KR20240004540A - 세포내 전달 조성물 - Google Patents
세포내 전달 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20240004540A KR20240004540A KR1020237039641A KR20237039641A KR20240004540A KR 20240004540 A KR20240004540 A KR 20240004540A KR 1020237039641 A KR1020237039641 A KR 1020237039641A KR 20237039641 A KR20237039641 A KR 20237039641A KR 20240004540 A KR20240004540 A KR 20240004540A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- protein
- linker
- pei
- hsa
- protein conjugate
- Prior art date
Links
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 title claims abstract description 125
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 365
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 359
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 claims abstract description 262
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 111
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 21
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 354
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 225
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 212
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 212
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 91
- 108700022150 Designed Ankyrin Repeat Proteins Proteins 0.000 claims description 64
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 64
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 63
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 53
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 51
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 49
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 45
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 45
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 claims description 45
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 42
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 42
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 claims description 34
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 33
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 claims description 33
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 32
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 30
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 claims description 29
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 claims description 28
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 26
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 25
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims description 24
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims description 24
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 claims description 23
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims description 19
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 claims description 18
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 16
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 14
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 14
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 claims description 13
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 12
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 12
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 12
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 9
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 8
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 8
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims description 7
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 5
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 5
- 230000035515 penetration Effects 0.000 claims description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 claims description 3
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 claims description 3
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 claims description 3
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 claims description 3
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 claims description 3
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 227
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 203
- -1 anti-TNF Proteins 0.000 description 85
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 70
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 64
- 229920001601 polyetherimide Polymers 0.000 description 62
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 57
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 56
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 56
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 44
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 37
- 125000003396 thiol group Chemical class [H]S* 0.000 description 33
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 29
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 28
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 28
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 28
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 28
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 27
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 26
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 26
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 24
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 24
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 23
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 22
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 22
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 21
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 20
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 20
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 20
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 20
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 20
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 18
- 102100037153 Keratin, type I cytoskeletal 27 Human genes 0.000 description 17
- 238000012650 click reaction Methods 0.000 description 17
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 17
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 17
- 102400000524 Fibrinogen alpha chain Human genes 0.000 description 16
- 101710137044 Fibrinogen alpha chain Proteins 0.000 description 16
- 102400001064 Fibrinogen beta chain Human genes 0.000 description 16
- 101710170765 Fibrinogen beta chain Proteins 0.000 description 16
- 102100024783 Fibrinogen gamma chain Human genes 0.000 description 16
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 108010048325 fibrinopeptides gamma Proteins 0.000 description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 16
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 15
- HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N (2s)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N 0.000 description 14
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 14
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 description 14
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 14
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 14
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 14
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 14
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 13
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 13
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 13
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 13
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 13
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 12
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 12
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 12
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 12
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 11
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 11
- 238000013461 design Methods 0.000 description 11
- 230000006870 function Effects 0.000 description 11
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 11
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 11
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 11
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 10
- 101000984753 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase B-raf Proteins 0.000 description 10
- 102100027103 Serine/threonine-protein kinase B-raf Human genes 0.000 description 10
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 10
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 10
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 10
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 10
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 description 10
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 10
- JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 9
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 9
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 9
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 9
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 8
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 8
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 7
- 239000002585 base Substances 0.000 description 7
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 7
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 7
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 7
- 238000000942 confocal micrograph Methods 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 7
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 7
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 7
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 7
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 7
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 7
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 7
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 7
- 108010014186 ras Proteins Proteins 0.000 description 7
- QTVBGVZVUCIFAH-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-[2-[2-[2-[2-[3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoylamino]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCOCCOCCOCCOCCNC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 QTVBGVZVUCIFAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 6
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 6
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 6
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 6
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N aldrithiol Chemical compound C=1C=CC=NC=1SSC1=CC=CC=N1 HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 6
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 6
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 6
- OUCMTIKCFRCBHK-UHFFFAOYSA-N 3,3-dibenzylcyclooctyne Chemical compound C1CCCCC#CC1(CC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 OUCMTIKCFRCBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ROUFCTKIILEETD-UHFFFAOYSA-N 5-nitro-2-[(5-nitropyridin-2-yl)disulfanyl]pyridine Chemical compound N1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1SSC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=N1 ROUFCTKIILEETD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N Asp-Gly-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 description 5
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 description 5
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 5
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 5
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 5
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 5
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 5
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 5
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 5
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 5
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 5
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 5
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 5
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 238000012758 nuclear staining Methods 0.000 description 5
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 5
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 5
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 5
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 5
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 5
- 125000000008 (C1-C10) alkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 4
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 4
- 238000005698 Diels-Alder reaction Methods 0.000 description 4
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100030708 GTPase KRas Human genes 0.000 description 4
- RUFHOVYUYSNDNY-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O RUFHOVYUYSNDNY-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 4
- WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- 101000584612 Homo sapiens GTPase KRas Proteins 0.000 description 4
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 101150040459 RAS gene Proteins 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000013127 Vimentin Human genes 0.000 description 4
- 108010065472 Vimentin Proteins 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 108010024078 alanyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 4
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 4
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 4
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 4
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 4
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 150000003141 primary amines Chemical group 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 4
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 210000005048 vimentin Anatomy 0.000 description 4
- 125000000027 (C1-C10) alkoxy group Chemical group 0.000 description 3
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N Ala-Ala-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- FUSPCLTUKXQREV-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FUSPCLTUKXQREV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- MFMDKJIPHSWSBM-GUBZILKMSA-N Ala-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O MFMDKJIPHSWSBM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 229940124297 CDK 4/6 inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 102000047934 Caspase-3/7 Human genes 0.000 description 3
- 108700037887 Caspase-3/7 Proteins 0.000 description 3
- 229940123587 Cell cycle inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YJIUYQKQBBQYHZ-ACZMJKKPSA-N Gln-Ala-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YJIUYQKQBBQYHZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- SJPMNHCEWPTRBR-BQBZGAKWSA-N Glu-Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O SJPMNHCEWPTRBR-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- IRXNJYPKBVERCW-DCAQKATOSA-N Glu-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IRXNJYPKBVERCW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N Phe-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 3
- DXTOOBDIIAJZBJ-BQBZGAKWSA-N Pro-Gly-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DXTOOBDIIAJZBJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108050002653 Retinoblastoma protein Proteins 0.000 description 3
- GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N Ser-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 3
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 3
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 3
- 108010028939 alanyl-alanyl-lysyl-alanine Proteins 0.000 description 3
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 125000003785 benzimidazolyl group Chemical group N1=C(NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 3
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 3
- 230000027448 caveolin-mediated endocytosis Effects 0.000 description 3
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 3
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 3
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 3
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 3
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 3
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010085325 histidylproline Proteins 0.000 description 3
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 3
- 125000002183 isoquinolinyl group Chemical group C1(=NC=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 3
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 125000005358 mercaptoalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 3
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 3
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 3
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 3
- 125000001567 quinoxalinyl group Chemical group N1=C(C=NC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 3
- 150000003335 secondary amines Chemical group 0.000 description 3
- 108010071207 serylmethionine Proteins 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- 150000003512 tertiary amines Chemical group 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007970 thio esters Chemical class 0.000 description 3
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 2
- FCEHBMOGCRZNNI-UHFFFAOYSA-N 1-benzothiophene Chemical compound C1=CC=C2SC=CC2=C1 FCEHBMOGCRZNNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-tetramine Chemical compound NCCNCCNCCN VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RSEBUVRVKCANEP-UHFFFAOYSA-N 2-pyrroline Chemical compound C1CC=CN1 RSEBUVRVKCANEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HFYMVDKBZONUOJ-UHFFFAOYSA-N 3-[[4-[1-(2,2-difluoroethyl)-3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-5-yl)pyrazol-4-yl]pyrimidin-2-yl]amino]propanenitrile Chemical compound C=1N=C2NC=CC2=CC=1C1=NN(CC(F)F)C=C1C1=CC=NC(NCCC#N)=N1 HFYMVDKBZONUOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 2
- JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N Ala-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 2
- YSMPVONNIWLJML-FXQIFTODSA-N Ala-Asp-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O YSMPVONNIWLJML-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N Ala-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 2
- BLGHHPHXVJWCNK-GUBZILKMSA-N Ala-Gln-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BLGHHPHXVJWCNK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- SFPRJVVDZNLUTG-OWLDWWDNSA-N Ala-Trp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SFPRJVVDZNLUTG-OWLDWWDNSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- UPKMBGAAEZGHOC-RWMBFGLXSA-N Arg-His-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O UPKMBGAAEZGHOC-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 2
- HGKHPCFTRQDHCU-IUCAKERBSA-N Arg-Pro-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O HGKHPCFTRQDHCU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- NGYHSXDNNOFHNE-AVGNSLFASA-N Arg-Pro-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NGYHSXDNNOFHNE-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- HPNDBHLITCHRSO-WHFBIAKZSA-N Asp-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O HPNDBHLITCHRSO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- QRULNKJGYQQZMW-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asn-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QRULNKJGYQQZMW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- AYFVRYXNDHBECD-YUMQZZPRSA-N Asp-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O AYFVRYXNDHBECD-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 2
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000009193 Caveolin Human genes 0.000 description 2
- 108050000084 Caveolin Proteins 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 102000005853 Clathrin Human genes 0.000 description 2
- 108010019874 Clathrin Proteins 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 2
- 108010090461 DFG peptide Proteins 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100421450 Drosophila melanogaster Shark gene Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 2
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 2
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 2
- JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- MXPBQDFWIMBACQ-ACZMJKKPSA-N Glu-Cys-Cys Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O MXPBQDFWIMBACQ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- YPHPEHMXOYTEQG-LAEOZQHASA-N Glu-Val-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O YPHPEHMXOYTEQG-LAEOZQHASA-N 0.000 description 2
- WGYHAAXZWPEBDQ-IFFSRLJSSA-N Glu-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WGYHAAXZWPEBDQ-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 2
- NZAFOTBEULLEQB-WDSKDSINSA-N Gly-Asn-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)CN NZAFOTBEULLEQB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- MHHUEAIBJZWDBH-YUMQZZPRSA-N Gly-Asp-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)CN MHHUEAIBJZWDBH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- LHRXAHLCRMQBGJ-RYUDHWBXSA-N Gly-Glu-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)CN LHRXAHLCRMQBGJ-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- SWQALSGKVLYKDT-UHFFFAOYSA-N Gly-Ile-Ala Natural products NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(C)C(O)=O SWQALSGKVLYKDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NSVOVKWEKGEOQB-LURJTMIESA-N Gly-Pro-Gly Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O NSVOVKWEKGEOQB-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N Gly-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 2
- ZLCLYFGMKFCDCN-XPUUQOCRSA-N Gly-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN)C(O)=O ZLCLYFGMKFCDCN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 2
- JQFILXICXLDTRR-FBCQKBJTSA-N Gly-Thr-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCC(O)=O JQFILXICXLDTRR-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 2
- WSLHFAFASQFMSK-SFTDATJTSA-N Gly-Trp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 WSLHFAFASQFMSK-SFTDATJTSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108700003968 Human immunodeficiency virus 1 tat peptide (49-57) Proteins 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N Ile-Arg-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 101100193693 Kirsten murine sarcoma virus K-RAS gene Proteins 0.000 description 2
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N L-tryptophan-L-tyrosine Natural products C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000007547 Laminin Human genes 0.000 description 2
- 108010085895 Laminin Proteins 0.000 description 2
- KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- QJUWBDPGGYVRHY-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N QJUWBDPGGYVRHY-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- HGFGEMSVBMCFKK-MNXVOIDGSA-N Leu-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HGFGEMSVBMCFKK-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 2
- UBZGNBKMIJHOHL-BZSNNMDCSA-N Leu-Leu-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 UBZGNBKMIJHOHL-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N Leu-Leu-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBNPMTNBFFAMMH-UHFFFAOYSA-N Leu-Val-Arg Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N FBNPMTNBFFAMMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XZNJZXJZBMBGGS-NHCYSSNCSA-N Leu-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XZNJZXJZBMBGGS-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 2
- QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N Leu-Val-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- YNNPKXBBRZVIRX-IHRRRGAJSA-N Lys-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YNNPKXBBRZVIRX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- CFVQPNSCQMKDPB-CIUDSAMLSA-N Lys-Cys-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N CFVQPNSCQMKDPB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- CRNNMTHBMRFQNG-GUBZILKMSA-N Lys-Glu-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N CRNNMTHBMRFQNG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- HYSVGEAWTGPMOA-IHRRRGAJSA-N Lys-Pro-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HYSVGEAWTGPMOA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- 101710175625 Maltose/maltodextrin-binding periplasmic protein Proteins 0.000 description 2
- ZEDVFJPQNNBMST-CYDGBPFRSA-N Met-Arg-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O ZEDVFJPQNNBMST-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 2
- HOZNVKDCKZPRER-XUXIUFHCSA-N Met-Lys-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HOZNVKDCKZPRER-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 2
- JQHYVIKEFYETEW-IHRRRGAJSA-N Met-Phe-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JQHYVIKEFYETEW-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006845 Michael addition reaction Methods 0.000 description 2
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010047562 NGR peptide Proteins 0.000 description 2
- 108010077850 Nuclear Localization Signals Proteins 0.000 description 2
- 108010043958 Peptoids Proteins 0.000 description 2
- ULECEJGNDHWSKD-QEJZJMRPSA-N Phe-Ala-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ULECEJGNDHWSKD-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 2
- GPLWGAYGROGDEN-BZSNNMDCSA-N Phe-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GPLWGAYGROGDEN-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- JHSRGEODDALISP-XVSYOHENSA-N Phe-Thr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JHSRGEODDALISP-XVSYOHENSA-N 0.000 description 2
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N Phosphine Chemical compound P XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007584 Prealbumin Human genes 0.000 description 2
- 108010071690 Prealbumin Proteins 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009572 RNA Polymerase II Human genes 0.000 description 2
- 108010009460 RNA Polymerase II Proteins 0.000 description 2
- 229940078123 Ras inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 201000000582 Retinoblastoma Diseases 0.000 description 2
- 101100273253 Rhizopus niveus RNAP gene Proteins 0.000 description 2
- SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- VQBCMLMPEWPUTB-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VQBCMLMPEWPUTB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- IUXGJEIKJBYKOO-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N IUXGJEIKJBYKOO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- VGQVAVQWKJLIRM-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VGQVAVQWKJLIRM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 108020004688 Small Nuclear RNA Proteins 0.000 description 2
- 102000039471 Small Nuclear RNA Human genes 0.000 description 2
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N Thiophene Chemical compound C=1C=CSC=1 YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DSLHSTIUAPKERR-XGEHTFHBSA-N Thr-Cys-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DSLHSTIUAPKERR-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 2
- XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N Thr-Ser-Glu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N)O XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 2
- BCYUHPXBHCUYBA-CUJWVEQBSA-N Thr-Ser-His Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O BCYUHPXBHCUYBA-CUJWVEQBSA-N 0.000 description 2
- ILUOMMDDGREELW-OSUNSFLBSA-N Thr-Val-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O ILUOMMDDGREELW-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 2
- 108060008245 Thrombospondin Proteins 0.000 description 2
- 102000002938 Thrombospondin Human genes 0.000 description 2
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 2
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 2
- CKKFTIQYURNSEI-IHRRRGAJSA-N Tyr-Asn-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 CKKFTIQYURNSEI-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- PHKQVWWHRYUCJL-HJOGWXRNSA-N Tyr-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O PHKQVWWHRYUCJL-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- SLLKXDSRVAOREO-KZVJFYERSA-N Val-Ala-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O SLLKXDSRVAOREO-KZVJFYERSA-N 0.000 description 2
- VLOYGOZDPGYWFO-LAEOZQHASA-N Val-Asp-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VLOYGOZDPGYWFO-LAEOZQHASA-N 0.000 description 2
- HHSILIQTHXABKM-YDHLFZDLSA-N Val-Asp-Phe Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(O)=O HHSILIQTHXABKM-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 2
- LHADRQBREKTRLR-DCAQKATOSA-N Val-Cys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C(C)C)N LHADRQBREKTRLR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- BTWMICVCQLKKNR-DCAQKATOSA-N Val-Leu-Ser Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O BTWMICVCQLKKNR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- CFIBZQOLUDURST-IHRRRGAJSA-N Val-Tyr-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N CFIBZQOLUDURST-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- AEFJNECXZCODJM-UWVGGRQHSA-N Val-Val-Gly Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC([O-])=O AEFJNECXZCODJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 2
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 2
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 2
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 description 2
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 2
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 2
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 2
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 2
- 108010069926 arginyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 2
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 description 2
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 2
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010461 azide-alkyne cycloaddition reaction Methods 0.000 description 2
- 229940077388 benzenesulfonate Drugs 0.000 description 2
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M benzenesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940050390 benzoate Drugs 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IOJUPLGTWVMSFF-UHFFFAOYSA-N benzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC=NC2=C1 IOJUPLGTWVMSFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 2
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 2
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000025084 cell cycle arrest Effects 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000010307 cell transformation Effects 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- ZPEIMTDSQAKGNT-UHFFFAOYSA-N chlorpromazine Chemical compound C1=C(Cl)C=C2N(CCCN(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 ZPEIMTDSQAKGNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001076 chlorpromazine Drugs 0.000 description 2
- 229940001468 citrate Drugs 0.000 description 2
- 229930193282 clathrin Natural products 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000006352 cycloaddition reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 2
- 108010004073 cysteinylcysteine Proteins 0.000 description 2
- 108010060199 cysteinylproline Proteins 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N dodecyl hydrogen sulfate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOS(O)(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940043264 dodecyl sulfate Drugs 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000002121 endocytic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008290 endocytic mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- MMXKVMNBHPAILY-UHFFFAOYSA-N ethyl laurate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC MMXKVMNBHPAILY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 229940050411 fumarate Drugs 0.000 description 2
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229940045109 genistein Drugs 0.000 description 2
- TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N genistein Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000006539 genistein Nutrition 0.000 description 2
- ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N genistein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N 0.000 description 2
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 2
- 108010085059 glutamyl-arginyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010079547 glutamylmethionine Proteins 0.000 description 2
- 108010077435 glycyl-phenylalanyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010020688 glycylhistidine Proteins 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 2
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 238000010185 immunofluorescence analysis Methods 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 210000005061 intracellular organelle Anatomy 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001786 isothiazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000842 isoxazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229940001447 lactate Drugs 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000010859 live-cell imaging Methods 0.000 description 2
- 230000006674 lysosomal degradation Effects 0.000 description 2
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 2
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 2
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- WCPAKWJPBJAGKN-UHFFFAOYSA-N oxadiazole Chemical compound C1=CON=N1 WCPAKWJPBJAGKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001715 oxadiazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002971 oxazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- AHJRHEGDXFFMBM-UHFFFAOYSA-N palbociclib Chemical compound N1=C2N(C3CCCC3)C(=O)C(C(=O)C)=C(C)C2=CN=C1NC(N=C1)=CC=C1N1CCNCC1 AHJRHEGDXFFMBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 108010074082 phenylalanyl-alanyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 108010064486 phenylalanyl-leucyl-valine Proteins 0.000 description 2
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 229920000151 polyglycol Polymers 0.000 description 2
- 239000010695 polyglycol Substances 0.000 description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 2
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 2
- 230000005588 protonation Effects 0.000 description 2
- 125000003373 pyrazinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000005956 quaternization reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002294 quinazolinyl group Chemical group N1=C(N=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 108010048397 seryl-lysyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 229940114926 stearate Drugs 0.000 description 2
- 229940086735 succinate Drugs 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- FAGUFWYHJQFNRV-UHFFFAOYSA-N tetraethylenepentamine Chemical compound NCCNCCNCCNCCN FAGUFWYHJQFNRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000005309 thioalkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002813 thiocarbonyl group Chemical group *C(*)=S 0.000 description 2
- 125000005300 thiocarboxy group Chemical group C(=S)(O)* 0.000 description 2
- CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N thioglycolic acid Chemical compound OC(=O)CS CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010031491 threonyl-lysyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 2
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- 125000004417 unsaturated alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 2
- GPXBXXGIAQBQNI-UHFFFAOYSA-N vemurafenib Chemical compound CCCS(=O)(=O)NC1=CC=C(F)C(C(=O)C=2C3=CC(=CN=C3NC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1F GPXBXXGIAQBQNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003862 vemurafenib Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 238000000733 zeta-potential measurement Methods 0.000 description 2
- LSPHULWDVZXLIL-UHFFFAOYSA-N (+/-)-Camphoric acid Chemical compound CC1(C)C(C(O)=O)CCC1(C)C(O)=O LSPHULWDVZXLIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N (2R)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2R,3S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-amino-1-hydroxyethylidene)amino]-3-carboxy-1-hydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1,5-dihydroxy-5-iminopentylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=N[C@@H](CS)C(=N[C@@H](C)C(=N[C@@H](CO)C(=NCC(=N[C@@H](CCC(=N)O)C(=NC(CS)C(=N[C@H]([C@H](C)O)C(=N[C@H](CS)C(=N[C@H](CO)C(=NCC(=N[C@H](CS)C(=NCC(=N[C@H](CCCCN)C(=O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)N=C([C@H](CS)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](C)N=C(CN=C([C@H](CO)N=C([C@H](CS)N=C(CN=C(C(CS)N=C(C(CC(=O)O)N=C(CN)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N 0.000 description 1
- GJLXVWOMRRWCIB-MERZOTPQSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-acetamido-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 GJLXVWOMRRWCIB-MERZOTPQSA-N 0.000 description 1
- XVZCXCTYGHPNEM-IHRRRGAJSA-N (2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- DSVOSLJAGTUKFB-SPAGYVKCSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-1-(2-aminoacetyl)pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CN DSVOSLJAGTUKFB-SPAGYVKCSA-N 0.000 description 1
- FJPHHBGPPJXISY-KBPBESRZSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]acetyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 FJPHHBGPPJXISY-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- JOCMUACTOZLBLC-WOYTXXSLSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-aminopropanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]propanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O JOCMUACTOZLBLC-WOYTXXSLSA-N 0.000 description 1
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004890 (C1-C6) alkylamino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004737 (C1-C6) haloalkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000171 (C1-C6) haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004605 1,2,3,4-tetrahydroisoquinolinyl group Chemical group C1(NCCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 125000004607 1,2,3,4-tetrahydroquinolinyl group Chemical group N1(CCCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 125000004529 1,2,3-triazinyl group Chemical group N1=NN=C(C=C1)* 0.000 description 1
- 125000001399 1,2,3-triazolyl group Chemical group N1N=NC(=C1)* 0.000 description 1
- YGTAZGSLCXNBQL-UHFFFAOYSA-N 1,2,4-thiadiazole Chemical compound C=1N=CSN=1 YGTAZGSLCXNBQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004530 1,2,4-triazinyl group Chemical group N1=NC(=NC=C1)* 0.000 description 1
- 125000001376 1,2,4-triazolyl group Chemical group N1N=C(N=C1)* 0.000 description 1
- KTZQTRPPVKQPFO-UHFFFAOYSA-N 1,2-benzoxazole Chemical compound C1=CC=C2C=NOC2=C1 KTZQTRPPVKQPFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003363 1,3,5-triazinyl group Chemical group N1=C(N=CN=C1)* 0.000 description 1
- BCMCBBGGLRIHSE-UHFFFAOYSA-N 1,3-benzoxazole Chemical compound C1=CC=C2OC=NC2=C1 BCMCBBGGLRIHSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005877 1,4-benzodioxanyl group Chemical group 0.000 description 1
- XOQABDOICLHPIS-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-2,1-benzoxaborole Chemical compound C1=CC=C2B(O)OCC2=C1 XOQABDOICLHPIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000010400 1-phosphatidylinositol-3-kinase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- BAXOFTOLAUCFNW-UHFFFAOYSA-N 1H-indazole Chemical compound C1=CC=C2C=NNC2=C1 BAXOFTOLAUCFNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-N 1H-tetrazole Substances C=1N=NNN=1 KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 description 1
- QMOQBVOBWVNSNO-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[[2-[(2-azaniumylacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetate Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O QMOQBVOBWVNSNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940080296 2-naphthalenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 3-Methylhistidine Natural products CN1C=NC(CC(N)C(O)=O)=C1 BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-M 3-phenylpropionate Chemical compound [O-]C(=O)CCC1=CC=CC=C1 XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BHPSIKROCCEKQR-UHFFFAOYSA-N 3-sulfanylpyrrole-2,5-dione Chemical compound SC1=CC(=O)NC1=O BHPSIKROCCEKQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001819 4H-chromenyl group Chemical group O1C(=CCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- GDRVFDDBLLKWRI-UHFFFAOYSA-N 4H-quinolizine Chemical compound C1=CC=CN2CC=CC=C21 GDRVFDDBLLKWRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004608 5,6,7,8-tetrahydroquinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC=2CCCCC12)* 0.000 description 1
- MSTFRUQNYRRUKZ-UHFFFAOYSA-N 5,6-dihydro-2h-thiazine Chemical compound C1CC=CNS1 MSTFRUQNYRRUKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940117976 5-hydroxylysine Drugs 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010052747 Adenocarcinoma pancreas Diseases 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- DKJPOZOEBONHFS-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O DKJPOZOEBONHFS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- PIPTUBPKYFRLCP-NHCYSSNCSA-N Ala-Ala-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PIPTUBPKYFRLCP-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N Ala-Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CCCN=C(N)N JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- XQGIRPGAVLFKBJ-CIUDSAMLSA-N Ala-Asn-Lys Chemical compound N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O XQGIRPGAVLFKBJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XCVRVWZTXPCYJT-BIIVOSGPSA-N Ala-Asn-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N XCVRVWZTXPCYJT-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- WXERCAHAIKMTKX-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WXERCAHAIKMTKX-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- WDIYWDJLXOCGRW-ACZMJKKPSA-N Ala-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WDIYWDJLXOCGRW-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- MKZCBYZBCINNJN-DLOVCJGASA-N Ala-Asp-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MKZCBYZBCINNJN-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- BGNLUHXLSAQYRQ-FXQIFTODSA-N Ala-Glu-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O BGNLUHXLSAQYRQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PAIHPOGPJVUFJY-WDSKDSINSA-N Ala-Glu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O PAIHPOGPJVUFJY-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- ROLXPVQSRCPVGK-XDTLVQLUSA-N Ala-Glu-Tyr Chemical compound N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O ROLXPVQSRCPVGK-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 1
- NHLAEBFGWPXFGI-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N NHLAEBFGWPXFGI-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- MPLOSMWGDNJSEV-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MPLOSMWGDNJSEV-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- VGPWRRFOPXVGOH-BYPYZUCNSA-N Ala-Gly-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VGPWRRFOPXVGOH-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- NBTGEURICRTMGL-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NBTGEURICRTMGL-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- LBFXVAXPDOBRKU-LKTVYLICSA-N Ala-His-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O LBFXVAXPDOBRKU-LKTVYLICSA-N 0.000 description 1
- OKIKVSXTXVVFDV-MMWGEVLESA-N Ala-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N OKIKVSXTXVVFDV-MMWGEVLESA-N 0.000 description 1
- CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N Ala-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MEFILNJXAVSUTO-JXUBOQSCSA-N Ala-Leu-Thr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MEFILNJXAVSUTO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PIXQDIGKDNNOOV-GUBZILKMSA-N Ala-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PIXQDIGKDNNOOV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Val Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(C)N)CCCCN MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGLQWAFPIXDKRL-UBHSHLNASA-N Ala-Met-Phe Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N DGLQWAFPIXDKRL-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- 108010011667 Ala-Phe-Ala Proteins 0.000 description 1
- XRUJOVRWNMBAAA-NHCYSSNCSA-N Ala-Phe-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=CC=C1 XRUJOVRWNMBAAA-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- BFMIRJBURUXDRG-DLOVCJGASA-N Ala-Phe-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=CC=C1 BFMIRJBURUXDRG-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- CYBJZLQSUJEMAS-LFSVMHDDSA-N Ala-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)[C@H](C)N)O CYBJZLQSUJEMAS-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 1
- IORKCNUBHNIMKY-CIUDSAMLSA-N Ala-Pro-Glu Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IORKCNUBHNIMKY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XWFWAXPOLRTDFZ-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XWFWAXPOLRTDFZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- JNJHNBXBGNJESC-KKXDTOCCSA-N Ala-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JNJHNBXBGNJESC-KKXDTOCCSA-N 0.000 description 1
- IYKVSFNGSWTTNZ-GUBZILKMSA-N Ala-Val-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IYKVSFNGSWTTNZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N Ala-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 239000012114 Alexa Fluor 647 Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 1
- 101710083889 Alpha-fetoprotein Proteins 0.000 description 1
- 102400000068 Angiostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010079709 Angiostatins Proteins 0.000 description 1
- 102000008102 Ankyrins Human genes 0.000 description 1
- 108010049777 Ankyrins Proteins 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- MCYJBCKCAPERSE-FXQIFTODSA-N Arg-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N MCYJBCKCAPERSE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OVVUNXXROOFSIM-SDDRHHMPSA-N Arg-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O OVVUNXXROOFSIM-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 1
- USNSOPDIZILSJP-FXQIFTODSA-N Arg-Asn-Asn Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O USNSOPDIZILSJP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- GHNDBBVSWOWYII-LPEHRKFASA-N Arg-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O GHNDBBVSWOWYII-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- OZNSCVPYWZRQPY-CIUDSAMLSA-N Arg-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OZNSCVPYWZRQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RYRQZJVFDVWURI-SRVKXCTJSA-N Arg-Gln-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N RYRQZJVFDVWURI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NXDXECQFKHXHAM-HJGDQZAQSA-N Arg-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NXDXECQFKHXHAM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- JAYIQMNQDMOBFY-KKUMJFAQSA-N Arg-Glu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JAYIQMNQDMOBFY-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Asp Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- QKSAZKCRVQYYGS-UWVGGRQHSA-N Arg-Gly-His Chemical compound N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O QKSAZKCRVQYYGS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N Arg-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- KRQSPVKUISQQFS-FJXKBIBVSA-N Arg-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N KRQSPVKUISQQFS-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- OCDJOVKIUJVUMO-SRVKXCTJSA-N Arg-His-Gln Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N OCDJOVKIUJVUMO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FRMQITGHXMUNDF-GMOBBJLQSA-N Arg-Ile-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N FRMQITGHXMUNDF-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 1
- JEOCWTUOMKEEMF-RHYQMDGZSA-N Arg-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JEOCWTUOMKEEMF-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- RIIVUOJDDQXHRV-SRVKXCTJSA-N Arg-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O RIIVUOJDDQXHRV-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MTYLORHAQXVQOW-AVGNSLFASA-N Arg-Lys-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O MTYLORHAQXVQOW-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- LCBSSOCDWUTQQV-SDDRHHMPSA-N Arg-Met-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N LCBSSOCDWUTQQV-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 1
- KZXPVYVSHUJCEO-ULQDDVLXSA-N Arg-Phe-Lys Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KZXPVYVSHUJCEO-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- LXMKTIZAGIBQRX-HRCADAONSA-N Arg-Phe-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O LXMKTIZAGIBQRX-HRCADAONSA-N 0.000 description 1
- HNJNAMGZQZPSRE-GUBZILKMSA-N Arg-Pro-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HNJNAMGZQZPSRE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OVQJAKFLFTZDNC-GUBZILKMSA-N Arg-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OVQJAKFLFTZDNC-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- YFHATWYGAAXQCF-JYJNAYRXSA-N Arg-Pro-Phe Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YFHATWYGAAXQCF-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- VENMDXUVHSKEIN-GUBZILKMSA-N Arg-Ser-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O VENMDXUVHSKEIN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- AUIJUTGLPVHIRT-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Cys Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)CN=C(N)N AUIJUTGLPVHIRT-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- JKRPBTQDPJSQIT-RCWTZXSCSA-N Arg-Thr-Met Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O JKRPBTQDPJSQIT-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- VJIQPOJMISSUPO-BVSLBCMMSA-N Arg-Trp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VJIQPOJMISSUPO-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- UVTGNSWSRSCPLP-UHFFFAOYSA-N Arg-Tyr Natural products NC(CCNC(=N)N)C(=O)NC(Cc1ccc(O)cc1)C(=O)O UVTGNSWSRSCPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULBHWNVWSCJLCO-NHCYSSNCSA-N Arg-Val-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ULBHWNVWSCJLCO-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- VYZBPPBKFCHCIS-WPRPVWTQSA-N Arg-Val-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VYZBPPBKFCHCIS-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- CPTXATAOUQJQRO-GUBZILKMSA-N Arg-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CPTXATAOUQJQRO-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- LEFKSBYHUGUWLP-ACZMJKKPSA-N Asn-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O LEFKSBYHUGUWLP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- HOIFSHOLNKQCSA-FXQIFTODSA-N Asn-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HOIFSHOLNKQCSA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- GOVUDFOGXOONFT-VEVYYDQMSA-N Asn-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GOVUDFOGXOONFT-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- YNSCBOUZTAGIGO-ZLUOBGJFSA-N Asn-Asn-Cys Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)C(=O)N YNSCBOUZTAGIGO-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- DXZNJWFECGJCQR-FXQIFTODSA-N Asn-Asn-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N DXZNJWFECGJCQR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PIWWUBYJNONVTJ-ZLUOBGJFSA-N Asn-Asp-Asn Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)C(=O)N PIWWUBYJNONVTJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- BHQQRVARKXWXPP-ACZMJKKPSA-N Asn-Asp-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N BHQQRVARKXWXPP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- PAXHINASXXXILC-SRVKXCTJSA-N Asn-Asp-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O PAXHINASXXXILC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VWJFQGXPYOPXJH-ZLUOBGJFSA-N Asn-Cys-Asp Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)C(=O)N VWJFQGXPYOPXJH-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- RFLVTVBAESPKKR-ZLUOBGJFSA-N Asn-Cys-Cys Chemical compound N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O RFLVTVBAESPKKR-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- LUVODTFFSXVOAG-ACZMJKKPSA-N Asn-Cys-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LUVODTFFSXVOAG-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- AYKKKGFJXIDYLX-ACZMJKKPSA-N Asn-Gln-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AYKKKGFJXIDYLX-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- XVAPVJNJGLWGCS-ACZMJKKPSA-N Asn-Glu-Asn Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N XVAPVJNJGLWGCS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- DDPXDCKYWDGZAL-BQBZGAKWSA-N Asn-Gly-Arg Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DDPXDCKYWDGZAL-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- PBSQFBAJKPLRJY-BYULHYEWSA-N Asn-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N PBSQFBAJKPLRJY-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- OWUCNXMFJRFOFI-BQBZGAKWSA-N Asn-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O OWUCNXMFJRFOFI-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- GURLOFOJBHRPJN-AAEUAGOBSA-N Asn-Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N GURLOFOJBHRPJN-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 1
- OOWSBIOUKIUWLO-RCOVLWMOSA-N Asn-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OOWSBIOUKIUWLO-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- LTZIRYMWOJHRCH-GUDRVLHUSA-N Asn-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LTZIRYMWOJHRCH-GUDRVLHUSA-N 0.000 description 1
- NLRJGXZWTKXRHP-DCAQKATOSA-N Asn-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O NLRJGXZWTKXRHP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N Asn-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- FODVBOKTYKYRFJ-CIUDSAMLSA-N Asn-Lys-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N FODVBOKTYKYRFJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- AYOAHKWVQLNPDM-HJGDQZAQSA-N Asn-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O AYOAHKWVQLNPDM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- NTWOPSIUJBMNRI-KKUMJFAQSA-N Asn-Lys-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTWOPSIUJBMNRI-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- KSGAFDTYQPKUAP-GMOBBJLQSA-N Asn-Met-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O KSGAFDTYQPKUAP-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 1
- JTXVXGXTRXMOFJ-FXQIFTODSA-N Asn-Pro-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JTXVXGXTRXMOFJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- YRTOMUMWSTUQAX-FXQIFTODSA-N Asn-Pro-Asp Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YRTOMUMWSTUQAX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HPASIOLTWSNMFB-OLHMAJIHSA-N Asn-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HPASIOLTWSNMFB-OLHMAJIHSA-N 0.000 description 1
- KZYSHAMXEBPJBD-JRQIVUDYSA-N Asn-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KZYSHAMXEBPJBD-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 1
- ATHZHGQSAIJHQU-XIRDDKMYSA-N Asn-Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N ATHZHGQSAIJHQU-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- JPPLRQVZMZFOSX-UWJYBYFXSA-N Asn-Tyr-Ala Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 JPPLRQVZMZFOSX-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N Asn-Tyr-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- MYRLSKYSMXNLLA-LAEOZQHASA-N Asn-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O MYRLSKYSMXNLLA-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- WSWYMRLTJVKRCE-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WSWYMRLTJVKRCE-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N Asp-Arg-Val Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- ZELQAFZSJOBEQS-ACZMJKKPSA-N Asp-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZELQAFZSJOBEQS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- SBHUBSDEZQFJHJ-CIUDSAMLSA-N Asp-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O SBHUBSDEZQFJHJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MJKBOVWWADWLHV-ZLUOBGJFSA-N Asp-Cys-Asp Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)C(=O)O MJKBOVWWADWLHV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- KVPHTGVUMJGMCX-BIIVOSGPSA-N Asp-Cys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)C(=O)O KVPHTGVUMJGMCX-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- VAWNQIGQPUOPQW-ACZMJKKPSA-N Asp-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VAWNQIGQPUOPQW-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VFUXXFVCYZPOQG-WDSKDSINSA-N Asp-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O VFUXXFVCYZPOQG-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N Asp-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OVPHVTCDVYYTHN-AVGNSLFASA-N Asp-Glu-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OVPHVTCDVYYTHN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- DGKCOYGQLNWNCJ-ACZMJKKPSA-N Asp-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DGKCOYGQLNWNCJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- XDGBFDYXZCMYEX-NUMRIWBASA-N Asp-Glu-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O XDGBFDYXZCMYEX-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N Asp-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- CRNKLABLTICXDV-GUBZILKMSA-N Asp-His-Glu Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N CRNKLABLTICXDV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- HOBNTSHITVVNBN-ZPFDUUQYSA-N Asp-Ile-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N HOBNTSHITVVNBN-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- XLILXFRAKOYEJX-GUBZILKMSA-N Asp-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O XLILXFRAKOYEJX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N Asp-Leu-Lys Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- IVPNEDNYYYFAGI-GARJFASQSA-N Asp-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N IVPNEDNYYYFAGI-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N Asp-Leu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- QNMKWNONJGKJJC-NHCYSSNCSA-N Asp-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QNMKWNONJGKJJC-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- VSMYBNPOHYAXSD-GUBZILKMSA-N Asp-Lys-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VSMYBNPOHYAXSD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NVFSJIXJZCDICF-SRVKXCTJSA-N Asp-Lys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N NVFSJIXJZCDICF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- YWLDTBBUHZJQHW-KKUMJFAQSA-N Asp-Lys-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YWLDTBBUHZJQHW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- VMVUDJUXJKDGNR-FXQIFTODSA-N Asp-Met-Asn Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VMVUDJUXJKDGNR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RRUWMFBLFLUZSI-LPEHRKFASA-N Asp-Met-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N RRUWMFBLFLUZSI-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- RPUYTJJZXQBWDT-SRVKXCTJSA-N Asp-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N RPUYTJJZXQBWDT-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FAUPLTGRUBTXNU-FXQIFTODSA-N Asp-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FAUPLTGRUBTXNU-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- CUQDCPXNZPDYFQ-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O CUQDCPXNZPDYFQ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- DRCOAZZDQRCGGP-GHCJXIJMSA-N Asp-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O DRCOAZZDQRCGGP-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- QSFHZPQUAAQHAQ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QSFHZPQUAAQHAQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N Asp-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- ITGFVUYOLWBPQW-KKHAAJSZSA-N Asp-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ITGFVUYOLWBPQW-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- XOASPVGNFAMYBD-WFBYXXMGSA-N Asp-Trp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XOASPVGNFAMYBD-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 1
- KNDCWFXCFKSEBM-AVGNSLFASA-N Asp-Tyr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KNDCWFXCFKSEBM-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- CZIVKMOEXPILDK-SRVKXCTJSA-N Asp-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CZIVKMOEXPILDK-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GIKOVDMXBAFXDF-NHCYSSNCSA-N Asp-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O GIKOVDMXBAFXDF-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- SFJUYBCDQBAYAJ-YDHLFZDLSA-N Asp-Val-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 SFJUYBCDQBAYAJ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 229940125431 BRAF inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108091032955 Bacterial small RNA Proteins 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000007350 Bone Morphogenetic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010007726 Bone Morphogenetic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004152 Bone morphogenetic protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 108090000654 Bone morphogenetic protein 1 Proteins 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701822 Bovine papillomavirus Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006577 C1-C6 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 101100512078 Caenorhabditis elegans lys-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100189913 Caenorhabditis elegans pept-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100297347 Caenorhabditis elegans pgl-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100408682 Caenorhabditis elegans pmt-2 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical group NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical compound NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 1
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 1
- 229940123249 Caveolin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000003734 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay Methods 0.000 description 1
- 108010075016 Ceruloplasmin Proteins 0.000 description 1
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 108010004103 Chylomicrons Proteins 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010028780 Complement C3 Proteins 0.000 description 1
- 102000016918 Complement C3 Human genes 0.000 description 1
- 108010028778 Complement C4 Proteins 0.000 description 1
- 102000013701 Cyclin-Dependent Kinase 4 Human genes 0.000 description 1
- 108010025464 Cyclin-Dependent Kinase 4 Proteins 0.000 description 1
- QFMCHXSGIZPBKG-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ala-Asp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N QFMCHXSGIZPBKG-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- CEZSLNCYQUFOSL-BQBZGAKWSA-N Cys-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O CEZSLNCYQUFOSL-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- SURTWIXUHQNUGN-GUBZILKMSA-N Cys-Arg-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CS)N SURTWIXUHQNUGN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- BYALSSDCQYHKMY-XGEHTFHBSA-N Cys-Arg-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CS)N)O BYALSSDCQYHKMY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- FEJCUYOGOBCFOQ-ACZMJKKPSA-N Cys-Asp-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N FEJCUYOGOBCFOQ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- HYKFOHGZGLOCAY-ZLUOBGJFSA-N Cys-Cys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HYKFOHGZGLOCAY-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- LWTTURISBKEVAC-CIUDSAMLSA-N Cys-Cys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CS)N LWTTURISBKEVAC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MBILEVLLOHJZMG-FXQIFTODSA-N Cys-Gln-Glu Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N MBILEVLLOHJZMG-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- MUZAUPFGPMMZSS-GUBZILKMSA-N Cys-Glu-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N MUZAUPFGPMMZSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UPURLDIGQGTUPJ-ZKWXMUAHSA-N Cys-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CS)N UPURLDIGQGTUPJ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- XVLMKWWVBNESPX-XVYDVKMFSA-N Cys-His-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CS)N XVLMKWWVBNESPX-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- LYSHSHHDBVKJRN-JBDRJPRFSA-N Cys-Ile-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N LYSHSHHDBVKJRN-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- DIHCYBRLTVEPBW-SRVKXCTJSA-N Cys-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N DIHCYBRLTVEPBW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- WVLZTXGTNGHPBO-SRVKXCTJSA-N Cys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O WVLZTXGTNGHPBO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UIKLEGZPIOXFHJ-DLOVCJGASA-N Cys-Phe-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UIKLEGZPIOXFHJ-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- CHRCKSPMGYDLIA-SRVKXCTJSA-N Cys-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CHRCKSPMGYDLIA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RJPKQCFHEPPTGL-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RJPKQCFHEPPTGL-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- WZJLBUPPZRZNTO-CIUDSAMLSA-N Cys-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CS)N WZJLBUPPZRZNTO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JLZCAZJGWNRXCI-XKBZYTNZSA-N Cys-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O JLZCAZJGWNRXCI-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- KXHAPEPORGOXDT-UWJYBYFXSA-N Cys-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KXHAPEPORGOXDT-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- 102000010831 Cytoskeletal Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037414 Cytoskeletal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-ZXXMMSQZSA-N D-iditol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100023078 Early endosome antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 102400001047 Endostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010079505 Endostatins Proteins 0.000 description 1
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- PRBLYKYHAJEABA-SRVKXCTJSA-N Gln-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O PRBLYKYHAJEABA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KJRXLVZYJJLUCV-DCAQKATOSA-N Gln-Arg-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O KJRXLVZYJJLUCV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- INFBPLSHYFALDE-ACZMJKKPSA-N Gln-Asn-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O INFBPLSHYFALDE-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- OETQLUYCMBARHJ-CIUDSAMLSA-N Gln-Asn-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O OETQLUYCMBARHJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- AAOBFSKXAVIORT-GUBZILKMSA-N Gln-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AAOBFSKXAVIORT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- CRRFJBGUGNNOCS-PEFMBERDSA-N Gln-Asp-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O CRRFJBGUGNNOCS-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- QFTRCUPCARNIPZ-XHNCKOQMSA-N Gln-Cys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O QFTRCUPCARNIPZ-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- MADFVRSKEIEZHZ-DCAQKATOSA-N Gln-Gln-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N MADFVRSKEIEZHZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- ORYMMTRPKVTGSJ-XVKPBYJWSA-N Gln-Gly-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ORYMMTRPKVTGSJ-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- MTCXQQINVAFZKW-MNXVOIDGSA-N Gln-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N MTCXQQINVAFZKW-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- HHQCBFGKQDMWSP-GUBZILKMSA-N Gln-Leu-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N HHQCBFGKQDMWSP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LGIKBBLQVSWUGK-DCAQKATOSA-N Gln-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LGIKBBLQVSWUGK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QKCZZAZNMMVICF-DCAQKATOSA-N Gln-Leu-Glu Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QKCZZAZNMMVICF-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- CAXXTYYGFYTBPV-IUCAKERBSA-N Gln-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O CAXXTYYGFYTBPV-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- KHNJVFYHIKLUPD-SRVKXCTJSA-N Gln-Leu-Met Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N KHNJVFYHIKLUPD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MLSKFHLRFVGNLL-WDCWCFNPSA-N Gln-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MLSKFHLRFVGNLL-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- UWKPRVKWEKEMSY-DCAQKATOSA-N Gln-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O UWKPRVKWEKEMSY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- LURQDGKYBFWWJA-MNXVOIDGSA-N Gln-Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N LURQDGKYBFWWJA-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- FKXCBKCOSVIGCT-AVGNSLFASA-N Gln-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FKXCBKCOSVIGCT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- JRHPEMVLTRADLJ-AVGNSLFASA-N Gln-Lys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N JRHPEMVLTRADLJ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- QMVCEWKHIUHTSD-GUBZILKMSA-N Gln-Met-Glu Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N QMVCEWKHIUHTSD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XZUUUKNKNWVPHQ-JYJNAYRXSA-N Gln-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XZUUUKNKNWVPHQ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- DOQUICBEISTQHE-CIUDSAMLSA-N Gln-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O DOQUICBEISTQHE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OSCLNNWLKKIQJM-WDSKDSINSA-N Gln-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O OSCLNNWLKKIQJM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- SYTFJIQPBRJSOK-NKIYYHGXSA-N Gln-Thr-His Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 SYTFJIQPBRJSOK-NKIYYHGXSA-N 0.000 description 1
- OUBUHIODTNUUTC-WDCWCFNPSA-N Gln-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O OUBUHIODTNUUTC-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- ARYKRXHBIPLULY-XKBZYTNZSA-N Gln-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ARYKRXHBIPLULY-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- DITJVHONFRJKJW-BPUTZDHNSA-N Gln-Trp-Glu Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N DITJVHONFRJKJW-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- FVEMBYKESRUFBG-SZMVWBNQSA-N Gln-Trp-His Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CN=CN3)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N FVEMBYKESRUFBG-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- JKDBRTNMYXYLHO-JYJNAYRXSA-N Gln-Tyr-Leu Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 JKDBRTNMYXYLHO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- UGEZSPWLJABDAR-KKUMJFAQSA-N Gln-Tyr-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N UGEZSPWLJABDAR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- OACPJRQRAHMQEQ-NHCYSSNCSA-N Gln-Val-Arg Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OACPJRQRAHMQEQ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- BBFCMGBMYIAGRS-AUTRQRHGSA-N Gln-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BBFCMGBMYIAGRS-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- SDSMVVSHLAAOJL-UKJIMTQDSA-N Gln-Val-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N SDSMVVSHLAAOJL-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- FITIQFSXXBKFFM-NRPADANISA-N Gln-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FITIQFSXXBKFFM-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- SZXSSXUNOALWCH-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O SZXSSXUNOALWCH-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- OGMQXTXGLDNBSS-FXQIFTODSA-N Glu-Ala-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O OGMQXTXGLDNBSS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- HUWSBFYAGXCXKC-CIUDSAMLSA-N Glu-Ala-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O HUWSBFYAGXCXKC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MXOODARRORARSU-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Ser Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N MXOODARRORARSU-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- CVPXINNKRTZBMO-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)CN=C(N)N CVPXINNKRTZBMO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LTUVYLVIZHJCOQ-KKUMJFAQSA-N Glu-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LTUVYLVIZHJCOQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- VPKBCVUDBNINAH-GARJFASQSA-N Glu-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O VPKBCVUDBNINAH-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- NKSGKPWXSWBRRX-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Cys Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N NKSGKPWXSWBRRX-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- MLCPTRRNICEKIS-FXQIFTODSA-N Glu-Asn-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MLCPTRRNICEKIS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ZOXBSICWUDAOHX-GUBZILKMSA-N Glu-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O ZOXBSICWUDAOHX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SBYVDRJAXWSXQL-AVGNSLFASA-N Glu-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SBYVDRJAXWSXQL-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N Glu-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PBFGQTGPSKWHJA-QEJZJMRPSA-N Glu-Asp-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O PBFGQTGPSKWHJA-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- ZXQPJYWZSFGWJB-AVGNSLFASA-N Glu-Cys-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZXQPJYWZSFGWJB-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- AUTNXSQEVVHSJK-YVNDNENWSA-N Glu-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O AUTNXSQEVVHSJK-YVNDNENWSA-N 0.000 description 1
- HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N Glu-Gly-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- XMPAXPSENRSOSV-RYUDHWBXSA-N Glu-Gly-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O XMPAXPSENRSOSV-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- LGYCLOCORAEQSZ-PEFMBERDSA-N Glu-Ile-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O LGYCLOCORAEQSZ-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- VGUYMZGLJUJRBV-YVNDNENWSA-N Glu-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VGUYMZGLJUJRBV-YVNDNENWSA-N 0.000 description 1
- YKBUCXNNBYZYAY-MNXVOIDGSA-N Glu-Lys-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O YKBUCXNNBYZYAY-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- RBXSZQRSEGYDFG-GUBZILKMSA-N Glu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RBXSZQRSEGYDFG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N Glu-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- YUXIEONARHPUTK-JBACZVJFSA-N Glu-Phe-Trp Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N YUXIEONARHPUTK-JBACZVJFSA-N 0.000 description 1
- WIKMTDVSCUJIPJ-CIUDSAMLSA-N Glu-Ser-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N WIKMTDVSCUJIPJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MRWYPDWDZSLWJM-ACZMJKKPSA-N Glu-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MRWYPDWDZSLWJM-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- QCMVGXDELYMZET-GLLZPBPUSA-N Glu-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QCMVGXDELYMZET-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 1
- CQGBSALYGOXQPE-HTUGSXCWSA-N Glu-Thr-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O CQGBSALYGOXQPE-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 1
- MXJYXYDREQWUMS-XKBZYTNZSA-N Glu-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MXJYXYDREQWUMS-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- YOTHMZZSJKKEHZ-SZMVWBNQSA-N Glu-Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)=CNC2=C1 YOTHMZZSJKKEHZ-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N Glu-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 1
- VXEFAWJTFAUDJK-AVGNSLFASA-N Glu-Tyr-Ser Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O VXEFAWJTFAUDJK-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- LZEUDRYSAZAJIO-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O LZEUDRYSAZAJIO-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- QRWPTXLWHHTOCO-DZKIICNBSA-N Glu-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O QRWPTXLWHHTOCO-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- SOYWRINXUSUWEQ-DLOVCJGASA-N Glu-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SOYWRINXUSUWEQ-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- JBRBACJPBZNFMF-YUMQZZPRSA-N Gly-Ala-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JBRBACJPBZNFMF-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- LJPIRKICOISLKN-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LJPIRKICOISLKN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KFMBRBPXHVMDFN-UWVGGRQHSA-N Gly-Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCNC(N)=N KFMBRBPXHVMDFN-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- UXJHNZODTMHWRD-WHFBIAKZSA-N Gly-Asn-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UXJHNZODTMHWRD-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- DJTXYXZNNDDEOU-WHFBIAKZSA-N Gly-Asn-Cys Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)CN)C(=O)N DJTXYXZNNDDEOU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- XLFHCWHXKSFVIB-BQBZGAKWSA-N Gly-Gln-Gln Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O XLFHCWHXKSFVIB-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- JLJLBWDKDRYOPA-RYUDHWBXSA-N Gly-Gln-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 JLJLBWDKDRYOPA-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- HDNXXTBKOJKWNN-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HDNXXTBKOJKWNN-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- XTQFHTHIAKKCTM-YFKPBYRVSA-N Gly-Glu-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O XTQFHTHIAKKCTM-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GDOZQTNZPCUARW-YFKPBYRVSA-N Gly-Gly-Glu Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O GDOZQTNZPCUARW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UPADCCSMVOQAGF-LBPRGKRZSA-N Gly-Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)CNC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 UPADCCSMVOQAGF-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- MVORZMQFXBLMHM-QWRGUYRKSA-N Gly-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CN=CN1 MVORZMQFXBLMHM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- BXICSAQLIHFDDL-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Asn Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BXICSAQLIHFDDL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N Gly-Lys-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- QGDOOCIPHSSADO-STQMWFEESA-N Gly-Met-Phe Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QGDOOCIPHSSADO-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- GAFKBWKVXNERFA-QWRGUYRKSA-N Gly-Phe-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 GAFKBWKVXNERFA-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- IGOYNRWLWHWAQO-JTQLQIEISA-N Gly-Phe-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 IGOYNRWLWHWAQO-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N Gly-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CN)O WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N 0.000 description 1
- WDXLKVQATNEAJQ-BQBZGAKWSA-N Gly-Pro-Asp Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WDXLKVQATNEAJQ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N Gly-Ser-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N Gly-Ser-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JSLVAHYTAJJEQH-QWRGUYRKSA-N Gly-Ser-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JSLVAHYTAJJEQH-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- IMRNSEPSPFQNHF-STQMWFEESA-N Gly-Ser-Trp Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C12)C(=O)O IMRNSEPSPFQNHF-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- FFJQHWKSGAWSTJ-BFHQHQDPSA-N Gly-Thr-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FFJQHWKSGAWSTJ-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- YXTFLTJYLIAZQG-FJXKBIBVSA-N Gly-Thr-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N YXTFLTJYLIAZQG-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- RHRLHXQWHCNJKR-PMVVWTBXSA-N Gly-Thr-His Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 RHRLHXQWHCNJKR-PMVVWTBXSA-N 0.000 description 1
- GNNJKUYDWFIBTK-QWRGUYRKSA-N Gly-Tyr-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GNNJKUYDWFIBTK-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- GJHWILMUOANXTG-WPRPVWTQSA-N Gly-Val-Arg Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GJHWILMUOANXTG-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- BNMRSWQOHIQTFL-JSGCOSHPSA-N Gly-Val-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BNMRSWQOHIQTFL-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- IZVICCORZOSGPT-JSGCOSHPSA-N Gly-Val-Tyr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O IZVICCORZOSGPT-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N H-Lys-Trp-OH Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050005077 Haptoglobin Proteins 0.000 description 1
- 102000014702 Haptoglobin Human genes 0.000 description 1
- DCRODRAURLJOFY-XPUUQOCRSA-N His-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O DCRODRAURLJOFY-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- ZZLWLWSUIBSMNP-CIUDSAMLSA-N His-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZZLWLWSUIBSMNP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OEROYDLRVAYIMQ-YUMQZZPRSA-N His-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OEROYDLRVAYIMQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- BDFCIKANUNMFGB-PMVVWTBXSA-N His-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 BDFCIKANUNMFGB-PMVVWTBXSA-N 0.000 description 1
- WJGSTIMGSIWHJX-HVTMNAMFSA-N His-Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N WJGSTIMGSIWHJX-HVTMNAMFSA-N 0.000 description 1
- JENKOCSDMSVWPY-SRVKXCTJSA-N His-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JENKOCSDMSVWPY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- AIPUZFXMXAHZKY-QWRGUYRKSA-N His-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O AIPUZFXMXAHZKY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- BXOLYFJYQQRQDJ-MXAVVETBSA-N His-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N BXOLYFJYQQRQDJ-MXAVVETBSA-N 0.000 description 1
- YAALVYQFVJNXIV-KKUMJFAQSA-N His-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 YAALVYQFVJNXIV-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- UXSATKFPUVZVDK-KKUMJFAQSA-N His-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N UXSATKFPUVZVDK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- TTYKEFZRLKQTHH-MELADBBJSA-N His-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)C(=O)O TTYKEFZRLKQTHH-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- BZAQOPHNBFOOJS-DCAQKATOSA-N His-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BZAQOPHNBFOOJS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QCBYAHHNOHBXIH-UWVGGRQHSA-N His-Pro-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CN=CN1 QCBYAHHNOHBXIH-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- PZAJPILZRFPYJJ-SRVKXCTJSA-N His-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O PZAJPILZRFPYJJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DQZCEKQPSOBNMJ-NKIYYHGXSA-N His-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DQZCEKQPSOBNMJ-NKIYYHGXSA-N 0.000 description 1
- YERBCFWVWITTEJ-NAZCDGGXSA-N His-Trp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC3=CN=CN3)N)O YERBCFWVWITTEJ-NAZCDGGXSA-N 0.000 description 1
- PUFNQIPSRXVLQJ-IHRRRGAJSA-N His-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N PUFNQIPSRXVLQJ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 102100039996 Histone deacetylase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100039999 Histone deacetylase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101001050162 Homo sapiens Early endosome antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001035024 Homo sapiens Histone deacetylase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001035011 Homo sapiens Histone deacetylase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000341655 Human papillomavirus type 16 Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- JRHFQUPIZOYKQP-KBIXCLLPSA-N Ile-Ala-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O JRHFQUPIZOYKQP-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- BOTVMTSMOUSDRW-GMOBBJLQSA-N Ile-Arg-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BOTVMTSMOUSDRW-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 1
- YOTNPRLPIPHQSB-XUXIUFHCSA-N Ile-Arg-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N YOTNPRLPIPHQSB-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- NULSANWBUWLTKN-NAKRPEOUSA-N Ile-Arg-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N NULSANWBUWLTKN-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- IDAHFEPYTJJZFD-PEFMBERDSA-N Ile-Asp-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N IDAHFEPYTJJZFD-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- BGZIJZJBXRVBGJ-SXTJYALSSA-N Ile-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)N BGZIJZJBXRVBGJ-SXTJYALSSA-N 0.000 description 1
- VQUCKIAECLVLAD-SVSWQMSJSA-N Ile-Cys-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N VQUCKIAECLVLAD-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 1
- OVPYIUNCVSOVNF-ZPFDUUQYSA-N Ile-Gln-Pro Natural products CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O OVPYIUNCVSOVNF-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- HTDRTKMNJRRYOJ-SIUGBPQLSA-N Ile-Gln-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 HTDRTKMNJRRYOJ-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 1
- WUKLZPHVWAMZQV-UKJIMTQDSA-N Ile-Glu-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N WUKLZPHVWAMZQV-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- LPFBXFILACZHIB-LAEOZQHASA-N Ile-Gly-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N LPFBXFILACZHIB-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- DFFTXLCCDFYRKD-MBLNEYKQSA-N Ile-Gly-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N DFFTXLCCDFYRKD-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- ZXIGYKICRDFISM-DJFWLOJKSA-N Ile-His-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N ZXIGYKICRDFISM-DJFWLOJKSA-N 0.000 description 1
- UQXADIGYEYBJEI-DJFWLOJKSA-N Ile-His-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N UQXADIGYEYBJEI-DJFWLOJKSA-N 0.000 description 1
- OUUCIIJSBIBCHB-ZPFDUUQYSA-N Ile-Leu-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OUUCIIJSBIBCHB-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- PHRWFSFCNJPWRO-PPCPHDFISA-N Ile-Leu-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N PHRWFSFCNJPWRO-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- UIEZQYNXCYHMQS-BJDJZHNGSA-N Ile-Lys-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N UIEZQYNXCYHMQS-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- PNTWNAXGBOZMBO-MNXVOIDGSA-N Ile-Lys-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N PNTWNAXGBOZMBO-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- YSGBJIQXTIVBHZ-AJNGGQMLSA-N Ile-Lys-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YSGBJIQXTIVBHZ-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N Ile-Lys-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RCMNUBZKIIJCOI-ZPFDUUQYSA-N Ile-Met-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N RCMNUBZKIIJCOI-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- ZUPJCJINYQISSN-XUXIUFHCSA-N Ile-Met-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N ZUPJCJINYQISSN-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- OTSVBELRDMSPKY-PCBIJLKTSA-N Ile-Phe-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N OTSVBELRDMSPKY-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- KTNGVMMGIQWIDV-OSUNSFLBSA-N Ile-Pro-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KTNGVMMGIQWIDV-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- XMYURPUVJSKTMC-KBIXCLLPSA-N Ile-Ser-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N XMYURPUVJSKTMC-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- ZLFNNVATRMCAKN-ZKWXMUAHSA-N Ile-Ser-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)O)N ZLFNNVATRMCAKN-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- PELCGFMHLZXWBQ-BJDJZHNGSA-N Ile-Ser-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N PELCGFMHLZXWBQ-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- HXIDVIFHRYRXLZ-NAKRPEOUSA-N Ile-Ser-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N HXIDVIFHRYRXLZ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- PZWBBXHHUSIGKH-OSUNSFLBSA-N Ile-Thr-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PZWBBXHHUSIGKH-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- YBKKLDBBPFIXBQ-MBLNEYKQSA-N Ile-Thr-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)O)N YBKKLDBBPFIXBQ-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- FXJLRZFMKGHYJP-CFMVVWHZSA-N Ile-Tyr-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N FXJLRZFMKGHYJP-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 1
- NXRNRBOKDBIVKQ-CXTHYWKRSA-N Ile-Tyr-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N NXRNRBOKDBIVKQ-CXTHYWKRSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 241000581650 Ivesia Species 0.000 description 1
- IBMVEYRWAWIOTN-UHFFFAOYSA-N L-Leucyl-L-Arginyl-L-Proline Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O IBMVEYRWAWIOTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N L-Met-L-Phe Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N L-leucine-L-tyrosine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N L-leucyl-L-arginine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- LJHGALIOHLRRQN-DCAQKATOSA-N Leu-Ala-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N LJHGALIOHLRRQN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- KSZCCRIGNVSHFH-UWVGGRQHSA-N Leu-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O KSZCCRIGNVSHFH-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- IBMVEYRWAWIOTN-RWMBFGLXSA-N Leu-Arg-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(O)=O IBMVEYRWAWIOTN-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 1
- STAVRDQLZOTNKJ-RHYQMDGZSA-N Leu-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O STAVRDQLZOTNKJ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- DUBAVOVZNZKEQQ-AVGNSLFASA-N Leu-Arg-Val Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)CCCN=C(N)N DUBAVOVZNZKEQQ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- DBVWMYGBVFCRBE-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DBVWMYGBVFCRBE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OIARJGNVARWKFP-YUMQZZPRSA-N Leu-Asn-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O OIARJGNVARWKFP-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- MDVZJYGNAGLPGJ-KKUMJFAQSA-N Leu-Asn-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MDVZJYGNAGLPGJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ULXYQAJWJGLCNR-YUMQZZPRSA-N Leu-Asp-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O ULXYQAJWJGLCNR-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- FOEHRHOBWFQSNW-KATARQTJSA-N Leu-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O FOEHRHOBWFQSNW-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- KAFOIVJDVSZUMD-DCAQKATOSA-N Leu-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O KAFOIVJDVSZUMD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- KAFOIVJDVSZUMD-UHFFFAOYSA-N Leu-Gln-Gln Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O KAFOIVJDVSZUMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BOFAFKVZQUMTID-AVGNSLFASA-N Leu-Gln-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N BOFAFKVZQUMTID-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- FQZPTCNSNPWHLJ-AVGNSLFASA-N Leu-Gln-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O FQZPTCNSNPWHLJ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- QDSKNVXKLPQNOJ-GVXVVHGQSA-N Leu-Gln-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QDSKNVXKLPQNOJ-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- HFBCHNRFRYLZNV-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HFBCHNRFRYLZNV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- WIDZHJTYKYBLSR-DCAQKATOSA-N Leu-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WIDZHJTYKYBLSR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FMEICTQWUKNAGC-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O FMEICTQWUKNAGC-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N Leu-Gly-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- QPXBPQUGXHURGP-UWVGGRQHSA-N Leu-Gly-Met Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N QPXBPQUGXHURGP-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N Leu-Gly-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- CSFVADKICPDRRF-KKUMJFAQSA-N Leu-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)CC1=CN=CN1 CSFVADKICPDRRF-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- AUBMZAMQCOYSIC-MNXVOIDGSA-N Leu-Ile-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O AUBMZAMQCOYSIC-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- KUIDCYNIEJBZBU-AJNGGQMLSA-N Leu-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KUIDCYNIEJBZBU-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N Leu-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- IFMPDNRWZZEZSL-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Cys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O IFMPDNRWZZEZSL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- JNDYEOUZBLOVOF-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O JNDYEOUZBLOVOF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N Leu-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- WXZOHBVPVKABQN-DCAQKATOSA-N Leu-Met-Asp Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N WXZOHBVPVKABQN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- AIRUUHAOKGVJAD-JYJNAYRXSA-N Leu-Phe-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIRUUHAOKGVJAD-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- DRWMRVFCKKXHCH-BZSNNMDCSA-N Leu-Phe-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 DRWMRVFCKKXHCH-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- KWLWZYMNUZJKMZ-IHRRRGAJSA-N Leu-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KWLWZYMNUZJKMZ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- AKVBOOKXVAMKSS-GUBZILKMSA-N Leu-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O AKVBOOKXVAMKSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- JIHDFWWRYHSAQB-GUBZILKMSA-N Leu-Ser-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O JIHDFWWRYHSAQB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- RGUXWMDNCPMQFB-YUMQZZPRSA-N Leu-Ser-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RGUXWMDNCPMQFB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SBANPBVRHYIMRR-GARJFASQSA-N Leu-Ser-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N SBANPBVRHYIMRR-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- SBANPBVRHYIMRR-UHFFFAOYSA-N Leu-Ser-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O SBANPBVRHYIMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N Leu-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- ZDJQVSIPFLMNOX-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N ZDJQVSIPFLMNOX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- LCNASHSOFMRYFO-WDCWCFNPSA-N Leu-Thr-Gln Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O LCNASHSOFMRYFO-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- HGLKOTPFWOMPOB-MEYUZBJRSA-N Leu-Thr-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 HGLKOTPFWOMPOB-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- ARNIBBOXIAWUOP-MGHWNKPDSA-N Leu-Tyr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O ARNIBBOXIAWUOP-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 1
- FBNPMTNBFFAMMH-AVGNSLFASA-N Leu-Val-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N FBNPMTNBFFAMMH-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N Leu-Val-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 108090000581 Leukemia inhibitory factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004058 Leukemia inhibitory factor Human genes 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005198 Long Noncoding RNA Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- MPOHDJKRBLVGCT-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N MPOHDJKRBLVGCT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PNPYKQFJGRFYJE-GUBZILKMSA-N Lys-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PNPYKQFJGRFYJE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KCXUCYYZNZFGLL-SRVKXCTJSA-N Lys-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KCXUCYYZNZFGLL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N Lys-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KNKHAVVBVXKOGX-JXUBOQSCSA-N Lys-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KNKHAVVBVXKOGX-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- IRNSXVOWSXSULE-DCAQKATOSA-N Lys-Ala-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN IRNSXVOWSXSULE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- ABHIXYDMILIUKV-CIUDSAMLSA-N Lys-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ABHIXYDMILIUKV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LZWNAOIMTLNMDW-NHCYSSNCSA-N Lys-Asn-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N LZWNAOIMTLNMDW-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- QUYCUALODHJQLK-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QUYCUALODHJQLK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SQXUUGUCGJSWCK-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N SQXUUGUCGJSWCK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- IWWMPCPLFXFBAF-SRVKXCTJSA-N Lys-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IWWMPCPLFXFBAF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NRQRKMYZONPCTM-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NRQRKMYZONPCTM-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ZAWOJFFMBANLGE-CIUDSAMLSA-N Lys-Cys-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCCCN)N ZAWOJFFMBANLGE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HWMZUBUEOYAQSC-DCAQKATOSA-N Lys-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HWMZUBUEOYAQSC-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- RZHLIPMZXOEJTL-AVGNSLFASA-N Lys-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N RZHLIPMZXOEJTL-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- HEWWNLVEWBJBKA-WDCWCFNPSA-N Lys-Gln-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN HEWWNLVEWBJBKA-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- DRCILAJNUJKAHC-SRVKXCTJSA-N Lys-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O DRCILAJNUJKAHC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GRADYHMSAUIKPS-DCAQKATOSA-N Lys-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O GRADYHMSAUIKPS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N Lys-Glu-Gly Chemical compound [NH3+]CCCC[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C(=O)NCC([O-])=O GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- IMAKMJCBYCSMHM-AVGNSLFASA-N Lys-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN IMAKMJCBYCSMHM-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- DUTMKEAPLLUGNO-JYJNAYRXSA-N Lys-Glu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O DUTMKEAPLLUGNO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N Lys-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- GTAXSKOXPIISBW-AVGNSLFASA-N Lys-His-Gln Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N GTAXSKOXPIISBW-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- GNLJXWBNLAIPEP-MELADBBJSA-N Lys-His-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O GNLJXWBNLAIPEP-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- JYXBNQOKPRQNQS-YTFOTSKYSA-N Lys-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JYXBNQOKPRQNQS-YTFOTSKYSA-N 0.000 description 1
- KEPWSUPUFAPBRF-DKIMLUQUSA-N Lys-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O KEPWSUPUFAPBRF-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- RIJCHEVHFWMDKD-SRVKXCTJSA-N Lys-Lys-Asn Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RIJCHEVHFWMDKD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- URGPVYGVWLIRGT-DCAQKATOSA-N Lys-Met-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O URGPVYGVWLIRGT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- MTBLFIQZECOEBY-IHRRRGAJSA-N Lys-Met-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O MTBLFIQZECOEBY-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- JYVCOTWSRGFABJ-DCAQKATOSA-N Lys-Met-Ser Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N JYVCOTWSRGFABJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- ZJSZPXISKMDJKQ-JYJNAYRXSA-N Lys-Phe-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZJSZPXISKMDJKQ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- MSSJJDVQTFTLIF-KBPBESRZSA-N Lys-Phe-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)NCC(O)=O MSSJJDVQTFTLIF-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- MIROMRNASYKZNL-ULQDDVLXSA-N Lys-Pro-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 MIROMRNASYKZNL-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- WQDKIVRHTQYJSN-DCAQKATOSA-N Lys-Ser-Arg Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N WQDKIVRHTQYJSN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- JMNRXRPBHFGXQX-GUBZILKMSA-N Lys-Ser-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O JMNRXRPBHFGXQX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- YRNRVKTYDSLKMD-KKUMJFAQSA-N Lys-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YRNRVKTYDSLKMD-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WAAZECNCPVGPIV-RHYQMDGZSA-N Lys-Thr-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O WAAZECNCPVGPIV-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N Lys-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- ZVZRQKJOQQAFCF-ULQDDVLXSA-N Lys-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O ZVZRQKJOQQAFCF-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- XATKLFSXFINPSB-JYJNAYRXSA-N Lys-Tyr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O XATKLFSXFINPSB-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- XABXVVSWUVCZST-GVXVVHGQSA-N Lys-Val-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN XABXVVSWUVCZST-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- VKCPHIOZDWUFSW-ONGXEEELSA-N Lys-Val-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN VKCPHIOZDWUFSW-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- NYTDJEZBAAFLLG-IHRRRGAJSA-N Lys-Val-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O NYTDJEZBAAFLLG-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- TXTZMVNJIRZABH-ULQDDVLXSA-N Lys-Val-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 TXTZMVNJIRZABH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- OZVXDDFYCQOPFD-XQQFMLRXSA-N Lys-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N OZVXDDFYCQOPFD-XQQFMLRXSA-N 0.000 description 1
- 208000015439 Lysosomal storage disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000009571 Macrophage Inflammatory Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010009474 Macrophage Inflammatory Proteins Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L Malonate Chemical compound [O-]C(=O)CC([O-])=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- VHGIWFGJIHTASW-FXQIFTODSA-N Met-Ala-Asp Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O VHGIWFGJIHTASW-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- QAHFGYLFLVGBNW-DCAQKATOSA-N Met-Ala-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN QAHFGYLFLVGBNW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- RJEFZSIVBHGRQJ-SRVKXCTJSA-N Met-Arg-Met Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O RJEFZSIVBHGRQJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- TUSOIZOVPJCMFC-FXQIFTODSA-N Met-Asp-Asp Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O TUSOIZOVPJCMFC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- MTBVQFFQMXHCPC-CIUDSAMLSA-N Met-Glu-Asp Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MTBVQFFQMXHCPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MVBZBRKNZVJEKK-DTWKUNHWSA-N Met-Gly-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)NCC(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N MVBZBRKNZVJEKK-DTWKUNHWSA-N 0.000 description 1
- BEZJTLKUMFMITF-AVGNSLFASA-N Met-Lys-Arg Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N BEZJTLKUMFMITF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- DJJBHQHOZLUBCN-WDSOQIARSA-N Met-Lys-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O DJJBHQHOZLUBCN-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- VQILILSLEFDECU-GUBZILKMSA-N Met-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VQILILSLEFDECU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MNGBICITWAPGAS-BPUTZDHNSA-N Met-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O MNGBICITWAPGAS-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- LBSWWNKMVPAXOI-GUBZILKMSA-N Met-Val-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LBSWWNKMVPAXOI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 102000003792 Metallothionein Human genes 0.000 description 1
- 108090000157 Metallothionein Proteins 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical compound CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N N-L-methionyl-L-tyrosine Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010061952 Orosomucoid Proteins 0.000 description 1
- 102000012404 Orosomucoid Human genes 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108090000573 Osteocalcin Proteins 0.000 description 1
- 102000004067 Osteocalcin Human genes 0.000 description 1
- 108010077077 Osteonectin Proteins 0.000 description 1
- 102000009890 Osteonectin Human genes 0.000 description 1
- ZCQWOFVYLHDMMC-UHFFFAOYSA-N Oxazole Chemical compound C1=COC=N1 ZCQWOFVYLHDMMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 208000008900 Pancreatic Ductal Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010088535 Pep-1 peptide Proteins 0.000 description 1
- CYZBFPYMSJGBRL-DRZSPHRISA-N Phe-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CYZBFPYMSJGBRL-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- MQWISMJKHOUEMW-ULQDDVLXSA-N Phe-Arg-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MQWISMJKHOUEMW-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- XMPUYNHKEPFERE-IHRRRGAJSA-N Phe-Asp-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 XMPUYNHKEPFERE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MPFGIYLYWUCSJG-AVGNSLFASA-N Phe-Glu-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 MPFGIYLYWUCSJG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- KYYMILWEGJYPQZ-IHRRRGAJSA-N Phe-Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 KYYMILWEGJYPQZ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- JWQWPTLEOFNCGX-AVGNSLFASA-N Phe-Glu-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JWQWPTLEOFNCGX-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- UAMFZRNCIFFMLE-FHWLQOOXSA-N Phe-Glu-Tyr Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N UAMFZRNCIFFMLE-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 1
- WPTYDQPGBMDUBI-QWRGUYRKSA-N Phe-Gly-Asn Chemical compound N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O WPTYDQPGBMDUBI-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- JEBWZLWTRPZQRX-QWRGUYRKSA-N Phe-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O JEBWZLWTRPZQRX-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- XEXSSIBQYNKFBX-KBPBESRZSA-N Phe-Gly-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 XEXSSIBQYNKFBX-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- PMKIMKUGCSVFSV-CQDKDKBSSA-N Phe-His-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N PMKIMKUGCSVFSV-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 1
- KNYPNEYICHHLQL-ACRUOGEOSA-N Phe-Leu-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 KNYPNEYICHHLQL-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- SCKXGHWQPPURGT-KKUMJFAQSA-N Phe-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SCKXGHWQPPURGT-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- KAJLHCWRWDSROH-BZSNNMDCSA-N Phe-Phe-Asp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 KAJLHCWRWDSROH-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- CZQZSMJXFGGBHM-KKUMJFAQSA-N Phe-Pro-Gln Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O CZQZSMJXFGGBHM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- MMJJFXWMCMJMQA-STQMWFEESA-N Phe-Pro-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CC=CC=C1 MMJJFXWMCMJMQA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- NJJBATPLUQHRBM-IHRRRGAJSA-N Phe-Pro-Ser Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O NJJBATPLUQHRBM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N Phe-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GNRMAQSIROFNMI-IXOXFDKPSA-N Phe-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GNRMAQSIROFNMI-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- YUPRIZTWANWWHK-DZKIICNBSA-N Phe-Val-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N YUPRIZTWANWWHK-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- 108091007412 Piwi-interacting RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 101710182846 Polyhedrin Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWNOFCGBMSFTBC-CIUDSAMLSA-N Pro-Ala-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IWNOFCGBMSFTBC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OCSACVPBMIYNJE-GUBZILKMSA-N Pro-Arg-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OCSACVPBMIYNJE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- VCYJKOLZYPYGJV-AVGNSLFASA-N Pro-Arg-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VCYJKOLZYPYGJV-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- OLTFZQIYCNOBLI-DCAQKATOSA-N Pro-Cys-Lys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O OLTFZQIYCNOBLI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- XJROSHJRQTXWAE-XGEHTFHBSA-N Pro-Cys-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XJROSHJRQTXWAE-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- LHALYDBUDCWMDY-CIUDSAMLSA-N Pro-Glu-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O LHALYDBUDCWMDY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- VPFGPKIWSDVTOY-SRVKXCTJSA-N Pro-Glu-His Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O VPFGPKIWSDVTOY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UUHXBJHVTVGSKM-BQBZGAKWSA-N Pro-Gly-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O UUHXBJHVTVGSKM-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- VYWNORHENYEQDW-YUMQZZPRSA-N Pro-Gly-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 VYWNORHENYEQDW-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- XYSXOCIWCPFOCG-IHRRRGAJSA-N Pro-Leu-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XYSXOCIWCPFOCG-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- RMODQFBNDDENCP-IHRRRGAJSA-N Pro-Lys-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O RMODQFBNDDENCP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- RPLMFKUKFZOTER-AVGNSLFASA-N Pro-Met-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 RPLMFKUKFZOTER-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- VGVCNKSUVSZEIE-IHRRRGAJSA-N Pro-Phe-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O VGVCNKSUVSZEIE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- SBVPYBFMIGDIDX-SRVKXCTJSA-N Pro-Pro-Pro Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1N(C(=O)[C@H]2NCCC2)CCC1 SBVPYBFMIGDIDX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BGWKULMLUIUPKY-BQBZGAKWSA-N Pro-Ser-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 BGWKULMLUIUPKY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N Pro-Thr-Gly Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- GZNYIXWOIUFLGO-ZJDVBMNYSA-N Pro-Thr-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GZNYIXWOIUFLGO-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 1
- WWXNZNWZNZPDIF-SRVKXCTJSA-N Pro-Val-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 WWXNZNWZNZPDIF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ZMLRZBWCXPQADC-TUAOUCFPSA-N Pro-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 ZMLRZBWCXPQADC-TUAOUCFPSA-N 0.000 description 1
- FIODMZKLZFLYQP-GUBZILKMSA-N Pro-Val-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FIODMZKLZFLYQP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N Pyrazole Chemical compound C=1C=NNC=1 WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100033479 RAF proto-oncogene serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010034634 Repressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000009661 Repressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 description 1
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 description 1
- MWMKFWJYRRGXOR-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Asn Chemical compound N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)O)CC(N)=O)C)CO MWMKFWJYRRGXOR-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- BKOKTRCZXRIQPX-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N BKOKTRCZXRIQPX-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- SRTCFKGBYBZRHA-ACZMJKKPSA-N Ser-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SRTCFKGBYBZRHA-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- BTKUIVBNGBFTTP-WHFBIAKZSA-N Ser-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O BTKUIVBNGBFTTP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- WTUJZHKANPDPIN-CIUDSAMLSA-N Ser-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N WTUJZHKANPDPIN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OOKCGAYXSNJBGQ-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OOKCGAYXSNJBGQ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- GHPQVUYZQQGEDA-BIIVOSGPSA-N Ser-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O GHPQVUYZQQGEDA-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- MOVJSUIKUNCVMG-ZLUOBGJFSA-N Ser-Cys-Ser Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)O MOVJSUIKUNCVMG-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- PVDTYLHUWAEYGY-CIUDSAMLSA-N Ser-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O PVDTYLHUWAEYGY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OHKFXGKHSJKKAL-NRPADANISA-N Ser-Glu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OHKFXGKHSJKKAL-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- BPMRXBZYPGYPJN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BPMRXBZYPGYPJN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N Ser-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N Ser-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- YIUWWXVTYLANCJ-NAKRPEOUSA-N Ser-Ile-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O YIUWWXVTYLANCJ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- RIAKPZVSNBBNRE-BJDJZHNGSA-N Ser-Ile-Leu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O RIAKPZVSNBBNRE-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- KCNSGAMPBPYUAI-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KCNSGAMPBPYUAI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PPNPDKGQRFSCAC-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PPNPDKGQRFSCAC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- BYCVMHKULKRVPV-GUBZILKMSA-N Ser-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O BYCVMHKULKRVPV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N Ser-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- LRWBCWGEUCKDTN-BJDJZHNGSA-N Ser-Lys-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LRWBCWGEUCKDTN-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- XUDRHBPSPAPDJP-SRVKXCTJSA-N Ser-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CO XUDRHBPSPAPDJP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PTWIYDNFWPXQSD-GARJFASQSA-N Ser-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O PTWIYDNFWPXQSD-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- LRZLZIUXQBIWTB-KATARQTJSA-N Ser-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LRZLZIUXQBIWTB-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- IFLVBVIYADZIQO-DCAQKATOSA-N Ser-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N IFLVBVIYADZIQO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- JAWGSPUJAXYXJA-IHRRRGAJSA-N Ser-Phe-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)N)CC1=CC=CC=C1 JAWGSPUJAXYXJA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- NUEHQDHDLDXCRU-GUBZILKMSA-N Ser-Pro-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O NUEHQDHDLDXCRU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- RHAPJNVNWDBFQI-BQBZGAKWSA-N Ser-Pro-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O RHAPJNVNWDBFQI-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- XGQKSRGHEZNWIS-IHRRRGAJSA-N Ser-Pro-Tyr Chemical compound N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(O)=O XGQKSRGHEZNWIS-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- NVNPWELENFJOHH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)N NVNPWELENFJOHH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SZRNDHWMVSFPSP-XKBZYTNZSA-N Ser-Thr-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O SZRNDHWMVSFPSP-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- PCJLFYBAQZQOFE-KATARQTJSA-N Ser-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PCJLFYBAQZQOFE-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N Ser-Thr-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- AXKJPUBALUNJEO-UBHSHLNASA-N Ser-Trp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AXKJPUBALUNJEO-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- PZHJLTWGMYERRJ-SRVKXCTJSA-N Ser-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PZHJLTWGMYERRJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N Ser-Tyr-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- ODRUTDLAONAVDV-IHRRRGAJSA-N Ser-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ODRUTDLAONAVDV-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020003224 Small Nucleolar RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042773 Small Nucleolar RNA Human genes 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007000 Tenascin Human genes 0.000 description 1
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 1
- DHXVGJBLRPWPCS-UHFFFAOYSA-N Tetrahydropyran Chemical compound C1CCOCC1 DHXVGJBLRPWPCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DPOPAJRDYZGTIR-UHFFFAOYSA-N Tetrazine Chemical compound C1=CN=NN=N1 DPOPAJRDYZGTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KEGBFULVYKYJRD-LFSVMHDDSA-N Thr-Ala-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KEGBFULVYKYJRD-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 1
- DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N Thr-Ala-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- GLQFKOVWXPPFTP-VEVYYDQMSA-N Thr-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GLQFKOVWXPPFTP-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- BWUHENPAEMNGQJ-ZDLURKLDSA-N Thr-Gln Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O BWUHENPAEMNGQJ-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- CQNFRKAKGDSJFR-NUMRIWBASA-N Thr-Glu-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)O CQNFRKAKGDSJFR-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- LHEZGZQRLDBSRR-WDCWCFNPSA-N Thr-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LHEZGZQRLDBSRR-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- XFTYVCHLARBHBQ-FOHZUACHSA-N Thr-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XFTYVCHLARBHBQ-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- MPUMPERGHHJGRP-WEDXCCLWSA-N Thr-Gly-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O MPUMPERGHHJGRP-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- DJDSEDOKJTZBAR-ZDLURKLDSA-N Thr-Gly-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DJDSEDOKJTZBAR-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- KBBRNEDOYWMIJP-KYNKHSRBSA-N Thr-Gly-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N)O KBBRNEDOYWMIJP-KYNKHSRBSA-N 0.000 description 1
- VTVVYQOXJCZVEB-WDCWCFNPSA-N Thr-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VTVVYQOXJCZVEB-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- PRNGXSILMXSWQQ-OEAJRASXSA-N Thr-Leu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PRNGXSILMXSWQQ-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- HPQHHRLWSAMMKG-KATARQTJSA-N Thr-Lys-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O HPQHHRLWSAMMKG-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- SCSVNSNWUTYSFO-WDCWCFNPSA-N Thr-Lys-Glu Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SCSVNSNWUTYSFO-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- MXNAOGFNFNKUPD-JHYOHUSXSA-N Thr-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MXNAOGFNFNKUPD-JHYOHUSXSA-N 0.000 description 1
- NYQIZWROIMIQSL-VEVYYDQMSA-N Thr-Pro-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NYQIZWROIMIQSL-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- GVMXJJAJLIEASL-ZJDVBMNYSA-N Thr-Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GVMXJJAJLIEASL-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 1
- RVMNUBQWPVOUKH-HEIBUPTGSA-N Thr-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O RVMNUBQWPVOUKH-HEIBUPTGSA-N 0.000 description 1
- QYDKSNXSBXZPFK-ZJDVBMNYSA-N Thr-Thr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYDKSNXSBXZPFK-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 1
- AAZOYLQUEQRUMZ-GSSVUCPTSA-N Thr-Thr-Asn Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O AAZOYLQUEQRUMZ-GSSVUCPTSA-N 0.000 description 1
- BJJRNAVDQGREGC-HOUAVDHOSA-N Thr-Trp-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)O BJJRNAVDQGREGC-HOUAVDHOSA-N 0.000 description 1
- KHTIUAKJRUIEMA-HOUAVDHOSA-N Thr-Trp-Asp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 KHTIUAKJRUIEMA-HOUAVDHOSA-N 0.000 description 1
- CYCGARJWIQWPQM-YJRXYDGGSA-N Thr-Tyr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CYCGARJWIQWPQM-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 1
- 101710195626 Transcriptional activator protein Proteins 0.000 description 1
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- PEYSVKMXSLPQRU-FJHTZYQYSA-N Trp-Ala-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O PEYSVKMXSLPQRU-FJHTZYQYSA-N 0.000 description 1
- MHNHRNHJMXAVHZ-AAEUAGOBSA-N Trp-Asn-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)NCC(=O)O)N MHNHRNHJMXAVHZ-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 1
- UKINEYBQXPMOJO-UBHSHLNASA-N Trp-Asn-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N UKINEYBQXPMOJO-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- IQGJAHMZWBTRIF-UBHSHLNASA-N Trp-Asp-Asn Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N IQGJAHMZWBTRIF-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- WACMTVIJWRNVSO-CWRNSKLLSA-N Trp-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N)C(=O)O WACMTVIJWRNVSO-CWRNSKLLSA-N 0.000 description 1
- OBWQLWYNNZPWGX-QEJZJMRPSA-N Trp-Gln-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OBWQLWYNNZPWGX-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- PTAWAMWPRFTACW-SZMVWBNQSA-N Trp-Gln-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N PTAWAMWPRFTACW-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- OGXQLUCMJZSJPW-LYSGOOTNSA-N Trp-Gly-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O OGXQLUCMJZSJPW-LYSGOOTNSA-N 0.000 description 1
- UJRIVCPPPMYCNA-HOCLYGCPSA-N Trp-Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N UJRIVCPPPMYCNA-HOCLYGCPSA-N 0.000 description 1
- UKWSFUSPGPBJGU-VFAJRCTISA-N Trp-Leu-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O UKWSFUSPGPBJGU-VFAJRCTISA-N 0.000 description 1
- YTYHAYZPOARHAP-HOCLYGCPSA-N Trp-Lys-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)O)N YTYHAYZPOARHAP-HOCLYGCPSA-N 0.000 description 1
- VDUJEEQMRQCLHB-YTQUADARSA-N Trp-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N)C(=O)O VDUJEEQMRQCLHB-YTQUADARSA-N 0.000 description 1
- WKQNLTQSCYXKQK-VFAJRCTISA-N Trp-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WKQNLTQSCYXKQK-VFAJRCTISA-N 0.000 description 1
- GFUOTIPYXKAPAH-BVSLBCMMSA-N Trp-Pro-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O GFUOTIPYXKAPAH-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- GBEAUNVBIMLWIB-IHPCNDPISA-N Trp-Ser-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 GBEAUNVBIMLWIB-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- ZGTKIODEJMUQOT-WIRXVTQYSA-N Trp-Trp-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZGTKIODEJMUQOT-WIRXVTQYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 108010040002 Tumor Suppressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000001742 Tumor Suppressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- IELISNUVHBKYBX-XDTLVQLUSA-N Tyr-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 IELISNUVHBKYBX-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 1
- TVOGEPLDNYTAHD-CQDKDKBSSA-N Tyr-Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 TVOGEPLDNYTAHD-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 1
- VTFWAGGJDRSQFG-MELADBBJSA-N Tyr-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)C(=O)O VTFWAGGJDRSQFG-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- BARBHMSSVWPKPZ-IHRRRGAJSA-N Tyr-Asp-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O BARBHMSSVWPKPZ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- NRFTYDWKWGJLAR-MELADBBJSA-N Tyr-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)C(=O)O NRFTYDWKWGJLAR-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- FQNUWOHNGJWNLM-QWRGUYRKSA-N Tyr-Cys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O FQNUWOHNGJWNLM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- RYSNTWVRSLCAJZ-RYUDHWBXSA-N Tyr-Gln-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 RYSNTWVRSLCAJZ-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- KOVXHANYYYMBRF-IRIUXVKKSA-N Tyr-Glu-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N)O KOVXHANYYYMBRF-IRIUXVKKSA-N 0.000 description 1
- GIOBXJSONRQHKQ-RYUDHWBXSA-N Tyr-Gly-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GIOBXJSONRQHKQ-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- ARSHSYUZHSIYKR-ACRUOGEOSA-N Tyr-His-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O ARSHSYUZHSIYKR-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- JJNXZIPLIXIGBX-HJPIBITLSA-N Tyr-Ile-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N JJNXZIPLIXIGBX-HJPIBITLSA-N 0.000 description 1
- NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N Tyr-Leu-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- QHLIUFUEUDFAOT-MGHWNKPDSA-N Tyr-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N QHLIUFUEUDFAOT-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 1
- KHCSOLAHNLOXJR-BZSNNMDCSA-N Tyr-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KHCSOLAHNLOXJR-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- NSGZILIDHCIZAM-KKUMJFAQSA-N Tyr-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N NSGZILIDHCIZAM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- JAGGEZACYAAMIL-CQDKDKBSSA-N Tyr-Lys-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N JAGGEZACYAAMIL-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 1
- WOAQYWUEUYMVGK-ULQDDVLXSA-N Tyr-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WOAQYWUEUYMVGK-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- BYAKMYBZADCNMN-JYJNAYRXSA-N Tyr-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O BYAKMYBZADCNMN-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- CWVHKVVKAQIJKY-ACRUOGEOSA-N Tyr-Lys-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N CWVHKVVKAQIJKY-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- FASACHWGQBNSRO-ZEWNOJEFSA-N Tyr-Phe-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N FASACHWGQBNSRO-ZEWNOJEFSA-N 0.000 description 1
- QKXAEWMHAAVVGS-KKUMJFAQSA-N Tyr-Pro-Glu Chemical compound N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QKXAEWMHAAVVGS-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- RWOKVQUCENPXGE-IHRRRGAJSA-N Tyr-Ser-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O RWOKVQUCENPXGE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- XYBNMHRFAUKPAW-IHRRRGAJSA-N Tyr-Ser-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N XYBNMHRFAUKPAW-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- CLEGSEJVGBYZBJ-MEYUZBJRSA-N Tyr-Thr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 CLEGSEJVGBYZBJ-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- NUQZCPSZHGIYTA-HKUYNNGSSA-N Tyr-Trp-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N NUQZCPSZHGIYTA-HKUYNNGSSA-N 0.000 description 1
- BXJQKVDPRMLGKN-PMVMPFDFSA-N Tyr-Trp-Leu Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 BXJQKVDPRMLGKN-PMVMPFDFSA-N 0.000 description 1
- RGJZPXFZIUUQDN-BPNCWPANSA-N Tyr-Val-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RGJZPXFZIUUQDN-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- OBKOPLHSRDATFO-XHSDSOJGSA-N Tyr-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N OBKOPLHSRDATFO-XHSDSOJGSA-N 0.000 description 1
- REJBPZVUHYNMEN-LSJOCFKGSA-N Val-Ala-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N REJBPZVUHYNMEN-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- COYSIHFOCOMGCF-UHFFFAOYSA-N Val-Arg-Gly Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(C(=O)NCC(O)=O)CCCN=C(N)N COYSIHFOCOMGCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CVUDMNSZAIZFAE-TUAOUCFPSA-N Val-Arg-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N CVUDMNSZAIZFAE-TUAOUCFPSA-N 0.000 description 1
- CVUDMNSZAIZFAE-UHFFFAOYSA-N Val-Arg-Pro Natural products NC(N)=NCCCC(NC(=O)C(N)C(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O CVUDMNSZAIZFAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GXAZTLJYINLMJL-LAEOZQHASA-N Val-Asn-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N GXAZTLJYINLMJL-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- LNYOXPDEIZJDEI-NHCYSSNCSA-N Val-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N LNYOXPDEIZJDEI-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- JLFKWDAZBRYCGX-ZKWXMUAHSA-N Val-Asn-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N JLFKWDAZBRYCGX-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N Val-Asp-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- ZSZFTYVFQLUWBF-QXEWZRGKSA-N Val-Asp-Met Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N ZSZFTYVFQLUWBF-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- XIFAHCUNWWKUDE-DCAQKATOSA-N Val-Cys-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N XIFAHCUNWWKUDE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- OUUBKKIJQIAPRI-LAEOZQHASA-N Val-Gln-Asn Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OUUBKKIJQIAPRI-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- BRPKEERLGYNCNC-NHCYSSNCSA-N Val-Glu-Arg Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N BRPKEERLGYNCNC-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- SZTTYWIUCGSURQ-AUTRQRHGSA-N Val-Glu-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SZTTYWIUCGSURQ-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- ZXAGTABZUOMUDO-GVXVVHGQSA-N Val-Glu-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N ZXAGTABZUOMUDO-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- LAYSXAOGWHKNED-XPUUQOCRSA-N Val-Gly-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LAYSXAOGWHKNED-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- ZIGZPYJXIWLQFC-QTKMDUPCSA-N Val-His-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O ZIGZPYJXIWLQFC-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 1
- VXDSPJJQUQDCKH-UKJIMTQDSA-N Val-Ile-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VXDSPJJQUQDCKH-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- OTJMMKPMLUNTQT-AVGNSLFASA-N Val-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N OTJMMKPMLUNTQT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- FEXILLGKGGTLRI-NHCYSSNCSA-N Val-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N FEXILLGKGGTLRI-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- BMOFUVHDBROBSE-DCAQKATOSA-N Val-Leu-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N BMOFUVHDBROBSE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- XTDDIVQWDXMRJL-IHRRRGAJSA-N Val-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N XTDDIVQWDXMRJL-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- DAVNYIUELQBTAP-XUXIUFHCSA-N Val-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N DAVNYIUELQBTAP-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- KTEZUXISLQTDDQ-NHCYSSNCSA-N Val-Lys-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N KTEZUXISLQTDDQ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- JAKHAONCJJZVHT-DCAQKATOSA-N Val-Lys-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N JAKHAONCJJZVHT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- IOETTZIEIBVWBZ-GUBZILKMSA-N Val-Met-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N IOETTZIEIBVWBZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UZFNHAXYMICTBU-DZKIICNBSA-N Val-Phe-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N UZFNHAXYMICTBU-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- HJSLDXZAZGFPDK-ULQDDVLXSA-N Val-Phe-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)[C@H](C(C)C)N HJSLDXZAZGFPDK-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- DOFAQXCYFQKSHT-SRVKXCTJSA-N Val-Pro-Pro Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DOFAQXCYFQKSHT-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DEGUERSKQBRZMZ-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DEGUERSKQBRZMZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- AJNUKMZFHXUBMK-GUBZILKMSA-N Val-Ser-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N AJNUKMZFHXUBMK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- JQTYTBPCSOAZHI-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N JQTYTBPCSOAZHI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VIKZGAUAKQZDOF-NRPADANISA-N Val-Ser-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O VIKZGAUAKQZDOF-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- QTPQHINADBYBNA-DCAQKATOSA-N Val-Ser-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN QTPQHINADBYBNA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N Val-Ser-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N Val-Ser-Pro Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N Val-Thr-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- PDDJTOSAVNRJRH-UNQGMJICSA-N Val-Thr-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O PDDJTOSAVNRJRH-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- OFTXTCGQJXTNQS-XGEHTFHBSA-N Val-Thr-Ser Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O OFTXTCGQJXTNQS-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- RFZFBOQPPFCOKG-BZSNNMDCSA-N Val-Trp-Met Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N RFZFBOQPPFCOKG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- KJFBXCFOPAKPTM-BZSNNMDCSA-N Val-Trp-Val Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 KJFBXCFOPAKPTM-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- DFQZDQPLWBSFEJ-LSJOCFKGSA-N Val-Val-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N DFQZDQPLWBSFEJ-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- LLJLBRRXKZTTRD-GUBZILKMSA-N Val-Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N LLJLBRRXKZTTRD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 1
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 1
- HPFVBGJFAYZEBE-XNBTXCQYSA-N [(8r,9s,10r,13s,14s)-10,13-dimethyl-3-oxo-1,2,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydrocyclopenta[a]phenanthren-17-yl] 3-cyclopentylpropanoate Chemical compound C([C@H]1[C@H]2[C@@H]([C@]3(CCC(=O)C=C3CC2)C)CC[C@@]11C)CC1OC(=O)CCC1CCCC1 HPFVBGJFAYZEBE-XNBTXCQYSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GELXFVQAWNTGPQ-UHFFFAOYSA-N [N].C1=CNC=N1 Chemical compound [N].C1=CNC=N1 GELXFVQAWNTGPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010011164 acein 1 Proteins 0.000 description 1
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000641 acridinyl group Chemical group C1(=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3C=C12)* 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001266 acyl halides Chemical class 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-L adipate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC([O-])=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010011559 alanylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010034445 albutensin A Proteins 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001345 alkine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000008055 alkyl aryl sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 125000004647 alkyl sulfenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004644 alkyl sulfinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940045714 alkyl sulfonate alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 150000008052 alkyl sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 125000004390 alkyl sulfonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 108010050122 alpha 1-Antitrypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000015395 alpha 1-Antitrypsin Human genes 0.000 description 1
- 229940024142 alpha 1-antitrypsin Drugs 0.000 description 1
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003805 amantadine Drugs 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000006620 amino-(C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004397 aminosulfonyl group Chemical group NS(=O)(=O)* 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 229940111121 antirheumatic drug quinolines Drugs 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010057412 arginyl-glycyl-aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010091092 arginyl-glycyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108010036999 aspartyl-alanyl-histidyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010037716 aspartyl-phenylalanyl-leucyl-alanyl-glutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N aspergillomarasmine B Natural products OC(=O)CNC(C(O)=O)CNC(C(O)=O)CC(O)=O FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- RFRXIWQYSOIBDI-UHFFFAOYSA-N benzarone Chemical group CCC=1OC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC=C(O)C=C1 RFRXIWQYSOIBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002047 benzodioxolyl group Chemical group O1OC(C2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000000499 benzofuranyl group Chemical group O1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- XSCHRSMBECNVNS-UHFFFAOYSA-N benzopyrazine Natural products N1=CC=NC2=CC=CC=C21 XSCHRSMBECNVNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001164 benzothiazolyl group Chemical group S1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000004196 benzothienyl group Chemical group S1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- QRUDEWIWKLJBPS-UHFFFAOYSA-N benzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N[N][N]C2=C1 QRUDEWIWKLJBPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012964 benzotriazole Substances 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-N beta-phenylpropanoic acid Natural products OC(=O)CCC1=CC=CC=C1 XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 229940112869 bone morphogenetic protein Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011132 calcium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000001314 canonical amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000018486 cell cycle phase Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 1
- 230000009134 cell regulation Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N chloro formate Chemical compound ClOC=O FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003016 chromanyl group Chemical group O1C(CCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 125000004617 chromonyl group Chemical group O1C(=CC(C2=CC=CC=C12)=O)* 0.000 description 1
- WCZVZNOTHYJIEI-UHFFFAOYSA-N cinnoline Chemical compound N1=NC=CC2=CC=CC=C21 WCZVZNOTHYJIEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006395 clathrin-mediated endocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- UUEKSRXZPGZUMC-UHFFFAOYSA-N cyclopenta-1,3-diene prop-1-ene Chemical group C1=CC=CC1.C=CC UUEKSRXZPGZUMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001944 cysteine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000021040 cytoplasmic transport Effects 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000664 diazo group Chemical group [N-]=[N+]=[*] 0.000 description 1
- 150000001993 dienes Chemical class 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 229940009662 edetate Drugs 0.000 description 1
- 230000000547 effect on apoptosis Effects 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 230000001700 effect on tissue Effects 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 229940037395 electrolytes Drugs 0.000 description 1
- 230000004651 endocytosis pathway Effects 0.000 description 1
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- HPWMACWMMZPMSS-UHFFFAOYSA-N ethane;sulfuric acid Chemical compound CC.OS(O)(=O)=O HPWMACWMMZPMSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 108010091735 fibrinogen peptide 6A Proteins 0.000 description 1
- 102000034240 fibrous proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005899 fibrous proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 150000002244 furazanes Chemical class 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010042598 glutamyl-aspartyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010057083 glutamyl-aspartyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 108010040856 glutamyl-cysteinyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010019832 glycyl-asparaginyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010050475 glycyl-leucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010079413 glycyl-prolyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010074027 glycyl-seryl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010048994 glycyl-tyrosyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000004438 haloalkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-N heptanoic acid Chemical compound CCCCCCC(O)=O MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-UHFFFAOYSA-N hexane-1,2,3,4,5,6-hexol Chemical compound OCC(O)C(O)C(O)C(O)CO FBPFZTCFMRRESA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 1
- 230000006197 histone deacetylation Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 229940048921 humira Drugs 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- AJKLKFPOECCSOO-UHFFFAOYSA-N hydrochloride;hydroiodide Chemical compound Cl.I AJKLKFPOECCSOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000004679 hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 125000003453 indazolyl group Chemical group N1N=C(C2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 150000002473 indoazoles Chemical class 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 102000002467 interleukin receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010093036 interleukin receptors Proteins 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010212 intracellular staining Methods 0.000 description 1
- 230000010189 intracellular transport Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N isethionic acid Chemical compound OCCS(O)(=O)=O SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- ZLTPDFXIESTBQG-UHFFFAOYSA-N isothiazole Chemical compound C=1C=NSC=1 ZLTPDFXIESTBQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 description 1
- CTAPFRYPJLPFDF-UHFFFAOYSA-N isoxazole Chemical compound C=1C=NOC=1 CTAPFRYPJLPFDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 229940099584 lactobionate Drugs 0.000 description 1
- JYTUSYBCFIZPBE-AMTLMPIISA-N lactobionic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JYTUSYBCFIZPBE-AMTLMPIISA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010000761 leucylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 1
- 108010012058 leucyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010056787 lysyl-arginyl-glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010012988 lysyl-glutamyl-aspartyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 108010063431 methionyl-aspartyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010022588 methionyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010056582 methionylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010068488 methionylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-M naphthalene-2-sulfonate Chemical compound C1=CC=CC2=CC(S(=O)(=O)[O-])=CC=C21 KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000004593 naphthyridinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CN=C12)* 0.000 description 1
- 230000033595 negative regulation of clathrin-mediated endocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical group 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000009206 nuclear medicine Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 1
- 102000027450 oncoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008819 oncoproteins Proteins 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000004095 oxindolyl group Chemical group N1(C(CC2=CC=CC=C12)=O)* 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 229960004390 palbociclib Drugs 0.000 description 1
- 201000002094 pancreatic adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000008129 pancreatic ductal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- NRNCYVBFPDDJNE-UHFFFAOYSA-N pemoline Chemical compound O1C(N)=NC(=O)C1C1=CC=CC=C1 NRNCYVBFPDDJNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000761 pemoline Drugs 0.000 description 1
- JRKICGRDRMAZLK-UHFFFAOYSA-L peroxydisulfate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O JRKICGRDRMAZLK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000001484 phenothiazinyl group Chemical group C1(=CC=CC=2SC3=CC=CC=C3NC12)* 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010082795 phenylalanyl-arginyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 1
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 125000005328 phosphinyl group Chemical group [PH2](=O)* 0.000 description 1
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M phosphonate Chemical compound [O-]P(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000005499 phosphonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229910000073 phosphorus hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- LFSXCDWNBUNEEM-UHFFFAOYSA-N phthalazine Chemical compound C1=NN=CC2=CC=CC=C21 LFSXCDWNBUNEEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004592 phthalazinyl group Chemical group C1(=NN=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 229940075930 picrate Drugs 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-M picrate anion Chemical compound [O-]C1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229950010765 pivalate Drugs 0.000 description 1
- IUGYQRQAERSCNH-UHFFFAOYSA-N pivalic acid Chemical compound CC(C)(C)C(O)=O IUGYQRQAERSCNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920000333 poly(propyleneimine) Polymers 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000029279 positive regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 108010079317 prolyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010015796 prolylisoleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 1
- AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N prometryn Chemical compound CSC1=NC(NC(C)C)=NC(NC(C)C)=N1 AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 239000012562 protein A resin Substances 0.000 description 1
- 238000012514 protein characterization Methods 0.000 description 1
- 230000003947 protein internalization Effects 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- CPNGPNLZQNNVQM-UHFFFAOYSA-N pteridine Chemical compound N1=CN=CC2=NC=CN=C21 CPNGPNLZQNNVQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001042 pteridinyl group Chemical group N1=C(N=CC2=NC=CN=C12)* 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003216 pyrazines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003217 pyrazoles Chemical class 0.000 description 1
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000004892 pyridazines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002098 pyridazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CCOXWRVWKFVFDG-UHFFFAOYSA-N pyrimidine-2-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=NC=CC=N1 CCOXWRVWKFVFDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N quinazoline Chemical compound N1=CN=CC2=CC=CC=C21 JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011946 reduction process Methods 0.000 description 1
- 238000006894 reductive elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 102200006531 rs121913529 Human genes 0.000 description 1
- 102200006539 rs121913529 Human genes 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 1
- 108010069117 seryl-lysyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000005346 substituted cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N sulfanyl Chemical compound [SH] PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000475 sulfinyl group Chemical group [*:2]S([*:1])=O 0.000 description 1
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 1
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 1
- 125000001273 sulfonato group Chemical group [O-]S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N sulfuryl dichloride Chemical compound ClS(Cl)(=O)=O YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000012976 tarts Nutrition 0.000 description 1
- 150000003536 tetrazoles Chemical class 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005296 thioaryloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003567 thiocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 229930192474 thiophene Natural products 0.000 description 1
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005147 toluenesulfonyl group Chemical group C=1(C(=CC=CC1)S(=O)(=O)*)C 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 150000003852 triazoles Chemical class 0.000 description 1
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010058119 tryptophyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017949 tyrosyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010012567 tyrosyl-glycyl-glycyl-phenylalanyl Proteins 0.000 description 1
- 108010037335 tyrosyl-prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000034512 ubiquitination Effects 0.000 description 1
- 238000010798 ubiquitination Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 229930195735 unsaturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical class CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 108010000998 wheylin-2 peptide Proteins 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/595—Polyamides, e.g. nylon
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/643—Albumins, e.g. HSA, BSA, ovalbumin or a Keyhole Limpet Hemocyanin [KHL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/76—Albumins
- C07K14/765—Serum albumin, e.g. HSA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
폴리에틸렌이민을 포함하는 단백질 담체, 세포내 표적과 상호작용하는 페이로드 및 링커를 포함하는 단백질 접합체가 제공된다. 단백질 접합체를 포함하는 약학적 조성물뿐만 아니라 단백질 접합체의 사용 방법 및 생산 방법이 또한 제공된다.
Description
관련 출원의 교차 참조
본 출원은, 2021년 4월 20일자로 출원된 미국 임시 특허 출원 제63/177,144호의 우선권을 주장하며, 그 전체 내용이 모두 본원에 참조로 포함된다.
기술분야
본 발명은 단백질의 세포내 전달 분야이다.
특히 종양학 분야에서 새롭고 강력한 치료 표적을 탐색할 때, 세포내 표적, 특히 "약물치료 불가능한(undruggable)" 것으로 간주되는 표적을 표적화하는 것은 매우 어렵다. 이러한 표적은 소분자 약물에 의해서 표적화될 수 없는데, 그 이유는 주로 필요한 치료 개입이 단백질-단백질 상호작용을 방해하는 것을 포함하기 때문이고, 여기서 소분자 약물은 효능 및/또는 충분한 선택성을 나타낼 수 없다. 이러한 표적 및 생물학적 과정은 생물학적 작용제, 예를 들어, 모노클로날 항체, 수용체, 인터루킨 및 이들의 유도체 및 조합에 의해 고전적이고 효율적으로 다루어지지만, 이러한 작용제는 살아있는 세포, 특히 세포질, 핵, ER 등과 같이 임상적으로 관련된 세포 구획에 쉽게 들어갈 수 없다. 이는 외부 세포막이 단백질 기반 분자에 대해 불침투성이기 때문이다.
단백질 기반 분자가 자연적 세포내이입 기반 메커니즘에 의해 살아있는 세포에 내재화되는 경우, 이 단백질 기반 분자는 엔도솜 경로로 들어가는데, 이것은 리소솜 분해로 이어진다. 따라서, 이 경로는 자연적으로 리소솜 장애의 치료나 항체-약물 접합체(ADC)에만 관련된다. 전자의 경우, 치료적 단백질 기반 작용제는 엔도솜 또는 리소솜에서 활성을 발휘하는 것을 목표로 하며 일반적으로 엔도솜/리소솜의 조건을 견디도록 설계되거나 자연적으로 적합하다. 후자의 경우, 항체는 소분자 약물을 특정 세포에 표적화/전달하기 위해 순전히 사용되며, 항체 담체의 리소솜 분해는 소분자 약물, 일반적으로 세포 독소를 방출한다.
그러나, 단백질 자체가 단지 표적화 모이어티가 아니라 치료적이라면, 본 발명의 기술은 "엔도솜 탈출"로 알려진 것을 추가로 가능하게 해야 한다. 이러한 중요한 단계는 이러한 세포 기구에 의한 치료제의 이화작용을 피하기 위해서, 엔도솜 경로의 여러 단계의 소포, 즉 초기 또는 후기 엔도솜 및 리소솜의 소포로부터 치료적 생물학적 제제를 유리한다.
엔도솜으로부터의 성공적인 탈출 후, 치료제는 세포의 세포질로 방출된다. 그러나, 세포질은 혼잡한 환경이며 현재 사용되는 대부분의 생물학적 치료제, 예를 들어, 모노클로날 항체 및 이의 유도체에 적합하지 않다. 치료적 생물학적 제제는 이의 치료 표적에 위치하여 이와 결속하거나, 대안적으로 표적 세포내 소기관, 예컨대, 핵, 소포체(ER), 미토콘드리아 등에 도달하기 위해서 세포질에 효율적으로 분산되어야 한다.
단백질-단백질 상호작용을 차단하기 위해 설계되고 임상적으로 사용되거나 효능제로 사용될 수 있는 가장 강력한 생물학적 작용제는 항체, 주로 모노클로날 항체 또는 이의 유도체, 예컨대, Fab, scFv 및 이들의 조합을 기반으로 한다. 이러한 모든 작용제는 구조적으로 또는 기능적으로 쇄내 또는 쇄간 이황화 결합에 의존한다. 이러한 이황화 결합은 세포질의 환원 환경에서 불안정하다. 이러한 환원 환경은 고농도의 환원제(이들 중 가장 두드러진 것은 글루타티온임)의 결과로 이러한 치료제의 이황화 가교의 환원을 유발하여 이의 구조를 잃고, 따라서 이의 표적과 결합하는 능력을 잃게 만든다. 따라서 효율적인 세포내 전달 기술은 세포질 안정적인 작용제를 활용하거나 이러한 환원 환경으로부터 전달된 작용제를 보호하는 몇 가지 방법을 제공해야 한다.
이 외에도, 세포내 전달 기술은 생체 전체의 다양한 기관 및 조직에 치료적 페이로드를 효율적으로 전달할 수 있도록 적절한 약동학적 및 약력학적 거동을 가져야 한다.
고전적이고 가장 많이 연구된 세포내 전달 기술 중 하나는 페이로드의 향상된 양전하의 사용을 포함한다. 가장 고전적인 접근법은 바이러스에 의해서 사용되는 세포내 흡수 메커니즘에 대한 이해로부터 발전하였다. 후자는 유명한 HIV-유래 TAT 펩티드(RKKRRQRRR(서열번호 16))와 같은 아르기닌 및 리신이 풍부한 양으로 하전된 펩티드를 사용한다. 이러한 접근법은 다양한 페이로드에 융합되거나 화학적으로 접합되거나 다양한 나노입자를 장식하는 데 사용되는 상이한 전하, 아미노산 서열, 추가 변형 및 구조(선형, 고리형 등)를 갖는 수많은 세포-침투성 펩티드(CPP)를 생성하였다. CPP는 세포내로 내재화되는 능력을 나타내지만, 이의 엔도솜 탈출 효율은 여전히 논란의 여지가 있으며, 실제 의약품 응용에 사용하기에는 전반적인 효율성이 불충분한 것으로 여겨진다.
표준 CPP를 넘어 세포의 세포질에 단백질 기반 치료제를 전달하고 생체분포 및 약력학을 개선하는 보다 효율적인 방법이 상당히 필요하다.
본 발명은 폴리에틸렌이민을 포함하는 단백질 담체, 세포내 표적과 상호작용하는 페이로드 및 이들을 연결하는 링커를 포함하는 단백질 접합체를 제공한다. 단백질 접합체를 포함하는 약학적 조성물뿐만 아니라 단백질 접합체의 사용 방법 및 생산 방법이 또한 제공된다.
제1 양태에 따르면,
a.
복수의 폴리에틸렌이민(PEI) 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체;
b.
세포내 표적과 상호작용하는 페이로드; 및
c.
공유 결합을 통해서 단백질 담체 및 페이로드에 결합된 링커를 포함하는 단백질 접합체가 제공되며;
여기서 페이로드는, 절단되는 경우 세포내 표적과의 상호작용을 감소시키는 이황화 결합이 없고, 단백질 접합체는 융합 단백질이 아니다.
또 다른 양태에 따르면,
a.
복수의 폴리에틸렌이민(PEI) 모이어티에 공유 결합되고 적어도 8 mV의 양의(positive) 제타 전위를 특징으로 하는 HSA;
b.
단일 도메인 항체; 및
c.
공유 결합을 통해서 HSA 및 단일 도메인 항체에 결합된 링커를 포함하는 단백질 접합체가 제공되며;
여기서 단백질 접합체는 융합 단백질이 아니다.
또 다른 양태에 따르면, 세포내 표적에 결합할 수 있는 단백질 접합체의 생산 방법이 제공되며, 이 방법은,
a.
세포내 표적에 결합하고, 절단되는 경우 세포내 표적에 대한 결합을 감소시키는 이황화 결합이 없는 페이로드를 제공하는 것;
b.
복수의 PEI 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체를 제공하는 것;
c.
선택된 페이로드를 링커를 통해서 선택된 단백질 담체에 공유 연결시켜 단백질 접합체를 생산하는 것;
d.
인간 혈액, 혈장 또는 혈청에서 링커의 안정성을 결정하는 것; 및
e.
인간 혈액, 혈장 또는 혈청에서 안정적인 링커를 포함하는 단백질 접합체를 선택하는 것을 포함하며;
이에 의해서 세포내 표적에 결합할 수 있는 단백질 접합체를 생산한다.
또 다른 양태에 따르면, 본 발명의 방법에 의해 생산된 단백질 접합체가 제공된다.
또 다른 양태에 따르면, 본 발명의 단백질 접합체 및 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 보조제를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.
또 다른 양태에 따르면, 세포내 표적에 결합하는 방법이 제공되며, 이 방법은 세포내 표적을 발현하는 세포를 본 발명의 단백질 접합체 또는 본 발명의 약학적 조성물과 접촉시키는 것을 포함하며, 여기서 생물학적 페이로드는 세포내 표적에 결합하며, 이에 의해서 세포내 표적에 결합한다.
또 다른 양태에 따르면, 세포내 표적에 결합하는 방법이 제공되며, 이 방법은,
a.
본 발명의 방법에 의해서 세포내 표적에 결합할 수 있는 단백질 접합체를 생산하는 것; 및
b.
세포내 표적을 발현하는 세포를 생산된 단백질 접합체와 접촉시키는 것을 포함하며;
이에 의해서 세포내 표적에 결합한다.
일부 실시형태에 따르면, PEI는 2000 달톤 미만의 분자량을 갖는 선형 PEI 또는 분지형 PEI이다.
일부 실시형태에 따르면, 복수의 PEI 모이어티는 3 내지 90개의 분자를 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 페이로드는 세포내 표적에 결합하는 항원 결합 분자이다.
일부 실시형태에 따르면, 항원 결합 분자는 단일 쇄 항체, 단일 도메인 항체, 가변 중 동종이량체(VHH: variable heavy homodimer), 나노바디, 면역글로불린 신규 항원 수용체(IgNAR), 설계된 안키린 반복 단백질(DARPin) 및 항체 모방 단백질로부터 선택된다.
일부 실시형태에 따르면, 항원 결합 분자는 VHH 및 DARPin으로부터 선택된다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 담체는 혈장 내인성 단백질이다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 담체는 적어도 60 KDa 크기이다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 담체는 인간 혈청 알부민(HSA), 피브리노겐, IgG, 녹색 형광 단백질(GFP) 및 설계된 안키린 반복 단백질(DARPin)로부터 선택된다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 담체는 HSA이다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 담체는 HSA이고, 상기 단백질 담체는 3 내지 10개의 PEI 분자를 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 링커는 생체적합성 중합체를 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 생체적합성 중합체는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 링커는 생물학적-절단 가능한 결합(bio-cleavable bond)을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 생물학적-절단 가능한 결합은 이황화 결합을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 링커는 혈액에서 적어도 24시간 동안 실질적으로 안정적이다.
일부 실시형태에 따르면, 안정적이라는 것은 24시간 후에 혈액에서 25% 미만의 절단을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 생물학적 절단 가능한 결합은 입체 장애형이다.
일부 실시형태에 따르면, HSA는 시스테인 34(C34)를 포함하는 서열번호 1의 아미노산 서열 또는 이의 단편 또는 동족체를 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 링커는 이황화 결합을 통해서 HSA에 결합된다.
일부 실시형태에 따르면, 링커는 HSA의 C34에 결합된다.
일부 실시형태에 따르면, 이황화 결합은 C34에 근접하다.
일부 실시형태에 따르면, 근접한은 C34로부터 5 내지 15 옹스트롬 범위의 거리이다.
일부 실시형태에 따르면, 링커는 펩티드 링커이다.
일부 실시형태에 따르면, 링커는 서열번호 4 내지 15로부터 선택된다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 담체는 DNA가 없다.
일부 실시형태에 따르면, 생물학적 페이로드는 세포 표면 단백질에 결합하지 않는다.
일부 실시형태에 따르면, 복수의 PEI 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체는 적어도 8 mV의 양의 제타 전위를 특징으로 한다.
일부 실시형태에 따르면, HSA는 3 내지 10개의 PEI 분자를 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 접합체는 검출 가능한 태그를 추가로 포함하고, 선택적으로 여기서 태그는 생물학적 페이로드에 접합된다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 접합체는 혈액-안정적인 접합체이다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 접합체는 세포-침투성 접합체이다.
일부 실시형태에 따르면, 결정은 단백질 접합체의 형성 이전에 또는 상기 단백질 접합체의 형성 이후에 수행된다.
일부 실시형태에 따르면, 방법은 세포내 표적에 대한 생물학적 페이로드의 결합을 확인하는 것을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 복수의 PEI 모이어티에 결합된 단백질 담체는 적어도 8 mV의 양의 제타 전위를 특징으로 한다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 담체는 HSA를 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 단백질 담체는 적어도 3개의 PEI 분자에 결합된다.
일부 실시형태에 따르면, 방법은 선택된 단백질 접합체를 세포에 접촉시키는 것, 및 생물학적 페이로드가 세포의 세포질에 유입되는 것을 확인하는 것을 추가로 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 안정적이라는 것은 24시간 후에 혈액에서 25% 미만의 절단을 포함하고, 불안정적이라는 것은 24시간 후에 세포질 조건에서 적어도 50%의 절단을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 링커는 생체적합성 중합체를 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 공유 연결은 클릭 반응을 통해서 일어난다.
일부 실시형태에 따르면, 페이로드는 제1 반응성 기를 포함하는 링커에 공유 결합되고; 단백질 담체는 상기 제1 반응성 기에 대해 반응성을 갖는 제2 반응성 기를 포함하는 링커에 공유 결합된다.
일부 실시형태에 따르면, 공유 연결은 제1 반응성 기와 제2 반응성 기의 반응을 통해서 일어나며, 이에 의해서 페이로드와 단백질 담체를 공유 연결한다.
일부 실시형태에 따르면, 링커는 생물학적-절단 가능한 결합을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 공유 연결은 이황화 결합 형성을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, (i) 페이로드는 단백질 담체의 시스테인과 이황화 결합을 생성할 수 있는 링커에 공유 결합되거나; (ii) 단백질 담체는 페이로드의 시스테인과 이황화 결합을 생성할 수 있는 링커와 공유 결합되고, 결합은 선택적으로 이황화 결합을 통해서 일어난다.
일부 실시형태에 따르면, 방법은 세포질 조건에서 링커의 안정성을 결정하는 것, 및 세포질 조건에서 불안정적인 링커를 포함하는 단백질 접합체를 선택하는 것을 추가로 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 약학적 조성물은 전신 투여용으로 제형화된다.
일부 실시형태에 따르면, 방법은 세포내 표적을 검출하는 방법이며, 단백질 접합체는 검출 가능한 태그를 포함하고, 방법은 검출 가능한 태그를 검출하는 것을 추가로 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 방법은 세포내 표적을 조절하는 방법이고, 페이로드는 세포내 표적의 효능제 또는 길항제이다.
일부 실시형태에 따르면, 세포는 대상체에 존재하고, 여기서 접촉은 단백질 접합체를 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 방법은 병태의 치료를 필요로 하는 대상체에서 병태를 치료하는 방법이며, 병태는 세포내 표적의 조절에 의해서 치료될 수 있다.
일부 실시형태에 따르면, 병태는 암이고, 세포내 표적은 발암성이고, 생물학적 페이로드는 길항제이다.
일부 실시형태에 따르면, 접촉시키는 것은, 단백질 접합체가 세포로 침투하는 것을 유도하도록 설계된 담체 단백질 이외의 작용제의 존재 하에서 일어나지 않는다.
추가의 실시형태 및 본 발명의 적용가능성의 전체 범위는 이하에 주어진 상세한 설명으로부터 명백해질 것이다. 그러나, 상세한 설명 및 구체적인 실시예는, 본 발명의 바람직한 실시형태를 나타내면서, 단지 예시로서 주어지는 것으로 이해되어야 하는데, 이는, 본 발명의 사상 및 범주 내의 다양한 변화 및 변형이 이러한 상세한 설명으로부터 당업자에게 명백해질 것이기 때문이다.
도 1: 다양한 변형 수준에서 비변형 마우스 IgG 및 PEI-변형된 마우스 IgG의 MALDI-ToF 스펙트럼.
도 2: PEI-변형된 마우스 IgG 또는 비변형 마우스 IgG의 A375 세포(청색 - 핵, 녹색 - 염색된 마우스 IgG) 내로의 내재화에 대한 현미경 사진. 천연 IgG는 변형되지 않으며, 다른 모든 패널은 PEI를 갖는 증가하는 수준의 변형을 나타낸다. 각각의 패널 모서리의 숫자는 IgG 분자당 PEI 분자의 평균 수를 나타낸다.
도 3a 및 도 3b: (3a) HEK 세포(60 μg/mL) 및 (3b) A375 세포(5 μg/mL) 내로의 PEI-변형된 GFP(GFP 분자당 평균 6.5 PEI)의 내재화의 현미경 사진.
도 4a 및 도 4b: PEI-양이온화된 담체 단백질이 치료제(이 예에서는 항체)에 화학적으로 연결되는 담체 및 페이로드 방법론의 도식적 표현, 여기서 링커는 이상적으로는 이의 CDR에서 떨어져 있는 Fc 영역에 접합된다. 링커는 (4a) 세포질에서 환원 및 절단되어 자유로운 세포질 수송을 가능하게 하는 양이온화된 담체로부터 치료적 페이로드를 방출할 수 있는 이황화 결합을 포함할 수 있거나 (4b) 절단 가능한 모이어티가 결여될 수 있다.
도 5a 내지 도 5m: (5a, 5c) (5a) 1 μM 또는 (5c) 3 μM의 다양한 작용제로 처리된 A375 세포에서 적색 아넥신 V 형광에 의해서 측정된 바와 같은 아폽토시스의 선 그래프. (5b, 5d) (5b) 5a 및 (5d) 5c에서 세포 역가당 적색 형광의 막대 그래프 정량화 및 정규화. (5e 내지 5l) (5e) 1C5-Hel20-LC; (5f) 1C5-Hel20-LC-S-S-HSA-PEI×3.5; (5g) 1C5-Hel20-LC-HSA-PEI×3.5; (5h) 1C5-Hel20-LC-S-S-PEG12-CO-NH-PEI600, (5i) 1C5-Hel20-LC-PEG8-CO-NH-PEI600, (5j) 1C5-Hel20-LC-S-S-PEG12-CO-NH-PEI1800; (5k) 1C5-Hel20-LC-PEG8-CO-NH-PEI1800; (5l) 1C5-Hel20-LC-r-CO-NH-PEI1800과의 2시간 인큐베이션 후 항-VHH 항체로 염색된 A375의 공초점 현미경 영상. 항-VHH 항체 - 적색; 핵 염색 - 청색. (5m) 다양한 작용제로 처리된 A375 세포에서 시간 경과에 따른 카스파제 3/7 양성 세포 아폽토시스 사건의 선 그래프.
도 6: 배지에서 IgG 수준의 특정 ELISA에 의해 측정된 바와 같은, 다양한 변형 수준에서 PEI-변형된 IgG(초기 배지 농도 2 μg/mL)의 세포 흡수 효율의 막대 차트.
도 7: PEI-변형된 IgG(4.5 PEI)의 카베올린-매개 세포내이입 내재화의 특이적 저해를 나타낸 히스토그램. NC - 변형되지 않은 IgG.
도 8: 5 μg/mL의 PEI-변형된 IgG(3×PEI, 좌측 패널; 4.5×PEI, 중간 패널 및 7×PEI, 우측 패널)와 함께 인큐베이션(5시간)시킨 후 HEK293 세포에서 발현된 엔도솜 마커(상부 패널) 또는 리소솜 마커(하부 패널)의 염색 현미경사진. 엔도솜 및 리소솜 마커는 녹색으로 나타나고, PEI-변형된 IgG는 적색으로 나타나고, 핵은 청색으로 염색된다.
도 9: 10 μg/mL의 PEI-변형된 IgG와 2×104개의 HeLa 세포의 밤새 인큐베이션 후 pH 감응성 염료(5(6)-카르복시나프토플루오레세인, 적색)로 표지된 PEI-변형된 IgG(4.5×PEI)의 실시간 영상 공초점 현미경을 사용한 엔도솜 탈출 모니터링의 현미경사진. 녹색 - 튜불린 염색, 청색 - 핵 염색.
도 10: 항-CD247 PEI-변형된 mAb(4.5×PEI)의 내재화 후 IFNγ 분비의 용량 의존적 증가에 의해 반영된 CD3 세포 활성화의 막대 차트. 평가된 농도 범위에서 내재화된 PEI-변형된 마우스 IgG에 대해 IFNγ 수준의 변화는 관찰되지 않았다.
도 11: PEI-변형된 HSA(7×PEI)에 대한 PEG-기반 이황화물 함유 링커에 의해 접합된 GFP와 A375 세포의 인큐베이션 후 GFP의 세포내 프로파일을 나타낸 현미경사진. 공초점 현미경(녹색 - GFP, 청색 - 핵)에 의해서 관찰된 바와 같이 세포는 인큐베이션 후 24시간(좌측) 및 48시간(우측)에 분산된 GFP 프로파일을 나타낸다.
도 12: 형광 표지된(AlexaFluor 647) 항-인간 IgG 항체를 사용한 공초점 현미경에 의해서 검출된 바와 같은, A375 세포와 밤새 인큐베이션시킨 후 이황화-결합 함유 PEG 링커를 통해서 PEI-변형된 HSA(11×PEI)에 접합된 항-TNFα 항체의 현미경사진.
도 13a 내지 도 13d: 본 발명의 예시적인 단백질 접합체의 도식적 표현. 도 13a는 PEG 링커를 통해 2개의 VHH 분자에 결합된 PEI 변형된 담체를 나타낸다. 도 13b 내지 도 13d는 예시적인 단백질 접합체를 개략적으로 나타내며, 여기서 PEG-기반 링커는 S-S 결합을 통해 담체에 공유 결합된다. PEG-기반 링커는 (13b) 이황화 결합(C1)을 통해, (13c) 말레이미드와 시스테인의 접합 생성물(C2)을 통해 또는 (13d) 디벤질 사이클로옥틴(DBCO)과 아지드의 클릭 반응(C3)에 의해 VHH 분자의 시스테인에 추가로 접합된다.
도 14: A375 세포의 존재 또는 이의 부재 하에서 HSA당 평균 3.5 또는 8개의 PEI 분자를 갖는 PEI 변형된 HSA에 접합된 항-비멘틴 VHH의 배지 수준에 대한 막대그래프.
도 15a 내지 도 15c: PEI-변형된 HSA에 가역적으로 접합된 항-비멘틴 VHH와 24시간 인큐베이션 후 (15a) VHH 및 (15b) 비멘틴에 대해 염색된 A375 세포의 공초점 현미경 영상의 현미경 사진 및 (15c) 둘 다의 병합. 핵은 청색으로 염색되어 있다.
도 16a 및 도 16b: (16a) PEI-변형된 HSA에 가역적으로 접합된 항-비멘틴 VHH 또는 (16b) 비접합된 항-비멘틴과 24시간 인큐베이션 후 VHH(녹색)에 대해 염색된 A375 세포의 공초점 현미경 영상의 현미경 사진. 핵은 청색으로 염색되어 있다.
도 17: 티미딘 세포 주기 동기화 후 S, G2 및 M 세포 주기 단계에서 HPV-양성 HeLa FUCCI 세포의 백분율을 나타낸 선 그래프. 세포를 평균 3.5개의 PEI로 변형된 HSA에 접합된 항-E7 VHH 및 다양한 대조군 처리로 처리하였다. 대조군은 치료 없음(wo), 비변형 VHH 항-E7, 비변형 HSA에 접합된 항-E7 VHH, 관련 없는(irrelevant) VHH에 접합된 변형된 HSA(항-비멘틴), 변형된 HSA 담체 단독 및 세포 주기 저해제(DP, CDK4/6 저해제)였다.
도 18: HPV-양성 HeLa FUCCI 세포에 대한 상이한 처리 효과의 현미경 사진. 평균 3.5개의 PEI로 변형된 HSA에 접합된 관련 없는 VHH(항-비멘틴)로 처리된 세포는 미처리 세포(좌측 영상)와 동일한 프로파일을 나타낸 반면, 동일한 HSA 담체에 접합된 항-E7 VHH는 CDK4/6 저해제의 처리 후에 관찰된 것(우측 영상)과 유사하게, 극적인 세포 사멸을 초래하였다.
도 19: 폐 선암종 세포 내로 내재화된 PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-K-RAS His-태그 DARPin K27 단백질의 대표적인 현미경 사진. DARPin은 항-His 태그 항체로 염색한 후 K-RAS 부위(세포막 내부)에 국재화한다.
도 20: 아폽토시스의 선 그래프. PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-KRAS DARPin K27을 SU8686 세포에 내재화하고 연속 Incucyte 시스템을 사용하는 아넥신 V를 사용하여 아폽토시스 상태를 평가하였다. 8개의 PEI 분자로 변형된 담체(담체-I)에 접합된 DARPin에 노출된 세포는 높은 수준의 아폽토시스를 나타낸 반면, 3.5개의 PEI 분자를 갖는 담체(담체 II)에 접합된 DARPin에 노출된 세포는 또한 명확한 아폽토시스를 나타내지만 더 낮은 정도이다. 미처리 세포, 비변형 DARPin에 노출된 세포 및 8개의 PEI를 갖는 HSA 담체에 노출된 세포는 모두 기준선 아폽토시스를 나타낸다.
도 21a 및 도 21b: 핵에서 GFP를 구성적으로 발현하는 HeLa 세포의 (21a) 증식 및 (21b) 아폽토시스에 대한 PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-KRAS DARPin K27의 효과를 나타낸 선 그래프. 양성 대조군으로서 pan-RAS 저해제를 사용하였고, 음성 대조군으로서 처리제를 사용하지 않았다. 세포를 또한 비변형 DARPin K27, PEI-변형된 HSA 담체 단독, 비변형 HSA 담체에 접합된 DARPin K27 및 PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-비멘틴 VHH(관련 없는 VHH)로 처리하였다.
도 22: 핵에서 GFP를 구성적으로 발현하는 HeLa 세포의 아폽토시스에 대한 PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-KRAS DARPin K27의 효과를 나타낸 현미경 사진.
도 23: 반응에서 일정한 몰 과량의 PEI를 사용하고 카르보디이미드 커플링제인 EDC의 수준을 조정함으로써 변형 수준을 제어하는 다양한 수준의 PEI(600 Da)로 변형된 HSA의 질량 분석법(MALDI-ToF) 스펙트럼. HSA에 대한 PEI 분자의 평균 수준은 검정색으로 제공된다.
도 24: 다양한 수준의 PEI 변형을 갖는 HSA 담체에 접합된 VHH의 인큐베이션 48시간 후 A375 세포 내부의 항-비멘틴 VHH의 공초점 현미경 영상. HSA 담체에 대한 PEI 분자의 평균 수를 각각의 박스에 표시한다. 세포내 VHH는 항-VHH 항체를 사용하여 시각화된다.
도 25a 내지 도 25d: (25a 및 25b) (25a) PEI 변형된 담체를 함유하는 작용제 및 (25b) 담체 없이 PEI 변형된 VHH를 함유하는 작용제에 대한 시간 경과에 따른 작용제 농도의 선 그래프. (25c) 담체 혈장 노출의 막대 그래프. (25d) 소변에서 담체 수준의 박스 플롯.
도 26: 10 mg/Kg(VHH 중량 기준)의 유리 VHH, 및 두 가지 수준(3.5개 및 8개의 분자)에서 PEI 변형이 있거나 변형이 없는 담체에 접합된 VHH를 주사한 후 5분 후 마우스 혈장 내 VHH(진한 회색 및 박스) 및 VHH-담체(밝은 회색) 수준의 막대 그래프.
도 27: HSA-특이적 ELISA에 의해 측정된 주사 후 24시간에서의 HSA 혈장 수준의 막대 그래프.
도 28: 주사 24시간 후, 10 mg/Kg의 비변형 VHH, 또는 PEI가 없는, 3.5개 분자의 PEI 및 8개 분자의 PEI를 갖는 담체에 접합된 VHH로 처리된 마우스의 간의 VHH 수준의 막대 그래프. VHH 수준을 ELISA로 정량화하였다.
도 29: 비변형 VHH(VHH), 비변형 HSA에 접합된 VHH(VHH-담체), PEI(×3.5)-변형된 HSA에 접합된 VHH(VHH-담체 3PEI) 및 PEI (×8)-변형된 HSA에 접합된 VHH(VHH-담체 8PEI)의 면역형광 분석의 현미경 사진. 토끼 항-VHH 항체에 이어서 형광 항-토끼 항체를 사용하여 염색을 수행하였다.
도 30: ELISA에 의해 측정된, 마우스의 혈장, 인간 및 원숭이의 혈청 내 VHH-HSA 접합체의 상대적 안정성의 막대 그래프. 글루타티온 처리를 양성 대조군으로 사용하였다.
도 31: HSA-특이적 ELISA로 분석한 비변형 HSA에 접합된 VHH, 및 HSA-PEI×3.5 및 HSA-PEI×8에 접합된 VHH로 주사된 동물의 기관 내 HSA 수준의 막대 그래프.
도 32a 내지 도 32c: 항-HSA-FITC 항체로 염색된, (32a) 비변형 VHH, (32b)비변형 HSA에 접합된 VHH 및 (32c) HSA-PEI×8에 접합된 VHH가 주사된 마우스로부터의 비장의 동결절편 현미경 사진.
도 33: 2개의 상이한 페이로드-담체 접합체 설계의 도식적 표현. 접합체 A와 B는 이황화 결합 위치가 상이하다. PEG는 개략적으로 표현되며 도시된 것보다 길 수 있다.
도 34: PBS, 및 마우스 및 인간 혈장에서 이황화 결합을 사용하여 HSA의 Cys34에 연결된 HSA-PEG-비오틴 접합체의 안정성의 막대 그래프.
도 35: 세포질-유사 조건(10 mM GSH) 하에서 이황화 결합을 통해 HSA의 Cys34에 연결된 HSA-PEG-비오틴 접합체의 안정성의 막대 그래프.
도 36: 본 발명의 예시적인 단백질 접합체의 합성을 위해 활용된 예시적인 접합 전략의 도식적 표현.
도 37a 내지 도 37f: 마우스 혈장, 인간 혈장 및 PBS에서 세포질-유사 조건(10 mM GSH) 하에서 (37a) HSA-PEG4-dm-S-S-VHH, (37c) HSA-S-S-α-메틸-PEG11-트리아졸-PEG4-VHH(S2), (37d) VHH-GGGGSGGGGSGGGGLC(서열번호 4)-S-S-HSA의 안정성의 막대 그래프, (37e) VHH-GGGGSGGGGSGGGLGC(서열번호 5)-S-S-HSA 및 (37f) VHH-GGGGSGGGGSGGGGLC(서열번호 4)-S-S-HSA, VHH-GGGGSGGGGSGGGLGC(서열번호 5)-S-S-HSA와 비가역적 링커 작제물 HSA-PEG11-VHH의 비교. (37b) 마우스 혈장에서 비가역적 링커 작제물인 HSA-PEG11-VHH와 비교한 HSA-PEG4-dm-S-S-VHH의 안정성의 막대 그래프.
도 38a 내지 도 38c. PK 결과: (38a) 2세대 링커(C1 및 C2); (38b) 3세대 링커(S1, S2, S3A-B). S-S 결합이 VHH의 C 말단 시스테인에 있는 VHH αE7-S-S-dm-PEG4-NH-HSA(S1)를 제외하고 모든 가역적인 접합체에서 S-S 결합은 HSA C34 시스테인 상에 존재한다. Balb-c 마우스에 시험된 접합체 60 nmol/Kg을 주사하였다. 혈장 샘플을 주사 후 0.08/0.5/2/6/24/48/72/96시간에 수집하였다. 혈장 내 시험된 접합체의 양을 2면 ELISA(항 VHH/항 HSA)에 의해 결정하였다. (38c) 2면 ELISA 대 HSA ELISA에 의해서 결정된 S3A의 PK. 모든 접합체의 PK를 두 ELISA 방법으로 결정하였고 동일한 결과를 제공하였다(데이터 나타내지 않음).
도 39: 세포질-유사 조건(10 mM GSH) 및 인간 혈장에서 VHH αE7-(G4S)3-C-HSA(S3C) 대 VHH αE7-G4S-G4S-G4L-C-HSA(S3A)의 안정성의 막대 그래프.
도 40a 내지 도 40f. VHH-αE7과 24시간 인큐베이션 후 Hela-GFP 세포의 공초점 현미경 영상. VHH를 상이한 링커 전략을 사용하여 HSA 담체에 접합하였다. (40a) 처리 없음; (40b) S4-PEI×3.5; (40c) S2-PEI×3.5; (40d) S1-PEI×3.5 (40e) S3A-PEI×3.5 (40f) S3B-PEI×3.5. 항 VHH 면역형광 염색(적색). 핵 염색(녹색).
도 41: 세포질 유사 조건(10 mM GSH), 마우스 혈장 및 PBS 하에서 VHH 항 BRAF 1C5-Hel20-LC-HSA-PEI×3.5(S5C)의 안정성의 막대 그래프.
도 42a 내지 도 42d. A375 세포를 96개의 플레이트 웰에 24시간 동안 시딩하여 세포 부착을 허용하였다(1500개 세포/웰). BRAF 저해제인 PF-04880594를 10 μM로 첨가한 것을 제외하고는, 각각의 웰에 시험된 작용제의 샘플을 원하는 농도(42a 및 42b) 1 μM; (42c 및 42d) 3 μM로 첨가하였다. (42a, 42c) IncuCyte®에서 모니터링된, 아폽토시스 세포를 식별하는 일반적으로 사용되는 형광 염료인 아넥신 V 적색 시약으로부터 얻은 적색 영역. (42b, 42d) 적색 영역을 온전한 세포에 상응하는 CellTiter-Glo로 얻은 값으로 정규화하였다.
도 43a 내지 43l: 상이한 담체에 접합된 VHH 항-E7과 24시간 인큐베이션 후 A375 세포의 공초점 현미경 영상. (43a 및 43b) 처리 없음; (43c 및 43d) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-HSA-PEI×3.5; (43e 및 43f) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-Darpin-PEI×2.4; (43g 및 43h) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-IgG-PEI×27; (43i 및 43j) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-피브리노겐-PEI×90; (43k 및 43l) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-GFP-PEI×1.6. 항-VHH 항체를 사용한 VHH에 대한 면역형광 염색 - 적색; 핵 염색 - 청색.
도 44a 내지 44f. 상이한 PEI 변형된 담체와 24시간 인큐베이션 후 A375 세포의 공초점 현미경 영상. (44a) 처리 없음; (44b) HSA-PEI×4.5; (44c) K-27 DARPin-PEI×2.4; (44d) IgG-PEI×27, (44e) 피브리노겐-PEI×90, (44f) GFP-PEI×1.6. 항-HSA-PEI 항체를 사용한 면역형광 염색 - 녹색; 핵 염색 - 청색.
도 45a 및 도 45b. Hela-GFP 세포를 96개의 플레이트 웰에 24시간 동안 시딩하여 부착된 세포를 1500개 세포/웰로 생산하였다. 각각의 웰에 시험된 작용제의 샘플을 원하는 농도로 첨가한 후 아넥신 V 적색 시약을 첨가하여 아폽토시스 세포를 확인하였다. IncuCyte®에서 세포 아폽토시스를 모니터링하였다. 추가 대조군 샘플을 시험하였지만, 모두 처리가 없는 신호(세포 단독)와 동등한 동일한 신호를 제공하였기 때문에 표시되지 않았다. 추가 대조군 샘플은 1C5, 1C5-flex-pep-LC; 1C5-Hel20-LC이고, 모두 담체에 접합되지 않은 것이다. (45a) 시간 경과에 따른 세포 사멸의 선 그래프. (45b) 140시간의 최종 시점에 세포 생존력의 막대 그래프.
도 2: PEI-변형된 마우스 IgG 또는 비변형 마우스 IgG의 A375 세포(청색 - 핵, 녹색 - 염색된 마우스 IgG) 내로의 내재화에 대한 현미경 사진. 천연 IgG는 변형되지 않으며, 다른 모든 패널은 PEI를 갖는 증가하는 수준의 변형을 나타낸다. 각각의 패널 모서리의 숫자는 IgG 분자당 PEI 분자의 평균 수를 나타낸다.
도 3a 및 도 3b: (3a) HEK 세포(60 μg/mL) 및 (3b) A375 세포(5 μg/mL) 내로의 PEI-변형된 GFP(GFP 분자당 평균 6.5 PEI)의 내재화의 현미경 사진.
도 4a 및 도 4b: PEI-양이온화된 담체 단백질이 치료제(이 예에서는 항체)에 화학적으로 연결되는 담체 및 페이로드 방법론의 도식적 표현, 여기서 링커는 이상적으로는 이의 CDR에서 떨어져 있는 Fc 영역에 접합된다. 링커는 (4a) 세포질에서 환원 및 절단되어 자유로운 세포질 수송을 가능하게 하는 양이온화된 담체로부터 치료적 페이로드를 방출할 수 있는 이황화 결합을 포함할 수 있거나 (4b) 절단 가능한 모이어티가 결여될 수 있다.
도 5a 내지 도 5m: (5a, 5c) (5a) 1 μM 또는 (5c) 3 μM의 다양한 작용제로 처리된 A375 세포에서 적색 아넥신 V 형광에 의해서 측정된 바와 같은 아폽토시스의 선 그래프. (5b, 5d) (5b) 5a 및 (5d) 5c에서 세포 역가당 적색 형광의 막대 그래프 정량화 및 정규화. (5e 내지 5l) (5e) 1C5-Hel20-LC; (5f) 1C5-Hel20-LC-S-S-HSA-PEI×3.5; (5g) 1C5-Hel20-LC-HSA-PEI×3.5; (5h) 1C5-Hel20-LC-S-S-PEG12-CO-NH-PEI600, (5i) 1C5-Hel20-LC-PEG8-CO-NH-PEI600, (5j) 1C5-Hel20-LC-S-S-PEG12-CO-NH-PEI1800; (5k) 1C5-Hel20-LC-PEG8-CO-NH-PEI1800; (5l) 1C5-Hel20-LC-r-CO-NH-PEI1800과의 2시간 인큐베이션 후 항-VHH 항체로 염색된 A375의 공초점 현미경 영상. 항-VHH 항체 - 적색; 핵 염색 - 청색. (5m) 다양한 작용제로 처리된 A375 세포에서 시간 경과에 따른 카스파제 3/7 양성 세포 아폽토시스 사건의 선 그래프.
도 6: 배지에서 IgG 수준의 특정 ELISA에 의해 측정된 바와 같은, 다양한 변형 수준에서 PEI-변형된 IgG(초기 배지 농도 2 μg/mL)의 세포 흡수 효율의 막대 차트.
도 7: PEI-변형된 IgG(4.5 PEI)의 카베올린-매개 세포내이입 내재화의 특이적 저해를 나타낸 히스토그램. NC - 변형되지 않은 IgG.
도 8: 5 μg/mL의 PEI-변형된 IgG(3×PEI, 좌측 패널; 4.5×PEI, 중간 패널 및 7×PEI, 우측 패널)와 함께 인큐베이션(5시간)시킨 후 HEK293 세포에서 발현된 엔도솜 마커(상부 패널) 또는 리소솜 마커(하부 패널)의 염색 현미경사진. 엔도솜 및 리소솜 마커는 녹색으로 나타나고, PEI-변형된 IgG는 적색으로 나타나고, 핵은 청색으로 염색된다.
도 9: 10 μg/mL의 PEI-변형된 IgG와 2×104개의 HeLa 세포의 밤새 인큐베이션 후 pH 감응성 염료(5(6)-카르복시나프토플루오레세인, 적색)로 표지된 PEI-변형된 IgG(4.5×PEI)의 실시간 영상 공초점 현미경을 사용한 엔도솜 탈출 모니터링의 현미경사진. 녹색 - 튜불린 염색, 청색 - 핵 염색.
도 10: 항-CD247 PEI-변형된 mAb(4.5×PEI)의 내재화 후 IFNγ 분비의 용량 의존적 증가에 의해 반영된 CD3 세포 활성화의 막대 차트. 평가된 농도 범위에서 내재화된 PEI-변형된 마우스 IgG에 대해 IFNγ 수준의 변화는 관찰되지 않았다.
도 11: PEI-변형된 HSA(7×PEI)에 대한 PEG-기반 이황화물 함유 링커에 의해 접합된 GFP와 A375 세포의 인큐베이션 후 GFP의 세포내 프로파일을 나타낸 현미경사진. 공초점 현미경(녹색 - GFP, 청색 - 핵)에 의해서 관찰된 바와 같이 세포는 인큐베이션 후 24시간(좌측) 및 48시간(우측)에 분산된 GFP 프로파일을 나타낸다.
도 12: 형광 표지된(AlexaFluor 647) 항-인간 IgG 항체를 사용한 공초점 현미경에 의해서 검출된 바와 같은, A375 세포와 밤새 인큐베이션시킨 후 이황화-결합 함유 PEG 링커를 통해서 PEI-변형된 HSA(11×PEI)에 접합된 항-TNFα 항체의 현미경사진.
도 13a 내지 도 13d: 본 발명의 예시적인 단백질 접합체의 도식적 표현. 도 13a는 PEG 링커를 통해 2개의 VHH 분자에 결합된 PEI 변형된 담체를 나타낸다. 도 13b 내지 도 13d는 예시적인 단백질 접합체를 개략적으로 나타내며, 여기서 PEG-기반 링커는 S-S 결합을 통해 담체에 공유 결합된다. PEG-기반 링커는 (13b) 이황화 결합(C1)을 통해, (13c) 말레이미드와 시스테인의 접합 생성물(C2)을 통해 또는 (13d) 디벤질 사이클로옥틴(DBCO)과 아지드의 클릭 반응(C3)에 의해 VHH 분자의 시스테인에 추가로 접합된다.
도 14: A375 세포의 존재 또는 이의 부재 하에서 HSA당 평균 3.5 또는 8개의 PEI 분자를 갖는 PEI 변형된 HSA에 접합된 항-비멘틴 VHH의 배지 수준에 대한 막대그래프.
도 15a 내지 도 15c: PEI-변형된 HSA에 가역적으로 접합된 항-비멘틴 VHH와 24시간 인큐베이션 후 (15a) VHH 및 (15b) 비멘틴에 대해 염색된 A375 세포의 공초점 현미경 영상의 현미경 사진 및 (15c) 둘 다의 병합. 핵은 청색으로 염색되어 있다.
도 16a 및 도 16b: (16a) PEI-변형된 HSA에 가역적으로 접합된 항-비멘틴 VHH 또는 (16b) 비접합된 항-비멘틴과 24시간 인큐베이션 후 VHH(녹색)에 대해 염색된 A375 세포의 공초점 현미경 영상의 현미경 사진. 핵은 청색으로 염색되어 있다.
도 17: 티미딘 세포 주기 동기화 후 S, G2 및 M 세포 주기 단계에서 HPV-양성 HeLa FUCCI 세포의 백분율을 나타낸 선 그래프. 세포를 평균 3.5개의 PEI로 변형된 HSA에 접합된 항-E7 VHH 및 다양한 대조군 처리로 처리하였다. 대조군은 치료 없음(wo), 비변형 VHH 항-E7, 비변형 HSA에 접합된 항-E7 VHH, 관련 없는(irrelevant) VHH에 접합된 변형된 HSA(항-비멘틴), 변형된 HSA 담체 단독 및 세포 주기 저해제(DP, CDK4/6 저해제)였다.
도 18: HPV-양성 HeLa FUCCI 세포에 대한 상이한 처리 효과의 현미경 사진. 평균 3.5개의 PEI로 변형된 HSA에 접합된 관련 없는 VHH(항-비멘틴)로 처리된 세포는 미처리 세포(좌측 영상)와 동일한 프로파일을 나타낸 반면, 동일한 HSA 담체에 접합된 항-E7 VHH는 CDK4/6 저해제의 처리 후에 관찰된 것(우측 영상)과 유사하게, 극적인 세포 사멸을 초래하였다.
도 19: 폐 선암종 세포 내로 내재화된 PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-K-RAS His-태그 DARPin K27 단백질의 대표적인 현미경 사진. DARPin은 항-His 태그 항체로 염색한 후 K-RAS 부위(세포막 내부)에 국재화한다.
도 20: 아폽토시스의 선 그래프. PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-KRAS DARPin K27을 SU8686 세포에 내재화하고 연속 Incucyte 시스템을 사용하는 아넥신 V를 사용하여 아폽토시스 상태를 평가하였다. 8개의 PEI 분자로 변형된 담체(담체-I)에 접합된 DARPin에 노출된 세포는 높은 수준의 아폽토시스를 나타낸 반면, 3.5개의 PEI 분자를 갖는 담체(담체 II)에 접합된 DARPin에 노출된 세포는 또한 명확한 아폽토시스를 나타내지만 더 낮은 정도이다. 미처리 세포, 비변형 DARPin에 노출된 세포 및 8개의 PEI를 갖는 HSA 담체에 노출된 세포는 모두 기준선 아폽토시스를 나타낸다.
도 21a 및 도 21b: 핵에서 GFP를 구성적으로 발현하는 HeLa 세포의 (21a) 증식 및 (21b) 아폽토시스에 대한 PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-KRAS DARPin K27의 효과를 나타낸 선 그래프. 양성 대조군으로서 pan-RAS 저해제를 사용하였고, 음성 대조군으로서 처리제를 사용하지 않았다. 세포를 또한 비변형 DARPin K27, PEI-변형된 HSA 담체 단독, 비변형 HSA 담체에 접합된 DARPin K27 및 PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-비멘틴 VHH(관련 없는 VHH)로 처리하였다.
도 22: 핵에서 GFP를 구성적으로 발현하는 HeLa 세포의 아폽토시스에 대한 PEI-변형된 HSA 담체에 접합된 항-KRAS DARPin K27의 효과를 나타낸 현미경 사진.
도 23: 반응에서 일정한 몰 과량의 PEI를 사용하고 카르보디이미드 커플링제인 EDC의 수준을 조정함으로써 변형 수준을 제어하는 다양한 수준의 PEI(600 Da)로 변형된 HSA의 질량 분석법(MALDI-ToF) 스펙트럼. HSA에 대한 PEI 분자의 평균 수준은 검정색으로 제공된다.
도 24: 다양한 수준의 PEI 변형을 갖는 HSA 담체에 접합된 VHH의 인큐베이션 48시간 후 A375 세포 내부의 항-비멘틴 VHH의 공초점 현미경 영상. HSA 담체에 대한 PEI 분자의 평균 수를 각각의 박스에 표시한다. 세포내 VHH는 항-VHH 항체를 사용하여 시각화된다.
도 25a 내지 도 25d: (25a 및 25b) (25a) PEI 변형된 담체를 함유하는 작용제 및 (25b) 담체 없이 PEI 변형된 VHH를 함유하는 작용제에 대한 시간 경과에 따른 작용제 농도의 선 그래프. (25c) 담체 혈장 노출의 막대 그래프. (25d) 소변에서 담체 수준의 박스 플롯.
도 26: 10 mg/Kg(VHH 중량 기준)의 유리 VHH, 및 두 가지 수준(3.5개 및 8개의 분자)에서 PEI 변형이 있거나 변형이 없는 담체에 접합된 VHH를 주사한 후 5분 후 마우스 혈장 내 VHH(진한 회색 및 박스) 및 VHH-담체(밝은 회색) 수준의 막대 그래프.
도 27: HSA-특이적 ELISA에 의해 측정된 주사 후 24시간에서의 HSA 혈장 수준의 막대 그래프.
도 28: 주사 24시간 후, 10 mg/Kg의 비변형 VHH, 또는 PEI가 없는, 3.5개 분자의 PEI 및 8개 분자의 PEI를 갖는 담체에 접합된 VHH로 처리된 마우스의 간의 VHH 수준의 막대 그래프. VHH 수준을 ELISA로 정량화하였다.
도 29: 비변형 VHH(VHH), 비변형 HSA에 접합된 VHH(VHH-담체), PEI(×3.5)-변형된 HSA에 접합된 VHH(VHH-담체 3PEI) 및 PEI (×8)-변형된 HSA에 접합된 VHH(VHH-담체 8PEI)의 면역형광 분석의 현미경 사진. 토끼 항-VHH 항체에 이어서 형광 항-토끼 항체를 사용하여 염색을 수행하였다.
도 30: ELISA에 의해 측정된, 마우스의 혈장, 인간 및 원숭이의 혈청 내 VHH-HSA 접합체의 상대적 안정성의 막대 그래프. 글루타티온 처리를 양성 대조군으로 사용하였다.
도 31: HSA-특이적 ELISA로 분석한 비변형 HSA에 접합된 VHH, 및 HSA-PEI×3.5 및 HSA-PEI×8에 접합된 VHH로 주사된 동물의 기관 내 HSA 수준의 막대 그래프.
도 32a 내지 도 32c: 항-HSA-FITC 항체로 염색된, (32a) 비변형 VHH, (32b)비변형 HSA에 접합된 VHH 및 (32c) HSA-PEI×8에 접합된 VHH가 주사된 마우스로부터의 비장의 동결절편 현미경 사진.
도 33: 2개의 상이한 페이로드-담체 접합체 설계의 도식적 표현. 접합체 A와 B는 이황화 결합 위치가 상이하다. PEG는 개략적으로 표현되며 도시된 것보다 길 수 있다.
도 34: PBS, 및 마우스 및 인간 혈장에서 이황화 결합을 사용하여 HSA의 Cys34에 연결된 HSA-PEG-비오틴 접합체의 안정성의 막대 그래프.
도 35: 세포질-유사 조건(10 mM GSH) 하에서 이황화 결합을 통해 HSA의 Cys34에 연결된 HSA-PEG-비오틴 접합체의 안정성의 막대 그래프.
도 36: 본 발명의 예시적인 단백질 접합체의 합성을 위해 활용된 예시적인 접합 전략의 도식적 표현.
도 37a 내지 도 37f: 마우스 혈장, 인간 혈장 및 PBS에서 세포질-유사 조건(10 mM GSH) 하에서 (37a) HSA-PEG4-dm-S-S-VHH, (37c) HSA-S-S-α-메틸-PEG11-트리아졸-PEG4-VHH(S2), (37d) VHH-GGGGSGGGGSGGGGLC(서열번호 4)-S-S-HSA의 안정성의 막대 그래프, (37e) VHH-GGGGSGGGGSGGGLGC(서열번호 5)-S-S-HSA 및 (37f) VHH-GGGGSGGGGSGGGGLC(서열번호 4)-S-S-HSA, VHH-GGGGSGGGGSGGGLGC(서열번호 5)-S-S-HSA와 비가역적 링커 작제물 HSA-PEG11-VHH의 비교. (37b) 마우스 혈장에서 비가역적 링커 작제물인 HSA-PEG11-VHH와 비교한 HSA-PEG4-dm-S-S-VHH의 안정성의 막대 그래프.
도 38a 내지 도 38c. PK 결과: (38a) 2세대 링커(C1 및 C2); (38b) 3세대 링커(S1, S2, S3A-B). S-S 결합이 VHH의 C 말단 시스테인에 있는 VHH αE7-S-S-dm-PEG4-NH-HSA(S1)를 제외하고 모든 가역적인 접합체에서 S-S 결합은 HSA C34 시스테인 상에 존재한다. Balb-c 마우스에 시험된 접합체 60 nmol/Kg을 주사하였다. 혈장 샘플을 주사 후 0.08/0.5/2/6/24/48/72/96시간에 수집하였다. 혈장 내 시험된 접합체의 양을 2면 ELISA(항 VHH/항 HSA)에 의해 결정하였다. (38c) 2면 ELISA 대 HSA ELISA에 의해서 결정된 S3A의 PK. 모든 접합체의 PK를 두 ELISA 방법으로 결정하였고 동일한 결과를 제공하였다(데이터 나타내지 않음).
도 39: 세포질-유사 조건(10 mM GSH) 및 인간 혈장에서 VHH αE7-(G4S)3-C-HSA(S3C) 대 VHH αE7-G4S-G4S-G4L-C-HSA(S3A)의 안정성의 막대 그래프.
도 40a 내지 도 40f. VHH-αE7과 24시간 인큐베이션 후 Hela-GFP 세포의 공초점 현미경 영상. VHH를 상이한 링커 전략을 사용하여 HSA 담체에 접합하였다. (40a) 처리 없음; (40b) S4-PEI×3.5; (40c) S2-PEI×3.5; (40d) S1-PEI×3.5 (40e) S3A-PEI×3.5 (40f) S3B-PEI×3.5. 항 VHH 면역형광 염색(적색). 핵 염색(녹색).
도 41: 세포질 유사 조건(10 mM GSH), 마우스 혈장 및 PBS 하에서 VHH 항 BRAF 1C5-Hel20-LC-HSA-PEI×3.5(S5C)의 안정성의 막대 그래프.
도 42a 내지 도 42d. A375 세포를 96개의 플레이트 웰에 24시간 동안 시딩하여 세포 부착을 허용하였다(1500개 세포/웰). BRAF 저해제인 PF-04880594를 10 μM로 첨가한 것을 제외하고는, 각각의 웰에 시험된 작용제의 샘플을 원하는 농도(42a 및 42b) 1 μM; (42c 및 42d) 3 μM로 첨가하였다. (42a, 42c) IncuCyte®에서 모니터링된, 아폽토시스 세포를 식별하는 일반적으로 사용되는 형광 염료인 아넥신 V 적색 시약으로부터 얻은 적색 영역. (42b, 42d) 적색 영역을 온전한 세포에 상응하는 CellTiter-Glo로 얻은 값으로 정규화하였다.
도 43a 내지 43l: 상이한 담체에 접합된 VHH 항-E7과 24시간 인큐베이션 후 A375 세포의 공초점 현미경 영상. (43a 및 43b) 처리 없음; (43c 및 43d) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-HSA-PEI×3.5; (43e 및 43f) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-Darpin-PEI×2.4; (43g 및 43h) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-IgG-PEI×27; (43i 및 43j) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-피브리노겐-PEI×90; (43k 및 43l) VHH-αE7-S-S-PEG4-C(O)-NH-GFP-PEI×1.6. 항-VHH 항체를 사용한 VHH에 대한 면역형광 염색 - 적색; 핵 염색 - 청색.
도 44a 내지 44f. 상이한 PEI 변형된 담체와 24시간 인큐베이션 후 A375 세포의 공초점 현미경 영상. (44a) 처리 없음; (44b) HSA-PEI×4.5; (44c) K-27 DARPin-PEI×2.4; (44d) IgG-PEI×27, (44e) 피브리노겐-PEI×90, (44f) GFP-PEI×1.6. 항-HSA-PEI 항체를 사용한 면역형광 염색 - 녹색; 핵 염색 - 청색.
도 45a 및 도 45b. Hela-GFP 세포를 96개의 플레이트 웰에 24시간 동안 시딩하여 부착된 세포를 1500개 세포/웰로 생산하였다. 각각의 웰에 시험된 작용제의 샘플을 원하는 농도로 첨가한 후 아넥신 V 적색 시약을 첨가하여 아폽토시스 세포를 확인하였다. IncuCyte®에서 세포 아폽토시스를 모니터링하였다. 추가 대조군 샘플을 시험하였지만, 모두 처리가 없는 신호(세포 단독)와 동등한 동일한 신호를 제공하였기 때문에 표시되지 않았다. 추가 대조군 샘플은 1C5, 1C5-flex-pep-LC; 1C5-Hel20-LC이고, 모두 담체에 접합되지 않은 것이다. (45a) 시간 경과에 따른 세포 사멸의 선 그래프. (45b) 140시간의 최종 시점에 세포 생존력의 막대 그래프.
본 발명은, 일부 실시형태에서, 세포 침투성 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체; 페이로드; 및 공유 결합을 통해서 단백질 담체 및 페이로드에 결합된 링커를 포함하는 단백질 접합체를 제공한다.
일부 실시형태에서, 단백질 담체는 긴 혈청 반감기를 갖는 단백질이다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 혈액에서 발견되는 단백질이다. 일부 실시형태에서, 담체 단백질은 적어도 60 kDa의 분자량을 포함한다. 일부 실시형태에서, 담체 단백질은 적어도 65 kDa의 분자량을 포함한다. 일부 실시형태에서, 담체 단백질은 적어도 70 kDa의 분자량을 포함한다. 일부 실시형태에서, 담체 단백질은 200, 190, 180, 170, 160, 150, 140, 130, 120, 110, 100, 95, 90, 85, 80, 75, 또는 70 kDa 미만의 분자량을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 담체 단백질은 최대 7의 등전점을 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 인간 단백질이다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 알부민이다. 일부 실시형태에서, 알부민은 혈청 알부민이다. 일부 실시형태에서, 혈청 알부민은 인간 혈청 알부민(HSA)이다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 인간 혈청 알부민(HSA)이다.
일부 실시형태에서, 단백질 담체는 하나 이상의 세포 침투성 모이어티에 공유 결합된다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 단일 세포 침투성 모이어티에 공유 결합된다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 복수의 세포 침투성 모이어티에 공유 결합된다.
일부 실시형태에서, 세포 침투성 모이어티는 세포-내재화 분자를 포함한다. 일부 실시형태에서, 세포 침투성 모이어티는 본 발명의 단백질 접합체를 세포 내로 내재화시키도록 구성된다. 일부 실시형태에서, 세포 침투성 모이어티는 본 발명의 단백질 접합체의 세포 내재화를 유도 또는 향상시키도록 구성된다. 일부 실시형태에서, 세포 침투성 모이어티는 대조군(예를 들어, 세포 침투성 모이어티가 없는 단백질 접합체)에 비해서, 본 발명의 단백질 접합체의 세포 침투 또는 내재화를 향상시키도록 구성된다.
일부 실시형태에서, 향상은 대조군에 비해서 적어도 20%, 적어도 50%, 적어도 100%, 적어도 1000%, 적어도 10000%, 적어도 100000%(이들 사이의 임의의 범위 포함)만큼이다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 세포 침투성 모이어티는 알킬 아민, 양이온성 중합체, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 실시형태에서, 세포 침투성 모이어티는 양이온성 중합체를 포함한다. 일부 실시형태에서, 세포 침투성 모이어티는 알킬 아민을 포함한다.
일부 실시형태에서, 양이온성 중합체는 복수의 아민 기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 양이온성 중합체는 1차 아민 기, 2차 아민 기, 3차 아민 기, 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다. 일부 실시형태에서, 양이온성 중합체는 양이온성 중합체의 아민 기의 pKa 값보다 낮은 pH 값을 갖는 용액 내에서 이온화(양성 이온화)를 겪을 수 있다. 일부 실시형태에서, 양이온성 중합체는 양이온성 중합체의 아민 기의 pKa 값보다 낮은 pH 값을 갖는 용액 내에서 양성자화를 겪을 수 있다.
일부 실시형태에서, 양이온성 중합체 중 적어도 50 중량%는 양이온성 중합체의 아민 기의 pKa 값보다 낮은 pH 값을 갖는 용액 내에서 양으로 하전(또는 양성자화)된다. 일부 실시형태에서, 양이온성 중합체는 용액 내에서 양성자화를 겪어서, 복수의 양성 표면 전하를 생성하며, 여기서 용액은 본원에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 양이온성 중합체는 폴리아민을 포함한다. 일부 실시형태에서, 양이온성 중합체는 폴리에틸렌이민(PEI)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 폴리아민은 1차 아민을 포함한다. 일부 실시형태에서, 폴리아민은 2차 아민을 포함한다. 일부 실시형태에서, 폴리아민은 3차 아민을 포함한다. 일부 실시형태에서, 폴리아민은 1차, 2차 및 3차 아민을 포함한다. 폴리아민은 당업계에 널리 알려져 있고, 예를 들자면 예를 들어, 폴리에틸렌이민 및 폴리프로파일렌이민을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 양이온성 중합체는 폴리에틸렌이민(PEI)이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, PEI는 선형 PEI를 포함한다. 일부 실시형태에서, PEI는 분지형 PEI를 포함한다. 일부 실시형태에서, PEI(예를 들어, 분지형 또는 선형 PEI)는 5000 Da 미만, 4000 Da 미만, 3000 Da 미만, 2000 Da 미만, 1500 Da 미만, 1000 Da 미만, 800 Da 미만(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 수평균 분자량(Mn)을 특징으로 한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 세포 침투성 모이어티는 100 내지 2000 Da, 200 내지 5000 Da, 200 내지 3000 Da, 500 내지 5000 Da, 500 내지 2000 Da, 500 내지 3000 Da, 100 내지 300 Da, 300 내지 400 Da, 400 내지 500 Da, 500 내지 600 Da, 600 내지 700 Da, 700 내지 1000Da(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 MW(예를 들어, 평균 분자량)를 특징으로 한다.
일부 실시형태에서, PEI는 100 내지 2000 Da, 200 내지 5000 Da, 200 내지 3000 Da, 500 내지 5000 Da, 500 내지 2000 Da, 500 내지 3000 Da, 100 내지 300 Da, 300 내지 400 Da, 400 내지 500 Da, 500 내지 600 Da, 600 내지 700 Da, 700 내지 1000Da(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 Mn을 특징으로 한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 세포 침투성 모이어티는 500 내지 700 Da, 또는 500 내지 2000 Da의 Mn을 특징으로 하는 분지형 PEI를 포함한다.
일부 실시형태에서, 단백질 담체는 이에 공유 결합된 복수의 세포 침투성 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 복수의 세포 침투성 모이어티는 2 내지 100, 3 내지 100, 3 내지 90, 4 내지 100, 4 내지 90, 4 내지 10, 4 내지 40, 4 내지 20, 20 내지 100, 20 내지 40, 40 내지 60, 60 내지 100, 6 내지 100, 6 내지 20, 6 내지 40, 6 내지 50, 4 내지 15, 3 내지 15, 3 내지 10, 3 내지 8, 4 내지 8, 6 내지 10(이들 사이의 임의의 범위 포함)을 포함한다.
일부 실시형태에서, 단백질 담체는 이에 공유 결합된 복수의 PEI 분자를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 이에 공유 결합된 3 내지 10개의 PEI 분자, 3 내지 5개의 PEI 분자, 5 내지 8개의 PEI 분자, 8 내지 10개의 PEI 분자, 10 내지 15개의 PEI 분자, 15 내지 20개의 PEI 분자(이들 사이의 임의의 범위 포함)를 포함한다.
일부 실시형태에서, 단백질 담체는 적어도 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 또는 80 KDa의 크기를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 적어도 50 KDa의 크기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 적어도 60 KDa의 크기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 적어도 65 KDa의 크기를 포함한다.
일부 실시형태에서, 단백질 담체는 혈액 내인성 단백질이다. 일부 실시형태에서, 단백질은 혈액에서 자연적으로 발견된다. 일부 실시형태에서, 혈액은 혈장이다. 일부 실시형태에서, 혈액은 포유동물 혈액이다. 일부 실시형태에서, 포유동물은 인간이다. 일부 실시형태에서, 혈액 내인성 단백질은 알부민이다. 일부 실시형태에서, 혈액 내인성 단백질은 글로불린이다. 일부 실시형태에서, 혈액 내인성 단백질은 피브리노겐이다. 일부 실시형태에서, 글로불린은 면역글로불린(Ig)이다. 일부 실시형태에서, Ig는 IgG이다. 일부 실시형태에서, Ig는 IgA이다. 일부 실시형태에서, Ig는 IgM이다. 일부 실시형태에서, 혈액 내인성 단백질은 HSA, 피브리노겐, 및 IgG로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 혈액 내인성 단백질은 응고성 단백질이다. 혈액 내인성 단백질은 당업계에 널리 알려져 있고, 몇 개만 예를 들면, 예를 들어, 프리알부민(트랜스티레틴), 알파 1 항트립신, 알파-1-산 당단백질, 알파-1-태아단백질, 알파2-마크로글로불린, 감마 글로불린, 베타-2 마이크로글로불린, 합토글로빈, 세룰로플라스민, 보체 성분 3, 보체 성분 4, C-반응성 단백질(CRP), 지질단백질(킬로미크론, VLDL, LDL, HDL), 트랜스페린, 프로트롬빈 및 말토스 결합 단백질(MBP) 등을 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 인간 혈청 알부민(HSA), 피브리노겐, IgG, 형광 단백질(GFP) 및 설계된 안키린 반복 단백질(DARPin)로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 형광 단백질은 녹색(GFP), 적색(RFP), 청색(BFP) 및 황색(YFP)으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 형광 단백질은 GFP이다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 HSA이다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 피브리노겐이다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 IgG이다.
일부 실시형태에서, 단백질 담체는 HSA이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체는 PEI 변형된 HSA를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 링커를 통해서 단백질 담체에 결합된 페이로드를 포함하며, 여기서 링커는 본원에 기재된 바와 같고, 단백질 담체는 3 내지 20, 3.5 내지 20, 3 내지 10, 3.5 내지 10, 3 내지 8, 3.5 내지 8, 3 내지 5, 5 내지 8, 8 내지 10, 10 내지 15, 3 내지 10, 3 내지 15, 4 내지 20, 4 내지 10, 3.5 내지 6, 3.5 내지 15, 3.5 내지 8, 3.5 내지 12, 3 내지 12, 3 내지 17, 3.5 내지 17, 3.5 내지 15, 4 내지 8, 6 내지 10개의 PEI 분자(이들 사이의 임의의 범위 포함)에 공유 결합된(또는 이에 의해서 변형된) HSA이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본원에 기재된 PEI 분자의 수는 평균 값을 나타낸다. 일부 실시형태에서, PEI 분자는 100 내지 2000 Da, 200 내지 5000 Da, 200 내지 3000 Da, 500 내지 5000 Da, 500 내지 2000 Da, 500 내지 3000 Da, 100 내지 300 Da, 300 내지 400 Da, 400 내지 500 Da, 500 내지 600 Da, 600 내지 700 Da, 700 내지 1000Da(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 평균 MW를 특징으로 한다.
일부 실시형태에서, 접합체는 페이로드를 포함한다. 본원에서 사용되는, 용어 "페이로드"는 표적 세포의 세포질로 전달될 임의의 분자를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 세포내 표적에 결합한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 세포내 표적과 상호작용한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 세포내 표적을 조절한다. 일부 실시형태에서, 세포내는 세포질이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는, 절단되는 경우 세포내 표적과 상호작용을 감소시키는 이황화 결합이 없다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 이황화 결합이 없다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 분자이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 생물학적 페이로드이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 생물학적 분자이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 유기물이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 치료적 분자이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 검출 가능한 분자이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 표적에 결합할 수 있는 분자이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 생물학적 제제이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 약물이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 단백질 또는 펩티드이다. 일부 실시형태에서, 펩티드 또는 단백질은 단리된 단백질 또는 펩티드이다. 일부 실시형태에서, 펩티드 또는 단백질은 펩티드 또는 단백질 모이어티이다. 단백질은 완전한 단백질일 필요는 없지만 단백질의 부분 또는 단편일 수 있음이 이해될 것이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 아미노산을 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 단일 아미노산 사슬이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 복수의 아미노산 사슬이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 생물활성 분자이다. 일부 실시형태에서, 생물활성 분자는 생물활성제이다.
일부 실시형태에서, 페이로드는 핵산 분자이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 DNA이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 RNA이다. 일부 실시형태에서, 핵산 분자는 올리고뉴클레오티드이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 아답터이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 프라이머이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 안티센스 올리고뉴클레오티드이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 조절성 RNA이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 플라스미드이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 발현 벡터이다. 일부 실시형태에서, 벡터는 표적 세포에서 발현하도록 구성된다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 유전자 요법이다. 일부 실시형태에서, 핵산 분자는 오픈 리딩 프레임을 포함한다. 일부 실시형태에서, 오픈 리딩 프레임은 치료적 단백질을 암호화한다. 핵산 분자를 화학 및 아미노산 링커를 접합하는 방법은 당업계에 널리 알려져 있고 임의의 이러한 방법이 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 핵산 분자는 핵 국재화 신호(NLS)를 포함한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 단백질 및 핵산 분자로부터 선택된다.
용어 "핵산"은 당업계에 널리 알려져 있다. 본원에서 사용되는 "핵산"은 일반적으로 핵염기를 포함하는, DNA, RNA 또는 이의 유도체 또는 유사체의 분자(즉, 가닥)를 지칭할 것이다. 핵염기는 예를 들어, DNA에서 발견되는 자연 발생 퓨린 또는 피리미딘 염기(예를 들어, 아데닌 "A", 구아닌 "G", 티민 "T" 또는 시토신 "C") 또는 RNA(예를 들어, A, G, 우라실 "U" 또는 C)를 포함한다.
용어 "핵산 분자"는 단일-가닥 RNA(ssRNA), 이중-가닥 RNA(dsRNA), 단일-가닥 DNA(ssDNA), 이중-가닥 DNA(dsDNA), 작은 RNA, 예컨대, miRNA, siRNA 및 다른 짧은 간섭 핵산, snoRNAs, snRNAs, tRNA, piRNA, tnRNA, 작은 rRNA, hnRNA, lncRNA, 순환 핵산, 게놈 DNA 또는 RNA의 단편, 절단된 핵산, 리보자임, 바이러스 RNA 또는 DNA, 감염 기원의 핵산, 증폭 산물, 변형된 핵산, 플라스미드 또는 세포소기관 핵산 및 인공 핵산, 예컨대, 올리고뉴클레오티드를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
본원에서 사용되는, 용어 "올리고뉴클레오티드"는 짧은(예를 들어, 100개 이하의 염기), 화학적으로 합성된 단일-가닥 DNA 또는 RNA 분자를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오티드는 예컨대, 결찰 반응에 의해서 핵산 분자의 5' 또는 3' 단부에 부착된다.
본원에서 사용되는 용어 "발현"은 유전자 산물의 전사 및/또는 번역을 포함하는 유전자 산물의 생합성을 지칭한다. 따라서, 핵산 분자의 발현은 핵산 단편의 전사(예를 들어, mRNA 또는 다른 기능성 RNA를 초래하는 전사) 및/또는 RNA의 전구체 또는 성숙 단백질(폴리펩티드)로의 번역을 지칭할 수 있다.
세포 내에서 유전자를 발현시키는 것은 당업자에게 널리 알려져 있으며, 본원에서 이의 전달은 본 발명의 방법에 의해 또는 본 발명의 조성물을 사용하여 수행될 수 있다. 일부 실시형태에서, 유전자는 플라스미드 또는 바이러스 벡터와 같은 발현 벡터 내에 있다. 벡터는 바이러스 벡터일 수 있다. 바이러스 벡터는 레트로바이러스 벡터, 헤르페스바이러스 벡터, 아데노바이러스 벡터, 아데노-관련 바이러스 벡터 또는 폭스바이러스 벡터일 수 있다. 프로모터는 포유동물 세포에서 활성일 수 있다. 프로모터는 바이러스 프로모터일 수 있다.
일부 실시형태에서, 유전자 또는 오픈 리딩 프레임은 프로모터 또는 다른 조절 요소에 작동 가능하게 연결된다. 용어 "작동 가능하게 연결된"은 관심 뉴클레오티드 서열이(예를 들어, 시험관내 전사/번역 시스템에서 또는 본 발명의 방법에 의해서 벡터가 숙주 세포 내에 도입될 때 숙주 세포에서) 뉴클레오티드 서열의 발현을 허용하는 방식으로 조절 요소 또는 요소들에 연결됨을 의미하는 것으로 의도된다. 일부 실시형태에서, 조절 요소 또는 프로모터는 표적 세포에서 활성이다.
본원에서 사용되는 용어 "프로모터"는 RNA 폴리머라제 즉, RNA 폴리머라제 II에 대한 개시 부위 주위에 클러스터링된 전사 제어 모듈 그룹을 지칭한다. 프로모터는 별개의 기능성 모듈로 구성되며, 각각은 대략 7 내지 -20 bp의 DNA로 이루어지고, 전사 활성인자 또는 저해인자 단백질에 대한 하나 이상의 인식 부위를 함유한다.
일부 실시형태에서, 핵산 서열은 RNA 폴리머라제 II(RNAP II 및 Pol II)에 의해 전사된다. RNAP II는 진핵생물 세포에서 발견되는 효소이다. 이는 DNA의 전사를 촉매화하여 mRNA의 전구체 및 대부분의 snRNA 및 microRNA를 합성한다.
일부 실시형태에서, 포유동물 발현 벡터는 Invitrogen으로부터 입수 가능한 pcDNA3, pcDNA3.1(±), pGL3, pZeoSV2(±), pSecTag2, pDisplay, pEF/myc/cyto, pCMV/myc/cyto, pCR3.1, pSinRep5, DH26S, DHBB, pNMT1, pNMT41, pNMT81, Promega로부터 입수 가능한 pCI, Strategene으로부터 입수 가능한 pMbac, pPbac, pBK-RSV 및 pBK-CMV, Clontech로부터 입수 가능한 pTRES, 및 이들의 유도체를 포함하나 이에 제한되지 않는다.
일부 실시형태에서, 레트로바이러스와 같은 진핵생물 바이러스로부터의 조절 요소를 함유하는 발현 벡터가 본 발명에 의해 사용된다. SV40 벡터는 pSVT7 및 pMT2를 포함한다. 일부 실시형태에서, 소 유두종 바이러스로부터 유래된 벡터는 pBV-1MTHA를 포함하고, 엡스타인 바(Epstein Bar) 바이러스로부터 유래된 벡터는 pHEBO, 및 p2O5를 포함한다. 다른 예시적인 벡터는 pMSG, pAV009/A+, pMTO10/A+, pMAMneo-5, 배큘로바이러스 pDSVE, 및 SV-40 초기 프로모터, SV-40 후기 프로모터, 메탈로티오네인 프로모터, 뮤린 유방 종양 바이러스 프로모터, 라우스(Rous) 육종 바이러스 프로모터, 폴리헤드린 프로모터, 또는 진핵생물 세포에서 발현에 효과적인 것으로 제시된 다른 프로모터의 지시 하에 단백질의 발현을 허용하는 임의의 다른 벡터를 포함한다.
일부 실시형태에서, 측면 감염 및 표적화 특이성과 같은 이점을 제공하는 재조합 바이러스 벡터가 생체내 발현을 위해 사용된다. 일 실시형태에서, 측면 감염은 예를 들어, 레트로바이러스의 수명 주기에 내재되어 있고 단일 감염된 세포가 갈라져 나와 이웃 세포를 감염시키는 많은 자손 비리온을 생산하는 과정이다. 일 실시형태에서, 결과는 넓은 면적이 빠르게 감염되고, 대부분이 원래 바이러스 입자에 의해 초기에 감염되지 않았다는 것이다. 일 실시형태에서, 측면으로 번질 수 없는 바이러스 벡터가 생산된다. 일 실시형태에서, 이러한 특성은 원하는 목적이 명시된 유전자를 국재화된 수의 표적화된 세포에만 도입하는 것인 경우 유용할 수 있다.
용어 "생물활성"은 세포 또는 조직에 효과를 발휘하는 분자 또는 작용제를 지칭한다. 생물활성제의 유형의 대표적인 예는 치료제, 비타민, 전해질, 아미노산, 펩티드, 폴리펩티드, 단백질, 효소, 탄수화물, 지질, 다당류, 핵산, 뉴클레오티드, 폴리뉴클레오티드, 당단백질, 지질단백질, 당지질, 글리코사미노글리칸, 프로테오글리칸, 성장 인자, 분화 인자, 호르몬, 신경전달물질, 프로스타글란딘, 면역글로불린, 사이토카인 및 항원을 포함한다. 이들 분자의 다양한 조합이 사용될 수 있다. 사이토카인의 예는 대식세포 유래 케모카인, 대식세포 염증성 단백질, 인터루킨, 종양 괴사 인자를 포함한다. 단백질의 예는 섬유질 단백질(예를 들어, 콜라겐, 엘라스틴) 및 접착 단백질(예를 들어, 액틴, 피브린, 피브리노겐, 피브로넥틴, 비트로넥틴, 라미닌, 카드헤린, 셀렉틴, 세포내 접착 분자 및 인테그린)을 포함한다. 다양한 경우에, 생물활성제는 피브로넥틴, 라미닌, 트롬보스폰딘, 테나신 C, 렙틴, 백혈병 저해 인자, RGD 펩티드, 항-TNF, 엔도스타틴, 안지오스타틴, 트롬보스폰딘, 골형성 단백질-1, 골 형성 단백질, 오스테오넥틴, 소마토메딘-유사 펩티드, 오스테오칼신, 인터페론 및 인터루킨으로부터 선택될 수 있다. 일부 실시형태에서, 생물활성제는 성장 인자, 분화 인자 또는 이들의 조합을 포함한다.
본원에서 사용되는, 용어 "단리된 펩티드"는 탄수화물, 지질 또는 자연에서 펩티드와 회합되는 다른 단백질성 불순물과 같은 오염 세포 성분이 본질적으로 없는 펩티드를 지칭한다. 전형적으로, 단리된 펩티드의 제제는 고도로 정제된 형태, 즉, 적어도 약 80% 순수, 적어도 약 90% 순수, 적어도 약 95% 순수, 95% 초과 순수, 또는 99% 초과 순수한 펩티드를 함유한다.
본원에서 사용되는, "펩티드", "폴리펩티드" 및 "단백질"이라는 용어는 아미노산 잔기의 중합체를 지칭하도록 상호교환 가능하게 사용된다. 다른 실시형태에서, 본원에서 사용되는 "펩티드", "폴리펩티드" 및 "단백질"이라는 용어는 자연적 펩티드, 펩티도미메틱(전형적으로 비(non)펩티드 결합 또는 다른 합성 변형을 포함) 및 펩티드 유사체 펩토이드 및 세미펩토이드 또는 임의의 이들의 조합을 포함한다. 또 다른 실시형태에서, 기재된 펩티드, 폴리펩티드 및 단백질은 그들을 체내에 있는 동안 더 안정하게 하거나 세포 내로 더 잘 침투할 수 있도록 하는 변형을 갖는다. 일 실시형태에서, 용어 "펩티드", "폴리펩티드" 및 "단백질"은 자연 발생 아미노산 중합체에 적용된다. 또 다른 실시형태에서, 용어 "펩티드", "폴리펩티드" 및 "단백질"은 하나 이상의 아미노산 잔기가 상응하는 자연 발생 아미노산의 인공 화학적 유사체인 아미노산 중합체에 적용된다.
일부 실시형태에서, 페이로드는 세포질 표적에 결합한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 세포질 표적에 특이적이다. 일부 실시형태에서, 특이적은 임의의 다른 표적에 유의하게 결합하지 않는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 결합 분자이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 이의 표적에 혼성화한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 이의 표적에 상보적이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 표적에 결합하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이다. 항체의 구조는 잘 알려져 있고, 당업자는 단지 이의 CDR 서열만으로 항체가 무슨 표적에 결합하는지 알 수 없지만, 항체의 일반적인 구조 및 이의 항원 결합 영역은 당업자에 의해 인식될 수 있다.
본원에서 사용된 "항체"라는 용어는, 내부 표면 형태를 갖는 3-차원 결합 공간과, 항원의 항원 결정기의 특징부에 상보적인 전하 분포를 갖는 폴리펩티드 사슬의 폴딩으로부터 형성된 적어도 하나의 결합 도메인을 포함하는 폴리펩티드 또는 폴리펩티드의 그룹을 말한다. 항체는 전형적으로 폴리펩티드 쇄의 2개의 동일한 쌍을 포함하는 사량체성 형태를 가지며, 각각의 쌍은 하나의 "경쇄" 및 하나의 "중쇄"를 갖는다. 각각의 경쇄/중쇄 쌍의 가변 영역은 항체 결합 부위를 형성한다. 항체는 올리고클로날, 폴리클로날, 모노클로날, 키메라, 낙타화, CDR-이식, 다중특이적, 이중특이적, 촉매적, 인간화, 완전 인간, 항-개체특이형(anti-idiotypic) 항체 및 가용성 또는 결합된 형태로 표지될 수 있는 항체뿐만 단독으로 또는 다른 아미노산 서열과 조합하여, 에피토프-결합 단편을 포함하는 항체의 단편, 변이체 또는 유도체일 수 있다. 항체는 임의의 종으로부터 유래될 수 있다. 용어 항체는 또한 Fv, Fab, Fab', F(ab')2 단일 가닥 항체(svFC), 이량체성 가변 영역(디아바디(Diabody)) 및 디설파이드-결합 가변 영역(dsFv)을 포함하나 이에 제한되지 않는 결합 단편을 포함한다. 특히, 항체는 면역글로불린 분자 및 면역글로불린 분자의 면역학적으로 활성 단편, 즉, 항원 결합 부위를 함유하는 분자를 포함한다. 항체 단편은 Fc 영역 또는 이의 단편을 포함하나 이에 제한되지 않는 또 다른 면역글로불린 도메인에 융합될 수 있거나 또는 융합될 수 없다. 당업자는 scFv- Fc 융합, 가변 영역(예를 들어, VL 및 VH)~ Fc 융합 및 scFv-scFv-Fc 융합을 포함하나 이에 제한되지 않는 다른 융합 생성물이 생성될 수 있음을 추가로 이해할 것이다.
면역글로불린 분자는 임의의 유형(예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 클래스(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 서브클래스의 것일 수 있다.
일부 실시형태에서, 항체는 단일 쇄 항체(ScFv)이다. 일부 실시형태에서, 항체는 단일 도메인 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 낙타과 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 상어 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 VHH이다. 일부 실시형태에서, 항체는 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 중쇄 단독 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 항체 모방이다. 일부 실시형태에서, 결합 분자 또는 항체 모방체는 DARPin이다. CDR이 존재하는 항체와 상관없이, 항체 단편, ScFv, 나노바디, VHH, 단일 도메인 항체, DARPin 등은 이들의 비-가변 영역에 의해 구조적으로 인식될 수 있다. 따라서, 특정 표적에 제한되지 않고, 본 발명의 조성물은 페이로드로서 이들 분자를 포함하는 것으로 알려져 있을 수 있다.
일부 실시형태에서, 페이로드는 C-말단 시스테인 아미노산을 포함한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 페이로드의 C-말단에 근접한 시스테인 아미노산을 포함한다. 일부 실시형태에서, 근접한은 말단의 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1개 아미노산 이내이다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 태그를 포함한다. 일부 실시형태에서, 태그는 C-말단 태그이다. 일부 실시형태에서, 태그는 시스테인 아미노산에 대해 C-말단이다. 일부 실시형태에서, 태그는 시스테인 아미노산에 대해 N-말단이다. 일부 실시형태에서, 태그와 시스테인 아미노산은 인접하다. 일부 실시형태에서, 시스테인 아미노산은 태그 내에 있다. 일부 실시형태에서, 태그는 GGGGSC(서열번호 9)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 C-말단 서열번호 9를 포함한다.
일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 링커를 통해서 단백질 담체에 결합된 페이로드를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 융합 단백질이 아니다. 당업자는 페이로드와 담체가 별도의 링커에 의해서 서로 접합된다는 것을 이해할 것이다. 링커는 담체의 일부가 아니고, 또한 페이로드의 일부가 아니지만 오히려 서로에 부착되어(접합되어) 이들을 연결한다.
일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 링커를 통해서 단백질 담체에 결합된 페이로드를 포함하고, 여기서 링커는 본원에 기재되어 있고, 단백질 담체는(예를 들어, HSA)이고, 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 8.5, 적어도 9, 적어도 9.5, 적어도 10, 적어도 12 mV, 또는 8 내지 40, 8.5 내지 40, 8 내지 20, 8.5 내지 20, 10 내지 40, 10 내지 20, 10 내지 30 mV(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 양의 제타 전위 값을 특징으로 하는 단백질 담체를 얻기에 충분한 복수의 PEI 분자에 공유 결합된다. 당업자는 접합체의 실제 제타 전위 값은 단백질 담체, 페이로드 또는 둘 다의 MW 및/또는 크기에 따라서 달라질 수 있다. 일부 실시형태에서, 담체 및 세포 침투성 모이어티는 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 8.5, 적어도 9, 적어도 9.5, 적어도 10, 적어도 12 mV 또는 8 내지 40, 8.5 내지 40, 8 내지 20, 8.5 내지 20, 10 내지 40, 10 내지 20, 10 내지 30 mV(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 양의 제타 전위 값을 특징으로 한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 접합체는 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 8.5, 적어도 9, 적어도 9.5, 적어도 10, 적어도 12 mV, 또는 8 내지 40, 8.5 내지 40, 8 내지 20, 8.5 내지 20, 10 내지 40, 10 내지 20, 10 내지 30 mV(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 양의 제타 전위 값을 특징으로 한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다.
제타 전위는 당업계에 알려진 임의의 방법에 의해서 측정될 수 있다. 본원에서는 다음 프로토콜이 사용되며 분자가 본원에 언급된 범위의 제타 전위를 포함하는지 결정하기 위한 표준으로 간주될 수 있다. Zeta Sizer Ultra(Malvern Instruments)를 사용하여 제타 전위 측정을 수행하였다. 샘플의 완충액을 1 mg/mL 단백질 농도로 1 mM NaCl로 교환하였다. 각각의 샘플로부터의 20 μL를 제타 셀(DTS1070)에 로딩하고, 각각의 샘플에 대해 5회 반복하여 측정하고 각각의 반복에 대해 mV 단위의 평균 제타 전위를 얻었다. 5개 측정의 평균을 표준편차와 함께 보고한다. 측정은 다음 조건에서 수행되었다: 온도 25℃; 각각의 반복에 대한 실행 수 10 내지 40; 평형 시간: 60초, 하위 실행 후 일시 중지 없음; 반복 사이에 60초 중지; 전압은 자동으로 선택되었으며 데이터 처리에는 단일 모드 분석 방법이 사용되었다. 일부 실시형태에서, 제타 전위는 약 1 mM 염에서 측정된다. 일부 실시형태에서, 염은 NaCl이다. 일부 실시형태에서, 제타 전위는 약 1 mg/mL의 단백질 농도에서 측정된다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 링커를 통해서 페이로드에 공유 결합된 단백질 담체를 포함한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 링커에 공유 결합된다. 일부 실시형태에서, 담체는 링커에 공유 결합된다. 일부 실시형태에서, 공유 결합은 펩티드 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, 링커와 페이로드 사이의 결합 및 링커와 담체 사이의 결합 중 적어도 하나는 펩티드 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, 담체, 링커 및 페이로드는 단일 아미노산 사슬에 포함되지 않는다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 링커를 통해서 페이로드에 공유 결합된 단백질 담체를 포함하며, 여기서 링커는 적어도 하나의 절단 가능한 결합을 포함하는 합성 링커이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 링커를 통해서 페이로드에 공유 결합된 단백질 담체를 포함하며, 여기서 링커는 절단 가능한 결합이 없는 합성 링커이다. 일부 실시형태에서, 담체 및 페이로드는 동일한 단백질로부터 유래되지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 및 담체는 동일한 단백질로부터 유래되지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커는 펩티드 링커이고, 담체가 기반이 되는 단백질의 아미노산 서열에 존재하지 않는 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커는 펩티드 링커이고, 페이로드가 기반이 되는 단백질의 아미노산 서열에 존재하지 않는 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커 및 페이로드는 동일한 단백질로부터 유래되지 않는다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 자연 발생 분자가 아니다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 인공적이다. 일부 실시형태에서, 링커는 자연 발생이 아니다. 일부 실시형태에서, 링커는 인공적이다. 일부 실시형태에서, 담체는 자연 발생 단백질 또는 이의 단편이다.
일부 실시형태에서, 링커는 단백질 링커이다. 일부 실시형태에서, 링커는 펩티드 링커이다. 일부 실시형태에서, 링커는 아미노산 링커이다. 일부 실시형태에서, 링커는 강성 링커이다. 일부 실시형태에서, 링커는 가요성 링커이다. 일부 실시형태에서, 강성 링커는 알파-나선형 펩티드이다. 일부 실시형태에서, 링커는 C-말단 시스테인 아미노산을 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커는 링커의 C-말단에 근접한 시스테인 아미노산을 포함한다. 일부 실시형태에서, 근접한은 말단의 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1개 아미노산 이내이다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 링커는 N-말단 시스테인을 포함하고, 페이로드는 C-말단 시스테인을 포함한다. 당업자는 시스테인의 측쇄가 절단 가능한 이황화 결합을 생성하는 데 사용될 수 있는 황 원자를 포함한다는 것을 이해할 것이다. 예를 들어, 시스테인은 HSA의 시스테인 34와 이황화 결합을 형성할 수 있다.
일부 실시형태에서, 알파-나선형 펩티드는 AAASAEAAAKEAAAKEAAAKAAAGSG(서열번호 6)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 알파-나선형 펩티드는 AAASAEAAAKEAAAKEAAAKAAAGSGLC(서열번호 10)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 알파-나선형 펩티드는 AAASAEAAAKEAAAKEAAAKAAAGSGL(서열번호 14)을 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 가요성 링커는 GGGGS 링커이다. 일부 실시형태에서, 가요성 링커는 1내지 5개의 GGGGS 반복부를 포함한다. 일부 실시형태에서, 1 내지 5개는 1 내지 3개이다. 일부 실시형태에서, 1 내지 5개는 1개이다. 일부 실시형태에서, 1 내지 5개는 2개이다. 일부 실시형태에서, 1 내지 5개는 3개이다. 일부 실시형태에서, 링커는 GGGGSGGGGSGGGGLC(서열번호 4)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커는 GGGGSGGGGSGGGLGC(서열번호 5)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커는 GGGGSGGGGSGGGLG(서열번호 7)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커는 GGGGSGGGGSGGGGSC(서열번호 8)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커는 GGGGSGGGGSGGGGS(서열번호 12)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커는 GGGGSC(서열번호 9)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커는 GGGGS(서열번호 13)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커는 GGGLGC(서열번호 11)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커는 GGGLG(서열번호 15)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 링커는 서열번호 4 내지 15로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 이루어진다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 생물학적 유체(예를 들어, 인간 혈액, 혈장 또는 혈청)에서 적어도 2, 적어도 10, 적어도 24, 적어도 48시간(이들 사이의 임의의 범위 포함) 동안 실질적으로 안정적이다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 혈액 내에서 실질적으로 안정적이다. 일부 실시형태에서, 혈액은 인간 혈액이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 인간 혈액에서 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 18, 24, 36, 48 또는 72시간 동안 실질적으로 안정적이다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 세포질 조건에 대한 노출 하에서 불안정적이다. 일부 실시형태에서, 절단 가능한은 생물학적-절단 가능한이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 페이로드를 시토졸로 방출하도록, 세포질 조건에 대한 노출 하에서 절단 가능하다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커 및/또는 단백질 접합체는 세포질 조건 하에서 실질적으로 안정적이며, 여기서 실질적으로 안정적이라는 것은 본원에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 생물학적 절단 가능한 결합(예를 들어, 세포질 조건에 대한 단백질 접합체의 노출 하에서 절단 가능한 결합)이 실질적으로 없다. 일부 실시형태에서, 링커는 생물학적 절단 가능한 결합이 실질적으로 없다. 일부 실시형태에서, 링커는 생물학적 절단 가능하지 않은 결합(예를 들어, 아미드 결합, 클릭 반응 생성물, 티오에테르 결합 등)을 통해서 단백질 담체 및/또는 페이로드에 부착된다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 생물학적 절단 가능한 결합을 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 담체 및/또는 페이로드는 생물학적 절단 가능한 결합을 통해서 링커에 결합된다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 생물학적 절단 가능한 결합을 포함한다. 일부 실시형태에서, 생물학적 절단 가능한 결합은 생물학적 유체(예를 들어, 인간 혈액, 혈장 또는 혈청)에서 적어도 2시간, 적어도 10시간, 적어도 24시간, 적어도 48시간(이들 사이의 임의의 범위 포함) 동안 실질적으로 안정적이다. 일부 실시형태에서, 절단 가능한은 세포질에서 절단 가능하다. 일부 실시형태에서, 절단 가능한은 혈청 또는 혈액에서 절단 가능하지 않다. 일부 실시형태에서, 절단 가능하지 않은은 실질적으로 절단 가능하지 않다. 일부 실시형태에서, 세포질에서 생물학적 절단 가능한은 혈액에서보다 세포질에서 상당히 더 절단된다.
일부 실시형태에서, 생물학적 절단 가능한 결합은 세포질 조건에 대한 노출 하에서 절단 가능하다. 일부 실시형태에서, 생물학적 절단 가능한 결합은 세포질 조건(예를 들어, 세포내 구획, 특히 산성 pH 조건 및/또는 글루타티온과 같은 환원제 포함)에 대한 노출 하에서 환원 가능하다.
생물학적 절단 가능한 결합은 당업계에 널리 알려져 있고, 세포에 유입 후 선택적으로 절단되는(세포내 절단) 결합을 지칭한다. 세포 내에서 약물의 방출을 위한 바람직한 연결부는 리소솜에서 발견되는 것과 같은 산성 조건에서 절단 가능하다. 일례는 이황화 결합이다. 이황화 결합은 글루타티온에 의해 세포에 유입될 때 절단되는 것으로 가정된다.
일부 실시형태에서, 생물학적 절단 가능한 결합은 이황화 결합이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 생물학적 절단 가능한 결합은 복수의 이황화 결합을 포함한다. 일부 실시형태에서, 생물학적 절단 가능한 결합은 입체 장애형이다. 일부 실시형태에서, 생물학적 절단 가능한 결합은 입체 장애형 이황화 결합이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 생물학적 유체는 체액이다. 일부 실시형태에서, 생물학적 유체는 혈액, 혈청, 혈장, 위액, 장액, 타액, 담즙, 종양액, 모유, 소변, 간질액, 뇌척수액 및 대변 중 적어도 하나로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 생물학적 유체는 혈액이다. 일부 실시형태에서, 생물학적 유체는 혈청이다. 일부 실시형태에서, 생물학적 유체는 혈장이다.
일부 실시형태에서, 입체 장애형 이황화 결합은 이에 인접한 측기 또는 벌키(bulky) 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 측기 또는 벌키 모이어티는 이황화 결합의 적어도 하나의 황에 근접하게 위치된다. 일부 실시형태에서, 인접한 또는 근접한은 0 내지 10, 0 내지 2, 2 내지 5, 5 내지 10개의 원자 결합(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 거리를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본원에서 사용되는 용어 "원자 결합"은 탄소-탄소(C-C) 결합 길이, 예를 들어, 단일 C-C 결합 길이를 지칭한다.
일부 실시형태에서, 입체 장애형 이황화 결합은 이에 인접한 측기 또는 벌키 모이어티를 포함한다(예를 들어, 이황화 결합의 황 원자로부터 1 내지 15 Å, 1 내지 3 Å, 3 내지 5 Å, 5 내지 10 Å, 10 내지 15 Å 범위(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 거리에 위치함).
일부 실시형태에서, 측기 또는 벌키 모이어티는 알킬(예를 들어, 1차, 2차 또는 3차 C1-C10 알킬, 선택적으로 불포화 결합 및/또는 치환체 포함), 방향족 고리, 입체 장애형 측쇄를 포함하는 아미노산(예를 들어, 류신, 발린, 이소류신, 페닐알라닌, 히스티딘, 티로신 및 트립토판) 또는 단백질 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다. 일부 실시형태에서, 측기 또는 벌키 모이어티는 이황화 결합에 인접한 메틸렌기에 공유 결합된다.
일부 실시형태에서, 이황화 결합은 본 발명의 페이로드 및/또는 단백질 담체에 인접하게 위치되고, 여기서 인접한은 본원에 기재되어 있다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 페이로드 및/또는 단백질 담체는 이황화 결합을 통해서 링커에 결합된다. 일부 실시형태에서, 이황화 결합은 단백질 담체에 근접 또는 인접하다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 담체(예를 들어, HSA)는 이황화 결합을 통해서 링커에 결합된다. 일부 실시형태에서, HSA는 다음의 아미노산 서열 또는 이의 단편 또는 동족체를 포함한다: DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFAKTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNECFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFYAPELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKCASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDLLECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPADLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSVVLLLRLAKTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGEYKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAEDYLSVVLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPKEFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDDFAAFVEKCCKADDKETCFAEEGKKLVAASQAALGL(서열번호 1). 서열번호 1은 신호 펩티드가 없는 HSA의 서열을 제공한다. 일부 실시형태에서, HSA는 신호 펩티드를 포함한다. 일부 실시형태에서, 신호 펩티드는 MKWVTFISLLFLFSSAYSRGVFRR(서열번호 17)을 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, HSA는 HSA의 단편이다. 일부 실시형태에서, 단편은 적어도 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 100%의 HSA를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 단편은 HSA로부터의 적어도 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550 또는 600개의 아미노산을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 아미노산은 순차적인 아미노산이다. 일부 실시형태에서, HSA는 HSA의 동족체이다. 일부 실시형태에서, HSA의 동족체는 서열번호 1과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97% 또는 99% 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, HSA는 서열번호 1과 적어도 70% 상동성인 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, HSA는 서열번호 1 또는 이의 단편 또는 동족체로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 상동성은 서열 동일성이다. 일부 실시형태에서, HSA는 서열번호 1과 적어도 70% 상동성인 아미노산 서열로 이루어진다. 일부 실시형태에서, HSA는 서열번호 1로 이루어진다. 일부 실시형태에서, HSA는 유리 시스테인을 포함한다. 일부 실시형태에서, 유리 시스테인은 시스테인 C34이다. 일부 실시형태에서, 유리 시스테인은 단지 단일의 유리 시스테인이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 이황화 결합을 통해서 HSA의 C34에 결합된다.
일부 실시형태에서, 피브리노겐은 피브리노겐 알파 사슬(FGA)이다. 일부 실시형태에서, FGA는 다음의 아미노산 서열 또는 이의 단편 또는 동족체를 포함한다: ADSGEGDFLAEGGGVRGPRVVERHQSACKDSDWPFCSDEDWNYKCPSGCRMKGLIDEVNQDFTNRINKLKNSLFEYQKNNKDSHSLTTNIMEILRGDFSSANNRDNTYNRVSEDLRSRIEVLKRKVIEKVQHIQLLQKNVRAQLVDMKRLEVDIDIKIRSCRGSCSRALAREVDLKDYEDQQKQLEQVIAKDLLPSRDRQHLPLIKMKPVPDLVPGNFKSQLQKVPPEWKALTDMPQMRMELERPGGNEITRGGSTSYGTGSETESPRNPSSAGSWNSGSSGPGSTGNRNPGSSGTGGTATWKPGSSGPGSTGSWNSGSSGTGSTGNQNPGSPRPGSTGTWNPGSSERGSAGHWTSESSVSGSTGQWHSESGSFRPDSPGSGNARPNNPDWGTFEEVSGNVSPGTRREYHTEKLVTSKGDKELRTGKEKVTSGSTTTTRRSCSKTVTKTVIGPDGHKEVTKEVVTSEDGSDCPEAMDLGTLSGIGTLDGFRHRHPDEAAFFDTASTGKTFPGFFSPMLGEFVSETESRGSESGIFTNTKESSSHHPGIAEFPSRGKSSSYSKQFTSSTSYNRGDSTFESKSYKMADEAGSEADHEGTHSTKRGHAKSRPVRDCDDVLQTHPSGTQSGIFNIKLPGSSKIFSVYCDQETSLGGWLLIQQRMDGSLNFNRTWQDYKRGFGSLNDEGEGEFWLGNDYLHLLTQRGSVLRVELEDWAGNEAYAEYHFRVGSEAEGYALQVSSYEGTAGDALIEGSVEEGAEYTSHNNMQFSTFDRDADQWEENCAEVYGGGWWYNNCQAANLNGIYYPGGSYDPRNNSPYEIENGVVWVSFRGADYSLRAVRMKIRPLVTQ(서열번호 2). 서열번호 2는 신호 펩티드가 없는 피브리노겐의 서열을 제공한다. 일부 실시형태에서, 피브리노겐은 신호 펩티드를 포함한다. 일부 실시형태에서, 신호 펩티드는 MFSMRIVCLVLSVVGTAWT(서열번호 3)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, FGA는 FGA의 단편이다. 일부 실시형태에서, 단편은 적어도 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 100%의 FGA를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 단편은 FGA로부터의 적어도 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800 또는 850개의 아미노산을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 아미노산은 순차적인 아미노산이다. 일부 실시형태에서, FGA는 FGA의 동족체이다. 일부 실시형태에서, 상동성은 서열 동일성이다. 일부 실시형태에서, FGA의 동족체는 서열번호 2와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97% 또는 99% 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, FGA는 서열번호 2 또는 이의 단편 또는 동족체로 이루어진다. 일부 실시형태에서, FGA는 서열번호 2와 적어도 70% 상동성인 아미노산 서열로 이루어진다. 일부 실시형태에서, FGA는 서열번호 2로 이루어진다.
일부 실시형태에서, 피브리노겐은 피브리노겐 베타 사슬(FGB)이다. 일부 실시형태에서, FGB는 다음의 아미노산 서열 또는 이의 단편 또는 동족체를 포함한다: QGVNDNEEGFFSARGHRPLDKKREEAPSLRPAPPPISGGGYRARPAKAAATQKKVERKAPDAGGCLHADPDLGVLCPTGCQLQEALLQQERPIRNSVDELNNNVEAVSQTSSSSFQYMYLLKDLWQKRQKQVKDNENVVNEYSSELEKHQLYIDETVNSNIPTNLRVLRSILENLRSKIQKLESDVSAQMEYCRTPCTVSCNIPVVSGKECEEIIRKGGETSEMYLIQPDSSVKPYRVYCDMNTENGGWTVIQNRQDGSVDFGRKWDPYKQGFGNVATNTDGKNYCGLPGEYWLGNDKISQLTRMGPTELLIEMEDWKGDKVKAHYGGFTVQNEANKYQISVNKYRGTAGNALMDGASQLMGENRTMTIHNGMFFSTYDRDNDGWLTSDPRKQCSKEDGGGWWYNRCHAANPNGRYYWGGQYTWDMAKHGTDDGVVWMNWKGSWYSMRKMSMKIRPFFPQQ(서열번호 19). 서열번호 19는 신호 펩티드가 없는 피브리노겐의 서열을 제공한다. 일부 실시형태에서, 피브리노겐은 신호 펩티드를 포함한다. 일부 실시형태에서, 신호 펩티드는 MKRMVSWSFHKLKTMKHLLLLLLCVFLVKS(서열번호 18)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, FGB는 FGB의 단편이다. 일부 실시형태에서, 단편은 적어도 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 100%의 FGB를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 단편은 FGB로부터의 적어도 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450 또는 480개의 아미노산을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 아미노산은 순차적인 아미노산이다. 일부 실시형태에서, FGB는 FGB의 동족체이다. 일부 실시형태에서, 상동성은 서열 동일성이다. 일부 실시형태에서, FGB의 동족체는 서열번호 19와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97% 또는 99% 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, FGB는 서열번호 19 또는 이의 단편 또는 동족체로 이루어진다. 일부 실시형태에서, FGB는 서열번호 19와 적어도 70% 상동성인 아미노산 서열로 이루어진다. 일부 실시형태에서, FGB는 서열번호 19로 이루어진다.
일부 실시형태에서, 피브리노겐은 피브리노겐 감마 사슬(FGG)이다. 일부 실시형태에서, FGG는 하기의 아미노산 서열 또는 이의 단편 또는 동족체를 포함한다: YVATRDNCCILDERFGSYCPTTCGIADFLSTYQTKVDKDLQSLEDILHQVENKTSEVKQLIKAIQLTYNPDESSKPNMIDAATLKSRKMLEEIMKYEASILTHDSSIRYLQEIYNSNNQKIVNLKEKVAQLEAQCQEPCKDTVQIHDITGKDCQDIANKGAKQSGLYFIKPLKANQQFLVYCEIDGSGNGWTVFQKRLDGSVDFKKNWIQYKEGFGHLSPTGTTEFWLGNEKIHLISTQSAIPYALRVELEDWNGRTSTADYAMFKVGPEADKYRLTYAYFAGGDAGDAFDGFDFGDDPSDKFFTSHNGMQFSTWDNDNDKFEGNCAEQDGSGWWMNKCHAGHLNGVYYQGGTYSKASTPNGYDNGIIWATWKTRWYSMKKTTMKIIPFNRLTIGEGQQHHLGGAKQVRPEHPAETEYDSLYPEDDL(서열번호 21). 서열번호 21은 신호 펩티드가 없는 피브리노겐의 서열을 제공한다. 일부 실시형태에서, 피브리노겐은 신호 펩티드를 포함한다. 일부 실시형태에서, 신호 펩티드는 MSWSLHPRNLILYFYALLFLSSTCVA(서열번호 20)를 포함하거나 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, FGG는 FGG의 단편이다. 일부 실시형태에서, 단편은 적어도 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 100%의 FGG를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 단편은 FGG로부터의 적어도 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450 또는 480개의 아미노산을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 아미노산은 순차적인 아미노산이다. 일부 실시형태에서, FGG는 FGG의 동족체이다. 일부 실시형태에서, 상동성은 서열 동일성이다. 일부 실시형태에서, FGG의 동족체는 서열번호 21과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97% 또는 99% 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, FGG는 서열번호 21 또는 이의 단편 또는 동족체로 이루어진다. 일부 실시형태에서, FGG는 서열번호 21과 적어도 70% 상동성인 아미노산 서열로 이루어진다. 일부 실시형태에서, FGG는 서열번호 21로 이루어진다.
일부 실시형태에서, 피브리노겐은 피브리노겐의 혼합물이다. 일부 실시형태에서, 혼합물은 FGA, FGB 및 FGG 중 적어도 둘의 혼합물이다. 일부 실시형태에서, 혼합물은 FGA, FGB 및 FGG 중 3개 모두의 혼합물이다. 일부 실시형태에서, FGA, FGB 및 FGG는 인간 혈액에서 발견되는 바와 같은 비율이다. 일부 실시형태에서, 혈액은 혈장이다. 인간 혈장으로부터의 피브리노겐은 예컨대, Sigma-Aldrich 카탈로그 번호 341578로부터 상업적으로 입수 가능하다. 일부 실시형태에서, 피브리노겐은 유리 시스테인을 포함한다. 일부 실시형태에서, 피브리노겐은 유리 리신을 포함한다. 피브리노겐에 대한 접합은 본원에 기재된 바와 같이 또는 당업계에 알려진 임의의 수단에 의해서 수행될 수 있다. 접합은 무작위로 또는 본원에 기재된 바와 같은 특이적 부위에 존재할 수 있다.
일부 실시형태에서, IgG는 IgG의 Fc 부분이다. 일부 실시형태에서, IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, IgG는 IgG1이다. 일부 실시형태에서, IgG는 포유동물 IgG이다. 일부 실시형태에서, IgG는 인간 IgG이다. 일부 실시형태에서, IgG는 마우스 IgG이다. 일부 실시형태에서, IgG는 IgG의 중쇄의 불변 영역이다. 일부 실시형태에서, IgG는 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 일부 실시형태에서, IgG는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함한다. 일부 실시형태에서, IgG는 단백질 복합체이다. 일부 실시형태에서, IgG는 폴리클로날이다. 일부 실시형태에서, IgG는 모노클로날이다. 일부 실시형태에서, IgG는 비-인간 종에 대해서 상승되는 IgG이다. 일부 실시형태에서, 종은 염소 또는 양이다. 일부 실시형태에서, IgG는 비-인간 종의 IgG의 중쇄에 대한 것이다. 상업적인 마우스 IgG는 구매할 수 있으며, 예컨대, Sigma-Aldrich의 항-염소/양 IgG 항체, 마우스 모노클로날(클론 GT-34)이다. 일부 실시형태에서, IgG는 유리 시스테인을 포함한다. 일부 실시형태에서, IgG는 유리 리신을 포함한다. 일부 실시형태에서, IgG는 C-말단 시스테인을 포함한다. IgG에 대한 접합은 본원에 기재된 바와 같이 또는 당업계에 알려진 임의의 수단에 의해서 수행될 수 있다. 접합은 무작위로 또는 본원에 기재된 바와 같은 특이적 부위에 존재할 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 선형 또는 분지형 사슬이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 하나 이상의 상기 사슬을 선택적으로 포함하는 골격이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 스페이서(예를 들어, 자연 및/또는 비자연 아미노산, 알킬, 아미드 결합, 에스테르 결합, 티오에스테르 결합, 우레아 결합, 이들의 임의의 유도체 또는 조합 포함)이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 생체적합성 중합체 또는 생체적합성 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 생체적합성 중합체는 적어도 부분적으로 생체분해성이다. 일부 실시형태에서, 생체적합성 중합체는 폴리글리콜 에테르, 폴리에스테르, 폴리아미드, 폴리아미노산, 펩티드 및/또는 이들의 유도체 또는 이들의 임의의 조합이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 폴리글리콜 에테르는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 PEG를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 100 내지 5000 Da(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 Mn을 특징으로 하는 PEG를 포함한다.
일부 실시형태에서, 생체적합성 모이어티는 아미드, 에스테르, 글리콜, 아미노산, 또는 이들의 임의의 조합이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 폴리아미노산 또는 이의 유도체는 2 내지 50개의 아미노산, 4 내지 50개, 5 내지 50개, 5 내지 50개, 4 내지 20개, 4 내지 30개, 4 내지 40개, 5 내지 20개, 5 내지 30개, 5 내지 40개, 6 내지 50개, 6 내지 30개, 6 내지 40개, 6 내지 20개, 8 내지 50개, 8 내지 30개, 8 내지 20개, 8 내지 40개(이들 사이의 임의의 범위 포함)를 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "펩티드", "폴리펩티드" 및 "단백질"은 천연 펩티드, 펩티드 유도체, 예컨대, 베타 펩티드, 펩티드모방체(전형적으로 비펩티드 결합 또는 다른 합성 변형 포함) 및 펩티드 유사체 펩토이드 및 세미펩토이드 또는 이들의 조합을 포함한다. 또 다른 실시형태에서, 용어 "펩티드", "폴리펩티드" 및 "단백질"은 적어도 하나의 아미노산 잔기가 상응하는 자연 발생 아미노산의 인공 화학적 유사체인 아미노산 중합체에 적용된다.
용어 "유도체" 또는 "화학적 유도체"는 측쇄 또는 펩티드 내의 임의의 작용기 상에서의 반응에 의해 화학적으로 유도체화된 하나 이상의 잔기를 갖는 폴리펩티드의 임의의 화학적 유도체를 포함한다. 이러한 유도체화된 분자에는 예를 들어, 하나 이상의 보호기(예를 들어, 측쇄 보호기(들) 및/또는 N-말단 보호기)를 보유하는 펩티드 및/또는 유리 아미노기가 유도체화되어 아민 히드로클로라이드, p-톨루엔 설포닐기, 카르보벤족시기, t-부틸옥시카르보닐기, 아세틸기 또는 포르밀기를 형성한 펩티드를 포함한다. 유리 카르복실기는 유도체화되어 이의 아미드, 염, 메틸 및 에틸 에스테르 또는 다른 유형의 에스테르 또는 히드라지드를 형성할 수 있다. 유리 히드록기는 유도체화되어 O-아실 또는 O-알킬 유도체를 형성할 수 있다. 히스티딘의 이미다졸 질소는 유도체화되어 N-im-벤질히스티딘을 형성할 수 있다. 또한 화학적 유도체에는 20개의 표준 아미노산 잔기 중 하나 이상의 자연 발생 아미노산 유도체를 함유하는 펩티드가 포함된다. 예를 들어, 4-히드록시프롤린이 프롤린 대신 치환될 수 있고; 5-히드록시리신이 리신 대신 치환될 수 있고; 3-메틸히스티딘이 히스티딘 대신 치환될 수 있고; 호모세린이 세린 대신 치환될 수 있고; Dab, Daa 및/또는 오르니틴(O)이 리신 대신 치환될 수 있다.
또한, 펩티드 유도체는 말단-NH2 아실화, 아세틸화 또는 티오글리콜산 아미드화를 포함하지만 이들로 제한되지 않는 화학적 변형에 의해서 그리고 예를 들어, 암모니아, 메틸아민 등을 사용한 말단 및/또는 측쇄 카르복시 기의 아미드화에 의해서 본 발명의 펩티드의 자연 서열과 상이할 수 있다. 펩티드는 임의의 배위를 갖는 선형, 고리형 또는 분지형 등일 수 있으며, 이것은 당업계에 알려진 방법을 사용하여 달성될 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 스페이서(예를 들어, 자연 및/또는 비자연 아미노산, 알킬, 아미드 결합, 에스테르 결합, 이황화 결합, 티오에스테르 결합, 우레아 결합, 이들의 임의의 유도체 또는 조합 포함)를 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 이황화 결합을 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 클릭 반응 생성물(예를 들어, 공유 연결, 예컨대, 고리화 반응 생성물 및/또는 클릭 반응을 통해 형성된 석신이미드-티오에테르 모이어티)을 포함한다.
클릭 반응은 당업계에 잘 알려져 있으며, 특히 말레이미드와 티올의 마이클 첨가(석신이미드-티오에테르의 형성을 초래함); 아지드 알킨 고리첨가; 딜스-앨더(Diels-Alder) 반응(예를 들어 직접 및/또는 역전자 수요 딜스 앨더); 디벤질 사이클로옥틴 1,3-니트론(또는 아지드) 고리첨가; 알켄 테트라졸 광클릭 반응 등을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 하기 화학식 A로 표현되고:
, 상기 식에서, PC는 본 발명의 단백질 담체를 나타내고; BP는 본 발명의 생물학적 페이로드(즉, 페이로드)를 나타내고; 각각의 r 및 m은 독립적으로 0 내지 10(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; 각각의 R3은 독립적으로 치환체 또는 H를 나타내고; Het는 O, N, NH 및 S로부터 각각 독립적으로 선택된 헤테로원자를 나타내고; 각각의 A는 독립적으로 (i) 생체적합성 모이어티 또는 생체적합성 중합체; 및/또는 (ii) 하나 이상의 링커 - 각각의 링커는 독립적으로 헤테로원자(예를 들어, O, N, NH, 또는 S), 카르보닐 유도체(예를 들어, -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -C(O)S-, -C(NH)NH-, -C(NH)O-, -C(NH)S-), C1-C10 알킬, C1-C10 아미노알킬, C1-C10 알콕시, C1-C10 메르캅토알킬, 또는 클릭 반응 생성물(이들의 임의의 조합 포함) 중 임의의 것을 포함함 - 를 나타내거나, A는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나의 r 또는 m은 1 내지 10, 1 내지 3, 1 내지 5, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 10(이들 사이의 임의의 범위 포함)이다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 하기 화학식 B:
, 또는 하기 화학식 C로 표현되고:
상기 식에서, PC는 본 발명의 단백질 담체를 나타내고; BP는 본 발명의 생물학적 페이로드를 나타내고; 각각의 r 및 m은 독립적으로 0 내지 10(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; p는 0 내지 100(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; Pol은 생체적합성 모이어티 또는 생체적합성 중합체를 나타내고; 각각의 R3은 독립적으로 치환체 또는 H를 나타내고; Het는 O, N, NH 및 S로부터 각각 독립적으로 선택된 헤테로원자를 나타내고; 각각의 A는 독립적으로 하나 이상의 링커 - 각각의 링커는 독립적으로 헤테로원자(예를 들어, O, N, NH, 또는 S), 카르보닐 유도체(예를 들어, -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -C(O)S-, -C(NH)NH-, -C(NH)O-, -C(NH)S-), C1-C10 알킬, C1-C10 아미노알킬, C1-C10 알콕시, C1-C10 메르캅토알킬, 또는 클릭 반응 생성물(이들의 임의의 조합 포함) 중 임의의 것을 포함함 - 를 나타내거나, A는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 화학식 A 내지 화학식 C 중 어느 하나로 표현되며, 여기서 링커는 적어도 5, 적어도 10, 적어도 15, 적어도 20, 적어도 30, 적어도 5, 적어도 100, 적어도 300, 적어도 500, 5 내지 500, 5 내지 100, 10 내지 100, 5 내지 50, 50 내지 100, 100 내지 500개의 원자 결합(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 길이를 갖는다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나의 p는 1 내지 100, 1 내지 20, 10 내지 100, 2 내지 20, 3 내지 20, 3 내지 15, 10 내지 20, 20 내지 50, 50 내지 100, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 10, 11, 12, 15 또는 20(이들 사이의 임의의 범위 포함)이다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 하기 화학식 1로 표현되고:
, 상기 식에서, PC, BP 및 Pol은 본원에 기재된 바와 같고; 각각의 r 및 m은 독립적으로 0 내지 10(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; l은 독립적으로 1 내지 10(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; p는 2 내지 100(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; 각각의 R은 독립적으로 벌키 모이어티 또는 H를 나타내고; 각각의 A는 독립적으로 하나 이상의 링커 - 각각의 링커는 독립적으로 헤테로원자(예를 들어, O, N, NR3, 또는 S), 카르보닐 유도체(예를 들어, -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -C(O)S-, -C(NR3)NR3-, -C(NR3)O-, -C(NR3)S-), C1-C10 알킬, C1-C10 아미노알킬, C1-C10 알콕시, C1-C10 메르캅토알킬, 또는 클릭 반응 생성물(이들의 임의의 조합 포함) 중 임의의 것을 포함함 - 를 나타내거나, A는 존재하지 않는다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 하기 화학식으로 표현되고:
, 상기 식에서, PC, BP, Het, A, Pol 및 p는 본원에 기재된 바와 같고; 각각의 r, r', m 및 m'는 독립적으로 0 내지 10(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; 각각의 R3 및 R3'는 독립적으로 하나 이상의 벌키 모이어티, 하나 이상의 치환체, 또는 H를 나타내고; X1은 헤테로원자(예를 들어, O, N, NR3, 또는 S), 카르보닐 유도체(예를 들어, -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -C(O)S-, -C(NR3)NR3-, -C(NR3)O-, -C(NR3)S-), 또는 클릭 반응 생성물(이들의 임의의 조합 포함)을 나타내고, Het가 S인 경우, 적어도 하나의 X1은 S이다. 일부 실시형태에서, Het 및 X1 둘 다가 S인 경우, 적어도 하나의 R3은 하나 이상의 벌키 모이어티이고; m' 및 r' 중 적어도 하나는 0이 아니다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 하기 화학식으로 표현되고:
, 상기 식에서 PC, BP, Het, A, Pol, R3, r, m 및 p는 원자가에 의해 허용 가능한 바와 같이 본원에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, Het 및 X1 둘 다가 S인 경우, 적어도 하나의 R3은 하나 이상의 벌키 모이어티이고; m' 및 r' 중 적어도 하나는 0이 아니다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 하기 화학식 A로 표현되고:
, 상기 식에서, Het는 S 또는 NH를 포함하며, X는 카르보닐 유도체, 클릭 반응 생성물을 나타내거나 결합이고; Pep는 펩티드를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 펩티드는 BP의 C-말단에 결합된다. 일부 실시형태에서, Het는 S이고, 펩티드는 시스테인(예를 들어, C-말단 시스테인)을 통해 PC에 결합된다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 하기 화학식 중 어느 하나로 표현되고:
,
상기 식에서, PC, BP 및 Pol은 본원에 기재된 바와 같고; 각각의 j, k, r, o, n 및 m은 독립적으로 0 내지 10(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; l은 독립적으로 1 내지 10(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; p는 2 내지 100(이들 사이의 임의의 범위 포함) 범위의 정수를 나타내고; 각각의 R은 독립적으로 벌키 모이어티 또는 H를 나타내고; 각각의 X는 독립적으로 헤테로원자(예를 들어, O, N, NH, 또는 S), 카르보닐 유도체(예를 들어, -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -C(O)S-, -C(NH)NH-, -C(NH)O-, -C(NH)S-), 스페이서(예를 들어, C1-C10 알킬, C1-C10 아미노알킬, C1-C10 알콕시, C1-C10 메르캅토알킬, 또는 클릭 반응 생성물) 또는 이들의 조합을 나타내거나, X는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나의 R은 메틸이다. 일부 실시형태에서, Pol은 펩티드, 아미노산 또는 이의 탈수 유도체, PEG, 또는 -CH2-CH2-O-를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 아미노산의 탈수 유도체는 를 포함하고, 상기 식에서 파선 결합(wavy bond)은 링커 또는 후속 단량체에 대한 부착 지점을 나타내고, R은 아미노산 측쇄를 나타낸다.
일부 실시형태에서, 클릭 반응 생성물은 클릭 반응을 통해 형성된 모이어티를 포함하며, 여기서 클릭 반응은 상기에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 클릭 반응 생성물은 말레이미드와 티올의 마이클 첨가(석신이미드-티오에테르의 형성을 초래함); 아지드 알킨 고리첨가; 딜스-앨더 반응(예를 들어 직접 및/또는 역전자 수요 딜스 앨더); 디벤질 사이클로옥틴 1,3-니트론(또는 아지드) 고리첨가; 알켄 테트라졸 광클릭 반응, 또는 이들의 조합 중 임의의 것에 의해서 형성된 생성물을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 하기 화학식 1A에 표현되고:
,
상기 식에서, R, n, k, l, p, m, Pol, 및 r은 본원에 기재된 바와 같고, 각각의 X는 독립적으로 헤테로원자(예를 들어, O, N, NH, 또는 S), 스페이서(예를 들어, C1-C10 알킬, C1-C10 아미노알킬, C1-C10 알콕시, C1-C10 메르캅토알킬, 또는 클릭 반응 생성물) 또는 이들의 조합을 나타내거나, X는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, Pol은 아미노산 또는 이의 탈수 유도체, 또는 -CH2-CH2-O-를 나타낸다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 이황화 결합을 통해 HSA에 결합된다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 링커는 본 발명의 페이로드의 아미노 기 또는 티올 기에 공유 결합된다. 일부 실시형태에서, 각각의 HSA는 단일 생물학적 페이로드에 결합된다. 일부 실시형태에서, 각각의 HSA는 복수의 페이로드에 결합된다. 본 발명의 예시적인 단백질 접합체는 도 4a 내지 도 4b 및 도 13a 내지 도 13d 및 하기 표 1에 나타나 있다.
[표 1]
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 생물학적 유체에서 적어도 2시간, 적어도 10시간, 적어도 24시간, 적어도 48시간(이들 사이의 임의의 범위 포함) 동안 실질적으로 안정적이다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체의 적어도 25%, 적어도 50%, 적어도 75%, 적어도 90%(이들 사이의 임의의 범위 포함)는 이들 사이의 임의의 범위를 포함하여 실질적으로 안정적이다.
본원에서 사용되는, 용어 "안정적인"은 본 발명의 단백질 접합체 또는 링커가 이의 화학적 온전성을 유지하는(예를 들어, 절단이 없음) 능력을 지칭한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체의 적어도 25%, 적어도 50%, 적어도 75%, 적어도 90%는 양의 제타 전위를 특징으로 한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체의 적어도 25%, 적어도 50%, 적어도 75%, 적어도 90%는 음의 제타 전위를 특징으로 한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 담체는 적어도 1 mV, 적어도 5 mV, 적어도 10 mV, 적어도 15 mV, 적어도 20 mV, 적어도 30 mV(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 평균 양의 제타 전위를 특징으로 한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 담체는 적어도 5 mV, 적어도 6 mV, 적어도 7 mV, 적어도 8 mV, 적어도 9 mV, 적어도 10 mV, 적어도 15 mV(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 평균 양의 제타 전위를 특징으로 한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체는 5 내지 50 mV, 6 내지 50 mV, 7 내지 50 mV, 8 내지 50 mV, 8 내지 40 mV, 8 내지 30 mV, 8 내지 20 mV, 10 내지 50 ㎷, 10 내지 40 mV, 10 내지 30 mV, 10 내지 20 mV, 20 내지 50 mV, 30 내지 50 mV(이들 사이의 임의의 범위 포함)의 평균 양의 제타 전위를 특징으로 한다.
일부 실시형태에서, 치환체는 각각 독립적으로 C1-C6 알킬, 할로, -NO2, -CN, -OH, -NH2, 카르보닐, -CONH2, -CONR'2, -CNNR2, -CSNR2, -CONH-OH, -CONH-NH2, -NHCOR', -NHCSR', -NHCNR', -NC(=O)OR', -NC(=O)NR', -NC(=S)OR', -NC(=S)NR', -SO2R', -SOR', -SR', -SO2OR', -SO2N(R')2, -NHNR'2, -NNR', -NH(C1-C6 알킬), -N(C1-C6 알킬)2, C1-C6 알콕시, C1-C6 할로알콕시, 히드록시(C1-C6 알킬), 히드록시(C1-C6 알콕시), 알콕시(C1-C6 알킬), 알콕시(C1-C6 알콕시), 아미노(C1-C6 알킬), -CONH(C1-C6 알킬), -CON(C1-C6 알킬)2, -CO2H, -CO2R', -OCOR', -OCOR', -OC(=O)OR', -OC(=O)NR', -OC(=S)OR', -OC(=S)NR'로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체를 포함하고, 각각의 R'는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 아릴, 헤테로아릴 헤테로원자, 선택적으로 치환된 사이클로알킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴 또는 이들의 임의의 조합으로부터 선택된다.
키트
또 다른 양태에서, 제1 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체 및 페이로드를 포함하는 키트가 제공되며, 여기서 제1 모이어티는 페이로드에 대한 반응성을 특징으로 한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 제2 모이어티에 공유 결합되며, 여기서 제1 모이어티 및 제2 모이어티는 (예를 들어, 클릭 반응을 통한) 서로에 대한 반응성을 갖는다.
일부 실시형태에서, 제1 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체는 하기 화학식 2:
,
또는 하기 화학식 2A로 표현되고:
, 상기 식에서, R, n, j, l, p, m, 및 r은 본원에 기재된 바와 같고, A는 O, NR, 및 S로부터 선택된 헤테로원자이거나 이를 포함하고, R1은 제1 모이어티를 나타낸다.
일부 실시형태에서, 제2 모이어티에 공유 결합된 페이로드는 하기 화학식 3:
,
또는 하기 화학식 4로 표현되고:
, 상기 식에서, R, X, j, k, l, n, m, 및 p는 본원에 기재된 바와 같고, A는 A는 O, NR, 및 S로부터 선택된 헤테로원자이거나 이를 포함하고, R2는 제2 모이어티를 나타낸다.
일부 실시형태에서, 제1 모이어티 또는 제2 모이어티는 1,3-니트론, 아지드, 디엔, 테트라진, 활성 에스테르(예를 들어, 티오-에스테르, 펜타플루오로페닐 에스테르, N-히드록시석신이미드 에스테르), 아실 할라이드, 클로로포르메이트, 무수물, 알데히드, 에폭시드, 이소시아네이트, 이소티오시아네이트, 말레이미드, 카르보네이트, 설포닐 클로라이드, 아이오도아세트아미드, 아실 아지드, 이미도에스테르, 비닐 설폰, 오르토-피리딜-디설파이드 또는 이들의 임의의 조합이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 제1 모이어티 또는 제2 모이어티는 친핵성 기(예를 들어, 아민, 티올, 포스핀, 히드록실), 디에노파일(dienophile), 알켄, 알킨(예를 들어, 아세틸렌, 디벤질 사이클로옥틴 등), 또는 이들의 임의의 조합이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 키트는 HSA(예를 들어, 이의 시스테인 또는 리신)에 대한 반응성을 갖는 작용기를 포함하는 링커에 공유 결합된 페이로드; 및 HSA를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 키트는 페이로드(예를 들어, 이의 시스테인 또는 리신)에 대한 반응성을 갖는 작용기를 포함하는 링커에 공유 결합된 HSA; 및 페이로드를 포함한다. 일부 실시형태에서, 작용기는 아이오도아세트아미드, 활성 에스테르, 오르토-피리딜디설파이드, 말레이미드, 또는 이들의 조합 중 임의의 것이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 접합체는 혈액-안정적인 접합체이다. 일부 실시형태에서, 접합체는 세포-침투성 접합체이다. 일부 실시형태에서, 접합체는 세포 막 통과 접합체이다. 일부 실시형태에서, 접합체 세포에 유입될 수 있다. 일부 실시형태에서, 접합체는 엔도솜을 탈출할 수 있다. 일부 실시형태에서, 접합체는 페이로드를 세포내에 전달할 수 있다. 일부 실시형태에서, 세포내 전달은 세포질 전달이다. 일부 실시형태에서, 세포내 전달은 페이로드로부터의 담체의 해리를 포함한다. 일부 실시형태에서, 접합체는 세포질에서 해리되도록 구성된다. 일부 실시형태에서, 해리는 페이로드로부터의 담체의 해리이다. 일부 실시형태에서, 접합체는 세포내 표적을 조절하는 데 사용하기 위한 것이다. 일부 실시형태에서, 접합체는 세포내 표적 영향을 미치는 데 사용하기 위한 것이다. 일부 실시형태에서, 접합체는 세포내 표적과 상호작용하는 데 사용하기 위한 것이다.
방법
또 다른 양태에서, 단백질 접합체의 생산 방법이 제공되며, 이 방법은 세포내 표적에 결합하는 생물학적 작용제를 제공하는 것; 세포 침투성 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체를 제공하는 것; 상기 선택된 생물학적 작용제를 링커를 통해서 상기 선택된 단백질 담체에 공유 연결시켜 단백질 접합체를 생산하는 것; 인간 혈액, 혈장 또는 혈청에서 상기 링커의 안정성을 결정하는 것; 및 상기 인간 혈액, 혈장 또는 혈청에서 안정적인 링커를 포함하는 단백질 접합체를 선택하는 것을 포함하며; 이에 의해서 세포내 표적에 결합할 수 있는 단백질 접합체를 생산한다.
일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 세포내 표적에 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 세포의 세포질에 유입될 수 있다. 일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 생물학적 작용제를 세포내 전달할 수 있다. 일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 생물학적 작용제를 세포내 전달할 수 있다. 일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 세포내 표적을 조절할 수 있다. 일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 세포내 표적을 조절하도록 구성된다. 일부 실시형태에서, 생물학적 작용제는 이황화 결합이 없다. 일부 실시형태에서, 생물학적 작용제는 생물학적 작용제의 구조에 필요한 이황화 결합이 없다. 일부 실시형태에서, 생물학적 작용제는 생물학적 작용제의 기능에 필요한 이황화 결합이 없다. 일부 실시형태에서, 생물학적 작용제는 생물학적 작용제의 결합에 필요한 이황화 결합이 없다. 일부 실시형태에서, 생물학적 작용제는, 절단되는 경우 결합을 약화시키는 이황화 결합이 없다. 일부 실시형태에서, 결합은 세포내 표적에 대한 결합이다.
일부 실시형태에서, 페이로드는 세포내 표적에 결합한다고 알려져 있다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 세포내 표적에 결합한다고 입증되어 있다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 세포내 표적에 결합한다고 확인되어 있다. 일부 실시형태에서, 방법은 페이로드가 세포내 표적에 결합하는 것을 확인하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 생물학적 작용제이다.
일부 실시형태에서, 방법은 세포 내로의 전달을 확인하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 세포 내는 세포의 세포질 내이다. 일부 실시형태에서, 방법은 세포 내부에서 생물학적 작용제의 기능을 확인하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 세포 내부는 세포의 세포질 내이다. 일부 실시형태에서, 기능은 결합이다. 일부 실시형태에서, 기능은 조절이다.
일부 실시형태에서, 링커는 절단 가능한 결합을 포함한다. 일부 실시형태에서, 결합은 생물학적 절단 가능하다. 일부 실시형태에서, 방법은 세포질 조건에서 불안정한 단백질 접합체를 선택하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 방법은 세포질 조건에서 링커의 안정성을 결정하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 세포질 조건은 세포 내이다. 일부 실시형태에서, 세포질 조건은 글루타티온(GSH)의 존재 하이다. 일부 실시형태에서, 불안정한이라는 것은 혈액, 혈장 또는 혈청에서보다 덜 안정적인 것이다.
일부 실시형태에서, 안정적이라는 것은 1, 2, 3, 5, 7, 9, 10, 12, 15, 17, 20, 25, 30, 35, 40, 45 또는 50% 미만의 해리를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 안정적이라는 것은 적어도 4, 6, 12, 18, 24, 48, 72 또는 96시간 동안 안정적인 것이다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 안정적이라는 것은 96시간 후에 20% 미만의 해리를 포함한다. 일부 실시형태에서, 해리는 페이로드(예를 들어, 생물학적 작용제)로부터의 담체의 해리이다. 일부 실시형태에서, 불안정한이라는 것은 안정적이지 않은 임의의 상태이다. 일부 실시형태에서, 불안정한이라는 것은 안정적인 조건에서보다 더 큰 해리를 포함한다.
일부 실시형태에서, 링커는 상기 페이로드(예를 들어, 생물학적 작용제)의 활성 부위로부터 멀리에 연결된다. 일부 실시형태에서, 멀리는 원위이다. 일부 실시형태에서, 멀리는 근접한 것이 아니다. 일부 실시형태에서, 멀리는 적어도 5, 10, 15, 20, 30, 35, 40, 45, 50, 60,70, 80, 90 또는 100개 아미노산 멀리이다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 멀리는 적어도 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65 또는 70 옹스트롬이다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 당업자는 VHH의 C-말단이 마지막 CDR의 단부로부터 약 40 내지 50 옹스트롬 거리에 존재한다는 것을 알고 있을 것이다. 일부 실시형태에서, 멀리는 적어도 40 옹스트롬이다. 일부 실시형태에서, 멀리는 적어도 50 옹스트롬이다. 일부 실시형태에서, 연결은 작용제의 말단에 존재한다. 일부 실시형태에서, 말단은 N-말단이다. 일부 실시형태에서, 말단은 C-말단이다.
일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 치료제이다. 일부 실시형태에서, 치료제는 생물학적 치료제이다. 일부 실시형태에서, 치료제는 생물학적 제제이다. 일부 실시형태에서, 치료제는 세포내 표적에 대한 작용제이다. 일부 실시형태에서, 치료제는 세포내 표적을 표적으로 한다. 일부 실시형태에서, 치료제는 세포내 표적을 조절한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체의 합성 방법이 존재한다. 일부 실시형태에서, 방법은 본 발명의 키트를 제공하는 것 및 (예를 들어, 선택적으로 금속계 촉매 및/또는 UV-, 열-방사선을 포함하는 적합한 조건 하에서) 제1 모이어티 및 제2 모이어티를 반응시키는 것을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 단백질 접합체의 합성 방법은, (i) 제1 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체, 및 제2 모이어티에 공유 결합된 페이로드를 제공하는 것 - 제1 모이어티 및 제2 모이어티는 서로에 대해서 반응성을 가짐(예를 들어, 클릭 반응을 통해서, 티오-말레이미드 연결 형성을 통해서, 아민을 통해서 활성 에스테르 커플링에 대해서, 예컨대, SPDP 또는 니트로-SPDP와 티올의 반응에 의한 S-S 결합 형성을 통해서) -; 및 (ii) 제1 모이어티와 제2 모이어티 간의 반응에 적합한 조건 하에서 단백질 담체 및 페이로드를 제공하며, 이에 의해서 본 발명의 단백질 접합체를 합성하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 제1 모이어티 및 제2 모이어티는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 반응은 클릭 반응을 포함한다.
일부 실시형태에서, 방법은 페이로드(예를 들어, 이의 시스테인 또는 리신)에 대한 반응성을 갖는 작용기를 포함하는 링커에 공유 결합된 단백질 담체 및 페이로드를 제공하는 것; (ii)작용기와 페이로드를 반응시키며, 이에 의해서 본 발명의 단백질 접합체를 합성하는 것을 포함한다.
일부 실시형태에서, 방법은 단백질 담체(예를 들어, 이의 시스테인 또는 리신)에 대한 반응성을 갖는 작용기를 포함하는 링커에 공유 결합된 페이로드 및 단백질 담체를 제공하는 것; (ii)작용기와 단백질 담체를 반응시키며, 이에 의해서 본 발명의 단백질 접합체를 합성하는 것을 포함한다. 예시적인 합성 반응식은 도 36에 제시되어 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 방법에 의해 생산된 단백질 접합체가 제공된다.
조성물
또 다른 양태에서, 본 발명의 단백질 접합체를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.
일부 실시형태에서, 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 아주반트를 포함한다. 본원에서 사용되는, 용어 "담체", "부형제", 또는 "아주반트"는 활성제가 아닌 약학적 조성물의 임의의 성분을 지칭한다. 본원에서 사용되는, 용어 "약학적으로 허용 가능한 담체"는 비독성, 불활성 고체, 반고체 액체 충전제, 희석제, 캡슐화 물질, 임의의 유형의 제형 보조제, 또는 단순히 염수와 같은 멸균 수성 매질을 지칭한다. 약학적으로 허용 가능한 담체로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 당, 예컨대, 락토스, 글루코스 및 수크로스, 글리콜, 예컨대, 프로파일렌 글리콜, 폴리올, 예컨대, 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜; 에스테르, 예컨대, 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트, 무발열원수; 등장성 식염수, 링거액; 에틸알코올 및 인산염 완충 용액뿐만 아니라 약학적 제형에 사용되는 기타 비독성 상용성 물질이다. 본원에서 담체로서 작용할 수 있는 물질의 일부 비제한적인 예에는 당, 스테아르산, 마그네슘 스테아레이트, 황산칼슘, 폴리올, 무발열원수, 등장성 식염수, 포스페이트 완충 용액뿐만 아니라 다른 약학적 제형에 사용되는 다른 비독성의 약학적으로 상용성인 물질이 포함된다. 습윤제 및 나트륨 라우릴 설페이트와 같은 윤활제뿐만 아니라 부형제, 안정화제, 산화방지제, 및 방부제가 또한 존재할 수 있다. 임의의 비독성, 불활성, 및 효과적인 담체가 본원에서 고려되는 조성물을 제형화하는 데 사용될 수 있다.
담체는, 총계로, 본원에 제시된 약학적 조성물의 약 0.1 중량% 내지 약 99.99999 중량%를 구성할 수 있다.
일부 실시형태에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 본 발명의 단백질 접합체를 포함한다. "치료적 유효량"이라는 용어는, 포유동물에서 질병 또는 장애를 치료하는 데 효과적인 약물의 양을 말한다. "치료적 유효량"이라는 용어는 원하는 치료적 또는 예방적 결과를 얻는 데 필요한 투여량과 시기 동안 효과적인 양이다. 정확한 투여 형태 및 투여법은 환자의 상태에 따라 의사가 결정할 것이다.
일부 실시형태에서, 약학적 조성물은 전신 투여용으로 제형화된다. 일부 실시형태에서, 약학적 조성물은 국소 투여용으로 제형화된다. 일부 실시형태에서, 약학적 조성물은 정맥내 투여용으로 제형화된다. 일부 실시형태에서, 약학적 조성물은 대상체에게 투여하기 위해 제형화된다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 화합물은 치료를 위해서 유리 형태로 또는 약학적으로 허용 가능한 염으로서 존재할 수 있다.
본원에서 사용되는, 용어 "약학적으로 허용 가능한 염"은 대상체, 예를 들어, 인간에게 투여 시 직접적으로 또는 간접적으로 본 발명의 화합물을 제공할 수 있는 본 발명의 화합물의 임의의 비독성 염 또는 이의 저해적으로 활성인 대사산물 또는 잔류물을 지칭한다. 예를 들어, "약학적으로 허용 가능한"이라는 용어는 연방 정부 또는 주정부의 규제 기간에 의해 허가되거나 미국 약전 또는 동물 및 더 특히 인간에서 사용하기 위한 다른 일반적으로 인정된 약전에 열거됨을 의미할 수 있다.
약학적으로 허용 가능한 염은 당업계에 널리 알려져 있다. 예를 들어, S. M. Berge 등은 약학적으로 허용 가능한 염을 문헌[J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19]에 상세하게 기재한다. 본 발명의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 적합한 무기 및 유기 산 및 염기로부터 유래된 것을 포함한다. 이러한 염은 화합물의 최종 단리 및 정제 동안 동일계에서 제조될 수 있다. 산 부가 염은 1) 유리-염기 형태의 정제된 화합물을 적합한 유기 또는 무기 산과 반응시키고, 2) 이렇게 형성된 염을 단리시킴으로써 제조될 수 있다.
약학적으로 허용 가능한 염의 비제한적인 예는 아세테이트, 아스파르테이트, 벤젠설포네이트, 벤조에이트, 바이카르보네이트, 카르보네이트, 할라이드(예컨대, 브로마이드, 클로라이드, 아이오다이드, 플루오라이드), 바이타르트레이트, 시트레이트, 살리실레이트, 스테아레이트, 석시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 데카노에이트, 에데테이트, 푸마레이트, 글루코네이트 및 락테이트 또는 이들의 임의의 조합을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
약학적으로 허용 가능한 무독성 산 부가 염의 추가 예는 무기산, 예컨대, 염산, 브로민화수소산, 인산, 황산 및 과염소산 또는 유기산, 예컨대, 아세트산, 옥살산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 석신산 또는 말론산을 사용하여 또는 이온 교환과 같은 당업계에 사용되는 다른 방법을 사용하여 형성된 아미노 기의 염이다.
다른 약학적으로 허용 가능한 염은 아디페이트, 알기네이트, 아스코르베이트, 아스파르테이트, 벤젠설포네이트, 벤조에이트, 바이설페이트, 보레이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포르설페이트, 시트레이트, 사이클로펜타디엔 프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실설페이트, 에탄설페이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루코헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 글루코네이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드로아이오다이드, 2-히드록시-에탄설포네이트, 락토비오네이트, 락테이트, 라우레이트, 라우릴 설페이트, 말레이트, 말로네이트, 메탄설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 올레이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 팔모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 살리실레이트, 스테아레이트, 석시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, p-톨루엔설포네이트, 운도카노에이트, 발레르에이트 염 등을 포함한다.
염기 부가 염은 1) 산 형태의 정제된 화합물을 적합한 유기 또는 무기 염기와 반응시키고, 2) 이렇게 형성된 염을 단리시킴으로써 제조될 수 있다. 적절한 염기로부터 유래된 염은 알칼리 금속(예를 들어, 나트륨, 리튬 및 칼륨), 알칼리 토금속(예를 들어, 마그네슘 및 칼슘), 암모늄 및 N+(C1-4 알킬)4 염을 포함한다. 본 발명은 또한 본원에 개시된 화합물의 임의의 염기성 질소-함유 기의 4차화를 구상한다. 이러한 4차화를 통해 수용성, 유용성 또는 분산성 제품을 얻을 수 있다.
추가의 약학적으로 허용 가능한 염은 적절한 경우 반대이온, 예컨대, 할라이드, 히드록시드, 카르복실레이트, 설페이트, 포스페이트, 니트레이트, 저급알킬 설포네이트 아릴 설포네이트를 사용하여 형성된 무독성 암모늄, 4급 암모늄 및 아민 양이온을 포함한다. 그 자체로는 약학적으로 허용 가능하지 않은 다른 산 및 염기가 본 발명의 화합물 및 이의 약학적으로 허용 가능한 산 또는 염기 부가 염을 얻는 데 중간체로서 유용한 염의 제조에 사용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 용어 "하나 이상"은 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 중에서 선택된 임의의 수치 값을 지칭한다. 일부 실시형태에서, 헤테로원자는 N, O, NH 또는 S 중 임의의 것을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본원에 기재된 화합물은 키랄 화합물(즉, 비대칭 탄소 원자를 가짐)이다. 일부 실시형태에서, 부분입체이성질체, 기하 이성질체 및 개별 이성질체가 본 발명의 범주에 포함된다. 일부 실시형태에서, 본원에 기재된 키랄 화합물은 라세미 혼합물의 형태이다. 일부 실시형태에서, 키랄 화합물은 R 배위를 갖는 비대칭 탄소 원자를 갖는 단일 거울상이성질체의 형태이다. 일부 실시형태에서, 키랄 화합물은 상기에 기재된 바와 같은 S 배위를 갖는 비대칭 탄소 원자를 갖는 단일 거울상이성질체의 형태이다.
일부 실시형태에서, 키랄 화합물은 70% 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는 단일 거울상이성질체의 형태이다. 일부 실시형태에서, 키랄 화합물은 80% 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는 단일 거울상이성질체의 형태이다. 일부 실시형태에서, 키랄 화합물은 90% 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는 단일 거울상이성질체의 형태이다. 일부 실시형태에서, 키랄 화합물은 95% 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는 단일 거울상이성질체의 형태이다.
일부 실시형태에서, 불포화 결합을 포함하는 본 발명의 화합물은 트랜스- 또는 시스-이성질체 형태이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 상기에 기재된 바와 같은 시스-이성질체와 트랜스-이성질체의 혼합물을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본원에 기재된 화합물은 수화된 형태를 포함하여 용매화된 형태뿐만 아니라 비용매화된 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 용매화된 형태는 비용매화된 형태와 동등하며 본 발명의 범위 내에 포함된다. 본 발명의 특정 화합물은 다중 결정질 또는 무정형 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 모든 물리적 형태는 본 발명에 의해 고려되는 용도에 대해서 동등하며 본 발명의 범주 내에 포함되도록 의도된다.
용어 "용매화물"은 용질(본원에 기재된 접합체) 및 용질의 생물학적 활성을 방해하지 않는 용매에 의해 형성되는 가변 화학량론(예를 들어, 디-, 트리-, 테트라-, 펜타-, 헥사- 등)의 복합체를 지칭한다. 적합한 용매는 예를 들어, 에탄올, 아세트산 등을 포함한다.
용어 "수화물"은 상기에 정의된 바와 같은 용매화물을 지칭하며, 여기서 용매는 물이다.
달리 제시되지 않는 한, 본원에 도시된 구조는 또한 그 구조의 모든 이성질체(예를 들어, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 기하, 입체배좌 및 회전) 형태를 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 각각의 비대칭 중심에 대한 R 및 S 배위, (Z) 및 (E) 이중 결합 이성질체, (Z) 및 (E) 입체배좌 이성질체가 본 발명에 포함된다. 당업자가 이해하는 바와 같이, 치환체는 임의의 회전 가능한 결합 주위를 자유롭게 회전할 수 있다. 따라서, 본 화합물의 단일 입체화학 이성질체뿐만 아니라 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 기하, 입체배좌 및 회전 혼합물이 또한 본 발명의 범위 내에 있다.
달리 제시하지 않는 한, 본 발명의 화합물의 모든 호변이성질체 형태는 본 발명의 범위 내에 있다.
추가로, 달리 제시하지 않는 한, 본원에 도시된 구조는 또한 하나 이상의 동위원소가 풍부한 원자의 존재만 상이한 화합물을 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 중수소 또는 삼중수소에 의한 수소의 대체, 또는 18F에 의한 수소의 대체, 또는 13C- 또는 14C-풍부 탄소에 의한 탄소의 대체를 제외하고 본 구조를 갖는 화합물은 본 발명의 범주 내에 있다. 이러한 화합물은 예를 들어, 영상화 프로브로서 유용하다.
사용 방법
또 다른 양태에서, 세포내 표적에 결합하는 방법이 제공되며, 이 방법은 세포내 표적을 발현하는 세포를 본 발명의 단백질 접합체 또는 본 발명의 약학적 조성물과 접촉시키고, 이에 의해서 세포내 표적에 결합시키는 것을 포함한다.
일부 실시형태에서, 방법은 세포내 표적을 조절하는 방법이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 세포내 표적에 결합한다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 세포내 표적을 조절한다. 일부 실시형태에서, 변형은 효능작용성이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 세포내 표적의 효능제이다. 일부 실시형태에서, 변형은 길항작용성이다. 일부 실시형태에서, 페이로드는 길항제이다. 조절하는(즉, 길항작용하거나 효능작용하는) 분자는 당업계에 널리 알려져 있고, 임의의 이러한 분자가 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 생물학적 표적은 세포내 표적에 특이적이다.
일부 실시형태에서, 방법은 세포내 표적을 검출하는 방법이다. 일부 실시형태에서, 단백질 접합체는 검출 가능한 태그를 포함한다. 일부 실시형태에서, 태그는 검출 가능한 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 방법은 단백질 접합체를 검출하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 방법은 검출 가능한 태그를 검출하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 검출 가능한 태그는 형광 태그이다. 검출 가능한 태그 및 모이어티는 당업계에 널리 알려져 있고, 비제한적인 예는 형광단(예를 들어, GFP, RFP, YFP, 루시퍼라제 등), 방사성 태그 및 착색 태그)을 포함한다. 이러한 알려진 태그가 사용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 세포는 대상체 내에 존재한다. 일부 실시형태에서, 대상체는 포유동물이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 인간이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 질환 또는 병태를 앓고 있다. 일부 실시형태에서, 질환 또는 병태는 세포내 표적을 접촉함으로써 치료될 수 있다. 일부 실시형태에서, 질환 또는 병태는 세포내 표적을 조절함으로써 치료될 수 있다. 일부 실시형태에서, 질환 또는 병태는 세포내 표적을 효능작용함으로써 치료될 수 있다. 일부 실시형태에서, 질환 또는 병태는 세포내 표적을 길항작용함으로써 치료될 수 있다. 일부 실시형태에서, 대상체는 세포내 표적의 조절을 필요로 한다. 일부 실시형태에서, 대상체는 치료를 필요로 한다. 일부 실시형태에서, 대상체는 이를 필요로 하는 대상체이다.
일부 실시형태에서, 방법은 대상체에게 본 발명의 단백질 접합체를 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 방법은 본 발명의 약학적 조성물을 대상체에 투여하는 단계를 포함한다.
본원에서 사용되는, 용어 "투여하는", "투여" 및 유사 용어는 건전한 의료 관행에서, 치료 효과를 제공하는 방식으로 활성제를 함유하는 조성물을 대상체에 전달하는 임의의 방법을 지칭한다. 본 발명 요지의 일 양태는 본 발명 요지의 조성물의 치료적 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 정맥내 투여하는 것을 제공한다. 다른 적합한 투여 경로는 비경구, 피하, 경구, 근육내, 종양내 또는 복막내를 포함할 수 있다.
투여되는 투여량은 수용자의 연령, 건강, 및 체중, 존재하는 경우 병행 치료의 종류, 치료의 빈도, 및 원하는 효과의 성질에 좌우될 것이다.
일부 실시형태에서, 질환 또는 병태는 암이다. 일부 실시형태에서, 세포내 표적은 종양유전자이고, 페이로드는 길항제이다. 일부 실시형태에서, 세포내 표적은 종양 억제인자이고 페이로드는 효능제이다.
일부 실시형태에서, 접촉시키는 것은, 단백질 접합체의 세포 내로의 침투를 유도하도록 설계된 작용제의 존재 하에서 일어나지 않는다. 일부 실시형태에서, 침투를 유도하도록 설계된 작용제는 담체 단백질 이외의 작용제이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 방법과 다른 세포 침투를 유도하는 또 다른 방법은 사용되지 않는다.
본원에서 사용되는, 용어 "알킬"은 직쇄형 및 분지쇄형 기를 포함하고 일반적으로 1 내지 30개, 또는 1 내지 10개의 탄소 원자를 포함하는 지방족 탄화수소를 기술한다. 본원에서 사용되는 용어 "알킬"은 또한 포화 또는 불포화 탄화수소를 포함하며, 따라서 이 용어는 알케닐 및 알키닐을 추가로 포함한다.
용어 "알케닐"은 적어도 2개의 탄소 원자 및 적어도 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 본원에 정의된 바와 같은 불포화 알킬을 기술한다. 알케닐은 상기 기재된 바와 같이 하나 이상의 치환체에 의해 치환되거나 비치환될 수 있다.
본원에 정의된 용어 "알키닐"은 적어도 2개의 탄소 원자 및 적어도 1개의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는 불포화 알킬이다. 알키닐은 상기에 기재된 바와 같이 하나 이상의 치환체로 치환 또는 비치환될 수 있다.
"사이클로알킬"이라는 용어는 하나 이상의 고리가 완전히 공액된 파이-전자 시스템을 갖지 않는 전체-탄소 모노사이클릭 또는 융합된 고리(즉, 인접한 탄소 원자 쌍을 공유하는 고리) 기를 기술한다. 사이클로알킬 기는 본원에 제시된 바와 같이 치환되거나 비치환될 수 있다.
용어 "아릴"은 완전히 공액된 파이-전자 시스템을 갖는 전체-탄소 모노사이클릭 또는 융합된 고리 폴리사이클릭(즉, 인접한 탄소 원자 쌍을 공유하는 고리) 기를 기술한다. 아릴 기는 본원에 제시된 바와 같이 치환되거나 비치 환될 수 있다.
용어 "알콕시"는 본원에 정의된 바와 같이 -O-알킬 및 -O-사이클로알킬 기를 모두 기술한다. 용어 "아릴옥시"는 본원에 정의된 바와 같이 -O-아릴을 기술한다.
본원의 일반식에서 알킬, 사이클로알킬 및 아릴기는 각각 하나 이상의 치환체로 치환될 수 있으며, 이에 의해 각각의 치환체는 독립적으로 예를 들어, 치환된 기 및 분자 내 이의 위치에 따라, 할라이드, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 니트로, 아미노, 히드록실, 티올, 티오알콕시, 카르복시, 아미드, 아릴 및 아릴옥시일 수 있다. 추가의 치환체도 고려된다.
용어 "할라이드", "할로겐" 또는 "할로"는 불소, 염소, 브로민 또는 아이오딘을 기술한다. 용어 "할로알킬"은 하나 이상의 할라이드(들)에 의해 추가로 치환된, 본원에 정의된 바와 같은 알킬 기를 기술한다. "할로알콕시"라는 용어는 하나 이상의 할라이드(들)에 의해 추가로 치환된 본원에 정의된 바와 같은 알콕시 기를 기술한다. 용어 "히드록실" 또는 "히드록시"는 -OH 기를 기술한다. 용어 "메르캅토" 또는 "티올"은 -SH 기를 기술한다. 용어 "티오알콕시"는 본원에 정의된 바와 같이 -S-알킬 기 및 -S-사이클로알킬 기를 모두 기술한다. 용어 "티오아릴옥시"는 본원에 정의된 바와 같이 -S-아릴 및 -S-헤테로아릴 기를 모두 기술한다. 용어 "아미노"는 -NR'R'' 기 또는 이의 염을 기술하며, R' 및 R''는 본원에 기재된 바와 같다.
용어 "헤테로사이클릴"은 고리(들)에 질소, 산소 및 황과 같은 하나 이상의 원자를 갖는 모노사이클릭 또는 융합된 고리 기를 기술한다. 고리는 또한 하나 이상의 이중 결합을 가질 수 있다. 그러나 고리에는 완전히 공액된 파이-전자 시스템이 없다. 대표적인 예는 피페리딘, 피페라진, 테트라히드로푸란, 테트라히드로피란, 모르폴리노 등이다.
용어 "카르복시"는 -C(O)OR' 기 또는 이의 카르복실레이트 염 - 여기서 R'는 수소, 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 헤테로아릴(고리 탄소를 통해 결합됨) 또는 헤테로사이클릴(고리 탄소를 통해 결합됨)은 본원에 정의된 바와 같음 - 또는 "카르복실레이트"를 기술한다.
용어 "카르보닐"은 -C(=O)-R' 기를 기술하며, 여기서 R'는 상기에 정의된 바와 같다. 상기 용어는 또한 이의 티오-유도체(티오카르복시 및 티오카르보닐)를 포함한다.
용어 "티오카르보닐"은 -C(S)R' 기를 기술하며, 여기서 R'는 상기에 정의된 바와 같다. "티오카르복시" 기는 -C(S)OR' 기를 기술하며, 여기서 R'는 본원에 정의된 바와 같다. "설피닐" 기는 -S(O)R' 기를 기술하며, 여기서 R'는 본원에 정의된 바와 같다. "설포닐" 또는 "설포네이트" 기는 -S(O)2R' 기를 기술하며, 여기서 R'는 본원에 정의된 바와 같다.
"카르바밀" 또는 "카르바메이트" 기는 -OC(=O)-NR'R" 기를 기술하며, 여기서 R'는 본원에 정의된 바와 같고 R"는 R'에 대해 정의된 바와 같다. "니트로" 기는 -NO2 기를 지칭한다. 본원에서 사용되는 용어 "아미드"는 C-아미드 및 N-아미드를 포함한다. 용어 "C-아미드"는 -C(O)NR'R" 단부 기 또는 -C(O)NR'-연결 기를 기술하며, 이러한 어구는 상기에 정의한 바와 같고, 여기서 R' 및 R"은 본원에 정의된 바와 같다. 용어 "N-아미드"는 -NR'C(O)R' 단부 기 또는 -NR'C(O)- 연결 기를 기술하며, 이러한 어구는 상기에 정의한 바와 같고, 여기서 R' 및 R"은 본원에 정의된 바와 같다.
"시아노" 또는 "니트릴" 기는 -CN 기를 지칭한다. 용어 "아조" 또는 "디아조"는 -N=NR' 단부 기 또는 -N=N- 연결 기를 기술하며, 이러한 어구는 상기에 정의되어 있고, R'은 상기에 정의된 바와 같다. 용어 "구아니딘"은 -R'NC(N)NR"R"' 단부 기 또는 -R'NC(N) NR"- 연결 기를 기술하며, 이러한 어구는 상기에 정의된 바와 같고, 여기서 R', R" 및 R'"는 본원에 정의된 바와 같다. 본원에서 사용되는 용어 "아지드"는 -N3 기를 지칭한다. 용어 "설폰아미드"는 -S(O)2NR'R'' 기를 지칭하며, 여기서 R' 및 R"는 본원에 정의된 바와 같다.
용어 "포스포닐" 또는 "포스포네이트"는 -OP(O)-(OR')2 기를 기술하며, 여기서 R'는 상기에 정의된 바와 같다. 용어 "포스피닐"은 -PR'R" 기를 기술하며, 여기서 R' 및 R"는 상기에 정의된 바와 같다. 용어 "알킬아릴"은 본원에 기재된 바와 같은 아릴에 의해 치환된, 본원에 정의된 바와 같은 알킬을 기술한다. 예시적인 알킬아릴은 벤질이다.
용어 "헤테로아릴"은 고리(들)에 예를 들어 질소, 산소 및 황과 같은 하나 이상의 원자를 갖고, 추가로 완전히 공액된 파이-전자 시스템을 갖는 모노사이클릭 또는 융합된 고리(즉, 인접한 원자 쌍을 공유하는 고리) 기를 기술한다. 본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴"은, 방향족 고리를 형성하는 적어도 하나의 원자가 헤테로원자인 방향족 고리를 지칭한다. 헤테로아릴 고리는 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 9개 초과의 원자에 의해 형성될 수 있다. 헤테로아릴 기는 선택적으로 치환될 수 있다. 헤테로아릴 기의 예에는, 예를 들면, 고리 형성 탄소 원자 중 하나를 통해 연결된, 1개의 산소 또는 황 원자, 또는 2개의 산소 원자, 또는 2개의 황 원자 또는 최대 4개의 질소 원자, 또는 1개의 산소 또는 황 원자와 최대 2개의 질소 원자의 조합을 함유하는 방향족 C3-8 헤테로사이클릭 기, 및 이것들의 치환된 그리고 벤조- 및 피리도-융합 유도체를 포함하지만 이것들로 제한되지 않는다. 특정 실시형태에서, 헤테로아릴은 옥사졸릴, 이속사졸릴, 옥사디아졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 피리디닐, 피리다지닐, 피리미디날, 피라지닐, 인돌릴, 벤즈이미다졸릴, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴나졸리닐 또는 퀴녹살리닐로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, 헤테로아릴 기는 피롤릴, 푸라닐(푸릴), 티오페닐(티에닐), 이미다졸릴, 피라졸릴, 1,2,3-트리아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 1,3-옥사졸릴(옥사졸릴), 1,2-옥사졸릴(이속사졸릴), 옥사디아졸릴, 1,3-티아졸릴(티아졸릴), 1,2-티아졸릴(이소티아졸릴), 테트라졸릴, 피리디닐(피리딜) 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 1,2,3-트리아지닐, 1,2,4-트리아지닐, 1,3,5-트리아지닐, 1,2,4,5-테트라지닐, 인다졸릴, 인돌릴, 벤조티오페닐, 벤조푸라닐, 벤조티아졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조디옥솔릴, 아크리디닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 프탈라지닐, 티에노티오페닐, 1,8-나프티리디닐, 기타 나프티리디닐, 프테리디닐 또는 페노티아지닐로부터 선택된다. 상기 헤테로아릴 기가 하나 초과의 고리를 포함하는 경우에, 각각의 추가 고리는 포화 형태(퍼히드로 형태) 또는 부분적 불포화 형태(예를 들면, 디히드로 형태 또는 테트라히드로 형태) 또는 최대 불포화(비방향족) 형태이다. 따라서 용어 헤테로아릴은 2개의 고리가 방향족인 바이사이클릭 라디칼 및 오직 하나의 고리만이 방향족인 바이사이클릭 라디칼을 포함한다. 헤테로아릴의 그와 같은 예에는 3H-인돌리닐, 2(1H)-퀴놀리노닐, 4-옥소-1,4-디히드로퀴놀리닐, 2H-1-옥소이소퀴놀릴, 1,2-디히드로퀴놀리닐, (2H)퀴놀리닐 N-옥사이드, 3,4-디히드로퀴놀리닐, 1,2-디히드로이소퀴놀리닐, 3,4-디히드로-이소퀴놀리닐, 크로모닐, 3,4-디히드로이소퀴녹살리닐, 4-(3H)퀴나졸리노닐, 4H-크로메닐, 4-크로마노닐, 옥신돌릴, 1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀리닐, 1,2,3,4-테트라히드로-퀴놀리닐, 1H-2,3-디히드로이소인돌릴, 2,3-디히드로벤조[f]이소인돌릴, 1,2,3,4-테트라히드로벤조-[g]이소퀴놀리닐, 1,2,3,4-테트라히드로-벤조[g]이소퀴놀리닐, 크로마닐, 이소크로마노닐, 2,3-디히드로크로모닐, 1,4-벤조-디옥사닐, 1,2,3,4-테트라히드로-퀴녹살리닐, 5,6-디히드로-퀴놀릴, 5,6-디히드로이소-퀴놀릴, 5,6-디히드로퀴녹살리닐, 5,6-디히드로퀴나졸리닐, 4,5-디히드로-1H-벤즈이미다졸릴, 4,5-디히드로-벤즈옥사졸릴, 1,4-나프토퀴놀릴, 5,6,7,8-테트라히드로-퀴놀리닐, 5,6,7,8-테트라히드로-이소퀴놀릴, 5,6,7,8-테트라히드로퀴녹살리닐, 5,6,7,8-테트라히드로퀴나졸릴, 4,5,6,7-테트라히드로-1H-벤즈이미다졸릴, 4,5,6,7-테트라히드로-벤즈옥사졸릴, 1H-4-옥사-1,5-디아자-나프탈렌-2-오닐, 1,3-디히드로이미디졸로-[4,5]-피리딘-2-오닐, 2,3-디히드로-1,4-디나프토-퀴노닐, 2,3-디히드로-1H-피롤[3,4-b]퀴놀리닐, 1,2,3,4-테트라히드로벤조[b]-[1,7]나프티리디닐, 1,2,3,4-테트라히드로벤즈[b][1,6]-나프티리디닐, 1,2,3,4-테트라히드로-9H-피리도[3,4-b]인돌릴, 1,2,3,4-테트라히드로-9H-피리도[4,3-b]인돌릴, 2,3-디히드로-1H-피롤로-[3,4-b]인돌릴, 1H-2,3,4,5-테트라히드로-아제피노[3,4-b]인돌릴, 1H-2,3,4,5-테트라히드로아제피노-[4,3-b]인돌릴, 1H-2,3,4,5-테트라히드로-아제피노[4,5-b]인돌릴, 5,6,7,8-테트라히드로[1,7]나프티리디닐, 1,2,3,4-테트라히드로-[2,7]-나프티리딜, 2,3-디히드로[1,4]디옥시노[2,3-b]피리딜, 2,3-디히드로[1,4]-디옥시노[2,3-b]피리딜, 3,4-디히드로-2H-1-옥사[4,6]디아자나프탈레닐, 4,5,6,7-테트라히드로-3H-이미다조 -[4,5-c]피리딜, 6,7-디히드로[5,8]디아자나프탈레닐, 1,2,3,4-테트라히드로[1,5]-나프티리디닐, 1,2,3,4-테트라히드로[1,6]나프티리디닐, 1,2,3,4-테트라히드로[1,7]나프티리디닐, 1,2,3,4-테트라히드로-[1,8]나프티리디닐 또는 1,2,3,4-테트라히드로[2, 6]나프티리디닐이 포함된다. 일부 실시형태에서, 헤테로아릴 기는 선택적으로 치환된다. 일 실시형태에서, 하나 초과의 치환체는 할로, 히드록시, 아미노, 시아노, 니트로, 알킬아미도, 아실, C1-6-알킬, C1-6-할로알킬, C1-6-히드록시알킬, C1-6-아미노알킬, C1-6-알킬아미노, 알킬설페닐, 알킬설피닐, 알킬설포닐, 설파모일, 또는 트리플루오로메틸로부터 각각 독립적으로 선택된다.
헤테로아릴 기의 예에는 푸란, 벤조푸란, 티오펜, 벤조티오펜, 피롤, 피리딘, 인돌, 옥사졸, 벤즈옥사졸, 이속사졸, 벤즈이속사졸, 티아졸, 벤조티아졸, 이소티아졸, 이미다졸, 벤즈이미다졸, 피라졸, 인다졸, 테트라졸, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 피리다진, 피리미딘, 퓨린 및 피라진, 푸라잔, 1,2,3-옥사디아졸, 1,2,3-티아디아졸, 1,2,4-티아디아졸, 트리아졸, 벤조트리아졸, 프테리딘, 페녹사졸, 옥사디아졸, 벤조피라졸, 퀴놀리진, 신놀린, 프탈라진, 퀴나졸린 및 퀴녹살린의 치환되지 않고 일- 또는 이-치환된 유도체가 포함되지만 이것들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, 상기 치환체는 할로, 히드록시, 시아노, O-C1-6-알킬, C1-6-알킬, 히드록시-C1-6-알킬 및 아미노-C1-6-알킬이다.
본원에서 사용되는, 용어 "할로" 및 "할라이드"는 본원에서 상호교환가능하게 지칭되고, 할로겐의 원자, 즉 불소, 염소, 브롬 또는 아이오다이드를 기술하며, 또한 본원에서 플루오라이드, 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드로 지칭된다.
본원에서 사용되는, 용어 "약"은 소정 값과 조합될 때 기준값의 플러스 및 마이너스 10%를 지칭한다. 예를 들어, 약 1000 나노미터(nm) 길이는 1000 nm +/- 100 nm 길이를 지칭한다.
본원 및 첨부된 청구범위에서 사용되는, 단수 형태("a", "an", 및 "the")는, 문맥이 명확하게 달리 지시하지 않으면, 복수의 지시 대상을 포함한다는 것에 유의한다. 따라서, 예를 들어, "폴리뉴클레오티드"에 대한 언급은 복수의 그러한 폴리뉴클레오티드를 포함하고 "폴리펩티드"에 대한 언급은 하나 이상의 폴리펩티드 및 당업자에게 알려진 이의 등가물 등에 대한 언급을 포함한다. 또한, 청구범위는 임의의 선택적인 요소를 배제하도록 작성될 수 있음에 유의한다. 그러한 바와 같이, 이러한 언급은 청구범위 요소의 인용 또는 "부정적" 제한의 사용과 관련하여 "오로지", "단지" 등과 같은 배타적인 용어의 사용에 대한 선행 근거(antecedent basis)로서의 역할을 하도록 의도된다.
"A, B, 및 C 등 중 적어도 하나"와 유사한 관례가 사용되는 경우에, 일반적으로 이러한 구성은 당업자가 관례를 이해할 것이라는 의미로 의도된다(예를 들어, "A, B, 및 C 중 적어도 하나를 갖는 시스템"은 A 단독, B 단독, C 단독, A 및 B 함께, A 및 C 함께, B 및 C 함께, 및/또는 A, B, 및 C 함께 등을 갖는 시스템을 포함할 수 있으나 이에 제한되지 않는다). 2개 이상의 대안적인 용어를 제시하는 사실상 임의의 이접적(disjunctive) 단어 및/또는 어구는 설명, 청구범위, 또는 도면에서든 용어들 중 하나, 용어들 중 어느 하나, 또는 용어 둘 다를 포함할 가능성을 고려하기 위해 이해되어야 함이 당업자에 의해 추가로 이해될 것이다. 예를 들어, 문구 "A 또는 B"는 "A"또는 "B"또는 "A 및 B"의 가능성을 포함하는 것으로 이해될 것이다.
명료함을 위하여, 개별적인 실시형태와 관련하여 기재된 본 발명의 소정 특징이 또한 단일 실시형태에서 조합되어 제공될 수 있음이 인식되어야 한다. 역으로, 간결함을 위하여, 단일 실시형태와 관련하여 기재된 본 발명의 다양한 특징이 또한 개별적으로 또는 임의의 적합한 하위조합으로 제공될 수 있다. 본 발명에 속하는 실시형태의 모든 조합은 본 발명에 의해 구체적으로 포함되며 마치 각각 하나하나의 모든 조합이 개별적으로 그리고 명시적으로 개시된 것처럼 본원에 개시된다. 또한, 다양한 실시형태 및 이의 요소의 모든 하위조합이 또한 본 발명에 의해 구체적으로 포함되며 마치 각각 하나하나의 모든 그러한 하위조합이 개별적으로 그리고 명시적으로 본원에 개시된 것처럼 본원에 개시된다.
본 발명의 추가적인 목적, 이점, 및 신규 특징은 제한하려는 의도가 아니라 하기 실시예의 조사 시 당업자에게 명백하게 될 것이다. 추가적으로, 상기에 기술되고 하기 청구범위 부분에서 청구된 바와 같은 본 발명의 다양한 실시형태 및 양태는 각각 하기 실시예에서 실험적 지지를 찾는다.
상기 기술되고 하기 청구범위 섹션에서 청구된 바와 같은 본 발명의 다양한 실시형태 및 양태는 하기 실시예에서 실험적 뒷받침을 발견한다.
실시예
일반적으로, 본원에 사용되는 명명법 및 본 발명에 활용되는 실험실 절차는 분자, 생화학, 미생물 및 재조합 DNA 기법을 포함한다. 이러한 기법은 문헌에 자세히 설명되어 있다. 예를 들어, 문헌["Molecular Cloning: A laboratory Manual" Sambrook et al., (1989)]; 문헌["Current Protocols in Molecular Biology" Volumes I-III Ausubel, R. M., ed. (1994)]; 문헌[Ausubel et al., "Current Protocols in Molecular Biology", John Wiley and Sons, Baltimore, Maryland (1989)]; 문헌[Perbal, "A Practical Guide to Molecular Cloning", John Wiley & Sons, New York (1988)]; 문헌[Watson et al., "Recombinant DNA", Scientific American Books, New York]; 문헌[Birren et al. (eds) "Genome Analysis: A Laboratory Manual Series", Vols. 1--4, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York (1998)]; 미국 특허 제4,666,828호; 제4,683,202호; 제4,801,531호; 제5,192,659호 및 제5,272,057호에 제시된 바와 같은 방법; 문헌["Cell Biology: A Laboratory Handbook", Volumes I-III Cellis, J. E., ed. (1994)]; 문헌["Culture of Animal Cells - A Manual of Basic Technique" by Freshney, Wiley-Liss, N. Y. (1994), Third Edition]; 문헌["Current Protocols in Immunology" Volumes I-III Coligan J. E., ed. (1994)]; 문헌[Stites et al. (eds), "Basic and Clinical Immunology" (8th Edition), Appleton & Lange, Norwalk, CT (1994)]; 문헌[Mishell and Shiigi (eds), "Strategies for Protein Purification and Characterization - A Laboratory Course Manual" CSHL Press (1996)]을 참조하며, 이들 모두는 참고로 포함된다. 다른 일반적인 참고문헌이 본 문서 전체에 걸쳐 제공된다.
실시예 1: 직접 화학적 변형
양전하는 세포내이입 경로를 통한 세포내 전달을 촉진하기 때문에, 몇몇의 작은 폴리아민 유도체를 시험하였다. GFP/IgG를 테트라에틸렌펜타민(TEPA), 트리에틸렌테트라민(TETA) 또는 폴리에틸렌이민(PEI)과 직접 접합하고, 세포 내로의 단백질 흡수를 모니터링하였다. PEI는 훨씬 우수한 것으로 밝혀졌기 때문에(데이터 나타내지 않음) 모든 추가 실험은 PEI를 사용하여 수행하였다.
PEI는 선형 또는 분지형의 긴 중합체이며, 일반적으로 분자량이 10 KDa를 초과하며, 기존 중합체 중에서 가장 높은 양이온 전하 밀도를 갖는 것을 특징으로 한다. 이로 인해서 이것은 형질주입제로서 사용되는데, 여기서 높은 양전하는 음으로 하전된 DNA 또는 RNA의 복합체를 형성하고 추가로 이러한 핵산을 세포 내로 내재화하는 데 사용된다. 이러한 고분자량 형질주입제는 시험관내 적용에서는 효율적이지만 생체내 적용에서는 덜 유용하다. 따라서 초저분자량 PEI 모이어티, 즉 600 내지 1800 Da(질량 분석법으로 측정) 범위의 분자량을 갖는 분지형 PEI 분자를 사용하였다. 이러한 초저분자량 PEI는 내재화될 단백질 페이로드에 화학적으로 그리고 공유적으로 접합될 수 있다.
주로 600 Da의 초저분자량 PEI를 IgG 및 GFP에 접합시켰다. PEI는 많은 1차 아민을 함유하기 때문에 단백질의 글루타민산 및 아스파르트산의 카르복실산 잔기뿐만 아니라 C-말단 카르복시 기에 대한 접합은 카르보디이미드 접합 화학을 사용하여 수행하였다. 반응은 과량의 PEI, 즉 3500 몰 과량에서 수행하였고, 변형 수준의 제어는 반응에서 카르보디이미드 작용제(N-(3-디메틸아미노프로파일)-N'-에틸카르보디이미드 염산염(EDC))의 수준을 조절하여 달성되었다. 변형 수준은 MALDI-ToF 질량 분석법으로 결정하였다(도 1). IgG 기반 단백질의 경우, 평균 변형 수준은 IgG 분자당 PEI(600 Da) 1 내지 8.5개 분자 범위였으며, 이는 각각 25 내지 400 몰 당량 범위의 과량 수준의 EDC로 달성되었다. PEI 변형은 부위 선택적이지 않기 때문에 MALDI-ToF 스펙트럼에서 관찰된 바와 같이 분자량 모이어티의 광범위한 분포를 초래한다(도 1). 평균 변형 수준은 측정된 피크 상단의 분자량 값에서 첨가된 PEI의 중량을 제공하는 변형되지 않은 단백질의 측정된 피크 상단의 분자량 값을 뺀 값을 기준으로 계산되었다. 이 값을 변형에 사용된 단일 PEI 분자의 분자량으로 나누면 평균적으로 추가된 분자 수를 얻는다.
다음으로, PEI-변형 및 비변형 마우스 IgG를 A375 세포와 함께 2시간 동안 인큐베이션시켰다. 형질주입/내재화에 대한 추가 유도는 추가되지 않았다. 도 2에서 볼 수 있는 바와 같이, 비변형 마우스 IgG는 A375 세포에 유입되지 않았다. 대조적으로, 낮은 수준의 PEI-변형(IgG 분자당 평균 3개의 PEI 분자, X3) 조차도 내재화를 가능하게 하며, 평균 변형 수준의 증가는 세포 내부에서 관찰되는 IgG 수준을 비례적으로 증가시킨다. 내재화를 측정하기 위해 유세포 분석법을 사용한 경우에도 유사한 결과가 관찰되었다(데이터 나타내지 않음).
유사한 내재화 효율 및 변형 수준의 의존성이 다른 IgG(데이터 나타내지 않음) 및 녹색 형광 단백질(GFP)을 포함하는 다른 페이로드에 대해서 관찰되었다(도 3a 내지 및 3b).
단일 도메인 항체 및 다른 더 작은 페이로드는, 이의 크기가 혼잡한 세포질에서 더 높고 더 쉬운 분산성에 대한 이점이기 때문에 세포내 활성에 이상적이다. PEI 분자로 직접 변형되는 경우 작은 단백질 페이로드는 기능적 문제에 직면할 수 있다. 작은 단백질에서, 이러한 화학적 변형이 단백질의 기능적 도메인을 방해할 가능성이 매우 높다. 특정 부위 또는 도메인에서 치료제에 대한 링커에 대한 선택적 접합 화학을 사용함으로써, 링커 접합의 정확한 위치를 제어하여 이것을 치료제의 활성 도메인에서 멀어지게 할 수 있다.
더욱 좋은 점은 화학적 변형을 보유하는 담체 단백질을 사용하면 이러한 위험이 완전히 제거된다는 것이다. 추가적으로, 일반적으로 작은 단백질 및 특히 단일 도메인 항체는 매우 낮은 혈장 반감기 및 높은 제거율로 인해서 이를 치료 적용에 부적합하게 만드는 약동학적 문제에 확실히 직면할 것이다. 따라서 본 발명자들은 기재된 담체 단백질 시스템을 사용하여 단백질 페이로드를 전달하는 것을 선호하였다.
이러한 담체 및 페이로드 방법론의 두 가지 개략도를 도 4a 및 도 4b에 도시한다. 인지할 수 있는 바와 같이, 담체 단백질은 PEI 기를 보유하며, 막 통과 및 엔도솜 탈출을 담당한다. 이들 기는 무작위로 또는 부위 선택적으로 담체 단백질에 접합될 수 있다. 무작위 접합의 경우, 접합 수준은 상기에 기재된 바와 같이 특정 반응 조건을 선택함으로써 제어될 수 있다. 도 4a는 시토졸 절단 가능한 S-S 결합이 있는 구성을 나타낸다. 이 결합은 절단 가능하지 않은 링커를 생성하기 위해 단순히 C-C 결합 또는 O-C 결합으로 대체될 수 있음이 이해될 것이다. 절단 가능하지 않은 링커를 갖는 접합체의 대안적인 구성을 도 4b에 도시한다.
담체 단백질 자체는 바람직하게는 면역원성 문제를 피하기 위해 인간 내인성 단백질 목록으로부터 선택된다. 또한, 혈액 내에서 흔히 발견되며 자연적으로 순환 반감기가 긴 단백질이 바람직하다. 마지막으로, 치료제가 목적하는 신체 영역에 페이로드를 전달할 수 있는 단백질이 이로울 것이다. 신체의 이러한 영역에 대한 예는 종양 및 이의 미세환경뿐만 아니라 자가면역 질환 및 다수의 다른 병리학적 병태에 중요한 염증 부위를 포함할 수 있다. 따라서 인간 혈청 알부민(HSA)이 선택되었다. HSA는 반감기가 긴 순환 단백질이고, 종양 및 염증 부위로 이동하고 페이로드를 해당 부위에, 심지어 세포외 환경에만 전달하는 것으로 밝혀져 있다(전문이 참조에 의해 본원에 포함된 문헌[Liu et al. BMC Biotechnology 2012, 12:68; Kratz, F., Journal of Controlled Release 132 (2008) 171-183]; 문헌[Um et al., Bioconjugate Chem., 2019, 10.1021/acs.bioconjchem.9b00760], 문헌[Wunder A. et al., J Immunol 2003; 170:4793-4801]; 및 문헌[Yazaki P.J. et al., Nuclear Medicine and Biology, 35 (2008) 151-158] 참조).
치료제는 생물학적 제제의 폴리펩티드 사슬을 따라 단일 접합 부위에서 단일 링커에 접합된다. 이러한 접합 부위는 작용제의 활성을 방해하지 않을 위치에 존재한다. 링커는 펩티드 링커, 화학적 링커 또는 조합으로부터 선택될 수 있다. 중합체-기반 링커인 PEG를 선택하였다. 상기에 논의된 바와 같이, 세포의 세포질 내의 특정 조건에 감응성인 불안정한 결합도 포함될 수 있다.
담체의 중요성을 입증하기 위해서, 단일 도메인 항체 페이로드를 담체 없이 PEI 분자에 직접 접합시켰다. 단일 도메인 항체의 CDR과의 간섭을 최소화하기 위해서, PEI는 단일 도메인 항체의 특정 부위, 바람직하게는 가능한 한 이들 CDR로부터 멀리 부착되어야 한다. 양호한 위치는 이러한 페이로드의 C-말단이다. PEI 변형을 위해 상기에 기재된 바와 같이 VHH 또는 DARPin의 C-말단 시스테인을 활용하는 경우, PEI의 한 단위만 페이로드에 접합된다. 따라서, 단 하나의 PEI 단위로 상당한 양전하에 도달하기 위해서, 담체 변형을 위해 본 발명에 기재된 600 Da PEI 이외에 분자량이 1800 Da인 분지형 PEI를 또한 사용하였다.
가역적 또는 비가역적 이황화 결합을 사용하여 페이로드의 C 말단인 선택적 부위에서 PEI의 접합을 수행하였다. 또한 단일 도메인 항체에 대한 무작위(부위 특이적 아님) 비가역적 PEI 변형을 또한 수행하였다. 본 발명자들이 항상 다중 PEI 변형된 페이로드를 얻었다는 것에 주목해야 한다. 더욱이, 조(crude) 반응 혼합물은 항상 분리하기 힘든 다수의 생성물을 포함한다. 따라서, 특정 PEI 변형(예를 들어, 미리 결정된 PEI 변형 위치 및/또는 미리 결정된 PEI 모이어티의 수를 갖는 접합체)을 얻기 위해서, 본원에 기재된 바와 같이, 링커를 통해 PEI 변형된 담체를 페이로드에 연결함으로써 본 발명의 접합체를 합성할 필요가 있다고 가정되었다.
이러한 목적을 위해, PEI(1800 또는 600 Da)를 HS-PEG12-SPDP 또는 NHS-PEG8-MAL로 변형시켜 각각 가역적 또는 비가역적 방식으로 페이로드 접합을 위한 티올 반응성 PEI를 생성하였다. 활성화된 PEI를 항-BRAF VHH, 1C5-Hel20-LC와 반응시켜 다음 작제물을 달성하였다:
1.
1C5-Hel20-LC-S-S-PEG12-C(O)-NH-PEI1800 (S6)
2.
1C5-Hel20-LC-PEG8-C(O)-NH-PEI1800 (S7)
3.
1C5-Hel20-LC-S-S-PEG12-C(O)-NH-PEI600 (S6A)
4.
1C5-Hel20-LC-PEG8-C(O)-NH-PEI600 (S7A)
EDC의 존재 하에서 1C5-Hel20-LC와 PEI1800을 반응시켜 무작위 변형을 달성하여 1C5-Hel20-LC-r-C(O)-NH-PEI1800(S8)을 제공하였다. PEI에 직접 접합된 페이로드의 상이한 작제물을, A375 세포에 침투하여 BRAF 저해 후 아폽토시스를 유도하는 능력에 대해 평가하였다. 이들 작제물을 1C5-Hel20-LC-S-S-HSA-PEI×4.5(S5C)로 명명된 가역적 결합 및 1C5-Hel20-LC-HSA-PEI×4.5(S5D)로 명명된 비가역적 결합을 통해 본 발명의 담체에 접합된 페이로드와 비교하였다.
접합체(S5D, S6-S7A)의 화학 구조를 상기 표 1에 제시한다.
도 5a 내지 도 5d에서 볼 수 있는 바와 같이, 1 μM의 모든 작용제(도 5a 및 도 5b) 또는 3 μM(도 5c 및 도 5d)로 처리한 경우, 가역적 또는 비가역적 연결을 통해 담체에 접합된 항-BRAF VHH만 효율적인 BRAF 저해를 나타내어 확실한 아폽토시스 신호를 초래한 반면, 부위 지정(도 5a 및 도 5b)이든 무작위 변형(도 5c 및 도 5d)이든 간에 PEI로 직접 변형된 모든 VHH는 아폽토시스가 없거나 매우 제한적인 것으로 나타났다. 직접적으로 변형된 VHH의 불활성은 담체 단백질이 결여된 모든 경우에 항-VHH를 사용한 제한된 세포내 염색으로 입증되는 바와 같이 더 낮은 수준의 막 통과 및 훨씬 더 낮은 엔도솜 탈출 효율로 설명될 수 있다(도 5e 내지 도 5l). 더 낮은 탈출은 낮은 수준의 PEI 분자 수준으로 인한 것인데, 그 이유는 더 큰 PEI 변형제(1800 Da)를 사용해도 보상하기에 충분하지 않았기 때문이다. C-말단에서 비가역적으로 1800 Da PEI로 변형된 VHH 중 하나의 제타 전위는 약 +5 mV 미만으로 측정되었는데, 이는 효율적인 내재화 및 엔도솜 탈출을 위해서는 너무 낮은 것으로 보인다. 더욱이, 상기에 언급된 바와 같이, VHH의 활성 도메인에 가깝게 접합된 PEI의 간섭으로 인해서 또는 링커 자체가 다시 접혀서 PEI, CDR 또는 둘 다를 모호하게 함으로써 활성 부족이 발생할 수도 있다.
병행 실험에서, A375 세포를 검정색/투명 바닥 96-웰 플레이트에 웰당 1500개 세포로 플레이팅하였다. 24시간 후, PBS 희석된, HSA-PEI×3.5(비가역적, 말레이미드-기반 링커 사용)에 접합된 항 BRAF 1C5 VHH를 세포에 첨가하였다(3.2 μM 최종 농도). HSA-PEI×3.5(비가역적, 말레이미드-기반 링커 사용)에 접합된 2A1 VHH(항-CD28 VHH, 여기서는 관련 없는 VHH라 함)뿐만 아니라 PEI 변형된 HSA를 음성 대조군(최종 농도 24 μM)으로 사용하였다. PF-04880594(선택적 RAF 저해제, Sigma, 카탈로그 번호 PZ0294)를 양성 대조군(최종 농도 10 μM)으로 사용하였다. 카스파제 시약을 흡수 기간이 시작될 때 세포에 첨가하였다(최종 희석 1:1000). 카스파제-3/7 활성화의 동역학 프로파일을 IncuCyte® 분석기를 사용하여 4일 동안 2시간마다 라이브 세포 영상화를 사용하여 모니터링하고 정량화하였다. 검정 완료 시, 배지를 제거하고, 세포 생존율 평가를 위해서 CellTiter-Glo® Luminescent 시약(Promega)을 첨가하였다. CellTiter-Glo® 발광 세포 생존율 검정은 대사 활성 세포의 지표인 존재하는 ATP의 정량화를 기반으로 배양물에서 생존 가능한 세포의 수를 결정하는 방법이다.
도 5m에서 볼 수 있는 바와 같이, HSA-PEI에 접합된 1C5 VHH만이 카스파제 3/7 활성의 극적인 증가를 유도하였는데, 이는 이들 세포에서 BRAF가 성공적이고 효율적으로 저해되어 아폽토시스를 유도한다는 것을 시사한다. 관련 없는 VHH, 및 무 VHH 대조군 경우 세포의 실질적인 아폽토시스가 발생하지 않았다. BRAF 저해제는 매우 강력한 세포 살해자라는 점에 유의해야 한다. 따라서 형광 신호가 검출되기 전에 대부분의 세포가 완전히 사멸하였다(도 5a, 도 5c, 도 5m). 그러나 신호가 세포 역가로 정규화되는 경우 저해제가 매우 효과적이라는 것이 분명해졌다(도 5b, 도 5d).
실시예 2: 막 통과 효율
세포 침투성 펩티드(CPP)를 사용한 다수의 연구는 일정 수준의 세포 내재화를 나타내었지만, 대부분의 경우 세포에 대한 초기 흡수 효율은 매우 낮았는데, 그 이유는 실제로 세포에 내재화되는 분자의 일부만을 생성하기 위해서 배지에서는 높은 수준의 페이로드가 필요하기 때문이었다. 초기 내재화 단계의 효율성을 평가하기 위해서, 특정 ELISA를 사용하여 배지에서 페이로드인 PEI-변형 마우스 IgG의 수준을 시간의 함수로 측정하였다. 도 6에서 볼 수 있는 바와 같이, 높은 수준의 PEI-변형(대략 7)에서는 거의 모든 변형된 IgG가 내재화되고(95%) 대부분의 내재화는 인큐베이션 초기 24시간 동안 발생한다(회색 막대). 낮은 수준의 변형(대략 4.5 및 3)에서도, 내재화 단계는 매우 효율적인데, 이는 5일 인큐베이션 후 전체 페이로드의 약 75%의 전체적인 흡수를 나타내고(도 6, 가장 어두운 회색 및 가장 밝은 회색 막대), 고도로 변형된 IgG와 유사한 동역학을 따른다. 불완전하고 더 느린 흡수는 평균 변형 수준보다 훨씬 덜 변형된 IgG와 관련이 있을 가능성이 있다. PEI-변형은 변형된 모이어티가 다소 광범위하게 분포하며(도 1 참조), 변형되지 않거나 변형이 적은 분자(3개 미만)는 5일 후에도 여전히 배지에 존재할 가능성이 있다. 이러한 세포-막 통과 효율은 0.2 내지 40 μg/mL의 IgG 범위의 다양한 초기 배지 농도에서 관찰되었다.
실시예 3: PEI-변형된 단백질이 활용하는 세포내이입 경로
양이온화된 모이어티는 자연적 세포내이입 메커니즘을 사용하여 내재화된다고 생각된다. 두 가지 관련 세포내이입 메커니즘은 카베올린-매개 및 클라트린-매개 세포내이입이다. 내재화의 정확한 메커니즘은 알려진 특정 세포내이입 저해제의 존재 하에서 PEI-변형된 IgG의 내재화를 수행함으로써 밝혀졌다. A375 세포를 클라트린 저해제(아만타딘 또는 클로르프로마진) 또는 카베올린 저해제(제니스테인)의 존재 하에 PEI-변형된 마우스 IgG(4.5 PEI)와 함께 밤새 인큐베이션시켰다. 카베올린 저해제로 알려진 제니스테인은 실제로 PEI-변형된 IgG의 내재화를 저해하였다(도 7). 매우 흥미롭게도, 클라트린 저해제로 알려진 클로르프로마진을 첨가하면 내재화가 증가하였다. 이는 클라트린-매개 세포내이입의 저해가 세포에서 카베올린 매개 세포내이입의 보상적 증가를 초래하기 때문에 카베올린-매개 세포내이입이 PEI-변형된 페이로드에 의해 내재화를 위해 이용된다는 것을 확증한다.
실시예 4: 엔도솜 탈출
상기에 기재된 바와 같이, 아마도 생물학적 치료제의 세포내 전달에서 가장 어려운 장애물은 치료제의 이화작용을 피하기 위한 엔도솜 탈출일 것이다. PEI-변형된 단백질이 엔도솜으로부터 탈출할 수 있는지 여부를 평가하기 위해서, 공초점 현미경 및 엔도솜 및 리소솜 마커의 대비염색을 사용하여 내재화를 추적하였다. PEI-변형된 IgG를 형광 엔도솜/리소솜 마커를 발현하는 HEK293 세포와 함께 5시간 동안 인큐베이션시켰다. 세포를 공초점 현미경으로 분석하였다. 엔도솜 및 리소솜에 녹색 형광 마커(Cell light Endosome, Molecular Probes, 카탈로그 번호 C10586 또는 Cell light Lysosome, Molecular Probes, 카탈로그 번호 C10596)를 형질주입하였고, IgG를 적색 형광 항-마우스 항체로 염색하였다. 도 8에서 볼 수 있는 바와 같이, 내재화된 IgG와 초기 엔도솜 또는 리소솜 소포 사이의 주요 공동-국재화는 관찰되지 않았다. 이는 실제로 PEI-변형된 페이로드가 엔도솜을 성공적으로 탈출했음을 나타내었다. 이러한 실험을 엔도솜/리소솜 마커인 EEA1, 트랜스페린 및 칼세인을 사용하여 반복하였고, 동일한 결과가 관찰되었다(데이터 나타내지 않음). 초기 엔도솜에서도 공동-국재화가 관찰되지 않는다는 점에 유의해야 하는데, 이는 PEI-변형된 단백질의 엔도솜 탈출이 엔도솜 경로의 시작 시에 빠르게 발생한다는 것을 시사한다.
PEI-변형된 IgG와 다양한 엔도솜 및 리소솜 마커 사이에 공동-국재화가 관찰되지 않는 반면, 이들 IgG의 염색은 사실상 점상(punctate)으로 나타난다. 점상 프로파일은 일종의 소포에 내재화된 IgG가 포함되어 있음을 시사할 수 있다. PEI-변형된 단백질의 엔도솜 탈출을 추가로 확증하기 위해서, 단백질을 pH 감응성 형광 염료인 5(6)-카르복시나프토플루오레세인으로 표지하였다. 이 염료는 7 이상의 pH 값에서만 형광을 나타낸다. 초기 엔도솜의 pH는 이미 7 미만이고 엔도솜이 리소솜으로 성숙함에 따라 감소하기 때문에 엔도솜 경로의 모든 소포는 산성이다. PEI-변형된, pH-감응성의 표지된 IgG를 HeLa 세포와 함께 인큐베이션시키고, 세포를 공초점 현미경으로 분석하였다. 세포는 pH-감응성 염료의 고유한 적색 형광을 명확하게 나타내는데, 이는 PEI-변형된 단백질이 세포질과 같은 비(non)산성 구획(도 9)에 있음을 나타낸다. 이는 PEI-변형된 단백질이 엔도솜 경로를 효율적으로 탈출한다는 추가 증거이다.
마지막으로, PEI-변형된 단백질이 내재화 후 엔도솜을 효율적으로 탈출하는지 확인하기 위해 기능적 검정을 사용하였다. 이를 위해, CD3-제타 사슬로도 알려진 CD247에 대한 모노클로날 항체를 PEI로 변형하여, CD3+ 1차 세포에 내재화하였다. CD3 수용체의 세포내 도메인은 면역수용체 티로신-기반 활성화 모티프(ITAM)를 통해 T 세포 활성화를 담당한다. 선택된 모노클로날 항-CD3 제타 사슬 항체(Sigma, Clone ZT-10, 카탈로그 번호 SAB4200446)는 CD3 제타 사슬의 ITAM 중 하나와 결합한다.
음성 대조군으로서 PEI-변형된 항-CD247 및 PEI-변형된 마우스 IgG의 내재화를 항-CD3/CD28 항체로 코팅된 비드로 사전 자극된 CD3+ 세포 내에서 수행하였다. 세포 활성화 수준의 변화에 대한 마커로서 인터페론 감마(IFNγ) 분비에 대해 배지를 모니터링하였다. 전체 항체는 구조적으로 필수적인 이황화 결합의 존재로 인해 세포질에서 안정적일 것으로 예상되지 않지만, 이 항체의 결합은 IFNγ 분비에서 최고조에 달하는 신호전달 캐스케이드를 활성화할 것이다. 따라서 소량의 초기 활성화라도 사이토카인 수준의 정량적 증가를 초래할 것이다. 따라서, 예상되는 세포질 불안정성에도 불구하고, 항체의 내재화는 관찰 가능한 IFNγ 반응을 생성할 것으로 예상된다.
CD3+ 세포에 대한 변형된 항체의 내재화를 세포내 FACS 분석에 의해 확인하였다(데이터 나타내지 않음). 항-CD247 PEI-변형된 mAb(4.5×PEI)의 내재화는 IFNγ 분비의 상승으로 측정된 바와 같이 CD3 세포의 용량 의존적 활성화를 초래하였다(도 10). PEI-변형된 마우스 IgG는 이 실험에 사용된 항체 농도 범위에서 어떠한 CD3 세포 활성화도 유발하지 않았다. 이 결과는 PEI-변형된 단백질의 엔도솜 탈출 및 표적 세포에서 생물학적 및 임상적 효과를 발휘하는 능력을 더욱 확증한다.
실시예 5: 시토졸 분산성 및 페이로드-담체 용액
PEI-변형된 단백질의 엔도솜 탈출은 기능성에 기초하여 명백히 발생하지만, 다양한 내재화된 단백질의 현미경 영상은 점상 프로파일을 나타낸다(도 2, 도 3, 도 8 및 도 9). PEI 변형은 세포막 통과 및 엔도솜 탈출에 매우 효율적이지만 동일한 변형이 PEI-변형된 단백질이 세포질에서 효율적으로 분산되는 것을 방해한다는 가설을 세웠다. 이러한 분산성 문제는 강하게 양이온화된 내재화된 단백질과 다양한 세포질 단백질(주로 세포골격 단백질, 이들의 대부분은 음으로 하전됨) 사이의 강한 정전기적 상호작용의 결과일 수 있다. 낮은 세포질 분산성은 임의의 세포내 생물학적 제제가 세포질 또는 다른 세포내 구획 또는 소기관이든 간에 세포내 표적에 도달하지 못할 수 있기 때문에 임의의 세포내 생물학적 제제의 효능에 부정적인 영향을 미칠 수 있다.
이러한 세포내 분산성 장애물을 극복하기 위해서, PEI로 미리 변형된 범용 담체와 치료제 사이의 링커에 이황화 결합을 혼입시켰다. 선택된 연결은 이황화 결합이 혼입된 화학적 링커였다. 이러한 불안정한 이황화 결합은 주로 글루타티온의 높은 농도로 인해서 세포질의 높은 환원 잠재력으로 인해 엔도솜 탈출 시 절단되어, 양이온화된 담체에서 치료제를 방출하고 세포의 세포질 내에서 치료제의 자유로운 이동을 가능하게 한다. 담체-페이로드 방법론의 효율성을 평가하기 위해서, GFP를 이황화 결합을 혼입한 PEG-기반 링커를 통해 PEI-양이온화 HSA에 접합시켰다. eGFP(Biorbyt, 카탈로그 번호 orb84840)를 NHS-PEG4-SPDP로 변형시켰다. PEI-변형된 HSA(11×PEI)를 또한 DTT를 사용하여 이러한 SPDP를 유리 티올로 환원시킨 후 NHS-PEG4-SPDP와 추가로 반응시켰다. SPDP-활성화 eGFP를 HSA-PEI가 없는 티올과 반응시켜 링커에 혼입된 불안정한 이황화 결합을 갖는 GFP-HSA 접합체를 생성하였다.
내재화된 PEI-변형된 GFP의 점상 프로파일(도 3)과 대조적으로, PEI-양이온화 HSA에 이황화-연결된 GFP가 세포에 내재화되었을 때 점상 없이 완전히 분산된 프로파일을 생성하였다(도 11). 내재화된 치료적 페이로드의 효율적인 분산을 확인하기 위해서, 전체 치료적 항-TNFα 모노클로날 항체(Humira®, Abbvie)를 이황화 결합을 포함하는 PEG-기반 링커를 통해 PEI-변형된 HSA에 연결하였다. GFP와 유사하게, 항체를 NHS-PEG4-SPDP로 변형시켰다. PEI-변형된 HSA(11×PEI)를 또한 DTT를 사용하여 이러한 SPDP를 유리 티올로 환원시킨 후 NHS-PEG4-SPDP와 추가로 반응시켰다. SPDP-활성화 항체를 HSA-PEI가 없는 티올과 반응시켜 링커에 혼입된 불안정한 이황화 결합을 갖는 항체-HSA 접합체를 생성하였다. 도 12에서 볼 수 있는 바와 같이, 내재화된 모노클로날 항체는 세포질 전체에 분산되며, 이는 직접 양이온화가 세포질 내 자유 분산을 방해한다는 가설을 다시 확증하고 양이온화된 담체로부터 페이로드를 분리하는 용액의 효율성을 입증한다.
이러한 분산성은 또한 도 5f 내지 도 5g에서, 그리고 도 3과 도 11을 비교함으로써 인지할 수 있다. S-S 절단 가능한 결합을 함유하는 링커와 접합된 페이로드는 세포 전체에 더욱 균일하게 분산되었다. 그러나 이는 절단 가능한 링커가 없는 작제물이 전혀 분포하지 않았거나 기능하지 않았다는 의미는 아니다. 도 5g는 세포 내에서 절단 가능하지 않은 링커를 갖는 VHH의 분포를 명확하게 나타내며, 도 4a 내지 도 4d는 절단 가능하지 않은 링커를 갖는 접합체가 여전히 표적에 결합하여 기능할 수 있다는 것을 명확하게 나타내지만, 절단 가능한 링커를 갖는 작제물이 아폽토시스를 유도하는 데 우수하다는 점은 주목할 만하다(도 5a 및 도 5b). 따라서, 분산성이 유익하고 이것이 분산될 수 없는 표적에 도달/결합하기 어려울 수 있는 반면, 절단 가능하지 않은 링커는 여전히 완전히 기능할 수 있다.
실시예 6: 시토졸 안정성
치료제는 표적 세포의 세포질에 유입될 뿐만 아니라 생물학적 활성도 발휘해야 한다. 다른 세포내 위치(핵, ER, 미토콘드리아 등)로 운반되는 분자조차도 여전히 세포질을 통과할 것이다. 많은 생물학적 치료제는 항체 스캐폴드 또는 이의 유도체를 기반으로 한다. 종종 이러한 치료제는 특정 표적에 결합하여 해당 표적에 길항작용하거나 효능작용한다. 이들 작용제의 결합 활성은 3차 및 4차 구조에 전적으로 의존한다. 전체 IgG 또는 이의 절단된 유도체(Fab, scFv 등...)와 같은 항체 기반 분자에서, 이러한 구조는 사슬내 또는 사슬간 이황화 결합을 기반으로 하고 이에 의해 안정화된다. 그러나 상기에 언급된 바와 같이 세포질뿐만 아니라 다른 세포내 소기관 및 구획도 매우 환원적인 환경을 특징으로 한다. 주요 환원제인 글루타티온은 세포질 농도가 1 내지 11 mM 범위이다. 대조적으로, 혈장 수준은 낮은 마이크로몰 값이다. 세포질의 이러한 특징은 효율적인 세포내 치료 경로로서 이의 구조에서 이황화 결합을 활용하는 다른 생물학적 작용제뿐만 아니라 항체-기반 작용제의 사용을 방해하였다.
시험관내 실험은 글루타티온(GSH)의 세포질 수준에 대한 항체의 노출이 단 몇 시간 후에 이황화 결합의 감소를 유도한다는 것을 나타내었는데, 이는 항-경쇄 항체에 의해서 검출된 바와 같은 SDS-PAGE 웨스턴 블롯에서 다중 밴드의 출현으로 인지할 수 있다. 밤새 노출하면 아마도 3D 구조의 손실 또는 심지어는 응집 및 침강으로 인해 웨스턴 블롯에서 항체가 검출되지 않는다. 후자는 세포내 발현된 항체 및 이의 유도체의 알려진 현상이다(문헌[Kabayama, H. et al., Nature Communications 2020, (11), 336], 전문이 참조에 의해 본원에 포함된). 세포내 생물학적 작용제에 대한 이러한 임의의 효과는 생물학적 표적에 결합하고 치료 효과를 발휘하는 능력에 해로울 수 있다.
이러한 세포내 안정성 문제를 고려하여, 단일-도메인 항체를 치료적 페이로드로 선택하였다. 이러한 단일-도메인 항체는 다른 단백질과 결합할 수 있는 능력을 가진 단일-사슬 단백질-기반 분자이다. 이들의 구조는 필수 이황화-결합이 부족하여 이들을 세포질의 환원 환경에 저항성이도록 만든다. 이러한 단일-도메인 결합 단백질은 나노바디라고도 알려진 낙타과-기반 가변 중 동종이량체(VHH) 또는 상어-기반 면역글로불린 신규 항원 수용체(IgNAR)와 같은 절단된 형태의 중쇄 항체(HcAb)를 포함한다. 이러한 단일-도메인 결합 단백질의 다른 예는 설계된 안키린 반복 단백질(DARPin) 및 유전자 조작된 항체 모방 단백질을 포함한다.
단일 도메인 결합 단백질, 특히 VHH는 페이로드로서 매우 적합하다. 이들의 구조적으로 필수적인 이황화-결합의 부족이 이들을 세포질 조건에서 저항성이도록 만든다. 이들은 VHH의 경우 약 15 KDa, DARPin의 경우 약 20 KDa로 매우 작으며, 이 사실이 세포질 분산성에 도움이 되는 것이다. 이들의 단일 도메인 특징은 어떠한 우발적인 세포내 가교 효과도 일으키지 않음을 나타낸다. 이들은 보다 복잡한 결합 프로파일을 가능하게 하기 위해 상이한 구조체에 2개 이상의 모이어티를 포함하도록 쉽게 조작된다. 이들은 면역원성으로 간주되지 않으며 양호한 안전성 프로파일을 갖는다. 주요 특징은 담체에 대한 부위-선택적 접합에 대한 상용성이다. 예를 들어, VHH 및 DARPin 둘 다에서, C-말단은 항원 결합 영역(CDR)에서 멀리 위치하므로, 항원-결합에 영향을 주지 않고 접합을 위해 이 부위를 활용할 수 있다. 또한, C-말단은 접합을 위해 유리 설프히드릴 기와 함께 단일 시스테인 아미노산을 포함하도록 쉽게 조작될 수 있다. 이 기는 티올-반응성 기가 있는 담체에 접합될 수 있다. C-말단 유리 설프히드릴은 담체에 직접적으로 또는 대안적으로는 링커를 통해 접합될 수 있다.
C-말단에 단일 시스테인 아미노산을 포함하는 상업적인 항-비멘틴 VHH(Q60c, QVQ)를 티올 반응성 기에 의해 추가로 변형된 PEI-변형된 HSA 담체에 접합시켰다. PEI-변형된 HSA를 2-피리딜디티오 기(NHS-PEGn-SPDP, n = 4)를 보유하는 NHS-활성화 PEG 링커에 커플링시켰다. SPDP는 VHH의 유리-티올과 쉽게 반응하여 VHH-HSA 모이어티를 생성하며, 여기서 VHH 페이로드와 HSA 담체 사이의 연결은 이황화 결합을 포함한다. 이러한 작제물의 일반적인 개략도는 도 13a에서 볼 수 있으며, 여기서 2개의 VHH를 포함하는 접합체는 이러한 접합 방법론이 담체가 하나 초과의 페이로드에 접합되는 접합체를 생성할 수 있다는 사실을 예시하기 위해서 제시된다. 담체와 페이로드 사이의 결합은 환원 조건에서 절단될 수 있으며 VHH에 대한 접합은 PEI 수준에 관계없이 유사하였다. 추가로, 모든 반응에서, 페이로드는 5 mM의 GSH로 처리한 후 효율적으로 절단되어 세포질 환원 조건을 모방하였다.
항-비멘틴-PEI-변형된 HSA 접합체의 세포 내재화 효율은 A375 세포를 접합체와 함께 인큐베이션시킬 때 배양 배지로부터 접합체가 사라지는 것에 의해서 평가하였다. VHH를 2개의 수준, 즉, HSA당 평균 3.5개의 PEI 분자 및 8개의 PEI 분자에서 PEI로 변형된 HSA에 접합하였다. PEI-변형된 IgG(도 6)에 대해 이미 인지된 바와 같이, VHH-담체 접합체는 세포에 의해 효율적으로 내재화되었고(도 14), 접합체의 거의 80%가 인큐베이션 첫 24시간 동안 내재화되었다. HSA에 접합된 VHH만을 측정하는 자체 개발 2면 ELISA를 사용하여 접합체의 수준을 측정했으며, 캡처로서 항-VHH 항체 및 검출을 위해서 항-HSA 항체를 활용하였다. 놀랍게도, 두 PEI-변형 수준 모두 매우 유사한 내재화 효율 및 동역학을 나타냈으며 8-PEI 변형에 비해 아주 약간의 이점만 존재하였다. 관찰된 수준의 감소가 분해로 인한 것이 아닌지를 확인하기 위해서 세포가 없는 세포 배지에서 이들 VHH-HSA 접합체의 수준을 평가하였다. 세포가 없는 경우 약간의 하락만 관찰되었는데(도 14), 이는 실제로 세포의 존재 하에서 VHH 수준의 극적인 감소가 VHH 내재화로 인한 것이었음을 시사한다.
엔도솜 탈출 효율뿐만 아니라 세포질 내 페이로드 VHH의 분산성을 추가로 평가하기 위해서, PEI-변형된 HSA(HSA 분자당 평균 11개의 PEI)에 접합된 항-비멘틴-VHH를 A375 세포와 함께 24시간 동안 인큐베이션시킨 후 공초점 현미경으로 세포를 분석하였다(도 15a 및 도 15b). AlexaFluor 647에 접합된 항-VHH 항체를 사용하여 완화 프로파일에서 세포 내부의 VHH의 존재를 나타내었다(도 15a). 표준 형광 표지된 항-비멘틴 항체를 사용하여 세포를 비멘틴에 대해 공동 염색하였다(도 15b). 두 영상을 주의 깊게 조사한 결과 항-VHH 염색으로 얻은 프로파일이 실제로 비멘틴 염색과 동일하다는 것이 분명하게 나타났는데, 이는 항-비멘틴 VHH가 이의 담체로부터 방출되어 세포의 세포질로 성공적으로 전달되어 이의 표적을 찾아서 결합할 수 있음을 시사한다(도 15c). 이러한 결합에 대한 추가 증거는 도 16a에서 인지할 수 있는데, 여기서 PEI-변형된 HSA에 접합된 항-비멘틴 VHH에 노출된 세포 중 하나를 클로즈업하면 항-VHH 항체 염색에 의해 시각화된 바와 같이 비멘틴 세포골격 패턴이 명확하게 나타난다. 도 16b는 담체 접합 없이 항-비멘틴 VHH에만 노출된 세포가 세포내 VHH 염색을 나타내지 않음을 나타낸다.
내재화된 항-비멘틴 VHH의 이의 비멘틴 표적(도 15a, 도 16a)에 대한 결합은 또한 VHH 작용제가 세포질 내부에서 구조적 안정성을 유지했다는 것을 입증한다. 모든 결합 생물학적 작용제의 경우에서와 같이, 표적에 결합하는 능력은 이의 구조 및 이 구조의 안정성에 결정적으로 좌우된다. 따라서 이 데이터는 본 발명의 페이로드 작용제로서 단일 도메인 결합 단백질의 선택을 뒷받침한다.
제시된 전달 시스템의 또 다른 중요한 특징은 배지 내 모든 세포가 내재화를 나타낸다는 점에서 내재화의 효율성 및 균일성이다. 이는 특히 도 15a 내지 도 15c의 영상을 포함하여 다양한 현미경 영상에서 인지할 수 있다. 문헌에 알려진 단백질의 세포내 전달에 대한 많은 시도는 세포의 일부만 단백질 내재화를 나타내는 결과를 나타내며 이는 매우 낮은 효율성을 시사한다.
실시예 7: 시험관내 기능성 PoC
세포내 전달된 생물학적 제제의 기능성의 추가 평가를 인간 유두종 바이러스(HPV)의 E7 단백질에 대한 VHH를 사용하여 수행하였다. 거의 모든 자궁경부암은 인간 유두종 바이러스(HPV) 감염과 관련이 있으며, HPV16 및 HPV18의 두 가지 유형이 사례의 70%를 차지한다. HPV의 주요 종양단백질 중 하나는 E7 단백질이다. E7은 망막모세포종 단백질(RB1)과의 상호작용을 통해 악성 표현형을 유도하고 유지한다. E7은 숙주 RB1 단백질의 기능을 방해하여 제어되지 않는 세포 증식을 자극한다. E7은 또한 HDAC1 및 HDAC2에 의해 매개되는 숙주 히스톤 탈아세틸화를 방해하여 전사 활성화를 유도할 수 있다. 이전 연구는 E7 기능의 저해가 HPV 양성 자궁경부암 세포의 성장을 저해한다는 것을 시사하였다. Li 등(문헌[Molecular Immunology, 2019, 109, 12-19])은, 단백질 자체에 대한 효율적인 세포내 전달 시스템의 부족으로 인해서 사용된 HPV 양성 세포에서 E7 단백질에 대한 VHH를 암호화하는 플라스미드의 형질주입이 E7 활성을 방해하여(E7-RB1 상호작용을 파괴하여), HPV 양성 세포의 증식을 감소시킬 수 있음을 나타내었다. 본 발명자들은 C-말단 시스테인을 첨가하여 동일한 항-E7 VHH를 발현 및 정제하고, 이를 본 발명의 세포내 담체에 접합시켰다.
HPV-양성 세포주에서 E7 저해의 세포내 효과의 크기를 확인하기 위해서, Incucyte®와 같은 라이브 세포 분석 시스템을 사용하였다. E7이 세포 주기 제어에 영향을 미치기 때문에, 형광 유비퀴틴화 기반 세포 주기 지표(FUCCI: Fluorescent Ubiquitination-based Cell Cycle Indicator)라고 불리는 특정 HPV 양성 HeLa 세포주를 사용하였다. FUCCI 리포터 시스템은 세포의 상이한 세포 주기 단계를 따르는 것을 허용한다. G1의 세포는 적색의 형광을 나타내고 S, G2 또는 M의 세포는 녹색의 형광을 나타낸다. 세포의 배지에 다양한 치료를 도입하기 전에 24시간 동안 세포를 티미딘과 동기화하였다. 세포를 절단 가능한 링커에 의해 PEI 변형된 HSA에 접합된 항-E7 VHH 및 다음 대조군으로 처리하였다: 처리 없음, 변형된 HSA, 관련 없는 VHH (항-비멘틴)에 접합된 변형된 HSA, 비변형 항-E7 VHH, 비변형 HSA에 접합된 항-E7 VHH 및 세포 주기 저해제(DP, CDK4/6 저해제). 도 17에서 인지할 수 있는 바와 같이, 모든 대조군은 세포 주기에 어떠한 영향도 미치지 않아서 미처리 세포와 유사하게 유지되는 반면, PEI-변형된 HSA(3.5 PEI)에 접합된 항-E7 VHH는 극적인 효과를 나타내어 직접 세포 주기 저해제를 사용하는 것과 유사하게 세포 주기 정지를 유발하였다. 상업적인 E7 저해제가 없기 때문에, 세포 주기 정지를 유발하는 것으로 알려진 CDK4/6 저해제인 팔보시클립 이세티오네이트(PD0332991, Sigma, 카탈로그 번호 PZ0199)를 양성 대조군으로 사용하였다. 변형된 HSA에 접합된 항-E7 VHH는 단지 다른 동역학에서만 이 저해제와 유사한 효과를 나타내었다. 또한, 도 18에서 인지할 수 있는 바와 같이, 이러한 정지는 HPV-양성 세포의 사멸로 이어졌다.
항-비멘틴과 항-E7 VHH 둘 다 세포질의 환원 환경에서 내구성을 나타내었다. 구조를 안정화하고 유지하기 위해 이황화 결합에 의존하지 않는 단일 도메인 결합 단백질의 상용성을 추가로 예시하기 위해, 본 발명자들은 설계된 안키린 반복 단백질(DARPin)을 결합제로 사용하였다. DARPin은 전형적으로 매우 특이적이고 높은 친화도의 표적 단백질 결합을 나타내는 유전자 조작 항체 모방 단백질이다. 이것은 자연에서 가장 일반적인 결합 단백질 클래스 중 하나인 자연 안키린 단백질로부터 유래되며, 세포 신호 전달, 조절 및 세포의 구조적 온전성과 같은 다양한 기능을 담당한다. DARPin은 몇몇의 반복 모티프로 이루어지며 분자 질량은 약 14 내지 18 KDa(킬로달톤)이다. 이것은 또한 VHH와 유사하게 구조적 온전성을 위해 이황화 결합에 의존하지 않는다는 것을 특징으로 한다.
이를 위해, K-RAS에 대한 DARPin을 선택하였다. RAS 단백질은 분자 스위치로서 신호 전달에 중요한 역할을 한다. RAS는 RAF-MEK-ERK 캐스케이드를 통한 세포 증식 및 분화, 및 PI3K 활성화를 통한 세포 생존에 관여하는 세포 형질전환에서 가장 중요한 표적이다. RAS 단백질(K-, H- 또는 N-RAS)의 돌연변이는 신호 독립적인 방식으로 세포 형질전환을 촉진하는 구성적으로 활성화된 GTP-결합 형태를 생성한다. 활성화 RAS 유전자 돌연변이는 인간 암의 30%에서 발견되며, 췌장, 결장 및 폐 선암종에서 가장 높은 빈도로 발견된다. 발암성 RAS는 종양의 조기 발병에 필수적이며 종양 생존력 유지에 필요한 것으로 나타났다. RAS 돌연변이의 가장 중심 위치는 G12D 및 G12V와 같이 글리신 12에 존재한다.
Guillard 등(전문이 참조에 의해 본원에 포함된 문헌[Guillard, S. et al. Nat. Commun. 2017, 8, 16111])은 Ras의 뉴클레오티드 교환을 저해하는 항체 모방체, DARPin K27을 생성하였다. K27은 Kd가 4 nM인 불활성 Ras GDP 형태에 우선적으로 결합하며 구조 연구는 불활성 Ras에 대한 선택성을 뒷받침한다. DARPin 암호화 벡터의 형질주입에 의한 K27의 세포내 발현은 활성 Ras의 양을 상당히 감소시키고, 하류 신호전달, 특히 인산화된 ERK의 수준을 저해하고, HCT116 세포의 연한천(soft agar)에서의 성장을 늦추는 것으로 나타났다. 이 그룹은 "...Ras가 세포 내에 존재한다는 사실로부터 장벽이 발생한다. DARPin K27은 세포에 유입되는 본질적인 능력이 없으므로 DARPin이 세포 외부에 첨가되면 Ras에 접근할 수 없다. DARPin을 세포의 세포질에 전달한다는 보고가 있었지만... 이 접근 방식을 치료적으로 실행 가능하게 하기 위해서는 효율성의 실질적인 증가가 필요하다. DARPin K27과 동일한 부위에 결합하는 소분자 저해제를 개발하는 것은 도전적일 수 있는데, 그 이유는 스캐폴드가 포켓을 한정하는 것이 아니라 넓은 표면에 걸쳐 결합하기 때문이다"라고 언급한다.
DARPin K27을 공개된 서열을 기반으로 발현시키고 평균 3.5개의 PEI 분자로 변형된 HSA 담체에 접합시켰다. 내재화 및 KRAS 결합을 공초점 현미경으로 평가하였다(도 19). K27 DARPin은 세포질에 분산되지 않고 오히려 KRAS의 주요 위치인 원형질막 내부에 국재화되었다. 흥미롭게도, 일부 세포는 내재화된 DARPin과 관련하여 점상 프로파일 및 내부 막 국재화를 모두 나타내었다. 점상은 아직 엔도솜을 탈출하지 못했거나 표적을 자유롭게 찾기 위해 담체에서 분리되지 않은 DARPin의 결과일 수 있다.
추가 시험에서, 췌장관 암종 세포(SU8686)를 HSA 담체에 접합된 항-KRAS DARPin K27과 함께 인큐베이션시켰다. 담체를 8개 또는 3.5개의 PEI 분자로 변형시켰다. 세포의 아폽토시스 상태를 전통적인 아넥신 V 검정을 사용하여 모니터링하고 Incucyte® 연속 세포 모니터링 시스템을 사용하여 시각화하였다. 절단 가능한 링커를 통해 PEI 변형된 HSA에 접합된 DARPin에 노출된 세포는 특히 높은 수준의 PEI 변형을 갖는 담체에 접합된 DARPin의 경우 아폽토시스에서 극적인 증가를 나타낸다(도 20). 이는 특히 엔도솜 탈출 과정의 강화된 내재화 및 더 빠른 동역학 때문일 가능성이 높다. 이에 반해서, 미처리 세포, 비변형 DARPin으로 처리된 세포 또는 PEI-변형된 HSA(8개 분자)로 처리된 세포 단독은 DARPin의 세포내 효과를 강조하는 기준선 수준의 아폽토시스를 나타내었다.
Guillard 등은 항-KRAS DARPin K27이 천연, 돌연변이체가 아닌 불활성 KRAS 및 주로 G12 위치에서 다양한 돌연변이를 갖는 KRAS에 결합한다는 것을 밝혀내었다. 따라서, 항-KRAS DARPin K27을 HeLa 세포주의 증식 및 아폽토시스에 대한 세포내 효과에 대해 평가하였다. 이 세포주는 핵 내에서 GFP의 구성적 발현을 특징으로 하며, Incucyte®와 같은 연속 영상 모니터링 방법을 사용하여 이러한 세포를 쉽게 추적할 수 있다. 항-KRAS DARPin의 2개의 상이한 제제를 8개의 PEI 분자를 보유하는 HSA에 접합시키고, HeLa-GFP 세포에 대한 이의 효과를 다음 대조군 처리와 비교하였다: 음성 대조군으로서의 처리 없음, 양성 대조군으로서 소분자 Pan-Ras 저해제로의 처리, 비변형 DARPin으로의 처리, 비변형 HSA에 접합된 DARPin, 8개의 PEI 분자로 변형된 HSA 담체, 및 항-비멘틴 VHH, 8개의 PEI 분자로 변형된 HSA에 접합된 관련 없는 VHH로의 처리. 도 21a 및 도 21b에서 인지할 수 있는 바와 같이, 8개의 PEI 분자를 보유하는 HSA에 접합된 항-KRAS DARPin의 두 제제 모두는 HeLa-GFP 세포의 증식(도 21a) 및 아폽토시스(도 21b) 모두에 극적으로 영향을 미쳤다. 대조군 처리 중 어느 것도 이러한 매개변수에 영향을 미치지 않았다. 아폽토시스에 대한 효과는 도 22에서도 인지될 수 있는데, 여기서 PEI-변형된 HSA에 접합된 항-KRAS DARPin로 처리된 세포(아폽토시스 세포)의 적색 염색 및 세포 사멸에 따른 GFP의 손실이 명확하게 관찰된다.
실시예 8: 약동학 및 생체분포(PK 및 BD)
PEI 변형은 담체 단백질에 집중된 강한 양전하를 부여한다. 대조적으로, 혈장 성분 및 세포막은 일반적으로 음으로 하전된다. 양으로 하전된 단백질은 음으로 하전된 성분과 정전기적 결합으로 인해 "끈적끈적"한 것으로 알려져 있다. 이러한 "끈적임"은 짧은 반감기 및 생체분포 문제를 일으킬 수 있다. 이러한 현상은 자연적으로 양으로 하전되고 다소 염기성인 등전점(pI)을 특징으로 하는 단백질에서 알려져 있다. PEI 변형된 단백질의 약동학 및 생체분포 프로파일은 강한 양전하에 의해 영향을 받을 수 있다. 더욱이, 이러한 부착은 투여된 양으로 하전된 단백질이 주사 부위에 "트래핑(trapping)"을 유발할 수도 있다. 이러한 효과를 피하거나 최소한 최소화하기 위해서, PEI 변형 수준의 효과를 조사하였다.
세포막을 통과하고 엔도솜 탈출을 가능하게 하는 데 여전히 효과적인 최저 수준의 PEI 변형을 확인하고 활용함으로써 본 발명의 단백질의 PK 및 생체분포가 개선될 수 있다. 이러한 변형 수준을 확인하기 위해서, 2.0, 3.6, 5.2, 6.2, 8.0 및 9.4의 평균 PEI 변형 수준을 사용하여 HSA 담체를 생산하였다. 이러한 수준은 MALDI-ToF 질량 분석법을 사용하여 생성된 변형된 HSA를 분석하여 확인하였다(도 23). 이들 담체를 항-비멘틴 VHH에 추가로 접합시켰고 이들 접합체의 내재화를 공초점 현미경을 사용하여 평가하였다(도 24). 공초점 현미경 결과에서 인지될 수 있는 바와 같이, 2.0 및 3.6개의 PEI 분자로 HSA에 접합된 VHH 조차도 세포 내부에서 뚜렷한 존재를 나타낸다. 더 높은 수준의 PEI로 변형된 담체의 사용은 세포 내부에서 명백히 더 높은 수준의 VHH를 초래하는 것으로 보이지만, 이러한 경우 내재화된 VHH의 프로파일은 더 높은 양전하로 인해서 VHH가 담체로부터 더 느리게 분리되기 때문에 더 점상이고 덜 분산된다. 3.6개 초과의 PEI/HSA로 변형된 HSA의 경우 세포 내부에서 VHH의 더 강한 염색은, 집중된 점상 프로파일로 인한 더 강한 영상화의 결과일 수 있으며 반드시 절대적인 더 높은 수준을 가리킬 필요는 없다.
공초점 현미경의 결과는 또한 특정 ELISA를 사용하여 세포 배지 내 접합체의 잔류 수준을 측정함으로써 이들 접합체의 내재화 수준과 상관관계가 있었다(도 14). PEI로 직접 변형된 IgG에서 관찰된 결과(도 6)와 달리, HSA 담체(접합된 VHH를 가짐)의 수준 및 동역학은 변형 수준에 의해 덜 영향을 받는다. 3.5개 및 8개 분자의 PEI를 사용하면 내재화가 효율적이며 그 크기 및 속도가 매우 유사하다.
이러한 결과는, 실제로 담체로서 사용될 HSA가 단 3.5개 또는 그보다 더 적은 PEI 분자로 변형될 수 있으며, 이는 순환계에서 HSA 담체의 점착성을 감소시킬 수 있음을 시사한다. PEI 변형의 이러한 감소 효과를 생체내 PK 및 생체분포 연구에서 조사한다. 2 내지 8 범위의 상이한 수준의 PEI로 변형된 HSA를 근-IR 형광 염료, 예를 들어, Vivo-Tag-750(PerkinElmer)로 추가로 표지하였다. 표지된 단백질을 Balb-C 마우스에 IV 투여하였다. 투여 후, IVIS 생체내 영상화 시스템(PerkinElmer)과 같은 라이브 영상화 시스템을 사용하여 주사된 동물을 모니터링하였다. 상이한 PEI-변형된 HSA 유도체의 분포 프로파일을 투여 후 다양한 시점에서 모니터링하였다. 동물을 다양한 시점에 희생시키고, 관류시키고, 상이한 기관을 수거하고, IVIS 시스템을 사용하여 각각의 기관의 형광 수준을 조사하였다. 종양이 이식된 동물에도 유사한 프로토콜을 사용할 수 있다.
2개의 상이한 수준(3.5 또는 8개 PEI 단위)의 PEI로 변형된 HSA의 PK 및 생체분포를 조사하였다. PEI-변형된 HSA를 B-16 흑색종 암 종양(S.C. 종양)이 있는 마우스에 주사하였다. 담체를 250 nmol/Kg의 용량으로 IV 주사하였다. 시험된 담체의 PK 및 생체분포를 항-HSA ELISA를 사용하여 평가하였다.
도 25a 및 표 2에서 인지할 수 있는 바와 같이, 8개의 PEI 변형을 갖는 담체는 강하게 양이온화된 단백질의 특징인 매우 낮은 AUC 수준 및 높은 제거율을 나타내었다. 3.5개의 PEI로 변형된 담체는 아마도 양전하가 낮기 때문에 더 높은 AUC 및 더 낮은 제거율 값으로 다소 더 양호한 PK 값을 나타내었다. 대조적으로, VHH가 이의 C-말단에서 PEI1800과 직접 접합된 경우, 혈액으로부터의 제거는 매우 빨랐다(도 25b, 표 2). 두 담체의 혈장 노출 수준은 도 25c에서 볼 수 있다. 도 25d에서 인지될 수 있는 바와 같이, 담체의 높은 제거율 및 낮은 AUC 값은 처리된 마우스의 소변에서 발견되는 매우 낮은 수준의 담체에 의해 인지될 수 있는 바와 같이 신장 제거율로 인한 것이 아니다. 이는 낮은 크기로 인한 이러한 제거를 피하기 위해 일반적으로 담체, 특히 HSA를 사용하는 주요 이유 중 하나이다.
[표 2]
실시예 9: 링커 안정성
링커의 설계 및 정확한 구조는 최종 접합체 생성물의 생체내 성능(PK 및 생체분포)에 중요하다. 링커의 초기 설계는 안정적인 아미드 결합에 의해 HSA 담체에 연결되고 이황화 결합을 통해 페이로드에 연결되는 PEG 사슬을 기반으로 하였다. 이러한 이황화 결합은 세포질의 환원 환경에서 절단되도록 설계되었다. 도 13a는 2개의 VHH에 커플링된 PEI-변형된 HSA의 초기 설계에 대한 개략적인 표현을 도시한다. 물론 VHH는 임의의 생물학적 제제로 치환될 수 있다. 이러한 설계를 항-E7 VHH 및 항-KRAS DARPin을 사용한 기능적 시험관내 연구에 사용하였다. 이러한 설계에서, PEI-변형된 HSA를 NHS-PEGn-SPDP로 추가로 변형시켰다. NHS 기는 HSA 또는 이의 PEI 변형의 1차 아미노 기와 반응하여 안정적인 아미드 결합을 생성한다. 사용된 링커는 PEG4 사슬을 포함하였다. 단일 변형에 가까운 변형 수준을 생성하도록 반응 조건을 선택하였다. 실제로, PEI-변형된 HSA의 대부분은 단일 변형을 가졌지만 일부는 2 내지 3개의 변형을 가졌다. 이들 모이어티를 이의 C-말단에 유리 시스테인을 갖는 VHH 또는 DARPin과 추가로 반응시켰다. 일부 경우에, 이러한 시스테인의 티올을 이량체 상태 또는 다른 티올 함유 분자에 대한 결합으로부터 방출시키기 위해서 TCEP와 같은 환원제를 사용한 전처리가 필요하였다. 최종 접합체는 활성 페이로드에 가까운 불안정한 이황화 결합을 갖는 것을 특징으로 한다.
이러한 초기 설계는 세포질을 모방하는 조건, 즉, 대략 10 mM의 GSH 존재 하에서 절단을 겪지만 기능적 시험관내 연구에 사용되는 세포 배양 배지에서는 안정한 것으로 나타났다.
도 13a에 도시된 구조에 따라 PEI-변형된 HSA(3.5개 및 8개 분자)에 접합되거나 단일 VHH를 갖는 항-비멘틴 VHH(QVQ, 카탈로그 번호 Q60C)를 마우스에서 PK 및 생체분포에 대해서 평가하였다. 10 mg/Kg(VHH 중량 기준)의 비변형 VHH, 비변형 HSA에 접합된 VHH 및 PEI-변형된 HSA에 접합된 VHH를 모두 마우스 꼬리 정맥에 주사하고, 주사 후 5분 및 24시간에 혈장을 채취하였다. 추가로, 생체분포를 평가하기 위해서 주사 후 24시간에 마우스로부터 다양한 조직을 수거하였다. 조직은 간, 비장, 신장, 폐, 심장 및 뇌를 포함하였다.
초기 분석은 페이로드, 즉, VHH의 검출 및 측정에 중점을 두었다. 샘플을 VHH 검출에 사용된 ELISA뿐만 아니라 온전한 담체-VHH 접합체를 측정하도록 설계된 ELISA에 의해 분석하였다. 두 방법 모두를 사용하여 주사 후 5분에 마우스 혈장을 분석한 결과 VHH 수준과 온전한 접합체 수준 사이에 양호한 상관관계가 있는 모든 군의 혈장에 VHH가 존재하는 것으로 나타났다(도 26). 이는 VHH가 이 시점에서 담체에 접합된 상태로 남아 있음을 시사한다. 주사 후 24시간에 채취한 혈장 샘플의 VHH 수준의 분석은, 이것이 변형되지 않았는지 또는 접합체의 일부인지에 관계없이 어떠한 VHH도 검출할 수 없었다. VHH에 접합되었는지에 관계없이, 담체(HSA) 수준 분석은 상당한 수준의 비변형 담체를 검출하였다(도 27). 이러한 결과는 VHH가 담체로부터 조기에 절단되었음을 시사한다. 이러한 가설은 다양한 조직에서 VHH의 ELISA(도 28) 및 면역형광 분석(도 29)의 결과에 의해 추가로 뒷받침되었다. 이러한 분석은, 분석된 상이한 기관에서 VHH의 수준 및 분포 프로파일이 담체의 PEI 수준에 관계없이 또는 VHH가 접합되지 않은 경우에도 매우 유사하다는 것을 나타내었다.
이러한 결과는 VHH 페이로드와 HSA 담체 사이의 링커가 마우스 혈장에서 충분히 안정적이지 않다는 가설을 이끌어 내었다. 따라서, 이러한 링커의 생체외 안정성 분석을 마우스, 원숭이 및 인간의 혈장에서 수행하였다. 도 13a의 일반 구조에 따른, HSA에 접합된 VHH(PEI 변형 없음)의 안정성을 마우스 혈장(Balb-C 마우스, Bioreclamation, K2EDTA, 카탈로그 번호 MSEO2PLK2YNN, 로트 번호 MSE347339), 인간 혈장(Bioreclamation, Na2EDTA, 로트 번호 HMN21123) 및 원숭이 혈청(Bioreclamation, 카탈로그 번호 CYN262432)에서 접합체와 인큐베이션시켜 분석하였다. 온전한 접합체만 측정하는 ELISA를 사용하여 접합체의 수준을 시간 경과에 따라 측정하고, PBS에서 인큐베이션시키는 경우 접합체 수준에 대해서 표준화하였다. 도 30에서 인지할 수 있는 바와 같이, 접합체는 실제로 마우스 혈장에서는 불안정하였고 원숭이 혈청에서는 그 정도가 덜하였다. 시간 경과에 따른 인간 혈장에서의 접합체 수준 감소가 마우스 혈장에서만큼 가파르지는 않았지만, 인간 혈장에서의 안정성 또한 효율적인 생체분포에 이상적이지 않다. 접합체의 안정성을 또한 세포의 세포질 내 GSH 수준을 모방하여 10 mM GSH 용액에서 평가하였다. 예상된 바와 같이 그리고 설계된 바와 같이, VHH를 담체에 접합시키는 이황화 결합은 GSH의 존재 하에서 불안정하며 실제로 모든 접합체는 5시간 이내에 절단되었다.
페이로드 VHH가 혈장에서 조기에 절단되었음을 이해하고, 수집된 다양한 기관에서 담체 자체의 수준을 분석하였다. HSA 단백질에만 관련된 ELISA를 사용하여 주사된 동물로부터의 뇌, 심장, 비장, 폐, 꼬리 및 간 추출물을 분석하였다. 비변형 HSA와 HSA-PEI×3.5 둘 다는 모든 기관에서 매우 낮은 수준으로 검출되었다(도 31). 그러나 HSA-PEI×8은 폐 및 꼬리(주사 부위)를 제외한 모든 기관에서 매우 높은 수준으로 검출되었다. 이러한 ELISA 결과는 항-HSA-FITC 항체로 염색된 비장 냉동절편에서 높은 수준의 HSA-PEI×8 단백질을 나타내는 면역형광 결과에 의해 확증되었다(도 32c). PEI 변형된 HSA는 비장에서 높은 수준으로 발견되었지만, 비변형 HSA는 훨씬 낮은 수준에서 관찰되었으며(도 32b), 실제로는 비변형 VHH 주사 후 관찰된 배경 신호와 유사한 수준이었다(도 32a). ELISA와 면역형광 둘 다의 결과는 안정적으로 접합되는 경우 PEI 변형이 실제로 IV 주사 후 상이한 기관의 세포에 담체 및 이의 카고(cargo)를 전달할 수 있음을 나타낸다.
실시예 10: 새로운 접합체 및 링커
이러한 결과에 기초하여, 접합체를 재설계하였다(도 33). 이 설계는 하나의 페이로드 단백질이 하나의 HSA 담체에 접합된 접합체를 생성하는 것을 목표로 한다. 담체에 대한 링커 접합을 위해 NHS-활성화 에스테르를 활용하는 이전 방법론은 이 요구 사항과 호환되지 않기 때문에, 대신에 HSA 단백질의 위치 34의 시스테인 아미노산을 활용하였다. 이는 HSA에 존재하는 유일한 유리 티올이므로 이 위치에 페이로드를 접합하면 일대일 접합을 생성한다.
도 34에서 인지할 수 있는 바와 같이, 비오틴이 Cys34에서 직접 이황화 결합을 통해 HSA에 연결된 비오틴-PEG-HSA 접합체는 마우스 혈장 및 인간 혈장 모두에서 매우 안정적이다.
그러나, 과도하게 보호된 절단 부위는 세포질 절단이 세포질 내 페이로드 분산에 유익하기 때문에 작동 불가능할 것이다. 따라서, 비오틴-PEG-HSA 접합체의 안정성을 글루타티온(10 mM)의 존재를 특징으로 하는 세포질-유사 조건에서 평가하였다. 놀랍게도, 비오틴-PEG-HSA는 이러한 조건 하에서 고도로 절단 가능하며, 심지어 t=0으로 지칭되는 초기 측정 지점에서도 접합체의 약 50%가 절단되는데(도 35), 이는 아마도 GSH 용액에의 접합체 첨가와, 분석 전의 이의 샘플링 및 동결 사이의 수 분 이내에 절단된다. 6시간까지, 접합체 대부분이 절단되는데, 이는 Cys34 이황화 결합이 혈장에서는 안정적이지만 세포질 환경에서 발견되는 것과 같은 환원성 절단에 매우 민감하여, 본 발명의 접합체에 사용하기에 이상적이라는 것을 시사한다.
따라서, 이황화 결합(예를 들어, 링커와 Cys34 사이) 또는 클릭 화학(예를 들어, 마이클 첨가 또는 아지드-DBCO 고리첨가)를 통한 페이로드-담체 접합을 활용하여 다양한 페이로드-담체 접합체(C1-C2, 표 1 참조)를 설계하고 제조하였다(도 13b 내지 도 13d 및 도 36).
상기에 언급된 바와 같이, 활성 도메인을 또한 방해하지 않을 부위-선택적인 방식으로 담체에 페이로드를 접합시키기 위해서, 바람직한 방법론은 바람직하게는 페이로드의 C-말단에서 단일 유리 시스테인에 대한 접합을 사용하는 것을 포함한다. 링커에 대한 담체 및 페이로드 둘 다의 접합은 유리 티올을 통해 이루어지기 때문에, 이것은 양 말단에 2개의 티올 반응성 기를 가져야 하는데, 하나는 불안정한 Cys34 이황화 결합을 생성하기 위한 SPDP 기반이고 다른 하나는 VHH 페이로드 근처에서 안정적인 결합을 유도하는 티올 반응성 기 기반이다. Cys34 티올과 제2 부위의 반응을 피하기 위해서, 일반적으로 Cys34와 반응하지 않고 페이로드 유리 티올과 반응하기 전에 탈보호 및/또는 활성화가 필요한 보호된 기를 사용한다.
제시된 링커에 대해 추가적인 최적화를 평가하였다. 이러한 최적화 중 하나는 Cys34에 입체적으로 보호된 이황화 결합을 포함하는 링커의 사용을 포함한다. 이는 활성화된 티올의 알파 위치에 있는 탄소가 1개 또는 2개의 알킬 기, 바람직하게는 메틸 기로 치환된 링커를 사용하여 달성된다.
그럼에도 불구하고, 페이로드 결합을 위해 유리 티올 상의 보호기가 사용될 수 있다. 예를 들어, 일반적으로 사용되는 티올 보호 기는 SATA라고도 알려진 S-아세틸 기이다.
그 다음, 탈보호된 티올은 추가로 활성화되어 HSA의 Cys34의 유리 티올과 효율적인 반응을 가능하게 한다. 이러한 활성화는 탈보호된 유리 티올을 2,2'-디피리딜디설파이드(알드리티올)와 반응시켜 SPDP 활성화 티올을 생성함으로써 달성될 수 있으며, 이는 이미 HSA의 Cys34와 효율적으로 반응하는 것으로 나타났다. 예시적인 접합 반응식을 도 36에 제시한다. 추가적인 예시적인 합성 경로를 하기 표 3에 제시한다.
[표 3]
한 설계에서, HSA-PEG4-디-메틸(dm)-S-S-VHH(S1)를 제조하였다(참고로, HSA에 대한 접합이 선택적이지 않아서 하나 초과의 변형이 일어날 수 있기 때문에 HSA와 VHH 사이의 몰비는 1 초과일 수 있음). 이를 위해, HSA를 NHS-PEG4-dm-SPDP로 변형시킨다. NHS 기를 HSA의 1차 아미노 기와 반응시켜 안정적인 아미드 결합을 생성한다. 사용된 링커는 PEG4 사슬을 포함하였다. 변형된 HSA 상의 dm-SPDP와 C-말단에 유리 시스테인이 있는 VHH의 이러한 반응은 낮은 반응 수율을 초래하였다. 반응 수율을 개선시키기 위해서, HSA 상의 dm-SPDP 모이어티를 dm-SPDP-NO2로 전환시켜 훨씬 더 활성화된 기를 생성하였다. 이를 위해, NHS-PEG4-SPDP로 변형된 HSA를 TCEP로 환원시켜 PEG4-dm-SH 모이어티를 갖는 HSA를 얻었고, 후자를 2,2'-디티오비스(5-니트로피리딘)으로 추가로 활성화시켜 PEG4-dm-SPDP-NO2 모이어티로 변형된 목적하는 HSA를 제공하였다. 이들 모이어티를 이의 C-말단에 유리 시스테인을 갖는 VHH 또는 DARPin과 추가로 반응시켰다. 일부 경우에, 이러한 시스테인의 티올을 이량체 상태 또는 다른 티올 함유 분자에 대한 결합으로부터 방출시키기 위해서 TCEP와 같은 환원제를 사용한 전처리가 필요하였다.
또 다른 다른 설계인 HSA-S-S-α-메틸-PEG11-트리아졸-PEG4-VHH (S2)을 제조하였다. 이를 위해, HSA를 N3-PEG11-α-메틸-SPDP-NO2로 변형시켜, 시스테인 34에서 모노 PEG 변형을 제공하였다. 동시에, VHH를 MAL-PEG4-DBCO로 변형시켜 VHH C 말단 시스테인에서 변형된 모노 PEG를 제공하였다. 2개의 단백질을 클릭 반응에 의해서 접합시켜 목적하는 HSA-S-S-α-메틸-PEG11-트리아졸-PEG4-VHH 작제물을 제공하였다.
펩티드-기반 링커
이 설계에서, VHH 페이로드를 C-말단 단부에 추가적인 펩티드 링커를 사용하여 발현시켰다. 본 발명자들은 위치 34에서 HSA 시스테인 상에 불안정한 이황화 결합을 갖는 펩티드-기반 링커(S3A-B)를 사용하여 다양한 접합체를 합성하였다. 약술하자면, G4S-기반 펩티드로 C-말단에 발현되고 시스테인으로 종결된 VHH를 SPDP 또는 니트로-SPDP에 의해 활성화시켜 HSA의 C34 티올 기와 반응시켰다. S3A-B를 표 1에 개략적으로 제시한다.
S-S 결합의 안정성을 증가시키기 위해서, 본 발명자들은 각각 다음 서열에서와 같이, C 말단 시스테인 상의 α 또는 β 위치에 있는 입체 장애형 아미노산인 류신을 첨가하였다; GGGGSGGGGSGGGGLC(서열번호 4)("pep1"로 명명) 또는 GGGGSGGGGSGGGLGC(서열번호 5)("pep2"로 명명). 이러한 접합체는 알드리티올 또는 2,2'-디티오비스(5-니트로피리딘)을 사용하여 C 말단 시스테인에서 VHH 활성시킨 후 HSA에 접합시켜 제조하였다. 일부 경우에, 이러한 시스테인의 티올을 이량체 상태 또는 다른 티올 함유 분자에 대한 결합으로부터 방출시키기 위해서 TCEP와 같은 환원제를 사용한 C 말단 VHH의 전처리가 필요하였다.
펩티드에서 류신 아미노산이 이러한 펩티드 링커의 안정성에 기여하는지 여부를 이해하기 위해서, VHH αE7-(G4S)3-C의 추가 작제물을 발현시키고 HSA에 접합시켜, 추가적인 펩티드 링커-기반 접합체인 VHH αE7-(G4S)3-C-HSA(S3C)를 생성하였다.
실시예 11: 생물학적 절단 가능한(가역적) 링커 및 생물학적 절단 불가능한(비가역적) 링커(S1 내지 S3C)의 안정성
S1 접합체는 활성 페이로드에 가까운 불안정한 이황화 결합을 갖는 것을 특징으로 한다. 다음 배지에서의 시험관내 연구: PBS/인간 혈장/마우스 혈장 및 GSH(10 mM)(도 37a)는 이 접합체가 PBS에서 안정적이라는 것을 나타내었다. 인간 혈장에서 접합체 농도는 96시간 후에도 감소하지 않았다. GSH(10 mM)에서 접합체 농도는 예상된 바와 같이 시간 경과에 따라 급격히 감소하였으며 마우스 혈장에서는 접합체 농도의 일부 감소가 관찰되었다(도 37a). 시간 경과에 따른 이러한 농도 감소는 비가역적 링커의 유사한 거동(도 37b) 및 생체내 PK 결과(도 38a 및 도 38b 참조)에 비추어 이황화 결합의 화학적 분해가 아니라 흡착과 같은 물리적 과정의 결과일 가능성이 높다.
S2의 시험관내 안정성 분석은 접합체가 PBS/마우스 혈장 및 인간 혈장에서 매우 안정적이라는 것을 나타내었다. 다른 HSA 접합체와는 달리, 이 링커는 또한 GSH(10 mM) 조건 하에서 더 안정적이었으며 별도의 VHH 및 HSA로의 환원은 사용된 다른 링커만큼 빠르지 않았다. 4시간 후에도 대부분의 접합체는 여전히 HSA-VHH 접합된 형태(80% 초과)인 반면, 24시간 후에는 샘플의 20%만 HSA-VHH 형태로 검출되었으며 환원 과정은 시간이 경과에 따라 계속되었다(도 37c). 이러한 결과는 시험된 다른 모든 접합체와 비교하여 이 접합체에 대해 우수한 안정성을 나타낸 PK 결과와 상관관계가 있다(도 38a 및 도 38b 참조).
펩티드-기반 링커의 시험관내 안정성을 또한 연구하였다. 결과는 이러한 접합체가 PBS/인간 혈장 및 마우스 혈장에서 안정적이라는 것을 나타내었는데, 그 이유는 임의의 조건에서 96시간 인큐베이션 동안 접합체 농도의 감소가 관찰되지 않았기 때문이다. GSH(10 mM)에서 접합체의 농도는 예상된 바와 같이 시간 경과에 따라 빠르게 감소하였다(도 37d 내지 도 37f). 마우스 혈장 내 접합체의 안정성을 비가역적 접합체(VHH 항 E7-HSA)와 추가로 비교하여, 새로운 작제물(S3A-B)이 마우스 혈장에서 비가역적 작제물만큼 안정적이라는 것을 보여주었다(도 37f).
HSA의 C34 시스테인에 불안정한 이황화 결합을 갖는 접합체 C1 및 C2를 생체내 PK 연구에서 평가하여 마우스 혈장에서 이의 실제 안정성을 결정하였다(도 38a). 다음 표 4는 상이한 링커를 갖는 상이한 접합체의 동역학적 매개변수 및 HSA 단독 및 비가역적 접합체(VHH αE7-PEG11-HSA, S4)와의 비교를 요약한다. 예상된 바와 같이, 이들 둘은 반감기 및 AUC를 포함하여 매우 유사한 PK 프로파일 및 매개변수를 갖는다. 접합체 C1 및 C2는 HSA 및 비가역적 접합체보다 낮은 반감기를 가졌지만, 이황화 결합의 안정성에 상응하는 반감기는 HSA의 C34 공동에 의해 제공되는 바와 같이, 이황화 결합이 페이로드의 C-말단에 존재하고 어떠한 장애 또는 자연적 보호도 없는 초기 작제물과 비교할 때 극적으로 개선되었다. 후자의 경우, 이 접합체는 수 분 및 수 시간 이내에 감소되었으며 주사 후 24시간에서 원래 주사된 용량의 매우 적은 양이 이들 동물의 혈액에서 검출될 수 있었다. 이는 실제로 C34의 이황화 결합 위치가 혈장에서 환원제로부터 보호를 제공한다는 것을 추가로 나타낸다.
[표 4]
실제 마우스 혈장 조건 하에서 상이한 새로운 링커, 장애형 PEG 및 펩티드 링커의 안정성을 추가로 평가하기 위해서, 다음 접합체를 사용하여 PK 연구를 수행하였다: (1) S3A; (2) S3B; (3) VHH S2; (4) S1; (5) HSA. 도 38b 및 하기 표에서 인지할 수 있는 바와 같이, S3A 및 S3B의 펩티드 링커뿐만 아니라 S1의 디메틸 장애형 PEG 링커는 매우 유사한 PK 프로파일 및 PK 매개변수를 제공하였다. 모든 이들 링커는 이전 PK 연구에 사용된 더 단순한 PEG 링커에 대해 얻은 값보다 더 높은 반감기 값을 제공하였는데(도 38a), 이는 이들 링커가 불안정한 이황화 결합의 더 양호한 혈장 안정성을 제공한다는 것을 시사한다. 메틸 기(S2)로 인해 추가로 방해받은 C34 상의 이황화 결합은 더 높은 반감기 및 심지어는 HSA의 반감기에 훨씬 더 가깝다는 사실에서 입증되는 바와 같이 훨씬 더 양호한 안정성 프로파일을 제공하였다. 안정성의 이러한 개선은 다른 PK 매개변수, 특히 제거율 및 AUC에서도 분명하다(하기 표 5 참조).
[표 5]
새로운 링커(S1, S2, S3A-B)를 갖는 접합체의 혈장 반감기는 HSA의 반감기보다 약간 낮다. HSA와 비교하여 혈장 접합체 농도의 감소가 실제로 링커 절단의 결과인지 결정하기 위해서, 추가 ELISA를 수행하였다. 이 ELISA에서 4개의 새로운 접합체의 혈장 내 농도를 항 HSA ELISA(링커가 절단된 경우에도 HSA의 양을 정량화함)에 의해 평가하였다. HSA에 의한 접합체의 농도를 2면 ELISA(HSA 형태에 결합된 VHH αE7만 정량화함)에 의한 접합체 농도와 비교하였다. HSA의 PK 프로파일과 비교하여 ELISA 방법으로 측정한 S3A의 PK 프로파일을 도 38c에 나타내었다. HSA ELISA에 의한 S3A의 정량화는 HSA 단독에 대해 관찰된 것과 매우 유사한 접합체 농도를 제공하였다. 이 결과는 HSA와 비교할 때 S3A 농도의 감소가 실제로 링커 절단의 결과임을 나타낸다. 상이한 링커를 갖는 다른 접합체에 대해서도 유사한 결과가 얻어졌다(데이터는 나타내지 않음).
이황화 결합 근처의 류신 아미노산 위치만 다른 펩티드 링커를 갖는 2개의 작제물(VHH αE7-G4S-G4S-G4L-C(서열번호 4), S3A 및 VHH αE7-G4S-G4S-GGGLG-C(서열번호 5), S3B)을 시험관내 및 생체내 안정성에 대해서 평가하였다. 2개의 접합체는 시험관내 및 생체내 (PK) 안정성 모두 서로 유사하고 또한 절단 불가능한 링커를 갖는 접합체(S4)와 유사함을 나타내었다. 새로운 작제물인 VHH αE7-(G4S)3-C-HSA (S3C) 안정성을 S3A와 비교하여 인간 혈장 및 10 mM GSH에서 시험관내에서 시험하였다. 도 39에서 인지할 수 있는 바와 같이, 두 작제물 모두 인간 혈장 및 글루타티온 용액 둘 다에서 매우 유사한 안정성 프로파일을 나타내는데, 이는 류신 아미노산이 접합체의 안정성에 크게 기여하지 않음을 시사한다. 10 mM GSH에서 류신 함유 링커는 다소 더 양호하게 생존한 것이 주목되었는데, 그 이유는 이 접합체의 초기 수준의 약 8%가 24시간 후에도 여전히 검출될 수 있었던 반면, 류신이 없는 접합체의 잔류 수준은 이 시점에서 검출될 수 없었기 때문이었다. 류신-함유 링커를 갖는 접합체는 48시간(대략 1%) 후에도 검출될 수 있다.
이는 류신이 안정성 측면에서 일부 이점을 제공하며 이러한 기여를 확인하기 위해서는 추가 시험이 필요할 수 있음을 시사한다. 임의의 경우에, 본 발명자들은 담체와 함께 이황화 결합에 가까운 류신을 함유하는 링커를 계속 사용할 것이다.
HSA에 연결된 VHH αE7의 4개 접합체(S1 내지 S3B) 모두를 상이한 링커 및 화학물질을 사용하여 VHH αE7을 HSA-PEI×3.5에 접합시킴으로써 PEI로 추가 변형시켰고, 이들의 흡수 능력을 공초점 현미경으로 확인하였다. Hela GFP 세포를 시딩하고, 시험된 샘플을 세포와 함께 16시간 동안 인큐베이션시킨 후, 고정 및 면역염색 과정 후 공초점 현미경으로 흡수 수준을 평가하였다. 도 40a 내지 도 40f에서 인지될 수 있는 바와 같이, 미처리 세포(도 40a)는 VHH의 존재를 나타내지 않은 반면, 새로운 링커(S1-PEI-S3B-PEI)를 통해 HSA-PEI×3.5에 접합된 VHH로 처리한 경우 세포 내부에서 VHH의 명확한 존재를 나타내었다(도 40b 내지 도 40f).
링커 길이(상이한 길이의 펩티드 링커, (G4S)n, n=0, 1, 2, 3)
상이한 VHH 및 DARPin 작용제를 G4S 단위를 기반으로 하는 가요성 펩티드 및 그 다음 말단 시스테인 아미노산과 함께 발현시켰다. 펩티드 링커의 길이는 n=0, 1, 2, 3인 (G4S)n 단위의 수에 의해 결정되었다. 단백질을 2,2'-디티오비스(5-니트로피리딘)으로 활성화시키고, HSA에 접합시켰다.
n=1인 경우, 본 발명자들은 상이한 단백질에 대해 상이한 접합 반응 수율을 관찰하였다. VHH αE7-G4S-1C는 담체에 대한 효율적인 접합 반응을 초래하였고, K27 항-KRAS DARPin은 중간 수준의 반응 수율을 제공한 반면, HSA/HSA-PEI에 대한 VHH 항-BRAF의 접합에서는 접합 생성물이 관찰되지 않았다. 링커의 일부 확장을 초래하는 비스-MAL-PEGn의 사용을 요구하는 비가역적 접합의 경우, VHH 항-BRAF-G4S-C 작제물을 사용하여 VHH 항-BRAF-G4S-C-HSA-PEI(S5A)를 성공적으로 생성할 수 있다는 것을 주목해야 한다.
VHH 항-BRAF(1C5)는 상이한 펩티드 링커 길이로 발현되었다(하기 표 6에 제시됨). 상이한 링커 길이를 갖는 상이한 1C5 작제물을 TCEP로 처리하고, 생성된 C-말단 시스테인의 유리 티올을 2,2'-디티오비스(5-니트로피리딘)으로 활성시킨 후 담체인 HSA-PEI에 접합시켰다. C 말단에서 류신-시스테인으로 끝나는 모든 활성화된 1C5 접합체는 펩티드 링커 길이(n=0, 1, 2, 3)에 관계없이 HSA-PEI×4.5에 대한 효율적인 접합을 나타내었다. 이러한 결과는 접합 생성물을 생성하는 데 실패한 1C5-G4S-C(류신 없음)와 HSA-PEI×4.5의 접합 반응으로부터 얻은 결과에 비추어 놀라운 것이다.
상이한 페이로드 작제물의 접합 반응의 수율을 SDS 겔에 의해서 평가하였고, 그 결과를 하기 표 6에 요약한다.
[표 6]
특정 이론에 얽매이고자 함은 아니지만, 본 발명의 페이로드에 대한 단백질 담체의 공유 부착을 위해 펩티드 링커가 구현되는 경우 적어도 4개, 적어도 5개, 적어도 6개, 적어도 8개의 아미노산을 포함하는 링커를 갖는 것이 유리할 수 있다고 가정된다. 표 6에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 페이로드에 대한 단백질 담체의 효율적인 접합에 필요한 링커 길이는 페이로드의 특정 크기 및/또는 서열에 따라 달라질 수 있다.
입체 장애형 아미노산이 있거나 없는 상이한 길이의 펩티드 링커
하기 C 말단 서열을 갖는 VHH 항 BRAF(1C5)를 발현시켰다:
작제물 1: 항 BRAF (1C5)-G4S-C(서열번호 9)(1C5)
작제물 2: 항 BRAF (1C5)-GGGGSGGGGSGGGGLC(서열번호 4) (1C5-flex-pep-LC)
작제물 3: 항 BRAF (1C5)-AAASAEAAAKEAAAKEAAAKAAAGSGLC(서열번호 10)(1C5-Hel20-LC)
작제물 2는 항-E7 VHH(S3A)를 갖는 펩티드 링커를 갖는 상기에 기재된 작제물과 유사하다. 작제물 3은 본질적으로 VHH 페이로드와 담체의 상호작용을 피하거나 최소화하는 것으로 추정되는 강성 링커로 간주되는 알파-나선형 링커를 갖는다. 1C5 VHH는 가요성 G4S-기반 링커를 사용하여 HSA-PEI에 접합된 경우 단백질-A 기반 수지에 대한 친화력을 잃어버리는 것으로 관찰되었는데, 이는 아마도 특정 정전기 상호작용으로 인한 것이다. 강성 링커는 실제로 단백질-A 수지와의 이러한 상호작용을 회복시켰는데, 이는 강성 링커가 담체와의 이러한 상호작용을 감소시키고 노출된 VHH를 유지함을 시사한다. 강성 링커는 또한 담체 접합에 사용되는 말단 시스테인 근처의 류신으로 종결된다.
작제물 1(1C5)을 비가역적 PEG 링커(비스 MAL-PEG11)를 사용하여 HSA-PEI×3.5에 접합시켜 1C5-HSA-PEI×3.5(S5A)를 생성하였다. 작제물 2(1C5-flex-pep-LC) 및 3(1C5-Hel20-LC) 둘 모두를 HSA-PEI×3.5에 접합시켜 가역적 접합체 각각 1C5-flex-pep-LC-HSA-PEI×3.5(S5B) 및 1C5-Hel20-LC-HSA-PEI×3.5(S5C)를 제공하였다. 1C5-flex-pep-LC-HSA-PEI×3.5(S5B)는 마우스 혈장에서 양호한 안정성을 나타낸 E7-pep1-LC-HSA(S3A)와 유사한 작제물이다(생체내 도 38b 및 시험관내 도 37f). S5C는 강성 펩티드 링커를 통한 항 BRAF VHH의 작제물이다. 이 작제물을 시험관내 안정성에 대해 시험하였고(도 41), 마우스 혈장 조건 하에서 양호한 안정성을 나타내었다.
실시예 12: PEI 변형
담체 단백질에 매우 강하고 농축된 양전하를 부여하는 PEI 변형은 세포막의 통과를 유도하는 세포막에 대한 담체의 초기 접착을 담당한다. 그 다음 동일한 PEI 변형은 엔도솜 경로로부터 PEI-변형된 담체 및 이의 페이로드의 효율적인 탈출을 담당한다. 본원에는 상이한 수준의 PEI에 의해 변형된 다양한 캐리어가 제시되어 있다. 구체적으로 담체로서의 HSA에 대해서, 본 발명자들은 주로 두 가지 변형 수준, 즉, HSA 분자당 3.5 내지 4.5개 범위의 PEI 분자의 낮은 수준 및 7.5 내지 9.5개 범위의 더 높은 수준에 초점을 맞춘 내재화, 기능적 및 생체내 결과를 설명하였다. 이전에 본 발명자들은 두 PEI 범위, 즉, 높은 범위와 낮은 범위 모두 세포에서 내재화 및 엔도솜 탈출뿐만 아니라 기능성을 효율적으로 가능하게 한다는 것을 발견하였다. 두 범위 모두 대등한 PK 및 생체분포 프로파일을 갖지만 더 낮은 범위가 더 우수하였다. 본 발명자들은 특히 세포 내에서 페이로드-담체 접합체의 기능성에 대한 더 낮은 수준의 PEI의 효과가 무엇인지 확립하고자 하였다.
강성 펩티드 링커인 1C5-Hel20-LC를 갖는 항-BRAF VHH를 n=4.5, 3, 2, 1로 HSA-PEI×n(S5C)에 접합시켰다. 상기에 기재된 바와 같이, PEI의 수준은 PEI 변형 반응에 사용되는 시약의 수준 및 비율에 의해 제어되며 최종 수준은 MALDI-ToF 질량 분석법에 의해서 변형 생성물의 이의 원래 질량에 대해서 분석함으로써 결정된다. 보고된 PEI 수준은 HSA에 첨가된 PEI 분자의 평균 수를 나타냄을 주목하고 강조해야 한다. 각각의 반응에서 HSA 단백질에 대한 PEI 변형 수준을 질량 분석법으로 평가하고, 상이한 담체를 제타 전위에 대해서 특징규명하였다(표 7).
Zeta Sizer Ultra(Malvern Instruments)를 사용하여 제타 전위 측정을 수행하였고, 샘플 완충액을 1 mg/mL 단백질 농도의 1 mM NaCl로 교환하였다. 각각의 샘플 20 μL를 제타 셀(DTS1070)에 로딩하고 각각의 샘플에 대해 5회 반복 측정하여 mV 단위의 평균 제타 전위를 얻었다.
[표 7]
1C5-Hel20-LC를 환원시키고 2,2'-디티오비스(5-니트로피리딘)으로 활성화시킨 후 HSA-PEI×n로 접합시켜 1C5-Hel20-LC-HSA-PEI(S5C)×n 접합체를 제조하였다. 상이한 작제물에 의한 세포내 BRAF 저해를 A375 세포에서 기능적 검정에 의해서 평가하였다. 아폽토시스 세포를 확인하기 위해 IncuCyte®에서 형광을 모니터링하면서, 상이한 접합체를 아넥신 V 적색 시약의 존재 하에서 A375 세포와 함께 6일 동안 인큐베이션시켰다(도 42a, 도 42c). 이 6일의 종료 시, 시험된 웰 각각에서 살아있는 세포의 양을 평가하기 위해서 CellTiter-Glo 검정을 수행하였다. 6일 후, 아폽토시스 수준을 나타내는 동일한 시점의 적색 영역을 시험된 각각의 웰에서 살아있는 세포 양에 대해 정규화할 수 있다. 이러한 정규화된 값을 사용하여 상이한 시험된 작용제를 비교하였다(도 42b, 도 42d).
직접적인 아폽토시스 평가(도 42a, 도 42c)를 보면, 두 농도 수준 모두에서, S5C-PEI×4.5는 세포내 BRAF의 상당한 저해를 제공하였고 처리된 세포에서 높은 아폽토시스 신호를 유도하였다. 그러나, 아폽토시스 신호가 세포 수에 대해서 정규화되는 경우 PEI 수준에 비해 용량 의존성이 있음이 분명하다(도 42b, 도 42d). S5C-PEI×3 또한 감소하였지만 활성을 나타냈고, PEI×2 및 PEI×1 조차도 특히 3 μM 농도에서 제한된 효과를 나타내었다. 전체적으로, 활성 수준은 PEI 수준과 양호하게 상응하였다.
이러한 결과에서 인지할 수 있는 바와 같이, PEI 수준은 세포내 활성을 얻는 데 중요하며 HSA의 경우 담체가 2개 초과의 PEI 분자에 의해 변형되는 경우 상당한 활성이 달성될 수 있고 담체가 3개 초과의 PEI 분자에 의해서 변형되는 경우 훨씬 더 양호한 활성이 얻어지는 것으로 보인다.
또한, 도 5a에 나타난 바와 같이, 접합체 S5D(실시예 1에 언급됨)는 확실한 아폽토시스 신호로 이어지는 효율적인 BRAF 저해를 나타내었다. 따라서, 생물학적 절단 가능한 결합이 있거나 없는 접합체가 본원에 기재된 바와 같이 페이로드의 효율적인 세포 전달 및 기능을 위해 활용될 수 있다고 가정된다.
실시예 13: 추가 담체
상이한 분자량을 갖는 4개의 상이한 단백질을 담체로서 작용하는 능력에 대해 평가하였다: K27 DARPin(20 KDa; 문헌[Guillard, S. et al. Nat. Commun. 8, 16111 doi: 10.1038/ncomms16111 (2017)]), GFP(30 KDa; biorbyt, 카탈로그 번호 orb84840), IgG(150 KDa; 모노클로날 항체, 마우스 항 염소/양, Clone GT-34, Sigma) 및 피브리노겐(300 KDa; Sigma, 카탈로그 번호 341578). 후자의 2개의 단백질은 혈액에 내인성인 단백질이며, 본 발명의 주요 담체로 사용되는 HSA와 유사하다. 이를 위해, PEI를 사용하여 상이한 단백질을 변형시켰다. EDC 및 PEI의 존재 하에서 MES 완충액 pH 5에서 변형을 수행하였다. PEI 변형된 단백질을 크기 배제 크로마토그래피를 사용하여 과량의 시약으로부터 정제하였다. 변형 수준을 질량 분석법으로 평가하였고, 변형된 담체를 제타 전위에 대해 추가로 평가하였다. 표 8에서 인지할 수 있는 바와 같이 각각의 잠재적 담체에 대한 PEI 변형 수준을 최적화 및 제어할 수 있지만, 더 큰 담체 단백질, 즉, IgG 및 피브리노겐은 접근 가능한 PEI-변형 부위가 더 많기 때문에 더 쉽게 변형된다. 이에 반해서, DARPin과 같은 더 작은 담체는 잠재적인 변형 부위가 더 적고 이들 부위가 더 밀집해있기 때문에 더 낮은 수준의 PEI에 의해 변형된다. GFP는 비교적 낮게 변형되었지만, 이의 크기는 미래에는 훨씬 고도하게 변형될 수 있음을 시사할 것이다.
[표 8]
PEI로 변형된 후 각각의 담체 단백질의 전하 변화를 제타 전위로 측정하였다(표 9). 바람직한 담체인, 4.5 또는 8 PEI 변형을 갖는 HSA를 또한 비교를 위해 제시한다.
[표 9]
상이한 담체를 세포 내로 내재화하는 능력에 대해 시험하였다. PEI 변형된 담체를 A375 세포와 함께 24시간 동안 인큐베이션시키고, 세포 내에서의 이들의 존재를 항 HSA-PEI 항체(HSA-PEI로 동물을 면역시킨 후 자체 생산하였고 HSA-PEI뿐만 아니라 다른 PEI-변형된 단백질을 선택적으로 식별하는 것으로 나타남)를 사용하여 공초점 현미경에 의해서 평가하였다.
이러한 대안적인 담체에서 접합 핫-스팟을 찾으려는 시도가 수행되지 않았기 때문에, 이들을 페이로드에 접합시키기 위해서 PEI로 변형된 상이한 단백질을 NHS-PEG4-SPDP로 활성화시킨 후 VHH 항-E7의 C 말단 시스테인과 접합 반응시켜서, 상기에 기재된 대안적인 PEI-변형된 담체에 접합된 VHH 항-E7을 제공하였다. 항-E7 VHH 페이로드를 세포질의 환원 환경에 민감한 가역적 이황화 결합을 사용하여 접합시켰다. 세포 내로 페이로드를 전달하는 상이한 담체의 능력을, 접합체를 A375 세포와 24시간 동안 인큐베이션시킨 후 항 VHH 항체를 사용한 면역형광 염색을 통해 평가하였다.
도 43a 내지 도 43l에서 인지될 수 있는 바와 같이, 모든 대안적인 담체는 그들의 VHH 카고를 A375 세포에 성공적으로 전달하였다. 또한 상기에 논의된 바와 같이, 더 높은 수준의 PEI 변형을 갖는 담체, 즉 IgG, 피브리노겐 및 HSA는 더 많은 VHH를 전달할 수 있었다. 본원에서 담체가 가역적 링커를 통해 접합되었기 때문에 VHH는 세포질에서 방출되고 세포질에는 사용된 특정 VHH에 대한 표적이 없기 때문에 VHH는 세포질 전체에 확산되어 담체 검출과 달리 검출이 더 어려워지는데(도 44), 이는 이미 논의된 세포질 단백질과의 정전기적 상호작용으로 인해 점상 프로파일로 나타나는 현상으로 인해 더욱 강력해진다. 이러한 이유로 인해서, 낮은 수준의 PEI를 사용하여 더 낮은 수준의 VHH를 전달하도록 관리된 DARPin 담체에 의해서 전달되는 VHH를 관찰하는 것이 다소 어렵다.
이들 결과는 다른 인간 혈액 내인성 단백질을 포함한 다른 단백질이 세포내 담체로서 역할을 할 수 있다는 것을 명확하게 나타내지만, 상기에 나타난 바와 같이 혈액 내 높은 존재비, 낮은 면역원성, 또한 유리한 PK 프로파일의 원인이 되는 유리한 물리화학적 특성 및 상기에 제시된 바와 같이 세포 내부에 페이로드를 방출하기 위해 가역적 결합이 첨가되는 경우 접합체에 대한 높은 부위 선택성 및 향상된 안정성을 제공할 수 있는 C34에서의 고유한 접합 부위로 인해서 HSA를 본 발명의 접합체의 단백질 담체로 사용하는 것이 유익할 수 있다.
실시예 14: 기능적 검정
3개의 작제물인 S5A 내지 C를 다양한 세포주인 Hela-GFP, B16, Renca 및 A375에서 세포내 BRAF를 저해하고 세포 사멸을 유도하는 기능적 능력에 대해 시험하였다. 양성 대조군으로서 PLX 4032, 베무라페닙을 함께 시험하였다. 음성 대조군으로서, 관련되지 않은 VHH인 2A1을 비가역적 PEG 링커를 사용하여 HSA-PEI×3.5에 접합시켰다. 세포 사멸을 실험 전반에 걸쳐 모니터링하였고(도 45a), 실험 종료 시점(140시간)에 세포 역가로 정량화하였다(도 45b).
도 45a 및 도 45b에서 인지될 수 있는 바와 같이, 새로운 펩티드 링커를 통해 접합된 항-BRAF VHH는 세포에서 높은 활성을 나타내었는데, 이는 이들 링커가 효과적으로 세포에 유입되어 세포내 표적에 대해서 이의 페이로드를 방출하는 접합체의 생성과 양립할 수 있음을 시사한다. HSA-PEI×3.5(S5A)에 비가역적으로 접합된 항-BRAF VHH(1C5)는 또한 가역적으로 접합된 작제물보다 낮은 수준이기는 하지만 세포에 아폽토시스를 일으켰고 그 효과는 가역적으로 접합된 작제물보다 늦은 시점에 시작되었다.
본 발명은 이의 구체적인 실시형태와 함께 기재되어 있지만, 많은 대안, 변경 및 변형이 당업자에게 명백할 것임이 자명하다. 따라서, 본 발명은 첨부된 청구범위의 사상 및 넓은 범주 내에 있는 그러한 모든 대체, 변경 및 변형을 포함하는 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING
<110> Biond Biologics Ltd.
<120> INTRACELLULAR DELIVERY COMPOSITIONS
<130> BDB-P-013-PCT
<150> 63/177,144
<151> 2021-04-20
<160> 21
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 585
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu
1 5 10 15
Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr Leu Gln
20 25 30
Gln Cys Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu
35 40 45
Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys
50 55 60
Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu
65 70 75 80
Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu Pro
85 90 95
Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu
100 105 110
Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His
115 120 125
Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys Tyr Leu Tyr Glu Ile Ala Arg
130 135 140
Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg
145 150 155 160
Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala Ala
165 170 175
Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser
180 185 190
Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gln Lys Phe Gly Glu
195 200 205
Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe Pro
210 215 220
Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr Lys
225 230 235 240
Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp Asp
245 250 255
Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile Ser
260 265 270
Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His
275 280 285
Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro Ser
290 295 300
Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr Ala
305 310 315 320
Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg
325 330 335
Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr
340 345 350
Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu
355 360 365
Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro
370 375 380
Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly Glu
385 390 395 400
Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val Pro
405 410 415
Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly Lys
420 425 430
Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro Cys
435 440 445
Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu His
450 455 460
Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu Ser
465 470 475 480
Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu Thr
485 490 495
Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala Asp
500 505 510
Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg Gln Ile Lys Lys Gln Thr Ala
515 520 525
Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gln Leu
530 535 540
Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys Lys
545 550 555 560
Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu Val
565 570 575
Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu
580 585
<210> 2
<211> 866
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Met Phe Ser Met Arg Ile Val Cys Leu Val Leu Ser Val Val Gly Thr
1 5 10 15
Ala Trp Thr Ala Asp Ser Gly Glu Gly Asp Phe Leu Ala Glu Gly Gly
20 25 30
Gly Val Arg Gly Pro Arg Val Val Glu Arg His Gln Ser Ala Cys Lys
35 40 45
Asp Ser Asp Trp Pro Phe Cys Ser Asp Glu Asp Trp Asn Tyr Lys Cys
50 55 60
Pro Ser Gly Cys Arg Met Lys Gly Leu Ile Asp Glu Val Asn Gln Asp
65 70 75 80
Phe Thr Asn Arg Ile Asn Lys Leu Lys Asn Ser Leu Phe Glu Tyr Gln
85 90 95
Lys Asn Asn Lys Asp Ser His Ser Leu Thr Thr Asn Ile Met Glu Ile
100 105 110
Leu Arg Gly Asp Phe Ser Ser Ala Asn Asn Arg Asp Asn Thr Tyr Asn
115 120 125
Arg Val Ser Glu Asp Leu Arg Ser Arg Ile Glu Val Leu Lys Arg Lys
130 135 140
Val Ile Glu Lys Val Gln His Ile Gln Leu Leu Gln Lys Asn Val Arg
145 150 155 160
Ala Gln Leu Val Asp Met Lys Arg Leu Glu Val Asp Ile Asp Ile Lys
165 170 175
Ile Arg Ser Cys Arg Gly Ser Cys Ser Arg Ala Leu Ala Arg Glu Val
180 185 190
Asp Leu Lys Asp Tyr Glu Asp Gln Gln Lys Gln Leu Glu Gln Val Ile
195 200 205
Ala Lys Asp Leu Leu Pro Ser Arg Asp Arg Gln His Leu Pro Leu Ile
210 215 220
Lys Met Lys Pro Val Pro Asp Leu Val Pro Gly Asn Phe Lys Ser Gln
225 230 235 240
Leu Gln Lys Val Pro Pro Glu Trp Lys Ala Leu Thr Asp Met Pro Gln
245 250 255
Met Arg Met Glu Leu Glu Arg Pro Gly Gly Asn Glu Ile Thr Arg Gly
260 265 270
Gly Ser Thr Ser Tyr Gly Thr Gly Ser Glu Thr Glu Ser Pro Arg Asn
275 280 285
Pro Ser Ser Ala Gly Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ser Gly Pro Gly Ser
290 295 300
Thr Gly Asn Arg Asn Pro Gly Ser Ser Gly Thr Gly Gly Thr Ala Thr
305 310 315 320
Trp Lys Pro Gly Ser Ser Gly Pro Gly Ser Thr Gly Ser Trp Asn Ser
325 330 335
Gly Ser Ser Gly Thr Gly Ser Thr Gly Asn Gln Asn Pro Gly Ser Pro
340 345 350
Arg Pro Gly Ser Thr Gly Thr Trp Asn Pro Gly Ser Ser Glu Arg Gly
355 360 365
Ser Ala Gly His Trp Thr Ser Glu Ser Ser Val Ser Gly Ser Thr Gly
370 375 380
Gln Trp His Ser Glu Ser Gly Ser Phe Arg Pro Asp Ser Pro Gly Ser
385 390 395 400
Gly Asn Ala Arg Pro Asn Asn Pro Asp Trp Gly Thr Phe Glu Glu Val
405 410 415
Ser Gly Asn Val Ser Pro Gly Thr Arg Arg Glu Tyr His Thr Glu Lys
420 425 430
Leu Val Thr Ser Lys Gly Asp Lys Glu Leu Arg Thr Gly Lys Glu Lys
435 440 445
Val Thr Ser Gly Ser Thr Thr Thr Thr Arg Arg Ser Cys Ser Lys Thr
450 455 460
Val Thr Lys Thr Val Ile Gly Pro Asp Gly His Lys Glu Val Thr Lys
465 470 475 480
Glu Val Val Thr Ser Glu Asp Gly Ser Asp Cys Pro Glu Ala Met Asp
485 490 495
Leu Gly Thr Leu Ser Gly Ile Gly Thr Leu Asp Gly Phe Arg His Arg
500 505 510
His Pro Asp Glu Ala Ala Phe Phe Asp Thr Ala Ser Thr Gly Lys Thr
515 520 525
Phe Pro Gly Phe Phe Ser Pro Met Leu Gly Glu Phe Val Ser Glu Thr
530 535 540
Glu Ser Arg Gly Ser Glu Ser Gly Ile Phe Thr Asn Thr Lys Glu Ser
545 550 555 560
Ser Ser His His Pro Gly Ile Ala Glu Phe Pro Ser Arg Gly Lys Ser
565 570 575
Ser Ser Tyr Ser Lys Gln Phe Thr Ser Ser Thr Ser Tyr Asn Arg Gly
580 585 590
Asp Ser Thr Phe Glu Ser Lys Ser Tyr Lys Met Ala Asp Glu Ala Gly
595 600 605
Ser Glu Ala Asp His Glu Gly Thr His Ser Thr Lys Arg Gly His Ala
610 615 620
Lys Ser Arg Pro Val Arg Asp Cys Asp Asp Val Leu Gln Thr His Pro
625 630 635 640
Ser Gly Thr Gln Ser Gly Ile Phe Asn Ile Lys Leu Pro Gly Ser Ser
645 650 655
Lys Ile Phe Ser Val Tyr Cys Asp Gln Glu Thr Ser Leu Gly Gly Trp
660 665 670
Leu Leu Ile Gln Gln Arg Met Asp Gly Ser Leu Asn Phe Asn Arg Thr
675 680 685
Trp Gln Asp Tyr Lys Arg Gly Phe Gly Ser Leu Asn Asp Glu Gly Glu
690 695 700
Gly Glu Phe Trp Leu Gly Asn Asp Tyr Leu His Leu Leu Thr Gln Arg
705 710 715 720
Gly Ser Val Leu Arg Val Glu Leu Glu Asp Trp Ala Gly Asn Glu Ala
725 730 735
Tyr Ala Glu Tyr His Phe Arg Val Gly Ser Glu Ala Glu Gly Tyr Ala
740 745 750
Leu Gln Val Ser Ser Tyr Glu Gly Thr Ala Gly Asp Ala Leu Ile Glu
755 760 765
Gly Ser Val Glu Glu Gly Ala Glu Tyr Thr Ser His Asn Asn Met Gln
770 775 780
Phe Ser Thr Phe Asp Arg Asp Ala Asp Gln Trp Glu Glu Asn Cys Ala
785 790 795 800
Glu Val Tyr Gly Gly Gly Trp Trp Tyr Asn Asn Cys Gln Ala Ala Asn
805 810 815
Leu Asn Gly Ile Tyr Tyr Pro Gly Gly Ser Tyr Asp Pro Arg Asn Asn
820 825 830
Ser Pro Tyr Glu Ile Glu Asn Gly Val Val Trp Val Ser Phe Arg Gly
835 840 845
Ala Asp Tyr Ser Leu Arg Ala Val Arg Met Lys Ile Arg Pro Leu Val
850 855 860
Thr Gln
865
<210> 3
<211> 19
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 3
Met Phe Ser Met Arg Ile Val Cys Leu Val Leu Ser Val Val Gly Thr
1 5 10 15
Ala Trp Thr
<210> 4
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 4
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Leu Cys
1 5 10 15
<210> 5
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 5
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Leu Gly Cys
1 5 10 15
<210> 6
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 6
Ala Ala Ala Ser Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu
1 5 10 15
Ala Ala Ala Lys Ala Ala Ala Gly Ser Gly
20 25
<210> 7
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 7
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Leu Gly
1 5 10 15
<210> 8
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 8
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Cys
1 5 10 15
<210> 9
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 9
Gly Gly Gly Gly Ser Cys
1 5
<210> 10
<211> 28
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 10
Ala Ala Ala Ser Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu
1 5 10 15
Ala Ala Ala Lys Ala Ala Ala Gly Ser Gly Leu Cys
20 25
<210> 11
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 11
Gly Gly Gly Leu Gly Cys
1 5
<210> 12
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 12
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 13
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 13
Gly Gly Gly Gly Ser
1 5
<210> 14
<211> 27
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 14
Ala Ala Ala Ser Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu
1 5 10 15
Ala Ala Ala Lys Ala Ala Ala Gly Ser Gly Leu
20 25
<210> 15
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 15
Gly Gly Gly Leu Gly
1 5
<210> 16
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial
<220>
<223> Synthetic
<400> 16
Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg
1 5
<210> 17
<211> 24
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 17
Met Lys Trp Val Thr Phe Ile Ser Leu Leu Phe Leu Phe Ser Ser Ala
1 5 10 15
Tyr Ser Arg Gly Val Phe Arg Arg
20
<210> 18
<211> 30
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 18
Met Lys Arg Met Val Ser Trp Ser Phe His Lys Leu Lys Thr Met Lys
1 5 10 15
His Leu Leu Leu Leu Leu Leu Cys Val Phe Leu Val Lys Ser
20 25 30
<210> 19
<211> 461
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 19
Gln Gly Val Asn Asp Asn Glu Glu Gly Phe Phe Ser Ala Arg Gly His
1 5 10 15
Arg Pro Leu Asp Lys Lys Arg Glu Glu Ala Pro Ser Leu Arg Pro Ala
20 25 30
Pro Pro Pro Ile Ser Gly Gly Gly Tyr Arg Ala Arg Pro Ala Lys Ala
35 40 45
Ala Ala Thr Gln Lys Lys Val Glu Arg Lys Ala Pro Asp Ala Gly Gly
50 55 60
Cys Leu His Ala Asp Pro Asp Leu Gly Val Leu Cys Pro Thr Gly Cys
65 70 75 80
Gln Leu Gln Glu Ala Leu Leu Gln Gln Glu Arg Pro Ile Arg Asn Ser
85 90 95
Val Asp Glu Leu Asn Asn Asn Val Glu Ala Val Ser Gln Thr Ser Ser
100 105 110
Ser Ser Phe Gln Tyr Met Tyr Leu Leu Lys Asp Leu Trp Gln Lys Arg
115 120 125
Gln Lys Gln Val Lys Asp Asn Glu Asn Val Val Asn Glu Tyr Ser Ser
130 135 140
Glu Leu Glu Lys His Gln Leu Tyr Ile Asp Glu Thr Val Asn Ser Asn
145 150 155 160
Ile Pro Thr Asn Leu Arg Val Leu Arg Ser Ile Leu Glu Asn Leu Arg
165 170 175
Ser Lys Ile Gln Lys Leu Glu Ser Asp Val Ser Ala Gln Met Glu Tyr
180 185 190
Cys Arg Thr Pro Cys Thr Val Ser Cys Asn Ile Pro Val Val Ser Gly
195 200 205
Lys Glu Cys Glu Glu Ile Ile Arg Lys Gly Gly Glu Thr Ser Glu Met
210 215 220
Tyr Leu Ile Gln Pro Asp Ser Ser Val Lys Pro Tyr Arg Val Tyr Cys
225 230 235 240
Asp Met Asn Thr Glu Asn Gly Gly Trp Thr Val Ile Gln Asn Arg Gln
245 250 255
Asp Gly Ser Val Asp Phe Gly Arg Lys Trp Asp Pro Tyr Lys Gln Gly
260 265 270
Phe Gly Asn Val Ala Thr Asn Thr Asp Gly Lys Asn Tyr Cys Gly Leu
275 280 285
Pro Gly Glu Tyr Trp Leu Gly Asn Asp Lys Ile Ser Gln Leu Thr Arg
290 295 300
Met Gly Pro Thr Glu Leu Leu Ile Glu Met Glu Asp Trp Lys Gly Asp
305 310 315 320
Lys Val Lys Ala His Tyr Gly Gly Phe Thr Val Gln Asn Glu Ala Asn
325 330 335
Lys Tyr Gln Ile Ser Val Asn Lys Tyr Arg Gly Thr Ala Gly Asn Ala
340 345 350
Leu Met Asp Gly Ala Ser Gln Leu Met Gly Glu Asn Arg Thr Met Thr
355 360 365
Ile His Asn Gly Met Phe Phe Ser Thr Tyr Asp Arg Asp Asn Asp Gly
370 375 380
Trp Leu Thr Ser Asp Pro Arg Lys Gln Cys Ser Lys Glu Asp Gly Gly
385 390 395 400
Gly Trp Trp Tyr Asn Arg Cys His Ala Ala Asn Pro Asn Gly Arg Tyr
405 410 415
Tyr Trp Gly Gly Gln Tyr Thr Trp Asp Met Ala Lys His Gly Thr Asp
420 425 430
Asp Gly Val Val Trp Met Asn Trp Lys Gly Ser Trp Tyr Ser Met Arg
435 440 445
Lys Met Ser Met Lys Ile Arg Pro Phe Phe Pro Gln Gln
450 455 460
<210> 20
<211> 26
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 20
Met Ser Trp Ser Leu His Pro Arg Asn Leu Ile Leu Tyr Phe Tyr Ala
1 5 10 15
Leu Leu Phe Leu Ser Ser Thr Cys Val Ala
20 25
<210> 21
<211> 427
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 21
Tyr Val Ala Thr Arg Asp Asn Cys Cys Ile Leu Asp Glu Arg Phe Gly
1 5 10 15
Ser Tyr Cys Pro Thr Thr Cys Gly Ile Ala Asp Phe Leu Ser Thr Tyr
20 25 30
Gln Thr Lys Val Asp Lys Asp Leu Gln Ser Leu Glu Asp Ile Leu His
35 40 45
Gln Val Glu Asn Lys Thr Ser Glu Val Lys Gln Leu Ile Lys Ala Ile
50 55 60
Gln Leu Thr Tyr Asn Pro Asp Glu Ser Ser Lys Pro Asn Met Ile Asp
65 70 75 80
Ala Ala Thr Leu Lys Ser Arg Lys Met Leu Glu Glu Ile Met Lys Tyr
85 90 95
Glu Ala Ser Ile Leu Thr His Asp Ser Ser Ile Arg Tyr Leu Gln Glu
100 105 110
Ile Tyr Asn Ser Asn Asn Gln Lys Ile Val Asn Leu Lys Glu Lys Val
115 120 125
Ala Gln Leu Glu Ala Gln Cys Gln Glu Pro Cys Lys Asp Thr Val Gln
130 135 140
Ile His Asp Ile Thr Gly Lys Asp Cys Gln Asp Ile Ala Asn Lys Gly
145 150 155 160
Ala Lys Gln Ser Gly Leu Tyr Phe Ile Lys Pro Leu Lys Ala Asn Gln
165 170 175
Gln Phe Leu Val Tyr Cys Glu Ile Asp Gly Ser Gly Asn Gly Trp Thr
180 185 190
Val Phe Gln Lys Arg Leu Asp Gly Ser Val Asp Phe Lys Lys Asn Trp
195 200 205
Ile Gln Tyr Lys Glu Gly Phe Gly His Leu Ser Pro Thr Gly Thr Thr
210 215 220
Glu Phe Trp Leu Gly Asn Glu Lys Ile His Leu Ile Ser Thr Gln Ser
225 230 235 240
Ala Ile Pro Tyr Ala Leu Arg Val Glu Leu Glu Asp Trp Asn Gly Arg
245 250 255
Thr Ser Thr Ala Asp Tyr Ala Met Phe Lys Val Gly Pro Glu Ala Asp
260 265 270
Lys Tyr Arg Leu Thr Tyr Ala Tyr Phe Ala Gly Gly Asp Ala Gly Asp
275 280 285
Ala Phe Asp Gly Phe Asp Phe Gly Asp Asp Pro Ser Asp Lys Phe Phe
290 295 300
Thr Ser His Asn Gly Met Gln Phe Ser Thr Trp Asp Asn Asp Asn Asp
305 310 315 320
Lys Phe Glu Gly Asn Cys Ala Glu Gln Asp Gly Ser Gly Trp Trp Met
325 330 335
Asn Lys Cys His Ala Gly His Leu Asn Gly Val Tyr Tyr Gln Gly Gly
340 345 350
Thr Tyr Ser Lys Ala Ser Thr Pro Asn Gly Tyr Asp Asn Gly Ile Ile
355 360 365
Trp Ala Thr Trp Lys Thr Arg Trp Tyr Ser Met Lys Lys Thr Thr Met
370 375 380
Lys Ile Ile Pro Phe Asn Arg Leu Thr Ile Gly Glu Gly Gln Gln His
385 390 395 400
His Leu Gly Gly Ala Lys Gln Val Arg Pro Glu His Pro Ala Glu Thr
405 410 415
Glu Tyr Asp Ser Leu Tyr Pro Glu Asp Asp Leu
420 425
Claims (72)
- 단백질 접합체로서,
a. 복수의 폴리에틸렌이민(PEI) 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체;
b. 세포내 표적과 상호작용하는 페이로드; 및
c. 공유 결합을 통해서 상기 단백질 담체 및 상기 페이로드에 결합된 링커를 포함하며;
상기 페이로드는, 절단되는 경우 상기 세포내 표적과의 상호작용을 감소시키는 이황화 결합이 없고, 상기 단백질 접합체는 융합 단백질이 아닌, 단백질 접합체. - 제1항에 있어서, 상기 PEI는 2000 달톤 미만의 분자량을 갖는 선형 PEI 또는 분지형 PEI인, 단백질 접합체.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 복수의 PEI 모이어티는 3 내지 90개의 분자를 포함하는, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 페이로드는 상기 세포내 표적에 결합하는 항원 결합 분자인, 단백질 접합체.
- 제4항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 단일 쇄 항체, 단일 도메인 항체, 가변 중 동종이량체(VHH: variable heavy homodimer), 나노바디, 면역글로불린 신규 항원 수용체(IgNAR), 설계된 안키린 반복 단백질(DARPin) 및 항체 모방 단백질로부터 선택되는, 단백질 접합체.
- 제5항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 VHH 및 DARPin으로부터 선택되는, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단백질 담체는 혈장 내인성 단백질인, 단백질 접합체.
- 제7항에 있어서, 상기 단백질 담체는 적어도 60 KDa 크기인, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단백질 담체는 인간 혈청 알부민(HSA), 피브리노겐, IgG, 녹색 형광 단백질(GFP) 및 설계된 안키린 반복 단백질(DARPin)로부터 선택되는, 단백질 접합체.
- 제9항에 있어서, 상기 단백질 담체는 HSA인, 단백질 접합체.
- 제10항에 있어서, 상기 단백질 담체는 HSA이고, 상기 단백질 담체는 3 내지 10개의 PEI 분자를 포함하는, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 생체적합성 중합체를 포함하는, 단백질 접합체.
- 제12항에 있어서, 상기 생체적합성 중합체는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함하는, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 생물학적-절단 가능한 결합(bio-cleavable bond)을 포함하는, 단백질 접합체.
- 제14항에 있어서, 상기 생물학적-절단 가능한 결합은 이황화 결합을 포함하는, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 적어도 24시간 동안 혈액에서 실질적으로 안정적인, 단백질 접합체.
- 제16항에 있어서, 안정적이라는 것은 24시간 후에 혈액에서 25% 미만의 절단을 포함하는, 단백질 접합체.
- 제14항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생물학적 절단 가능한 결합은 입체 장애형인, 단백질 접합체.
- 제9항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 HSA는 시스테인 34(C34)를 포함하는 서열번호 1의 아미노산 서열 또는 이의 단편 또는 동족체를 포함하는, 단백질 접합체.
- 제19항에 있어서, 상기 링커는 이황화 결합을 통해서 상기 HSA에 결합된, 단백질 접합체.
- 제19항 또는 제20항에 있어서, 상기 링커는 상기 HSA의 C34에 결합된, 단백질 접합체.
- 제20항 또는 제21항에 있어서, 상기 이황화 결합은 상기 C34에 근접한, 단백질 접합체.
- 제22항에 있어서, 상기 근접한은 상기 C34로부터 5 내지 15 옹스트롬 범위의 거리인, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 펩티드 링커인, 방법.
- 제24항에 있어서, 상기 링커는 서열번호 4 내지 15로부터 선택되는, 방법.
- 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단백질 담체는 DNA가 없는, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생물학적 페이로드는 세포 표면 단백질에 결합하지 않는, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 복수의 PEI 모이어티에 공유 결합된 상기 단백질 담체는 적어도 8 mV의 양의(positive) 제타 전위를 특징으로 하는, 단백질 접합체.
- 단백질 접합체로서,
a. 복수의 폴리에틸렌이민(PEI) 모이어티에 공유 결합되고 적어도 8 mV의 양의 제타 전위를 특징으로 하는 HSA;
b. 단일 도메인 항체; 및
c. 공유 결합을 통해서 상기 HSA 및 상기 단일 도메인 항체에 결합된 링커를 포함하며;
융합 단백질이 아닌, 단백질 접합체. - 제29항에 있어서, 상기 HSA는 3 내지 10개의 PEI 분자를 포함하는, 단백질 접합체.
- 제29항 또는 제30항에 있어서, 상기 링커는 생체적합성 중합체를 포함하는, 단백질 접합체.
- 제31항에 있어서, 상기 생체적합성 중합체는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)인, 단백질 접합체.
- 제29항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 생물학적-절단 가능한 결합을 포함하는, 단백질 접합체.
- 제33항에 있어서, 상기 생물학적-절단 가능한 결합은 이황화 결합을 포함하는, 단백질 접합체.
- 제29항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 적어도 24시간 동안 혈액에서 실질적으로 안정적인, 단백질 접합체.
- 제35항에 있어서, 안정적이라는 것은 24시간 후에 혈액에서 25% 미만의 절단을 포함하는, 단백질 접합체.
- 제34항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생물학적 절단 가능한 결합은 입체 장애형인, 단백질 접합체.
- 제29항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 HSA는 시스테인 34(C34)를 포함하는 서열번호 1의 아미노산 서열 또는 이의 단편 또는 동족체를 포함하는, 단백질 접합체.
- 제38항에 있어서, 상기 링커는 이황화 결합을 통해서 상기 HSA에 결합된, 단백질 접합체.
- 제39항에 있어서, 상기 링커는 HSA의 상기 C34에 결합된, 단백질 접합체.
- 제39항 또는 제40항에 있어서, 상기 링커는 펩티드 링커인, 방법.
- 제41항에 있어서, 상기 링커는 서열번호 4 내지 45로부터 선택되는, 방법.
- 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 검출 가능한 태그를 추가로 포함하고, 선택적으로 상기 태그는 상기 생물학적 페이로드에 접합되는, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 혈액-안정성 접합체인, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 세포-침투성 접합체인, 단백질 접합체.
- 세포내 표적에 결합할 수 있는 단백질 접합체의 생산 방법으로서,
a. 상기 세포내 표적에 결합하고, 절단되는 경우 상기 세포내 표적에 대한 결합을 감소시키는 이황화 결합이 없는 페이로드를 제공하는 것;
b. 복수의 PEI 모이어티에 공유 결합된 단백질 담체를 제공하는 것;
c. 상기 선택된 페이로드를 링커를 통해서 상기 선택된 단백질 담체에 공유 연결시켜 단백질 접합체를 생산하는 것;
d. 인간 혈액, 혈장 또는 혈청에서 상기 링커의 안정성을 결정하는 것; 및
e. 상기 인간 혈액, 혈장 또는 혈청에서 안정적인 링커를 포함하는 단백질 접합체를 선택하는 것을 포함하며;
이에 의해서 세포내 표적에 결합할 수 있는 단백질 접합체를 생산하는, 방법. - 제46항에 있어서, 상기 결정하는 것은 상기 단백질 접합체의 형성 이전에 또는 상기 단백질 접합체의 형성 이후에 수행되는, 방법.
- 제46항 또는 제47항에 있어서, 상기 세포내 표적에 대한 상기 생물학적 페이로드의 결합을 확인하는 것을 포함하는, 방법.
- 제46항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 복수의 PEI 모이어티에 결합된 상기 단백질 담체는 적어도 8 mV의 양의 제타 전위를 특징으로 하는, 방법.
- 제46항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단백질 담체는 HSA를 포함하는, 방법.
- 제46항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단백질 담체는 적어도 3개의 PEI 분자에 공유 결합된, 방법.
- 제46항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 선택된 단백질 접합체를 세포에 접촉시키는 것, 및 상기 생물학적 페이로드가 상기 세포의 세포질에 유입되는지를 확인하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
- 제46항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 안정적이라는 것은 24시간 후에 혈액에서 25% 미만의 절단을 포함하고, 불안정적이라는 것은 24시간 후에 상기 세포질 조건에서 적어도 50%의 절단을 포함하는, 방법.
- 제46항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 생체적합성 중합체를 포함하는, 방법.
- 제46항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 공유 연결은 클릭 반응을 통해서 일어나는, 방법.
- 제46항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 페이로드는 제1 반응성 기를 포함하는 링커에 공유 결합되고; 상기 단백질 담체는 상기 제1 반응성 기에 대해 반응성을 갖는 제2 반응성 기를 포함하는 링커에 공유 결합되는, 방법.
- 제56항에 있어서, 상기 공유 연결은 상기 제1 반응성 기와 상기 제2 반응성 기의 반응을 통해서 일어나며, 이에 의해서 상기 페이로드와 상기 단백질 담체를 공유 연결하는, 방법.
- 제46항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 생물학적-절단 가능한 결합을 포함하는, 방법.
- 제58항에 있어서, 공유 연결은 이황화 결합 형성을 포함하는, 방법.
- 제58항에 있어서, (i) 상기 페이로드는 상기 단백질 담체의 시스테인과 이황화 결합을 생성할 수 있는 링커에 공유 결합되거나; (ii) 상기 단백질 담체는 상기 페이로드의 시스테인과 이황화 결합을 생성할 수 있는 링커와 공유 결합되고, 결합은 선택적으로 이황화 결합을 통해서 일어나는, 방법.
- 제58항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 세포질 조건에서 상기 링커의 안정성을 결정하는 것, 및 상기 세포질 조건에서 불안정적인 링커를 포함하는 단백질 접합체를 선택하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
- 제46항 내지 제61항 중 어느 한 항의 방법에 의해서 생산된, 단백질 접합체.
- 제1항 내지 제45항 및 제62항 중 어느 한 항의 단백질 접합체 및 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 아주반트를 포함하는, 약학적 조성물.
- 제63항에 있어서, 전신 투여용으로 제형화된 약학적 조성물.
- 세포내 표적에 결합하는 방법으로서, 상기 세포내 표적을 발현하는 세포를 제1항 내지 제45항 및 제62항 중 어느 한 항의 단백질 접합체 또는 제63항 또는 제64항의 약학적 조성물과 접촉시키는 것을 포함하며, 상기 생물학적 페이로드는 상기 세포내 표적에 결합하며, 이에 의해서 상기 세포내 표적에 결합하는, 방법.
- 세포내 표적에 결합하는 방법으로서,
a. 제46항 내지 제61항 중 어느 한 항의 방법에 의해서 상기 세포내 표적에 결합할 수 있는 단백질 접합체를 생산하는 것; 및
b. 상기 세포내 표적을 발현하는 세포를 상기 생산된 단백질 접합체와 접촉시키는 것을 포함하며;
이에 의해서 상기 세포내 표적에 결합하는, 방법. - 제65항 또는 제66항에 있어서, 상기 방법은 세포내 표적을 검출하는 방법이고, 상기 단백질 접합체는 검출 가능한 태그를 포함하고, 상기 방법은 상기 검출 가능한 태그를 검출하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
- 제67항에 있어서, 상기 방법은 상기 세포내 표적을 조절하는 방법이고, 상기 페이로드는 상기 세포내 표적의 효능제 또는 길항제인, 방법.
- 제65항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포는 대상체에 존재하고, 상기 접촉시키는 것은 상기 단백질 접합체를 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
- 제69항에 있어서, 상기 방법은 병태의 치료를 필요로 하는 대상체에서 병태를 치료하는 방법이고, 상기 병태는 상기 세포내 표적의 조절에 의해서 치료될 수 있는, 방법.
- 제70항에 있어서, 상기 병태는 암이고, 상기 세포내 표적은 발암성이고, 상기 생물학적 페이로드는 길항제인, 방법.
- 제65항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 접촉시키는 것은, 상기 단백질 접합체가 상기 세포로 침투하는 것을 유도하도록 설계된 상기 담체 단백질 이외의 작용제의 존재 하에서 일어나지 않는, 방법.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US202163177144P | 2021-04-20 | 2021-04-20 | |
US63/177,144 | 2021-04-20 | ||
PCT/IL2022/050411 WO2022224257A1 (en) | 2021-04-20 | 2022-04-20 | Intracellular delivery compositions |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20240004540A true KR20240004540A (ko) | 2024-01-11 |
Family
ID=81975137
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020237039641A KR20240004540A (ko) | 2021-04-20 | 2022-04-20 | 세포내 전달 조성물 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20240148886A1 (ko) |
EP (1) | EP4326332A1 (ko) |
JP (1) | JP2024515689A (ko) |
KR (1) | KR20240004540A (ko) |
CN (1) | CN117651568A (ko) |
AU (1) | AU2022260842B2 (ko) |
CA (1) | CA3215619A1 (ko) |
IL (1) | IL307843A (ko) |
WO (1) | WO2022224257A1 (ko) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA3237102A1 (en) * | 2021-11-03 | 2023-05-11 | Biond Biologics Ltd. | Intracellular delivery compositions |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4666828A (en) | 1984-08-15 | 1987-05-19 | The General Hospital Corporation | Test for Huntington's disease |
US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
US4801531A (en) | 1985-04-17 | 1989-01-31 | Biotechnology Research Partners, Ltd. | Apo AI/CIII genomic polymorphisms predictive of atherosclerosis |
US5272057A (en) | 1988-10-14 | 1993-12-21 | Georgetown University | Method of detecting a predisposition to cancer by the use of restriction fragment length polymorphism of the gene for human poly (ADP-ribose) polymerase |
US5192659A (en) | 1989-08-25 | 1993-03-09 | Genetype Ag | Intron sequence analysis method for detection of adjacent and remote locus alleles as haplotypes |
US11103589B2 (en) * | 2016-01-08 | 2021-08-31 | Apg Therapeutics, Inc. | Polyethylenimine (PEI)-polypeptide conjugates and methods of use thereof |
-
2022
- 2022-04-20 EP EP22728683.8A patent/EP4326332A1/en active Pending
- 2022-04-20 KR KR1020237039641A patent/KR20240004540A/ko not_active Application Discontinuation
- 2022-04-20 CA CA3215619A patent/CA3215619A1/en active Pending
- 2022-04-20 IL IL307843A patent/IL307843A/en unknown
- 2022-04-20 CN CN202280043622.5A patent/CN117651568A/zh active Pending
- 2022-04-20 AU AU2022260842A patent/AU2022260842B2/en active Active
- 2022-04-20 WO PCT/IL2022/050411 patent/WO2022224257A1/en active Application Filing
- 2022-04-20 JP JP2023564379A patent/JP2024515689A/ja active Pending
-
2023
- 2023-10-18 US US18/381,344 patent/US20240148886A1/en active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2024515689A (ja) | 2024-04-10 |
US20240148886A1 (en) | 2024-05-09 |
CA3215619A1 (en) | 2022-10-27 |
EP4326332A1 (en) | 2024-02-28 |
IL307843A (en) | 2023-12-01 |
CN117651568A (zh) | 2024-03-05 |
AU2022260842B2 (en) | 2024-03-14 |
AU2022260842A9 (en) | 2023-11-16 |
AU2022260842A1 (en) | 2023-11-02 |
WO2022224257A1 (en) | 2022-10-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2782248T3 (es) | Conjugado de anticuerpo y fármaco producido por la unión a través de un enlazador que tiene estructura hidrófila | |
JP2021130672A (ja) | Mt1−mmpに特異的な二環性ペプチドリガンド | |
US11498947B2 (en) | Stabilized BCL9 peptides for treatment of aberrant WNT signaling | |
CN111417410A (zh) | 糖皮质激素受体激动剂及其免疫缀合物 | |
BR112021013559A2 (pt) | Moléculas de ligação a receptor de transferrina, conjugados das mesmas e seus usos | |
TW201420117A (zh) | 抗體-藥物複合體 | |
US20240148886A1 (en) | Intracellular delivery compositions | |
BR112020004555A2 (pt) | agentes que modulam funções de beta-catenina e métodos dos mesmos | |
US20210061861A1 (en) | D-peptidic compounds for vegf | |
JP2022515760A (ja) | Pmel17に対する抗体及びその結合体 | |
CA3227844A1 (en) | Antibodies and antibody conjugates specific for nectin-4 and methods of use thereof | |
KR20240147737A (ko) | 세포내 전달 조성물 | |
CA3237102A1 (en) | Intracellular delivery compositions | |
CN115427057A (zh) | 靶向突变ras蛋白的分子 | |
CN118524853A (zh) | 胞内递送组合物 | |
EP2894161B1 (en) | Peptide for inhibiting vascular endothelial growth factor receptor |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
A302 | Request for accelerated examination | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E601 | Decision to refuse application |