KR20230126994A - 천궁 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 천궁 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진에 우수한 효과를 보이는 조성물을 제공한다. 본 발명의 천궁 발효 추출물은 산화적 스트레스에 의해 유발되는 탈모를 개선 또는 예방할 수 있으며, 모유두세포의 증식 또는 분화를 촉진하거나 모유두세포의 활성을 증진시킴에 따라 탈모 방지 또는 발모 촉진 효과를 발휘하므로 탈모 방지, 예방 또는 개선용 화장료 조성물 또는 건강기능식품 조성물로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 천궁(Cnidium officinale Makino) 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것이다.
탈모는 생리적으로 머리털이 빠지는 현상을 말하며, 휴지기의 털이 자연스럽게 탈락되는 자연 탈모와 발열성 질병, 스트레스 등에 의해 생장기의 머리털이 갑자기 휴지기에 들어가 많이 빠지는 비정상적 탈모로 구분된다. 현대인의 탈모는 노화나 유전적인 요인뿐만 아니라, 각종 환경오염, 스트레스, 식생활 변화에 따른 호르몬 분비 이상 등 후천적 요인에 의해 발생할 수 있다.
일반적으로 탈모 치료제는 모발의 생성 또는 성장을 촉진시키는 약물로서 탈모의 원인을 억제하거나 두피의 혈관을 확장 시켜 모발의 생성을 촉진시키고, 모발 성장에 필요한 영양분을 공급하여 모발의 성장을 향상시키는 작용을 하는 물질들을 총칭한다. 현재까지 탈모는 범용적인 치료제가 없는 난치의 질환이며, 시중에 판매되는 탈모 치료제들이 탈모를 근본적으로 치료하지는 못하므로 값비싼 비용에도 불구하고 치료효과가 나타나기까지 장시간 꾸준히 사용하여야 하고, 불측의 부작용을 감수하여야 하는 문제점이 있다. 최근에는 탈모 환자가 급격히 증가하고 있으며, 모발 관리 대상자 60%가 20대 내지 30대로 탈모의 연령대는 점 점 낮아지고 있다. 탈모증으로 고통 받고 있는 환자의 숫자는 거의 천만 명에 이를 것으로 추산되고 있어, 이에 따른 사회 경제적 문제가 심각하게 대두되고 있다. 특히, 환자들은 증상이 심할수록 우울증이나 불안 증상을 호소하고, 스트레스 지각도가 높아지며, 인간관계나 이성 관계에 대한 적응의 어려움을 겪는 것으로 보고되고 있어 보건학적인 관심사가 되고 있다.
탈모의 원인은 아직 까지 잘 알려져 있지 않으나 이에 대한 가능성 있는 원인으로 유전적 요인, 호르몬적 이상 그리고 면역학적 이상 등이 언급된다. 현재 탈모 치료제로는 미국 FDA의 승인을 받은 경피 도포용 미녹시딜(Minoxidil)과 경구투여용 피나스테라이드(Finasteride)가 많이 사용되고 있으나 수반되는 부작용으로 심혈관계 장애, 피부 자극, 우울증, 성기능 감소 및 심각한 기형유발 등이 보고되고 있다.
이에 본 발명자들은 천궁 발효 추출물의 탈모 방지 또는 발모 촉진 효과를 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 천궁 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진에 우수한 효과를 보이는 조성물을 제공하고자 한다. 본 발명의 조성물은 화장료 조성물 또는 건강기능식품 조성물로 사용될 수 있다.
본 발명은 천궁(Cnidium officinale Makino) 추출물을 발효한 천궁 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 천궁 추출물은, 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것이 좋다.
본 발명에 있어서, 상기 천궁 발효 추출물은, 바람직하게는 상기 천궁 추출물에 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri)를 접종하여 발효한 것이 좋다.
본 발명에 있어서, 상기 천궁 발효 추출물은, 바람직하게는 항산화 효과가 있는 것이 좋다.
본 발명에 있어서, 상기 천궁 발효 추출물은, 바람직하게는 모유두세포의 증식 또는 분화를 촉진시키는 것이 좋다.
본 발명에 있어서, 상기 천궁 발효 추출물은, 바람직하게는 모유두세포의 활성을 증진시키는 것이 좋다.
또한, 본 발명은 천궁(Cnidium officinale Makino) 추출물을 발효한 천궁 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 천궁 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진에 우수한 효과를 보이는 조성물을 제공한다. 본 발명의 천궁 발효 추출물은 산화적 스트레스에 의해 유발되는 탈모를 개선 또는 예방할 수 있으며, 모유두세포의 증식 또는 분화를 촉진하거나 모유두세포의 활성을 증진시킴에 따라 탈모 방지 또는 발모 촉진 효과를 발휘하므로 탈모 방지, 예방 또는 개선용 화장료 조성물 또는 건강기능식품 조성물로 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 ABTS 라디칼 소거 활성을 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명에 따른 천궁 발효 추출물의 환원력을 나타낸 도이다.
도 4는 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 DNA 산화적 손상 보호 효과를 나타낸 도이다.
도 5는 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 모유두세포 증식 또는 분화 촉진 효과를 나타낸 도이다.
도 6은 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 모유두세포 활성 증진 효과를 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 ABTS 라디칼 소거 활성을 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명에 따른 천궁 발효 추출물의 환원력을 나타낸 도이다.
도 4는 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 DNA 산화적 손상 보호 효과를 나타낸 도이다.
도 5는 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 모유두세포 증식 또는 분화 촉진 효과를 나타낸 도이다.
도 6은 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 모유두세포 활성 증진 효과를 나타낸 도이다.
본 발명은 천궁(Cnidium officinale Makino) 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물을 제공한다.
천궁(Cnidium officinale Makino)은 산형과(Umbelli-ferae)에 속하는 중국산 다년초로 한방에서 중풍, 각종 통증질환 및 부인과 질환 등에 사용되고 있는 약용식물자원이다.
본 발명에 있어서, 상기 천궁 발효 추출물은, DPPH 라디칼 소거활성, ABTS 라디칼 소거활성에 따른 항산화 효과가 있으며, 환원력(reducing power)이 우수하고, DNA의 산화적 손상을 보호함에 따라, 산화적 스트레스에 의해 유발되는 탈모를 개선 또는 예방할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 천궁 발효 추출물은, 모유두세포의 증식 또는 분화를 촉진시키거나 모유두세포의 활성을 증진시켜 탈모를 개선 또는 예방하는 효과가 있다.
본 발명에 있어서, 상기 천궁 추출물은, 추출용매로 에탄올을 이용하는 것이 좋으며, 바람직하게는 70 %(v/v) 에탄올을 이용하여 추출하는 것이 좋다.
본 발명에 있어서, 상기 천궁 발효 추출물은, 상기 천궁 추출물에 락토바실러스(Lactobacillus) 속의 균주를 접종하여 발효한 것이 좋으며, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) 균주를 이용하여 발효하는 것이 좋다.
본 발명에 따른 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된 "추출물"은 적절한 용매를 이용하여 천궁(Cnidium officinale Makino)으로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다. 상기 천궁으로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 식품학/약학/화장품학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올(Methanol), 에탄올(Ethanol), 프로판올(Propanol), 이소프로판올(Isopropanol), 부탄올(Butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알콜, 아세톤(Acetone), 에테르(Ether), 벤젠(Benzene), 클로로포름(Chloroform), 에틸아세테이트(Ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(Methylene chloride), 헥산(Hexane) 및 시클로헥산 (Cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다. 추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법, 고온고압추출법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다.
본 발명의 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 추출물은 상기한 열수 추출 또는 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말상태로 제조할 수 있다. 또한 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(Silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(Thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(High performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다. 따라서, 본 발명에 있어서 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.
또한 본 발명의 건강기능식품 조성물은 유효성분인 추출물을 함유하는 것 외에 통상의 식품 조성물과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 향미제는 천연 향미제(타우마틴), 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 하기 약학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화 되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알콜 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.
또한, 상기 식품 조성물은 유효성분인 추출물 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은, 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공될 수 있다. 본 발명에서 '건강기능식품 조성물'이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다. 본 발명의 건강 기능성 식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전처에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 '식품 첨가물 공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다. 예를 들어, 정제 형태의 건강 기능성 식품은 본 발명의 유효성분을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강 기능성 식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다. 캅셀 형태의 건강 기능성 식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀 기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다. 환 형태의 건강 기능성 식품은 본 발명의 유효성분과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다. 과립 형태의 건강 기능성 식품은 본 발명의 유효성분의 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 '%'는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (w/w) %, 고체/액체는 (w/v) %, 그리고 액체/액체는 (v/v) %이다.
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 보다 자세히 설명한다. 다만, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 당업자에게 주지 저명한 기술 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 수 있고, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않는다. 본 발명은 후술하는 특허청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다.
<실시예 1> 천궁 발효 추출물의 제조
건조된 천궁 200 g을 70%(v/v) 에탄올 2 L로 24시간씩 3회 추출하고, 15 ㎛ 필터로 3회 여과한 뒤 감압농축하여 천궁 추출물을 제조하였다. 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri)를 24시간 배양한 배양액을 상기 농축물 전체 중량에 대하여 3 중량% 접종하고 24시간 발효한 뒤, 3 ㎛ 필터로 3회 여과 후 감압농축 및 동결건조하여 분말 형태의 천궁 발효 추출물을 제조하였다. 하기 실험에서는 천궁 발효 추출물을 다양한 농도로 제조하여 사용하였다.
<실험예 1> 천궁 발효 추출물의 총 페놀 및 플라보노이드 측정
Folin-Ciocalteu's의 방법(Wang et al., 1994)을 이용하여 총 페놀 함량을 측정하였다. galic acid를 이용하여 standard 표준곡선을 획득하였고, 실시예 1의 천궁 발효 추출물 40 ㎕와 1N Folin-Ciocalteu phenol reagent 20 ㎕, 20% Na₂CO₃ 60 ㎕ 혼합하였다. 암실에서 30분 반응시킨 후 흡광도 700 ㎚에서 측정하였다.
총 플라보노이드 함량 측정은 Nieva 방법(Nieva et al., 2000)의 방법으로 측정하였다. catechin reagent을 이용하여 standard 표준곡선을 획득하였고, 실시예 1의 천궁 발효 추출물을 25 ㎕씩 분주하고 125 ㎕ 증류수로 희석한 뒤 5% sodium nitric 8 ㎕를 첨가하여 5분간 상온에서 반응시켰다. 10% aluminum chloride 15 ㎕를 첨가하여 6분 반응시킨 후 1M Sodium hydroxide 50 ㎕와 27 ㎕의 증류수를 첨가하여 510 ㎚에서 흡광도를 측정하였다(GAE:gallic acid equivalent, CE:catechin equivalent).
| 총 폴리페놀 (㎍ GAE/ml) |
총 플라보노이드 (㎍ CE/ml) |
|
| 천궁 발효 추출물 | 55.64±1.05 | 12.94±0.62 |
표 1에서 보듯이, 총 폴리페놀 함량은 55.64±1.05 ㎍ GAE/ml, 총 플라보노이드 함량은 12.94±0.62 ㎍ CE/ml로 확인되었다.
<실험예 2> 천궁 발효 추출물의 DPPH radical 소거활성 확인
실시예 1의 천궁 발효 추출물을 0.25, 0.5, 1, 2, 4 mg/ml 농도로 제조하고, 각 농도의 천궁 발효 추출물 100 ㎕와 0.2 mM의 DPPH 용액 50 ㎕를 혼합하였다. 차광상태에서 30분간 반응시킨 뒤 517 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로 아스코르브산(ascorbic acid) 0.25, 0.5, 1, 2, 4 mg/ml 농도, BHT(dibutyl hydroxy toluene) 0.25, 0.5, 1, 2, 4 mg/ml 농도롤 각각 100 ㎕ 를 처리하였다.
도 1에서 보듯이, 본 발명의 천궁 발효 추출물은 농도의존적으로 DPPH 라디칼 소거활성이 증가하였으며, 4 mg/ml에서는 대조군과 유사한 소거활성을 보였다.
<실험예 3> 천궁 발효 추출물의 ABTS radical 소거활성 확인
ABTS 용액을 에탄올에 희석하여 743 ㎚에서 흡광도 값이 0.706 ± 0.001이 되도록 제조하였다. 7.4 mM ABTS와 2.6 mM potassium persulfate(K2S2O8)을 1:1로 혼합한 혼합물과 상기 실험예 2와 같이 천궁 발효 추출물 100 ㎕를 처리한 뒤 암실에서 24시간 반응시켰다. 대조군으로 아스코르브산 또한 천궁 발효 추출물과 같은 농도로 각각 100 ㎕를 처리하였다.
도 2에서 보듯이, 본 발명의 천궁 발효 추출물은 농도의존적으로 ABTS 라디칼 소거활성이 증가하였으며, 1 mg/ml 이상 처리할 경우 대조군과 유사한 소거활성을 보였다.
<실험예 4> 천궁 발효 추출물의 환원력 확인
실시예 1의 천궁 발효 추출물을 0.25, 0.5, 1, 2, 4 mg/ml 농도로 제조하고, sodium phosphate buffer(PBS) 0.5 ml, 1% 페리시안화칼륨(potassium ferricyanide) 0.5 ml, 상기 천궁 발효 추출물 또는 아스코르브산 0.5 ml를 혼합한 뒤, 50 ℃에서 20분간 정치하여 반응시켰다. 각 혼합물을 1 ml씩 분취하여 새 튜브에 옮긴 뒤, trichloroacetic acid(TCA) 0.5 ml를 첨가하고 4 ℃에서 10분간 3,000 rpm으로 원심분리하였다. 상층액 0.5 ml에 증류수 0.5 ml와 염화제2철(ferric chloride) 0.1 ml를 첨가한 뒤 96 well plate에 0.15 ml씩 분주하고 ELISA reader를 이용하여 700 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.
도 3에서 보듯이, 본 발명의 천궁 발효 추출물은 농도 의존적으로 환원력이 증가하였다.
<실험예 5> 천궁 발효 추출물의 DNA 산화적 손상 보호 효과 확인
모발성장촉진유전자는 정상상태의 경우 수소결합에 의해 연결되어 Supercoiled form으로 존재하는데, 활성산소는 이를 Open circular form으로 변화시켜, 정상적인 모발성장유전자의 기능을 저해시키고, 이에 따라 탈모가 발생한다. 본 실험에서는 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 DNA 산화적 손상 보호 효과를 확인하였다.
실시예 1의 천궁 발효 추출물을 0.25, 0.5, 1 mg/ml 농도로 제조하고, 플라스미드 PBR 322 DNA (0.5 ㎍/㎕) 1 ㎕, 0.8 mM FeSO4 2 ㎕, 30 %(v/v) H2O2 3 ㎕, 3 ㎕ 증류수와 상기 천궁 발효 추출물 2 ㎕를 혼합하여 37 ℃에서 1시간 반응시켰다. 이후 6X DNA loading dye 2 ㎕를 첨가하였다. 실온에서 100 V의 0.8 % agarose gel electrophoresis에 반응시켰다. DNA 밴드(supercoiled, linear and open circular)는 ethidium bromide로 염색시켰고, DNA 산화를 억제하는 효과는 대조군(C) 값을 기준으로 한 supercoiled monomer의 증가와 감소로 평가하였다.
도 4에서 보듯이, 산화적 손상이 유발된 경우(미처리군, negative control, NC)에는 Supercoiled form의 DNA가 산화적 손상에 의해 Open circular form으로 변화하였으나, 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리 시에는 Open circular form이 감소하였고, 천궁 발효 추출물 처리 농도가 증가함에 따라 DNA의 산화적 손상 보호 효과가 증가하였다.
<실험예 6> 천궁 발효 추출물의 모유두세포 증식 또는 분화 촉진 효과 확인
탈모는 미세먼지 등의 외부 오염과 스트레스에 의해 두피에 산화 스트레스가 유발되어 발생하기도 한다. 또한, 피부에 상처를 유발한 뒤 이를 치유하는 과정에서 표피와 진피의 성체줄기세포가 활성화되어 새로운 모낭이 생성되는 것으로 알려져 있다. 본 실험에서는 산화 스트레스를 유발시킨 뒤에 피부에 상처를 내어 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 상처 치유 효과를 확인하였다.
Control은 인간 모유두 세포(Humam dermal papilla cell, HDPCs)에 어떠한 처리도 하지 않은 군, Negative control은 H2O2를 처리함으로써 인간 모유두 세포에 stress를 유발한 후 어떠한 처리도 하지 않은 군, Positive control은 H2O2를 처리함으로써 모유두 세포에 stress를 유발한 후 상기 인간 모유두 세포에 미녹시딜을 처리한 군, 마지막으로 실험군은 H2O2를 처리함으로써 모유두 세포에 stress를 유발한 후 상기 인간 모유두 세포에 실시예 1의 천궁 발효 추출물을 처리한 군으로 하였다.
인간 모유두 세포를 6 well plate에 접종한 후 2일 뒤 각 well을 100μl 멸균 팁으로 긁은 후 Control군을 제외한 상기 3개의 군을 H2O2를 처리 후 미녹시딜과 실시예 1의 천궁 발효 추출물을 처리한 뒤 0hr, 24hr의 시점에서 긁힌 부분을 촬영하였다.
도 5에서 보듯이, 산화 스트레스를 유발시킬 경우에는 24시간 후에도 상처가 치유되지 않은 반면, 미녹시딜과 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리시에는 산화 스트레스가 유발된 경우에도 상처 치유 효과가 있는 것으로 나타났다. 특히, 본 발명의 천궁 발효 추출물을 처리한 경우에는 양성대조군인 미녹시딜 처리군에 비해 현저한 상처 치유 효과가 확인되었으며, 이를 통해 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리 시 진피의 모유두세포 증식 또는 분화 촉진 효과가 있음을 확인하였다.
<실험예 6> 천궁 발효 추출물의 모유두세포 활성 증진 효과 확인
알칼리성 인산 분해효소(alkaline phosphatase)는 모유두세포의 활성에 관여하는 인자로 알려져 있다. 본 실험에서는 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리에 따른 알칼리성 인산 분해효소 발현량 차이를 확인하였다. 모유두세포는 푸른색으로 염색되어 관찰이 용이하도록 하였다.
실험군 및 대조군은 상기 실험예 1과 동일하게 구성하였다. 구체적으로 control을 제외한 나머지 Negative control, Positive control, 실험군은 H2O2를 처리함으로써 모유두 세포에 stress를 유발한 후 Negative control은 아무것도 처리하지 않고, Positive control은 미녹시딜을 처리하고 마지막으로 실험군은 실시예 1의 천궁 발효 추출물을 처리한 후 48hr 뒤에 고정 용액을 5분 동안 하였다. Control은 아무 처리를 하지 않고 고정 용액을 처리하였다.
이후 각각의 군에서 상기 고정 용액을 제거한 후, 각각의 군에 알칼리성 인산 가수분해 효소 기질(alkaline phosphatase substrate)를 처리한 후 일정 시간 뒤 3차 증류수로 염색된 세포를 씻은 후 현미경으로 푸른색으로 염색된 세포를 확인하였다.
도 6에서 보듯이, 산화 스트레스에 의해 알칼리성 인산 분해효소가 감소하였으나, 미녹시딜과 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리시에는 푸른색으로 염색된 알칼리성 인산 가수분해 효소가 관찰되었다. 특히 본 발명의 천궁 발효 추출물을 처리한 경우에는 양성대조군인 미녹시딜 처리군에 비해 푸른색으로 염색된 알칼리성 인산 가수분해 효소가 많이 관찰되었으며, 이를 통해 본 발명의 천궁 발효 추출물 처리 시 모유두세포 활성을 증진시킬 수 있음을 확인하였다.
Claims (7)
- 천궁(Cnidium officinale Makino) 추출물을 발효한 천궁 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 천궁 추출물은,
물, 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 천궁 발효 추출물은,
상기 천궁 추출물에 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri)를 접종하여 발효한 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 천궁 발효 추출물은,
항산화 효과가 있는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 천궁 발효 추출물은,
모유두세포의 증식 또는 분화를 촉진시키는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 천궁 발효 추출물은,
모유두세포의 활성을 증진시키는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
- 천궁(Cnidium officinale Makino) 추출물을 발효한 천궁 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 건강기능식품 조성물.
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| KR1020220024514A KR20230126994A (ko) | 2022-02-24 | 2022-02-24 | 천궁 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
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| KR20230126994A true KR20230126994A (ko) | 2023-08-31 |
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| KR (1) | KR20230126994A (ko) |
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|---|---|---|---|---|
| KR102137252B1 (ko) | 2020-04-23 | 2020-07-24 | 주식회사 제이투케이바이오 | 락토바실러스 플란타넘 j2k- 27 균주를 이용한 스트레스성 탈모방지용 혼합 발효 추출물 및 그 제조 방법, 그 혼합 발효 추출물을 함유하는 화장료 조성물 |
-
2022
- 2022-02-24 KR KR1020220024514A patent/KR20230126994A/ko unknown
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