KR20230144227A - 항산화 효과를 가지는 알로에 유래 신규 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 uab1의 사균체 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 항산화 효과를 가지는 신규 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08) 사균체에 관한 것으로, 구체적으로 알로에 베라 첨가 산업배지를 이용하여 제조한 알로에 유래 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체는 일반산업배지를 이용하여 제조한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 사균체와 비교하여 사균체의 균수가 약 4배 증가되고 항산화 활성이 보다 우수한 것을 확인하였으므로, 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체를 항산화용 조성물의 유효성분으로 이용할 수 있다.
Description
본 발명은 항산화 효과를 가지는 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08)의 사균체에 관한 것이다.
생체 내에서는 에너지 생산을 위한 산화과정 중 상당량의 활성산소가 생성된다. 활성산소가 순간적으로 다량 발생되거나 만성적으로 활성산소가 발생하게 되면, 세포의 구성성분과 강하게 반응하여 세포 및 조직에 손상을 유발하며, 지속적인 세포의 손상은 DNA 변성, 지질 산화, 단백질 분해 등을 초래할 수 있는 것으로 알려져 있다.
인체 내에서 과산화물제거효소(Superoxide dismutase, SOD), 글루타티온과산화효소(glutathione peroxidase, GPX), 카탈라아제(catalase, CAT), 글루타티온환원효소(glutathione reductase), 글루타티온-S-전달효소(glutathione-S-transferase) 등과 같이 활성산소에 대항하는 항산화 효소가 존재하나, 오늘날 산업화와 함께 증가하는 각종 환경오염 물질, 흡연, 스트레스 등으로 인하여 인체 내 항산화 효소 등의 활성만으로는 DNA 손상이나 단백질 분해 등을 방어하는데 한계가 있다.
이에, 항산화제로 부틸레이트하이드록시아니솔(butylated hydroxyanisole, BHA), 부틸레이트하이드록시톨루엔(butylated hydroxytoluene, BHT)과 같은 합성물질들이 개발되었으나, 인체에 여러 부작용을 야기할 수 있어 천연물질로부터 유래한 안전한 항산화 물질을 찾은 연구가 지속적으로 필요한 실정이다.
한편, 유산균(Lactic acid bacteria)은 당류를 분해하여 젖산을 생성하는 세균으로, 젖산균이라고도 불리운다. 사람이나 동물의 소화관, 우유, 요구르트, 치즈, 김치, 식물 및 토양 등 자연계에 널리 분포되어 있으며, 인체의 소화계에 공생하며 섬유질 및 복합 단백질들을 분해하여 중요한 영양 성분으로 만드는 역할을 담당하는 것으로 알려져 있다. 이와 같이 사람을 포함한 동물의 위장관 내에서 미생물 환경을 개선하여 면역력을 향상시키는데 기여하는 등의 유익한 영향을 주는 유산균에 대한 연구가 최근 활발히 진행되면서 일반식품뿐만 아니라 건강식품 및 약품으로써 이용되는 등 그 응용범위가 넓어지고 있다.
이에 따라 프로바이오틱스의 정의 또한 시대의 흐름에 따라 조금씩 확대되고 있는데, 1989년 Fuller는 Probiotcis를 “장내 균종을 개선시켜 줌으로써 숙주에게 유익한 영향을 주는 생균제제”라고 정의하여 살아있는 미생물로서의 정립이 이루어졌으나, 1999년 Salminen 등이 “숙주에 유익한 작용을 갖는 미생물 또는 미생물의 성분”으로 정의함으로써 Probiotcis의 범위를 사균(死菌) 및 그 균체 성분으로까지 확대시켰다.
유산균 사균체는 생균의 반대되는 개념으로서 발효를 통해 얻어진 생균과 대사산물들을 열처리 등에 의해 균의 성장이 일어나지 못하도록 한 형태로, 유산균 사균체 제품은 생균제품과 비교하여 높은 안정성을 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 특히 외부 환경에 대한 안정성이 높아 기존 유산균 제품보다 보관이 용이하고 유통기간을 늘일 수 있다는 장점을 가지고 있어, 사균체 제품은 건강기능식품, 식품첨가제, 의약품, 동물사료 등과 같은 기존의 유산균 생균이 적용되어 온 분야 외에도 화장품 원료 등의 다양한 분야로도 적용이 가능하다.
이에, 본 발명자들은 부작용이 적고 항산화 효과를 가지는 유산균 사균체를 개발하기 위해 노력한 결과, 알로에 베라 첨가 산업배지를 이용하여 제조한 알로에 유래 토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08) 사균체가 일반산업배지를 이용하여 제조한 락토코쿠스 락티즈 아종 호르드니아에 사균체와 비교하여 항산화 활성이 보다 우수한 것을 확인하여, 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체가 항산화용 조성물의 유효성분으로 이용할 수 있음을 밝힘으로써, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08) 사균체를 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08) 사균체를 제공한다.
또한, 본 발명은
1) 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 전 배양하는 단계; 및
2) 단계 1)의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 알로에 배지에 접종하고 배양한 후 열처리하는 단계를 포함하는 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 항산화용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 프로바이오틱스 제제를 제공한다.
아울러, 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08) 사균체는 항산화 효과를 가지며, 특히 일반산업배지를 이용하여 제조한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 사균체와 비교하여 사균체의 균수가 약 4배 증가되고 우수한 항산화 활성을 나타내므로, 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체를 항산화용 조성물의 유효성분으로 이용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08)의 형태학적 특성을 확인한 도이다.
도 2는 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 계통도를 확인한 도이다.
도 3은 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 내산성을 확인한 도이다.
도 4는 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 인공위액 및 인공담즙 저항성을 확인한 도이다.
도 5는 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 DPPH 자유 라디칼(DPPH free radical) 소거능 및 ABTS 자유 라디칼 소거능을 확인한 도이다.
도 6은 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 IL-6 유도 STAT-3 루시퍼라제(luciferase) 활성 저해 효과를 확인한 도이다.
도 7은 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 제조 공정을 나타낸 도이다.
도 8은 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 DPPH 자유 라디칼(DPPH free radical) 소거능 및 ABTS 자유 라디칼 소거능을 확인한 도이다.
도 2는 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 계통도를 확인한 도이다.
도 3은 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 내산성을 확인한 도이다.
도 4는 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 인공위액 및 인공담즙 저항성을 확인한 도이다.
도 5는 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 DPPH 자유 라디칼(DPPH free radical) 소거능 및 ABTS 자유 라디칼 소거능을 확인한 도이다.
도 6은 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 IL-6 유도 STAT-3 루시퍼라제(luciferase) 활성 저해 효과를 확인한 도이다.
도 7은 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 제조 공정을 나타낸 도이다.
도 8은 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 DPPH 자유 라디칼(DPPH free radical) 소거능 및 ABTS 자유 라디칼 소거능을 확인한 도이다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08)의 사균체를 제공한다.
또한, 상기 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08은 한국 주식회사 유니베라에서 개발한 유산균으로서, 항산화 효과를 나타내는 것이 바람직하다.
본 발명에서, 상기 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체는 시판되는 것, 또는 공지된 사균체 제조법으로 제조된 것 중 어느 것을 이용하여도 무방하며, 독성을 나타내지 않고, 인체에 무해하다.
또한, 상기 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체는 사균체, 사균체의 추출물, 사균체 제조과정에서 사균체 회수 후 얻은 상등액, 이들의 농축액, 농축물, 건조물, 또는 필요에 따라서는 이들의 희석액, 희석물 등이며, 사균체를 처리하여 얻어지는 모든 상태의 것을 포함할 수 있다.
본 발명에서, 상기 사균체는 상응한 생균체를 열처리하거나 포르말린 또는 기타 살균제와 함께 처리하여 제조할 수 있으며 사균체는 실질적으로 죽어 있는 것이어도 사용가능하다. 또한, 상기 사균체는 통상의 방법에 의해 배양하여 수득한 균주를 세정하고, 원심 탈수하고, 필요에 따라 세정·탈수를 반복한 후, 증류수, 생리식염수 등에 현탁하고, 그 현탁액을, 예를 들면 70 내지 130℃에서 3초 내지 30분간 가열함으로써 얻어지는 사균체 현탁액이나 그 건조물, 또는 상기 사균체 현탁액에 감마선 혹은 중성자선을 조사함으로써 얻어지는 사균체 현탁액이나 그 건조물을 들 수 있다. 상기 사균체 현탁액의 건조 수단으로서는 공지된 건조 수단이면 특별히 제한되지 않지만, 분무 건조, 동결 건조 등을 예시할 수 있다. 경우에 따라서는, 가열 등에 의한 살균 처리의 전후, 또는, 건조 처리의 전후에, 효소 처리, 계면활성제 처리, 마쇄·분쇄 처리를 실행할 수 있고, 이러한 처리에 의해 얻어지는 것도 본 발명의 사균체에 포함된다. 아울러, 상기 사균체는 하기와 같은 방법으로 제조될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다:
1) 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08를 전 배양하는 단계; 및
2) 단계 1)의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 알로에 배지에 접종하고 배양한 후 열처리하는 단계.
상기 단계 1)의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08은 종 배양(seed culture)된 것일 수 있고, 구체적으로 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 스탁(stock)을 배양배지에 0.1 내지 5％(v/v)로 접종한 후 20 내지 45℃의 온도에서 5 내지 30시간 동안 종 배양된 것일 수 있고, 0.5 내지 3％(v/v)로 접종한 후 25 내지 40℃의 온도에서 10 내지 20시간 동안 종 배양된 것일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
상기 단계 1)에서 전 배양은 배양배지에 상기 종 배양한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 포함하는 배양액 0.1 내지 5％(v/v)를 접종하고 20 내지 45℃의 온도에서 1 내지 25 시간 동안 수행될 수 있고, 보다 구체적으로 배양배지에 상기 종 배양한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 포함하는 배양액 0.5 내지 3％(v/v)를 접종하고 25 내지 40℃의 온도에서 5 내지 20 시간 동안 수행될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
상기 단계 2)에서 상기 단계 1)의 전 배양한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08를 포함하는 배양액 0.1 내지 5％(v/v)를 알로에 배지에 접종하여 20 내지 45℃의 온도에서 5 내지 30시간 동안 배양할 수 있고, 보다 구체적으로 25 내지 40℃의 온도에서 10 내지 20시간 동안 종 배양된 것일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
또한, 상기 알로에 배지는 배양배지에 알로에 베라 겔 분말을 포함하는 배지로 구체적으로 배양배지에 알로에 베라 겔 분말을 1 내지 20 중량％ 포함하는 배지일 수 있고, 보다 구체적으로 배양배지에 알로에 베라 겔 분말을 2 내지 10 중량％ 포함하는 배지일 수 있으며, 보다 더 구체적으로 배양배지에 알로에 베라 겔 분말을 2 내지 10 중량% 포함하는 배지일 수 있다.
상기 단계 2)에서 열처리는 70 내지 130 ℃에서 수행될 수 있고, 구체적으로 0 내지 3 bar, 0 내지 2 bar 또는 0 내지 1 bar의 가압 조건으로 70 내지 130 ℃에서 수행될 수 있다. 상기 과정은 2 내지 10회, 2 내지 8회, 2 내지 6회 또는 2 내지 4회 반복될 수 있다.
상기 단계 2)를 거쳐 획득한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 사균체는 급속냉동 및 후 동결건조된 후 분쇄될 수 있다.
또한, 상기 급속냉동 전 부형제를 추가할 수 있다.
상기 방법에 있어서, 배양배지는 유산균을 배양하기 위한 목적의 배지를 의미하며, 유산균의 생장에 도움을 줄 수 있는 것으로 본 발명의 기술분야에서 통상적으로 알려진 성분을 포함할 수 있다.
상기 유산균 배양배지는 탄소원, 질소원, 및 무기염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상을 더 포함할 수 있으며, 유산균의 배양에 최소로 요구되는 성분이나, 유산균의 생장에 도움을 줄 수 있는 성분이라면 제한 없이 포함할 수 있다.
상기 배양배지의 예로 MRS 배지를 들 수 있으며, 상기 MRS 배지 성분은 프로테오스 펩톤, 비프(beef) 추출물, 효모(yeast) 추출물, 덱스트로스, 폴리소베이트 80, 시트르산 암모늄, 황산마그네슘, 황산망간, 및/또는 제2인산칼륨일 수 있다.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체를 제작하였고, 상기 사균체의 사균체 균수 증가 효과 및 항산화 효능을 알아보기 위하여 일반산업배지를 이용하여 제조한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 사균체와 비교한 결과, 상기 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 균수가 약 4배 증가되고, DPPH 자유 라디칼 소거능 및 ABTS 자유 라디칼 소거능이 우수한 것을 확인하였으므로, 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체가 항산화용 조성물의 유효성분으로 이용될할 수 있다.
이에, 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 항산화용 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 조성물 총 중량에 대해, 유효성분으로서 균주를 106 내지 1013 CFU/㎖의 함량으로 포함하거나, 동등한 수의 생균을 가진 배양물 또는 사균체를 포함할 수 있다. 또한, 주성분인 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 유효량에 1종 또는 2종 이상의 약제학적으로 허용 가능한 통상적인 담체 또는 1종 또는 2종 이상의 첨가제를 선택하여 통상적인 제형의 조성물로 제조할 수 있다.
상기 담체는 희석제, 활택제, 결합제, 붕해제, 감미제, 안정제, 방부제 중에서 1종 또는 2종 이상을 선택하여 사용할 수 있으며, 첨가제로는 향료, 비타민류, 항산화제 중에서 1종 또는 2종 이상을 선택하여 사용할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 담체 및 첨가제는 약제학적으로 허용 가능한 것은 모두 사용이 가능하며, 구체적으로는 희석제로는 유당(lactose monohydrate), 트레할로스(Trehalose), 옥수수 전분(cornstarch), 콩기름(soybean oil), 미결정 셀룰로오스(microcrystalline cellulose) 또는 만니톨(D-mannitol)이 좋고, 활택제로는 스테아린산 마그네슘(magnesium stearate) 또는 탈크(talc)가 바람직하며, 결합제로는 폴리비닐 피롤리돈(PVP:polyvinyl pyrolidone) 또는 하이드록시프로필셀룰로오스(HPC: hydroxypropylcellulose) 중에서 선택함이 바람직하다. 또한, 붕해제로는 카르복시메칠셀룰로오스칼슘(Ca-CMC: carboxymethylcellulose calcium), 전분글리콜산나트륨(sodium starchglycolate), 폴라크릴린칼륨(polacrylin potassium) 또는 크로스포비돈(cross-linkedpolyvinylpyrrolidone)중에서 선택함이 바람직하고, 감미제로는 백당, 과당, 소르비톨(sorbitol) 또는 아스파탐(aspartame) 중에서 선택되고, 안정제로는 카르복시메칠셀룰로오스나트륨(Na-CMC: carboxymethylcellulosesodium), 베타-싸이크로덱스트린(β-cyclodextrin), 백납(white bee's wax) 또는 잔탄검(xanthan gum) 중에서 선택되며, 방부제로는 파라옥시안식향산메칠(methyl p-hydroxy benzoate, methylparaben), 파라옥시안식향산프로필(propylp-hydroxybenzoate, propylparaben), 또는 소르빈산칼륨(potassium sorbate) 중에서 선택하는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 항산화 효능을 갖는 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 건강기능식품은 예를 들어, 프로바이오틱스 제제, 식품, 차, 젤리, 즙, 엑기스, 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 이와 같이 다양한 형태로 가공된 본 발명의 건강기능식품은 인체에 부작용이 없으면서 복용이 용이하고 장기간 보관이 가능하다.
본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체를 식품 첨가물로 사용할 경우, 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체를 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에는 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체 원료 100 중량부에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없으므로 유효성분은 상기범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체를 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 얼음과자, 아이스크림류, 우유, 우유 대용품, 크림, 버터, 버터 밀크, 요구르트, 요거트, 치즈를 포함하는 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
상기 외의 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체는 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체는 천연 과일 주스, 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하지 않지만 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체 100 중량부 당 0.001 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 상기 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합의 수득 방법은 상기 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 사균체에 기재된 내용과 동일하므로, 구체적인 설명은 상기 내용을 원용하고, 이하에서는 화장료 조성물의 특유한 구성에 대해서만 설명하도록 한다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 상기 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 유효성분을 제제화 하기 위해서는 상법에 따라 실시하면 용이하게 제제화할 수 있으며 계면활성제, 부형제, 착색료, 향신료, 보존제, 안정제, 완충제, 현탁제, 기타 상용화하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유클렌징, 오일, 분말파운데이션, 유탁액파운데이션, 왁스파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 벤질벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜오일, 글리세롤지방족에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의지방산에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴알코올, 폴리옥시에틸렌소르비톨에스테르 및 폴리옥시에틸렌소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성셀룰로오스, 알루미늄메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로 히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 가축 사료 첨가제를 제공한다.
본 발명에서, 상기 가축은 개, 고양이, 토끼, 양, 염소, 돼지, 말, 당나귀, 소, 젖소, 오리, 닭 또는 거위일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 사료 첨가제는 사료에 첨가되는 물질을 의미하고, 대상 개체의 생산성 향상이나 건강을 증진시키기 위한 것일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 상기 사료 첨가제는 사료 관리법상 보조사료에 해당할 수 있고, 시판되는 기본 사료에 첨가하여 사용할 수 있으며, 상기 기본 사료는 가축의 성장을 위한 필수 영양소로 탄수화물, 지방, 단백질 및 추가적인 광물질, 비타민을 포함할 수 있다.
상기 사료는 개체가 먹고 섭취하며 소화시키는, 적당한 임의의 천연 규정식, 인공 규정식, 한끼식 또는 상기 한끼식의 성분을 의미할 수 있다. 상기 사료의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 사료를 사용할 수 있다. 상기 사료의 예로는 곡물류, 근과류, 식품 가공 부산물류, 조류, 섬유질류, 제약 부산물류, 유지류, 전분류, 박류 및 곡물 부산물류로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 식물성 사료일 수 있고, 단백질류, 무기물류, 유지류, 광물성류, 단세포 단백질류, 동물성 플랑크톤류 및 음식물로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 동물성 사료일 수 있으며, 상기 식물성 사료 및 동물성 사료를 단독으로 사용하거나 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다.
또한, 상기 가축 사료 첨가제에는 품질 저하를 방지하기 위하여 첨가하는 결착제, 유화제, 보존제 등이 있고, 효용 증대를 위하여 사료에 첨가하는 아미노산제, 비타민제, 효소제, 향미제, 비단백질태질소화합물, 규산염제, 완충제, 추출제, 올리고당 등이 있다. 그 외에도 사료 혼합제 등을 추가로 포함할 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 가축용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 상기 화장료 조성물은 애완동물용 헤어토닉, 애완동물용 헤어로션, 애완동물용 헤어크림, 애완동물용 헤어스프레이, 애완동물용 헤어무스, 애완동물용 헤어젤, 애완동물용 헤어컨디셔너, 애완동물용 헤어샴푸, 애완동물용 헤어 린스, 애완동물용 헤어책, 애완동물용 헤어 트리트먼트, 애완동물용 눈썹발모제, 애완동물용 속눈썹발모제 또는 애완동물용 속눈썹영양제 등 다양한 형태로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(
Lactococcus lactis
subsp. Hordniae VIALO08)의 분리 및 동정
<1-1> 알로에로부터 균주VIALO08의 분리
알로에로부터 균주는 다음과 같이 분리하였다.
구체적으로, 증류수로 세척한 알로에 잎을 잘게 자른 다음 멸균 생리식염수인 0.85％의 염화나트륨(NaCl)과 혼합하고 37℃에서 1시간 동안 배양한 후 상등액만을 취하여 BCP첨가 PCA한천(BCP plate count agar, EIKEN, 일본) 배지에 접종하였다. 그다음 상기 배지를 37℃에서 48시간 동안 배양한 후 나타난 콜로니(colony)에 노란색 환을 형성하는 균주만을 분리하였다. 이어 상기 알로에로부터 순수 분리한 균주를 MRS 한천(MRS agar, Difco, 미국) 평판배지에 도말하고 배양하였으며, 이때 형성된 콜로니를 30％ 글리세롤(glycerol)을 사용해 글리세롤 스탁(glycerol stock)으로 제조하여 -80℃의 온도에서 보관하였고, 임의로 VIALO08이라 명명하였다.
<1-2> 알로에로부터 분리한 VIALO08의 형태학적 특성
상기 <실시예 1-1>에서 분리한 VIALO08의 형태학적 특성을 다음과 같이 확인하였다.
구체적으로, <실시예 1-1>에서 순수 분리 후 MRS 한천배지에 배양한 균주에서 콜로니(colony) 형태와 색 등을 확인하였고, 현미경을 이용하여 1000배로 확대하여 균주의 형태를 확인하였으며, 그람염색을 수행하였다.
그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 VIALO008 균주의 콜로니는 0.1 내지 1.5 ㎜의 작은 크기로 둥글고 광택이 있는 흰색 형태이며, 현미경으로 관찰한 균주는 구균으로 단일(single), 쌍(pairs) 또는 짧은 사슬(short chain)을 형성하는 것을 확인하였다.
<1-3> 알로에로부터 분리한 VIALO08의 16S rRNA 분석
상기 <실시예 1-1>에서 분리한 VIALO08를 동정하기 위하여 16S rRNA 분석을 다음과 같이 수행하였다.
구체적으로, (주)바이오팩트(대전, 한국)에 16S rRNA 서열분석을 의뢰하여 수행하였고, 27F와 1492R 프라이머(primer)를 이용하여 PCR을 진행하였다. 그다음 염기서열(sequencing)을 분석하여 나온 결과를 토대로 NCBI의 BLAST 프로그램을 사용하여 Genbank의 데이터베이스에 등록된 16S 리보솜 RNA(16S ribosomal RNA)의 유전자 염기서열과 상동성을 분석하고, MEGA-X 프로그램으로 계통도를 작성하였다.
그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 VIALO08 균주는 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에(Lactococcus lactis subsp. Hordniae) NBRC 100931과 99％의 상동성을 나타내는 것을 확인하였으며, 이에 본 발명의 VIALO08 균주를 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에(Lactococcus lactis subsp. Hordniae) VIALO08이라 명명하고, 2021년 11월 16일자로 한국생명공학연구원 미생물자원센터에 기탁하여 기탁번호 KCTC 14775BP를 부여받았다.
<1-4> 알로에로부터 분리한 VIALO08의 당 이용성 분석
상기 <실시예 1-1>에서 분리한 VIALO08를 동정하기 위하여 당 이용성 분석을 다음과 같이 수행하였다.
구체적으로, MRS 한천(MRS agar) 배지에서 순수배양한 상기 <실시예 1-1>에서 분리한 균주의 콜로니(colony)를 유산균 동정용 배지(API 50 CHL medium)에 적정농도로 희석하여 유산균 동정용 키트(API 50 CHL kit, BIOMERIEUX, 프랑스)에 접종하고, 37℃의 온도에서 24 내지 48시간 동안 배양한 후, 탄소원에 대하여 미생물 증식에 의한 배지(medium)의 색 변화 여부를 관찰하여 각 탄소원의 이용 여부를 관찰하였다. 최종 동정 결과는 동정용 프로그램(apiwep program, http://apiweb.biomerieux.com)을 이용하여 해석하였다.
그 결과, 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08은 49개의 당 중 리보오스(Ribose), D-자일로오스(D-Xylose), D-글루코오스(D-Glucose), D-푸룩토오스(D-Fructose), D-만노오스(D-Mannose), N-아세틸글루코사민(N-Acetyl glucosamine), 아르부틴(Arbutine), 에스쿨린(Esculin), 살리신(Salicine), 사카로오스(Saccharose) 및 트레할로오스(Trehalose)까지 총 10개의 당을 이용하는 것을 확인하였다.
| No. | 당 종류 | 이용성 | No. | 당 종류 | 이용성 |
| 1 | Glycerol | - | 266 | Salicine | + |
| 2 | Erythritol | - | 27 | Cellobiose | - |
| 3 | D-Arabinose | - | 28 | Maltose | - |
| 4 | L-Arabinose | - | 29 | Lactose | - |
| 5 | Ribose | + | 30 | Melibiose | - |
| 6 | D-Xylose | + | 31 | Saccharose | + |
| 7 | L-Xylose | - | 32 | Trehalose | + |
| 8 | Adonitol | - | 33 | Inuline | - |
| 9 | β-Methl-xyloside | - | 34 | Melezitose | - |
| 10 | Galactose | - | 35 | D-Raffinose | - |
| 11 | D-Glucose | + | 36 | Amidon | - |
| 12 | D-Fructose | + | 37 | Glycogen | - |
| 13 | D-Mannose | + | 38 | Xylitol | - |
| 14 | L-Sorbose | - | 39 | β-Gentiobiose | - |
| 15 | Rhamnose | - | 40 | D-Turanose | - |
| 16 | Dulicitol | - | 41 | D-Lyxose | - |
| 17 | Inositol | - | 42 | D-Tagatose | - |
| 18 | Mannitol | - | 43 | D-Fucose | - |
| 19 | Sorbitol | - | 44 | L-Fucose | - |
| 20 | α-Methyl-D-mannoside | - | 45 | D-Arabitol | - |
| 21 | α-Methyl-D-glucoside | - | 46 | L-Arabitol | - |
| 22 | N-Acetyl glucosamine | + | 47 | Gluconate | - |
| 23 | Amygdaline | - | 48 | 2-ceto-gluconate | - |
| 24 | Arbutine | + | 49 | 5-ceto-gluconate | - |
| 25 | Esculin | + |
<실험예 1> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(
Lactococcus lactis
subsp. Hordniae VIALO08)의 활성 확인
<1-1> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 내산성 확인
락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 내산성을 확인하기 위하여, 상기 <실시예 1-1>에서 분리한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 pH 3.0 및 pH 2.0의 완충액(buffer)에 현탁한 후 2시간 동안 배양한 다음 생균수를 측정하여 낮은 pH 조건에서의 생존율을 확인하였다.
그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08이 pH 3.0 조건에서는 94.3％의 생존율을 나타내고, pH 2.0 조건에서는 46.2％의 생존율을 나타내어 높은 내산성을 보유하는 것을 확인하였다.
<1-2> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 인공위액 및 인공담즙 저항성 확인
락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 인공위액 및 인공담즙에 대한 저항성을 확인하기 위하여, 상기 <실시예 1-1>에서 분리한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 MRS 액체(broth) 배지에서 배양한 배양액을 0.1％ 펩신(pepsin)이 첨가된 pH 2.5의 인공위액 배지에 접종한 후 2시간 동안 배양하고, 0.3％의 옥스갈(oxgall)이 첨가된 인공담즙액에 상기 인공위액 배양액을 접종하여 2시간 동안 추가 배양한 다음 생균수를 측정하여 생존율을 확인하였다.
그 결과, 도 4에서 나타낸 바와 같이, 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08이 인공위액 배지에서 2시간 동안 배양한 조건에서는 47.7％의 생존율을 나타내고, 추가로 인공담즙액 배지에 계대하여 2시간 동안 배양한 조건에서는 23.4％의 생존율을 나타내는 것을 확인하였다.
<1-3> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 항산화능 확인
락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 항산화능을 확인하기 위하여, DPPH 자유 라디칼(DPPH free radical) 소거능 및 ABTS 자유 라디칼 소거능을 측정하였다.
구체적으로, 상기 <실시예 1-1>에서 분리한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 MRS 액체(broth) 배지에서 배양한 배양액을 증류수로 희석하여 농도가 8.2, 8.0, 7.8 및 7.6 Log CFU/㎖이 되도록 조정한 다음, DPPH 자유 라디칼 소거능은 DPPH(2,2-Diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazin-1-yl) 시약을 사용하고, ABTS 자유 라디칼 소거능은 ABTS(2,2-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) 시약 및 과황산칼륨(potassium persulfate) 시약을 사용하여 통상적인 방법에 따라 흡광도를 확인하여 소거능을 측정하였다.
그 결과, 도 5에서 나타낸 바와 같이, 대조군으로 사용된 아스코르브산(ascorbic acid) 100 ㎍/㎖ 농도의 DPPH 및 ABTS 자유 라디칼 소거 활성은 각각 93.1％와 94％로 확인되었고, 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 DPPH 및 ABTS 자유 라디칼 소거 활성은 농도 의존적으로 감소하며, 8.0 Log CFU/㎖(1.0×108 CFU/㎖) 농도에서 각각 67.4％와 68.3％의 소거 활성을 보이는 것을 확인하였다.
<1-4> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 IL-6 유도 STAT-3 루시퍼라제(luciferase) 활성 저해 확인
락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 IL-6 유도 STAT-3 루시퍼라제 활성 저해 효과를 확인하기 위하여, STAT-3 활성에 의존적으로 루시퍼라제 유전자를 발현하는 Hep3B 세포에 상기 <실시예 1>에서 분리 및 동정한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 10, 30, 60 ㎍/㎖의 농도별로 각각 1시간 동안 전처리한 다음, STAT-3을 활성화시키기 위하여 IL-6 10 ng/㎖를 18시간 동안 처리한 후 루시퍼라제 활성을 측정하였다.
그 결과, 도 6에서 나타낸 바와 같이, 대조군으로 사용된 상업용 균주에 비하여 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08를 60 ㎍/㎖의 농도로 전처리한 실험군의 STAT3 전사(transcription) 저해 효과가 우수한 것을 확인하였다.
<실시예 2> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(
Lactococcus lactis
subsp. Hordniae VIALO08) 사균체 제조
락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08) 사균체는 다음과 같이 제조하였다.
구체적으로, 상기 <실시예 1>에서 알로에로부터 분리 및 동정한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08)(기탁번호 KTCT 14775BP) 스탁(stock)을 MRS 액체 배지에 1％(v/v)로 접종한 후 37℃의 온도에서 18시간 동안 종 배양(seed culture)한 다음, 포도당, 이스트 분말, 소이펩톤, 초산나트륨 및 제2인산칼륨 등이 함유된 산업배지에 상기 종 배양 배양액 1％(v/v)를 접종하고 37℃의 온도에서 12시간 동안 전 배양을 거친 후, 일반산업배지에 알로에 베라 겔 분말 4 내지 6％를 혼합하여 제조한 알로에 배지에 상기 전 배양액 1％(v/v)를 접종한 뒤 37℃의 온도에서 18시간 동안 배양하였다. 그다음 상기 알로에 배지 배양액을 80 내지 121℃의 온도 및 0 내지 0.8 bar 내외의 가압 조건에서 틴달 공정을 3회 반복하여 수행하고, 부형제를 혼합한 후 액체질소동결기(liquid nitrogen freezer)를 이용하여 상기 틴달 용액을 급속 냉동한 뒤 동결건조 후 분쇄하여 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08) 사균체 분말을 제조하였다(도 7).
<비교예 1> 상이한 배지를 이용하여 제조된 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에(
Lactococcus lactis
subsp. Hordniae) 사균체의 제조
상기 <실시예 2>에서 <실시예 1-1>에서 알로에로부터 분리한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08) 대신 한국미생물보존센터에서 분양받은 상업용 균주인 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에(Lactococcus lactis subsp. Hordniae, KCCM40700)를 이용하고, 포도당, 이스트 분말, 소이펩톤, 초산나트륨 및 제2인산칼륨 등이 함유된 산업배지에 알로에 베라 겔 분말을 혼합한 알로에 배지 대신 일반산업배지를 이용하는 것을 제외하고 <실시예 2>의 제조방법에 따라 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에(Lactococcus lactis subsp. Hordniae) 사균체를 제조하였다.
<실험예 2> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(
Lactococcus lactis
subsp. Hordniae VIALO08) 사균체의 활성 확인
<2-1> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 균체수 증가 효과 확인
알로에로부터 분리된 유산균을 알로에 베라 겔 분말이 첨가된 산업배지를 이용하여 제조한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 균체수 증가 효과를 확인하기 위하여, 상기 <실시예 2>에서 제조한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체와 상기 <비교예 1>에서 제조한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 사균체 수를 측정하였다.
그 결과, 표 2에서 나타낸 바와 같이, <실시예 2>에서 제조한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 경우 사균체 수가 3.18E＋11 cell/g으로, <비교예 1>의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에(Lactococcus lactis subsp. Hordniae) 사균체의 경우 사균체 수가 8.21E＋10 cell/g로 나타나, 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체가 비교예에 비하여 사균체 수가 약 4배 더 많은 것을 확인하였다.
| No. | 사균체 수 (cell/g) |
| 실시예 2 | 3.18E＋11 |
| 비교예 1 | 8.21E＋10 |
<2-2> 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 항산화능 확인
락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체의 항산화능을 확인하기 위하여, 상기 <실험예 1-3>의 방법에 따라 <실시예 2>의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체 및 <비교예 1>의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 사균체의 DPPH 자유 라디칼(DPPH free radical) 소거능 및 ABTS 자유 라디칼 소거능을 측정하였다.
그 결과, 도 8에서 나타낸 바와 같이, <실시예 2>에서 제조한 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체 및 <비교예 1>의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에(Lactococcus lactis subsp. Hordniae) 사균체의 DPPH 및 ABTS 자유 라디칼 소거 활성은 농도 의존적으로 감소하며, 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체가 비교예에 비하여 항산화 활성이 우수한 것을 확인하였다.
따라서, 상기 결과를 통해 본 발명의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08은 기초 활성이 우수하고, 알로에 베라 성분을 이용하여 사균체 분말을 이용하여 제조한 사균체는 균체수 증가 효과 및 항산화 효능이 우수하므로 항산화용 조성물의 유효성분으로 이용할 수 있다.
<110> Univera Co., Ltd.
ViTech Co., Ltd.
<120> NOVEL HEAT-KILLED LACTOCOCCUS LACTIS SUBSP. HORDNIAE VIALO08
DERIVED FROM ALOE WITH ANTIOXIDANT EFFECT
<130> KP2260175-NAAL
<160> 1
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 1417
<212> RNA
<213> Lactococcus lactis
<400> 1
tgcagttgag cgctgaaggt tggtacttgt accaactgga tgagcagcga acgggtgagt 60
aacgcgtggg gaatctgcct ttgagcgggg gacaacattt ggaaacgaat gctaataccg 120
cataaaaact ttaaacacaa gttttaagtt tgaaagatgc aattgcatca ctcaaagatg 180
atcccgcgtt gtattagcta gttggtgagg taaaggctca ccaaggcgat gatacatagc 240
cgacctgaga gggtgatcgg ccacattggg actgagacac ggcccaaact cctacgggag 300
gcagcagtag ggaatcttcg gcaatggacg aaagtctgac cgagcaacgc cgcgtgagtg 360
aagaaggttt tcggatcgta aaactctgtt ggtagagaag aacgttggtg agagtggaaa 420
gctcatcaag tgacggtaac tacccagaaa gggacggcta actacgtgcc agcagccgcg 480
gtaatacgta ggtcccgagc gttgtccgga tttattgggc gtaaagcgag cgcaggtggt 540
ttattaagtc tggtgtaaaa ggcagtggct caaccattgt atgcattgga aactggtaga 600
cttgagtgca ggagaggaga gtggaattcc atgtgtagcg gtgaaatgcg tagatatatg 660
gaggaacacc ggtggcgaaa gcggctctct ggcctgtaac tgacactgag gctcgaaagc 720
gtggggagca aacaggatta gataccctgg tagtccacgc cgtaaacgat gagtgctaga 780
tgtagggagc tataagttct ctgtatcgca gctaacgcaa taagcactcc gcctggggag 840
tacgaccgca aggttgaaac tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat 900
gtggtttaat tcgaagcaac gcgaagaacc ttaccaggtc ttgacatact cgtgctattc 960
ctagagatag gaagttcctt cgggacacgg gatacaggtg gtgcatggtt gtcgtcagct 1020
cgtgtcgtga gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccctattg ttagttgcca 1080
tcattaagtt gggcactcta acgagactgc cggtgataaa ccggaggaag gtggggatga 1140
cgtcaaatca tcatgcccct tatgacctgg gctacacacg tgctacaatg gatggtacaa 1200
cgagtcgcga gacagtgatg tttagctaat ctcttaaaac cattctcagt tcggattgta 1260
ggctgcaact cgcctacatg aagtcggaat cgctagtaat cgcggatcag cacgccgcgg 1320
tgaatacgtt cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacac cacgggagtt gggagtaccc 1380
gaagtaggtt gcctaaccgc aaggagggcg ctcctaa 1417
Claims (15)
- 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08(Lactococcus lactis subsp. Hordniae VIALO08) 사균체.
- 제1항에 있어서, 상기 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08은 서열번호 1의 16S rRNA 염기서열을 포함하는 것인, 사균체.
- 제1항에 있어서, 상기 사균체는 하기 단계를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 하는, 사균체:
1) 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 전 배양하는 단계; 및
2) 단계 1)의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 알로에 배지에 접종하고 배양한 후 열처리하는 단계.
- 제3항에 있어서, 상기 알로에 배지는 배양배지에 알로에 베라 겔 분말을 포함하는 배지인 것을 특징으로하는, 사균체.
- 제1항에 있어서, 상기 사균체는 항산화 효능을 가지는 것을 특징으로 하는, 사균체.
- 제5항에 있어서, 상기 항산화 효능은 DPPH 자유 라디칼 및 ABTS 자유 라디칼 소거 활성인 것을 특징으로 하는, 사균체.
- 1) 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 전배양하는 단계; 및
2) 단계 1)의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08을 알로에 배지에 접종하고 배양한 후 열처리하는 단계;
를 포함하는 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08 사균체 제조방법.
- 제7항에 있어서, 상기 단계 2)에서 알로에 배지는 배양배지에 알로에 베라 겔 분말을 포함하는 배지인 것을 특징으로 하는, 제조방법.
- 제8항에 있어서, 상기 알로에 배지는 배양배지에 알로에 베라 겔 분말을 1 내지 20 중량％ 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법.
- 제9항에 있어서, 상기 알로에 배지는 배양배지에 알로에 베라 겔 분말으 2 내지 10 중량％ 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법.
- 제7항에 있어서, 상기 단계 2)에서 열처리는 70 내지 130℃에서 수행하는 것을 특징으로 하는, 제조방법.
- 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 항산화용 조성물.
- 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 프로바이오틱스 제제.
- 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 건강기능식품.
- 수탁번호 KCTC 14775BP의 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 VIALO08의 사균체, 상기 사균체의 추출물 또는 이들의 조합을 포함하는 화장료 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220043245A KR20230144227A (ko) | 2022-04-07 | 2022-04-07 | 항산화 효과를 가지는 알로에 유래 신규 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 uab1의 사균체 |
Applications Claiming Priority (1)
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| KR1020220043245A KR20230144227A (ko) | 2022-04-07 | 2022-04-07 | 항산화 효과를 가지는 알로에 유래 신규 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 uab1의 사균체 |
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| KR20230144227A true KR20230144227A (ko) | 2023-10-16 |
Family
ID=88506334
Family Applications (1)
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| KR1020220043245A KR20230144227A (ko) | 2022-04-07 | 2022-04-07 | 항산화 효과를 가지는 알로에 유래 신규 락토코쿠스 락티스 아종 호르드니아에 uab1의 사균체 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20230144227A (ko) |
-
2022
- 2022-04-07 KR KR1020220043245A patent/KR20230144227A/ko unknown
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