KR20230149057A - 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물 - Google Patents

로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물 Download PDF

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KR20230149057A
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Abstract

본 발명은 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물 {Cosmetic composition containing roasted Changija extract as an active ingredient to have antioxidant and anti-inflammatory effects}
본 발명은 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.
현 시장에서는알러지로부터 피부를 보호할 뿐만 아니라, 염증으로부터 피부를 보호하는 효과도 있는 천연 식물을 찾아내는 것이 요구되고 있다. 피부에 대한 대표적인 위협으로는 염증과 노화가 있다.
대부분의 질환과 마찬가지로 피부 질환은 염증 반응을 동반하는데 대표적인 피부 질환인 알레르기 접촉 피부염, 건선, 아토피성 피부염 등은 면역세포인 T세포가 매개하는 염증성 질환이다. 따라서 주요 피부 질환에 대한 관리 및 치료에는 반드시 항염증제가 응용되어야 한다. 이러한 염증성 질환을 치료하기 위해 스테로이드성 항염증 제제가 사용되고 있으나 스테로이드성 제제들은 여러 가지 많은 부작용을 나타내고 있어 그 사용을 제한하고 있다. 따라서, 현 시장에서는 NOS를 직접적으로 억제하여 알러지로부터 피부를 보호할 뿐만 아니라, 염증으로부터 피부를 보호하는 효과도 있는 천연 식물을 찾아내는 것이 요구되고 있다.
피부의 노화는 크게 내인적 노화(intrinsic aging)와 외인적 노화(extrinsic aging)로 대별되는데, 내인적 노화는 나이가 듦에 따라 피부의 생리적 기능이 점차 저하되어 자연적으로 나타나는 노화 현상으로 임상학적으로 탄력이 감소하고, 피부결이 거칠어지며, 깊은 주름이 생기며 색소가 침착되는 특징이 있고, 외인적 노화는 자외선, 활성 산소종(reactive oxygen species) 및 스트레스 등의 외인적 요인에 의해 발생하는 노화 현상을 말한다. 이러한 요인들에 의해 피부의 노화는 급속히 진행되며, 그 결과 피부 표면에 거친 주름이 생성되고 탄력이 현저히 감소하게 된다.
이러한 피부노화를 억제하고 그 진행속도를 완화하기 위하여, 레티놀, 레티노이드, 비타민 C, 플라보노이드 및 토코페롤, 기타 피부보호성분이 함유된 화장료조설물 또는 피부보호제가 개발되고는 있으나, 피부노화에 따른 각종 증상을 일시에 개선하는 데에는 한계가 있는 문제점이 있다.
이와 관련된 기술로, 대한민국 등록특허공보 제10-0499999호(2005.09.15.공고)에는 "창이자(도꼬마리) 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거 화장료"가 공고된 바 있는데, 이는 창이자(도꼬마리)의 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거 화장료로서, 창이자는 국화과(compositae)의 도꼬마리(xanthium strumarium LINNAEUS)열매임을 특징으로 하는 화장료에 관한 것이다.
그러나, 상기 종래의 창이자(도꼬마리) 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거 화장료는 도꼬마리에 대한 전처리 과정을 수행하지 않아 세포 독성이 나타나는 문제점이 있었으며, 도꼬마리 내의 유효 성분의 효과를 증대시키지 못해 항산화 효과가 떨어지는 문제점이 있었다. 따라서, 창이자의 전처리 기술의 조건에 대한 정확한 확립이 필요한 실정이다.
대한민국 등록특허공보 제10-0499999호(2005.09.15.공고), "창이자(도꼬마리) 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거 화장료"
따라서, 본 발명의 목적은 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
상기와 같은 과제를 달성하기 위하여 본 발명은 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물을 제공한다.
바람직하게는, 상기 창이자는 120 ~ 140℃로 30분 ~ 4시간 동안 로스팅된 것을 특징으로 하는 로스팅될 수 있다.
또한, 바람직하게는, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 에틸 아세테이트, 글리세린 및 에틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상 혼합된 추출 용매를 사용하여 추출할 수 있다.
또한, 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 화장수, 스킨, 로션, 크림, 파운데이션, 에센스, 젤, 팩, 유화형 자외선 차단용 크림, 유화형 파운데이션, 유화형 메이크업 베이스, 오일케익형 파운데이션, 투웨이케익, 또는 파우더 팩트의 제형으로 제형화하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물은 항산화 및 항염 효과가 우수하다.
도 1 내지 도 4는 제조예 1 내지 20에 대한 세포 생존률 시험을 나타낸 그래프.
도 5 내지 도 6은 제조예 11 내지 20에 대한 자유라디칼 소거 효과와 관련된 실험을 나타낸 그래프.
도 7 내지 도 8은 제조예 11 내지 20에 대한 지질과산화 억제 효과와 관련된 실험을 나타낸 그래프.
도 9 내지 도 10은 제조예 11 내지 20에 대한 NO 생성 저해율과 관련된 실험을 나타낸 그래프.
도 11 내지 도 12는 제조예 11 내지 20에 대한 β-Hexosaminidase release와 관련된 실험을 나타낸 그래프.
이하의 본 발명에 관한 상세한 설명들은 본 발명이 실시될 수 있는 실시 예이고 해당 실시 예의 예시로써 도시된 첨부 도면을 참조한다. 이들 실시 예는 당 업자가 본 발명의 실시에 충분하도록 상세히 설명된다. 본 발명의 다양한 실시 예는 서로 다르지만 상호 배타적일 필요는 없음이 이해되어야 한다. 예를 들어, 여기에 기재되어 있는 특정 형상, 구조 및 특성은 일 실시 예에 관련하여 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않으면서 다른 실시 예로 구현될 수 있다. 또한, 각각의 기재된 실시 예 내의 개별 구성요소의 위치 또는 배치는 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않으면서 변경될 수 있음이 이해되어야 한다.
따라서 후술되는 상세한 설명은 한정적인 의미로서 취하려는 것이 아니며, 본 발명의 범위는 적절하게 설명된다면 그 청구항들이 주장하는 것과 균등한 모든 범위와 더불어 첨부된 청구항에 의해서만 한정된다. 도면에서 유사한 참조부호는 여러 측면에 걸쳐서 동일하거나 유사한 기능을 지칭한다.
본 발명에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.
본 발명에서 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한, 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있음을 의미한다.
본 발명은 로스팅된 창이자를 추출용매로 추출한 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 창이자는 국화과의 도꼬마리(Xanthium strumarium L.)의 열매를 칭한다. 상기 도꼬마리는 한해살이풀로 온몸에 짧고 빳빳한 털이 빽빽하게 깔려 있다. 상기 도꼬마리의 줄기는 곧게 서서 1m 안팎의 높이로 자라 약간의 가지를 친다. 상기 도꼬마리의 잎은 서로 어긋나게 자리하는데 넓은 세모꼴로 가장자리가 얕게 3~5개로 갈라지며, 갈라진 조각의 끝은 뾰족하고 뒷면에는 세 개의 잎맥이 뚜렷하게 보인다. 상기 도꼬마리의 잎 가장자리에는 거친 톱니가 나 있고 긴 잎자루를 가지고 있다. 상기 도꼬마리의 꽃은 암꽃과 수꽃이 따로 핀다. 수꽃은 둥글고 줄기와 가지 끝에 많이 뭉쳐 핀다. 암꽃은 곤봉과 같이 길쭉하며 잎겨드랑이에 뭉쳐 핀다. 꽃의 빛깔은 노라며, 꽃이 지고 난 뒤에 길이 1cm 정도의 많은 가시를 가진 열매가 달리는데 이를 창이자라 한다.
본 발명에 따른 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물은 창이자를 로스팅하고, 추출용매를 통해 추출하여 창이자가 갖는 항염 및 항산화효과를 증진시킨다.
상기 창이자의 로스팅 과정에서, 창이자가 갖는 항산화 및 항염효과가 증대될 수 있다. 이에, 본 발명은 창이자의 로스팅을 통해 항산화 및 항염효과가 증대되도록 하는 가장 효율적인 전처리 조건을 제공한다.
상기 창이자는 120 내지 140℃의 온도조건에서, 30분 내지 4시간 동안 로스팅하는 전처리과정을 수행하게 된다. 창이자를 로스팅하는 온도가 120℃ 미만일 경우에는 창이자 추출물이 세포독성을 나타낼 수 있으며, 창이자를 로스팅하는 온도가 140℃를 넘으면 창이자에서 탄화가 일어나 창이자를 폐기하여야 한다. 또한, 창이자를 로스팅하는 시간이 30분 미만일 경우에는 창이자가 갖는 항산화 및 항염효과가 충분히 증대되지 못하며, 창이자를 로스팅하는 시간이 4시간을 넘으면 창이자에서 탄화가 일어나 창이자를 폐기하여야 한다. 이중, 가장 바람직하게는 창이자를 120℃ ~ 140℃의 온도조건에서 3 ~ 4시간 로스팅할 때 항산화 및 항염효과가 가장 극대화될 것이다.
또한, 로스팅 과정을 통해 전처리된 창이자는 용매를 이용해 추출하고, 농축하여, 동결건조한다. 이때, 상기 로스팅된 창이자는 물(정제수), 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 에틸 아세테이트, 글리세린 및 에틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상 혼합된 추출 용매를 사용하여 추출할 수 있다. 바람직하게, 상기 로스팅된 창이자의 추출물은 물(정제수)을 통한 추출, 즉, 열수 추출을 통해 추출한 열수추출물인 것이 가장 적절하다. 이때, 추출물은 로스팅된 창이자를 80 ~ 100℃로 2 ~ 6시간 추출한 것이 바람직하다. 보다 구체적으로, 90℃로 4시간 추출한 것이 가장 바람직할 것이다.
또한, 로스팅된 창이자의 추출물은 농축 및 동결과정이 추가로 수행된 것일 수 있다. 로스팅된 창이자의 추출물은 감압농축기를 이용해 30 내지 50℃에서 감압농축될 수 있으며, 이외에 다양한 농축방법이 적용될 수 있을 것이다.
그리고, 로스팅된 창이자의 추출물을 농축한 다음 동결건조하여 분말 형태로 가공하는 것이 바람직할 것이다.
정리하자면, 본 발명에 따른 로스팅된 창이자의 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물은 120 내지 140℃의 온도조건에서, 30분 내지 4시간 동안 로스팅한 창이자를 물(정제수), 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 에틸 아세테이트, 글리세린 및 에틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상 혼합된 추출 용매를 이용해 80 ~ 100℃로 2 ~ 6시간 동안 추출하고, 감압농축기를 이용해 30 내지 50℃에서 농축하여, 동결건조하고 분쇄한 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 본 발명에 따른 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물에서 상기 창이자 추출물은 최종 형태 중에 적어도 0.001 내지 20.0 중량%로 함유하고, 보다 바람직하게는 0.01 내지 15.0 중량%로 함유하며, 보다 바람직하게는 0.1 내지 10.0 중량%로 함유한다.
상기 추출물의 함량 0.001 중량% 미만일 경우에는 항산화효과가 나타나지 않으며, 20 중량% 초과일 경우에는 그 효과가 크게 증가하지 않으며, 제형상의 안전성과 안정성에 문제가 발생되어 경제성도 대체적으로 낮아진다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효성분 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양크림, 맛사지 크림, 에센스, 팩, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 글리세롤, 글리세린, 지방족 에스테르, 페녹시에탄올, 트리에탄올아민, 폴리에틸렌 글리콜, 밀납, 폴리솔베이트 60, 솔비탄세스퀴오레이드, 파라핀, 소르비탄 스테아레이트, 친유형 모노스테아린산 글리세린, 스테아린산, 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트, 카르복시폴리머, 시토스테롤, 폴리글리세릴 2-올레이트, 세라마이드, 콜레스테롤, 스테아레스-4, 디세틸포스페이트, 마카다미아 오일, 카르복시비닐폴리머, 산탄검 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올, 글리세린, 부틸렌글리콜 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오즈, 소디움히아루로네이트, 페녹시에탄올, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 스테아린산, 세틸알코올, 글리세릴모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트, 솔비탄세스퀴올레이트, 글리세릴모노스테아레이트/글리세릴스테아레이트/폴리옥시에틸렌스테아레이트, 왁스, 파리핀, 스쿠알란, 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드, 카르복시비닐폴리머, 트리에탄올아민, 아가 또는 트라칸트 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 중 어느 하나 이상을 선택하여 이용될 수 있다.
또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물의 사용효능은 개인의 피부상태와 컨디션, 외부 환경 조건에 따라 알맞게 조절이 가능하다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위해 제조예 및 실험예를 제시하여 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 하기의 제조예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 이에 의해 본 발명의 기술적 수준과 범위가 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 제조예 및 실험예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다.
제조예 1 내지 5. 창이자를 80℃의 온도로 로스팅하여 추출한 추출물
창이자를 80℃의 온도조건에서 하기 표 1의 시간 동안 로스팅하였다. 로스팅된 창이자를 물(정제수)를 이용하여, 90℃로 4시간 동안 추출하여 추출물을 제조하였다. 추출물을 감압농축기를 이용해 40℃에서 감압농축하고 동결건조하여 분말 형태로 가공하였다.
※80℃의 온도조건에서 로스팅
로스팅 시간
제조예1 30분
제조예2 1시간
제조예3 2시간
제조예4 3시간
제조예5 4시간
제조예 6 내지 10. 창이자를 100℃의 온도로 로스팅하여 추출한 추출물
창이자를 100℃의 온도조건에서 하기 표 2의 시간 동안 로스팅하였다. 로스팅된 창이자를 물(정제수)를 이용하여, 90℃로 4시간 동안 추출하여 추출물을 제조하였다. 추출물을 감압농축기를 이용해 40℃에서 감압농축하고 동결건조하여 분말 형태로 가공하였다.
※100℃의 온도조건에서 로스팅
로스팅 시간
제조예6 30분
제조예7 1시간
제조예8 2시간
제조예9 3시간
제조예10 4시간
제조예 11 내지 15. 창이자를 120℃의 온도로 로스팅하여 추출한 추출물
창이자를 120℃의 온도조건에서 하기 표 3의 시간 동안 로스팅하였다. 로스팅된 창이자를 물(정제수)를 이용하여, 90℃로 4시간 동안 추출하여 추출물을 제조하였다. 추출물을 감압농축기를 이용해 40℃에서 감압농축하고 동결건조하여 분말 형태로 가공하였다.
※120℃의 온도조건에서 로스팅
로스팅 시간
제조예11 30분
제조예12 1시간
제조예13 2시간
제조예14 3시간
제조예15 4시간
제조예 16 내지 20. 창이자를 140℃의 온도로 로스팅하여 추출한 추출물
창이자를 140℃의 온도조건에서 하기 표 4의 시간 동안 로스팅하였다. 로스팅된 창이자를 물(정제수)를 이용하여, 90℃로 4시간 동안 추출하여 추출물을 제조하였다. 추출물을 감압농축기를 이용해 40℃에서 감압농축하고 동결건조하여 분말 형태로 가공하였다.
※140℃의 온도조건에서 로스팅
로스팅 시간
제조예16 30분
제조예17 1시간
제조예18 2시간
제조예19 3시간
제조예20 4시간
< 시험예 1 > 세포생존율 시험
1) 실험방법
상기 제조예 1 내지 20에서 제조된 시료에 대하여 세포 증식에 미치는 영향을 확인하였다. 세포 증식 및 독성 확인을 위하여 하기와 같은 방법으로 실험을 진행하였다.
배양하고 있는 세포 3T3(fibroblast cell line)을 96 웰 마이크로플레이트에 5,000 세포/ml로 분주(分株)하여 30분간 항온조에서 배양하고, 시료를 농도별로 투여하여 72시간 동안 배양하였다.
72시간 배양 후, 티아졸린 블루(Thiazoline blue)를 투여하고 4시간 동안 추가 배양을 하였다. 배양액을 모두 버리고 마이크로플레이트의 각 웰에 반응 정지액을 가하고 5분간 교반한 후, 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조군은 시료 주입량 만큼 10% 우태아혈청(Fetal Bovine Ser㎛, FBS) 배지를 투여하여 세포 성장의 최적 조건으로 동시배양을 하였으며, 대조군의 세포증식을 100 %로 하고 시료 투입 실험군의세포 증식률을 계산하였다.
세포증식 효과는 하기 수학식 1에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 5 내지 표 8에 나타내었다.
2) 실험결과
전처리 조건에 따른 세포 생존율(%)
0% 0.01% 0.025% 0.05% 0.1% 0.5% 1%
무처리 100 93.6 87.1 80.9 75.2 70.1 65.5
제조예1(30분) 100 93.8 87.5 82.3 76.5 71.8 67.8
제조예2(1시간) 100 94 88.7 83.5 78.6 74.6 71.1
제조예3(2시간) 100 94.3 89.1 84.7 80.4 76.8 74.1
제조예4(3시간) 100 94.5 90.2 86.3 82.9 79.5 76.9
제조예5(4시간) 100 94.8 90.6 86.9 83.4 80.6 78.8
※80℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
전처리 조건에 따른 세포 생존율(%)
0% 0.01% 0.025% 0.05% 0.1% 0.5% 1%
무처리 100 93.6 87.1 80.9 75.2 70.1 65.5
제조예6(30분) 100 94.2 88.3 82.6 78 73.9 70.1
제조예7(1시간) 100 95.9 91.6 86.4 81.7 77.3 73.9
제조예8(2시간) 100 97.5 94.1 90.2 85.9 81.9 78.6
제조예9(3시간) 100 98.2 95.9 92.3 88.4 84.9 82.6
제조예10(4시간) 100 98.9 96.7 93.5 89.8 86.2 84.2
※100℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
전처리 조건에 따른 세포 생존율(%)
0% 0.01% 0.025% 0.05% 0.1% 0.5% 1%
무처리 100 93.6 87.1 80.9 75.2 70.1 65.5
제조예11(30분) 100 97.1 93.9 89.3 84.9 78.8 69.7
제조예12(1시간) 100 99.4 97.3 94.1 89.3 83.5 75.5
제조예13(2시간) 100 100.6 98.9 96.8 93.8 88.7 82.1
제조예14(3시간) 100 101.3 100.8 100.4 98.7 95.9 88.4
제조예15(4시간) 100 101.5 101.1 100.6 99.1 97.1 89.6
※120℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
전처리 조건에 따른 세포 생존율(%)
0% 0.01% 0.025% 0.05% 0.1% 0.5% 1%
무처리 100 93.6 87.1 80.9 75.2 70.1 65.5
제조예16(30분) 100 98.3 95.7 92.3 87.7 81.2 72.5
제조예17(1시간) 100 100.3 98.6 95.8 91.7 86.4 78.2
제조예18(2시간) 100 100.6 100.3 99.1 96.5 92.3 86.2
제조예19(3시간) 100 101.4 100.9 100.5 99.4 98.0 93.9
제조예20(4시간) 100 101.7 101.3 100.9 99.7 98.4 94.6
※140℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
그 결과, 120℃ 및 140℃ 온도조건에서 로스팅한 제조예 11 내지 제조예 20의 경우에 세포 생존율이 가장 우수함을 확인할 수 있었다. 80℃ 및 100℃ 온도조건에서는 세포독성이 나타나는 것을 확인하여 화장료 원료로 적절치 못함을 확인할 수 있었다. 따라서, 이하의 실험에서는 제조예 11 내지 제조예 20을 이용하여 수행한다.
< 시험예 2 > 자유라디칼 소거 효과 확인
1) 실험방법
상기 제조예 11 내지 20에서 제조된 시료에 대하여 자유라디칼(Free Radical) 소거에 미치는 영향을 확인하였다. 자유라디칼(Free Radical) 소거에 미치는 영향을 확인하기 위하여 하기와 같은 방법으로 실험을 진행하였다.
DPPH(1,1-디페닐-2피크릴-히드라질)법 (참조:Blois.M.S.Nature 181, 1190, 1958)을 사용하여 실험을 수행하였으며, DPPH와 Ascorbic acid(대조군)는 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 0.2 mM DPPH 메탄올 용액 1 ml에 상이한 농도를 갖는 제조예 11 내지 20과, 양성대조군을 각각 2 ml씩 첨가하고 교반한 후 실온에서 10분간 반응시켰다. 그 후, 517 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 이때 공시험으로 각 시료 대신 정제수를 사용하였다.
하기 수학식 2를 이용하여 자유라디칼의 변화를 측정하였고 그 결과를 표 9 및 표 10에 나타내었다.
2) 실험결과
자유라디칼 소거에 대한 결과는 하기 표 9 및 표 10에 나타내었다.
전처리 조건에 따른 라디칼소거 효과(%)
0.001% 0.0025% 0.005% 0.01%
무처리 14.6 35.8 66.9 72.1
제조예11(30분) 16.8 39.7 71.9 74.2
제조예12(1시간) 21.1 46.9 72.5 78.4
제조예13(2시간) 22.2 50.3 75.4 78.7
제조예14(3시간) 23.5 55.4 78.7 83.5
제조예15(4시간) 22.9 53.1 76.3 81.1
※120℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
전처리 조건에 따른 라디칼소거 효과(%)
0.001% 0.0025% 0.005% 0.01%
무처리 14.6 35.8 66.9 72.1
제조예16(30분) 17.1 40.4 72.3 75.1
제조예17(1시간) 21.8 47.6 74.0 78.9
제조예18(2시간) 22.4 51.4 76.1 79.6
제조예19(3시간) 22.9 54.2 77.6 81.7
제조예20(4시간) 21.1 51.8 75.2 78.8
※140℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
그 결과, 120℃에서 3시간 로스팅한 제조예 14와, 140℃에서 3시간 로스팅한 제조예 19의 자유라디칼 소거 효과가 가장 우수하였다. 로스팅 처리하지 않은 경우에는 자유라디칼 소거 효과가 낮게 나타났다.
< 시험예 3 > 지질과산화 저해능 ( lipid peroxidation inhibition action ) 측정
1) 실험방법
지질과산화 저해능(lipid peroxidation inhibition action) 측정은 Siriwardhana 등의 방법[22]에 준하여 측정하였다. 상이한 농도를 갖는 제조예 11 내지 20의 각 시료 1.0 mL, 2.5% linoleic acid emulsion 2.0 mL 및 phosphate buffer (pH 7.0) 10.0 mL를 첨가하여 교반한 후, 증류수 8.0 mL를 가하여 혼합하였다. 빛을 차단한 40℃ 수조에 24시간 동안 혼합액을 반응시킨 다음, 반응액 0.1 mL에 30% ammonium thiocyanate 0.1 mL와 에탄올 3.7 mL 및 0.02 M ferrous chloride 0.1 mL를 가하여 3분간 교반하여 산화 정도에 따른 흡광도를 500 nm에서 측정하였다. 활성 비교를 위해 BHA 를 사용하였으며, 아래의 식에 의하여 백분율(%)로 계산하여 지질과산화 저해능을 나타내었다.
2) 실험결과
지질과산화 저해능에 대한 실험 결과는 하기 표 11 및 표 12에 나타내었다.
Lipid peroxidation inhibition (%)
0.01% 0.02% 0.03% 0.04% 0.05%
무처리 11.7 23.7 35.8 43.9 49.8
제조예11(30분) 12.3 24.1 37.0 45.5 52.4
제조예12(1시간) 15.1 26.3 39.8 48.3 56.5
제조예13(2시간) 18.8 30.8 44.7 53.4 59.7
제조예14(3시간) 21.9 35.2 48.6 58.4 65.8
제조예15(4시간) 21.2 33.7 46.8 56.1 63.4
BHA 35.9 46.2 58.9 70.5 80.2
※120℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
Lipid peroxidation inhibition (%)
0.01% 0.02% 0.03% 0.04% 0.05%
무처리 11.7 23.7 35.8 43.9 49.8
제조예16(30분) 13.1 25.4 38.1 46.7 54.2
제조예17(1시간) 14.9 25.8 39.2 47.6 56
제조예18(2시간) 17.8 29.2 42.8 51.9 58.1
제조예19(3시간) 20.7 34.3 47.1 56.9 64.1
제조예20(4시간) 20.1 33.2 45.5 54.8 62.3
BHA 35.9 46.2 58.9 70.5 80.2
※140℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
그 결과, 제조예 11 내지 20 모두 농도 의존적으로 Lipid peroxidation inhibition 효능을 지니고 있는 것을 확인하였다. 특히, 120℃에서 3시간 로스팅한 제조예 14와, 140℃에서 3시간 로스팅한 제조예 19의 Lipid peroxidation inhibition 효과가 가장 우수하였다. 로스팅 처리하지 않은 경우에는 Lipid peroxidation inhibition 효과가 낮게 나타났다.
< 시험예 4 > NO 억제 효과 확인
1) 실험방법
마우스 대식세포인 Raw 264.7 세포를 6-웰플레이트에 3.5 Х 105세포/ml 농도로 분주하여 24시간 배양시켰다. 그 이후, 각 웰에 제조예 11 내지 20에서 제조한 시료를 상이한 농도로 희석하여 함유한 세포배지로 교체하였다. 자극원으로 LPS(Lipopolysaccharide)를 1 ㎍씩 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 상층액을 100 ㎕씩 취해 96-웰 플레이트에 옮기고, Griess 용액을 100 ㎕씩 가해 상온에서 10분간 반응시키고, 540 nm에서의 흡광도를 측정함으로써 NO 억제효과를 판단하고, 그 결과를 하기 표 13 및 표 14에 나타내었다.
2) 실험결과
전처리 조건에 따른 NO 생성 억제 효과(%)
LPS 0.0% 0.0% 0.001% 0.005% 0.01% 0.025% 0.05%
LPS 무처리 - 4.7
LPS 단독처리 + 18.7
무처리 + 4.7 18.7 18.5 18.2 17.6 16.7 15.9
제조예11(30분) + 4.7 18.7 18.4 17.9 17.1 16.2 15.4
제조예12(1시간) + 4.7 18.7 18.2 17.4 16.3 15.2 14.4
제조예13(2시간) + 4.7 18.7 18.0 17.1 15.8 14.3 13.5
제조예14(3시간) + 4.7 18.7 17.5 16.2 14.6 12.9 11.8
제조예15(4시간) + 4.7 18.7 17.6 16.4 15.1 13.2 12.3
※120℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
전처리 조건에 따른 NO 생성 억제 효과(%)
LPS 0.0% 0.0% 0.001% 0.005% 0.01% 0.025% 0.05%
LPS 무처리 - 4.7
LPS 단독처리 + 18.7
무처리 4.7 18.7 18.5 18.2 17.6 16.7 15.9
제조예16(30분) + 4.7 18.7 18.3 17.7 16.8 15.9 15.2
제조예17(1시간) + 4.7 18.7 18.3 17.5 16.5 15.4 14.6
제조예18(2시간) + 4.7 18.7 18.2 17.3 16.0 14.7 13.8
제조예19(3시간) + 4.7 18.7 17.9 16.5 15.0 13.2 12.2
제조예20(4시간) + 4.7 18.7 18.0 16.8 15.4 13.7 12.6
※140℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
그 결과, 제조예 11 내지 20 모두 농도 의존적으로 NO 생성을 억제하는 효능을 지니고 있는 것을 확인하였다. 특히, 120℃에서 3시간 로스팅한 제조예 14와, 140℃에서 3시간 로스팅한 제조예 19의 NO 억제효과가 가장 우수하였다. 로스팅 처리하지 않은 경우에는 NO 억제효과가 낮게 나타났다.
< 시험예 5 > β- Hexosaminidase release 확인
1) 실험방법
본 발명의 파테놀라이드를 RBL-2H3 세포주(Rat mast cell line)에 처리하여 안티젠에 의한 탈과립화를 억제하는 효과를 나타낸 것이다. RBL-2H3 세포주를 24 well plate에 각각 well 당 2×105개의 세포가 들어가도록 분주한 다음, well 당 200 ng/mL의 anti-DNP Ig E로 감작시키고 5%의 CO2 배양기에서 12 h 배양시켰다. 세포주는 siraganian buffer로 2 회 세척한 후 제조예 11 내지 20의 시료를 농도별로 첨가한 후 30 min 동안 37℃에서 다시 반응시키고, 여기에 DNP-HAS (25 ng/mL)를 처리하고 30 min 간 알레르기 반응을 유도한 후 ice bath에서 10 min 간 반응을 정지한 후 12,000 rpm에서 3 min 원심 분리하여 상등액만 회수하고, β-hexosaminidase 측정에 이용하였다. β-Hexosaminidase 분비 저해 측정은 상등액 30 μL와 1 mM p-NAG 30 μL을 혼합한 반응액을 1 h 동안 37℃에서 반응시키고 0.1M carbonate buffer 250 mL를 첨가하여 반응을 종결시키고, ELISA reader (Molecular Devices, USA)를 사용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.
2) 실험결과
전처리 조건에 따른 β-Hexosaminidase release
0.0% 0.001% 0.005% 0.01% 0.025% 0.05%
무처리 100.0 94.9 92.1 85.2 76.8 68.7
제조예11(30분) 100.0 94.7 91.9 85.1 76.4 68.1
제조예12(1시간) 100.0 94.1 90.9 84.2 73.6 64.9
제조예13(2시간) 100.0 93.5 90.2 82.3 71.6 62.3
제조예14(3시간) 100.0 92.8 87.3 77.9 65.1 54.3
제조예15(4시간) 100.0 93.1 88.6 79.2 67.3 57.5
※120℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
전처리 조건에 따른 β-Hexosaminidase release
0.0% 0.001% 0.005% 0.01% 0.025% 0.05%
무처리 100.0 94.9 92.1 85.2 76.8 68.7
제조예16(30분) 100.0 94.5 91.4 84.7 75.9 67.3
제조예17(1시간) 100.0 94.3 91.2 84.5 74.6 65.5
제조예18(2시간) 100.0 93.9 90.8 83.7 72.3 62.3
제조예19(3시간) 100.0 93.2 88.5 77.9 66.2 55.6
제조예20(4시간) 100.0 93.5 89.2 80.3 68.4 58.4
※140℃의 온도조건에서 로스팅한 시료
그 결과, 제조예 11 내지 20 모두 농도 의존적으로 베타 헥소사미니다아제 방출량이 감소되는 것으로 확인되었으며, 특히, 120℃에서 3시간 로스팅한 제조예 14와, 140℃에서 3시간 로스팅한 제조예 19의 헥소사미니다아제 방출량이 감소되는 것으로 나타났다.
< 제형예 1 > 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하는 토너의 제조
로스팅된 창이자 추출물을 함유한 화장료 중 토너의 처방예는 표 17과 같다.
번호 원료 함량(중량%) 원료내함량비율(%)
1 로스팅된 창이자 추출물 2.00
2 글리세린 5.00
3 메틸프로판디올 3.00
4 베타인 1.00
5 폴리글리세릴-10올리에이트 0.50 44%
폴리글리세릴-10스테아레이트 56%
6 1,2-헥산디올 1.20
7 디소듐이디티에이 0.02
8 방부제 미량
9 향료 미량
10 정제수 잔량
< 제형예 2 > 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하는 로션의 제조
로스팅된 창이자 추출물을 함유한 화장료 중 로션의 처방예는 표 18와 같다.
번호 원료 함량(중량%) 원료내함량비율(%)
1 로스팅된 창이자 추출물 2.00
2 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.00
3 세테아릴알코올 1.00
4 스테아릭애씨드 0.50
5 글리세린 5.00
6 메틸프로판디올 3.00
7 프로판디올 3.00
8 디메치콘 0.50
9 사이클로펜타실록산 1.00 65%
사이클로헥사실록산 35%
10 세테아릴올리베이트 1.00 50-70%
솔비탄올리베이트 35-50%
11 폴리글리세릴-3메틸글루코오스다이스테아레이트 1.00
12 1,2-헥산디올 1.20
13 글리세릴스테아레이트 0.50
14 폴리솔베이트60 0.30
15 트로메타민 0.18
16 디소듐이디티에이 0.02
17 암모늄아크릴로일다이메틸타우레이트/브이피코폴리머 0.10
18 소듐폴리아크릴레이트 0.10 55-65%
하이드로제네이티드폴리데센 30-40%
트라이데세스-6 < 5%
19 카보머 0.10
20 잔탄검 0.05
21 방부제 미량
22 향료 미량
23 정제수 잔량
< 제형예 3 > 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하는 크림의 제조
로스팅된 창이자 추출물을 함유한 화장료 중 크림의 처방예는 표 19와 같다.
번호 원료 함량(중량%) 원료내함량비율(%)
1 로스팅된 창이자 추출물 2.00
2 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 7.00
3 다이카프릴릴카보네이트 3.00
4 세테아릴알코올 2.00
5 스테아릭애씨드 0.20
6 글리세린 5.00
7 프로판디올 5.00
8 디메치콘 0.50
9 사이클로펜타실록산 1.00 65%
사이클로헥사실록산 35%
10 1,2-헥산디올 1.20
11 트레할로스 0.50
12 글리세릴스테아레이트시트레이트 3.00
13 글리세릴스테아레이트 0.30
14 폴리솔베이트60 0.30
15 트로메타민 0.18
16 디소듐이디티에이 0.02
17 암모늄아크릴로일다이메틸타우레이트/브이피코폴리머 0.10
18 소듐폴리아크릴레이트 0.40 55-65%
하이드로제네이티드폴리데센 30-40%
트라이데세스-6 < 5%
19 카보머 0.20
20 잔탄검 0.05
21 소듐하이알루로네이트 0.005
22 방부제 미량
23 향료 미량
24 정제수 잔량
본 발명을 첨부된 도면과 함께 설명하였으나, 이는 본 발명의 요지를 포함하는 다양한 실시 형태 중의 하나의 실시 예에 불과하며, 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 하는 데에 그 목적이 있는 것으로, 본 발명 은 상기 설명된 실시예에만 국한되는 것이 아님은 명확하다. 따라서, 본 발명의 보호범위는 하기의 청구범위에 의해 해석되어야 하며, 본 발명의 요지를 벗어나지 않는 범위 내에서 변경, 치환, 대체 등에 의해 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리에 포함될 것이다. 또한, 도면의 일부 구성은 구성을 보다 명확하게 설명하기 위한 것으로 실제보다 과장되거나 축소되어 제공되는 것임을 명확히 한다.

Claims (4)

  1. 로스팅된 창이자를 추출용매로 추출한 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물
  2. 제1항에 있어서,
    상기 창이자는 120 ~ 140℃로 30분 ~ 4시간 동안 로스팅된 것을 특징으로 하는 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은, 로스팅된 창이자를 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 에틸 아세테이트, 글리세린 및 에틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상 혼합된 추출용매를 사용하여 추출하는 것을 특징으로 하는 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 화장수, 스킨, 로션, 크림, 파운데이션, 에센스, 젤, 팩, 유화형 자외선 차단용 크림, 유화형 파운데이션, 유화형 메이크업 베이스, 오일케익형 파운데이션, 투웨이케익, 또는 파우더 팩트의 제형으로 제형화하는 것을 특징으로 하는 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물.
KR1020220048240A 2022-04-19 2022-04-19 로스팅된 창이자 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염효과를 갖는 화장료 조성물 KR20230149057A (ko)

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KR100499999B1 (ko) 1997-09-09 2005-09-15 주식회사 참 존 창이자(도꼬마리)추출물을함유하는자유라디칼소거화장료

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KR100499999B1 (ko) 1997-09-09 2005-09-15 주식회사 참 존 창이자(도꼬마리)추출물을함유하는자유라디칼소거화장료

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