KR20230122506A - 맥아 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 기능 강화용 조성물 - Google Patents
맥아 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 기능 강화용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 기능 강화용 조성물에 관한 것으로, 맥아 추출물이 활성산소 생성을 억제하여 VCD에 의해 유도되는 난독성(ovotoxicity)에 대한 난소세포 보호, 세포사멸 억제 및 PI3K/Akt 신호전달 경로 활성화 효과를 나타내는 것을 확인함으로써, 난소 기능 강화용 조성물로서 유용하게 활용될 수 있다.
Description
본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 기능 강화용 조성물에 관한 것이다.
난소(ovary)는 여성의 생식기관일 뿐만 아니라 다양한 호르몬 생성을 통해 여성의 건강을 유지하는 기관이다. 여성의 노화는 일반적인 신체 노화와 생식기능의 노화로 구분할 수 있는데, 그 중 생식기능의 노화는 일반적으로 난소 노화(ovarian aging)를 의미한다. 난소 노화는 모든 여성에 나타나는 현상으로, 일반적으로 35세를 기점으로 난포의 수적 감소와 더불어 난모세포의 질적 저하가 동반되어 생식능력이 감소하고, 이를 통한 난소기능 저하는 호르몬 불균형, 조기난소부전, 다낭성 난소 증후군, 난임, 조기 폐경 등 뿐만 아니라, 치매, 골다공증, 심장병, 갱년기 질환, 신진대사장애 등 전신적인 문제도 유발할 수 있다고 알려져 있다.
갱년기 질환은 난소 노화(난소기능 저하)로 발생하는 대표적인 질환으로, 여성호르몬인 에스트로겐의 분비가 저하되면서 발생하며 갱년기성 골다공증, 안면홍조, 복부비만, 자궁위축, 인지장애, 알츠하이머, 혈류장애, 다한증, 피부 노화 등 신체적 증상뿐만 아니라, 우울증, 집중력저하, 불면, 두통, 이명, 신경과민 등 정신신경계통에서도 증상이 나타날 수 있다.
난독성(ovotoxicity)은 다양한 유해 인자에 의해 난소 조직 및 난소의 생식세포에 대한 독성 효과를 나타내는 것을 의미한다. 항암화학요법제, 다환 방향족 탄화수소(polycyclic aromatic hydrocarbon, PAH) 등이 대표적인 난독성 인자로 알려져 있고, 이러한 난독성은 난소 노화를 촉발하여 조기난소부전이나 가임력 저하 등을 유발한다.
4-vinylcyclohexene diepoxide(VCD)는 고무 타이어, 폴리에스테르, 플라스틱을 제조하는데 전형적으로 사용되어온 물질로, 최근 생식노화와 관련된 환경적 요인의 화학물질로서 주목받고 있다. VCD는 자연 세포 사멸 과정을 가속화하여 선택적 ovarian small pre-antral(primordial and primary) follicles의 파괴를 유발하고, 직접적으로 oocyte-associated c-kit receptor에 상호작용하여 인산화작용(auto phosphorylation)을 억제하여 난모 세포의 생존능력을 손상시키며 이 과정에서 PI3K protein의 활성과 PI3K family인 Akt에도 영향을 주는 것으로 알려져 있다.
현재 난소기능 저하에 따른 다양한 증상의 개선을 위해 생약제제 및/또는 기능성 식품을 활용하거나 난소 기능 저하로 인한 생성이 감소된 에스트로겐을 보충하는 호르몬 치료법 등이 임상적으로 사용되고 있으나, 아직까지 난소기능 저하를 근본적으로 치료할 수 있는 방법은 개발되지 않은 상황이다.
한편, 맥아(Hordei Fructus Germinatus)는 벼과의 대맥(Hordeum vulgare Linn,大麥)을 싹 띄워 건조한 것으로, 맥아의 이명으로는 대맥아(大麥芽), 대맥벽(大麥蘗), 대맥모(大麥毛), 광맥얼(麥蘖), 곡맥(谷麥) 등이 있으며, 맥아효소인 아밀라아제가 녹말을 당분으로 바꾸는 작용을 하여“엿기름”으로도 알려져 있다. 맥아는 디아스타아제(diastase), 인버타아제(invertase), 글루코스 6-포스페이트 데하이드로게나제(glucose 6-phosphate dehydrogenase), 아밀라아제(a-amylase, b-amylase), 프로테아제(protease), 덱스트린(dextrin), 말토스(maltose), 글루코스(glucose), 비타민 B 등 단백질 대사 관여 효소를 많이 함유하고 있고, 한방에서는 비위허약으로 인한 소화장애, 유즙분비 등을 치료하는데 사용되어 왔으며, 최근 궤양성 결장염, 장염, 간염 등에서 효과가 있는 것으로 보고된 바 있다. 그러나 아직까지 맥아의 난소 기능 강화에 대해서는 보고된 바 없다.
본 발명의 목적은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 기능 강화용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난독성 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난독성 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조기난소부전 또는 조기폐경 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조기난소부전 또는 조기폐경 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 기능 강화용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난독성 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난독성 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조기난소부전 또는 조기폐경 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조기난소부전 또는 조기폐경 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따르면, 맥아 추출물이 활성산소 생성을 억제하여 VCD에 의해 유도되는 난독성(ovotoxicity)에 대한 난소세포 보호, 세포사멸 억제 및 PI3K/Akt 신호전달 경로 활성화 효과를 나타내는 것을 확인함으로써, 난소 기능 강화용 조성물로서 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 난소세포에 대한 맥아 추출물의 세포독성을 분석한 결과이다.
도 2는 VCD로 유도된 난독성(ovotoxicity)에 대한 맥아 추출물의 처리 농도에 따른 난소세포 보호 효능을 분석한 결과이다.
도 3은 VCD로 유도된 난소세포에서 맥아 추출물의 활성산소 억제 효능을 분석한 결과이다.
도 4는 VCD로 유도된 난소세포에서 맥아 추출물의 세포사멸(apoptosis) 억제 효능을 분석한 결과이다.
도 5는 맥아 추출물의 처리 시간에 따른 PI3K/Akt 신호전달경로 활성변화를 분석한 결과이다.
도 2는 VCD로 유도된 난독성(ovotoxicity)에 대한 맥아 추출물의 처리 농도에 따른 난소세포 보호 효능을 분석한 결과이다.
도 3은 VCD로 유도된 난소세포에서 맥아 추출물의 활성산소 억제 효능을 분석한 결과이다.
도 4는 VCD로 유도된 난소세포에서 맥아 추출물의 세포사멸(apoptosis) 억제 효능을 분석한 결과이다.
도 5는 맥아 추출물의 처리 시간에 따른 PI3K/Akt 신호전달경로 활성변화를 분석한 결과이다.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 기능 강화용 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출할 수 있다.
또한, 상기 추출물은 활성산소(Reactive oxygen species, ROS) 생성 억제 활성을 통해 난독성(ovotoxicity)에 대한 난소 보호 효과를 나타낼 수 있다.
상기 난독성은 4-vinylcyclohexene diepoxide(VCD)에 의해 유도될 수 있다.
또한, 상기 추출물은 난소세포의 세포사멸(apoptosis)을 억제하고, PI3K/Akt 신호전달 경로를 활성화시킬 수 있다.
또한, 본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난독성 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 약학 조성물은 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다.
상기 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸 히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘, 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 약학 조성물에 포함되는 첨가제의 함량은 특별히 한정되는 것은 아니며 통상의 제제화에 사용되는 함량 범위 내에서 적절하게 조절될 수 있다.
상기 약학 조성물은 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립, 정제, 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 및 카타플라스마제로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 피부 외용제 형태로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 제형화를 위해 추가로 있는 약학적으로 허용 가능한 담체 및 희석제를 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체 및 희석제는 전분, 당 및 만니톨과 같은 부형제, 칼슘 포스페이트 등과 같은 충전제 및 증량제, 카르복시메틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스 등과 같은 셀룰로오스 유도체, 젤라틴, 알긴산염, 폴리비닐 피롤리돈 등과 같은 결합제, 활석, 스테아린산 칼슘, 수소화 피마자유 및 폴리에틸렌글리콜과 같은 윤활제, 포비돈 및 크로스포비돈과 같은 붕해제, 폴리소르베이트, 세틸알코올, 글리세롤 등과 같은 계면활성제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체 및 희석제는 대상체에게 생물학적 및 생리학적으로 친화적인 것일 수 있다. 희석제의 예로는 염수, 수용성 완충액, 용매 및/또는 분산제(dispersion media)를 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구 투여(예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있다. 경구 투여일 경우, 정제, 트로키제(troches), 로젠지(lozenge), 수용성 현탁액, 유성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽, 엘릭시르제 등으로 제형화될 수 있다. 비경구 투여일 경우, 주사액, 좌제, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 연고, 도포용 파우더, 오일, 크림 등으로 제형화 될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 투여량은 환자의 상태, 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이 체질 특이성, 제제의 성질, 질병의 정도, 조성물의 투여시간, 투여방법, 투여기간 또는 간격, 배설율 및 약물 형태에 따라 그 범위가 다양할 수 있으며, 이 분야 통상의 기술자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 예컨대, 약 0.1 내지 10,000mg/kg의 범위일 수 있으나 이제 제한되지 않으며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여될 수 있다.
상기 약학 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여되거나 비경구 투여(예를 들면, 정맥 내, 피하 내, 복강 내 또는 국소에 적용)될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물의 약학적 유효량 및 유효 투여량은 약학 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간, 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물의 투여는 하루에 1회 투여될 수 있고, 수회에 나누어 투여될 수도 있다.
또한, 본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난독성 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 통상적으로 이용되는 식품으로써 일반적으로 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 건강기능식품으로서 사용될 수 있다. 상기 "건강기능 식품"이라 함은 건강기능 식품에 관한 법률에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
상기 건강기능식품 조성물은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 상기 "식품 첨가물"로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전처에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
상기 "식품 첨가물 공전"에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류들을 들 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 정제, 캡슐, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공할 수 있다. 예를 들어, 캡슐 형태의 건강기능 식품 중 경질 캡슐제는 통상의 경질 캡슐에 본 발명에 따른 조성물을 부형제 등의 첨가제와 혼합 및 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캡슐제는 본 발명에 따른 조성물을 부형제 등의 첨가제와 혼합하고 젤라틴 등 캡슐기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캡슐제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.
상기 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 교미제, 착향제 등에 대한 용어 정의는 당업계에 공지된 문헌에 기재된 것으로 그 기능 등이 동일 내지 유사한 것들을 포함한다. 상기 식품의 종류에는 특별한 제한이 없으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
본 발명에서 용어 “예방”이란 본 발명에 따른 조성물의 투여로 질환의 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 말한다. 본 발명에서 용어 “치료”는 본 발명에 따른 조성물의 투여로 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 말한다. 본 발명에서 "개선"이란 본 발명의 조성물을 개체에 투여하거나 섭취시켜 질환의 나쁜 상태를 좋게 하는 모든 행위를 의미한다.
또한, 본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조기난소부전 또는 조기폐경 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조기난소부전 또는 조기폐경 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
[
실험예
1]
맥아 추출물
제조
맥아(麥芽, Hordei Fructus Germinatus)는 (주)휴먼허브(Daegu, Korea)에서 구입하여 선별하고 정선한 것을 사용하였다. 맥아 100g에 70% 에탄올 800mL를 가한 다음 4시간 동안 가열 환류 방식으로 추출하였다. 8μm 구멍 크기의 여과지로 두 번 여과한 후, 걸러진 용액은 감압 농축 및 동결 건조하고, 이를 분말화하여 6.731g 맥아 추출물을 얻었다.
[
실험예
2] 세포 생존율 측정(
MTT
assay)
세포 생존율은 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay 방법으로 분석하였다. 96-웰 플레이트에 1 × 104 cells/well의 CHO-K1 세포를 배양한 후 4시간 동안 혈청 고갈(serum starvation) 후, 맥아 추출물을 농도별로 전처리하고, 4-vinylcyclohexene diepoxide(이하 VCD라 함) 1.5mM를 순차적으로 처리하여 37℃ 및 5% CO2의 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 웰 당 10μL의 MTT 용액 2mg/mL를 첨가하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 2시간 동안 반응시킨 후, MTT 용액과 배양액을 완전히 제거 후 100μL DMSO(dimethyl sulfoxide, Junsei Chemical Co., Tokyo, Japan)로 세포 내에 형성된 포마잔(formazan) 결정체를 용해하여 ELISA plate reader(Tecan Austria GmbH, Grdig, Austria)로 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군에 대한 세포생존율은 백분율로 표시하였다.
[
실험예
3] 활성 산소(Reactive oxygen species,
ROS
) 측정
CHO-K1 세포를 6-웰 플레이트에서 배양한 후, 맥아 추출물을 1시간 동안 전처리하고, VCD 1.5mM을 처리하여 18시간 동안 추가로 배양하였다. PBS(phosphate buffer saline)로 희석한 DCFH-DA(2' 7-dichlorofluorescein diacetate)를 1μM 농도로 배지에 첨가하고, 30분 동안 배양한 후 세포를 PBS로 2회 세척하였다. 이후 CytoFLEX flow cytometer(Beckman Coulter Inc., USA)로 형광 강도를 측정하였고, 대조군과 비교하여 백분율(%)로 DCF 형광 광도의 증가율을 계산하였다.
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실험예
4]
웨스턴
블롯
(Western blot)
단백질의 추출을 위하여, 세포를 PBS로 2회 세척한 후, RIPA buffer(Thermo Fisher Scientific, Rockford, IL, USA)를 넣어 4℃에서 30분간 반응시키고 12,000 ×g에서 30분간 원심분리하여 상층액을 모았다. Bicinchoninic acid protein assay kit(Thermo Fisher Scientific)로 단백질의 농도를 측정한 다음, sample buffer(Bio-Rad, Hercules, CA, USA)를 이용하여 단백질 샘플을 만들었다. 동량의 단백질을 SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)로 분리시킨 후, 단백질을 PVDF 멤브레인(membrane)에 트랜스퍼(transfer)하였다. 이 멤브레인을 항체의 비특이적 결합을 차단하기 위해, blocking buffer(5% non-fat milk)를 1시간 처리한 후, 0.1% Tween 20을 함유한 PBST 용액으로 세척하였다. 각각의 보고자 하는 단백질의 항체를 사용하여 4℃에서 밤새 처리하였으며, 2차 항체는 HRP-linked 항-토끼(anti-rabbit) 또는 항-마우스(anti-mouse)를 사용하였고, enhanced chemiluminoescence solution(Amersham, Piscataway, NJ, USA)에 반응시킨 다음 Fusion Solo-2 화상이미지 분석기(Vilber Lourmat, Paris, France)에서 각 단백질의 발현 정도를 관찰하고, 이미지를 획득하였다.
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실험예
5] 통계분석
모든 실험예 결과들은 평균(mean) ± 표준오차(standard error of the mean, SEM)로 나타냈으며, 유의성을 검정하기 위하여 GraphPad Prism software(GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA)를 사용하여 일원분산분석(one way analysis of variance, ANOVA)을 실시한 후 p < 0.05 수준에서 Tukey’s multiple comparison test로 분석하였다.
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실시예
1] 세포독성 측정
상기 실험예 2에 따라, CHO-K1 세포에 맥아 추출물을 농도별로 단독 처리한 후, MTT assay를 통해 맥아 추출물 자체의 세포독성을 평가한 결과, 대조군과 비교할 때, 200μg/mL까지는 CHO-K1 세포 생존율에 영향을 미치지 않음을 확인하였다(도 1).
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실시예
2] VCD로 유도된
난독성에
대한 보호 효과 확인
CHO-K1 세포에 맥아 추출물을 다양한 농도(1, 10, 100 및 200μg/mL)로 1시간 전처리하고, VCD 1.5mM로 난독성을 유발시킨 후, 난독성(ovotoxicity)에 대한 보호 효과를 확인한 결과, 맥아 추출물은 농도의존적으로 난독성에 대한 보호 효능을 나타내는 것을 확인하였다(도 2).
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실시예
3]
맥아 추출물의
ROS
생성 억제 효과 확인
맥아 추출물의 난소세포 보호 효능이 산화적 스트레스 억제에 의한 것인지 확인하기 위해, 상기 실험예 3에 따라, ROS(reactive oxygen species)의 생성 정도를 측정한 결과, VCD의 처리는 ROS 생성을 현저하게 증가시켰고, 맥아 추출물 처리 시, ROS 생성이 농도의존적으로 유의하게 감소하는 것을 확인하였다(도 3).
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실시예
4]
맥아 추출물의
VCD로 유도된 세포사멸 억제 효과 확인
CHO-K1 세포에서 VCD 1.5mM 처리 시 세포사멸(Apoptosis)이 일어나고, 맥아 추출물의 전처리 시 VCD로 인한 세포사멸이 억제되는지 확인하기 위해, 상기 실험예 4에 따라, 맥아 추출물 처리에 따른 세포사멸 관련 단백질(apoptosis-related protein; PARP)인 caspase-3의 발현 변화를 웨스턴 블롯을 통해 확인한 결과, 대조군과 비교할 때, VCD 처리 시 PARP cleavage가 일어나 band가 2개로 나타나고, 프로폼(proform)의 caspase-3의 경우, band 강도(intensity)가 감소한 바, 세포사멸이 유도되었음을 확인하였다. 반면, 맥아 추출물을 전처리하고 VCD를 처리한 경우, PARP band가 2개로 분리되지 않았고, caspase-3의 경우도 VCD 단독 처리보다 감소하지 않음을 확인하였다(도 4).
이는 맥아 추출물이 VCD로 유도된 세포사멸을 억제하고, 난독성으로부터 세포 보호 효과가 있음을 의미한다.
[
실시예
5]
맥아 추출물의
난독성
보호 효능의 기전 확인
맥아 추출물의 난독성 보호 효능의 기전을 알아보기 위해, 상기 실험예 4에 따라, 맥아 추출물 처리에 따른 VCD의 독성 기전으로 알려져 있는 PI3K/Akt 신호전달경로에서의 변화를 웨스턴 블롯을 통해 확인한 결과, 맥아 추출물(100μg/mL) 처리 시, PI3K/Akt 신호전달의 주요한 키나아제(kinase)인 Akt 및 mTOR의 발현이 시간의존적으로 하위 시그널(signal) 쪽으로 활성화되는 것을 확인하였다(도 6).
이는 맥아 추출물이 PI3K/Akt 신호 경로를 순차적으로 활성화시키고, 이를 통해 VCD로부터 난소세포 보호 효능을 나타냄을 의미한다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술한 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (10)
- 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 기능 강화용 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출되는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 추출물은 활성산소(Reactive oxygen species, ROS) 생성 억제 활성을 통해 난독성(ovotoxicity)에 대한 난소 보호 효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 3에 있어서, 상기 난독성은 4-vinylcyclohexene diepoxide(VCD)에 의해 유도되는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 추출물은 난소세포의 세포사멸(apoptosis)을 억제하는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 추출물은 PI3K/Akt 신호전달 경로를 활성화시키는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난독성 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 난독성 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조기난소부전 또는 조기폐경 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 맥아(Hordei Fructus Germinatus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조기난소부전 또는 조기폐경 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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PCT/KR2023/001830 WO2023153794A1 (ko) | 2022-02-14 | 2023-02-08 | 난소 기능 강화용 또는 난독성 예방 또는 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR20220018607 | 2022-02-14 | ||
KR1020220018607 | 2022-02-14 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
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KR1020220076617A KR20230122506A (ko) | 2022-02-14 | 2022-06-23 | 맥아 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 기능 강화용 조성물 |
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KR20160073505A (ko) | 2014-12-16 | 2016-06-27 | 농업회사법인 대제한약 주식회사 | 혈소판 응집 저해능과 관능성이 우수한 한방 약선차 |
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2022
- 2022-06-23 KR KR1020220076617A patent/KR20230122506A/ko unknown
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KR20160073505A (ko) | 2014-12-16 | 2016-06-27 | 농업회사법인 대제한약 주식회사 | 혈소판 응집 저해능과 관능성이 우수한 한방 약선차 |
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