ra)(Ra), 또는 -O-P(=O)(ORa)2 여기서 각각의 Ra 은 독립적으로 수소, 알킬, 할로알킬, 카르보사이클릴, 카르보사이클릴알킬, 아릴, 아랄킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬에 의해 임의로 치활될 수 있고, 이들 각각의 모이어티는 본원에 설명된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 용어 "사이클로알케닐" 및 "사이클로알키닐"은 "사이클로알킬"에 대한 상기 설명을 반영하고, 여기서 접두사 "alk"는 각각 "알켄" 또는 "알킨"으로 대체되고, 모체 "알케닐" 또는 "알키닐" 용어들은 본원에 설명된 바와 같다. 예를 들어, 사이클로알케닐기는 5개 내지 8개의 고리 원자와 같이 3개 내지 13개의 고리 원자를 가질 수 있다. 일부 양태에서, 사이클로알키닐기는 5개 내지 13개의 고리 원자를 가질 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로사이클로알킬"은, 탄소 이외의 원자에서 선택되는 하나 이상의 골격쇄 원자를 갖는 사이클로알킬 라디칼, 예를 들어, O, N, S, P 또는 이들의 조합을 지칭한다. 본 명세서에서 달리 언급하지 않는 한, 용어는 치환 및 비치환된 헤테로사이클로알킬기 둘 모두를 포함하는 것으로 의도된다. 헤테로사이클로알킬의 예시적인 예는 2-하이드록시-아지리딘-1-일, 3-옥소-1-옥사사이클로부탄-2-일, 2,2-디메틸-테트라하이드로푸란-3-일, 3-카르복시-모르폴린-4-일, 1-사이클로프로필-4-메틸-피페라진-2-일, 2-피롤리닐, 3-피롤리닐, 디하이드로-2H-피라닐, 1,2,3,4-테트라하이드로피리딘, 3,4-디하이드로-2H-[1,4]옥사진 등을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로사이클", "헤테로사이클릭" 또는 "헤테로사이클로"는, 완전히 포화되거나 또는 부분적으로 불포화된 사이클릭기, 예를 들어, 3원 내지 7원 모노사이클릭, 7원 내지 12원 바이사이클릭, 또는 10원 내지 15원 트리사이클릭 고리계를 지칭하고, 이는 적어도 하나의 고리에 적어도 하나의 헤테로원자를 가지며, 여기서 각 고리의 0개, 1개, 2개 또는 3개의 원자는 치환기로 치환될 수 있다. 헤테로원자를 함유하는 헤테로사이클릭기의 각 고리는 질소 원자, 산소 원자 및/또는 황 원자에서 선택된 1개, 2개, 3개 또는 4개의 헤테로원자를 가질 수 있으며, 여기서 질소 및 황 헤테로원자는 임의로 산화될 수 있고 질소 헤테로원자는 임의로 4차화될 수 있다. 헤테로사이클릭기는 고리 또는 고리계의 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에 부착될 수 있다.
발명의 상세한 설명
본 발명은 암(예를 들어, 유방, 결장, 자궁내막, 신장, 폐, 흑색종, 전립선, 갑상선암 및 백혈병)과 같은 다양한 질병 및 상태의 치료에서 신규한 PI3Kβ 억제제의 발견, 이의 약제학적 조성물 및 이들의 제조 방법 및 용도에 부분적으로 기초한다.
일 국면에서, 본 발명은 일반적으로 하기 구조식 (I)을 갖는 화합물에 관한 것이고:
여기서
A는 탄소를 나타내고 B는 산소를 나타내거나, 또는 A 및 B는 각각 질소를 나타내고;
W는 -CHR-Q- 또는 -Q-CHR-을 나타내고; 여기서 Q는 결합, O, S, CH2 또는 NR'을 나타내고; R 및 R'은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되고;
Rw는 Ar 또는 치환 또는 비치환된 인돌린기를 나타내고, 여기서 Ar은 치환 또는 비치환된 6원 방향족 또는 헤테로-방향족 고리를 포함하는 기이고;
R2는 C1-3알킬, CN, CH2OH, CH2F 또는 CONH2를 나타내고;
R1은 H, NH2, OH, CN, CF3, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, C1-4알킬, O-C1-4알킬, Het, Ar; NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O) NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; 단, A가 탄소이고, B가 산소이고 Rw가 Ar일 때, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; A 및 B가 질소일 때, Rw는 Ar이고, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe, C(=O)-NR1qR1r를 나타내고, 여기서 R1q 및 R1r은 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하고;
여기서 R1a, R1b, R1c, R1d, R1e, R1h, R1i, R1j, R1k, R1l, R1m, R1n, R1o, R1p는 H, C1-4알킬, C3-8사이클로알킬, C3-8헤테로사이클로알킬, 또는, 하이드록실, OMe, CN, 플루오로, NR3aR3b, C3-8사이클로알킬, C3-8 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4알킬에서 각각 독립적으로 선택되고; R1a 및 R1b, R1d 및 R1e, R1n 및 R1o는 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성해도 되고;
C1-4알킬은 비치환되거나 또는 OH, F, NR1dR1e로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R3a 및 R3b는 H, 및 C1-4알킬로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되고;
Het는 O, S, S(=O)p 및 N에서 각각 독립적으로 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 3원 내지 8원 포화 또는 부분 포화 모노사이클릭, 브릿지된 또는 스피로 헤테로사이클릴을 나타내고; 이는 할로, NR3aR3b, C1-4알킬, OH, OMe 및 CN으로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4를 나타내고; 및
p는 1 또는 2를 나타낸다,
또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태 또는 이의 동위원소 유도체에 관한 것이다.
특정 양태에서, A는 탄소이고 B는 산소이고, 하기 구조식 (Ia)를 갖는다:
화학식 (Ia)의 특정 양태에서, Rw는 Ar이다. 특정 양태에서, W는 -CHR4-NR5-이고, 여기서 R4 및 R5는 H, 메틸 또는 에틸에서 각각 독립적으로 선택된다.
화학식 (Ia)의 특정 양태에서, Rw는 치환 또는 비치환된 인돌린기이다. 특정 양태에서, W는 -CHR4이고, 여기서 R4는 H, 메틸 또는 에틸에서 선택된다.
특정 양태에서, A 및 B는 각각 하기 구조식 (Ib)를 갖는 질소이다:
화학식 (Ib)의 특정 양태에서, Rw는 Ar이다. 특정 양태에서, W는 -CHR4-NR5-이고, 여기서 R4 및 R5는 H, 메틸 또는 에틸에서 각각 독립적으로 선택된다.
화학식 (Ib)의 특정 양태에서, Rw는 치환 또는 비치환된 인돌린기이다. 특정 양태에서, W는 -CHR4이고, 여기서 R4는 H, 메틸 또는 에틸에서 선택된다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, R4 및 R5는 각각 H이다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, R4 및 R5 중 적어도 하나는 메틸 또는 에틸이다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, Ar 또는 인돌린기는 할로겐, C1-4알킬, OC1-4알킬, CN, CHF2, CF3 및 CH2OH로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, Ar 또는 인돌린기는 적어도 하나의 F 원자로 치환된다. 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, Ar 또는 인돌린기는 2개의 F 원자로 치환된다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, W-Rw는 하기에서 선택되고:
여기서 R은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택된다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, n은 0이다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, n은 1이다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, R2는 C1-3알킬이다. 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, R2는 CH2OH, CN 또는 CONH2이다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, R1은 C(=O)-NR1aR1b이고, 여기서 R1a 및 R1b는 H 및 C1-4알킬로부터 각각 독립적으로 선택된다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, R1은 C(=O)-NR1qR1r이고, 여기서 R1q 및 R1r은 C1-3알킬 및 NR3aR3b 중 하나 이상으로 치환되어도 되는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성한다.
특정 양태에서, R1q 및 R1r은 C1-3알킬로 치환된 5원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성한다.
특정 양태에서, R1q 및 R1r은 NR3aR3b로 치환된 5원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성한다.
특정 양태에서, R3a 및 R3b는 각각 메틸이다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, R1은 하이드록시, -O-C1-4알킬 및 NR1cR1d로 치환되어도 되는 C1-4알킬이다.
화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 특정 양태에서, R1은 하기에서 선택된다:
본 발명에 따른 화합물의 예는 하기 화합물:
또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태 또는 이의 동위원소 유도체를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
특정 양태에서, 본 발명의 화합물은 하나 이상의(예를 들어, 1, 2, 3) 수소 원자를 대체하는 하나 이상의(예를 들어, 1, 2, 3) 중수소 원자를 갖는다. 특정 양태에서, 본 발명의 화합물은 하나의 수소 원자를 대체하는 하나의 중수소 원자를 갖는다.
다른 국면에서, 본 발명은 일반적으로 인간을 포함하는 포유동물에서 하나 이상의 질병 또는 장애를 치료하거나 또는 감소시키는 데 유효한 본원에 개시된 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
또 다른 국면에서, 본 발명은 일반적으로 인간을 포함하는 포유동물에서, 하나 이상의 질병 또는 장애를 치료하거나 또는 감소시키는 데 유효한 하기 구조식 (I)을 갖는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태 또는 이의 동위원소 유도체, 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이고:
여기서
A는 탄소를 나타내고 B는 산소를 나타내거나, 또는 A 및 B는 각각 질소를 나타내고;
W는 -CHR-Q- 또는 -Q-CHR-을 나타내고; 여기서 Q는 결합, O, S, CH2 또는 NR'을 나타내고; R 및 R'은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되고;
Rw는 Ar 또는 치환 또는 비치환된 인돌린기를 나타내고, 여기서 Ar은 치환 또는 비치환된 6원 방향족 또는 헤테로-방향족 고리를 포함하는 기이고;
R2는 C1-3알킬, CN, CH2OH, CH2F 또는 CONH2를 나타내고;
R1은 H, NH2, OH, CN, CF3, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, C1-4알킬, O-C1-4알킬, Het, Ar; NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O) NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; 단, A가 탄소이고, B가 산소이고 Rw가 Ar일 때, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; A 및 B가 질소일 때, Rw는 Ar이고, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe, C(=O)-NR1qR1r를 나타내고, 여기서 R1q 및 R1r은 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하고;
여기서 R1a, R1b, R1c, R1d, R1e, R1h, R1i, R1j, R1k, R1l, R1m, R1n, R1o, R1p는 H, C1-4알킬, C3-8사이클로알킬, C3-8헤테로사이클로알킬, 또는, 하이드록실, OMe, CN, 플루오로, NR3aR3b, C3-8사이클로알킬, C3-8 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4알킬에서 각각 독립적으로 선택되고; R1a 및 R1b, R1d 및 R1e, R1n 및 R1o는 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성해도 되고;
C1-4알킬은 비치환되거나 또는 OH, F, NR1dR1e로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R3a 및 R3b는 H, 및 C1-4알킬로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되고;
Het는 O, S, S(=O)p 및 N에서 각각 독립적으로 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 3원 내지 8원 포화 또는 부분 포화 모노사이클릭, 브릿지된 또는 스피로 헤테로사이클릴을 나타내고; 이는 할로, NR3aR3b, C1-4알킬, OH, OMe 및 CN으로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4를 나타내고; 및
p는 1 또는 2를 나타낸다.
특정 양태에서, 약제학적 조성물은 경구 투여에 적합하다.
특정 양태에서, 약제학적 조성물은 암을 치료하거나 또는 감소시키는 데 유용하다.
특정 양태에서, 약제학적 조성물은 유방암, 결장암, 자궁내막암, 신장암, 폐암, 흑색종, 전립선암, 갑상선암 또는 백혈병을 치료하거나 또는 감소시키는 데 유용하다.
또 다른 국면에서, 본 발명은 일반적으로 본원에 개시된 약제학적 조성물을 포함하는 단위 투약 형태에 관한 것이다.
특정 양태에서, 단위 투약 형태는 경구 투여에 적합하다.
특정 양태에서, 단위 투약 형태는 정제 또는 캡슐이다.
특정 양태에서, 단위 투약 형태는 정맥내 투여에 적합하다.
특정 양태에서, 단위 투약 형태는 액체 제형의 형태이다.
또 다른 국면에서, 본 발명은 일반적으로 인간을 포함하는 포유동물에서, 암, 또는 관련 질병 또는 장애를 치료하는 데 유효한 하기 구조식 (I)을 갖는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 형태 또는 이의 동위원소 유도체를 포함하는 약제학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 질병 또는 장애를 치료 또는 감소시키는 방법에 관한 것이고:
여기서
A는 탄소를 나타내고 B는 산소를 나타내거나, 또는 A 및 B는 각각 질소를 나타내고;
W는 -CHR-Q- 또는 -Q-CHR-을 나타내고; 여기서 Q는 결합, O, S, CH2 또는 NR'을 나타내고; R 및 R'은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되고;
Rw는 Ar 또는 치환 또는 비치환된 인돌린기를 나타내고, 여기서 Ar은 치환 또는 비치환된 6원 방향족 또는 헤테로-방향족 고리를 포함하는 기이고;
R2는 C1-3알킬, CN, CH2OH, CH2F 또는 CONH2를 나타내고;
R1은 H, NH2, OH, CN, CF3, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, C1-4알킬, O-C1-4알킬, Het, Ar; NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O) NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; 단, A가 탄소이고, B가 산소이고 Rw가 Ar일 때, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; A 및 B가 질소일 때, Rw는 Ar이고, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe, C(=O)-NR1qR1r를 나타내고, 여기서 R1q 및 R1r은 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하고;
여기서 R1a, R1b, R1c, R1d, R1e, R1h, R1i, R1j, R1k, R1l, R1m, R1n, R1o, R1p는 H, C1-4알킬, C3-8사이클로알킬, C3-8헤테로사이클로알킬, 또는, 하이드록실, OMe, CN, 플루오로, NR3aR3b, C3-8사이클로알킬, C3-8 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4알킬에서 각각 독립적으로 선택되고; R1a 및 R1b, R1d 및 R1e, R1n 및 R1o는 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성해도 되고;
C1-4알킬은 비치환되거나 또는 OH, F, NR1dR1e로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R3a 및 R3b는 H, 및 C1-4알킬로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되고;
Het는 O, S, S(=O)p 및 N에서 각각 독립적으로 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 3원 내지 8원 포화 또는 부분 포화 단환식, 브릿지된 또는 스피로 헤테로사이클릴을 나타내고; 이는 할로, NR3aR3b, C1-4알킬, OH, OMe 및 CN으로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4를 나타내고; 및
p는 1 또는 2를 나타낸다.
특정 양태에서, 치료될 수 있는 암은 유방암, 결장암, 자궁내막암, 신장암, 폐암, 흑색종, 전립선암, 갑상선암 및 백혈병에서 선택된다. 다른 PTEN-결핍 종양, 예를 들어, 뇌(신경아교종), 교모세포종, 바나얀-조나나(Bannayan-Zonana) 증후군, 카우덴(Cowden) 질병, 레미트-두크로스(Lhermitte-Duclos) 질병, 결장직장암, 윌름즈(Wilm's) 종양, 유잉 육종(Ewing's sarcoma), 횡문근육종, 뇌실막종, 수모세포종, 두경부암, 간암, 편평상피암, 난소암, 췌장암, 육종암, 골육종, 골거대세포종, 림프구성 T 세포, 악성 림프종, 호디킨 림프종, 비호디킨 림프종, 림프구성 T 세포 림프종, 버킷 림프종(Burkitt's lymphoma), 여포성 림프종, 신경모세포종, 방광암, 요로상피암, 외음부암, 자궁경부암, 신장암, 중피종, 식도암, 침샘암, 간세포암, 위암, 비인두암, 협측암(buccal cancer), 구강암, 위장관기질종양 및 고환암은, 또한 본 발명의 화합물 및 약제학적 조성물로 치료할 수 있다.
또 다른 국면에서, 본 발명은 일반적으로 질병 또는 장애를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서, 본원에 개시된 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제의 용도에 관한 것이다.
특정 양태에서, 질병 또는 장애는 암, 또는 관련 질병 또는 장애이다.
특정 양태에서, 치료될 수 있는 암은 유방암, 결장암, 자궁내막암, 신장암, 폐암, 흑색종, 전립선암, 갑상선암 및 백혈병에서 선택된다.
특정 양태에서, 약제는 경구 투여용이다.
특정 양태에서, 약제는 정맥내 투여용이다.
본 발명의 특정 화합물은 특히 기하이성질체 형태 또는 입체이성질체 형태로 존재할 수 있다. 본 발명은, 본 발명의 범위 내에 속하는, 시스-이성질체 및 트랜스-이성질체, R-거울상이성질체 및 S-거울상이성질체, 부분입체이성질체, (d)-이성질체, (l)-이성질체, 그 라세미 혼합물, 및 그 다른 혼합물을 포함하는 모든 그러한 화합물을 고려한다. 추가적인 비대칭성 탄소 원자는 알킬기와 같은 치환기에 존재할 수 있다. 모든 그러한 이성질체뿐만 아니라 그 혼합물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다.
임의의 다양한 이성질체 비율을 함유하는 이성질체 혼합물이 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 예를 들어, 두 개의 이성질체만 결합한 경우, 50:50, 60:40, 70:30, 80:20, 90:10, 95:5, 96:4, 97:3, 98:2, 99:1 또는 100:0 이성질체 비율을 포함하는 혼합물이 본 발명에 의해 고려된다. 통상의 기술자는 더 복잡한 이성질체 혼합물에 대해 유사한 비율이 고려된다는 것을 쉽게 이해할 것이다.
예를 들어, 본 발명의 화합물의 특정 거울상이성질체를 원하는 경우, 비대칭 합성 또는 카이랄 보조제와의 유도에 의해 제조될 수 있으며, 여기서 생성된 부분입체이성질체 혼합물이 분리되고 보조제가 절단되어 순수한 원하는 거울상이성질체를 제공할 수 있다. 대안적으로, 분자가 아미노와 같은 염기성 작용기 또는 카르복실과 같은 산성 작용기를 함유하는 경우, 부분입체이성질체 염은 적절한 광학-활성 산 또는 염기로 형성되고, 이어서 분별 결정화 또는 당업계에 잘 알려진 크로마토그래피 방법, 및 순수한 거울상이성질체의 후속 회수에 의해 형성된 부분입체이성질체의 분해가 뒤따른다.
동위원소-표지된 화합물 또한 본 개시의 범위 내에 있다. 본원에서 사용되는 "동위원소-표지된 화합물"은 하나 이상의 원자가 자연에서 일반적으로 발견되는 원자 질량 또는 질량수와는 다른 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체된, 각각 본원에 설명된 바와 같은 약제학적 염 및 이의 전구약물을 포함하는 현재 개시된 화합물을 지칭한다. 현재 개시된 화합물에 편입될 수 있는 동위원소의 예는 각각 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F, 및 36Cl과 같은 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소 및 염소의 동위원소를 포함한다.
현재 개시된 화합물을 동위원소-표지함으로써, 화합물은 약물 및/또는 기질 조직 분포 분석에 유용할 수 있다. 삼중수소화(3H) 및 탄소-14(14C) 표지된 화합물은 제조 및 검출 용이성 때문에 특히 바람직하다. 또한, 중수소(2H)와 같은 더 무거운 동위원소로 치환하면 생체 내 반감기 증가 또는 투약량 요구량 감소와 같은 더 큰 대사 안정성으로 인한 특정 치료적 이점을 얻을 수 있으므로, 일부 환경에서 선호될 수 있다. 약제학적 염, 에스테르 및 전구약물을 포함하는 현재 개시된 동위원소 표지된 화합물은 당업계에 공지된 임의의 수단에 의해 제조될 수 있다.
또한, 일반적으로 풍부한 수소(1H)를 중수소와 같은 더 무거운 동위원소로 치환하면 특정 치료적 이점을 얻을 수 있고, 예를 들어, 흡수, 분포, 대사 및/또는 배설(ADME) 특성이 개선되어 효능, 안전성 및/또는 내성이 개선된 약물이 생성된다. 일반적으로 풍부한 12C를 13C로 치환함으로써 이점을 또한 얻을 수 있다. (WO 2007/005643, WO 2007/005644, WO 2007/016361, 및 WO 2007/016431 참조.)
입체이성질체(예를 들어, 시스 및 트랜스 이성질체) 및 현재 개시된 화합물의 모든 광학 이성질체(예를 들어, R 및 S 거울상이성질체), 뿐만 아니라 라세미, 부분입체이성질체 및 그러한 이성질체의 다른 혼합물은 본 개시의 범위 내에 있다.
본 발명의 화합물은 그의 제조 후에 바람직하게는 분리 및 정제되어 95중량% 이상의 양("실질적으로 순수한")을 함유하는 조성물을 얻은 다음, 본원에 설명된 바와 같이 사용되거나 제형화된다. 특정 양태에서, 본 발명의 화합물은 99% 초과의 순도이다.
본 발명의 화합물의 용매화물 및 다형체가 또한 본원에서 고려된다. 본 발명의 화합물의 용매화물은 예를 들어 수화물을 포함한다.
임의의 적절한 투여 경로, 예를 들어 비경구, 정맥내, 피하, 근육내, 뇌실내, 체내, 복강내, 직장 또는 경구 투여가 사용될 수 있다. 특정 환자에게 가장 적합한 투여 수단은 치료되는 질병 또는 상태의 특성 및 중증도 또는 사용되는 요법의 특성 및 활성 화합물의 특성에 따라 달라질 것이다.
비경구 주사용 조성물은 약제학적으로 허용가능한 멸균 수성 또는 비수성 용액, 분산액, 현탁물 또는 에멀젼 뿐만 아니라 사용 직전에 멸균 주사액 또는 분산액으로 재구성하기 위한 멸균 분말을 포함한다. 적합한 수성 및 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 비히클의 예는, 물, 에탄올, 폴리올(예컨대 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 등), 카르복시메틸셀룰로오스 및 이의 적합한 혼합물, 식물성 오일(예컨대 올리브 오일), 및 올레산염과 같은 주사 가능한 유기 에스테르를 포함한다. 적절한 유동성은 예를 들어 레시틴과 같은 코팅 물질의 사용, 분산액의 경우 필요한 입자 크기의 유지 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.
이들 조성물은 또한 방부제, 습윤제, 유화제 및 분산제와 같은 보조제를 함유할 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들어 파라겐, 클로로부탄올, 페놀 소르브산 등을 포함함으로써 확보될 수 있다. 당, 염화나트륨 등과 같은 등장성 제제를 포함하는 것이 또한 바람직할 수 있다. 주사 가능한 약제학적 형태의 연장된 흡수는 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴과 같이 흡수를 지연시키는 제제를 포함함으로써 야기될 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 리포좀의 형태로 투여될 수 있다. 당업계에 공지된 바와 같이, 리포좀은 일반적으로 인지질 또는 다른 지질 물질로부터 유도된다. 리포좀은 수성 매질에 분산된 단층 또는 다중-층상 수화 액정에 의해 형성된다. 리포좀을 형성할 수 있는 무독성, 생리학적으로 허용가능하고 대사가능한 지질을 사용할 수 있다. 리포좀 형태의 본 발명의 조성물은 본 발명의 화합물 외에도 안정제, 방부제, 부형제 등을 함유할 수 있다. 바람직한 지질은 천연 및 합성 인지질 및 포스파티딜 콜린(레시틴)이다. 리포좀을 형성하는 방법은 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y. (1976), p. 33 et seq.]를 참조한다.
인간 또는 다른 포유동물 숙주에 투여하기 위한 본 발명의 조성물의 일일 총 투약량은 단일 또는 분할 투약량으로 예를 들어, 매일 0.0001 내지 300 mg/kg 체중, 보다 일반적으로 1 내지 300 mg/kg 체중의 양일 수 있다. 0.0001 내지 300mg/kg 체중의 용량을 하루에 두 번 투여할 수 있다.
경구 투여를 위한 고체 투약 형태는 캡슐, 정제, 알약, 분말 및 과립을 포함한다. 이러한 고체 투약 형태에서, 본원에 설명된 화합물 또는 이의 유도체는, 구연산나트륨 또는 인산디칼슘과 같은 적어도 하나의 불활성 관습 부형제(또는 담체) 또는 (i) 예를 들어, 녹말, 락토오스, 수크로스, 포도당, 만니톨 및 규산과 같은 충전제 또는 확장제, (ii) 예를 들어, 카르복시메틸셀룰로오스, 알긴산염, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈, 수크로스 및 아카시아와 같은 결합제, (iii) 예를 들어, 글리세롤과 같은 습윤제, (iv) 예를 들어, 아가-아가(agar-agar), 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정 복합체 규산염 및 탄산나트륨과 같은 분해제, (v) 예를 들어, 파라핀과 같은 용액 지연제, (vi) 예를 들어, 4급 암모늄 화합물과 같은 흡수 촉진제, (vii) 예를 들어, 세틸 알코올, 및 글리세롤 모노스테아레이트와 같은 습윤제, (viii) 예를 들어, 카올린 및 벤토나이트와 같은 흡착제, 및 (ix) 예를 들어, 탈크, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌글리콜, 소듐라우릴설페이트 또는 이의 혼합물과 같은 윤활제로 혼합될 수 있다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우, 투약 형태는 또한 완충 제제를 포함할 수 있다. 유사한 유형의 고체 조성물은 또한 락토스 또는 유당뿐만 아니라 고분자량 폴리에틸렌글리콜 등과 같은 부형제를 사용하여 연질 및 경질로 충전된 젤라틴 캡슐의 충전제로 사용될 수 있다. 정제, 당의정, 캡슐, 알약 및 과립과 같은 고체 투약 형태는 장용 코팅 및 당업계에 공지된 다른 것과 같은 코팅 및 쉘로 제조될 수 있다.
경구 투여를 위한 액체 제형은 약제학적으로 허용가능한 에멀젼, 용액, 현탁물, 시럽 및 엘릭시르(elixir)를 포함한다. 활성 화합물 외에도, 액체 투약 형태는 당업계에서 일반적으로 사용되는 불활성 희석제, 예를 들어 물 또는 기타 용매, 가용화제 및 예를 들어 에틸 알코올, 이소프로필 알코올, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트와 같은 유화제, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 디메틸포름아미드, 오일, 특히 면실유, 땅콩유, 옥수수 배아유, 올리브유, 피마자유, 참깨유, 글리세롤, 테트라하이드로푸르푸릴 알코올, 폴리에틸렌글리콜 및 지방 소르비탄의 산성 에스테르, 또는 이들 물질의 혼합물 등을 포함할 수 있다. 이러한 불활성 희석제 외에, 조성물은 또한 습윤제, 유화제, 현탁제, 감미제, 풍미제 또는 향료와 같은 추가 제제를 포함할 수 있다.
본원에 개시된 재료, 조성물 및 구성요소는 개시된 방법 및 조성물을 위해 사용될 수 있거나, 함께 사용될 수 있거나, 제조에 사용될 수 있거나, 또는 이들의 생성물이다. 이들 물질의 조합, 서브세트, 상호 작용, 기 등이 개시되는 경우, 이들 화합물의 각각의 다양한 개별적 및 집합적 조합 및 순열에 대한 특정 참조가 명시적으로 개시되지 않을 수 있지만, 각각은 구체적으로 고려되고 설명된다는 것이 이해된다. 예를 들어, 방법이 개시되고 논의되고 그 방법에 포함되는 다수의 분자에 대해 이루어질 수 있는 다수의 변형이 논의되는 경우, 달리 명시되지 않는 한 그 방법의 각각의 모든 조합 및 순열, 및 가능한 변형이 구체적으로 고려된다. 마찬가지로, 이들의 임의의 서브세트 또는 조합 또한 구체적으로 고려되고 개시된다. 이 개념은 개시된 조성물을 사용하는 방법의 단계를 포함하지만 이에 제한되지 않는 본 개시의 모든 국면에 적용된다. 따라서, 수행될 수 있는 다양한 추가 단계가 있는 경우, 이러한 각각의 추가 단계는 임의의 특정 방법 단계 또는 개시된 방법의 방법 단계의 조합으로 수행될 수 있으며, 각각의 그러한 조합 또는 조합의 서브세트는 구체적으로 고려되며 개시된 것으로 간주되어야 한다.
실시예
하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 목적으로 제공되지만, 본 발명의 범위 또는 사상을 제한하기 위한 것은 아니다.
상기 및 하기 본원에 구체적으로 개시된 것을 포함하는 본 발명의 화합물은 하기 방식들에 설명된 바와 같이 제조될 수 있다. 예를 들어, 화학식 (I)의 화합물은 하기 방식에 설명된 바와 같이 제조될 수 있으며, 이는 단편 및 그의 조합물을 제조하기 위해 통상의 기술자에게 공지되어 있다. 본 발명이 바람직한 양태와 함께 상세하게 설명되었지만, 통상의 기술자는 본 발명의 범위 내에서 본 발명에 대한 수정, 변형 및 균등한 대체가 본 발명의 보호 범위에 속한다는 것을 이해해야 한다.
약어
방식 1
방식 1에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
1-(5-브로모-2-하이드록시-3-요오도페닐)에탄온의 제조 (방식 1의 단계 1)
AcOH(400mL) 중의 1-(5-브로모-2-하이드록시-페닐)에탄온(40g, 186.01mmol, 1당량)의 용액에 NIS(50.22g, 223.21mmol, 1.2당량)를 25℃에서 첨가하고 반응 혼합물을 120℃에서 12시간 동안 교반했다. HPLC 및 LC-MS는 1-(5-브로모-2-하이드록시-페닐)에탄온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 얼음물(400mL)에 부었다. 갈색 침전물을 형성했다. 수집된 고체를 EtOH(100mL)로 25℃에서 30분 동안 분쇄했다. 화합물 1-(5-브로모-2-하이드록시-3-요오도-페닐)에탄온(45g, 131.99mmol, 70.96% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ 13.08 (s, 1H), 8.07 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 2.66 (s, 3H).
1-(5-브로모-2-하이드록시-3-요오도페닐)-3-모르폴리노프로판-1,3-다이온의 제조 (방식 1의 단계 2)
THF(400mL) 중의 1-(5-브로모-2-하이드록시-3-요오도-페닐)에탄온(45g, 131.99mmol, 1당량)의 용액에 LiHMDS(1M, 422.36mL, 3.2당량)를 -65℃에서 N2 하에서 적하하고 이어서 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반했다. 혼합물을 -65℃로 재냉각하고 모르폴린-4-카르보닐 클로라이드(21.72g, 145.19mmol, 16.97mL, 1.1당량)를 -65℃에서 적하했다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 1-(5-브로모-2-하이드록시-3-요오도-페닐)에탄온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 2M HCl을 사용하여 pH=7로 조정했다. 수성상을 에틸 아세테이트(200mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(brine)(150mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 조(crude)물질을 MTBE(200mL)로 25℃에서 30분 동안 분쇄했다. 1-(5-브로모-2-하이드록시-3-요오도-페닐)-3-모르폴리노-프로판-1,3-다이온(57g, 125.54mmol, 95.11% 수율) 을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400MHz) δ 8.06 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 4.32 (s, 2H), 3.59~3.55 (m, 4H), 3.45~3.37 (m, 4H).
6-브로모-8-요오도-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 1의 단계 3)
DCM(440mL) 중의 1-(5-브로모-2-하이드록시-3-요오도-페닐)-3-모르폴리노-프로판-1,3-다이온(44g, 96.90mmol, 1당량)의 용액에 Tf2O(109.36g, 387.62mmol, 63.95mL, 4당량)를 0℃에서 적하했다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=0:1, Rf=0.4)는 1-(5-브로모-2-하이드록시-3-요오도-페닐)-3-모르폴리노-프로판-1,3-다이온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고 MeOH(200mL)를 첨가하여 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 조정했다. 수성상을 DCM(200mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(200mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트~에틸 아세테이트:MeOH=50/1~4:1)로 정제했다. 6-브로모-8-요오도-2-모르폴리노-크로멘-4-온(11.6g, 26.60mmol, 27.45% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400MHz) δ 8.29 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 3.81~3.72 (m, 4H), 3.62~3.57 (m, 4H).
6-브로보-2-모르폴리노-8-비닐-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 1의 단계 4)
디옥산(80mL) 중의 6-브로모-8-요오도-2-모르폴리노-크로멘-4-온(8.4g, 19.26mmol, 1당량) 및 칼륨 트리플루오로(비닐)보라누이드(2.84g, 21.19mmol, 1.1당량)의 혼합물에 Pd(dppf)Cl2(704.79mg, 963.22umol, 0.05당량) 및 H2O(10mL) 중의 K2CO3(5.32g, 38.53mmol, 2당량)의 용액을 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반했다. LC-MS는 6-브로모-8-요오도-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 여과 후, 여액을 농축했다. 잔류물을 EtOAc(50mL) 및 H2O(80mL)에 용해시켰다. 유기상을 분리하고 수성상을 EtOAc(50mL x 2)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(20mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 MTBE(30mL)로 25℃에서 30분 동안 분쇄했다. 화합물 6-브로모-2-모르폴리노-8-비닐-크로멘-4-온(6.9g, 미정제)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400MHz) δ 8.09 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.12 (q, J = 11.2, 1H), 6.13 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.60 ~5.55 (m, 2H), 3.77~3.69 (m, 4H), 3.55~3.49 (m, 4H).
6-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-8-카르브알데히드의 제조 (방식 1의 단계 5)
THF(50mL) 및 H2O(10mL) 중의 6-브로모-2-모르폴리노-8-비닐-크로멘-4-온(6.3g, 18.74mmol, 1당량)의 용액에 K2OsO4 .2H2O(345.25mg, 937.00umol, 0.05당량)를 25℃에서 첨가하고 반응 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반했다. NaIO4(12.02g, 56.22mmol, 3.12mL, 3당량)를 0℃에서 혼합물에 조금씩 첨가했다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.23)는 6-브로모-2-모르폴리노-8-비닐-크로멘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(100mL)로 ??칭하고 에틸 아세테이트(80mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(50mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트~ EtOAc:MeOH=30:1~4:1)로 정제했다. 화합물 6-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-8-카르브알데히드(5.2g, 15.38mmol, 82.06% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400MHz) δ 10.33 (s, 1H), 8.24~8.21 (m, 2H), 5.66 (s, 1H), 3.72~3.75 (m, 4H), 3.61~3.63 (m, 4H).
6-브로모-8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 1의 단계 6)
CH3CN(2mL) 중의 6-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-8-카르브알데히드(5.2g, 15.38mmol, 1당량) 및 3,5-디플루오로아닐린(3.97g, 30.76mmol, 2당량)의 혼합물에 Et3SiH(10.73g, 92.27mmol, 14.74mL, 6당량) 및 TFA(7.01g, 61.51mmol, 4.55mL, 4당량)를 25℃에서 첨가했다. 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 6-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-8-카르브알데히드가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 조정했다. 혼합물을 에틸 아세테이트(80mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(80mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=50/1 내지 0:1)로 정제했다. 화합물 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(1.8g, 3.99mmol, 25.94% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400MHz) δ 7.89 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.34~6.28 (m, 3H), 5.59 (s, 1H), 4.53 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.72~3.67 (m, 4H), 3.53~3.50 (m, 4H).
방식 1의 최종 화합물의 제조 (방식 1의 단계 7)
디옥산(4.5mL/mmol~9.0mL/mmol) 중의 6-브로모-8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(332.40umol, 1당량), R'NHR"(997.21umol~1.662mmol, 3당량~5당량), Pd2(dba)3(33.24umol~66.48umol, 0.1당량~0.2당량), XPhos(49.86umol~99.72umol, 0.15당량~0.3당량) 및 Cs2CO3(997.21umol~2.66mmol, 3당량~8당량)의 혼합물을 100℃에서 10시간~12시간 동안 N2 하에서 교반했다. HPLC 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 여과 후, 여액을 감소된 압력 하에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc에 용해시키고 물로 세척했다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*30mm*3um 또는 Phenomenex luna C18 80*40mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 30%-45%, 10분 또는 [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 20%-50%, 7분)로 정제했다. 수용액을 동결 건조하여 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 1
8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2,6-디모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 1의 단계 7)
디옥산(3mL) 중의 6-브로모-8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(150mg, 332.40umol, 1당량), 모르폴린(86.88mg, 997.21umol, 87.75uL, 3당량), Pd2(dba)3(30.44mg, 33.24umol, 0.1당량), XPhos(23.77mg, 49.86umol, 0.15당량) 및 Cs2CO3(324.91mg, 997.21umol, 3당량)의 혼합물을 100℃에서 10시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.2) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 여과 후, 여액을 감소된 압력 하에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc(5mL)에 용해시키고 물(2mL x 2)로 세척했다. 합쳐진 유기층을 염수(2mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*30mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 30%-45%, 10분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2,6-디모르폴리노-4H-크로멘-4-온(26.3mg, 57.49umol, 17.30% 수율)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.30 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.75 (t, J = 2.8 Hz, 1H), 6.31~6.25 (m, 3H), 5.50 (s, 1H), 4.45 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.74 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.66 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.46 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.09 (t, J = 4.4 Hz, 4H). HPLC: 97.61% (220 nm), 99.42% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H25F2N3O4 457.18 m/z found 458.2 [M+H]+.
화합물 2
8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-6-(디메틸아미노)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 1의 단계 7에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(22.2mg, 48.48umol, 10.94% 수율, 98.69% 순도)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.20~7.09 (m, 2H), 6.33~6.21 (m, 3H), 5.65 (s, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.71~3.59 (m, 8H), 2.92 (s, 6H). HPLC: 98.69% (220 nm), 98.47% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H23F2N3O3 415.17 m/z found 416.2 [M+H]+.
화합물 3
8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르보니트릴의 제조 (방식 1의 단계 7)
DMA(1mL) 중의 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(0.1g, 221.60umol, 1당량)의 용액에 Zn(CN)2(78.07mg, 664.80umol, 42.20uL, 3.0당량), DPPF(19.66mg, 35.46umol, 0.16당량) 및 Pd2(dba)3(16.23mg, 17.73umol, 0.08당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 170℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과했다. 여액을 prep-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 150*25mm*5um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 25%-45%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르보니트릴(27.5mg, 69.20umol, 31.23% 수율)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.20 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.94~6.79 (m, 1H), 6.37~6.22 (m, 3H), 5.65 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.75~3.67 (m, 4H), 3.56~3.49 (m, 4H). HPLC: 96.81% (220 nm), 99.10% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C21H17F2N3O3 397.12 m/z found 398.1 [M+H]+.
화합물 4
8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-6-에톡시-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 1의 단계 7)
EtOH(0.3mL) 및 톨루엔(0.2mL) 중의 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(0.15g, 332.40umol, 1당량) 및 EtONa(67.86mg, 997.21umol, 3당량)의 혼합물에 ditert-부틸-[2-(2,4,6-트리이소프로필페닐)페닐]포스판(28.23mg, 66.48umol, 0.2당량), Pd(OAc)2(7.46mg, 33.24umol, 0.1당량) 및 Cs2CO3(162.45mg, 498.60umol, 1.5당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Xtimate C18 100*30mm*3um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 30%-60%, 8분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[(3,5-디플루오로아닐리노) 메틸]-6-에톡시-2-모르폴리노-크로멘-4-온(4.9mg, 11.77umol, 3.54% 수율)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.24 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.40~6.21 (m, 3H), 5.61 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.04 (q, J = 8.0 Hz, 2H), 3.69~3.67 (m, 4H), 3.52~3.50 (m, 4H), 1.31 (t, J = 6.8 Hz, 3H). HPLC: 93.72% (220 nm), 96.88% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H22F2O4N2 416.15 m/z found 417.1 [M+H]+.
화합물 5
8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-6-에티닐-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 1의 단계 7)
8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-6-((트리메틸실릴)에티닐)-4H-크로멘-4-온의 제조
MeCN(3mL) 중의 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(0.18g, 398.88umol, 1당량) 및 에티닐(트리메틸)실란 (195.89mg, 1.99mmol, 276.29 uL, 5당량)의 혼합물에 [2-(2-아미노페닐)페닐]-클로로-팔라듐tritert-부틸포스판(20.44mg, 39.89umol, 0.1당량) 및 N-사이클로헥실-N-메틸-사이클로헥산아민(233.75mg, 1.20mmol, 253.80 uL, 3당량)을 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 반응 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 감소된 압력 하에서 농축했다. 화합물 8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-6-(2-트리메틸실릴 에티닐)크로멘-4-온(0.18g, 미정제)을 노란색 고체로서 얻었다. MS (ESI): mass calcd. For C25H26F2O3N2Si 468.57 m/z found 469.0 [M+H]+.
8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-6-에티닐-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조
MeOH(2mL) 중의 8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-6-(2-트리메틸실릴에티닐) 크로멘-4-온(0.17g, 362.81umol, 1당량)의 용액에 K2CO3(100.28mg, 725.62umol, 2당량)를 25℃에서 첨가하고 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-6-(2-트리메틸실릴에티닐)크로멘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 2M HCl을 사용하여 pH=7로 조정했다. 수성상을 에틸 아세테이트(15mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Xtimate C18 100*30mm*3um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 30%-60%, 6분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-6-에티닐-2-모르폴리노-크로멘-4-온(8.3mg, 18.78umol, 5.18% 수율, 97.94% 순도, HCl)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.85 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.35~6.21 (m, 3H), 5.59 (s, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.23 (s, 1H), 3.71~3.66 (m, 4H), 3.53~3.51 (m, 4H). HPLC: 97.94% (220 nm), 99.62% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H18F2O3N2 396.13 m/z found 397.1 [M+H]+.
화합물 6
6-사이클로프로필-8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 1의 단계 7)
디옥산(10mL) 및 H2O(2mL) 중의 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(0.2g, 443.20umol, 1당량) 및 사이클로프로필보론산(304.56mg, 3.55mmol, 8당량)의 혼합물에 PCy3(12.43mg, 44.32umol, 14.37uL, 0.1당량), K3PO4(188.15mg, 886.41umol, 2당량) 및 Pd(OAc)2(4.98mg, 22.16umol, 0.05당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX C18 75*30mm*3um; 이동상: [물(0.05% NH3H2O + 10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 35%-60%, 8분)로 정제했다. 용매를 농축하고 얻은 것을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex luna C18 80*40mm*3um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 42%-52%, 7분)로 추가로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 6-사이클로프로필-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(7.2mg, 16.84umol, 3.80% 수율, 96.49% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.51 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.36~6.22 (m, 3H), 5.60 (s, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.68~3.66 (m, 4H), 3.53~3.48 (m, 4H), 2.03~1.96 (m, 1H), 0.98~0.96 (m, 2H), 0.66~0.58 (m, 2H). HPLC: 98.24% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C23H22F2O3N2 412.16 m/z found 413.1 [M+H]+.
화합물 7
3-(8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)-1,1-디메틸우레아의 제조 (방식 1의 단계 7)
디옥산(3mL) 중의 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(0.2g, 443.20umol, 1당량) 및 1,1-디메틸우레아(78.10mg, 886.41umol, 2당량)의 혼합물에 Cs2CO3(288.81mg, 886.41umol, 2당량) 및 BrettPhos Pd G3(40.18mg, 44.32umol, 0.1당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 6-브로모-8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(컬럼: Welch Xtimate C18 150*25mm*5um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 20%-40%, 8분)로 정제했다. 화합물 3-[8-[(3,5-디플루오로아닐리노)메틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]-1,1-디메틸-우레아(8.7mg, 17.13umol, 3.86% 수율, 97.43% 순도, HCl)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.50 (s, 1H), 7.93 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.26~6.24 (m, 3H), 5.50 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.69~3.67 (m, 4H), 3.50~3.48 (m, 4H), 2.91 (s, 6H). HPLC: 97.42% (220 nm), 99.13% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H24F2O4N4 458.18 m/z found 459.2 [M+H]+.
화합물 8
N-(8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)아세트아미드의 제조 (방식 1의 단계 7)
디옥산(3mL) 중의 6-브로모-8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(0.15g, 332.40umol, 1당량), 아세트아미드(58.90mg, 997.21umol, 3당량), CuI(12.66mg, 66.48umol, 0.2당량), N1,N2-디메틸에탄-1,2-디아민(5.86mg, 66.48umol, 7.16 uL, 0.2당량) 및 Cs2CO3(324.91mg, 997.21umol, 3당량)의 혼합물을 100℃에서 10시간 동안 N2 하에서 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 여과 후, 여액을 감소된 압력 하에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex luna C18 80*40mm*3um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 19%-49%, 7분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 N-(8-(((3,5-디플루오로페닐)아미노)메틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)아세트아미드(42.8mg, 91.87umol, 27.64% 수율, HCl)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 10.13 (s, 1H), 8.20 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.26~6.23 (m, 3H), 5.61 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 3.70 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.52 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.02 (s, 3H). HPLC: 94.83% (220 nm), 97.01% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H21F2N3O4 429.15 m/z found 430.2 [M+H]+.
방식 2
방식 2에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
6-브로모-4-하이드록시-8-요오도-2H-크로멘-2-티온의 제조 (방식 2의 단계 1)
THF(500mL) 중의 1-(5-브로모-2-하이드록시-3-요오도-페닐)에탄온(42g, 123.19mmol, 1.0당량)의 용액에 NaHMDS(1M, 431.16mL, 3.5당량)를 -65℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 -65℃로 냉각시키고 CS2(15.01g, 197.10mmol, 11.91mL, 1.6당량)를 적하했다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반했다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 얼음물(1000mL)에 붓고 농축된 HCl을 사용하여 pH를 4까지 천천히 조정했다. 유기층을 분리하고 수성상을 EtOAc(500mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(300mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 DCM(30mL)로 25℃에서 300분 동안 분쇄했다. 화합물 6-브로모-4-하이드록시-8-요오도-크로멘-2-티온(80g, 208.88mmol, 56.52% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.33 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H).
6-브로모-2-(에틸티오)-8-요오도-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 2의 단계 2)
아세톤(100mL) 중의 6-브로모-4-하이드록시-8-요오도-크로멘-2-티온(70g, 182.77mmol, 1.0당량)의 용액에 K2CO3(30.31g, 219.32mmol, 1.2당량) 및 EtI(99.77g, 639.69mmol, 51.16mL, 3.5당량)를 25℃에서 첨가했다. 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 잔류물을 EtOAc(300mL)에 용해시키고 0.05N HCl을 사용하여 pH=7이 될 때까지 세척했다. 합쳐진 유기층을 염수(100mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 EtOAc(120mL)로 25℃에서 30분 동안 분쇄했다. 화합물 6-브로모-2-에틸설파닐-8-요오도-크로멘-4-온(60g, 145.97mmol, 79.86% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.40 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 3.29~3.26 (m, 2H), 1.39 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
6-브로모-8-요오도-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 2의 단계 3)
CH3CN(300mL) 중의 6-브로모-2-에틸설파닐-8-요오도-크로멘-4-온(50g, 121.64mmol, 1.0당량)의 용액에 모르폴린(31.79g, 364.92mmol, 32.11mL, 3당량)을 25℃에서 첨가하고 반응 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 미정제 생성물을 석유 에테르(200mL x 2)로 25℃에서 30분 동안 분쇄했다. 화합물 6-브로모-8-요오도-2-모르폴리노-크로멘-4-온(49g, 112.38mmol, 92.38% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.29 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 3.78~3.73 (m, 4H), 3.63~3.60 (m, 4H).
6-브로모-2-모르폴리노-8-비닐-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 2의 단계 4)
디옥산(60mL) 및 H2O(10mL) 중의 6-브로모-8-요오도-2-모르폴리노-크로멘-4-온(5g, 11.47mmol, 1.0당량) 및 칼륨 트리플루오로(비닐)보라누이드(1.69g, 12.61mmol, 1.1당량)의 혼합물에 K2CO3(3.17g, 22.93mmol, 2.0당량) 및 Pd(dppf)Cl2(419.52mg, 573.34umol, 0.05당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 70℃에서 4시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 농축했다. 잔류물을 EtOAc(80mL) 및 H2O(80mL)에 용해시켰다. 유기상을 분리하고 수성상을 에틸 아세테이트(50mL x 2)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(50mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 MTBE(30mL)로 25℃에서 50분 동안 분쇄했다. 화합물 6-브로모-2-모르폴리노-8-비닐-크로멘-4-온(3.8g, 11.30mmol, 98.58% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.08 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 11.2 Hz, 17.6 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.60~5.55 (m, 2H), 3.73~3.71 (m, 4H), 3.55~3.51 (m, 4H).
6-브로모-8-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 2의 단계 5)
HBr(40mL, 48%) 중 6-브로모-2-모르폴리노-8-비닐-크로멘-4-온(3.8g, 11.30mmol, 1.0당량)의 용액을 100℃에서 12시간 동안 교반했다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 노란색 고체를 일부 형성했다. 여과 후, 화합물 6-브로모-8-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-크로멘-4-온(3.8g, 9.11mmol, 80.60% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.99 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.85 (s, 1H), 5.63~5.61 (m, 1H), 3.76~3.71 (m, 8H), 1.39 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
6-브로모-8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 2의 단계 6)
DMA(40mL) 중의 6-브로모-8-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-크로멘-4-온(3.8g, 9.11mmol, 1.0당량) 및 3,5-디플루오로아닐린 (4.71g, 36.44mmol, 4.0당량)의 혼합물을 50℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(100mL)에 붓고 에틸 아세테이트(50mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(40mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피(Biotage; 40g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 석유 에테르의 용리액/에틸 아세테이트~에틸 아세테이트:MeOH=40:1~4:1)로 정제했다. 화합물 6-브로모-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘 4-온(1.6g, 3.44mmol, 37.74% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.87 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.26 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 5.60 (s, 1H), 5.03~4.92 (m, 1H), 3.76~3.70 (m, 4H), 3.58~3.51 (m, 4H), 1.49 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
방식 2의 최종 화합물의 제조 (방식 2의 단계 7)
방법 A: 디옥산(5mL/mmol~14mL/mmol) 중의 6-브로모-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(279.40umol, 1.0당량) 및 R'NHR"(838.20umol~1.40mmol, 3당량~5당량)의 혼합물에, CuI(111.76umol~558.80umol, 0.4당량~2.0당량), N,N'-디메틸에탄-1,2-디아민(55.88umol~139.70umol, 0.2당량~0.5당량) 및 Cs2CO3(838.19umol, 3.0당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 100℃에서 10시간~48시간 동안 교반했다.
방법 B: 디옥산(5mL/mmol~14mL/mmol) 중의 6-브로모-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(279.40umol, 1.0당량) 및 R'NHR"(838.20umol~1.40mmol, 3당량~5당량)의 혼합물에, [2-(2-아미노페닐) 페닐메틸설포닐옥시-팔라듐 디사이클로헥실-[3,6-디메톡시-2-(2,4,6-트리이소프로필페닐) 페닐]포스판(27.94umol, 0.1당량) 및 Cs2CO3(838.19umol, 3.0당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 100℃에서 10시간~48시간 동안 교반했다.
준비: LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 100*25mm*3um 또는 Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um; 이동상: [물(0.05% HCl) - MeCN]; B%: 25%-55%, 8분 또는 [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 35% - 45%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조하여 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 9
방법 B를 이용한 N-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)-N-메틸아세트아미드의 제조 (방식 2의 단계 7)
디옥산(3mL) 중의 6-브로모-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(150mg, 322.38umol, 1.0당량) 및 N-메틸아세트아미드(117.82mg, 1.61mmol, 123.11 uL, 5.0당량)의 혼합물에 [2-(2-아미노페닐)페닐메틸설포닐옥시-팔라듐 디사이클로헥실-[3,6-디메톡시-2-(2,4,6-트리이소프로필페닐)페닐]포스판(29.22mg, 32.24umol, 0.1당량) 및 Cs2CO3(210.08mg, 644.76umol, 2.0당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(컬럼: Welch Xtimate C18 100*25mm*3um; 이동상: [물(0.05% HCl) - MeCN]; B%: 25%-55%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 얻어진 생성물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um; 이동상: [물(NH4HCO3) - MeCN]; B%: 15%-40%, 8분)로 추가로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 N-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]-N-메틸-아세트아미드(26.4mg, 57.44umol, 17.82% 수율, 99.54% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.41~7.39 (m, 1H), 6.87 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.28~6.13 (m, 3H), 5.59 (s, 1H), 4.99~4.97 (m, 1H), 3.74~3.72 (m, 4H), 3.57~3.64 (m, 4H), 3.16 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 1.53 (d, J = 6.4 Hz, 3H). HPLC: 99.55% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H25F2O4N3 457.18 m/z found 458.2 [M+H]+.
화합물 10
4-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)모르폴린-3-온을 방법 A를 이용하여 방식 2의 단계 7에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(52.5mg, 102.01umol, 36.51% 수율, 94.33% 순도)을 방법 A를 이용하여 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.78 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.28~6.06 (m, 3H), 5.58 (s, 1H), 4.98~4.96 (m, 1H), 4.18 (s, 2H), 3.98~3.93 (m, 2H), 3.76~3.64 (m, 6H), 3.57~3.51 (m, 4H), 1.49 (d, J = 6.8 Hz, 3H). HPLC: 94.33% (220 nm), 99.63% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H25F2N5O3 485.18 m/z found 486.1 [M+H]+.
화합물 11
N-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)프로피온아미드를 방법 A를 이용하여 방식 2의 단계 7에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(3.2mg, 7.00umol, 2.50% 수율)을 방법 A를 이용하여 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10.02 (s, 1H), 8.13 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.01~6.99 (m, 1H), 6.23~6.07 (m, 3H), 5.54 (s, 1H), 4.94~4.92 ( m, 1H), 3.73~3.71 (m, 4H), 3.54 ~ 3.51 (m, 4H), 2.50~2.27 (m, 2H), 1.49 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.06 (t, J = 7.6 Hz, 3H). LCMS: 94.64 % (220 nm), 98.87 % (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H25F2N3O4 457.18, m/z found 458.1 [M+H]+.
화합물 12
N-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)사이클로펜탄카르복스아미드를 방법 A를 이용하여 방식 2의 단계 7에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(30.6mg, 59.09umol, 21.15% 수율, 96.08% 순도)을 방법 A를 이용하여 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 10.01 (s, 1H), 8.12 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.20 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.11~6.08 (m, 2H), 5.50 (s, 1H), 4.93~4.90 (m, 1H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.53~3.49 (m, 4H), 2.74~2.70 (m, 1H), 1.80~2.07 (m, 2H), 1.70~1.66 (m, 4H), 1.52 (s, 2H), 1.47 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS: 96.08% (220 nm), 99.64% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H29F2N3O4 497.21 m/z found 498.2 [M+H]+.
화합물 13
N-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)메탄설폰아미드를 방법 A를 이용하여 방식 2의 단계 7에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(12.5mg, 29.49umol, 20.15% 수율, 97.30% 순도)을 방법 A를 이용하여 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.86 (s, 1H), 7.62 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.24~6.19 (m, 1H), 6.12~6.09 (m, 2H), 5.56 (s, 1H), 4.94 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.55~3.30 (m, 4H), 2.85 (s, 3H), 1.49 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS: 98.01% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H23F2N3O5S 479.13 m/z found 480.1 [M+H]+.
화합물 14
2-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)구아니딘을 방법 A를 이용하여 방식 2의 단계 7에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(48.3mg, 106.45umol, 24.76% 수율, 97.73% 순도)을 방법 A를 이용하여 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.99 (s, 1H), 7.62 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 4H), 7.38 (s, 1H), 6.25~6.13 (m, 3H), 5.71 (s, 1H), 4.98~4.95 (m, 1H), 3.78~3.73 (m, 4H), 3.69~3.63 (m, 4H), 1.50 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS: 97.73% (220 nm), 98.13% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H23F2N5O3 443.18 m/z found 444.1 [M+H]+.
방식 3
화합물 15
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-6-하이드록시-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 3의 단계 1-2)
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 3의 단계 1)
디옥산(3mL) 중의 6-브로모-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(0.3g, 644.76umol, 1당량), BPD(491.19mg, 1.93mmol, 3당량), Pd(dppf)Cl2(47.18mg, 64.48umol, 0.1당량) 및 AcOK(189.83mg, 1.93mmol, 3당량)의 혼합물을 탈기하고 N2로 3회 퍼지(purge)하고 이어서 혼합물을 N2 분위기 하에서 100℃에서 15시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축했다. 화합물 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)크로멘-4-온(1.170g, 미정제)을 갈색 오일로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 8.18 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.04 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.24 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 5.56 (s, 1H), 4.99 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.74 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.55 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 1.48 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.29 (s, 12H).
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-6-하이드록시-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 3의 단계 2)
THF(20mL) 및 H2O(20mL) 중의 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)크로멘-4-온(1.1g, 2.15mmol, 1당량)의 용액에 나트륨 3-옥시도디옥사보리난 사수화물(5.82g, 37.84mmol, 7.28mL, 17.62당량)을 첨가했다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)크로멘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 EtOAc(45mL) 및 H2O(15mL) 사이에 분배했다. 수성상을 분리하고 이어서 EtOAc(10mL x 3)로 추출했다. 유기층을 염수(10mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-50%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-6-하이드록시-2-모르폴리노-크로멘-4-온(56.5mg, 140.41umol, 40.36% 수율, 100.00% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.74 (s, 1H), 7.13 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.24 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 5.60 (s, 1H), 4.92 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.74 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.58~3.53 (m, 4H), 1.48 (d, J = 6.4 Hz, 3H). LCMS:100.00% (220 nm),100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C21H20F2N2O4 402.14 m/z found 403.1 [M+H]+.
방식 4
방식 4에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-설포닐 플루오라이드의 제조 (방식 4의 단계 1)
i-PrOH(15mL) 중의 6-브로모-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(1g, 2.15mmol, 1.0당량) 및 1,4-디아조니아비시클로[2.2.2]옥탄-1,4-디설피네이트(568.10mg, 2.36mmol, 1.1당량)의 혼합물에 Et3N(652.43mg, 6.45mmol, 897.43uL, 3.0당량) 및 4-ditert-부틸포스파닐-N,N-디메틸-아닐린 디클로로팔라듐(152.18mg, 214.92umol, 152.18uL, 0.1당량)을 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 85℃에서 12시간 동안 교반하고 이어서 25℃로 냉각했다. 상기 반응 혼합물에 NFSI(1.02g, 3.22mmol, 1.5당량)를 첨가하고 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LC-MS는 ~20%의 8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온 및 ~65%의 원하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 농축했다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트~EtOAc:MeOH=40:1~4:1)로 정제했다. 용매를 농축했다. 화합물 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-설포닐 플루오라이드(0.48g, 1.02mmol, 11.92% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.38 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.33~6.11 (m, 3H), 5.75 (s, 1H), 5.11~4.98 (m, 1H), 3.77~3.72 (m, 4H), 3.65~3.54 (m, 4H), 1.54 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
방식 4의 화합물의 제조 (방식 4의 단계 2)
MeCN(6mL/mmol~12mL/mmol) 중의 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-설포닐 플루오라이드(156.90umol, 1.0당량) 및 R1NHR2(0.31mmol, 2.0당량, HCl 또는 유리 염기)의 혼합물에 DIEA(0.47mmol, 390.42uL, 3.0당량)를 실온에서 적하했다. 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반했다. HPLC 및 LC-MS는 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-설포닐 플루오라이드가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(5mL)로 ??칭하고 에틸 아세테이트(5mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(5mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex luna C18 80*40mm*3um 또는 Phenomenex Gemini-NX C18 75*30mm*3um 또는 Waters Xbridge BEH C18 10*30mm*10um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 32%-54%, 7분 또는 [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-45%, 8분 또는 [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 30%-60%, 10분)로 정제했다. 수용액을 동결 건조하여 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 16
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-N-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-설폰아미드의 제조 (방식 4의 단계 2)
CH3CN(5mL) 중의 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-설포닐 플루오라이드(0.31g, 661.76umol, 1당량) 및 메탄아민(89.36mg, 1.32mmol, 2당량, HCl)의 혼합물에 DIEA(256.58mg, 1.99mmol, 345.80uL, 3당량)를 25℃에서 첨가했다. 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반했다. HPLC 및 LC-MS는 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-설포닐 플루오라이드가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(20mL)로 ??칭하고 수성상을 에틸 아세테이트(15mL x 3)로 추출했다.합쳐진 유기상을 염수(10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 20%-50%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-N-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-설폰아미드(118.9mg, 247.97umol, 37.47% 수율, 100% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 8.20 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.49~7.51 (m, 1H), 7.05 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.25~6.14 (m, 3H), 5.66 (s, 1H), 5.03~5.00 (m, 1H), 3.74~3.72 (m, 4H), 3.60~3.53 (m, 4H), 2.22 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 1.53 (d, J = 6.4 Hz, 3H). LCMS:100.00% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H23F2N3O5S 479.13 m/z found 480.1 [M+H]+.
화합물 17
6-((3-아미노아제티딘-1-일)설포닐)-8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 4의 단계 2에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.)
원하는 화합물(18.8mg, 33.96umol, 11.71% 수율, 94.02% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 8.10 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.24~6.18 (m, 3H), 5.70 (s, 1H), 5.09~5.02 (m, 1H), 3.78~3.72 (m, 4H), 3.63~3.56 (m, 5H), 3.31~3.24 (m, 2H), 3.05~3.02 (m, 1H), 2.90~2.87 (m, 1H), 1.55 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS: 94.02% (220 nm), 94.50% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H26F2N4O5S 520.16 m/z found 521.2 [M+H]+.
화합물 18
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-설폰산의 제조 (방식 4의 단계 3)
MeOH(10mL) 중의 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-설포닐 플루오라이드(120mg, 256.17umol, 1.0당량)의 용액에 암모니아 포름산(484.58mg, 7.68mmol, 30당량)을 첨가했다. 혼합물을 50℃에서 4시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-설포닐 플루오라이드가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 진공에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*25mm*5um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 15%-45%, 10분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-설폰산(30mg, 64.58umol, 24.71% 수율, 99.58% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, D2O) δ 8.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.09~6.03 (m, 3H), 5.63 (s, 1H), 4.85~4.83 (m, 1H), 3.79~3.78 (m, 4H), 3.58~3.57 (m, 4H), 1.48 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS: 99.58% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C21H20F2N2O6S 466.10 m/z found 467.1 [M+H]+.
방식 5
방식 5에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
tert-부틸(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)카르바메이트의 제조 (방식 5의 단계 1)
디옥산(10mL) 중의 6-브로모-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(1g, 2.15mmol, 1당량), tert-부틸 카르바메이트(755.31mg, 6.45mmol, 5.76uL, 3당량), CuI(409.32mg, 2.15mmol, 1당량), N,N'-디메틸에탄-1,2-디아민(56.84mg, 644.76umol, 69.40uL, 0.3당량) 및 Cs2CO3(2.10g, 6.45mmol, 3당량)의 혼합물을 탈기하고 N2 로 3회 퍼지했다. 이어서 혼합물을 100℃에서 10시간 동안 N2 분위기 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=1:1, Rf=0.25), LC-MS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(10mL)로 ??칭하고 수성상을 에틸 아세테이트(15mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피 (Biotage; 12g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~100% 에틸 아세테이트 그래디언트의 용리액 @ 60mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 tert-부틸N-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]카르바메이트(0.55g, 1.10mmol, 51.03% 수율)를 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.52 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.65 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.23~6.08 (m, 3H), 5.51 (s, 1H), 4.90 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.50 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 1.45~1.49 (m, 12H).
화합물 19
6-아미노-8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 5의 단계 2)
EtOAc(2mL) 중의 tert-부틸 N-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]카르바메이트(0.66g, 1.28mmol, 1당량)의 용액에 HCl/EtOAc(4M, 6.69mL, 24.39당량)를 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 6시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 연노란색 침전물을 형성했다. 여과 후, 고체를 수집 및 건조시켰다. 화합물 6-아미노-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(471mg, 1.08mmol, 98.09% 수율, HCl)을 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.62 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.30~5.97 (m, 3H), 5.71 (s, 1H), 4.96~4.94 (m, 1H), 3.78~3.76 (m, 4H), 3.57~3.54 (m, 4H), 1.49 (d, J = 9.6 Hz, 3H). HPLC: 95.08% (220 nm), 96.94% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C21H21F2N3O3 401.16 m/z found 402.1 [M+H]+.
방식 5의 화합물의 제조 (방식 5의 단계 3)
피리딘(5mL/mmol) 또는 AcOH(10mL/mmol) 중의 6-아미노-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(274.06umol, 1당량, HCl)의 용액에 MeS-아민(1.37mmol, 5당량)을 첨가했다. 또는 THF(15mL/mmol) 중의 6-아미노-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(124.56umol, 1.0당량), 2-시아노아세트산(373.69umol, 3.0당량) 및 DIEA(622.81umol, 108.48 uL, 5.0당량)의 혼합물에 T3P(448.42umol, 266.69uL, 50% 순도, 3.6당량)를 0℃에서 적하했다. 이어서 혼합물을 25℃~150℃에서 4시간~15시간 동안 교반했다. HPLC 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하거나 또는 혼합물을 포화 NaOH 및 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 염기화시켰다. 침전물을 형성했다. 침전물을 여과에 의해 수집했다. 잔류물 또는 필터 케이크를 prep-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 100*25mm*3um 또는 Phenomenex luna C18 80*40mm*3um; 이동상: [물(0.05% HCl) - MeCN]; B%: 15%-30%, 8분 또는 [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 27%-42%, 5.5분 또는 [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 23%-47%, 7분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다.
화합물 20
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-6-((4,5-디하이드로-1H-이미다졸-2-일)아미노)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 5의 단계 3)
피리딘(1.5mL) 중의 6-아미노-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(120mg, 274.06umol, 1당량, HCl)의 용액에 2-메틸설파닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-하이드로아이오다이드(334.48mg, 1.37mmol, 5당량)를 첨가했다. 혼합물을 150℃에서 15시간 동안 교반했다. HPLC 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 100*25mm*3um; 이동상: [물(0.05% HCl) - MeCN]; B%: 15%-30%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-6-((4,5-디하이드로-1H-이미다졸-2-일)아미노)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온(13.7mg, 26.34umol, 9.61% 수율, 97.28% 순도, HCl)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 10.64 (s, 1H), 8.40 (s, 2H), 7.67 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.23 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.15~6.13 (m, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.0~4.95 (m, 1H), 3.75~3.72 (m, 8H), 3.58~3.56 (m, 4H), 1.51 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS: 97.28% (220 nm), 98.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H25O3N5F2 469.19 m/z found 470.2 [M+H]+.
화합물 21
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-6-((4,4-디메틸-4,5-디하이드로옥사졸-2-일)아미노)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 5의 단계 3에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(4.7mg, 9.43umol, 4.13% 수율, 90.56% 순도)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.82 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 6.16 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.73 (s, 4H), 3.60~3.57 (m, 4H), 1.51 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 1.41 (s, 6H). LCMS: 90.56% (220 nm), 88.11% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H28F2N4O4 498.21 m/z found 499.2 [M+H]+.
화합물 22
2-시아노-N-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)아세트아미드를 방식 5의 단계 3에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(14.0mg, 29.42umol, 23.62% 수율, 98.45% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10.46 (s, 1H), 8.11 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.21 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 5.58 (s, 1H), 4.93 ( d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.73~3.71 (m, 4H), 3.64~3.53 (m, 4H), 1.49 (d, J = 6.5 Hz, 3H). LCMS: 98.45% (220 nm), 98.82% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H22F2N4O4 468.16 m/z found 469.1 [M+H]+.
화합물 23
(Z)-2-시아노-N-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)-3-하이드록시부트-2-에나미드를 방식 5의 단계 3에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(5.8mg, 10.03umol, 6.71% 수율, 94.59% 순도)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.12 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.27~6.07 (m, 3H), 5.73 (s, 1H), 5.02~4.84 (m, 1H), 3.77~3.70 (m, 4H), 3.67~3.62 (m, 4H), 2.19 (s, 3H), 1.49 (d, J = 6.8 Hz, 3H). HPLC: 94.60% (220 nm), 92.11% (254 nm).MS (ESI): mass calcd. For C26H24F2N4O5 510.17 m/z found 511.1 [M+H]+.
방식 6
화합물 24
2-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)-N,N-디메틸아세트아미드의 제조 (방식 6의 단계 1-3)
화합물 25
메틸 2-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)아세테이트의 제조 (방식 6의 단계 1)
6-브로모-8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(1g, 2.15mmol, 1당량), 디메틸프로판디오에이트(1.87g, 14.18mmol, 1.63mL, 6.6당량), tritert-부틸포스포늄 테트라플루오로보레이트(124.71mg, 429.84umol, 0.2당량), K3PO4(1.28g, 6.02mmol, 2.8당량), 18-크라운-6 (284.03mg, 1.07mmol, 0.5당량) 및 Pd2(dba)3(196.81mg, 214.92umol, 0.1당량)의 혼합물을 탈기하고 N2로 3회 퍼지하고 이어서 혼합물을 160℃에서 6시간 동안 N2 분위기 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=0:1, Rf=0.44), LC-MS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 필터 케이크를 에틸 아세테이트(10mL x 6)로 세척했다. 합쳐진 여액을 진공에서 농축했다. 잔류물을 물(100mL)로 ??칭하고 에틸 아세테이트(15mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(10mL x 3)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피 (Biotage; 20g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~100% 에틸 아세테이트, 0~40% MeOH/에틸 아세테이트 그래디언트의 용리액 @ 60mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거하여 804mg의 메틸 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세테이트를 얻었다. 30mg의 미정제 생성물을 prep-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 100*25mm*3um; 이동상: [물(0.05% HCl) - MeCN]; B%: 30%-45%, 8분)로 추가로 정제했다. 화합물 메틸 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸] -2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세테이트 (10.7mg, 22.37umol, 1.04% 수율, 95.83% 순도)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 7.74 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.23~6.18 (m, 1H), 6.14(t, J = 1.6 Hz, 2H), 5.73 (s, 1H), 4.98~4.93 (m, 1H), 3.75~3.71 (m, 6H), 3.70~3.59 (m, 7H), 1.50 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS: 95.83% (220 nm),96.03% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H24F2N2O5 458.17 m/z found 459.1 [M+H]+.
화합물 26
2-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)아세트산의 제조 (방식 6의 단계 2)
HCl(12M, 0.15mL, 8.25당량) 중의 메틸 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일] 아세테이트(0.1g, 218.12umol, 1당량)의 용액을 80℃에서 1시간 동안 교반했다. LC-MS는 메틸 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세테이트가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 포화 NaOH(0.5mL)를 사용하여 pH=5로 염기화시켰다. 생성된 침전물(150mg)을 여과에 의해 수집했다. 20mg의 침전물을 prep-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 100*25mm*3um; 이동상: [물(0.05% HCl) - MeCN]; B%: 25%-40%, 8분)로 추가로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세트산(2.4mg, 5.33umol, 2.44% 수율, 98.64% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.22~6.18 (m, 1H), 6.14~6.08 (m, 2H), 5.64 (s, 1H), 4.96~4.95(m, 1H), 3.74 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.63 (d, J = 3.2 Hz, 2H), 3.56~3.53 (m, 4H), 1.50 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS: 98.64% (220 nm), 99.38% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C23H22F2N2O5 444.15 m/z found 445.1 [M+H]+.
2-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)-N,N-디메틸아세트아미드의 제조 (방식 6의 단계 3)
THF(1.5mL) 중의 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세트산(130mg, 270.33umol, 1당량, HCl), DIEA(279.51mg, 2.16mmol, 376.70uL, 8당량) 및 N-메틸메탄아민하이드로클로라이드(132.27mg, 1.62mmol, 6당량)의 용액에 T3P(344.06mg, 540.67umol, 321.55 uL, 50% 순도, 2당량)를 0℃에서 적하했다. 추가 후, 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세트산이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물(0.5mL)을 첨가하여 ??칭했다. 혼합물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*25mm*5um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-50%, 10분)로 바로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]-N,N-디메틸-아세트아미드(10.4mg, 21.88umol, 8.09% 수율, 99.18% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.66 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.23~6.18 (m, 1H), 6.11 (dd, J = 2.0 Hz, 10.4 Hz, 2H), 5.54 (s, 1H), 4.97~4.91 (m, 1H), 3.76 (s, 4H), 3.72 (s, 2H), 3.57~3.51 (m, 4H), 2.84 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 1.50 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS: 99.18% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H27F2N3O4 471.20 m/z found 472.2 [M+H]+.
방식 7
방식 7에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
메틸 3-아세틸-4-하이드록시벤조에이트의 제조 (방식 7의 단계 1)
MeOH(300mL) 중의 1-(5-브로모-2-하이드록시-페닐)에탄온(10g, 46.50mmol, 1당량), Pd(dppf)Cl2(1.70g, 2.33mmol, 0.05당량) 및 TEA(9.41g, 93.00mmol, 12.95mL, 2당량)의 혼합물을 80℃에서 15시간 동안 CO(50 psi.) 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=5:1, Rf=0.45) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 여과 후, 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 잔류물을 EtOAc(100mL)에 용해시키고 0.5N HCl을 사용하여 pH=7까지 세척하고 염수(50mL x 3)로 세척했다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피 (Biotage®; 40g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~16% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @80mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 메틸 3-아세틸-4-하이드록시-벤조에이트(9g, 46.35mmol, 99.67% 수율)를 갈색 침상 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 12.20 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 2.67 (s, 3H).
메틸 3-아세틸-5-브로모-4-하이드록시벤조에이트의 제조 (방식 7의 단계 2)
DCM(400mL) 중의 메틸 3-아세틸-4-하이드록시-벤조에이트(37g, 190.54mmol, 1당량) 및 피리딘(60.29g, 762.17mmol, 61.52mL, 4당량)의 혼합물에 Br2(33.50g, 209.60mmol, 10.80mL, 1.1당량)를 0℃에서 적하했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=5:1, Rf=0.45)는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(300mL)에 붓고 2N HCl을 사용하여 천천히 pH=4로 만들었다. 유기층을 분리하고 수성 물질을 DCM(300mL x 2)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(300mL x 5)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 석유 에테르(200mL)로 분쇄했다. 고체를 여과 후 수집했다. 화합물 메틸 3-아세틸-5-브로모-4-하이드록시-벤조에이트(48.5g, 177.60mmol, 93.21% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 13.28 (s, 1H), 8.44 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.76 (s, 3H).
메틸 8-브로모-4-하이드록시-2-티옥소-2H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 7의 단계 3)
THF(200mL) 중의 에틸 3-아세틸-5-브로모-4-하이드록시-벤조에이트(40g, 146.48mmol, 1당량)의 용액에 NaHMDS(1 M, 512.67mL, 3.5당량)를 -50℃에서 적하했다. 혼합물을 -5℃~0℃에서 1시간 동안 N2 하에서 교반했다. 이어서 CS2(17.84g, 234.36mmol, 14.16mL, 1.6당량)를 -50℃에서 적하하고 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.2) 및 LCMS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(1L)에 붓고 농축된 HCl을 사용하여 천천히 pH=4로 만들었다. 유기층을 분리하고 수성 물질을 EtOAc(400mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(200mL x 5)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 DCM(100mL)으로 분쇄했다. 고체를 여과 후 수집했다. 화합물 메틸 8-브로모-4-하이드록시-2-티옥소-크로멘-6-카르복실레이트(28.5g, 67.73mmol, 46.24% 수율, 74.89% 순도)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.36 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.63 (s, 1H), 3.91 (s, 3H).
메틸 8-브로모-2-(에틸티오)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 7의 단계 4)
아세톤(600mL) 중의 메틸 8-브로모-4-하이드록시-2-티옥소-크로멘-6-카르복실레이트(28.5g, 90.44mmol, 1당량) 및 EtI(49.37g, 316.53mmol, 25.32mL, 3.5당량)의 용액에 K2CO3(15.00g, 108.52mmol, 25.55L, 1.20당량)를 첨가했다. 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=5:1, Rf=0.2) 및 LC-MS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 잔류물을 EtOAc(300mL)에 용해시키고 0.05N HCl을 사용하여 pH=7로 세척했다. 합쳐진 유기층을 염수(100mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 EtOAc(20mL)로 분쇄했다. 고체를 여과 후 수집했다. 화합물 메틸 8-브로모-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(25g, 72.85mmol, 80.55% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.44 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.42 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.26 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.40 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
메틸 8-아세틸-2-(에틸티오)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 7의 단계 5)
디옥산(150mL) 중의 메틸 8-브로모-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(10g, 29.14mmol, 1당량), 트리부틸(1-에톡시비닐)스탄난(13.33g, 36.91mmol, 12.46mL, 1.27당량) 및 Pd(PPh3)2Cl2(1.02g, 1.46mmol, 0.05당량)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=4:1, Rf=0.2) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 17.48mL의 2N HCl을 첨가하여 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 만들고, DCM(100mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(100mL x 3)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 석유 에테르 및 MTBE(v:v=10:1, 110mL x 2)로 분쇄했다. 고체를 여과 후 수집했다. 화합물 메틸 8-아세틸-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(8g, 26.12mmol, 89.63% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.64 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.22 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.72 (s, 3H), 1.36 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
메틸 2-(에틸티오)-8-(1-하이드록시에틸)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 7의 단계 6)
MeOH(70mL) 및 AcOH(41.17g, 685.53mmol, 39.21mL, 30당량) 중의 메틸 8-아세틸-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(7g, 22.85mmol, 1당량)의 용액에 NaBH3CN(2.87g, 45.70mmol, 2당량)을 20℃에서 조금씩 첨가하고 이어서 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=2:1, Rf=0.2) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(100mL)로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 노란색 고체를 일부 형성했다. 여과 후, 고체(2g)을 수집했다. 여액을 EtOAc(100mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 포화 NaHCO3로 pH=7까지 세척하고 염수(50mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 EtOAc(30mL)로 분쇄했다. 고체(3.2g)를 여과 후 수집했다. 여액을 감소된 압력 하에서 농축하고 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 20g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~7% DCM과 EtOAc 그래디언트의 용리액 @ 80mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 메틸 2-에틸설파닐-8-(1- 하이드록시에틸)-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(5.2g, 16.86mmol, 73.80% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.44 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 5.64 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.24 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.23 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.40 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.37 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
메틸 8-(1-브로모에틸)-2-(에틸티오)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 7의 단계 7)
DCM(100mL) 중의 메틸 2-에틸설파닐-8-(1-하이드록시에틸)-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(4g, 12.97mmol, 1당량)의 용액에 PPh3(5.10g, 19.46mmol, 1.5당량) 및 CBr4(6.45g, 19.46mmol, 1.5당량)를 0℃에서 교반하면서 조금씩 첨가했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=1:1, Rf=0.8)는 원하는 더 낮은 극성을 갖는 하나의 주요한 새 지점이 검출되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 20℃에서 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 120g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~20% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 100mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 메틸 8-(1-브로모에틸)-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(3.5g, 9.43mmol, 72.68% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.49 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.88 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.27 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.12 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.39 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
메틸 8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-(에틸티오)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 7의 단계 8)
DMA(20mL) 중의 메틸 8-(1-브로모에틸)-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(2g, 5.39mmol, 1당량) 및 3,5-디플루오로아닐린(1.25g, 9.70mmol, 1.8당량)의 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=2:1, Rf=0.3)는 더 큰 극성을 갖는 하나의 주요한 새 지점이 검출되었음을 나타냈다. 혼합물을 20℃로 냉각시켰다. 잔류물을 얼음물(w/w=1/1,100mL)에 붓고 5분 동안 교반했다. 수성상을 에틸 아세테이트(50mL x 3)로 추출했다.합쳐진 유기상을 염수(30mL x 2)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 40g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~20% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 100mL/분)로 정제했다. 메틸 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(1.4g, 3.34mmol, 61.96% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.43 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.23 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 2.0 Hz, J = 14.0 Hz, 2H), 4.98 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.25 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.52 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.38 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
메틸 8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 7의 단계 9)
MeCN(5mL) 중의 메틸 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(0.6g, 1.43mmol, 1당량) 및 모르폴린(498.49mg, 5.72mmol, 503.53uL, 4당량)의 용액을 80℃에서 10시간 동안 교반했다. 모르폴린(249.25mg, 2.86mmol, 251.76uL, 4당량)을 첨가하고 혼합물을 80℃에서 10시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.15) 및 LC-MS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 잔류물을 EtOAc(10mL)로 분쇄했다. 고체를 수집했다. 화합물 메틸 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(0.47g, 1.06mmol, 73.93% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.39 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.22 (t, J = 4.0 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 2.0 Hz, J = 10.4 Hz, 2H), 5.63 (s, 1H), 5.00 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.75 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.58 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 1.50 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복시산의 제조 (방식 7의 단계 10)
HCl(12M, 4.50mL, 100당량) 중의 메틸 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(0.24g, 540.02umol, 1당량)의 용액을 80℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.05) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 흰색 고체를 일부 형성했다. 고체를 여과 후 수집하고 감소된 압력 하에서 농축했다. 고체를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용했다. 화합물 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복시산(0.2g, 464.68umol, 86.05% 수율)을 분홍색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.37 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.21 (t, J = 4.4 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 2.4 Hz, J = 10.4 Hz, 2H), 5.77 (s, 1H), 5.00 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 3.75 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.61 (t, J = 3.6 Hz, 4H), 1.50 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
(방식 7의 단계 11)의 화합물의 제조
THF(6mL/mmol~12mL/mmol) 및 DMF(2mL/mmol) 중의 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복시산, R'NHR"(255.57umol~697.02umol, 1.1당량~3당량) 및 DIEA(1.16mmol, 202.35uL, 5당량)의 혼합물에 T3P(302.04umol, 50% 순도, 1.3당량)를 0℃에서 적하하고 혼합물을 20℃에서 2시간~3시간 동안 교반했다. HPLC 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 EtOAc로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um 또는 Phenomenex Gemini-NX 80*30mm*3um 또는 Phenomenex Gemini-NX C18 80*30mm*5um 또는 Waters Xbridge BEH C18 100*25mm*5um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 15%-45%, 8분 또는 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-50%, 10분 또는; [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-55%, 8분)로 정제했다. 수용액을 동결 건조하여 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 27
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-6-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 7의 단계 11)
THF(3mL) 및 DMF(0.5mL) 중의 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복시산(0.1g, 232.34umol, 1당량), N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(34.49mg, 302.04umol, 1.3당량) 및 DIEA(150.14mg, 1.16mmol, 202.35uL, 5당량)의 혼합물에 T3P(192.21mg, 302.04umol, 179.63uL, 50% 순도, 1.3당량)를 0℃에서 적하하고 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반했다. HPLC 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 EtOAc(20mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(20mL x 3)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 15%-45%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 건조시켰다. 화합물 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-6-[3- (디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐]-2-모르폴리노-크로멘-4-온(46.1mg, 84.44umol, 36.34% 수율, 96.45% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.91 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 6.99~6.94 (m, 1H), 6.22~6.14 (m, 3H), 5.59 (s, 1H), 5.01 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 3.74 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.58~3.50 (m, 5H), 3.38~3.10 (m, 3H), 2.68~2.60 (m, 1H), 2.30~1.80 (m, 7H), 1.68~1.52 (m, 1H), 1.49 (d, J = 5.6 Hz, 3H). HPLC: 96.45% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C28H32F2N4O4 526.24 m/z found 527.3 [M+H]+.
화합물 28
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-6-(2,2-디옥시도-2-티아-6-아자스피로[3.3]헵탄-6-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 7의 단계 11에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(52.3mg, 89.94umol, 48.39% 수율, 96.23% 순도)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.02 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.84 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.22 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.16 (dd, J = 2.0 Hz, J = 7.2 Hz, 2H), 5.63 (s, 1H), 5.01 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 4.53~4.26 (m, 8H), 3.74 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.59 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 1.50 (d, J = 6.4 Hz, 3H). HPLC: 96.23% (220 nm), 99.02% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H27F2N3O6S 559.16 m/z found 560.2 [M+H]+.
화합물 29
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-6-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 7의 단계 11에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(103.1mg, 191.84umol, 48.57% 수율, 97.98% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.91 (s, 1H), 7.66 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 6.99~6.92 (m, 1H), 6.16~6.14 (m, 3H), 5.59 (s, 1H), 5.05~4.98 (m, 1H), 3.73 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.58~3.52 (m, 5H), 3.19~2.99 (m, 3H), 2.68~2.60 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.01~1.93 (m, 4H), 1.71~1.66 (m, 1H), 1.51 (d, J = 6.4 Hz, 3H). HPLC: 97.98% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C28H32F2N4O4 526.24 m/z found 527.3 [M+H]+.
화합물 30
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-6-((S)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 7의 단계 11에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(116.3mg, 215.45umol, 54.55% 수율, 97.55% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.91 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 6.98~6.96 (m, 1H), 6.22~6.14 (m, 3H), 5.59 (s, 1H), 5.00 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 3.73 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.58~3.52 (m, 5H), 3.28~2.92 (m, 3H), 2.69~2.60 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.93~1.80 (m, 4H), 1.68~1.63 (m, 1H), 1.49 (d, J = 5.6 Hz, 3H). HPLC: 97.55% (220 nm), 99.72% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C28H32F2N4O4 526.24 m/z found 527.3 [M+H]+.
방식 8
화합물 31
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)프로필)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조(방식 8의 단계 1-3)
8-(1-히드록시프로필)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 8의 단계 1)
THF(4mL) 중의 8-포르밀-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(0.3g, 908.17umol, 1당량)의 혼합물에 EtMgBr(3M, 605.45uL, 2당량)를 0℃에서 N2 하에서 적하하고 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반했다. 이어서 EtMgBr(3M, 302.72uL, 1당량)을 적하하고 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반했다. TLC(EtOAc:MeOH=20:1, Rf=0.15), HPLC 및 LCMS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 포화 NH4Cl(5mL)로 ??칭하고 0℃에서 1N HCl를 사용하여 pH=7로 만들었다. 수성 물질을 DCM:i-PrOH(v:v=3:1, 40mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(5mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 4g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~20% MeOH/에틸아세테이트 그래디언트의 용리액 @30mL/분) 로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 8-(1-하이드록시프로필)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(0.1g, 미정제) 및 8-(하이드록시메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 혼합물을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.79 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 5.56 (s, 1H), 5.44 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.04~5.00 (m, 1H), 3.74 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.54 (t, J = 8.4 Hz, 4H), 2.99 (s, 3H), 2.94 (s, 3H), 1.80~1.64 (m, 2H), 0.87 (t, J = 7.2 Hz, 3H). MS (ESI): mass calcd. For C19H24N2O5 360.17 m/z found 360.2 [M+H]+.
8-(1-브로모프로필)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 8의 단계 2))
DCE(1mL) 중의 8-(1-하이드록시프로필)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6- 카르복스아미드(0.1g, 277.47umol, 1당량) 및 8-(하이드록시메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드(277.47umol, 1당량)의 혼합물에 PBr3(150.22mg, 554.93umol, 52.71uL, 2당량)를 0℃에서 적하하고 이어서 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반했다. TLC(에틸 아세테이트:MeOH=15:1, Rf=0.56), HPLC 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(2mL)로 ??칭하고 포화 Na2CO3를 사용하여 pH=7로 만들었다. 수성 물질을 DCM(15mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(10mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 8-(1-브로모프로필)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(90mg, 212.62umol, 76.63% 수율) 및 8-(브로모메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 혼합물을 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.88 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 5.75 (s, 1H), 5.64~5.60 (m, 1H), 3.75 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.60 (t, J = 8.4 Hz, 4H), 3.00 (s, 3H), 2.93 (s, 3H), 2.36~2.32 (m, 2H), 0.99 (t, J = 7.2 Hz, 3H). MS (ESI): mass calcd. For C19H23BrN2O4 422.08 m/z found 423.1 [M+H]+.
8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)프로필)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 8의 단계 3)
DMA(1mL) 중의 8-(브로모메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(84.04mg, 212.62umol, 1당량) 및 8-(1-브로모프로필)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(90.00mg, 212.62umol, 1당량) 및 3,5-디플루오로아닐린(109.80mg, 850.46umol, 4당량)의 혼합물을 50℃에서 10시간 동안 교반했다. LCMS 및 HPLC는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 prep-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 100*25mm*3um; 이동상: [물(0.05% HCl) - MeCN]; B%: 20%-40%, 8분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)프로필]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(13.8mg, 29.20umol, 13.73% 수율, 99.76% 순도)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.80 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.93~6.90 (m, 1H), 6.23~6.15 (m, 3H), 5.66 (s, 1H), 4.82 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.76 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.61 (t, J = 8.4 Hz, 4H), 2.95 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 1.89~1.78 (m, 2H), 0.96 (t, J = 7.2 Hz, 3H). HPLC: 99.76% (220 nm), 99.78% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H27F2N3O4 471.20 m/z found 472.2 [M+H]+.
방식 9
방식 9에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 9의 단계 1)
MeCN(30mL) 중의 메틸 8-브로모-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(2g, 5.83mmol, 1당량) 및 모르폴린(2.03g, 23.31mmol, 2.05mL, 4당량)의 용액을 80℃에서 5시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=1:1, Rf=0.15) 및 LC-MS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 용매를 감소된 압력 하에서 제거하였다. 잔류물을 EtOAc(30mL)로 분쇄했다. 고체를 수집했다. 화합물 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(1.5g, 4.07mmol, 69.91% 수율)를 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.41 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 5.63 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.75 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.59 (t, J = 4.8 Hz, 4H).
메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 9의 단계 2)
디옥산(50mL) 및 H2O(5mL) 중의 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(3.9g, 10.59mmol, 1당량), Pd(dppf)Cl2(775.08mg, 1.06mmol, 0.1당량), K2CO3(2.93g, 21.19mmol, 2당량) 및 칼륨 하이드라이드 트리플루오로(비닐)보론(2.13g, 15.89mmol, 1.5당량)의 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.18) 및 LC-MS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 여과 후, 여액을 감소된 압력 하에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc(100mL) 및 물(100mL)에 용해시켰다. 황백색 고체를 일부 형성했다. 고체(2.2g)를 여과 후 수집했다. 여액을 EtOAc(300mL x 2)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(20mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 EtOAc(30mL)로 분쇄하여 0.3g의 생성물을 얻었다. 화합물 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복실레이트(2.5g, 7.93mmol, 74.85% 수율)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.41 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 6.0 Hz, J = 11.6 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.61~5.58 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.74 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.55 (t, J = 4.8 Hz, 4H).
2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복시산의 제조 (방식 9의 단계 3)
THF(20mL) 및 H2O(20mL) 중의 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복실레이트(4g, 12.69mmol, 1.0당량) 및 LiOH.H2O(1.60g, 38.06mmol, 3.0당량)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 2M HCl을 사용하여 pH=4로 조정했다. 노란색 침전물을 형성했다. 필터 케이크를 여과 후 수집했다. 화합물 2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복시산(3.49g, 11.58mmol, 91.31% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.40 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 11.2 Hz, 17.6 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.61~5.55 (m, 2H), 3.72~3.75 (m, 4H), 3.57~3.53 (m, 4H).
N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 4)
THF(30mL) 중의 2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복시산(1.4g, 4.65mmol, 1.0당량) 및 N-메틸메탄아민(1.14g, 13.95mmol, 1.28mL, 3.0당량, HCl)의 혼합물에 DIEA(3.00g, 23.25mmol, 4.05mL, 5.0당량) 및 T3P(2.22g, 6.98mmol, 2.07mL, 1.5당량)를 0℃에서 적하했다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반했다. 혼합물을 2M HCl을 사용하여 pH=6로 조정했다. 혼합물을 에틸 아세테이트(50mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(20mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐 -크로멘-6-카르복스아미드(1.7g, 미정제)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 11.2 Hz, 17.6 Hz, 1H), 6.09 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.62~5.50 (m, 2H), 3.77~3.72 (m, 4H), 3.58~3.51 (m, 4H), 3.06~2.92 (m, 6H).
8-포르밀-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 5)
THF(15mL) 및 H2O(10mL) 중의 N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복스아미드(1.7g, 5.18mmol, 1.0당량)의 용액에 OsO4(0.25g, 983.37umol, 51.02uL, 0.19당량)를 25℃에서 첨가했다. 이어서 NaIO4(3.32g, 15.53mmol, 860.64uL, 3.0 eq)를 0℃에서 조금씩 첨가하고 이어서 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반했다. 혼합물을 물(50mL)로 ??칭하고 이어서 에틸 아세테이트(50mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 H2O(30mL x 2) 및 염수(30mL x 2)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 8-포르밀-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소- 크로멘-6-카르복스아미드(1.2g, 3.63mmol, 70.17% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ10.41 (s, 1H), 8.16 (dd, J = 2.0 Hz, 14.8 Hz, 2H), 5.66 (s, 1H), 3.77~3.72 (m, 4H), 3.66~3.60 (m, 4H), 3.08~2.96 (m, 6H).
방식 9의 화합물의 제조 (방식 9의 단계 6)
MeOH(5mL/mmol~7mL/mmol) 중의 8-포르밀-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(3.63mmol, 1.0당량) 및 인돌린(3.63mmol~7.27mmol, 1.0당량~2.0당량)의 혼합물에 AcOH(108.98mmol, 30당량)를 25℃에서 첨가하고 이어서 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. 이어서 NaBH3CN(3.63 mmol~7.27 mmol, 1.0당량~2.0당량)을 0℃에서 첨가하고 반응 혼합물을 25℃에서 1시간~2시간 동안 교반했다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=6로 조정했다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage; 20g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~20% MeOH/에틸 아세테이트 그래디언트의 용리액 @ 50mL/분) 또는 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex luna C18 80*40mm*3um 또는 Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 34% - 54%, 7분 또는 [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 38%-52%, 7분 또는 [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 20%-50%, 10분 또는 [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 30%-50%, 8분)로 정제했다. 용매를 감소된 압력 하에서 농축하거나 또는 수용액을 동결 건조하여 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 32
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
MeOH(20mL) 중의 8-포르밀-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(1.2g, 3.63mmol, 1.0당량) 및 4,6-디플루오로인돌린e(1.13g, 7.27mmol, 2.0당량)의 혼합물에 AcOH(6.54g, 108.98mmol, 6.23mL, 30당량)를 25℃에서 첨가하고 이어서 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. 이어서 NaBH3CN(456.57mg, 7.27mmol, 2당량)을 0℃에서 첨가하고 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=6로 조정했다. 혼합물을 에틸 아세테이트(80mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(50mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage; 20g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~20% MeOH/에틸 아세테이트 그래디언트의 용리액 @ 50mL/분)로 정제했다. 용매를 농축했다. 얻어진 것을 MTBE 및 CH3CN(v:v=20:1, 30mL)으로 25℃에서 30분 동안 분쇄했다. 화합물 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(1.2g, 2.52mmol, 69.38% 수율, 98.6% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.84 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.47~6.23 (m, 2H), 5.59 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.72~3.66 (m, 4H), 3.56~3.51 (m, 4H), 3.48~3.45 (m, 2H), 3.01~2.94 (m, 5H), 2.89 (s, 3H). HPLC: 98.66% (220 nm), 98.16% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H25F2O4N3 469.18 m/z found 470.2 [M+H]+.
화합물 33
8-((4-플루오로-2-메틸인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드를 방식 9의 단계 6에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(28.3mg, 58.07umol, 19.18% 수율, 95.52% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz) δ 7.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.98~6.94 (m, 1H), 6.38 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 4.59 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 3.90~3.87 (m, 1H), 3.72~3.69 (m, 4H), 3.54 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 3.31~3.27 (m, 2H), 2.96~2.82 (m, 6H), 1.25 (d, J = 6.0 Hz, 3H). MS: 95.52% (220 nm), 95.90% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H28FN3O4 465.21 m/z found 466.2 [M+H]+.
화합물 34
8-((4,6-디플루오로-3,3-디메틸인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드를 방식 9의 단계 6에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(33.1mg, 65.63umol, 24.09% 수율, 98.65% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.86 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.41 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.31 (t, J=10.4 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.67 (d, J=5.2 Hz, 4H), 3.53 (d, J=5.2 Hz, 4H), 3.21 (s, 2H), 2.97 (s, 3H), 2.91 (s, 3H),1.32 (s, 6H). HPLC: 98.65% (220 nm), 99.03% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H29F2N3O4 497.21 m/z found 498.2 [M+H]+.
화합물 35
8-((4-하이드록시인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드를 방식 9의 단계 6에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(36.4mg, 80.98umol, 26.75% 수율, 100% 순도)을 회색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz) δ 9.10 (s, 1H), 7.84 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.84 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 8.0 Hz, 10.0 Hz, 2H), 5.60 (s, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.69 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.54(t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.31 (s, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 2.84 (t, J=8.0 Hz, 2H). MS: 100.00% (220 nm), 98.43% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H27N3O5 449.20 m/z found 450.2 [M+H]+.
화합물 36
8-((7-클로로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드를 방식 9의 단계 6에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(2.1mg, 4.31umol, 1.42% 수율, 96.01% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.83 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.10~6.97 (m, 2H), 6.66 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 5.58 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.71~3.69 (m, 4H), 3.55~3.51 (m, 4H), 3.50~3.46 (m, 2H), 3.03 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 2.98~2.82 (m, 6H). LCMS: 96.01% (220 nm), 95.47% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H26ClN3O4 467.1 m/z found 468.1 [M+H]+.
방식 10
방식 10에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복시산의 제조 (방식 10의 단계 1)
H2O(10mL) 및 THF(5mL) 중의 메틸 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(2g, 5.43mmol, 1당량) 및 LiOH.H2O(683.80mg, 16.30mmol, 3당량)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 2N HCl을 사용하여 0℃에서 즉시 pH=4로 만들고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 황백색 고체를 일부 형성했다. 고체를 여과 후 수집하고 감소된 압력 하에서 건조시켰다. 화합물 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복시산(1.82g, 5.14mmol, 94.60% 수율)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.42 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 3.75 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.60 (t, J = 5.6 Hz, 4H).
8-브로모-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 10의 단계 2)
DMF (10mL) 중의 8-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복시산(1.8g, 5.08mmol, 1당량), DIEA (3.94g, 30.50mmol, 5.31mL, 6당량) 및 N-메틸메탄아민(1.24g, 15.25mmol, 1.40mL, 3당량, HCl)의 혼합물에 HATU(2.51g, 6.61mmol, 1.3당량)를 조금씩 첨가했다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.12), HPLC 및 LC-MS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(30mL)에 붓고 황백색 고체를 일부 형성했다. 고체(0.5g, 황백색 고체)를 여과 후 수집했다. 수성 물질을 EtOAc(10mL x 5)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(5mL x 3)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 고체를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 20g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~15% 메탄올/에틸 아세테이트의 용리액 @ 50mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다(0.7g, 갈색 고체). 화합물 8-브로모-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(1.2g, 3.15mmol, 61.93% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.99 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.62 (s, 1H), 3.75 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.59 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.99 (s, 3H), 2.93 (s, 3H).
N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 10의 단계 3)
디옥산(15mL) 및 H2O(1.5mL) 중의 칼륨 하이드라이드 트리플루오로(비닐)보론(843.28mg, 6.30mmol, 1.5당량), Pd(dppf)Cl2(307.10mg, 419.70umol, 0.1당량), K2CO3(1.16g, 8.39mmol, 2당량) 및 9-브로모-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드(1.6g, 4.20mmol, 1당량)의 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(EtOAc:MeOH=20:1, Rf=0.13) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. DCM(20mL)를 첨가하고 여과했다. 유기층을 분리하고 수성 물질을 DCM(10mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(5mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 석유 에테르(50mL) 및 EtOAc(5mL)로 분쇄하고, 이어서 감소된 압력 하에서 건조시켰다. 화합물 N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드(1.3g, 3.96mmol, 94.33% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.94 (s, 1H), 7.82 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 6.4 Hz, 11.2 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 5.56 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.04 (t, J = 6.8 Hz, 4H), 3.56 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.01 (s, 3H), 2.94 (s, 3H).
8-(1-브로모에틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 10의 단계 4)
HBr(7.70g, 45.68mmol, 5.17mL, 48% 순도, 50당량) 중의 N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복스아미드(0.3g, 913.63umol, 1당량)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.5) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 갈색 고체를 일부 형성했다. 고체를 여과 후 수집했다. 여액을 포화 Na2CO3를 사용하여 pH=7로 만들고 이어서 DCM(10mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(5mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 8-(1-브로모에틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(0.27g, 659.71umol, 72.21% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.89 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 5.75 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 5.63 (s, 1H), 3.75 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.62 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.00 (s, 3H), 2.94 (s, 3H), 2.10 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
방식 10의 화합물의 제조 (방식 10의 단계 5)
DMA(7mL/mmol) 중의 8-(1-브로모에틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(293.20umol, 1당량), 인돌린(439.80umol, 1.5당량) 및 DIEA(0.88mmol~1.47mmol, 3당량~5당량)의 용액을 50℃에서 10시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물로 ??칭하고 EtOAc로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Luna C18 100*30mm*5um 또는 Phenomenex luna C18 80*40mm*3um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 30%-60%, 10분 또는 [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 40%-60%, 7분)로 정제했다. 용리액을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 만들고 EtOAc(15mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(10mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-TLC(EtOAc:MeOH=20:1)로 추가로 정제했다. 얻어진 것을 동결 건조 하에서 건조시켜 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 37
8-(1-(4,6-디플루오로인돌린-1-일)에틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 10의 단계 5)
DMA(2mL) 중의 8-(1-브로모에틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(0.12g, 293.20umol,당량), 4,6-디플루오로인돌린(68.23mg, 439.80umol, 1.5당량) 및 DIEA(189.47mg, 1.47mmol, 255.35 uL, 5당량)의 용액을 50℃에서 10시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(5mL)로 ??칭하고 EtOAc(5mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(2mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Luna C18 100*30mm*5um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 30%-60%, 10분)로 정제했다. 용리액을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 만들고 EtOAc(15mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(10mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-TLC(EtOAc:MeOH=20:1)로 추가로 정제했다. 얻어진 것을 동결 건조 하에서 건조시켰다. 화합물 8-[1-(4,6-디플루오로인돌린-1-일)에틸]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(3.1mg, 6.11umol, 2.08% 수율, 95.29% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.07 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 6.17~6.08 (m, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.38 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 3.66 (t, J = 5.6 Hz, 4H), 3.55 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.30~3.24 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 3.01 (s, 3H), 3.01~2.88 (m, 2H), 1.31 (d, J = 7.2 Hz, 3H). HPLC: 95.29% (220 nm), 94.27% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H27F2N3O4 483.20 m/z found 484.1 [M+H]+.
화합물 38
8-(1-(4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)에틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드를 방식 10의 단계 5에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(5.8mg, 10.95umol, 3.73% 수율, 93.91% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.09 and 8.08 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 7.86 and 7.84 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 6.31~6.07 (m, 4H), 5.65 and 5.62 (s, 2H), 5.45~5.21 (m, 2H), 4.12~4.07 (m, 1H), 3.68~3.34 (m, 10H), 3.30~3.13 (m, 1H), 3.13 (d, J = 8.8 Hz, 6H), 3.03 (d, J = 8.8 Hz, 6H), 2.56~2.15 (m, 2H), 1.73 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.63 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.75 (d, J = 6.0 Hz, 3H). HPLC: 93.91% (220 nm), 92.44% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H29F2N3O4 497.21 m/z found 498.2 [M+H]+.
방식 11
방식 11에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
메틸 8-포르밀-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 11의 단계 1)
THF(80mL) 및 H2O(20mL) 중의 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복실레이트(10g, 31.71mmol, 1.0당량)의 용액에 OsO4(0.25g, 983.37umol, 51.02uL, 3.10e-2당량)를 25℃에서 첨가했다. 이어서 NaIO4(20.35g, 95.14mmol, 5.27mL, 3.0당량)를 혼합물에 0℃에서 조금씩 첨가하고 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(80mL)로 ??칭하고 에틸 아세테이트(60mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 H2O(30mL x 2) 및 염수(20mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 메틸 8-포르밀-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(9g, 28.36mmol, 89.44% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 10.39 (s, 1H), 8.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.75~3.73 (m, 4H), 3.64~3.62 (m, 4H).
메틸 8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 11의 단계 2)
MeOH(40mL) 중의 메틸 8-포르밀-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(5g, 15.76mmol, 1.0당량) 및 4,6-디플루오로인돌린 (3.42g, 22.06mmol, 1.4당량)의 혼합물에 AcOH(28.39g, 472.75mmol, 27.04mL, 30당량)를 25℃에서 첨가하고 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. 이어서 NaBH3CN(1.98g, 31.52mmol, 2.0당량)을 0℃에서 조금씩 첨가했다. 이어서 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 조정했다. 유기 용매를 감소된 압력 하에서 45℃에서 제거했다. 수성 물질을 에틸 아세테이트(50mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(30mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 메틸 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(5.7g, 12.49mmol, 79.25% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.41 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 6.44~6.42 (m, 1H), 6.32~6.30 (m, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.70~3.66 (m, 4H), 3.53~3.49 (m, 4H), 3.46~3.44 (m, 2H), 2.96~2.94 (m, 2H).
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복시산의 제조 (방식 11의 단계 3)
THF(40mL) 중의 메틸 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(5.5g, 12.05mmol, 1.0당량)의 용액에 H2O(40mL) 중의 LiOH.H2O(2.02g, 48.20mmol, 4.0당량)의 용액을 첨가했다. 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 2M HCl을 사용하여 pH=4로 조정하고 황백색 침전물을 일부 형성했다. 필터 케이크를 여과 후 수집했다. 여액을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축하여 유기 용매를 제거했다. 수성 물질을 에틸 아세테이트(50mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(30mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복시산(2g, 4.52mmol, 37.51% 수율)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.42 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.48~6.28 (m, 2H), 5.60 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.71~3.65 (m, 4H), 3.56~3.53 (m, 4H), 3.47 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.97 (t, J = 8.4 Hz, 2H).
방식 11의 화합물의 제조 (방식 11의 단계 4)
THF(5mL/mmol~10mL/mmol) 중의 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복시산(4.48mmol, 1.0당량) 및 R'NHR"(5.82mmol~13.44mmol, 1.3당량~3.0당량)의 혼합물에 DIEA(22.40mmol~38.56mmol, 5.0당량~7.5당량) 및 T3P(6.72mmol~10.07mmol, 50% 순도, 1.5당량~2.25당량)를 0℃에서 N2 하에서 적하했다. 이어서 혼합물을 25℃에서 2시간~72시간 동안 교반했다. LCMS는 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복시산이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 2M HCl을 사용하여 pH=7로 조정했다. 흰색 침전물을 형성했다. 여과 후, 필터 케이크를 MTBE 및 CH3CN(v:v=20:1)으로 25℃에서 30분 동안 2회 분쇄했다. 또는 반응 혼합물을 얼음물을 첨가하여 ??칭했다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 100*25mm*3um 또는 Waters Xbridge Prep OBD C18 150*40mm*10um 또는 Phenomenex luna C18 80*40mm * 3um; 이동상: [물(0.05% HCl) - MeCN]; B%: 15%-35%, 8분 또는 [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 45%-55%, 7분 또는 [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 18%-55%, 7분 또는 [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-55%, 8분)로 정제했다. 수용액을 동결건조하여 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 39
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N-(2-(디메틸아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드를 방식 11의 단계 4에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(23.7mg, 45.38umol, 28.68% 수율, 98.15% 순도)을 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz) δ 9.09 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 6.44~6.31 (m, 2H), 5.73 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.69~3.65 (m, 4H), 3.64~3.55 (m, 2H), 3.56~3.49 (m, 4H), 3.48 (m, 2H), 3.26 (s, 2H), 2.97 (s, 2H), 2.81 (s, 6H). MS: 98.15% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H30F2N4O4 512.22 m/z found 513.2 [M+H]+.
화합물 40
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N-(2-(디메틸아미노)에틸)-N-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드를 방식 11의 단계 4에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(16.7mg, 31.48umol, 19.90% 수율, 99.26% 순도)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 8.01 ( s, 1H), 7.82 (s, 1H), 6.43 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.32 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.79 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.81~3.79 (m, 2H), 3.69~3.66 (m, 4H), 3.58~3.55 (m, 4H), 3.51 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 3.35~2.33(m, 2H), 2.98~2.93 (m, 5H), 2.85~2.83(m, 6H). LCMS: 99.26% (220 nm), 99.76% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C28H32F2N4O4 526.24 m/z found 527.2 [M+H]+.
화합물 41
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-6-(모르폴린-4-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 11의 단계 4에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(18.2mg, 32.47umol, 20.52% 수율, 91.26% 순도)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ7.85 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.50~6.20 (m, 2H), 5.60 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.70~3.66 (m, 4H), 3.57~3.40 (m, 12H), 3.30~3.26 (m, 2H), 2.98 (t, J = 8.4 Hz, 2H). HPLC: 91.27% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H27F2O5N3 511.19 m/z found 512.2 [M+H]+.
화합물 42
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-2-모르폴리노-6-(피롤리딘-1-카르보닐)-4H-크로멘-4-온을 방식 11의 단계 4에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(22.6mg, 44.90umol, 24.83% 수율, 98.45% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.97 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.35 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.71~3.65 (m, 4H), 3.54~3.51 (m, 4H), 3.34~3.32 (m, 2H), 2.97~2.94 (m, 2H), 1.89~1.76 (m, 4H). LCMS: 98.45% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H27F2N3O4 495.20 m/z found 496.20 [M+H]+.
화합물 43
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-6-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 11의 단계 4에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(44mg, 80.75umol, 44.65% 수율, 98.84% 순도)을 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 10.86 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 6.44 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.31 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.69~3.68 (m, 2H), 3.67~3.65 (m, 4H), 3.56~3.53 (m, 4H), 3.49~3.47 (m, 2H), 2.99~2.97 (m, 2H), 2.88~2.66 (m, 6H), 2.64~2.62 (m, 2H), 2.18~2.16 (m, 1H), 1.72~1.46 (m, 2H). HPLC: 98.85% (220 nm), 99.79% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C29H32F2N4O4 538.24 m/z found 539.2 [M+H]+.
화합물 44
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-6-(4-메틸피페라진-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 11의 단계 4에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(23.2mg, 43.01umol, 23.78% 수율, 97.24% 순도)을 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 11.09 (s, 1H), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.36 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 5.65 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.04 ~4.00 (m, 4H), 3.71~3.67 (m, 4H), 3.57~3.53 (m, 4H), 3.48~3.46 (m, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.99~2.95 (m, 2H), 2.97 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.74 (d, J = 4.4 Hz, 3H). LCMS: 97.25% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C28H30F2N4O4 524.22 m/z found 525.2 [M+H]+.
화합물 45
6-(아제티딘-1-카르보닐)-8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 11의 단계 4에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(12.4mg, 25.49umol, 14.09% 수율, 98.96% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.32 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.24 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 4.04 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.72-3.64 (m, 4H), 3.56-3.51 (m, 4H), 3.49-3.44 (m, 2H), 2.97 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.25 (t, J = 7.8 Hz, 2H). HPLC: 98.96% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H25F2O4N3 481.18 m/z found 482.1 [M+H]+.
화합물 46
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-6-(3-(디메틸아미노)아제티딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온을 방식 11의 단계 4에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(18.1mg, 34.40umol, 19.02% 수율, 99.70% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz) δ 8.09 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 6.43 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.31 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.17 (s, 1H), 4.05 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.81 (s, 1H), 3.69 (s, 4H), 3.53 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 3.38~3.34(m, 2H), 3.07 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 3.00 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.05 (s, 6H). LCMS: 99.70% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C28H30F2N4O4 524.22 m/z found 525.2 [M+H]+.
방식 12
화합물 47
9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((4,4-디메틸-4,5-디하이드로옥사졸-2-일)아미노)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 12의 단계 1-8)
7-브로모-2-하이드록시-9-요오도-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 12의 단계 1)
DCE(500mL) 중의 5-브로모-3-요오도-피리딘-2-아민(40g, 133.82mmol, 1당량)의 혼합물에 프로판디올 디클로라이드(20.75g, 147.20mmol, 14.31mL, 1.1당량)를 0℃에서 N2 하에서 적하했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하고 이어서 50℃에서 9시간 동안 교반했다. 이어서 혼합물을 70℃에서 10시간 동안 교반했다. 이어서 혼합물을 75℃에서 4시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=2:1), HPLC 및 LC-MS는 ~15%의 5-브로모-3-요오도-피리딘-2-아민이 남아있고 LCMS에서 원하는 것의 ~55%가 남아있음을 나타냈다. 노란색 고체가 일부 형성되었고 노란색 침전물을 여과에 의해 수집했다. 화합물 7-브로모-2-하이드록시-9-요오도-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(49g, 133.54mmol, 99.79% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.11 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.67 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.53 (s, 1H).
7-브로모-9-요오도-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일 메탄설포네이트의 제조 (방식 12의 단계 2)
DCM(80mL) 중의 7-브로모-2-하이드록시-9-요오도-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(10g, 27.25mmol, 1당량) 및 Et3N(5.52g, 54.51mmol, 7.59mL, 2당량)의 혼합물에 MsCl(6.5g, 56.74mmol, 4.39mL, 2.08당량)을 0℃에서 N2 하에서 적하했다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LC-MS는 7-브로모-2-하이드록시-9-요오도-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용했다. MS(ESI): 질량 계산. C9H6BrISO4N2 443.83m/z에 대해444.8 [M+H]+가 발견되었다.
7-브로모-9-요오도-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 12의 단계 3)
DCM(80mL) 중의 (7-브로모-9-요오도-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-2-일)메탄설포네이트(12g, 26.96mmol, 1당량) 및 모르폴린(7.05g, 80.89mmol, 7.12mL, 3당량)의 혼합물을 50℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 (7-브로모-9-요오도-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-2-일)메탄설포네이트가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O(50mL)를 첨가하여 0℃에서 ??칭하고 이어서 DCM(100mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 DCM(30mL)로 25℃에서 50분 동안 분쇄했다. 화합물 7-브로모-9-요오도-2-모르폴리노-피리도[1,2-a] 피리미딘-4-온(10.2g, 23.39mmol, 86.75% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.80 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.62 (s, 1H), 3.72~3.68 (m, 8H).
9-아세틸-7-브로모-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 12의 단계 4)
디옥산(40mL) 중의 7-브로모-9-요오도-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(5.5g, 12.61mmol, 1당량), 트리부틸(1-에톡시비닐)스탄난(6.65g, 18.42mmol, 6.22mL, 1.46당량) 및 Pd(PPh3)2Cl2(442.67mg, 630.67umol, 0.05당량)의 혼합물을 70℃에서 11시간 동안 N2 하에서 교반했다. 혼합물을 25℃로 냉각시키고 HCl(2M, 7.57mL, 1.2당량)을 첨가하여 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LC-MS는 7-브로모-9-요오도-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 농축했다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 만들고 DCM(80mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(80mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 석유 에테르 및 EtOAc(v:v=20:1, 30mL)로 25℃에서 30분 동안 분쇄했다. 화합물 9-아세틸-7-브로모-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(3.1g, 8.80mmol, 69.78% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.92 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.69 (s, 1H), 3.68~3.66 (m, 4H), 3.60~3.58 (m, 4H), 2.65 (s, 3H).
7-브로모-9-(1-하이드록시에틸)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 12의 단계 5)
MeOH(25mL) 및 DCM(6mL) 중의 9-아세틸-7-브로모-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1g, 2.84mmol, 1당량) 및 CeCl3 .7H2O(1.06g, 2.84mmol, 269.88 uL, 1당량)의 혼합물에 NaBH4(64.45mg, 1.70mmol, 0.6당량)를 -70℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 -70℃에서 0.3시간 동안 교반했다. TLC(EtOAc, Rf=0.25)는 9-아세틸-7-브로모-2-모르폴리노- 피리도[1,2-a]피리미딘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(30mL)로 천천히 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 EtOAc(40mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(30mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 7-브로모-9-(1-하이드록시에틸)-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.67g, 1.89mmol, 66.62% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.76 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.66 (s, 1H), 5.51 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.52~5.15 (m, 1H), 3.69~3.67 (m, 4H), 3.62~3.59 (m, 4H), 1.39 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
7-브로모-9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 12의 단계 6)
DCE(10mL) 중의 7-브로모-9-(1-하이드록시에틸)-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.67g, 1.89mmol, 1당량)의 용액에 PBr3(563.23mg, 2.08mmol, 1.1당량)를 0℃에서 N2 하에서 적하했다. 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반했다. LC-MS는 7-브로모-9-(1-하이드록시에틸)-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=6로 조정했다. 유기상을 분리하고 수성상을 DCM(10mL x 2)으로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 7-브로모-9-(1-브로모에틸)- 2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.63g, 1.51mmol, 79.85% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.82 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 5.94~5.90 (m, 1H), 5.68 (s, 1H), 3.72~3.66 (m, 8H), 2.06 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
7-브로모-9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 12의 단계 7)
DMA(10mL) 중의 7-브로모-9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.63g, 1.51mmol, 1당량) 및 3,5-디플루오로아닐린 (779.81mg, 6.04mmol, 4당량)의 혼합물을 50℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 7-브로모-9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 물(50mL)로 ??칭했다. 수성상을 에틸 아세테이트(50mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(30mL x 2)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피 (Biotage; 12g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~100% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 60mL/분)로 정제했다. 용매를 농축했다. 화합물 7-브로모-9-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-피리도[1,2-a] 피리미딘-4-온(0.48g, 1.03mmol, 68.32% 수율)을 노란색 오일로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.76 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.24 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.09 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 5.70 (s, 1H), 5.09~5.06 (m, 1H), 3.69~3.64 (m, 8H), 1.47 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((4,4-디메틸-4,5-디하이드로옥사졸-2-일)아미노)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 12의 단계 8)
디옥산(2mL) 중의 7-브로모-9-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-피리도[1,2-a] 피리미딘-4-온(0.1g, 214.92umol, 1당량) 및 4,4-디메틸-5H-옥사졸-2-아민(167.69mg, 859.68umol, 4당량, HBr)의 혼합물에 CuI(81.86mg, 429.84umol, 2당량), N,N'-디메틸에탄-1,2-디아민(9.47mg, 107.46umol, 11.57 uL, 0.5당량) 및 Cs2CO3 (210.07mg, 644.76umol, 3당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과하고 여액을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 30%-60%, 8분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-7-[(4,4-디메틸-5H-옥사졸-2-일)아미노]-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(3.1mg, 6.22umol, 2.89% 수율, 100% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.33 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.20 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.05 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 5.63 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.13-4.10 (m, 2H), 3.70~3.67 (m, 4H), 3.62~3.57 (m, 4H), 1.47 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.23 (s, 6H) HPLC: 100% (220 nm), 96.01% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H28F2O3N6 498.22 m/z found 499.3 [M+H]+.
방식 13
방식 13에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
메틸 6-아미노-5-브로모니코티네이트의 제조 (방식 13의 단계 1)
THF(800mL) 중의 메틸 6-아미노피리딘-3-카르복실레이트(50g, 328.62mmol, 1당량)의 혼합물에 NBS(64.34g, 361.48mmol, 1.1당량)를 0℃에서 조금씩 첨가했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 10시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=2:1, Rf=0.45)는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(200mL)로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 잔류물에 물(500mL)을 첨가했다. 갈색 고체를 일부 형성했다. 여액을 EtOAc(200mL x 6)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 포화 NaHCO3(200mL x 4) 및 염수(100mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 고체(47g)를 추가 정제 없이 수집했다. 잔류물을 EtOAc(200mL)로 분쇄하고 감소된 압력 하에서 건조시켰다(11g). 화합물 메틸 6-아미노-5-브로모-피리딘-3-카르복실레이트(58g, 251.03mmol, 76.39% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.49 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.15~7.14 (m, 2H), 3.78 (s, 3H).
메틸 9-브로모-2-하이드록시-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 13의 단계 2)
50oC의 톨루엔(300mL) 중의 메틸 6-아미노-5-브로모-피리딘-3-카르복실레이트(21g, 90.89mmol, 1당량)의 혼합물에 비스(2,4,6-트리클로로페닐) 프로판디오에이트(50g, 108.01mmol, 1.19당량)를 50℃에서 N2 하에서 조금씩 첨가했다. 이어서 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=2:1, Rf=0.10) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 갈색 침전물을 여과에 의해 수집했다. 침전물을 여액이 무색이 될 때까지 소량의 빙냉 석유 에테르(200mL)로 세척했다. 화합물 메틸 9-브로모-2-하이드록시-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(26.5g, 88.61mmol, 97.49% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.31 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 5.59 (s, 1H), 3.92 (s, 3H).
메틸 9-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 13의 단계 3)
DCM(300mL) 중의 메틸 9-브로모-2-하이드록시-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(26.5g, 88.61mmol, 1당량) 및 Et3N(17.93g, 177.21mmol, 24.67mL, 2당량)의 혼합물에 MsCl(14.21g, 124.05mmol, 9.60mL, 1.4당량)을 0℃에서 N2 하에서 적하했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. 이어서 모르폴린 (23.16g, 265.82mmol, 23.39mL, 3당량)을 첨가하고 혼합물을 20℃에서 5시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=1:1, Rf=0.2) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(200mL)에 붓고 고체를 일부 형성했다. 고체(9g, 황백색 고체)를 여과 후 수집했다. 유기 용매를 분리했다. 수성 물질을 DCM(150mL x 4)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(100mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 DCM(50mL) 및 EtOAc(100mL)로 분쇄했고, 이어서 고체(15g, 황백색 고체)를 감소된 압력 하에서 건조시켰다. 화합물 메틸 9-브로모-2-모르폴리노-4-옥소- 피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(24g, 65.19mmol, 73.57% 수율)를 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.69 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.69 (s, 8H).
메틸 9-아세틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 13의 단계 4)
디옥산(100mL) 중의 메틸 9-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(9g, 24.44mmol, 1당량), 트리부틸(1-에톡시비닐)스탄난(12.87g, 35.64mmol, 12.03mL, 1.46당량) 및 Pd(PPh3)2Cl2(857.88mg, 1.22mmol, 0.05당량)의 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.2) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 14.67mL의 2N HCl을 첨가하여 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반했다. 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 만들고, DCM(100mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL x 3)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 석유 에테르 및 EtOAc(v:v=10:1, 440mL x 1)로 분쇄했다. 고체를 여과 후 수집했다. 화합물 메틸 9-아세틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(7g, 21.13mmol, 86.43% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.36 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.72 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.68~3.65 (m, 8H), 2.68 (s, 3H).
메틸 9-(1-하이드록시에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 13의 단계 5)
DCM(15mL) 및 MeOH(60mL) 중의 메틸 9-아세틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(7g, 21.13mmol, 1당량) 및 CeCl3 .7H2O(7.87g, 21.13mmol, 28.69 uL, 1당량)의 혼합물에 NaBH4(479.55mg, 12.68mmol, 0.6당량)를 -70℃에서 조금씩 첨가하고 이어서 혼합물을-70℃에서 0.3시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.2) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 -70℃에서 얼음물(100mL)로 천천히 ??칭하고 셀라이트를 통해 여과했다. 여액을 EtOAc(100mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 메틸 9-(1-하이드록시에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(5.6g, 16.80mmol, 79.52% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.67 (s, 1H), 5.52 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.19~5.15 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.68~3.60 (m, 8H), 1.18 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
메틸 9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 13의 단계 6)
DCE(50mL) 중의 메틸 9-(1-하이드록시에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7 -카르복실레이트(3g, 9.00mmol, 1당량)의 용액에 PBr3(3.17g, 11.70mmol, 1.11mL, 1.3당량)를 0℃에서 적하하고 이어서 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=1:1, Rf=0.35) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(50mL)로 ??칭하고 포화 Na2CO3를 사용하여 pH=6~7로 만들었다. 수성 물질을 DCM(50mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(20mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 EtOAc(30mL)로 분쇄했다. 화합물 메틸 9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(1.9g, 4.80mmol, 53.28% 수율)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.97~5.86 (m, 1H), 5.70 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.69 (s, 8H), 2.08 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
메틸 9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 13의 단계 7)
DMA(20mL) 중의 메틸 9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(1.9g, 4.80mmol, 1당량) 및 3,5-디플루오로아닐린(1.86g, 14.39mmol, 3당량)의 용액을 55℃에서 10시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=1:1, Rf=0.26) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(50mL)로 ??칭하고 흰색 고체를 일부 형성했다. 여과 후, 고체(1g)를 감소된 압력 하에서 수집 및 농축했다. 여액을 EtOAc(300mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(10mL x 4)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 MeOH(30mL)로 분쇄하고, 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용된 1g의 고체를 얻었다. 화합물 메틸 9-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(2g, 4.50mmol, 93.85% 수율)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.23 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.08 (dd, J = 2.0 Hz, 10.4 Hz, 2H), 5.73 (s, 1H), 5.08~5.05 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.70 (s, 8H), 1.48 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산의 제조 (방식 13의 단계 8)
H2O(10mL) 및 THF(10mL) 중의 메틸 9-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(2g, 4.50mmol, 1당량) 및 LiOH.H2O(566.48mg, 13.50mmol, 3당량)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=1:1, Rf=0.05) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 5mL의 물을 첨가하고 1N HCl를 사용하여 0℃에서 수성 물질을 pH=4로 만들고 고체를 일부 형성했다. 여과 후, 고체를 감소된 압력 하에서 수집 및 농축했다. 화합물 9-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(1.8g, 4.18mmol, 92.93% 수율)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 13.53~13.50 (m, 1H), 9.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.22 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.09 (dd, J = 2.0 Hz, 10.4 Hz, 2H), 5.71 (s, 1H), 5.07~5.02 (m, 1H), 3.69 (s, 8H), 1.47 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
방식 13의 화합물의 제조
(방식 13의 단계 9)
THF(7mL/mmol~9mL/mmol) 중의 9-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘 -7-카르복시산(697.02umol, 1당량), 아민(1.05mmol, 1.5당량) 및 DIEA(3.49mmol ~4.18mmol, 5당량~6당량)의 용액에 T3P(906.13umol, 50% 순도, 1.3당량)를 0℃에서 적하했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 5시간 동안 교반했다. HPLC 및 LCMS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물로 ??칭하고 이어서 EtOAc로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um 또는 Phenomenex Gemini-NX C18 75*30mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 20%-50%, 8분 또는 [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 30%-50%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 수용액을 동결 건조하여 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 48
9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 13의 단계 9)
THF(5mL) 중의 9-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘 -7-카르복시산(0.3g, 697.02umol, 1당량), N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(119.39mg, 1.05mmol, 1.5당량) 및 DIEA(450.41mg, 3.49mmol, 607.03 uL, 5당량)의 용액에 T3P(576.62mg, 906.13umol, 538.90 uL, 50% 순도, 1.3당량)를 0℃에서 적하했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 5시간 동안 교반했다. HPLC 및 LCMS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(10mL)로 ??칭하고 이어서 EtOAc(10mL x 2)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(5mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 20%-50%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-7-[3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐]-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(205.8mg, 389.77umol, 55.92% 수율, 99.73% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.88 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.03~6.96 (m, 1H), 6.22~6.20 (m, 1H), 6.08 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 5.71 (s, 1H), 5.10~5.07 (m, 1H), 3.69 (s, 8H), 3.62~3.53 (m, 1H), 3.44~3.40 (m, 2H), 3.24~3.21 (m, 1H), 2.55~2.52 (m, 1H), 2.16~1.97 (m, 7H), 1.69~1.68 (m, 1H), 1.48 (d, J = 6.4 Hz, 3H). HPLC: 99.73% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H32F2N6O3 526.25 m/z found 527.2 [M+H]+.
화합물 48의 카이랄 분리를 수행했다. 카이랄 제조 기구: Thar 80 제조 SFC; 칼럼: (s,s) Whelk O-1, 250×30mm i.d., 10μm 및 Daicel Chiralpak IC, 250×30mm i.d., 10μm. 카이랄 분석 기구: Waters Acquity Arc; 칼럼: S,S_Whelk_O1, 3.5μm, 0.46cm id x 10cm L. 4개의 이성질체를 얻었다. 화합물 48 - P1(Rt = 6.501분, 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%) = 95.8%); 화합물 48 - P2(Rt = 7.525분, 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%) = 95.8 =100%); 화합물 48 - P3(Rt = 8.298분; 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%) = 98.8%) 및 화합물 48 - P4(Rt = 14.409분, 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%) = 99.46%).
화합물 49
9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-(3-(디메틸아미노)아제티딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 방식 13의 단계 9에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(26mg, 50.26umol, 21.63% 수율, 99.08% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.95 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.04 (d, d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.25~6.20 (m, 1H), 6.11~6.08 (m, 2H), 5.72 (s, 1H), 5.08 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 4.22~3.80 (m, 4H), 3.66 (s, 8H), 3.06~3.03 (m, 1H), 2.05 (s, 6H), 1.49 (d, J = 6.8 Hz, 3H). HPLC: 99.08% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H30F2N6O3 512.23 m/z found 513.2 [M+H]+.
방식 14
화합물 50
9-((R)-1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 14의 단계 1-6)
(R,E)-이소프로필 9-(1-((tert-부틸설피닐)이미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 14의 단계 1)
THF(80mL) 중의 메틸 9-아세틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(4.1g, 12.37mmol, 1당량), (R)-2-메틸프로판-2-설핀아미드(2.70g, 22.27mmol, 1.8당량) 및 Ti(i-PrO)4(14.07g, 49.50mmol, 14.61mL, 4당량)의 혼합물을 70℃에서 20시간 동안 N2 하에서 교반했다. LC-MS 및 TLC(석유 에테르:EtOAc=2:1, Rf=0.3)는 반응이 완료되고 대부분의 (R,E)-이소프로필 9-(1-((tert-부틸설피닐)이미노)에틸)-2-모르폴리노 -4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트가 형성됨을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(100mL)로 ??칭하고, EtOAc(300mL)를 첨가했다. 셀라이트를 통해 여과 후, 필터 케이크를 EtOAc(50mL x 3)로 세척했다. 유기층을 분리했다. 수성상을 EtOAc(100mL x 1)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 이소프로필 9-[(Z)-N-[(S)-tert-부틸설피닐]-C-메틸-카본이미도일]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(5.5g, 11.89mmol, 96.09% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.30~9.22 (m, 1H), 8.03~7.96 (m, 1H), 5.71~5.69 (m, 1H), 5.20~5.17 (m, 1H), 3.65 (s, 8H), 2.53 (s, 3H), 1.35 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.21~1.15 (m, 9H).
이소프로필 9-((R)-1-((R)-1,1-디메틸에틸설핀아미도)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 14의 단계 2)
MeOH(50mL) 및 DCM(50mL) 중의 이소프로필 9-[(E)-N-[(S)-tert-부틸설피닐]-C-메틸-카본이미도일]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(5.5g, 11.89mmol, 1당량) 및 AcOH(5.71g, 95.12mmol, 5.44mL, 8당량)의 용액에 NaBH3CN(2.24g, 35.67mmol, 3당량)을 -15℃에서 조금씩 첨가하고, 이어서 혼합물을 -15℃에서 5시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.10) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(30mL)로 ??칭하고, 이어서 포화 Na2CO3 용액을 pH=7이 될 때까지 첨가했다. 수용액을 EtOAc(50mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 40g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~100% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @30mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 이소프로필 9-[(1S)-1-[[(R)-tert-부틸설피닐]아미노]에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(2.8g, 6.03mmol, 50.69% 수율)를 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.24 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 5.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.21~5.17 (m, 1H), 5.03~4.99 (m, 1H), 3.65 (s, 8H), 1.45 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.35 (d, J = 4.4 Hz, 6H), 1.14 (s, 9H).
(R)-이소프로필 9-(1-아미노에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 14의 단계 3)
EtOAc(100mL) 중의 이소프로필 9-[(1R)-1-[[(R)-tert-부틸설피닐]아미노]에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(13.9g, 29.92mmol, 1당량)의 용액에 HCl/EtOAc(4M, 74.80mL, 10당량)를 첨가하고 이어서 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(EtOAc:MeOH=20:1, Rf=0.1) 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc(100mL)로 분쇄했다. 여과 후, 고체를 수집했다. 화합물 이소프로필 9-[(1R)-1-아미노에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(11.5g, 26.54mmol, 88.70% 수율, 2HCl, 100% ee.)를 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.28 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.27 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.24~5.17 (m, 1H), 4.97 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.69 (s, 8H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.37 (t, J = 6.0 Hz, 6H).
카이랄 분석 기구: Waters Acquity UPC2; 칼럼: Chiralcel OD-3 3μm, 0.46cm id x 5cm L. 이동상: SFC CO2에 대한 A 및 MeOH에 대한 B (0.05% IPAm); 그래디언트: 3분 안에 A 중의 B를 5%에서 50%로 ; 유량: 3.4mL/분; 칼럼 온도:35oC; 파장: 220nm; 시스텝 배압: 1800 psi. Rt = 1.158분; 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%) = 100%.
(R)-이소프로필 9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 14의 단계 4)
디옥산(110mL) 중의 이소프로필 9-[(1R)-1-아미노에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(11g, 25.38mmol, 1당량, 2HCl), 1,3-디플루오로-5-요오도-벤젠(12.18g, 50.77mmol, 6.09mL, 2당량), Pd2(dba)3(2.32g, 2.54mmol, 0.1당량), XPhos(1.82g, 3.81mmol, 0.15당량) 및 Cs2CO3(28.95g, 88.85mmol, 3.5당량)의 혼합물을 100℃에서 20시간 동안 N2 하에서 교반했다. 이어서 1,3-디플루오로-5-요오도-벤젠(6.09g, 25.38mmol, 3.05mL, 1당량), Pd2(dba)3(1.16g, 1.27mmol, 0.05당량), XPhos(907.60mg, 1.90mmol, 0.075당량) 및 Cs2CO3(8.27g, 25.38mmol, 1당량)을 첨가하고 혼합물을 100℃에서 추가로 20시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC 체크는 출발 물질이 소모되지 않았음을 나타냈고, 이어서 또 다른 배치 1,3-디플루오로-5-요오도-벤젠(6.09g, 25.38mmol, 3.05mL, 1당량)을 첨가하고 TLC(석유 에테르:EtOAc=1:1, Rf=0.2) 및 LC-MS가 반응이 거의 완료되었음을 나타낼 때까지 혼합물을 100℃에서 20시간 동안 N2 하에서 교반했다. 셀라이트를 통해 여과 후, 여액을 감소된 압력 하에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc(300mL)에 용해시키고 물(100mL x 2)로 세척했다. 합쳐진 유기층을 염수(100mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 120g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~69% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @100mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 이소프로필 9-[(1R)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(5.7g, 12.06mmol, 47.52% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 또한 이소프로필 9-[(1R)-1-아미노에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(1.2g)를 갈색 고체로서 회수했다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.21 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.07 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.24~6.19 (m, 1H), 6.10~6.07 (m, 2H), 5.73 (s, 1H), 5.15~5.10 (m, 1H), 5.08~5.04 (m, 1H), 3.69 (s, 8H), 1.47 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.32 (d, J = 7.2 Hz, 6H).
(R)-9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산의 제조 (방식 14의 단계 5)
THF(12mL) 중의 이소프로필 9-[(1S)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(5.7g, 12.06mmol, 1당량) 및 수성 NaOH 용액(4M, 60.32mL, 20당량)의 용액을 20℃에서 6시간 동안 교반했다. 이어서 THF(10mL) 및 수성 NaOH 용액(4M, 15.08mL, 5당량)을 첨가하고 혼합물을 20℃에서 추가로 4시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.05)는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 MTBE(30mL x 2)로 추출하여 불순물을 제거했다. 수성 물질을 0℃에서 농축된 HCl을 사용하여 pH=4로 조정하고 노란색 고체가 침전되었다. 여과 후, 고체를 감소된 압력 하에서 수집 및 농축했다. 여액을 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 30mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(20mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 EtOAc(5mL)로 분쇄했다. 화합물 9-[(1S)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도 [1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(4.3g, 9.99mmol, 82.81% 수율, 96.84% ee.)을 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 13.53~13.50 (m, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.07 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.21 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.09~6.06 (m, 2H), 5.70 (s, 1H), 5.08~5.04 (m, 1H), 3.69 (s, 8H), 1.47 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
카이랄 분석 기구: Waters Acquity UPC2; 칼럼: Chiralpak IC-3 3μm, 0.46cm id x 5cm L; 이동상: SFC CO2에 대한 A 및 EtOH(0.05% IPAm)에 대한 B; 그래디언트: 3분 안에 A 중의 B를 5%에서 50%로 ; 유량: 3.4mL/분; 칼럼 온도: 35oC; 파장: 220nm; 시스텝 배압: 1800 psi Rt=1.767분; 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%)=96.84%.
9-((R)-1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 14의 단계 6)
THF(25mL) 중의 9-[(1R)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복시산(3g, 6.97mmol, 1당량), (3R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(1.96g, 10.46mmol, 2.17mL, 1.5당량, 2HCl) 및 DIEA(4.50 g, 34.85mmol, 6.07mL, 5당량)의 용액에 T3P(6.65g, 10.46mmol, 6.22mL, 50% 순도, 1.5당량)를 0℃에서 적하했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 10시간 동안 교반했다. HPLC 및 LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(30mL)로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 20mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(2mL)로 세척하고, Na20SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Xtimate C18 10u 250 mm*80mm; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 30%-55%, 24분)로 추가로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[(1R)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-7-[(3R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐]-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(2.29g, 4.34mmol, 62.25% 수율, 99.75% 순도, 96.34% ee.)을 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.88 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.02~6.98 (m, 1H), 6.25~6.21 (m, 1H), 6.11~6.08 (m, 2H), 5.71 (s, 1H), 5.12~5.08 (m, 1H), 3.73 (s, 8H), 3.66~3.51 (m, 1H), 3.47~3.42 (m, 2H), 3.26~3.22 (m, 1H), 2.68~2.62 (m, 1H), 2.17 and 2.06 (m, 6H), 2.01~1.96 (m, 1H), 1.74~1.71 (m, 1H), 1.49 (d, J = 6.8 Hz, 3H). HPLC: 99.75% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H32F2N6O3 526.25 m/z found 527.3 [M+H]+.
카이랄 분석 기구: Waters Acquity Arc; 칼럼: S,S_Whelk_O1, 3.5μm, 0.46cm id x 10cm L. 화합물 50(Rt=8.212분; 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%)=96.34%)을 얻고 화합물 48 - P3(Rt=8.298분, 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%)=98.8%)로서 식별되었다.
방식 15
화합물 51
9-((R)-1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((S)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 15의 단계 1-6)
(R,E)-에틸 9-(1-((tert-부틸설파닐)이미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 15의 단계 1)
THF(160mL) 중의 메틸 9-아세틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(16g, 48.40mmol, 1당량), (R)-2-메틸프로판-2-설핀아미드(10.56g, 87.13mmol, 1.8당량) 및 테트라에톡시티타늄(44.16g, 193.61mmol, 40.15mL, 4당량)의 혼합물을 75℃에서 20시간 동안 N2 분위기 하에서 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 이어서 물(400mL) 및 에틸 아세테이트(250mL)로 희석했다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 필터 케이크를 에틸 아세테이트(40mL)로 세척했다. 유기상을 분리했다. 수성상을 에틸 아세테이트(200mL x 4)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(300mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 MTBE(130mL)로 20℃에서 1시간 동안 분쇄했다. 여과 후, 13.13g의 화합물 에틸 9-[(E)-N-[(R)-tert-부틸설피닐]-C-메틸-카본이미도일]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(13.13g, 29.27mmol, 60.48% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.31~9.22 (m, 1H), 8.05~8.00 (m, 1H), 5.71~5.69 (m 1H), 4.40 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.65 (s, 8H), 2.58 (s, 3H), 1.36~1.33 (m, 3H), 1.12~1.08 (m, 9H).
에틸 9-((R)-1-((R)-1,1-디메틸에틸설핀아미도)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 15의 단계 2)
DCM(80mL) 및 MeOH(80mL) 중의 에틸 9-[(E)-N-[(R)-tert-부틸설피닐]-C-메틸-카본이미도일]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(13.13g, 29.27mmol, 1당량) 및 AcOH(14.06g, 234.18mmol, 13.39mL, 8당량)의 용액에 NaBH3CN(5.52g, 87.82mmol, 3당량)을 -15℃에서 조금씩 첨가했다. 혼합물을 -15℃에서 5시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(1.5 mL)로 ??칭하고 0℃에서 포화 Na2CO3를 사용하여 pH=7로 조정했다. 유기상을 분리했다. 수성상을 EtOAc(150mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(300mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플레시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage; 220g SepaFlash ® 실리카 플래시 칼럼, 0 ~ 100% 에틸아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액; 0 ~ 13% MeOH/에틸아세테이트 그래디언트의 용리액 @ 200mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 에틸 9-[(1R)-1-[[(R)-tert-부틸설피닐]아미노]에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(6.83g, 15.16 mmol, 51.79% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.25 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 5.96 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.69 (s, 1H), 5.04~4.97 (m, 1H), 4.38~4.34 (q, J = 3.2 Hz, 2H), 3.69 (s, 8H), 1.46 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.12 (s, 9H).
(R)-에틸 9-(1-아미노에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 15의 단계 3)
EtOAc(70mL) 중의 에틸 9-[(1R)-1-[[(R)-tert-부틸설피닐]아미노]에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(6.8g, 15.09mmol, 1당량)의 용액에 HCl/EtOAc(4M, 37.73mL, 10당량)를 첨가했다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc(20mL)로 분쇄했다. 여과 후, 고체를 수집했다. 화합물 에틸 9-[(1R)-1-아미노에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(6.63g, 미정제, 2HCl, 100% ee)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.30 (s, 1H), 8.64 (s, 2H), 8.29 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 4.98~4.95 (m, 1H), 4.42 (q, J = 8.0 Hz, 2H), 3.69 (s, 8H), 1.58 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.38 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
카이랄 분석 기구: Waters Acquity UPC2; 칼럼: Chiralcel OD-3 3μm, 0.46cm id x 5cm L; 이동상: SFC CO2에 대한 A 및 MeOH(0.05% IPAm)에 대한 B; 그래디언트: 3분 안에 A 중의 B를 5%에서 50%로 ; 유량: 3.4mL/분; 칼럼 온도: 35oC; 파장: 220nm; 시스텝 배압: 1800 psi. Rt=1.217분; 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%)=100% ee.
(R)-에틸 9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 15의 단계 4)
디옥산(70mL) 중의 에틸 9-[(1R)-1-아미노에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(6.62g, 15.79mmol, 1당량, 2 HCl), 1,3-디플루오로-5-요오도-벤젠(5.68g, 23.68mmol, 2.84mL, 1.5당량), Pd2(dba)3(1.45g, 1.58mmol, 0.1당량), Cs2CO3(18.00g, 55.26mmol, 3.5당량) 및 디사이클로헥실-[2-(2,4,6-트리이소프로필페닐)페닐]포스판(1.13g, 2.37mmol, 0.15당량)의 혼합물을 탈기하고 N2로 3회 퍼지하고 이어서 혼합물을 100℃에서 20시간 동안 N2 분위기 하에서 교반했다. 이어서 또 다른 배치 1,3-디플루오로-5-요오도-벤젠(3.79g, 15.79mmol, 1.89mL, 1당량), Pd2(dba)3(722.87mg, 789.41umol, 0.05당량), Cs2CO3(5.14g, 15.79mmol, 1당량) 및 디사이클로헥실-[2-(2,4,6-트리이소프로필페닐)페닐]포스판(564.48mg, 1.18mmol, 0.075당량)을 첨가하고 이어서 혼합물을 100℃에서 20시간 동안 N2 분위기 하에서 교반했다. LC-MS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과하고 필터 케이크를 EtOAc(20mL)로 세척했다. 여액을 진공에서 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피 (Biotage; 40g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0 ~ 60% 에틸아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 에틸 9-[(1R)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(3.35g, 7.31mmol, 46.28% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 그리고 에틸 9-[(1R)-1-아미노에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(1.11g)를 갈색 고체로서 회수했다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.23 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.08 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.25 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 6.09 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 5.73 (s, 1H), 5.06 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 4.35~4.30 (m, 2H), 3.69 (s, 8H), 1.47 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.30 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
(R)-9-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산의 제조 (방식 15의 단계 5)
THF(6mL) 중의 에틸 9-[(1R)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(3.35g, 7.31mmol, 1당량)의 용액에 NaOH(4M, 7.31mL, 4당량)를 첨가했다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반했다. NaOH(4M, 7.31mL, 4당량)를 첨가하고 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS 및 TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=1:1, Rf=0)는 반응이 완료되었음을 나타냈다. HCl(4N)을 0℃에서 pH=3이 될 때까지 적하했다. 침전물을 진공에서 여과 및 농축에 의해 수집했다. 화합물 9-[(1R)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(3.03g, 7.04mmol, 96.37% 수율, 100% ee)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.22 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.09 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.24 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 6.09 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 5.71 (s, 1H), 5.08~5.02 (m, 1H), 3.69 (s, 8H), 1.48 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
카이랄 분석 기구: Waters Acquity UPC2; 칼럼: Chiralpak IC-3 3μm, 0.46cm id x 5cm L; 이동상: SFC CO2에 대한 A 및 EtOH(0.05% IPAm)에 대한 B; 그래디언트: 3분 안에 A 중의 B를 5%에서 50%로 ; 유량: 3.4mL/분; 칼럼 온도: 35oC; 파장: 220nm; 시스텝 배압: 1800 psi. Rt=1.771분; 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%)=100% ee.
9-((R)-1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((S)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 15의 단계 6)
THF(28mL) 중의 9-[(1R)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복시산(2.8g, 6.51mmol, 1당량), (3S)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(1.11g, 9.76mmol, 1.5당량) 및 DIEA(4.20g, 32.53mmol, 5.67mL, 5당량)의 용액에 T3P(6.21g, 9.76mmol, 5.80mL, 50% 순도, 1.5당량)를 0℃에서 적하했다. 생성된 혼합물을 20℃에서 10시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(1.5mL)로 ??칭하고 진공에서 농축했다. 물(40mL)을 잔류물에 첨가하고 혼합물을 DCM 및 i-PrOH(v :v=3:1, 40mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(70mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Xtimate C18 10u 250mm*80mm; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-55%, 26분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[(1R)-1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-7-[(3S)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐]-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(2.16g, 4.06mmol, 62.37% 수율, 98.91% 순도, 94.16% ee)를 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.87 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 6.97~6.96 (m, 1H), 6.22~6.20 (m, 1H), 6.10 (d, J = 10.8 Hz, 2H), 5.70 (s, 1H), 5.10~5.08 (m, 1H), 3.69 (s, 8H), 3.60~3.53 (m, 1H), 3.42~3.40 (m, 2H), 3.24~3.21 (m, 1H), 2.45~2.42 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.05 (s, 1H), 1.97 (s, 3H), 1.68~1.67 (m, 1H), 1.48 (d, J = 6.4 Hz, 3H). HPLC: 98.91% (220 nm), 99.01% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H32F2N6O3 526.25 m/z found 527.3 [M+H]+.
카이랄 분석 기구: Waters Acquity Arc; 칼럼: S,S_Whelk_O1, 3.5μm, 0.46cm id x 10cm L. 화합물 51 (Rt=RT=14.281분; 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%)=94.16%)을 얻고 화합물 48 - P4 (Rt=14.409분, 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%)=99.46%)로 식별되었다.
방식 16
방식 16에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
9-브로모-2-하이드록시-7-메틸-피리도[1,2-a] 피리미딘-4-온의 제조 (방식 16의 단계 1)
DCM(300mL) 중의 3-브로모-5-메틸-피리딘-2-아민(22g, 117.62mmol, 1당량)의 용액에 프로판디올 디클로라이드(18.24g, 129.39mmol, 12.58mL, 1.1당량)를 0℃에서 적하했다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 고체를 여과에 의해 형성하여 수집하고, DCM(10mL x 2)로 세척하고, 감소된 압력 하에서 건조시켰다. 화합물 9-브로모-2-하이드록시-7-메틸-피리도[1,2-a] 피리미딘-4-온(46g, 180.34mmol, 76.66% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.72 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 5.54 (s, 1H), 2.34 (s, 3H).
9-브로모-7-메틸-2-모르폴리노피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 16의 단계 2)
DCM(100mL) 중의 9-브로모-2-하이드록시-7-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(10g, 39.21mmol, 1당량)의 용액에 TEA(7.93g, 78.41mmol, 10.91mL, 2당량) 및 MsCl(6.29g, 54.89mmol, 4.25mL, 1.4당량)을 0℃에서 적하했다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. 이어서 모르폴린(10.25g, 117.62mmol, 10.35mL, 3당량)을 첨가했다. 혼합물을 50℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O(50mL)를 첨가하여 0℃에서 ??칭하고, 이어서 DCM(100mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 재결정(re-crystallization)에 의해 DCM(30mL)으로부터 정제하고 EtOAc(20mL x 2)로 세척하여 순수한 생성물 9-브로모-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(5g)을 노란색 고체로서 얻었다. 그리고 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 40g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~60% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 100mL/분)로 정제하여 순수한 생성물 9-브로모-7-메틸-2-모르폴리노피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(2g)을 노란색 고체로서 얻었다. 생성물의 2개의 배치를 혼합한 후 노란색 고체 화합물 9-브로모-7-메틸-2-모르폴린피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(7g, 수율 55.1%)을 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.60 (s, 1H), 8.17 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.61 (s, 1H), 3.68~3.64 (m, 8H), 2.29 (s, 3H).
7-메틸-2-모르폴리노-9-비닐피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 16의 단계 3)
디옥산(40mL) 및 H2O(10mL) 중의 9-브로모-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(3g, 9.25mmol, 1당량), 칼륨 하이드라이드;트리플루오로(비닐)보론(1.86g, 13.88mmol, 1.5당량), Pd(dppf)Cl2(338.57mg, 462.72umol, 0.05당량) 및 K2CO3(3.84g, 27.76mmol, 3당량)의 혼합물을 탈기하고 N2로 3회 퍼지하고, 이어서 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 N2 분위기 하에서 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하여 불용성을 제거하고 감소된 압력 하에서 농축하여 디옥산을 제거했다. 이어서 수성 물질을 DCM(20mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(10mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 재결정에 의해 DCM(10mL)으로부터 정제하고 EtOAc(10mL x 2)로 세척하여 순수한 생성물 7-메틸-2-모르폴리노-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1g)을 노란색 고체로서 얻었다. 그리고 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 12g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~10% 메탄올 : 티클로로메탄 그래디언트의 용리액 @ 60mL/분)로 정제하여 미정제 생성물 7-메틸-2-모르폴리노-9-비닐피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1.2g)을 노란색 고체로서 얻었다. 생성물의 2개의 배치를 혼합한 후 노란색 고체 화합물 7-메틸-2-모르폴린-9-비닐피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(2.2g, 수율 87.9%)을 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.58 (s, 1H), 7.97 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 17.6 Hz, 11.2 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.62 (s, 1H), 5.48 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.69~3.67 (m, 4H), 3.61~3.59 (m, 4H), 2.33 (s, 3H).
7-메틸-2-모르폴리노-4-옥소- 피리도[1,2-a]피리미딘-9-카르브알데히드의 제조 (방식 16의 단계 4)
디옥산(100mL) 및 H2O(20mL) 중의 7-메틸-2-모르폴리노-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(750mg, 2.76mmol, 1당량)의 용액에 이칼륨;이산화(디옥소)오시뮴;이수화물(101.85mg, 276.43umol, 0.1당량)을 25℃에서 첨가했다. 첨가 후, 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 NaIO4(1.77g, 8.29mmol, 459.53uL, 3당량)를 0℃에서 첨가했다. 생성된 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하여 불용성을 제거하고 감소된 압력 하에서 농축하여 디옥산을 제거했다. 이어서 수성 물질을 DCM(20mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(10mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 12g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~60% 디클로로메탄:에틸 아세테이트 그래디언트의 용리액 @ 100mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 7-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-9-카르브알데히드(300mg, 1.10mmol, 39.71% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 10.82 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.11 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.65 (s, 1H), 3.83~3.80 (m, 4H), 3.71~3.68 (m, 4H), 2.41 (s, 3H).
방식 16의 화합물의 제조 (방식 16의 단계 5)
MeOH(5mL/mmol) 중의 -메틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-9-카르브알데히드(365.92umol, 1당량), AcOH(10.98mmol, 30당량) 및 인돌린(474.50umol~731.84uumol, 1.1당량~2.0당량)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. 이어서 NaCNBH3(365.92umol~731.84umol, 1당량~2당량)를 0℃에서 조금씩 첨가하고 혼합물을 20℃에서 1시간~2시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.15) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=8로 만들고, 이어서 DCM으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 12g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~60% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 80mL/분) 또는 prep-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 100*25mm*3um 또는 Waters Xbridge Prep OBD C18 150*40mm*10um 또는 Phenomenex luna C18 80*40mm*3um; 이동상: [물(0.05% HCl) - MeCN]; B%: 15%-35%, 8분 또는 [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 45%-55%, 7분 또는 [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 18%-55%, 7분 또는 [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-55%, 8분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거하거나 또는 수용액을 동결 건조하여 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 52
9-[(4-플루오로인돌린-1-일)메틸]-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 16의 단계 5)
MeOH(3mL) 중의 7-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-9-카르브알데히드(0.1g, 365.92umol, 1당량), AcOH(659.22mg, 10.98mmol, 627.83uL, 30당량) 및 4-플루오로인돌린(70.26mg, 512.29umol, 1.4당량)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. 이어서 NaCNBH3(83.45mg, 731.84umol, 54.19uL, 2당량)를 0℃에서 조금씩 첨가하고 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.15)는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(10mL)로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=8로 만들고, 이어서 DCM(10mL x 4)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(10mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 12g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~60% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 80mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 잔류물을 H2O(20mL)로 희석하고 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[(4-플루오로인돌린-1-일)메틸]-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(66.4mg, 167.01umol, 45.64% 수율, 99.21% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.56 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.00 (dd, J = 14.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 6.39 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.32 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.66~3.64 (m, 4H), 3.61~3.59 (m, 4H), 3.53 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 3.02 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.29 (s, 3H). LCMS: 99.21 % (220 nm), 100.00 % (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H23FN4O2 394.18, m/z found 395.1 [M+H]+.
화합물 53
9-((4-플루오로-2-메틸인돌린-1-일)메틸)-7-메틸-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 방식 16의 단계 5에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(51mg, 118.63umol, 46.31% 수율, 95.01% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.55 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.94 (dd, J = 14.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 6.37 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.03 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 4.46 (dd, J = 18.4 Hz, 10.8 Hz, 2H), 3.95~3.89 (m, 1H), 3.68~3.66 (m, 4H), 3.61~3.59 (m, 4H), 3.29~3.25 (m, 1H), 2.69~2.62 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.27 (d, J = 6.0 Hz, 3H). LCMS: 95.01 % (220 nm), 96.20 % (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C23H25FN4O2 408.20, m/z found 409.2 [M+H]+.
화합물 54
9-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-7-메틸-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 방식 16의 단계 5에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(12.5mg, 29.49umol, 20.15% 수율, 97.30% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.56 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.30~6.24 (m, 2H), 5.62 (s, 1H), 4.53 (s, 2H), 3.65 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.60 (t, J = 7.2 Hz, 4H), 3.57~3.55 (m, 2H), 2.98 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H). MS: 97.30% (220 nm), 99.80% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H22F2N4O2 412.17 m/z found 413.2 [M+H]+.
화합물 55
9-((4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)메틸)-7-메틸-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 방식 16의 단계 5에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(3.9mg, 8.75umol, 5.98% 수율, 95.66% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (MeOD, 400 MHz) δ 8.62 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.11 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.82 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.74 (s, 1H), 4.54 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 4.06~3.93 (m, 1H), 3.80~3.76 (m, 4H), 3.73~3.69 (m, 4H), 3.28~3.25 (m, 1H), 2.70~2.64 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 1.33 (d, J = 6.4 Hz, 3H) LCMS: 95.66 % (220 nm), 98.49 % (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C23H24F2N4O2 426.19, m/z found 427.2 [M+H]+.
화합물 56
9-((5-플루오로인돌린-1-일)메틸)-7-메틸-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 방식 16의 단계 5에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(5.2mg, 12.46umol, 8.52% 수율, 94.55% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.56 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 6.96 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.80~6.70 (m, 1H), 6.45~6.42 (m, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.66 (t, J = 5.6 Hz, 4H), 3.61 (t, J=4.4 Hz, 4H), 3.45~3.43 (m, 2H), 2.97 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H). MS: 94.55% (220 nm), 97.88% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C22H23FN4O2 394.18 m/z found 395.2 [M+H]+.
화합물 57
7-메틸-9-((2-메틸인돌린-1-일)메틸)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 방식 16의 단계 5에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(11.2mg, 27.37umol, 18.70% 수율, 95.42% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz) δ 8.55 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.05 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.92 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.60 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 4.48~4.34 (m, 2H), 3.81 ~3.80 (m, 1H), 3.67 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.62 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.18 ~3.10 (m, 1H), 2.63 (s, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.27 (d, J = 6.0 Hz, 3H). MS: 95.42% (220 nm), 98.90% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C23H26N4O2 390.21 m/z found 391.2 [M+H]+.
방식 17
방식 17에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
9-아세틸-7-메틸-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 17의 단계 1)
디옥산(50mL) 중의 9-브로모-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(4.2g, 12.96mmol, 1당량), 트리부틸(1-에톡시비닐)스탄난(6.820g, 18.88mmol, 6.37mL, 1.46당량) 및 Pd(PPh3)2Cl2(454.69mg, 647.80umol, 0.05당량)의 혼합물을 100℃에서 10시간 동안 N2 하에서 교반했다. LC-MS는 9-브로모-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a] 피리미딘-4-온(4.2g, 12.96mmol, 1당량)이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 25℃로 냉각시키고, HCl(2M, 7.77mL, 1.2당량)을 첨가하여 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거하였다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 만들고 DCM(100mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 석유 에테르 및 EtOAc(v:v=10:1, 20mL x 2)로 분쇄했다. 고체를 여과 후 수집했다. 화합물 9-아세틸-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(2.8g, 9.75mmol, 75.22% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.74 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.65 (s, 1H), 3.69~3.65 (m, 4H), 3.60~3.55 (m, 4H), 2.67 (s, 3H), 2.33 (s, 3H).
9-(1-하이드록시에틸)-7-메틸-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 17의 단계 2)
MeOH(15mL) 및 DCM(4mL) 중의 9-아세틸-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(2.6g, 9.05mmol, 1당량) 및 CeCl3 .7H2O(3.37g, 9.05mmol, 860.11uL, 1당량)의 혼합물에 NaBH4(205.42mg, 5.43mmol, 0.6당량)를 -70℃에서 N2 하에서 조금씩 첨가했다. 혼합물을 -70℃에서 0.3시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(30mL)로 천천히 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 EtOAc(40mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(30mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 9-(1-하이드록시에틸)-7-메틸-2- 모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1.4g, 4.84mmol, 53.47% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.53 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 5.60 (s, 1H), 5.36 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.26~5.18 (m, 1H), 3.70~3.65 (m, 4H), 3.61~3.54 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 1.38 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
9-(1-브로모에틸)-7-메틸-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 17의 단계 3)
DCE(10mL) 중의 9-(1-하이드록시에틸)-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.6g, 2.07mmol, 1당량)의 혼합물에 PBr3(617.47mg, 2.28mmol, 1.1당량)를 0℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 조정했다. 수성상을 DCM(30mL x 2)으로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(20mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 9-(1-브로모에틸)-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a] 피리미딘-4-온(0.52g, 1.48mmol, 71.19% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.61 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.05~6.01 (m, 1H), 5.64 (s, 1H), 3.73~3.68 (m, 4H), 3.66~3.63 (m, 4H), 2.34 (s, 3H), 2.07 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
방식 17의 화합물의 제조 (방식 17의 단계 4)
DMA(5mL/mmol) 중의 무염기 또는 DIEA(8.5mmol, 5당량) 상태 하의 9-(1-브로모에틸)-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1.70mmol, 1당량) 및 4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린(3.41mmol, 2당량) 또는 4,6-디플루오로인돌린(1.70mmol, 1당량)의 혼합물을 50℃에서 10시간~12시간 동안 교반했다. LCMS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 물로 ??칭하고 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex luna C18 250*50mm*10um 또는 Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 55%-85%, 10분 또는 [물(10mM NH4HCO3)-MeCN]; B%: 30%-60%, 8분))로 정제했다. 용매를 동결 건조하에서 제거하여 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 58
9-(1-(4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)에틸)-7-메틸-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 17의 단계 4)
DMA(10mL) 중의 9-(1-브로모에틸)-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.6g, 1.70mmol, 1당량) 및 4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린(576.35mg, 3.41mmol, 2당량)의 혼합물을 50℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(50mL)로 ??칭하고 혼합물을 에틸 아세테이트(50mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(40mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex luna C18 250*50mm*10um; 이동상: [물(0.04% HCl) - MeCN]; B%: 55%-85%, 10분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[1-(4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린-1-일)에틸]-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.1716g, 359.79umol, 21.12% 수율, HCl)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.61 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 26.0 Hz, 1H), 6.24~5.94 (m, 2H), 5.64 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.37~5.02 (m, 1H), 4.37~4.13 (m, 1H), 3.63~3.58 (m, 4H), 3.51~3.36 (m, 4H), 3.28~3.19 (m, 1H), 2.43~2.39 (m, 1H), 2.33 (d, J = 13.0 Hz, 3H), 1.60 (dd, J = 4.0 Hz, 7.2 Hz, 3H), 1.11 (dd, J = 2.8, 6.2 Hz, 3H). EtOAc(5mL) 중의 9-[1-(4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린-1-일)에틸]-7-메틸-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.17g, 356.43umol, 1당량, HCl)의 용액을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=7로 조정했다. 유기층을 분리하고 수성상을 에틸 아세테이트(10mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(5mL x 2)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 MTBE 및 CH3CN(v:v=20:1, 30mL)로 분쇄했다. 화합물 9-[1-(4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린-1-일)에틸]-7-메틸-2-모르폴리노-피리도 [1,2-a]피리미딘-4-온(140.2mg, 312.56umol, 87.69% 수율, 98.2% 순도)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.61 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 24.0 Hz, 1H), 6.27~5.92 (m, 2H), 5.67~5.52 (m, 1H), 5.37~5.05 (m, 1H), 4.33~4.17 (m, 1H), 3.63~3.59 (m, 4H), 3.51~3.37 (m, 4H), 3.25~3.17 (m, 1H), 2.46~2.38 (m, 1H), 2.33 (d, J = 13.0 Hz, 3H), 1.60 (dd, J = 4.0 Hz, 7.2 Hz, 3H), 1.11 (dd, J = 3.2 Hz, 6.2 Hz, 3H). HPLC: 98.20% (220 nm), 99.52% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H26F2O2N4 440.20 m/z found 441.2 [M+H]+.
화합물 59
9-(1-(4,6-디플루오로인돌린-1-일)에틸)-7-메틸-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온을 방식 17의 단계 4에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
원하는 화합물(43.3mg, 97.00umol, 22.78% 수율, 95.53% 순도)을 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 8.59 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 6.19 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.08 (dd, J = 2.0 Hz, J = 10.8 Hz, 1H), 5.62 (s, 1H), 5.42 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 3.66~3.56 (m, 9H), 3.43~3.34 (m, 1H), 2.91~2.88 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.50 (d, J = 7.2 Hz, 3H). HPLC: 95.53% (220 nm), 98.98% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C23H24F2N4O2 426.19 m/z found 427.2 [M+H]+.
방식 18
화합물 60
4-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)-1H-피라졸-3(2H)-온의 제조 (방식 18의 단계 1-3)
2-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)아세트아미드의 제조 (방식 18의 단계 1)
DMF(5mL) 중의 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세트산(0.25g, 562.52umol, 1당량) 및 NH4Cl(90.27mg, 1.69mmol, 3당량)의 혼합물에 DIEA(218.11mg, 1.69mmol, 293.94uL, 3당량) 및 HATU(320.83mg, 843.78umol, 1.5당량)를 0℃에서 N2 하에서 첨가했다. 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS는 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세트산이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 얼음물(20mL)로 ??칭하고 수성상을 에틸 아세테이트(15mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(15mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 4g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~100% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 45mL/분, 0~20% MeOH/에틸 아세테이트의 용리액@ 45mL/분)로 정제했다. 화합물 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세트아미드(0.173g, 390.13umol, 69.35% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.73 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 6.93 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.20 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 5.53 (s, 1H), 4.98~4.91 (m, 1H), 3.76~3.70 (m, 4H), 3.55~3.50 (m, 4H), 3.43~3.79 (m, 2H), 1.48 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
6-((4H-1,2,4-트리아졸-3-일)메틸)-8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 18의 단계 2)
DMF(1mL) 중의 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일] 아세트아미드(60mg, 135.31umol, 1당량) 및 DMF-DMA(96.74mg, 811.83umol, 107.85uL, 6당량)의 혼합물을 25℃에서 36시간 동안 교반했다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 잔류물에 AcOH(8.13mg, 135.31umol, 7.74uL, 1당량) 및 NH2NH2 .H2O(13.82mg, 270.61umol, 13.42uL, 98% 순도, 2당량)를 25℃에서 첨가했다. 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS는 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세트아미드가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*25mm*5um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 20%-50%, 9분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-6-(4H-1,2,4-트리아졸-3-일메틸)크로멘-4-온(18.8mg, 38.35umol, 28.35% 수율, 95.37% 순도)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 13.75 (s, 1H), 8.40 and 7.81 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.92 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.20 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.53 (s, 1H), 4.97~4.91 (m, 1H), 4.04~4.01 (m, 2H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.52 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 1.48 (d, J = 5.6 Hz, 3H). HPLC: 95.37% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H23F2O3N5 467.18 m/z found 468.2 [M+H]+.
화합물 61
4-(8-(1-((3,5-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-일)-1H-피라졸-3(2H)-온의 제조 (방식 18의 단계 3)
DMF-DMA(897.00mg, 7.53mmol, 1 mL, 66.76당량) 중의 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]아세트아미드(50 mg, 112.75 umol, 1 eq)의 용액을 90℃에서 12시간 동안 교반했다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 농축했다. 이어서 AcOH(437.50mg, 7.29mmol, 416.67uL, 64.61당량) 및 NH2NH2 .H2O(83.31mg, 1.66mmol, 80.89uL, 14.76당량)를 25℃에서 첨가했다. 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 2-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘- 6-일]아세트아미드가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 20%-45%, 10분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 4-[8-[1-(3,5-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-일]-1,2-디하이드로피라졸-3-온(12.3mg, 24.12umol, 21.39% 수율, 91.87% 순도)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.11 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 6.90 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.21~6.14 (m, 3H), 5.53 (s, 1H), 4.98~4.93 (m, 1H), 3.73~3.68 (m, 4H), 3.54~3.50 (m, 4H), 1.52 (d, J = 6.0 Hz, 3H). HPLC: 91.87% (220 nm), 93.09% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H22F2O4N4 468.16 m/z found 469.3 [M+H]+.
화합물 62
8-((7-클로로-4-플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6))
화합물 62(18mg, 37.51umol, 15.49% 수율, 97.51% 순도)를 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.84 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.07~7.02 (m, 1H), 6.52 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 5.02 (s, 2H), 3.72~3.70 (m, 4H), 3.62 (t, J=8.8 Hz, 2H), 3.59~3.54 (m, 4H), 3.08 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.97 (s, 3H), 2.86 (s, 3H). LCMS: 97.51% (220 nm), 99.52% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H25ClFN3O4 485.15 m/z found 486.1 [M+H]+.
화합물 63
8-((4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6))
화합물 63(153.4mg, 316.06umol, 20.88% 수율, 99.62% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.82 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.28 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.69~4.58 (m, 2H), 3.99~3.91 (m, 1H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.53 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.27~3.19 (m, 1H), 2.95 (s, 3H), 2.85 (s, 3H), 2.68~2.63 (m, 1H), 1.23 (d, J = 6.0 Hz, 3H). HPLC: 99.62% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H27F2N3O4 483.20 m/z found 484.2 [M+H]+.
화합물 64 및 화합물 65
(S)-8-((4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드 및 (R)-8-((4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 63의 카이랄 분리를 수행했다. 카이랄 제조 기구: CAS-TJ-ANA-SFC-L(PDA를 갖는 Waters UPCC); 칼럼: Chiralpak AD-3, 50×4.6mm I.D., 3um. 2개의 이성질체를 얻었다. 구조는 무작위로 할당되었다. 화합물 64(Rt=1.318분, 카이랄 HPLC에 의한 E.E. (%) =100%); 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.81 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.28 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.09 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.70~4.51 (m, 2H), 3.97~3.94 (m, 1H), 3.70 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.54 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.27~3.24 (m, 1H), 2.95 (s, 3H), 2.85 (s, 3H), 1.23 (d, J = 6.0 Hz, 3H). HPLC: 100% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H27F2N3O4 484.2 m/z found 483.2 [M+H]+. 화합물 65(Rt=1.578분, 카이랄 HPLC (%)=100%에 의한 E.E.). 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.82 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.28 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 6.09 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.72~4.53 (m, 2H), 4.02~3.88 (m, 1H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.53 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.22~3.26 (m, 1H), 2.95 (s, 3H), 2.85 (s, 3H), 2.69~2.64 (m, 1H), 1.23 (d, J = 6.0 Hz, 3H). HPLC: 100% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H27F2N3O4 484.2 m/z found 483.2 [M+H]+.
화합물 66
8-((4,6-디플루오로-2,2-디메틸인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 66(15.5mg, 30.85umol, 11.32% 수율, 99.02% 순도)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.80 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.25 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 5.82 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.73 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.56 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.95~2.94 (m, 6H), 2.82 (s, 2H), 1.28 (s, 6H). LCMS: 99.02% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H29F2N3O4 497.21 m/z found 498.2 [M+H]+.
화합물 67
8-(인돌린-1-일메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 67(15.5mg, 30.85umol, 11.32% 수율, 99.02% 순도)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.84 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.07 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.99 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.65~6.56 (m, 2H), 5.59 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.67 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.52 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.31~3.28 (m, 2H), 2.98~2.86 (m, 8H). LCMS: 99.13% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H27N3O4 433.20 m/z found 434.2 [M+H]+..
화합물 68
8-((4-플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 68(50.4mg, 111.63umol, 46.09% 수율, 100% 순도)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz) δ 7.84 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.05~7.00 (m, 1H), 6.47~6.39 (m, 2H), 5.60 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.67 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.52 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.43 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 3.01 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.97 (s, 3H), 2.88 (s, 3H). MS: 100.00% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H26FN3O4 451.19 m/z found 452.2 [M+H]+.
화합물 69
8-((5-클로로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 69(51.1mg, 108.54umol, 44.82% 수율, 99.39% 순도)를 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz) δ 7.84 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.12~7.08 (m, 1H), 7.05~7.00 (m, 1H), 6.64~6.61 (m, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.55 (s, 2H), 3.68 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.52 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.38~3.37 (m, 2H), 2.97 (s, 6H), 2.91~2.76 (m, 2H). MS: 99.39% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H26ClN3O4 467.16 m/z found 468.2 [M+H]+.
화합물 70
8-((6-플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 70(29.8mg, 65.26umol, 26.95% 수율, 98.87% 순도)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.84 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.01 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.51~6.48 (m, 1H), 6.35~6.31 (m, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.68 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.52 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.39 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.97~2.50 (m, 8H). LCMS: 98.87% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H26FN3O4 451.19 m/z found 452.2 [M+H]+.
화합물 71
8-((4-클로로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 71(22.1mg, 45.74umol, 21.59% 수율, 96.86% 순도)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.84 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.01 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.68 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.52 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.43 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.02~2.87 (m, 8H). LCMS: 96.86% (220 nm), 98.21% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H26ClN3O4 467.16 m/z found 468.2 [M+H]+.
화합물 72
8-((7-메톡시인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 72(30.9mg, 65.12umol, 26.89% 수율, 97.68% 순도)를 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.83 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 6.82~6.62 (m, 3H), 5.58 (s, 1H), 4.82 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.68 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.54 (t, J = 4.0 Hz, 4H), 3.20 (t, J = 9.2 Hz, 2H), 2.97 (s, 3H), 2.92~2.84 (m, 5H). LCMS: 97.68% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H29N3O5 463.21 m/z found 464.2 [M+H]+.
화합물 73
8-((2,3-디하이드로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 73(12mg, 27.13umol, 8.96% 수율, 98.23% 순도)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.84 (s, 1H), 7.79 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.30 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.50 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 5.57 (s, 1H), 4.75 (s, 2H), 3.66 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.55 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.41 (t, J = 8.2 Hz, 2H), 2.97 ~2.90 (m, 8H). HPLC: 98.23% (220 nm), 99.69% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H26O4N4 434.20 m/z found 435.2 [M+H]+.
화합물 74
8-((2,3-디하이드로-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 74(27.1mg, 62.26umol, 25.71% 수율, 99.82% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz) δ 7.93 (s, 1H), 7.88 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.12 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 3.67 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.53 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.39~3.35 (m, 2H), 3.02~2.99 (m, 2H), 2.97 (s, 3H), 2.88 (s, 3H). MS: 99.82% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H26N4O4 434.20 m/z found 435.2 [M+H]+.
화합물 75
8-((6-플루오로-2,3-디하이드로-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 75(42.9mg, 94.81umol, 39.15% 수율, 100% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz,) δ 7.85 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.88 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.68 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.53 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.52~3.50 (m, 2H), 3.03~3.00 (m, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.89 (s, 3H). MS: 100.00% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H25FN4O4 452.19 m/z found 452.3 [M+H]+.
화합물 76
8-((2,3-디하이드로-1H-피롤로[3,2-b]피리딘-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 9의 단계 6)
화합물 76(25.9mg, 59.61umol, 24.61% 수율, 100.00% 순도)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.86 (s, 1H), 7.70 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.94 (t, J = 7.6 Hz, 1H)), 6.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.68~3.64 (m, 4H), 3.53~3.50 (m, 4H), 3.42 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 3.03 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.90 (s, 3H). LCMS: 100.00% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H26N4O4 434.20 m/z found 435.2 [M+H]+.
방식 19
화합물 77
(Z)-8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-4-(하이드록시이미노)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 19)
i-PrOH(3mL) 중의 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소- 크로멘-6-카르복스아미드(0.1g, 213.00umol, 1당량) 및 NH2OH.HCl(29.60mg, 426.00umol, 2당량)의 혼합물을 130℃에서 30분 동안 마이크로파 하에서 가열했다. LCMS는 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 30%-60%, 10분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 (4Z)-8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸] -4-하이드록시이미노-N,N-디메틸-2-모르폴리노-크로멘-6-카르복스아미드(15.9mg, 32.82umol, 15.41% 수율)를 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.63 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.31~6.11 (m, 2H), 4.35 (s, 2H), 3.71 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.49 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.21 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.98~2.88 (m, 8H). HPLC: 100% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H26O4N4F2 484.19 m/z found 485.3 [M+H]+.
화합물 78
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디에틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 78(43.5mg, 85.62umol, 37.88% 수율, 97.93% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz) δ 7.78 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.33~6.28 (m, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.70 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.54~3.52 (m, 4H), 3.49~3.47 (m, 2H), 3.29~3.27 (m, 4H), 2.99 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.12 (s, 3H), 1.00 (s, 3H). MS: 97.93% (220 nm), 99.19% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H29F2N3O4 497.21 m/z found 498.3 [M+H]+.
화합물 79
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N-에틸-N-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 79(18mg, 36.39umol, 16.10% 수율, 97.74% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.81 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.41~6.30 (m, 2H), 5.59 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.68 (s, 4H), 3.53~3.49 (m, 6H), 3.19~3.12 (m, 2H), 3.01~2.79 (m, 5H), 1.12~0.94 (m, 3H). LCMS: 97.74% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H27F2N3O4 483.20 m/z found 484.2 [M+H]+.
화합물 80
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N-에틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 80(15.7mg, 32.00umol, 28.31% 수율, 95.68% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 8.75~8.73 (m, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 6.44 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.32 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 3.69~3.66 (m, 4H), 3.54~3.50 (m, 4H), 3.46 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.24~3.20 (m,2), 2.96 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.12 (t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS: 95.68% (220 nm), 99.33% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H25F2N3O4 469.18 m/z found 470.2 [M+H]+.
화합물 81
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N-이소프로필-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 81(9.5mg, 19.50umol, 17.25% 수율, 99.24% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 8.55 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 6.43 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.33 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.12~4.05 (m, 1H), 3.73~3.63 (m, 4H), 3.55~3.50 (m, 4H), 3.46 (t, J=8.4 Hz, 2H), 2.95 (t, J=8.4 Hz, 2H), 1.16 (d, J=6.8 Hz, 6H). LCMS: 99.24% (220 nm), 99.84% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H27F2N3O4 483.20 m/z found 484.2 [M+H]+.
화합물 82
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N-(1-메틸피페리딘-4-일)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 82(14.1mg, 25.58umol, 22.63% 수율, 97.71% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz,) δ 8.56 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 6.47~6.44 (m, 1H), 6.34~6.29 (m, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.78~3.71 (m, 1H), 3.69~3.67 (m, 4H), 3.53~3.51 (m, 4H), 3.44 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 2.95 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.78 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.97~1.91 (m, 2H), 1.75~1.72 (m, 2H), 1.64~1.56 (m, 2H). MS: 97.71% (220 nm), 98.11% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C29H32F2N4O4 538.24 m/z found 539.3 [M+H]+.
화합물 83
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-2-모르폴리노-4-옥소-N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 83(18.8mg, 35.45umol, 31.37% 수율, 99.11% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz,) δ 8.64 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 6.47~6.44 (m, 1H), 6.34~6.30 (m, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.01~3.99 (m, 1H), 3.89 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 3.69~3.67 (m, 4H), 3.53~3.51 (m, 4H), 3.45 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.40 (s, 1H), 3.37 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 2.95 (t, J = 9.2 Hz, 2H), 1.75 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 1.66~1.59 (m, 2H). MS: 99.11% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C28H29F2N3O5 525.21 m/z found 526.2 [M+H]+.
화합물 84
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 84(21mg, 40.89umol, 36.18% 수율, 100% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.55 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 6.46 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.31 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.56 (s, 1H), 3.69~3.67 (m, 4H), 3.54~3.51 (m, 4H), 3.46 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.24 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.96 (t, J = 8.4 Hz, 2H). HPLC: 100% (220 nm), 99.72% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H29F2O5N3 513.21 m/z found 514.2 [M+H]+.
화합물 85
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N-이소부틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 85(24.1mg, 47.57umol, 42.09% 수율, 98.20% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.75 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 6.45 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.31 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.69~3.67 (m, 4H), 3.53~3.51 (m, 4H), 3.46 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.07 (t, J = 6.0 Hz 2H), 2.98 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 1.90~1.80 (m, 1H), 0.87 (d, J = 6.8 Hz, 6H). HPLC: 98.20% (220 nm), 98.72% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H29O4N3F2 497.21 m/z found 498.2 [M+H]+.
화합물 86
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 86(8.1mg, 16.45umol, 14.55% 수율, 92.48% 순도)을 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 8.68~8.67 (m, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.05s (s, 1H), 6.43 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.32 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.69~3.67 (m, 4H), 3.55~3.52 (m, 4H), 3.46 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.95 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.77 (d, J = 4.4 Hz, 3H). LCMS: 92.48% (220 nm), 90.06% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H23F2N3O4 455.17 m/z found 456.1 [M+H]+.
화합물 87
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-6-(3,3-디메틸아제티딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 87(47.1mg, 92.03umol, 50.89% 수율, 99.56% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.09 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 6.44 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 6.31 ( t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.67 (s, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.70~3.68 (m, 4H), 3.54~3.53 (m, 4H), 3.49 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.98 ( t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.22 (s, 6H). MS: 99.56% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C28H29F2N3O4 509.21 m/z found 510.3 [M+H]+.
화합물 88
1-(8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르보닐)-3-메틸아제티딘-3-카르보니트릴의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 88(21.2mg, 40.73umol, 22.52% 수율, 100% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 6.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.31 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.62~4.60 (m, 1H), 4.38~4.32 (m, 1H), 4.19~4.15 (m, 1H), 4.06~4.01 (m, 1H), 3.71~3.66 (m, 4H), 3.56~3.52 (m, 4H), 3.49 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 2.98 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 1.64 (s, 3H). LCMS: 100.00% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C28H26F2N4O4 520.19 m/z found 521.3 [M+H]+.
화합물 89
8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-6-(3-하이드록시아제티딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-크로멘-4-온의 제조 (방식 11의 단계 4)
화합물 89(19.5mg, 39.20umol, 21.68% 수율, 100.00% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.06 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 6.44 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.32 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.49~4.45 (m, 1H), 4.39~4.36 (m, 1H), 4.27~4.23 (m, 1H), 3.99~3.94 (m, 1H), 3.81~3.77 (m, 1H), 3.72~3.65 (m, 4H), 3.53~3.52 (m, 4H), 3.48 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 2.97 (t, J = 8.0 Hz, 2H). LCMS: 100.00% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H25F2N3O5 497.18 m/z found 498.2 [M+H]+.
방식 20
화합물 90
(R)-8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드 및 (R)-8-((4-플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 20의 단계 1-7)
(R)-메틸 8-브로모-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 20의 단계 1)
MeCN(80mL) 중의 메틸 8-브로모-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(8g, 23.31mmol, 1당량), (2R)-2-메틸모르폴린(4.81g, 34.97mmol, 1.03mL, 1.5당량, HCl) 및 DIEA(9.04g, 69.93mmol, 12.18mL, 3당량)의 용액을 105℃에서 15시간 동안 교반했다. 이어서 DIEA(3.01g, 23.31mmol, 4.06mL, 1당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 110℃에서 15시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=1:1, Rf=0.15) 및 LCMS는 ~40%의 메틸 8-브로모-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트가 생성되고 ~18%의 메틸 8-브로모-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트가 남았음을 나타냈다. 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 잔류물을 EtOAc(100mL) 및 물(100mL)에 용해시켰다. 갈색 고체를 일부 형성했다. 고체를 여과 후 수집했다. 여액의 경우, 유기층을 분리하고 수성 물질을 EtOAc(50mL x 2)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 물(30mL x 2) 및 염수(30mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 EtOAc(15mL) 및 석유 에테르(60mL)로 분쇄했다. 고체를 여과 후 수집했다. 화합물 메틸 8-브로모-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(6.7g, 17.53mmol, 75.20% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.40 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 5.65 (s, 1H), 4.02~3.89 (m, 6H), 3.64~3.61 (m, 2H), 3.17~3.15 (m, 1H), 2.84 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 1.10 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
(R)-메틸 2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 20의 단계 2)
디옥산(60mL) 및 H2O(10mL) 중의 메틸 8-브로모-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6- 카르복실레이트(6.7g, 17.53mmol, 1당량), Pd(dppf)Cl2(1.28g, 1.75mmol, 0.1당량), K2CO3(4.85g, 35.06mmol, 2당량) 및 칼륨 하이드라이드 트리플루오로(비닐)보론(3.52g, 26.29mmol, 1.5당량)의 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 N2 하에서 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.18) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 셀라이트의 패드를 통해 여과 후, 여액을 감소된 압력 하에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc(50mL) 및 물(50mL)에 용해시켰다. 황백색 고체를 일부 형성했다. 고체를 여과 후 수집했다. 여액을 DCM(50mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL x 4)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 합쳐진 미정제 생성물을 EtOAc(15mL) 및 석유 에테르(60mL)로 분쇄했다. 고체를 여과 후 수집했다. 화합물 메틸 2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복실레이트(5.7g, 17.31mmol, 98.73% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.39 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.20~7.13 (m, 1H), 6.07 (dd, J = 6.0 Hz, 18.0 Hz, 1H), 5.62~5.58 (m, 2H), 4.02~3.90 (m, 6H), 3.62~3.56 (m, 2H), 3.15~3.09 (m, 1H), 2.79 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
(R)-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복시산의 제조 (방식 20의 단계 3)
THF(30mL) 및 H2O(30mL) 중의 메틸 2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복실레이트(5.7g, 17.31mmol, 1당량) 및 LiOH.H2O(2.18g, 51.92mmol, 3당량)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.20) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 유기 용매의 절반을 감소된 압력 하에서 제거했다. 잔여 수성 물질 및 절반의 THF 상을 0℃에서 1N HCl을 사용하여 pH=4로 만들고 흰색 고체를 일부 형성했다. 고체를 여과 후 수집했다. 화합물 2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복시산(5.1g, 16.17mmol, 93.45% 수율)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 13.22 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.56~7.49 (m, 1H), 6.06 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.61~5.57 (m, 2H), 3.95~3.92 (m, 3H), 3.63~3.57 (m, 2H), 3.15~3.12 (m, 1H), 2.82~2.79 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
(R)-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 20의 단계 4)
THF(50mL) 중의 2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복시산(5.1g, 16.17mmol, 1당량), DIEA(10.45g, 80.87mmol, 14.09mL, 5당량) 및 N-메틸메탄아민(3.96g, 48.52mmol, 4.45mL, 3당량, HCl)의 혼합물에 T3P(15.44g, 24.26mmol, 14.43mL, 50% 순도, 1.5당량)를 0℃에서 적하했다. 혼합물을 20℃에서 8시간 동안 교반했다. TLC(EtOAc:MeOH=15:1, Rf=0.12) 및 LCMS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 얼음물(200mL)에 붓고 1N HCl을 사용하여 pH=6으로 만들었다. 혼합물을 EtOAc(80mL x 4)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 수성 물질을 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 80mL x 4)로 더 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(50mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 N,N-디메틸-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복스아미드(3g, 8.76mmol, 54.17% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.93 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.18 (dd, J = 7.6 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 22.0 Hz, 1H), 5.61 (s, 1H), 5.56 (d, J = 22.0 Hz, 1H), 4.02~3.92 (m, 3H), 3.63~3.60 (m, 2H), 3.13~3.10 (m, 1H), 3.01 and 2.94 (s, 6H), 2.79~2.72 (m, 1H), 1.16 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
(R)-8-포르밀-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조(방식 20의 단계 5)
THF(10mL) 및 H2O(10mL) 중의 N,N-디메틸-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복스아미드(0.5g, 1.46mmol, 1당량) 및 K2OsO4.2H2O(53.81mg, 146.03umol, 0.1당량)의 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반했다. 이어서 혼합물을 0oC로 냉각시키고 NaIO4(937.05mg, 4.38mmol, 242.76uL, 3당량)를 0℃에서 조금씩 첨가하고 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반했다. TLC(EtOAc:MeOH=15:1, Rf=0.15) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 20mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(10mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 8-포르밀-N,N-디메틸-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(0.5g, 1.45mmol, 99.43% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 10.41 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.10~4.02 (m, 3H), 3.62~3.59 (m, 2H), 3.02~2.99 (m, 1H), 2.99 and 2.92 (s, 6H), 2.82~2.79 (m, 1H), 1.05 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
(R)-8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 20 단계 6)
MeOH(3mL) 중의 8-포르밀-N,N-디메틸-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(0.5g, 1.16mmol, 80% 순도, 1당량), AcOH(2.09g, 34.85mmol, 1.99mL, 30당량) 및 4,6-디플루오로인돌린(270.32mg, 1.74mmol, 1.5당량)의 용액을 20℃에서 1.5시간 동안 교반했다. 이어서 NaBH3CN(145.99mg, 2.32mmol, 2당량)을 0℃에서 조금씩 첨가하고 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. HPLC 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(10mL)로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=8로 만들고, 이어서 EtOAc(10mL x 4)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(10mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge C18 150*50mm*10um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 30%-50%, 10분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[(-1-디플루오로아닐리노)메틸]-6-에티닐-2-모르폴리노-크로멘-6-원(140.6mg, 289.02umol, 24.88% 수율, 99.39% 순도, HCl)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.85 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.50~6.46 (m, 1H), 6.34~6.29 (m, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.66~4.60 (m, 2H), 3.94~3.87 (m, 3H), 3.56~3.50 (m, 2H), 3.43 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 2.98~2.90 (m, 9H), 2.75~2.69 (m, 1H), 1.07 (d, J = 6.4 Hz, 3H). HPLC: 99.39% (220 nm), 98.68% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H27F2N3O4 483.20 m/z found 484.2 [M+H]+.
화합물 91
(R)-8-((4-플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 20의 단계 7)
MeOH(50mL) 중의 8-포르밀-N,N-디메틸-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6- 카르복스아미드(5.5g, 15.97mmol, 1당량), AcOH(1.92g, 31.94mmol, 1.83mL, 2당량) 및 4-플루오로인돌린(2.19g, 15.97mmol, 1당량)의 용액을 20℃에서 1.5시간 동안 교반했다. 이어서 NaBH3CN(1.51g, 23.96mmol, 1.5당량)을 0℃에서 N2 하에서 조금씩 첨가했다.혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반했다. LC-MS 및 HPLC는 8-포르밀-N,N-디메틸-2 -[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(50mL)로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=8로 만들고, 이어서 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 80mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(30mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 80g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~14% 그래디언트 메탄올/에틸 아세테이트의 용리액 @130mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 미정제물(4.49g)을 prep-HPLC(칼럼: Xtimate C18 10 u 250*80mm; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-55%, 30분)로 추가로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[(4-플루오로인돌린-1-일)메틸]-N,N-디메틸-2- [(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(3.16g, 6.78mmol, 42.48% 수율, 99.94% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 이 배치(batch)를 ET34641-507 및 ET34641-509와 함께 결합하여 동결 건조 하에서 건조시키고 이어서 전달을 위해 함께 QC(quality control) 체크를 했다. 총 0.65g + 1.86g + 3.16g=5.67g을 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.85 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.06~7.00 (m, 1H), 6.50 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.42 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.97~3.86 (m, 3H), 3.54~3.53 (m, 2H), 3.45~3.40 (m, 2H), 3.07~3.06 (m, 1H), 2.98~2.88 (m, 8H), 2.76~2.72 (m, 1H), 1.05 (d, J = 6.4 Hz, 3H). HPLC: 99.94% (220 nm), 99.70% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H28FN3O4 465.21 m/z found 466.2 [M+H]+.
방식 21
화합물 92
(S)-8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-2-(2-(플루오로메틸)모르폴리노)-N,N-디메틸-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 21의 단계 1-8)
(S)-메틸 8-브로모-2-(2-(하이드록시메틸)모르폴리노)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조 (방식 21의 단계 1)
CH3CN(100mL) 중의 메틸 8-브로모-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(10g, 29.14mmol, 1당량) 및 [(2S)-모르폴린-2-일]메탄올(6.83g, 44.45mmol, 1.53당량, HCl)의 혼합물에 DIEA(15.06g, 116.56mmol, 20.30mL, 4당량)를 첨가했다. 혼합물을 100℃에서 36시간 동안 N2 하에서 교반했다. LCMS-MS는 메틸 8-브로모-2-에틸설파닐-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트가 거의 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc(150mL) 및 H2O(200mL)에 용해시켰다. 유기상을 분리하고 수성상을 에틸 아세테이트(80mL x 2)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(50mL x 2)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피 (Biotage®; 80g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~80% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 60mL/분)로 정제했다. 용매를 진공에서 농축했다. 화합물 메틸 8-브로모-2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(6.4g, 16.07mmol, 55.15% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.42 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.89 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.04~3.99 (m, 1H), 3.96 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.63~3.61 (m, 2H), 3.51~3.47 (m, 2H), 3.24 (t, J = 11.6 Hz, 1H), 2.99 (t, J = 11.6 Hz, 1H).
(S)-메틸 2-(2-(하이드록시메틸)모르폴리노)-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복실레이트의 제조(방식 21의 단계 2)
디옥산(50mL) 및 H2O(10mL) 중의 메틸 8-브로모-2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트(6.4g, 16.07mmol, 1당량) 및 칼륨 트리플루오로(비닐)보라누이드(3.23g, 24.11mmol, 1.5당량)의 혼합물에 K2CO3(4.44g, 32.14mmol, 2당량) 및 Pd(dppf)Cl2(588.01mg, 803.61umol, 0.05당량)를 첨가했다. 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 N2 하에서 교반했다. LC-MS는 메틸 8-브로모-2-[(2S)-2-(하이드록시메틸) 모르폴린-4-일]-4-옥소-크로멘-6-카르복실레이트가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 셀라이트의 패드를 통해 여과했다. 여액을 감소된 압력 하에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc(70mL) 및 H2O(100mL)에 용해시켰다. 유기층을 분리하고 수성상을 에틸 아세테이트(50mL x 2)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(35mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 메틸 2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복실레이트(4.3g, 12.45mmol, 77.47% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.39 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.19~7.12 (dd, J = 10.8 Hz, 17.6 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.61~5.59 (m, 2H), 4.83 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.99~3.94 (m, 2H ), 3.89 (s, 3H), 3.64~3.56 (m, 2H), 3.51~3.47 (m, 2H), 3.17 (t, J = 11.6 Hz, 1H), 2.95 (t, J = 11.6 Hz, 1H).
(S)-2-(2-(하이드록시메틸)모르폴리노)-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복시산의 제조 (방식 21의 단계 3)
THF(30mL) 중의 메틸 2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복실레이트(4.3g, 12.45mmol, 1당량)의 용액에 H2O(10mL) 중의 LiOH.H2O(1.57g, 37.35mmol, 3당량)의 용액을 0℃에서 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 2N HCl을 사용하여 pH=4로 조정했다. 수성상을 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 45mL x 5)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(35mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복시산(2.5g, 7.55mmol, 60.60% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 13.25 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.15 (dd, J = 11.2 Hz, 17.6 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.59~5.56 (m, 2H), 3.99~3.92 (m, 3H), 3.63~3.61 (m, 2H), 3.55~3.50 (m, 2H), 3.17 (t, J = 11.6 Hz, 1H), 2.94 (t, J = 11.6 Hz, 1H).
(S)-2-(2-(하이드록시메틸)모르폴리노)-N,N-디메틸-4-옥소-8-비닐-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 21의 단계 4)
DMF(20mL) 중의 2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-4-옥소-8-비닐-크로멘-6-카르복시산(2.5g, 7.55mmol, 1당량) 및 N-메틸메탄아민(1.85g, 22.64mmol, 2.07mL, 3당량, HCl)의 혼합물에 DIEA(4.88g, 37.73mmol, 6.57mL, 5당량) 및 HATU(4.30g, 11.32mmol, 1.5당량)를 0℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(10mL)에 붓고, 이어서 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 15mL x 4)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-N,N-디메틸-4-옥소-8- 비닐-크로멘-6-카르복스아미드(5g, 미정제)를 노란색 오일로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.94 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.17 (dd, J = 11.2 Hz, 17.6 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.59~5.55 (m, 2H), 3.99~3.91 (m, 3H), 3.63~3.54 (m, 4H), 3.16~3.13 (m, 2H), 3.01 (s, 3H), 2.95 (s, 3H).
(S)-8-포르밀-2-(2-(하이드록시메틸)모르폴리노)-N,N-디메틸-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 21의 단계 5)
THF(30mL) 및 H2O(10mL) 중의 2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-N,N-디메틸-4-옥소-8-비닐- 크로멘-6-카르복스아미드(4.5g, 12.56mmol, 1당량)의 용액에 K2OsO4 .2H2O(462.64mg, 1.26mmol, 0.1당량)를 25℃에서 첨가하고 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반했다. 이어서 혼합물을 0℃로 냉각시키고 NaIO4(8.06g, 37.67mmol, 2.09mL, 3당량)를 조금씩 첨가했다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반했다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(80mL)로 ??칭하고, 이어서DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 50mL x 5)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(30mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 8-포르밀-2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-N,N-디메틸-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(2.7g, 미정제)를 노란색 오일로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 10.40 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 5.64 (s, 1H), 3.81~3.74 (m, 2H), 3.51~3.47 (m, 3H), 3.17 (s, 6H), 2.94~2.90 (m, 2H), 2.87~2.83 (m, 2H).
(S)-8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-2-(2-(하이드록시메틸)모르폴리노)-N,N-디메틸-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 21의 단계 6)
MeOH(5mL) 중의 8-포르밀-2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-N,N-디메틸-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(0.2g, 277.50umol, 50% 순도, 1당량) 및 4,6-디플루오로인돌린(64.58mg, 416.25umol, 1.5당량)의 혼합물에 AcOH(499.93mg, 8.32mmol, 476.13uL, 30당량)를 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 N2 하에서 교반했다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 NaBH3CN(34.88mg, 555.00umol, 2당량)을 조금씩 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(0.5mL)로 ??칭하고 이어서 진공에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*25mm*5um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 20%-55%, 10분)로 정제했다. 용매를 진공에서 농축했다. 화합물 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-N,N-디메틸-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(5.8mg, 11.02umol, 3.97% 수율, 94.9% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.84 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.43 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.31 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 5.58 (s, 1H), 4.82 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.02~3.84 (m, 3H), 3.63~3.42 (m, 5H), 3.37~3.33 (m, 2H), 3.15~3.11 (m, 1H), 2.99~2.92 (m, 6H), 2.90~2.87 (m, 2H). HPLC: 94.91% (220 nm), 95.24% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H27O5N3F2 499.19 m/z found 500.2 [M+H]+.
(S)-(4-(8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-6-(디메틸카르바모일)-4-옥소-4H-크로멘-2-일)모르폴린-2-일)메틸 메탄설포네이트의 제조 (방식 21의 단계 7)
DCM(10mL) 중의 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-N,N-디메틸-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(150mg, 300.30umol, 1당량) 및 DIEA(116.43mg, 900.89umol, 156.92uL, 3당량)의 혼합물에 메틸설포닐 메탄설포네이트(62.77mg, 360.36umol, 1.2당량)를 0℃에서 N2 하에서 조금씩 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반했다. LCMS는 ~14%의 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-2-[(2S)-2-(하이드록시메틸)모르폴린-4-일]-N,N-디메틸-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드가 남았음을 나타내고, ~43%의 [(2S)-4-[8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-6-(디메틸 카르바모일)-4-옥소-크로멘-2-일]모르폴린-2-일]메틸 메탄설포네이트가 제거되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(30mL)로 ??칭하고, 이어서DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 15mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피 (Biotage®; 4g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~100% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 및 이어서 0~40% 메탄올/에틸 아세테이트 그래디언트의 용리액 @ 50mL/분)로 정제했다. 용매를 진공에서 농축했다. 화합물 [(2S)-4-[8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-6-(디메틸카르바모일)-4-옥소-크로멘-2-일]모르폴린-2-일]메틸 메탄설포네이트(0.1g, 173.13umol, 57.65% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. MS(ESI): 질량 계산. C27H29O7N3F2S 577.17m/z에 대하여 578.2 [M+H]+가 발견되었다.
화합물 93
(S)-8-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-2-(2-(플루오로메틸)모르폴리노)-N,N-디메틸-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 (방식 21의 단계 8)
CH3CN(2mL) 중의 [(2S)-4-[8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-6-(디메틸카르바모일)-4-옥소-크로멘-2-일]모르폴린-2-일]메틸 메탄설포네이트(0.1g, 173.13umol, 1당량)의 용액에 테트라메틸암모늄 플루오라이드 사수화물(143.01mg, 865.66umol, 5당량)를 80℃에서 N2 하에서 첨가하고 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반했다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex C18 80*40mm*3um; 이동상: [물(NH4HCO3) - MeCN]; B%: 35%-65%, 8분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 8-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-2-[(2S)-2-(플루오로메틸)모르폴린-4-일]-N,N-디메틸-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(13.5mg, 25.71umol, 14.85% 수율, 95.5% 순도)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.85 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.46 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.34~6.30 (m, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.63 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.54~4.34 (m, 2H), 4.06~3.92 (m, 3H), 3.88~3.72 (m, 2H), 3.60 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.46 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 3.13 (t, J = 8.4 Hz 1H), 2.98~2.90 (m, 8H). HPLC: 95.95% (220 nm), 97.29% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H26O4N3F3 501.19 m/z found 502.2 [M+H]+.
방식 22
화합물 94
9-(1-((3,4-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 13의 단계 1-3)
메틸 9-(1-((3,4-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 22의 단계 1)
DMA(5mL) 중의 메틸 9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(0.5g, 1.26mmol, 1당량) 및 3,4-디플루오로아닐린(488.75mg, 3.79mmol, 3당량)의 용액을 55℃에서 10시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=1:1, Rf=0.26) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(20mL)로 ??칭하고 EtOAc(10mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(5mL x 4)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 메틸 9-[1-(3,4-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(0.9g, 미정제)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.23 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.05~7.00 (m, 1H), 6.71 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.49~6.46 (m, 1H), 6.31~6.29 (m, 1H), 5.72 (s, 1H), 5.00 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.70 (s, 8H), 1.46 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
9-(1-((3,4-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산의 제조 (방식 22의 단계 2)
H2O(5mL) 및 THF(5mL) 중의 메틸 9-[1-(3,4-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(0.9g, 1.01mmol, 50% 순도, 1당량) 및 LiOH.H2O(127.46mg, 3.04mmol, 3당량)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.05) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 10mL의 물을 첨가하고 수성 물질을 MTBE(5mL x 3)로 추출하여 불순물을 제거했다. 수성 물질을 0℃에서 1N HCl을 사용하여 pH=4로 조정하고 고체를 일부 형성했다. 여과 후, 고체를 감소된 압력 하에서 수집 및 농축했다. 화합물 9-[1-(3,4-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(0.35g, 813.19umol, 80.31% 수율)을 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.20 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.08~7.00 (m, 1H), 6.64 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.41~6.36 (m, 1H), 6.21~6.16 (m, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.00 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 3.70 (s, 8H), 1.46 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
9-(1-((3,4-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 22의 단계 3)
THF(2mL) 중의 9-[1-(3,4-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(0.15g, 348.51umol, 1당량), (3R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(97.81mg, 522.76umol, 108.68uL, 1.5당량, 2HCl) 및 DIEA(225.21mg, 1.74mmol, 303.51uL, 5당량)의 용액에 T3P(332.67mg, 522.76umol, 310.90uL, 50% 순도, 1.5당량)를 0℃에서 적하했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 10시간 동안 교반했다. HPLC 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(3mL)로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 2mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(2mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 15%-45%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[1-(3,4-디플루오로아닐리노)에틸]-7-[(3R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐]-2-모르폴리노-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(96.4mg, 180.25umol, 51.72% 수율, 98.46% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.86 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.06~7.02 (m, 1H), 6.61~6.54 (m, 1H), 6.42~6.39 (m, 1H), 6.19~6.14 (m, 1H), 5.71 (s, 1H), 5.06~5.01 (m, 1H), 3.70 (s, 8H), 3.40~3.33 (m, 2H), 3.20~3.03 (m, 2H), 2.69~2.61 (m, 1H), 2.15~1.94 (m, 7H), 1.68~1.63 (m, 1H), 1.47 (d, J = 6.0 Hz, 3H). HPLC: 98.46% (220 nm), 100% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H32F2N6O3 526.25 m/z found 527.3 [M+H]+.
화합물 95
9-(1-((2,3-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 22의 단계 1)
메틸 9-(1-((2,3-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 22의 단계 2)
DMA(3mL) 중의 메틸 9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(0.3g, 757.13umol, 1당량)의 용액에 2,3-디플루오로아닐린(293.25mg, 2.27mmol, 230.91uL, 3당량)을 첨가했다. 혼합물을 55℃에서 10시간 동안 교반했다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(2mL)로 천천히 ??칭하고 침전물을 일부 형성했다. 침전물을 여과 후 수집했다. 화합물 메틸 9-[1-(2,3-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(203mg, 456.76umol, 60.33% 수율)를 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.23 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 6.83~6.77 (m, 1H), 6.62 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.54~6.48 (m, 1H), 6.15 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.73 (s, 1H), 5.17 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.70 (s, 8H), 1.53 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
9-(1-((2,3-디플루오로페닐)아미노)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산의 제조 (방식 22의 단계 2)
THF(1mL) 및 H2O(0.5mL) 중의 메틸 9-[1-(2,3-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(200mg, 450.01umol, 1당량)의 용액에 LiOH.H2O(56.65mg, 1.35mmol, 3당량)를 첨가했다.혼합물을 20℃에서 8시간 동안 교반하고 반응 혼합물이 투명한 용액이 되었다. LCMS 및 TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=0:1, Rf=0)는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 HCl(2M)을 사용하여 pH=4로 조정하고 침전물을 일부 형성했다. 침전물을 여과 후 수집했다. 화합물 9-[1-(2,3-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복시산(173mg, 401.95umol, 89.32% 수율)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 13.54 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 6.81~6.77 (m, 1H), 6.58 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.54~6.50 (m, 1H), 6.15 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 5.71 (s, 1H), 5.17 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.69 (s, 8H), 1.53 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
9-(1-((2,3-디플루오로페닐)아미노)에틸)-7-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 13의 단계 3)
THF(1mL) 중의 9-[1-(2,3-디플루오로아닐리노)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘 -7-카르복시산(100mg, 232.34umol, 1당량) 및 (3R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민디하이드로클로라이드(130.42mg, 697.02umol, 3당량)의 용액에 DIEA(180.17mg, 1.39mmol, 242.81 uL, 6당량)를 첨가했다. 이어서 T3P(221.78mg, 348.51umol, 207.27uL, 50% 순도, 1.5당량)를 0℃에서 N2 하에서 적하했다. 반응 혼합물을 20℃에서 10시간 동안 교반했다. LCMS 및 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(0.1mL)로 ??칭하고 진공에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 20%-50%, 10분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[1-(2,3-디플루오로아닐리노)에틸]-7-[(3R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐]-2-모르폴리노-피리도 [1,2-a]피리미딘-4-온(44.7mg, 84.36umol, 36.31% 수율, 99.38% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz,) δ 8.86 (s, 1H), 7.95~7.90 (m, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.57~6.49 (m, 2H), 6.18 (t, J = 1.0 Hz,, 1H), 5.71 (s, 1H), 5.19 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 3.69 (8 s, 8H), 3.52~3.48 (m, 1H), 3.40 (s, 2H), 3.25~3.12 (m, 1H), 2.69 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.07~2.04 (m, 3H), 1.97~1.93 (m, 1H), 1.70~1.65 (m, 1H), 1.55 (d, J = 6.4 Hz, 3H). MS: 99.38% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C27H32F2N6O3 526.25 m/z found 527.3 [M+H]+.
방식 23
화합물 96
9-(1-(4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)에틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드의 제조 (방식 23의 단계 1-3)
메틸 9-(1-(4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 23의 단계 1)
DMA(10mL) 중의 메틸 9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(0.5g, 1.26mmol, 1당량) 및 4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린(213.47mg, 1.26mmol, 1당량)의 혼합물을 55℃에서 12시간 동안 교반했다. 혼합물을 이어서 100℃에서 12시간 동안 교반했다. LC-MS는 메틸 9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(50mL)로 ??칭하고 에틸 아세테이트(30mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(20mL x 2)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트~에틸 아세테이트:메탄올=30/1 내지 4/1)로 정제했다. 용매를 진공에서 농축했다. 화합물 메틸 9-[1-(4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린-1-일)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(0.36g, 743.04umol, 58.88% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.28 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 6.26~6.13 (m, 2H), 5.92 (s, 1H), 5.20~5.07 (m, 1H), 4.31~4.27 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.68~3.65 (m, 6H), 3.48~3.43 (m, 4H), 1.62 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
9-(1-(4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산의 제조 (방식 23의 단계 2)
THF(8mL) 및 H2O(8mL) 중의 메틸 9-[1-(4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린-1-일)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(80mg, 165.12umol, 1당량)의 용액에 LiOH.H2O(20.79mg, 495.36umol, 3당량)를 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LC-MS는 메틸 9-[1-(4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린-1-일)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 물(10mL)을 잔류물에 첨가하고 2M HCl을 사용하여 pH=4로 조정했다. 흰색 침전물을 형성했다. 여과 후, 화합물 9-[1-(4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린-1-일)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(50㎎, 106.28umol, 64.36% 수율)을 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 13.57 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 6.25~6.11 (m, 2H), 5.91 (s, 1H), 5.21~5.07 (m,1H), 4.32~4.29 (m, 1H), 3.67~3.64 (m, 6H), 3.48~3.42 (m, 4H), 1.63 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
화합물 97
9-(1-(4,6-디플루오로-2-메틸인돌린-1-일)에틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드의 제조 (방식 23의 단계 3)
DMF(2mL) 중의 9-[1-(4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린-1-일)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도 [1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(50mg, 106.28umol, 1당량) 및 N-메틸메탄아민(2M, 192.23uL, 3.62당량)의 혼합물에 DIEA(68.68mg, 531.39umol, 92.56uL, 5당량) 및 HATU(60.61mg, 159.42umol, 1.5당량)를 0℃에서 N2 하에서 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 용액을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*25mm*5um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 40%-70%, 10분)로 정제했다. 용매를 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[1-(4,6-디플루오로-2-메틸-인돌린-1-일)에틸]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드(15.1mg, 29.65umol, 27.90% 수율, 97.71% 순도)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.80 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 6.20~5.99 (m, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.12~5.10 (m, 1H), 4.30~4.27 (m, 1H), 3.64~3.61 (m, 6H), 3.48~3.39 (m, 4H), 2.98 (s, 6H), 1.65~1.58 (m, 3H), 1.16~1.12 (m, 3H). HPLC: 97.71% (220 nm), 98.55% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H29O3N5F2 497.22 m/z found 498.2 [M+H]+.
9-(1-(7-클로로인돌린-1-일)에틸)-7-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 23의 단계 1-3)
메틸 9-(1-(7-클로로인돌린-1-일)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 23의 단계 1)
DMA(3mL) 중의 메틸 9-(1-브로모에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(0.2g, 504.75umol, 1당량) 및 7-클로로인돌린 (100.79mg, 656.18umol, 1.3당량)의 용액을 55℃에서 10시간 동안 교반했다. 이어서 혼합물을 70℃에서 10시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:에틸 아세테이트=1:1, Rf=0.26) 및 LCMS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(20mL)로 ??칭하고 EtOAc(10mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(5mL x 4)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 메틸 9-[1-(7-클로로인돌린-1-일)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(0.2g, 426.50umol, 84.50% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.29 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 6.99~6.93 (m, 2H), 6.56~6.51 (m, 1H), 6.32~6.30 (m, 1H), 5.67 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.62~3.56 (m, 8H), 3.54 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.00 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 1.55 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
9-(1-(7-클로로인돌린-1-일)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산의 제조 (방식 23의 단계 2)
THF(3mL) 및 H2O(3mL) 중의 메틸 9-[1-(7-클로로인돌린-1-일)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(0.2g, 426.50umol, 1당량) 및 LiOH.H2O(53.69mg, 1.28mmol, 3당량)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(석유 에테르:EtOAc=0:1, Rf=0.05) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 10mL의 물을 첨가하고 수성 물질을 MTBE(5mL x 3)로 추출하여 불순물을 제거했다. 수성 물질을 0℃에서 1N HCl을 사용하여 pH=4로 만들고 고체를 일부 형성했다. 여과 후, 고체를 감소된 압력 하에서 수집 및 농축했다. 화합물 9-[1-(7-클로로인돌린-1-일)에틸]-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산 (0.13g, 285.77umol, 67.00% 수율)를 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 13.55 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.01~6.93 (m, 2H), 6.54 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.32 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 3.76~3.64 (m, 10H), 2.89 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.55 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
9-(1-(7-클로로인돌린-1-일)에틸)-7-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온의 제조 (방식 23의 단계 3)
THF(2mL) 중의 9-(1-(7-클로로인돌린-1-일)에틸)-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복시산(0.13g, 285.77umol, 1당량), (3R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(80.21mg, 428.66umol, 89.12uL, 1.5당량, 2HCl) 및 DIEA(184.67mg, 1.43mmol, 248.88uL, 5당량)의 용액에 T3P(272.78mg, 428.66umol, 254.94uL, 50% 순도, 1.5당량)를 0℃에서 적하했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 5시간 동안 교반했다. HPLC 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(3mL)로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 2mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(2mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 22%-52%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-(1-(7-클로로인돌린-1-일)에틸)-7-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-카르보닐)-2-모르폴리노-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(57mg, 98.09umol, 34.32% 수율, 94.83% 순도)를 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.90 (s, 1H), 7.88~7.76 (m, 1H), 6.96~6.92 (m, 2H), 6.54 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.36~6.31 (m, 1H), 5.64 (s, 1H), 3.69~3.55 (m, 12H), 3.30~3.28 (m, 2H), 2.92~2.89 (m, 2H), 2.54~2.48 (m, 1H), 2.18~1.95 (m, 7H), 1.75~1.68 (m, 1H), 1.55 (d, J = 6.8 Hz, 3H). HPLC: 94.83% (220 nm), 97.70% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C29H35ClN6O3 550.25 m/z found 551.3 [M+H]+.
방식 24
화합물 98
방식 24에서 화합물을 제조하기 위한 일반 절차
메틸 2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 24의 단계 1)
디옥산(50mL) 및 H2O(5mL) 중의 메틸 9-브로모-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(5g, 13.58mmol, 1당량), 칼륨 하이드라이드 트리플루오로(비닐)보론(2.73g, 20.37mmol, 1.5당량), Pd(dppf)Cl2(496.84mg, 679.01umol, 0.05당량) 및 K2CO3(3.75g, 27.16mmol, 2당량)의 혼합물을 탈기하고 N2로 3회 퍼지하고 이어서 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 N2 분위기 하에서 교반했다. LC-MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물에 DCM(80mL) 및 물(80mL)을 첨가하고, 이어서 셀라이트 패드를 통해 여과했다. 유기층을 분리하고 수성 물질을 DCM(60mL x 2)으로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(100mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 DCM(3mL) 및 EtOAc(30mL)로 분쇄하고, 이어서 감소된 압력 하에서 건조시켜 2.7g의 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트를 얻었다. 여액을 농축하고 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 20g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~100% (에틸 아세테이트:DCM=4:1)/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @50mL/분)로 추가로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거하여 0.26g의 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트를 얻었다. 화합물 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(2.96g, 9.37mmol, 69.03% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.24 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.28 (dd, J = 6.8 Hz, 11.2 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 18.0 Hz, 1H), 5.68 (s, 1H), 5.55 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.70~3.56 (m, 8H).
2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산의 제조(방식 24의 단계 2)
H2O(10mL) 및 THF(10mL) 중의 메틸 2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(1.9g, 6.03mmol, 1당량)의 용액에 LiOH.H2O(1.01g, 24.10mmol, 4당량)를 첨가했다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. TLC(EtOAc:MeOH=20:1, Rf=0.05) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 0℃에서 2N HCl을 사용하여 pH=4로 만들고 노란색 고체를 일부 형성했다. 여과 후, 고체를 감소된 압력 하에서 수집 및 농축했다. 화합물 2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산 (1.7g, 5.64mmol, 93.64% 수율)를 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.25 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.31 (dd, J = 6.0 Hz, 11.2 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.69 (s, 1H), 5.55 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.70~3.66 (m, 8H).
N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드의 제조 (방식 24의 단계 3)
DMF(15mL) 중의 2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(1.7g, 5.64mmol, 1당량), N-메틸 메탄아민(1.38g, 16.93mmol, 1.55mL, 3당량, HCl) 및 DIEA(3.65g, 28.21mmol, 4.91mL, 5당량)의 용액에 HATU(2.79g, 7.33mmol, 1.3당량)를 0℃에서 조금씩 첨가했다. 이어서 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반했다. TLC(EtOAc:MeOH=20:1, Rf=0.1) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 얼음물(50mL)로 ??칭하고 혼합물을 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 30mL x 4)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(20mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 40g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~23% MeOH/에틸 아세테이트 그래디언트의 용리액 @30mL/분)로 정제했다. 용리액을 감소된 압력 하에서 제거했다. 화합물 N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드(1.5g, 4.57mmol, 80.96% 수율)를 연노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.78 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.34 (dd, J = 6.8 Hz, 10.8 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 18.0 Hz, 1H), 5.68 (s, 1H), 5.54 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.70~3.66 (m, 8H), 3.02 (s, 6H).
9-포르밀-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드의 제조 (방식 24의 단계 4)
THF(20mL) 및 H2O(20mL) 중의 N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드(1.4g, 4.26mmol, 1당량) 및 K2OsO4 .2H2O(157.09mg, 426.35umol, 0.1당량)의 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반했다. 이어서 NaIO4(2.74g, 12.79mmol, 708.75uL, 3당량)를 0℃에서 조금씩 첨가하고 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반했다. TLC(EtOAc:MeOH=20:1, Rf=0.12) 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 EtOAc(20mL x 4)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(15mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 이어서 수성 물질을 DCM 및 i-PrOH(v:v=3:1, 20mL x 4)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(15mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 화합물 9-포르밀-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복스아미드(1g, 3.03mmol, 71.00% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 10.69 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 5.73 (s, 1H), 3.70~3.66 (m, 8H), 3.02 (s, 6H).
방식 24의 단계 5의 화합물의 제조
MeOH(6mL/mmol~8mL/mmol) 중의 9-포르밀-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7- 카르복스아미드(454.08umol, 1당량), AcOH(13.62mmol, 779.07uL, 30당량) 및 인돌린(590.30umol 698.46umol, 1.3당량~2.0당량)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. 이어서 NaBH3CN(908.16umol, 2당량)을 0℃에서 조금씩 첨가하고 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. 혼합물을 0℃에서 얼음물로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=8로 만들고, 이어서 EtOAc로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um 또는 Phenomenex Gemini - NX C18 75*30mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3 - MeCN]; B%: 20%-55%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조하여 원하는 생성물을 얻었다.
9-((4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드의 제조 (방식 24의 단계 5)
MeOH(3mL) 중의 9-포르밀-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7- 카르복스아미드(0.3g, 454.08umol, 50% 순도, 1당량), AcOH(818.03mg, 13.62mmol, 779.07uL, 30당량) 및 4,6-디플루오로인돌린(152.64mg, 590.30umol, 60% 순도, 1.3당량)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. 이어서 NaBH3CN(57.07mg, 908.16umol, 2당량)을 0℃에서 조금씩 첨가하고 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반했다. HPLC 및 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃에서 얼음물(1mL)로 ??칭하고 유기 용매를 감소된 압력 하에서 제거했다. 수성 물질을 포화 NaHCO3를 사용하여 pH=8로 만들고, 이어서 EtOAc(2mL x 4)로 추출했다. 합쳐진 유기층을 염수(5mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감소된 압력 하에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-45%, 8분)로 정제했다. 용리액을 동결 건조 하에서 제거했다. 화합물 9-[(4,6-디플루오로인돌린-1-일)메틸]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드(37mg, 77.30umol, 17.02% 수율, 98.08% 순도)를 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.77 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 6.33~6.26 (m, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.55 (s, 2H), 3.69~3.62 (m, 8H), 3.60 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 3.00 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 2.97 (s, 6H). HPLC: 98.08% (220 nm), 97.97% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H25F2N5O3 469.19 m/z found 470.2 [M+H]+.
화합물 99
9-((4,7-디플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드를 방식 24의 단계 5에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
화합물 99(14.8mg, 30.17umol, 16.61% 수율, 95.72% 순도)를 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.78 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 6.95~6.88 (m, 1H), 6.45~6.40 (m, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.70 (s, 2H), 3.69~3.66 (m, 8H), 3.57 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.07 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 2.97 (s, 6H). HPLC: 95.72% (220 nm), 98.26% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H25F2N5O3 469.19 m/z found 470.2 [M+H]+.
화합물 100
9-((4-클로로-7-플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드를 방식 24의 단계 5에 대해 본원에 설명된 절차에 따라 제조했다.
화합물 100(13.6mg, 27.27umol, 9.01% 수율, 97.45% 순도)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 8.77 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 6.96~6.91 (m, 1H), 6.65~6.62 (m, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.70 (s, 2H), 3.65 (s, 8H), 3.57 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.07 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 2.97 (s, 6H). LCMS: 97.45% (220 nm), 98.43% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C24H25ClFN5O3 485.16 m/z found 486.1 [M+H]+.
방식 25
화합물 101
(R)-9-((4-플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드의 제조 (방식 25의 단계 1-6)
(R)-메틸 9-브로모-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 25의 단계 1)
DCM(60mL) 중의 메틸 9-브로모-2-하이드록시-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(4.3g, 14.38mmol, 1당량) 및 Et3N(2.91g, 28.76mmol, 4.00mL, 2당량)의 혼합물에 MsCl(3.63g, 31.69mmol, 2.45mL, 2.20당량)을 0℃에서 N2 하에서 적하했다. 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반했다. 이어서 (2R)-2-메틸모르폴린 하이드로클로라이드(2.00g, 14.53mmol, 1당량) 및 DIEA(3.76g, 29.06mmol, 5.06mL, 2당량)를 25℃에서 첨가했다. 반응 혼합물을 50℃에서 12시간 동안 교반했다. LCMS는 반응이 거의 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 이어서 2N HCl을 사용하여 pH=7로 조정했다. 유기상을 분리하고 수성상을 DCM(50mL x 3)으로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(40mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 미정제 생성물을 DCM(15mL)로 25℃에서 30분 동안 분쇄했다. 화합물 메틸 9-브로모-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(2.6g, 6.80mmol, 46.82% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.24 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 3.95~3.93 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.56~3.46 (m, 2H), 3.36~3.33 (m, 2H), 3.04~3.02 (m, 1H), 2.75~2.66 (m, 1H), 1.16 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
(R)-메틸 2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-9-비닐-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트의 제조 (방식 25의 단계 2)
디옥산(20mL) 및 H2O(10mL) 중의 메틸 9-브로모-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(2.6g, 6.80mmol, 1당량) 및 칼륨 트리플루오로(비닐)보라누이드(1.37g, 10.20mmol, 1.5당량)의 혼합물에 K2CO3(1.88g, 13.61mmol, 2당량) 및 Pd(dppf)Cl2(248.87mg, 340.13umol, 0.05당량)를 25℃에서 N2 하에서 첨가했다. 반응 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반했다. LCMS는 메틸 9-브로모-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트가 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 셀라이트의 패드를 통해 여과했다. 여액을 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc(30mL) 및 H2O(30mL)에 용해시켰다. 유기상을 분리하고 수성상을 에틸 아세테이트(20mL x 2)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(20mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Brotage®; 40g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~100% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 80mL/분)로 정제했다. 용매를 진공에서 농축했다. 화합물 메틸 2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복실레이트(0.9g, 2.73mmol, 40.17% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.25 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.30 (dd, J = 11.2 Hz, 17.6 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.71 (s, 1H), 5.56 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.93~3.89 (m, 4H), 3.58~3.49 (m, 2H), 3.01 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 2.69 (t, J = 11.6 Hz, 1H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
(R)-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-9-비닐-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산의 제조 (방식 25의 단계 3)
THF(5mL) 중의 메틸 2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복실레이트(0.9g, 2.73mmol, 1당량)의 용액에 H2O(5mL) 중의 LiOH.H2O(344.02mg, 8.20mmol, 3당량)의 용액을 25℃에서 첨가했다. 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 2N HCl을 사용하여 pH=4로 조정했다. 노란색 침전물을 여과 후 수집했다. 화합물 2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(0.66g, 2.09mmol, 76.60% 수율)을 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.25 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.31 (dd, J = 11.6 Hz, 18.0 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.56 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.93~3.90 (m, 2H), 3.55~3.48 (m, 3H), 3.04~2.98 (m, 1H), 2.69~2.50 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
(R)-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-9-비닐-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드의 제조 (방식 25의 단계 4)
DMF(10mL) 중의 2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복시산(0.66g, 2.09mmol, 1당량), Me2NH(512.04mg, 6.28mmol, 575.33uL, 100% 순도, 3당량, HCl) 및 DIEA(1.35g, 10.47mmol, 1.82mL, 5당량)의 혼합물에 HATU(1.19g, 3.14mmol, 1.5당량)를 0℃에서 N2 하에서 조금씩 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반했다. LCMS는 2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복시산이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 얼음물(15mL)로 ??칭하고 에틸 아세테이트(20mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(20mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 잔류물을 플래시 실리카 겔 크로마토그래피(Biotage®; 8g SepaFlash® 실리카 플래시 칼럼, 0~100% 에틸 아세테이트/석유 에테르 그래디언트의 용리액 @ 45mL/분)로 정제했다. 용매를 진공에서 농축하였다. 화합물 N,N-디메틸-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드(0.43g, 1.26mmol, 60.00% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.77 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.34 (dd, J = 11.2 Hz, 18.0 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.54 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.69~3.59 (m, 1H), 3.55~3.45 (m, 2H), 3.23~3.08 (m, 2H), 3.02 (s, 6H), 2.99~2.93 (m, 1H), 2.70~2.62 (m, 1H), 1.24 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
(R)-9-포르밀-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드의 제조 (방식 25의 단계 5)
THF(5mL) 및 H2O(5mL) 중의 N,N-디메틸-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-9-비닐-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복스아미드(0.2g, 584.13umol, 1당량)의 용액에 K2OsO4 .2H2O(21.52mg, 58.41umol, 0.1당량)를 첨가하고 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반했다. 이어서 NaIO4(374.82mg, 1.75mmol, 97.10uL, 3당량)를 위의 혼합물에 0℃에서 조금씩 첨가하고 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반했다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 얼음물(20mL)로 ??칭하고 이어서 에틸 아세테이트(20mL x 3)로 추출했다. 합쳐진 유기상을 염수(15mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 여과 및 농축했다. 화합물 9-포르밀-N,N-디메틸-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드(0.1g, 290.39umol, 49.71% 수율)를 노란색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 10.70 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 3.92~3.90 (m, 1H), 3.53~3.47 (m, 4H), 3.02 (s, 6H), 2.97~2.95 (m, 1H), 2.73~2.71 (m, 1H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
(R)-9-((4-플루오로인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-(2-메틸모르폴리노)-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드의 제조 (방식 25의 단계 6)
MeOH(10mL) 중의 9-포르밀-N,N-디메틸-2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-피리도[1,2-a] 피리미딘-7-카르복스아미드(0.1g, 290.39umol, 1당량) 및 4-플루오로인돌린(39.83mg, 290.39umol, 1당량)의 혼합물에 AcOH(523.16mg, 8.71mmol, 498.24uL, 30당량)를 25℃에서 첨가하고 혼합물을25℃에서 12시간 동안 교반했다. 이어서 혼합물을 0℃로 냉각시키고 NaBH3CN(36.50mg, 580.78umol, 2당량)을 조금씩 첨가했다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반했다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 얼음물(1mL)로 ??칭하고 감소된 압력 하에서 45℃에서 농축했다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Phenomenex Gemini-NX 80*30mm*3um; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - MeCN]; B%: 25%-55%, 8분)로 정제했다. 동결 건조 하에서 용매를 제거했다. 화합물 9-[(4-플루오로인돌린-1-일)메틸]-N,N-디메틸 -2-[(2R)-2-메틸모르폴린-4-일]-4-옥소-피리도[1,2-a]피리미딘-7-카르복스아미드(18.0mg, 37.08umol, 12.77% 수율, 95.89% 순도)를 황백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 8.77 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.02~6.96 (m, 1H), 6.41~6.34 (m, 2H), 5.70 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.42~4.26 (m, 2H), 3.87 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.57~3.46 (m, 4H), 3.03 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.96 (s, 6H), 2.95~2.93 (m, 1H), 2.64~2.61 (m, 1H ), 1.13 (d, J = 6.4 Hz, 3H). HPLC: 95.89% (220 nm), 99.55% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C25H28O3N5F 465.22 m/z found 466.2 [M+H]+.
화합물 102 및 화합물 103
(S)-8-((4-플루오로-2-메틸인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드 및 (R)-8-((4-플루오로-2-메틸인돌린-1-일)메틸)-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드의 제조 257mg의 화합물 33을 카이랄 분리에 의해 수행했다.
(카이랄 제조 기구: Thar 80 제조 SFC; 칼럼: DAICEL CHIRALPAK AD (250mm*30mm,10um); 이동상: [Neu-EtOH]; B%: 55%-55%, 6분). 2개의 이성질체를 얻었고 카이랄 중심이 무작위로 할당되었다.
화합물 102가 8-[[(2S)-4-플루오로-2-메틸-인돌린-1-일]메틸]-N,N-디메틸 -2-모르폴리노-4- 옥소-크로멘-6-카르복스아미드(흰색 고체, 108.1mg, 232.22umol, 42.06% 수율, 100% 순도, Rt=1.452분 카이랄 HPLC 상, 99.72% e.e.)로 지정되었다. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.81 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.96 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.38 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.63~4.54 (m, 2H), 3.89 (d, J=5.2 Hz, 1H), 3.70 (s, 4H), 3.53 (s, 4H), 2.94 (s, 3H), 2.84 (s, 3H), 2.68~2.63 (m, 2H), 1.26 (d, J = 5.2 Hz, 3H). HPLC:100.00% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H28FN3O4 465.21 m/z found 466.2 [M+H]+.
화합물 103이 8-[[(2R)-4-플루오로-2-메틸- 인돌린-1-일]메틸]-N,N-디메틸-2-모르폴리노-4-옥소-크로멘-6-카르복스아미드(흰색 고체, 97mg, 208.37umol, 37.74% 수율, 100% 순도, Rt=1.800분, 카이랄 HPLC 상, 98.52% e.e.)로 지정되었다.
카이랄 분석 기구: PDA를 갖는 워터스 UPCC; 칼럼: Chiralpak AD-3, 50*4.6mm I.D., 3um; 이동상: [CO2-EtOH(0.05% IPAm)]; B%: 5%-50%, 3분; 유량: 3.4mL/분; 칼럼 온도: 35oC; ABPR: 1800 psi. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 7.81 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.96 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.64~4.54 (m, 2H), 3.89 (d, J=5.6 Hz, 1H), 3.70 (s, 4H), 3.53 (s, 4H), 2.94 (s, 3H), 2.84 (s, 3H), 2.68~2.63 (m, 2H), 1.25 (d, J = 4.4 Hz, 3H). HPLC:100.00% (220 nm), 100.00% (254 nm). MS (ESI): mass calcd. For C26H28FN3O4 465.21 m/z found 466.2 [M+H]+.
세포 분석
HCC70 세포에서 AKT의 인산화를 정량화하여 PI3Kβ 억제제의 세포 활성을 결정했다. Ser473 및 Thr308에서 인산화된 AKT를 웨스턴 블롯팅(western blotting), 및 세포 신호 전달(Cell Signaling(CST)), Danvers, MA로부터의 특정 1차 항체를 사용하여 측정했다. 1일째에, HCC70 세포(ATCC #CRL-2315)를 10% 열 비활성화 FBS(GIBCO #10438026), 1% 펜-스트렙(GIBCO #15140122)을 함유하는 1ml의 완전 배양 배지(RPMI-1640, GIBCO #11875093)에, 웰당 100,000세포로 Falcon 12-웰 세포 배양 플레이트(Corning #353043)에 시드하고, 37℃, 5% CO2에서 하룻밤 동안 배양했다. 2일째에, 화합물(500nM) 또는 DMSO(0.1%, Sigma Aldrich #8418)를 첨가하고 세포를 총 부피 1ml의 신선한 배지에서 37℃, 5% CO2에서 60분 동안 더 배양했다.
세포 처리 기간 종료 시, 흡입에 의해 배지를 제거하고 부착 세포를 100uL RIPA 완충액(Sigma Aldrich # R0278)에 용해시켰다. 동일한 부피(15uL)의 단백질을 SDS-PAGE로 분석하고 면역블롯 분석을 위해 PVDF(Millipore #IPFL00010) 막으로 이동시켰다. 후속 단백질에 대한 1차 항체를 면역블롯팅에 사용했다: 인광체-AKT (Ser473) (CST #4060), 인광체-AKT (Thr308) (CST #2965), 총 AKT (CST #9272). 2차 염소 항-토끼 IgG 형광단 접합 항체(Invitrogen #A21109)를 사용하여 Odyssey CLx 이미징 시스템(Li-Cor) 상에서, 표시된 단백질을 시각화했다. 밴드 강도의 정량화는 Odyssey 3.0 소프트웨어를 사용하여 수행했다. Akt 활성 억제는 하기 공식을 사용하여 밴드 강도로 계산했다.
Akt 억제(AI) =
지수는 AI %에 의해 평가되었다. 데이터는 지수 + (20~60%), ++ (60%-80%), +++ (80%-90%), 및 ++++ > 90%를 나타낸다.
효소 결합 분석(KINOMEscan.)
본원에 개시된 화합물의 키나아제 효소 결합 친화성은 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재의 Eurofins DiscoveRx Corporation (www.eurofinsdiscoveryservices.com)에 의해 수행된 KINOMEscan 기술을 사용하여 결정되었다. 표 2는 얻어진 PIK3β Kd 값(nM)을 나타내고, PIK3β Kd는 억제제 결합 상수이다. 표 3은 얻어진 Kd 값(nM)을 나타내고, Kd는 억제제 결합 상수이다:
표 2. 생물학적 데이터 - PIK3β 결합 활성 및 세포 분석
표 3. 생물학적 데이터 - 결합 활성 및 세포 분석
출원인의 개시는 도면을 참조하여 바람직한 실시형태로 본원에 기재되어 있으며, 여기서 동일한 숫자는 동일하거나 또는 유사한 요소를 나타낸다. 본 명세서 전반에 걸쳐 "하나의 양태, "일 양태" 또는 유사한 언어에 대한 참조는, 그 양태와 관련하여 설명된 특정한 특징, 구조 또는 특성이 본 발명의 적어도 하나의 양태에 포함됨을 의미한다. 따라서, 본 명세서 전반에 걸쳐 "하나의 양태에서", "일 양태에서"라는 어구 및 유사한 언어의 출현은 반드시 그런 것은 아니지만 모두 동일한 양태를 지칭한다.
출원인의 개시의 설명된 특징, 구조 또는 특성은 하나 이상의 양태에서 임의의 적합한 방식으로 조합될 수 있다. 본원의 설명에서, 본 발명의 양태에 대한 완전한 이해를 제공하기 위해 다수의 구체적인 세부사항이 언급된다. 그러나, 관련 기술 분야의 통상의 기술자는 출원인의 조성물 및/또는 방법이 하나 이상의 특정한 세부 사항 없이, 또는 다른 방법, 성분, 재료 등으로 실시될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 다른 예에서, 주지된 구조, 재료 또는 동작은 본 개시의 국면을 모호하게 하는 것을 피하기 위해 상세하게 나타나거나 설명되지 않았다.
본 명세서 및 첨부된 청구항에서, 단수 형태 "a", "an" 및 "the"는 문맥상 명백하게 달리 지시하지 않는 한, 복수 지시 대상을 포함한다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 설명된 것과 유사하거나 또는 등가인 방법 및 재료가 본 개시의 실행 또는 시험에 사용될 수 있지만, 적합한 방법 및 재료가 이제 설명된다. 본원에 언급된 방법은 개시된 특정 순서 외에, 논리적으로 가능한 임의의 순서로 수행될 수 있다.
참조로 포함
특허, 특허 출원, 특허 간행물, 저널, 서적, 논문, 웹 콘텐츠와 같은 다른 문서에 대한 참조 및 인용이 본 개시에서 이루어졌다. 이러한 모든 문서는 모든 목적을 위해 그 전문이 참조로 본원에 포함된다. 본원에 참조로 포함되었다고 하지만, 본원에 명시적으로 기재된 기존 정의, 진술 또는 기타 개시 자료와 상충하는 모든 자료 또는 그 일부는, 포함된 자료와 본 개시 자료 사이에서 상충하지 않는 범위까지만 포함된다. 상충하는 경우, 본 개시를 우선 개시로 하여 상충이 해결되어야 한다.
균등물
대표적인 실시예는 본 발명을 예시하는 데 도움을 주기 위해 의도된 것이고, 본 발명의 범위를 제한하려는 의도가 아니며 그렇게 해석되어서도 안 된다. 실제로, 본원에 도시되고 설명된 것 외에도, 본 발명의 다양한 변형 및 그 다수의 추가 양태는, 본원에 포함된 과학 및 특허 문헌에 대한 실시예 및 참조를 포함하는 본 문서의 전체 내용으로부터 통상의 기술자에게 명백할 것이다. 실시예는 본 발명의 다양한 실시예 및 등가물에서 본 발명의 실시에 적용될 수 있는 중요한 추가 정보, 예시 및 지침을 포함한다.

Claims (45)

  1. 하기 구조식 (I)을 갖는 화합물:

    여기서
    A는 탄소를 나타내고 B는 산소를 나타내거나, 또는 A 및 B는 각각 질소를 나타내고;
    W는 -CHR-Q- 또는 -Q-CHR-을 나타내고; 여기서 Q는 결합, O, S, CH2 또는 NR'을 나타내고; R 및 R'은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되고;
    Rw는 Ar 또는 치환 또는 비치환된 인돌린기를 나타내고, 여기서 Ar은 치환 또는 비치환된 6원 방향족 또는 헤테로-방향족 고리를 포함하는 기이고;
    R2는 C1-3알킬, CN, CH2OH, CH2F 또는 CONH2를 나타내고;
    R1은 H, NH2, OH, CN, CF3, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, C1-4알킬, O-C1-4알킬, Het, Ar, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p , P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; 단, A가 탄소이고, B가 산소이고 Rw가 Ar일 때, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; A 및 B가 질소일 때, Rw는 Ar이고, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe, C(=O)-NR1qR1r를 나타내고, 여기서 R1q 및 R1r 은 함께 C1-3알킬 및 NR3aR3b 로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 형성하고;
    여기서 R1a, R1b, R1c, R1d, R1e, R1h, R1i, R1j, R1k, R1l, R1m, R1n, R1o, R1p는 H, C1-4알킬, C3-8사이클로알킬, C3-8헤테로사이클로알킬, 또는, 하이드록실, OMe, CN, 플루오로, NR3aR3b, C3-8사이클로알킬, C3-8 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4알킬에서 각각 독립적으로 선택되고; R1a 및 R1b, R1d 및 R1e, R1n 및 R1o는 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성해도 되고;
    C1-4알킬은 비치환되거나 또는 OH, F, NR1dR1e로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
    R3a 및 R3b는 H, 및 C1-4알킬로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되고;
    Het는 O, S, S(=O)p 및 N에서 각각 독립적으로 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 3원 내지 8원 포화 또는 부분 포화 모노사이클릭, 브릿지된 또는 스피로 헤테로사이클릴을 나타내고; 이는 할로, NR3aR3b, C1-4알킬, OH, OMe 및 CN으로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4를 나타내고; 및
    p는 1 또는 2를 나타낸다;
    또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태 또는 이의 동위원소 유도체.
  2. 제1항에 있어서,
    A는 탄소이고 B는 산소이고, 하기 구조식 (Ia)를 갖는, 화합물:
  3. 제2항에 있어서, Rw는 Ar인, 화합물.
  4. 제3항에 있어서, W는 -CHR4-NR5-이고, 여기서 R4 및 R5는 H, 메틸 또는 에틸에서 각각 독립적으로 선택되는, 화합물.
  5. 제2항에 있어서, Rw 는 치환 또는 비치환된 인돌린기인, 화합물.
  6. 제5항에 있어서, W는 -CHR4이고, 여기서 R4는 H, 메틸 또는 에틸에서 선택되는, 화합물.
  7. 제1항에 있어서, A 및 B는 각각 질소인, 구조식 (Ib)를 갖는, 화합물:
  8. 제7항에 있어서, Rw는 Ar인, 화합물.
  9. 제8항에 있어서, W는 -CHR4-NR5-이고, 여기서 R4 및 R5는 H, 메틸 또는 에틸에서 각각 독립적으로 선택되는, 화합물.
  10. 제7항에 있어서, Rw 는 치환 또는 비치환된 인돌린기인, 화합물.
  11. 제10항에 있어서, W는 -CHR4이고, 여기서 R4는 H, 메틸 또는 에틸에서 선택되는, 화합물.
  12. 제4항, 제6항, 제9항 또는 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4 및 R5는 각각 H인, 화합물.
  13. 제4항, 제6항, 제9항 또는 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4 및 R5 중 적어도 하나는 메틸 또는 에틸인, 화합물.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    Ar 또는 인돌린기는 할로겐, C1-4알킬, OC1-4알킬, CN, CHF2, CF3 및 CH2OH로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된, 화합물.
  15. 제14항에 있어서,
    Ar 또는 인돌린기는 적어도 하나의 F 원자로 치환된, 화합물.
  16. 제14항에 있어서,
    Ar 또는 인돌린기는 2개의 F 원자로 치환된, 화합물.
  17. 제1항, 제2항, 제5항, 제7항 또는 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    W-Rw는 하기로부터 선택되고:

    여기서 R은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되는, 화합물.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, n은 0인, 화합물.
  19. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, n은 1인, 화합물.
  20. 제19항에 있어서, R2는 C1-3알킬인, 화합물.
  21. 제19항에 있어서, R2는 CH2OH, CN 또는 CONH2인, 화합물.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1은 C(=O)-NR1aR1b이고, 여기서 R1a 및 R1b는 H 및 C1-4알킬로부터 각각 독립적으로 선택되는, 화합물.
  23. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1은 C(=O)-NR1qR1r이고, 여기서 R1q 및 R1r은 C1-3알킬 및 NR3aR3b 중 하나 이상으로 치환되어도 되는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하는, 화합물.
  24. 제23항에 있어서,
    R1q 및 R1r은 C1-3알킬로 치환된 5원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하는, 화합물.
  25. 제23항에 있어서,
    R1q 및 R1r은 NR3aR3b로 치환된 5원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하는, 화합물.
  26. 제25항에 있어서, R3a 및 R3b는 각각 메틸인, 화합물.
  27. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1은 하이드록시, -O-C1-4알킬 및 NR1cR1d로 치환되어도 되는 C1-4알킬인, 화합물.
  28. 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 화합물:















    또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태 또는 이의 동위원소 유도체.
  29. 인간을 포함하는 포유동물에서 하나 이상의 질병 또는 장애를 치료하거나 또는 감소시키는 데 유효한 제1항 내지 제28항에 따른 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는, 약제학적 조성물.
  30. 인간을 포함하는 포유동물에서 하나 이상의 질병 또는 장애를 치료하거나 또는 감소시키는 데 유효한 하기 구조식 (I)을 갖는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 형태 또는 이의 동위원소 유도체, 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체, 또는 희석제를 포함하는, 약제학적 조성물:

    여기서
    A는 탄소를 나타내고 B는 산소를 나타내거나, 또는 A 및 B는 각각 질소를 나타내고;
    W는 -CHR-Q- 또는 -Q-CHR-을 나타내고; 여기서 Q는 결합, O, S, CH2 또는 NR'을 나타내고; R 및 R'은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되고;
    Rw는 Ar 또는 치환 또는 비치환된 인돌린기를 나타내고, 여기서 Ar은 치환 또는 비치환된 6원 방향족 또는 헤테로-방향족 고리를 포함하는 기이고;
    R2는 C1-3알킬, CN, CH2OH, CH2F 또는 CONH2를 나타내고;
    R1은 H, NH2, OH, CN, CF3, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, C1-4알킬, O-C1-4알킬, Het, Ar; NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O) NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; 단, A가 탄소이고, B가 산소이고 Rw가 Ar일 때, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; A 및 B가 질소일 때, Rw는 Ar이고, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe, C(=O)-NR1qR1r를 나타내고, 여기서 R1q 및 R1r은 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성하고;
    여기서 R1a, R1b, R1c, R1d, R1e, R1h, R1i, R1j, R1k, R1l, R1m, R1n, R1o, R1p는 H, C1-4알킬, C3-8사이클로알킬, C3-8헤테로사이클로알킬, 또는, 하이드록실, OMe, CN, 플루오로, NR3aR3b, C3-8사이클로알킬, C3-8 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4알킬에서 각각 독립적으로 선택되고; R1a 및 R1b, R1d 및 R1e, R1n 및 R1o는 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성해도 되고;
    C1-4알킬은 비치환되거나 또는 OH, F, NR1dR1e로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
    R3a 및 R3b는 H, 및 C1-4알킬로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되고;
    Het는 O, S, S(=O)p 및 N에서 각각 독립적으로 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 3원 내지 8원 포화 또는 부분 포화 모노사이클릭, 브릿지된 또는 스피로 헤테로사이클릴을 나타내고; 이는 할로, NR3aR3b, C1-4알킬, OH, OMe 및 CN으로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4를 나타내고; 및
    p는 1 또는 2를 나타낸다.
  31. 제29항 또는 제30항에 있어서, 경구 투여에 적합한, 약제학적 조성물.
  32. 제29항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 암을 치료하거나 또는 감소시키는 데 유용한, 약제학적 조성물.
  33. 제29항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 유방암, 결장암, 자궁내막암, 신장암, 폐암, 흑색종, 전립선암, 갑상선암 또는 백혈병을 치료하거나 또는 감소시키는 데 유용한, 약제학적 조성물.
  34. 제29항 내지 제33항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 포함하는, 단위 투약 형태.
  35. 제34항에 있어서, 경구 투여에 적합한, 단위 투약 형태.
  36. 제35항에 있어서, 정제 또는 캡슐인, 단위 투약 형태.
  37. 제34항에 있어서, 정맥내 투여에 적합한, 단위 투약 형태.
  38. 제37항에 있어서, 액체 제형의 형태인, 단위 투약 형태.
  39. 인간을 포함하는 포유동물에서, 암, 또는 관련 질병 또는 장애를 치료하는 데 유효한 하기 구조식 (I)을 갖는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 형태 또는 이의 동위원소 유도체를 포함하는 약제학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 질병 또는 장애를 치료 또는 감소시키는 방법:

    여기서
    A는 탄소를 나타내고 B는 산소를 나타내거나, 또는 A 및 B는 각각 질소를 나타내고;
    W는 -CHR-Q- 또는 -Q-CHR-을 나타내고; 여기서 Q는 결합, O, S, CH2 또는 NR'을 나타내고; R 및 R'은 수소, C1-4알킬, 또는 -OH 또는 할로로 치환된 C1-4알킬에서 독립적으로 선택되고;
    Rw는 Ar 또는 치환 또는 비치환된 인돌린기를 나타내고, 여기서 Ar은 치환 또는 비치환된 6원 방향족 또는 헤테로-방향족 고리를 포함하는 기이고;
    R2는 C1-3알킬, CN, CH2OH, CH2F 또는 CONH2를 나타내고;
    R1은 H, NH2, OH, CN, CF3, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, C1-4알킬, O-C1-4알킬, Het, Ar, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; 단, A가 탄소이고, B가 산소이고 Rw가 Ar일 때, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe를 나타내고; A 및 B가 질소일 때, Rw는 Ar이고, R1은 NH2, CN, CHO, COC1-4알킬, CH2C(=O)-NR1aR1b, CH2COOR1c, NR1dR1e, O-C2-4알킬, Het, NR1h(C=O)R1i, NR1j(C=O)NR1kR1l, NR1j(SO2)R1m, SO2NR1nR1o, NR1j(C=O)C(CN)C(OH)R1p, P(O)MeMe, P(O)OMeOMe, C(=O)-NR1qR1r를 나타내고, 여기서 R1q 및 R1r은 함께 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 형성하고;
    여기서 R1a, R1b, R1c, R1d, R1e, R1h, R1i, R1j, R1k, R1l, R1m, R1n, R1o, R1p는 H, C1-4알킬, C3-8사이클로알킬, C3-8헤테로사이클로알킬, 또는, 하이드록실, OMe, CN, 플루오로, NR3aR3b, C3-8사이클로알킬, C3-8 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4알킬에서 각각 독립적으로 선택되고; R1a 및 R1b, R1d 및 R1e, R1n 및 R1o는 C1-3알킬 및 NR3aR3b로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기를 갖는 3원 내지 8원 질소-함유 헤테로사이클릴 고리를 함께 형성해도 되고;
    C1-4알킬은 비치환되거나 또는 OH, F, NR1dR1e로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
    R3a 및 R3b는 H, 및 C1-4알킬로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되고;
    Het는 O, S, S(=O)p 및 N에서 각각 독립적으로 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 함유하는 3원 내지 8원 포화 또는 부분 포화 모노사이클릭, 브릿지된 또는 스피로 헤테로사이클릴을 나타내고; 이는 할로, NR3aR3b, C1-4알킬, OH, OMe 및 CN으로 이루어지는 군에서 각각 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4를 나타내고; 및
    p는 1 또는 2를 나타낸다.
  40. 제39항에 있어서,
    암은 유방암, 결장암, 자궁내막암, 신장암, 폐암, 흑색종, 전립선암, 갑상선암 또는 백혈병에서 선택되는 것인, 방법.
  41. 질병 또는 장애를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서의 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항의 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제의 용도.
  42. 제41항에 있어서,
    질병 또는 장애는 암, 또는 관련 질병 또는 장애인 것인, 용도.
  43. 제41항 또는 제42항에 있어서,
    암은 유방암, 결장암, 자궁내막암, 신장암, 폐암, 흑색종, 전립선암, 갑상선암 및 백혈병에서 선택되는 것인, 용도.
  44. 제41항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 약제는 경구 투여용인, 용도.
  45. 제41항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서,
    약제는 정맥내 투여용인, 용도.
KR1020237029259A 2021-02-01 2022-01-25 포스포이노시티드 3 키나아제 베타 억제제 및 그 조성물 및 방법 KR20240016938A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163144287P 2021-02-01 2021-02-01
US63/144,287 2021-02-01
PCT/US2022/013725 WO2022164812A1 (en) 2021-02-01 2022-01-25 Phosphoinositide 3 kinase beta inhibitors and compositions and methods thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20240016938A true KR20240016938A (ko) 2024-02-06

Family

ID=82654889

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237029259A KR20240016938A (ko) 2021-02-01 2022-01-25 포스포이노시티드 3 키나아제 베타 억제제 및 그 조성물 및 방법

Country Status (8)

Country Link
EP (1) EP4284375A1 (ko)
JP (1) JP2024508045A (ko)
KR (1) KR20240016938A (ko)
CN (1) CN117615763A (ko)
AU (1) AU2022214080A1 (ko)
CA (1) CA3209581A1 (ko)
IL (1) IL304895A (ko)
WO (1) WO2022164812A1 (ko)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3217937A1 (en) 2021-05-03 2022-11-10 Erin Danielle ANDERSON Allosteric chromenone inhibitors of phosphoinositide 3-kinase (pi3k) for the treatment of disease
US11878970B2 (en) 2021-05-27 2024-01-23 Petra Pharma Corporation Allosteric chromenone inhibitors of phosphoinositide 3-kinase (PI3K) for the treatment of disease
WO2024081904A1 (en) * 2022-10-14 2024-04-18 Genesis Therapeutics, Inc. Methods for treating cancer
WO2024081889A1 (en) * 2022-10-14 2024-04-18 Genesis Therapeutics, Inc. 4h-pyrido[1,2-a]pyrimidin-4-one derivatives for treating cancer

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1891699A (zh) * 2000-01-24 2007-01-10 基纳西亚股份有限公司 用于治疗的吗啉代基取代的化合物
CA2495661C (en) * 2002-08-16 2011-06-14 Kinacia Pty Ltd. Inhibition of phosphoinositide 3-kinase beta
US8399460B2 (en) * 2009-10-27 2013-03-19 Astrazeneca Ab Chromenone derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
CN117615763A (zh) 2024-02-27
JP2024508045A (ja) 2024-02-21
AU2022214080A1 (en) 2023-09-14
CA3209581A1 (en) 2022-08-04
IL304895A (en) 2023-10-01
WO2022164812A1 (en) 2022-08-04
EP4284375A1 (en) 2023-12-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5766820B2 (ja) Ｐｉ３キナーゼ阻害剤としての複素環化合物
WO2020108590A1 (zh) 嘧啶并五元氮杂环类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
JP6819585B2 (ja) Ｂｒｋ阻害化合物
CN102459272B (zh) 对P110δ具有选择性的为PI3K抑制剂的二环嘧啶化合物和使用方法
KR20240016938A (ko) 포스포이노시티드 3 키나아제 베타 억제제 및 그 조성물 및 방법
WO2021121397A1 (zh) 取代的炔基杂环化合物
CN104125959A (zh) 作为btk活性的抑制剂的杂芳基吡啶酮和氮杂-吡啶酮化合物
CN103038233A (zh) 吡啶酮和氮杂吡啶酮化合物及使用方法
CN108349996B (zh) 三环pi3k抑制剂化合物及其使用方法
TW201434825A (zh) ３－取代吡唑及其用途
WO2023061294A1 (zh) 含氮杂环类衍生物调节剂、其制备方法及应用
TW202328124A (zh) 1,4-氧雜氮雜環庚烷衍生物及其用途
JP2019517996A (ja) ＰＤＥ１阻害剤としての１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン及び１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−４−オン
WO2019228404A1 (zh) 一种新型磷酸肌醇3-激酶抑制剂及其制备方法和用途
TW202233190A (zh) 作為ＰＩ３Ｋδ抑制劑的咪唑並［１，５－Ａ］吡衍生物
KR20200090636A (ko) 피롤로피리미딘 유도체 및 이를 유효성분으로 함유하는 단백질 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2022161461A1 (zh) Sos1抑制剂及其制备方法和应用
TW202116774A (zh) 炔類衍生物及其製備方法和用途
CN115867346A (zh) 激酶抑制剂
TW202227409A (zh) 作為tlr9抑制劑之經取代苯并咪唑
US11370792B2 (en) Caffeine inhibitors of MTHFD2 and uses thereof
CN115677682B (zh) 螺环类plk4抑制剂及其用途
WO2023041049A1 (zh) 作为sos1抑制剂的杂环化合物及其用途
CN116964046B (zh) Plk4抑制剂及其用途
WO2020233645A1 (zh) 大环类衍生物、及其制备方法和用途