KR20230060310A - Antibacterial and antioxidant composition comprising fermented Centella asiatica extract fermented by inoculating Bacillus safensis strain - Google Patents

Antibacterial and antioxidant composition comprising fermented Centella asiatica extract fermented by inoculating Bacillus safensis strain Download PDF

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bacillus
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이경록
김정환
김수영
신소영
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주식회사 아미코스메틱
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Abstract

The present invention relates to an antibacterial and antioxidant composition containing a fermented extract of Centella asiatica by inoculating and fermenting a novel Bacillus safensis strain, and use thereof. The antibacterial and antioxidant composition contains a fermented extract of Centella asiatica by inoculating and fermenting a new strain, Bacillus safensis AMI-1407 with accession number KCCM13051P. Accordingly, as antibacterial and antioxidant effects against Propionibacterium acnes can be provided, the antibacterial and antioxidant composition is effective.

Description

바실러스 사펜시스 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 조성물 {Antibacterial and antioxidant composition comprising fermented Centella asiatica extract fermented by inoculating Bacillus safensis strain}Antibacterial and antioxidant composition comprising fermented Centella asiatica extract fermented by inoculating Bacillus safensis strain}

본 발명은 신규한 바실러스 사펜시스 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 조성물 내지 이의 용도에 대한 것이다. The present invention relates to an antibacterial and antioxidant composition comprising a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting a novel Bacillus sapensis strain or its use.

피부는 신체의 외부를 덮고 있는 하나의 막으로 여러 가지 외부의 자극, 장해, 건조 등의 환경요소로부터 신체를 보호해 주는 다양한 생리적 기능을 수행하여 내부 장기와 그 밖의 체내 기관을 보호 조절하는 역할을 한다.Skin is a membrane that covers the outside of the body and plays a role in protecting and regulating internal organs and other internal organs by performing various physiological functions that protect the body from various external stimuli, obstacles, and environmental factors such as dryness. do.

그러나, 피부는 연령이 증가함에 따라 생체의 생리적 기능이 저하되어 신진 대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되게 된다. 또한 광 또는 열에 반복적인 노출로 인해 피부의 외양 또는 기능이 변하게 되는데, 이로 인해 자유라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스 등은 피부의 정상 기능 저하, 멜라닌 침착에 의한 기미, 주근깨 등의 생성 및 피부 노화현상을 촉진하여 피부를 손상시키게 된다.However, as the age of the skin increases, the physiological function of the body decreases, the secretion of various hormones that control metabolism decreases, and the function of immune cells and the activity of cells decrease. In addition, the appearance or function of the skin changes due to repeated exposure to light or heat. As a result, free radicals and active harmful oxygen increase, excessive physical and chemical stimulation and stress cause the normal function of the skin to deteriorate and melanin deposition to cause blemishes. , freckles, etc., and promote skin aging, thereby damaging the skin.

이러한 피부노화 및 손상을 방지하여 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위하여 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻어진 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하여 사용함으로써 피부의 고유 기능을 유지시키고 피부세포를 활성화시켜 피부 신진대사를 촉진하여 피부 건강을 유지하고자 하는 노력이 계속되고 있으며, 이에 따른 화장품, 피부 외용제 등이 개발되고 있다.In order to prevent such skin aging and damage and maintain healthier and more beautiful skin, physiologically active substances obtained from various animals, plants, microorganisms, etc. are added to cosmetics and used to maintain the unique function of the skin and activate skin cells to promote skin growth Efforts are being made to maintain skin health by promoting metabolism, and accordingly, cosmetics, skin external agents, and the like are being developed.

그러나, 이들 물질은 피부 적용시 자극, 홍반, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적으로 피부 기능 개선 효과를 기대기 어려웠다. 따라서, 기존의 피부 외용제 조성물 보다 생체에 안전하고 효과가 높은 천연 추출물의 개발이 요구되고 있다.However, when these materials are applied to the skin, safety problems such as irritation, erythema, redness, etc. limit the amount of use, or the effect is insignificant, so it is difficult to expect a substantial improvement in skin function. Therefore, there is a demand for the development of natural extracts that are safer to the body and have higher effects than existing compositions for external application for skin.

대한민국 특허출원 제 10-2012-0148892 호 는 항균활성을 갖는 바실러스 사펜시스 균주에 대한 것이다. 그러나 여드름 관련 균주에 항균활성을 띄거나 항산화 효과도 함께 나타나는 신규한 바실러스 사펜시스 균주에 대한 기재는 개시된 바 없다. Korean Patent Application No. 10-2012-0148892 relates to a Bacillus sapensis strain having antibacterial activity. However, there is no disclosure of a novel Bacillus sapensis strain that exhibits antibacterial activity against acne-related strains or exhibits an antioxidant effect as well.

이에 본 발명자들은 항균 및 항산화 효과를 함께 제공할 수 있는 천연 추출물을 제공하고자 예의 노력한 결과, 개나리 유래의 신규한 바실러스 사펜시스 균주인 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407)로 발효한 병풀 발효 추출물은 여드름균에 대한 항균효과와 항산화 효과를 나타내는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the present inventors have made diligent efforts to provide a natural extract capable of providing both antibacterial and antioxidant effects. Centella asiatica fermented with Bacillus sapensis AMI-1407, a novel Bacillus sapensis strain derived from forsythia. The present invention was completed by confirming that the fermented extract exhibits antibacterial and antioxidant effects against acne bacillus.

따라서, 본 발명의 목적은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 조성물 내지 이의 용도를 제공하는 것이다. Accordingly, an object of the present invention is to provide an antibacterial and antioxidant composition comprising a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting a Bacillus safensis strain or a use thereof.

본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 조성물을 제공한다. The present invention provides an antibacterial and antioxidant composition comprising a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting a Bacillus safensis strain.

본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주는 수탁번호 KCCM13051P 로 기탁된 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407) 인 것이다. According to a preferred embodiment of the present invention, the Bacillus safensis strain is Bacillus safensis AMI-1407 deposited under accession number KCCM13051P.

본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 병풀 발효 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출된 것이다.According to a preferred embodiment of the present invention, the centella asiatica fermented extract is extracted using water, an organic solvent, or a mixture thereof as a solvent.

본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 조성물은 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes) 균에 대하여 항균 활성을 갖는 것이다.According to a preferred embodiment of the present invention, the composition has antibacterial activity against Propionibacterium acnes bacteria.

또한, 본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 화장료 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a cosmetic composition for antibacterial and anti-oxidation containing a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting a Bacillus safensis strain.

또한, 본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 의약외품 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a quasi-drug composition for antibacterial and anti-oxidation containing a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting a Bacillus safensis strain.

또한, 본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 식품 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides an antibacterial and antioxidant food composition comprising a fermented centella asiatica extract fermented by inoculating a Bacillus safensis strain.

또한, 본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 반려용품 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides an antibacterial and antioxidative companion product composition comprising a fermented centella asiatica fermented extract obtained by inoculating and fermenting a Bacillus safensis strain.

본 발명은 신규한 균주인 수탁번호 KCCM13051P 의 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407)를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함함으로써, 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes) 균에 대한 항균 효과 및 항산화 효과를 제공할 수 있어 항균 및 항산화용 조성물로서 효과적이다. The present invention includes a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting Bacillus safensis AMI-1407 ( Bacillus safensis AMI-1407), a novel strain, accession number KCCM13051P, thereby antibacterial effect on Propionibacterium acnes bacteria And it can provide an antioxidant effect, so it is effective as an antibacterial and antioxidant composition.

도 1 은 병풀에 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407, B.safensis)을 접종(0, 10%, 25%, 50%)하여 발효시킨 발효물을 멸균(열수) 추출방법으로 제조한 병풀 발효 추출물의 ABTS 항산화 효능평가 결과를 나타낸다. B.safensis 를 접종하여 발효시키더라도 항산화 효과에 영향을 주지 않는 것을 확인할 수 있었다.
도 2 는 병풀에 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407, B.safensis)을 접종(0, 10%, 25%, 50%)하여 발효시킨 발효물을 70% EtOH(교반) 추출방법으로 제조한 추출물의 ABTS 항산화 효능평가 결과를 나타낸다. B.safensis를 25% 수준으로 접종한 병풀 발효물에서 항산화 효과가 대조군 대비 6.3% 증가하였고, B.safensis를 10% 및 50% 수준으로 접종한 병풀 발효물 대비 효능이 높은 것을 확인할 수 있었다.
도 3 은 병풀에 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407, B.safensis)을 접종(0, 10%, 25%, 50%)하여 발효시킨 발효물을 멸균(열수) 추출방법 또는 70% EtOH(교반) 추출방법으로 제조한 추출물의 항균 효능평가 결과를 나타낸다. 병풀 발효물을 멸균 추출방법으로 추출하는 경우 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes) 균에 대한 항균 활성을 나타내지 않았지만, B.safensis 를 25% 로 접종하여 발효시킴 병풀 발효물을 70% EtOH 추출방법으로 추출하는 경우 프로피오니박테리움 아크네균에 대한 항균 활성을 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
1 is prepared by inoculating (0, 10%, 25%, 50%) Bacillus safensis AMI-1407 ( Bacillus safensis AMI-1407, B.safensis ) into centella asiatica and fermented fermented product by sterilization (hot water) extraction method The ABTS antioxidant efficacy evaluation results of the fermented centella asiatica extract are shown. It was confirmed that even if B. safensis was inoculated and fermented, the antioxidant effect was not affected.
Figure 2 is a fermentation product fermented by inoculating (0, 10%, 25%, 50%) Bacillus safensis AMI-1407 ( Bacillus safensis AMI-1407, B.safensis ) in Centella Asiatica, and 70% EtOH (stirring) extraction method Shows the ABTS antioxidant efficacy evaluation results of the extract prepared by. In the fermented Centella Asiatica inoculated with B.safensis at 25% level, the antioxidant effect increased by 6.3% compared to the control group, and it was confirmed that the efficacy was higher than that of the fermented Centella Asiatica inoculated with B.safensis at 10% and 50% level.
Figure 3 is a sterilization (hot water) extraction method or 70 fermented product fermented by inoculating (0, 10%, 25%, 50%) Bacillus safensis AMI-1407 ( Bacillus safensis AMI-1407, B.safensis ) in centella asiatica. The antibacterial efficacy evaluation results of the extract prepared by the % EtOH (stirring) extraction method are shown. When the fermented centella asiatica was extracted by sterilization extraction method, it did not show antibacterial activity against Propionibacterium acnes bacteria, but B.safensis was inoculated and fermented at 25%. When extracted, it was confirmed that it exhibits antibacterial activity against Propionibacterium acnes.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명의 '병풀 발효 추출물' 은 병풀 추출물을 제조한 후 개나리 유래의 신규한 균주인 수탁번호 KCCM13051P 의 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407) 로 발효시켜 병풀 발효물로 제조한 후, 이를 다시 추출하여 제조한 추출물을 의미한다. The 'fermented centella asiatica extract' of the present invention is prepared by preparing a centella asiatica extract and then fermenting it with Bacillus safensis AMI-1407 of accession number KCCM13051P, a novel strain derived from forsythia, to prepare a centella asiatica fermented product, It means an extract prepared by extracting it again.

본 발명에서 제공하는 개나리 유래의 신규한 균주인 수탁번호 KCCM13051P 의 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407) 로 발효시킨 병풀 발효 추출물은 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes) 균에 대한 항균 효과 및 항산화 효과를 제공할 수 있어 항균 및 항산화용 조성물로서 효과적으로 사용될 수 있다. The centella asiatica fermented extract fermented with Bacillus safensis AMI-1407 of accession number KCCM13051P, which is a novel strain derived from forsythia provided by the present invention, has an antibacterial effect against Propionibacterium acnes bacteria And it can provide an antioxidant effect, so it can be effectively used as an antibacterial and antioxidant composition.

구체적으로, ABTS+ 라디칼 소거활성을 확인한 결과 수탁번호 KCCM13051P 의 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407)를 접종하여 발효시킨 병풀 발효물을 멸균(열수) 추출방법으로 추출하는 경우 항균, 항산화 내지 항노화 효과를 나타내지 않았다. 반면에, 상기 병풀 발효물을 70% EtOH(교반) 추출방법으로 추출하는 경우 항산화를 통한 항노화 활성 및 프로피오니박테리움 아크네균에 대한 항균 활성을 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 특히, 항균 활성의 경우 병풀 추출물 발효시 B.safensis 균을 많이 접종한다고 하여 증가하는 것은 아니었으며 병풀 추출물 중량 대비 15% 내지 35% 로 접종하는 경우 가장 우수한 항균 활성을 나타냈다(도 3). Specifically, as a result of confirming the ABTS+ radical scavenging activity, when extracting the fermented centella asiatica fermented product by inoculation with Bacillus safensis AMI-1407 (Accession No. KCCM13051P) by sterilization (hot water) extraction method, antibacterial, antioxidant to It did not show an anti-aging effect. On the other hand, when the centella asiatica fermented product was extracted with 70% EtOH (stirring) extraction method, it was confirmed that anti-aging activity through anti-oxidation and antibacterial activity against Propionibacterium acnes were exhibited. In particular, in the case of antibacterial activity, it was not increased by inoculating a lot of B. safensis bacteria during fermentation of the Centella asiatica extract, and the best antibacterial activity was exhibited when inoculated at 15% to 35% of the weight of the Centella asiatica extract (FIG. 3).

따라서, 본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 조성물을 제공할 수 있다. Accordingly, the present invention can provide an antibacterial and antioxidant composition comprising a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting a Bacillus safensis strain.

본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주는 수탁번호 KCCM13051P 의 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407) 인 것일 수 있다. According to a preferred embodiment of the present invention, the Bacillus safensis strain may be Bacillus safensis AMI-1407 of accession number KCCM13051P.

본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주는 개나리 유래인 것일 수 있다.According to a preferred embodiment of the present invention, the Bacillus safensis strain may be derived from Forsythia.

본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 병풀 발효 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출된 것일 수 있다. 바람직하게는 상기 병풀 발효 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출된 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게는 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올 또는 이들의 혼합물 용매로 하여 추출된 것이 바람직하며 가장 바람직하게는 에탄올을 용매로 하는 것이 가장 바람직하다. 상기 에탄올은 1% ~ 100% 에탄올 일 수 있다. According to a preferred embodiment of the present invention, the centella asiatica fermented extract may be extracted using water, an organic solvent, or a mixture thereof as a solvent. Preferably, the centella asiatica fermented extract is preferably extracted using water, C1 to C4 lower alcohol, or a mixture thereof as a solvent, and more preferably extracted using water, methanol, ethanol, propanol, or a mixture thereof as a solvent. It is preferred, and most preferably, ethanol is used as a solvent. The ethanol may be 1% to 100% ethanol.

본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 병풀 발효 추출물은 감압고온추출, 열탕추출, 환류추출, 교반추출, 열수추출, 상온추출, 초음파 추출 및 증기추출 방법으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 방법으로 추출된 것일 수 있으며, 바람직하게는 교반추출 방법으로 제조한 것일 수 있다.According to a preferred embodiment of the present invention, the centella asiatica fermented extract is at least one method selected from the group consisting of reduced pressure and high temperature extraction, hot water extraction, reflux extraction, stirring extraction, hot water extraction, room temperature extraction, ultrasonic extraction and steam extraction. It may be extracted with, preferably it may be prepared by a stirring extraction method.

상기 추출공정 후, 여과, 원심분리 또는 농축과정 등 추출물의 순도를 높이기 위한 정제 과정을 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 농축은 침전농축, 증발농축, 감압농축, 한외여과법, 역삼투법 또는 원심분리법 등의 방법으로 이루어질 수 있으나 이에 제한되지 않는다. After the extraction process, a purification process to increase the purity of the extract, such as filtration, centrifugation or concentration process, may be additionally included. The concentration may be performed by a method such as precipitation concentration, evaporation concentration, vacuum concentration, ultrafiltration, reverse osmosis, or centrifugation, but is not limited thereto.

본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 조성물은 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes) 균에 대하여 항균 활성을 갖는 것일 수 있다. 상기 항균활성은 병풀 추출물 발효시 B.safensis 균을 병풀 추출물 대비 10% 초과 내지 50% 미만으로 접종하여 발효시키는 경우 나타나는 것일 수 있다. 바람직하게는 병풀 추출물 중량 대비 15% 내지 35% 로 접종하여 발효시키는 경우 나타나는 것일 수 있으며, 보다 바람직하게는 B.safensis 균을 병풀 추출물 중량 대비 20% 내지 30% 로 접종하여 나타나는 것일 수 있다. According to a preferred embodiment of the present invention, the composition may have antibacterial activity against Propionibacterium acnes bacteria. The antibacterial activity may be exhibited when fermenting the centella asiatica extract by inoculating B. safensis bacteria in an amount greater than 10% to less than 50% compared to the centella asiatica extract. Preferably, it may appear when inoculated and fermented at 15% to 35% by weight of centella asiatica extract, more preferably by inoculating B. safensis bacteria at 20% to 30% by weight of centella asiatica extract.

또한, 본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 화장료 조성물을 제공할 수 있다. In addition, the present invention can provide a cosmetic composition for antibacterial and anti-oxidation containing a fermented centella asiatica extract fermented by inoculating a Bacillus safensis strain.

상기 병풀 발효 추출물 내지 항균은 상기 항균 및 항산화용 조성물에서 사용된 개념과 동일하므로 설명은 그 기재로 대신한다. Since the Centella asiatica fermented extract to antibacterial is the same as the concept used in the antibacterial and antioxidant composition, the description is replaced with the description.

본 발명의 화장료 조성물은 상기 병풀 발효 추출물을 유효성분으로 함유하며 피부학적으로 허용 가능한 부형제와 함께 기초 화장품 조성물(화장수, 피부 보호제, 크림, 에센스, 클렌징 폼 및 클렌징 워터와 같은 세안제, 팩, 보디오일, 전신 세정제), 색조 화장품 조성물(파운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스), 두발 제품 조성물(샴푸, 린스, 두피 세정제, 헤어컨디셔너, 헤어젤) 및 비누 등의 형태로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention contains the centella asiatica fermented extract as an active ingredient and a basic cosmetic composition (toilet, skin protectant, cream, essence, face wash such as cleansing foam and cleansing water, pack, body oil) together with dermatologically acceptable excipients , body cleanser), color cosmetic composition (foundation, lipstick, mascara, makeup base), hair product composition (shampoo, rinse, scalp cleanser, hair conditioner, hair gel) and soap.

상기 부형제로는 이에 한정되지는 않으나 예를 들어, 피부연화제, 피부 침투 증강제, 착색제, 방향제, 유화제, 농화제 및 용매를 포함할 수 있다. 또한, 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제 및 보습제 등을 추가로 포함할 수 있으며, 물성개선을 목적으로 점증제, 무기염류, 합성 고분자 물질 등을 포함할 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 화장료 조성물로 세안제 및 비누를 제조하는 경우에는 통상의 세안제 및 비누 베이스에 상기 병풀 발효 추출물을 첨가하여 용이하게 제조할 수 있다. 크림을 제조하는 경우에는 일반적인 수중유적형(O/W)의 크림베이스에 상기 병풀 발효 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다. 여기에 향료, 킬레이트제, 색소, 산화방지제, 방부제 등과 물성개선을 목적으로 한 단백질, 미네랄, 비타민 등 합성 또는 천연소재를 추가로 첨가할 수 있다.The excipient is not limited thereto, but may include, for example, a skin softener, a skin penetration enhancer, a colorant, a fragrance, an emulsifier, a thickening agent, and a solvent. In addition, it may additionally include flavoring agents, pigments, bactericides, antioxidants, preservatives, moisturizing agents, and the like, and thickeners, inorganic salts, synthetic polymer materials, and the like may be included for the purpose of improving physical properties. For example, when preparing a facial cleanser and soap with the cosmetic composition of the present invention, it can be easily prepared by adding the centella asiatica fermented extract to a conventional facial cleanser and soap base. When preparing a cream, it can be prepared by adding the centella asiatica fermented extract to a general oil-in-water (O/W) cream base. Herein, synthetic or natural materials such as flavors, chelating agents, pigments, antioxidants, preservatives, and proteins, minerals, and vitamins for the purpose of improving physical properties may be additionally added.

본 발명의 화장료 조성물에 함유되는 병풀 발효 추출물의 함량은 이에 한정되지 않지만 전체 조성물 총중량에 대하여 0.001 내지 10 중량%인 것이 바람직하고, 0.01 내지 5중량%인 것이 더욱 바람직하다. 상기 함량이 0.001중량% 미만에서는 목적하는 항균 및 항산화 효과를 기대할 수 없고, 10중량% 초과에서는 안전성 또는 제형상의 제조에 어려움이 있을 수 있다.The content of the fermented centella asiatica extract contained in the cosmetic composition of the present invention is not limited thereto, but is preferably 0.001 to 10% by weight, more preferably 0.01 to 5% by weight, based on the total weight of the total composition. If the content is less than 0.001% by weight, the desired antibacterial and antioxidant effects cannot be expected, and if it exceeds 10% by weight, there may be difficulties in safety or preparation of the formulation.

또한, 본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 의약외품 조성물을 제공할 수 있다. In addition, the present invention can provide a quasi-drug composition for antibacterial and anti-oxidation containing a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting a Bacillus safensis strain.

상기 병풀 발효 추출물 내지 항균은 상기 항균 및 항산화용 조성물에서 사용된 개념과 동일하므로 설명은 그 기재로 대신한다. Since the Centella asiatica fermented extract to antibacterial is the same as the concept used in the antibacterial and antioxidant composition, the description is replaced with the description.

본 발명의 '의약외품' 이란, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미하는 것으로, 예를 들어 약사법에 따르면 의약외품이란 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람ㆍ동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.The term 'quasi-drugs' of the present invention refers to items that have a milder effect than pharmaceuticals among items used for the purpose of diagnosing, treating, improving, mitigating, treating or preventing diseases of humans or animals. For example, according to the Pharmaceutical Affairs Act, quasi-drugs Products used for the purpose of medicine are excluded, and include products used for the treatment or prevention of diseases in humans and animals, and products with mild or no direct action on the human body.

본 발명의 병풀 발효 추출물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 그대로 첨가되거나 다른 의약외품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.When the fermented centella asiatica extract of the present invention is used as a quasi-drug additive, it may be added as it is or used together with other quasi-drug ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The mixing amount of the active ingredient can be suitably determined depending on the purpose of use (prevention, health or therapeutic treatment).

바람직하게는, 상기 의약외품 조성물은 소독청결제, 샤워폼, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 마스크 또는 연고제 일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. Preferably, the quasi-drug composition may be a disinfectant cleanser, shower foam, wet tissue, detergent soap, hand wash, mask or ointment, but is not limited thereto.

또한, 본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 식품 조성물을 제공할 수 있다. In addition, the present invention can provide an antibacterial and antioxidant food composition comprising a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting a Bacillus safensis strain.

상기 병풀 발효 추출물 내지 항균은 상기 항균 및 항산화용 조성물에서 사용된 개념과 동일하므로 설명은 그 기재로 대신한다. Since the Centella asiatica fermented extract to antibacterial is the same as the concept used in the antibacterial and antioxidant composition, the description is replaced with the description.

본 발명에 따른 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 일반 식품으로는 이에 한정되지 않지만 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게이트, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용식물 유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명의 병풀 발효 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 영양보조제로는 이에 한정되지 않지만 캡슐, 타블렛, 환 등에 본 발명의 병풀 발효 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 본 발명의 병풀 발효 추출물 자체를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용(건강음료)할 수 있도록 액상화, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 본 발명의 병풀 발효 추출물을 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 병풀 발효 추출물과 항균 및 항산화 효과가 있다고 알려진 공지의 활성 성분과 함께 혼합하여 제조할 수 있다.The food composition according to the present invention can be prepared in various forms according to conventional methods known in the art. General foods include, but are not limited to, beverages (including alcoholic beverages), fruits and their processed foods (e.g. canned fruits, bottled products, jams, marmalades, etc.), fish, meat and their processed foods (e.g. ham, sausages) Corned beef, etc.), breads and noodles (e.g. udon, buckwheat noodles, ramen, spagate, macaroni, etc.), fruit juice, various drinks, cookies, taffy, dairy products (e.g. butter, cheese, etc.), edible vegetable oil, margarine , Vegetable protein, retort food, frozen food, various seasonings (eg, soybean paste, soy sauce, sauce, etc.) can be prepared by adding the centella asiatica fermented extract of the present invention. In addition, nutritional supplements are not limited thereto, but may be prepared by adding the centella asiatica fermented extract of the present invention to capsules, tablets, pills, etc. In addition, the fermented centella asiatica extract itself of the present invention can be prepared in the form of tea, juice, and drink, and can be ingested by liquefying, granulating, encapsulating, and powdering so that it can be consumed (healthy beverage). In addition, in order to use the fermented centella asiatica extract of the present invention in the form of a food additive, it can be prepared and used in the form of a powder or concentrate. In addition, it can be prepared by mixing the fermented centella asiatica extract of the present invention with a known active ingredient known to have antibacterial and antioxidant effects.

본 발명의 병풀 발효 추출물을 건강음료로 이용하는 경우, 상기 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.When using the fermented centella asiatica extract of the present invention as a health drink, the health drink composition may contain various flavoring agents or natural carbohydrates as additional components like conventional drinks. The aforementioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose and fructose; disaccharides such as maltose and sucrose; polysaccharides such as dextrins and cyclodextrins; It may be a sugar alcohol such as xylitol, sorbitol, or erythritol. Sweeteners include natural sweeteners such as thaumatin and stevia extract; Synthetic sweeteners such as saccharin and aspartame may be used. The proportion of the natural carbohydrate is generally about 0.01 to 0.04 g, preferably about 0.02 to 0.03 g per 100 mL of the composition of the present invention.

또한, 본 발명의 병풀 발효 추출물은 항균 및 항산화용 건강기능식품 조성물의 유효성분으로 함유될 수 있는데, 그 양은 항균 및 항산화 작용을 달성하기에 유효한 양으로 특별히 한정되는 것은 아니나, 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%인 것이 바람직하다. 본 발명의 건강기능식품 조성물은 병풀 발효 추출물과 함께 항균 및 항산화에 효과가 있는 것으로 알려진 다른 활성 성분과 함께 혼합하여 제조될 수 있다.In addition, the centella asiatica fermented extract of the present invention may be contained as an active ingredient in the antibacterial and antioxidant health functional food composition, the amount of which is not particularly limited to an effective amount to achieve antibacterial and antioxidant activity, based on the total weight of the total composition It is preferably from 0.01 to 100% by weight relative to. The health functional food composition of the present invention may be prepared by mixing the centella asiatica fermented extract with other active ingredients known to have antibacterial and antioxidant effects.

상기 외에 본 발명의 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강기능식품은 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above, the health functional food of the present invention contains various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid, salts of pectic acid, alginic acid, salts of alginic acid, organic acids, protective colloidal thickeners, pH regulators, stabilizers, and preservatives. , glycerin, alcohol or carbonation agent, and the like. In addition, the health functional food of the present invention may contain fruit flesh for the production of natural fruit juice, fruit juice beverage, or vegetable beverage. These components may be used independently or in combination. The ratio of these additives is not very important, but is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.

또한, 본 발명은 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 반려용품 조성물을 제공할 수 있다. In addition, the present invention can provide an antibacterial and antioxidant companion product composition comprising a fermented centella asiatica extract obtained by inoculating and fermenting a Bacillus safensis strain.

상기 병풀 발효 추출물 내지 항균은 상기 항균 및 항산화용 조성물에서 사용된 개념과 동일하므로 설명은 그 기재로 대신한다. Since the Centella asiatica fermented extract to antibacterial is the same as the concept used in the antibacterial and antioxidant composition, the description is replaced with the description.

본 발명의 반려용품은 반려동물에 필요한 용품을 모두 포함하는 의미이나, 바람직하게는 반려동물을 대상으로 하는 화장품 조성물, 의약외품 조성물, 식품 조성물 또는 건강기능식품 조성물 을 의미할 수 있다. 상기 화장품 조성물, 의약외품 조성물, 식품 조성물 또는 건강기능식품 조성물 에 대한 설명은 상기 기재로 대신한다.The companion product of the present invention includes all necessary products for companion animals, but may preferably mean a cosmetic composition, a quasi-drug composition, a food composition, or a health functional food composition for companion animals. Description of the cosmetic composition, quasi-drug composition, food composition or health functional food composition is replaced with the above description.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 제한되는 것으로 해석하지 않는 것은 해당 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명한 것이다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are only for exemplifying the present invention, and it is obvious to those skilled in the art that the scope of the present invention is not construed as being limited by these examples.

유용미생물 분리 Isolation of useful microorganisms

제주도 야생 개나리에서 신규한 바실러스 사펜시스의 균주를 분리 및 동정하고자 하였다. We tried to isolate and identify a new strain of Bacillus sapensis from wild forsythia in Jeju Island.

구체적으로 제주도 야생 개나리를 멸균한 생리 식염수에 현탁하여 각 해당 선택배지에 각각 도말하였다. 30~37℃ 에서 24 내지 48시간 동안 혐기 조건으로 배양을 진행하며 집락의 형태가 서로 다른 균주들을 선별하여 여러 번의 순수 배양 과정을 통하여 순수 분리하였다. 순수 분리한 균주를 일반세균 배양 고체배지(Plate count agar)에 도말하여 35℃ 에서 24시간 배양하였으며, 순수 분리된 집락을 일반세균 배양 액체배지(Plate count broth)에 배양하여 활성화 시킨 뒤 원심분리하여 균체만을 수득하여 20%(v/v) 글리세롤(glycerol)로 혼합하여 -70℃ 초저온냉동고에 보관하였다.Specifically, wild forsythia from Jeju Island was suspended in sterilized physiological saline and smeared on each corresponding selective medium. Culture was carried out under anaerobic conditions at 30-37 ° C. for 24 to 48 hours, and strains with different colony types were selected and purified through several pure culture processes. The pure isolated strain was plated on a general bacterial culture solid medium (Plate count agar) and cultured at 35 ° C for 24 hours. Only the cells were obtained, mixed with 20% (v / v) glycerol, and stored in a -70 ° C cryogenic freezer.

분리된 균주는 16S rDNA 서열 분석을 통하여 분리 균주(바실러스 사펜시스 AMI-1407, Bacillus safensis AMI-1407)를 동정하였으며, 염기서열 확인은 ㈜솔젠트에 의뢰하여 확인하였다. 균주 분리에 사용한 프라이머는 Universal primer인 27F(5'- AGAGTTTGATCCTGGCTCAG -3', 서열번호 1)와 1492R(5'- GGTTACCTTGTTACGACTT-3', 서열번호 2) 이었다. The isolated strain was identified through 16S rDNA sequence analysis (Bacillus sapensis AMI-1407, Bacillus safensis AMI-1407), and the base sequence was confirmed by requesting Solgent Co., Ltd. Primers used for strain isolation were universal primers 27F (5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG -3', SEQ ID NO: 1) and 1492R (5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3', SEQ ID NO: 2).

병풀 발효물 제조Production of fermented centella asiatica

정제수로 세척하고 건조시킨 병풀 전초를 조분쇄하여 2배의 정제수와 혼합한 뒤 121℃ 15분간 고압 열수추출 하였다. 발효를 위한 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407) 은 멸균된 일반세균배양배지(Plate count broth, 디프코, 미합중국) 또는 천연물 배지를 사용하였으며, 배양이 완료된 후 1 × 107 cfu/㎖ 농도로 병풀 추출물에 접종하였다. 발효는 고상 발효조를 이용하여 3~10일간, 30℃ 및 습도를 유지하며 진행하였다. 발효가 완료된 병풀 발효물은 열풍건조기를 이용하여 12~48시간동안 40℃로 건조하였다.After washing with purified water and drying the centella asiatica plant, it was coarsely pulverized and mixed with twice as much purified water, followed by high-pressure hot water extraction at 121 ° C. for 15 minutes. Bacillus safensis AMI-1407 for fermentation ( Bacillus safensis AMI-1407) was used for sterilized general bacterial culture medium (Plate count broth, Difco, United States of America) or natural product medium, and after culture was completed, 1 × 10 7 cfu / It was inoculated with centella asiatica extract at a concentration of ㎖. Fermentation was carried out using a solid fermenter for 3 to 10 days, maintaining 30 ° C. and humidity. Fermented centella asiatica fermented product was dried at 40 ℃ for 12 to 48 hours using a hot air dryer.

병풀 발효 추출물 제조 Preparation of Centella asiatica fermented extract

<3-1> 병풀 발효 열수추출물 제조 <3-1> Preparation of Centella asiatica fermented hot water extract

상기 <실시예 1> 에서 제조하여 건조한 병풀 발효물의 20배의 용암해수 미네랄수와 혼합한 뒤 121℃ 15분간 고압 열수추출 하였다. The fermented centella asiatica prepared in <Example 1> was mixed with 20 times lava seawater and mineral water, followed by high-pressure hot water extraction at 121 ° C. for 15 minutes.

<3-2> 병풀 발효 에탄올추출물 제조 <3-2> Preparation of Centella asiatica fermented ethanol extract

상기 <실시예 1> 에서 제조하여 건조한 병풀 발효물의 20배의 70% 에탄올과 혼합한 뒤 마그네틱 바를 넣고 교반기 위에서 회전속도 300rpm 정도로 설정하여 3일~7일간 교반추출 하였다.After mixing with 20 times 70% ethanol of the dried centella asiatica prepared in <Example 1>, a magnetic bar was inserted and the rotation speed was set to about 300 rpm on a stirrer, and stirring and extraction were performed for 3 to 7 days.

항산화 활성 확인 - ABTSConfirmation of antioxidant activity - ABTS ++ 라디칼 소거활성 확인 Confirmation of radical scavenging activity

ABTS+[2,2’-아지노-비즈(3-에틸벤조티아졸린-6-술폰산(ABTS+[2,2'-Azino-bis(3-ethyl benzothiazoline-6-sulfonic acid)]) 라디칼 소거활성은 수소 공여 항산화제(hydrogen-donating antioxidants)와 연쇄절단형 항산화제(chainbreaking antioxidants) 모두를 측정할 수 있으며 수용상(aqueous phase)과 유기상(organic phase) 모두에 적용 가능한 측정방법으로, 청록색의 ABTS+용액이 항산화제에 의해 환원되면 무색을 띠는 원리를 이용한 비색측정법이다. ABTS + [2,2'-Azino-bis(3 - ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)] radical scavenging activity is a measurement method that can measure both hydrogen-donating antioxidants and chainbreaking antioxidants and is applicable to both aqueous phase and organic phase. + It is a colorimetry method using the principle that when a solution is reduced by an antioxidant, it becomes colorless.

구체적으로, 7 mM ABTS 용액에 과황화칼륨(potassium persulfate)이 2.45 mM 이 되도록 혼합한 후 암소에서 약 16시간 반응시켜 생성한 청록색의 ABTS+ 용액을 증류수로 희석시켜 준비하였다. 시료는 최고농도 1000 ㎍/㎖ 부터 1/2배씩 희석하여 7개 농도와 용매(무처리군)를 96well plate에 50 ㎕ 씩 넣어주고, 준비한 ABTS+ 용액을 각각 50 ㎕ 씩 넣어준 후, 암소에서 20분간 반응시켜 microplate reader를 이용하여 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. 결과 값은 상기 <실시예 3> 에서 제조한 추출물 시료 처리군과 무처리군을 비교하여 하기 [식 1] 을 이용한 계산을 통해 라디칼의 소거활성을 백분율(%)로 나타냈다.Specifically, a 7 mM ABTS solution was mixed with potassium persulfate to a concentration of 2.45 mM, and then reacted for about 16 hours in the dark to prepare a blue-green ABTS + solution diluted with distilled water. Samples were diluted 1/2-fold from the highest concentration of 1000 μg/ml, and 50 μl of each of the 7 concentrations and the solvent (untreated group) was added to a 96-well plate, and 50 μl of each prepared ABTS + solution was added, and then in the dark After reacting for 20 minutes, absorbance was measured at 700 nm using a microplate reader. The resulting value was expressed as a percentage (%) of radical scavenging activity through calculation using the following [Equation 1] by comparing the treatment group and the untreated group of the extract sample prepared in <Example 3>.

[식 1][Equation 1]

ABTS+ 소거활성(%) = [1 - (실시예 또는 비교예 시료처리군의 흡광도/ 시료 무처리군의 흡광도)] X 100(%)ABTS + scavenging activity (%) = [1 - (absorbance of Example or Comparative Example sample treated group / absorbance of sample untreated group)] X 100 (%)

그 결과, 멸균(열수) 추출방법으로 제조한 병풀 발효 추출물은 B.safensis 접종량을 증가시키더라도 항산화 효과에 영향을 미치지 않았다(도 1). 반면에, 70% EtOH(교반) 추출방법으로 제조한 병풀 발효 추출물은 B.safensis 접종량이 25% 또는 50% 인 경우 1000 ㎍/㎖ 농도에서 항산화 효과가 대조군 대비 각각 6.3% 및 5.0% 증가한 것을 확인할 수 있었다(도 2). As a result, the fermented centella asiatica extract prepared by the sterilization (hot water) extraction method did not affect the antioxidant effect even if the B. safensis inoculation amount was increased (FIG. 1). On the other hand, the fermented centella asiatica extract prepared by the 70% EtOH (stirring) extraction method confirmed that the antioxidant effect increased by 6.3% and 5.0%, respectively, compared to the control group at a concentration of 1000 μg/ml when the inoculation amount of B.safensis was 25% or 50%. could (Fig. 2).

ABTS+ 라디칼 소거활성(%)ABTS + radical scavenging activity (%) 0% 발효
열수추출물
0% fermentation
hot water extract
10% 발효
열수추출물
10% fermentation
hot water extract
25% 발효
열수추출물
25% fermentation
hot water extract
50% 발효
열수추출물
50% fermentation
hot water extract
86.586.5 73.873.8 76.776.7 74.474.4 0% 발효70%에탄올추출물0% fermented 70% ethanol extract 10% 발효
70%에탄올추출물
10% fermentation
70% ethanol extract
25% 발효
70%에탄올추출물
25% fermentation
70% ethanol extract
50% 발효
70%에탄올추출물
50% fermentation
70% ethanol extract
92.492.4 81.181.1 98.798.7 97.497.4

항균 활성 확인 Confirmation of antibacterial activity

본 발명의 병풀 발효 추출물의 여드름 유발 피부상재균에 대한 항균효능을 측정하기 위해, 생장 정지환 확인 방법인 페이퍼 디스크 확산법(Paper disc diffusion assay)방법을 이용하여 분석을 진행하였다.In order to measure the antibacterial efficacy of the fermented centella asiatica extract of the present invention against acne-causing skin fungi, analysis was performed using a paper disc diffusion assay method, which is a method for confirming growth arrest.

프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes ATCC 6919)를 RCM 액체배지에서 48시간 배양한 다음 멸균된 생리식염수(0.9% NaCl)에 1.0×106 cfu/㎖ 수준으로 희석하였다. 희석한 균 배양액을 RCM 고체배지(Agar 1.5%)에 100㎕ 도말한 후(최종 1.0 × 105 cfu/㎖ 수준) 소독한 집게로 Paper disc의 볼록한 부분이 위로 향하게 만든 후 병풀발효물(균주 25% 접종 및 50% 접종) 및 병풀추출물, 양성대조군인 에리스로마이신(erythromycin) 0.01mg/㎖ 및 음성대조군을 각각 40㎕을 injection하고 Paper disc가 떨어지지 않게 잠시 두었다가 뒤집어 혐기조건에서 48시간 배양하여 저해환 생성여부 확인을 통하여 항균력을 확인하였다.Propionibacterium acnes (ATCC 6919) was cultured in RCM liquid medium for 48 hours, and then diluted to a level of 1.0×10 6 cfu/ml in sterile saline (0.9% NaCl). After smearing 100 μl of the diluted bacterial culture on RCM solid medium (Agar 1.5%) (final level of 1.0 × 10 5 cfu/ml), make the convex part of the paper disc face up with sterilized forceps, % inoculation and 50% inoculation) and centella asiatica extract, positive control erythromycin 0.01mg/ml and negative control were injected with 40 μl each, and left for a while so that the paper disc would not fall off, turned over and cultured for 48 hours under anaerobic conditions to prevent inhibition Antibacterial activity was confirmed by checking whether or not it was produced.

그 결과, [도 3] 에서 나타나는 바와 같이 멸균(열수) 추출방법으로 제조한 병풀 발효 추출물은 B.safensis 접종량을 증가시키더라도 항균 효과가 나타나지 않았다. 반면에, 70% EtOH(교반) 추출방법으로 제조한 병풀 발효 추출물은 B.safensis 접종량이 25% 인 경우 100 mg/㎖ 농도에서 항산화 효과가 대조구 대비 증가한 것을 확인할 수 있었다(대조구: 13mm, 25%: 17mm).As a result, as shown in [Fig. 3], the centella asiatica fermented extract prepared by the sterilization (hot water) extraction method did not show an antibacterial effect even if the B. safensis inoculation amount was increased. On the other hand, it was confirmed that the fermented centella asiatica extract prepared by the 70% EtOH (stirring) extraction method had an increased antioxidant effect compared to the control at a concentration of 100 mg/ml when the B.safensis inoculum was 25% (control: 13 mm, 25% : 17mm).

저해환(mm)Low ring (mm) 열수추출물
hot water extract
0% 발효
70%에탄올추출물
0% fermentation
70% ethanol extract
10% 발효 70%에탄올추출물10% fermented 70% ethanol extract 25% 발효 70%에탄올추출물25% fermented 70% ethanol extract 50% 발효 70%에탄올추출물50% fermented 70% ethanol extract 양성대조구(erythromycin)Positive control (erythromycin) 음성대조구
(DW)
voice control phrase
(DW)
음성대조구
(EtOH)
voice control phrase
(EtOH)
음성대조구
(EtOH:DMSO=1:1)
voice control phrase
(EtOH:DMSO=1:1)
00 1313 1313 1717 1515 3535 00 00 00

한국미생물보존센터(국외)Korea Microbial Conservation Center (Overseas) KCCM13051PKCCM13051P 2021092820210928

SEQUENCE LISTING <110> AMI COSMETIC CO., LTD. <120> Antibacterial and antioxidant composition comprising fermented Centella asiatica extract fermented by inoculating Bacillus safensis strain <130> 1069920 <160> 2 <170> PatentIn version 3.2 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Universal primer_27F <400> 1 agagtttgat cctggctcag 20 <210> 2 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Universal primer_1492R <400> 2 ggttaccttg ttacgactt 19 SEQUENCE LISTING <110> AMI COSMETIC CO., LTD. <120> Antibacterial and antioxidant composition comprising fermented Centella asiatica extract fermented by inoculating Bacillus safensis strain <130> 1069920 <160> 2 <170> PatentIn version 3.2 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> Universal primer_27F <400> 1 agagtttgat cctggctcag 20 <210> 2 <211> 19 <212> DNA <213> artificial <220> <223> Universal primer_1492R <400> 2 ggttaccttg ttacgactt 19

Claims (8)

바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 조성물.
Bacillus sapensis ( Bacillus safensis ) Antibacterial and antioxidant composition comprising a fermented centella asiatica extract fermented by inoculating the strain.
제1항에 있어서, 상기 병풀 발효 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출된 것을 특징으로 하는 항균 및 항산화용 조성물.
The antibacterial and antioxidant composition according to claim 1, wherein the centella asiatica fermented extract is extracted using water, an organic solvent, or a mixture thereof as a solvent.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes) 균에 대하여 항균 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 항균 및 항산화용 조성물.
According to claim 1, wherein the composition Propionibacterium acnes ( Propionibacterium acnes ) Antibacterial and antioxidant composition characterized in that it has an antibacterial activity against the bacteria.
제1항에 있어서, 상기 바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주는 수탁번호 KCCM13051P 로 기탁된 바실러스 사펜시스 AMI-1407(Bacillus safensis AMI-1407) 인 것을 특징으로 하는 항균 및 항산화용 조성물.
According to claim 1, wherein the Bacillus sapensis ( Bacillus safensis ) The strain deposited as Bacillus sapensis AMI-1407 accession number KCCM13051P ( Bacillus safensis AMI-1407) characterized in that the antibacterial and antioxidant composition.
바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 화장료 조성물.
Bacillus sapensis ( Bacillus safensis ) Antibacterial and antioxidant cosmetic composition comprising a fermented centella asiatica extract fermented by inoculating the strain.
바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 의약외품 조성물.
Bacillus sapensis ( Bacillus safensis ) Antibacterial and antioxidant quasi-drug composition comprising a fermented centella asiatica extract obtained by inoculation and fermentation.
바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 식품 조성물.
Bacillus sapensis ( Bacillus safensis ) Antibacterial and antioxidant food composition comprising a fermented centella asiatica extract fermented by inoculating the strain.
바실러스 사펜시스(Bacillus safensis) 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항균 및 항산화용 반려용품 조성물.Bacillus sapensis ( Bacillus safensis ) Antibacterial and antioxidative companion product composition comprising a fermented centella asiatica extract fermented by inoculating the strain.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117089480A (en) * 2023-06-20 2023-11-21 广东南芯医疗科技有限公司 Bacillus marinus BH03 and application thereof in preparation of antioxidant and anti-aging products

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