KR20230048514A - 뇌졸중 환자에서 사망의 위험을 감소시키기 위한 페를레칸 및 이의 단편의 용도 - Google Patents

Abstract

본 개시내용은 대혈관 폐색 및 외상성 뇌 손상을 포함하는 뇌졸중과 같은 신경학적 손상으로 인한 대상체에서의 사망의 위험을 감소시키기 위한 페를레칸 조성물의 용도에 관한 것이다. 본 개시내용은 또한 tPA로 치료받은 뇌졸중 환자에서 사망률을 감소시키기 위한 페를레칸 조성물의 용도에 관한 것이다.

Description

뇌졸중 환자에서 사망의 위험을 감소시키기 위한 페를레칸 및 이의 단편의 용도

우선권 주장

본 출원은 2020년 7월 24일에 출원된 미국 가출원 제63/056,059호 및 2020년 8월 5일에 출원된 제63/061,308호에 대한 우선권의 이익을 주장하며, 두 출원 모두의 전체 내용은 본원에 참고로 포함된다.

37 C.F.R. 1.821(c)에 따라, 서열 목록은 2021년 7월 26일에 생성되고 ~39킬로바이트의 크기를 갖는 "STRMP0003WO_ST25.txt"라는 이름의 ASCII 준수 텍스트 파일로 이와 함께 제출된다. 전술한 파일의 내용은 전문이 본원에 참고로 포함된다.

1. 본 개시내용의 분야

본 개시내용은 일반적으로 의학, 혈관 질환 및 신경생물학 분야에 관한 것이다. 보다 특히, 본 개시내용은 뇌졸중(stroke)을 앓고 있는 환자, 특히 전방 대뇌 혈관구조(anterior cerebral vasculature)의 대혈관 폐색(large vessel occlusion)을 특징으로 하는 허혈성 뇌졸중(ischemic stroke)을 앓고 있는 환자에서 사망(mortality)의 위험을 감소시키기 위한 페를레칸(perlecan) 및 이의 단편의 용도에 관한 것이다.

2. 배경

매년 미국에서 795,000명 이상의 사람들이 뇌졸중을 앓고 있으며 이들 대상체(subject) 중 약 140,000명이 사망하여, 연간 사망자 20명 중 1명을 차지한다. 사실, 미국에서 누군가는 40초마다 뇌졸중이 발생하고 4분마다 누군가는 뇌졸중으로 사망한다. 뇌졸중으로 인해 미국은 의료 서비스 비용, 뇌졸중 치료제 및 결근 일수를 포함하여 매년 추정 340억 달러의 비용이 든다. 뇌졸중은 또한 심각한 장기 장애의 주요 원인이어서, 65세 이상 뇌졸중 생존자의 절반 이상에서 기동성이 감소한다.

모든 뇌졸중의 약 87%는 뇌로의 혈류가 차단되는 허혈성 뇌졸중이다. 대조적으로, 출혈성 뇌졸중은 출혈로부터 야기된다. 뇌졸중에 대한 치료 옵션은 제한적이며 가장 일반적으로 사용되는 치료법 중 일부 - 아스피린 및 조직 플라스미노겐 활성제 - 는 사건 초기에 사용해야 하며 그렇지 않으면 추가 손상을 일으킬 수 있다. 따라서, 뇌졸중을 치료하고 뇌졸중이 존재하는 심각한 사망의 위험, 특히 개입을 위한 "초기" 창 밖의 사망의 위험을 감소시키기 위한 개선된 방법이 절실히 필요하다.

요지

따라서, 본 개시내용에 따르면, 신경학적 손상(neurological injury)을 앓고 있거나 신경학적 손상의 위험이 있는 대상체에게 페를레칸 도메인(perlecan domain) V 또는 이의 기능적 단편(functional fragment)을 포함하는 조성물을 투여함을 포함하여, 상기 대상체에서 사망의 위험을 감소시키는 방법이 제공되며, 여기서 상태(condition)는 신경변성 질환(neurodegenerative disease)이 아니다. 상기 기능적 단편은 LG3일 수 있다. 예컨대 상기 대상체가 이전에 뇌졸중을 앓았거나, 심방 세동(atrial fibrillation)이 있거나, 당뇨병(diabetes)이 있거나, 고혈압(hypertension)이 있거나, 암(cancer)이 있거나, SARS-Cov-2 또는 이의 변종과 같은 바이러스 감염이 있기 때문에 상기 대상체가 뇌졸중을 앓고 있을 수 있거나 뇌졸중의 위험이 있다. 뇌졸중은 대혈관 폐색으로 인한 것과 같은 허혈성 뇌졸중일 수 있다. 대혈관 폐색은 전방 대뇌 혈관구조에 위치할 수 있다. 뇌졸중은 출혈성 뇌졸중일 수 있다. 대안적으로, 대상체는 뇌진탕성 폭발(concussive blast) 또는 둔기 충격 외상(blunt impact trauma)에 의해 유발되는 것과 같은 외상성 뇌 손상(traumatic brain injury)을 앓을 수 있다.

투여는 복강내 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여, 척수강내 투여, 두개내 투여, 골내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 또는 경구(협측) 투여를 포함할 수 있다. 대상체는 조직 플라스미노겐 활성제와 같은 혈전용해 요법을 받았거나 받고 있을 수 있다. 조성물은 1회 이상, 예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10회 투여될 수 있다. 조성물은 매일 2회(예를 들어 12시간마다), 매일, 격일마다, 3일마다, 주 2회, 매주, 격주, 매월 2회 또는 매월 투여될 수 있다. 상기 방법은 혈전용해 요법 이외의 제2 항뇌졸중 요법(ant-stroke therapy)을 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.

또한, 뇌졸중을 앓고 있고 혈전용해 또는 색전용해 요법을 받고 있는 대상체에게 페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편을 투여함을 포함하여 상기 대상체에서 사망의 위험을 감소시키는 방법이 제공된다. 상기 기능적 단편은 LG3일 수 있다. 뇌졸중은 대혈관 폐색으로 인한 것과 같은 허혈성 뇌졸중일 수 있다. 대혈관 폐색은 전방 대뇌 혈관구조에 위치할 수 있다. 뇌졸중은 출혈성 뇌졸중일 수 있다.

투여는 복강내 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여, 척수강내 투여, 두개내 투여, 골내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 또는 경구(협측) 투여를 포함할 수 있다. 상기 혈전용해 요법은 조직 플라스미노겐 활성제일 수 있다. 조성물은 1회 이상, 예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10회 투여될 수 있다. 조성물은 매일 2회(예를 들어 12시간마다), 매일, 격일마다, 3일마다, 주 2회, 매주, 격주, 매월 2회 또는 매월 투여될 수 있다. 상기 방법은 혈전용해/색전용해 요법 이외의 제2 항뇌졸중 요법을 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 혈전용해/색전용해 요법은 상기 뇌졸중 발생 3시간 이내에 투여되거나 상기 뇌졸중 발생 후 3시간 이상 투여될 수 있다. 이것은 뇌졸중 요법에서 혈전용해제/색전용해제의 사용을 위한 범위를 효과적으로 확장하는 역할을 한다.

또 다른 실시양태에서, 뇌졸중을 앓고 있는 대상체에게 (a) 페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편 및 (b) 혈전절제술(thrombectomy) 또는 색전절제술(embolectomy)로 치료함을 포함하여 상기 대상체에서 사망의 위험을 감소시키는 방법이 제공된다. 상기 기능적 단편은 LG3일 수 있다. 뇌졸중은 대혈관 폐색으로 인한 것과 같은 허혈성 뇌졸중일 수 있다. 대혈관 폐색은 전방 대뇌 혈관구조에 위치할 수 있다. 뇌졸중은 출혈성 뇌졸중일 수 있다. 투여는 복강내 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여, 척수강내 투여, 두개내 투여, 골내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 또는 경구(협측) 투여를 포함할 수 있다.

페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편은 1회 이상, 예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10회 투여될 수 있다. 페를레칸 도메인 V 또는 기능적 단편은 매일 2회(예를 들어 12시간마다), 매일, 격일마다, 3일마다, 주 2회, 매주, 격주, 매월 2회 또는 매월 투여될 수 있다. 상기 방법은 혈전절제술/색전절제술 이외의 추가의 항뇌졸중 요법을 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 혈전절제술/색전절제술은 상기 뇌졸중 발생한지 3시간 이내에 수행될 수 있다. 혈전절제술/색전절제술 요법은 상기 뇌졸중 발생한지 3시간 이상 후에 수행될 수 있다. 이것은 뇌졸중 요법에서 혈전절제술/색전절제술의 사용을 위한 범위를 효과적으로 확장하는 역할을 한다.

또한 이식 물질(transplant material)을 (a) 페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편과 배씽(bathing), 배양(incubating), 주입(infusing), 주사(injecting) 또는 달리 접촉시키는 것을 포함하여 이식 물질을 치료, 보존 또는 안정화하는 방법이 제공된다.

청구항 및/또는 명세서에서 용어 "포함하는(comprising)"과 함께 사용될 때 단어 "a" 또는 "an"의 사용은 "하나"를 의미할 수 있지만, 이는 또한 "하나 이상", "적어도 하나" 및 "하나 또는 하나 이상"의 의미와 일치한다. "약"이라는 단어는 명시된 숫자의 플러스 또는 마이너스 5%를 의미한다.

본원에 기재된 임의의 방법 또는 조성물이 본원에 기재된 임의의 다른 방법 또는 조성물에 대하여 구현될 수 있는 것으로 고려된다. 본 개시내용의 다른 목적, 특징 및 장점은 하기 상세한 설명으로부터 명백해질 것이다. 그러나, 상세한 설명 및 특정 실시예들은, 본 개시내용의 특정 실시양태들을 나타내기는 하지만, 본 개시내용의 사상 및 범위 내의 다양한 변경 및 수정들이 이러한 상세한 설명으로부터 당업계의 숙련가들에게 명백해질 것이기 때문에 단지 예시로서 주어진 것임을 이해해야 한다.

하기 도면들은 본 명세서의 일부를 형성하며, 본 개시내용의 특정 측면들을 추가로 입증하기 위해 포함된다. 본 개시내용은 본원에 제시된 특정 실시양태의 상세한 설명과 함께 이들 도면들 중 하나 이상을 참조함으로써 더 잘 이해될 수 있다.
도 1a 내지 d. tPA-유도된 뇌졸중-후 출혈로부터의 LG3 보호: 뇌졸중-후 3일차에 1/10 LG3/tPA 병용투여 연구의 총 부검에서는 MCA에서 두개골을 빠져나와 뇌와 두개골 안팎에서 응고된 대량 출혈/피가 나타났다. TTC에서는 뇌가 출혈 및 뇌졸중으로 인한 손상으로부터 보호되었으며 병변 크기는 60분 CCA-MCA 폐색을 받는 LG3-처리된 마우스에 대해 예상 값 내에서 측정된 것으로 나타났다. 6mg/kg으로 투여됨.
도 2. tMCAO 후 체질량의 변화: 체중은 내벽 필라멘트를 통한 60분 MCA 폐색 후 7일 동안 매일 기록하였다. LG3 처리는 비히클-처리된 대조군에 비해 유의하게 덜한 체중 감소를 야기하였고 뇌졸중 후 급성 체중 회복을 가속화하였다. 6mg/kg으로 투여됨.
도 3. 사망률 평가를 위한 카플란-마이어 플롯: 도 2에 기재된 실험에 대한 생존 데이터를 기록하였다. 분석 결과 LG3-처리는 비히클-처리된 대조군에 비해 유의하게 개선된 생존율을 야기하였다. 6mg/kg으로 투여됨.

예시적인 실시양태의 설명

상기 논의된 바와 같이, 뇌졸중은 미국에서 사망률의 중요한 원인이며 이는 일반적으로 전 세계에도 해당된다. 또한, 이것은 지원 치료의 필요성을 감안할 때 의료 제공자와 병원에 상당한 부담을 준다. 급성기 및 회복기 모두에서 뇌졸중 환자를 치료하는 데 드는 비용은 엄청나다.

여기서, 본 발명자들은, 페를레칸 도메인 V(PDV) 및 이의 단편, LG3의 이전에 알려진 신경보호 효과에 더하여, 이들 제제가 또한 사망을 초래할 가능성이 있는 뇌졸중과 연관된 치명적인 사건으로부터 환자를 보호할 수 있음을 알아내었다. 이러한 신규한 발견은 적절한 환자에게 PDV 및 LG3를 적용하는 것이 단순히 뇌졸중 동안 및 뇌졸중 후 뇌 조직에 대한 손상을 제한하는 것 이상을 할 수 있을 뿐만 아니라 주요 허혈성 및/또는 출혈성 사건으로 인한 사망의 위험을 실질적으로 감소시킬 수 있음을 시사한다.

인간 재조합 DV는 질병의 동물 모델 및 특히 병리학적 조직의 본거지에서 내약성이 우수하고 독성이 없는 것으로 이미 나타났다는 것을 주지하는 것이 중요하다(Bix et al., J. Natl. Cancer Inst. 98.22 (2006): 1634-46). 이러한 결과는 DV가 혈액 및 CSF 프로테옴에서 쉽게 발견되는 자연 발생 단백질 단편이라는 사실에 의해 설명될 수 있다(Bix & Iozzo, Microsc. Res. Tech. 71.5 (2008): 339-48). 이전 실험에서도 DV 및 LG3가 혈액 뇌 장벽을 횡단할 수 있는 것으로 나타났다.

본 개시내용의 이들 및 다른 측면들은 이하에서 상세히 설명된다.

I. 신경학적 손상

A. 뇌졸중 및 관련 뇌 손상

뇌졸중은 뇌로의 불량한 혈류가 세포 사멸을 유발하는 의학적 상태이다. 뇌졸중에는 두 가지 주요 유형이 있다: 혈류 부족으로 인한 허혈성 뇌졸중 및 출혈로 인한 출혈성 뇌졸중. 둘 다 뇌의 일부가 제대로 기능하지 못하게 한다. 뇌졸중의 징후 및 증상은 신체의 한쪽을 움직이거나 느낄 수 없음, 이해 또는 말하기 문제, 현기증, 또는 한쪽 시력 상실을 포함할 수 있다. 징후 및 증상은 종종 뇌졸중이 발생한 직후에 나타난다. 증상이 1 또는 2시간 미만으로 지속되면, 뇌졸중은 미니-뇌졸중이라고도 하는 일과성 허혈 발작(transient ischemic attack, TIA)이다. 출혈성 뇌졸중은 또한 심한 두통과 관련이 있을 수 있다. 뇌졸중의 증상은 영구적 일 수 있다. 장기적인 합병증은 폐렴 및 방광 조절 상실을 포함할 수 있다.

뇌졸중의 주요 위험 요소는 고혈압이다. 다른 위험 요소는 담배 흡연, 비만, 고 혈중 콜레스테롤, 당뇨병, 이전 TIA, 말기 신장 질환 및 심방 세동을 포함한다. 허혈성 뇌졸중은 전형적으로 혈관이 막혀 발생하지만, 덜 일반적인 원인도 있다. 출혈성 뇌졸중은 뇌로 직접 출혈하거나 뇌막 사이의 공간으로 출혈하여 발생한다. 출혈은 파열된 뇌 동맥류로 인해 발생할 수 있다. 진단은 전형적으로 신체 검사를 기반으로 하며 CT 스캔 또는 MRI 스캔과 같은 의료 영상으로 지원된다. CT 스캔은 출혈을 배제할 수 있지만 초기에 전형적으로 CT 스캔에 나타나지 않는 허혈을 반드시 배제하지는 않을 수 있다. 심전도(ECG) 및 혈액 검사와 같은 다른 검사는 위험 요소를 결정하고 다른 가능한 원인을 배제하기 위해 수행된다. 저혈당이 유사한 증상을 유발할 수 있다.

예방은 위험 요인 감소, 문제가 있는 경동맥 협착이 있는 사람에서 뇌로 가는 동맥을 개방하는 수술, 및 심방 세동을 가진 사람에서 와파린을 포함한다. 아스피린 또는 스타틴은 예방을 위해 의사가 권장할 수 있다. 뇌졸중 또는 TIA는 종종 응급 치료를 필요로 한다. 허혈성 뇌졸중은 3 내지 4시간 30분 이내에 발견되면 혈전을 분해할 수 있는 약물로 치료할 수 있다. 일부 출혈성 뇌졸중은 수술로부터 혜택을 받는다. 상실된 기능의 회복을 시도하는 치료를 뇌졸중 재활이라고 하며, 이상적으로는 뇌졸중 병동에서 이루어진다; 그러나, 이들은 세계의 많은 지역에서 이용 가능하지 않다.

2013년에는 약 690만 명이 허혈성 뇌졸중을 앓았고 340만 명이 출혈성 뇌졸중을 앓았다. 2015년에는 이전에 뇌졸중을 앓았지만 아직 살아있는 사람은 약 4,240만 명이었다. 1990년과 2010년 사이에 매년 발생하는 뇌졸중 건수는 선진국에서는 약 10% 감소하였으며 개발 도상국에서는 10% 증가하였다. 2015년에, 뇌졸중은 관상 동맥 질환 다음으로 두 번째로 빈번한 사망 원인이었으며, 630만 명(전체의 11%)을 차지하였다. 약 300만 명이 허혈성 뇌졸중으로 사망하였으며 330만 명이 출혈성 뇌졸중으로 사망하였다. 뇌졸중을 앓은 사람들의 약 절반은 1년 미만으로 생존한다. 전반적으로, 뇌졸중의 3분의 2는 65세 이상에서 발생하였다.

뇌졸중은 두 가지 주요 범주로 분류할 수 있다: 허혈성 및 출혈성. 허혈성 뇌졸중은 뇌로의 혈액 공급 중단으로 인해 발생하는 반면 출혈성 뇌졸중은 혈관 파열 또는 비정상적인 혈관 구조로 인해 발생한다. 뇌졸중의 약 87%는 허혈성이고 나머지는 출혈성이다. 출혈은 "출혈성 변형"으로 알려진 상태인 허혈 부위 내부에서 발생할 수 있다. 얼마나 많은 출혈성 뇌졸중이 실제로 허혈성 뇌졸중으로 시작되는지는 알려져 있지 않다.

허혈성 뇌졸중에서는 뇌의 일부로의 혈액 공급이 감소하여 해당 부위의 뇌 조직의 기능 장애를 유발한다. 이것이 일어날 수 있는 네 가지 이유가 있다:

혈전증(thrombosis)(국소적으로 형성되는 혈전에 의한 혈관 폐색)

색전증(embolism)(신체의 다른 곳에서 색전으로 인한 폐색)

전신 저관류(systemic hypoperfusion)(혈액 공급의 일반적인 감소, 예를 들어, 쇼크에서)

대뇌 정맥동 혈전증(cerebral venous sinus thrombosis).

명백한 설명이 없는 뇌졸중은 (알려지지 않은 기원의) 원인불명(cryptogenic)이라고 한다; 이것은 모든 허혈성 뇌졸중의 30-40%를 차지한다.

급성 허혈성 뇌졸중에 대한 다양한 분류 시스템이 있다. 옥스포드 지역사회 뇌졸중 프로젝트 분류(Oxford Community Stroke Project classification)(OCSP, 뱀포드 또는 옥스포드 분류라고도 함)는 주로 초기 증상에 의존한다: 증상의 정도에 기반하여, 뇌졸중 에피소드는 총 전방 순환 경색(total anterior circulation infarct, TACI), 부분 전방 순환 경색(partial anterior circulation infarct, PACI), 열공 경색(lacunar infarct, LACI) 또는 후방 순환 경색(posterior circulation infarct, POCI)으로 분류된다. 이러한 네 가지 개체는 뇌졸중의 정도, 영향을 받는 뇌 영역, 근본 원인 및 예후를 예측한다. TOAST(Trial of Org 10172 in Acute Stroke Treatment) 분류는 임상 증상 뿐만 아니라 추가 조사 결과에 기반한다: 이러한 기준에 따라, 뇌졸중은 (1) 큰 동맥의 죽상경화증으로 인한 혈전증 또는 색전증, (2) 심장에서 기원하는 색전증, (3) 작은 혈관의 완전한 막힘, (4) 기타 결정된 원인, (5) 미확인 원인(두 가지 가능한 원인, 확인된 원인 없음, 또는 불완전한 조사). 코카인 및 메탐페타민과 같은 각성제 사용자는 허혈성 뇌졸중의 위험이 높다.

출혈성 뇌졸중에는 두 가지 주요 유형이 있다. 첫 번째는 뇌실질내 출혈(intraparenchymal hemorrhage)(뇌 조직 내 출혈) 또는 뇌실내 출혈(intraventricular hemorrhage)(뇌의 심실 시스템 내 출혈)로 인한 기본적으로 뇌 자체 내의 출혈(뇌의 동맥이 파열되어 주변 조직에 혈액이 넘침)인 뇌내 출혈이다. 두 번째는 기본적으로 뇌 조직 외부에서 발생하지만 여전히 두개골 내에서 발생하며 정확히는 지주막과 연막(뇌를 둘러싸고 있는 수막의 세 개의 층 중 섬세한 가장 안쪽 층) 사이에서 발생하는 출혈인 지주막하 출혈이다.

이러한 두 가지 주요 유형의 출혈성 뇌졸중은 또한 두개내 출혈의 두 가지 상이한 형태이며, 이는 두개 원개(cranial vault) 내의 어느 곳에 혈액이 축적되는 것이며; 그러나 경막외 혈종(epidural hematoma)(뇌를 둘러싸고 있는 수막의 가장 두꺼운 바깥쪽 층인 경막과 두개골 사이의 출혈) 및 경막하 혈종(subdural hematoma)(경막하 공간에서의 출혈)과 같은 다른 형태의 두개내 출혈은 "출혈성 뇌졸중"으로 간주되지 않는다. 출혈성 뇌졸중은 뇌 아밀로이드 혈관병증(cerebral amyloid angiopathy), 뇌 동정맥 기형(cerebral arteriovenous malformation) 및 두개내 동맥류(intracranial aneurysm)와 같은 뇌 혈관의 변화를 배경으로 발생할 수 있으며, 이는 뇌실질내 또는 지주막하 출혈을 유발할 수 있다.

신경학적 장애 외에도, 출혈성 뇌졸중은 통상적으로 특정 증상을 유발하거나(예를 들어, 지주막하 출혈은 고전적으로 벼락 두통(thunderclap headache)으로 알려진 심한 두통을 유발함) 이전 두부 손상의 증거를 나타낸다. 뇌졸중 증상은 전형적으로 몇 초에서 몇 분에 걸쳐 갑자기 시작되며, 대부분의 경우 더 이상 진행되지 않는다. 증상은 영향을 받는 뇌 영역에 따라 좌우된다. 영향을 받는 뇌 영역이 넓을수록 더 많은 기능이 상실될 수 있다. 일부 형태의 뇌졸중은 추가 증상을 유발할 수 있다. 예를 들면, 두개내 출혈에서, 영향을 받는 영역은 다른 구조를 압박할 수 있다. 대부분의 뇌졸중 형태는 지주막하 출혈 및 뇌 정맥 혈전증 및 때때로 뇌내 출혈을 제외하고는 두통과 관련이 없다.

뇌졸중 증상은 전형적으로 몇 초에서 몇 분에 걸쳐 갑자기 시작되며, 대부분의 경우 더 이상 진행되지 않는다. 증상은 영향을 받는 뇌 영역에 따라 좌우된다. 영향을 받는 뇌 영역이 넓을수록 더 많은 기능이 상실될 수 있다. 일부 형태의 뇌졸중은 추가 증상을 유발할 수 있다. 예를 들면, 두개내 출혈에서, 영향을 받는 영역은 다른 구조를 압박할 수 있다. 대부분의 뇌졸중 형태는 지주막하 출혈 및 뇌 정맥 혈전증 및 때때로 뇌내 출혈을 제외하고는 두통과 관련이 없다.

허혈성 뇌졸중의 경우, 아스피린은 전반적인 재발 위험을 13% 감소시켜 조기에 더 큰 이점을 제공한다. 처음 몇 시간 내의 결정적 치료(definitive therapy)는 혈전을 분해하거나(혈전용해) 기계적으로 제거하여(혈전절제술) 막힘을 제거하는 것을 목표로 한다. 처음 몇 시간 동안의 엄격한 혈당 조절은 결과를 개선하지 않으며 해를 끼칠 수 있다. 고혈압에는 또한 도움이 되지 않는 것으로 밝혀졌기 때문에 고혈압은 일반적으로 낮아지지 않는다. 많은 아시아 및 유럽 국가에서 급성 허혈성 뇌졸중을 치료하는 데 사용되는 돼지 뇌 조직의 혼합물인 세레브롤리신은 결과를 개선하지 않으며 심각한 부작용의 위험을 증가시킬 수 있다.

급성 허혈성 뇌졸중에서 재조합 조직 플라스미노겐 활성제(rtPA, tPA)를 사용하는 것과 같은 혈전용해술은 증상 발병 3시간 이내에 제공될 때 장애 없이 생활하는 것과 관련하여 전반적으로 10%의 이점이 초래된다. 그러나, 생존 가능성을 개선하지는 않는다. 혜택은 일찍 사용할수록 커진다. 3시간 내지 4시간 30분 사이에는 효과가 덜 명확하다. AHA/ASA는 이 기간에 특정 사람들에게 권장된다. 4시간 30분 후 혈전용해는 결과를 악화시킨다. 이러한 혜택 또는 혜택 부족은 치료받는 사람의 연령에 관계없이 발생하였다. 치료 후 두개내 출혈이 있는 사람과 그렇지 않은 사람을 결정할 수 있는 신뢰할 수 있는 방법은 없다. 4.5시간 내지 9시간 사이에 의료 영상에서 구할 수 있는 조직의 소견이 있거나 뇌졸중으로 깨어난 사람들에서, 알테플라제(tPA)가 약간의 혜택을 야기한다. tPA는 미국 심장 협회, 미국 응급 의사 협회 및 미국 신경학 아카데미에서 다른 금기사항(예를 들어 비정상적인 실험실 값, 고혈압 또는 최근 수술)이 없는 한 증상 발병 3시간 이내에 급성 뇌졸중에 권장되는 치료법으로 승인되었다. 카테터가 동맥을 통해 뇌로 전달되고 혈전증 부위에 약물을 주입하는 동맥내 섬유소용해술은 급성 허혈성 뇌졸중을 가진 사람에서 결과를 개선하는 것으로 밝혀졌다.

기계적 혈전절제술이라고 하는 허혈성 뇌졸중을 유발하는 혈전의 기계적 제거는 중뇌 동맥과 같은 큰 동맥의 폐색에 대한 잠재적인 치료법이다. 2015년에, 한 리뷰에서는 증상 발병 12시간 이내에 수행할 경우 이 시술의 안전성 및 효능을 입증하였다. 이것은 사망의 위험을 변화시키지는 않았지만 기계적 혈전절제술에 대해 평가된 사람들에서 일반적으로 사용되는 정맥내 혈전용해술의 사용에 비해 장애를 감소시켰다. 특정 경우에는 증상이 시작된 후 최대 24 시간까지 혈전절제술로부터 혜택을 받을 수 있다.

뇌의 많은 부분에 영향을 미치는 허혈성 뇌졸중은 주변 조직의 2차 뇌 손상과 함께 심각한 뇌 팽윤을 유발할 수 있다. 이 현상은 주로 혈액 공급을 위해 중뇌 동맥에 의존하는 뇌 조직에 영향을 미치는 뇌졸중에서 발생하며 예후가 좋지 않기 때문에 "악성 뇌경색"이라고도 한다. 압력의 완화는 약물로 시도할 수 있지만, 일부는 머리의 한쪽에 있는 두개골을 일시적으로 외과적으로 제거하는 편개두술(hemicraniectomy)이 필요한다. 이것은 사망의 위험을 감소시키지만, 그렇지 않으면 사망했을 일부 사람들은 장애를 갖고 생존한다.

출혈성 뇌졸중의 경우, 뇌내 출혈이 있는 사람은 필요한 경우 혈압 조절을 포함한 지지 치료가 필요한다. 사람들은 의식 수준의 변화를 모니터링하고 이들의 혈당 및 산소 공급을 최적의 수준으로 유지한다. 항응고제 및 항혈전제는 출혈을 악화시킬 수 있으며 일반적으로 중단된다(가능하면 역전). 혈액을 제거하고 근본 원인을 치료하기 위해 신경외과적 개입의 혜택을 받을 수 있지만, 이는 출혈의 위치와 크기 뿐만 아니라 환자 관련 요인에 따라 좌우되며, 뇌내 출혈을 가진 사람들이 어떤 혜택을 볼 수 있는지에 대한 지속적인 연구가 진행되고 있다.

지주막하 출혈에서, 근본적인 뇌 동맥류에 대한 조기 치료는 추가 출혈의 위험을 감소시킬 수 있다. 동맥류 부위에 따라 이것은 두개골을 여는 것을 수반하는 수술에 의해 혈관내(혈관을 통해) 수술에 의해 이루어질 수 있다.

B. 외상성 뇌 손상

외상성 뇌 손상은 통상적으로 머리 또는 몸에 격렬한 타격이나 충격으로 인해 발생한다. TBI는 또한 궁극적으로 뇌 세포 사멸로 이어지는 총알 또는 부서진 두개골 조각과 같이 뇌 조직을 관통하는 물체에 의해 발생할 수 있다. TBI를 유발하는 일반적인 사건은 낙상, 차량 관련 충돌, 폭력, 스포츠 부상, 폭발물 폭발 또는 기타 전투 부상을 포함한다. TBI는 멍, 조직 찢어짐, 출혈 및 기타 뇌에 대한 물리적 손상을 초래할 수 있으며, 이것은 장기적인 합병증 또는 사망으로 이어질 수 있다. 증상은 의식 상실, 반복되는 구토, 발작, 조정 능력 상실, 심각한 착락, 어늘한 말을 포함할 수 있다. 연구 조사에서는 반복적이거나 심각한 TBI는 알츠하이머병/AD 및 파킨슨병/PD를 포함한 신경퇴행성 질환의 위험을 증가시킬 수 있는 것으로 시사되었다.

II. 대혈관 폐색

상기 주지된 바와 같이, 허혈성 뇌졸중은 모든 뇌졸중의 80% 이상의 원인이 된다. 허혈성 뇌졸중의 특정 범주는 대혈관의 폐색으로부터 야기되고, 따라서 "대혈관 폐색(large vessel occlusion)" 또는 LVO라고 하며, 작은 혈관-관련 뇌졸중보다 유의하게 더 높은 이환율과 사망률을 갖는다. 또한, 더 큰 응고 부담으로 인해 LVO를 나타내는 환자에서 치료가 덜 효과적인 경향이 있다. 혈전을 제거하는 특수 혈관내 요법이 LVO에 사용되어 왔지만, 어렵고 시간-소모적이며 위험이 없는 것은 아니다. 따라서, LVO는 본원에 개시된 조성물 및 방법에 대한 특히 중요한 적용이다.

급성 LVO의 4가지 메커니즘이 확인되었다. 첫 번째는 두개내 동맥의 죽상판 파열로 인한 현장 폐색(in situ occlusion)이다. 두 번째는 협착, 죽상판 파열을 갖는 궤양 또는 절개에 의해 영향을 받는 두개외 동맥으로부터 색전 조각이 발생하는 동맥-동맥 색전증(artery-to-artery embolism)이다. 세 번째는 종종 심방 세동에 의해 발생하는 심장으로부터 기원하는 색전증이다. 넷째, 잠재 발작성 심방 세동으로부터 발생하는 것으로 의심되는 원인을 알 수 없는("원인불명") LVO가 있다. 이러한 네 가지 메커니즘으로부터의 LVO의 발생률은 다양하다.

LVO의 한 유형은 전방 대뇌 동맥(ACA)으로부터의 혈액 공급이 제한되어 해당 혈관에 의해 공급되는 뇌의 부분: 전두엽과 두정엽의 내측 측면, 기저핵, 전뇌궁 및 전뇌량의 기능 감소를 야기하는 상태인 전방 대뇌 동맥 증후군(anterior cerebral artery syndrome)이다. 폐색의 부위 및 중증도에 따라, 징후 및 증상은 ACA 증후군에 영향을 받는 인구 내에서 다를 수 있다. 혈관의 근위 (A1) 부분이 막히면 반대쪽 반구로부터 전교통 동맥을 통한 부수적인 혈류로 인해 약간의 결손 만 발생한다. 이 부분의 원위 폐색은 ACA 증후군의 더 심각한 발현을 초래할 것이다. 하지의 반대쪽 편마비 및 반감각 상실은 ACA 증후군과 관련된 가장 흔한 증상이다. LVO/ACA는 본원에 개시된 조성물 및 방법에 대한 또 다른 중요한 적용이다.

III. 페를레칸 및 도메인 V(DV)

인간 페를레칸 단백질의 아미노산 서열에는 Swiss-Prot 수탁 번호 P98160(서열 1)이 할당되었다. 잔기 3658 내지 4391의 아미노산 서열이 도메인 V(DV)를 구성한다. 위치 4331에서 S에서 N으로의 아미노산 변화를 포함하여 Swiss-Prot 데이터베이스에 P98160에 대해 여러 자연 발생 변이체가 나열되어 있다. 본 발명자들은 천연 전장 DV에서 발견되지 않는, 위치 3780, 3836 및 4068에서의 N에서 Q로의 치환이 치료 잠재력을 갖는다는 것을 입증하였다. 따라서, DV 및 LG3의 탈글리코실화 돌연변이체가 또한 개시된다. DV는 하기 영역으로 세분된다: 잔기 3663-3843 (181개 아미노산) 라미닌 G-유사 도메인 1 (LG1); 잔기 3844-3881 (38개 아미노산) EGF-유사 도메인 1; 잔기 3884-3922 (39개 잔기) EGF-유사 도메인 2, 잔기 3928-4103 (176개의 아미노산), 라미닌 G-유사 도메인 2 (LG2); 잔기 4104-4141 (38개 아미노산) EGF-유사 도메인 3; 잔기 4143-4176 (34개 아미노산) EGF-유사 도메인 4; 잔기 4197-4391 (189개 아미노산) 라미닌 G-유사 도메인 3 (LG3). 잔기 4196 내지 4197 사이에는 천연 BMP-1 절단 부위가 있으며, 이는 잔기 4197-4391의 펩티드, 즉 LG3 도메인을 생성한다. 도메인 간의 이러한 설명은 P98160에 대한 Swiss-Prot 데이터베이스의 주석을 기반으로 한다. 인간 서열의 몇몇 종 변이체가 공지되어 있다. 예를 들면, 마우스, 초파리 및 닭 페를레칸에는 각각 Swiss Prot 수탁 번호 Q05793, Q8MPN3 및 Q6 KD71-Chik이 할당된다; 마카카 물라타(Macaca mulatta)(붉은털 원숭이), 에쿠스 카발루스(Equus caballus)(말), 보스 토러스(Bos taurus)(소), 및 다니오 레리오(Bos taurus)(제브라피쉬) 페를레칸 서열이 또한 확인되었다.

본 개시내용은 DV 내로부터 및 보다 특히 DV (LG3)의 라미닌-G-유사 도메인 3 영역 내로부터의 잔기의 연속적인 세그먼트를 함유하는 페를레칸의 단편을 포함하거나 이들로 구성된 제제를 제공한다. 일부 이러한 제제는 DV 내 및/또는 193개 잔기의 연속 단편 또는 세그먼트의 경우 LG3 내에 적어도 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 50, 100, 150, 193, 200, 300, 400, 500, 600, 700 또는 728개 연속 잔기의 세그먼트를 함유한다. 일부 제제는 700, 600, 500, 400, 300, 또는 200개보다 많지 않거나 적지 않은 DV 또는 LG3의 연속 잔기를 함유한다. 예를 들면, 일부 제제는 특히 LG3 내에서 전체적으로 또는 부분적으로 DV 또는 LG3로부터의 5-728, 5-500 또는 5-193개의 연속 아미노산을 갖는다. 일부 제제는 특히 LG3 내에서 전체적으로 또는 부분적으로 DV로부터의 193-728, 193-500, 193-200, 10-100 또는 약 193개의 연속 아미노산을 갖는다.

일부 예시적인 제제는 하기 아미노산 좌표 중 임의의 것에 의해 정의된 페를레칸 펩티드를 포함하거나 이들로 구성된 제제를 포함한다: 4197-4389, 4197-4390, 4197-4391, 4198-4389, 4198-4390, 4198-4391, 4199-4389, 4199-4390, 4199-4391, 4200-4389, 4200-4390, 4200-4391, 4201-4389, 4201-4390, 4201-4391, 4202-4389, 4202-4390, 4202-4391. 펩티드 4197-4391에 대한 언급은, 예를 들면, 잔기 4197에서 시작하여 잔기 4391에서 끝나고 DV의 LG3의 모든 잔기를 포함하는 펩티드를 의미한다. 이러한 펩티드를 포함하는 제제는 DV로부터의 추가의 인접한 플랭킹 잔기를 포함할 수 있다. 다른 펩티드도 유사하게 정의된다. 본 개시내용은 또한 아미노산의 최대 5, 10, 15, 20, 25 또는 50개 결실, 부가 또는 치환에 의해 상기 언급된 펩티드 중 임의의 것과는 상이한 펩티드를 제공한다. 이러한 결실, 부가 또는 치환은 내부 또는 C- 또는 N-말단에 있을 수 있다. 치환은 보존적이거나 비보존적일 수 있다. 부가는 DV 또는 LG3으로부터의 추가 연속 잔기를 포함할 수 있다. 일부 제제는 상기 펩티드 중 임의의 것의 단편을 포함하거나 이들로 구성된다. 일부 이러한 제제는 명시된 펩티드 내에 적어도 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 50, 100, 150개 아미노산의 세그먼트를 함유한다. 일부 이러한 제제는 명시된 펩티드 내에 150, 100, 50 또는 20개 이하의 연속 잔기를 함유한다. 예를 들면, 일부 제제는 명시된 펩티드 내에 5-189, 5-100 또는 5-50개의 연속 아미노산을 갖는다. 일부 제제는 명시된 펩티드로부터 10-100 또는 10-50개의 연속 아미노산을 갖는다. 일부 제제는 명시된 펩티드로부터 20-100 또는 20-50개의 연속 아미노산을 갖는다.

일부 제제는 DV 또는 LG3 및/또는 상기 열거된 임의의 다른 펩티드의 변이체인 아미노산 서열을 갖는 펩티드를 포함하거나 이들로 구성된다. 이러한 제제는 전형적으로 비교되는 두 서열(갭 또는 갭과 정렬된 잔기를 포함하지 않음) 모두에 존재하는 10, 25, 50, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700 또는 728개 아미노산의 비교 창에 걸쳐 DV 또는 LG3(또는 상기 열거된 다른 펩티드)와 적어도 85, 90, 95 또는 99% 서열 동일성을 갖는 펩티드일 수 있다. 비교 창은 바람직하게는 DV 및/또는 LG3 내에 있다. 이러한 펩티드는 바람직하게는 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200, 100, 50, 20 또는 10개 이하의 아미노산의 총 길이를 갖는다. 일부 제제는 총 20-728, 20-500, 20-189, 20-100 또는 20-50개 아미노산을 갖는다. 변이체는 DV 또는 LG3의 종, 대립유전자 또는 유도된 변이체일 수 있다. 유도된 변이체는 DV 또는 LG3와 상이한 위치에 비-천연 또는 천연 아미노산을 포함할 수 있다. 아미노산 치환은 보존적이거나 비보존적일 수 있다.

보존된 구조 및/또는 기능을 가질 가능성이 있는 서열 변이체는 통상적인 방법에 의해 확인될 수 있다. 예를 들면, PFam 및 기타 도메인 식별 도구는 라미닌 G-유사(LG) 도메인 또는 EGF-유사 도메인과 같은 단백질 도메인의 적절한 폴딩에 필요한 아미노산을 식별하는 데 사용될 수 있다. 동일한 구조를 갖지만 기능이 상이한 단백질 도메인에서 발견되는 보존된 또는 보존적으로 치환된 소수성 잔기는 종종 2차 및 3차 구조를 결정하는 데 관여한다. 다중-서열 정렬 도구는 관련 기능을 갖는 단백질 도메인에서 보존된 아미노산을 식별하는 데 사용될 수 있다. 기능적으로 관련된 도메인에서 보존되지만 도메인의 적절한 폴딩에 중요한 것으로 확인되지 않은 아미노산 잔기는 단백질 도메인의 기능과 관련될 가능성이 더 높다. CABS, ESyPred3D, HHpred, ROBETTA 및 WHAT IF와 같은 구조 예측 도구는 단백질 도메인의 구조를 모델링하여 단백질 도메인의 표면에 위치한 아미노산을 식별할 수 있게 하는 데 사용될 수 있다. 단백질 도메인의 표면에 위치한 보존된 아미노산은 종종 단백질-단백질 상호작용에 관여한다. 일반적으로, 구조적으로나 기능적으로 보존되지 않는 위치에서의 아미노산의 변이는 전형적으로 기능적 변이체를 초래한다; 구조적으로 및/또는 기능적으로 보존되는 위치에서의 아미노산의 변이는 보다 제한되지만, 때로는 여전히 허용된다(예를 들어, 보존적 치환 및 특정 비-보존적 치환이 허용될 수 있음). 페를레칸 DV의 LG3 도메인은 라마닌_G₁ 패밀리(PFam 명칭 PF00054)의 구성원이며 α2β1 인테그린에 대한 결합 모티프를 형성하는 2개의 DGR 서열을 함유한다. 임의로 일부 또는 모든 개재하는 아미노산을 갖고, 추가의 측면 페를레칸 서열을 갖거나 갖지 않는 2개의 DGR 서열을 포함하는 페를레칸 펩티드가 이러한 펩티드를 포함하거나 이들로 구성된 제제와 마찬가지로 제공된다. 상이한 유기체(예를 들어, 인간, 마우스, 붉은털 원숭이, 말, 소, 닭, 및/또는 제브라피쉬)로부터의 DV의 서열은 구조적으로 및 기능적으로 보존된 잔기를 나타내도록 정렬될 수 있다. 또한, LG3 도메인은, 예를 들어, 펜트락신의 구조를 사용하여 구조적으로 모델링될 수 있다(참조; Beckmann et al. (1998), J. Mol. Biol. 275:725-730). 페를레칸 DV의 EGF-유사 도메인은 PFam EGF Clan CL0001의 구성원이며 공지된 EGF-유사 도메인 구조에 기초하여 구조적으로 모델링될 수 있다. 문헌[Hohenester & Engel (2002), Matrix Biol. 21 : 115-128]을 참조한다. 따라서, 본원에 개시된 통상적인 서열 분석 도구 및 스크리닝 방법을 사용하여, 보존된 구조 및 기능을 갖는 DV 및 특히 LG3 서열 변이체를 확인하고 기능에 대해 시험할 수 있다.

임의의 펩티드는 천연 펩티드일 수 있거나, C 또는 N-말단 또는 측쇄에서 변형될 수 있다.

일부 제제는 단지 DV 또는 LG3의 펩티드 세그먼트 또는 펩티드의 길이에 걸쳐 높은 정도의 서열 동일성(예를 들어, Swiss-Prot 수탁 번호 P98160(서열 번호 1)과 적어도 85, 90, 95 또는 99%)을 갖는 펩티드를 포함한다. 다른 제제는 펩티드 또는 비펩티드일 수 있는 보조 분자를 포함한다. 이러한 보조 분자는 식별 목적으로 또는 약동학을 개선하거나 혈액 뇌 장벽을 가로지르는 통과를 개선하기 위한 태그로서 역할을 할 수 있다. 혈액 뇌 장벽을 가로지르는 통과를 촉진하는 펩티드의 예는 HIV로부터 유래된 tat(Vives et al., 1997, J. Biol. Chem. 272:16010; Nagahara et al., 1998, Nat. Med. 4:1449)(예를 들어, YGRKKRRQRRR (서열 번호 2)), 초파리로부터의 안테나페디아(Dcrossi et al., 1994, J. Biol. Chem. 261:10444), 단순 포진 바이러스로부터의 VP22(Elliot and D'Hare, 1997, Cell 88:223-233), 항-DNA 항체의 상보성-결정 영역(CDR) 2 및 3(Avrameas et al., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 95:5601-5606), 70 kDa 열 충격 단백질(Fujihara, 1999, EMBO J. 18:411-419) 및 트랜스포손(Pooga et al., 1998, FASEB J. 12:67-77)을 포함한다.

일부 제제는 Swiss-Prot 수탁 번호 P98160의 잔기 3464-3707을 포함하는 펩티드 세그먼트가 결여되어 있다. 일부 제제는 Swiss-Prot 수탁 번호 P98160의 잔기 3464 및 3707 사이에 5, 10, 20 또는 50개의 연속 잔기의 임의의 하위세그먼트가 결여되어 있다. 일부 제제는 DV 외부에 적어도 5, 10, 20 또는 50개 잔기의 임의의 연속 세그먼트가 결여되어 있다. 일부 제제는 LG3 외부에 적어도 5, 10, 20 또는 50개 잔기의 임의의 연속 세그먼트가 결여되어 있다.

본 개시내용의 제제는 특히 α2 인테그린이 β1 인테그린과 복합체화될 때 통상적으로 α2 인테그린에 특이적으로 결합한다. 본 개시내용의 제제는 특히 α2 인테그린에 결합하기 위해 DV 및/또는 LG3와 경쟁하며, 다시 통상적으로 β1 인테그린과 복합체화될 때 시험된다.

IV. 약제학적 제형 및 투여 방법

A. 약제학적 제형

본 개시내용의 일부 실시양태에서, 제제는 약제학적 제형에 포함된다. 예를 들면, 임상적 적용이 고려되는 경우, 의도된 적용에 적합한 형태로 약제학적 조성물을 제조하는 것이 필요할 것이다. 일반적으로, 이것은 피로겐 뿐만 아니라 인간 또는 동물에게 해로울 수 있는 다른 불순물을 본질적으로 함유하지 않는 조성물을 제조하는 것을 수반할 것이다.

본 개시내용의 활성 조성물은 고전적인 약제학적 제제를 포함할 수 있다. 일반적으로 제제를 안정하게 만들고 표적 세포에 의한 흡수를 허용하기 위해 적절한 염 및 완충액을 사용하기를 원할 것이다. 본 개시내용의 수성 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체 또는 수성 매질에 용해되거나 분산된 유효량의 제제(들)를 포함한다. 이러한 조성물은 또한 접종물(inocula)로 지칭된다. 어구 "약제학적으로 또는 약리학적으로 허용되는"은 동물 또는 인간에게 투여될 때 불리한 반응, 알레르기 반응, 또는 다른 바람직하지 않은 반응을 일으키지 않는 분자 실체 및 조성물을 지칭한다. 본원에 사용된 바와 같이, "약제학적으로 허용되는 담체"는 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 항박테리아제 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 예는 인산염 완충 염수 및 단백질 담체를 갖거나 갖지 않는 나트륨 락테이트 또는 나트륨 시트레이트의 완충 용액을 포함한다. 약제학적 활성 물질에 대한 이러한 매질 및 제제의 사용은 당업계에 잘 알려져 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 제제가 본 개시내용과 양립할 수 없는 경우를 제외하고, 치료 조성물에서의 이의 사용이 고려된다. 보충 활성 성분이 또한 조성물에 혼입될 수 있다.

본 개시내용의 제제는 종종 활성 치료제 및 다양한 다른 약제학적으로 허용되는 성분을 포함하는 조성물로서 투여된다. 문헌[Remington's Pharmaceutical Science (15th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1980)]을 참조한다. 사용되는 특정 제형은 의도된 투여 방식 및 치료적 적용에 의존한다. 조성물은 또한, 원하는 제형에 따라, 동물 또는 인간 투여를 위한 약제학적 조성물을 제형화하는데 통상적으로 사용되는 비히클로 정의되는 약제학적으로 허용되는 비독성 담체 또는 희석제를 포함할 수 있다. 희석제는 조합물의 생물학적 활성에 부정적인 영향을 미치지 않도록 선택된다. 이러한 희석제의 예는 증류수, 생리학적 인산염-완충 염수, 링거 용액, 덱스트로스 용액, 및 행크 용액을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 또한, 약제학적 조성물 또는 제형은 또한 다른 담체, 보조제, 또는 비독성, 비치료적, 비면역원성 안정화제 등을 포함할 수 있다.

약제학적 조성물은 또한 단백질, 다당류, 예를 들어 키토산, 폴리락트산, 폴리글리콜산, 공중합체(예를 들어 라텍스 관능화 세파로스® 비드, 아가로스, 셀룰로스 등), 중합체성 아미노산, 아미노산 공중합체, 및 지질 응집체(예를 들어 유적 또는 리포솜)와 같은 크고 천천히 대사되는 거대분자를 포함할 수 있다.

비경구 투여의 경우, 본 개시내용의 제제는 물, 오일, 염수, 글리세롤, 또는 에탄올과 같은 멸균 액체일 수 있는 약제학적 담체와 함께 생리학적으로 허용되는 희석제 중의 물질의 용액 또는 현탁액의 주사가능한 투여량으로서 투여될 수 있다. 인간 투여를 위한 비경구 조성물은 멸균성이고, 실질적으로 등장성이며, GMP 조건 하에서 제조된다. 또한, 보조 물질, 예를 들어 습윤제 또는 유화제, 계면활성제, pH 완충 물질 등이 조성물에 존재할 수 있다. 약제학적 조성물의 다른 성분은 석유, 동물, 식물, 또는 합성 기원의 것들, 예를 들면, 땅콩유, 대두유, 및 광유이다. 일반적으로, 글리콜, 예를 들어 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜이 특히 주사가능한 용액에 대해 바람직한 액체 담체이다. 항체는 활성 성분의 서방출을 허용하도록 하는 방식으로 제형화될 수 있는 데포 주사제 또는 임플란트 제제의 형태로 투여될 수 있다. 예시적인 조성물은 HCl로 적합한 pH로 조정된, 50mM L-히스티딘(임의), 150mM NaCl을 함유하는 수성 완충액 중에서 제형화된 5mg/mL의 단클론 항체를 포함한다.

전형적으로, 조성물은 액체 용액 또는 현탁액으로서의 주사제로서 제조되고; 주사 전에 액체 비히클 중 액체 또는 현탁액에 적합한 고체 형태가 또한 제조될 수 있다. 제제는 또한 상기 논의된 바와 같이, 강화된 보조제 효과를 위해 폴리락티드, 폴리글리콜리드, 또는 공중합체와 같은 리포솜 또는 마이크로입자에 유화되거나 캡슐화될 수 있다(참조; Langer, Science, 249:1527 33 (1990) and Hanes et al., Advanced Drug Delivery Reviews, 28:97-119 (1997)). 본원에 기재된 제제는 활성 성분의 서방출 또는 박동성 방출을 허용하도록 하는 방식으로 제형화될 수 있는 데포 주사제 또는 임플란트 제제의 형태로 투여될 수 있다.

다른 투여 방식에 적합한 추가의 제형은 경구, 비강내, 및 폐 제형, 좌제, 및 경피 적용을 포함한다. 비강내 전달은 펩티드를 뇌에 전달하는데 특히 유용하다. 펩티드는, 예를 들면 멸균수에서, 비강 스프레이로서 제형화될 수 있다. 좌제의 경우, 결합제 및 담체는, 예를 들면, 폴리알킬렌 글리콜 또는 트리글리세리드를 포함하고; 이러한 좌제는 약 0.5% 내지 약 10%, 또는 약 1% 내지 약 2% 범위의 활성 성분을 함유하는 혼합물로부터 형성될 수 있다. 경구 제형은 약제학적 등급의 만니톨, 락토스, 전분, 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 사카린, 셀룰로스, 및 탄산마그네슘과 같은 부형제를 포함할 수 있다. 이러한 조성물은 전형적으로 용액, 현탁액, 정제, 환제, 캡슐제, 서방형 제형 또는 분말의 형태를 취하고, 약 10% 내지 약 95%의 활성 성분, 또는 약 25% 내지 약 70%를 함유한다.

용어 "단위 용량"은 대상체에서 사용하기에 적합한 물리적 이산 단위를 지칭하며, 각 단위는 이의 투여, 즉 적절한 경로 및 치료 섭생과 관련하여 상기 논의된 원하는 반응을 생성하도록 계산된 소정량의 치료 조성물을 함유한다. 투여되는 양은, 치료 횟수 및 단위 용량 둘 다에 따라, 치료하고자 하는 대상체, 대상체의 상태 및 원하는 보호에 따라 좌우된다. 치료 조성물의 정확한 양은 또한 의사의 판단에 의존하며 각 개인에게 특유하다. 본 개시내용의 제제는 동물에게 직접 투여될 수 있거나, 또는 대안적으로, 후속적으로 동물에게 투여되는 세포에 투여될 수 있다.

B. 투여 방법

예방적 적용에서, 약제학적 조성물 또는 약제는 손상의 생화학적, 조직학적 및/또는 행동적 증상, 이의 합병증 및 손상의 발달 동안 나타나는 중간 병리학적 표현형을 포함하여 적어도 손상의 위험을 감소시키거나, 중증도를 낮추거나, 또는 손상의 발병을 지연시키기에 충분한 섭생(즉, 용량, 빈도, 전달 경로)으로 신경 손상에 취약하거나 신경 손상의 위험이 있는 환자에게 투여된다.

경로는 정맥내, 동맥내, 두개내, 복강내, 골내, 척수강내, 피하, 협측(예를 들어, 필름), 경구, 비강내(스프레이), 에어로졸화 흡입을 포함하며, 이들 중 어느 것은 다공성 및 재흡수성 나노구조체를 사용하는 것과 같은 시간-방출 제형과 조합될 수 있다.

치료적 적용에서, 조성물 또는 약제는 질환의 합병증 및 중간 병리학적 증상을 포함하여 질환의 증상(생화학적, 조직학적 및/또는 행동적)을 감소시키거나 적어도 악화를 늦추기에 충분한 섭생(용량, 빈도, 경로)으로 이러한 손상이 의심되거나 이미 앓고 있는 환자에게 투여된다.

치료적 또는 예방적 치료를 달성하기에 적합한 양은 치료학적 또는 예방학적 유효 용량으로 정의된다. 치료적 섭생에서, 제제는 통상적으로 질환의 증상이 사라지거나 현저하게 감소할 때까지 간격을 두고 투여된다. 임의로 투여는 재발을 방지하기 위해 계속될 수 있다. 예방적 섭생에서, 제제는 또한 통상적으로 간격을 두고 투여되며, 일부 경우에는 환자의 남은 생애 동안 투여된다. 치료는 투여된 제제의 수준을 분석함으로써 또는 환자의 반응을 모니터링함으로써 모니터링될 수 있다.

상기한 상태의 치료를 위한 본 개시내용의 조성물의 유효 용량은 투여 수단, 표적 부위, 환자의 생리학적 상태, 환자가 인간인지 동물인지 여부, 투여되는 다른 약물, 및 치료가 예방적인지 또는 치료적인지 여부를 포함하는 많은 상이한 인자에 따라 다양하다. 통상적으로, 환자는 인간이다; 유전자이식 포유동물을 포함한 비인간 포유류도 치료될 수 있다. 치료 용량은 전형적으로 안전성과 효능을 최적화하도록 적정된다.

투여량은 숙주 체중의 약 0.0001 내지 약 100 mg/kg, 및 보다 통상적으로 약 0.01 내지 약 20 mg/kg의 범위이다. 예를 들면, 투여량은 약 1 mg/kg 체중 또는 약 20 mg/kg 체중 또는 약 1 내지 약 10 mg/kg 또는 1 내지 5 mg/kg의 범위 내일 수 있다. 예시적인 치료 섭생은 1일 2회(예를 들어 12시간마다), 1일 1회, 매주, 2주마다 또는 1개월에 1회 또는 3 내지 6개월에 1회 투여를 수반한다.

본 개시내용의 제제는 예방적 및/또는 치료적 치료를 위한 비경구, 국소, 정맥내, 경구, 협측(필름), 피하, 척수강내, 두개내, 동맥내, 두개내, 복강내, 골내, 비강내, 또는 근육내 수단에 의해 투여될 수 있다. 일부 방법에서, 제제는 침전물이 축적된 특정 조직에, 예를 들면 두개내 주사로 직접 주사된다. 일부 방법에서, 근육내 주사 또는 정맥내 주입이 항체의 투여를 위해 사용된다. 일부 방법에서, 특정 치료제는 두개골 내로 직접 주사된다. 일부 방법에서, 제제는 서방출 조성물 또는 장치로서 투여된다.

전체 기관/조직 이식과 관련하여, 이식 전, 이식시 또는 이식 후에 본 개시내용의 제제를 대상체에게 투여하는 것 외에도, 제제가 이식 물질 그 자체를 치료, 보존, 안정화 또는 달리 유익하게 하기 위해 사용될 수 있는 것으로 또한 고려된다. 이것은 "조직/기관 욕(bath)" 중의 용액과 같이 조직을 제제와 함께 배씽하거나 배양하는 형태를 취할 수 있거나, 이것은 조직/기관 자체로의 주사에 의해 조직/기관의 상주 혈관게를 통해 제제를 조직 또는 기관으로 주입하는 것을 포함할 수 있다. 투여 방식, 기관의 예상 생존 기간, 및 수용자의 긴급성에 따라, 배양/치료 시간이 다를 수 있다. 이러한 조직/기관 치료는 또한 대상체에의 본 개시내용의 제제의 투여 뿐만 아니라 다른 표준 이식-전 및/또는 이식-후 치료와 조합하여 사용될 수 있다.

표 1 - 투여 경로별로 제안된 재조합 페를레칸 LG3 제안된 치료 용량 ^*+

IV (정맥내): 0.5-3 mg/kg

IP (복강내): 1.5-6 mg/kg

IA (동맥내): 0.5-3 mg/kg

IT (척수강내): 0.01-1 mg/kg

IO (골내): 0.5-3 mg/kg

IC (두개내): 0.01-1.5 mg/kg

SC (피하): 1.5-6 mg/kg

경구 (협측내): 0.5-6 mg/kg

비강내: 0.5-6 mg/kg

^* - 치료제는 유리한 안전성 프로파일에 기초하여 상기 제시된 >10x 용량으로 안전하게 투여될 수 있다.

⁺ - 가능한 수의학적 적용은 종에 따라 인간 투여량을 2, 3, 또는 6배로 감소시킴으로써 투여될 수 있다.

V. 병용 요법

의학 분야에서 두 가지 이상의 치료 방식을 조합하는 것은 매우 일반적이다. 다음은 본 개시내용의 요법과 함께 사용될 수 있는 요법에 대한 일반적인 논의이다.

본 개시내용의 방법 및 조성물을 사용하여 손상 또는 상태를 치료하기 위해, 대상체를 본원에 개시된 바와 같은 제제 및 적어도 하나의 다른 요법과 접촉시킬 수 있다. 이들 요법은 하나 이상의 질환 파라미터의 감소를 달성하는데 효과적인 조합량으로 제공될 것이다. 이러한 과정은 대상체를 두 제제/요법과 동시에, 예를 들어, 두 제제를 모두 포함하는 단일 조성물 또는 약리학적 제형을 사용하거나, 또는 대상체를 2개의 별개의 조성물 또는 제형(여기서 하나의 조성물은 본원에 개시된 바와 같은 제제를 포함하고, 다른 조성물은 다른 제제를 포함한다)과 동시에 접촉시킴으로써 접촉시키는 것을 포함할 수 있다.

대안적으로, 본원에 개시된 바와 같은 제제는 수 분 내지 수 주에 이르는 간격으로 다른 치료에 선행하거나 후속할 수 있다. 일반적으로 각 전달 시간 사이에 상당한 기간이 만료되지 않도록 보장하여, 치료법이 여전히 대상체에게 유리하게 조합된 효과를 발휘할 수 있도록 한다. 이러한 경우에, 서로 약 12 내지 24시간 이내, 서로 약 6 내지 12시간 이내, 또는 단지 약 12시간의 지연 시간으로 두 방식으로 세포를 접촉시키는 것이 고려된다. 일부 상황에서는, 치료 기간을 상당히 연장하는 것이 바람직할 수 있다; 그러나, 여기서 각 투여 사이에 수 일(2, 3, 4, 5, 6 또는 7일) 내지 수 주(1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8주)가 경과한다.

병용 요법으로서 고려되는 가능한 제제는 IL-6, CCL5R, CD3, CD6, 톨 유사 수용체, 또는 수용체 길항제, 예를 들어 ATN-161 및 IL1RA, 또는 NSAID, 예를 들어 N-아세틸 시스테인, 아세틸살리실산, 산화질소 신타제 억제제, COX-1, -2, 및/또는 -3 억제제, 또는 크산틴 옥시다제 억제제를 포함한다.

또한 펩티드 또는 다른 요법의 하나 이상의 투여가 바람직할 것이라고 생각할 수 있다. 이하에서 예시된 바와 같이 다양한 조합이 사용될 수 있으며, 여기서 본 개시내용의 제제는 "A"이고, 다른 요법은 "B"이다:

A/B/A B/A/B B/B/A A/A/B B/A/A A/B/B B/B/B/A B/B/A/B

A/A/B/B A/B/A/B A/B/B/A B/B/A/A B/A/B/A B/A/A/B B/B/B/A

A/A/A/B B/A/A/A A/B/A/A A/A/B/A A/B/B/B B/A/B/B B/B/A/B

다른 조합이 고려된다. 섹션 I에서 상기 언급된 임의의 요법은 또한 본 개시내용에 따른 제제와 병용 요법에 사용될 수 있다.

VI. 실시예

바람직한 실시양태들을 입증하기 위해 하기 실시예가 포함된다. 하기 실시예에 개시된 기술들이 실시양태들의 실시에서 잘 기능하기 위해 발명자에 의해 발견된 기술들을 나타내고, 따라서 이의 실시를 위한 바람직한 방식을 구성하는 것으로 간주될 수 있다는 것이 당업계의 숙련가들에 의해 인지되어야 한다. 그러나, 당업계의 숙련가들은, 본 개시내용에 비추어, 개시된 특정 실시양태에서 많은 변경이 이루어질 수 있고, 개시내용의 취지 및 범위를 벗어나지 않으면서 여전히 같거나 유사한 결과를 수득할 수 있음을 인지해야 한다.

실시예 1

본 발명자들은 LG3 및 조직 플라스미노겐 활성제(rtPA 또는 tPA)와 LG3을 공동-투여하는 효과를 알아보기 위한 실험을 설계하였다. tPA는 현재 뇌졸중 치료용으로 승인된 유일한 약물이다. 이의 기능은 혈전을 용해하는 "혈전용해제(clot buster)"이지만 그 자체로는 신경보호 또는 신경회복 효과를 갖지 않는다. 중요하게도, tPA는 출혈 위험과 사망 가능성을 피하기 위해 뇌졸중-후 좁은 치료 창을 제공한다. 이는 tPA가 내인성 응고 활성을 감소시키고 뇌의 혈관 및 혈액-뇌 장벽을 약화시킬 수 있기 때문이다.

재관류시 tPA(10mg/kg, IV) 및 LG3(6mg/kg, IP)의 공동투여와 함께 탠덤 CCA-MCA 60분 폐색을 받은 10마리의 마우스 중 한 마리는 PSD3에서 수술 종료 및 상처 봉합 후 어느 시점에서 주요 뇌출혈(도 1a-d)을 경험한 것으로 관찰되었다. 이러한 관찰은 Stream의 선별 연구에서 CCA-MCA 뇌졸중을 겪은 ~200마리의 마우스 중에서 독특하였다(이러한 N=10 연구 이전에는 tPA를 투여받지 않았다). 인도적 안락사 및 사후-참수 후, 연구원은 상당한 양의 응고된 혈액을 발견했을 때 시상 봉합 위의 피부를 따라 절개하기 시작하였다. 응고된 혈액의 용적을 측정하려는 시도는 없었지만 추정되는 1-3mm 두께의 응고된 혈액이 전체 두개골에 존재하였으며 마우스의 귀 아래의 피부/두개골 계면에 상당한 양이 존재하였다(도 1a). 두개골을 세정하여 열었을 때, 응고된 혈액이 뇌의 오른쪽 정중선을 따라 난형 방식으로 관찰되었다(도 1c). 출혈의 진원지는 폐색 지점에서 바로 MCA에 따라 정렬되었다. 슬라이스하고 TTC로 염색하였을 때, 파괴된 조직의 작은 영역 주위에 아주 작은 경색(화살표) 만 존재하였다(도 1d).

대상체는 안락사 전에 손상의 고통의 징후를 보이지 않았다. 수술전 체중은 29g이었고 안락사 당시 PSD3에서 다시 29g으로 측정되었다. 대상체는 활동적이었고 다루는 것을 피하였으며 순진한 마우스의 활력으로 움직이고/싸웠다. 뇌 및 그 주변의 혈액의 양 및 존재는 치명적이거나 쇠약하게 만드는 손상을 시사하며, 슬라이스는 뇌가 대체로 손상을 모면하였음을 보여준다. 여기에서 관찰된 손상 정도는 60분 CCA-MCA와 폐색 후 6mg/kg LG3 치료에 대해 알려진 값과 일치한다는 것을 주지해야 한다(도 2-3). 이는 뇌가 이러한 사건으로 인해 발생할 수 있는 이전 뇌졸중 손상의 악화 및 출혈을 모면하였음을 의미한다. 따라서, tPA가 동물에게 출혈을 야기하였지만 LG3 치료가 동물의 뇌를 손상으로부터 구할 가능성이 있는 것으로 보인다. 이것은 PDV 및 LG3가 또한 혈액-뇌 장벽 접합부를 강화한다는 것을 보여주는 미공개 데이터와 일치한다.

급성 ELVO의 환경에서 잠재적으로 생명을 구하는 효과 외에도, rhPDV 및 이의 단편은 동맥류 출혈 또는 개방 및 MIS 뇌 수술 중 발생하는 출혈로 고통받는 개인에게 사망으로부터 보호를 제공할 수 있다. 단백질 치료제는 뇌종양의 외과적 절제를 표적으로 하는 연장된 신경외과적 절차 동안 IV 점적을 통해 또는 MRI 또는 PET 스캔에서 확인된 급성 뇌출혈의 치료를 위해 척수강내 주사를 통해 급성으로 투여될 수 있는 것으로 고려된다.

실시예 2

내벽 필라멘트를 통한 60분 MCA 폐색을 받은 마우스에서 뇌졸중-후 치료학적 신경보호제로서 LG3를 조사하는 효능 연구를 실행하였다. 이 모델은 뇌졸중 연구에서 널리 사용되고 잘 받아들여지고 있으며 임상 집단에서 LVO를 반영하는 광범위한 뇌 손상을 일으키는 것으로 알려져 있다. 상당한 사망률과 기능적 결함이 이 모델에서 설명되었다. 시험 약물은 IP 주사(6mg/kg)를 통해 3회 투여, 즉 재관류/뇌졸중 종료 직후에 한 번, 재관류-후 48시간 및 96시간에 다시 투여되었다. 동물 생체 인식 및 활동을 연구 전반에 걸쳐 모니터링하였으며, 체중은 매일 기록하고, 뇌졸중-후 일수(PSD) 1, 3, 7일차에 기능 평가를 수행하였다. 경색 용적/뇌졸중 병변 크기는 PSD7에 정량하였다.

LG3는 뇌졸중-후 회복에 강력한 영향을 미치는 것으로 관찰되었다. LG3-처리된 대상체는 비히클-처리된 상대보다 체중이 유의하게 덜 감소하였으며 >60% 감소된 경색 용적을 나타내었다. 체중 데이터의 분석에서 LG3-처리된 대상체의 체중 감소 특성에 중대한 변화가 밝혀졌다: 이들 대상체는 PSD2-3에서 체중이 증가하기 시작한 반면, 비히클-처리된 대조군은 PSD5-6에서 체중 증가를 처음으로 입증하였다(도 2). 놀랍게도, 이러한 관찰은 기능의 현저한 개선 및 뇌졸중 손상과 관련된 사망률의 완전한 제거(도 3)와 상관관계가 있었다. 비히클-처리된 대조군은 > 33% 사망률을 경험한 반면 LG3-처리된 코호트에서는 사망률이 0%(0%)로 관찰되었다. 데이터 분석에서는 이 차이가 코호트 크기에 기반하여 통계적으로 유의한(p = .0052) 것으로 밝혀졌다. 이러한 관찰은 LG3가 뇌졸중 및 기타 치명적인 신경외상에서 강력한 생명을 구하는 효과를 발휘할 수 있음을 보여준다.

실시예 3

추가 연구에서는 성별, 연령 및 종에 걸친 LG3의 잠재적인 생명을 구하는 효과를 입증하였다. 재관류 전에 tPA로 치료받은 노령(12개월) 수컷 및 암컷 래트에서 일과성 필라멘트 MCAO 뇌졸중을 이용한 연구를 수행하였다. MCAO 필라멘트 허혈성 뇌졸중 모델 수술 절차는 외과적 MCA 필라멘트 폐색 부위에서 출혈을 야기할 수 있다. 동물을 재관류시에, 및 다시 PSD2 및 PSD4에 LG3 또는 비히클(PBS) 용액으로 처리하였다. 기능적 결과는 기준선 PSD1, 3, 7에서 측정하였으며; PSD 7에 모든 대상체를 희생시키고 수의학 신경 병리학자가 뇌를 검사하였다. 출혈/안전성 및 기타 모든 기능 분석을 위해, 폐색 부위 출혈(절차 인공물)이 없는 동물만 포함시켰다.

LG3 처리(재관류시 6mg/kg 동맥내 투여)는 인산염 완충 염수 처리된 대응물과 비교하여 절차와 관련이 없는 출혈의 발생률을 제거하기 위해 조직학에 의해 관찰되었다. PBS 비히클-처리된 대상체의 29.6%(p=0.048)와 비교하여 LG3로 처리된 임의의 암컷 또는 수컷 대상체에서 출혈(외과적 폐색 부위와 구별됨)이 관찰되지 않았다. 이러한 관찰은 LG3가 급성 출혈 및 뇌 외상이 발생할 수 있는 상태에서 유의한 치료적 (생명을 구하는) 이점을 발휘할 수 있다는 개념을 더욱 뒷받침한다.

* * * * * * * * * * * * * * * * *

본원에 개시되고 청구된 모든 조성물 및 방법은 본 개시내용에 비추어 과도한 실험없이 만들어지고 실행될 수 있다. 본 개시내용의 조성물 및 방법이 바람직한 실시양태의 관점에서 기술되었지만, 본 개시내용의 개념, 취지 및 범위를 벗어나지 않으면서 변형이 조성물 및 방법에 및 본원에 기재된 방법의 단계에서 또는 단계의 순서에서 적용될 수 있음이 당업계의 숙련가들에게 명백할 것이다. 보다 구체적으로, 화학적으로 및 생리학적으로 관련된 특정 제제가 본원에 기재된 제제를 대체할 수 있지만 동일하거나 유사한 결과가 달성될 수 있음이 명백할 것이다. 당업계의 숙련가들에게 명백한 모든 이러한 유사한 대체 및 변형은 첨부된 청구항에 의해 정의된 본 개시내용의 취지, 범위 및 개념 내에 있는 것으로 간주된다.

SEQUENCE LISTING <110> Stream Biomedical, Inc. <120> USE OF PERLECAN AND FRAGMENTS THEREOF TO REDUCE THE RISK OF DEATH IN STROKE PATIENTS <130> STRM.P0003WO <140> Filed Concurrently Herewith <141> 2021-07-26 <150> US 63/056,059 <151> 2020-07-24 <150> US 63/061,308 <151> 2020-08-05 <160> 2 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 4391 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Gly Trp Arg Ala Ala Gly Ala Leu Leu Leu Ala Leu Leu Leu His 1 5 10 15 Gly Arg Leu Leu Ala Val Thr His Gly Leu Arg Ala Tyr Asp Gly Leu 20 25 30 Ser Leu Pro Glu Asp Ile Glu Thr Val Thr Ala Ser Gln Met Arg Trp 35 40 45 Thr His Ser Tyr Leu Ser Asp Asp Glu Asp Met Leu Ala Asp Ser Ile 50 55 60 Ser Gly Asp Asp Leu Gly Ser Gly Asp Leu Gly Ser Gly Asp Phe Gln 65 70 75 80 Met Val Tyr Phe Arg Ala Leu Val Asn Phe Thr Arg Ser Ile Glu Tyr 85 90 95 Ser Pro Gln Leu Glu Asp Ala Gly Ser Arg Glu Phe Arg Glu Val Ser 100 105 110 Glu Ala Val Val Asp Thr Leu Glu Ser Glu Tyr Leu Lys Ile Pro Gly 115 120 125 Asp Gln Val Val Ser Val Val Phe 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Asp Gly Asp Phe Asp Cys Glu Asp 340 345 350 Arg Thr Asp Glu Ala Asn Cys Pro Thr Lys Arg Pro Glu Glu Val Cys 355 360 365 Gly Pro Thr Gln Phe Arg Cys Val Ser Thr Asn Met Cys Ile Pro Ala 370 375 380 Ser Phe His Cys Asp Glu Glu Ser Asp Cys Pro Asp Arg Ser Asp Glu 385 390 395 400 Phe Gly Cys Met Pro Pro Gln Val Val Thr Pro Pro Arg Glu Ser Ile 405 410 415 Gln Ala Ser Arg Gly Gln Thr Val Thr Phe Thr Cys Val Ala Ile Gly 420 425 430 Val Pro Thr Pro Ile Ile Asn Trp Arg Leu Asn Trp Gly His Ile Pro 435 440 445 Ser His Pro Arg Val Thr Val Thr Ser Glu Gly Gly Arg Gly Thr Leu 450 455 460 Ile Ile Arg Asp Val Lys Glu Ser Asp Gln Gly Ala Tyr Thr Cys Glu 465 470 475 480 Ala Met Asn Ala Arg Gly Met Val Phe Gly Ile Pro Asp Gly Val Leu 485 490 495 Glu Leu Val Pro Gln Arg Gly Pro Cys Pro Asp Gly His Phe Tyr Leu 500 505 510 Glu His Ser Ala Ala Cys Leu Pro Cys Phe Cys Phe Gly Ile Thr Ser 515 520 525 Val Cys Gln Ser Thr Arg Arg Phe Arg Asp Gln Ile Arg Leu Arg Phe 530 535 540 Asp Gln Pro Asp Asp Phe Lys Gly Val 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Ser Pro Thr Pro Gly Glu Leu 965 970 975 Gly Phe Ser Ser Phe His Arg Leu Leu Ser Gly Pro Tyr Phe Trp Ser 980 985 990 Leu Pro Ser Arg Phe Leu Gly Asp Lys Val Thr Ser Tyr Gly Gly Glu 995 1000 1005 Leu Arg Phe Thr Val Thr Gln Arg Ser Gln Pro Gly Ser Thr Pro 1010 1015 1020 Leu His Gly Gln Pro Leu Val Val Leu Gln Gly Asn Asn Ile Ile 1025 1030 1035 Leu Glu His His Val Ala Gln Glu Pro Ser Pro Gly Gln Pro Ser 1040 1045 1050 Thr Phe Ile Val Pro Phe Arg Glu Gln Ala Trp Gln Arg Pro Asp 1055 1060 1065 Gly Gln Pro Ala Thr Arg Glu His Leu Leu Met Ala Leu Ala Gly 1070 1075 1080 Ile Asp Thr Leu Leu Ile Arg Ala Ser Tyr Ala Gln Gln Pro Ala 1085 1090 1095 Glu Ser Arg Val Ser Gly Ile Ser Met Asp Val Ala Val Pro Glu 1100 1105 1110 Glu Thr Gly Gln Asp Pro Ala Leu Glu Val Glu Gln Cys Ser Cys 1115 1120 1125 Pro Pro Gly Tyr Arg Gly Pro Ser Cys Gln Asp Cys Asp Thr Gly 1130 1135 1140 Tyr Thr Arg Thr Pro Ser Gly Leu Tyr Leu Gly Thr Cys Glu Arg 1145 1150 1155 Cys Ser Cys His Gly His Ser Glu Ala Cys Glu Pro Glu Thr Gly 1160 1165 1170 Ala Cys Gln Gly Cys Gln His His Thr Glu Gly Pro Arg Cys Glu 1175 1180 1185 Gln Cys Gln Pro Gly Tyr Tyr Gly Asp Ala Gln Arg Gly Thr Pro 1190 1195 1200 Gln Asp Cys Gln Leu Cys Pro Cys Tyr Gly Asp Pro Ala Ala Gly 1205 1210 1215 Gln Ala Ala His Thr Cys Phe Leu Asp Thr Asp Gly His Pro Thr 1220 1225 1230 Cys Asp Ala Cys Ser Pro Gly His Ser Gly Arg His Cys Glu Arg 1235 1240 1245 Cys Ala Pro Gly Tyr Tyr Gly Asn Pro Ser Gln Gly Gln Pro Cys 1250 1255 1260 Gln Arg Asp Ser Gln Val Pro Gly Pro Ile Gly Cys Asn Cys Asp 1265 1270 1275 Pro Gln Gly Ser Val Ser Ser Gln Cys Asp Ala Ala Gly Gln Cys 1280 1285 1290 Gln Cys Lys Ala Gln Val Glu Gly Leu Thr Cys Ser His Cys Arg 1295 1300 1305 Pro His His Phe His Leu Ser Ala Ser Asn Pro Asp Gly Cys Leu 1310 1315 1320 Pro Cys Phe Cys Met Gly Ile Thr Gln Gln Cys Ala Ser Ser Ala 1325 1330 1335 Tyr Thr Arg His Leu Ile Ser Thr His Phe Ala Pro Gly Asp Phe 1340 1345 1350 Gln Gly Phe Ala Leu Val Asn Pro Gln Arg Asn Ser Arg Leu Thr 1355 1360 1365 Gly Glu Phe Thr Val Glu Pro Val Pro Glu Gly Ala Gln Leu Ser 1370 1375 1380 Phe Gly Asn Phe Ala Gln Leu Gly His Glu Ser Phe Tyr Trp Gln 1385 1390 1395 Leu Pro Glu Thr Tyr Gln Gly Asp Lys Val Ala Ala Tyr Gly Gly 1400 1405 1410 Lys Leu Arg Tyr Thr Leu Ser Tyr Thr Ala Gly Pro Gln Gly Ser 1415 1420 1425 Pro Leu Ser Asp Pro Asp Val Gln Ile Thr Gly Asn Asn Ile Met 1430 1435 1440 Leu Val Ala Ser Gln Pro Ala Leu Gln Gly Pro Glu Arg Arg Ser 1445 1450 1455 Tyr Glu Ile Met Phe Arg Glu Glu Phe Trp Arg Arg Pro Asp Gly 1460 1465 1470 Gln Pro Ala Thr Arg Glu His Leu Leu Met Ala Leu Ala Asp Leu 1475 1480 1485 Asp Glu Leu Leu Ile Arg Ala Thr Phe Ser Ser Val Pro Leu Ala 1490 1495 1500 Ala Ser Ile Ser Ala Val Ser Leu Glu Val Ala Gln Pro Gly Pro 1505 1510 1515 Ser Asn Arg Pro Arg Ala Leu Glu Val Glu Glu Cys Arg Cys Pro 1520 1525 1530 Pro Gly Tyr Ile Gly Leu Ser Cys Gln Asp Cys Ala Pro Gly Tyr 1535 1540 1545 Thr Arg Thr Gly Ser Gly Leu Tyr Leu Gly His Cys Glu Leu Cys 1550 1555 1560 Glu Cys Asn Gly His Ser Asp Leu Cys His Pro Glu Thr Gly Ala 1565 1570 1575 Cys Ser Gln Cys Gln His Asn Ala Ala Gly Glu Phe Cys Glu Leu 1580 1585 1590 Cys Ala Pro Gly Tyr Tyr Gly Asp Ala Thr Ala Gly Thr Pro Glu 1595 1600 1605 Asp Cys Gln Pro Cys Ala Cys Pro Leu Thr Asn Pro Glu Asn Met 1610 1615 1620 Phe Ser Arg Thr Cys Glu Ser Leu Gly Ala Gly Gly Tyr Arg Cys 1625 1630 1635 Thr Ala Cys Glu Pro Gly Tyr Thr Gly Gln Tyr Cys Glu Gln Cys 1640 1645 1650 Gly Pro Gly Tyr Val Gly Asn Pro Ser Val Gln Gly Gly Gln Cys 1655 1660 1665 Leu Pro Glu Thr Asn Gln Ala Pro Leu Val Val Glu Val His Pro 1670 1675 1680 Ala Arg Ser Ile Val Pro Gln Gly Gly Ser His Ser Leu Arg Cys 1685 1690 1695 Gln Val Ser Gly Ser Pro Pro His Tyr Phe Tyr Trp Ser Arg Glu 1700 1705 1710 Asp Gly Arg Pro Val Pro Ser Gly Thr Gln Gln Arg His Gln Gly 1715 1720 1725 Ser Glu Leu His Phe Pro Ser Val Gln Pro Ser Asp Ala Gly Val 1730 1735 1740 Tyr Ile Cys Thr Cys Arg Asn Leu His Gln Ser Asn Thr Ser Arg 1745 1750 1755 Ala Glu Leu Leu Val Thr Glu Ala Pro Ser Lys Pro Ile Thr Val 1760 1765 1770 Thr Val Glu Glu Gln Arg Ser Gln Ser Val Arg Pro Gly Ala Asp 1775 1780 1785 Val Thr Phe Ile Cys Thr Ala Lys Ser Lys Ser Pro Ala Tyr Thr 1790 1795 1800 Leu Val Trp Thr Arg Leu His Asn Gly Lys Leu Pro Thr Arg Ala 1805 1810 1815 Met Asp Phe Asn Gly Ile Leu Thr Ile Arg Asn Val Gln Leu Ser 1820 1825 1830 Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Thr Gly Ser Asn Met Phe Ala Met 1835 1840 1845 Asp Gln Gly Thr Ala Thr Leu His Val Gln Ala Ser Gly Thr Leu 1850 1855 1860 Ser Ala Pro Val Val Ser Ile His Pro Pro Gln Leu Thr Val Gln 1865 1870 1875 Pro Gly Gln Leu Ala Glu Phe Arg Cys Ser Ala Thr Gly Ser Pro 1880 1885 1890 Thr Pro Thr Leu Glu Trp Thr Gly Gly Pro Gly Gly Gln Leu Pro 1895 1900 1905 Ala Lys Ala Gln Ile His Gly Gly Ile Leu Arg Leu Pro Ala Val 1910 1915 1920 Glu Pro Thr Asp Gln Ala Gln Tyr Leu Cys Arg Ala His Ser Ser 1925 1930 1935 Ala Gly Gln Gln Val Ala Arg Ala Val Leu His Val His Gly Gly 1940 1945 1950 Gly Gly Pro Arg Val Gln Val Ser Pro Glu Arg Thr Gln Val His 1955 1960 1965 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Ser His His Gln Thr Arg Gly Ser Arg Leu 2765 2770 2775 Arg Leu His His Val Ser Pro Ala Asp Ser Gly Glu Tyr Val Cys 2780 2785 2790 Arg Val Met Gly Ser Ser Gly Pro Leu Glu Ala Ser Val Leu Val 2795 2800 2805 Thr Ile Glu Ala Ser Gly Ser Ser Ala Val His Val Pro Ala Pro 2810 2815 2820 Gly Gly Ala Pro Pro Ile Arg Ile Glu Pro Ser Ser Ser Arg Val 2825 2830 2835 Ala Glu Gly Gln Thr Leu Asp Leu Lys Cys Val Val Pro Gly Gln 2840 2845 2850 Ala His Ala Gln Val Thr Trp His Lys Arg Gly Gly Asn Leu Pro 2855 2860 2865 Ala Arg His Gln Val His Gly Pro Leu Leu Arg Leu Asn Gln Val 2870 2875 2880 Ser Pro Ala Asp Ser Gly Glu Tyr Ser Cys Gln Val Thr Gly Ser 2885 2890 2895 Ser Gly Thr Leu Glu Ala Ser Val Leu Val Thr Ile Glu Pro Ser 2900 2905 2910 Ser Pro Gly Pro Ile Pro Ala Pro Gly Leu Ala Gln Pro Ile Tyr 2915 2920 2925 Ile Glu Ala Ser Ser Ser His Val Thr Glu Gly Gln Thr Leu Asp 2930 2935 2940 Leu Asn Cys Val Val Pro Gly Gln Ala His Ala Gln Val Thr Trp 2945 2950 2955 Tyr Lys Arg Gly Gly Ser Leu Pro Ala Arg His Gln Thr His Gly 2960 2965 2970 Ser Gln Leu Arg Leu His Leu Val Ser Pro Ala Asp Ser Gly Glu 2975 2980 2985 Tyr Val Cys Arg Ala Ala Ser Gly Pro Gly Pro Glu Gln Glu Ala 2990 2995 3000 Ser Phe Thr Val Thr Val Pro Pro Ser Glu Gly Ser Ser Tyr Arg 3005 3010 3015 Leu Arg Ser Pro Val Ile Ser Ile Asp Pro Pro Ser Ser Thr Val 3020 3025 3030 Gln Gln Gly Gln Asp Ala Ser Phe Lys Cys Leu Ile His Asp Gly 3035 3040 3045 Ala Ala Pro Ile Ser Leu Glu Trp Lys Thr Arg Asn Gln Glu Leu 3050 3055 3060 Glu Asp Asn Val His Ile Ser Pro Asn Gly Ser Ile Ile Thr Ile 3065 3070 3075 Val Gly Thr Arg Pro Ser Asn His Gly Thr Tyr Arg Cys Val Ala 3080 3085 3090 Ser Asn Ala Tyr Gly Val Ala Gln Ser Val Val Asn Leu Ser Val 3095 3100 3105 His Gly Pro Pro Thr Val Ser Val Leu Pro Glu Gly Pro Val Trp 3110 3115 3120 Val Lys Val Gly Lys Ala Val Thr Leu Glu Cys Val Ser Ala Gly 3125 3130 3135 Glu Pro Arg Ser Ser Ala Arg Trp Thr Arg Ile Ser Ser Thr Pro 3140 3145 3150 Ala Lys Leu Glu Gln Arg Thr Tyr Gly Leu Met Asp Ser His Ala 3155 3160 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Leu Leu Val Gln 3560 3565 3570 Ala Leu Pro Gln Ile Ser Met Pro Gln Glu Val Arg Val Pro Ala 3575 3580 3585 Gly Ser Ala Ala Val Phe Pro Cys Ile Ala Ser Gly Tyr Pro Thr 3590 3595 3600 Pro Asp Ile Ser Trp Ser Lys Leu Asp Gly Ser Leu Pro Pro Asp 3605 3610 3615 Ser Arg Leu Glu Asn Asn Met Leu Met Leu Pro Ser Val Arg Pro 3620 3625 3630 Gln Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Thr Ala Thr Asn Arg Gln Gly 3635 3640 3645 Lys Val Lys Ala Phe Ala His Leu Gln Val Pro Glu Arg Val Val 3650 3655 3660 Pro Tyr Phe Thr Gln Thr Pro Tyr Ser Phe Leu Pro Leu Pro Thr 3665 3670 3675 Ile Lys Asp Ala Tyr Arg Lys Phe Glu Ile Lys Ile Thr Phe Arg 3680 3685 3690 Pro Asp Ser Ala Asp Gly Met Leu Leu Tyr Asn Gly Gln Lys Arg 3695 3700 3705 Val Pro Gly Ser Pro Thr Asn Leu Ala Asn Arg Gln Pro Asp Phe 3710 3715 3720 Ile Ser Phe Gly Leu Val Gly Gly Arg Pro Glu Phe Arg Phe Asp 3725 3730 3735 Ala Gly Ser Gly Met Ala Thr Ile Arg His Pro Thr Pro Leu Ala 3740 3745 3750 Leu Gly His Phe His Thr Val Thr Leu Leu Arg Ser Leu Thr Gln 3755 3760 3765 Gly Ser Leu Ile Val Gly Asp Leu Ala Pro Val Asn Gly Thr Ser 3770 3775 3780 Gln Gly Lys Phe Gln Gly Leu Asp Leu Asn Glu Glu Leu Tyr Leu 3785 3790 3795 Gly Gly Tyr Pro Asp Tyr Gly Ala Ile Pro Lys Ala Gly Leu Ser 3800 3805 3810 Ser Gly Phe Ile Gly Cys Val Arg Glu Leu Arg Ile Gln Gly Glu 3815 3820 3825 Glu Ile Val Phe His Asp Leu Asn Leu Thr Ala His Gly Ile Ser 3830 3835 3840 His Cys Pro Thr Cys Arg Asp Arg Pro Cys Gln Asn Gly Gly Gln 3845 3850 3855 Cys His Asp Ser Glu Ser Ser Ser Tyr Val Cys Val Cys Pro Ala 3860 3865 3870 Gly Phe Thr Gly Ser Arg Cys Glu His Ser Gln Ala Leu His Cys 3875 3880 3885 His Pro Glu Ala Cys Gly Pro Asp Ala Thr Cys Val Asn Arg Pro 3890 3895 3900 Asp Gly Arg Gly Tyr Thr Cys Arg Cys His Leu Gly Arg Ser Gly 3905 3910 3915 Leu Arg Cys Glu Glu Gly Val Thr Val Thr Thr Pro Ser Leu Ser 3920 3925 3930 Gly Ala Gly Ser Tyr Leu Ala Leu Pro Ala Leu Thr Asn Thr His 3935 3940 3945 His Glu Leu Arg Leu Asp Val Glu Phe Lys Pro Leu Ala Pro Asp 3950 3955 3960 Gly Val Leu Leu Phe Ser Gly Gly Lys Ser Gly Pro Val Glu Asp 3965 3970 3975 Phe Val Ser Leu Ala Met Val Gly Gly His Leu Glu Phe Arg Tyr 3980 3985 3990 Glu Leu Gly Ser Gly Leu Ala Val Leu Arg Ser Ala Glu Pro Leu 3995 4000 4005 Ala Leu Gly Arg Trp His Arg Val Ser Ala Glu Arg Leu Asn Lys 4010 4015 4020 Asp Gly Ser Leu Arg Val Asn Gly Gly Arg Pro Val Leu Arg Ser 4025 4030 4035 Ser Pro Gly Lys Ser Gln Gly Leu Asn Leu His Thr Leu Leu Tyr 4040 4045 4050 Leu Gly Gly Val Glu Pro Ser Val Pro Leu Ser Pro Ala Thr Asn 4055 4060 4065 Met Ser Ala His Phe Arg Gly Cys Val Gly Glu Val Ser Val Asn 4070 4075 4080 Gly Lys Arg Leu Asp Leu Thr Tyr Ser Phe Leu Gly Ser Gln Gly 4085 4090 4095 Ile Gly Gln Cys Tyr Asp Ser Ser Pro Cys Glu Arg Gln Pro Cys 4100 4105 4110 Gln His Gly Ala Thr Cys Met Pro Ala Gly Glu Tyr Glu Phe Gln 4115 4120 4125 Cys Leu Cys Arg Asp Gly Phe Lys Gly Asp Leu Cys Glu His Glu 4130 4135 4140 Glu Asn Pro Cys Gln Leu Arg Glu Pro Cys Leu His Gly Gly Thr 4145 4150 4155 Cys Gln Gly Thr Arg Cys Leu Cys Leu Pro Gly 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Claims (47)

1. 신경학적 손상(neurological injury)을 앓고 있거나 신경학적 손상의 위험이 있는 대상체(subject)(여기서, 상태(condition)는 신경변성 질환(neurodegenerative disease)이 아니다)에게 페를레칸 도메인(perlecan domain) V 또는 이의 기능적 단편(functional fragment)을 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하여, 상기 대상체에서 사망(mortality)의 위험을 감소시키는 방법.
2. 제1항에 있어서, 기능적 단편이 LG3인 방법.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체가 뇌진탕성 폭발(concussive blast) 또는 둔기 충격 외상(blunt impact trauma)에 의해 유발되는 것과 같은 외상성 뇌 손상(traumatic brain injury)을 앓고 있는 방법.
4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체가 뇌졸중(stroke)을 앓고 있는 방법.
5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 예컨대 대상체가 이전에 뇌졸중을 앓았거나, 심방 세동(atrial fibrillation)이 있거나, 당뇨병(diabetes)이 있거나, 고혈압(hypertension)이 있거나, 암(cancer)이 있거나, SARS-Cov-2 또는 이의 변종과 같은 바이러스 감염이 있기 때문에, 상기 대상체가 뇌졸중의 위험이 있는 방법.
6. 제4항 또는 제5항에 있어서, 뇌졸중이 대혈관 폐색(large vessel occlusion)과 같은 허혈성 뇌졸중(ischemic stroke)인 방법.
7. 제6항에 있어서, 대혈관 폐색이 전방 대뇌 혈관구조(anterior cerebral vasculature)에 위치하는 방법.
8. 제4항 또는 제5항에 있어서, 뇌졸중이 출혈성 뇌졸중인 방법.
9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 투여가 복강내 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여, 척수강내 투여, 두개내 투여, 골내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 또는 경구(협측) 투여를 포함하는 방법.
10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 조직 플라스미노겐 활성제와 같은 혈전용해 요법을 받았거나 받고 있는 방법.
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 1회 이상, 예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10회 투여되는 방법.
12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 1일 2회, 매일, 격일마다, 3일마다, 주 2회, 매주, 격주, 매월 2회 또는 매월 투여되는 방법.
13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 항뇌졸중 요법(ant-stroke therapy)을 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
14. 제1항 또는 제3항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 페를레칸 도메인 V가 투여되는 방법.
15. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, LG3가 투여되는 방법.
16. 뇌졸중을 앓고 있고 혈전용해 또는 색전용해 요법을 받고 있는 대상체에게 페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편을 투여하는 단계를 포함하여, 상기 대상체에서 사망의 위험을 감소시키는 방법.
17. 제16항에 있어서, 기능적 단편이 LG3인 방법.
18. 제16항 또는 제17항에 있어서, 뇌졸중이 허혈성 뇌졸중인 방법.
19. 제18항에 있어서, 허혈성 뇌졸중이 대혈관 폐색인 방법.
20. 제19항에 있어서, 대혈관 폐색이 전방 대뇌 혈관구조에 위치하는 방법.
21. 제16항 또는 제17항에 있어서, 뇌졸중이 출혈성 뇌졸중인 방법.
22. 제16항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 투여가 복강내 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여, 척수강내 투여, 두개내 투여, 골내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 또는 경구(협측) 투여를 포함하는 방법.
23. 제16항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 혈전용해 요법이 조직 플라스미노겐 활성제인 방법.
24. 제16항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 1회 이상, 예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10회 투여되는 방법.
25. 제16항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 1일 2회, 매일, 격일마다, 3일마다, 주 2회, 매주, 격주, 매월 2회 또는 매월 투여되는 방법.
26. 제16항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 추가의 항뇌졸중 요법을 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
27. 제16항 및 제18항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 페를레칸 도메인 V가 투여되는 방법.
28. 제16항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, LG3가 투여되는 방법.
29. 제16항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 혈전용해 요법이 상기 뇌졸중 발생한지 3시간 이내에 투여되는 방법.
30. 제16항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 혈전용해 요법이 상기 뇌졸중 발생한지 3시간 이상 후에 투여되는 방법.
31. 대상체를 (a) 페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편 및 (b) 혈전절제술(thrombectomy) 또는 색전절제술(embolectomy)로 치료하는 단계를 포함하여, 뇌졸중을 앓고 있는 대상체에서 사망의 위험을 감소시키는 방법.
32. 제31항에 있어서, 기능적 단편이 LG3인 방법.
33. 제31항 또는 제32항에 있어서, 뇌졸중이 허혈성 뇌졸중인 방법.
34. 제33항에 있어서, 허혈성 뇌졸중이 대혈관 폐색인 방법.
35. 제34항에 있어서, 대혈관 폐색이 전방 대뇌 혈관구조에 위치하는 방법.
36. 제31항 또는 제32항에 있어서, 뇌졸중이 출혈성 뇌졸중인 방법.
37. 제31항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편의 투여가 복강내 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여, 척수강내 투여, 두개내 투여, 골내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 또는 경구(협측) 투여를 포함하는 방법.
38. 제31항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, (b)가 혈전절제술인 방법.
39. 제31항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, (b)가 색전절제술인 방법.
40. 제31항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편이 1회 이상, 예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10회 투여되는 방법.
41. 제31항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편이 1일 2회, 매일, 격일마다, 3일마다, 주 2회, 매주, 격주, 매월 2회 또는 매월 투여되는 방법.
42. 제36항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 혈전절제술/색전절제술 이외의 추가의 항뇌졸중 요법을 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
43. 제31항 및 제33항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 페를레칸 도메인 V가 투여되는 방법.
44. 제31항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, LG3가 투여되는 방법.
45. 제31항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (b)가 상기 뇌졸중 발생한지 3시간 이내에 수행되는 방법.
46. 제31항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (b)가 상기 뇌졸중 발생한지 3시간 이상에 투여되는 방법.
47. 이식 물질(transplant material)을 (a) 페를레칸 도메인 V 또는 이의 기능적 단편과 배씽(bathing), 배양(incubating), 주입(infusing), 주사(injecting) 또는 달리 접촉시키는 것을 포함하여, 이식 물질을 치료, 보존 또는 안정화하는 방법.

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