KR20230107866A

KR20230107866A - Btk 억제제를 사용한 전신성 홍반성 루푸스의 치료 방법

Info

Publication number: KR20230107866A
Application number: KR1020237020532A
Authority: KR
Inventors: 난 후; 슈란 리; 샤오민 송; 젠 야오; 윤향 구오; 지웨이 왕
Original assignee: 베이진 스위찰랜드 게엠베하
Priority date: 2020-11-20
Filing date: 2021-11-19
Publication date: 2023-07-18
Also published as: EP4247382A4; EP4247382A1; JP2023550416A; WO2022105870A1; CN117042777A

Abstract

(S)-7-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로-[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 이용하여, 대상체에서의 루푸스 신염, 구체적으로 활성 증식성 루푸스 신염을 포함하는 전신성 홍반성 루푸스를 치료하는 방법이 본 명세서에서 제공된다.

Description

BTK 억제제를 사용한 전신성 홍반성 루푸스의 치료 방법

대상체에서의 루푸스 신염, 구체적으로 활성 증식성 루푸스 신염을 포함하는 전신성 홍반성 루푸스(systemic lupus erythematosus)를 치료하는 방법으로서, 이를 필요로 하는 대상체에게 (S)-7-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로-[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 것을 포함하는 방법이 본 명세서에서 개시된다.

전신성 홍반성 루푸스(SLE)는 거의 모든 기관 시스템에 영향을 미칠 수 있는 미지의 병인의 복잡하고 만성적인 자가면역 질환으로서, 재발 및 완화의 질환 과정을 수반한다. SLE는 남성에서보다 여성에서 훨씬 더 자주 발생하고, 일부 연구에서는 최대 9배까지 더 자주 발생하며, 보통 가임년수(15 내지 45세 연령) 동안 나타난다. SLE에서, 면역 시스템은 신체의 세포 및 조직을 공격하고, 이로써 심장, 관절, 피부, 폐, 혈관, 간, 신장, 및 신경계에 해를 끼칠 수 있는 염증 및 조직 손상을 초래한다.

루푸스 신염은 SLE의 일반적이고 심각한 징후이다. 루푸스 신염은 사구체에 면역 복합체가 축적되고 종종 모든 신장 구획에서 염증 반응이 나타나는 것을 특징으로 하는 사구체신염의 한 유형이다. 시간 경과에 따라, 염증은 신실질(renal parenchyma)의 만성적인 손상과 신장 기능의 상실을 야기한다. 루푸스 신염의 발병률 및 유병률은 연령, 성별, 인종, 민족, 지역, 및 진단 기준에 의해 영향을 받는다. 임상적으로 명백한 루푸스 신염은 SLE 환자의 20% 내지 60%에서 발견되고, SLE 진단 후 6개월 이내에 가장 자주 발생한다. SLE 환자에서 표준 사망률은 일반 인구에서보다 2 내지 5배 더 높고(Bernatsky S, Boivin J-F, Joseph L, et al. Mortality in systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum.2006;54(8):2550-7.), 만성 신장 질환 및 말단 신장 질환(end-stage renal disease; ESRD)이 발병한 환자에서 더 증가한다(Mok CC, Kwok RCL, Yip PSF, et al. Effect of renal disease on the standardized mortality ratio and life expectancy of patients with systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum. 2013;65(8):2154-60.).

신장 생검은 루푸스 신염을 진단하기 위한 최적 표준이고, 루푸스 신염의 치료는 병리학적 분류에 따라 안내되어야 한다. 국제신장학회/신병리학회의 루푸스 신염의 분류(International Society of Nephrology/Renal Pathology Society Classification of Lupus Nephritis)에 따르면 루푸스 신염은 6개 등급으로 분류된다. 클래스 I 및 II 루푸스 신염 환자는 통상적으로 루푸스의 신장외 임상 징후에 의해 규정된 대로 치료된다. 클래스 III 루푸스 신염(국소 루푸스 신염) 및 클래스 IV 루푸스 신염은, 예후가 좋지 않기 때문에, 코르티코스테로이드 및 면역억제제로 치료되어야 한다. 시클로포스파미드 또는 마이코페놀레이트 모페틸(MMF)과 조합된 코르티코스테로이드를 이용하는 초기 치료는 6개월 동안 지속된다. 초기 치료가 끝나고, 클래스 III 및 클래스 IV 루푸스 신염 환자가 초기 치료를 받고 치료가 끝난 후, 클래스 III 및 클래스 IV 루푸스 신염 환자는 아자티오프린 또는 마이코페놀레이트 모페틸 및 저용량의 경구 코르티코스테로이드(10 mg/일 이하의 프레드니손 또는 등가물)로 유지 요법을 받을 것이다. 완전 완화(complete remission)에 도달한 후, 면역억제제를 감량하기 전까지 적어도 1년 동안 유지 요법이 지속되어야 한다(KDIGO Clinical Practice Guideline for Glomerulonephritis. Kidney Int Suppl. 2012;2(2):259-74.). 그러나, 여러 임상 연구의 데이터에 따르면, 6개월의 유도 요법 후, 환자의 30% 미만이 완전 신장 반응을 달성하였다는 것이 제시되어 있다.

현재까지, 미국에서는 보클로스포린만이 루푸스 신염의 치료용으로 승인되고, 중국에서는 마이코페놀레이트 모페틸이 승인되어 있지만, 완전 완화율은 여전히 낮다. 따라서, 높은 안전 위험을 초래하지 않으면서 환자에게 상당한 이점을 제공할 수 있는 새로운 대체 치료법에 대한 미충족 수요가 여전히 많이 존재한다.

WO2014/173289A에는 일련의 BTK 억제제, 특히 (S)-7-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라-하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(이하, 화합물 1)가 개시되어 있다. 화합물 1은 BTK가 중요한 역할을 하는 B-세포 수용체(BCR) 및 FcR 신호 전달 경로에 이상이 있는 암의 치료에 사용될 수 있고, BTK에 대해 강력하고 비가역적인 억제 활성을 갖는 것으로 입증되었다.

화합물 1은 유리한 약리학적 및 약동학적(PK) 프로파일을 갖는 강력하고, 특이적이며, 비가역적인 BTK 억제제이다. 화합물 1은 키나제 억제와 세포-기반 분석의 결과에 기반하는 표피 성장 인자 수용체(EGFR), 야누스 키나제 3(JAK3), 인간 표피 성장 인자 수용체-2(HER2), TEC, 유도성 T-세포 키나제(ITK) 등을 포함하는 (off-target) 키나제에 대해 양호한 선택성을 갖는다. BTK에 대한 화합물 1의 양호한 선택성은 상기 언급한 키나제의 억제와 관련된 더 낮은 발병률 및 덜 심각한 표적외 독성을 초래할 수 있다.

본 개시내용은 전신성 홍반성 루푸스(SLE)가 있는 대상체에서 반응을 나타내는, (S)-7-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라-하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(화합물 1) 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 개시한다.

본 개시내용은 또한 루푸스 신염이 있는 대상체에서 반응을 나타내는, (S)-7-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라-하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(화합물 1) 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 개시한다.

본 개시내용은 또한 활성 증식성 루푸스 신염이 있는 대상체에서 반응을 나타내는, (S)-7-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라-하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(화합물 1) 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 개시한다.

본 개시내용의 발명자는 NZBWF1/J 루푸스 마우스 모델에서 화합물 1이 효능을 나타냈으며, 특히 3 및 10 mg/kg BID로 경구 투약된 경우, 화합물 1이 마이코페놀레이트 모페틸(MMF)에 비해 더 강력한 항-루푸스 효과를 나타냄을 발견하였다.

본 개시내용의 발명자들은 또한 화합물 1이 전신성 홍반성 루푸스 유사 만성 이식편-대-숙주-질환(systemic lupus erythematosus like chronic graft-versus-host-disease; SLE-cGVHD) 마우스 모델에서 효능을 나타냄을 밝혀냈다. 화합물 1의 10 및 20 mg/kg의 1일 2회 경구 투약은 혈청 내 항-dsDNA IgG의 수준을 억제하였고, 단백뇨 수준을 상당히 감소시켰고, 비장 비대증을 개선하였다.

또한, 본 개시내용의 발명자들은 화합물 1이 또한 MRL/lpr 마우스 루푸스 모델에서 1일 2회 1.5 ㎎/㎏ 내지 50 ㎎/㎏의 범위에서 용량-의존적 효능을 나타냄을 발견하였다.

인간에서 1일 2회(BID) 40 mg의 화합물 1 노출은 MRL/lpr 마우스에서 1일 2회 15 mg/kg의 노출에 근사하였다. 또한, BTK 억제제의 유효 용량은 PBMC에서 90% 초과 및 비장에서 70% 초과의 지속된 BTK 점유율(sustained BTK occupancy)을 달성해야 한다. 전임상 데이터, PK 가변성 및 혈액학적 적응증의 임상 용량에 기초한 PK-PD 시뮬레이션에 따라, 1일 80 mg(40 mg BID) 내지 1일 320 mg(160 mg BID) 용량의 화합물 1이 권장되었고, 이는 B 세포 악성 종양 환자에서 효과적이고 잘 용인되는 것으로 나타났다.

화합물 1은 현재의 표준 요법과 비교하여 유의하게 단백뇨를 감소시키고 완화율을 증가시킴으로써 루푸스 신염을 포함한 전신성 홍반성 루푸스의 치료에 효과적인 치료법이 될 수 있다. 화합물 1은 만성 요법으로서 루푸스 신염 환자를 포함한 전신성 홍반성 루푸스에서 잘 용인될 수 있다.

도 1aa 및 도 1ab는 화합물 1이 용량-의존적으로 단백뇨를 억제함을 나타냈다. 양성 대조군으로서, 마이코페놀레이트 모페틸(MMF)을 1일 1회 100 mg/kg으로 사용하였고; 0.1 및 0.3 mg/kg의 화합물 1은 MMF보다 덜 효과적인 반면, 1, 3 및 10 mg/kg의 화합물 1은 MMF와 비교할 때 유의한 차이가 없는 것으로 나타났다. (p < 0.05; ** p < 0.01, *** p < 0.001 vs. 비례 확률 모델에 의한 비히클; MMF: 마이코페놀레이트 모페틸)
도 1ac 및 도 1ad는 화합물 1이 BUN 수준을 상당히 감소시키고 신장의 병리학적 손상을 억제함을 나타냈다. 3 및 10 mg/kg의 화합물 1 및 MMF는 BUN 수준을 현저하게 억제하였다. 화합물 1은 용량-의존적 방식으로 신장 조직병리학 점수를 억제한 반면, MMF는 조직병리학 점수를 유의하게 억제할 수 없었다. (* p < 0.05 vs. 일원 ANOVA에 의한 비히클; BUN: 혈중 요소 질소)
도 1ae는 화합물 1이 비장 비대를 상당히 개선함을 나타냈다. 3 및 10 mg/kg의 화합물 1은 비장 중량을 극적으로 억제한 반면, MMF는 비장 질량을 유의하게 억제할 수 없었다. (* p < 0.05 vs. 일원 ANOVA에 의한 비히클; MMF: 마이코페놀레이트 모페틸)
도 1af 및 도 1ag는 화합물 1이 혈청에서 TNFα 및 IL-10 수준을 상당히 감소시킴을 나타냈다. 10 mg/kg의 화합물 1은 TNFα와 IL-10의 분비를 극적으로 억제하였다. 그에 반해서, MMF는 대조군 그룹과 비교하여 통계적 유의성이 없는 더 낮은 수준의 TNFα와 IL-10을 나타냈다. (* p < 0.05 vs. 일원 ANOVA에 의한 비히클; MMF: 마이코페놀레이트 모페틸)
도 1ba는 SLE-cGvHd 마우스 모델에서 항-dsDNA IgG 수준에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 치료 15일째에, 혈청 내 항-dsDNA IgG의 수준을 ELISA로 검출하였다. 데이터는 각 그룹에서 평균 항-DNA±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다. 통계적 분석은 일원 ANOVA(이후 던넷(Dunnett) 테스트)를 사용하여 수행하였다. ** p < 0.01 vs. 비히클.
도 1bb는 SLE-cGvHD 마우스 모델에서 화합물 1의 단백뇨 수준에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 치료 22일째에, URIT 1 vp 스트립을 사용하여 소변 알부민을 측정하여 단백뇨 수준을 평가하였다. 데이터는 각 그룹에서의 평균 점수±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다. 통계적 분석은 일원 ANOVA(이후 던넷 테스트)를 사용하여 수행하였다. * p < 0.05, ** p < 0.01, **** p < 0.0001 vs. 비히클.
도 1bc는 SLE-cGvHD 마우스 모델에서 비장 지수에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 비장 중량 및 체중을 연구 종료시 측정하였다. 비장 지수(비장 중량 대 체중의 비)를 계산하였다. 데이터는 각 그룹에서의 평균 비장 지수±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다. 통계적 분석은 일원 ANOVA(이후 던넷 테스트)를 사용하여 수행하였다. * * p < 0.01, *** p < 0.001 vs. 비히클.
도 1bd는 SLE-cGvHD 마우스 모델에서 체중에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 체중을 주당 2회 측정하였다. 데이터는 주당 2회 측정한 평균 체중을 나타낸다. 데이터는 각 그룹에서의 평균 체중 x±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다.
도 1ca는 MRL/MpJ-Fas^lpr/J(MRL/lpr) 마우스 모델에서 항-dsDNA IgG에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 연구 종료시, 혈청 내 항-dsDNA IgG 수준을 ELISA로 검출하였다. 데이터는 각 그룹에서 평균 항-dsDNA±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다. 통계적 분석은 일원 ANOVA(이후 던넷 테스트)를 사용하여 수행하였다. * * p < 0.01 vs. 비히클.
도 1cb는 MRL/MpJ-Fas^lpr/J(MRL/lpr) 마우스 모델에서 단백뇨 수준에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 118일째에, URTI 1 vp 스트립을 사용하여 소변 알부민을 측정하여 단백뇨 수준을 평가하였다. 데이터는 각 그룹에서 평균 점수±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다. 통계적 분석은 일원 ANOVA(이후 던넷 테스트)를 사용하여 수행하였다. **** p < 0.0001 vs. 비히클.
도 1cc는 MRL/MpJ-Fas^lpr/J(MRL/lpr) 마우스 모델에서 비장 지수에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 비장 중량 및 체중을 연구 종료시 측정하였다. 비장 지수(비장 중량 대 체중의 비)를 계산하였다. 데이터는 각 그룹에서의 평균 비장 지수±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다. 통계적 분석은 일원 ANOVA(이후 던넷 테스트)를 사용하여 수행하였다. **** p < 0.0001 vs. 비히클; ## p < 0.01 vs. 비히클, ####p < 0.0001 vs. 프레드니손.
도 1cd는 MRL/MpJ-Fas^lpr/J(MRL/lpr) 마우스 모델에서 체중에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 체중을 주당 2회 측정하였다. 데이터는 각 그룹에서의 평균 체중±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다.
도 1ce는 MRL/MpJ-Fas^lpr/J(MRL/lpr) 마우스 모델에서 BUN 수준에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 연구 종료시 혈청 혈중 요소 질소(BUN)를 측정하였다. 데이터는 각 그룹에서 평균 BUN±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다. 통계적 분석은 일원 ANOVA(이후 던넷 테스트)를 사용하여 수행하였다. ** p < 0.01 vs. 비히클.
도 1cf는 MRL/MpJ-Fas^lpr/J(MRL/lpr) 마우스 모델에서 신장 조직병리학에 대한 화합물 1의 효과를 나타냈다. 연구 종료 시 이산화탄소를 사용하여 마우스를 안락사시켰다. 신장을 채취하여 염증 세포 침윤, 사구체병증 및 캐스트(cast)의 사망 점수를 정량적으로 분석하였다. 데이터는 각 그룹에서 평균 점수±평균의 표준 오차(SEM)로 표시하였다. 통계적 분석은 일원 ANOVA(이후 던넷 테스트)를 사용하여 수행하였다. ** p < 0.01, *** p < 0.001, , **** p < 0.0001, vs. 비히클.

정의

본 문서의 다른 부분에서 구체적으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 다른 모든 기술 및 과학 용어들은 당업자가 일반적으로 이해하는 의미를 가지고 있다.

첨부된 청구범위를 포함하여 본 명세서에서 사용되는 단수형의 단어(예컨대, "a", "an", 및 "the")는 문맥상 명백하게 달리 지시하지 않는 한 대응하는 복수의 지시대상을 포함한다.

용어 "또는"은 문맥상 명백하게 달리 지시하지 않는 한, 용어 "및/또는"의 의미로 사용되며, 또한 이 용어와 상호 교환적으로 사용된다.

본 명세서에서, 용어 "투여", "투여하는", "치료하는", 및 "치료"는 동물, 인간, 실험 대상체, 세포, 조직, 기관, 또는 생물학적 유체에 적용될 때, 동물, 인간, 대상체, 세포, 조직, 기관, 또는 생물학적 유체에 대해 외인성 약제, 치료제, 진단제 또는 조성물이 접촉하는 것을 의미한다. 세포의 치료는 세포에 대한 시약의 접촉뿐만 아니라, 유체가 세포와 접촉하는 유체에 대한 시약의 접촉을 포함한다. 용어 "투여" 및 "치료"는 또한, 시약, 진단제, 결합 화합물, 또는 다른 세포에 의한, 예를 들어 세포의 시험관내 및 생체외 치료를 의미한다. 본 명세서에서, 용어 "대상체"는 임의의 유기체, 바람직하게는 동물, 더 바람직하게는 포유동물(예를 들어, 래트, 마우스, 개, 고양이, 토끼), 가장 바람직하게는 인간을 포함한다. 임의의 질환 또는 장애를 치료하는 것은, 일 양태에서, 질환 또는 장애를 개선하는 것(즉, 질환 또는 이의 임상 증상 중 적어도 하나의 발병을 늦추거나 정지시키거나 감소시키는 것)을 지칭한다. 다른 양태에서, "치료하다", "치료하는", 또는 "치료"는 환자가 식별할 수 없는 것들을 포함하여 적어도 하나의 물리적 파라미터를 경감 또는 개선하는 것을 지칭한다. 또 다른 양태에서, "치료하다", "치료하는", 또는 "치료"는 물리적으로, (예를 들어, 식별 가능한 증상의 안정화), 또는 생리학적으로, (예를 들어, 물리적 파라미터의 안정화), 또는 둘 다로, 질환 또는 장애를 조절하는 것을 지칭한다. 또 다른 측면에서, "치료하다", "치료하는", 또는 "치료"는 질환 또는 장애의 개시 또는 발병 또는 진행을 예방 또는 지연시키는 것을 지칭한다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "치료적 유효량"은, 질환, 또는 질환 또는 장애의 임상 증상 중 적어도 하나를 치료하기 위해 대상체에게 투여될 때, 질환, 장애, 또는 증상에 대해 이러한 치료를 이행하기에 충분한 Bcl-2 억제제의 양을 지칭한다. "치료적 유효량"은 작용제, 질환, 장애, 및/또는 질환 또는 장애의 증상, 질환, 장애, 및/또는 질환 또는 장애의 증상의 중증도, 치료될 대상체의 연령, 및/또는 치료될 대상체의 체중에 따라 변할 수 있다. 임의의 주어진 경우에서의 적절한 양은 당업자에게 명백할 수 있거나 일상적인 실험에 의해 결정될 수 있다. 병용 요법의 경우, "치료적 유효량"은 질환, 장애 또는 병태의 효과적인 치료를 위한 조합 객체의 총량을 지칭한다. 본 개시내용의 일부 구현예에 있어서, 상기 대상체는 인간이다.

본 개시내용은 치료를 필요로 하는 대상체에게 화합물 1 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서의 루푸스 신염을 치료하는 방법을 제공한다.

치료 방법

일 양태에서, 본 개시내용은 전신성 홍반성 루푸스(SLE)의 치료 방법을 제공한다. SLE는 주로 여성에게서 발생하는 결합 조직의 만성, 염증성, 가변성 자가면역 질환을 지칭하며, 통상적으로 발열, 피부 발진, 피로, 및 관절통 및 종종 혈액, 신장, 심장, 폐, 및 뇌의 장애(예를 들어, 용혈성 빈혈, 신염, 흉막염, 심낭염, 인지 기능 장애, 또는 수막염)를 특징으로 한다. 영향을 받는 주요 기관 또는 조직에 따라, SLE는 루푸스 신염, 신경정신 루푸스, 루푸스 폐렴, 루푸스 심근염 및 루푸스 간염을 포함하지만 이에 제한되지 않는 질환으로 더 분류될 수 있다.

일 양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 루푸스 신염을 치료하는 방법을 제공한다.

루푸스 신염은 통상적으로 단백뇨 및 혈뇨를 특징으로 하고 종종 신부전을 야기하는 전신성 홍반성 루푸스와 연관된 사구체신염을 지칭한다. 루푸스 신염은 6개의 조직병리학적 등급으로 분류된다. 표 1을 참조한다.

특정 측면에서, 본 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 화합물 1 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 것을 포함한다.

루푸스 신염은 6개의 조직병리학적 등급으로 분류된다. 표 1 참조.

국제신장학회/신병리학회의 루푸스 신염의 약식 분류 ^a (2003)

클래스 I	최소 중간상 루푸스 신염
클래스 II	중간상 증식성 루푸스 신염
클래스 III	국소 루푸스 신염^b유형 A(활성 병변), 유형 A/C(활성 및 만성 병변), 및 유형 C(만성 병변)
클래스 IV	확산성 세그먼트(IV-S) 또는 전역(IV-G) 루푸스 신염^c유형 A(활성 병변), 유형 A/C(활성 및 만성 병변), 및 유형 C(만성 병변)
클래스 V	막성 루푸스 신염^d
클래스 VI	진행성 경화성 루푸스 신염

출처: 전신성 홍반성 루푸스의 사구체신염 분류의 재검토(Weening JJ, VD D'Agati, MM Schwartz, et al. The classification of glomerulonephritis in systemic lupus erythematosus revisited. JASN 2004;15 (2) 241-50.). ^a 세뇨관 위축, 간질성 염증 및 섬유증의 등급(경증, 중등도, 중증), 및 동맥경화 또는 기타 혈관 병변의 중증도를 나타냄

^b 활성 병변 및 경화성 병변이 있는 사구체의 비율을 나타냄.

^c 섬유소양 괴사 및 세포 크레센트가 있는 사구체의 비율을 나타냄.

^d 클래스 V는 클래스 III 또는 클래스 IV와 함께 발생할 수 있으며, 이 경우 둘 다로 진단될 것임.

본 개시내용의 일부 구현예에서, 루푸스 신염은 활성 증식성 루푸스 신염이다.

활성 증식성 루푸스 신염은, 국제신장학회/신병리학회의 루푸스 신염의 분류(2003)에 의해 분류된, 클래스 III/IV 루푸스 신염(LN)을 지칭한다.

화합물 1은 경구, 비경구, 폐내, 및 비강내를 포함하는 임의의 적합한 수단에 의해 투여될 수 있고, 필요한 경우 국소 치료를 위해, 병변내 투여될 수 있다. 투약은 임의의 적합한 경로에 의한 것일 수 있다. 다양한 시점에 걸친 단일 또는 다중 투여, 볼러스 투여, 및 펄스 주입을 포함하지만 이에 제한되지 않는 다양한 투약 스케줄이 본 명세서에서 고려된다.

화합물 1은 양호한 의료 관행과 일치하는 방식으로 제형화되고, 투약되고, 투여될 것이다. 이 맥락에서 고려해야 할 요소에는 치료할 특정 장애, 치료할 특정 포유동물, 개별 환자의 임상 상태, 장애의 원인, 제제의 전달 부위, 투여 방법, 투여 스케줄링, 및 의료 종사가에게 알려진 다른 요인들이 포함된다.

일부 구현예에서, 화합물 1은 1일 10 mg 내지 640 mg, 바람직하게는 1일 10 mg 내지 320 mg, 더 바람직하게는 1일 40 내지 320 mg, 가장 바람직하게는 1일 80 내지 320 mg의 용량으로 경구 투여된다. 일부 구현예에서, 화합물 1은 1일 40 mg 내지 160 mg, 바람직하게는 1일 80 mg 내지 160 mg의 용량으로 경구 투여된다.

일부 구현예에서, 화합물 1은 1일 2회(BID) 5 mg 내지 320 mg, 바람직하게는 5 mg 내지 160 mg BID, 더 바람직하게는 20 mg 내지 160 mg BID, 가장 바람직하게는 40 mg 내지 160 mg BID의 용량으로 경구 투여된다.

일부 구현예에서, 화합물 1은 1일 1회(QD) 10 mg 내지 640 mg, 바람직하게는 10 mg 내지 320 mg QD, 더 바람직하게는 40 mg 내지 320 mg QD, 가장 바람직하게는 40 mg 내지 160 mg QD의 용량으로 경구 투여된다.

실시예

본 발명은 발명을 예시하는 하기 실시예에 의해 추가로 예시되지만 이로 제한되는 것은 아니다.

실시예 1A NZBWF1/J 루푸스 모델에서 화합물 1의 효능

방법

26주령의 NZBWF1 암컷 마우스 90마리를 단백뇨 수준, 항-dsDNA IgG 수준 및 체중에 기초하여 그룹당 10마리 마우스씩 7개 그룹으로 무작위로 나누었다. 100 mg/kg 마이코페놀레이트 모페틸(MMF)로 1일 1회(QD) 및 비히클(0.5% MC), 0.1, 0.3, 1, 3 및 10 mg/kg 화합물 1로 1일 2회(BID) 96일 동안 무작위화 후 치료를 개시하였다. 치료제는 10 ml/kg 체중의 부피로 구강 위관(p.o.)으로 투여하였다.

또한, 마우스를 연구 기간 동안 독성의 임상 징후에 대해 매일 모니터링하였다. 각 동물에 대해 체중을 주당 2회 기록하였고, 단백뇨를 매주 측정하였다. 단백뇨를 URIT 1 vp 스트립을 사용하여 평가하였고, 0은 미량, 1은 30 mg/dL 이상, 2는 100 mg/dL 이상, 3은 300 mg/dL 이상, 4는 500 mg/dL 이상으로 하는 0 내지 4의 채점 등급으로 채점하였다.

치료 96일째에, 이산화탄소 안락사 상태에서 심장에 구멍을 뚫어 빠르게 혈액을 채취하였다. 300 내지 500 μL의 혈액을 응고관으로 옮기고, 상부 혈청 샘플을 2,000 g에서 10분 동안 원심분리기로 분리한 후, 추후 사용을 위해 -80

에서 냉장고에 보관하였다. 110 μL의 혈청을 혈중 요소 질소 수준의 검출에 사용하였고, 25 μL의 혈청을 루미넥스(Luminex)에 의한 TNFα 및 IL-10 수준 측정에 사용하였다.

신장을 제거하고 10% 중성 포르말린 용액으로 고정하였다. 상기 변형된 블록으로부터 조직을 채취하여 단계적으로 알코올로 탈수하고, 파라핀에 포매하고, 슬라이드 슬라이서(약 3 ㎛ 두께)로 절단하고, 헤마톡실린-에오신(HE)으로 염색하고, 신장 조직의 병리학적 변화를 광학 현미경으로 조사하였다. 절편은 염증(0 내지 4), 사구체 손상(0 내지 4), 및 경화증(0 내지 4)을 포함하는 3가지 시스템의 합으로서 블라인드 채점하였다.

결과

화합물 1의 생체내 효능을 NZBWF1/J 루푸스 모델에서 조사하였다. 양성 대조군으로 마이코페놀레이트 모페틸(MMF)을 1일 1회 100 mg/kg으로 사용하였다. 0.1 및 0.3 mg/kg의 화합물 1을 이용한 1일 2회 경구 치료는 MMF보다 덜 효과적인 반면, 1, 3 및 10 mg/kg의 화합물 1은 MMF와 비교할 때 유의한 차이를 나타내지 않았다(도 1aa 및 도 1ab).

3 및 10 mg/kg의 화합물 1 및 MMF는 혈중 요소 질소(BUN) 수준을 현저하게 억제하였고(도 1ac), 화합물 1은 용량-의존적 방식으로 신장 조직병리학 점수를 억제한 반면, MMF는 조직병리학 점수를 유의하게 억제할 수 없었다(도 1ad). 3 및 10 mg/kg의 화합물 1은 비장 중량을 극적으로 억제한 반면, MMF는 비장 질량을 유의하게 억제할 수 없었다(도 1ae). 10 mg/kg의 화합물 1은 TNFα 및 IL-10의 분비를 극적으로 억제하였다(도 1af 및 도 1ag). 그에 반해서, MMF는 더 낮은 수준의 TNFα 및 IL-10을 나타내었으며, 이는 대조군 그룹과 비교하여 통계적 유의성이 없었다(도 1af 및 도 1ag). 모든 결과는 화합물 1이 NZBWF1/J 루푸스 마우스 모델에서 강력한 항-루푸스 효과를 갖는다는 것을 나타낸다.

실시예 1B 전신성 홍반성 루푸스 유사 만성 이식편-대-숙주-질환(SLE-cGVHD) 모델에서 화합물 1의 효능

방법

DBA/2 마우스로부터의 비장 세포를 -7일 및 0일째에 54마리의 B6D2F1 마우스에 정맥내 이식하였다. 48마리의 동물을 접종 순서에 따라 각 그룹당 12마리씩 4개의 그룹으로 무작위로 나누었다. 무작위 배정 후 다음날에 치료를 개시하여 26일째 치료를 종료하였다. 마우스에 비히클(0.5% 메틸셀룰로오스), 10 또는 20 mg/kg 화합물 1을 1일 2회 경구 투여하였다. 10 ml/체중(kg)의 부피로 구강 위관(p.o.)으로 치료제를 투여하였다.

마우스를 연구 기간 동안 독성의 임상 징후에 대해 매일 모니터링하였다. 각 동물에 대해 체중을 주당 2회 기록하였다. 치료 15일째에, 이소플루란/산소 마취 하에 안와정맥동으로부터 혈액을 채취하여 혈청 샘플을 준비하였다. 항-dsDNA IgG ELISA 키트(Chondrex, Inc., Cat. 3031)를 사용하여 개별 마우스로부터의 혈청에서 항-dsDNA IgG에 대한 IgG 수준을 정량화하였다.

치료 8일, 15일 및 22일째에, URIT 1 vp 스트립(URIT, 중국)을 사용하여 소변 알부민을 측정하여 단백뇨를 평가하였고, 0은 미량, 1은 30 mg/dL 이상, 2는 100 mg/dL 이상, 3은 300 mg/dL 이상, 4는 500 mg/dL 이상으로 하는 0 내지 4의 채점 등급으로 채점하였다.

치료 26일째에, 화합물 1 처리 그룹에 대해 0, 0.5, 1.5, 4 및 8시간째에서 이소플루란/산소 마취 하에 안와후동으로부터 혈액 샘플을 채취하였다. 혈장을 5,600 rpm에서 7분 동안 원심분리에 의해 수집하였다. 3D BioOptima Co., Ltd.(중국, 쑤저우 소재)에서 생물학적 분석을 수행하였다.

처리 및 비히클 그룹에서의 단백뇨 수준, 비장-지수 및 항-dsDNA IgG 수준의 평균 값 사이의 차이를 일원 ANOVA(이후 던넷 테스트)를 사용하여 유의성에 대해 분석하였다. p < 0.05를 통계적으로 유의한 것으로 간주하였다.

결과

화합물 1의 생체내 효능을 전신성 홍반성 루푸스 유사 만성 이식편-대-숙주-질환(SLE-cGVHD) 마우스 모델에서 조사하였다. 화합물 1 10 및 20 mg/kg의 1일 2회 경구 투여는 혈청 내 항-dsDNA IgG의 수준을 억제하였고, 단백뇨 수준을 상당히 감소시켰고 비장 비대를 개선하였다(도 1ba, 도 1bb 및 도 1bc). 모든 처리 그룹은 연구 전반에 걸쳐 유의한 체중을 갖지 않았다(도 1bd). 정상 상태에서 화합물 1의 약물 노출(AUC_0-8h 및 C_max)은 용량 의존적으로 증가하였다. 모든 결과는 화합물 1이 SLE-cGvHD 마우스 모델에서 질환을 개선했음을 나타낸다.

실시예 1C MRL/lpr 루푸스 모델에서 화합물 1의 효능

방법

Jackson laboratories로부터 구입한 MRL/MpJ-Fas^lpr/J (MRL/lpr) 마우스를 단백뇨 수준, 항-dsDNA IgG 및 체중에 기초하여, 그룹당 11마리 마우스씩 6개 그룹으로 무작위로 나누었다. 17주 동안 5.0 mg/kg 프레드니손으로 1일 1회(QD) 또는 비히클(0.5% MC, 메틸셀룰로오스), 1.5, 5, 15, 및 50 mg/kg 화합물 1로 1일 2회(BID) 무작위화한 후 다음날 치료를 개시하였다. 치료제는 10 ml/kg 체중의 부피로 구강 위관(p.o.)으로 투여하였다.

실험 기간 동안 매일 마우스의 상태와 사망률을 기록하였다. 각 동물에 대해 체중을 주당 2회 기록하였다.

URIT 1 vp 스트립(URIT, 중국)을 사용하여 매주 소변 알부민을 측정하여 단백뇨를 계량하였고, 0은 미량, 1은 30 mg/dLl 이상, 2는 100 mg/dL 이상, 3은 300 mg/dLl 이상, 4는 500 mg/dL 이상으로 하는 0 내지 4의 채점 등급으로 채점하였다.

화합물 1 처리 그룹에 대해 0, 0.5, 1.5, 4 및 8시간에서 이소플루란/산소 마취 하에 안와후동으로부터 혈액 샘플을 채취하였다. 혈장을 5,600 rpm에서 7분 동안 원심분리하여 수집하고, 분석 전까지 -80

에서 냉동 보관하였다. 3D BioOptima Co., Ltd.(중국, 쑤저우 소재)에서 생물학적 분석을 수행하였다.

연구 종료시, 이소플루란/산소 마취 하에서 안와정맥동으로부터 혈액을 채취하였다. 혈청 샘플을 준비하고 혈청 내 BUN 수준에 대해 분석하였다. 항-dsDNA IgG ELISA 키트(Chondrex, Inc., Cat. 3031)를 사용하여 개별 마우스로부터의 혈청에서 항-dsDNA IgG에 대한 IgG 수준을 정량하였다.

이산화탄소를 사용하여 마우스를 안락사시키고, 연구 종료시 비장 중량 및 체중을 측정하였다. 비장 지수(비장 중량 대 체중의 비)를 계산하였다.

신장을 수집하여 10% NBF에서 보존하고, 조직을 트리밍시키고, 탈수시키고, 파라핀에 포매하고, 절단(약 3 μm)하고 HE로 염색하였다. 조직병리학 검사를 수행하였다.

처리 및 비히클 그룹에서의 단백뇨 수준, 비장-지수, BUN 수준, 신장 조직병리학 점수 및 항-dsDNA IgG 수준의 평균값 사이의 차이를 일원 ANOVA(이후 던넷 테스트)를 사용하여 유의성에 대해 분석하였다. p < 0.05를 통계적으로 유의한 것으로 간주하였다.

결과

화합물 1의 생체내 효능을 MRL/MpJ-Fas^lpr/J(MRL/lpr) 모델에서 조사하였다. 양성 대조군으로 프레드니손을 1일 1회 5.0 ㎎/㎏으로 사용하였다. 1.5, 5, 15 및 50 mg/kg의 화합물 1로 1일 2회 경구 치료하면 루푸스 신염으로부터 마우스를 상당히 보호하였고, 비히클과 비교할 때 혈청 내 항-dsDNA IgG 수준을 억제하였고(도 1ca), 단백뇨 및 혈청 혈중 요소 질소(BUN) 수준을 상당히 감소시켰고(도 1cb 및 도 1ce), 용량-의존적 방식으로 비장 비대를 억제하였고(도 1cc), 신장 조직병리학적 점수를 감소시켰다(도 1cf). 모든 처리 그룹은 연구 전반에 걸쳐 체중에 유의한 영향을 미치지 않았다(도 1cd). 정상 상태에서 화합물 1의 약물 노출(AUC_0-8h 및 C_max)은 독립적으로 용량을 증가시켰다. 모든 결과는 화합물 1이 MRL/MpJ-Fas^lpr/J(MRL/lpr) 마우스 모델에서 강력한 항-루푸스 효과를 갖는다는 것을 나타낸다.

실시예 2 활성 증식성 루푸스 신염 환자에서의 화합물 1의 안전성 및 효능을 평가하기 위한 2상, 다기관, 무작위화, 이중-맹검, 위약-대조 연구

본 연구의 주요 목적은 활성 증식성 루푸스 신염이 있는 참가자들에 대한 완전 신장 반응에 의해 측정되는 바와 같이, 표준 치료에 추가되는 화합물 1의 효능을 평가하는 것이다.

연구 설계:

환자들은 다음의 실험군(arm) 및 개입(intervention)에 따라 치료 그룹 중 하나로 무작위 배정될 것이다.

결과 측정

1차 결과 측정:

1. 완전 신장 반응이 있는 참가자의 비율[시간 범위: 49주 1일]

2차 결과 측정:

1. 완전 신장 반응을 달성한 참가자의 비율[시간 범위: 25주 1일]

2. 부분 신장 반응을 달성한 참가자의 비율[시간 범위: 25주 1일 및 49주 1일]

3. 전체 신장 반응을 달성한 참가자의 비율[시간 범위: 25주 1일 및 49주 1일]

4. 첫번째 완전 신장 반응까지의 시간: 무작위 배정일로부터 첫번째 완전 신장 반응 날짜까지의 시간[시간 범위: 73주 1일까지]

5. 첫번째 부분 신장 반응까지의 시간: 무작위 배정일로부터 첫번째 부분 신장 반응 날짜까지의 시간[시간 범위: 73주 1일까지]

6. 전신성 홍반성 루푸스 질환 활동 지수 2000(SLEDAI-2K) 점수의 변화[시간 범위: 25주 1일 및 49주 1일]

SLEDAI-2K 점수는 0 내지 105의 범위인, 9개의 기관 시스템 중의 24 가지 특징의 존재에 기초한 전신성 홍반성 루푸스(SLE) 활동 지수이고, 점수가 더 높을수록 지난 30일 동안 참가자에서 더 심각한 특징을 나타낸다.

8. 혈장 농도 시간 곡선 아래의 면적(AUC)을 포함하는, 루푸스 신염 환자에서의 화합물 1의 약동학[시간 범위: 1주 1일 및 5주 1일]

적격성

주요 포함 기준:

1. 피험자 동의서(ICF)에 서명한 날을 기준으로 18 내지 70세(포함)의, 여성 또는 남성

2. 전신성 루푸스 국제 협업 클리닉(Systemic Lupus International Collaborating Clinics) 2012 기준에 따른 SLE의 임상 진단.

3. 신장 생검에 의해 확인되는, 클래스 V가 있거나 없는 ISN/RPS 클래스 III/IV 루푸스 신염[유형 III(A), III(A+C), IV(A) 및 IV(A+C)].

4. 스크리닝 시 양성 항핵 항체, 양성 항-dsDNA 자가항체, 및/또는 양성 항스미스 자가항체.

5. 스크리닝 시 24시간 소변 단백질 배설이 1.0 g 초과임.

주요 제외 기준:

전신성 홍반성 루푸스 및 기타 질환과 관련된 제외 기준:

1. 전신성 홍반성 루푸스 이외의 원인에 의해 유발된 사구체신염.

2. 신장 생검에서 사구체의 50% 초과에서 경화증.

3. 류마티스 관절염, 근염, 혈관염, 또는 중첩 증후군을 포함하지만 이에 제한되지 않는, 효능의 평가를 혼란스럽게 할 수 있는 임의의 다른 염증성 질환.

4. 폐동맥 고혈압, 중증 심근염, 중증 중추신경계 루푸스(예를 들어, 신경정신적 SLE, 발작, 정신병, 횡방향 골수염, 중추신경계 혈관염 및 시신경염) 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는, 중증 신외성 SLE.

화합물 1은 현재의 표준 요법에 비해 단백뇨를 상당히 감소시키고 완화율을 현저하게 증가시킴으로써 루푸스 신염 치료에 효과적인 치료법이 될 수 있다. 화합물 1은 만성 요법으로서 루푸스 신염 환자에서 잘 용인될 수 있다.

전술한 실시예 및 특정 구현예의 설명은 청구범위에 의해 정의된 본 발명을 제한하는 것이 아니라, 예시하는 것으로 간주되어야 한다. 용이하게 이해할 수 있는 바와 같이, 상기에 제시된 특징들의 다수의 변형 및 조합들이 청구범위에 제시된 바와 같은 본 발명으로부터 벗어나지 않으면서 이용될 수 있다. 이러한 모든 변형은 본 발명의 범주 내에 포함되고자 한다. 인용된 모든 참고 문헌은 전문이 본 명세서에 참고로 포함된다.

Claims

치료적 유효량의 (S)-7-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로-[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(화합물 1) 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 전신성 홍반성 루푸스의 치료 방법.
치료적 유효량의 (S)-7-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로-[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(화합물 1) 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 루푸스 신염의 치료 방법:
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제1항에 있어서, 루푸스 신염은 활성 증식성 루푸스 신염인, 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는, 다음의 전신성 루푸스 국제 협업 클리닉(Systemic Lupus International Collaborating Clinics) 2012 기준에 따른 SLE의 임상 진단:
a) 신장 생검에 의해 확인되는, 클래스 V가 있거나 없는 ISN/RPS 클래스 III/IV 루푸스 신염[유형 III(A), III(A+C), IV(A) 및 IV(A+C)];
b) 스크리닝 시 양성 항핵 항체, 양성 항-dsDNA 자가항체, 및/또는 양성 항스미스 자가항체; 및
c) 스크리닝 시 24시간 소변 단백질 배설이 1.0 g 초과임
으로 이루어진 포함 기준 중 하나를 충족하는 환자인, 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 1은 PBMC에서 90% 초과 및 비장에서 70% 초과의 지속된 BTK 점유율(sustained BTK occupancy)을 달성하는 용량으로 투여되는, 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 1은 1일 10 mg 내지 640 mg, 바람직하게는 1일 10 mg 내지 320 mg, 더 바람직하게는 1일 40 내지 320 mg, 가장 바람직하게는 1일 80 내지 320 mg의 용량으로 투여되는, 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 1은 1일 40 mg 내지 160 mg, 바람직하게는 1일 80 mg 내지 160 mg의 용량으로 투여되는, 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 1은 1일 2회(BID) 5 mg 내지 320 mg, 바람직하게는 5 mg 내지 160 mg BID, 더 바람직하게는 20 mg 내지 160 mg BID, 가장 바람직하게는 40 mg 내지 160 mg BID의 용량으로 경구 투여되는, 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 1은 1일 1회(QD) 10 mg 내지 640mg, 바람직하게는 10 mg 내지 320mg QD, 더 바람직하게는 40 mg 내지 320 mg QD, 가장 바람직하게는 40 mg 내지 160 mg QD의 용량으로 경구 투여되는, 방법.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 혈청내 항-dsDNA IgG를 포함하여 양의 수준의 자가항체를 나타내는 방법.
제1항에 있어서, 전신성 홍반성 루푸스는 루푸스 신염, 신경정신 루푸스, 루푸스 폐렴, 루푸스 심근염 및 루푸스 간염을 포함하는, 방법.
제2항에 있어서, 루푸스 신염은
최소 중간상 루푸스 신염;
중간상 증식성 루푸스 신염;
국소 루푸스 신염;
확산성 세그먼트(IV-S) 또는 전역(IV-G) 루푸스 신염;
막성 루푸스 신염; 또는
진행성 경화성 루푸스 신염
의 루푸스 신염 중 어느 하나인, 방법.