KR20230045340A - 체지방을 감소시키거나 지방간 형성을 억제시키기 위한 열처리 락토바실러스 플란타룸 k8 조성물 - Google Patents

체지방을 감소시키거나 지방간 형성을 억제시키기 위한 열처리 락토바실러스 플란타룸 k8 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 체지방 감소 또는 지방간 형성 억제 기능을 가진 유산균에 관한 것으로, 락토바실러스 플란타룸 K8(Lactobacillus plantarum Strain K8: 기탁번호 10887BP) 생균 또는 열처리 사균을 제공한다. 본 발명의 생균 또는 열처리 유산균주는 체지방 저하 또는 지방간 형성 억제 기능성 식품으로 직접 사용하거나, 체지방 저하 또는 지방간 형성 억제 기능성 식품 첨가제로 사용될 수 있으며, 생균 형태로서 체지방 저하 또는 지방간 형성 억제 기능성 발효식품의 발효 종균으로 사용할 수 있으며, 본 균주가 생산하는 체지방 저하 또는 지방간 형성 억제 물질을 분리하여 사용할 수 있다.

Description

체지방을 감소시키거나 지방간 형성을 억제시키기 위한 열처리 락토바실러스 플란타룸 K8 조성물{Heat-killed Lactobacillus plantarum K8 composition for reducing body fat or inhibiting fatty liver formation}
본 발명은 체지방 감소 내지는 지방간 형성 억제용 조성물에 관한 것으로, 특히 유산균을 열처리함으로써 세포에 대한 독성을 제거하여 인체의 제지방 감소 내지 지방간 억제를 위한 용도로 사용되기에 적합한 조성물에 대한 것이다.
프로바이오틱스(Probiotics)는 적당량을 섭취했을 때 인체에 이로움을 주는 살아있는 세균을 총칭하는 말로 우리 몸에 도움을 주는 균을 말한다. 현재까지 알려진 대부분의 프로바이오틱스는 유산균이다. 프로바이오틱스인 유산균이나 이로운 세균들은 몸 안의 위산과 담즙산에서 살아남아서 소장까지 도달하여 장에서 증식하고 정착한다. 정착한 장 안에서 건강에 이로운 효과를 나타내며, 이러한 프로바이오틱스는 독성이 없고 병을 유발하지 않아야 한다. 일반적으로 프로바이오틱스 제품은 젖당을 발효하여 젖산이나 알코올을 생성시켜 만든 발효유 제품으로 섭취된다. 프로바이오틱스는 치즈와 요구르트로부터 김치와 된장에 이르기까지 발효를 이용한 음식들에 많이 들어있다. 프로바이오틱스는 식품, 특히 발효식품을 통하여 섭취하는 것부터 최근에는 발효유, 과립, 분말 등의 형태로 건강기능식품을 통해 섭취할 수 있다. 프로바이오틱스의 효능은 ‘장 건강 개선’이다. 그러나 장내 환경 개선 이외에 프로바이오틱스를 통해 면역력 개선 효과도 기대할 수 있다. 면역세포·항체의 60%가 장에 있는 만큼 병원균이 침투하지 못하도록 장벽을 만들고 항체(IgA) 생성을 자극하며, 면역 작용을 활성화시킬 수 있다. 최근에는 락토바실러스 플랜타럼이 자외선에 의한 피부 손상과 피부 보습과 관련해 식약처로부터 개별 인정을 받았다. 또한, 체지방 감소 효능에 대한 기능성을 인정받은 프로바이오틱스 제품도 출시되었다. 이러한 프로바이오틱스의 효능은 장 건강 개선을 통해 유도되는 것으로 학계에서는 인정하고 있다. 장건강 이외에 프로바이오틱스의 가장 큰 효능은 항균이다. 프로바이오틱스를 이용한 항균 효능은 pH를 낮추는 유기산의 생산 및 박테리오신이라는 항균물질의 생성을 통하여 병원균의 번식을 억제하고 면역세포와 상호작용하여 면역체계를 조절하는 것이다. 그러나 대부분의 살아있는 프로바이오틱스는 섭취 시 위에서 사멸하고, 박테리오신을 생산하는 프로바이오틱스는 몇몇 종에 한정되어 있다.
프로바이오틱스는 ‘살아있는 균’이기 때문에 온도에 민감하여 유통 과정에서 사멸할 수 있다. 또한, 엔테로코커스가 포함된 프로바이오틱스를 복용했을 때 항생제 내성이 생겼다는 보고 있으므로 항생제 치료가 필요할 때는 프로바이오틱스 복용을 잠시 중지하는 것도 좋다. 식약처의 ‘건강기능식품 이상사례 신고현황’에 따르면 설사(30.7%)와 위장 불편(8.7%), 구토(7.3%) 같은 위장관 증상과 피부발진 및 두드러기(14%) 같은 이상사례 신고가 접수되었다. 미국식품의약국(FDA)은 장기이식 후 거부 반응 제어제를 복용하는 환자와 자가면역 질환 치료 환자, 화학적 항암치료나 방사선 치료를 받는 환자, 심장 내막염을 앓은 적이 있는 심장 질환자 등은 프로바이오틱스 섭취에 주의할 것을 강조하고 있다. 중심정맥관(카테터)을 삽입한 환자에서 프로바이오틱 섭취 시 패혈증이 나타날 수 있다는 보고도 있다.
이러한 프로바이오틱스의 한계를 극복하기 위해서는 열처리 사균 또는 파쇄체를 이용한 제품개발이 필요하다. 특히, 열처리 사균체 및 파쇄체의 경우 생균에 비해 더 높은 면역조절 효능을 보여주며, 유통 과정 중에 발생할 수 있는 제품의 변질을 예방할 수 있다.
필리핀 유제품에서 분리한 한 lactobacillus spp. 는 암세포의 자가사멸을 유도하는 것으로 보고되어 있다(Shyu et al., 2014, 2014:9 BioMed Research International). 또 다른 연구에서는 6종의 Lactobacillus plantarum strains으로부터 분리한 PM(postbiotic metaboites)가 암세포의 자가사멸을 유도한다고 보고 하였다(Chuah et al., 2019, 19:114, BMC Complement Altern Med). 이러한 결과로 볼 때, 본 발명에 사용된 L. plantarum의 생균은 어떠한 종류의 PM을 생산하고, 이로 인해 세포독성이 나타나는 것으로 추측할 수 있다. 그러나 이러한 PM은 암세포에 대한 사멸을 유도할 때는 항암제로서의 가치를 갖지만, 본 발명에서와같이 정상세포(3T3-L1 또는 HaCaT 세포)의 자가사멸을 유도할 경우 독성 물질로 분류될 수 있다.
이에 본 발명의 목적은 종래에 체지방 감소 효과가 있다고 알려진 유산균 L. plantarum 생균의 세포독성을 제거한 열처리 L. plantarum K8 (LpK8HK) 유산균 제제 및 LpK8HK 조성물을 제공하는 것이다.
따라서, 본 발명의 일실시예에서 L. plantarum K8 균주(기탁번호: 10887BP)의 세포독성을 제거하기 위하여 열처리를 한 열처리 사균체(LpK8HK)를 제공한다.
여기서, 상기 열처리 사균체 LpK8HK는 정상세포에 대한 독성을 나타내지 않고 체지방 감소 효과 및 지방간 형성을 억제하는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명의 일제조예에서 상기 열처리 유산균 제제를 함유하는 건강기능식품 및 약학 조성물을 제공한다.
전술한 바와 같은 본 발명에 따르면, 열처리 유산균 LpK8HK는 유산균 생균이 유도할 수 있는 세포독성을 제거함으로써 인체 안전성을 높여줌은 물론 높은 체지방 감소 효능 및 지방간 형성 억제 효능을 기대할 수 있다.
이상에서의 본 발명에 따른 효과는 상기에 한정되는 것은 아니며, 기타 본 발명의 효과들은 후술할 실시예, 제조예 및 청구범위에 기재된 사항을 통하여 본 발명이 속하는 분야의 통상의 지식을 가진 자에 의하여 분명하게 이해될 수 있을 것이다.
유산균 4종 생균을 이용한 세포독성 시험 유산균 4종 열처리 사균체의 세포독성 시험 L. plantarum K8 생균과 열처리 사균체 LpK8HK의 세포독성 시험 L. plantarum K8 생균과 열처리 사균체 LpK8HK의 전사체 변화 L. plantarum K8 생균과 열처리 사균체 LpK8HK에 의한 3T3-L1 전사체 변화 LpK8HK 대비 L. plantarum K8에 의한 3T3-L1 전사체 변화 비교 LpK8HK 대비 L. plantarum K8에 의한 3T3-L1에서 변화된 유전자 목록 Lp8KHK 처리에 의한 3T3-L1 세포 내 중성지방 축적 억제 Lp8KHK 처리에 의한 3T3-L1 세포 내 지방합성 관련 유전자 발현 억제 L. plantarum K8 생균과 열처리 사균체 LpK8HK에의한 체지방 증가 억제 효능 L. plantarum K8 생균과 열처리 사균체 LpK8HK에의한 체지방 세포 크기 증가 억제 효능 L. plantarum K8 생균과 열처리 사균체 LpK8HK에의한 체지방 형성 유전자 발현 억제 효능 L. plantarum K8 생균과 열처리 사균체 LpK8HK에의한 지방간 형성 억제 효능 L. plantarum K8 생균과 열처리 사균체 LpK8HK에의한 지방간 형성 유전자 발현 억제 효능
이하, 본 발명의 실시예를 첨부된 도면을 참고하여 보다 상세하게 설명하도록 한다. 그러나, 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐, 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아닐 것이다.
<실시예 1>
열처리 유산균 LpK8HK의 제조
Lactobacillus plantarum K8(KCTC 10887BP)을 MRS 유산균 배지에 접종하여 30℃ 내지 40℃에서 12 내지 24시간 배양하였다. 배양된 유산균 L. plantarum K8은 원심분리(8,000 rpm, 8 min)를 통하여 회수하고 3차 증류수로 3회 세척하였다. 세척 후 침전물을 1x1011 CFU/ml이 되게 재혼탁 시켰다. 이어서 65℃ 내지 100℃에서 20분 내지 40분간 처리하여 열처리 사균제 LpK8HK를 제작하였다.
<실시예 2>
유산균 생균과 열처리 유산균 사균체의 세포독성 비교
4종의 유산균을 생균과 열처리 유산균으로 제조하여 HaCaT 세포에 농도별로 24시간 처리한 후 세포독성을 WST-1 assay를 통해 확인하였다. 도 1에서와 같이 유산균 생균의 경우 1x108 또는 1x109 CFU/ml 이상을 처리했을 때 세포의 사멸이 발생하는 것을 확인하였다. 반면 이러한 세포 사멸은 열처리 유산균을 같은 농도로 24시간 처리했을 때는 발생하지 않았다(도2).
<실시예 3>
L. plantarum K8 생균 및 열처리 사균체 LpK8HK의 세포독성 비교
L. plantarum K8 생균을 3T3-L1 세포에 농도별로 24시간 처리한 후 WST-1 assay를 수행한 결과 1x109 CFU/ml에서 세포 사멸이 발생하였다(도 3A). 반면 열처리 사균체 LpK8HK는 같은 농도에서 세포 사멸이 발생하지 않았다(도 3B).
실시예 2와 실시예 2에서의 결과로 볼 때 유산균은 비록 안전한 것으로 알려져 있지만(GRAS, generally recognized as safe) 피부세포 또는 비만세포와 같은 특정 조직에서 세포독성을 유발할 수 있음을 알 수 있다. 따라서 이러한 세포독성을 제거하기 위해서는 유산균의 열처리가 필요함을 의미한다.
<실시예 4>
L. plantarum K8 생균 및 열처리 사균체 LpK8HK의 유전자 변화 비교
열처리에 의한 L. plantarum K8의 유전자 변화를 알아보기 위하여 L. plantarum K8 생균과 열처리 사균체 LpK8HK의 전사체(Transcriptome)분석을 수행하였다.
도 4에서와같이 열처리 유산균 대비 생균의 전사체 변화는 생물학적 조절 유전자(biological regulation)에서 37.75%의 변화가 나타났고, 생합성 과정(biosynthetic process)에 관여하는 유전자 34.66%, 저분자 대사 과정(small molecule metabolic process) 관련 유전자 34.9%, 국지화(localization) 관련 유전자 30.85%, 자극에 대한 반응 유전자 22.22%가 유의성 있게 증가 또는 감소하였다. 생균과 열처리 유산균에 의한 이러한 유전자 차이는 인간 세포에 대한 세포독성 및 유전자 발현에 영향을 미칠 수 있다.
<실시예 5>
L. plantarum K8 생균 및 열처리 사균체 LpK8HK에 의한 3T3-L1 세포의 유전자 변화 비교
L. plantarum K8 생균 및 열처리 사균체 LpK8HK를 각각 3T3-L1 세포에 처리한 후 전사체 변화를 분석하였다. 아무것도 처리하지 않은 3T3-L1 세포 대비 L. plantarum K8 생균을 처리했을 때 세포사멸(cell death) 및 자가사멸(Apoptotic process)관련 유전자의 변화는 17.09%와 17.21%였다. 또한, LpK8HK를 처리한 세포의 경우에는 세포사멸 및 자가사멸 관련 유전자의 변화는 각각 14.54%와 14.55%였다(도 5).
이러한 유전자 변화를 LpK8HK 대비 L. plantarum K8 생균에 의한 변화로 비교하면 세포독성관련 유전자는 4.33%, 자가사멸 관련 유전자는 4.24% 변화하였다. 이 중에는 유의성 있게 증가하는 유전자가 세포독성 18개, 자가사멸 15개였으며, 유의성 있게 감소하는 유전자는 각각 21개와 20개였다(도 6). LpK8HK 대비 L. plantarum K8에서 증감되는 유전자는 도 7에 표시하였으며, 이들 유전자에는 세포독성, 자가사멸, 세포주기 억제(cell arrest)에 관여하는 유전자들이 포함되어 있다.
이상에서의 실시예를 통하여 본 발명에서 L. plantarum K8을 열처리한 사균체 LpK8HK가 생균과 비교하여 유전자 발현에 차이가 있으며, 이러한 차이는 비만세포인 3T3-L1에 작용하여 세포사멸에 관여하는 유전자들의 유의성 있는 증감을 유도하여 비만세포의 사멸 또는 생존에 영향을 미치는 것을 확인하였다.
실험 결과에 따르면 많은 종류의 유산균들은 생균 형태로 세포에 처리할 시 세포독성을 유발하는 것으로 나타났다. 반면 같은 종류의 유산균을 열처리한 후 세포에 처리하면 이러한 세포독성은 발생하지 않는다. 즉, 이러한 결과는 살아있는 유산균의 경우 알려져 있지 않은 작용 또는 요소로 인해 세포의 사멸을 유도하는 것으로 생각할 수 있다.
따라서, 상기 실시예는 많은 양의 유산균을 생균 형태로 섭취할 경우 독성을 유도할 수 있음을 보여준다. 본 개발자들은 이러한 결과를 바탕으로 열처리 유산균을 제작하였고 체지방 감소 및 지방간 억제 효능을 시험하였다.
<실시예 6>
열처리 유산균 LpK8HK의 세포 내 중성지방(Triglyceride, TG) 축적 억제
중성지방은 섭취한 음식물 중 우리 몸에서 사용하고 남은 지방 성분의 일종으로 혈액 중에서 에너지원의 운반이나 저장, 우리 몸을 유지하는 데 중요한 역할을 하는 물질이다. 하지만 정상보다 많아 질 경우 동맥경화, 지방간, 심근경색과 같은 질환을 일으킬 수 있다. 3T3-L1 세포를 분화 유도 배지(DMEM, 10% FBS, 1 μM Dexamethasone, 517 μM 3-Isobuthyl-1-methylxanthine, 5 ug/ml Insulin)로 7일 동안 분화를 유도하는 동시에 1x109 CFU/ml LpK8HK를 처리하였다. 이후 세포를 PBS로 세척하고 Oil red O 염색을 통하여 세포 내 중성지방의 양을 측정하였다. 세포 내 중성지방은 분화가 유도된 세포에서 그렇지 않은 세포에 비해 크게 증가하였다. 또한, 분화와 동시에 LpK8HK를 처리한 세포에서는 농도 의존적으로 중성지방의 축적이 감소하는 것을 확인할 수 있었다(도 8).
<실시예 7>
열처리 유산균 LpK8HK의 지질대사(lipid metabolism)관련 유전자 억제 효능
선행 연구에서와 비슷한 조건으로 LpK8HK를 3T3-L1 세포에 처리한 후 지질대사 관련 유전자 발현 변화를 real-time PCR로 확인하였다.
전사 유전자인 PPARγ and C/EBPα는 분화에 관여하는 유전자 FABP4의 발현을 유도하는데 LpK8HK는 이들 유전자의 발현을 억제하였다. 또한, lipognic enzyme인 ACC, FAS, SCD-1은 중성지방 합성에 관여하는데 역시 LpK8HK 처리 시 농도 의존적으로 감소하는 것으로 나타났다. 반면, CPT-1α and PGC1α은 지방산화(Fat oxidation)에 관여하는 유전자인데 LpK8HK에 큰 영향을 받지 않았다(도 9).
이러한 연구결과는 LpK8HK가 세포 내 존재하는 지방을 제거하기보다는 지질생성(adipogenesis) 억제를 통해 비만을 억제한다는 것을 보여준다.
<실시예 8> 열처리 유산균 LpK8HK의 체지방 감소 효능
C57BL/6 (male, 6 주령)을 4개 그룹(정상그룹(none), 고지방식이 그룹(HFD), 고지방식이+L. plantarum K8 생균 그룹(K8 live+HFD), 고지방식이+LpK8HK 그룹(K8HK+HFD))으로 나누어 10주간 몸무게 변화 및 혈중 중성지방 양을 측정하였다. 고지방식이 그룹은 정상 그룹과 비교하면 섭취 4주 후부터 유의서 있게 몸무게가 증가하였다. 반면, 고지방식이+L. plantarum K8 생균 그룹과 고지방식이+LpK8HK은 정상 그룹에 비해 약간의 몸무게 증가가 나타났으나 고지방식이 그룹에 비해 현저하게 감소하는 것을 확인하였다. L. plantarum 생균과 LpK8HK 섭취 그룹 간의 비교에서는 LpK8HK를 섭취한 그룹에서의 몸무게 증가가 L. plantarum K8 생균 섭취 그룹에 비해 다소 둔화된 것을 알 수 있다(도10a).
섭취 10주 후 마우스로부터 분리한 혈액에서 중성지방(TG) 양을 ELISA 방법을 통해 측정하였다. 혈중 중성지방 양은 고지방식이 그룹에서 증가했으나, L. plantarum 생균과 LpK8HK 섭취 그룹 간의 비교에서는 LpK8HK를 섭취한 그룹에서 감소하였다. L. plantarum 생균과 LpK8HK 섭취 그룹 간의 비교에서는 LpK8HK를 섭취한 그룹에서의 혈중 중성지방의 양이 L. plantarum K8 생균 섭취 그룹에 비해 낮게 나타났다(도 10b).
섭취 10주 후 지방세포(adipocytes) 조직을 분리하여 크기를 비교하기 위하여 H&E 염색을 수행하였다. 염색 결과 고지방식이 그룹의 지방세포 크기는 약 250 μm로 정상 지방세포 100 μm에 비해 크게 증가한 것을 확인하였다. 반면, 고지방식이+L. plantarum K8 생균 그룹과 고지방식이+LpK8HK은 고지방식이 그룹의 지방세포 크기는 평균 70 μm로 측정되었으며 고지방식이 그룹에 비해 현저하게 작은 것을 관찰하였다(도 11a, 11b).
섭취 10주 후 분리한 지방세포에서 지방형성 관련 유전자의 발현 변화를 Western blot을 통하여 확인하였다. PPARγ, C/EBPα, FABP4 단백질 양은 고지방식이 그룹에서 크게 증가한 반면 고지방식이+L. plantarum K8 생균 그룹과 고지방식이+LpK8HK 섭취 그룹에서는 감소한 것을 확인하였다(도 12).
이상에서의 연구 결과 L. plantarum K8 생균과 이의 열처리 사균체인 LpK8HK를 섭취 시 체지방이 증가하는 것을 유의적으로 억제시킬 수 있다는 것을 확인하였다. 또한, LpK8HK가 L. plantarum K8 생균에 비해 다소 우수한 효과를 보여주었다.
<실시예 9> 열처리 유산균 LpK8HK의 지방간 억제 효능
C57BL/6 (male, 6 주령)을 4개 그룹(정상그룹(none), 고지방식이 그룹(HFD), 고지방식이+L. plantarum K8 생균 그룹(K8 live+HFD), 고지방식이+LpK8HK 그룹(K8HK+HFD))으로 나누어 10주간 실험한 마우스로부터 간을 적출하여 무게를 측정 측정하였다.
고지방식이 그룹에서 간 무게가 크게 증가한 것을 확인하였고, 고지방식이+L. plantarum K8 생균 그룹, 고지방식이+LpK8HK 섭취 그룹에서 고지방식이 그룹에 비해 유의성 있게 간 무게가 감소한 것을 관찰하였다 (도 13a).
간을 적출 한 후 촬영한 사진에서도 고지방식이 마우스의 간에 비해 L. plantarum 생균 또는 LpK8HK를 섭취한 마우스의 간 크기가 작은 것을 관찰하였다(도 13b). 또한, 간 조직을 Oil red O 염색한 결과를 통해서 간 세포에 축적된 중성지방이 L. plantarum 생균 또는 LpK8HK에 의해 감소된 것을 확인하였다 (도 13c).
지방형성 관련 유전자의 발현 변화를 Western blot을 통하여 확인한 결과 PPARγ, C/EBPα, FABP4 단백질량은 고지방식이 그룹의 간에서 크게 증가한 반면 고지방식이+L. plantarum K8 생균 그룹과 고지방식이+LpK8HK 섭취 그룹으로부터 분리한 간에서는 감소한 것을 확인하였다(도 14).
이상에서의 연구결과 L. plantarum K8 생균과 이의 열처리 사균체인 LpK8HK를 섭취 시 지방간 형성을 유의적으로 억제할 수 있다는 것을 확인하였다.
[제조예 1] LpK8HK 함유 식품의 제조
식품제조예 A: LpK8HK 함유 프리바이오틱스 정장제의 제조
LpK8HK에 소량의 칼슘 및 비타민 D를 혼합하여 프리바이오틱스 정장제품을 제조하였다. 구체적인 조성은 하기 표 1에 기재하였다. 정장 효과를 높이기 위해 정장 효과가 있는 다른 유산균 원말, 예컨대, 대장에 존재하는 것으로 알려진 비피더스균 원말, 락토바실러스 플란타륨을 소량 첨가할 수 있다.
MSF를 함유하는 정장제 조성
성분 1팩(%)
LpK8HK 70
비타민 D 15
칼슘 15
총합 100
식품제조예 B: LpK8HK를 포함하는 생식의 제조
대두 배아 발효분말에 각종 곡류 분말, 해조류 분말, 과채류 분말, 버섯류 분말 및 본 발명의 LpK8HK를 혼합하여 생식제품을 제조하였다. 구체적인 조성은 하기 표 2에 기재하였다.
성분 1팩(%)
대두배아 발효 분말 25
현미 분말 10
보리 분말 5
옥수수 분말 3
녹두 분말 3
율무 분말 3
참깨 분말 3
팥 분말 3
김 분말 5
미역 분말 8
다시마 분말 12
케일 분말 5
알로에 분말 3
당근 분말 2
표고버섯 분말 4
영지버섯 분말 4
LpK8HK 2
총합 100
식품제조예 C: LpK8HK를 함유한 건강기능식품의 제조예
LpK8HK를 함유한 건강기능식품 조성물은 다음 각각의 제제예와 같은 조성으로 통상의 액제 제조방법으로 제조하였다. 최종 부피는 각 액제에 100 ml이다. 본 제조예는 액제 뿐만 아니라 정제, 산제, 과립제 등으로 통상의 제조 방법으로 제조가 가능하다.
성분 함량 (중량%)
LpK8HK 100mg
벌꿀 1500mg
비타민 C 50mg
비타민 B6 10mg
니코틴산아미드 10mg
로얄젤리 80mg
방부제, 향 미량
정제수 잔량
합계 100mg
[제조예 2] LpK8HK 함유 약제의 제조
본 발명의 LpK8HK는 일일 0.1 내지 1000mg의 용량을 약제학적으로 통상으로 사용되는 부형제나 보조제와 혼합하고 통상의 약제학적인 방법으로 경구 또는 비경구로 투여할 수 있는 약학적 제제로 제제화하여 의약품으로 사용될 수 있다. 다음에 제제 실시예로서 제제의 제조예를 예시한다.
제제실시예 A: 정제의 제조
LpK8HK 5mg
유당 20mg
전분 19mg
스테아린산 마그네슘 적양
상기 성분을 혼합하고 통상의 캄셀제 제조방법에 따라서 50mg의 정제로 타정한다.
제제실시예 B: 캅셀제의 제조
LpK8HK 5mg
유당 20mg
전분 19mg
탈크 1mg
스테아린산 마그네슘 적량
상기 성분을 혼합하고 통상의 캄셀제 제조방법에 따라서 50mg의 젤라틴 캅셀에 충진한다.
제제실시예 C: 주사제의 제조
LpK8HK 5mg
용해보조제 적량
주사용멸균증류수 적량
상기의 성분을 통상이 주사제의 제조방법에 따라서 2ml의 앰플에 충진하고 밀봉한 다음 멸균하여 주사제를 제조한다.
제제실시예 D: 시럽제의 제조
LpK8HK 5mg
Tween 80 적량
설탕 5g
이성화당 5g
정제수 적량
전체 50ml
상기의 성분을 정제수에 넣고 잘 교반한 다음 50ml의 유리병에 충진하고 멸균하여 시럽제를 제조한다.
제제실시예 E: 연고제의 제조
LpK8HK 5mg
디에탄올아민 1.5g
폴리비닐피롤리돈 5g
프로필렌글리콜 30g
증류수를 가하여 전체 100ml로 함
상기의 성분을 통상의 연고제 제조 방법에 따라서 연고제를 제조한다.

Claims (10)

  1. 체지방 감소 활성을 가지는 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체
  2. 지방간 형성 억제 활성을 가지는 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체
  3. 제1항 내지 2항에 있어서,
    상기 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체는, 상기 균주를 30℃ 내지 40℃에서 12시간 내지 24시간 동안 배양한 후, 65℃ 내지 100℃에서 20분 내지 40분 동안 열처리하는 것을 특징으로 하는 사균체
  4. 제1항 내지 2항에 있어서,
    상기 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체는 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 생균에 비해 높은 동물세포의 자가사멸 억제 또는 세포사멸 억제 효능을 보이는 것을 특징으로 하는 사균체
  5. 제1항 내지 2항에 있어서,
    상기 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체는 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 생균에 비해 생물학적 조절(biological regulation), 생합성 과정(biosynthetic process), 국소화(localization), 자극에 대한 반응(response to stimulus), 저분자 대사 과정(small molecule metabolic process)관련 유전자의 발현 증감을 유도하는 것을 특징으로 하는 사균체
  6. 제1항 내지 2항에 있어서,
    상기 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체는 지방 산화(Fat oxidation) 보다는 지질 생성(adipogenesis)를 억제하여 체지방 감소 내지 지방간 형성 억제를 유도하는 것을 특징으로 하는 사균체
  7. 제1항 내지 2항에 따른 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 개선용 건강기능식품
  8. 제1항 내지 2항에 따른 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체를 유효성분으로 포함하는 지방간 형성 예방 또는 개선용 건강기능식품
  9. 제1항 내지 2항에 따른 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 개선용 약학 조성물
  10. 제1항 내지 2항에 따른 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) K8 열처리 사균체를 유효성분으로 포함하는 지방간 형성 예방 또는 개선용 약학 조성물
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