KR20230046286A - 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법 및 그에 의한 항산화 및 항갈변 특성의 복합 식물 조성물 - Google Patents

저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법 및 그에 의한 항산화 및 항갈변 특성의 복합 식물 조성물 Download PDF

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browning
hydrolase
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이호
김철
최일
임경현
임석희
이정희
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Abstract

본 발명은 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법 및 그에 의한 항산화 및 항갈변 특성의 복합 식물 조성물에 관한 것이다. 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법은 과일 또는 채소를 포함하는 천연 식물을 5 내지 10 ㎜ 평균 직경 또는 길이를 가지는 분쇄 소재로 파쇄하는 단계; 분쇄 소재를 20 내지 30 ℃의 온도에서 활성을 가지는 저온성 가수분해 효소와 1차 효소 반응을 시키는 단계; 1차 효소 반응물을 31 내지 50 ℃에서 활성을 가지는 중온성 가수분해 효소와 2차 효소 반응을 시키는 단계; 및 2차 효소 반응물을 여과하여 상징액을 수득하는 단계를 포함한다.

Description

저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법 및 그에 의한 항산화 및 항갈변 특성의 복합 식물 조성물{A Method for Producing a Vegetable Extract with A Low and Mid Property Enzyme and a Complex Vegetable Composition for an Anti-oxidation and Anti-Browning by the Same}
본 발명은 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법 및 그에 의한 항산화 및 항갈변 특성의 복합 식물 조성물에 관한 것이고, 구체적으로 저온성 및 중온성 가수분해 효소에 의하여 과일 또는 채소로부터 항산화 및 항갈변 특성을 가진 유효 성분을 추출하는 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법 및 그에 의한 항산화 및 항갈변 특성의 복합 식물 조성물에 관한 것이다.
사과, 오렌지, 파인애플 또는 포도와 같은 과일 및 브로콜리, 양배추, 배추, 청경채 또는 이와 유사한 십자화과 채소는 비타민C 또는 쿼세틴(quercetin)과 같은 항산화 성분을 포함한다. 그러나 이러한 항산화 성분들은 열에 약하여 고온에서 쉽게 관련 성분이 산화되어 항산화 활성을 상실하는 경우가 많다. 항산화 성분의 추출과 관련하여 특허공개번호 10-2001-0046778 및 특허공개번호 10-2003-0026613은 에탄올과 같은 유기 용매를 이용한 추출 방법에 대하여 개시한다. 또한 특허공개번호 10-2002-0084619는 유기 용매 및 고주파를 이용한 추출 방법에 대하여 개시한다. 또한 특허공개번호 10-2013-0050502는 이와 같은 추출 방법에 의하여 추출된 추출물을 식음료에 이용하는 방법에 대하여 개시한다. 그리고 특허공개번호 10-2001-0111340은 이와 같은 추출물은 화장품의 원료로 사용하는 방법에 대하여 개시한다. 그러나 과일 또는 채소로부터 항산화물질을 열수 추출, 알코올 추출과 같은 방법으로 추출하면 소량의 유용물질이 얻어지고 충분한 효능을 얻기 위하여 크로마토그래피와 같은 방법을 이용하여 최종적으로 정제하는 공정을 이용하여야 한다. 구체적으로 이와 같은 추출 방법은 물 또는 다가 알코올과 같은 추출용매를 사용하여 과일 또는 채소와 같은 식물체의 일반성분을 무작위로 추출하므로 활성 성분 및 기타 성분의 추출효율이 낮아 식품 및 화장품 등의 제조에 이용하기 어렵다는 단점을 가진다. 또한 대부분 알코올과 같은 고가의 유기용매의 처리에 의하여 제조단가의 상승 및 환경오염을 가져올 수 있고 대량생산이 곤란하다. 또한 일반적인 열수 추출법에 의해서 항산화 유효성분이 파괴될 수 있고, 이에 비하여 낮은 온도에서 추출하는 경우 과일 또는 채소의 유효 물질의 추출 효율이 낮다는 단점을 가진다. 과일 또는 채소의 가격이 고가인 점을 고려하면 전체 추출 비율이 낮은 공지의 저온이나 중온 추출법이나 알코올 추출법의 문제점을 해결할 수 있는 추출 방법이 만들어질 필요가 있다.
선행기술 1: 특허공개번호 10-2001-0046778(송치현, 2001.06.15. 공개) 상황버섯 자실체와 균사체로부터 얻은 다당체 및 그 제조방법 선행기술 2: 특허공개번호 10-2003-0026613(재단법인서울대학교산학협력재단, 2003.04.03. 공개) 상황버섯추출물을 포함하는 갭 결합을 통한 세포간 정보전달의 억제 및 항상성의 불균형과 관련된 질환의 예방 또는 치료용 조성물 선행기술 3: 특허공개번호 10-2002-0084619(나드리화장품주식회사, 2002.11.09. 공개) 상황버섯추출물과 포도발효물을 함유하는 주름방지용 화장료 조성물 선행기술 4: 특허공개번호 10-2013-0050502(정세영, 2013.05.16.) 오미자 석류혼합차의 제조방법 선행기술 5: 특허공개번호 10-2001-0111340(나드리화장품주식회사, 2002.11.09. 공개) 상황버섯추출물과 포도발효물을 함유하는 주름방지용 화장료 조성물
본 발명의 목적은 저온 및 상온에서 저온성 및 중온성 가수분해 효소를 이용하여 물 용매에서 다양한 종류의 식물로부터 항산화 성분 및 항갈변 성분을 추출하는 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법 및 그에 의한 항산화 및 항갈변 특성의 복합 식물 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 적절한 실시 형태에 따르면, 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법은 과일 또는 채소를 포함하는 천연 식물을 5 내지 10 ㎜ 평균 직경 또는 길이를 가지는 분쇄 소재로 파쇄하는 단계; 분쇄 소재를 20 내지 30 ℃의 온도에서 활성을 가지는 저온성 가수분해 효소와 1차 효소 반응을 시키는 단계; 1차 효소 반응물을 31 내지 50 ℃에서 활성을 가지는 중온성 가수분해 효소와 2차 효소 반응을 시키는 단계; 및 2차 효소 반응물을 여과하여 상징액을 수득하는 단계를 포함한다.
본 발명의 다른 적절한 실시 형태에 따르면, 저온성 가수분해 효소는 펙티나아제 또는 셀루라아제가 되고, 중온성 가수분해 효소는 셀룰라아제, 알파-아밀라아제, 프로테아제, 글루코아밀라아제 및 베타-아밀라제로 구성된 그룹으로부터 선택된 적어도 하나가 된다.
본 발명의 또 다른 적절한 실시 형태에 따르면, 천연 식물은 사과, 오렌지, 파인애플, 포도, 브로콜리, 양배추, 배추, 청경채, 고추냉이, 강황, 및 울금으로 구성된 그룹으로부터 선택된 적어도 하나가 된다.
본 발명에 따른 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법은 환경오염을 발생시키지 않으면서 과일 또는 채소와 같은 식물의 항산화 성분을 낮은 온도에서 충분한 양으로 추출되도록 한다. 본 발명에 따른 추출 방법은 낮은 온도와 상온에서 물 용매에서 과일 또는 채소를 다단계로 효소 반응을 시켜 특정 효능을 발휘하는 높은 농도를 가지는 유효 성분이 추출될 수 있도록 하고, 이에 의하여 본 발명에 따른 제조 방법은 천연 항산화 성분 및 항갈변 성분의 대량 생산이 가능하도록 한다. 본 발명에 따른 복합 식물 조성물은 약제, 식물 또는 화장품의 원료로 첨가될 수 있지만 이에 제한되지 않는다.
도 1은 본 발명에 따른 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법의 실시 예를 도시한 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 식물 추출물이 제조되는 과정에 적용되는 다양한 조건의 실시 예를 도시한 것이다.
도 3 및 도 4는 각각 본 발명에 따른 조성물에 대한 항산화 평가 및 항갈변 평가의 결과를 도시한 것이다.
도 5 내지 도 11은 본 발명에 따른 조성물에 다양한 종류의 식품에 적용된 실시 예를 도시한 것이다.
도 12는 본 발명에 따른 조성물이 비타민 C와 함께 적용된 실시 예를 도시한 것이다.
아래에서 본 발명은 첨부된 도면에 제시된 실시 예를 참조하여 상세하게 설명이 되지만 실시 예는 본 발명의 명확한 이해를 위한 것으로 본 발명은 이에 제한되지 않는다. 아래의 설명에서 서로 다른 도면에서 동일한 도면 부호를 가지는 구성요소는 유사한 기능을 가지므로 발명의 이해를 위하여 필요하지 않는다면 반복하여 설명이 되지 않으며 공지의 구성요소는 간략하게 설명이 되거나 생략이 되지만 본 발명의 실시 예에서 제외되는 것으로 이해되지 않아야 한다.
도 1은 본 발명에 따른 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법의 실시 예를 도시한 것이다.
도 1을 참조하면, 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법은 과일 또는 채소를 포함하는 천연 식물을 5 내지 10 ㎜ 평균 직경 또는 길이를 가지는 분쇄 소재로 파쇄를 하는 단계(P11); 분쇄 소재를 20 내지 30 ℃의 온도에서 활성을 가지는 저온성 가수분해 효소와 1차 효소 반응을 시키는 단계(P12); 1차 효소 반응물을 31 내지 50 ℃에서 활성을 가지는 중온성 가수분해 효소와 2차 효소 반응을 시키는 단계(P13); 및 2차 효소 반응물을 여과하여 상징액을 수득하는 단계(P14)를 포함한다.
다양한 과일 또는 식물로부터 유효 성분이 추출될 수 있고, 예를 들어 사과, 오렌지, 파인애플, 포도, 브로콜리, 양배추, 배추, 청경채, 고추냉이, 강황 또는 울금과 같은 식물 소재가 준비될 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 식물 소재는 예를 들어 비타민 C, 카로틴, 루틴, 아스코르빈산 또는 이와 유사한 성분을 포함하는 식물이 될 수 있다. 또는 식물 소재는 페놀산 또는 플라보노이드와 같은 페놀 화합물 또는 폴리페놀 화합물을 포함하는 식물이 될 수 있다. 식물 소재는 항산화 성분 또는 항갈변 성분을 포함하는 다양한 종류의 과일, 채소 또는 이와 유사한 천연 식물이 될 수 있고 이에 의하여 본 발명은 제한되지 않는다. 식물 소재는 세척이 되어 이물질이 제거될 수 있고, 분쇄기에 의하여 예를 들어 5 내지 10 ㎜의 평균 직경 또는 길이로 분쇄 또는 파쇄가 될 수 있다(P11). 그리고 파쇄가 된 식물 소재는 저온 가수분해 효소에 의하여 1차로 유효 성분이 추출될 수 있다(P12). 가수분해 효소는 고분자 화합물을 저분자 화합물로 가수분해를 하는 과정에 촉매로 작용하는 효소를 말하고 아래와 같은 반응을 유도할 수 있다.
A-B + H2O → A-OH + B-H
효소(enzyme)는 정해진 온도 범위 및 pH에서 활성화가 되는 특성을 가지고, 1차 유효 성분의 추출을 위하여 저온 가수분해 효소가 사용될 수 있고, 예를 들어 20 내지 30 ℃의 온도에서 활성화가 되는 가수분해 효소가 사용될 수 있다. 추출 용기에 증류수가 채워질 수 있고, 용기에 분쇄가 식물 소재가 완전히 잠기도록 용기에 수용될 수 있다. 추출 용기는 온도 조절이 가능한 냉각 및 가열 수단을 가질 수 있고, 용기 내부의 온도가 20 내지 30 ℃의 온도로 유지되도록 조절될 수 있다. 이와 같은 상태에서 저온 가수분해 효소가 추출 용기에 첨가되어 가수분해 반응이 진행될 수 있다. 이후 저온 가수분해 효소에 의한 1차 추출 반응이 완료되면 예를 들어 1 내지 30분 동안 방치될 수 있고, 이후 중온 가수분해 효소에 의한 2차 효소 반응이 진행될 수 있다(P12). 2차 효소 반응을 위하여 추출 용기의 온도가 31 내지 50 ℃로 조절될 수 있고, 중온 가수분해 효소가 적정 농도로 첨가되어 중온 상태에서 가수분해 반응에 의하여 유효 성분이 추출될 수 있다. 2차 효소 반응에 의하여 식물 소재로부터 유효 성분이 추출되면(P13), 유효 성분을 포함하는 용액이 분리되어 여과가 될 수 있고, 여과 용액이 예를 들어 원심 분리와 같은 방법에 의하여 이물질로부터 분리될 수 있다. 구체적으로 원심 분리가 된 후 위쪽 부분의 투명한 상징액이 분리될 수 있다(P14). 이후 상징액이 농축이 되어 항산화 및 항갈변 특성을 가진 조성물이 획득될 수 있다.
아래에서 이와 같은 과정에 대하여 구체적으로 설명된다.
도 2는 본 발명에 따른 식물 추출물이 제조되는 과정에 적용되는 다양한 조건의 실시 예를 도시한 것이다.
도 2를 참조하면, 유효 성분의 추출을 위한 식물 소재는 예를 들어 사과, 오렌지, 파인애플, 포도, 브로콜리, 양배추, 배추, 청경채, 고추냉이, 강황, 및 울금으로 구성된 그룹으로부터 선택된 적어도 하나가 될 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 식물 소재는 세척이 될 수 있고(P21), 증류수에 의하여 5 내지 10 ℃의 온도에서 10 내지 30분 동안 세척될 수 있다. 세척이 된 식물 소재는 분쇄기 또는 파쇄기에 의아여 파쇄가 될 수 있고, 예를 들어 5 내지 10 ㎜의 평균 길이 또는 평균 직경을 가지도록 분쇄가 될 수 있지만 이에 제한되지 않고 식물 소재의 종류에 따라 다양한 길이 또는 크기로 분쇄가 될 수 있다(P22). 식물 소재로부터 가수분해에 의한 열수 추출 방법으로 유효 성분이 추출될 수 있고, 열수 추출은 저온 가수분해 효소 및 중온 가수분해 효소에 의하여 제1 열수 추출 과정(P23) 및 제2 열수 추출 과정(P24)으로 이루어질 수 있다. 각각의 열수 추출 과정에서 첨가되어야 하는 제1, 2 가수분해 효소가 선택될 수 있고(P231, P241), 첨가되어야 하는 효소의 양이 결정될 수 있다(P232, P242). 제1 열수 추출을 위한 제1 효소는 20 내지 30 ℃의 조건에서 열수 추출이 가능한 저온성 가수분해 효소로 선택될 수 있고, 예를 들어 펙티나아제(pectinase) 또는 셀루라아제(cellulase)와 같은 가수분해 효소가 선택될 수 있다. 추출 용기에 물이 채워질 수 있고, 분쇄가 된 식물 소재가 침지될 수 있다. 저온성 가수분해 효소의 활성 조건에 따라 추출 용기의 온도가 조절될 수 있고, pH가 설정될 수 있다. 각각의 저온 가수분해 효소의 활성에 적합하도록 pH가 조절될 수 있고, 예를 들어 펙티나아제 또는 셀룰라아제가 첨가되는 경우 pH가 3.0 내지 6.5 또는 pH가 4.8로 조절될 수 있다. 제1, 2 열수 추출 과정(P23, P24)은 예를 들어 1 내지 100 시간 동안 진행될 수 있고, 추출 과정에서 교반이 될 수 있다. 또한 제1, 2 열수 추출 과정(P23, P24)에서 농도 보정이 될 수 있다(P232, P242). 가수분해 효소의 농도는 예를 들어 0.1 % 내지 5 %가 될 수 있고, 제1, 2 열수 추출 과정(P23, P24)가 진행되면서 농도가 낮아질 수 있다. 이에 따라 제1, 2 열수 추출 과정에서 농도의 변화에 따라 적절하게 농도가 조절되거나, 여러 번에 걸쳐 가수분해 처리가 될 수 있다. 제1 열수 추출 과정(P23)과 제2 열수 추출 과정(P24)은 단계적으로 진행될 수 있고, 제2 열수 추출 과정(P24)의 진행을 위한 중온 가수분해 효소가 선택될 수 있다(P241). 중온 가수분해 효소는 셀룰라아제(cellulase), 알파-아밀라아제(α-amylase), 프로테아제(protease), 글루코아밀라아제(glucoamylase) 및 베타-아밀라제(β-amylase)로부터 선택된 적어도 하나의 효소가 될 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 제2 열수 추출 과정(P24)는 1 내지 100 시간 동안 진행될 수 있고, 추출 용기는 31 내지 50 ℃의 온도로 유지될 수 있다. 중온 가수분해 효소는 0.1 내지 5 %의 농도로 첨가될 수 있고, 가수분해 과정에서 농도가 보정되거나(P242), 여러 차례에 걸쳐 가수분해 처리가 될 수 있다. 또한 추출 용액의 pH는 가수분해 효소에 따라 3 내지 6.5로 유지될 수 있다. 이와 같은 방법으로 제2 열수 추출이 완료되면(P24), 10 내지 30분 동안 방지된 이후 가수분해 후 남은 식물 소재가 분리되어(P244) 적절한 방법으로 폐기될 수 있다(P244). 분리된 용액은 여과가 될 수 있고(P25), 100 내지 20,000 rpm의 속도로 회전되는 원심분리기에서 원심 분리가 되어 상징액이 수득될 수 있다. 그리고 상징액은 예를 들어 0.1 내지 0.8 기압의 감압 조건에서 수분이 제거되어 농축이 되고(P26), 이후 -5 내지 -50 ℃의 온도에서 냉동 건조가 되어 추출물이 획득될 수 있다(P27). 여과 과정(P25), 농축 과정(P26) 또는 추출물 획득 과정(P27)은 다양한 방법으로 진행될 수 있고 제시된 실시 예에 제한되지 않는다.
제시된 방법에 따라 식물 소재로부터 유효 성분이 추출되었고, 추출된 유효 성분에 대하여 항산화 및 항갈변 활성이 평가되었다.
실시 예
실시 예 1
브로콜리를 세척하여 5 내지 10 ㎜의 크기로 분쇄하고, 2,000 ㎖의 증류수가 담긴 온도 조절이 가능한 추출 용기에 100 g의 파쇄 브로콜리를 투입하였다. 추출 용기를 25 ℃의 온도 및 pH 4.5가 되도록 유지하면서 펙티나이제의 농도가 1.5 %가 되도록 유지하면서 파쇄 브로콜리가 10 시간 동안 가수분해 처리가 되었다. 이후 5분간 방치된 이후 추출 용기를 45 ℃의 온도로 유지하면서 pH가 5.5가 되도록 유지하였다. 알파-아밀라아제 및 베타-아밀라에제로 이루어진 중온 가수분해 효소의 농도가 2%가 되도록 유지하면서 10 시간 동안 2차 가수분해 처리가 되었다. 가수분해가 되고 남은 파쇄 브로콜리가 제거되고, 남은 용액이 5,000 rpm의 속도로 원심 분리가 되어 상징액이 수득되어 농축되고, 이에 의하여 식물 추출 조성물이 획득되었다.
실시 예 2
사과, 배추 및 고추냉이채를 실시 예 1과 동일한 방법으로 가수분해 처리를 하여 식물 추출 조성물이 획득되었다.
실시 예 3
오렌지, 파인애플, 포도, 강황 및 울금을 실시 예1과 동일한 방법으로 가수분해 처리를 하여 식물 추출 조성물이 획득되었다.
실시 예 4 내지 7
실시 예1과 동일한 방법으로 가수분해 처리를 하면서 저온 가수분해 효소를 셀룰라아제로 선택하였고, 중온성 가수분해 효소를 각각 셀룰라아제, 프로테아제 및 클루코아밀라아제라로 선택하여 가수분해 처리를 하여 실시 예 4 내지 7에 해당하는 식물 추출 조성물이 획득되었다.
효능 시험
제조된 실시 예 1 내지 7의 식물 추출 조성물에 대하여 항산화 활성 평가 및 항갈변 활성 평가가 진행되었다. 항산화 활성 평가는 DPPH 라디칼 소거 활성(radical scavenging activity), ABTS 라디칼 소거 활성, FRAP(Ferric Reducing Anti-oxidant power) 분석법이 적용되었다. 그리고 황갈변 활성 평가를 위하여 폴리페놀 옥시다아제(Polyphenol oxidase) 활성 저해 평가(PPO 반응 평가) 및 3-데옥시클루코손(3-deoxyglucosone: 3-DG) 생성 평가 방법이 적용되었다. 각각의 평가 방법은 아래와 같은 방법으로 진행되었다.
1. 항산화활성평가
A. DPPH radical scavengingactivity
가. 0.2 mM DPPH 자유 라디칼 용액(free radical solution) 제조
나. 시료 100 ㎕와 0.2 mM DPPH 용액(solution) 900 ㎕ 혼합
다. 암소에서 30분 동안 반응 후 517 nm에서 흡광도 측정
B. ABTS radical scavenging activity
가. 7.4 mM ABTS 용액(solution) 및 2.45 mM 과황산칼륨(potassium persulfate)의 혼합액을 16시간 동안 실온에서 암소에 보관하여 ABTS 양이온 형성
나. 시료 50 ㎕와 ABTS 용액(solution) 950 ㎕ 혼합
다. 5분 동안 반응 후 734 nm에서 흡광도측정
C. FRAP(Ferric Reducing Antioxidant Power) assay
가. pH가 3.6이 되는 300 mM 아세테이트 버퍼(acetate buffer):10 mM의TPTZ(2,4,6-tripyridyl-s-triazine): 20 mM의 FeCl3·6H2O를10:1:1비율로 혼합
나. 시료 30 ㎕와 FRAP 용액(solution)1 ml를 혼합
다. 5분 동안 반응 후 593 nm에서 흡광도측정
2. 항갈변 활성 평가
A. Polyphenol oxidase 활성 저해 평가
가. 50 mM phosphate buffer(pH6.5) 570 ㎕와 PPO(500 units/mg) 60 ㎕를 혼합
나. 시료를 40㎕를 첨가하여 25℃에서 15분 방치
다. 기질로 4mM catechin 330 ㎕를 각각 첨가
라. 420 nm에서 흡광도 측정
B. 3-deoxyglucosone(3-DG) 생성율 평가
가. 0.1Mg lucose 2 ml+0.1 M glutamic acid 2 ml+시료 2 ml 혼합용액 준비
나. DW 1 mL에 최종 농도 0.2 mM FeCl2 되도록 첨가
다. 반응액 7 ml을 튜브에 넣고 밀봉
라. 50 ℃에서 24 시간 동안 가열하고, 가열 직후 냉수에서 냉각시켜 반응을 신속히 정지
마. 갈변도는 420 nm에서 흡광도 측정
바. 3-DG 생성율은 530 nm에서 흡광도 측정
실시 예 1에 대한 항산화 평가 및 항갈변 평가가 각각 도 3 및 4로 제시되었다. 실시 예 2 내지 7은 ±1 내지 2 %의 범위에서 실시 예 1과 같은 평가 결과를 보여주었다.
실시 예 1 내지 7에 따른 조성물이 녹차 음료(실시 예 1), 와인(실시 예 2), 과일 퓨레(실시 예 3), 레몬 청(실시 예 4), 마요네즈 (실시 예 5), 과일(실시 예 6) 및 곶감에 적용되었고, 각각 도 5 내지 도 11로 제시되었다. 또한 도 12는 비타민 C와 본 발명에 따른 조성물이 함께 적용된 실시 예를 도시한 것이다.
도 5를 참조하면, BABA-GN은 본 발명에 따른 조성물을 나타내고, 본 발명에 따른 조성물이 0.3 내지 0.5 wt%로 첨가되어 처리되면 보관 기간에 관계없이 항갈변 활성이 나타난다는 것을 알 수 있고, 냉장 보관 제품에 비하여 우수한 효과를 나타내는 것을 알 수 있다.
도 6을 참조하면, 본 발명에 따른 조성물이 0.2 wt% 내지 0.3 wt%가 되면 갈변 억제 활성이 나타나고, 0.3 wt% 이상이 되면 냉장 보관 제품에 비하여 우수한 갈변 억제 활성이 나타나는 것을 알 수 있다.
도 7을 참조하면, 망고, 레드 자몽 및 청포도 퓨레에 대하여 본 발명의 따른 조성물이 0.5 wt%의 양으로 처리되면 냉장 보관 제품과 유사한 항갈변 효과가 나타나고, 0.8 w%로 처리되면 레드 자몽에 대하여 갈변 억제 효과가 냉장 보관 제품에 비하여 우수하다는 것을 알 수 있다.
도 8을 참조하면, 레몬 청이 60 ℃에서 2 주 동안 보관된 실시 예를 도시한 것으로 좌측은 처리가 되지 않은 제품을 그리고 우측은 0.5 wt%로 처리된 제품을 나타낸 것이다. 본 발명에 따른 조성물 0.5 wt%로 처리된 경우 갈변 현상이 크게 억제된다는 것을 알 수 있다.
도 9를 참조하면, 본 발명에 따른 조성물이 마요네즈에 각각 0.25 wt%, 0.5 wt% 및 1.0 w%로 처리되어 상온에서 7일 동안 보관된 이후 결과를 나타낸 것이다. 본 발명에 따른 조성물 0.5 wt% 이상으로 처리되는 경우 마요네즈의 갈변 현상이 억제된다는 것을 알 수 있다.
도 10을 참조하면, 사과 및 바나나에 본 발명에 따른 조성물이 0.5 wt% 및 1.0 wt%로 처리된 실시 예를 도시한 것으로 사과 조각 및 바나나 조각이 0.5 wt% 및 1.0 wt%의 수용액에 30초 동안 침지되고, 상온에서 7일 동안 보관된 이후 결과를 나타낸 것이다. 본 발명에 따른 조성물 0.5 wt% 이상으로 처리되는 경우 대조군에 비하여 갈변 현상이 현저하게 억제되는 것을 알 수 있다.
도 11을 참조하면, 본 발명에 대한 조성물이 곶감에 대하여 8.0 wt%, 5.0 wt% 및 1.0 wt%의 양으로 처리되어 10일 및 18일 동안 보관한 결과를 나타낸 것으로 처리되지 않는 것에 비하여 갈변 현상이 현저하게 억제된다는 것을 알 수 있다.
도 12를 참조하면, 좌측은 비타민 C 15%의 수용액으로 처리되어 45 ℃에서 4주 동안 보관된 실시 예를 도시한 것이고, 우측은 비타민 C 15 wt% 및 본 발명에 따른 조성물 5 wt%의 혼합 용액에 의하여 처리되어 동일 조건에서 보관된 결과를 도시한 것이다. 본 발명에 따른 조성물 5wt%의 수용액으로 처리되면 갈변 현상이 현저하게 억제된다는 것을 알 수 있다.
다양한 과일, 야채 또는 이와 유사한 식품류에 본 발명에 따른 조성물이 수용액 형태로 만들어져 처리될 수 있고 제시된 실시 예에 제한되지 않는다. 또한 본 발명에 따른 조성물은 약제, 식품 또는 화장품의 첨가물로 사용되어 항산화 효과 또는 항갈변 효과를 나타낼 수 있다는 것은 자명하다.
위에서 본 발명은 제시된 실시 예를 참조하여 상세하게 설명이 되었지만 이 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 제시된 실시 예를 참조하여 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위에서 다양한 변형 및 수정 발명을 만들 수 있을 것이다. 본 발명은 이와 같은 변형 및 수정 발명에 의하여 제한되지 않으며 다만 아래에 첨부된 청구범위에 의하여 제한된다.
P11: 식물 소재 파쇄 P12: 저온 효소 반응
P13: 중온 효소 반응 P14: 여과 및 상징액 수득

Claims (1)

  1. 천연 식물을 5 내지 10 ㎜ 평균 직경 또는 길이를 가지는 분쇄 소재로 파쇄하는 단계;
    분쇄 소재를 20 내지 30 ℃의 온도에서 활성을 가지는 저온성 가수분해 효소와 1차 효소 반응을 시키는 단계;
    1차 효소 반응물을 31 내지 50 ℃에서 활성을 가지는 중온성 가수분해 효소와 2차 효소 반응을 시키는 단계; 및
    2차 효소 반응물을 여과하여 상징액을 수득하는 단계를 포함하고,
    저온성 가수분해 효소는 펙티나아제 또는 셀루라아제가 되고, 중온성 가수분해 효소는 셀룰라아제, 알파-아밀라아제, 프로테아제 및 베타-아밀라제로 구성된 그룹으로부터 선택된 적어도 하나가 되고,
    천연 식물은 사과, 오렌지, 파인애플, 포도, 브로콜리, 양배추, 배추, 청경채, 고추냉이, 강황 및 울금으로 구성된 그룹으로부터 선택된 적어도 하나가 되는 것을 특징으로 하는 저온성 및 중온성 효소에 의한 식물 추출물의 제조 방법.
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