KR20230057590A - 사이클로헥사논을 함유하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 조성물 - Google Patents

사이클로헥사논을 함유하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 조성물 Download PDF

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김미려
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대구한의대학교산학협력단
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Abstract

본 발명은 사이클로헥사논을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 사이클로헥사논은 모유두세포에서 우수한 모발 성장 효과를 나타내므로, 탈모 예방 또는 치료용 약학적 조성물과 탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물 및 탈모 예방 또는 발모 촉진용 식품 조성물로 유용할 수 있다.

Description

사이클로헥사논을 함유하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 조성물{Composition for preventing hair loss or promoting hair growth containing cyclohexanone}
본 발명은 사이클로헥사논을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것이다.
모발은 모근과 모간으로 나뉘며, 모근을 둘러싸고 있는 모낭에서 모발이 생장한다. 모낭에서 생물학적 특성을 조절하는 두 가지 중요한 요소는 모낭상피인 외측모근초 세포 (ORS)와 중간엽 유래의 모유두 (DP)이며, 모주기의 반복을 통하여 모발이 성장하고 탈락하게 된다. 모발은 크게 성장기(anagen), 퇴화기(catagen), 휴지기(telogen)의 3단계를 거치며, 각질층에서 모발은 각각 표피와 모낭의 증식 및 분화를 통하여 만들어지고 탈락되는데 모낭 하부의 결직초 (DP)에는 중간엽 유래의 전이증폭세포가 존재하여 성장기 모낭의 모유두를 유지하는 역할을 한다고 알려져 있다. 다양한 호르몬(testosterone), 사이토카인(cytokines) 및 성장인자(growth factors)가 모발 형태 발생과 모발 성장 조절에 관여한다고 알려져 있다. 모낭의 수와 크기의 증가는 성장기에 관찰되었는데, 휴지기의 모낭은 진피층(dermis)에 위치하는 것과 달리 성장기에는 모낭이 깊은 피하조직(subcutis)에 위치하므로 모낭의 수와 크기의 증가는 성장기와 밀접하게 연관되어 있다.
모발은 외모의 한 부분으로서 대외적인 이미지 개선에 있어 중요한 역할을 하기 때문에, 최근 발모, 양모 및 탈모예방에 대한 연구의 중요성이 높아지고 있는 추세이다. 특히, 생활패턴이 서구화되면서 삶의 질이 개선되고 스트레스가 증가하면서 탈모와 두피질환 등의 고민이 모든 사람의 관심사로 확대되고 있고, 그 원인도 단순한 유전적 요인과 후천적인 요인이 있으며, 이에 대한 중요성과 관심이 점차 커지고 있다. 탈모는 심리적인 위축감 등을 초래하여 대인관계 기피증과 자신감 상실 등으로 이어질 수 있기 때문에 개인의 윤택한 삶 유지에도 많은 영향을 미칠 수 있어 탈모산업 시장은 지속적으로 급성장하고 있는 추세이다.
현재 미국 식품의약품안전청(FDA)으로부터 승인을 받은 대표적인 탈모치료제로는 합성의약품으로 도포용 미녹시딜과 경구용 프로페시아가 있는데, 이들은 몇 가지 부작용들이 지속적으로 보고되고 있다. 프로페시아는 남성호르몬 (testosterone)에서 탈모의 원인물질인 dihydrotestosterone(DHT)으로 변환되는 과정을 억제하여 효과를 나타내지만 남성의 성욕을 감소시킬 수 있다는 문제가 제기되고 있으며 미녹시딜은 고혈압 치료제로 개발되다가 모낭 활성을 통한 모발 성장 촉진이 보고되면서 양모제로 개발되었지만 다양한 피부질환 등의 부작용이 보고되고 있다.
지금까지 연구된 모발성장에 유용한 천연물에는 콩(Glycine linne, isoflavone), 생강 (Zingiber officinale, 6-gingerol), 고추 (Capsicum annuum), 알로에 (Aloe arborescens), 감초 (Glycyrrhiza glabra), 차나무(Camellia sinensis), 은행나무(Ginkgo biloba), 아보카도(Persea americana), 백하수오(Polygonum multiflorum) 등이 보고되어 있다.
기존에 알려진 천연물 선행특허들을 살펴보면, 대한민국 공개특허 10-2014-0115400에서는 붉나무 추출물의 탈모 방지 및 발모 촉진 효과를 개시하고 있다. 또한, 대한민국 공개특허 10-2016-0069488에서는 봉독을 발모 촉진 및 탈모 방지에 이용하는 내용을 개시하고 있다.
그러나, 이와 같은 천연물을 활용하려는 노력에도 불구하고 의약품 대비 낮은 활성으로 인해 발모촉진제 또는 탈모억제제의 상용화는 아직 미미한 수준이다.
이에, 본 발명자들은 탈모 방지 및 발모 촉진을 위한 효과적인 천연 유래 발모제를 개발하기 위한 연구를 수행한 결과, 의이인 유래 정유에 함유되어 있는 사이클로헥사논이 모유두세포에서 모발 성장에 대한 효과가 있음을 알아내고 본 발명을 완성하였다.
한국공개특허 제10-2014-0115400호 한국공개특허 제10-2016-0069488호
본 발명의 목적은 사이클로헥사논을 포함하는 탈모 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 사이클로헥사논을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 사이클로헥사논을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 건강기능식품 및 건강식품 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 사이클로헥사논을 포함하는 탈모 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 사이클로헥사논을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물을 제공한다.
나아가 본 발명은 사이클로헥사논을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
더 나아가 본 발명은 사이클로헥사논을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 건강식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 사이클로헥사논은 모유두세포에서 우수한 모발 성장 효과를 나타내므로, 탈모 예방 또는 치료용 약학적 조성물과 탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물 및 탈모 예방 또는 발모 촉진용 식품 조성물로 유용할 수 있다.
도 1은 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군(증류수) 대비 세포증식율을 측정한 MTT 분석 결과이다.
도 2는 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군 대비 p-Erk/Erk 단백질 발현양을 측정한 결과이다.
도 3은 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군 대비 Wnt3a 단백질 발현양을 측정한 결과이다.
도 4는 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군 대비 p-Akt/Akt 단백질 발현양을 측정한 결과이다.
도 5는 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군 대비 IGF-1 단백질 발현양을 측정한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
탈모 예방 또는 치료용 약학적 조성물
본 발명은 사이클로헥사논(cyclohexanone)을 포함하는 탈모 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 탈모 질환의 발생, 확산 및 재발을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하고, 본 발명에서 사용된 용어 "치료"란 본 발명의 조성물의 투여로 탈모 진행이 지연 또는 멈춰 탈모 증세를 호전시키거나, 모발이 길어지거나 수가 많아지는 등의 발모 및 육모가 촉진되는 등의 탈모 증세를 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 본원의 조성물이 효과가 있는 질환의 정확한 기준을 알고, 개선, 향상 및 치료된 정도를 판단할 수 있을 것이다.
일 구현예에서, 상기 약학적 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸의 경구형 제형, 액상, 크림상, 로션상, 페이스트상 또는 고체상의 경피 국소 도포형 제형(피부 외용제), 좌제, 멸균 주사용액 및 분무제를 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 제형일 수 있다. 바람직하게는 피부 외용제 형태인 것일 수 있다. 상기 피부 외용제는 피부 외부에서 도포되는 어떠한 것이라도 포함될 수 있는 총칭으로서 다양한 제형의 의약품 및 화장품이 여기에 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물의 치료적으로 유효한 양은 여러 요소, 예를 들면 투여방법, 목적부위, 환자의 상태 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 인체에 사용 시 투여량은 안전성 및 효율성을 함께 고려하여 적정량으로 결정되어야 한다. 동물실험을 통해 결정한 유효량으로부터 인간에 사용되는 양을 추정하는 것도 가능하다. 유효한 양의 결정시 고려할 이러한 사항은, 예를 들면 Hardman and Limbird, eds., Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed.(2001), Pergamon Press; 및 E.W. Martin ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed.(1990), Mack Publishing Co.에 기술되어있다.
본 발명의 조성물은 또한 생물학적 제제에 통상적으로 사용되는 담체, 희석제, 부형제 또는 둘 이상의 이들의 조합을 포함할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 조성물을 생체 내 전달에 적합한 것이면 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면, Merck Index, 13th ed., Merck & Co. Inc. 에 기재된 화합물, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 이용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주이용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
본 발명의 조성물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 이때 약제학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바 납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당, 덱스트로스, 소르비톨 및 탈크 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1 중량부 내지 90 중량부 포함되는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 비 경구 투여(예를 들어 정맥 내, 경피, 복강 내 또는 국소에 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다.
본 발명의 조성물의 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 통상적으로 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 다양한 부형제, 예컨대 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 함께 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제 등이 포함된다.
본 발명의 유효물질은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 약학적으로 허용가능한 염이란 표현은 환자에게 비교적 비독성이고 무해한 유효작용을 갖는 농도로서 이 염에 기인한 부작용이 유효물질의 염기 화합물의 이로운 효능을 떨어뜨리지 않는 유효물질의 염기 화합물의 어떠한 유기 또는 무기 부가염을 의미한다. 이들 염은 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 질산, 황산, 과염소산, 인산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 구연산, 초산, 젖산, 말레산, 푸마린산, 글루콘산, 메탄설폰산, 글리콘산, 숙신산, 타타르산, 갈룩투론산, 엠본산, 글루탐산, 아스파르트산, 옥살산, (D) 또는 (L) 말산, 말레산, 메테인설폰산, 에테인설폰산, 4-톨루엔술폰산, 살리실산, 시트르산, 벤조산 또는 말론산 등을 사용할 수 있다. 또한, 이들 염은 알칼리 금속염(나트륨염, 칼륨염 등) 및 알칼리 토금속염(칼슘염, 마그네슘염 등) 등을 포함한다. 예를 들면, 산부가염으로는 아세테이트, 아스파테이트, 벤즈에이트, 베실레이트, 바이카보네이트/카보네이트, 바이설페이트/설페이트, 보레이트, 캄실레이트, 시트레이트, 에디실레이트, 에실레이트, 포메이트, 퓨마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루큐로네이트, 헥사플루오로포스페이트, 하이벤제이트, 하이드로클로라이드/클로라이드, 하이드로브로마이드/브로마이드, 하이드로요오디드/요오디드, 이세티오네이트, 락테이트, 말레이트, 말리에이트, 말로네이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 나프틸레이트, 2-나프실레이트, 니코티네이트, 나이트레이트, 오로테이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/수소 포스페이트/이수소 포스페이트, 사카레이트, 스테아레이트, 석시네이트, 타르트레이트, 토실레이트, 트리플루오로아세테이트, 알루미늄, 알기닌, 벤자틴, 칼슘, 콜린, 디에틸아민, 디올아민, 글라이신, 라이신, 마그네슘, 메글루민, 올아민, 칼륨, 나트륨, 트로메타민, 아연염 등이 포함될 수 있으며, 이들 중 하이드로클로라이드 또는 트리플루오로아세테이트가 바람직하다.
본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면, 유효물질을 유기용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤, 메틸렌클로라이드, 아세토니트릴 등에 녹이고 유기산 또는 무기산을 가하여 생성된 침전물을 여과, 건조하여 제조되거나, 용매와 과량의 산을 감압 증류한 후 건조하거나 유기용매 하에서 결정화시켜셔 제조할 수 있다.
또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 은 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은 염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.
나아가, 본 발명은 유효물질 및 이의 약학적으로 허용되는 염뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 가능한 용매화물, 수화물, 이성질체, 광학 이성질체 등을 모두 포함한다.
탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물
본 발명은 월견자 유래 정유 및 의이인 유래 정유를 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물은 상술한 본 발명의 유효성분의 화장품학적 유효량(cosmetically effective amount) 및 화장품학적으로 허용되는 담체를 포함하여 제조할 수 있다.
화장료 조성물의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 상기 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 헤어토닉, 헤어크림, 헤어팩, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말, 젤, 솔젤, 에멀젼, 오일, 왁스 및 에어로졸로 이루어진 군으로부터 선택되는 형태의 모발 또는 두피용 화장료인 것일 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따르면 유효성분의 함량은 특별히 제한되지 않으나, 본 발명에 따른 정유 혼합물을 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 20 중량%로 포함할 수 있다. 상기 함량을 만족하는 경우 부작용없이 우수한 효능을 나타낼 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에는 상기 정유 혼합물 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에는 또한, 상기 기능성 첨가물과 더불어 필요에 따라 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분을 배합해도 된다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.
탈모 예방 또는 발모 촉진용 건강기능식품 또는 건강식품 조성물
본 발명은 월견자 유래 정유 및 의이인 유래 정유를 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 건강기능식품 또는 건강식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 '기능성'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 통상의 기술분야에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 통상의 기술분야에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품용 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 탈모방지제 또는 발모제의 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다. 예를들어, 상기 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 형태의 식품인 것일 수 있고, 상기 건강식품은 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제에서 선택되는 것일 수 있다.
본 발명의 조성물을 건강기능식품 조성물 또는 건강식품 조성물로 사용하는 경우, 상기 월견자 유래 정유 및 의이인 유래 정유를 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상의 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있으며, 유효성분의 혼합량은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품 또는 건강식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 조성물이 사용될 수 있는 건강기능식품 또는 건강식품의 종류에는 제한이 없다. 아울러 본 발명의 월견자 유래 정유 및 의이인 유래 정유를 포함하는 조성물은 당업자의 선택에 따라 건강기능식품에 함유될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림 류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 정유 혼합물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다.
본 발명의 월견자 유래 정유 및 의이인 유래 정유는 천연 식물을 원료로 하므로 약학적 조성물 또는 식품 조성물로 사용할 경우에도 일반적인 합성 화합물에 비하여 부작용이 덜할 수 있으므로, 안전하게 약학적 조성물, 건강기능식품 및 건강식품에 포함되어 유용하게 사용될 수 있다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
< 실험예 1> 사이클로헥사논의 모발 성장 촉진 효능 분석
모유두세포 배양
Human hair dermal papilla cell(모유두세포, HDPCs)은 Cellbio(모델명: CB-HDP-003, 한국)에서 구매하여 사용하였고, 10% FBS(fetal bovine serum)와 1% penicillin-streptomycin을 첨가한 Low glucose DMEM 배지를 배양액으로 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였다.
재료
세포 배양에 사용한 배지 및 화합물:
Dulbecco's modified Eagel's 배지(DMEM, Hyclone, Logan, Utah, USA)
태아 소 혈청(FBS, Hyclone, Logan, Utah, USA)
페니실린-스트렙토마이신(Hyclone, Logan, Utah, USA)
Western blot에 사용된 1차 항체:
β-actin 항체(Cell Signaling Technology, Boston, Massachusetts, Catalog no.4970)
IGF-1 항체(Novusbio, USA; catalog no.NBP2-16929)
Wnt3a 항체(R&D systems, USA; catalog no.MAB13242-100)
Akt 항체(Cell Signaling Technology; catalog no.2938)
p-Akt 항체(Cell Signaling Technology; catalog no.4060)
Erk 항체(Cell Signaling Technology; cata-log no.9102)
p-Erk 항체(Cell Signaling Technology; catalog no.4376).
Western blot에 사용된 2차 항체:
anti-rabbit IgG 항체(HRP)(GeneTex; catalog no.GTX213110-01)
anti-mouse IgG 항체(HRP)(GeneTex; catalog no.GTX213111-01)
모유도세포의 세포증식 평가방법
세포증식을 분석하기 위해 모유두세포를 96웰 플레이트에 플레이팅하였다(4 x 105 cells/well). 2일의 성장 후, 세포를 48시간 동안 다양한 농도의 사이클로헥사논으로 처리하였다. 1 ㎎/㎖ MTT 분석 용액(3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드, Sigma, St. Louis, MO, USA)을 4시간 동안 첨가하였다. 침전된 세포를 디메틸설폭사이드(DMSO, Sigma, St. Louis, MO, USA)에 용해시키고 570 ㎚에서 ELISA 플레이트 판독기(Multiskan sky high microplate spectrophotometer, Thermo Fisher Scientific, USA)를 사용하여 세포 증식을 측정하였다.
모발 성장 요인으로 알려져 있는 Wnt3a, IGF-1, p-Erk/Erk, and p-Akt/Akt 단백질 발현 정량을 위한 웨스턴블롯 방법
모유두세포를 60㎜ 배양 접시에 접종하였다(2.5 x 106 cells/well). 처리된 세포를 얼음 위의 Halt™ Protease 및 Phosphatase inhibitor cocktail(Thermo Fisher, USA)이 포함된 Radio 면역 침전 분석 완충액(RIPA 완충액, Thermo Fisher, USA)으로 긁어냈다. 4℃에서 30분 동안 13,000 rpm으로 원심분리한 후 상층액을 수집하였다. 단백질 정량은 Bradford 방법을 사용하여 수행한 다음 해당 항체(β-actin, IGF-1, Wnt3a, Akt, phospho-Akt, Erk 및 phospho-Erk)를 사용하여 웨스턴 블롯으로 50 ㎍의 단백질을 분석했다. 각 단백질의 발현 정도는 이미지 분석기(Uvitec Cambridge, Alliance, England, United Kingdom)를 이용하여 분석하였다.
통계 분석
실험성적의 통계적 유의성은 평균±표준편차로 표기하였고, 각 군간의 차이는 SPSS 25(SPSS Inc. USA)프로그램을 사용하였으며, ANOVA, Duncan 검정으로 사후 검정을 실시하여 유의성을 분석하였다. P<0.05 이하인 경우에 유의한 것으로 인정하였으며, 정상군과의 통계학적 유의성을 도면에 표기하였다. 각각의 실험은 모두 적어도 3번 이상 실시하여 통계처리하였다.
모발 성장 촉진 효능을 알아보기 위하여, 모유두세포의 세포증식 효능 평가와 모발 성장 요인으로 알려져 있는 Wnt3a, IGF-1, p-Erk/Erk, and p-Akt/Akt 단백질 발현양을 평가하였다.
(1) 모유두세포(human hair dermal papilla cells, HDPCs)에서 사이클로헥사논의 세포증식 효능 평가
모유두세포의 세포증식에 대한 사이클로헥사논의 효과는 MTT 분석에 의해 평가하였다.
구체적으로, 모유두세포를 다양한 농도의 사이클로헥사논(0.1, 0.5, 1, 5, 10, 25, 50, 100μM), 10 μM MNXD(미녹시딜, 양성 대조군) 및 DW(대조군)로 처리한 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1은 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군(증류수) 대비 세포증식율을 측정한 MTT 분석 결과이다.
도 1에 나타난 바와 같이, 모유두세포(HDPCs)의 세포증식은 사이클로헥사논 처리 농도에 따라 128.97±7.22, 123.33±9.06, 114.87±4.03, 108.46±3.08, 111.15±11.15, 100.38±0.38, 105.0 100.38±0.38에서 HDPCs의 증식을 나타내었다. 사이클로헥사논 처리군은 DW 처리군의 100.00±7.69%에 비해 유의하게 증가하였다. 또한, 0.1μM cyclohexanone 처리군은 MNXD 처리군(127.95±7.77%)에 비해 세포 증식의 유의한 증가를 나타냈다. 이러한 결과는 저용량의 사이클로헥사논 처리가 HDPC의 세포증식을 유도했음을 나타낸다.
(2) 모유두세포에서 p-Erk/Erk 단백질 발현에 대한 사이클로헥사논의 효능 평가
모유두세포에서 p-Erk/Erk 단백질 발현에 대한 사이클로헥사논의 효능을 확인하기 위해 웨스턴 블롯을 수행하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2는 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군 대비 p-Erk/Erk 단백질 발현양을 측정한 결과이다.
도 2에 나타난 바와 같이, p-Erk/Erk의 단백질 발현은 cyclohexanone 처리군에서 각각 272.63±0.14, 288.95±0.08, 422.11±0.03%였다. 또한, 422.11±0.18에서 MNXD 처리군과 1μM 시클로헥사논 처리군은 p-Erk/Erk 단백질 발현이 유사하였다. 이러한 결과는 cyclohexanone이 모유두세포에서 Erk의 인산화를 촉진함을 시사한다.
(3) 모유두세포에서 Wnt3a 단백질 발현에 대한 사이클로헥사논의 효능 평가
모유두세포에서 Wnt3a 단백질 발현에 대한 사이클로헥사논의 효능을 확인하기 위해 웨스턴 블롯을 수행하였고, 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3은 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군 대비 Wnt3a 단백질 발현양을 측정한 결과이다.
도 3에 나타난 바와 같이, Wnt3a의 단백질 발현은 cyclohexanone 0.1, 0.5, 1 μM 처리군에서 275.19±0.67, 254.82±0.75, 115.93±0.09이었다. DW 처리군(100.00±0.06)과 비교하여, 0.1 μM에서 cyclohexanone 처리군이 유의하게 증가하였다. 또한 0.1 및 0.5 μM에서 cyclohexanone 처리군이 MNXD 처리군(211.85±0.10)보다 높았다.
(4) 모유두세포에서 p-Akt/Akt 단백질 발현에 대한 사이클로헥사논의 효능 평가
모유두세포에서 p-Akt/Akt 단백질 발현에 대한 사이클로헥사논의 효능을 확인하기 위해 웨스턴 블롯을 수행하였고, 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4는 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군 대비 p-Akt/Akt 단백질 발현양을 측정한 결과이다.
도 4에 나타난 바와 같이, cyclohexanone 0.1, 0.5, 1 μM 처리군에서 p-Akt/Akt의 단백질 발현을 각각 167.74±0.01, 156.45±0.13, 212.37±0.08로 유의하게 증가시켰다. DW 처리군(100.00±0.02)과 비교하여, cyclohexanone 처리군은 Akt 인산화 수준이 유의하게 증가하였다. 또한, cyclohexanone 1 μM 처리군은 MNXD 10 μM 처리군(216.13±0.03)과 유사한 결과를 나타냈다.
(5) 모유두세포에서 IGF-1 단백질 발현에 대한 사이클로헥사논의 효능 평가
모유두세포에서 IGF-1 단백질 발현에 대한 사이클로헥사논의 효능을 확인하기 위해 웨스턴 블롯을 수행하였고, 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5는 모유두세포에 다양한 농도의 사이클로헥사논 처리에 따른 대조군 대비 IGF-1 단백질 발현양을 측정한 결과이다.
도 5에 나타난 바와 같이, IGF-1의 단백질 발현은 cyclohexanone 0.1, 0.5, 1 μM 처리군에서 각각 330.54±0.12, 263.17±0.12, 263.17±0.02이었다. DW 처리군(100.00±0.05)과 비교하여, cyclohexanone 처리군은 IGF-1의 단백질 수준을 유의하게 증가시켰다. 또한 0.1 μM의 cyclohexanone 처리군이 10 μM의 MNXD 처리군(279.04±0.18) 보다 IGF-1의 단백질 발현양이 높았다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (8)

  1. 사이클로헥사논(cyclohexanone)을 포함하는 탈모 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  2. 사이클로헥사논(cyclohexanone)을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
  3. 사이클로헥사논(cyclohexanone)을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 건강기능식품 조성물.
  4. 사이클로헥사논(cyclohexanone)을 포함하는 탈모 예방 또는 발모 촉진용 건강식품 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 피부 외용제 형태인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  6. 제2항에 있어서,
    상기 화장료는 헤어토닉, 헤어크림, 헤어팩, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말, 젤, 솔젤, 에멀젼, 오일, 왁스 및 에어졸로 이루어진 모발용 화장료에서 선택되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  7. 제3항에 있어서,
    상기 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 형태의 식품인 것을 특징으로 하는 건강기능식품 조성물.
  8. 제4항에 있어서,
    상기 건강식품은 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제에서 선택되는 것을 특징으로 하는 건강식품 조성물.
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