KR20230149566A - 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents
고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 상세하게는 고량강 추출물은 아토피 피부염 동물 모델의 귀 두께 증가를 억제시키고, 피부손상 등의 피부병변을 호전시키며, 케모카인 및 면역글로불린 E의 분비량을 감소시키는 효과가 우수하므로, 아토피 피부염에 대한 건강기능식품, 의약품 등에 유용하게 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
최근 들어, 아토피는 유병률이 급격히 증가함에 따라 그 위험성이 크게 부각되고 있는 과민증(hypersensitivity)의 일종으로, 면역학적 관점에서는 면역글로불린 E(immunoglobulin E)와 알레르겐(allergen)의 면역반응에 의한 주요증상을 동반하는 유전경향이 강한 알레르기성 질환군으로 정의된다. 특히, 아토피의 대표적 증상인 아토피 피부염(atopic dermatitis)은 전 인구의 0.5~1%, 어린이의 5~10%가 심각한 증상을 호소하고 있지만, 유전적인 요인과 면역계 결핍에 관련 있는 것으로 추정될 뿐 아직 정확한 원인은 밝혀진 바 없고, 환경 및 식생활 개선을 통해 다소 완화되는 것으로 기대될 뿐 근본적인 치료방법이 전무한 실정이다.
그러나, 아토피 피부염은 개인차를 보이기는 하지만, 대부분 극심한 가려움증을 비롯한 피부건조증, 발진, 진물, 부스럼딱지, 비늘 같은 껍질이 있는 피부(인비늘) 등을 수반하며, 이로 인한 정서적 불안, 스트레스, 긴장, 좌절, 분노의 감정과 함께 기타 알레르기 질환인 두드러기, 금속 알레르기, 천식이나 알레르기성 비염 등을 동반하는 경우가 빈번한 바, 오늘날 국민건강을 위협하는 심각한 사회문제로 떠오르고 있다. 한편, 현재까지 아토피 피부염에 효과가 있는 것으로 알려진 대표적 약물로는 스테로이드제(steroid), 항히스타민제(antihistamine), 항생제(antibiotic), 비스테로이드제를 비롯한 기타 진정제와 신경안정제 등을 들 수 있다.
한편, 고량강(Alpinia officinarum Hance)은 생강과에 속하는 다년생 초본으로서, 뿌리줄기를 가을에 캐어 건조한 것을 사용한다. 동의치료에서는 복통, 구토설사에 효력이 뛰어나고, 신장 기능 허약과 냉증으로 인한 정력감퇴, 이질 등에 효력이 있다고 전해진다. 주요 약리 작용으로는 위액분비 촉진 작용, 진통작용, 항산소결핍 작용, 항혈전 작용, 항응혈 작용, 말초순환 개선 작용 등이 있는 것으로 알려져 있다.
아토피 피부염 관련 선행기술로는 한국등록특허 제2282256호에 '활량나물 추출물을 함유하는 아토피 피부염 예방, 개선 또는 치료용 조성물'이 개시되어 있으며, 한국등록특허 제1874462호에 '오미자 잎 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물'이 개시되어 있다. 하지만, 본 발명의 '고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물'에 대해서는 아직까지 개시된 바가 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하고, 고량강 추출물이 아토피 피부염 동물 모델의 귀 두께 증가를 억제시키고, 피부손상 등의 피부병변을 호전시키며, 케모카인(MDC 및 RANTES) 및 면역글로불린 E(IgE)의 분비량을 감소시키는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 의약외품을 제공한다.
또한, 본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 사료 첨가제를 제공한다.
본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 고량강 추출물은 아토피 피부염 동물 모델의 귀 두께 증가를 억제시키고, 피부손상 등의 피부병변을 호전시키며, 케모카인(MDC 및 RANTES) 및 면역글로불린 E(IgE)의 분비량을 감소시키는 효과가 있다.
도 1은 DfE(Dermatophagoides farinae extract) 처리를 통해 아토피 피부염이 유도된 동물모델에서 본 발명의 고량강 추출물 투여에 따른 아토피 피부염의 개선 효과를 확인한 동물실험 방법에 대한 모식도이다.
도 2는 아토피 피부염이 유도된 동물모델에서 본 발명의 고량강 추출물(AOWex)의 투여에 따른 각 실험군의 피부손상 정도를 육안으로 관찰한 결과이다. DfE(-)는 천연진드기 유래 추출물(Dermatophagoides farinae extract)을 처리하지 않은 정상군이고, DfE(+)는 천연진드기 유래 추출물(Dermatophagoides farinae extract)을 처리하여 유도한 아토피 피부염군, AOWex는 고량강 추출물 투여군, Dexa는 양성 대조군인 덱사메타손 투여군이다.
도 3은 아토피 피부염이 유도된 동물모델에서 본 발명의 고량강 추출물(AOWex) 투여에 따른 마우스의 귀 두께(ear thickness)와 피부손상 정도(dermatitis score)를 확인한 결과이다. Normal은 정상군이고, AD는 아토피 피부염 유도군이며, AOWex는 고량강 추출물 투여군이고, Dexa는 양성 대조군인 덱사메타손 투여군이다. ####은 정상군 대비 아토피 피부염 유도군의 귀 두께 및 피부손상 정도가 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.0001이다. ****는 아토피 피부염 유도군 대비 고량강 투여군(AOWex) 및 양성대조군인 덱사메타손 투여군의 귀 두께 및 피부손상 정도가 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, p<0.0001이다.
도 4는 아토피 피부염이 유도된 동물모델에서 본 발명의 고량강 추출물(AOWex)의 투여에 따른 혈청 내 MDC, RANTES 및 IgE의 함량을 확인한 결과이다. DfE(-)는 천연진드기 유래 추출물(Dermatophagoides farinae extract)을 처리하지 않은 정상군이고, DfE(+)는 천연진드기 유래 추출물(Dermatophagoides farinae extract)을 처리하여 유도한 아토피 피부염군이며, AOWex는 고량강 추출물 투여군이고, Dexa는 양성 대조군인 덱사메타손 투여군이다. ####은 정상군 대비 아토피 피부염군의 혈청 내 MDC, RANTES 및 IgE의 함량이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.0001이다. *, **, ****은 아토피 피부염군 대비 본 발명의 고량강 추출물 투여군 및 양성대조군인 덱사메타손 투여군의 혈청 내 MDC, RANTES 및 IgE의 함량이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, *는 p<0.05이고, **는 p<0.01이며, ****는 p<0.0001이다.
도 2는 아토피 피부염이 유도된 동물모델에서 본 발명의 고량강 추출물(AOWex)의 투여에 따른 각 실험군의 피부손상 정도를 육안으로 관찰한 결과이다. DfE(-)는 천연진드기 유래 추출물(Dermatophagoides farinae extract)을 처리하지 않은 정상군이고, DfE(+)는 천연진드기 유래 추출물(Dermatophagoides farinae extract)을 처리하여 유도한 아토피 피부염군, AOWex는 고량강 추출물 투여군, Dexa는 양성 대조군인 덱사메타손 투여군이다.
도 3은 아토피 피부염이 유도된 동물모델에서 본 발명의 고량강 추출물(AOWex) 투여에 따른 마우스의 귀 두께(ear thickness)와 피부손상 정도(dermatitis score)를 확인한 결과이다. Normal은 정상군이고, AD는 아토피 피부염 유도군이며, AOWex는 고량강 추출물 투여군이고, Dexa는 양성 대조군인 덱사메타손 투여군이다. ####은 정상군 대비 아토피 피부염 유도군의 귀 두께 및 피부손상 정도가 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.0001이다. ****는 아토피 피부염 유도군 대비 고량강 투여군(AOWex) 및 양성대조군인 덱사메타손 투여군의 귀 두께 및 피부손상 정도가 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, p<0.0001이다.
도 4는 아토피 피부염이 유도된 동물모델에서 본 발명의 고량강 추출물(AOWex)의 투여에 따른 혈청 내 MDC, RANTES 및 IgE의 함량을 확인한 결과이다. DfE(-)는 천연진드기 유래 추출물(Dermatophagoides farinae extract)을 처리하지 않은 정상군이고, DfE(+)는 천연진드기 유래 추출물(Dermatophagoides farinae extract)을 처리하여 유도한 아토피 피부염군이며, AOWex는 고량강 추출물 투여군이고, Dexa는 양성 대조군인 덱사메타손 투여군이다. ####은 정상군 대비 아토피 피부염군의 혈청 내 MDC, RANTES 및 IgE의 함량이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.0001이다. *, **, ****은 아토피 피부염군 대비 본 발명의 고량강 추출물 투여군 및 양성대조군인 덱사메타손 투여군의 혈청 내 MDC, RANTES 및 IgE의 함량이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, *는 p<0.05이고, **는 p<0.01이며, ****는 p<0.0001이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 고량강 추출물은 하기의 단계를 포함하는 방법에 의해 제조할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다:
(1) 고량강에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
(2) 단계 (1)의 추출물을 여과하는 단계; 및
(3) 단계 (2)의 여과한 추출물을 농축하고 건조하여 추출물을 제조하는 단계.
상기 단계 (1)에서 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물 중에서 선택하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 물이지만 이에 한정하지 않는다.
상기 제조방법에 있어서, 추출방법은 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 당 업계에 공지된 모든 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 상기 추출용매는 고량강 중량의 1~20배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 5~15배 첨가하는 것이다. 추출시간은 0.5~10시간인 것이 바람직하며, 0.5~5시간이 더욱 바람직하지만 이에 한정하지 않는다. 상기 방법에 있어서, 단계 (3)의 감압농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하지만, 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무 건조 또는 동결 건조하는 것이 바람직하지만 이에 한정하지 않는다.
상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것이 바람직하지만 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 고량강 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취인 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합체 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
본 발명의 조성물을 건강 음료로 사용할 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 텍스트린, 사이클로텐스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마린, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린 또는 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100g당 일반적으로 약 0.01~0.04g, 바람직하게는 약 0.02~0.03g이다. 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 중점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물은 100중량부 당 0.01~0.1중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 상기 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있으며, 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 캡슐제, 산제, 과립제, 정제, 환제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조제, 좌제가 포함된다. 비수성 용제 및 현탁 용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로 젤라틴 등이 사용될 수 있다. 비경구 투여 시 피부 외용 또는 복강 내, 직장, 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사 방식을 선택하는 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효량의 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명의 조성물은 단독으로 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 의약외품을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미하는 것으로, 예를 들어 약사법에 따르면 의약외품이란 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람ㆍ동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품 또는 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.
본 발명의 의약외품은 아토피 피부염의 개선을 목적으로 사용되는 것으로, 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없고, 각 제형에 있어서 의약외품은 다른 성분들을 기타 의약외품의 제형 또는 사용목적 등에 따라 임의로 선정하여 배합할 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(억제 또는 완화)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 예를 들어, 점증제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체 등을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 사료 첨가제를 제공한다.
본 발명의 사료 첨가제는 사료관리법상의 보조사료에 해당한다. 본 발명에서 용어 '사료'는 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미할 수 있다. 상기 사료의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 사료를 사용할 수 있다. 상기 사료의 비제한적인 예로는, 곡물류, 근과류, 식품 가공 부산물류, 조류, 섬유질류, 제약 부산물류, 유지류, 전분류, 박류 또는 곡물 부산물류 등과 같은 식물성 사료; 단백질류, 무기물류, 유지류, 광물성류, 유지류, 단세포 단백질류, 동물성 플랑크톤류 또는 음식물 등과 같은 동물성 사료를 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
이하, 본 발명의 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
재료 및 방법
1. 실험동물
5주령의 수컷 NC/Nga 마우스는 중앙실험동물(주)에서 공급 받았다. 동물은 환경적으로 통제된 조건(온도 21~25℃, 상대습도 45~65%, 환기횟수 12회/시간, 조명주기 12시간, 조도 150-300 lux)에서 마우스용 케이지(220×200×145 mm)에 5마리씩 사육하였다. 실험동물용 펠렛(pellet)형 고형사료인 Purina Rat Chow를 Nestle Purina PetCare Korea Ltd.(Seoul, Korea)로부터 공급받아 급여하였으며, 자동급수장치를 이용하여 멸균정제수를 자율적으로 음수하였다. 사육 환경에 7일 동안 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
2. 아토피 피부염 모델 수립 및 시료 투여
1주 동안 순화기간을 거친 NC/Nga 마우스의 삭발한 등 피부와 귀 표면에 4% 도데실 황산나트륨(SDS, Sodium Dodecyl Sulfate) 150㎕를 도포하여 피부장벽을 파괴하고, 3시간 후 알러지성 아토피 유발 항원인 천연 집먼지 진드기 유래 성분(DfE, Dermatophagoides farina extract)을 포함하는 연고(Biostir Inc.) 100mg을 도포하였다. 마우스는 총 3주 동안 일주일에 2번 DfE 연고를 도포하였다. 최초 DfE 연고 도포 후 7일 후, 멸균정제수에 녹인 고량강 추출물(AOWex) 또는 덱사메타손(Dexametasone, Dexa; 양성 대조군)을 매일 14일 동안 경구 투여하였다(도 1). NC/Nga 마우스는 무작위로 정상군(DfE 무처리), 아토피 피부염 유도군(DfE 처리), AOWex 투여군(고량강 추출물 30, 100, 300 mg/kg), Dexa 투여군(덱사메타손)의 5개 그룹으로 분류하였다.
3. 귀두께(ear thickness) 및 피부손상 정도(dermatitis score) 측정
귀 두께는 CAS 케미칼사에서 구입한 디지털 캘리퍼(digital caliper)를 사용하여 일주일에 두 번 측정하였다. 피부손상 정도는 등쪽 피부 및 귀 병변의 부종, 흉터/건조증, 홍반/출혈, 발진/발열 등 4가지 증상을 기준으로 표시하였다. 개별 점수는 증상 범주별로 0(증상 없음), 1(약함), 2(중간) 또는 3(심함)으로 매겼으며, 피부손상정도는 개별 점수의 합으로 정의하였다.
4. 혈청 분석
실험 23일째 심장체혈을 통해 수득한 마우스 혈액 샘플을 상온에서 30분 동안 반응시킨 후, 원심분리(13000 rpm, 15 min)하여 혈청을 얻었다. 혈청 내 면역글로불린 E(Immunoglobulin E, IgE)의 총 농도는 후지필름(Fusifilm)에서 구입한 LBIS 마우스 IgE ELISA 키트를 사용하여 측정하였으며, 총 MDC 및 RANTES의 혈청 수치는 R&D Systems로부터 구입한 ELISA 키트 사용하여 측정하였다. 모든 혈청 측정 실험은 제조사가 제공한 프로토콜에 따라 분석하였다.
5. 통계처리
모든 데이터는 GraphPad Prism 버전 8.0 프로그램을 사용하여 분석하였다. 데이터는 평균값(mean)±표준오차(SEM)로 나타내었으며, 분산 분석을 사용하여 계산하였다. 각 집단 간의 비교는 일원분산분석(one-way ANOVA)을 실시하였고, 사후검정으로 던컨의 다중 비교 테스트(Dunnett's multiple comparison test)를 이용하여 각 그룹 간 유의성을 검증하였다. p값이 0.05 미만일 경우, 통계적으로 유의적 차이가 있다고 판정하였다.
실시예 1. 고량강 추출물의 제조
건조한 1kg의 고량강(Alpinia officinarum)을 10ℓ의 증류수에 넣고, 100±2℃에서 3시간 동안 환류추출(Heating mantle)하여 거름망 필터 후, 테스트 시브(Test Sieve 53㎛ No.270)로 2차 여과하여 고량강 추출물을 얻었으며, 이를 동결 건조하였다.
동물 실험에서는 동결 건조된 추출물을 멸균정제수에 녹여 사용하였다. 세포 실험에서는 증류수로 녹인 고량강 열수 추출물을 0.22㎕ 필터로 여과 후 실험에 사용하였다.
실시예 2. 아토피 피부염이 유도된 동물모델에서 고량강 추출물의 투여에 따른 피부손상정도 확인
본 발명의 고량강 추출물 투여에 따른 마우스의 귀 두께(ear thickness) 및 피부손상 정도(dermatitis score)를 확인하였다.
그 결과, 정상군(DfE 무처리) 대비 아토피 피부염 유도군(DfE 처리)에서 피부 건조부터 심각한 흉터, 홍반, 출혈, 찰과상 및 미란이 나타났으며, 이에 대비하여 본 발명의 고량강 추출물 투여에 의해 손상된 피부증상이 농도 의존적으로 개선되는 것을 확인하였다(도 2).
또한, 도 3에 개시한 바와 같이 정상군(Normal) 대비 아토피 피부염 유도군(AD)에서 귀 두께와 피부손상 정도가 통계적으로 유의미하게 증가하였고, 이에 대비하여 7일째 이후, 모든 농도의 고량강 투여군(AOWex)에서 귀 두께 및 피부손상 정도가 통계적으로 유의미하게 감소하였다.
실시예 3. 아토피 피부염이 유도된 동물모델에서 고량강 추출물의 투여에 따른 혈청 내 MDC, RANTES 및 IgE 함량 확인
본 발명의 고량강 추출물 투여에 따른 마우스의 혈청 내 MDC, RANTES 및 IgE 함량을 확인하였다.
그 결과, 도 4에 개시한 바와 같이 정상군(DfE 무처리) 대비 아토피 피부염 유도군(DfE 처리)에서 MDC, RANTES 및 IgE의 함량이 통계적으로 유의미하게 증가하였고, 아토피 피부염 유도군 대비 본 발명의 고량강 추출물 처리군에서 MDC, RANTES 및 IgE의 함량이 통계적으로 유의미하게 감소하였다.
Claims (7)
- 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 고량강 추출물의 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 의약외품.
- 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
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2022
- 2022-04-20 KR KR1020220048943A patent/KR20230149566A/ko not_active Application Discontinuation
- 2022-10-14 WO PCT/KR2022/015587 patent/WO2023204363A1/ko unknown
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WO2023204363A1 (ko) | 2023-10-26 |
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