KR20230134354A - 락토바실러스 가세리를 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 - Google Patents
락토바실러스 가세리를 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 비만 및 지방간으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 (수탁번호 KCTC13437BP) 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함함으로써 우수한 체중 감소 효과, 체지방량 감소 효과, 지방 조직 및 간 조직의 무게 감소 효과, 지방 세포 직경 감소 효과, 간 지방증 감소 효과, 간 염증 감소 효과, 혈중 렙틴(leptin) 농도 감소 효과, 혈중 아디포넥틴(adiponectin) 농도 증가 효과, 혈중 알라닌 아미노기전이효소(ALT) 감소 효과 및 혈중 아스파테이트 아미노기전이효소(AST) 감소 효과를 나타낸다.
Description
본 발명은 대사성 질환 예방 또는 치료 효과 및 체지방 감소 효과가 있는 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri)에 관한 것이다.
락토바실러스 속 (Lactobacillus sp.) 미생물은 동형 또는 이형 발효를 하는 젖산 간균으로서 사람을 포함한 동물의 장관(Intestinal tract) 및 유제품이나 채소의 발효 과정에서 흔히 볼 수 유산균의 하나이다. 락토바실러스 속 미생물은 장내 pH를 산성으로 유지시켜, 대장균(E. coli)이나 클로스트리디움(Clostridium)과 같은 유해균의 번식을 억제하고 설사와 변비를 개선할 뿐만 아니라, 비타민 합성, 항암 작용, 혈청 콜레스테롤 저하 등의 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 또한 이러한 장내 미생물은 비만 등 성인병에 영향을 미친다는 보고가 되고 있다.
본 발명자들은 락토바실러스 속 균주에 대하여 연구하던 중 한국 임산부들의 질내 시료에서 채취한 신규 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 균주가 비만에 대하여 예방, 치료 및 개선 효과가 있는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 대사성 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 체지방 감소용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
1. 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 (수탁번호 KCTC13437BP) 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함하는 비만 및 지방간으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
2. 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 (수탁번호 KCTC13437BP) 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함하는 비만 및 지방간으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 대사성 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물.
3. 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 (수탁번호 KCTC13437BP) 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함하는 체지방 감소용 조성물.
4. 위 3에 있어서, 상기 조성물은 식품 조성물 또는 화장료 조성물인, 체지방 감소용 조성물.
본 발명의 약학 조성물 및 식품 조성물은 체중 감소 효과, 체지방량 감소 효과, 지방 조직 및 간 조직의 무게 감소 효과, 지방 세포 직경 감소 효과, 간 지방증 감소 효과, 간 염증 감소 효과, 혈중 렙틴(leptin) 농도 감소 효과, 혈중 아디포넥틴(adiponectin) 농도 증가 효과, 혈중 알라닌 아미노기전이효소(ALT) 감소 효과 및 혈중 아스파테이트 아미노기전이효소(AST) 감소 효과가 있어 대사성 질환의 예방, 치료 또는 개선에 도움을 줄 수 있다.
도 1은 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 균주의 전자 현미경(SEM, Scanning Electrone Microscope) 사진이다.
도 2는 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주의 항비만 효과를 DXA(dual energy X-ray absorptiometry)를 이용하여 측정한 체지방량을 통해 나타낸 것이다.
도 2는 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주의 항비만 효과를 DXA(dual energy X-ray absorptiometry)를 이용하여 측정한 체지방량을 통해 나타낸 것이다.
본 발명은 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함하는 비만 및 지방간으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 균주는 서열번호 1로 기재되는 16S rRNA 염기서열을 갖는다.
락토바실러스 가세리 SWPM102 균주는 한국생명공학연구원에 기탁되어 수탁번호 KCTC13437BP로 등록된 것이다.
락토바실러스 가세리 SWPM102 균주는 임산부의 질내 시료에서 분리된 것일 수 있다.
균주는 생균 또는 사균일 수 있다. 상기 사균은 균주를 배양한 후 가열, 냉각 등의 온도, 초음파, 효소, 압력, 산 및 염기 등의 처리를 통해 생균을 사멸시킨 것일 수 있고, 균주의 발효에 의한 대사 산물을 포함하는 배양액을 포함하거나 포함하지 않을 수 있다. 상기 사균이 발효에 의한 배양액을 포함하지 않는 경우, 사균은 발효시킨 배양액을 여과 또는 원심 분리하여 균체를 회수한 후 생균을 사멸시키거나, 먼저 사멸시킨 후 배양액으로부터 사멸된 균체를 회수하여 수득된 것일 수 있다. 상기 배양은 당업계에 통상적으로 이용되는 방법이라면 제한 없이 이용 가능하다.
파쇄물은 균주 자체를 화학적 또는 물리적 힘에 의하여 파쇄하여 얻은 산물일 수 있다.
배양물은 배양물의 형태를 불문하고 균주를 배양한 배지 내에 포함되어 있는 일부 또는 모든 물질을 포함하는 물질을 의미할 수 있고, 예를 들면 균주 배양의 결과물인 대사물 또는 분비물을 포함하는 물질 또는 그의 파쇄물을 의미할 수 있고, 균주 자체도 배양물 내에 포함되어 있거나 포함되어 있지 않을 수 있다. 상기 배양물은 배양물의 농축액 또는 배양물의 건조물일 수 있다. 상기 배양물의 제형은 액체 또는 고체일 수 있다.
추출물은 균주 자체, 균주의 파쇄물, 균주의 배양물 또는 이들의 혼합물을 추출 방법, 추출 용매, 추출된 성분 또는 추출물의 형태를 불문하고 추출하여 얻어진 산물을 의미할 수 있고, 추출 후 다른 방법으로 가공 또는 처리하여 얻어질 수 있는 물질을 모두 포함하는 광범위한 개념이다. 상기 추출 용매는 당업계에서 통상적으로 이용하는 용매라면 제한 없이 이용 가능하나, 예를 들면 에틸 아세테이트일 수 있다.
락토바실러스 가세리 SWPM102 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나는 상기 약학 조성물 총 중량을 기준으로 0.01 중량% 내지 10 중량%, 0.1 중량% 내지 5 중량% 또는 0.01 중량% 이하로 포함될 수 있다.
비만은 지방 조직의 과잉 축적으로 당뇨병, 고혈압 및 고지혈증 등 다양한 질환의 기반이 된다고 알려져 있다. 지방 조직은 하나의 내분비 기관으로서 아디포카인(adipokine)이라는 호르몬 유사 물질을 분비하여 체내 에너지 대사를 조절한다. 체지방 축적은 고지혈증, 당뇨, 심혈관 질환, 암 등 만성 질환의 주요 위험 인자이다.
지방간은 간에 지방이 과다하게 침착되어 생기는 질병으로, 일반적으로 중성지방이 간 무게의 5% 이상인 경우를 의미한다. 지방간은 주로 비만(복부비만), 과도한 음주, 당뇨병, 고지혈증에 의해 발생한다고 알려져 있다.
본 발명의 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주는 체중 감소 효과, 체지방량 감소 효과, 지방 조직 및 간 조직의 무게 감소 효과, 지방 세포 직경 감소 효과, 간 지방증 감소 효과 및 간 염증 감소를 나타낸다.
본 발명의 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주가 처리된 지방 세포는 혈중 렙틴(leptin) 농도가 현저히 감소할 수 있고, 이는 비만 저해 효능을 나타내는 것으로 볼 수 있다. 또한, 동일 종에 속하는 다른 락토바실러스 가세리 균주보다 우수한 혈중 렙틴 농도 감소 효과를 나타낼 수 있다. 혈중 렙틴 농도 감소는 혈중 렙틴 농도 감소 촉진, 증가 억제, 또는 감소 촉진 및 증가 억제를 의미할 수 있다.
본 발명의 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주가 처리된 지방 세포는 혈중 아디포넥틴(adiponectin) 농도가 현저히 증가할 수 있고, 이는 비만 저해 효능을 나타내는 것으로 볼 수 있다. 또한, 동일 종에 속하는 다른 락토바실러스 가세리 균주보다 우수한 혈중 아디포넥틴 농도 증가 효과를 나타낼 수 있다. 혈중 아디포넥틴 농도 증가는 혈중 아디포넥틴 농도 증가 촉진, 감소 억제, 또는 증가 촉진 및 감소 억제를 의미할 수 있다.
본 발명의 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주는 혈중 알라닌 아미노기전이효소(ALT) 감소 효과 및 혈중 아스파테이트 아미노기전이효소(AST) 감소 효과를 나타낸다. 상기 ALT 및 AST는 대표적인 간 기능 검사 지표로, 간세포 내에 존재하는 효소들이다. 이들은 독성을 나타내는 물질에 의해 간세포가 손상을 받는 경우에 혈중으로 방출되어 수치가 증가한다.
이러한 특성에 기초하여 본 발명의 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 비만 또는 지방간의 예방 또는 치료를 위해 사용할 수 있다.
용어 "예방"은 전체 예방 뿐만 아니라 병태의 발병 또는 재발병의 가능성의 경미한, 실질적인 또는 큰 감소를 포함하여 예방될 병태 또는 재발생 또는 재발하는 병태의 발병 가능성의 임의의 정도의 감소를 초래하는 예방적 조치를 지칭하고, 가능성 감소의 정도는 적어도 경미한 감소이다.
용어 "치료"는 치유뿐만 아니라 경미한 완화, 실질적인 완화, 주요 완화를 포함하는 임의의 정도의 완화를 포함하여 치료될 병태를 앓고 있는 대상체 또는 환자에게 유리한 효과를 초래하는 처치를 지칭하고, 완화 정도는 적어도 경미한 완화이다.
상기 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 약학 조성물에 함유될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오즈, 덱스트로즈, 수크로스, 덱스트린, 말토덱스트린, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면 활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제되나, 이에 제한되지 않는다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며 이에 제한되지는 않으나, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약학 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. 본 발명에서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 상기 약학 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
상기 약학 조성물에서 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 ㎏당 1 내지 6000 ㎎, 바람직하게는 60 내지 600 ㎎을 1회 또는 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명은 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함하는 비만 및 지방간으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 대사성 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 체중 감소 효과, 체지방량 감소 효과, 지방 조직 및 간 조직의 무게 감소 효과, 지방 세포 직경 감소 효과, 간 지방증 감소 효과, 간 염증 감소 효과, 혈중 렙틴(leptin) 농도 감소 효과, 혈중 아디포넥틴(adiponectin) 농도 증가 효과, 혈중 알라닌 아미노기전이효소(ALT) 감소 효과 및 혈중 아스파테이트 아미노기전이효소(AST) 감소 효과를 나타낸다. 따라서, 본 발명의 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 비만 또는 지방간의 예방 또는 개선을 위해 사용할 수 있다.
락토바실러스 가세리 SWPM102, 균주, 파쇄물, 배양물, 추출물, 렙틴, 아디포넥틴, ALT, AST 및 용어 “예방”은 전술한 범위 내의 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
용어 “개선”은 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 식품 조성물은 비만 또는 지방간의 예방 또는 개선을 목적으로, 정제, 캡슐, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
식품 첨가물 공전에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류 첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
예를 들어, 정제 형태의 식품 조성물은 상기 조성물을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 식품 조성물은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다.
캡슐 형태의 식품 조성물 중 경질 캡슐제는 통상의 경질 캡슐에 상기 조성물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캡슐제는 상기 조성물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캡슐기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캡슐제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.
환 형태의 식품 조성물은 상기 조성물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다.
과립 형태의 식품 조성물은 상기 조성물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
식품 조성물은 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류. 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등일 수 있다.
식품 조성물은 영양제의 용도로 경구 적용될 수 있으며, 적용 형태는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들면 경구 투여되는 경우, 하루 섭취량은 5000㎎ 이하인 것이 바람직하고, 하루 섭취량이 2000㎎ 이하인 것이 보다 바람직하며, 하루 섭취량이 500 내지 1500㎎, 또는 650㎎인 것이 가장 바람직하다. 캡슐제 또는 정제로 제제화하는 경우, 1일 1회 1정을 물과 함께 투여할 수 있다.
식품 조성물에 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주가 유효 성분으로 포함되는 경우, 상기 유효 성분의 투여량의 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 1일 투여 용량은 예를 들면 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주가 105 내지 1013 CFU/일, 보다 구체적으로는 108내지 1010 CFU/일이 될 수 있으나, 이에 제한되지 않으며, 투여하고자 하는 대상의 연령, 건강 상태, 합병증 등의 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다.
본 발명은 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함하는 체지방 감소용 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 체중 감소 효과, 체지방량 감소 효과, 지방 조직 및 간 조직의 무게 감소 효과, 지방 세포 직경 감소 효과, 간 지방증 감소 효과, 간 염증 감소 효과, 혈중 렙틴(leptin) 농도 감소 효과 및 혈중 아디포넥틴(adiponectin) 농도 증가 효과가 있다. 따라서, 본 발명의 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 체지방 감소를 위해 사용할 수 있다.
체지방 감소용 조성물은 식품 조성물 또는 화장료 조성물일 수 있다.
락토바실러스 가세리 SWPM102, 균주, 파쇄물, 배양물, 추출물, 렙틴, 아디포넥틴 및 식품 조성물은 전술한 범위 내의 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다.
실시예
1. 미생물 분리 및 동정
건양대병원 산부인과에 정기점검을 받기 위해 내원한 건강한 한국인 임산부들의 동의를 받아 이들 임산부들의 질내 시료를 채취하였다. 상기 시료로부터 분리된 균주를 MRS 한천 배지(Difco, USA)에 도말하고 37℃에서 48시간 혐기 조건에서 배양 후 콜로니(colony)를 형성한 균주를 분리하였다.
그런 다음 배양된 균주의 동정 및 분류를 위하여 16s rRNA 유전자 염기서열 및 Miseq을 이용하여 유전자 정보를 분석하였다. 상기 균주의 16s rRNA 유전자의 염기서열 결정(서열번호 1) 및 분석 결과는 표 1과 같다. 16s rRNA 염기서열 분석 결과, 상기 균주는 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri strain ATCC 33323 NR_075051.1)와 가장 높은 상동성(99%)을 나타내어 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri)로 동정하였다. 상기 균주를 락토바실러스 가세리 SWPM102로 명명하였으며, 생명공학연구원 유전자 은행에 2017년 12월 15일자로 기탁하였다(수탁번호 KCTC13437BP).
상기 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주의 전자현미경(SEM) 촬영 사진은 도 1과 같다.
모든 실시예의 실험 결과 통계 분석은 SPSS statistics 12.0K for medical science을 이용하여 P<0.05인 경우 통계학적으로 유의하다고 판정하였다.
| 균주명 | 16s RNA 유전자 염기서열 (서열번호 1) |
| Lactobacillus gasseri SWPM102 | TGCAGTCGAGCGAGCTTGCCTAGATGAATTTGGTGCTTGCACCAAATGAAACTAGATACAAGCGAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCAAGAGACTGGGATAACACCTGGAAACAGATGCTAATACCGGATAACAACACTAGACGCATGTCTAGAGTTTAAAAGATGGTTCTGCTATCACTCTTGGATGGACCTGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTAAGGCAACGGCTTACCAAGGCAATGATGCATAGCCGAGTTGAGAGACTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGCAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAGCTCTGTTGGTAGTGAAGAAAGATAGAGGTAGTAACTGGCCTTTATTTGACGGTAATTACTTAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGTGCAGGCGGTTCAATAAGTCTGATGTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGGAGAATTGCATCAGAAACTGCTGAACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGGAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTCTCTGGTCTGCAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTGGGAGGTTTCCGCCTCTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCAGTGCAAACCTAAGAGATTAGGAGTTCCCTTCGGGGACGCTGAGACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCATTAGTTGCCATCATTAAGTTGGGCACTCTAATGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGACGGTACAACGAGAAGCGAACCTGCGAAGGCAAGCGGATCTCTGAAAGCCGTTCTCAGTTCGGACTGTAGGCTGCAACTCGCCTACACGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTCTGTAACACCCAAAGCCGGTGGGATAACCTTTATAGGAGTCAGCCGTCTAA |
2. 락토바실러스 가세리 SWPM102 투여에 의한 체중 변화 확인
마우스에게 고지방식이와 SWPM102를 8주간 섭취시켜 효능을 확인하였다. 본 연구에 사용된 마우스는 체중 20 g의 5주령 수컷 C57BL/6N mice를 입수하여 7일간 순화 기간을 거쳐 시험에 영향을 미칠 요인이 없다고 판단되는 마우스만을 사용하였다. 실험군에 따라 정상식이(LFD, Rodent diet with 10% kcal fat. D12450B, Research Diet Inc., USA) 또는 고지방식이(HFD, Rodent diet with 60% kcal fat. D12492, Research Diet Inc., USA)를 섭취 시켰다. 사육실 환경은 온도 23±3℃, 상대습도 55±15%, 환기 횟수 10-20 회/hr, 조도 150-300 Lux에서 12시간 주야 단위로 조절해 주었으며, 사료와 물은 제한 없이 공급하였다. 실험군 구성은 하기 표 2와 같이 정상식이군(LFD), 고지방식이군(HFD), 고지방식이+유산균 고농도(HFD+SWPM102H, 1.0x108), 고지방식이+유산균 저농도(HFD+SWPM102H, 5.0x107)로 나누어 진행하였으며, 락토바실러스 가세리 SWPM102 균주는 배양하여 동결건조 시킨 후 멸균주사용수에 녹여서 매일 1회 경구 투여 하였다. 락토바실러스 가세리 SWPM102를 섭취하지 않는 군에 대해서는 투여에 따른 스트레스 등의 영향을 배제하기 위하여 동일 양의 멸균주사용수를 동일 양 매일 경구 투여 하였다.
| Group | 군 | 투여량 (CFU/head/day) |
투여액량 (mL/head/day) |
마리수 | 투여물질 |
| G1 | LFD | - | 0.2 | 6 | 멸균주사용수 |
| G2 | HFD | - | 0.2 | 6 | |
| G3 | HFD+SWPM102 | 5.0 x 107 | 0.2 | 6 | L.gasseri SWPM102 |
| G4 | HFD+SWPM102 | 1.0 x 108 | 0.2 | 6 |
모든 마우스에 대하여 부검일까지 매일 1회 일반 증상을 관찰하였으며 시험기간 동안 모든 군에서 사망 동물 및 이상 증상은 관찰되지 않았다. 체중은 주 2회, 사료 및 음수 섭취량 측정은 주 1회 측정하였고, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다(단위: g). 정상식이군(G1) 대비 고지방식이군(G2)에서 유의하게 체중이 증가하였다. 락토바실러스 가세리 SWPM102 고농도(G4)와 저농도(G3) 투여군의 경우 G2군과 비교하여 유의한 체중 감소를 확인하였다.
| G1 | G2 | G3 | G4 | |
| 시작 | 20.50 | 20.57 | 20.41 | 20.55 |
| 종료 | 25.33 | 32.12 | 28.82 | 28.56 |
| 증가율(%) | - | 26.37 | 14.28 | 12.48 |
| G1: LFD, G2: HFD, G3: HFD+SWPM102 (5.0 x 107 CFU/head/day), G4: HFD+SWPM102 (1.0 x 108 CFU/head/day) |
||||
3. 체지방량 및 지방 조직 무게 측정
락토바실러스 가세리 SWPM102 투여에 따른 체지방량 차이를 확인하기 위하여 투여 8주차에 DXA(Dual Energy X ray absorptiometry)를 이용한 체지방량 측정을 진행하였다. 그 결과 하기 표 4(단위: %)에서와 같이 정상식이군(G1) 대비 고지방식이군(G2)에서 유의한 체지방 증가를 확인되었으며, 락토바실러스 가세리 SWPM102 고농도(G4) 투여군에서 10.54% 감소되는 것을 확인하였다(도 2). 실험 동물을 부검일 채혈 전 약 16시간 동안 절식 시키고 동물을 이소플루란(isoflurane)으로 흡입 마취하고, 후대정맥에서 주사기를 이용하여 채혈하였다. 채혈이 끝난 동물은 복대동맥을 절단하여 방혈치사 시켰다. 이후 부고환주위지방, 신장주위지방, 장간막주위지방 및 간을 적출하여 무게를 측정하였고, 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다(단위: g). 고지방식이군(G2)은 정상식이군(G1)과 비교하여 부고환, 신장, 장막주위지방에서 유의한 지방 증가가 관찰되었다. 락토바실러스 가세리 SWPM102 투여 농도가 높을수록 부고환, 신장, 장막주위지방에서 지방이 더 많이 감소됨을 확인되었다.
또한, 락토바실러스 가세리 SWPM102 투여군에서 유의하게 부고환주위지방의 지방세포 직경, 간 지방증 및 간 염증이 감소되는 것을 확인하였다(표 6). 이는 락토바실러스 가세리 SWPM102 투여로 인해 지방간의 조직학적 개선에 영향을 준 것으로 판단된다.
| 4주차 | 8주차 | |
| G1 | 13.29 | 16.24 |
| G2 | 17.43 | 23.00 |
| G3 | 16.74 | 21.72 |
| G4 | 15.24 | 20.58 |
| G1: LFD, G2: HFD, G3: HFD+SWPM102 (5.0 x 107 CFU/head/day), G4: HFD+SWPM102 (1.0 x 108 CFU/head/day) |
||
| 부고환 지방 | 신장 지방 | 장막주위지방 | 간 | |
| G1 | 0.823 | 0.296 | 0.352 | 0.960 |
| G2 | 1.833 | 0.812 | 0.552 | 0.919 |
| G3 | 1.512 | 0.663 | 0.424 | 0.870 |
| G4 | 1.300 | 0.587 | 0.346 | 0.903 |
| G1: LFD, G2: HFD, G3: HFD+SWPM102 (5.0 x 107 CFU/head/day), G4: HFD+SWPM102 (1.0 x 108 CFU/head/day) |
||||
| 부고환 지방 지방세포 지름 (uM) |
간 지방증 (최대값 3) |
간 염증 (최대값 3) |
|
| G1 | 2786.78 | 0.17 | 1.00 |
| G2 | 4979.35 | 0.50 | 1.17 |
| G3 | 4673.17 | 0.00 | 1.17 |
| G4 | 3751.71 | 0.00 | 1.00 |
| G1: LFD, G2: HFD, G3: HFD+SWPM102 (5.0 x 107 CFU/head/day), G4: HFD+SWPM102 (1.0 x 108 CFU/head/day) |
|||
4. 혈중 렙틴(Leptin) 및 아디포넥틴(Adiponectin) 측정
부검일에 채혈한 혈액에서 얻은 혈청으로 혈중 Leptin 및 Adiponectin ELISA assay를 통해 확인하였다. 그 결과는 하기 표 6(단위: ng/mL)와 같이 고지방식이군(G2)은 정상식이군(G1)과 비교하여 유의한 혈중 leptin 증가 및 adiponectin 감소를 나타내었다. 락토바실러스 가세리 SWPM102 고농도(G4) 투여군에서 혈중 leptin 감소 및 adiponectin 증가하는 것을 확인하였다. 락토바실러스 가세리 SWPM102 투여로 인해 지방 대사에 관련된 호르몬에 영향을 준 것으로 판단된다.
또한, 락토바실러스 가세리 SWPM102 투여군에서 알라닌 아미노기전이효소(ALT) 및 아스파테이트 아미노기전이효소(AST) 수준이 감소하는 경향을 확인되었다(표 8). 이는 락토바실러스 가세리 SWPM102 투여로 인해 간기능 개선에 영향을 준 것으로 판단된다.
| LEPTIN | ADIPONECTIN | |
| G1 | 1.63 | 3.72 |
| G2 | 2.54 | 2.62 |
| G3 | 2.22 | 2.38 |
| G4 | 1.91 | 4.73 |
| G1: LFD, G2: HFD, G3: HFD+SWPM102 (5.0 x 107 CFU/head/day), G4: HFD+SWPM102 (1.0 x 108 CFU/head/day) |
||
| AST | ALT | |
| G1 | 85.85 | 34.50 |
| G2 | 91.43 | 38.57 |
| G3 | 75.50 | 29.37 |
| G4 | 75.73 | 28.25 |
| G1: LFD, G2: HFD, G3: HFD+SWPM102 (5.0 x 107 CFU/head/day), G4: HFD+SWPM102 (1.0 x 108 CFU/head/day) |
||
<110> Sungwun Pharmacopia Corporation
<120> Pharmaceutical composition for preventing or treating metabolic
disease comprising Lactobacillus gasseri
<130> 22P01021
<160> 1
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 1444
<212> DNA
<213> Lactobacillus gasseri
<400> 1
tgcagtcgag cgagcttgcc tagatgaatt tggtgcttgc accaaatgaa actagataca 60
agcgagcggc ggacgggtga gtaacacgtg ggtaacctgc ccaagagact gggataacac 120
ctggaaacag atgctaatac cggataacaa cactagacgc atgtctagag tttaaaagat 180
ggttctgcta tcactcttgg atggacctgc ggtgcattag ctagttggta aggcaacggc 240
ttaccaaggc aatgatgcat agccgagttg agagactgat cggccacatt gggactgaga 300
cacggcccaa actcctacgg gaggcagcag tagggaatct tccacaatgg acgcaagtct 360
gatggagcaa cgccgcgtga gtgaagaagg gtttcggctc gtaaagctct gttggtagtg 420
aagaaagata gaggtagtaa ctggccttta tttgacggta attacttaga aagtcacggc 480
taactacgtg ccagcagccg cggtaatacg taggtggcaa gcgttgtccg gatttattgg 540
gcgtaaagcg agtgcaggcg gttcaataag tctgatgtga aagccttcgg ctcaaccgga 600
gaattgcatc agaaactgct gaacttgagt gcagaagagg agagtggaac tccatgtgta 660
gcggtggaat gcgtagatat atggaagaac accagtggcg aaggcggctc tctggtctgc 720
aactgacgct gaggctcgaa agcatgggta gcgaacagga ttagataccc tggtagtcca 780
tgccgtaaac gatgagtgct aagtgttggg aggtttccgc ctctcagtgc tgcagctaac 840
gcattaagca ctccgcctgg ggagtacgac cgcaaggttg aaactcaaag gaattgacgg 900
gggcccgcac aagcggtgga gcatgtggtt taattcgaag caacgcgaag aaccttacca 960
ggtcttgaca tccagtgcaa acctaagaga ttaggagttc ccttcgggga cgctgagaca 1020
ggtggtgcat ggctgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag 1080
cgcaaccctt gtcattagtt gccatcatta agttgggcac tctaatgaga ctgccggtga 1140
caaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa gtcatcatgc cccttatgac ctgggctaca 1200
cacgtgctac aatggacggt acaacgagaa gcgaacctgc gaaggcaagc ggatctctga 1260
aagccgttct cagttcggac tgtaggctgc aactcgccta cacgaagctg gaatcgctag 1320
taatcgcgga tcagcacgcc gcggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc 1380
acaccatgag agtctgtaac acccaaagcc ggtgggataa cctttatagg agtcagccgt 1440
ctaa 1444
Claims (4)
- 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 (수탁번호 KCTC13437BP) 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함하는 비만 및 지방간으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 (수탁번호 KCTC13437BP) 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함하는 비만 및 지방간으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 대사성 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물.
- 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) SWPM102 (수탁번호 KCTC13437BP) 균주; 상기 균주의 파쇄물; 상기 균주의 배양물; 및 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물;로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함하는 체지방 감소용 조성물.
- 청구항 3에 있어서, 상기 조성물은 식품 조성물 또는 화장료 조성물인, 체지방 감소용 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220031611A KR20230134354A (ko) | 2022-03-14 | 2022-03-14 | 락토바실러스 가세리를 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220031611A KR20230134354A (ko) | 2022-03-14 | 2022-03-14 | 락토바실러스 가세리를 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20230134354A true KR20230134354A (ko) | 2023-09-21 |
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ID=88189314
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020220031611A KR20230134354A (ko) | 2022-03-14 | 2022-03-14 | 락토바실러스 가세리를 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 |
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| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20230134354A (ko) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102206628B1 (ko) | 2018-04-11 | 2021-01-22 | 한국생명공학연구원 | 비만의 예방 또는 치료 효과를 가지는 신규 락토바실러스 람노서스 균주 및 이의 용도 |
-
2022
- 2022-03-14 KR KR1020220031611A patent/KR20230134354A/ko unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| KR102206628B1 (ko) | 2018-04-11 | 2021-01-22 | 한국생명공학연구원 | 비만의 예방 또는 치료 효과를 가지는 신규 락토바실러스 람노서스 균주 및 이의 용도 |
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