KR20230079419A - 항-스클레로스틴 구축물 및 이의 용도 - Google Patents

항-스클레로스틴 구축물 및 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20230079419A
KR20230079419A KR1020237014802A KR20237014802A KR20230079419A KR 20230079419 A KR20230079419 A KR 20230079419A KR 1020237014802 A KR1020237014802 A KR 1020237014802A KR 20237014802 A KR20237014802 A KR 20237014802A KR 20230079419 A KR20230079419 A KR 20230079419A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
amino acid
seq
acid sequence
sclerostin
cdr1
Prior art date
Application number
KR1020237014802A
Other languages
English (en)
Inventor
샤오펑 리우
쿤펑 리우
바오지 위안
무위 리
후아주 커
Original Assignee
안지티아 바이오메디슨즈 리미티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 안지티아 바이오메디슨즈 리미티드 filed Critical 안지티아 바이오메디슨즈 리미티드
Publication of KR20230079419A publication Critical patent/KR20230079419A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2875—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF/TNF superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

본원은 스클레로스틴(Sclerostin)에 결합하는 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체, 예컨대 이중특이성 항-스클레로스틴 항체), 항-스클레로스틴의 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자, 상기 핵산 분자를 포함하는 벡터, 상기 벡터를 함유하는 숙주 세포, 상기 항-스클레로스틴 구축물의 제조 방법, 상기 항-스클레로스틴 구축물을 함유하는 약학 조성물, 및 상기 항-스클레로스틴 구축물 또는 조성물의 사용 방법을 제공한다.

Description

항-스클레로스틴 구축물 및 이의 용도
관련 출원에 대한 상호 참조
본원은 2020년 9월 28일에 출원된 국제 출원 PCT/CN2020/118387을 우선권 주장하고, 이의 내용은 모든 목적을 위해 전체적으로 참고로 인용된다.
기술분야
본 발명은 항-스클레로스틴(anti-Sclerostin) 구축물(예컨대, 항-스클레로스틴 항체) 및 이의 용도에 관한 것이다.
ASCII 텍스트 파일에 대한 서열목록의 제출
ASCII 텍스트 파일에 대한 하기 제출물의 내용은 그 전체가 본원에 참고로 인용된다: 서열목록의 컴퓨터 판독가능 형식(CRF)(파일명: 210912000241SEQLIST.TXT, 기록 날짜: 2021년 9월 20일, 크기: 386,061바이트).
인간의 골형성 억제제로서 SOST 유전자 산물인 스클레로스틴의 기능은 고골량(HBM) 장애 경화증을 야기하는 SOST 유전자의 기능 상실 돌연변이를 정밀 탐구한 유전자 맵핑(mapping) 연구에 의해 발견되었다(문헌[Balemans et al., 2001 Hum. Mol . Genet. 10, 537-543]; [Brunkow et al., 2001 Am. J. Hum. Genet. 68, 577-589]). 마우스에서 SOST 유전자의 결실은 골형성 증가로 인한 골량 및 골 강도의 증가를 야기하는 반면, 인간 스클레로스틴 트랜스진의 과발현은 낮은 골량 및 감소된 골 강도를 야기한다(문헌[Ke et al., 2012 Endocr. Rev. 33, 747-783]).
본원에서 언급된 모든 공보, 특허, 특허 출원 및 공개된 특허 출원의 개시 내용은 본원에 전체적으로 참고로 포함된다.
하기 요약은 예시일 뿐이고 어떤 식으로든 제한하려는 의도가 아니다. 즉, 신규한 분자 및 이의 용도의 특징, 유익성 및 장점을 소개하기 위해 하기 요약이 제공된다. 따라서, 하기 요약은 청구된 주제의 본질적인 특징을 식별하기 위한 것이 아니고 청구된 주제의 범위를 결정하는 데 사용하기 위한 것이 아니다.
한 양상에서, 본원은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는, 스클레로스틴(예를 들어, 인간 스클레로스틴)을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물, 예를 들어 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물을 제공한다. 일부 양태에서, 항체 모이어티는 전장 항체, 이중특이성 항체, 단일쇄 Fv(scFv) 단편, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2, Fv 단편, 다이설파이드 안정화 Fv 단편(dsFv), dsscFv, (dsFv)2, Fv-Fc 융합체, scFv-Fc 융합체, scFv-Fv 융합체, 디아바디, 트리바디 및 테트라바디로 이루어진 군으로부터 선택된 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 일부 양태에서, 구축물은 Fc 단편을 포함하는 전장 항체이다. 일부 양태에서, 항체 모이어티는 scFv 단편이다.
또 다른 양상에서, 본원은 스클레로스틴(예컨대, 인간 스클레로스틴)을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티 및 제2 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물을 제공한다. 일부 양태에서, 제2 모이어티는 반감기 연장 모이어티(예컨대, Fc 단편)를 포함한다. 일부 양태에서, 제2 모이어티는 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 비스포스포네이트, 프로스타글란딘 E(PGE) 수용체 작용제, 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 형질전환 성장 인자-β(TGFβ), 성장 인자(미오스타틴) 및 칼시토닌으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 포함한다.
일부 양태에서, 제2 모이어티는 항원을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다. 일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티(비제한적으로 본원에 기재된 항-스클레로스틴 항체 모이어티 포함), 및 Dickkopf-1(DKK1) 또는 핵 인자 카파 베타 리간드(RANKL)의 수용체 활성제를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. DKK1 또는 RANKL을 인식하는 항체 모이어티는 임의의 항-DKK1 항체 모이어티 또는 항-RANKL 항체 모이어티(비제한적으로 본원에 기재된 것 포함)일 수 있다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체, Fab, Fab', (Fab')2, Fv, 단일쇄 Fv(scFv) 단편, scFv-scFv, 미니바디, 디아바디 또는 sdAb이다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 Fc 단편을 포함하는 전장 항체이고, 이때 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 단일쇄 Fv(scFv) 단편이다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 scFv 단편이고, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 Fc 단편을 포함하는 전장 항체이다. 일부 양태에서, scFv 단편은 (링커를 통해 또는 링커 없이) 전장 항체의 중쇄 및/또는 경쇄 둘 다(예를 들어, 이의 N-말단 및/또는 C-말단)에 융합된다. 일부 양태에서, 구축물은 하기를 포함한다: a) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제1 CL 도메인")을 포함하는 제1 경쇄를 포함하는 제1 폴리펩티드; b) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH, ii) 제1 중쇄 불변 도메인("제1 CH1 도메인"), 및 iii) 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 중쇄를 포함하는 제2 폴리펩티드; c) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -2, ii) 제2 중쇄 불변 도메인("제2 CH1 도메인"), 및 iii) 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 중쇄를 포함하는 제3 폴리펩티드; 및 d) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -2, 및 ii) 제2 경쇄 불변 도메인("제2 CL 도메인")을 포함하는 제2 경쇄를 포함하는 제4 폴리펩티드, 이때 제1 및 제2 Fc 도메인은 Fc 단편을 형성한다. 제1 또는 제2 CH1 및/또는 제1 또는 제2 Fc 도메인은 본원에 기재된 바와 같이 다양한 변형을 가질 수 있다.
또 다른 양상에서, 본원은 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물과 경쟁적으로 스클레로스틴에 특이적으로 결합하는 항-스클레로스틴 구축물을 제공한다.
또 다른 양상에서, 본원은 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 일부 양태에서, 조성물은 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴) 및 칼시토닌으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 추가로 포함한다.
또 다른 양상에서, 본원은 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물 또는 이의 일부(예를 들어, 하나 이상의 이의 폴리펩티드)를 인코딩하는 단리된 핵산을 제공한다.
또 다른 양상에서, 본원은 본원에 기재된 임의의 단리된 핵산을 포함하는 벡터를 제공한다.
또 다른 양상에서, 본원은 임의의 단리된 핵산 및/또는 본원에 기재된 임의의 벡터를 포함하는 단리된 숙주 세포를 제공한다.
또 다른 양상에서, 본원은 하기를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물의 제조 방법을 제공한다: a) 항-스클레로스틴 구축물 또는 이의 일부(예컨대, 하나 이상의 이의 폴리펩티드)를 발현하기에 효과적인 조건하에, 본원에 기재된 단리된 숙주 세포를 배양하는 단계; 및 b) 상기 숙주 세포로부터 발현된 항-스클레로스틴 구축물 또는 이의 일부를 수득하는 단계.
또 다른 양상에서, 본원은 개체에게 항-스클레로스틴 구축물, 예를 들어 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물 또는 본원에 기재된 임의의 약학 조성물의 효과량을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 양태에서, 질환 또는 병태는 골 관련 장애이다. 일부 양태에서, 골 관련 장애는 골형성 부전증, 골석화증, (남성 및/또는 여성의) 골다공증, 노인성 골다공증, 골 치유 지연, 지연 또는 불유합 골절, 파제트병(Paget's disease), 부동화-유도된 골 손실, 글루코코르티코이드-유도된 골 손실, 관절염-유도된 골 손실을 비롯한 염증-유도된 골 손실, 또는 a) 양적, 질적 또는 둘 다의 골 손실, 및/또는 b) 골 구조 및 질(quality)의 이상과 관련된 또는 기타 질환 또는 병태이다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물 또는 약학 조성물은 개체에게 비경구적으로 투여된다. 일부 양태에서, 방법은 제2 제제 또는 치료제(예를 들어, 항-DKK1 항체 또는 항-RANKL 항체)를 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 제2 제제 또는 치료제는 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 비스포스포네이트, 프로스타글란딘 E(PGE) 수용체 작용제, VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴) 및 칼시토닌으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 포함한다. 일부 양태에서, 개체는 인간이다.
도 1은 스클레로스틴과 LDL 수용체 관련 단백질 6(LRP6) 사이의 상호작용을 설명하는, 스클레로스틴의 제2 루프(loop) 상의 서열 및 형태 'IGRGKWWR' 모티프(motif)를 도시한 것이다.
도 2는 스클레로스틴의 제2 루프 상의 합성 펩티드 단편을 사용한 단클론 Ab(mAb) 93B1B7의 스클레로스틴 에피토프 맵핑을 도시한 것이다.
도 3은 로모소주맙이 mAb 93B1B7에 의해 결합된 인간 스클레로스틴의 제2 루프로부터의 펩티드를 인식하지 않음을 도시한 것이다.
도 4는 93B1B7 및 로모소주맙이 상이한 스클레로스틴 에피토프를 점유하고 스클레로스틴에 대한 서로의 결합을 교차-차단하지 않음을 도시한 것이다.
도 5는 예시적인 이중특이성 항체 구조의 개략도를 도시한 것이다.
도 6은 이중특이성 항체에 대한 인간 스클레로스틴 및 DKK1의 증가하는 결합을 나타내는 BLI(BioLayer Interferometry) 센서그램의 결과를 도시한 것이다.
도 7은 시노몰거스 원숭이에서 30 mg/kg 피하 투여 후 이중특이성 항체의 혈청 농도를 도시한 것이다.
본원은 스클레로스틴에 특이적으로 결합하는 신규한 항-스클레로스틴 구축물(예컨대, 항-스클레로스틴 단클론 항체 또는 다중특이성 항체), 상기 항-스클레로스틴 구축물의 제조 방법, 상기 구축물의 사용 방법(예를 들어, 질환 또는 병태를 치료하는 방법)을 제공한다. 본원에 기재된 예시적인 항-스클레로스틴 구축물은 유리한 효과를 달성하였다. 예를 들어, 예시적인 항-스클레로스틴 구축물은 로모소주맙과 비교하여 스클레로스틴에 대한 더 높은 결합 친화도를 나타냈다. 실시예 3, 5 및 6(표 5, 7 및 8)을 참고한다.
I. 정의
"항체"라는 용어는 가장 넓은 의미로 사용되고, 원하는 항원 결합 활성을 나타내는 한, 다양한 항체 구조, 예컨대 비제한적으로 단클론 항체, 다클론 항체, 다중특이성 항체(예컨대, 이중특이성 항체), 전장 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포괄한다. 용어 "항체 모이어티"는 전장 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 지칭한다.
전장 항체는 2개의 중쇄와 2개의 경쇄를 포함한다. 경쇄 및 중쇄의 가변 영역은 항원 결합을 담당한다. 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인은 각각 "VH" 및 "VL"로 지칭될 수 있다. 상기 쇄 둘 다의 가변 영역은 일반적으로 상보성 결정 영역(CDR)(LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3을 포함하는 경쇄(LC) CDR, 및 HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3을 포함하는 중쇄(HC) CDR)으로 지칭되는 3개의 고가변성 루프를 함유한다. 본원에 개시된 항체 및 항원 결합 단편에 대한 CDR 경계는 카밧(Kabat), 초티아(Chothia) 또는 알-라지카니(Al-Lazikani)(문헌[Al-Lazikani 1997]; [Chothia 1985]; [Chothia 1987]; [Chothia 1989]; [Kabat 1987]; [Kabat 1991])의 규약에 의해 정의되거나 확인될 수 있다. 중쇄 또는 경쇄의 3개의 CDR은 프레임워크 영역(FR)으로 공지된 플랭킹 스트레치(flanking stretch) 사이에 삽입되고, 이는 CDR보다 더 고도로 보존되고, 초가변 루프를 지지하는 스캐폴드를 형성한다. 중쇄 및 경쇄의 불변 영역은 항원 결합에 관여하지 않지만, 다양한 효과기 기능을 나타낸다. 항체는 중쇄의 불변 영역의 아미노산 서열에 따라 분류된다. 항체의 5가지 주요 클래스 또는 이소형은 각각 α, δ, ε, γ 및 μ 중쇄의 존재를 특징으로 하는 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM이다. 몇 가지 주요 항체 클래스는 lgG1(γ1 중쇄), lgG2(γ2 중쇄), lgG3(γ3 중쇄), lgG4(γ4 중쇄), lgA1(α1 중쇄) 또는 lgA2(α2 중쇄)와 같은 하위 클래스로 분류된다.
본원에 사용된 용어 "항원 결합 단편"은 항체 단편, 예를 들어 디아바디, Fab, Fab', F(ab')2, Fv 단편, 다이설파이드 안정화 Fv 단편(dsFv), (dsFv)2, 이중특이성 dsFv(dsFv-dsFv'), 다이설파이드 안정화 디아바디(ds 디아바디), 단일쇄 Fv(scFv), dsscFv, scFv 이량체(2가 디아바디), 하나 이상의 CDR을 포함하는 항체의 일부로부터 형성된 다중특이성 항체, 카멜화된(camelized) 단일 도메인 항체, 나노바디, 도메인 항체, 2가 도메인 항체, 또는 항원에 결합하지만 완전한 항체 구조를 포함하지 않는 임의의 다른 항체 단편을 지칭한다. 항원 결합 단편은 모 항체 또는 모 항체 단편(예컨대, 모 scFv)이 결합하는 동일한 항원에 결합할 수 있다. 일부 양태에서, 항원 결합 단편은 하나 이상의 상이한 인간 항체로부터의 프레임워크 영역으로 이식된(grafted) 특정 인간 항체로부터의 하나 이상의 CDR을 포함할 수 있다.
"Fv"는 완전한 항원 인식 및 결합 부위를 함유하는 최소 항체 단편이다. 상기 단편은 긴밀한 비공유 회합으로 하나의 중쇄 가변 영역 도메인과 하나의 경쇄 가변 영역 도메인의 이량체로 이루어진다. 상기 두 도메인의 폴딩으로부터, 항원 결합을 위한 아미노산 잔기에 기여하고 항체에 항원 결합 특이성을 부여하는 6개의 초가변 루프(중쇄 및 경쇄에서 각각 3개의 루프)가 생성된다. 그러나, 심지어 단일 가변 도메인(또는 항원에 특이적인 3개의 CDR만 포함하는 Fv의 절반)은 전체 결합 부위보다 친화도는 낮지만, 항원을 인식하고 결합하는 능력을 가지고 있다.
"sFv" 또는 "scFv"로도 약칭되는 "단일쇄 Fv"는 단일 폴리펩티드 쇄로 연결된 VH 및 VL 항체 도메인을 포함하는 항체 단편이다. 일부 양태에서, scFv 폴리펩티드는 scFv가 항원 결합을 위해 원하는 구조를 형성할 수 있게 하는 VH와 VL 도메인 사이의 폴리펩티드 링커를 추가로 포함한다. scFv에 대한 리뷰는 문헌[Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994)]을 참고한다.
본원에 사용된 용어 "CDR" 또는 "상보성 결정 영역"은 중쇄 및 경쇄 폴리펩티드 둘 다의 가변 영역 내에서 발견되는 불연속 항원 결합 부위를 지칭하는 것으로 의도된다. 이러한 특정 영역은 문헌[Kabat et al., J. Biol. Chem. 252:6609-6616 (1977)]; [Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, "Sequences of proteins of immunological interest" (1991)]; [Chothia et al., J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)]; [Al-Lazikani B. et al., J. Mol . Biol ., 273: 927-948 (1997)]; [MacCallum et al., J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996)]; [Abhinandan and Martin, Mol . Immunol ., 45: 3832-3839 (2008)]; [Lefranc M.P. et al., Dev . Comp. Immunol ., 27: 55-77 (2003)]; 및 [Honegger and Pluckthun, J. Mol. Biol ., 309:657-670 (2001)]에 기재되어 있고, 이때 정의는 서로 비교할 때, 아미노산 잔기의 중첩 또는 하위 집합을 포함한다. 그럼에도 불구하고, 항체 또는 이식된 항체 또는 이의 변이체의 CDR을 지칭하는 정의의 적용은 본원에서 정의되고 사용된 용어의 범위 내에 있는 것으로 의도된다. 상기 인용된 참고문헌 각각에 의해 정의된 바와 같은 CDR을 포함하는 아미노산 잔기는 비교로서 하기 표 1에 제시되어 있다. CDR 예측 알고리즘 및 인터페이스는, 예를 들어 문헌[Abhinandan and Martin, Mol . Immunol ., 45: 3832-3839 (2008)]; [Ehrenmann F. et al., Nucleic Acids Res., 38: D301-D307 (2010)]; 및 [Adolf-Bryfogle J. et al., Nucleic Acids Res., 43: D432-D438 (2015)]을 비롯한 선행기술에 공지되어 있다. 본 문단에 인용된 참고문헌의 내용은 본원에 사용하고 하나 이상의 청구범위에 포함될 수 있도록 그 전체가 본원에 참고로 인용된다. 일부 양태에서, 본원에 제공된 CDR 서열은 IMGT 정의에 기초한다. 예를 들어, CDR 서열은 VBASE2 도구(http://www.vbase2.org/vbase2.php, 또한 문헌[Retter I, Althaus HH, Munch R, Muller W: VBASE2, an integrative V gene database. Nucleic Acids Res. 2005 Jan 1; 33 (Database issue): D671-4]을 참고하고, 그 전체가 본원에 참고로 인용됨)에 의해 결정될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "골다공증"은 폐경 전 특발성 골다공증, 폐경 후 골다공증, 폐경기 골다공증, 난소절제술 후 골다공증, 불용성 골다공증, 약물-유도된 골다공증, 흡수 장애로 인한 골다공증, 수술 후 흡수 장애 골다공증 및/또는 노인성 골다공증을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "골감소증"은 폐경 전 특발성 골감소증, 폐경 후 골감소증, 노인성 골감소증, 약물-유도된 골감소증, 불용성 골감소증, 신생아 골감소증 및/또는 감소된 중력에 의해 야기되는 우주비행 골감소증을 지칭한다.
본원에 사용되는 "대사성 골 질환"이라는 용어는 신장 골이영양증, 원발성 및 속발성 부갑상선기능항진증, 가족성 부갑상선기능항진증 증후군, 부갑상선 장애, 골이영양증, 골연골증, 인산과다증을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 용어 "골 괴사"는 골의 무혈성 괴사, 다이빙에 이차적인 무혈성 괴사, 턱의 골 괴사를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "골 손실"은 폐경후 골 손실, 부동화-유도된 골 손실, 무중력-유도된 골 손실, 안면골 손실, 질환 관련 두개골 손실, 질환 관련 턱골 손실, 두개골의 질환 관련 골 손실, 우주여행 관련 골 손실, 글루코코르티코이드-유도된 골 손실, 약물-유도된 골 손실, 장기 이식 관련 골 손실, 신장 이식 관련 골 손실, HIV 관련 골 손실, 성장 호르몬 저하 관련 골 손실, 낭포성 섬유증 관련 골 손실, 화학요법 관련 골 손실, 종양-유도된 골 손실, 암 관련 골 손실, 호르몬 제거 골 손실, 구강 골 손실, 헤파린-유도된 골 손실, 관절염-유도된 골 손실을 비롯한 염증-유도된 골 손실, 또는 a) 양적, 질적 또는 둘 다의 골 손실, 및/또는 b) 골 구조 및 질의 이상과 관련된 기타 질환 또는 병태, 또는 중력 감소로 인한 골 손실을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "불유합" 또는 "골 치유 지연"은 지연 또는 불유합 골절, 고관절 골절, 융합 또는 관절고정술 후 가성관절염, 골용해, 수술후 골용해, 척추 관절고정술 후 불유합, 척추 융합의 강화/가속, 관절 성형술 후 만성 통증을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "골연화증"은 비타민 D-저항성 골연화증, 칼슘 결핍증, 근육감소증, 암 근육감소증, 종양-유도된 골연화증을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "골절"은 비제한적으로 압박 골절, 취약성 골절, 병적 골절, 스트레스 골절, 고관절 골절, 대퇴골 경부 골절, 비정형 고관절 골절, 대퇴 전자간 골절, 신생물성 질환에서의 골절을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "고칼슘혈증"은 악성 종양의 고칼슘혈증, 고칼슘혈증으로 인한 근육병증, 만성 신장 질환에서의 고칼슘혈증을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "다발성 골수종 관련 골 장애"는 다발성 골수종증에서의 다발성 골수종 골 질환 및 오어(ore) 골다공증을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "원발성 골 종양"은 골육종, 골연골종, 골모세포종, 골연골점액종, 파골세포종, 골종, 유골골종, 연골육종, 연골모세포종, 연골점액양 섬유종, 점액성 연골육종, 육종, 유잉 육종, 카포시 육종, 골막육종, 사구체육종, 거대세포 종양, 거대 세포 육종, 거대 세포 혈관 섬유종, 혈관내피 육종, 미분화 육종, 섬유육종, 골 낭종, 동맥류성 골 낭종, 다발성 내분비 종양을 포함한다.
"악성 종양의 골 전이"에 대한 "악성 종양"이라는 용어는 유방암, 폐암, 간암, 난소암, 췌장암, 결장직장암, 위암, 전립선암, 갑상선암, 흉선암을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "염증성 또는 감염성 골 질환"은 골수염, 화농성 골수염, 강직성 척추염을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "골수 또는 혈액 장애 질환"은 백혈병, 악성 림프종, 혈액 악성 종양, 혈액 질환, 골수 질환을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "근골격계 희귀 질환"은 골형성 부전증, 알버스-쇤베르그병(Albers-Schonberg disease), 경골의 선천성 가관절증, 내연골종증, 섬유성 이형성증, 고셔병(Gaucher's Disease), 마판 증후군(Marfan's syndrome), 다발성 유전성 외이종증, 신경섬유종증, 골형성 부전증, 골석화증, 골형성증, 경화성 병변, 가성관절증, 멜로헌골증(melorheostosis), 소아 관절염, 지중해빈혈(thalassemia), 점액다당류증, 터너 증후군, 파운 증후군(Pown Syndrome), 클라인펠터 증후군, 나병, 페르테스병(Perthes' Disease), 청소년기 특발성 척추측만증, 윈체스터 증후군, 멘케스병(Menkes Disease), 허혈성 골 질환(예컨대, 레그-칼브-페르트병(Legg-Calve-Perthes disease), 국소 이동성 골다공증), 특발성 영아 고칼슘혈증, 말단비대증, 성선기능저하증, 올브라이트-맥큔-스텐버그 증후군(Albright-McCune-Sternberg syndrome), 알루미늄 골 질환, 카무라티-엔겔만병(Camurati-Engelmann disease), 골화석증 및 영아 신경축삭 이영양증, 이상골경화증(Dysosteosclerosis), 피크노디소스토증, 고햄-스타우트 증후군(Gorham-Stout syndrome), 낭성 혈관종증, 파제트병, 소아 파제트병, 골다공증-눈피부-저색소침착 증후군, 고전적 또는 비정형 낭포성 섬유증의 골다공증, 굽은 경골-요골 기형-골감소증-골절, X-연관 저인산성 골연화증, 가족성 팽창성 골용해증, 골형성증, 흑색조직증, 두개종단 이형성증, 골다공증-위신경교종 증후군, 클레이도두개 이형성증(Cleidocranial dysplasia), 하지두-체니 증후군(Hajdu-Cheney syndrome), 윈체스터-토르그 증후군, 콜-카펜터 증후군, 인산저하증, 유전성 과인산증, 진행성 골화 섬유이형성증, 가족성 저칼슘뇨성 고칼슘혈증, 가성부갑상선기능저하증, 말단 이형성증, 에이켄 증후군(Eiken syndrome), 다발성 연골종증, 비타민 D 하이드록실화-결핍 구루병, 저인산혈증 구루병을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "연골 관련 장애"는 연골종증, 연골이형성증, 연골이영양성 근긴장증, 피질주위 연골종, 무릎 연골 파열, 골관절염, 골연골이영양증을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 용어 "근육 관련 장애"는 근육감소증 및 암 근육감소증을 포함한다.
"골 또는 관절 수술 후 치유 촉진"에서 사용되는 "수술"이라는 용어는 정형 외과 시술, 치과 시술, 임플란트 수술, 관절 교체, 관절 보존 수술, 신연 골형성, 골 연장, 골 이식, 골 미용 수술 및 골 복구, 예컨대 골절 치유, 불유합 치유, 지연 유합 치유 및 안면 재건을 지칭한다.
Figure pct00001
"카밧에서와 같은 가변 도메인 잔기 넘버링" 또는 "카밧에서와 같은 아미노산 위치 넘버링"이라는 표현 및 이의 변형은 상기 문헌[Kabat et al.]에서의 항체 편집(compilation)의 중쇄 가변 도메인 또는 경쇄 가변 도메인에 사용되는 넘버링 시스템을 지칭한다. 이러한 넘버링 시스템을 사용하여 실제 선형 아미노산 서열은 가변 도메인의 초가변 영역(HVR) 또는 FR의 단축 또는 삽입에 해당하는 더 적거나 추가의 아미노산을 포함할 수 있다. 예를 들어, 중쇄 가변 도메인은 H2의 잔기 52 후의 단일 아미노산 삽입(카밧에 따른 잔기 52a) 및 중쇄 FR 잔기 82 후의 삽입된 잔기(예를 들어, 카밧에 따른 잔기 82a, 82b 및 82c 등)를 포함할 수 있다. 잔기의 카밧 넘버링은 소정 항체에 대해, "표준" 카밧 넘버링된 서열에 의한 상기 항체의 서열의 상동성의 영역에서의 정렬에 의해 결정될 수 있다.
본원에서 달리 나타내지 않는 한, 면역글로불린 중쇄 내의 잔기의 번호는 상기 문헌[Kabat et al.]에서와 같은 EU 색인의 번호이다. "카밧에서와 같은 EU 색인"은 인간 IgG1 EU 항체의 잔기 넘버링을 지칭한다.
"프레임워크" 또는 "FR" 잔기는 본원에 정의된 CDR 잔기 이외의 가변 도메인 잔기이다.
비인간(예를 들어, 설치류) 항체의 "인간화" 형태는 비인간 항체로부터 유래된 최소 서열을 함유하는 키메라 항체이다. 대부분의 경우 인간화 항체는 수용자의 초가변 영역(HVR)의 잔기가 원하는 항체 특이성, 친화도 및 능력을 갖는 비인간 종(공여자 항체), 예컨대 마우스, 래트, 토끼 또는 비인간 영장류의 초가변 영역으로부터의 잔기로 대체된 인간 면역글로불린(수용자 항체)이다. 어떤 경우에는 인간 면역글로불린의 프레임워크 영역(FR) 잔기가 상응하는 비인간 잔기로 대체된다. 또한, 인간화 항체는 수용자 항체 또는 공여자 항체에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이러한 변형은 항체 성능을 더욱 개선하기 위해 이루어진다. 일반적으로 인간화 항체는 하나 이상, 전형적으로 2개의 가변 도메인의 실질적인 전부를 포함할 것이고, 이때 초가변 루프의 전부 또는 실질적인 전부는 비-인간 면역글로불린의 것에 상응하고 실질적으로 FR의 전부 또는 실질적인 전부는 인간 면역글로불린 서열의 것이다. 인간화 항체는 또한 임의적으로 면역글로불린 불변 영역(Fc)의 적어도 일부, 전형적으로 인간 면역글로불린의 적어도 일부를 포함할 것이다. 더 자세한 내용은 문헌[Jones et al., Nature 321:522-525 (1986)]; [Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988)]; 및 [Presta, Curr . Op. Struct . Biol. 2:593-596 (1992)]을 참고한다.
"인간 항체"는 인간에 의해 생성된 항체의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 보유하고/하거나 본원에 개시된 인간 항체를 제조하는 임의의 기술을 사용하여 제조된 항체이다. 인간 항체의 이러한 정의는 특히 비인간 항원 결합 잔기를 포함하는 인간화 항체를 제외한다. 인간 항체는 파지-디스플레이 라이브러리를 포함하는 당업계에 공지된 다양한 기술을 사용하여 생성될 수 있다(문헌[Hoogenboom and Winter, J. Mol . Biol ., 227:381 (1991)]; [Marks et al., J. Mol . Biol ., 222:581 (1991)]). 인간 단클론 항체의 제조에 또한 이용가능한 방법은 문헌[Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985)]; [Boerner et al., J. Immunol ., 147(1):86-95 (1991)]에 기재되어 있다. 또한 문헌[Dijk and van de Winkel, Curr . Opin . Pharmacol ., 5: 368-74 (2001)]을 참고한다. 인간 항체는, 항원 도전에 반응하여 항체를 생성하도록 변형되었지만 그의 내인성 유전자좌가 불능화되어 있는 유전자이식 동물, 예를 들어 면역화된 제노마우스(xenomouse)(XENOMOUSETM 기술에 대해, 예를 들어, US 6,075,181 및 US 6,150,584 참고)에 항원을 투여함으로써 제조될 수 있다. 또한, 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 인간 항체에 대해 문헌[Li et al., Proc . Natl . Acad . Sci . USA, 103:3557-3562 (2006)]을 참고한다.
본원에서 확인된 폴리펩티드 및 항체 서열에 대한 "퍼센트(%) 아미노산 서열 동일성" 또는 "상동성"은, 서열 동일성의 일부로서 임의의 보존적 치환을 고려하여 서열을 정렬한 후, 비교되는 폴리펩티드 내의 아미노산 잔기와 동일한 후보 서열 내의 아미노산 잔기의 백분율로 정의된다. 퍼센트 아미노산 서열 동일성을 결정하기 위한 목적을 위한 정렬은, 예를 들어 BLAST, BLAST-2, ALIGN, Megalign(DNASTAR) 또는 MUSCLE 소프트웨어와 같은 공개적으로 이용가능한 컴퓨터 소프트웨어를 사용하여 당업계의 기술 범위 내에서 다양한 방식으로 달성될 수 있다. 당업자는 정렬을 측정하기 위한 적절한 매개변수를 결정할 수 있고, 이는 비교되는 서열의 전장에 걸쳐 최대 정렬을 달성하는 데 필요한 모든 알고리즘을 포함한다. 그러나, 본원의 목적을 위해, % 아미노산 서열 동일성 값은 서열 비교 컴퓨터 프로그램 MUSCLE을 사용하여 생성된다(문헌[Edgar, R.C., Nucleic Acids Research 32(5):1792-1797, 2004]; [Edgar, R.C., BMC Bioinformatics 5(1):113, 2004]).
"상동성"은 2개의 폴리펩티드 사이 또는 2개의 핵산 분자 사이의 서열 유사성 또는 서열 동일성을 지칭한다. 2개의 비교된 서열 둘 다에서 위치가 동일한 염기 또는 아미노산 단량체 서브유닛에 의해 점유될 때, 예를 들어, 2개의 DNA 분자 각각의 위치가 아데닌에 의해 점유된다면, 분자는 그 위치에서 상동성이다. 2개의 서열 사이의 상동성 백분율은 100을 곱한 비교된 위치의 수로 나눈 2개의 서열에 의해 공유된 일치 또는 상동성 위치의 수의 함수이다. 예를 들어, 2개의 서열에서 10개 중 6개의 위치가 일치하거나 상동성이면, 두 서열은 60% 상동성이다. 예를 들어, DNA 서열 ATTGCC 및 TATGGC는 50% 상동성을 공유한다. 일반적으로 최대 상동성을 제공하도록 2개의 서열이 정렬될 때 비교가 이루어진다.
용어 "불변 도메인"은 항원 결합 부위를 함유하는 가변 도메인인 면역글로불린의 다른 부분에 비해 더 보존된 아미노산 서열을 갖는 면역글로불린 분자의 부분을 지칭한다. 불변 도메인은 중쇄의 CH1, CH2 및 CH3 도메인(통칭하여 CH)과 경쇄의 CHL(또는 CL) 도메인을 포함한다.
모든 포유동물 종의 항체(면역글로불린)의 "경쇄"는 불변 도메인의 아미노산 서열을 기준으로 카파("κ") 및 람다("λ")로 지칭되는 두 가지 명확하게 구별되는 유형 중 하나로 지정될 수 있다.
"CH1 도메인"("H1" 도메인의 "C1"이라고도 함)은 일반적으로 대략 아미노산 118에서 대략 아미노산 215(EU 넘버링 시스템)까지 확장된다.
"힌지 영역"은 일반적으로 인간 IgG1의 Glu216 내지 Pro230에 상응하는 IgG 내의 영역으로 정의된다(문헌[Burton, Molec . Immunol .22:161-206 (1985)]). 다른 IgG 아이소타입의 힌지 영역은 중쇄 간 S-S 결합을 형성하는 제1 및 마지막 시스테인 잔기를 동일한 위치에 배치함으로써 IgG1 서열과 정렬될 수 있다.
인간 IgG Fc 영역의 "CH2 도메인"("C2" 도메인이라고도 함)은 일반적으로 대략 아미노산 231에서 대략 아미노산 340으로 확장된다. CH2 도메인은 다른 도메인과 밀접하게 쌍을 이루지 않는다는 점에서 독특하다. 오히려, 2개의 N-연결 분지형 탄수화물 쇄가 온전한 천연 IgG 분자의 2개의 CH2 도메인 사이에 삽입된다. 탄수화물이 도메인-도메인 쌍의 대체물을 제공하고 CH2 도메인을 안정화하는 데 도움이 될 수 있다고 추측되었다. 문헌[Burton, Molec Immunol . 22:161-206 (1985)].
"CH3 도메인"("C3" 도메인으로도 지칭됨)은 Fc 영역에서(즉, 대략 아미노산 잔기 341에서 항체 서열의 C-말단 끝까지, 일반적으로 IgG의 아미노산 잔기 446 또는 447에서) CH2 도메인에 대한 C-말단 잔기의 스트레치를 포함한다.
본원에서 용어 "Fc 영역" 또는 "단편 결정화가능 영역"은 천연 서열 Fc 영역 및 변이체 Fc 영역을 포함하는 면역글로불린 중쇄의 C-말단 영역을 정의하는 데 사용된다. 면역글로불린 중쇄의 Fc 영역의 경계는 다양할 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 일반적으로 Cys226 위치의 아미노산 잔기 또는 Pro230에서 카복실 말단까지 스트레칭되는 것으로 정의된다. Fc 영역의 C-말단 리신(EU 넘버링 시스템에 따른 잔기 447)은, 예를 들어 항체의 생성 또는 정제 동안 또는 항체의 중쇄를 인코딩하는 핵산을 재조합적으로 조작함으로써 제거될 수 있다. 따라서, 온전한 항체의 조성물은 모든 K447 잔기가 제거된 항체 집단, K447 잔기가 제거되지 않은 항체 집단, 및 K447 잔기가 있거나 없는 항체의 혼합물을 갖는 항체 집단을 포함할 수 있다. 본원에 기재된 항체에 사용하기에 적합한 천연 서열 Fc 영역은 인간 IgG1, IgG2(IgG2A, IgG2B), IgG3 및 IgG4를 포함한다.
"Fc 수용체" 또는 "FcR"은 항체의 Fc 영역에 결합하는 수용체를 설명한다. 바람직한 FcR은 천연 서열 인간 FcR이다. 또한, 바람직한 FcR은 IgG 항체(감마 수용체)에 결합하는 것이고 FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII 서브클래스의 수용체, 및 이들 수용체의 대립형질 변이체 및 대안적으로 스플라이싱된 형태를 포함하고, FcγRII 수용체는 FcγRIIA("활성화 수용체") 및 FcγRIIB("억제 수용체")를 포함하고, 이는 주로 그의 세포질 도메인이 상이한 유사한 아미노산 서열을 갖는다. 활성화 수용체 FcγRIIA는 세포질 도메인에 면역수용체 티로신 기반 활성화 모티프(ITAM)를 포함한다. 억제 수용체 FcγRIIB는 세포질 도메인에 면역수용체 티로신 기반 억제 모티프(ITIM)를 포함한다(문헌[M. Daeron, Annu . Rev. Immunol . 15:203-234 (1997) 참고]). FcR은 문헌[Ravetch and Kinet, Annu . Rev. Immunol . 9: 457-92 (1991)]; [Capel et al., Immunomethods 4: 25-34 (1994)]; 및 [de Haas et al., J. Lab. Clin. Med . 126: 330-41 (1995)]에서 리뷰된다. 추후 확인될 FcR을 포함하는 다른 FcR은 본원에서 "FcR"이라는 용어에 포함된다.
본원에 사용된 용어 "에피토프"는 항체 또는 항체 모이어티가 결합하는 항원 상의 원자 또는 아미노산의 특정한 기를 지칭한다. 2개의 항체 또는 항체 모이어티는 항원에 대해 경쟁적 결합을 나타내는 경우 항원 내의 동일한 에피토프에 결합할 수 있다.
본원에 사용되는 바와 같이, 등몰 농도의 제1 항체 또는 이의 단편의 존재 시, 상기 제1 항체 또는 이의 단편이 제2 항체 또는 이의 단편의 표적 항원 결합을 적어도 약 50%(예를 들어, 적어도 약 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)만큼 억제할 때, 제1 항체 또는 이의 단편은 표적 항원에 대한 결합에 대해 제2 항체 또는 이의 단편과 "경쟁"하고, 이의 역도 마찬가지이다. 항체의 교차 경쟁에 기초한 "비닝(binning)" 항체를 위한 고출력 공정은 PCT 공보 WO 03/48731에 기재되어 있다.
본원에 사용된 용어 "특이적으로 결합하다", "특이적으로 인식하는" 및 "~에 특이적이다"는 표적과 항체 또는 항체 모이어티 사이의 결합과 같은 측정가능하고 재현가능한 상호작용을 지칭하고, 생물학적 분자를 포함하여 이질적인 분자 집단이 존재하는 경우의 표적의 존재를 결정한다. 예를 들어, 표적(에피토프일 수 있음)을 특이적으로 인식하는 항체 또는 항체 모이어티는 이러한 표적에 다른 표적에 대한 결합보다 더 큰 친화도, 결합력, 더 큰 용이성 및/또는 더 긴 기간으로 결합하는 항체 또는 항체 모이어티다. 일부 양태에서, 관련되지 않은 표적에 대한 항체의 결합 정도는, 예를 들어 방사면역분석(RIA)에 의해 측정 시 표적에 대한 항체의 결합의 약 10% 미만이다. 일부 양태에서, 표적에 특이적으로 결합하는 항체는 ≤ 10-5 M, ≤ 10-6 M, ≤ 10-7 M, ≤ 10-8 M, ≤ 10-9 M, ≤ 10-10 M, ≤ 10-11 M, 또는 ≤ 10-12 M의 해리 상수(KD)를 갖는다. 일부 양태에서, 항체는 상이한 종으로부터의 단백질 중에서 보존된 단백질 상의 에피토프에 특이적으로 결합한다. 일부 양태에서, 특이적 결합은 배타적 결합을 포함할 수 있지만 필요로 하지는 않는다. 항체 또는 항원 결합 도메인의 결합 특이성은 당업계에 공지된 방법에 의해 실험적으로 측정될 수 있다. 이러한 방법은 웨스턴 블롯, ELISA-, RIA-, ECL-, IRMA-, EIA-, BLI-, BIACORETM-시험 및 펩티드 스캔을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
"단리된" 항체(또는 구축물)는 생성 환경(예컨대, 천연 또는 재조합)의 구성 요소로부터 식별, 분리 및/또는 회수된 항체이다. 바람직하게는, 단리된 폴리펩티드는 그의 생성 환경으로부터의 모든 다른 구성 요소과 회합되지 않는다.
본원에 기재된 구축물, 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 인코딩하는 "단리된" 핵산 분자는 그것이 생성되는 환경과 일반적으로 관련된 하나 이상의 오염 핵산 분자로부터 식별되고 분리되는 핵산 분자이다. 바람직하게는, 단리된 핵산은 생성 환경과 관련된 모든 구성 요소와 관련이 없다. 본원에 기재된 폴리펩티드 및 항체를 인코딩하는 단리된 핵산 분자는 자연에서 발견되는 형태 또는 설정 이외의 형태이다. 따라서, 단리된 핵산 분자는 세포에 자연적으로 존재하는 본원에 기재된 폴리펩티드 및 항체를 인코딩하는 핵산과 구별된다. 단리된 핵산은 일반적으로 핵산 분자를 포함하는 세포에 포함된 핵산 분자를 포함하지만, 핵산 분자는 염색체 외부에, 또는 천연 염색체 위치와 상이한 염색체 위치에 존재한다.
핵산은 다른 핵산 서열과 기능적 관계에 있을 때 "작동가능하게 연결된" 것이다. 예를 들어, 전서열 또는 분비 리더(secretory leader)에 대한 DNA는 폴리펩티드의 분비에 참여하는 전단백질(preprotein)로 발현되는 경우 폴리펩티드에 대한 DNA에 작동가능하게 연결되거나; 프로모터 또는 인핸서는 서열의 전사에 영향을 미치는 경우 코딩 서열에 작동가능하게 연결되거나; 리보솜 결합 부위는 번역을 용이하게 하도록 위치하는 경우 코딩 서열에 작동가능하게 연결된 것이다. 일반적으로, "작동가능하게 연결된"은 연결되는 DNA 서열이 연속적이고, 분비 리더의 경우 연속적이고 리딩 프레임 내에 있음을 지칭한다. 그러나, 인핸서는 연속적일 필요는 없다. 연결은 편리한 제한 부위에서 결찰을 통해 이루어진다. 해당 부위가 존재하지 않는 경우, 합성 올리고뉴클레오티드 어댑터(adaptor) 또는 링커는 통상적인 실시에 따라 사용된다.
본원에 사용된 용어 "벡터"는 그것이 연결된 또 다른 핵산을 증식시킬 수 있는 핵산 분자를 지칭한다. 이러한 용어는 벡터가 도입된 숙주 세포의 게놈에 통합된 벡터뿐만 아니라 자가 복제 핵산 구조로서의 벡터를 포함한다. 특정 벡터는 작동가능하게 연결된 핵산의 발현을 지시할 수 있다. 이러한 벡터는 본원에서 "발현 벡터"로 지칭된다.
본원에 사용된 용어 "형질감염된" 또는 "형질전환된" 또는 "형질도입된"은 외인성 핵산이 숙주 세포로 전달 또는 도입되는 과정을 지칭한다. "형질감염된" 또는 "형질전환된" 또는 "형질도입된" 세포는 외인성 핵산으로 형질감염, 형질전환 또는 형질도입된 세포이다. 세포는 1차 대상 세포 및 그 자손을 포함한다.
"숙주 세포", "숙주 세포주" 및 "숙주 세포 배양"이라는 용어는 상호 교환적으로 사용되고 이러한 세포의 자손을 포함하여 외인성 핵산이 도입된 세포를 지칭한다. 숙주 세포는 "형질전환체" 및 "형질전환된 세포"를 포함하고, 이는 계대의 수에 관계없이 1차 형질전환된 세포 및 그로부터 유래된 자손을 포함한다. 자손은 핵산 함량이 부모 세포와 완전히 동일하지 않을 수 있고 돌연변이를 포함할 수 있다. 원래 형질전환된 세포에서 스크리닝되거나 선택된 것과 동일한 기능 또는 생물학적 활성을 갖는 돌연변이 자손이 여기에 포함된다.
본원에 사용되는 "치료" 또는 "치료하는"은 임상 결과를 포함하여 유익하거나 원하는 결과를 얻기 위한 접근법이다. 본원의 목적을 위해 유익하거나 원하는 임상 결과는 하기 중 하나 이상을 포함하지만 이에 제한되지 않는다: 질환으로 인한 하나 이상의 증상 완화, 질환 정도 감소, 질환 안정화, 질환의 확산의 예방 또는 지연, 질환의 재발 예방 또는 지연, 질환의 진행의 지연 또는 둔화, 질환 상태의 개선, 질환의 관해(부분 또는 전체) 제공, 질환을 치료하는 데 요구되는 하나 이상의 다른 약물의 용량 감소, 질환 진행 지연, 삶의 질 증가 또는 향상, 체중 증가 및/또는 생존 연장. 본원의 방법은 이러한 치료 측면 중 어느 하나 이상을 고려한다.
용어 "억제" 또는 "억제하다"는 임의의 표현형 특성의 감소 또는 중지, 또는 이러한 특성의 발생률, 정도 또는 가능성의 감소 또는 중지를 지칭한다. "감소시키다" 또는 "억제하다"는 기준과 비교하여 활성, 기능 및/또는 양을 경감, 감소 또는 정지시키는 것이다. 특정 양태에서, "감소시키다" 또는 "억제하다"는 20% 이상의 전체 감소를 야기하는 능력을 지칭한다. 다른 양태에서, "감소시키다" 또는 "억제하다"는 전체 감소를 50% 이상 유발하는 능력을 지칭한다. 또 다른 양태에서, "감소시키다" 또는 "억제하다"는 75%, 85%, 90%, 95% 또는 그 이상의 전반적인 감소를 유발하는 능력을 지칭한다.
본원에서 사용된 "기준"은 비교 목적으로 사용되는 모든 샘플, 표준 또는 수준을 나타낸다. 건강한 및/또는 질환에 걸리지 않은 샘플에서 기준이 수득될 수 있다. 일부 예에서, 기준은 처리되지 않은 샘플에서 수득될 수 있다. 일부 예에서, 질환에 걸리지 않았거나 치료되지 않은 개체의 샘플에서 기준을 수득한다. 일부 예에서, 개체 또는 환자가 아닌 한 명 이상의 건강한 개체로부터 기준을 수득한다.
본원에 사용된 "질환의 발달 지연"은 질환의 발달을 지연, 방해, 둔화, 지체, 안정화, 억제 및/또는 연기하는 것을 지칭한다. 이러한 지연은 질환의 병력 및/또는 치료받는 개체에 따라 다양한 기간일 수 있다. 당업자에게 명백한 바와 같이, 충분하거나 현저한 지연은 사실상 개체가 질환을 발병하지 않는다는 점에서 예방을 포함할 수 있다.
본원에 사용되는 "예방"은 질환에 걸리기 쉬울 수 있지만 아직 질환으로 진단되지 않은 개체에서 질환의 발생 또는 재발에 대한 예방을 제공하는 것을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 기능 또는 활성을 "억제"하는 것은 관심 조건 또는 매개변수를 제외한 다른 동일한 조건과 비교할 때, 또는 대안적으로 다른 조건과 비교할 때 기능 또는 활성을 감소시키는 것이다. 예를 들어, 종양 성장을 억제하는 항체는 항체가 없을 때의 종양 성장 속도에 비해 종양 성장 속도를 감소시킨다.
용어 "대상", "개체" 및 "환자"는 인간, 소, 말, 고양이, 개, 설치류 또는 영장류를 포함하나 이에 제한되지 않는 포유동물을 지칭하기 위해 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 일부 양태에서, 개체는 인간이다.
제제의 "효과량"은 원하는 치료적 또는 예방적 결과를 달성하기 위해 필요한 기간 동안 투여량에서 효과적인 양을 지칭한다. 특정 투여량은 하기 중 하나 이상에 따라 달라질 수 있다: 선택한 특정 제제, 따라야 할 투여 요법, 다른 화합물과 함께 투여할지 여부, 투여 시기, 영상화할 조직, 및 운반되는 물리적 전달 시스템.
용어 "약학 제형" 및 "약학 조성물"은 활성 성분(들)의 생물학적 활성이 유효하도록 하는 형태이고, 제형이 투여될 개체에게 허용할 수 없을 정도로 유독한 추가 성분을 함유하지 않는 제제를 지칭한다. 이러한 제형은 멸균일 수 있다.
"약학적으로 허용되는 담체"는 개체에게 투여하기 위한 "약학 조성물"을 함께 포함하는 치료제와 함께 사용하기 위한 무독성 고체, 반고체 또는 액체 충전제, 희석제, 캡슐화 물질, 제형 보조제 또는 당업계에 통상적인 담체를 지칭한다. 약학적으로 허용되는 담체는 사용된 용량 및 농도에서 수용자에게 무독성이고 제형의 다른 성분과 호환성이다. 약학적으로 허용되는 담체는 사용되는 제형에 적합하다. 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제는 바람직하게는 독성학적 및 제조 시험의 필수 표준을 충족하고/하거나 미국 식품의약국에서 준비한 비활성 성분 가이드(문헌[the Inactive Ingredient Guide prepared by the U.S. Food and Drug administration])에 포함되어 있다.
"멸균" 제형은 무균이거나 본질적으로 살아있는 미생물 및 그 포자가 없다.
하나 이상의 추가 치료제와 "조합하여" 투여하는 단계는 임의의 순서로 동시(동시 발생) 및 연속적 또는 순차적 투여를 포함한다.
"동시"라는 용어는 본원에서 투여의 적어도 일부가 시간적으로 중첩되거나 하나의 치료제의 투여가 다른 치료제의 투여에 비해 짧은 기간 내에 속하는 2개 이상의 치료제의 투여를 지칭하는 것으로 사용된다. 예를 들어, 2개 이상의 치료제는 약 60분 이하, 예컨대 약 30, 15, 10, 5 또는 1분 중 어느 하나 이하의 시간 간격으로 투여된다.
용어 "순차적으로"는 본원에서 하나 이상의 다른 제제(들)의 투여를 중단한 후에 하나 이상의 제제(들)의 투여가 계속되는 2개 이상의 치료제의 투여를 지칭하는 것으로 사용된다. 예를 들어, 2개 이상의 치료제의 투여는 약 15분 초과, 예컨대 약 20, 30, 40, 50 또는 60분, 1일, 2일, 3일, 1주, 2주, 1개월 또는 그 이상 중 어느 하나의 시간 간격으로 투여된다.
본원에 사용되는 바와 같이, "와 함께"는 또 다른 치료 양식(treatment modality)에 더하는 하나의 치료 양식의 투여를 지칭한다. 이와 같이, "와 함께"는 개체에게 다른 치료 양식을 투여하기 전, 동안 또는 후에 하나의 치료 양식을 투여하는 것을 지칭한다.
용어 "패키지 삽입물"은 치료 제품의 사용에 관한 표시, 용법, 용량, 투여, 병용 요법, 금기 사항 및/또는 경고에 대한 정보를 포함하는 치료 제품의 상업용 패키지에 관례적으로 포함된 지침을 지칭하는 데 사용된다.
"제조품"은 하나 이상의 시약, 예를 들어 질환 또는 장애의 치료를 위한 약제 또는 본원에 기재된 바이오마커를 특이적으로 검출하기 위한 프로브를 포함하는 임의의 제조물(예를 들어, 패키지 또는 용기) 또는 키트이다. 특정 양태에서, 제조물 또는 키트는 본원에 기재된 방법을 수행하기 위한 단위로서 판촉, 배포 또는 판매된다.
본원에 기재된 출원의 양태는 "이루어진" 및/또는 "본질적으로 이루어진" 양태를 포함하는 것으로 이해된다.
본원에서 값 또는 매개변수 "약"에 대한 언급은 그 값 또는 매개변수 자체에 관한 변형을 포함(및 설명)한다. 예를 들어, "약 X"에 대한 설명은 "X"에 대한 설명을 포함한다.
본원에서 "약 X-Y"라는 용어는 "약 X 내지 약 Y"와 동일한 의미를 갖는다.
본원 및 첨부된 청구범위에서 사용된 바와 같이, 단수형은 문맥상 명백하게 달리 지시하지 않는 한 복수 지시대상을 포함한다.
II. 항-스클레로스틴 구축물
본원은 본원에 기재된 바와 같이 스클레로스틴(SOST의 생성물)에 특이적으로 결합하는 항-스클레로스틴 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물을 제공한다.
스클레로스틴은 C-말단 시스테인 매듭 유사(CTCK) 도메인, 및 골형성 단백질(BMP) 길항제의 DAN(신경모세포종에서 차등 스크리닝-선택 유전자 이상) 계열과의 서열 유사성을 갖는 분비된 당단백질이다. 이러한 유전자의 기능 상실 돌연변이는 진행성 골의 과성장을 유발하는 상염색체 열성 질환인 경화증과 관련이 있다. 감소된 스클레로스틴 발현을 유발하는 상기 유전자 하류의 결실은 반 부켐병(van Buchem disease)이라고 하는 보다 가벼운 형태의 장애와 관련이 있다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물이 제공되고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴 상의 에피토프에 결합하고, 상기 에피토프는 서열번호 186에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 스클레로스틴의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, VH는 i) 서열번호 1 내지 4 및 12 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5 내지 8 및 13 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9 내지 11 및 14 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 15 내지 17 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18 및 19 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20 및 21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL은 서열번호 15 또는 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 88의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 22의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 23의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 26의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 27의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 24의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 25의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 36의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 37의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 28의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 29의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 30의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 31의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 32의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 33의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 34의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 35의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 38의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 39의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 40의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 41의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 89의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열번호 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 90의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물이 제공되고, 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하고, 이때
(a) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 22에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 23에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(b) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 24에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 25에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(c) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 26에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 27에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(d) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 28에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 29에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(e) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 30에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 31에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(f) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 32에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 33에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(g) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 34에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 35에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(h) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 36에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 37에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(i) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 38에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 39에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(j) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 40에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 41에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(k) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 87에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 88에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(l) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 87에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 89에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(m) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 87에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 90에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함한다.
일부 양태에서, 구축물은 전장 항체, 이중특이성 항체, 단일쇄 Fv(scFv) 단편, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2, Fv 단편, 다이설파이드 안정화 Fv 단편(dsFv), dsscFv, (dsFv)2, VHH, Fv-Fc 융합체, scFv-Fc 융합체, scFv-Fv 융합체, 디아바디, 트리바디, 및 테트라바디로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이거나 이를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 전장 항체이다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 scFv 또는 dsscFv이다.
일부 양태에서, 상기 기재된 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, 및 이들의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택된 면역글로불린의 Fc 단편을 포함한다. 일부 양태에서, 상기 기재된 항-스클레로스틴 항체 모이어티 또는 전장 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, 및 이들의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택된 면역글로불린의 Fc 단편을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 효과기 기능을 갖는다. 일부 양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 향상된 효과기 기능을 갖는다.
일부 양태에서, 항체 모이어티는 본원에 기재된 임의의 항체 모이어티의 인간화 항체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 항-스클레로스틴 융합 단백질이거나 이를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 다중특이성 항-스클레로스틴 구축물(예컨대, 이중특이성 항체)이거나 이를 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴은 인간 스클레로스틴이다.
a) 항체 친화도
항체 모이어티의 결합 특이성은 당업계에 공지된 방법에 의해 실험적으로 측정될 수 있다. 이러한 방법은 웨스턴 블롯, ELISA-, RIA-, ECL-, IRMA-, EIA-, BLI-, BIACORETM-시험 및 펩티드 스캔을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
일부 양태에서, 항체 모이어티와 스클레로스틴 사이의 결합의 KD는 약 10-7 M 내지 약 10-12 M, 약 10-7 M 내지 약 10-8 M, 약 10-8 M 내지 약 10-9 M, 약 10-9 M 내지 약 10-10 M, 약 10-10 M 내지 약 10-11 M, 약 10-11 M 내지 약 10-12 M, 약 10-7 M 내지 약 10-12 M, 약 10-8 M 내지 약 10-12 M, 약 10-9 M 내지 약 10-12 M, 약 10-10 M 내지 약 10-12 M, 약 10-7 M 내지 약 10-11 M, 약 10-8 M 내지 약 10-11 M, 약 10-9 M 내지 약 10-11 M, 약 10-7 M 내지 약 10-10 M, 약 10-8 M 내지 약 10-10 M, 또는 약 10-7 M 내지 약 10-9 M이다. 일부 양태에서, 항체 모이어티와 스클레로스틴 사이의 결합의 KD는 10-7 M, 10-8 M, 10-9 M, 10-10 M, 10-11 M, 및 10-12 M 중 어느 하나보다 더 강하다. 일부 양태에서, 스클레로스틴은 인간 스클레로스틴이다. 일부 양태에서, 스클레로스틴은 시노몰거스 스클레로스틴이다.
일부 양태에서, 항체 모이어티와 스클레로스틴 사이의 결합의 Kon은 약 103 M-1s-1 내지 약 108 M-1s-1, 약 103 M-1s-1 내지 약 104 M-1s-1, 약 104 M-1s-1 내지 약 105 M-1s-1, 약 105 M-1s-1 내지 약 106 M-1s-1, 약 106 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 또는 약 107 M-1s-1 내지 약 108 M-1s-1이다. 일부 양태에서, 항체 모이어티와 스클레로스틴 사이의 결합의 Kon은 약 103 M-1s-1 내지 약 105 M-1s-1, 약 104 M-1s-1 내지 약 106 M-1s-1, 약 105 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 약 106 M-1s-1 내지 약 108 M-1s-1, 약 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 또는 약 105 M-1s-1 내지 약 108 M-1s-1이다. 일부 양태에서, 항체 모이어티와 스클레로스틴 사이의 결합의 Kon은 약 103 M-1s-1, 104 M-1s-1, 105 M-1s-1, 106 M-1s-1, 107 M-1s-1 또는 108 M-1s-1이다. 일부 양태에서, 스클레로스틴은 인간 스클레로스틴이다. 일부 양태에서, 스클레로스틴은 시노몰거스 스클레로스틴이다.
일부 양태에서, 항체 모이어티와 스클레로스틴 사이의 결합의 Koff는 약 1 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 1 s-1 내지 약 10-2 s-1, 약 10-2 s-1 내지 약 10-3 s-1, 약 10-3 s-1 내지 약 10-4 s-1, 약 10-4 s-1 내지 약 10-5 s-1, 약 10-5 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 1 s-1 내지 약 10-5 s-1, 약 10-2 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 10-3 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 10-4 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 10-2 s-1 내지 약 10-5 s-1, 또는 약 10-3 s-1 내지 약 10-5 s-1이다. 일부 양태에서, 항체 모이어티와 스클레로스틴 사이의 결합의 Koff는 적어도 약 1 s-1, 10-2 s-1, 10-3 s-1, 10-4 s-1, 10-5 s-1 또는 10-6 s-1이다. 일부 양태에서, 스클레로스틴은 인간 스클레로스틴이다. 일부 양태에서, 스클레로스틴은 시노몰거스 스클레로스틴이다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티 또는 항-스클레로스틴 구축물의 결합 친화도는 기존 항-스클레로스틴 항체(예컨대, 로모소주맙(Romosozumab))보다 더 높다(예컨대, 더 작은 KD 값을 가짐).
b) 키메라 또는 인간화 항체
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)은 키메라 항체이다. 특정 키메라 항체는, 예를 들어 US 4,816,567; 및 문헌[Morrison et al., Proc . Natl . Acad . Sci . USA, 81:6851-6855 (1984)]에 기재되어 있다. 일부 양태에서, 키메라 항체는 비-인간 가변 영역(예를 들어, 마우스로부터 유래된 가변 영역) 및 인간 불변 영역을 포함한다. 일부 양태에서, 키메라 항체는 클래스 또는 서브클래스가 모 항체의 클래스 또는 서브클래스에서 변경된 "클래스 전환된(class switched)" 항체이다. 키메라 항체는 그의 항원 결합 단편을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)은 인간화 항체이다. 전형적으로, 비-인간 항체는 모 비-인간 항체의 특이성 및 친화도를 유지하면서 인간에 대한 면역원성을 감소시키기 위해 인간화된다. 일반적으로, 인간화 항체는 HVR, 예를 들어, CDR(또는 이의 일부)이 비인간 항체로부터 유래되고 FR(또는 이의 일부)이 인간 항체 서열로부터 유래되는 하나 이상의 가변 도메인을 포함한다. 인간화 항체는 또한 임의적으로 인간 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 것이다. 일부 양태에서, 인간화 항체의 일부 FR 잔기는 비인간 항체(예를 들어, HVR 잔기가 유래된 항체)로부터의 상응하는 잔기로 치환된다.
인간화 항체 및 이의 제조 방법은, 예를 들어 문헌[Almagro and Fransson, Front. Biosci . 13:1619-1633 (2008)]에 리뷰되어 있고, 예컨대 문헌[Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988)]; [Queen et al., Proc . Nat'l Acad . Sci . USA 86:10029-10033 (1989)]; US 5,821,337, 7,527,791, 6,982,321, 및 7,087,409; 문헌[Kashmiri et al., Methods 36:25-34 (2005)](SDR(a-CDR) 이식을 설명함); [Padlan, Mol . Immunol . 28:489-498 (1991)]("재표면화(resurfacing)"를 설명함); [Dall'Acqua et al., Methods 36:43-60 (2005)]("FR 셔플링(FR shuffling)"을 설명함); 및 문헌[Osbourn et al., Methods 36:61-68 (2005)] 및 [Klimka et al., Br. J. Cancer, 83:252-260 (2000)](FR 셔플링을 위한 "안내되는 선택(guided selection)" 접근법을 설명함)에 추가로 기술된다.
인간화에 사용될 수 있는 인간 프레임워크 영역은 비제한적으로 하기를 포함한다: "최적합(best-fit)" 방법을 사용하여 선택된 프레임워크 영역(예를 들어, 문헌[Sims et al. J. Immunol . 151:2296 (1993)] 참고); 경쇄 또는 중쇄 가변 영역의 특정 서브그룹의 인간 항체의 공통 서열로부터 유도된 프레임워크 영역(예를 들어, 문헌[Carter et al. Proc . Natl . Acad . Sci . USA, 89:4285 (1992)]; 및 [Presta et al. J. Immunol ., 151:2623 (1993)] 참고); 인간 성숙(체세포 돌연변이) 프레임워크 영역 또는 인간 생식계열 프레임워크 영역(예를 들어, 문헌[Almagro and Fransson, Front. Biosci . 13:1619-1633 (2008)] 참고); 및 스크리닝 FR 라이브러리로부터 유도된 프레임워크 영역(예를 들어, 문헌[Baca et al., J. Biol . Chem . 272:10678-10684 (1997)] 및 [Rosok et al., J. Biol. Chem. 271:22611-22618 (1996)] 참고).
마우스 유래 항체의 인간화는 일반적이고 일상적으로 사용되는 기술인 것으로 이해된다. 따라서, 서열표에 개시된 임의의 및 모든 항-스클레로스틴 항체의 인간화 형식이 전임상 또는 임상 환경에서 사용될 수 있음이 이해된다. 참조된 항-스클레로스틴 항체 또는 이의 항원 결합 영역의 인간화 형식이 이러한 전임상 또는 임상 환경에서 사용되는 경우, 인간화 형식은 인간화되지 않은 원본 형식과 동일하거나 유사한 생물학적 활성 및 프로필을 가질 것으로 예상된다.
c) 인간 항체
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)은 인간 항체(인간 도메인 항체 또는 인간 dAb로 공지됨)이다. 인간 항체는 당업계에 공지된 다양한 기술을 사용하여 생성될 수 있다. 인간 항체는 문헌[van Dijk and van de Winkel, Curr . Opin . Pharmacol . 5: 368-74 (2001)], [Lonberg, Curr . Opin . Immunol . 20:450-459 (2008)], 및 문헌[Chen, Mol . Immunol. 47(4):912-21 (2010)]에 일반적으로 기재되어 있다. 완전 인간 단일 도메인 항체(또는 sdAb)를 생성할 수 있는 유전자이식 마우스 또는 래트는 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, US 2009/0307787 A1, US 8,754,287, US 2015/0289489 A1, US 2010/0122358 A1, 및 WO 2004/049794를 참고한다.
인간 항체(예를 들어, 인간 dAb)는 항원 공격에 반응하여 온전한 인간 항체 또는 인간 가변 영역을 가진 온전한 항체를 생성하도록 변형된 유전자이식 동물에게 면역원을 투여함으로써 제조될 수 있다. 이러한 동물은 일반적으로 내인성 면역글로불린 유전자좌를 대체하거나 염색체 외부에 존재하거나 동물의 염색체에 무작위로 통합된, 인간 면역글로불린 유전자좌의 전부 또는 일부를 포함한다. 이러한 유전자이식 마우스에서, 내인성 면역글로불린 유전자좌는 일반적으로 불활성화되어 있다. 유전자이식 동물로부터 인간 항체를 수득하는 방법에 대한 리뷰를 위해 문헌[Lonberg, Nat. Biotech. 23:1117-1125 (2005)]을 참고한다. 또한, 예를 들어, XENOMOUSETM 기술을 설명하는 US 6,075,181 및 6,150,584; HuMab® 기술을 설명하는 US 5,770,429; K-M MOUSE® 기술을 설명하는 US 7,041,870 및 VelociMouse® 기술 설명하는 US 2007/0061900을 참고한다. 이러한 동물에 의해 생성된 온전한 항체로부터의 인간 가변 영역은, 예를 들어 상이한 인간 불변 영역과 조합함으로써 추가로 변형될 수 있다.
인간 항체(예를 들어, 인간 dAb)는 또한 하이브리도마 기반 방법으로 제조될 수 있다. 인간 단클론 항체의 생성을 위한 인간 골수종 및 마우스-인간 이종골수종 세포주가 기재되어 있다(예를 들어, 문헌[Kozbor J. Immunol ., 133: 3001 (1984)]; [Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)]; 및 [Boerner et al., J. Immunol., 147: 86 (1991)] 참고). 또한, 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 인간 항체는 문헌[Li et al., Proc . Natl . Acad . Sci . USA, 103:3557-3562 (2006)]에 기재되어 있다. 추가 방법은, 예를 들어 US 7,189,826(하이브리도마 세포주로부터 단클론 인간 IgM 항체의 생성을 설명함) 및 문헌[Ni, Xiandai Mianyixue, 26(4):265-268 (2006)](인간-인간 IgM 하이브리도마 항체를 설명함)에 설명된 방법을 포함한다. 또한, 인간 하이브리도마 기술(트리오마(Trioma) 기술)은 문헌[Vollmers and Brandlein, Histology and Histopathology, 20(3):927-937 (2005)] 및 [Vollmers and Brandlein, Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology, 27(3):185-91 (2005)]에 기재되어 있다.
인간 항체(예를 들어, 인간 dAb)는 또한 인간 유래 파지 디스플레이 라이브러리로부터 선택된 Fv 클론 가변 도메인 서열을 단리함으로써 생성될 수 있다. 이어서, 이러한 가변 도메인 서열은 원하는 인간 불변 도메인과 조합될 수 있다. 항체 라이브러리에서 인간 항체를 선택하는 기술은 하기 설명되어 있다.
d) 라이브러리 유래 항체
본원에 기재된 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 원하는 활성을 갖는 항체에 대한 조합 라이브러리를 스크리닝함으로써 단리될 수 있다. 예를 들어, 파지 디스플레이 라이브러리를 생성하고 원하는 결합 특성을 보유하는 항체에 대해 이러한 라이브러리를 스크리닝하기 위한 다양한 방법이 당업계에 공지되어 있다. 이러한 방법은, 예를 들어 문헌[Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, 2001)]에 리뷰되어 있고, 예를 들어 문헌[McCafferty et al., Nature 348:552-554]; [Clackson et al., Nature 352: 624-628 (1991)]; [Marks et al., J. Mol . Biol . 222: 581-597 (1992)]; [Marks and Bradbury, in Methods in Molecular Biology 248:161-175 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003)]; [Sidhu et al., J. Mol . Biol . 338(2): 299-310 (2004)]; [Lee et al., J. Mol . Biol . 340(5): 1073-1093 (2004)]; [Fellouse, Proc . Natl . Acad . Sci . USA 101(34): 12467-12472 (2004)]; 및 [Lee et al., J. Immunol . Methods 284(1-2): 119-132(2004)]에 추가로 기재되어 있다. 단일 도메인 항체 라이브러리를 구축하는 방법은, 예를 들어 US 7,371,849에 기재되어 있다.
특정 파지 디스플레이 방법에서, VH 및 VL 유전자의 레퍼토리는 중합체라제 연쇄 반응(PCR)에 의해 개별적으로 클로닝되고 파지 라이브러리에서 무작위로 재조합되고, 이는 문헌[Winter et al., Ann. Rev. Immunol ., 12: 433-455 (1994)]에 기재된 항원-결합 파지에 대해 스크리닝될 수 있다. 파지는 일반적으로 scFv 단편 또는 Fab 단편으로서 항체 단편을 나타낸다. 면역화된 공급원으로부터의 라이브러리는 하이브리도마를 구성할 필요 없이 면역원에 대한 고친화도 항체를 제공한다. 다르게는, 나이브(naive) 레퍼토리는, 문헌[Griffiths et al., EMBO J, 12: 725-734 (1993)]에 의해 기재된 바와 같이 임의의 면역화 없이, (예컨대, 인간으로부터) 클로닝되어 광범위한 비-자가 항체 및 자가 항원에 대한 항체의 단일 공급원을 제공할 수 있다. 최종적으로, 나이브 라이브러리는 또한 줄기 세포로부터 V-유전자 분절을 클로닝함, 및 무작위 서열을 함유하는 PCR 프라이머를 사용하여 고가변성 CDR3 영역을 인코딩하고 시험관내 재정렬을 성취함으로써 합성적으로 제조될 수 있고, 이는 문헌[Hoogenboom and Winter, J. Mol . Biol ., 227: 381-388 (1992)]에 기재되어 있다. 인간 항체 파지 라이브러리를 설명하는 특허 공개는, 예를 들어 하기를 포함한다: US 2005/0079574, 2005/0119455, 2005/0266000, 2007/0117126, 2007/0160598, 2007/0237764, 2007/0292936, 및 2009/0002360.
인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체 또는 항체 단편은 본원에서 인간 항체 또는 인간 항체 단편으로 간주된다.
e) 치환, 삽입, 삭제 및 변이체
일부 양태에서, 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 항체 변이체가 제공된다. 치환 돌연변이유발을 위한 관심 부위에는 HVR(또는 CDR) 및 FR이 포함된다. 보존적 치환은 "바람직한 치환"이라는 표제로 표 2에 제시되어 있다. 보다 실질적인 변화는 표 2에서 "예시적인 치환"이라는 표제하에 제공되고, 이는 아미노산 측쇄 클래스와 관련하여 하기 추가로 설명된다. 아미노산 치환은 관심 항체에 도입될 수 있고 생성물은 원하는 활성, 예를 들어 유지/향상된 항원 결합, 감소된 면역원성 또는 개선된 ADCC 또는 CDC에 대해 스크리닝될 수 있다.
아미노산 치환
원래 잔기 예시적인 치환 바람직한 치환
Ala (A) Val; Leu; Ile Val
Arg (R) Lys; Gln; Asn Lys
Asn (N) Gln; His; Asp, Lys; Arg Gln
Asp (D) Glu; Asn Glu
Cys (C) Ser; Ala Ser
Gln (Q) Asn; Glu Asn
Glu (E) Asp; Gln Asp
Gly (G) Ala Ala
His (H) Asn; Gln; Lys; Arg Arg
Ile (I) Leu; Val; Met; Ala; Phe; 노르류신 Leu
Leu (L) 노르류신; Ile; Val; Met; Ala; Phe Ile
Lys (K) Arg; Gln; Asn Arg
Met (M) Leu; Phe; Ile Leu
Phe (F) Trp; Leu; Val; Ile; Ala; Tyr Tyr
Pro (P) Ala Ala
Ser (S) Thr Thr
Thr (T) Val; Ser Ser
Trp (W) Tyr; Phe Tyr
Tyr (Y) Trp; Phe; Thr; Ser Phe
Val (V) Ile; Leu; Met; Phe; Ala; 노르류신 Leu
아미노산은 일반적인 측쇄 특성에 따라 그룹화될 수 있다: (1) 소수성: 노르류신, Met, Ala, Val, Leu, Ile; (2) 중성 친수성: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln; (3) 산성: Asp, Glu; (4) 염기성: His, Lys, Arg; (5) 쇄 배향에 영향을 미치는 잔기: Gly, Pro; 및 (6) 방향족: Trp, Tyr, Phe.
비보존적 치환은 이러한 클래스 중 하나의 구성원을 다른 클래스로 교환하는 것을 수반할 것이다.
한 유형의 치환 변이체는 모 항체(예를 들어, 인간화 또는 인간 항체)의 하나 이상의 초가변 영역 잔기를 치환하는 것을 포함한다. 일반적으로, 추가 연구를 위해 선택된 결과 변이체(들)는 모 항체에 비해 특정 생물학적 특성(예컨대, 증가된 친화도, 감소된 면역원성)에서 변형(예컨대, 개선)을 가질 것이고/이거나 모 항체의 특정 생물학적 특성을 실질적으로 유지할 것이다. 예시적인 치환 변이체는, 예를 들어 본원에 기재된 파지 디스플레이-기반 친화도 성숙 기술을 사용하여 편리하게 생성될 수 있는 친화도 성숙 항체이다. 간략히 설명하면, 하나 이상의 HVR 잔기가 돌연변이되고 변이체 항체가 파지에 표시되고 특정 생물학적 활성(예를 들어, 결합 친화도)에 대해 스크리닝된다.
변경(예컨대, 치환)은, 예를 들어 항체 친화도를 개선하기 위해 HVR에서 수행될 수 있다. 이러한 변경은 HVR "핫스팟", 즉 체세포 성숙 과정 동안 높은 빈도로 돌연변이를 겪는 코돈에 의해 인코딩된 잔기(예를 들어, 문헌[Chowdhury, Methods Mol. Biol. 207:179-196 (2008)] 참고), 및/또는 결과적인 변이체 VH 또는 VL이 결합 친화도에 대해 시험되는 SDR(a-CDR)에서 수행될 수 있다. 2차 라이브러리로부터의 구성 및 재선택에 의한 친화도 성숙은, 예를 들어 문헌[Hoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, (2001))]에 기재되어 있다. 친화도 성숙의 일부 양태에서, 임의의 다양한 방법(예를 들어, 오류-유발 PCR, 쇄 셔플링 또는 올리고뉴클레오티드-지시 돌연변이유발)에 의해 성숙을 위해 선택된 가변 유전자에 다양성이 도입된다. 그러면 보조 라이브러리가 생성된다. 이어서, 원하는 친화도를 가진 임의의 항체 변이체를 식별하기 위해 라이브러리를 스크리닝한다. 다양성을 도입하는 또 다른 방법은 여러 HVR 잔기(예컨대, 한 번에 4 내지 6개의 잔기)가 무작위로 지정되는 HVR 지정 접근 방식을 포함한다. 항원 결합에 관련된 HVR 잔기는, 예를 들어 알라닌 스캐닝 돌연변이유발 또는 모델링을 사용하여 구체적으로 식별될 수 있다. 특히 CDR-H3 및 CDR-L3은 종종 표적이 된다.
일부 양태에서, 이러한 변경이 항원에 결합하는 항체의 능력을 실질적으로 감소시키지 않는 한, 하나 이상의 HVR 내에서 치환, 삽입 또는 결실이 발생할 수 있다. 예를 들어, 결합 친화도를 실질적으로 감소시키지 않는 보존적 변경(예를 들어, 본원에 제공된 바와 같은 보존적 치환)이 HVR에서 수행될 수 있다. 이러한 변경은 HVR "핫스팟" 또는 CDR 외부에 있을 수 있다.
돌연변이유발의 표적이 될 수 있는 항체의 잔기 또는 영역을 확인하는 유용한 방법은 문헌[Cunningham and Wells (1989) Science, 244:1081-1085]에 기재된 바와 같이 "알라닌 스캐닝 돌연변이유발"이라고 한다. 이러한 방법에서는 잔기 또는 표적 잔기 그룹(예컨대, Arg, Asp, His, Lys 및 Glu와 같은 하전된 잔기)을 식별하고 중성 또는 음전하를 띤 아미노산(예컨대, 알라닌 또는 폴리알라닌)으로 대체하여 항체와 항원의 상호작용이 영향을 받는지 여부를 판정한다. 초기 치환에 대한 기능적 민감성을 나타내는 아미노산 위치에 추가 치환이 도입될 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 항체와 항원 사이의 접점을 식별하기 위한 항원-항체 복합체의 결정 구조. 이러한 접촉 잔기 및 인접 잔기는 치환 후보로서 표적화되거나 제거될 수 있다. 원하는 속성을 포함하는지 여부를 판정하기 위해 변이체가 스크리닝될 수 있다.
아미노산 서열 삽입은 1개의 잔기에서 100개 이상의 잔기를 함유하는 폴리펩티드에 이르는 길이 범위의 아미노- 및/또는 카르복실-말단 융합뿐만 아니라 단일 또는 다중 아미노산 잔기의 서열내 삽입을 포함한다. 말단 삽입의 예는 N-말단 메티오닐 잔기를 갖는 항체를 포함한다. 항체 분자의 다른 삽입 변이체는 항체의 혈청 반감기를 증가시키는 효소(예를 들어, ADEPT를 위해) 또는 폴리펩티드에 대한 항체의 N- 또는 C-말단에 대한 융합을 포함한다.
f) 글리코실화 변이체
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)은 구축물이 글리코실화되는 정도를 증가시키거나 감소시키도록 변경된다. 항체에 대한 글리코실화 부위의 추가 또는 결실은 하나 이상의 글리코실화 부위가 생성되거나 제거되도록 아미노산 서열을 변경함으로써 편리하게 달성될 수 있다.
항체 모이어티가 Fc 영역을 포함하는 경우, 거기에 부착된 탄수화물이 변경될 수 있다. 포유동물 세포에 의해 생성된 천연 항체는 전형적으로 Fc 영역의 CH2 도메인의 Asn297에 N-연결에 의해 일반적으로 부착된 분지형, 바이안테나형(biantennary) 올리고당을 포함한다. 예를 들어, 문헌[Wright et al. TIBTECH 15:26-32 (1997)]을 참고한다. 올리고당은 다양한 탄수화물, 예를 들어 만노스, N-아세틸 글루코사민(GlcNAc), 갈락토스 및 시알산뿐만 아니라 바이안테나형 올리고당 구조의 "줄기"에서 GlcNAc에 부착된 푸코스를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 특정 개선된 특성을 갖는 항체 변이체를 생성하기 위해 항체 모이어티에서 올리고당류의 변형이 수행될 수 있다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)은 Fc 영역에 (직접 또는 간접적으로) 부착된 푸코스가 결여된 탄수화물 구조를 갖는다. 예를 들어, 이러한 항체에서 푸코스의 양은 1% 내지 80%, 1% 내지 65%, 5% 내지 65% 또는 20% 내지 40%일 수 있다. 푸코스의 양은, MALDI-TOF 질량 분석법에 의해 측정 시, 예를 들어, WO 2008/077546에 기재된 바와 같이, Asn 297에 부착된 모든 글리코구조(예를 들어, 복합체, 하이브리드 및 고 만노오스 구조)의 합에 대해 Asn297에서 당 쇄 내의 푸코스의 평균 양을 계산함으로써 판정된다. Asn297은 Fc 영역에서 대략 위치 297에 위치한 아스파라긴 잔기를 지칭하지만(Fc 영역 잔기의 EU 넘버링); Asn297은 또한 위치 297의 약 ±3개의 아미노산 상류 또는 하류, 즉, 항체의 사소한 서열 변이로 인해 위치 294와 300 사이에 위치할 수 있다. 이러한 푸코실화 변이체는 개선된 ADCC 기능을 가질 수 있다. 예를 들어, US 2003/0157108(Presta, L.); US 2004/0093621(Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd)을 참고한다. "탈푸코실화된" 또는 "푸코스-결핍" 항체 변이체와 관련된 공보의 예는 하기를 포함한다: US 2003/0157108; WO 2000/61739; WO 2001/29246; US 2003/0115614; US 2002/0164328; US 2004/0093621; US 2004/0132140; US 2004/0110704; US 2004/0110282; US 2004/0109865; WO 2003/085119; WO 2003/084570; WO 2005/035586; WO 2005/035778; WO 2005/053742; WO 2002/031140; 문헌[Okazaki et al. J. Mol . Biol . 336:1239-1249 (2004)]; [Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng . 87: 614 (2004)]. 탈푸코실화된 항체를 생성할 수 있는 세포주의 예는 단백질 푸코실화가 결핍된 Lec13 CHO 세포(문헌[Ripka et al. Arch. Biochem . Biophys . 249:533-545 (1986)]; US 2003/0157108 A1(Presta, L); 및 WO　2004/056312 A1(Adams et al.), 특히 실시예 11), 및 넉아웃 세포주, 예컨대 알파-1,6-푸코실트랜스퍼라제 유전자, FUT8, 넉아웃 CHO 세포(예컨대, 문헌[Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng . 87: 614 (2004)]; [Kanda, Y. et al., Biotechnol . Bioeng., 94(4):680-688 (2006)]; 및 WO 2003/085107 참고)를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)은, 예를 들어 항체의 Fc 영역에 부착된 바이안테나형 올리고당이 GlcNAc에 의해 양분된, 양분된 올리고당을 갖는다. 이러한 항체 변이체는 감소된 푸코실화 및/또는 개선된 ADCC 기능을 가질 수 있다. 이러한 항체 변이체의 예는, 예를 들어 WO 2003/011878(Jean-Mairet et al.); US 6,602,684(Umana et al.); 및 US 2005/0123546(Umana et al.)에 기재되어 있다. Fc 영역에 부착된 올리고당에 하나 이상의 갈락토스 잔기를 갖는 항체 변이체가 또한 제공된다. 이러한 항체 변이체는 개선된 CDC 기능을 가질 수 있다. 이러한 항체 변이체는, 예를 들어 WO 1997/30087(Patel et al.); WO 1998/58964(Raju, S.); 및 WO 1999/22764(Raju, S.)에 기재되어 있다.
g) Fc 영역 변이체 및 경쇄 불변 영역 변이체
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)은 Fc 단편을 포함한다.
용어 "Fc 영역", "Fc 도메인", "Fc 단편" 또는 "Fc"는 불변 영역의 적어도 일부를 함유하는 면역글로불린 중쇄의 C-말단 비-항원 결합 영역을 지칭한다. 이러한 용어는 천연 Fc 영역 및 변이체 Fc 영역을 포함한다. 일부 양태에서, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 Cys226에서 중쇄의 카르복실-말단까지 연장된다. 그러나, Fc 영역의 C-말단 리신(Lys447)은 Fc 영역의 구조 또는 안정성에 영향을 미치지 않으면서 존재할 수도 있고 존재하지 않을 수도 있다. 본원에서 달리 명시되지 않는 한, IgG 또는 Fc 영역 내의 아미노산 잔기의 넘버링은 문헌[Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991]에 기재된 EU 색인으로도 지칭되는 항체에 대한 EU 넘버링 체계에 따른 것이다.
일부 양태에서, Fc 단편은 IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, 및 이들의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택된 면역글로불린으로부터 유래된다. 일부 양태에서, Fc 단편은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, 및 이들의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택된 면역글로불린으로부터 유래된다.
일부 양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 효과기 기능(예를 들어, 항체 의존성 세포독성(ADCC) 수준으로 측정 시 적어도 약 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 또는 95% 감소된 효과기 기능)을 갖는다.
일부 양태에서, Fc 단편은 IgG1 Fc 단편이다. 일부 양태에서, IgG1 Fc 단편은 L234A 돌연변이 및/또는 L235A 돌연변이를 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 IgG2 또는 IgG4 Fc 단편이다. 일부 양태에서, Fc 단편은 S228P, F234A, 및/또는 L235A 돌연변이를 포함하는 IgG4 Fc 단편이다. 일부 양태에서, Fc 단편은 N297A 돌연변이를 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 N297G 돌연변이를 포함한다.
일부 양태에서, 하나 이상의 아미노산 변형이 항체 모이어티의 Fc 영역에 도입되어 Fc 영역 변이체를 생성할 수 있다. Fc 영역 변이체는 하나 이상의 아미노산 위치에서 아미노산 변형(예컨대, 치환)을 포함하는 인간 Fc 영역 서열(예컨대, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 Fc 영역)을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, Fc 단편은 래트 Fc 영역 서열(예를 들어, 래트 IgG2 Fc) 또는 마우스 Fc 영역 서열(예를 들어, 마우스 IgG1 Fc)로부터 유래된다.
일부 양태에서, Fc 단편은 인간 IgG2 Fc 영역을 포함한다.
일부 양태에서, Fc 단편은 인간 IgG4 Fc 영역을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 S228P, T366W 및 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상(예를 들어, 2, 3 또는 4개)의 치환을 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함한다. 본원에 설명된 변형의 넘버링은 달리 명시되지 않는 한 EU 색인을 따른다. 일부 양태에서, Fc 단편은 S228P, T366W 및 임의적인 H435R, 및 임의적인 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 F126C, L128C, C131S, F170C, P161C, V173C, S228P, T366S, L368A, 및 Y407V로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상(예컨대, 2, 3, 4, 5 또는 6개)의 치환, 및 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 a) C131S, S228P, T366S, L368A 및 Y407V, 및 b) F126C, L128C, F170C, P161C, 및 V173C로 이루어진 군으로부터 선택되는 치환 중 하나, 및 c) 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 F126C, C131S, S228P, T366S, L368A, 및 Y407V로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상(예컨대, 2, 3, 4, 5 또는 6개)의 치환, 및 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IGG4 중쇄 FC 영역을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 F126C, C131S, S228P, T366S, L368A 및 Y407V, 및 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 L128C, C131S, S228P, T366S, L368A 및 Y407V, 및 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 C131S, F170C, S228P, T366S, L368A 및 Y407V, 및 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 C131S, V173C, S228P, T366S, L368A 및 Y407V, 및 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 C131S, P171C, S228P, T366S, L368A 및 Y407V, 및 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 (a) S228P, T366W를 포함하는 제1 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역, 및 (b) a) C131S, S228P, T366S, L368A 및 Y407V, 및 임의적인 H435R 및 임의적인 Y436F, 및 b) F126C, L128C, F170C, P161C 및 V173C로 이루어진 군으로부터 선택되는 치환 중 하나를 포함하는 제2 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하는 Fc 단편을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) S228P, T366W를 포함하는 제1 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역, 및 b) F126C, C131S, S228P, T366S, L368A, Y407V, H435R 및 Y436F를 포함하는 제2 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하는 Fc 단편을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) S228P, T366W를 포함하는 제1 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역, 및 b) L128C, C131S, S228P, T366S, L368A, Y407V, H435R 및 Y436F를 포함하는 제2 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하는 Fc 단편을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) S228P, T366W를 포함하는 제1 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역, 및 b) C131S, F170C, S228P, T366S, L368A, Y407V, H435R 및 Y436F를 포함하는 제2 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하는 Fc 단편을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) S228P, T366W를 포함하는 제1 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역, 및 b) C131S, V173C, S228P, T366S, L368A, Y407V, H435R 및 Y436F를 포함하는 제2 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하는 Fc 단편을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) S228P, T366W를 포함하는 제1 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역, 및 b) C131S, P171C, S228P, T366S, L368A, Y407V, H435R 및 Y436F를 포함하는 제2 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하는 Fc 단편을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 F118C, S121C, Q160C, S162C, S176C 및/또는 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 S121C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 F118C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 S176C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 Q160C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 S162C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다.
일부 양태에서, Fc 단편은 전부는 아니지만 일부 효과기 기능을 보유하고, 이는 생체내 항체 모이어티의 반감기가 중요하지만 특정 효과기 기능이 불필요하거나 유해한 적용을 위한 바람직한 후보(예컨대, 보체 및 ADCC)가 되게 한다. CDC 및/또는 ADCC 활성의 감소/고갈을 확인하기 위해 시험관내 및/또는 생체내 세포독성 분석을 수행할 수 있다. 예를 들어, Fc 수용체(FcR) 결합 분석을 수행하여 항체가 FcγR 결합을 결여하지만(따라서 ADCC 활성이 결여될 가능성 있음), FcRn 결합 능력은 유지하는 것을 확인할 수 있다. ADCC를 매개하는 일차 세포인 NK 세포는 FcγRIII만을 발현하는 반면, 단핵구는 FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII을 발현한다. 조혈 세포에서의 FcR 발현은 문헌[Ravetch and Kinet, Annu . Rev. Immunol . 9:457-492 (1991)]의 페이지 464의 표 2에 요약되어 있다. 관심 분자의 ADCC 활성을 평가하기 위한 시험관내 검정의 비제한적 예는 US 5,500,362(예를 들어, 문헌[Hellstrom, I. et al. Proc. Nat'l Acad . Sci . USA 83:7059-7063 (1986)] 참고), [Hellstrom, I et al., Proc. Nat'l Acad . Sci . USA 82:1499-1502 (1985)]; US 5,821,337(문헌[Bruggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166:1351-1361 (1987)] 참고)에 기재되어 있다. 다르게는, 비방사성 분석 방법을 사용할 수 있다(예를 들어, 유세포 분석을 위한 ACTITM 비방사성 세포독성 분석(CellTechnology, Inc. Mountain View, CA); 및 CytoTox 96® 비방사성 세포독성 분석(Promega, Madison, WI)). 이러한 분석에 유용한 효과기 세포는 말초 혈액 단핵 세포(PBMC) 및 천연 살해(NK) 세포를 포함한다. 대안적으로 또는 추가로, 관심 분자의 ADCC 활성은, 예를 들어 문헌[Clynes et al. Proc . Nat'l Acad . Sci . USA 95:652-656 (1998)]에 개시된 바와 같이 동물 모델에서 생체내에서 평가될 수 있다. 항체가 C1q에 결합할 수 없고, 따라서 CDC 활성이 결여되어 있음을 확인하기 위해 C1q 결합 분석을 수행할 수도 있다. 예를 들어, WO 2006/029879 및 WO 2005/100402의 C1q 및 C3c 결합 ELISA를 참고한다. 보체 활성화를 평가하기 위해, CDC 분석을 수행할 수 있다(예를 들어, 문헌[Gazzano-Santoro et al., J. Immunol . Methods 202:163 (1996)]; [Cragg, M.S. et al., Blood 101:1045-1052 (2003)]; 및 [Cragg, M.S. and M.J. Glennie, Blood 103:2738-2743 (2004)] 참고). FcRn 결합 및 생체내 청소율/반감기 결정은 또한 당업계에 공지된 방법을 사용하여 수행될 수 있다(예를 들어, 문헌[Petkova, S.B. et al., Int'l . Immunol . 18(12):1759-1769 (2006)] 참고).
효과기 기능이 감소된 항체는 Fc 영역 잔기 238, 265, 269, 270, 297, 327 및 329 중 하나 이상의 치환이 있는 항체를 포함한다(US 6,737,056). 이러한 Fc 돌연변이체는 아미노산 위치 265, 269, 270, 297 및 327 중 2개 이상에서 치환된 Fc 돌연변이체를 포함하고, 잔기 265 및 297이 알라닌으로 치환된 소위 "DANA" Fc 돌연변이체를 포함한다(US 7,332,581). 일부 양태에서, Fc 단편은 N297A 돌연변이를 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 N297G 돌연변이를 포함한다.
FcR에 대한 결합이 개선되거나 감소된 특정 항체 변이체가 기재되어 있다(예를 들어, US 6,737,056; WO 2004/056312 및 문헌[Shields et al., J. Biol . Chem . 9(2): 6591-6604 (2001)] 참고).
일부 양태에서, Fc 단편은 IgG1 Fc 단편이다. 일부 양태에서, IgG1 Fc 단편은 L234A 돌연변이 및/또는 L235A 돌연변이를 포함한다. 일부 양태에서, Fc 단편은 IgG2 또는 IgG4 Fc 단편이다. 일부 양태에서, Fc 단편은 S228P, F234A, 및/또는 L235A 돌연변이를 포함하는 IgG4 Fc 단편이다.
일부 양태에서, 항체 모이어티는 ADCC를 개선하는 하나 이상의 아미노산 치환, 예를 들어 Fc 영역의 위치 298, 333 및/또는 334에서의 치환(잔기의 EU 넘버링)을 갖는 Fc 영역을 포함한다.
일부 양태에서, 예를 들어 US 6,194,551, WO 99/51642, 및 문헌[Idusogie et al. J. Immunol . 164: 4178-4184 (2000)]에 기재된 바와 같이 C1q 결합 및/또는 보체 의존 세포독성(CDC)을 변경(즉, 개선 또는 감소)시키는 Fc 영역에서 변경이 이루어진다.
일부 양태에서, 항체 모이어티 변이체는 반감기를 변경하고/하거나 신생아 Fc 수용체(FcRn)에 대한 결합을 변경하는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 변이체 Fc 영역을 포함한다. 반감기가 증가하고, 모계 IgG를 태아로 전달하는 역할을 하는 신생아 Fc 수용체(FcRn)(문헌[Guyer et al., J. Immunol . 117:587 (1976)] 및 문헌[Kim et al., J. Immunol . 24:249 (1994)])에 대한 결합이 개선된 항체가 US 2005/0014934 A1(Hinton et al.)에 기재되어 있다. 이들 항체는 FcRn에 대한 Fc 영역의 결합을 변경시키는 하나 이상의 치환을 갖는 Fc 영역을 포함한다. 이러한 Fc 변이체는 위치 250, 252, 254, 256, 307, 308, 428, 434에서 하나 이상의 Fc 영역 잔기에서 치환을 갖는 것(US 7,371,826), 예컨대 M428L 및 N434S를 포함하는 소위 "LS" Fc 돌연변이(WO 2009/086320), 및 M252Y, S254T 및 T256E를 포함하는 소위 "YTE" Fc 돌연변이(WO 2002/060919)를 포함한다,
또한, Fc 영역 변이체의 다른 예에 관해서는 문헌[Duncan & Winter, Nature 322:738-40 (1988)]; US 5,648,260; US 5,624,821; 및 WO 94/29351을 참고한다.
h) 시스테인 조작된 항체 변이체
일부 양태에서, 항체의 하나 이상의 잔기가 시스테인 잔기로 치환된 시스테인 조작된 항체 모이어티, 예를 들어 "thioMAb"를 생성하는 것이 바람직할 수 있다. 특정 양태에서, 치환된 잔기는 항체의 접근가능한 부위에서 발생한다. 이러한 잔기를 시스테인으로 치환함으로써, 반응성 티올 그룹은 항체의 접근가능한 부위에 위치하고 항체를 다른 모이어티, 예를 들어 약물 모이어티 또는 링커-모이어티에 접합하여 본원에 추가로 기재된 바와 같이 항체-약물 접합체를 생성하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 하기 잔기 중 어느 하나 이상이 시스테인으로 치환될 수 있다: 중쇄의 A118(EU 넘버링); 및 중쇄 Fc 영역의 S400(EU 넘버링). 시스테인 조작된 항체 모이어티는, 예를 들어, US 7,521,541에 기재된 바와 같이 생성될 수 있다.
i) 항체 유도체
일부 양태에서, 본원에 기재된 항체 모이어티는 당업계에 공지되어 있고 쉽게 입수가능한 추가적인 비단백질성 모이어티를 포함하도록 추가로 변형될 수 있다. 항체의 유도체화에 적합한 모이어티는 수용성 중합체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 수용성 중합체의 비제한적 예는 비제한적으로 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 에틸렌 글리콜/프로필렌 글리콜의 공중합체, 카르복시메틸셀룰로오스, 덱스트란, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리-1,3-디옥솔란, 폴리-1,3,6-트리옥산, 에틸렌/말레산 무수물 공중합체, 폴리아미노산(단독중합체 또는 랜덤 공중합체), 덱스트란 또는 폴리(n-비닐 피롤리돈)폴리에틸렌 글리콜, 프로프로필렌 글리콜 단독중합체, 프로프로필렌 옥사이드/에틸렌 옥사이드 공중합체, 폴리옥시에틸화 폴리올(예컨대, 글리세롤), 폴리비닐 알코올 및 이들의 혼합물을 포함한다. 폴리에틸렌 글리콜 프로피온알데히드는 물에 대한 안정성으로 인해 제조에 유리할 수 있다. 중합체는 임의의 분자량일 수 있고, 분지형 또는 비분지형일 수 있다. 항체에 부착된 중합체의 수는 다양할 수 있고, 하나 초과의 중합체가 부착된 경우 동일한 분자이거나 다른 분자일 수 있다. 일반적으로, 유도체화에 사용되는 중합체의 수 및/또는 유형은 개선될 항체의 특정 특성 또는 기능, 항체 유도체가 정의된 조건하에 진단에 사용될 것인지 여부를 포함하나 이에 제한되지 않는 고려 사항에 기초하여 결정될 수 있다.
일부 양태에서, 항체 모이어티는 하나 이상의 생물학적 활성 단백질, 폴리펩티드 또는 이의 단편을 포함하도록 추가로 변형될 수 있다. 본원에서 상호교환적으로 사용되는 "생체활성" 또는 "생물학적 활성"은 특정 기능을 수행하기 위해 신체에서 생물학적 활성을 나타내는 것을 지칭한다. 예를 들어, 단백질, DNA 등과 같은 특정 생체분자와 결합하여 그 생체분자의 활성을 촉진 또는 억제하는 것을 지칭할 수 있다. 일부 양태에서, 생체활성 단백질 또는 이의 단편은 질환 또는 병태의 예방 또는 치료를 위한 활성 약물 물질로서 환자에게 투여되는 단백질 및 폴리펩티드, 진단적 목적에 사용되는 단백질 및 폴리펩티드, 예컨대 진단 시험 또는 시험관내 분석에 사용되는 효소, 및 질환을 예방하기 위해 환자에게 투여되는 단백질 및 폴리펩티드, 예컨대 백신을 포함한다.
다중특이성 항-스클레로스틴 구축물
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 본원에 기재된 항-스클레로스틴 항체 모이어티 중 어느 하나에 따른 항-스클레로스틴 항체 모이어티, 및 제2 항원을 특이적으로 인식하는 제2 결합 모이어티(예컨대, 제2 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예컨대, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물을 포함한다. 일부 양태에서, 다중특이성 항-스클레로스틴 분자는 항-스클레로스틴 항체 모이어티, 및 제2 항원을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다. 일부 양태에서, 제2 항원은 면역 체크포인트 분자이다. 일부 양태에서, 제2 항원은 DKK1(Dickkopf WNT 신호 경로 억제제 1) 또는 RANKL(NF-κB 리간드의 수용체 활성화제)이다.
스클레로스틴과 RANKL 둘 다를 표적으로 하는 다중특이성 구축물
본원은 스클레로스틴 및 RANKL 둘 다를 표적으로 하는 다중특이성 구축물을 제공한다. 일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, 스클레로스틴은 인간 스클레로스틴이다. 일부 양태에서, RANKL은 인간 RANKL이다.
TNFSF11(종양 괴사 인자 리간드 상과 구성원 11)로도 공지된 RANKL(핵 인자 카파-B 리간드의 수용체 활성제)은 골단백질의 리간드이고 파골세포 분화 및 활성화의 핵심 인자로 기능한다. 이러한 단백질은 수지상 세포 생존 인자인 것으로 나타났고 T 세포 의존성 면역 반응의 조절에 관여한다. T 세포 활성화는 이 유전자의 발현을 유도하고 파골세포 형성 및 골 손실을 증가시키는 것으로 보고되었다. 이러한 단백질은 SRC 키나아제와 종양 괴사 인자 수용체 관련 인자(TRAF6)를 포함하는 신호 복합체를 통해 항-아폽토시스 키나아제(antiapoptotic kinase) AKT/PKB를 활성화하는 것으로 나타났고, 이는 이 단백질이 세포 아폽토시스(apoptosis)의 조절에 역할을 할 수 있음을 나타낸다. 마우스에서 관련 유전자의 표적화된 파괴는 심각한 골화석증과 파골세포의 부족을 야기하였다. 결함이 있는 마우스는 T 및 B 림프구의 초기 분화에 결함을 보였고, 임신 중에 소엽 폐포 유방 구조를 형성하지 못하였다.
예시적인 항-RANKL 항체 모이어티
일부 양태에서, 본원에 기재된 다중특이성 항-스클레로스틴 구축물에 사용되는 항-RANKL 항체 모이어티(예컨대, scFv)는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 RANKL의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 다중특이성 항-스클레로스틴 구축물에 사용되는 항-RANKL 항체 모이어티(예컨대, scFv)는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL은 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 72의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 73의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-RANKL 모이어티는 서열번호 72에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3; 및 서열번호 73에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, RANKL을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 항-RANKL 단일 도메인 항체(sdAb) 모이어티를 포함하고, 제2 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역(VH) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL) 및 Fc 단편을 포함하는 전장 항체를 포함한다. 일부 양태에서, 항-RANKL sdAb는 Fc 단편을 포함하는 전장 항체의 중쇄 둘 다에 융합된다. 일부 양태에서, 항-RANKL sdAb는 전장 항체의 경쇄 둘 다에 융합된다. 일부 양태에서, 항-RANKL sdAb는 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-RANKL sdAb는 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-RANKL sdAb는 링커(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 링커)를 통해 전장 항체에 융합된다. 일부 양태에서, 항-RANKL sdAb는 링커 없이 전장 항체에 융합된다.
일부 양태에서, RANKL을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 항-RANKL 단일 도메인 항체(sdAb) 모이어티를 포함하고, 제2 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역(VH) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하고, 상기 구축물은 하기를 포함한다: a) N-말단으로부터 C-말단으로 i) VH, ii) 제1 중쇄 불변 도메인("CH1 도메인"), iii) 항-RANKL sdAb, 및 iv) Fc 도메인(이때 2개의 Fc 도메인은 Fc 단편을 형성함)을 각각 포함하는 2개의 키메라 중쇄; b) VL 및 경쇄 불변 도메인("CL 도메인")을 포함하는 2개의 경쇄. 일부 양태에서, 항-RANKL sdAb는 제1 링커를 통해 Fc 도메인에 융합된다. 일부 양태에서, 항-RANKL sdAb는 제2 링커를 통해 VH에 융합된다.
일부 양태에서, RANKL을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 항-RANKL 단일 도메인 항체(sdAb) 모이어티를 포함하고, 제2 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역(VH) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하고, 이때 상기 구축물은 하기를 포함한다: a) N-말단으로부터 C-말단으로 i) 항-RANKL sdAb, 및 ii) 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 중쇄; b) N-말단으로부터 C-말단으로 i) VH, ii) 제1 중쇄 불변 도메인("CH1 도메인"), 및 iii) 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 중쇄; 및 c) VL 및 경쇄 불변 도메인("CL 도메인")을 포함하는 경쇄(이때 제1 및 제2 Fc 도메인은 Fc 단편을 형성함).
일부 양태에서, 제1 및 제2 Fc 도메인 중 하나는 T366W 돌연변이, 및 임의적으로 S354C 돌연변이를 포함하고, 다른 Fc 도메인은 T366S 돌연변이, L368A 돌연변이, Y407V 돌연변이, 및 임의적으로 Y349C 돌연변이를 포함한다.
일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 RANKL의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 제3 항체 모이어티와 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL은 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) 본원에 기재된 항-스클레로스틴 항체 모이어티 중 어느 하나에 따른 항-스클레로스틴 항체 모이어티; b) RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(본원에 기재된 임의의 항-RANKL 항체 모이어티와 같은 항-RANKL 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예컨대, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, 항-스클레로스틴 VL은 i) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, 항-스클레로스틴 VL은 i) 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 양태에서, 아미노산 치환은 본원의 표 2에 나타낸 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄(이때 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역(VL)을 포함함)를 포함하는 항-스클레로스틴 전장 항체, b) 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄 둘 다에 적어도 융합된 항-RANKL 항체 모이어티(예컨대, 임의의 본원에 기재된 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이다. 일부 양태에서, 항-RANKL 항체 모이어티는 중쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-RANKL 항체 모이어티는 중쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄(이때 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역(VL)을 포함함)를 포함하는 전장 항체를 포함하는 항-RANKL 항체 모이어티, b) 항-RANKL 전장 항체의 중쇄 중 적어도 하나 또는 둘 다에 융합된 항-스클레로스틴 항체 모이어티(예컨대, 임의의 본원에 기재된 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 중쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 중쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄(이때 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역(VL)을 포함함)를 포함하는 항-스클레로스틴 전장 항체, b) 항-스클레로스틴 전장 항체의 경쇄 둘 다에 적어도 융합된 항-RANKL 항체 모이어티(예컨대, 임의의 본원에 기재된 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이다. 일부 양태에서, 항-RANKL 항체 모이어티는 경쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-RANKL 항체 모이어티는 경쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄(이때 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역(VL)을 포함함)를 포함하는 항-RANKL 전장 항체, b) 항-RANKL 전장 항체의 경쇄 둘 다에 적어도 융합된 항-스클레로스틴 항체 모이어티(예컨대, 임의의 본원에 기재된 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 경쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 경쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL-1)을 포함하는 단일쇄 Fv 단편(scFv)을 포함하고, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2), 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 Fc 단편을 포함하는 전장 항체이다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 중쇄 중 하나 또는 둘 다에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 경쇄 중 하나 또는 둘 다에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 중쇄 및 경쇄 중 하나 또는 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 중쇄 및 경쇄 중 하나 또는 둘 다의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 제1 링커(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 링커)를 통해 전장 항체에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 링커 없이 전장 항체에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 제2 링커(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 링커)를 통해 VL -1과 융합된다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 제1 중쇄 가변 영역(VH -1), 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 Fc 단편을 포함하는 전장 항체이고, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 단일쇄 Fv 단편(scFv)을 포함한다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 중쇄 둘 다에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 경쇄 둘 다에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 제1 링커(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 링커)를 통해 전장 항체에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 링커 없이 전장 항체에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 올바른 scFv 조립을 가능하게 하기 위해 제2 링커(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 링커)를 통해 VL -2와 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 링커 없이 VL -2와 융합된다.
일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체를 포함하는, 스클레로스틴 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하고, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하고, 이때 상기 구축물은 하기를 포함한다: a) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -1, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제1 CL 도메인")을 포함하는 제1 경쇄를 포함하는 제1 폴리펩티드; b) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -1, ii) 제1 중쇄 불변 도메인("제1 CH1 도메인"), 및 iii) 제1 Fc 도메인을 포함하는 중쇄를 포함하는 제2 폴리펩티드; c) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -2, ii) 제2 중쇄 불변 도메인("제2 CH1 도메인"), 및 iii) 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 중쇄를 포함하는 제3 폴리펩티드; 및 d) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -2, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제2 CL 도메인")을 포함하는 제2 경쇄를 포함하는 제4 폴리펩티드, 이때 제1 및 제2 Fc 도메인은 Fc 단편을 형성한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 스클레로스틴을 특이적으로 인식하고, 제2 항체 모이어티는 RANKL을 특이적으로 인식한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 RANKL을 특이적으로 인식하고, 제2 항체 모이어티는 스클레로스틴을 특이적으로 인식한다.
일부 양태에서, 제1 및 제2 Fc 도메인 중 하나는 T366W 돌연변이, 및 임의적으로 S354C 돌연변이를 포함하고, 다른 Fc 도메인은 T366S 돌연변이, L368A 돌연변이, Y407V 돌연변이, 및 임의적으로 Y349C 돌연변이를 포함하고, 이때 넘버링은 EU 색인에 따른다.
일부 양태에서, i) 제1 CH1 도메인 및 제1 CL 도메인, 또는 ii) 제2 CH1 도메인 및 제2 CL 도메인은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다: a) 위치 141의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 116의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; b) 위치 168의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 164의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; c) 위치 126의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 121의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; d) 위치 128의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 118의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; e) 위치 170의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 176의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; f) 위치 171의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 162의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; g) 위치 173의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 160의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인(이때 상기 넘버링들은 EU 색인에 따른다).
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 항-스클레로스틴 전장 항체이고, 상기 2개의 중쇄는 각각 제1 중쇄 가변 영역(VH - 1)을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하고, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항-RANKL 단일쇄 Fv 단편(scFv)을 포함하고, 제2 항체 모이어티는 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 22의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL -1은 서열번호 23의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, VH-2는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 72의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL -1은 서열번호 73의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체를 포함하는, 스클레로스틴 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하고, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하고, 이때 상기 구축물은 하기를 포함한다: a) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -1, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제1 CL 도메인")을 포함하는 제1 경쇄를 포함하는 제1 폴리펩티드; b) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -1, ii) 제1 중쇄 불변 도메인("제1 CH1 도메인"), 및 iii) 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 중쇄를 포함하는 제2 폴리펩티드; c) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -2, ii) 제2 중쇄 불변 도메인("제2 CH1 도메인"), 및 iii) 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 중쇄를 포함하는 제3 폴리펩티드; 및 d) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -2, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제2 CL 도메인")을 포함하는 제2 경쇄를 포함하는 제4 폴리펩티드(이때 제1 및 제2 Fc 도메인은 Fc 단편을 형성하고, 제1 항체 모이어티는 스클레로스틴을 특이적으로 인식하고, 제2 항체 모이어티는 RANKL을 특이적으로 인식한다). 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 22의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL -1은 서열번호 23의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 72의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL -1은 서열번호 73의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 156의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 157의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 158의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 159의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL-1은 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 160의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 161의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 162의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하는, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티(이때 상기 VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -1은 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함); 및 b) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(이때 상기 VH -2는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL-2는 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88 또는 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 72의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 73의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제2 항체 모이어티는 VH -2 및 VL -2를 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -2는 VL -2의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 임의적으로 VH -2의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -2의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2 및 VL -2는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제1 항체 모이어티는 VH -1 및 VL -1을 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -1은 VL -1의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 임의적으로 VH -1의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -1의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 임의적으로 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2에서의 G100C 돌연변이를 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어 (GGGGS)3)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커 없이 융합된다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 126의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 127의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 128의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 133의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 130의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 133의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 131의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 133의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 132의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하는, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티(이때 상기 VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -1은 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함); 및 b) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(이때 상기 VH -2는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL-2는 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89 또는 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열 72의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열 73의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제2 항체 모이어티는 VH -2 및 VL -2를 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -2는 VL -2의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 임의적으로 VH -2의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -2의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2 및 VL -2는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 VH -2 상의 G44C 돌연변이 및 VL-2 상의 G100C 돌연변이에 의해 형성된 H44-L100 다이설파이드 결합을 갖는 dsscFv로 전환된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제1 항체 모이어티는 VH -1 및 VL -1을 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -1은 VL -1의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 임의적으로 VH-1의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -1의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 링커를 통해 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어 (GGGGS)3)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커 없이 융합된다.
일부 양태에서, 항-RANKL 항체 모이어티 및 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 결합 모이어티의 적절한 기능을 허용하는 임의의 작동가능한 형태를 갖는 본원에 기재된 임의의 링커와 같은 링커를 통해 서로 융합된다.
스클레로스틴과 DKK1을 둘 다 표적으로 하는 다중특이성 구축물
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 a) 본원에 기재된 항-스클레로스틴 항체 모이어티 중 어느 하나에 따른 항-스클레로스틴 항체 모이어티; b) DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(항-DKK1 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이다.
DKK1(Dickkopf 관련 단백질 1)은 dickkopf 계열 단백질의 구성원이다. 이러한 계열의 구성원은 단백질-단백질 상호작용을 매개하는 2개의 시스테인-풍부 도메인을 특징으로 하는 분비 단백질이다. DKK1은 LRP6 보조수용체에 결합하고, 베타-카테닌 의존성 Wnt 신호전달을 억제한다. 이러한 유전자는 배아 발달에 중요한 역할을 하고 성인의 골형성에 중요할 수 있다.
예시적인 항-DKK1 항체 모이어티
일부 양태에서, 다중특이성 항-스클레로스틴 구축물에 사용되는 항-DKK1 항체 모이어티(예컨대, scFv)는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 DKK1의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 다중특이성 항-스클레로스틴 구축물에 사용되는 항-DKK1 항체 모이어티(예컨대, scFv)는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 DKK1의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 다중특이성 항-스클레로스틴 구축물에 사용되는 항-DKK1 항체 모이어티(예컨대, scFv)는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 항체 모이어티는 DKK1의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 이때 VH -2는 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 다중특이성 항-스클레로스틴 구축물에 사용되는 항-DKK1 항체 모이어티(예컨대, scFV)는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL은 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 60의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 61의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 다중특이성 항-스클레로스틴 구축물에 사용되는 항-DKK1 항체 모이어티(예컨대, scFV)는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL은 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 62의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 63의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 다중특이성 항-스클레로스틴 구축물에 사용되는 항-DKK1 항체 모이어티(예컨대, scFV)는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL은 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH는 서열번호 64의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열번호 65의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 항-DKK1 모이어티는 서열번호 60, 62 또는 64에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3; 및 서열번호 61, 63 또는 65에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 항-스클레로스틴 전장 항체(이때 상기 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하고 상기 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역(VL)을 포함함), 및 b) 상기 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 적어도 둘 다에 융합된 항-DKK1 항체 모이어티(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, 항-DKK1 항체 모이어티는 중쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-DKK1 항체 모이어티는 중쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다.
일부 양태에서, a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체를 포함하는 항-DKK1 항체 모이어티(이때 상기 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하고 상기 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역(VL)을 포함함), 및 b) 항-DKK1 전장 항체의 중쇄의 적어도 하나 또는 둘 다에 융합된 항-스클레로스틴 항체 모이어티(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 중쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 중쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다.
일부 양태에서, a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 항-스클레로스틴 전장 항체(이때 상기 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하고 상기 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역(VL)을 포함함), 및 b) 상기 항-스클레로스틴 전장 항체의 경쇄의 적어도 둘 다에 융합된 항-DKK1 항체 모이어티(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, 항-DKK1 항체 모이어티는 경쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-DKK1 항체 모이어티는 경쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다.
일부 양태에서, a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체를 포함하는 항-DKK1 항체 모이어티(이때 상기 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하고 상기 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역(VL)을 포함함), 및 b) 항-DKK1 전장 항체의 경쇄의 적어도 하나 또는 둘 다에 융합된 항-스클레로스틴 항체 모이어티(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 경쇄 둘 다의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티는 경쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티 및 항-DKK1 항체 모이어티는 결합 모이어티의 적절한 기능을 허용하는 임의의 작동가능한 형태를 갖는 본원에 기재된 임의의 링커와 같은 링커를 통해 서로 융합된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티 및 항-DKK1 항체 모이어티는 링커 없이 융합된다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하는, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티(이때 상기 VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -1은 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함); 및 b) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(이때 상기 VH -2는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL-2는 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88 또는 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 60, 164 또는 166의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 61, 165 또는 167의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 164의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 165의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 166의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 167의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 61의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 167의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제2 항체 모이어티는 VH -2 및 VL -2를 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -2는 임의적으로 VH-2의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -2의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 VL -2의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2 및 VL -2는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL-2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제1 항체 모이어티는 VH -1 및 VL -1을 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -1은 VL -1의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 임의적으로 VH -1의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -1의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어 (GGGGS)3)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커 없이 융합된다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 91의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 92의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 94의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 96의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 95의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 96의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 97의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 99의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 98의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 99의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 100의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 102의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 101의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 102의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 103의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 104의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 103의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 105의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 106의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 107의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 106의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 108의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 109의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 110의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 109의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 111의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 112의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 112의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 114의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 117의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 118의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 123의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함한다.
a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하는, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티(이때 상기 VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -1은 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함); 및 b) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(이때 상기 VH -2는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -2는 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, VH-1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89 또는 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 60, 164 또는 166의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 61, 165 또는 167의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 164의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 165의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 166의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 167의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 61의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 167의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제2 항체 모이어티는 VH -2 및 VL -2를 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -2는 VL -2의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 임의적으로 VH -2의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -2의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2 및 VL -2는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제1 항체 모이어티는 VH -1 및 VL -1을 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -1은 VL -1의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 임의적으로 VH -1의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -1의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 VH-1 상의 G44C 돌연변이 및 VL -1 상의 G100C 돌연변이에 의해 형성된 H44-L100 다이설파이드 결합을 갖는 dsscFv로 전환된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어 (GGGGS)3)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커 없이 융합된다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 115의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 116의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 120의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 다중특이성 구축물은 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하고, 상기 2개의 중쇄는 각각 서열번호 121의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하는, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티(이때 상기 VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -1은 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함); 및 b) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(이때 상기 VH -2는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -2는 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89 또는 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 62의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 63의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제2 항체 모이어티는 VH -2 및 VL -2를 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -2는 임의적으로 VH-2의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -2의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 VL -2의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2 및 VL -2는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL-2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제1 항체 모이어티는 VH -1 및 VL -1을 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -1은 VL -1의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 임의적으로 VH -1의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -1의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL-2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어 (GGGGS)3)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커 없이 융합된다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하는, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티(이때 상기 VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -1은 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함); 및 b) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(이때 상기 VH -2는 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -2는 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89 또는 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 64의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제2 항체 모이어티는 VH -2 및 VL -2를 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -2는 VL -2의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 임의적으로 VH -2의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -2의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2 및 VL -2는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL-2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제1 항체 모이어티는 VH -1 및 VL -1을 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -1은 VL -1의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 임의적으로 VH -2의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -1의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL-2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어 (GGGGS)3)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커 없이 융합된다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하는, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티(이때 상기 VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -1은 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함); 및 b) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(이때 상기 VH -2는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -2는 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88 또는 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH-2는 서열번호 62의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 63의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제2 항체 모이어티는 VH -2 및 VL -2를 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -2는 VL -2의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 임의적으로 VH -2의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -2의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2 및 VL -2는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제1 항체 모이어티는 VH -1 및 VL -1을 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -1은 VL -1의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 임의적으로 VH -1의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -1의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 임의적으로 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2에서의 G100C 돌연변이를 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어 (GGGGS)3)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커 없이 융합된다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하는, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티(이때 상기 VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -1은 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함); 및 b) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티(이때 상기 VH -2는 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 상기 VL -2는 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 항-스클레로스틴 구축물이 제공된다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88 또는 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH-2는 서열번호 64의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제2 항체 모이어티는 VH -2 및 VL -2를 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -2는 VL -2의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2는 임의적으로 VH -2의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -2의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -2 및 VL -2는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2에서의 G100C 돌연변이를 임의적으로 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 전장 항체의 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 전장 항체이고, 제1 항체 모이어티는 VH -1 및 VL -1을 포함하는 scFv이다. 일부 양태에서, VH -1은 VL -1의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 임의적으로 VH -1의 C-말단에 부착된 단일 알라닌 아미노산에 의해 VL -1의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어, (GGGGS)4)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, VH -1 및 VL -1은 링커 없이 융합된다. 일부 양태에서, scFv는 임의적으로 a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2에서의 G44C 돌연변이, 및 b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2에서의 G100C 돌연변이를 포함하는 dsscFv이다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 전장 항체의 1개 또는 2개의 경쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커(예를 들어, GS 링커, 예를 들어 (GGGGS)3)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체 모이어티는 링커 없이 융합된다.
일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체를 포함하는, 스클레로스틴 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하고, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하고, 이때 상기 구축물은 하기를 포함한다: a) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -1, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제1 CL 도메인")을 포함하는 제1 경쇄를 포함하는 제1 폴리펩티드; b) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -1, ii) 제1 중쇄 불변 도메인("제1 CH1 도메인"), 및 iii) 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 중쇄를 포함하는 제2 폴리펩티드; c) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -2, ii) 제2 중쇄 불변 도메인("제2 CH1 도메인"), 및 iii) 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 중쇄를 포함하는 제3 폴리펩티드; 및 d) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -2, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제2 CL 도메인")을 포함하는 제2 경쇄를 포함하는 제4 폴리펩티드(이때 제1 및 제2 Fc 도메인은 Fc 단편을 형성한다). 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 스클레로스틴을 특이적으로 인식하고, 제2 항체 모이어티는 DKK1을 특이적으로 인식한다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 DKK1을 특이적으로 인식하고, 제2 항체 모이어티는 스클레로스틴을 특이적으로 인식한다.
일부 양태에서, 제1 및 제2 Fc 도메인 중 하나는 T366W 돌연변이, 및 임의적으로 S354C 돌연변이를 포함하고, 다른 Fc 도메인은 T366S 돌연변이, L368A 돌연변이, Y407V 돌연변이, 및 임의적으로 Y349C 돌연변이를 포함하고, 이때 넘버링은 EU 색인에 따른다.
일부 양태에서, i) 제1 CH1 도메인 및 제1 CL 도메인, 또는 ii) 제2 CH1 도메인 및 제2 CL 도메인은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다: a) 위치 141의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 116의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; b) 위치 168의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 164의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; c) 위치 126 또는 131의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 220의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 121의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; d) 위치 128의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 118의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; e) 위치 170의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 176의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; f) 위치 171의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 162의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; g) 위치 173의 아미노산이 시스테인으로 치환되고 위치 131(예를 들어, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예를 들어, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 160의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인(이때 상기 넘버링들은 EU 색인에 따른다).
일부 양태에서, 제1 중쇄는 S228P, T366W, H435R 및 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 중쇄는 F126C, C131S, S228P, T366S, L368A 및 Y407V를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 경쇄는 S121C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다.
일부 양태에서, 제1 중쇄는 S228P, T366S, L368A 및 Y407V를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 중쇄는 F126C, C131S, S228P, T366W, H435R 및 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 경쇄는 S121C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다.
일부 양태에서, 제1 중쇄는 S228P, T366W, H435R 및 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 중쇄는 L128C, C131S, S228P, T366S, L368A 및 Y407V를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 경쇄는 F118C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다.
일부 양태에서, 제1 중쇄는 S228P, T366S, L368A 및 Y407V를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 중쇄는 L128C, C131S, S228P, T366W, H435R 및 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 경쇄는 F118C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다.
일부 양태에서, 제1 중쇄는 S228P, T366S, L368A 및 Y407V를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 중쇄는 F170C, C131S, S228P, T366W, H435R 및 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 경쇄는 S176C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다.
일부 양태에서, 제1 중쇄는 S228P, T366S, L368A 및 Y407V를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 중쇄는 V173C, C131S, S228P, T366W, H435R 및 Y436F를 포함하는 변형된 인간 IgG4 중쇄 Fc 영역을 포함하고; 제2 경쇄는 Q160C 및 C214S를 포함하는 변형된 인간 Ig 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다.
일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 스클레로스틴을 특이적으로 인식하고, 제2 항체 모이어티는 DKK1을 특이적으로 인식한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -1은 서열번호 15 또는 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88 또는 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89 또는 160의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL -1은 서열번호 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, a) VH -2는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; b) VH -2는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; c) VH -2는 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 DKK1을 특이적으로 인식하고, 제2 항체 모이어티는 스클레로스틴을 특이적으로 인식한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 15 또는 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하고, VL -2는 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 87 또는 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL-2는 서열번호 88 또는 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH-2는 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL-2는 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH-2는 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL-2는 서열번호 169의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH-2는 서열번호 87 또는 169의 아미노산 서열을 포함하고, VL-2는 서열번호 89 또는 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH-2는 서열번호 87의 아미노산 서열을 포함하고, VL-2는 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, VH-2는 서열번호 168의 아미노산 서열을 포함하고, VL-2는 서열번호 170의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, a) VH -1은 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -1은 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; b) VH -1은 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -1은 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; c) VH -1은 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -1은 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 항-스클레로스틴 전장 항체이고, 상기 2개의 중쇄는 각각 제1 중쇄 가변 영역(VH - 1)을 포함하고, 상기 2개의 경쇄는 각각 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하고, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는 항-DKK1 단일쇄 Fv 단편(scFv)을 포함하고, 제2 항체 모이어티는 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄 둘 다의 C-말단에 융합된다. 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 22의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL -1은 서열번호 23의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, VH-2는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL -2는 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 60의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL -1은 서열번호 61의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, 제1 항체 모이어티 및 제2 항체를 포함하는, 스클레로스틴 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 다중특이성 구축물이 제공되고, 이때 제1 항체 모이어티는 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하고, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하고, 이때 상기 구축물은 하기를 포함한다: a) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -1, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제1 CL 도메인")을 포함하는 제1 경쇄를 포함하는 제1 폴리펩티드; b) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -1, ii) 제1 중쇄 불변 도메인("제1 CH1 도메인"), 및 iii) 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 중쇄를 포함하는 제2 폴리펩티드; c) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -2, ii) 제2 중쇄 불변 도메인("제2 CH1 도메인"), 및 iii) 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 중쇄를 포함하는 제3 폴리펩티드; 및 d) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -2, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제2 CL 도메인")을 포함하는 제2 경쇄를 포함하는 제4 폴리펩티드(이때 제1 및 제2 Fc 도메인은 Fc 단편을 형성하고, 제1 항체 모이어티는 스클레로스틴을 특이적으로 인식하고, 제2 항체 모이어티는 DKK1을 특이적으로 인식한다). 일부 양태에서, VH -1은 서열번호 22의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL -1은 서열번호 23의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL -2는 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 양태에서, VH -2는 서열번호 60의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL -1은 서열번호 61의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%(예를 들어, 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 136의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 137의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 138의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 139의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 140의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 141의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 142의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 143의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 144의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 145의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 148의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 149의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 150의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 151의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 152의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 153의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 154의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 155의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 156의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 157의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 158의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 159의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 160의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 161의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, a) 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 중쇄 불변 영역을 포함하는 제1 중쇄(이때 상기 제1 중쇄는 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함함); b) 제1 경쇄 가변 영역(VL -1) 및 제1 경쇄 불변 영역을 포함하는 제1 경쇄(이때 상기 제1 경쇄는 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함함); c) 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 중쇄 불변 영역을 포함하는 제2 중쇄(이때 상기 제2 중쇄는 서열번호 162의 아미노산 서열을 포함함); 및 d) 제2 경쇄 가변 영역(VL -2) 및 제2 경쇄 불변 영역을 포함하는 제2 경쇄(이때 상기 제2 경쇄는 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함함)를 포함하는 다중특이성(예를 들어, 이중특이성) 구축물이 제공되고, 이때 VH -1 및 VL -1은 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티를 포함하고, VH -2 및 VL -2는 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함한다.
항-스클레로스틴 융합 단백질 또는 항체-약물 접합체
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 항-스클레로스틴 항체 모이어티(예를 들어, 항-스클레로스틴 scFv) 및 제2 모이어티를 포함하는 융합 단백질 또는 항체-약물 접합체이다.
일부 양태에서, 제2 모이어티는 반감기 연장 모이어티를 포함한다. 일부 양태에서, 반감기 연장 모이어티는 알부민 결합 모이어티(예를 들어, 알부민 결합 항체 모이어티)이다.
일부 양태에서, 제2 모이어티는 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 비스포스포네이트, 프로스타글란딘 E(PGE) 수용체 작용제, VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴) 및 칼시토닌으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티 및 제2 모이어티는 링커(예를 들어, "링커" 섹션에 기재된 임의의 링커)를 통해 융합된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 항체 모이어티 및 제2 모이어티는 링커 없이 융합된다.
링커
일부 양태에서, 본원에 기재된 항-스클레로스틴 구축물은 2개의 모이어티(예를 들어, 전술한 다중특이성 구축물에서의 항-스클레로스틴 항체 모이어티와 반감기 연장 모이어티, 항-스클레로스틴 항체 모이어티와 제2 결합 모이어티) 사이에 하나 이상의 링커를 포함한다. 항-스클레로스틴 구축물에 사용된 링커(들)의 길이, 가요성 정도 및/또는 다른 특성은 비제한적으로 하나 이상의 특정 항원 또는 에피토프에 대한 친화도, 특이성 또는 결합력(avidity)을 비롯한 특성에 일부 영향을 줄 수 있다. 예를 들어, 2개의 인접한 도메인이 서로 입체적으로 간섭하지 않도록 더 긴 링커가 선택될 수 있다. 일부 양태에서, 링커(예컨대, 펩티드 링커)는 가요성 잔기(예컨대, 글리신 및 세린)를 포함하므로 인접 도메인이 서로에 대해 자유롭게 이동할 수 있다. 예를 들어, 글리신-세린 이중체가 적합한 펩티드 링커일 수 있다. 일부 양태에서, 링커는 비펩티드 링커이다. 일부 양태에서, 링커는 펩티드 링커이다. 일부 양태에서, 링커는 절단 불가능한 링커이다. 일부 양태에서, 링커는 절단가능한 링커이다.
다른 링커 고려 사항에는 용해도, 친유성, 친수성, 소수성, 안정성(더 또는 덜 안정적임 및 계획적 분해), 강성, 가요성, 면역원성, 항체 결합의 조정, 미셀 또는 리포솜으로 혼입되는 능력 등과 같은 생성된 화합물의 물리적 또는 약동학적 특성에 대한 영향이 포함된다.
펩티드 링커
펩티드 링커는 천연 발생 서열 또는 비-천연 발생 서열을 가질 수 있다. 예를 들어, 중쇄 단독 항체의 힌지 영역에서 유래된 서열이 링커로 사용될 수 있다. 예를 들어, WO 1996/34103을 참고한다.
펩티드 링커는 임의의 적합한 길이일 수 있다. 일부 양태에서, 펩티드 링커는 적어도 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 75, 및 100개 이상의 아미노산 길이 중 어느 하나이다. 일부 양태에서, 펩티드 링커는 약 100, 75, 50, 40, 35, 30, 25, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 및 5개 이하의 아미노산 길이 중 어느 하나이다. 일부 양태에서, 펩티드 링커의 길이는 약 1개의 아미노산 내지 약 10개의 아미노산, 약 1개의 아미노산 내지 약 20개의 아미노산, 약 1개의 아미노산 내지 약 30개의 아미노산, 약 5개의 아미노산 내지 약 15개의 아미노산, 약 10개의 아미노산 내지 약 25개의 아미노산, 약 5개의 아미노산 내지 약 30개의 아미노산, 약 10개의 아미노산 내지 약 30개의 아미노산, 약 30개의 아미노산 내지 약 50개의 아미노산, 및 약 50개의 아미노산 내지 약 100개의 아미노산 중 어느 하나의 길이이다.
이러한 펩티드 링커의 본질적인 기술적 특징은 상기 펩티드 링커가 어떠한 중합 활성도 포함하지 않는다는 것이다. 2차 구조의 촉진 부재를 포함하는 펩티드 링커의 특성은 당업계에 공지되어 있고, 예를 들어 문헌[Dall'Acqua et al. (Biochem. (1998) 37, 9266-9273)], [Cheadle et al. (Mol Immunol (1992) 29, 21-30)] 및 [Raag and Whitlow (FASEB (1995) 9(1), 73-80)]에 기재되어 있다. "펩티드 링커"와 관련하여 특히 바람직한 아미노산은 Gly이다. 또한, 어떠한 2차 구조도 촉진하지 않는 펩티드 링커가 바람직하다. 서로에 대한 도메인의 연결은, 예를 들어 유전 공학에 의해 제공될 수 있다. 융합되고 작동가능하게 연결된 이중특이성 단일쇄 구축물을 제조하고 이를 포유동물 세포 또는 박테리아에서 발현시키는 방법은 당업계에 주지되어 있다(예를 들어, WO 99/54440, 문헌[Ausubel, Current Protocols in Molecular Biology, Green Publishing Associates and Wiley Interscience, N. Y. 1989 and 1994] 또는 [Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N. Y., 2001]).
펩티드 링커는 프로테아제, 특히 매트릭스 메탈로프로테이나제(MMP)에 의해 절단될 수 없는 안정한 링커일 수 있다.
링커는 가요성 링커일 수도 있다. 예시적인 가요성 링커는 글리신 중합체 (G)n(서열번호 78), 글리신-세린 중합체(예를 들어, (GS)n(서열번호 79), (GSGGS)n(서열번호 80), (GGGGS)n(서열번호 81) 및 (GGGS)n(서열번호 82) 포함, n은 1 이상의 정수임), 글리신-알라닌 중합체, 알라닌-세린 중합체, 및 기타 당업계에 공지된 가요성 링커를 포함한다. 글리신 및 글리신-세린 중합체는 상대적으로 구조화되지 않았으므로, 구성 요소 사이에서 중성 테더(tether) 역할을 할 수 있다. 글리신은 심지어 알라닌보다 훨씬 더 많은 phi-psi 공간에 접근하고 더 긴 측쇄를 가진 잔기보다 훨씬 덜 제한적이다(문헌[Scheraga, Rev. Computational Chem. 11 173-142 (1992)] 참고). 당업자는 항체 융합 단백질의 설계가 모두 또는 부분적으로 가요성인 링커를 포함할 수 있음을 인식할 것이고, 따라서 링커는 가요성 링커 부분 및 원하는 항체 융합 단백질 구조를 제공하도록 덜 가요성인 구조를 부여하는 하나 이상의 부분을 포함할 수 있다.
또한, 예시적인 링커는 (GGGGS)n(서열번호 81)(이때 n은 1 내지 8의 정수임), 예를 들어 (GGGGS)3(서열번호 76), (GGGGS)4(서열번호 77), 또는 (GGGGS)6(서열번호 83)과 같은 아미노산 서열도 포함한다. 일부 양태에서, 펩티드 링커는 (GSTSGSGKPGSGEGS)n(서열번호 84)(이때 n은 1 내지 3의 정수임)의 아미노산 서열을 포함한다.
비펩티드 링커
2개의 모이어티의 커플링은 2개의 구성 요소가 각각의 활성, 예를 들어 각각 항-스클레로스틴 다중특이성 항체에서 스클레로스틴 및 제2 제제에 결합하는 활성을 보유하는 한 두 분자에 결합할 임의의 화학 반응에 의해 달성될 수 있다. 이러한 연결에는 많은 화학적 메커니즘, 예를 들어 공유 결합, 친화도 결합, 인터칼레이션, 배위 결합 및 복합체 형성이 포함될 수 있다. 일부 양태에서, 결합은 공유 결합이다. 공유 결합은 기존 측쇄의 직접 축합 또는 외부 가교 분자의 혼입에 의해 달성될 수 있다. 많은 2가 또는 다가 연결제가 이러한 맥락에서 단백질 분자를 커플링하는 데 유용할 수 있다. 예를 들어, 대표적인 커플링제는 티오에스터, 카보디이미드, 숙신이미드 에스터, 디이소시아네이트, 글루타르알데히드, 디아조벤젠 및 헥사메틸렌 디아민을 포함할 수 있다. 이러한 목록은 당업계에 공지된 다양한 클래스의 커플링제를 망라하는 것이 아니라, 보다 일반적인 커플링제의 예시하고자 의도된 것이다(문헌[Killen and Lindstrom, Jour. Immun. 133:1335-2549 (1984)]; [Jansen et al., Immunological Reviews 62:185-216 (1982)]; 및 [Vitetta et al., Science 238:1098 (1987)] 참고).
본원에 적용될 수 있는 링커는 문헌에 기재되어 있다(예를 들어, MBS(M-말레이미도벤조일-N-하이드록시숙신이미드 에스터)의 용도를 설명하는 문헌[Ramakrishnan, S. et al., Cancer Res. 44:201-208 (1984)] 참고). 일부 양태에서, 본원에 사용되는 비-펩티드 링커는 하기를 포함한다: (i) EDC(1-에틸-3-(3-디메틸아미노-프로필) 카보디이미드 하이드로클로라이드, (ii) SMPT(4-숙신이미딜옥시카보닐-알파-메틸-알파-(2-프리딜-디티오)-톨루엔(Pierce Chem. Co., Cat. (21558G)), (iii) SPDP(숙신이미딜-6-[3-(2-피리딜디티오)-프로피온아미도]-헥사노에이트)(Pierce Chem. Co., Cat #21651G), (iv) 설포-LC-SPDP(설포숙신이미딜 6-[3-(2-피리딜디티오)-프로피온아미도]-헥사노에이트)(Pierce Chem. Co. Cat. #2165-G); 및 (v) EDC에 접합된 설포-NHS(N-하이드록시설포-숙신이미드: Pierce Chem. Co., Cat. #24510).
상기 기재된 링커는 상이한 속성을 갖는 구성 요소를 함유하므로, 상이한 물리-화학적 특성을 갖는 이중특이성 항체를 유도할 수 있다. 예를 들어, 알킬 카르복실레이트의 설포-NHS 에스터는 방향족 카르복실레이트의 설포-NHS 에스터보다 더 안정적이다. NHS-에스터 함유 링커는 설포-NHS 에스터보다 용해도가 낮다. 또한, 링커 SMPT는 입체장애 다이설파이드 결합을 포함하고, 안정성이 증가된 항체 융합 단백질을 형성할 수 있다. 디설파이드 연결기는 일반적으로 디설파이드 연결기가 시험관내에서 절단되어 이용가능한 항체 융합 단백질을 덜 생성하기 때문에 다른 연결기보다 덜 안정적이다. 특히, 설포-NHS는 카보디이미드 커플링의 안정성을 향상시킬 수 있다. 설포-NHS와 함께 사용할 때, 카보디이미드 커플링(예컨대, EDC)은 카보디이미드 커플링 반응 단독보다, 가수분해에 더 내성이 있는 에스터를 형성한다.
III. 제조 방법
일부 양태에서, 스클레로스틴에 특이적으로 결합하는 항-스클레로스틴 구축물 또는 항체 모이어티의 제조 방법, 및 항-스클레로스틴 구축물 또는 항체 모이어티를 제조하는 동안 생성되는 조성물, 예컨대 폴리뉴클레오티드, 핵산 구축물, 벡터, 숙주 세포 또는 배양 배지가 제공된다. 본원에 기재된 항-스클레로스틴 구축물 또는 항체 모이어티 또는 조성물은 일반적으로 하기 및 보다 구체적으로 실시예에 기재된 다수의 공정에 의해 제조될 수 있다.
항체 발현 및 생성
본원에 기재된 항체(항-스클레로스틴 단클론 항체, 항-스클레로스틴 이중특이성 항체 및 항-스클레로스틴 항체 모이어티 포함)는 하기 및 실시예에 기재된 것을 포함하여 당업계에 공지된 임의의 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
단클론항체
단클론 항체는 실질적으로 균질한 항체 집단으로부터 얻어지고, 즉 집단을 구성하는 개별 항체는 소량으로 존재할 수 있는 가능한 천연 발생 돌연변이 및/또는 번역 후 변형(예컨대, 이성체화, 아미드화)을 제외하고는 동일하다. 따라서, "단클론"이라는 수식어는 개별 항체의 혼합물이 아닌 항체의 특성을 나타낸다. 예를 들어, 단클론 항체는 문헌[Kohler et al., Nature, 256:495 (1975)]에 처음 기재된 하이브리도마 방법을 사용하여 제조될 수 있거나 재조합 DNA 방법(US 4,816,567)에 의해 제조될 수 있다. 하이브리도마 방법에 있어서, 마우스, 또는 햄스터나 라마와 같은 다른 적절한 숙주 동물은, 면역화에 사용되는 단백질에 특이적으로 결합할 항체를 생성하거나 생성할 수 있는 림프구를 유도하기 위해 상기 기재된 바와 같이 면역화된다. 대안적으로, 림프구는 시험관내에서 면역화될 수 있다. 이어서, 림프구는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 적합한 융합제를 사용하여 골수종 세포와 융합되어 하이브리도마 세포를 형성한다(문헌[Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp. 59-103 (Academic Press, 1986)]). 또한, 낙타에서의 면역화에 대한 실시예 1을 참고한다.
면역화제는 전형적으로 항원성 단백질 또는 이의 융합 변이체를 포함할 것이다. 면역화제는 정제된 전장 또는 절두된 스클레로스틴 폴리펩티드, 또는 이의 변이체 또는 단편(즉, 펩티드)으로 구성될 수 있다. 이러한 펩티드는 재조합 분자 방법론에 의해 더 큰 폴리펩티드의 단백질분해 절단에 의해 생성될 수 있거나, 본원에 기재되고 당업계에 공지된 방법에 의해 화학적으로 합성될 수 있다. LRP6과 복합체를 이루는 인간 스클레로스틴의 결정학적 구조에 기초하여(문헌[Kim, J. 2020, Nat Commun 11: 5357-5357]), 'IGRGKWWR' 모티프(서열번호 186)를 함유하는 루프 팁(loop tip)은 LRP6의 제1 프로펠러에 대한 스클레로스틴의 결합에 대한 주요 결합 결정인자인 것으로 밝혀졌다. 면역화제로서 유용한 펩티드는 전형적으로 제2 루프 상의 'IGRGKWWR' 모티프를 포함하는 스클레로스틴 아미노산 서열, 예컨대 본원에 기재된 것으로부터 적어도 7개의 연속 아미노산의 아미노산 서열을 가질 수 있고, 바람직하게는 'IGRGKWWR' 모티프를 포함하는 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 24개의 연속 아미노산을 갖는다. 특정 다른 바람직한 펩티드 제제는 'IGRGKWWR' 모티프를 포함하는 스클레로스틴 서열의 8개 이상 내지 12개 이하 또는 그 이상의 연속 아미노산을 포함하고, 다른 바람직한 펩티드 제제는 스클레로스틴 폴리펩티드의 제2 루프의 24개의 연속 아미노산을 포함한다. 다른 바람직한 펩티드 제제는 이의 제2 루프에서의 'IGRGKWWR' 모티프를 포함하는 8 내지 24개(8 및 24개 포함)의 연속 아미노산의 임의의 전체 정수 개수, 또는 전장 스클레로스틴 서열을 포함하는 폴리펩티드를 포함한다. 한 양태 내에서, 면역화제는 전장 인간 스클레로스틴, 또는 바람직하게는 이의 제2 루프의 일부(예를 들어 스클레로스틴 상의 제2 루프의 'IGRGKWWR' 모티프를 특이적으로 인식하는 항체를 생성하도록, 아미노산 110 내지 133, 보다 바람직하게는 119 내지 130, 보다 바람직하게는 116 내지 126, 보다 바람직하게는 118 내지 125를 포함하는 본원에 기재된 바와 같은 제2 루프 내의 합성된 펩티드)이다. 일반적으로, 인간 기원의 세포가 필요한 경우 말초 혈액 림프구("PBL")가 사용되거나, 비인간 포유동물 공급원이 필요한 경우 비장 세포 또는 림프절 세포가 사용된다. 이어서, 림프구는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 적합한 융합제를 사용하여 불멸화 세포주와 융합되어 하이브리도마 세포를 형성한다(문헌[Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, Academic Press (1986), pp. 59-103]).
불멸화 세포주는 일반적으로 형질전환된 포유동물 세포, 특히 설치류, 소 및 인간 기원의 골수종 세포이다. 통상적으로, 래트 또는 마우스 골수종 세포주가 사용된다. 이렇게 제조된 하이브리도마 세포는 바람직하게는 융합되지 않은 모 골수종 세포의 성장 또는 생존을 억제하는 하나 이상의 물질을 포함하는 적합한 배양 배지에서 시딩 및 성장된다. 예를 들어, 부모 골수종 세포에 HGPRT 또는 HPRT(하이포잔틴 구아닌 포스포리보실 트랜스퍼라제) 효소가 부족한 경우, 하이브리도마를 위한 배양 배지는 전형적으로 HGPRT-결핍 세포의 성장을 방지하는 물질인 하이포잔틴, 아미노프테린 및 티미딘(HAT 배지)을 포함한다.
바람직한 불멸화 골수종 세포는 효율적으로 융합하고, 선택된 항체 생성 세포에 의한 안정적인 고수준 항체 생성을 지원하고, HAT 배지와 같은 배지에 민감한 세포이다. 이들 중에서, Salk Institute Cell Distribution Center(San Diego, CA, USA)로부터 입수가능한 MOPC-21 및 MPC-11 마우스 종양으로부터 유래된 것과 같은 뮤린 골수종 세포주, 및 American Type Culture Collection(Manassas, VA, USA)으로부터 이용가능한 SP-2 세포(및 이들의 유도체, 예를 들어, X63-Ag8-653)가 바람직하다. 인간 골수종 및 마우스-인간 이종골수종 세포주는 또한 인간 단클론 항체의 생성에 대해 기재된 바 있다(문헌[Kozbor, J. Immunol ., 133:3001 (1984)]; [Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)]).
하이브리도마 세포가 성장하고 있는 배양 배지는 항원에 대한 단클론 항체 생성에 대해 분석된다. 바람직하게는, 하이브리도마 세포에 의해 생성된 단클론 항체의 결합 특이성은 면역침전법, 또는 방사면역분석법(RIA) 또는 효소-연결 면역흡착 분석법(ELISA)과 같은 시험관내 결합 분석법에 의해 측정된다.
하이브리도마 세포가 배양되는 배양 배지는 원하는 항원에 대한 단클론 항체의 존재에 대해 검정될 수 있다. 바람직하게는, 단클론 항체의 결합 친화도 및 특이성은 면역침전법, 또는 방사면역분석법(RIA) 또는 효소-연결 면역흡착 분석법((ELISA)과 같은 시험관내 결합 분석에 의해 측정될 수 있다. 이러한 기술 및 검정은 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 결합 친화도는 문헌[Munson et al., Anal. Biochem ., 107:220 (1980)]의 스캐처드(Scatchard) 분석에 의해 측정될 수 있다. Wnt 활성을 억제하는 스클레로스틴의 능력을 특이적으로 중화시키는 단클론 항체를 선택하기 위해, 생성된 하이브리도마는 전장 인간 스클레로스틴, 및 ELISA 또는 BLI 접근법을 사용하여 'IGRGKWWR' 모티프를 함유하는 제2 루프로부터의 펩티드 둘 다와 반응성인 항체의 존재를 판정하기 위해 스크리닝될 수 있다. 실시예 3 및 4에 기재된 바와 같이, 전장 스클레로스틴 및 이의 'IGRGKWWR' 모티프를 함유하는 펩티드 둘 다에 특이적으로 결합하는 단클론 항체를 생성하는 하이브리도마가 바람직하다. 또한, 실시예 7에 기재된 바와 같이, HEK293/TCF/LEF/Wnt1 리포터 유전자 분석(문헌[Hannoush RN., 2008, PLoS ONE, 3: e3498])을 사용하여 LRP5 또는 LRP6과 같은 저밀도 지단백질 수용체 관련 단백질 계열 구성원에 대한 전장 인간 스클레로스틴의 결합을 차단, 손상 또는 억제할 수 있는 단클론 항체를 선택한다.
원하는 특이성, 친화도 및/또는 활성의 항체를 생성하는 하이브리도마 세포가 확인된 후, 클론은 제한 희석 절차에 의해 서브클로닝되고 표준 방법에 의해 성장될 수 있다(상기 문헌[Goding]). 이러한 목적에 적합한 배양 배지는, 예를 들어 D-MEM 또는 RPMI-1640 배지를 포함한다. 또한, 하이브리도마 세포는 포유동물에서 생체내에서 종양으로서 성장될 수 있다.
서브클론에 의해 분비된 단클론 항체는, 예를 들어 단백질 A-세파로스, 하이드록실아파타이트 크로마토그래피, 겔 전기영동, 투석 또는 친화도 크로마토그래피와 같은 통상적인 면역글로불린 정제 절차에 의해 배양 배지, 복수액 또는 혈청으로부터 적절하게 분리된다.
단클론 항체는 또한 재조합 DNA 방법, 예를 들어 US 4,816,567에 기재된 바와 같은 재조합 DNA 방법에 의해 제조될 수 있다. 단클론 항체를 인코딩하는 DNA는 통상적인 절차를 사용하여(예를 들어, 뮤린 항체의 중쇄 및 경쇄를 인코딩하는 유전자에 특이적으로 결합할 수 있는 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용하여) 용이하게 단리되고 시퀀싱된다. 하이브리도마 세포는 이러한 DNA의 바람직한 공급원으로서 역할을 한다. 일단 단리되면, 이러한 재조합 숙주 세포에서 단클론 항체를 합성하기 위해, DNA는 발현 벡터에 배치된 후, 대장균 세포, 유인원 COS 세포, 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포, 또는 다르게는 면역글로불린 단백질을 생성하지 않는 골수종 세포와 같은 숙주 세포에 형질감염된다. 항체를 인코딩하는 DNA의 박테리아에서의 재조합 발현에 관한 리뷰물은 문헌[Skerra et al., Curr. Opinion in Immunol ., 5:256-262 (1993)] 및 문헌[Pluckthun, Immunol. Revs. 130:151-188 (1992)]을 포함한다.
추가 양태에서, 문헌[McCafferty et al., Nature, 348:552-554 (1990)]에 기재된 기술을 사용하여 생성된 항체 파지 라이브러리로부터 항체를 단리할 수 있다. 문헌[Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991)] 및 [Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991)]은 각각 파지 라이브러리를 사용하는 뮤린 및 인간 항체의 단리를 기술한다. 후속 공보에는 쇄 뒤섞기(chain suffling)에 의한 고친화도(nM 범위) 인간 항체의 생성(문헌[Marks et al., Bio/Technology, 10:779-783 (1992)]) 및 매우 큰 파지 라이브러리 구축을 위한 전략으로서 조합적 감염 및 생체내 재조합(문헌[Waterhouse et al., Nucl. Acids Res., 21:2265-2266 (1993)])을 기술한다. 따라서, 이러한 기술은 단클론 항체의 단리를 위한 전통적인 단클론 항체 하이브리도마 기술에 대한 실행가능한 대안이다.
DNA는 또한, 예를 들어 상동 뮤린 서열 대신에 인간 중쇄 및 경쇄 불변 도메인에 대한 코딩 서열을 치환함으로써(US 4,816,567; 문헌[Morrison, et al., Proc . Natl Acad. Sci . USA, 81:6851 (1984)]), 또는 비-면역글로불린 폴리펩티드에 대한 코딩 서열의 전부 또는 일부를 면역글로불린 코딩 서열에 공유 접합시킴으로써 변형될 수 있다. 전형적으로, 이러한 비-면역글로불린 폴리펩티드는 항체의 불변 도메인을 치환하거나, 항체의 하나의 항원 결합 부위의 가변 도메인을 치환하여 항원에 특이성을 갖는 하나의 항원 결합 부위 및 상이한 항원에 대한 특이성을 갖는 또 다른 항원 결합 부위를 함유하는 키메라 2가 항체를 생성한다.
본원에 기재된 단클론 항체는 1가일 수 있고, 그의 제조는 당업계에 주지되어 있다. 예를 들어, 한 방법은 면역글로불린 경쇄 및 변형된 중쇄의 재조합 발현을 수반한다. 중쇄는 중쇄 가교결합을 방지하기 위해 일반적으로 Fc 영역의 임의의 지점에서 절두된다. 대안적으로, 관련 시스테인 잔기는 다른 아미노산 잔기로 치환되거나 가교결합을 방지하기 위해 결실될 수 있다. 시험관내 방법은 또한 1가 항체를 제조하는 데 적합하다. 그의 단편, 특히 Fab 단편을 생성하기 위한 항체의 소화는 당업계에 공지된 통상적인 기술을 사용하여 달성될 수 있다.
키메라 또는 하이브리드 항체는 또한 가교결합제를 포함하는 방법을 비롯한 합성 단백질 화학의 공지된 방법을 사용하여 시험관내에서 제조될 수 있다. 예를 들어, 면역독소는 디설파이드-교환 반응을 사용하거나 티오에터 결합을 형성함으로써 구축될 수 있다. 이러한 목적에 적합한 시약의 예는 이미노티올레이트 및 메틸-4-메르캅토부티르이미데이트를 포함한다.
항체 모이어티를 인코딩하는 핵산 분자
일부 양태에서, 본원에 기재된 항-스클레로스틴 구축물 또는 항체 모이어티 중 어느 하나를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 일부 양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나를 사용하여 제조된 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 일부 양태에서, 핵산 분자는 항체 모이어티(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)의 중쇄 또는 경쇄를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 일부 양태에서, 핵산 분자는 항체 모이어티(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)의 중쇄를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 경쇄를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 둘 다 포함한다. 일부 양태에서, 제1 핵산 분자는 중쇄를 인코딩하는 제1 폴리뉴클레오티드를 포함하고, 제2 핵산 분자는 경쇄를 인코딩하는 제2 폴리뉴클레오티드를 포함한다.
이러한 일부 양태에서, 중쇄 및 경쇄는 하나의 핵산 분자로부터, 또는 2개의 분리된 폴리펩티드로서 2개의 분리된 핵산 분자로부터 발현된다. 항체가 scFv인 경우와 같은 일부 양태에서, 단일 폴리뉴클레오티드는 함께 연결된 중쇄 및 경쇄를 둘 다 포함하는 단일 폴리펩티드를 인코딩한다.
일부 양태에서, 항체 모이어티(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)의 중쇄 또는 경쇄를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드는 리더 서열을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하고, 이는 번역될 때, 중쇄 또는 경쇄의 N-말단에 위치한다. 상기 논의된 바와 같이, 리더 서열은 천연 중쇄 또는 경쇄 리더 서열일 수 있거나, 또 다른 이종 리더 서열일 수 있다.
일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 DNA이다. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 RNA이다. 일부 양태에서, RNA는 mRNA이다.
당업계에 통상적인 재조합 DNA 기술을 사용하여 핵산 분자를 구축할 수 있다. 일부 양태에서, 핵산 분자는 선택된 숙주 세포에서의 발현에 적합한 발현 벡터이다.
핵산 구조
일부 양태에서, 본원에 기재된 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나를 포함하는 핵산 구조가 제공된다. 일부 양태에서, 본원에 기재된 임의의 방법을 사용하여 제조된 핵산 구조가 제공된다.
일부 양태에서, 핵산 구축물은 폴리뉴클레오티드에 작동가능하게 연결된 프로모터를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 폴리뉴클레오티드는 유전자에 상응하고, 이때 프로모터는 유전자에 대한 야생형 프로모터이다.
벡터
일부 양태에서, 본원에 기재된 항체 모이어티(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티) 또는 본원에 기재된 핵산 구축물 중 어느 하나의 중쇄 및/또는 경쇄를 인코딩하는 임의의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터가 제공된다. 일부 양태에서, 본원에 기재된 임의의 방법을 사용하여 제조된 벡터가 제공된다. 항체, scFv, 융합 단백질 또는 본원에 기재된 다른 형태의 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 scFv)과 같은 임의의 항-스클레로스틴 구축물을 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터도 제공된다. 이러한 벡터는 DNA 벡터, 파지 벡터, 바이러스 벡터, 레트로바이러스 벡터 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 양태에서, 벡터는 중쇄를 인코딩하는 제1 폴리뉴클레오티드 서열 및 경쇄를 인코딩하는 제2 폴리뉴클레오티드 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄 및 경쇄는 2개의 분리된 폴리펩티드로서 벡터로부터 발현된다. 일부 양태에서, 중쇄 및 경쇄는, 예를 들어 항체가 scFv인 경우 단일 폴리펩티드의 일부로서 발현된다.
일부 양태에서, 제1 벡터는 중쇄를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하고 제2 벡터는 경쇄를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 일부 양태에서, 제1 벡터 및 제2 벡터는 유사한 양(예를 들어, 유사한 몰량 또는 유사한 질량 양)으로 숙주 세포에 형질감염된다. 일부 양태에서, 제1 벡터와 제2 벡터의 5:1 내지 1:5의 몰비 또는 질량비가 숙주 세포로 형질감염된다. 일부 양태에서, 중쇄를 인코딩하는 벡터와 경쇄를 인코딩하는 벡터에 대해 1:1 내지 1:5의 질량비가 사용된다. 일부 양태에서, 중쇄를 인코딩하는 벡터와 경쇄를 인코딩하는 벡터에 대해 1:2의 질량비가 사용된다.
일부 양태에서, CHO 또는 CHO-유래 세포, 또는 NS0 세포에서 폴리펩티드의 발현을 위해 최적화된 벡터가 선택된다. 이러한 벡터의 예는, 예를 들어 문헌[Running Deer et al., Biotechnol. Prog. 20:880-889 (2004)]에 기재되어 있다.
숙주 세포
일부 양태에서, 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드, 핵산 구축물 및/또는 벡터를 포함하는 숙주 세포가 제공된다. 일부 양태에서, 본원에 기재된 임의의 방법을 사용하여 제조된 숙주 세포가 제공된다. 일부 양태에서, 숙주 세포는 발효 조건하에 본원에 기재된 임의의 항체 모이어티를 생성할 수 있다.
일부 양태에서, 본원에 기재된 항체 모이어티(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)는 원핵 세포, 예컨대 박테리아 세포; 또는 진균 세포(예컨대, 효모), 식물 세포, 곤충 세포 및 포유동물 세포와 같은 진핵 세포에서 발현될 수 있다. 이러한 발현은, 예를 들어 당업계에 공지된 절차에 따라 수행될 수 있다. 폴리펩티드를 발현하는 데 사용될 수 있는 예시적인 진핵 세포는 비제한적으로 COS 7 세포를 비롯한 COS 세포; 293-6E 세포를 비롯한 293 세포; CHO-S, DG44. Lec13 CHO 세포 및 FUT8 CHO 세포를 비롯한 CHO 세포; PER.C6® 세포(Crucell); 및 NS0 세포를 포함한다. 일부 양태에서, 본원에 기재된 항체 모이어티(예를 들어, 항-스클레로스틴 항체 모이어티)는 효모에서 발현될 수 있다. 예를 들어, 미국 공개 번호 US 2006/0270045 A1을 참고한다. 일부 양태에서, 특정 진핵 숙주 세포는 항체 모이어티의 중쇄 및/또는 경쇄에 원하는 번역후 변형을 제조하는 능력에 기초하여 선택된다. 예를 들어, 일부 양태에서, CHO 세포는 293 세포에서 생성된 동일한 폴리펩티드보다 더 높은 수준의 시알화를 갖는 폴리펩티드를 생성한다.
하나 이상의 핵산을 원하는 숙주 세포로 도입하는 것은 임의의 방법, 예컨대 비제한적으로 인산칼슘 형질감염, DEAE-덱스트란 매개 형질감염, 양이온성 지질 매개 형질감염, 전기천공법, 형질도입, 감염 등에 의해 달성될 수 있다. 비제한적인 예시적 방법은, 예를 들어 문헌[Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 3rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press (2001)]에 기재되어 있다. 핵산은 임의의 적합한 방법에 따라 원하는 숙주 세포에서 일시적으로 또는 안정적으로 형질감염될 수 있다.
본원은 또한 본원에 기재된 임의의 폴리뉴클레오티드 또는 벡터를 포함하는 숙주 세포를 제공한다. 일부 양태에서, 본 발명은 항-스클레로스틴 항체를 포함하는 숙주 세포를 제공한다. 이종 DNA를 과발현할 수 있는 임의의 숙주 세포는 관심 항체, 폴리펩티드 또는 단백질을 인코딩하는 유전자를 단리하기 위해 사용될 수 있다. 포유동물 숙주 세포의 비제한적 예는 COS, HeLa 및 CHO 세포를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 또한 PCT 공개 번호 WO 87/04462를 참고한다. 적합한 비포유동물 숙주 세포는 원핵생물(예컨대, E. coli 또는 B. subtillis) 및 효모(예컨대, S. cerevisae, S. pombe; 또는 K. lactis)를 포함한다.
일부 양태에서, 항체 모이어티는 세포-부재 시스템에서 생성된다. 비제한적인 예시적인 세포-부재 시스템은, 예를 들어 문헌[Sitaraman et al., Methods Mol . Biol . 498: 229-44 (2009)]; [Spirin, Trends Biotechnol . 22: 538-45 (2004)]; [Endo et al., Biotechnol. Adv. 21: 695-713 (2003)]에 기재되어 있다.
배양 배지
일부 양태에서, 본원에 기재된 임의의 항체 모이어티, 폴리뉴클레오티드, 핵산 구축물, 벡터 및/또는 숙주 세포를 포함하는 배양 배지가 제공된다. 일부 양태에서, 본원에 기재된 임의의 방법을 사용하여 제조된 배양 배지가 제공된다.
일부 양태에서, 배지는 하이포크산틴, 아미노프테린, 및/또는 티미딘(예를 들어, HAT 배지)을 포함한다. 일부 양태에서, 배지는 혈청을 포함하지 않는다. 일부 양태에서, 배지는 혈청을 포함한다. 일부 양태에서, 배지는 D-MEM 또는 RPMI-1640 배지이다.
항체 모이어티의 정제
항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 항-스클레로스틴 단클론 항체 또는 다중특이성 항체)은 임의의 적합한 방법에 의해 정제될 수 있다. 이러한 방법에는 친화도 매트릭스 또는 소수성 상호작용 크로마토그래피의 사용이 포함되나 이에 제한되지 않는다. 적합한 친화도 리간드는 ROR1 ECD 및 항체 불변 영역에 결합하는 리간드를 포함한다. 예를 들어, 단백질 A, 단백질 G, 단백질 A/G 또는 항체 친화도 컬럼을 사용하여 불변 영역에 결합하고 Fc 단편을 포함하는 항-스클레로스틴 구축물을 정제할 수 있다. 예를 들어, 부틸 또는 페닐 컬럼과 같은 소수성 상호작용 크로마토그래피는 또한 항체와 같은 일부 폴리펩티드를 정제하는 데 적합할 수 있다. 이온 교환 크로마토그래피(예컨대, 음이온 교환 크로마토그래피 및/또는 양이온 교환 크로마토그래피)는 또한 항체와 같은 일부 폴리펩티드를 정제하는 데 적합할 수 있다. 혼합 모드 크로마토그래피(예컨대, 역상/음이온 교환, 역상/양이온 교환, 친수성 상호작용/음이온 교환, 친수성 상호작용/양이온 교환 등)도 항체와 같은 일부 폴리펩티드를 정제하는 데 적합할 수 있다. 폴리펩티드를 정제하는 다수의 방법이 당업계에 공지되어 있다.
IV. 치료 방법
일부 양태에서, 개체에게 효과량의 항-스클레로스틴 구축물 또는 본원에 기재된 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 양태에서, 질환 또는 병태는 골 관련 장애 또는 연골 관련 장애, 골수 또는 혈액학적 장애, 근골격계 희귀 질환, 근육 관련 장애 또는 암이다.
본원에 기재된 방법은 임의의 골 관련 질환 또는 병태에 적용가능하다. 일부 양태에서, 골 관련 장애는 골형성 부전증, 골다공증 또는 골감소증(남성 및/또는 여성에서), 골 괴사, 골 치유 지연, 불유합 골절, 다발성 골수종, 다발성 골수종 관련 골 장애, 원발성 골 종양, 악성 종양의 골 전이, 염증성 또는 감염성 골 질환, 골연화증, 고칼슘혈증, 파제트병, 부동화-유도된 골 손실, 글루코코르티코이드-유도된 골 손실, 관절염-유도된 골 손실을 비롯한 염증-유도된 골 손실, 우주비행 골다공증/골감소증, 감소된 중력에 의해 야기되는 골 손실, 또는 a) 양적, 질적 또는 둘 다의 골 손실, 및/또는 b) 골 구조 및 질의 이상과 관련된 기타 질환 또는 병태이다. 일부 양태에서, 골 관련 장애는 골다공증 또는 골감소증이다. 일부 양태에서, 골 관련 장애는 골형성 부전증이다. 일부 양태에서, 골 관련 장애는 다발성 골수종, 또는 다발성 골수종 관련 골 장애이다.
일부 양태에서, 질환 또는 병태는 연골 장애이다. 일부 양태에서, 연골 장애는 연골종증, 연골이형성증, 연골무형성증, 골단 이형성증, 연골이형성 근긴장증, 피질주위 연골종, 무릎 연골 파열, 골섬유성 이형성증, 골관절염, 골형성 부전증, 저인산혈증 구루병 또는 골연골이영양증이다.
일부 양태에서, 질환 또는 병태는 근육 관련 장애이다. 일부 양태에서, 근육 관련 장애는 근육감소증 또는 암 근육감소증이다.
일부 양태에서, 질환 또는 병태는 암(예를 들어, 혈액 악성 종양, 예를 들어 다발성 골수종)이다.
일부 양태에서, 개체에게 효과량의 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물)을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 골 또는 관절 수술 후 치유를 촉진하는 방법이 제공된다.
일부 양태에서, 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)(이때 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 15 또는 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함함)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물의 효과량을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태(예컨대, 골 관련 질환)을 치료하는 방법이 제공된다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 RANKL을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물의 효과량을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태(예를 들어, 골 관련 질환)를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하고, 이때 VH -1은 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL -1은 i) 서열번호 15 또는 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하고, 이때 VH -2는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 제1 항체 모이어티 및 DKK1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는 다중특이성 구축물의 효과량을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태(예를 들어, 골 관련 질환)를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 양태에서, 제1 항체 모이어티는 제1 중쇄 가변 영역(VH -1) 및 제1 경쇄 가변 영역(VL - 1)을 포함하고, 이때 VH -1은 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL-1은 i) 서열번호 15 또는 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 제2 항체 모이어티는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하고, 이때 a) VH -2는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; b) VH -2는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; c) VH -2는 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL-2는 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 대상은 포유동물(예컨대, 인간)이다.
항-스클레로스틴 구축물의 투여량 및 투여 방법
개체에게 투여되는 본원에 기재된 질환 또는 장애를 치료하기 위해 사용되는 항-스클레로스틴 구축물의 투여 요법(예컨대, 특정 투여량 및 빈도)은 특정 항-스클레로스틴 구축물(예컨대, 항-스클레로스틴 단클론 또는 다중특이성 항체, 예컨대 항-스클레로스틴 융합 단백질), 투여 방식, 치료할 질환 또는 병태의 유형에 따라 다를 수 있다.
상기 양상 중 임의의 것의 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물(예컨대, 항-스클레로스틴 단클론 또는 다중특이성 항체)의 효과량은 약 0.001 μg/kg 내지 약 500 mg/kg 총 제중, 예를 들어, 약 0.005 μg/kg 내지 약 100 mg/kg, 약 0.01 μg/kg 내지 약 50 mg/kg, 또는 약 0.01 μg/kg 내지 약 5 mg/kg의 범위이다.
일부 양태에서, 치료는 항-스클레로스틴 구축물의 1회 초과의 투여(예컨대, 항-스클레로스틴 구축물의 약 2회, 3회, 4회, 5회, 6회, 7회, 8회, 야간 또는 10회 투여)를 포함한다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 대략 매일, 매주, 주당 2회, 월 1회, 3개월마다 1회, 6개월마다 1회, 또는 1년에 1회의 빈도로 투여된다.
항-스클레로스틴 구축물은, 예를 들어 정맥내, 관절내, 동맥내, 복강내, 폐내, 경구, 흡입, 방광내, 근육내, 기관내, 피하, 안내, 경막내, 경점막 및 경피를 포함하는 다양한 경로를 통해 개체(예컨대, 인간)에게 투여될 수 있다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 개체에게 투여되는 동안 약학 조성물에 포함된다. 일부 양태에서, 조성물의 지속적 연속 방출 제형이 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 정맥내로 투여된다. 일부 양태에서, 조성물은 복강내로 투여된다. 일부 양태에서, 조성물은 정맥내로 투여된다. 일부 양태에서, 조성물은 복강내로 투여된다. 일부 양태에서, 조성물은 근육내로 투여된다. 일부 양태에서, 조성물은 피하로 투여된다. 일부 양태에서, 조성물은 정맥내로 투여된다. 일부 양태에서, 조성물은 경구 투여된다.
병용 요법
본원은 또한 질환 또는 병태(예컨대, 골 관련 질환)를 치료하기 위해 항-스클레로스틴 구축물을 개체에게 투여하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 제2 제제 또는 치료제를 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 제2 제제 또는 치료제는 질환 또는 병태를 치료하기 위한 표준 또는 일반적으로 사용되는 제제 또는 치료제다.
일부 양태에서, a) 효과량의 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물); 및 b) 제2 치료제 또는 제제를 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태(예를 들어, 골 관련 질환)를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 양태에서, 제2 치료제 또는 제제는 항-DKK1 항체 또는 항-RANKL 항체이다. 일부 양태에서, 제2 제제 또는 치료제는 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 비스포스포네이트, 프로스타글란딘 E(PGE) 수용체 작용제, VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴) 및 칼시토닌으로 이루어진 군으로부터 선택된 제제를 포함한다.
일부 양태에서, a) 효과량의 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물); 및 b) 항-DKK1 항체를 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태(예를 들어, 골 관련 질환)를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 15 또는 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 항-DKK1 항체는 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하고, 이때 VH -2는 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, a) 효과량의 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물); 및 b) 항-RANKL 항체를 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태(예를 들어, 골 관련 질환)를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물은 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하고, 이때 VH는 i) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열번호 15 또는 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 항-RANKL 항체는 제2 중쇄 가변 영역(VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하고, 이때 a) VH -2는 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; b) VH -2는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2는 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; c) VH -2는 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL-2는 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물 및 제2 제제 또는 치료제는 동시에 투여된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물 및 제2 제제 또는 치료제는 동시에 투여된다. 일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물 및 제2 제제 또는 치료제는 순차적으로 투여된다.
V. 조성물, 키트 및 제조품
또한, 본원에는, 본원에 기재된 항-스클레로스틴 구축물 또는 항-스클레로스틴 항체 모이어티, 상기 항체 모이어티를 인코딩하는 핵산, 상기 항체 모이어티를 인코딩하는 핵산을 포함하는 벡터, 및 상기 핵산 또는 벡터를 포함하는 숙주 세포 중 어느 하나를 포함하는 조성물(예컨대, 제형, 예를 들어 약학 조성물)이 제공된다.
일부 양태에서, 항-스클레로스틴 구축물(예를 들어, 본원에 기재된 임의의 항-스클레로스틴 구축물) 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물이 제공된다. 일부 양태에서, 조성물은 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴) 및 칼시토닌으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 추가로 포함한다.
본원에 기재된 항-스클레로스틴 구축물의 적합한 제형은 원하는 정도의 순도를 갖는 항-스클레로스틴 구축물 또는 항-스클레로스틴 항체 모이어티를 임의의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제와 혼합함으로써 동결건조 제형 또는 수용액 형태로 수득될 수 있다(문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)]). 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제는 사용된 용량 및 농도에서 수용자에게 무독성이고, 완충제, 예컨대 포스페이트, 시트레이트 및 기타 유기산; 아스코르브산 및 메티오닌을 비롯한 항산화제; 방부제(예컨대, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드, 헥사메토늄 클로라이드, 벤즈알코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 메틸 또는 프로필파라벤과 같은 알킬 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린과 같은 단백질; 올리비닐피롤리돈과 같은 친수성 중합체; 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신과 같은 아미노산; 포도당, 만노스 또는 덱스트린을 비롯한 단당류, 이당류 및 기타 탄수화물; EDTA와 같은 킬레이트제; 수크로즈, 만니톨, 트레할로즈 또는 소르비톨과 같은 당류; 나트륨과 같은 염 형성 반대 이온; 금속 착물(예컨대, Zn-단백질 착물); 및/또는 TWEENTM, PLURONICSTM 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 비이온성 계면활성제를 포함한다. 피하 투여에 적합한 동결건조 제형은 WO 97/04801에 기재되어 있다. 이러한 동결건조된 제형은 적합한 희석제에 의해 높은 단백질 농도로 재구성될 수 있고, 재구성된 제형은 본원에서 영상화, 진단 또는 치료될 개체에게 피하 투여될 수 있다.
생체내 투여에 사용되는 제제는 멸균 상태여야 한다. 이는, 예를 들어 멸균 여과막을 통한 여과에 의해 쉽게 달성된다.
또한 본원에 기재된 항-스클레로스틴 구축물 및 항-스클레로스틴 항체 모이어티 중 어느 하나를 포함하는 키트가 제공된다. 키트는 본원에 기재된 세포 조성 또는 치료를 조절하는 임의의 방법에 유용할 수 있다.
일부 양태에서, 스클레로스틴에 특이적으로 결합하는 항-스클레로스틴 구축물을 포함하는 키트가 제공된다.
일부 양태에서, 키트는 항-스클레로스틴 구축물을 개체에게 전달할 수 있는 장치를 추가로 포함한다. 비경구 전달과 같은 적용을 위한 한 가지 유형의 장치는 대상의 몸에 조성물을 주입하는 데 사용되는 주사기이다. 흡입 장치는 특정 응용 분야에도 사용할 수 있다.
일부 양태에서, 키트는 질환 또는 병태, 예를 들어 골 관련 질환, 예를 들어 골형성 부전증, 골석화증, 또는 골 손실과 관련된 질환 또는 병태를 치료하기 위한 치료제를 추가로 포함한다.
본원의 키트는 적합한 패키징에 있다. 적합한 패키징은 바이알, 병, 항아리, 가요성 패키징(예를 들어, 밀봉된 마일러(Mylar) 또는 플라스틱 백) 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 키트는 임의적으로 완충제 및 해석 정보와 같은 추가 구성 요소를 제공할 수 있다.
따라서 본원은 또한 제조품을 제공한다. 제조품은 용기, 및 용기 상에 또는 용기와 관련된 라벨 또는 패키지 삽입물을 포함할 수 있다. 적합한 용기는 바이알(예컨대, 밀봉된 바이알), 병, 자(jar), 가요성 패키징 등을 포함한다. 일반적으로, 용기는 조성물을 보유하고 멸균 접근 포트를 가질 수 있다(예를 들어, 용기는 정맥내 용액 백 또는 피하 주사 바늘로 뚫을 수 있는 마개를 갖는 바이알일 수 있음). 라벨 또는 패키지 삽입물은 조성물이 개체의 특정 병태를 영상화, 진단 또는 치료하는 데 사용됨을 나타낸다. 라벨 또는 패키지 삽입물은 조성물을 개체에게 투여하고 개체를 영상화하기 위한 지침을 추가로 포함할 것이다. 라벨에는 재구성 및/또는 사용 지침이 표시되어 있을 수 있다. 조성물을 수용하는 용기는 재구성된 제형의 반복 투여(예를 들어, 2 내지 6회 투여)를 허용하는 다용도 바이알일 수 있다. 패키지 삽입물은 이러한 진단 제품의 사용에 관한 적응증, 용법, 용량, 투여, 금기 사항 및/또는 경고에 대한 정보를 포함하는 진단 제품의 상업용 패키지에 관례적으로 포함된 지침을 지칭한다. 추가로, 제조품은 주사용 정균수(BWFI), 포스페이트 완충 식염수, 링거 용액 및 덱스트로스 용액과 같은 약학적으로 허용되는 완충제를 포함하는 제2 용기를 추가로 포함할 수 있다. 이는 상업적 및 사용자 관점에서 바람직한 다른 물질, 예컨대 기타 완충제, 희석제, 충전제, 바늘 및 주사기를 추가로 포함할 수 있다.
키트 또는 제조품은, 예를 들어 병원 약국 및 조제 약국과 같은 약국에서 보관 및 사용하기에 충분한 양으로 포장된 조성물의 다중 단위 용량 및 사용 설명서를 포함할 수 있다.
당업자는 본 발명의 범위 및 사상 내에서 여러 양태가 가능하다는 것을 인식할 것이다. 본 발명은 이제 하기 비제한적 실시예를 참조하여 보다 상세히 기술될 것이다. 하기 실시예는 본 발명을 추가로 예시하지만, 물론 그 범위를 어떤 식으로든 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다.
예시적인 양태
양태 1. 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 항체 모이어티가 스클레로스틴 상의 에피토프에 결합하고, 상기 에피토프가 서열번호 186에 제시된 아미노산 서열을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 2. 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 항체 모이어티가 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하고, 이때
VH가 서열번호 1 내지 4 및 12 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5 내지 8 및 13 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9 내지 11 및 14 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고;
VL이 서열번호 15 내지 17, 85 및 86 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18 및 19 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20 및 21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하는,
항-스클레로스틴 구축물.
양태 3. 양태 1 또는 2에 있어서,
(a) VH가 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15 또는 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
(b) VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는,
항-스클레로스틴 구축물.
양태 4. 양태 1 또는 2에 있어서,
VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 5. 양태 1 또는 2에 있어서,
VH가 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 6. 양태 1 또는 2에 있어서,
VH가 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 7. 양태 1 또는 2에 있어서,
VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 8. 양태 1 또는 2에 있어서,
VH가 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 9. 양태 1 또는 2에 있어서,
VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 10. 양태 1 또는 2에 있어서,
VH가 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하는고; VL이 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 11. 양태 1 또는 2에 있어서,
VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 12. 양태 1 또는 2에 있어서,
VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 13. 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 항체 모이어티가 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하고, 이때
(a) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 22에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 23에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(b) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 24에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 25에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(c) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 26에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 27에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(d) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 28에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 29에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(e) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 30에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 31에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(f) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 32에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 33에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(g) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 34에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 35에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(h) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 36에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 37에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(i) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 38에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 39에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(j) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 40에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 41에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(k) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 87에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 88에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(l) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 87에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 89에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
(m) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 87에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 90에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는,
항-스클레로스틴 구축물.
양태 14. 양태 1 내지 13 중 어느 한 양태에 있어서,
VH가 서열번호 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40 및 87 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고/하거나, VL이 서열번호 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41 및 88 내지 90 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
15. 양태 14에 있어서,
(a) VH가 서열번호 22의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 23의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(b) VH가 서열번호 24의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 25의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(c) VH가 서열번호 26의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 27의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(d) VH가 서열번호 28의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 29의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(e) VH가 서열번호 30의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 31의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(f) VH가 서열번호 32의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 33의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(g) VH가 서열번호 34의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 35의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(h) VH가 서열번호 36의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 37의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(i) VH가 서열번호 38의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 39의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(j) VH가 서열번호 40의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 41의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(k) VH가 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 88의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(l) VH가 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 89의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
(m) VH가 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 90의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하는,
항-스클레로스틴 구축물.
양태 16. 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 항체 모이어티가 중쇄 가변 영역(VH) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항-스클레로스틴 항체로부터 유래된 인간화 항체 모이어티이고, 이때
(a) VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
(b) VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
(c) VH가 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
(d) VH가 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
(e) VH가 서열번호 199의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
(f) VH가 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 200의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
(g) VH가 서열번호 199의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
(h) VH가 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하는,
항-스클레로스틴 구축물.
양태 17. 양태 1 내지 16 중 어느 한 양태에 있어서,
항체 모이어티가 전장 항체, 이중특이성 항체, 단일쇄 Fv(scFv) 단편, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2, Fv 단편, 다이설파이드 안정화 Fv 단편(dsFv), 다이설파이드 안정화 scFv(dsscFv), (dsFv)2, Fv-Fc 융합체, scFv-Fc 융합체, scFv-Fv 융합체, 디아바디(diabody), 트리바디(tribody) 및 테트라바디(tetrabody)로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 18. 양태 1 내지 17 중 어느 한 양태에 있어서,
Fc 단편을 포함하는 전장 항체인 항-스클레로스틴 구축물.
양태 19. 양태 17에 있어서,
항체 모이어티가 scFv 단편인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 20. 양태 1 내지 19 중 어느 한 양태에 있어서,
스클레로스틴이 인간 스클레로스틴인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 21. 양태 1 내지 17, 19 및 20 중 어느 한 양태에 있어서,
항-스클레로스틴 구축물이 제2 모이어티를 추가로 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 22. 양태 21에 있어서,
제2 모이어티가 항원을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 23. 양태 22에 있어서,
제2 항체 모이어티가 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 24. 양태 22 또는 23에 있어서,
항원이 DKK1인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 25. 양태 24에 있어서,
DKK1이 인간 DKK1인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 26. 양태 24 또는 25에 있어서,
제2 항체 모이어티가 DKK1의 결합 에피토프에 대해, 제3 중쇄 가변 영역(VH -3) 및 제3 경쇄 가변 영역(VL - 3)을 포함하는 제3 항체 모이어티와 경쟁하고, 이때
(a) VH-3이 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-3이 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
(b) VH-3이 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-3이 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
(c) VH-3이 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-3이 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는,
항-스클레로스틴 구축물.
양태 27. 양태 26에 있어서,
VH -2가 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2가 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 28. 양태 26에 있어서,
VH -2가 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2가 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 29. 양태 26에 있어서,
VH -2가 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2가 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 30. 양태 22 또는 23에 있어서,
항원이 RANKL인, 항-스클레로스틴 구축물.
31. 양태 30에 있어서,
항원이 인간 RANKL인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 32. 양태 30 또는 31에 있어서,
제2 항체 모이어티가 RANKL의 결합 에피토프에 대해, 제3 중쇄 가변 영역(VH -3) 및 제3 경쇄 가변 영역(VL - 3)을 포함하는 제3 항체 모이어티와 경쟁하고, 이때 VH -3이 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -3이 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 33. 양태 31에 있어서,
VH -2가 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2가 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 34. 양태 22 내지 33 중 어느 한 양태에 있어서,
제2 항체 모이어티가 전장 항체, Fab, Fab', (Fab')2, Fv, 단일쇄 Fv(scFv) 단편, scFv-scFv, 미니바디, 디아바디 또는 sdAb인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 35. 양태 34에 있어서,
제2 항체 모이어티가 2개의 중쇄, 2개의 경쇄 및 Fc 단편을 포함하는 전장 항체이고, 항-스클레로스틴 항체 모이어티가 VL과 융합된 VH를 포함하는 단일쇄 Fv(scFv) 단편인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 36. 양태 35에 있어서,
항-스클레로스틴 항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 중 하나 또는 둘 다에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 37. 양태 34 내지 36 중 어느 한 양태에 있어서,
항-스클레로스틴 항체 모이어티가 전장 항체의 경쇄 중 하나 또는 둘 다에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 38. 양태 36 또는 37에 있어서,
항-스클레로스틴 항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 및 경쇄 중 하나 또는 둘 다의 N-말단에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 39. 양태 36 내지 38 중 어느 한 양태에 있어서,
항-스클레로스틴 항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 및 경쇄 중 하나 또는 둘 다의 C-말단에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 40. 양태 36 내지 39 중 어느 한 양태에 있어서,
항-스클레로스틴 항체 모이어티가 제1 링커(linker)를 통해 전장 항체에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 41. 양태 36 내지 39 중 어느 한 양태에 있어서,
항-스클레로스틴 항체 모이어티가 링커 없이 전장 항체에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 42. 양태 40에 있어서,
제1 링커가 서열번호 74 내지 84로 이루어진 군으로부터 선택되는 GS 링커인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 43. 양태 35 내지 42 중 어느 한 양태에 있어서,
VH가 제2 링커를 통해 VL과 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 44. 양태 43에 있어서,
scFv 단편이 N-말단으로부터 C-말단으로 VH, 제2 링커 및 VL을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 45. 양태 43에 있어서,
scFv 단편이 N-말단으로부터 C-말단으로 VL, 제2 링커 및 VH, 및 임의적으로 C-말단 알라닌 잔기를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 46. 양태 43 내지 45 중 어느 한 양태에 있어서,
제2 링커가 서열번호 76 또는 77의 아미노산 서열을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 47. 양태 23 내지 33 중 어느 한 양태에 있어서,
제2 항체 모이어티가 VH - 2 및 VL -2를 포함하는 scFv 단편이고, 항-스클레로스틴 항체 모이어티가 2개의 중쇄, 2개의 경쇄 및 Fc 단편을 포함하는 전장 항체인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 48. 양태 46에 있어서,
제2 항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 둘 다에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 49. 양태 47 또는 48에 있어서,
제2 항체 모이어티가 전장 항체의 경쇄 둘 다에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 50. 양태 48 또는 49에 있어서,
항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄 둘 다의 N-말단에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 51. 양태 47 내지 50 중 어느 한 양태에 있어서,
항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄 둘 다의 C-말단에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 52. 양태 47 내지 51 중 어느 한 양태에 있어서,
항체 모이어티가 제1 링커를 통해 전장 항체에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 53. 양태 47 내지 51 중 어느 한 양태에 있어서,
항체 모이어티가 링커 없이 전장 항체에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 54. 양태 52에 있어서,
제1 링커가 서열번호 74 내지 84로 이루어진 군으로부터 선택되는 GS 제1 링커인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 55. 양태 47 내지 54 중 어느 한 양태에 있어서,
VH -2가 제2 링커를 통해 VL -2와 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 56. 양태 47 내지 54 중 어느 한 양태에 있어서,
VH - 2가 링커 없이 VL -2와 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 57. 양태 55에 있어서,
scFv 단편이 N-말단으로부터 C-말단으로 VH -2, 제2 링커 및 VL -2를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 58. 양태 55에 있어서,
scFv 단편이 N-말단으로부터 C-말단으로 VL -2, 제2 링커 및 VH -2, 및 임의적으로 C-말단 알라닌 잔기를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 59. 양태 55, 57 및 58 중 어느 한 양태에 있어서,
제2 링커가 서열번호 76 또는 77의 아미노산 서열을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 60. 양태 35 내지 59 중 어느 한 양태에 있어서,
scFv가 다이설파이드 안정화 scFv("dsscFv")인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 61. 양태 60에 있어서,
dsscFv가 (a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2 내에 G44C 돌연변이, 및 (b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2 내에 G100C 돌연변이를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 62. 양태 35 내지 61 중 어느 한 양태에 있어서,
(1) 각각 서열번호 91의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(2) 각각 서열번호 92의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(3) 각각 서열번호 94의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 96의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(4) 각각 서열번호 95의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 96의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(5) 각각 서열번호 97의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 99의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(6) 각각 서열번호 98의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 99의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(7) 각각 서열번호 100의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 102의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(8) 각각 서열번호 101의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 102의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(9) 각각 서열번호 103의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 104의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(10) 각각 서열번호 103의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 105의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(11) 각각 서열번호 106의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 107의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(12) 각각 서열번호 106의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 108의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(13) 각각 서열번호 109의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 110의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(14) 각각 서열번호 109의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 111의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(15) 각각 서열번호 112의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(16) 각각 서열번호 112의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 114의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(17) 각각 서열번호 115의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(18) 각각 서열번호 116의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(19) 각각 서열번호 117의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(20) 각각 서열번호 118의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(21) 각각 서열번호 120의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(22) 각각 서열번호 121의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(23) 각각 서열번호 123의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(24) 각각 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(25) 각각 서열번호 126의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(26) 각각 서열번호 127의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(27) 각각 서열번호 128의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(28) 각각 서열번호 133의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 130의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(29) 각각 서열번호 133의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 131의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(30) 각각 서열번호 133의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 132의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
(31) 각각 서열번호 177의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(32) 각각 서열번호 178의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(33) 각각 서열번호 178의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
(34) 각각 서열번호 179의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄; 또는
(35) 각각 서열번호 180의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄
를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물.
양태 63. 양태 23 내지 33 중 어느 한 양태에 있어서,
(a) N-말단으로부터 C-말단으로 i) VL, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인("제1 CL 도메인")을 포함하는 제1 경쇄를 포함하는 제1 폴리펩티드;
(b) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH, ii) 제1 중쇄 불변 도메인("제1 CH1 도메인"), 및 iii) 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 중쇄를 포함하는 제2 폴리펩티드;
(c) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -2, ii) 제2 중쇄 불변 도메인("제2 CH1 도메인"), 및 iii) 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 중쇄를 포함하는 제3 폴리펩티드; 및
(d) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -2, 및 ii) 제2 경쇄 불변 도메인("제2 CL 도메인")을 포함하는 제2 경쇄를 포함하는 제4 폴리펩티드
를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물로서, 제1 및 제2 Fc 도메인이 Fc 단편을 형성하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 64. 양태 63에 있어서,
제1 및 제2 Fc 도메인 중 하나가 T366W 돌연변이, 및 임의적으로 S354C 돌연변이를 포함하고, 다른 Fc 도메인이 T366S 돌연변이, L368A 돌연변이, Y407V 돌연변이, 및 임의적으로 Y349C 돌연변이를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 넘버링이 EU 색인에 따른 것인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 65. 양태 63 또는 64에 있어서,
(i) 제1 CH1 도메인 및 제1 CL 도메인, 또는 (ii) 제2 CH1 도메인 및 제2 CL 도메인이
(a) 위치 141의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131(예컨대, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예컨대, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 116의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
(b) 위치 168의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131(예컨대, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예컨대, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 164의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
(c) 위치 126의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131(예컨대, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예컨대, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 121의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
(d) 위치 128의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131(예컨대, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예컨대, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 118의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
(e) 위치 170의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131(예컨대, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예컨대, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 176의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
(f) 위치 171의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131(예컨대, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예컨대, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 162의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; 및
(g) 위치 173의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131(예컨대, IgG2 또는 IgG4에서) 또는 220(예컨대, IgG1에서)의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 160의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 넘버링이 EU 색인에 따른 것인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 66. 양태 63 내지 65 중 어느 한 양태에 있어서,
(1) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 136의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 137의 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 138의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 139의 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 140의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 141의 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 142의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 143의 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 144의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 145의 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 148의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 149의 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 150의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 151의 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 152의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 153의 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 154의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 155의 아미노산 서열을 포함하거나;
(10) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 156의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 157의 아미노산 서열을 포함하거나;
(11) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 158의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 159의 아미노산 서열을 포함하거나;
(12) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 160의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 161의 아미노산 서열을 포함하거나;
(13) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 162의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함하거나;
(14) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 171의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 172의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함하거나;
(15) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 173의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 174의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함하거나;
(16) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 175의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 176의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함하는,
항-스클레로스틴 구축물.
양태 67. 양태 21에 있어서,
제2 모이어티가 반감기 연장 모이어티를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 68. 양태 67에 있어서,
반감기 연장 모이어티가 Fc 단편인, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 69. 양태 18, 35 내지 66 및 68 중 어느 한 양태에 있어서,
Fc 단편이 Fc 단편 형태 IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, 및 이들의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택되는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 70. 양태 69에 있어서,
Fc 단편이 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, 및 이들의 조합 및 하이브리드로부터의 Fc 단편으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 71. 양태 69 또는 70에 있어서,
Fc 단편이 H435R 돌연변이 및 Y436F 돌연변이를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 72. 양태 69 내지 71 중 어느 한 양태에 있어서,
Fc 단편이 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 효과기 기능을 갖는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 73. 양태 69 내지 71 중 어느 한 양태에 있어서,
Fc 단편이
상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 향상된 효과기 기능, 및/또는
상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 향상된 FcRn 결합 친화도
를 갖는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 74. 양태 21에 있어서,
항체-약물 접합체 또는 항체 융합 단백질인 항-스클레로스틴 구축물.
양태 75. 양태 74에 있어서,
제2 모이어티가 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 비스포스포네이트, 프로스타글란딘 E(PGE) 수용체 작용제, VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴), 칼시토닌 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
양태 76. 양태 1 내지 75 중 어느 한 양태에 따른 항-스클레로스틴 구축물과 경쟁적으로 스클레로스틴에 특이적으로 결합하는 항-스클레로스틴 구축물.
양태 77. 양태 1 내지 76 중 어느 한 양태에 따른 항-스클레로스틴 구축물 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물.
양태 78. 양태 77에 있어서,
부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴), 칼시토닌 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 추가로 포함하는 약학 조성물.
양태 79. 양태 1 내지 76 중 어느 한 양태에 따른 항-스클레로스틴 구축물을 인코딩하는 단리된 핵산.
양태 80. 양태 79에 따른 단리된 핵산을 포함하는 벡터.
양태 81. 양태 79에 따른 단리된 핵산 또는 양태 80에 따른 벡터를 포함하는 단리된 숙주 세포.
양태 82. (a) 항-스클레로스틴 구축물 또는 이의 일부를 발현하기에 효과적인 조건하에, 양태 81에 따른 단리된 숙주 세포를 배양하는 단계; 및
(b) 상기 숙주 세포로부터 발현된 항-스클레로스틴 구축물 또는 이의 일부를 수득하는 단계
를 포함하는 항-스클레로스틴의 제조 방법.
양태 83. 양태 1 내지 76 중 어느 한 양태에 따른 항-스클레로스틴 구축물 또는 양태 77 또는 78에 따른 약학 조성물의 효과량을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태를 치료 및/또는 예방하는 방법.
양태 84. 양태 83에 있어서,
질환 또는 병태가 골 관련 장애 또는 연골 관련 장애, 골수 또는 혈액학적 장애, 근골격계 희귀 질환, 근육 관련 장애 또는 암인, 방법.
양태 85. 양태 84에 있어서,
골 관련 장애가 골형성 부전증, (남성 및 여성에서의) 골다공증 또는 골감소증, 골 괴사, 골 치유 지연, 불유합 골절, 다발성 골수종, 다발성 골수종 관련 골 장애, 원발성 골 종양, 악성 종양의 골 전이, 염증성 또는 감염성 골 질환, 골연화증, 고칼슘혈증, 파제트병(Paget's disease), 부동화-유도된 골 손실, 글루코코르티코이드-유도된 골 손실, 관절염-유도된 골 손실을 비롯한 염증-유도된 골 손실, 우주비행 골다공증/골감소증, 감소된 중력에 의해 야기되는 골 손실, 또는 a) 양적, 질적 또는 둘 다의 골 손실, 및/또는 b) 골 구조 및 질의 이상과 관련된 기타 질환 또는 병태인, 방법.
양태 86. 양태 85에 있어서,
골 관련 장애가 골다공증 또는 골감소증인, 방법.
양태 87. 양태 85에 있어서,
골 관련 장애가 골형성 부전증인, 방법.
양태 88. 양태 85에 있어서,
골 관련 장애가 다발성 골수종, 또는 다발성 골수종 관련 골 장애인, 방법.
양태 89. 양태 84에 있어서,
연골 장애가 연골종증, 연골이형성증, 연골무형성증, 골단 이형성증, 연골이영양성 근긴장증, 피질주위 연골종, 무릎 연골 파열, 골섬유성 이형성증, 골관절염, 골형성 부전증, 저인산혈증 구루병 또는 골연골이영양증인, 방법.
양태 90. 양태 84에 있어서,
근육 관련 장애가 근육감소증 또는 암 근육감소증인, 방법.
양태 91. 양태 1 내지 76 중 어느 한 양태에 따른 항-스클레로스틴 구축물 및/또는 양태 77 또는 78에 따른 약학 조성물의 효과량을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 골 또는 관절 수술 후 치유를 촉진하는 방법.
양태 92. 양태 83 내지 91 중 어느 한 양태에 있어서,
항-스클레로스틴 구축물이 개체에게 피하 주사, 정맥 주사 또는 근육 내 주사로 투여되거나, 경구 또는 비경구로 투여되는, 방법.
양태 93. 양태 83 내지 92 중 어느 한 양태에 있어서,
제2 제제 또는 치료제를 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
양태 94. 양태 93에 있어서,
제2 제제 또는 치료제가 항-DKK1 항체를 포함하는, 방법.
양태 95. 양태 93에 있어서,
제2 제제 또는 치료제가 항-RANKL 항체를 포함하는, 방법.
양태 96. 양태 93에 있어서,
제2 제제 또는 치료제가 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 비스포스포네이트, 프로스타글란딘 E(PGE) 수용체 작용제, VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴) 및 칼시토닌으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 포함하는, 방법.
양태 97. 양태 83 내지 96 중 어느 한 양태에 있어서,
개체가 인간인, 방법.
실시예
하기 실시예는 응용 분야의 순전히 예시를 위한 것이고, 따라서 어떤 식으로든 응용 분야를 제한하는 것으로 간주되어서는 안 된다. 하기 실시예 및 상세한 설명은 제한이 아닌 예시를 위해 제공된 것이다.
실시예 1. 항- 스클레로스틴 단클론 항체의 생성
항-인간 SOST 단클론 항체는 마우스를 면역화함으로써 생성되었다. 실험용 BALB/c 마우스(18 내지 20g, 7 내지 8주령, Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.) 및 C57 마우스(18 내지 20g, 7 내지 8주령, Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.)를 사용하였다. 동물은 1주일 동안 12/12시간의 명/암 주기, 20 내지 25℃의 온도 및 40 내지 60%의 습도에서 SPF 수준 실험실에 보관되었다.
면역원으로는 His 태그가 있는 인간 SOST 재조합 단백질(HST-H5245, Acro Biosystems)을 사용하였다. 독점 아주반트(Lot No 20200120)를 유화에 사용하였고 항원을 동일한 부피의 보조제와 함께 첨가하여 총 부피가 300 μL가 되도록 하였다. 항원/아주반트 용액을 전기 혼합기로 유화시키고 다차원 회전기로 혼합하였다. 75% 알코올로 소독 후, 항원/아주반트 용액을 피하 주사하였다. 항원을 유화시키고 0, 14, 28일에 접종하였다. 비장 세포 융합 3일 전에 식염수 50 μg/마우스로 제형화된 항원 용액을 복강내(IP) 주사하여 추가 면역화를 수행하였다. 22일, 36일 및 45일에 혈액 역가 검사를 수행하였다. 3차 면역 후, 플랫폼 경향이 있는 혈액 역가가 가장 높은 2마리의 마우스를 비장 세포 융합을 위해 선택하였다. 하이브리도마 세포는 Electro Cell Manipulator(BTX, ECM2001)를 사용한 기존의 융합 절차를 사용하여 골수종 Sp2/0 세포와 비장 세포를 융합하여 수득하였다. 마우스 혈청의 인간 스클레로스틴에 대한 결합 활성을 실시예 3의 ELISA 방법으로 측정하고, 시험관내에서 결합 활성이 양호한 단클론 하이브리도마 세포주를 선택하였다. 결과는 표 5에 제시되어 있다.
실시예 2. 항- 스클레로스틴 단클론 항체의 클로닝 및 시퀀싱
하이브리도마 시퀀싱 과정은 하기와 같이 수행되었다. 총 RNA는 TRIzol® Reagent의 기술 매뉴얼에 따라 하이브리도마 세포에서 단리되었다. PrimeScriptTM 1st Strand cDNA Synthesis Kit의 기술 매뉴얼에 따라 이소형 특이적 안티센스 프라이머 또는 범용 프라이머를 사용하여 전체 RNA를 cDNA로 역전사하였다. cDNA 말단의 급속 증폭(RACE)의 표준 작동 절차(SOP)에 따라 중쇄 및 경쇄의 항체 단편을 증폭시켰다. 증폭된 항체 단편을 표준 클로닝 벡터에 개별적으로 클로닝하였다. 올바른 크기의 삽입물이 있는 클론을 스크리닝하기 위해 콜로니 PCR을 수행하였다. 공통 서열이 제공되었다.
서열 분석
모든 구축물로부터의 DNA 서열 데이터를 분석하고 중쇄 및 경쇄에 대한 공통 서열을 결정하였다. 표 3 및 4는 다양한 항체 및 공통 서열의 VH 및 VL CDR을 나열한다.
다양한 항체 및 공통 서열의 V H CDR
HC-CDR1 HC-CDR2 HC-CDR3
93B1B7 DYEIH
(서열번호 1)		 AIDPETGGTAYNQKFKG
(서열번호 5)		 YDYVTY
(서열번호 9)
94B12D3 DYEIH(서열번호 1) AIDPETGGTAYNQKFKA
(서열번호 6)		 YDYVSY
(서열번호 10)
71G6G8 DYEIH(서열번호 1) AIDPETGGTAYNQKFKG
(서열번호 5)		 YDYVTY
(서열번호 9)
56E5C10 DFEMH(서열번호 2) AIDPETGGTAYNQKFTA
(서열번호 7)		 YDYVSY
(서열번호 10)
91F6D10 DYEMH(서열번호 3) AIDPETGGTAYNQKFKA
(서열번호 6)		 YDYVSY
(서열번호 10)
51E8D4 DFEIH
(서열번호 199)		 AIDPETGGTAYNQKFKG
(서열번호 5)		 YDYVSY
(서열번호 10)
97C11D7 DYEMH
(서열번호 3)		 AIDPETGGSANNQKFKA
(서열번호200)		 YDYVSY
(서열번호 10)
81B2B6 DYEMH(서열번호 3) AIDPETGGTAYNQKFKA
(서열번호 6)		 YDYVSY
(서열번호 10)
84F2D5 DFEIH
(서열번호 199)		 AIDPETGGTAYNQKFKG
(서열번호 5)		 YDYVSY
(서열번호 10)
65B12C9 SYWMH
(서열번호 4)		 MIHPNSGSSNYNEKFKS
(서열번호 8)		 DYDDEGFAY
(서열번호 11)
공통 서열 DX1EX2H
X1 = Y 또는 F, X2 = M 또는 I.
(서열번호 12)		 AIDPETGGX3AX4NQKFX5X6
X3 = T 또는 S, X4 = Y 또는 N, X5 = K 또는 T, X6 = A, G, 또는 S.
(서열번호 13)		 YDYVX7Y
X7 = T 또는 S
(서열번호 14)
다양한 항체의 V L CDR
LC-CDR1 LC-CDR2 LC-CDR3
93B1B7 KSSQSLLYSDGRTYLN(서열번호 15) LVSKLDS
(서열번호 18)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
94B12D3 KSSQSLLYSDGRTYLN(서열번호 15) LVSKLDS
(서열번호 18)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
71G6G8 KSSQSLLYSDGRTYLN(서열번호 15) LVSKLDS
(서열번호 18)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
56E5C10 KSSQSLLYSDGRTYLN(서열번호 15) LVSKLDS
(서열번호 18)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
91F6D10 KSSQSLLYSDGRTYLN(서열번호 15) LVSKLDS
(서열번호 18)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
51E8D4 KSSQSLLYSDGKTYLN
(서열번호 16)		 LVSKLDS
(서열번호 18)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
97C11D7 KSSQSLLYSDGRTYLN
(서열번호 15)		 LVSKLDS
(서열번호 18)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
81B2B6 KSSQSLLYSDGRTYLN(서열번호 15) LVSKLDS
(서열번호 18)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
84F2D5 KSSQSLLYSDGKTYLN
(서열번호 16)		 LVSKLDS
(서열번호 18)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
65B12C9 KASQSVSNDVA
(서열번호 17)		 YASNRCT
(서열번호 19)		 QQDYSSPWT
(서열번호 21)
실시예 3. ELISA에 의해 측정된 스클레로스틴에 대한 항- 스클레로스틴 항체의 결합
스클레로스틴에 특이적으로 결합하는 항체의 능력은 ELISA 포획 검정에 의해 측정하였다. 플레이트를 코팅 완충액(PBS, pH 7.4) 중 100 μL/웰의 마우스 His-태깅된 인간 스클레로스틴(NCBI 참조 번호는 NP_079513.1임)[0.5 μg/mg]으로 96-웰 반면적으로 코팅하고, 실온(RT)에서 1시간 동안 또는 밤새 4℃에서 배양하였다. 플레이트를 100 μL/웰의 세척 용액(0.2% Tween-20 함유 PBS, BIO-RAD)으로 1회 세척하였다. 이어서, 플레이트를 RT에서 1시간 동안 차단 용액(1% BSA, 1% 염소 혈청 및 0.5% Tween-20을 함유하는 PBS; 100 μL/웰)에서 인큐베이션하였다. 이어서, 다양한 농도(1,000, 333.3, 111.1, 37.0, 12.3, 4.1, 1.4, 0.5, 0.15, 0.05 ng/mL)의 항-스클레로스틴 항체, 양성 대조군 항체 로모소주맙 또는 비-스클레로스틴 관련 IgG(인간 또는 래트 IgG, 음성 대조군)를 20 μL/웰의 차단 용액 중에서 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 RT에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 차단 용액(1:50,000 희석)에 희석된 NeutrAvidin HRP(Pierce, Catalog # 31001)를 각 웰(20mL/웰)에 첨가하고, 플레이트를 RT에서 1시간 동안 인큐베이션한 후, 100mL/웰의 세척 용액으로 3회 세척하였다. SuperSignal ELISA Femto(ThermoFisher Scientific, Catalog# 37074) 처리 용액을 플레이트에 첨가하고(20 mL/웰), 425nm에서 광도계를 사용하여 신호를 판독하였다.
하기 표 5에 나타낸 바와 같이, 시험된 항-스클레로스틴 항체는 로모소주맙과 비교하여 동등하거나 더 유리한 EC50 값을 나타냈다. 구체적으로, 93B1B7은 로모소주맙보다 유리한 EC50 값을 나타냈다.
항-스클레로스틴 뮤린 항체의 ELISA 활성
항체 EC 50 (nM)
93B1B7 0.04
94B12D3 0.04
71G6G8 0.04
56E5C10 0.09
91F6D10 0.06
51E8D4 0.07
97C11D7 0.04
81B2B6 0.01
84F2D5 0.02
65B12C9 0.04
로모소주맙 0.11
실시예 4. 항- 스클레로스틴 항체에 대한 결합 에피토프 동정
올바른 에피토프를 표적으로 삼는 것은 원하는 작용 메커니즘을 달성하기 위한 단클론 항체 선택에서 중요한 단계이다(문헌[Wilson, PC, 2012, Nat. Rev. Immunol. 12, 709-719]). B 세포 에피토프에 대한 합성 펩티드 기반 항체 생성은 당업계에서 다양한 질환에 대한 치료용 항체 및 백신을 개발하는 데 광범위하게 사용되었는데(문헌[Ben-Yedidia T., 1997, Curr Opin Bio technol 8:442-448]; [Bijker MS, 2007, Expert Rev Vaccines 6:591-603]), 정의된 에피토프로 제한되는 획득된 항체의 특이성 이점이 있다. 스클레로스틴의 제2 루프는 NMR 및 결정 구조에 의해 LRP5 또는 LRP6과 같은 저밀도 지단백 수용체 관련 단백질 계열 구성원과 직접 상호작용하고 LRP와 Wnt 계열 구성원 간의 상호작용을 차단하는 것으로 입증되었다. LRP6과 복합체를 이루는 인간 스클레로스틴의 결정학적 구조(문헌[Kim, J. 2020, Nat. Commun. 11: 5357-5357])에 기초하여, 도 1에 도시된 바와 같은 'IGRGKWWR' 모티프(서열번호 186)를 함유하는 루프 팁은, 스클레로스틴이 LRP6의 제1 프로펠러에 결합하기 위한 주요 결합 결정인자인 것으로 밝혀졌다.
인간 및 마우스 스클레로스틴의 제2 루프로부터, 도 2에 열거된 서열을 포함하는 화학적으로 합성된 펩티드에 대한 항체 93B1B7의 결합을 바이오-레이어 간섭계 접근법(Gator, Probe Life)에 의해 시험하였다. 펩티드를 비오틴일화(NHS-Biotin Reagents, Thermo, #21343)시키고, 0.5 μg/mL 용액을 사용하여 스트렙타비딘 바이오센서에 고정화하였다. 동역학 완충액(PBS, pH 7.4, 0.05% Tween-20, 0.2% BSA) 중 5 μg/mL mAb 93B1B7을 분석물로서 사용하였고 결합 센서그램을 도 1에 도시하였다. 인간 스클레로스틴 상의 동일한 'IGRGKWWR'(서열번호 186) 모티프를 갖는 pep1(서열번호 185), pep5(서열번호 187) 및 pep6(서열번호 188)은 높은 친화도로 93B1B7에 의해 인식된다. 대조적으로, 이들 펩티드는 도 3에 도시된 바와 같이 로모소주맙에 의해 인식될 수 없다.
93B1B7의 결합 에피토프가 로모소주맙의 결합 에피토프와 완전히 상이하다는 것을 추가로 입증하기 위해, 5 μg/mL 로모소주맙을 항-hFc 프로브에 고정화하고, 동역학 완충액(PBS, pH 7.4, 0.05% Tween-20, 0.2% BSA) 중 2 μg/mL 인간 스클레로스틴 및 5 μg/mL 93B1B7을 분석물로서 순차적으로 첨가하였다. 결합 센서그램을 도 4에 도시하였고, 이는 로모소주맙과 93B1B7이 서로 다른 결합 부위를 점유하여 동시에 스클레로스틴에 결합할 수 있으므로, 서로 교차-차단하지 않음을 나타낸다. 따라서, 결합 에피토프('IGRGKWWR' 모티프, 서열번호 186)는 본원의 항체에 고유하고 로모소주맙의 항체와 중복되지 않는다.
본원에서 발견된 대부분의 항-스클레로스틴 항체는 매우 유사한 결합 활성 및 CDR 서열(표 3 및 4 참고)을 가지므로, 동일한 특이성 및 결합 에피토프를 공유한다고 여겨진다. 따라서, 본원에서 발견된 이들 항체는 'IGRGKWWR' 모티프(서열번호 186)를 갖는 스클레로스틴 상의 특정 에피토프에 결합함을 추가로 확인하였다. 이것은 그들이 스클레로스틴과 LRP6 사이의 결합을 완전히 방지할 수 있게 하여 로모소주맙과 같은 다른 항-스클레로스틴 항체보다 더 강력한 스클레로스틴 중화를 초래한다. 이것은 본원에 개시된 항체가 하기 실시예에 개시된 바와 같이 스클레로스틴 결합 및 중화 활성에서 로모소주맙보다 더 유리하다는 관찰과 일치한다.
실시예 5. 항- 스클레로스틴 항체의 인간화
항체 93B1B7은 상보성 결정 영역(CDR)을 인간 생식계열 프레임워크에 이식하여 인간화되었다. 선택된 경쇄 생식계열 억셉터 서열은 인간 VK2 A19 V-영역 및 VK1 O12 V-영역 + JK4 J-영역이었다(V-BASE, https://www2.mrc-lmb.cam.ac.uk/vbase/alignments2.php). 선택된 중쇄 생식계열 억셉터 서열은 인간 VH1 1-18 V-영역 + JH4 J-영역(V BASE, https://www2.mrc-lmb.cam.ac.uk/vbase/alignments2.php)이었다. 공여자로부터 억셉터 서열로 이식된 CDR은 카밧(문헌[Kabat et al. 1987])에 의해 정의된 바와 같지만, 조합된 초티아/카밧 정의가 사용된 CDR-H1 및 H2는 예외이다. 초기 V-영역 서열을 포괄하는 전장 IgG4P 항체를 인코딩하는 유전자를 자동 합성 접근법(Vanzyme lnc.)에 의해 구축하고, 올리고뉴클레오티드 지정 돌연변이유발에 의해 최종 이식된 버전을 생성하도록 변형시켰다. 전체 활성을 유지하고 높은 내열성을 유지하기 위해 인간화 중쇄의 위치 93(티로신) 및 94(세린)(카밧 넘버링)에 있는 공여자 잔기는 유지되었고 위치 43(글루타민)의 억셉터 잔기는 리신으로 변경되었고, 이는 상기 위치에서 더 풍부화된다. 유사하게, 인간화 경쇄의 위치 46(아르기닌)(카밧 넘버링)에 있는 공여자 잔기가 유지되었다. 또한, 위치 30의 글리세린 잔기를 세린으로 돌연변이시킴으로써 경쇄 CDR L1에서 하나의 잠재적인 아스파테이트 이성체화 부위를 제거하였다. 인간화 항-스클레로스틴 항체 hAb-1, hAb-2 및 hAb-3을 생성하였다. 이의 CDR, VH 및 VL 서열에 대해서는 표 6을 참고한다.
예시적인 인간화 항- 스클레로스틴 항체의 CDR , V H 및 V L 서열
hAb-1 hAb-2 hAb-3
HC-CDR1 DYEIH
(서열번호 1)		 DYEIH
(서열번호 1)		 DYEIH
(서열번호 1)
HC-CDR2 AIDPETGGTAYNQKFKG(서열번호 5) AIDPETGGTAYNQKFKG
(서열번호 5)		 AIDPETGGTAYNQKFKG
(서열번호 5)
HC-CDR3 YDYVTY(서열번호 9) YDYVTY
(서열번호 9)		 YDYVTY
(서열번호 9)
LC-CDR1 KSSQSLLYSDGRTYLN(서열번호 15) RSSQSLLYSDGRTYLN
(서열번호 85)		 RSSQSLLYSDSRTYLN
(서열번호 86)
LC-CDR2 LVSKLDS(서열번호 18) LVSKLDS
(서열번호 18)		 LVSKLDS
(서열번호 18)
LC-CDR3 WQGTHLPHT(서열번호 20) WQGTHLPHT
(서열번호 20)		 WQGTHLPHT
(서열번호 20)
VH 서열번호 87 서열번호 87 서열번호 87
VL 서열번호 88 서열번호 89 서열번호 90
실시예 6. 바이오- 레이어 간섭계( BLI ) 검정에 의해 측정된 인간 및 시노몰 거스 원숭이 스클레로스틴에 대한 인간화 항-스클레로스틴 항체의 결합 동역학
인간 및 시노몰거스 원숭이 스클레로스틴에 대한 인간화 항-스클레로스틴 항체의 결합 친화도는 게이터 기구(Gator instrument)(Probe Life)를 사용하여 바이오-레이어 간섭계로 측정하였다. 항체를 5 μg 용액을 사용하여 항-hFc 바이오센서에 고정화하였다. 동역학 완충액(PBS, pH 7.4, 0.05% Tween-20, 0.2% BSA, 10μM 비오틴)에서 2배로 4 μg/mL로부터 인간 스클레로스틴 및 시노몰거스 원숭이 스클레로스틴의 연속 희석물을 분석물로 사용하였다. 친화도(KD) 및 동역학 매개변수(Kon 및 Koff)를 게이터 소프트웨어를 사용하여 데이터의 전역 맞춤(global fit)(1:1)에서 계산하였다.
결과를 하기 표 7에 나타냈다. 인간화 항체 hAb-1 및 hAb-2는 참조 로모소주맙과 비교하여 인간 및 시노몰거스 원숭이 스클레로스틴에 대해 더 높은 친화도를 나타낸다.
상이한 종의 스클레로스틴에 대한 인간화 항체의 결합 동역학
항체 인간 시노몰거스 원숭이
K on (1/Ms) K off (1/s) K D (M) K on (1/Ms) K off (1/s) K D (M)
93B1B7 1.0Х106 8.4Х10-5 5.1Х10-11 2.2Х106 6.5Х10-5 1.8Х10-11
hAb-1 7.3Х105 3.0Х10-4 4.1Х10-10 1.28Х106 2.29Х10-4 1.8Х10-10
hAb-2 7.8Х105 2.0Х10-4 2.4Х10-10 1.54Х106 8.06Х10-5 5.5Х10-11
로모소주맙 1.4Х106 2.8Х10-4 7.8Х10-10 7.55Х105 2.39Х10-4 3.5Х10-10
실시예 7. HEK293 / TCF / LEF / Wnt1 세포에서 항- 스클레로스틴 항체의 스클레로스틴 -중화 활성
항체는 HEK293 기반 검정에서 측정 시, 스클레로스틴을 중화하고 Wnt1 유도된 TCF/LEF 루시퍼라제 활성을 차단할 수 있었다.
Wnt 단백질은 마우스와 인간 둘 다에서 조골세포 분화 및 활성의 중요한 조절자인 분비된 당단백질 계열이다. Wnt 신호는 프리즐드(Fzd) 계열의 7-패스 막관통 G-단백질 결합 수용체 계열 및 LRP5 및 LRP6, 또는 RYK 또는 ROR 막관통 티로신 키나제와 같은 애로우(arrow)/LRP 계열의 보조수용체에 의해 형질도입된다. Fzd 수용체 및 보조수용체에 주어진 Wnt의 결합은, 역사적으로 정규 β-카테닌 의존성 경로와 비정규 β-카테닌 비의존성 경로로 나누어지는 다수의 뚜렷한 세포내 신호전달 캐스케이드를 활성화한다. β-카테닌은 Wnt 신호전달에 대한 반응으로 유전자 전사를 조절하는 중요한 전사 보조활성화제이다. Fzd 수용체 복합체에 대한 Wnt의 결합은 LRP5/6 복합체의 인산화를 초래하고, 이어서, 세포질에서 β-카테닌을 안정화시킨다. 안정화된 β-카테닌은 이후 핵으로 전위되어 림프구-향상 인자/T-세포 인자(LEF/TCF) 계열의 고 이동성 그룹(High Mobility Group)(HMG) 유형 전사 인자와 상호작용하여 표적 유전자의 발현을 자극한다.
Wnt 신호전달 경로 길항제 및 이의 항체 차단에 대한 연구에서, HEK293/TCF/LEF/Wnt1 세포주를 Askgene(Askgene, CA)에서 구입하였다. TCF/LEF 반딧불이 루시퍼라제 리포터 유전자를 발현하는 HEK293 세포주를 사용하여 스클레로스틴 및 DKK1과 같은 Wnt 신호전달 길항제의 억제 활성을 분석하였다. 스클레로스틴 또는 DKK1의 첨가는 Wnt1 신호를 길항하여 루시퍼라제 활성을 감소시킨다. 반대로, 스클레로스틴 또는 DKK1 항체를 추가하면 감소된 신호를 차단하고 루시퍼라제 활성을 복원한다. 도착 시, 세포를 10% 소 태아 혈청(FBS), 비필수 아미노산, 피루브산나트륨, 2-머캅토에탄올, 1% 페니실린/스트렙토마이신, 400 μg/mL G418 및 2 μg/mL 퓨로마이신을 함유하는, L-글루타민을 갖는 RPMI1640 배양 배지(Life Technologies, CA)에서 배양하였다. 세포를 수확하고 백색 96-웰 플레이트에 30,000 세포/웰의 농도로 평판배양하였다.
길항제의 억제 효과를 시험할 때, 배양 배지를 제거하고 10mM LiCl을 함유하는 검정 배지(G418 및 퓨로마이신이 없는 배양 배지) 50 μL를 각 웰에 첨가하였다. 시험된 스클레로스틴 및 DKK1 단백질을 연속 희석하고 동량의 길항제를 검정 플레이트에 첨가하고 37℃, 5% CO2에서 6시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 100 μL/웰의 1-단계 반딧불이 루시퍼라제(One-Step firefly luciferase)(Pierce, CA) 시약을 첨가하고, BioTek Gen5 발광 마이크로플레이트 리더(Winooski, VT)를 이용하여 루시퍼라제 활성을 측정하였다. 항체의 중화 활성을 시험할 때, 시험 항체와 대조군 항체를 분석 배지에서 연속 희석하였다. 고정량의 스클레로스틴 또는 DKK1 단백질을 첨가하고 15분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 50 μL의 배지를 검정 플레이트로 옮기고 37℃, 5% CO2에서 6시간 동안 인큐베이션하고, BioTek Gen5 발광 마이크로플레이트 리더를 사용하여 분석하였다.
결과는 하기 표 8에 나타냈다. 제시된 바와 같이, 65B12C9를 제외한 모든 뮤린 항-스클레로스틴 항체는 로모소주맙의 EC50 값과 비교할 때 필적하거나 더 유리한 EC50 값을 나타냈다. 3개의 인간화 항체 hAb-1, hAb-2 및 hAb-3은 로모소주맙보다 더 유리한 EC50 값을 나타냈다.
Figure pct00002
실시예 8: 인간화 항-스클레로스틴 항체의 용해도 및 안정성
본 발명에 기재된 인간화 항-SOST 항체 hAb-1 및 hAb-2 및 참조 항체 로모소주맙은 증가하는 농도에서 침전을 위해 접근되었다. 시작 농도는 pH 7.4의 PBS 완충액에서 10 mg/mL였다. 세포를 한외여과 농축관(Millipore)에서 4도 4,000 rpm으로 원심분리하고, 5 내지 10분 간격으로 원심분리를 멈추고 항체 농도가 30 mg/mL 및 90 mg/mL에 도달할 때까지 항체 농도를 샘플링하였다. 샘플을 4℃에서 14일 동안 보관하고 육안으로 침전을 관찰하였다. 본 발명에 기재된 항체는 90 mg/mL만큼 높은 투명한 용액을 유지했고, 참조 항체 로모소주맙은 침전되고 혼탁해졌고, 이는 hAb-1 및 hAb-2가 pH 7.4에서 PBS 완충액에서 로모소주맙보다 더 안정하고 가용성임을 나타낸다. 이러한 결과는 본원에 기재된 항체가 90 mg/mL와 같은 고농도 제형에서 안정할 수 있음을 시사한다.
Figure pct00003
실시예 9. 이중특이성 항체의 생성
스클레로스틴과 DKK1 또는 RANKL을 둘 다 표적으로 하는 이중특이성 항체를 생성하였다. DKK1 또는 RANKL을 표적으로 하는 예시적인 항체의 서열에 대해서는 표 9 및 10을 참고한다.
Figure pct00004
Figure pct00005
구체적으로, 하기 스클레로스틴/DKK1 및 스클레로스틴/RANKL 쌍을 생성하였다: hAb-1 x 11H10-VH44VL32, hAb-2 x 11H10-VH44VL32, hAb-1 x 데노수맙, hAb-2 x 데노수맙.
한 양태에서(도 5의 (A) 참고), 항-DKK1 11H10-VH44VL32(또는 항-RANKL 데노수맙) Fv 도메인을 (GGGGS)4 링커에 의해 연결된 VH 및 VL의 2개의 상이한 배향을 갖는 scFv로 형질전환시켰다. scFv의 올바른 조립을 촉진하기 위해, VH에는 G100C 및 VL에는 G44C와 같은 돌연변이가 있다. 2개의 항-DKK1(또는 항-RANKL) scFv는 각각 1개의 GGGGSGGGGSGGGGS(서열번호 76) 링커에 의해 항-스클레로스틴 인간화 항체의 2개의 IgG 중쇄 C-말단 각각에 연결되어 이중특이성 IgG-scFv를 형성한다.
또 다른 양태에서(도 5의 (B) 참고), 항-스클레로스틴 항체 및 항-DKK1 11H10-VH44VL32(또는 항-RANKL 데노수맙)를 비대칭 IgG 구조를 갖는 '노브-인투-홀' 이중특이성 항체로 형질전환시켰다. 항-DKK1 11H10-VH44VL32(또는 항-RANKL 데노수맙)의 CL 도메인은 S176C 및 C214S의 돌연변이를 함유하고, CH1 도메인은 F170C 및 C131S와 같은 돌연변이를 함유하여 직교 CH1-CK 다이설파이드 결합을 형성하여 경쇄가 올바른 페어링(paring)을 가능하게 한다.
하기 표 11은 다양한 항-스클레로스틴 이중특이성 항체의 형식 및 서열을 나열한다.
항-스클레로스틴 이중특이성 항체
이중특이성
항체		 형식 (N-말단으로부터 C-말단으로의) 중쇄 (N-말단으로부터 C-말단으로의) 경쇄
BAP0017 항-DKK1 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VH-VL) 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3-L1-93B1B7 VH-L2-93B1B7 VL
(서열번호 91)		 11H10 VL2-CL
(서열번호 93)
BAP0018 항-DKK1 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3-L1-93B1B7 VL-L2-93B1B7 VH(서열번호 92) 11H10 VL2-CL
(서열번호 93)
BAP0019 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VH-VL) 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3-L1-11H10 VH2-L2-11H10 VL2(서열번호 94) 93B1B7 VL-CL
(서열번호 96)
BAP0020 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VL-VH) 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3-L1-11H10 VL2-L2-11H10 VH2(서열번호 95) 93B1B7 VL-CL
(서열번호 96)
BAP0021 항-DKK1 전장 항체의 중쇄의 N-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VH-VL) 93B1B7 VH-L1-93B1B7 VL-L2-11H10 VH2-CH1-CH2-CH3(서열번호 97) 11H10 VL2-CL
(서열번호 99)
BAP0022 항-DKK1 전장 항체의 중쇄의 N-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 93B1B7 VL-L1-93B1B7 VH-L2-11H10 VH2-CH1-CH2-CH3(서열번호 98) 11H10 VL2-CL
(서열번호 99)
BAP0023 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 N-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VH-VL) 11H10 VH2-L1-11H10 VL2-L2-93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 100) 93B1B7 VL-CL
(서열번호 102)
BAP0024 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 N-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VL-VH) 11H10 VL2-L1-11H10 VH2-L2-93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 101) 93B1B7 VL-CL
(서열번호 102)
BAP0025 항-DKK1 전장 항체의 경쇄의 N-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VH-VL) 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3(서열번호 103) 93B1B7 VH-L1-93B1B7 VL-L2-11H10 VL2-CL
(서열번호 104)
BAP0026 항-DKK1 전장 항체의 경쇄의 N-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3(서열번호 103) 93B1B7 VL-L1-93B1B7 VH-L2-11H10 VL2-CL
(서열번호 105)
BAP0027 항-스클레로스틴 전장 항체의 경쇄의 N-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VH-VL) 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 106) 11H10 VH2-L1-11H10 VL2-L2-93B1B7 VL-CL
(서열번호 107)
BAP0028 항-스클레로스틴 전장 항체의 경쇄의 N-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VL-VH) 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 106) 11H10 VL2-L1-11H10 VH2-L2-93B1B7 VL-CL
(서열번호 108)
BAP0029 항-DKK1 전장 항체의 경쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VH-VL) 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3(서열번호 109) 11H10 VL2-CL-L1-93B1B7 VH-L2-93B1B7 VL
(서열번호 110)
BAP0030 항-DKK1 전장 항체의 경쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3(서열번호 109) 11H10 VL2-CL-L1-93B1B7 VL-L2-93B1B7 VH
(서열번호 111)
BAP0031 항-스클레로스틴 전장 항체의 경쇄의 C-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VH-VL) 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 112) 93B1B7 VL-CL-L1-11H10 VH2-L2-11H10 VL2
(서열번호 113)
BAP0032 항-스클레로스틴 전장 항체의 경쇄의 C-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VL-VH) 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 112) 93B1B7 VL-CL-L1-11H10 VL2-L2-11H10 VH2
(서열번호 114)
BAP0033 항-DKK1 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 11H10 VH-CH1-CH2-CH3-L1-hAb2 VL2-L2-hAb VH2(서열번호 115) 11H10 VL-CL
(서열번호 119)
BAP0034 항-DKK1 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VH-VL) 11H10 VH-CH1-CH2-CH3-L1-hAb VH2-L2-hAb2 VL2(서열번호 116) 11H10 VL3-CL
(서열번호 119)
BAP0035 항-DKK1 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 11H10 VH-CH1-CH2-CH3-L1-hAb1 VL2-L2-hAb VH2(서열번호 117) 11H10 VL3-CL
(서열번호 119)
BAP0036 항-DKK1 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VH-VL) 11H10 VH-CH1-CH2-CH3-L1-hAb VH2-L2-hAb1 VL2(서열번호 118) 11H10 VL3-CL
(서열번호 119)
BAP0037 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VH-VL) hAb VH-CH1-CH2-CH3-L1-11H10 VH3-L2-11H10 VL3(서열번호 120) hAb-2 VL-CL
(서열번호 122)
BAP0038 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VL-VH) hAb VH-CH1-CH2-CH3-L1-11H10 VL3-L2-11H10 VH3(서열번호 121) hAb-2 VL-CL
(서열번호 122)
BAP0039 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VH-VL) hAb VH-CH1-CH2-CH3-L1-11H10 VH3-L2-11H10 VL3(서열번호 123) hAb-1 VL-CL
(서열번호 125)
BAP0040 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-DKK1 scFv(VL-VH) hAb VH-CH1-CH2-CH3-L1-11H10 VL3-L2-11H10 VH3(서열번호 124) hAb-1 VL-CL
(서열번호 125)
BAP0050 항-RANKL 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 데노수맙 VH -CH1-CH2-CH3-L1-hAb-2 VL2 -L2-hAb VH2(서열번호 126) 데노수맙 VL-CL
(서열번호 129)
BAP0051 항-RANKL 전장 항체의 중쇄의 N-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) hAb-2 VL2 -L1-hAb VH2-L2-데노수맙 VH -CH1-CH2-CH3(서열번호 127) 데노수맙 VL-CL
(서열번호 129)
BAP0052 항-RANKL 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 데노수맙 VH -CH1-CH2-CH3-L1-hAb-2 VL2 -L2-hAb VH2(서열번호 128) 데노수맙 VL-CL
(서열번호 129)
BAP0053 항-RANKL 전장 항체의 경쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 데노수맙 VH -CH1-CH2-CH3(서열번호 133) 데노수맙 VL-CL-L1-hAb-2 VL2 -L2-hAb VH2
(서열번호 130)
BAP0054 항-RANKL 전장 항체의 경쇄의 N-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 데노수맙 VH -CH1-CH2-CH3(서열번호 133) hAb-2 VL2 -L1-hAb VH2-L2-데노수맙 VL-CL
(서열번호 131)
BAP0055 항-RANKL 전장 항체의 경쇄의 C-말단에 융합된 항-스클레로스틴 scFv(VL-VH) 데노수맙 VH -CH1-CH2-CH3(서열번호 133) 데노수맙 VL-CL-L1-hAb-1 VL2 -L2-hAb VH2
(서열번호 132)
BAP0041 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) DKK1을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 134)
제2 중쇄: 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3
(서열번호 136)		 제1 경쇄: 93B1B7 VL-CL
(서열번호 135)
제2 경쇄: 11H10 VL2-CL
(서열번호 137)
BAP0042 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) DKK1을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 134)
제2 중쇄: 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3
(서열번호 138)		 제1 경쇄: 93B1B7 VL-CL
(서열번호 135)
제2 경쇄: 11H10 VL2-CL
(서열번호 139)
BAP0043 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) DKK1을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 134)
제2 중쇄: 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3
(서열번호 140)		 제1 경쇄: 93B1B7 VL-CL
(서열번호 135)
제2 경쇄: 11H10 VL2-CL
(서열번호 141)
BAP0044 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) DKK1을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 134)
제2 중쇄: 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3
(서열번호 142)		 제1 경쇄: 93B1B7 VL-CL
(서열번호 135)
제2 경쇄: 11H10 VL2-CL
(서열번호 143)
BAP0045 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) DKK1을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: 93B1B7 VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 134)
제2 중쇄: 11H10 VH2-CH1-CH2-CH3
(서열번호 144)		 제1 경쇄: 93B1B7 VL-CL
(서열번호 135)
제2 경쇄: 11H10 VL2-CL
(서열번호 145)
BAP0061 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) DKK1을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 146)
제2 중쇄: 11H10 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 148)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 11H10 VL-CL
(서열번호 149)
BAP0062 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) DKK1을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 146)
제2 중쇄: 11H10 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 150)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 11H10 VL-CL
(서열번호 151)
BAP0063 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) DKK1을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 146)
제2 중쇄: 11H10 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 152)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 11H10 VL-CL
(서열번호 153)
BAP0064 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) DKK1을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 146)
제2 중쇄: 11H10 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 154)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 11H10 VL-CL
(서열번호 155)
BAP0065 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) RANKL을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 146)
제2 중쇄: 데노수맙 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 156)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 데노수맙 VL-CL
(서열번호 157)
BAP0066 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) RANKL을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 146)
제2 중쇄: 데노수맙 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 158)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 데노수맙 VL-CL
(서열번호 159)
BAP0067 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) RANKL을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 146)
제2 중쇄: 데노수맙 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 162)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 데노수맙 VL-CL
(서열번호 163)
BAP0068 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) RANKL을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 146)
제2 중쇄: 데노수맙 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 160)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 데노수맙 VL-CL
(서열번호 161)
BAP0069 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-RANKL scFv(VL-VH) hAb VH-CH1-CH2-CH3-L1-데노수맙 VL-L2-데노수맙 VH(서열번호 177) hAb-1 VL-CL
(서열번호 125)
BAP0070 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-RANKL scFv(VH-VL) hAb VH-CH1-CH2-CH3-L1-데노수맙 VH-L2-데노수맙 VL(서열번호 178) hAb-1 VL-CL
(서열번호 125)
BAP0071 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-RANKL scFv(VH-VL) hAb VH-CH1-CH2-CH3-L1-데노수맙 VH-L2-데노수맙 VL(서열번호 178) hAb-2 VL-CL
(서열번호 122)
BAP0072 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-RANKL scFv(VH-VL) hAb VH-CH1-CH2-CH3-L1-데노수맙 VH-L2-데노수맙 VL(서열번호 179) hAb-2 VL-CL
(서열번호 122)
BAP0073 항-스클레로스틴 전장 항체의 중쇄의 C-말단에 융합된 항-RANKL scFv(VH-VL) hAb VH-CH1-CH2-CH3-L1-데노수맙 VH-L2-데노수맙 VL(서열번호 180) hAb-2 VL-CL
(서열번호 122)
BAP0074 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) RANKL을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 171)
제2 중쇄: 데노수맙 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 172)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 데노수맙 VL-CL
(서열번호 163)
BAP0075 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) RANKL을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 173)
제2 중쇄: 데노수맙 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 174)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 데노수맙 VL-CL
(서열번호 163)
BAP0076 a) 스클레로스틴을 인식하는 VH-VL의 제1 쌍(제1 Fab), 및 b) RANKL을 인식하는 VH-VL의 제2 쌍(제2 Fab)을 갖는 전장 항체 제1 중쇄: hAb VH-CH1-CH2-CH3(서열번호 175)
제2 중쇄: 데노수맙 VH-CH1-CH2-CH3
(서열번호 176)		 제1 경쇄: hAb-2 VL-CL
(서열번호 147)
제2 경쇄: 데노수맙 VL-CL
(서열번호 163)
이중특이성 분자는 96-웰 플레이트에서 부착-적응된 293 6E 세포에서 일시적으로 발현되었다. 부착성 293 6E 세포를 무혈청 KOP293 배지(Zhuhai Kairui Biotech #K03252)에서 웰당 5E4 세포로 폴리-D-리신 코팅된 96-웰 조직 배양 플레이트에 25 μg/mL 및 5% FBS로 시딩하고, 24시간 후에, 형질감염시키고 37℃, 5% CO2에서 밤새 인큐베이션하였다. 형질감염 당일에, 결합 분자의 각각의 상응하는 HC 및 LC DNA 100 ng(40 ng/μL)을 함께 혼합하였다. 무혈청 배지 KOP293 25 μL/웰을 DNA 혼합물에 첨가하였다. RT에서 15 내지 30분 동안 인큐베이션한 후, 형질감염 혼합물을 배양 플레이트에 첨가하여 전날 시딩하고 부드럽게 흔들면서 혼합하였다. 배양 플레이트를 다시 37℃, 5% CO2 인큐베이터에 밤새 두었다. 다음날, 배지 및 형질감염 혼합물을 흡인하고 0.5% 트립톤을 함유하는 무혈청 배지 130 μL로 교체하였다. 플레이트를 추가로 6일 동안 인큐베이션하였다. 컨디셔닝된 배지(CM)는 형질감염 후 7일째에 수확되었다. 플레이트를 1,000 rpm에서 5분 동안 회전시켜 임의의 세포 파편을 펠렛화하였다. 상청액을 멸균 폴리프로필렌 블록으로 조심스럽게 옮겼다.
단백질 A 친화도 크로마토그래피로 항체를 정제하고 PBS(pH 7.2)에서 완충액을 교환하였다. 정제된 항체의 농도를 해당 단백질에 대해 이론적으로 측정된 흡광 계수를 사용하여 280nm에서 흡광도를 판독하여 측정하였다.
실시예 10. 항- 스클레로스틴 x 항- DKK1 및 항- 스클레로스틴 x 항- RANKL 이중특이성 항체의 결합 동역학 및 친화도
항-스클레로스틴 x 항-DKK1 및 항-스클레로스틴 x 항-RANKL 이중특이성 항체의 결합 동역학 및 친화도를 게이터(Probe Life) 바이오-레이어 간섭계(BLI)로 측정하였다. 항체를 5 μg/mL 용액을 사용하여 항-hFc 바이오센서에 고정화시켰다. 동역학 완충액(PBS, pH 7.4, 0.05% Tween-20, 0.2% BSA) 중 스클레로스틴(1 μg/mL부터), DKK1(2 μg/mL부터) 또는 RANKL(4 μg/mL부터)의 2배 까지의 연속 희석액을 분석 물질로 사용하였다. 친화도(KD) 및 동역학 매개변수(Kon 및 Koff)를 게이터 소프트웨어를 사용하여 데이터의 전역 맞춤(1:1)에서 계산하였다. 결과를 표 12에 요약하였다.
인간 스클레로스틴, DKK1 및 RANKL에 대한 이중특이성 항체의 결합 동역학 요약
항체 항원 k off (1/s) k on (1/Ms) K D (M) b
BAP0037 h스클레로스틴 LOD a 1.88Х106 추정치 10-11
hDKK1 3.01Х10-4 2.97Х105 1.01Х10-9
BAP0039 h스클레로스틴 9.74Х10-5 1.88Х106 5.2Х10-11
hDKK1 4.32Х10-5 3.09Х105 1.4Х10-10
BAP0061 h스클레로스틴 LOD 2.62Х106 추정치 10-11
hDKK1 LOD 3.30Х105 추정치 10-11
BAP0063 h스클레로스틴 LOD 2.59Х106 추정치 10-11
hDKK1 LOD 1.29Х105 추정치 10-11
BAP0069 h스클레로스틴 LOD 7.57Х105 추정치 10-11
hRANKL LOD 8.67Х104 추정치 10-11
BAP0075 h스클레로스틴 LOD 5.78Х105 추정치 10-11
hRANKL LOD 1.45Х105 추정치 10-11
a 오프-레이트(off-rate)가 매우 느리고 게이터의 정량분석 한계를 초과함을 나타내는 검출 한계
b 친화도 KD 값은 Koff/Kon으로 계산되고, Koff가 LOD인 경우, KD 값은 게이터의 검출 한계인 10pM 부근에서 추정됨
실시예 11. BLI를 사용한, bsAb에 대한 인간 스클레로스틴 및 DKK1의 동시 결합
bsAb에 대한 인간 스클레로스틴 및 DKK1의 동시 결합을, BLI를 사용하여 확인하였다. bsAb 구축물(5 μg/mL)을 항-hFc HFC 프로브에 포획한 후, 동역학 완충액(PBS, pH 7.4, 0.05% Tween-20, 0.2% BSA) 중 h스클레로스틴(2 μg/mL) 및 hDKK1(2 μg/mL)을 순차적으로 첨가하였다. 도 6에 도시한 바와 같이, 2개의 증가하는 결합 반응이 4개의 bsAb에 대해 관찰되었지만, 블랭크(blank) 완충액 또는 항-스클레로스틴 mAb에 대해서는 관찰되지 않았고, 이는 이중특이성 항체가 스클레로스틴과 DKK1에 동시에 결합할 수 있고 하나의 표적 단백질의 결합이 다른 표적의 결합을 차단하지 않음을 나타낸다.
실시예 12. HEK293 / TCF / LEF / Wnt1 세포에 대한 이중특이성 항체의 스클레로스틴 /DKK1-중화 활성
WNT 신호전달 분석을 1 μg/mL 인간 스클레로스틴 및 DKK1을 별도로 첨가한 실시예 7에 기재된 바와 같이 수행하였다. 모든 bsAb는 스클레로스틴과 DKK1 둘 다의 Wnt 길항 효과를 용량 의존적 방식으로 완전히 중화할 수 있었다. EC50 활성을 표 13에 나타냈다.
리포터 유전자 분석에서 스클레로스틴 및 DKK1 중화 활성
항체 EC 50 (nM)
스클레로스틴 DKK1
BAP0037 23.63 24.13
BAP0039 26.66 20.87
BAP0061 63.83 41.39
BAP0063 65.44 44.72
실시예 13. 이중특이성 항체의 약동학 연구
나이브 수컷 시노몰거스 원숭이를 Guangzhou Huazhen Laboratory Animal Co., Ltd.에서 구입하였다. 동물의 무게는 2.7 kg 내지 3.5 kg였고 투여 시작 당시 3 내지 5세였다. 동물을 무작위로 4개의 용량 그룹에 할당하였다(그룹당 n = 3). 투여 당일, 항체 30 mg/kg을 피하 투여하였다. 혈액 샘플을 투여 후 1일(투여 전, 투여 후 12시간 및 투여 후 24시간), 2, 3, 5, 7, 10, 14, 18, 21, 28일에 수집하였다. 이러한 연구에서 사용된 PK 샘플링 체계는 시노몰거스 원숭이에서 다른 인간 IgG 치료용 mAb의 공지된 PK 특성을 기반으로 한다.
시노몰거스 원숭이 혈청에서 bsAb를 측정하기 위한 분석은 인증된 목적 지향 맞춤(fit-for-purpose) 샌드위치 ELISA 방법을 사용하였다. CORNING 고결합 96웰 폴리스티렌 마이크로플레이트를 특정 인간 IgG 중쇄 및 경쇄 원숭이 흡착 항체로 코팅하였다. 표준, 품질 관리 및 미지의 샘플을 웰에 로딩하고, 존재하는 모든 인간 항체를 고정화 항체에 결합시켰다. 결합되지 않은 모든 물질을 세척한 후, ELISA를 위해 인간 IgG 중쇄 및 경쇄 원숭이 흡착 항체 접합체 HRP 및 TMB 기질 용액을 웰에 첨가하였다. 포획 항체와 검출 항체 둘 다에 결합된 인간 bsAb를 포함하는 샘플만이 450 nm에서 흡수 신호를 생성하였다. 생성된 신호는 존재하는 인간 bsAb의 양에 비례하였다. 샘플에서 항체의 최저 정량가능 농도(LLOQ)는 0.1 μg/mL였다.
시노몰거스 원숭이에서 이중특이성 항체의 혈청 농도는 도 7에 도시되어 있다. 데이터는 평균 ± SE n = 3으로 표시된다. 반감기는 17 내지 286시간 범위로 계산되었다.
실시예 14. 이중특이성 항체의 약력학 연구
골형성 바이오마커 프로콜라겐 I형 N-말단 프로펩티드(P1NP) 및 I형 콜라겐의 텔로펩티드의 골흡수 바이오마커 C-말단 단부(CTX-1)는 널리 인정되는 두 가지 특정 골 항상성 지표이다. 이중특이성 항체의 약력학적 효과를 시험하기 위해, 정상적인 수컷 시노몰거스 원숭이에게 위에서 기술한 다양한 이중특이성 항체를 30 mg/kg으로 피하 주사하였다. 주사 후 3일째 혈액 샘플을 채취하였다. 이어서, 혈청 샘플을 원심분리에 의해 분리하였다. 혈청 P1NP 및 CTX-1 수준은 제조사의 지시에 따라 각각 P1NP Test Kit(PC-007, Guangzhou Phicon Biotech Co. Guangzhou, China) 및 Serum CrossLaps ELISA 키트(AC-021F1R, Immunodiagnostic Systems, UK)를 사용하여 측정하였다. 결과는 이중특이성 항체의 투여가 주사 후 불과 3일 만에 혈청 P1NP 수준의 극적인 증가를 야기했음을 나타냈다. 투여 전 기준선과 비교할 때, 3일째 혈청 P1NP 수준은 상이한 이중특이성 항체에 대해 104.50 ± 8.5% 내지 212.75 ± 20.6%로 증가하였다(표 14). 또한, 혈청 CTX-1 수준은 3일째에 이중특이성 항체 주사에 대한 반응으로 기준선과 비교하여 상이한 이중특이성 항체에 대해 46.73 ± 2.5% 내지 90.11 ± 6.8%로 감소하였다(표 14). 상기 결과는, 이중특이성 항체가 골형성을 강력하게 증가시키고 동시에 골흡수를 감소시킴을 나타내어, 남성과 여성 둘 다의 골감소증이나 골다공증, 골형성 부전증, 다발성 골수종 골 질환과 같은 낮은 골질량 또는 열악한 골질(bone quality)과 관련된 질환 또는 병태를 치료하는 데 심도 있는 치료 효능을 시사하였다. 데이터를 표 14에 나타냈다.
주사 3일 후 시노몰거스 원숭이의 P1NP 및 CTX-1의 혈청 농도
항체 투약 전으로부터의 %변화(평균 ± S.E. n = 3)
혈청 P1NP 혈청 CTX-1
BAP0037 212.75 ± 20.6 -90.11 ± 6.8
BAP0039 127.92 ± 18.8 -75.03 ± 10.1
BAP0061 180.39 ± 23.8 -46.73 ± 2.5
BAP0063 117.12 ± 16.0 -68.81 ± 12.5
BAP0069 104.50 ± 8.5 -75.07 ± 2.9
또한, 매우 잘 검증된 폐경 후 골다공증 동물 모델인 샴 수술을 받은(sham operated; Sham) 또는 장기적 난소 절제(long-term ovariectomized; OVX) 암컷 시노몰거스 원숭이를 치료하기 위해 이중특이성 항체를 사용할 때, 10 mg/kg의 이중특이성 항체의 단일 주사는 혈청 P1NP의 현저한 증가 및 혈청 CTX-1 수준의 감소를 유도하였다. 투여 전 기준선 값과 비교하여, 혈청 P1NP 수준은 투여 후 14일에 각각 OVX 원숭이에서 241.36 ± 60.9% 증가한 반면, Sham 원숭이에서는 182.67 ± 60.1% 증가하였다. 동시에, 혈청 CTX-1은 투여 후 14일에 각각 OVX 원숭이에서 -52.12 ± 5.9% 감소한 반면, Sham 원숭이에서는 -17.43 ± 8.5% 감소하였다. 이러한 데이터는 연령 관련 또는 폐경 후 골다공증에서 골형성 증가 및 골흡수 감소의 치료 효능에 대한 추가적인 증거를 제공하였다.
실시예 15. 이중특이성 항체는 골형성 부전증( OI )에서 골절을 예방할 수 있음
골의 다단계 계층 구조는 자연적으로 골절에 저항하도록 최적화되어 있다. 강화된 골형성과 감소된 골흡수는 골의 강도를 강하고 건강하게 유지하는 두 가지 중요한 과정이다. 골형성 부전증(OI) 또는 취성 골 질환에서, 유전적 돌연변이는 콜라겐의 품질 및/또는 양에 영향을 미치고 골절 위험을 극적으로 증가시킨다. 임상적으로, 낮은 골량과 강도, 극도의 골 취약성과 골격 기형, 및 빈번한 골절이 이 질환의 특징이다. OI의 골절률을 낮추는 치료는 임상적 개선의 궁극적인 목표이다. 따라서, 본 발명자들은 I형 콜라겐의 pro-a2 쇄에서의 자발적 돌연변이가, 빈번한 취성 골절에 초래된 골질 저하 및 낮은 골질량을 유발하는 OI 마우스 모델(oim/oim)에서 이중특이성 항체를 조사하였다. 4주령이 되었을 때, 동형 접합 oim/oim 마우스는 장골(long bone)에 골절이 생기기 시작하였다. 개별 항체 또는 이중특이성 항체(25 mg/kg, 각 항체에 대해 주당 1회)를 6주간 피하 투여한 후, 새로 발생하는 골절의 수는 10주령에 비히클 처리된 동물의 경우보다 극적으로 적게 감소하였다. 비히클 처리된 대조군에, 4주령에서 10주령(관찰기간 6주)까지 X-선 영상에서의 골절수가 마우스당 2.27 ± 0.7 증가하였다. 스클레로스틴 항체 또는 DKK1 항체 단독의 처리는 비히클 처리 대조군과 비교하여 마우스당 골절 수를 감소시켰다(각각 0.75 ± 0.2, 1.44 ± 0.4). 더 극적으로, 이중특이성 항체로 치료된 oim/oim 마우스는 새로 발생하는 골절(4주령에서 10주령까지 마우스당 0.00±0.5의 새로운 골절)을 완전히 예방하는 데, 이는 단일 치료제 단독보다 훨씬 더 우수하다. 이러한 결과는 이중특이성 항체가 스클레로스틴과 DKK1을 동시에 중화할 때 추가적인 골절을 예방함으로써 상승적인 골 동화 효과를 달성했음을 시사한다. 스클레로스틴 및 DKK1 둘 다가 Wnt 수용체 LRP5/6에 결합하고 신호전달 경로의 단백동화 특성을 차단하는 길항제 역할을 한다는 점을 감안할 때, 특정 항체로 결합 부위 중 하나를 차단하는 경우가 보상 메커니즘에 의한 다른 길항제의 상향조절을 야기할 수 있음이 괄목할 만하고, 이는 골다공증 환자에서 항-스클레로스틴 항체로 치료한 후 관찰된 DKK1의 상향조절에 의해 증명된다(문헌[Holdsworth G, 2018, Bone 107, 93-103]). 따라서, 본 연구로부터의 상기 결과는 추가 골절의 예방에 의한 골에 대한 상승적인 효과를 강하게 시사한다. 이러한 유망한 결과는 이중특이성 항체가 OI 환자의 미충족 요구를 감소시키고 반복 골절의 부담을 줄일 수 있음을 분명히 시사한다.
실시예 16. 이중특이성 항체는 RPMI8226 다발성 골수종 세포의 시험관내 성장을 억제함
이중특이성 항체는 RPMI8226 인간 다발성 골수종(MM) 세포에서도 평가된다. 수많은 과학 보고서에 표시된 바와 같이, DKK1 발현 수준은 MM 환자에서 증가하고 질환의 중증도와 관련이 있음이 입증되었다(문헌[Fulciniti M. et al. Blood, 2009; 114(2): 371-379.], [Feng Y et al. Cancer Biomarkers . 2018; 1: 1-7]). 또한, 연구에 따르면 MM 환자의 약 80 내지 90%가 MM 관련 골 장애(MMBD)를 앓는 것으로 나타났다. MMBD의 주요 임상 표현은 골흡수 활성 증가로 인한 골용해성 병변 및 골절, 및 골형성의 억제이다. 따라서, 이중특이성 항체의 특성은 DKK1 발현을 억제할 뿐만 아니라 골흡수 억제를 제공하여 골형성을 증가시킴으로써 MMBD 환자에게 도움이 될 것이다. 본 발명자들의 예비 연구는 분자에 노출된 MM 세포(RPMI 8226)의 시험관내 세포 배양이 세포 표면 마커 CD138 수준의 감소를 나타내어, 세포가 아폽토시스 과정을 겪을 수 있음을 시사한다. 또한, 종양 성장의 CCK8 분석은 종양 세포 수의 용량 의존적 감소를 나타냈다. RPMI8226 MM 세포에 이중특이성 항체를 100 μg/mL로 48시간 동안 투여하였을 때, 생존 세포수가 약 28% 감소하였다. 이러한 증거는 이중특이성 항체가 RPMI8226 MM 세포 아폽토시스를 유발하고 종양 세포 성장을 정지시킬 수 있음을 나타낸다. 상기 결과는 골 장애를 예방할 뿐만 아니라(실시예 14 및 15에 표시된 데이터와 같이) 종양 성장을 직접적으로 억제함으로써 MMBD 및 종양 전이 관련 골 장애를 치료하기 위한 치료적 적용을 시사한다.
서열표
서열번호 설명 뉴클레오티드 또는 아미노산 서열
예시적인 항- 스클레로스틴 mAb 서열
1 HC-CDR1 DYEIH
2 HC-CDR1 DFEMH
3 HC-CDR1 DYEMH
4 HC-CDR1 SYWMH
5 HC-CDR2 AIDPETGGTAYNQKFKG
6 HC-CDR2 AIDPETGGTAYNQKFKA
7 HC-CDR2 AIDPETGGTAYNQKFTA
8 HC-CDR2 MIHPNSGSSNYNEKFKS
9 HC-CDR3 YDYVTY
10 HC-CDR3 YDYVSY
11 HC-CDR3 DYDDEGFAY
12 HC-CDR1 공통 서열 DX1EX2HX1 = Y 또는 F, X2 = M 또는 I.
13 HC-CDR2 공통 서열 AIDPETGGX1AX2NQKFX3X4X1 = T 또는 S, X2 = Y 또는 N, X3 = K 또는 T, X4 = A, G, 또는 S.
14 HC-CDR3 공통 서열 YDYVX1YX1 = T 또는 S
15 LC-CDR1 KSSQSLLYSDGRTYLN
16 LC-CDR1 KSSQSLLYSDGKTYLN
17 LC-CDR1 KASQSVSNDVA
18 LC-CDR2 LVSKLDS
19 LC-CDR2 YASNRCT
20 LC-CDR3 WQGTHLPHT
21 LC-CDR3 QQDYSSPWT
22 93B1B7 VH QAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSA
23 93B1B7 VL DVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELK
24 94B12D3 VH QVQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWVKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKAKAILTADRSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYSFSYDYVSYWGQGTLVTVSA
25 94B12D3 VL DVVMTQTPLTLSVTIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFAGSGSGTDFSLKISRVEAEDLGVYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELK
26 71G6G8 VH QAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWVKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCFSYDYVTYWGQGTLVTVTA
27 71G6G8 VL DVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFTGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELK
28 56E5C10 VH QVQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDFEMHWVKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFTAKAILTADRSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCFSYDYVSYWGQGTLVTVSA
29 56E5C10 VL DVMMTQTPLTLSVTIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFTGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELK
30 91F6D10 VH QVQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEMHWVKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKAKAILTADRSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCFSYDYVSYWGQGTLVTVSA
31 91F6D10 VL DVVMTQTPLTLSVTIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFTGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCWQGTHLPHTFGVGTKLELK
32 51E8D4 VH QVQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDFEIHWMKQTPVPGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKALLTADKSSSTAYMDLRSLTSEDSAVYFCFSYDYVSYWGQGTLVTVSA
33 51E8D4 VL DVVMTQTPLTLSVTFGQPASISCKSSQSLLYSDGKTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFTGSGSGTAFTLKISRVEAEDLGVYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELR
34 97C11D7 VH QVQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEMHWVKQTPVHGLEWIGAIDPETGGSANNQKFKAKAILTADRSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCFSYDYVSYWGQGTLVTVSA
35 97C11D7 VL DVVMTQTPLTLSVTIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFTGSGSGTDFTLKIGRVEAEDLGVYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELK
36 81B2B6 VH QVQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEMHWVKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKAKAILTADRSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCFSYDYVSYWGQGTLVTVSA
37 81B2B6 VL DVVMTQTPLTLSVTLGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFTGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGLYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELK
38 84F2D5 VH QVQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDFEIHWLKQTPVPGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKALLTADKSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCFSYDYVSYWGQGTLVTVSA
39 84F2D5 VL DVVMTQTPLTLSVTIGQPASISCKSSQSLLYSDGKTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFTGSGSGTAFTLKISRVEAEDLGVYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELR
40 65B12C9 VH QVQLQQPGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGMIHPNSGSSNYNEKFKSKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCANDYDDEGFAYWGQGTLVTVSA
41 65B12C9 VL SIVMTQTPKFLLVSAGDRVTITCKASQSVSNDVAWYQQKPGQSPKLLIYYASNRCTGVPDRFTGSGYGTDFTFTISTVQAEDLAVYFCQQDYSSPWTFGGGTKLEIK
예시적인 항- DKK1 서열
42 11H10-VH44VL32 HC-CDR1 GFTFSDYAMA
43 11H10-VH44VL32 HC-CDR2 TIIYDGSSTYYRDSVKG
44 11H10-VH44VL32 HC-CDR3 GLGIATDYFDY
45 11H10-VH44VL32 LC-CDR1 LASEDIYSDLA
46 11H10-VH44VL32 LC-CDR2 NANSLQN
47 11H10-VH44VL32 LC-CDR3 QQYNNYPPT
48 RH2-18 HC-CDR1 GYTFTDYYIH
49 RH2-18 HC-CDR2 WIHSNSGATTYAQKFQA
50 RH2-18 HC-CDR3 EDY
51 RH2-18 LC-CDR1 TGSSNIGAGYDVH
52 RH2-18 LC-CDR2 GYSNRPS
53 RH2-18 LC-CDR3 QSYDNSLSSYV
54 71G6G8 HC-CDR1 GFTFSSYAIS
55 71G6G8 HC-CDR2 SVSGTGLGFQTYYPDSVKG
56 71G6G8 HC-CDR3 SLENYAFDY
57 71G6G8 LC-CDR1 RASESVDDFGISFIN
58 71G6G8 LC-CDR2 AGSKQGS
59 71G6G8 LC-CDR3 QQLKEVPPT
60 11H10-VH44VL32 VH (11H10 VH) EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSS
61 11H10-VH44VL32 VL (11H10 VL) DIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGGGTKVEIK
62 RH2-18 VH EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYYIHWVRQAPGQGLEWMGWIHSNSGATTYAQKFQARVTMSRDTSSSTAYMELSRLESDDTAMYFCSREDYWGQGTLVTVSS
63 RH2-18 VL QSVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGYSNRPSGVPDRFSGSKSGASASLAITGLRPDDEADYYCQSYDNSLSSYVFGGGTQLTVL
64 71G6G8 VH EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAISWVRQAPGKGLEWVASVSGTGLGFQTYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCATSLENYAFDYWGQGTTVTVSS
65 71G6G8 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASESVDDFGISFINWYQQKPGQAPRLLIYAGSKQGSGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLKEVPPTFGGGTKVEIK
예시적인 항- RANKL 서열
66 데노수맙 HC-CDR1 GFTFSSYAMS
67 데노수맙 HC-CDR2 GITGSGGSTYYADSVKG
68 데노수맙 HC-CDR3 DPGTTVIMSWFDP
69 데노수맙 LC-CDR1 RASQSVRGRYLA
70 데노수맙 LC-CDR2 GASSRAT
71 데노수맙 LC-CDR3 QQYGSSPRT
72 데노수맙 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSS
73 데노수맙 VL EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGQGTKVEIK
예시적인 링커 서열
74 링커 GGGGS
75 링커 GGGGSGGGGS
76 링커 GGGGSGGGGSGGGGS
77 링커 GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS
78 링커 (G)n, n>=1
79 링커 (GS)n, 8>=n>=1
80 링커 (GSGGS)n, 8>=n>=1
81 링커 (GGGGS)n, 8>=n>=1
82 링커 (GGGS)n, 8>=n>=1
83 링커 (GGGGS)6
84 링커 (GSTSGSGKPGSGEGS)n3>=n>=1
예시적인 인간화 항- 스클레로스틴 항체 서열
85 hAb-2 LC-CDR1 RSSQSLLYSDGRTYLN
86 hAb-3 LC-CDR1 RSSQSLLYSDSRTYLN
87 hAb-1/hAb-2/hAb-3 VH (hAb VH) EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSS
88 hAb-1 VL DVVMTQSPLSLSVSPGERASLSCKSSQSLLYSDGRTYLNWYLQKPGQSPQRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVQSEDVGVYYCWQGTHLPHTFGGGTKVEIK
89 hAb-2 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGGGTKVEIK
90 hAb-3 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDSRTYLNWLQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGGGTKVEIK
예시적인 이중특이성 항- 스클레로스틴 항체 서열
91 BAP0017 중쇄 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSAETTAPSVYPLAPGTALKSNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGALSSGVHTFPAVLQSGLYTLTSSVTVPSSTWPSQTVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRNCGGDCKPCICTGSEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISQDDPEVHFSWFVDDVEVHTAQTRPPEEQFNSTFRSVSELPILHQDWLNGRTFRCKVTSAAFPSPIEKTISKPEGRTQVPHVYTMSPTKEEMTQNEVSITCMVKGFYPPDIYVEWQMNGQPQENYKNTPPTMDTDGSYFLYSKLNVKKEKWQQGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGKGGGGSGGGGSGGGGSQAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELK
92 BAP0018 중쇄 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSAETTAPSVYPLAPGTALKSNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGALSSGVHTFPAVLQSGLYTLTSSVTVPSSTWPSQTVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRNCGGDCKPCICTGSEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISQDDPEVHFSWFVDDVEVHTAQTRPPEEQFNSTFRSVSELPILHQDWLNGRTFRCKVTSAAFPSPIEKTISKPEGRTQVPHVYTMSPTKEEMTQNEVSITCMVKGFYPPDIYVEWQMNGQPQENYKNTPPTMDTDGSYFLYSKLNVKKEKWQQGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGKGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSA
93 BAP0017/BAP0018 경쇄 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRADAAPTVSIFPPSTEQLATGGASVVCLMNNFYPRDISVKWKIDGTERRDGVLDSVTDQDSKDSTYSMSSTLSLTKADYESHNLYTCEVVHKTSSSPVVKSFNRNEC
94 BAP0019 중쇄 QAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSPRPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMNTNGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELK
95 BAP0020 중쇄 QAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSPRPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMNTNGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGKGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSS
96 BAP0019/BAP0020 경쇄 DVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRNEC
97 BAP0021 중쇄 QAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSAETTAPSVYPLAPGTALKSNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGALSSGVHTFPAVLQSGLYTLTSSVTVPSSTWPSQTVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRNCGGDCKPCICTGSEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISQDDPEVHFSWFVDDVEVHTAQTRPPEEQFNSTFRSVSELPILHQDWLNGRTFRCKVTSAAFPSPIEKTISKPEGRTQVPHVYTMSPTKEEMTQNEVSITCMVKGFYPPDIYVEWQMNGQPQENYKNTPPTMDTDGSYFLYSKLNVKKEKWQQGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK
98 BAP0022 중쇄 DVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSAETTAPSVYPLAPGTALKSNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGALSSGVHTFPAVLQSGLYTLTSSVTVPSSTWPSQTVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRNCGGDCKPCICTGSEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISQDDPEVHFSWFVDDVEVHTAQTRPPEEQFNSTFRSVSELPILHQDWLNGRTFRCKVTSAAFPSPIEKTISKPEGRTQVPHVYTMSPTKEEMTQNEVSITCMVKGFYPPDIYVEWQMNGQPQENYKNTPPTMDTDGSYFLYSKLNVKKEKWQQGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK
99 BAP0021/BAP0022 경쇄 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRADAAPTVSIFPPSTEQLATGGASVVCLMNNFYPRDISVKWKIDGTERRDGVLDSVTDQDSKDSTYSMSSTLSLTKADYESHNLYTCEVVHKTSSSPVVKSFNRNEC
100 BAP0023 중쇄 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSQAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSPRPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMNTNGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK
101 BAP0024 중쇄 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSPRPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMNTNGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK
102 BAP0023/BAP0024 경쇄 DVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRNEC
103 BAP0025/BAP0026 중쇄 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSAETTAPSVYPLAPGTALKSNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGALSSGVHTFPAVLQSGLYTLTSSVTVPSSTWPSQTVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRNCGGDCKPCICTGSEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISQDDPEVHFSWFVDDVEVHTAQTRPPEEQFNSTFRSVSELPILHQDWLNGRTFRCKVTSAAFPSPIEKTISKPEGRTQVPHVYTMSPTKEEMTQNEVSITCMVKGFYPPDIYVEWQMNGQPQENYKNTPPTMDTDGSYFLYSKLNVKKEKWQQGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK
104 BAP0025 경쇄 QAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRADAAPTVSIFPPSTEQLATGGASVVCLMNNFYPRDISVKWKIDGTERRDGVLDSVTDQDSKDSTYSMSSTLSLTKADYESHNLYTCEVVHKTSSSPVVKSFNRNEC
105 BAP0026 경쇄 DVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRADAAPTVSIFPPSTEQLATGGASVVCLMNNFYPRDISVKWKIDGTERRDGVLDSVTDQDSKDSTYSMSSTLSLTKADYESHNLYTCEVVHKTSSSPVVKSFNRNEC
106 BAP0027/BAP0028 중쇄 QAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSPRPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMNTNGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK
107 BAP0027 경쇄 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRNEC
108 BAP0028 경쇄 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRNEC
109 BAP0029/BAP0030 중쇄 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSAETTAPSVYPLAPGTALKSNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGALSSGVHTFPAVLQSGLYTLTSSVTVPSSTWPSQTVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRNCGGDCKPCICTGSEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISQDDPEVHFSWFVDDVEVHTAQTRPPEEQFNSTFRSVSELPILHQDWLNGRTFRCKVTSAAFPSPIEKTISKPEGRTQVPHVYTMSPTKEEMTQNEVSITCMVKGFYPPDIYVEWQMNGQPQENYKNTPPTMDTDGSYFLYSKLNVKKEKWQQGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK
110 BAP0029 경쇄 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRADAAPTVSIFPPSTEQLATGGASVVCLMNNFYPRDISVKWKIDGTERRDGVLDSVTDQDSKDSTYSMSSTLSLTKADYESHNLYTCEVVHKTSSSPVVKSFNRNECGGGGSGGGGSGGGGSQAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELK
111 BAP0030 경쇄 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRADAAPTVSIFPPSTEQLATGGASVVCLMNNFYPRDISVKWKIDGTERRDGVLDSVTDQDSKDSTYSMSSTLSLTKADYESHNLYTCEVVHKTSSSPVVKSFNRNECGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSA
112 BAP0031/BAP0032 중쇄 QAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSAAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSPRPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMNTNGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK
113 BAP0031 경쇄 DVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRNECGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELK
114 BAP0032 경쇄 DVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRNECGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSA
115 BAP0033 중쇄 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSA
116 BAP0034 중쇄 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIK
117 BAP0035 중쇄 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQSPLSLSVSPGERASLSCKSSQSLLYSDGRTYLNWYLQKPGQSPQRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVQSEDVGVYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSA
118 BAP0036 중쇄 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQSPLSLSVSPGERASLSCKSSQSLLYSDGRTYLNWYLQKPGQSPQRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVQSEDVGVYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIK
119 BAP0033/BAP0034/BAP0035/BAP0036 경쇄 DIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
120 BAP0037 중쇄 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKCLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGCGTKVEIK
121 BAP0038 중쇄 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKCLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSA
122 BAP0037/BAP0038/BAP0071/BAP0072/BAP0073 경쇄 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
123 BAP0039 중쇄 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKCLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGCGTKVEIK
124 BAP0040 중쇄 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSDIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKCLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSA
125 BAP0039/BAP0040/BAP0069/BAP0070 경쇄 DVVMTQSPLSLSVSPGERASLSCKSSQSLLYSDGRTYLNWYLQKPGQSPQRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVQSEDVGVYYCWQGTHLPHTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
126 BAP0050 중쇄 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSA
127 BAP0051 중쇄 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
128 BAP0052 중쇄 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQSPLSLSVSPGERASLSCKSSQSLLYSDGRTYLNWYLQKPGQSPQRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVQSEDVGVYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSA
129 BAP0050/BAP0051/BAP0052 경쇄 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
130 BAP0053 경쇄 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGECGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSA
131 BAP0054 경쇄 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
132 BAP0055 경쇄 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGECGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQSPLSLSVSPGERASLSCKSSQSLLYSDGRTYLNWYLQKPGQSPQRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVQSEDVGVYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSA
133 BAP0053/BAP0054/BAP0055 중쇄 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
134 BAP0041/BAP0042/BAP0043/BAP0044/BAP0045 중쇄 #1 QAQLQQSGAELVRPGASVTLSCKASGYTFTDYEIHWMKQTPVHGLEWIGAIDPETGGTAYNQKFKGKAILTADRSSSTAYLELRSLTSEDSAVYYCYSYDYVTYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSLGK
135 BAP0041/BAP0042/BAP0043/BAP0044/BAP0045 경쇄 #1 DVVMTQTPLTWSITIGQPASISCKSSQSLLYSDGRTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGFYYCWQGTHLPHTFGAGTKLELKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
136 BAP0041 중쇄 #2 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSASTKGPSVCPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
137 BAP0041 경쇄 #2 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRTVAAPSVFIFPPCDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
138 BAP0042 중쇄 #2 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSASTKGPSVFPCAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
139 BAP0042 경쇄 #2 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRTVAAPSVFICPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
140 BAP0043 중쇄 #2 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTCPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
141 BAP0043 경쇄 #2 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLCSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
142 BAP0044 중쇄 #2 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPACLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
143 BAP0044 경쇄 #2 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSCESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
144 BAP0045 중쇄 #2 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPACLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
145 BAP0045 경쇄 #2 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSCESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
146 BAP0061/BAP0062/BAP0063/BAP0064/BAP0065/BAP0066/BAP0067/BAP0068 중쇄 #1 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSLGK
147 BAP0061/BAP0062/BAP0063/BAP0064/BAP0065/BAP0066/BAP0067/BAP0068/BAP0074/BAP0075/BAP0076 경쇄 #1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
148 BAP0061 중쇄 #2 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPCAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
149 BAP0061 경쇄 #2 DIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFICPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
150 BAP0062 중쇄 #2 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTCPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
151 BAP0062 경쇄 #2 DIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLCSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
152 BAP0063 중쇄 #2 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPACLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
153 BAP0063 경쇄 #2 DIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSCESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
154 BAP0064 중쇄 #2 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVCPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
155 BAP0064 경쇄 #2 DIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFICPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
156 BAP0065 중쇄 #2 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPCAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
157 BAP0065 경쇄 #2 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFICPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
158 BAP0066 중쇄 #2 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTCPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
159 BAP0066 경쇄 #2 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLCSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
160 BAP0067 중쇄 #2 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVCPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
161 BAP0067 경쇄 #2 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFICPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
162 BAP0068 중쇄 #2 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPACLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
163 BAP0068/BAP0074/BAP0075/BAP0076 경쇄 #2 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSCESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGES
171 BAP0074 중쇄 #1 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
172 BAP0074 중쇄 #2 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPACLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK
173 BAP0075 중쇄 #1 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK
174 BAP0075 중쇄 #2 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPACLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
175 BAP0076 중쇄 #1 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHARFTQKSLSLSPGK
176 BAP0076 중쇄 #2 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPACLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHAHYTQKSLSLSPGK
177 BAP0069 중쇄 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGCGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKCLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSA
178 BAP0070/BAP0071 중쇄 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKCLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGCGTKVEIK
179 BAP0072 중쇄 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKCLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGCGTKVEIK
180 BAP0073 중쇄 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKGLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKCLEWVSGITGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDPGTTVIMSWFDPWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRGRYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVFYCQQYGSSPRTFGCGTKVEIK
추가의 예시적인 항- DKK1 또는 항- 스클레로스틴 서열
164 11H10 VH2 EVQLVESGGGLVQPANSLKLSCAASGFTFSDYAMAWVRQSPKKGLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMDSLRSEDTATYYCATGLGIATDYFDYWGQGVLVTVSS
165 11H10 VL2 DIRMTQSPASLSASLGETVNIECLASEDIYSDLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVATYFCQQYNNYPPTFGGGTKLELK
166 11H10 VH3 EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDYAMAWVRQAPGKCLEWVATIIYDGSSTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATGLGIATDYFDYWGQGTLVTVSS
167 11H10 VL3 DIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCLASEDIYSDLAWYQQKPAKAPKLFIYNANSLQNGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYNNYPPTFGCGTKVEIK
168 hAb VH2 EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYEIHWVRQAPGKCLEWMGAIDPETGGTAYNQKFKGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCYSYDYVTYWGQGTTVTVSS
169 hAb1 VL2 DVVMTQSPLSLSVSPGERASLSCKSSQSLLYSDGRTYLNWYLQKPGQSPQRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVQSEDVGVYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIK
170 hAb2 VL2 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLYSDGRTYLNWYQQKPGKSPKRLIYLVSKLDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCWQGTHLPHTFGCGTKVEIK
스클레로스틴의 제2 루프에서의 펩티드 아미노산 서열
185 hScl 110-133/ pep1 GPARLLPNAIGRGKWWRPSGPDFR
186 hScl 119-126 IGRGKWWR
187 pep5 PNAIGRGKWWR
188 pep6 IGRGKWWRPSGP
추가적인 서열
183 SOST_HUN1AN_Q9BQB4 QGWQAFKNDATEIIPELGEYPEPPPELENNKTMNRAENGGRPPHHPFETKDVSEYSCRELHFTRYVTDGPCRSAKPVTELVCSGQCGPARLLPNAIGRGKWWRPSGPDFRCIPDRYRAQRVQLLCPGGEAPRARKVRLVASCKCKRLTRFHNQSELKDFGTEAARPQKGRKPRPRARSAKANQAELENAY
184 SOST_MACFA_A0A2K5VUE5 QGWQAFKNDATEIIPELGEYPEPPPDLENNKTMNRAENGGRPPHHPFETKDVSEYSCRELHFTRYVTDGQCRSAKPVTELVCSGQCGPARLLPNAIGRGKWWRPSGPDFRCIPDRYRAQRVQLLCPGGAAPRARKVRLVASCKCKRLTRFHNQSELKDFGPEAARPQKGRKPRPRARGAKANQAELENAY
189 SOST_MACMU_F6WYL4 QGWQAFKNDATEIIPELGEYPEPPPELENNKTMNRAENGGRPPHHPFETKDVSEYSCRELHFTRYVTDGQCRSAKPVTELVCSGQCGPARLLPNAIGRGKWWRPSGPDFRCIPDRYRAQRVQLLCPGGAAPRARKVRLVASCKCKRLTRFHNQSELKDFGPEAARPQKGRKPRPRARGAKANQAELENAY
190 SOST_MOUSE_Q99P68 QGWQAFRNDATEVIPGLGEYPEPPPENNQTMNRAENGGRPPHHPYDAKDVSEYSCRELHYTRFLTDGQCRSAKPVTELVCSGQCGPARLLPNAIGRVKWWRPNGPDFRCIPDRYRAQRVQLLCPGGAAPRSRKVRLVASCKCKRLTRFHNQSELKDFGPETARPQKGRKPRPGARGAKANQAELENAY
191 SOST_RAT_Q99P67 QGWQAFKNDATEVIPGLREYPEPPQELENNQTMNRAENGGRPPHHPYDTKDVSEYSCRELHYTRFVTDGQCRSAKPVTELVCSGQCGPARLLPNAIGRVKWWRPNGPDFRCIPDRYRAQRVQLLCPGGAAPRSRKVRLVASCKCKRLTRFHNQSELKDFGPETARPQKGRKPRPRARGAKANQAELENAY
192 Pep2 mSOST GPARLLPNAIGRVKWWRPNGPDFR
193 Pep3 h/mSOST GPARLLPNAIGR
194 Pep4 hSOST RLLPNAIGRGK
195 Pep7 hSOST KWWRPSGPDFR
196 Pep8 mSOST PNAIGRVKWWR
197 Pep9 mSOST IGRVKWWRPNGP
198 Pep10 mSOST KWWRPNGPDFR
199 HC-CDR1 DFEIH
200 HC-CDR2 AIDPETGGSANNQKFKA
SEQUENCE LISTING <110> ANGITIA BIOMEDICINES LIMITED <120> ANTI-SCLEROSTIN CONSTRUCTS AND USES THEREOF <130> MTPIKR220144 <140> PCT/CN2021/120612 <141> 2021-09-26 <150> PCT/CN2020/118387 <151> 2020-09-28 <160> 200 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 1 Asp Tyr Glu Ile His 1 5 <210> 2 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 2 Asp Phe Glu Met His 1 5 <210> 3 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 3 Asp Tyr Glu Met His 1 5 <210> 4 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 4 Ser Tyr Trp Met His 1 5 <210> 5 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 5 Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 6 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 6 Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Ala <210> 7 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 7 Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Thr 1 5 10 15 Ala <210> 8 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 8 Met Ile His Pro Asn Ser Gly Ser Ser Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Ser <210> 9 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 9 Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr 1 5 <210> 10 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 10 Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr 1 5 <210> 11 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 11 Asp Tyr Asp Asp Glu Gly Phe Ala Tyr 1 5 <210> 12 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 2 <223> Xaa = Y or F <220> <221> VARIANT <222> 4 <223> Xaa = M or I <400> 12 Asp Xaa Glu Xaa His 1 5 <210> 13 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 9 <223> Xaa = T or S <220> <221> VARIANT <222> 11 <223> Xaa = Y or N <220> <221> VARIANT <222> 16 <223> Xaa = K or T <220> <221> VARIANT <222> 17 <223> Xaa = A, G, or S <400> 13 Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Xaa Ala Xaa Asn Gln Lys Phe Xaa 1 5 10 15 Xaa <210> 14 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 5 <223> Xaa = T or S <400> 14 Tyr Asp Tyr Val Xaa Tyr 1 5 <210> 15 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 15 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn 1 5 10 15 <210> 16 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 16 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn 1 5 10 15 <210> 17 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 17 Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp Val Ala 1 5 10 <210> 18 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 18 Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser 1 5 <210> 19 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 19 Tyr Ala Ser Asn Arg Cys Thr 1 5 <210> 20 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 20 Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr 1 5 <210> 21 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 21 Gln Gln Asp Tyr Ser Ser Pro Trp Thr 1 5 <210> 22 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 22 Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 23 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 23 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 <210> 24 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 24 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Ala Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Ser 85 90 95 Phe Ser Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 25 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 25 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ala Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 <210> 26 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 26 Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Phe Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Thr Ala 115 <210> 27 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 27 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 <210> 28 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 28 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Phe 20 25 30 Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Thr Ala Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Phe Ser Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 29 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 29 Asp Val Met Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 <210> 30 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 30 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Ala Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Phe Ser Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 31 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 31 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Val Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 <210> 32 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 32 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Phe 20 25 30 Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val Pro Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Leu Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Phe Ser Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 33 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 33 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Phe Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ala Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Arg 100 105 110 <210> 34 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 34 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Ser Ala Asn Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Ala Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Phe Ser Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 35 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 35 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Gly Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 <210> 36 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 36 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Ala Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Phe Ser Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 37 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 37 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Leu Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 <210> 38 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 38 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Phe 20 25 30 Glu Ile His Trp Leu Lys Gln Thr Pro Val Pro Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Leu Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Phe Ser Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 39 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 39 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ala Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Arg 100 105 110 <210> 40 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 40 Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Met Ile His Pro Asn Ser Gly Ser Ser Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Asn Asp Tyr Asp Asp Glu Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 41 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 41 Ser Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Lys Phe Leu Leu Val Ser Ala Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Asn Arg Cys Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Thr Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Tyr Ser Ser Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 42 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 42 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala 1 5 10 <210> 43 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 43 Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 44 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 44 Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 45 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 45 Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala 1 5 10 <210> 46 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 46 Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn 1 5 <210> 47 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 47 Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr 1 5 <210> 48 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 48 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Ile His 1 5 10 <210> 49 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 49 Trp Ile His Ser Asn Ser Gly Ala Thr Thr Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Ala <210> 50 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 50 Glu Asp Tyr 1 <210> 51 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 51 Thr Gly Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His 1 5 10 <210> 52 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 52 Gly Tyr Ser Asn Arg Pro Ser 1 5 <210> 53 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 53 Gln Ser Tyr Asp Asn Ser Leu Ser Ser Tyr Val 1 5 10 <210> 54 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 54 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser 1 5 10 <210> 55 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 55 Ser Val Ser Gly Thr Gly Leu Gly Phe Gln Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 56 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 56 Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Phe Asp Tyr 1 5 <210> 57 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 57 Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asp Phe Gly Ile Ser Phe Ile Asn 1 5 10 15 <210> 58 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 58 Ala Gly Ser Lys Gln Gly Ser 1 5 <210> 59 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 59 Gln Gln Leu Lys Glu Val Pro Pro Thr 1 5 <210> 60 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 60 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 61 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 61 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 62 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 62 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile His Ser Asn Ser Gly Ala Thr Thr Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Ala Arg Val Thr Met Ser Arg Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Glu Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Ser Arg Glu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 100 105 110 <210> 63 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 63 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr 20 25 30 Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Tyr Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Ala Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Arg 65 70 75 80 Pro Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Asn Ser Leu 85 90 95 Ser Ser Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 64 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 64 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Val Ser Gly Thr Gly Leu Gly Phe Gln Thr Tyr Tyr Pro Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Thr Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 65 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 65 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asp Phe 20 25 30 Gly Ile Ser Phe Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 35 40 45 Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Gly Ser Lys Gln Gly Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Lys 85 90 95 Glu Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 66 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 66 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser 1 5 10 <210> 67 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 67 Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 68 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 68 Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro 1 5 10 <210> 69 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 69 Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 70 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 70 Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr 1 5 <210> 71 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 71 Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Arg Thr 1 5 <210> 72 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 72 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 73 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 73 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 74 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 74 Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 75 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 75 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 <210> 76 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 76 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 <210> 77 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 77 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser 20 <210> 78 <211> 1 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 1 <223> Can be present in repeats of any integer <400> 78 Gly 1 <210> 79 <211> 2 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (1)..(2) <223> Can be present in repeats of any integer up to 8 <400> 79 Gly Ser 1 <210> 80 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (1)..(5) <223> Can be present in repeats of any integer up to 8 <400> 80 Gly Ser Gly Gly Ser 1 5 <210> 81 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (1)..(5) <223> Can be present in repeats of any integer up to 8 <400> 81 Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 82 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (1)..(4) <223> Can be present in repeats of any integer up to 8 <400> 82 Gly Gly Gly Ser 1 <210> 83 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 83 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 20 25 30 <210> 84 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (1)..(15) <223> Can be present in repeats of any integer up to 3 <400> 84 Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser 1 5 10 15 <210> 85 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 85 Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn 1 5 10 15 <210> 86 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 86 Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Ser Arg Thr Tyr Leu Asn 1 5 10 15 <210> 87 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 87 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 88 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 88 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Ser Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Gln Ser Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 89 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 89 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 65 70 75 80 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 90 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 90 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Ser Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 65 70 75 80 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 91 <211> 708 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 91 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Glu Thr Thr Ala Pro Ser Val 115 120 125 Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Thr Ala Leu Lys Ser Asn Ser Met Val Thr 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Gly Leu Tyr Thr Leu Thr Ser Ser Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Thr Trp Pro Ser Gln Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala 195 200 205 Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asn Cys Gly Gly 210 215 220 Asp Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Gly Ser Glu Val Ser Ser Val Phe 225 230 235 240 Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro 245 250 255 Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Gln Asp Asp Pro Glu Val 260 265 270 His Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr 275 280 285 Arg Pro Pro Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu 290 295 300 Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Arg Thr Phe Arg Cys 305 310 315 320 Lys Val Thr Ser Ala Ala Phe Pro Ser Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Pro Glu Gly Arg Thr Gln Val Pro His Val Tyr Thr Met Ser Pro 340 345 350 Thr Lys Glu Glu Met Thr Gln Asn Glu Val Ser Ile Thr Cys Met Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Tyr Val Glu Trp Gln Met Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Gln Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Pro Pro Thr Met Asp Thr Asp 385 390 395 400 Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Asn Val Lys Lys Glu Lys Trp 405 410 415 Gln Gln Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His 420 425 430 Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys Gly Gly 435 440 445 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ala Gln 450 455 460 Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala Ser Val Thr 465 470 475 480 Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His 485 490 495 Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile 500 505 510 Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys 515 520 525 Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Leu Glu Leu 530 535 540 Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr 545 550 555 560 Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 565 570 575 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 580 585 590 Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser 595 600 605 Ile Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser 610 615 620 Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg 625 630 635 640 Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp 645 650 655 Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 660 665 670 Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr 675 680 685 Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys 690 695 700 Leu Glu Leu Lys 705 <210> 92 <211> 708 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 92 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Glu Thr Thr Ala Pro Ser Val 115 120 125 Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Thr Ala Leu Lys Ser Asn Ser Met Val Thr 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Gly Leu Tyr Thr Leu Thr Ser Ser Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Thr Trp Pro Ser Gln Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala 195 200 205 Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asn Cys Gly Gly 210 215 220 Asp Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Gly Ser Glu Val Ser Ser Val Phe 225 230 235 240 Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro 245 250 255 Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Gln Asp Asp Pro Glu Val 260 265 270 His Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr 275 280 285 Arg Pro Pro Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu 290 295 300 Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Arg Thr Phe Arg Cys 305 310 315 320 Lys Val Thr Ser Ala Ala Phe Pro Ser Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Pro Glu Gly Arg Thr Gln Val Pro His Val Tyr Thr Met Ser Pro 340 345 350 Thr Lys Glu Glu Met Thr Gln Asn Glu Val Ser Ile Thr Cys Met Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Tyr Val Glu Trp Gln Met Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Gln Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Pro Pro Thr Met Asp Thr Asp 385 390 395 400 Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Asn Val Lys Lys Glu Lys Trp 405 410 415 Gln Gln Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His 420 425 430 Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys Gly Gly 435 440 445 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val 450 455 460 Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly Gln Pro Ala 465 470 475 480 Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg 485 490 495 Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg 500 505 510 Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 515 520 525 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val 530 535 540 Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu 545 550 555 560 Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Gly Gly Gly 565 570 575 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 580 585 590 Ser Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 595 600 605 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 610 615 620 Tyr Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 625 630 635 640 Ile Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys 645 650 655 Phe Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala 660 665 670 Tyr Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 675 680 685 Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 690 695 700 Thr Val Ser Ala 705 <210> 93 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 93 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala 100 105 110 Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Thr Glu Gln Leu Ala Thr Gly 115 120 125 Gly Ala Ser Val Val Cys Leu Met Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Asp Ile 130 135 140 Ser Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Thr Glu Arg Arg Asp Gly Val Leu 145 150 155 160 Asp Ser Val Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Ser Leu Thr Lys Ala Asp Tyr Glu Ser His Asn Leu Tyr 180 185 190 Thr Cys Glu Val Val His Lys Thr Ser Ser Ser Pro Val Val Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Asn Glu Cys 210 <210> 94 <211> 701 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 94 Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ser 145 150 155 160 Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu 165 170 175 Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Pro Arg Pro Ser 180 185 190 Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val 195 200 205 Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile Cys 210 215 220 Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys 225 230 235 240 Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val 245 250 255 Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val Asp 260 265 270 Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe 275 280 285 Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln Asp 290 295 300 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala Phe 305 310 315 320 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro Lys 325 330 335 Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala Lys 340 345 350 Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu Asp 355 360 365 Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr Lys 370 375 380 Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser 385 390 395 400 Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr 405 410 415 Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser 420 425 430 Leu Ser His Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 435 440 445 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 450 455 460 Leu Val Gln Pro Ala Asn Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 465 470 475 480 Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys 485 490 495 Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr 500 505 510 Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn 515 520 525 Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp 530 535 540 Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr 545 550 555 560 Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly 565 570 575 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 580 585 590 Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser 595 600 605 Leu Gly Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr 610 615 620 Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu 625 630 635 640 Leu Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe 645 650 655 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu 660 665 670 Gln Ser Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr 675 680 685 Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 690 695 700 <210> 95 <211> 701 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 95 Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ser 145 150 155 160 Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu 165 170 175 Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Pro Arg Pro Ser 180 185 190 Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val 195 200 205 Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile Cys 210 215 220 Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys 225 230 235 240 Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val 245 250 255 Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val Asp 260 265 270 Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe 275 280 285 Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln Asp 290 295 300 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala Phe 305 310 315 320 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro Lys 325 330 335 Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala Lys 340 345 350 Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu Asp 355 360 365 Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr Lys 370 375 380 Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser 385 390 395 400 Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr 405 410 415 Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser 420 425 430 Leu Ser His Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 435 440 445 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser 450 455 460 Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser 465 470 475 480 Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 485 490 495 Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val 500 505 510 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys 515 520 525 Ile Asn Ser Leu Gln Ser Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln 530 535 540 Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu 545 550 555 560 Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 565 570 575 Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu 580 585 590 Val Gln Pro Ala Asn Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe 595 600 605 Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys 610 615 620 Gly Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr 625 630 635 640 Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala 645 650 655 Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr 660 665 670 Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe 675 680 685 Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser 690 695 700 <210> 96 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 96 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu 115 120 125 Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg 145 150 155 160 Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu 180 185 190 Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser 195 200 205 Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys 210 215 <210> 97 <211> 708 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 97 Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 115 120 125 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu 130 135 140 Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser 145 150 155 160 Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu 165 170 175 Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser 180 185 190 Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly 195 200 205 Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly 210 215 220 Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala 225 230 235 240 Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 260 265 270 Leu Val Gln Pro Ala Asn Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 275 280 285 Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys 290 295 300 Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr 305 310 315 320 Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn 325 330 335 Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp 340 345 350 Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr 355 360 365 Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Glu 370 375 380 Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Thr Ala Leu Lys 385 390 395 400 Ser Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro 405 410 415 Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ala Leu Ser Ser Gly Val 420 425 430 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Gly Leu Tyr Thr Leu Thr Ser 435 440 445 Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Thr Val Thr Cys 450 455 460 Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val 465 470 475 480 Pro Arg Asn Cys Gly Gly Asp Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Gly Ser 485 490 495 Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu 500 505 510 Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser 515 520 525 Gln Asp Asp Pro Glu Val His Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu 530 535 540 Val His Thr Ala Gln Thr Arg Pro Pro Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr 545 550 555 560 Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 565 570 575 Gly Arg Thr Phe Arg Cys Lys Val Thr Ser Ala Ala Phe Pro Ser Pro 580 585 590 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Pro Glu Gly Arg Thr Gln Val Pro His 595 600 605 Val Tyr Thr Met Ser Pro Thr Lys Glu Glu Met Thr Gln Asn Glu Val 610 615 620 Ser Ile Thr Cys Met Val Lys Gly Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Tyr Val 625 630 635 640 Glu Trp Gln Met Asn Gly Gln Pro Gln Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Pro 645 650 655 Pro Thr Met Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Asn 660 665 670 Val Lys Lys Glu Lys Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val 675 680 685 Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His 690 695 700 Ser Pro Gly Lys 705 <210> 98 <211> 708 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 98 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val 130 135 140 Arg Pro Gly Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr 145 150 155 160 Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly 165 170 175 Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr 180 185 190 Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser 195 200 205 Ser Thr Ala Tyr Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala 210 215 220 Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 260 265 270 Leu Val Gln Pro Ala Asn Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 275 280 285 Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys 290 295 300 Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr 305 310 315 320 Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn 325 330 335 Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp 340 345 350 Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr 355 360 365 Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Glu 370 375 380 Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Thr Ala Leu Lys 385 390 395 400 Ser Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro 405 410 415 Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ala Leu Ser Ser Gly Val 420 425 430 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Gly Leu Tyr Thr Leu Thr Ser 435 440 445 Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Thr Val Thr Cys 450 455 460 Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val 465 470 475 480 Pro Arg Asn Cys Gly Gly Asp Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Gly Ser 485 490 495 Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu 500 505 510 Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser 515 520 525 Gln Asp Asp Pro Glu Val His Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu 530 535 540 Val His Thr Ala Gln Thr Arg Pro Pro Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr 545 550 555 560 Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 565 570 575 Gly Arg Thr Phe Arg Cys Lys Val Thr Ser Ala Ala Phe Pro Ser Pro 580 585 590 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Pro Glu Gly Arg Thr Gln Val Pro His 595 600 605 Val Tyr Thr Met Ser Pro Thr Lys Glu Glu Met Thr Gln Asn Glu Val 610 615 620 Ser Ile Thr Cys Met Val Lys Gly Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Tyr Val 625 630 635 640 Glu Trp Gln Met Asn Gly Gln Pro Gln Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Pro 645 650 655 Pro Thr Met Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Asn 660 665 670 Val Lys Lys Glu Lys Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val 675 680 685 Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His 690 695 700 Ser Pro Gly Lys 705 <210> 99 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 99 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala 100 105 110 Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Thr Glu Gln Leu Ala Thr Gly 115 120 125 Gly Ala Ser Val Val Cys Leu Met Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Asp Ile 130 135 140 Ser Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Thr Glu Arg Arg Asp Gly Val Leu 145 150 155 160 Asp Ser Val Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Ser Leu Thr Lys Ala Asp Tyr Glu Ser His Asn Leu Tyr 180 185 190 Thr Cys Glu Val Val His Lys Thr Ser Ser Ser Pro Val Val Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Asn Glu Cys 210 <210> 100 <211> 701 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 100 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 115 120 125 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met 130 135 140 Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu Thr Val Asn 145 150 155 160 Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr 165 170 175 Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Asn Ala Asn 180 185 190 Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly 195 200 205 Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser Glu Asp Val Ala 210 215 220 Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly 225 230 235 240 Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu 260 265 270 Leu Val Arg Pro Gly Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly 275 280 285 Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val 290 295 300 His Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr 305 310 315 320 Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg 325 330 335 Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp 340 345 350 Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly 355 360 365 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser 370 375 380 Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val 385 390 395 400 Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 405 410 415 Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 420 425 430 Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro 435 440 445 Ser Ser Pro Arg Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro 450 455 460 Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly 465 470 475 480 Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile 485 490 495 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys 500 505 510 Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln 515 520 525 Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln 530 535 540 Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu 545 550 555 560 Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg 565 570 575 Val Asn Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 580 585 590 Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro 595 600 605 Lys Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr 610 615 620 Asp Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln 625 630 635 640 Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly 645 650 655 Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu 660 665 670 Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn 675 680 685 His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys 690 695 700 <210> 101 <211> 701 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 101 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Gly Gly Gly Gly Ser 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu 115 120 125 Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn Ser 130 135 140 Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala 145 150 155 160 Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala 165 170 175 Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys 180 185 190 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu 195 200 205 Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala 210 215 220 Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 225 230 235 240 Val Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu 260 265 270 Leu Val Arg Pro Gly Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly 275 280 285 Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val 290 295 300 His Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr 305 310 315 320 Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg 325 330 335 Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp 340 345 350 Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly 355 360 365 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser 370 375 380 Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val 385 390 395 400 Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 405 410 415 Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 420 425 430 Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro 435 440 445 Ser Ser Pro Arg Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro 450 455 460 Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly 465 470 475 480 Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile 485 490 495 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys 500 505 510 Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln 515 520 525 Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln 530 535 540 Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu 545 550 555 560 Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg 565 570 575 Val Asn Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 580 585 590 Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro 595 600 605 Lys Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr 610 615 620 Asp Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln 625 630 635 640 Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly 645 650 655 Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu 660 665 670 Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn 675 680 685 His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys 690 695 700 <210> 102 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 102 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu 115 120 125 Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg 145 150 155 160 Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu 180 185 190 Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser 195 200 205 Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys 210 215 <210> 103 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 103 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Glu Thr Thr Ala Pro Ser Val 115 120 125 Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Thr Ala Leu Lys Ser Asn Ser Met Val Thr 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Gly Leu Tyr Thr Leu Thr Ser Ser Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Thr Trp Pro Ser Gln Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala 195 200 205 Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asn Cys Gly Gly 210 215 220 Asp Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Gly Ser Glu Val Ser Ser Val Phe 225 230 235 240 Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro 245 250 255 Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Gln Asp Asp Pro Glu Val 260 265 270 His Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr 275 280 285 Arg Pro Pro Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu 290 295 300 Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Arg Thr Phe Arg Cys 305 310 315 320 Lys Val Thr Ser Ala Ala Phe Pro Ser Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Pro Glu Gly Arg Thr Gln Val Pro His Val Tyr Thr Met Ser Pro 340 345 350 Thr Lys Glu Glu Met Thr Gln Asn Glu Val Ser Ile Thr Cys Met Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Tyr Val Glu Trp Gln Met Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Gln Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Pro Pro Thr Met Asp Thr Asp 385 390 395 400 Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Asn Val Lys Lys Glu Lys Trp 405 410 415 Gln Gln Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His 420 425 430 Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 104 <211> 476 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 104 Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 115 120 125 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu 130 135 140 Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser 145 150 155 160 Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu 165 170 175 Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser 180 185 190 Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly 195 200 205 Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly 210 215 220 Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala 225 230 235 240 Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser 260 265 270 Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser 275 280 285 Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 290 295 300 Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val 305 310 315 320 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys 325 330 335 Ile Asn Ser Leu Gln Ser Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln 340 345 350 Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu 355 360 365 Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Thr 370 375 380 Glu Gln Leu Ala Thr Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Leu Met Asn Asn 385 390 395 400 Phe Tyr Pro Arg Asp Ile Ser Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Thr Glu 405 410 415 Arg Arg Asp Gly Val Leu Asp Ser Val Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp 420 425 430 Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Ser Leu Thr Lys Ala Asp Tyr 435 440 445 Glu Ser His Asn Leu Tyr Thr Cys Glu Val Val His Lys Thr Ser Ser 450 455 460 Ser Pro Val Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys 465 470 475 <210> 105 <211> 476 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 105 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val 130 135 140 Arg Pro Gly Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr 145 150 155 160 Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly 165 170 175 Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr 180 185 190 Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser 195 200 205 Ser Thr Ala Tyr Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala 210 215 220 Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser 260 265 270 Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser 275 280 285 Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 290 295 300 Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val 305 310 315 320 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys 325 330 335 Ile Asn Ser Leu Gln Ser Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln 340 345 350 Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu 355 360 365 Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Thr 370 375 380 Glu Gln Leu Ala Thr Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Leu Met Asn Asn 385 390 395 400 Phe Tyr Pro Arg Asp Ile Ser Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Thr Glu 405 410 415 Arg Arg Asp Gly Val Leu Asp Ser Val Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp 420 425 430 Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Ser Leu Thr Lys Ala Asp Tyr 435 440 445 Glu Ser His Asn Leu Tyr Thr Cys Glu Val Val His Lys Thr Ser Ser 450 455 460 Ser Pro Val Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys 465 470 475 <210> 106 <211> 439 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 106 Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ser 145 150 155 160 Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu 165 170 175 Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Pro Arg Pro Ser 180 185 190 Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val 195 200 205 Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile Cys 210 215 220 Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys 225 230 235 240 Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val 245 250 255 Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val Asp 260 265 270 Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe 275 280 285 Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln Asp 290 295 300 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala Phe 305 310 315 320 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro Lys 325 330 335 Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala Lys 340 345 350 Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu Asp 355 360 365 Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr Lys 370 375 380 Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser 385 390 395 400 Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr 405 410 415 Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser 420 425 430 Leu Ser His Ser Pro Gly Lys 435 <210> 107 <211> 481 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 107 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 115 120 125 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met 130 135 140 Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu Thr Val Asn 145 150 155 160 Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr 165 170 175 Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Asn Ala Asn 180 185 190 Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly 195 200 205 Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser Glu Asp Val Ala 210 215 220 Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly 225 230 235 240 Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr 260 265 270 Trp Ser Ile Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser 275 280 285 Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu 290 295 300 Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys 305 310 315 320 Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 325 330 335 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe 340 345 350 Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly 355 360 365 Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile 370 375 380 Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val 385 390 395 400 Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys 405 410 415 Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp 420 425 430 Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu 435 440 445 Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr 450 455 460 His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu 465 470 475 480 Cys <210> 108 <211> 481 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 108 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Gly Gly Gly Gly Ser 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu 115 120 125 Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn Ser 130 135 140 Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala 145 150 155 160 Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala 165 170 175 Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys 180 185 190 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu 195 200 205 Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala 210 215 220 Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 225 230 235 240 Val Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr 260 265 270 Trp Ser Ile Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser 275 280 285 Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu 290 295 300 Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys 305 310 315 320 Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 325 330 335 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe 340 345 350 Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly 355 360 365 Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile 370 375 380 Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val 385 390 395 400 Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys 405 410 415 Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp 420 425 430 Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu 435 440 445 Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr 450 455 460 His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu 465 470 475 480 Cys <210> 109 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 109 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Glu Thr Thr Ala Pro Ser Val 115 120 125 Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Thr Ala Leu Lys Ser Asn Ser Met Val Thr 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Gly Leu Tyr Thr Leu Thr Ser Ser Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Thr Trp Pro Ser Gln Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala 195 200 205 Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asn Cys Gly Gly 210 215 220 Asp Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Gly Ser Glu Val Ser Ser Val Phe 225 230 235 240 Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro 245 250 255 Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Gln Asp Asp Pro Glu Val 260 265 270 His Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr 275 280 285 Arg Pro Pro Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu 290 295 300 Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Arg Thr Phe Arg Cys 305 310 315 320 Lys Val Thr Ser Ala Ala Phe Pro Ser Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Pro Glu Gly Arg Thr Gln Val Pro His Val Tyr Thr Met Ser Pro 340 345 350 Thr Lys Glu Glu Met Thr Gln Asn Glu Val Ser Ile Thr Cys Met Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Tyr Val Glu Trp Gln Met Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Gln Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Pro Pro Thr Met Asp Thr Asp 385 390 395 400 Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Asn Val Lys Lys Glu Lys Trp 405 410 415 Gln Gln Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His 420 425 430 Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 110 <211> 476 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 110 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala 100 105 110 Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Thr Glu Gln Leu Ala Thr Gly 115 120 125 Gly Ala Ser Val Val Cys Leu Met Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Asp Ile 130 135 140 Ser Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Thr Glu Arg Arg Asp Gly Val Leu 145 150 155 160 Asp Ser Val Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Ser Leu Thr Lys Ala Asp Tyr Glu Ser His Asn Leu Tyr 180 185 190 Thr Cys Glu Val Val His Lys Thr Ser Ser Ser Pro Val Val Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Asn Glu Cys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 210 215 220 Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu 225 230 235 240 Val Arg Pro Gly Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr 245 250 255 Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His 260 265 270 Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala 275 280 285 Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser 290 295 300 Ser Ser Thr Ala Tyr Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser 305 310 315 320 Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln 325 330 335 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 340 345 350 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met 355 360 365 Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser 370 375 380 Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr 385 390 395 400 Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu 405 410 415 Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 420 425 430 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu 435 440 445 Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro 450 455 460 His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 465 470 475 <210> 111 <211> 476 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 111 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala 100 105 110 Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Thr Glu Gln Leu Ala Thr Gly 115 120 125 Gly Ala Ser Val Val Cys Leu Met Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Asp Ile 130 135 140 Ser Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Thr Glu Arg Arg Asp Gly Val Leu 145 150 155 160 Asp Ser Val Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Ser Leu Thr Lys Ala Asp Tyr Glu Ser His Asn Leu Tyr 180 185 190 Thr Cys Glu Val Val His Lys Thr Ser Ser Ser Pro Val Val Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Asn Glu Cys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 210 215 220 Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp 225 230 235 240 Ser Ile Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln 245 250 255 Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln 260 265 270 Arg Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu 275 280 285 Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 290 295 300 Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr 305 310 315 320 Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr 325 330 335 Lys Leu Glu Leu Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 340 345 350 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser 355 360 365 Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys 370 375 380 Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Met Lys Gln 385 390 395 400 Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr 405 410 415 Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr 420 425 430 Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr 435 440 445 Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr 450 455 460 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 465 470 475 <210> 112 <211> 439 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 112 Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ser 145 150 155 160 Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu 165 170 175 Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Pro Arg Pro Ser 180 185 190 Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val 195 200 205 Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile Cys 210 215 220 Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys 225 230 235 240 Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val 245 250 255 Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val Asp 260 265 270 Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe 275 280 285 Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln Asp 290 295 300 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala Phe 305 310 315 320 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro Lys 325 330 335 Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala Lys 340 345 350 Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu Asp 355 360 365 Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr Lys 370 375 380 Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser 385 390 395 400 Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr 405 410 415 Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser 420 425 430 Leu Ser His Ser Pro Gly Lys 435 <210> 113 <211> 481 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 113 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu 115 120 125 Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg 145 150 155 160 Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu 180 185 190 Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser 195 200 205 Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys Gly Gly Gly Gly Ser 210 215 220 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu 225 230 235 240 Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn Ser Leu Lys Leu Ser Cys 245 250 255 Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg 260 265 270 Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp 275 280 285 Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile 290 295 300 Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asp Ser Leu 305 310 315 320 Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile 325 330 335 Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Leu Val Thr Val 340 345 350 Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 355 360 365 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser 370 375 380 Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser 385 390 395 400 Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 405 410 415 Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val 420 425 430 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys 435 440 445 Ile Asn Ser Leu Gln Ser Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln 450 455 460 Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu 465 470 475 480 Lys <210> 114 <211> 481 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 114 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu 115 120 125 Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg 145 150 155 160 Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu 180 185 190 Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser 195 200 205 Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys Gly Gly Gly Gly Ser 210 215 220 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln 225 230 235 240 Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Glu Thr Val Asn Ile Glu 245 250 255 Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln 260 265 270 Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu 275 280 285 Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln 290 295 300 Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser Glu Asp Val Ala Thr Tyr 305 310 315 320 Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr 325 330 335 Lys Leu Glu Leu Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 340 345 350 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser 355 360 365 Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala 370 375 380 Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln 385 390 395 400 Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly 405 410 415 Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser 420 425 430 Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg 435 440 445 Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala 450 455 460 Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Leu Val Thr Val Ser 465 470 475 480 Ala <210> 115 <211> 709 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 115 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile 450 455 460 Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg 465 470 475 480 Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly 485 490 495 Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys 500 505 510 Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg 515 520 525 Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser 530 535 540 Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His 545 550 555 560 Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly 565 570 575 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 580 585 590 Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro 595 600 605 Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr 610 615 620 Asp Tyr Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu 625 630 635 640 Trp Met Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln 645 650 655 Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr 660 665 670 Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr 675 680 685 Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 690 695 700 Val Thr Val Ser Ala 705 <210> 116 <211> 709 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 116 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val 450 455 460 Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val 465 470 475 480 Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Ile 485 490 495 His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Met Gly Ala 500 505 510 Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly 515 520 525 Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu 530 535 540 Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser 545 550 555 560 Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser 565 570 575 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 580 585 590 Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu 595 600 605 Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln 610 615 620 Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln 625 630 635 640 Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu 645 650 655 Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 660 665 670 Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr 675 680 685 Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr 690 695 700 Lys Val Glu Ile Lys 705 <210> 117 <211> 709 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 117 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val 450 455 460 Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg 465 470 475 480 Ala Ser Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly 485 490 495 Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln 500 505 510 Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg 515 520 525 Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg 530 535 540 Val Gln Ser Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His 545 550 555 560 Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly 565 570 575 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 580 585 590 Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro 595 600 605 Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr 610 615 620 Asp Tyr Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu 625 630 635 640 Trp Met Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln 645 650 655 Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr 660 665 670 Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr 675 680 685 Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 690 695 700 Val Thr Val Ser Ala 705 <210> 118 <211> 709 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 118 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val 450 455 460 Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val 465 470 475 480 Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Ile 485 490 495 His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Met Gly Ala 500 505 510 Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly 515 520 525 Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu 530 535 540 Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser 545 550 555 560 Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser 565 570 575 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 580 585 590 Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu 595 600 605 Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Ser Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln 610 615 620 Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln 625 630 635 640 Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu 645 650 655 Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 660 665 670 Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Gln Ser Glu Asp Val Gly Val Tyr 675 680 685 Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr 690 695 700 Lys Val Glu Ile Lys 705 <210> 119 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 119 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 120 <211> 704 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 120 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser 450 455 460 Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala 465 470 475 480 Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln 485 490 495 Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly 500 505 510 Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser 515 520 525 Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg 530 535 540 Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala 545 550 555 560 Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 565 570 575 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 580 585 590 Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu 595 600 605 Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Glu 610 615 620 Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala 625 630 635 640 Pro Lys Leu Phe Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro 645 650 655 Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile 660 665 670 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 675 680 685 Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 690 695 700 <210> 121 <211> 704 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 121 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser 450 455 460 Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys 465 470 475 480 Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys 485 490 495 Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln 500 505 510 Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr 515 520 525 Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr 530 535 540 Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys 545 550 555 560 Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 565 570 575 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly 580 585 590 Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 595 600 605 Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala 610 615 620 Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser 625 630 635 640 Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 645 650 655 Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 660 665 670 Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr 675 680 685 Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 690 695 700 <210> 122 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 122 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 65 70 75 80 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 123 <211> 704 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 123 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser 450 455 460 Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala 465 470 475 480 Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln 485 490 495 Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly 500 505 510 Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser 515 520 525 Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg 530 535 540 Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala 545 550 555 560 Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 565 570 575 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 580 585 590 Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu 595 600 605 Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Glu 610 615 620 Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala 625 630 635 640 Pro Lys Leu Phe Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro 645 650 655 Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile 660 665 670 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 675 680 685 Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 690 695 700 <210> 124 <211> 704 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 124 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser 450 455 460 Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys 465 470 475 480 Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys 485 490 495 Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln 500 505 510 Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr 515 520 525 Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr 530 535 540 Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys 545 550 555 560 Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 565 570 575 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly 580 585 590 Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 595 600 605 Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala 610 615 620 Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser 625 630 635 640 Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 645 650 655 Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 660 665 670 Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr 675 680 685 Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 690 695 700 <210> 125 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 125 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Ser Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Gln Ser Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 126 <211> 710 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 126 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys 210 215 220 Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp 450 455 460 Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp 465 470 475 480 Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp 485 490 495 Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro 500 505 510 Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp 515 520 525 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 530 535 540 Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr 545 550 555 560 His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly 565 570 575 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 580 585 590 Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 595 600 605 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 610 615 620 Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu 625 630 635 640 Glu Trp Met Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn 645 650 655 Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser 660 665 670 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 675 680 685 Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 690 695 700 Thr Val Thr Val Ser Ala 705 710 <210> 127 <211> 710 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 127 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 65 70 75 80 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys 130 135 140 Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr 145 150 155 160 Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys 165 170 175 Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr 180 185 190 Asn Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr 195 200 205 Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala 210 215 220 Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly 260 265 270 Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 275 280 285 Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 290 295 300 Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr 305 310 315 320 Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn 325 330 335 Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 340 345 350 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met 355 360 365 Ser Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 370 375 380 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 385 390 395 400 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 405 410 415 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 420 425 430 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 435 440 445 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 450 455 460 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 465 470 475 480 Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 485 490 495 Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 500 505 510 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 515 520 525 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 530 535 540 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 545 550 555 560 Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 565 570 575 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 580 585 590 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 595 600 605 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 610 615 620 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 625 630 635 640 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 645 650 655 Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 660 665 670 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 675 680 685 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 690 695 700 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 705 710 <210> 128 <211> 710 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 128 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys 210 215 220 Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp 450 455 460 Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu 465 470 475 480 Arg Ala Ser Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp 485 490 495 Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro 500 505 510 Gln Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp 515 520 525 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser 530 535 540 Arg Val Gln Ser Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr 545 550 555 560 His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly 565 570 575 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 580 585 590 Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 595 600 605 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 610 615 620 Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu 625 630 635 640 Glu Trp Met Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn 645 650 655 Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser 660 665 670 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 675 680 685 Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 690 695 700 Thr Val Thr Val Ser Ala 705 710 <210> 129 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 129 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 130 <211> 477 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 130 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 210 215 220 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 225 230 235 240 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser 245 250 255 Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln 260 265 270 Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys 275 280 285 Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 290 295 300 Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr 305 310 315 320 Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly 325 330 335 Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 340 345 350 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Gln 355 360 365 Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys 370 375 380 Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Val Arg 385 390 395 400 Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Asp Pro Glu 405 410 415 Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met 420 425 430 Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu 435 440 445 Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val 450 455 460 Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ala 465 470 475 <210> 131 <211> 477 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 131 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 65 70 75 80 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys 130 135 140 Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr 145 150 155 160 Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys 165 170 175 Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr 180 185 190 Asn Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr 195 200 205 Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala 210 215 220 Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly 225 230 235 240 Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 245 250 255 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr 260 265 270 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser 275 280 285 Gln Ser Val Arg Gly Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 290 295 300 Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly 305 310 315 320 Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu 325 330 335 Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln 340 345 350 Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu 355 360 365 Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser 370 375 380 Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn 385 390 395 400 Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala 405 410 415 Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys 420 425 430 Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp 435 440 445 Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu 450 455 460 Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 465 470 475 <210> 132 <211> 477 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 132 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 210 215 220 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser 225 230 235 240 Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Ser Leu Ser Cys Lys Ser Ser 245 250 255 Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu 260 265 270 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys 275 280 285 Leu Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 290 295 300 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Gln Ser Glu Asp Val Gly Val 305 310 315 320 Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly 325 330 335 Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 340 345 350 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Gln 355 360 365 Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys 370 375 380 Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Val Arg 385 390 395 400 Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Asp Pro Glu 405 410 415 Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met 420 425 430 Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu 435 440 445 Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val 450 455 460 Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ala 465 470 475 <210> 133 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 133 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys 210 215 220 Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 134 <211> 442 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 134 Gln Ala Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Met Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Val Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 135 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 135 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Trp Ser Ile Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Phe Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 136 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 136 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Cys Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 137 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 137 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Cys Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 <210> 138 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 138 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Cys Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 139 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 139 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Cys Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 <210> 140 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 140 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Cys Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 141 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 141 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Cys 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 <210> 142 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 142 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Cys 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 143 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 143 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Cys 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 <210> 144 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 144 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Cys 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 145 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 145 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Cys 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 <210> 146 <211> 442 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 146 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Val Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 147 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 147 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 65 70 75 80 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 148 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 148 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Cys Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 149 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 149 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Cys Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 <210> 150 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 150 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Cys Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 151 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 151 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Cys 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 <210> 152 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 152 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Cys 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 153 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 153 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Cys 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 <210> 154 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 154 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Cys Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 155 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 155 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Cys Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 <210> 156 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 156 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Cys Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 210 215 220 Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445 Lys <210> 157 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 157 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Cys Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 215 <210> 158 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 158 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Cys Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 210 215 220 Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445 Lys <210> 159 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 159 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Cys Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 215 <210> 160 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 160 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Cys Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 210 215 220 Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445 Lys <210> 161 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 161 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Cys Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 215 <210> 162 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 162 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Cys Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 210 215 220 Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445 Lys <210> 163 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 163 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Cys Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Ser 210 215 <210> 164 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 164 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Ala Asn 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 165 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 165 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 166 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 166 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 167 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 167 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Ser Asp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile 35 40 45 Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 168 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 168 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 169 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 169 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Ser Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Gln Ser Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 170 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 170 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Arg Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 65 70 75 80 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Leu Pro His Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 171 <211> 441 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 171 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly 180 185 190 Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 225 230 235 240 Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 245 250 255 Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 260 265 270 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 275 280 285 Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His 290 295 300 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 305 310 315 320 Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln 325 330 335 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Glu Glu Met 340 345 350 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 355 360 365 Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 370 375 380 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 385 390 395 400 Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val 405 410 415 Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 420 425 430 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 <210> 172 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 172 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Cys Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys 210 215 220 Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys 355 360 365 Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 173 <211> 445 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 173 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys 210 215 220 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 225 230 235 240 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 245 250 255 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 260 265 270 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 275 280 285 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 290 295 300 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 305 310 315 320 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 325 330 335 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser 340 345 350 Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys 355 360 365 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 370 375 380 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 385 390 395 400 Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 405 410 415 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 420 425 430 Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 174 <211> 452 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 174 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Cys Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser 210 215 220 Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala 225 230 235 240 Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 245 250 255 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 260 265 270 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 275 280 285 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 290 295 300 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 305 310 315 320 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 325 330 335 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 340 345 350 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val 355 360 365 Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 370 375 380 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 385 390 395 400 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 405 410 415 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 420 425 430 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 435 440 445 Ser Pro Gly Lys 450 <210> 175 <211> 445 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 175 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys 210 215 220 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 225 230 235 240 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 245 250 255 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 260 265 270 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 275 280 285 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 290 295 300 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 305 310 315 320 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 325 330 335 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser 340 345 350 Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys 355 360 365 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 370 375 380 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 385 390 395 400 Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 405 410 415 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ala 420 425 430 Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 176 <211> 452 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 176 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Cys Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser 210 215 220 Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala 225 230 235 240 Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 245 250 255 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 260 265 270 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 275 280 285 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 290 295 300 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 305 310 315 320 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 325 330 335 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 340 345 350 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val 355 360 365 Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 370 375 380 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 385 390 395 400 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 405 410 415 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 420 425 430 Leu His Glu Ala Leu His Ala His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 435 440 445 Ser Pro Gly Lys 450 <210> 177 <211> 707 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 177 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser 450 455 460 Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 465 470 475 480 Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln 485 490 495 Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg 500 505 510 Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 515 520 525 Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe 530 535 540 Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Arg Thr Phe Gly Cys Gly Thr 545 550 555 560 Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 565 570 575 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser 580 585 590 Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala 595 600 605 Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln 610 615 620 Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly 625 630 635 640 Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser 645 650 655 Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg 660 665 670 Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr 675 680 685 Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 690 695 700 Val Ser Ala 705 <210> 178 <211> 707 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 178 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly 435 440 445 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser 450 455 460 Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala 465 470 475 480 Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln 485 490 495 Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly 500 505 510 Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser 515 520 525 Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg 530 535 540 Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr 545 550 555 560 Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 565 570 575 Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 580 585 590 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly 595 600 605 Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala 610 615 620 Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 625 630 635 640 Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr 645 650 655 Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 660 665 670 Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys 675 680 685 Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Arg Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val 690 695 700 Glu Ile Lys 705 <210> 179 <211> 706 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 179 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly 180 185 190 Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 225 230 235 240 Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 245 250 255 Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 260 265 270 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 275 280 285 Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His 290 295 300 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 305 310 315 320 Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln 325 330 335 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met 340 345 350 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 355 360 365 Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 370 375 380 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 385 390 395 400 Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val 405 410 415 Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 420 425 430 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 435 440 445 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 450 455 460 Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 465 470 475 480 Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala 485 490 495 Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly 500 505 510 Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 515 520 525 Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 530 535 540 Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val 545 550 555 560 Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 565 570 575 Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 580 585 590 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr 595 600 605 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser 610 615 620 Gln Ser Val Arg Gly Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 625 630 635 640 Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly 645 650 655 Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu 660 665 670 Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln 675 680 685 Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Arg Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu 690 695 700 Ile Lys 705 <210> 180 <211> 710 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 180 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Tyr Ser Tyr Asp Tyr Val Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys 210 215 220 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 225 230 235 240 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 245 250 255 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 260 265 270 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 275 280 285 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 290 295 300 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 305 310 315 320 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 325 330 335 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 340 345 350 Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 355 360 365 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 370 375 380 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 385 390 395 400 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 405 410 415 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 420 425 430 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly 435 440 445 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu 450 455 460 Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu 465 470 475 480 Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp 485 490 495 Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val Ser Gly Ile Thr 500 505 510 Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe 515 520 525 Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn 530 535 540 Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Pro 545 550 555 560 Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr 565 570 575 Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 580 585 590 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln 595 600 605 Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser 610 615 620 Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln 625 630 635 640 Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser 645 650 655 Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 660 665 670 Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val 675 680 685 Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Arg Thr Phe Gly Cys Gly 690 695 700 Thr Lys Val Glu Ile Lys 705 710 <210> 181 <400> 181 000 <210> 182 <400> 182 000 <210> 183 <211> 190 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 183 Gln Gly Trp Gln Ala Phe Lys Asn Asp Ala Thr Glu Ile Ile Pro Glu 1 5 10 15 Leu Gly Glu Tyr Pro Glu Pro Pro Pro Glu Leu Glu Asn Asn Lys Thr 20 25 30 Met Asn Arg Ala Glu Asn Gly Gly Arg Pro Pro His His Pro Phe Glu 35 40 45 Thr Lys Asp Val Ser Glu Tyr Ser Cys Arg Glu Leu His Phe Thr Arg 50 55 60 Tyr Val Thr Asp Gly Pro Cys Arg Ser Ala Lys Pro Val Thr Glu Leu 65 70 75 80 Val Cys Ser Gly Gln Cys Gly Pro Ala Arg Leu Leu Pro Asn Ala Ile 85 90 95 Gly Arg Gly Lys Trp Trp Arg Pro Ser Gly Pro Asp Phe Arg Cys Ile 100 105 110 Pro Asp Arg Tyr Arg Ala Gln Arg Val Gln Leu Leu Cys Pro Gly Gly 115 120 125 Glu Ala Pro Arg Ala Arg Lys Val Arg Leu Val Ala Ser Cys Lys Cys 130 135 140 Lys Arg Leu Thr Arg Phe His Asn Gln Ser Glu Leu Lys Asp Phe Gly 145 150 155 160 Thr Glu Ala Ala Arg Pro Gln Lys Gly Arg Lys Pro Arg Pro Arg Ala 165 170 175 Arg Ser Ala Lys Ala Asn Gln Ala Glu Leu Glu Asn Ala Tyr 180 185 190 <210> 184 <211> 190 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 184 Gln Gly Trp Gln Ala Phe Lys Asn Asp Ala Thr Glu Ile Ile Pro Glu 1 5 10 15 Leu Gly Glu Tyr Pro Glu Pro Pro Pro Asp Leu Glu Asn Asn Lys Thr 20 25 30 Met Asn Arg Ala Glu Asn Gly Gly Arg Pro Pro His His Pro Phe Glu 35 40 45 Thr Lys Asp Val Ser Glu Tyr Ser Cys Arg Glu Leu His Phe Thr Arg 50 55 60 Tyr Val Thr Asp Gly Gln Cys Arg Ser Ala Lys Pro Val Thr Glu Leu 65 70 75 80 Val Cys Ser Gly Gln Cys Gly Pro Ala Arg Leu Leu Pro Asn Ala Ile 85 90 95 Gly Arg Gly Lys Trp Trp Arg Pro Ser Gly Pro Asp Phe Arg Cys Ile 100 105 110 Pro Asp Arg Tyr Arg Ala Gln Arg Val Gln Leu Leu Cys Pro Gly Gly 115 120 125 Ala Ala Pro Arg Ala Arg Lys Val Arg Leu Val Ala Ser Cys Lys Cys 130 135 140 Lys Arg Leu Thr Arg Phe His Asn Gln Ser Glu Leu Lys Asp Phe Gly 145 150 155 160 Pro Glu Ala Ala Arg Pro Gln Lys Gly Arg Lys Pro Arg Pro Arg Ala 165 170 175 Arg Gly Ala Lys Ala Asn Gln Ala Glu Leu Glu Asn Ala Tyr 180 185 190 <210> 185 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 185 Gly Pro Ala Arg Leu Leu Pro Asn Ala Ile Gly Arg Gly Lys Trp Trp 1 5 10 15 Arg Pro Ser Gly Pro Asp Phe Arg 20 <210> 186 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 186 Ile Gly Arg Gly Lys Trp Trp Arg 1 5 <210> 187 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 187 Pro Asn Ala Ile Gly Arg Gly Lys Trp Trp Arg 1 5 10 <210> 188 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 188 Ile Gly Arg Gly Lys Trp Trp Arg Pro Ser Gly Pro 1 5 10 <210> 189 <211> 190 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 189 Gln Gly Trp Gln Ala Phe Lys Asn Asp Ala Thr Glu Ile Ile Pro Glu 1 5 10 15 Leu Gly Glu Tyr Pro Glu Pro Pro Pro Glu Leu Glu Asn Asn Lys Thr 20 25 30 Met Asn Arg Ala Glu Asn Gly Gly Arg Pro Pro His His Pro Phe Glu 35 40 45 Thr Lys Asp Val Ser Glu Tyr Ser Cys Arg Glu Leu His Phe Thr Arg 50 55 60 Tyr Val Thr Asp Gly Gln Cys Arg Ser Ala Lys Pro Val Thr Glu Leu 65 70 75 80 Val Cys Ser Gly Gln Cys Gly Pro Ala Arg Leu Leu Pro Asn Ala Ile 85 90 95 Gly Arg Gly Lys Trp Trp Arg Pro Ser Gly Pro Asp Phe Arg Cys Ile 100 105 110 Pro Asp Arg Tyr Arg Ala Gln Arg Val Gln Leu Leu Cys Pro Gly Gly 115 120 125 Ala Ala Pro Arg Ala Arg Lys Val Arg Leu Val Ala Ser Cys Lys Cys 130 135 140 Lys Arg Leu Thr Arg Phe His Asn Gln Ser Glu Leu Lys Asp Phe Gly 145 150 155 160 Pro Glu Ala Ala Arg Pro Gln Lys Gly Arg Lys Pro Arg Pro Arg Ala 165 170 175 Arg Gly Ala Lys Ala Asn Gln Ala Glu Leu Glu Asn Ala Tyr 180 185 190 <210> 190 <211> 188 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 190 Gln Gly Trp Gln Ala Phe Arg Asn Asp Ala Thr Glu Val Ile Pro Gly 1 5 10 15 Leu Gly Glu Tyr Pro Glu Pro Pro Pro Glu Asn Asn Gln Thr Met Asn 20 25 30 Arg Ala Glu Asn Gly Gly Arg Pro Pro His His Pro Tyr Asp Ala Lys 35 40 45 Asp Val Ser Glu Tyr Ser Cys Arg Glu Leu His Tyr Thr Arg Phe Leu 50 55 60 Thr Asp Gly Pro Cys Arg Ser Ala Lys Pro Val Thr Glu Leu Val Cys 65 70 75 80 Ser Gly Gln Cys Gly Pro Ala Arg Leu Leu Pro Asn Ala Ile Gly Arg 85 90 95 Val Lys Trp Trp Arg Pro Asn Gly Pro Asp Phe Arg Cys Ile Pro Asp 100 105 110 Arg Tyr Arg Ala Gln Arg Val Gln Leu Leu Cys Pro Gly Gly Ala Ala 115 120 125 Pro Arg Ser Arg Lys Val Arg Leu Val Ala Ser Cys Lys Cys Lys Arg 130 135 140 Leu Thr Arg Phe His Asn Gln Ser Glu Leu Lys Asp Phe Gly Pro Glu 145 150 155 160 Thr Ala Arg Pro Gln Lys Gly Arg Lys Pro Arg Pro Gly Ala Arg Gly 165 170 175 Ala Lys Ala Asn Gln Ala Glu Leu Glu Asn Ala Tyr 180 185 <210> 191 <211> 190 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 191 Gln Gly Trp Gln Ala Phe Lys Asn Asp Ala Thr Glu Ile Ile Pro Gly 1 5 10 15 Leu Arg Glu Tyr Pro Glu Pro Pro Gln Glu Leu Glu Asn Asn Gln Thr 20 25 30 Met Asn Arg Ala Glu Asn Gly Gly Arg Pro Pro His His Pro Tyr Asp 35 40 45 Thr Lys Asp Val Ser Glu Tyr Ser Cys Arg Glu Leu His Tyr Thr Arg 50 55 60 Phe Val Thr Asp Gly Pro Cys Arg Ser Ala Lys Pro Val Thr Glu Leu 65 70 75 80 Val Cys Ser Gly Gln Cys Gly Pro Ala Arg Leu Leu Pro Asn Ala Ile 85 90 95 Gly Arg Val Lys Trp Trp Arg Pro Asn Gly Pro Asp Phe Arg Cys Ile 100 105 110 Pro Asp Arg Tyr Arg Ala Gln Arg Val Gln Leu Leu Cys Pro Gly Gly 115 120 125 Ala Ala Pro Arg Ser Arg Lys Val Arg Leu Val Ala Ser Cys Lys Cys 130 135 140 Lys Arg Leu Thr Arg Phe His Asn Gln Ser Glu Leu Lys Asp Phe Gly 145 150 155 160 Pro Glu Thr Ala Arg Pro Gln Lys Gly Arg Lys Pro Arg Pro Arg Ala 165 170 175 Arg Gly Ala Lys Ala Asn Gln Ala Glu Leu Glu Asn Ala Tyr 180 185 190 <210> 192 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 192 Gly Pro Ala Arg Leu Leu Pro Asn Ala Ile Gly Arg Val Lys Trp Trp 1 5 10 15 Arg Pro Asn Gly Pro Asp Phe Arg 20 <210> 193 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 193 Gly Pro Ala Arg Leu Leu Pro Asn Ala Ile Gly Arg 1 5 10 <210> 194 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 194 Arg Leu Leu Pro Asn Ala Ile Gly Arg Gly Lys 1 5 10 <210> 195 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 195 Lys Trp Trp Arg Pro Ser Gly Pro Asp Phe Arg 1 5 10 <210> 196 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 196 Pro Asn Ala Ile Gly Arg Val Lys Trp Trp Arg 1 5 10 <210> 197 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 197 Ile Gly Arg Val Lys Trp Trp Arg Pro Asn Gly Pro 1 5 10 <210> 198 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 198 Lys Trp Trp Arg Pro Asn Gly Pro Asp Phe Arg 1 5 10 <210> 199 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 199 Asp Phe Glu Ile His 1 5 <210> 200 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 200 Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Ser Ala Asn Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Ala

Claims (97)

  1. 스클레로스틴(Sclerostin)을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물(construct)로서, 상기 항체 모이어티가 스클레로스틴 상의 에피토프에 결합하고, 상기 에피토프가 서열번호 186에 제시된 아미노산 서열을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  2. 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 항체 모이어티가 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하고, 이때
    VH가 서열번호 1 내지 4 및 12 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5 내지 8 및 13 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9 내지 11 및 14 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 HC- CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고;
    VL이 서열번호 15 내지 17, 85 및 86 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18 및 19 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20 및 21 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하는,
    항-스클레로스틴 구축물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    (a) VH가 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15 또는 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    (b) VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는,
    항-스클레로스틴 구축물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    VH가 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    VH가 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  8. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    VH가 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  9. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  10. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    VH가 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  11. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  12. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL이 서열번호 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  13. 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 항체 모이어티가 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하고, 이때
    (a) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 22에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 23에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (b) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 24에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 25에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (c) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 26에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 27에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (d) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 28에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 29에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (e) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 30에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 31에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (f) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 32에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 33에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (g) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 34에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 35에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (h) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 36에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 37에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (i) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 38에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 39에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (j) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 40에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 41에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (k) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 87에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 88에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (l) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 87에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 89에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하거나;
    (m) HC-CDR1, HC-CDR2 및 HC-CDR3이 서열번호 87에 제시된 서열을 갖는 VH 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하고, LC-CDR1, LC-CDR2 및 LC-CDR3이 서열번호 90에 제시된 서열을 갖는 VL 내의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는,
    항-스클레로스틴 구축물.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    VH가 서열번호 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40 및 87 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고/하거나, VL이 서열번호 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41 및 88 내지 90 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  15. 제14항에 있어서,
    (a) VH가 서열번호 22의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 23의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (b) VH가 서열번호 24의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 25의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (c) VH가 서열번호 26의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 27의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (d) VH가 서열번호 28의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 29의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (e) VH가 서열번호 30의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 31의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (f) VH가 서열번호 32의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 33의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (g) VH가 서열번호 34의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 35의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (h) VH가 서열번호 36의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 37의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (i) VH가 서열번호 38의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 39의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (j) VH가 서열번호 40의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 41의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (k) VH가 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 88의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (l) VH가 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 89의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나;
    (m) VH가 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 90의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하는,
    항-스클레로스틴 구축물.
  16. 스클레로스틴을 특이적으로 인식하는 항체 모이어티를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 항체 모이어티가 중쇄 가변 영역(VH) 및 제2 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항-스클레로스틴 항체로부터 유래된 인간화 항체 모이어티이고, 이때
    (a) VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
    (b) VH가 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
    (c) VH가 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
    (d) VH가 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
    (e) VH가 서열번호 199의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
    (f) VH가 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 200의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
    (g) VH가 서열번호 199의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하거나;
    (h) VH가 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하고, VL이 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 이의 변이체를 포함하는,
    항-스클레로스틴 구축물.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 모이어티가 전장 항체, 이중특이성 항체, 단일쇄 Fv(scFv) 단편, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2, Fv 단편, 다이설파이드 안정화 Fv 단편(dsFv), 다이설파이드 안정화 scFv(dsscFv), (dsFv)2, Fv-Fc 융합체, scFv-Fc 융합체, scFv-Fv 융합체, 디아바디(diabody), 트리바디(tribody) 및 테트라바디(tetrabody)로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인, 항-스클레로스틴 구축물.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서,
    Fc 단편을 포함하는 전장 항체인 항-스클레로스틴 구축물.
  19. 제17항에 있어서,
    항체 모이어티가 scFv 단편인, 항-스클레로스틴 구축물.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    스클레로스틴이 인간 스클레로스틴인, 항-스클레로스틴 구축물.
  21. 제1항 내지 제17항, 제19항 및 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-스클레로스틴 구축물이 제2 모이어티를 추가로 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  22. 제21항에 있어서,
    제2 모이어티가 항원을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  23. 제22항에 있어서,
    제2 항체 모이어티가 제2 중쇄 가변 영역(VH -2) 및 경쇄 가변 영역(VL - 2)을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  24. 제22항 또는 제23항에 있어서,
    항원이 DKK1인, 항-스클레로스틴 구축물.
  25. 제24항에 있어서,
    DKK1이 인간 DKK1인, 항-스클레로스틴 구축물.
  26. 제24항 또는 제25항에 있어서,
    제2 항체 모이어티가 DKK1의 결합 에피토프에 대해, 제3 중쇄 가변 영역(VH -3) 및 제3 경쇄 가변 영역(VL - 3)을 포함하는 제3 항체 모이어티와 경쟁하고, 이때
    (a) VH -3이 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL -3이 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    (b) VH -3이 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL -3이 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    (c) VH -3이 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL -3이 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는,
    항-스클레로스틴 구축물.
  27. 제26항에 있어서,
    VH -2가 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2가 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 47의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  28. 제26항에 있어서,
    VH -2가 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2가 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  29. 제26항에 있어서,
    VH -2가 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2가 서열번호 57의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  30. 제22항 또는 제23항에 있어서,
    항원이 RANKL인, 항-스클레로스틴 구축물.
  31. 제30항에 있어서,
    항원이 인간 RANKL인, 항-스클레로스틴 구축물.
  32. 제30항 또는 제31항에 있어서,
    제2 항체 모이어티가 RANKL의 결합 에피토프에 대해, 제3 중쇄 가변 영역(VH -3) 및 제3 경쇄 가변 영역(VL - 3)을 포함하는 제3 항체 모이어티와 경쟁하고, 이때 VH -3이 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -3이 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  33. 제31항에 있어서,
    VH -2가 서열번호 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL -2가 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열번호 71의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  34. 제22항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서,
    제2 항체 모이어티가 전장 항체, Fab, Fab', (Fab')2, Fv, 단일쇄 Fv(scFv) 단편, scFv-scFv, 미니바디, 디아바디 또는 sdAb인, 항-스클레로스틴 구축물.
  35. 제34항에 있어서,
    제2 항체 모이어티가 2개의 중쇄, 2개의 경쇄 및 Fc 단편을 포함하는 전장 항체이고, 항-스클레로스틴 항체 모이어티가 VL과 융합된 VH를 포함하는 단일쇄 Fv(scFv) 단편인, 항-스클레로스틴 구축물.
  36. 제35항에 있어서,
    항-스클레로스틴 항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 중 하나 또는 둘 다에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  37. 제34항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-스클레로스틴 항체 모이어티가 전장 항체의 경쇄 중 하나 또는 둘 다에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  38. 제36항 또는 제37항에 있어서,
    항-스클레로스틴 항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 및 경쇄 중 하나 또는 둘 다의 N-말단에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  39. 제36항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-스클레로스틴 항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 및 경쇄 중 하나 또는 둘 다의 C-말단에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  40. 제36항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-스클레로스틴 항체 모이어티가 제1 링커(linker)를 통해 전장 항체에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  41. 제36항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-스클레로스틴 항체 모이어티가 링커 없이 전장 항체에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  42. 제40항에 있어서,
    제1 링커가 서열번호 74 내지 84로 이루어진 군으로부터 선택되는 GS 링커인, 항-스클레로스틴 구축물.
  43. 제35항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서,
    VH가 제2 링커를 통해 VL과 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  44. 제43항에 있어서,
    scFv 단편이 N-말단으로부터 C-말단으로 VH, 제2 링커 및 VL을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  45. 제43항에 있어서,
    scFv 단편이 N-말단으로부터 C-말단으로 VL, 제2 링커 및 VH, 및 임의적으로 C-말단 알라닌 잔기를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  46. 제43항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서,
    제2 링커가 서열번호 76 또는 77의 아미노산 서열을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  47. 제23항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서,
    제2 항체 모이어티가 VH - 2 및 VL -2를 포함하는 scFv 단편이고, 항-스클레로스틴 항체 모이어티가 2개의 중쇄, 2개의 경쇄 및 Fc 단편을 포함하는 전장 항체인, 항-스클레로스틴 구축물.
  48. 제46항에 있어서,
    제2 항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 둘 다에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  49. 제47항 또는 제48항에 있어서,
    제2 항체 모이어티가 전장 항체의 경쇄 둘 다에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  50. 제48항 또는 제49항에 있어서,
    항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄 둘 다의 N-말단에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  51. 제47항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 모이어티가 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄 둘 다의 C-말단에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  52. 제47항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 모이어티가 제1 링커를 통해 전장 항체에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  53. 제47항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 모이어티가 링커 없이 전장 항체에 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  54. 제52항에 있어서,
    제1 링커가 서열번호 74 내지 84로 이루어진 군으로부터 선택되는 GS 제1 링커인, 항-스클레로스틴 구축물.
  55. 제47항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서,
    VH -2가 제2 링커를 통해 VL -2와 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  56. 제47항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서,
    VH - 2가 링커 없이 VL -2와 융합된, 항-스클레로스틴 구축물.
  57. 제55항에 있어서,
    scFv 단편이 N-말단으로부터 C-말단으로 VH -2, 제2 링커 및 VL -2를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  58. 제55항에 있어서,
    scFv 단편이 N-말단으로부터 C-말단으로 VL -2, 제2 링커 및 VH -2, 및 임의적으로 C-말단 알라닌 잔기를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  59. 제55항, 제57항 및 제58항 중 어느 한 항에 있어서,
    제2 링커가 서열번호 76 또는 77의 아미노산 서열을 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  60. 제35항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서,
    scFv가 다이설파이드 안정화 scFv(dsscFv)인, 항-스클레로스틴 구축물.
  61. 제60항에 있어서,
    dsscFv가 (a) 서열번호 60의 넘버링에 따른 VH 또는 VH -2 내에 G44C 돌연변이, 및 (b) 서열번호 61의 넘버링에 따른 VL 또는 VL -2 내에 G100C 돌연변이를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  62. 제35항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서,
    (1) 각각 서열번호 91의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (2) 각각 서열번호 92의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (3) 각각 서열번호 94의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 96의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (4) 각각 서열번호 95의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 96의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (5) 각각 서열번호 97의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 99의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (6) 각각 서열번호 98의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 99의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (7) 각각 서열번호 100의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 102의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (8) 각각 서열번호 101의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 102의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (9) 각각 서열번호 103의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 104의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (10) 각각 서열번호 103의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 105의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (11) 각각 서열번호 106의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 107의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (12) 각각 서열번호 106의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 108의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (13) 각각 서열번호 109의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 110의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (14) 각각 서열번호 109의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 111의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (15) 각각 서열번호 112의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (16) 각각 서열번호 112의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 114의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (17) 각각 서열번호 115의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (18) 각각 서열번호 116의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (19) 각각 서열번호 117의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (20) 각각 서열번호 118의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (21) 각각 서열번호 120의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (22) 각각 서열번호 121의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (23) 각각 서열번호 123의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (24) 각각 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (25) 각각 서열번호 126의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (26) 각각 서열번호 127의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (27) 각각 서열번호 128의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (28) 각각 서열번호 133의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 130의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (29) 각각 서열번호 133의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 131의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (30) 각각 서열번호 133의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 132의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 경쇄;
    (31) 각각 서열번호 177의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (32) 각각 서열번호 178의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (33) 각각 서열번호 178의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄;
    (34) 각각 서열번호 179의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄; 또는
    (35) 각각 서열번호 180의 아미노산 서열을 포함하는 항-스클레로스틴 또는 제2 항체 모이어티와 융합된 2개의 중쇄, 및 각각 서열번호 122의 아미노산 서열을 포함하는 2개의 경쇄
    를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물.
  63. 제23항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서,
    (a) N-말단으로부터 C-말단으로 i) VL, 및 ii) 제1 경쇄 불변 도메인(제1 CL 도메인)을 포함하는 제1 경쇄를 포함하는 제1 폴리펩티드;
    (b) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH, ii) 제1 중쇄 불변 도메인(제1 CH1 도메인), 및 iii) 제1 Fc 도메인을 포함하는 제1 중쇄를 포함하는 제2 폴리펩티드;
    (c) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VH -2, ii) 제2 중쇄 불변 도메인(제2 CH1 도메인), 및 iii) 제2 Fc 도메인을 포함하는 제2 중쇄를 포함하는 제3 폴리펩티드; 및
    (d) N-말단으로부터 C-말단으로, i) VL -2, 및 ii) 제2 경쇄 불변 도메인(제2 CL 도메인)을 포함하는 제2 경쇄를 포함하는 제4 폴리펩티드
    를 포함하는 항-스클레로스틴 구축물로서, 제1 및 제2 Fc 도메인이 Fc 단편을 형성하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  64. 제63항에 있어서,
    제1 및 제2 Fc 도메인 중 하나가 T366W 돌연변이, 및 임의적으로 S354C 돌연변이를 포함하고, 다른 Fc 도메인이 T366S 돌연변이, L368A 돌연변이, Y407V 돌연변이, 및 임의적으로 Y349C 돌연변이를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 넘버링(numbering)이 EU 색인(EU index)에 따른 것인, 항-스클레로스틴 구축물.
  65. 제63항 또는 제64항에 있어서,
    (i) 제1 CH1 도메인 및 제1 CL 도메인, 또는 (ii) 제2 CH1 도메인 및 제2 CL 도메인이
    (a) 위치 141의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131 또는 220의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 116의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
    (b) 위치 168의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131 또는 220의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 164의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
    (c) 위치 126의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131 또는 220의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 121의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
    (d) 위치 128의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131 또는 220의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 118의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
    (e) 위치 170의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131 또는 220의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 176의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인;
    (f) 위치 171의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131 또는 220의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 162의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인; 및
    (g) 위치 173의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 131 또는 220의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CH1 도메인; 및 위치 160의 아미노산이 시스테인으로 치환되고, 위치 214의 시스테인이 비-시스테인 아미노산으로 치환된 CL 도메인
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 항-스클레로스틴 구축물로서, 상기 넘버링이 EU 색인에 따른 것인, 항-스클레로스틴 구축물.
  66. 제63항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서,
    (1) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 136의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 137의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (2) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 138의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 139의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (3) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 140의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 141의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (4) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 142의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 143의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (5) 제1 폴리펩티드가 서열번호 135의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 134의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 144의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 145의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (6) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 148의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 149의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (7) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 150의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 151의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (8) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 152의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 153의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (9) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 154의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 155의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (10) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 156의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 157의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (11) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 158의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 159의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (12) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 160의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 161의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (13) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 146의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 162의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (14) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 171의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 172의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (15) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 173의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 174의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함하거나;
    (16) 제1 폴리펩티드가 서열번호 147의 아미노산 서열을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 서열번호 175의 아미노산 서열을 포함하고, 제3 폴리펩티드가 서열번호 176의 아미노산 서열을 포함하고, 제4 폴리펩티드가 서열번호 163의 아미노산 서열을 포함하는,
    항-스클레로스틴 구축물.
  67. 제21항에 있어서,
    제2 모이어티가 반감기 연장 모이어티를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  68. 제67항에 있어서,
    반감기 연장 모이어티가 Fc 단편인, 항-스클레로스틴 구축물.
  69. 제18항, 제35항 내지 제66항 및 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
    Fc 단편이 Fc 단편 형태 IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, 및 이들의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택되는, 항-스클레로스틴 구축물.
  70. 제69항에 있어서,
    Fc 단편이 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, 및 이들의 조합 및 하이브리드로부터의 Fc 단편으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 항-스클레로스틴 구축물.
  71. 제69항 또는 제70항에 있어서,
    Fc 단편이 H435R 돌연변이 및 Y436F 돌연변이를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  72. 제69항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서,
    Fc 단편이 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 효과기 기능을 갖는, 항-스클레로스틴 구축물.
  73. 제69항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서,
    Fc 단편이
    (a) 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 향상된 효과기 기능, 및/또는
    (b) 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 향상된 FcRn 결합 친화도
    를 갖는, 항-스클레로스틴 구축물.
  74. 제21항에 있어서,
    항체-약물 접합체 또는 항체 융합 단백질인 항-스클레로스틴 구축물.
  75. 제74항에 있어서,
    제2 모이어티가 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 비스포스포네이트, 프로스타글란딘 E(PGE) 수용체 작용제, VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴), 칼시토닌 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 포함하는, 항-스클레로스틴 구축물.
  76. 제1항 내지 제75항 중 어느 한 항에 따른 항-스클레로스틴 구축물과 경쟁적으로 스클레로스틴에 특이적으로 결합하는 항-스클레로스틴 구축물.
  77. 제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 따른 항-스클레로스틴 구축물 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물.
  78. 제77항에 있어서,
    부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴), 칼시토닌 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 추가로 포함하는 약학 조성물.
  79. 제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 따른 항-스클레로스틴 구축물을 인코딩하는 단리된 핵산.
  80. 제79항에 따른 단리된 핵산을 포함하는 벡터.
  81. 제79항에 따른 단리된 핵산 또는 제80항에 따른 벡터를 포함하는 단리된 숙주 세포.
  82. (a) 항-스클레로스틴 구축물 또는 이의 일부를 발현하기에 효과적인 조건하에, 제81항에 따른 단리된 숙주 세포를 배양하는 단계; 및
    (b) 상기 숙주 세포로부터 발현된 항-스클레로스틴 구축물 또는 이의 일부를 수득하는 단계
    를 포함하는 항-스클레로스틴의 제조 방법.
  83. 제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 따른 항-스클레로스틴 구축물 및/또는 제77항 또는 제78항에 따른 약학 조성물의 효과량을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 질환 또는 병태를 치료 및/또는 예방하는 방법.
  84. 제83항에 있어서,
    질환 또는 병태가 골 관련 장애 또는 연골 관련 장애, 골수 또는 혈액학적 장애, 근골격계 희귀 질환, 근육 관련 장애 또는 암인, 방법.
  85. 제84항에 있어서,
    골 관련 장애가 골형성 부전증, (남성 및 여성에서의) 골다공증 또는 골감소증, 골 괴사, 골 치유 지연, 불유합 골절, 다발성 골수종, 다발성 골수종 관련 골 장애, 원발성 골 종양, 악성 종양의 골 전이, 염증성 또는 감염성 골 질환, 골연화증, 고칼슘혈증, 파제트병(Paget's disease), 부동화-유도된 골 손실, 글루코코르티코이드-유도된 골 손실, 관절염-유도된 골 손실을 비롯한 염증-유도된 골 손실, 우주비행 골다공증/골감소증, 감소된 중력에 의해 야기되는 골 손실, 또는 a) 양적, 질적 또는 둘 다의 골 손실, 및/또는 b) 골 구조 및 질(quality)의 이상과 관련된 기타 질환 또는 병태인, 방법.
  86. 제85항에 있어서,
    골 관련 장애가 골다공증 또는 골감소증인, 방법.
  87. 제85항에 있어서,
    골 관련 장애가 골형성 부전증인, 방법.
  88. 제85항에 있어서,
    골 관련 장애가 다발성 골수종, 또는 다발성 골수종 관련 골 장애인, 방법.
  89. 제84항에 있어서,
    연골 장애가 연골종증, 연골이형성증, 연골무형성증, 골단 이형성증, 연골이영양성 근긴장증, 피질주위 연골종, 무릎 연골 파열, 골섬유성 이형성증, 골관절염, 골형성 부전증, 저인산혈증 구루병 또는 골연골이영양증인, 방법.
  90. 제84항에 있어서,
    근육 관련 장애가 근육감소증 또는 암 근육감소증인, 방법.
  91. 제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 따른 항-스클레로스틴 구축물 및/또는 제77항 또는 제78항에 따른 약학 조성물의 효과량을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 개체의 골 또는 관절 수술 후 치유를 촉진하는 방법.
  92. 제83항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-스클레로스틴 구축물이 개체에게 피하 주사, 정맥 주사 또는 근육 내 주사로 투여되거나, 경구 또는 비경구로 투여되는, 방법.
  93. 제83항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서,
    제2 제제 또는 치료제를 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  94. 제93항에 있어서,
    제2 제제 또는 치료제가 항-DKK1 항체를 포함하는, 방법.
  95. 제93항에 있어서,
    제2 제제 또는 치료제가 항-RANKL 항체를 포함하는, 방법.
  96. 제93항에 있어서,
    제2 제제 또는 치료제가 부갑상선 호르몬(PTH), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 비스포스포네이트, 프로스타글란딘 E(PGE) 수용체 작용제, VEGF, TGFβ, 성장 인자(미오스타틴) 및 칼시토닌으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제제를 포함하는, 방법.
  97. 제83항 내지 제96항 중 어느 한 항에 있어서,
    개체가 인간인, 방법.
KR1020237014802A 2020-09-28 2021-09-26 항-스클레로스틴 구축물 및 이의 용도 KR20230079419A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNPCT/CN2020/118387 2020-09-28
CN2020118387 2020-09-28
PCT/CN2021/120612 WO2022063262A1 (en) 2020-09-28 2021-09-26 Anti-sclerostin constructs and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230079419A true KR20230079419A (ko) 2023-06-07

Family

ID=80844988

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237014802A KR20230079419A (ko) 2020-09-28 2021-09-26 항-스클레로스틴 구축물 및 이의 용도

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20230312755A1 (ko)
EP (1) EP4217389A1 (ko)
JP (1) JP2023543643A (ko)
KR (1) KR20230079419A (ko)
CN (7) CN118126189A (ko)
AU (1) AU2021348613A1 (ko)
CA (1) CA3193569A1 (ko)
IL (1) IL301763A (ko)
MX (1) MX2023003644A (ko)
TW (1) TW202313674A (ko)
WO (1) WO2022063262A1 (ko)
ZA (1) ZA202304872B (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023179791A1 (en) * 2022-03-24 2023-09-28 Angitia Biomedicines Limited Treatment of musculoskeletal disorders
WO2024129988A1 (en) * 2022-12-14 2024-06-20 Flagship Pioneering Innovations Vii, Llc Compositions and methods for delivery of therapeutic agents to bone

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE056313T2 (hu) * 2010-01-29 2022-02-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-DLL3 antitest
EP2641914B1 (en) * 2010-12-27 2018-11-14 Japan Health Sciences Foundation Monoclonal antibody capable of recognizing human papilloma virus (hpv) l2 protein, and method for measuring hpv-neutralizing antibody titer using same
EP2797953B1 (en) * 2011-12-28 2020-06-03 Amgen Inc. Method of treating alveolar bone loss through the use of anti-sclerostin antibodies
GB201810746D0 (en) * 2018-06-29 2018-08-15 Mereo Biopharma 3 Ltd Use of sclerostin antagonist
EP4267628A1 (en) * 2020-12-22 2023-11-01 XL-protein GmbH Antibodies specific for structurally disordered sequences

Also Published As

Publication number Publication date
TW202313674A (zh) 2023-04-01
AU2021348613A9 (en) 2024-06-13
CN118146384A (zh) 2024-06-07
CN118126190A (zh) 2024-06-04
CN118146382A (zh) 2024-06-07
WO2022063262A1 (en) 2022-03-31
CN118146385A (zh) 2024-06-07
MX2023003644A (es) 2023-04-19
CN118126189A (zh) 2024-06-04
US20230312755A1 (en) 2023-10-05
ZA202304872B (en) 2024-01-31
CN115279787B (zh) 2024-06-07
CA3193569A1 (en) 2022-03-31
IL301763A (en) 2023-05-01
JP2023543643A (ja) 2023-10-17
AU2021348613A1 (en) 2023-06-08
CN115279787A (zh) 2022-11-01
CN118146383A (zh) 2024-06-07
EP4217389A1 (en) 2023-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20230312755A1 (en) Anti-sclerostin constructs and uses thereof
US20230112085A1 (en) Anti-b7-h4 constructs and uses thereof
JP7493018B2 (ja) 抗スクレロスチン抗体およびその使用
US20230365705A1 (en) Anti-cd93 constructs and uses thereof
WO2021164701A1 (en) Fusion proteins and uses thereof
WO2023179791A1 (en) Treatment of musculoskeletal disorders
US20230125301A1 (en) Multispecific anti-claudin-18.2 constructs and uses thereof
US20230322935A1 (en) Anti-cd93 constructs and uses thereof
US20230235075A1 (en) Anti-cd93 constructs and uses thereof
US20240150466A1 (en) Anti-igfbp7 constructs and uses thereof