KR20230043912A - Lpa 발현을 저해하기 위한 조성물 및 방법 - Google Patents
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Abstract
아포지단백(a)(LPA) 발현을 저해하는 올리고뉴클레오타이드가 본 명세서에 제공된다. 또한, 이를 포함하는 조성물 및 이의 용도, 특히 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 및/또는 병태를 치료하는 것과 관련된 용도가 제공된다.
Description
기술 분야
본 개시내용은 아포지단백(a)("LPA") 발현을 저해하는 올리고뉴클레오타이드 및 이의 용도, 특히 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 및/또는 병태를 치료하는 것과 관련된 용도에 관한 것이다.
서열 목록에 대한 참조
서열 목록은 파일 이름이 DRNA_C002WO_ST25.txt이고, 생성 날짜가 2021년 8월 5일이며, 크기가 238킬로바이트인 ASCII 형식의 텍스트 파일로 명세서와 동시에 제출되었다. 서열 목록의 전자 형식으로 된 정보는 명세서의 일부이며, 그 전체가 참조에 의해 본 명세서에 원용된다.
지단백(a)(Lp(a))를 지질 코어 및 이황화 결합을 통해 apoB-100에 부착된 고유한 구성성분인 아포지단백(a)(apo(a))를 갖는 아포지단백 B(apoB-100)를 포함하는 이종의 저밀도 지단백(low density lipoprotein: LDL)-유사 입자이다. apo(a) 유전자(LPA)는 주로 간에서 발현되며, 발현은 인간 및 비인간 영장류로 제한된다. 인간에서 Lp(a) 수준은 유전적으로 정의되며, 식이요법, 운동 또는 기타 생활 방식의 변화에 따라 크게 변하지 않는다. LPA는 존재하는 Kringle KIV2 도메인의 수에 따라 길이가 달라지며, 이의 발현은 존재하는 도메인의 수와 반비례한다. 정상적인 Lp(a) 수준은 0.1 ㎎/㎗ 내지 25 ㎎/㎗ 범위이며, 미국 인구의 약 25%가 30 ㎎/㎗ 이상의 Lp(a) 수준을 갖는다. 여러 연구에서 Lp(a) 수준의 분석은 높은 Lp(a) 수준이 심혈관 질환, 뇌졸중 및 죽상동맥경화성 협착증을 비롯한 기타 관련 장애에 대한 독립적인 위험 인자임을 암시하였다. 또한, 전장유전체 연관 분석은 또한 LPA를 죽상동맥경화성 협착증과 같은 질환의 유전적 위험 인자로 암시하였다. 고지혈증 환자의 Lp(a) 및 LDL 수준을 모두 낮추기 위해 치료적 지단백 성분채집술을 사용한 경우, 심혈관 사건의 유의한 감소가 관찰되었다.
따라서, 이러한 그리고 기타 LPA-관련 질환과 관련된 치료제 및 치료에 대한 필요성이 존재한다.
본 개시내용의 실시형태는 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 및/또는 병태를 치료하기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다. 본 개시내용은 부분적으로 간에서 LPA 발현을 선택적으로 저해하고/하거나 감소시키는 올리고뉴클레오타이드의 발견 및 개발에 기초한다. 따라서, LPA mRNA 내의 표적 서열이 확인되고, 이들 표적 서열에 연결하고 LPA mRNA 발현을 저해하는 RNAi 올리고뉴클레오타이드가 생성되었다. 본 명세서에서 입증된 바와 같이, RNAi 올리고뉴클레오타이드는 간에서 원숭이 및 인간 LPA 발현을 저해하였다. 이론에 얽매이지 않고, 본 명세서에 기재된 RNAi 올리고뉴클레오타이드는 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태(예를 들어, 심혈관대사성 질환, 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH)를 치료하는 데 유용하다.
따라서, 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이이다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, 센스 가닥은 15개 내지 50개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 18개 내지 36개의 뉴클레오타이드 길이이다.
임의의 전술한 또는 관련된 양태에서, 안티센스 가닥은 15개 내지 30개의 뉴클레오타이드 길이이다.
임의의 전술한 또는 관련된 양태에서, 안티센스 가닥은 22개의 뉴클레오타이드 길이이고, 안티센스 가닥 및 센스 가닥은 적어도 19개의 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 적어도 20개의 뉴클레오타이드 길이의 이중체 영역을 형성한다.
임의의 전술한 또는 관련된 양태에서, 상보성 영역은 적어도 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 적어도 20개의 뉴클레오타이드 길이이다.
임의의 전술한 또는 관련된 양태에서, 센스 가닥의 3' 말단은 S1-L-S2로 제시되는 스템-루프(stem-loop)를 포함하되, S1은 S2에 상보적이고, L은 S1과 S2 사이에 3개 내지 5개의 뉴클레오타이드 길이의 루프를 형성한다.
일부 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 15개 내지 50개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이이다.
다른 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 15개 내지 50개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 15개 내지 30개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이이다.
또 다른 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 15개 내지 50개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이이다.
추가 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 18개 내지 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이이다.
다른 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 18개 내지 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 22개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이이다.
일부 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 18개 내지 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 22개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 센스 가닥의 3' 말단은 S1-L-S2로 제시되는 스템-루프를 포함하고, S1은 S2에 상보적이며, L은 S1과 S2 사이에 3개 내지 5개 뉴클레오타이드 길이의 루프를 형성하고, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이이다.
다른 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 22개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 센스 가닥의 3' 말단은 S1-L-S2로 제시되는 스템-루프를 포함하고, S1은 S2에 상보적이며, L은 S1과 S2 사이에 3개 내지 5개 뉴클레오타이드 길이의 루프를 형성하고, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이이다.
또 다른 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 22개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 적어도 19개의 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이의 이중체 영역을 형성하며, 센스 가닥의 3' 말단은 S1-L-S2로 제시되는 스템-루프를 포함하고, S1은 S2에 상보적이며, L은 S1과 S2 사이에 3개 내지 5개 뉴클레오타이드 길이의 루프를 형성하고, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이이다.
임의의 전술한 또는 관련된 양태에서, L은 트라이루프(triloop) 또는 테트라루프(tetraloop)이다. 일부 실시형태에서, L은 테트라루프이다. 일부 실시형태에서, 테트라루프는 서열 5'-GAAA-3'를 포함한다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, S1 및 S2는 1개 내지 10개의 뉴클레오타이드 길이이며, 동일한 길이를 갖는다. 일부 실시형태에서, S1 및 S2는 1개의 뉴클레오타이드, 2개의 뉴클레오타이드, 3개의 뉴클레오타이드, 4개의 뉴클레오타이드, 5개의 뉴클레오타이드, 6개의 뉴클레오타이드, 7개의 뉴클레오타이드, 8개의 뉴클레오타이드, 9개의 뉴클레오타이드 또는 10개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, S1 및 S2는 6개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 스템-루프는 서열 5'-GCAGCCGAAAGGCUGC-3'(서열번호 1197)를 포함한다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, 안티센스 가닥은 1개 이상의 뉴클레오타이드 길이의 3' 오버행 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 3' 오버행 서열은 2개의 뉴클레오타이드 길이이며, 선택적으로 3' 오버행 서열은 GG이다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 포함한다. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 2'-변형을 포함한다. 일부 실시형태에서, 2'-변형은 2'-아미노에틸, 2'-플루오로, 2'-O-메틸, 2'-O-메톡시에틸 및 2'-데옥시-2'-플루오로-β-d-아라비노뉴클레산으로부터 선택되는 변형이다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되며, 선택적으로 변형은 2'-플루오로 및 2'-O-메틸로부터 선택되는 2'-변형이다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드간 연결을 포함한다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드간 연결은 포스포로티오에이트 연결이다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, 안티센스 가닥의 5'-뉴클레오타이드의 당의 4'-탄소는 포스페이트 유사체를 포함한다. 일부 실시형태에서, 포스페이트 유사체는 옥시메틸포스포네이트, 바이닐포스포네이트 또는 말로닐 포스포네이트이며, 선택적으로 포스페이트 유사체는 5'-메톡시포스포네이트-4'-옥시를 포함하는 4'-포스페이트 유사체이다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 적어도 하나의 뉴클레오타이드는 하나 이상의 표적화 리간드에 접합된다. 일부 실시형태에서, 각 표적화 리간드는 탄수화물, 아미노 당, 콜레스테롤, 폴리펩타이드 또는 지질을 포함한다. 일부 실시형태에서, 각 표적화 리간드는 N-아세틸갈락토사민(GalNAc) 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, GalNAc 모이어티는 1가 GalNAc 모이어티, 2가 GalNAc 모이어티, 3가 GalNAc 모이어티 또는 4가 GalNAc 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 스템-루프의 L의 최대 4개의 뉴클레오타이드는 각각 1가 GalNAc 모이어티에 접합된다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402 및 403 중 어느 하나의 뉴클레오타이드 서열을 포함한다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, 안티센스 가닥은 서열번호 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 800, 801, 802 및 803 중 어느 하나의 뉴클레오타이드 서열을 포함한다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 뉴클레오타이드 서열을 포함한다:
(a) 각각 서열번호 393 및 793;
(b) 각각 서열번호 388 및 788;
(c) 각각 서열번호 389 및 789;
(d) 각각 서열번호 390 및 790;
(e) 각각 서열번호 391 및 791;
(f) 각각 서열번호 392 및 792;
(g) 각각 서열번호 394 및 794;
(h) 각각 서열번호 395 및 795;
(i) 각각 서열번호 396 및 796;
(j) 각각 서열번호 397 및 797;
(k) 각각 서열번호 398 및 798;
(l) 각각 서열번호 399 및 799;
(m) 각각 서열번호 400 및 800;
(n) 각각 서열번호 401 및 801;
(o) 각각 서열번호 402 및 802; 및
(p) 각각 서열번호 403 및 803.
일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 393에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 793에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 388에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 788에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 389에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 789에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 390에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 790에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 391에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 791에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 392에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 792에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 394에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 794에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 395에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 795에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 396에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 796에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 397에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 797에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 398에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 798에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 399에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 799에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 400에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 800에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 401에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 801에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 402에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 802에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 403에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 803에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되고, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이이다.
추가의 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되고, 안티센스 가닥의 5'-뉴클레오타이드의 당의 4'-탄소는 포스페이트 유사체를 포함하며, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이이다.
다른 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되고, 안티센스 가닥의 5'-뉴클레오타이드의 당의 4'-탄소는 포스페이트 유사체를 포함하며, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이이다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 제공하되, 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하고, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하며, 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되고, 안티센스 가닥 및 센스 가닥은 하나 이상의 2'-플루오로 및 2'-O-메틸 변형된 뉴클레오타이드 및 적어도 하나의 포스포로티오에이트 연결을 포함하며, 안티센스 가닥의 5'-뉴클레오타이드의 당의 4'-탄소는 포스페이트 유사체를 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이이다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 해당 방법은 치료학적 유효량의 전술한 청구항 중 어느 한 항의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 이의 약제학적 조성물을 대상체에게 투여함으로써 대상체를 치료하는 단계를 포함한다.
다른 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서에 기재된 RNAi 올리고뉴클레오타이드 및 약제학적으로 허용 가능한 담체, 전달제 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
다른 실시형태에서, 본 개시내용은 대상체에게 올리고뉴클레오타이드를 전달하는 방법을 제공하며, 해당 방법은 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 실시형태에서, 본 개시내용은 세포, 세포 집단 또는 대상체에서 LPA 발현을 감소시키는 방법을 제공하며, 해당 방법은:
i. 세포 또는 세포 집단을 본 명세서에 기재된 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물과 접촉시키는 단계; 또는
ii. 본 명세서에 기재된 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, LPA 발현을 감소시키는 것은 LPA mRNA의 양 또는 수준, LPA 단백질의 양 또는 수준 또는 둘 다를 감소시키는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 대상체는 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는다. 일부 실시형태에서, LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태는 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH이다. 일부 실시형태에서, RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물은 제2 조성물 또는 치료제와 조합하여 투여된다.
또 다른 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 해당 방법은 치료학적 유효량의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하되, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이이다.
또 다른 양태에서, 본 개시내용은 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 해당 방법은 치료학적 유효량의 표 5에 제시된 열로부터 선택되는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 이의 약제학적 조성물을 대상체에게 투여함으로써 대상체를 치료하는 단계를 포함한다.
다른 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 해당 방법은 치료학적 유효량의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하되, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 뉴클레오타이드 서열을 포함한다:
(a) 각각 서열번호 393 및 793;
(b) 각각 서열번호 388 및 788;
(c) 각각 서열번호 389 및 789;
(d) 각각 서열번호 390 및 790;
(e) 각각 서열번호 391 및 791;
(f) 각각 서열번호 392 및 792;
(g) 각각 서열번호 394 및 794;
(h) 각각 서열번호 395 및 795;
(i) 각각 서열번호 396 및 796;
(j) 각각 서열번호 397 및 797;
(k) 각각 서열번호 398 및 798;
(l) 각각 서열번호 399 및 799;
(m) 각각 서열번호 400 및 800;
(n) 각각 서열번호 401 및 801;
(o) 각각 서열번호 402 및 802; 및
(p) 각각 서열번호 403 및 803.
일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 393에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 793에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 388에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 788에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 389에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 789에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 390에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 790에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 391에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 791에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 392에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 792에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 394에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 794에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 395에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 795에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 396에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 796에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 397에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 797에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 398에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 798에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 399에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 799에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 400에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 800에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 401에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 801에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 402에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 802에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 403에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 803에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태는 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH이다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태의 치료, 선택적으로 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH의 치료를 위한 약제의 제조에서의 본 명세서에 기재된 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물의 용도를 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태의 치료, 선택적으로 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH의 치료에 사용하거나 또는 이에 대해 적합화될 수 있는 본 명세서에 기재된 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물의 용도를 제공한다.
다른 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서에 기재된 RNAi 올리고뉴클레오타이드, 선택적인 약제학적으로 허용 가능한 담체, 및 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에게 투여하기 위한 지침서를 포함하는 패키지 삽입물을 포함하는 키트를 제공한다.
임의의 전술한 또는 관련된 실시형태에서, LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태는 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH이다.
도 1 내지 도 4는 대조군 모의-처리된 세포에서의 LPA mRNA의 백분율(%)과 비교하여 표시된 DsiRNA로 형질감염된 HEK293-LPA 세포에서의 LPA mRNA의 %를 나타내는 그래프를 제공한다.
도 5는 대조군 모의-처리된 세포에서의 LPA mRNA의 백분율(%)에 대한 표시된 DsiRNA로 형질감염된 HepG2-LPA 세포에서의 LPA mRNA의 %를 나타내는 그래프를 제공한다.
도 6 내지 도 7은 대조군 모의-처리된 세포에서의 LPA mRNA의 백분율(%)과 비교하여 표시된 DsiRNA로 형질감염된 HEK293-LPA 세포에서의 LPA mRNA의 %를 나타내는 그래프를 제공한다.
도 8 내지 도 9는 인산 완충 식염수(PBS)로 처리된 마우스와 비교하여 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리된 마우스로부터의 간 샘플에서의 LPA mRNA의 백분율(%)을 나타내는 그래프를 제공한다.
도 10은 일반 N-아세틸갈락토사민(GalNAc)-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드의 구조 및 화학적 변형 패턴을 도시하는 개략도를 제공한다.
도 11A 내지 도 11C는 처리 후 제28일(도 11A), 제56일(도 11B) 및 제84일(도 11C)에 PBS로 처리된 비인간 영장류(NHP)와 비교하여 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리된 NHP로부터의 간 샘플에서의 LPA mRNA의 백분율(%)을 나타내는 그래프를 제공한다.
도 11D는 제28일에 PBS로 처리된 NHP와 비교하여 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리된 NHP로부터의 간 샘플에서의 PLG mRNA의 백분율(%)을 나타내는 그래프를 제공한다.
도 12는 시간 경과에 따라 PBS로 처리된 NHP와 비교하여 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리된 NHP로부터의 혈청 중 apo(a) 단백질의 평균 백분율(%)을 나타내는 그래프를 제공한다.
도 5는 대조군 모의-처리된 세포에서의 LPA mRNA의 백분율(%)에 대한 표시된 DsiRNA로 형질감염된 HepG2-LPA 세포에서의 LPA mRNA의 %를 나타내는 그래프를 제공한다.
도 6 내지 도 7은 대조군 모의-처리된 세포에서의 LPA mRNA의 백분율(%)과 비교하여 표시된 DsiRNA로 형질감염된 HEK293-LPA 세포에서의 LPA mRNA의 %를 나타내는 그래프를 제공한다.
도 8 내지 도 9는 인산 완충 식염수(PBS)로 처리된 마우스와 비교하여 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리된 마우스로부터의 간 샘플에서의 LPA mRNA의 백분율(%)을 나타내는 그래프를 제공한다.
도 10은 일반 N-아세틸갈락토사민(GalNAc)-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드의 구조 및 화학적 변형 패턴을 도시하는 개략도를 제공한다.
도 11A 내지 도 11C는 처리 후 제28일(도 11A), 제56일(도 11B) 및 제84일(도 11C)에 PBS로 처리된 비인간 영장류(NHP)와 비교하여 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리된 NHP로부터의 간 샘플에서의 LPA mRNA의 백분율(%)을 나타내는 그래프를 제공한다.
도 11D는 제28일에 PBS로 처리된 NHP와 비교하여 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리된 NHP로부터의 간 샘플에서의 PLG mRNA의 백분율(%)을 나타내는 그래프를 제공한다.
도 12는 시간 경과에 따라 PBS로 처리된 NHP와 비교하여 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리된 NHP로부터의 혈청 중 apo(a) 단백질의 평균 백분율(%)을 나타내는 그래프를 제공한다.
I. 정의
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 하나 이상의 관심 값에 적용되는 "약"은 명시된 참조 값과 유사한 값을 지칭한다. 소정의 실시형태에서, "약"은 달리 명시되지 않거나 또는 달리 문맥으로부터 명백하지 않는 한 명시된 참조 값의 어느 방향으로든(크거나 작음) 25%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% 이하에 속하는 값의 범위를 지칭한다(해당 숫자가 가능한 값의 100%를 초과하는 경우 제외).
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "투여하다", "투여하는", "투여" 등은 약리학적으로 유용한 방식으로(예를 들어, 대상체에서 병태를 치료하기 위해) 대상체에게 물질(예를 들어, 올리고뉴클레오타이드)을 제공하는 것을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "아포지단백(a)" 및 약어로 "apo(a)"는 지질에 연결하여 지단백을 형성하는 폴리펩타이드의 아포지단백 클래스의 구성원인 아포지단백(a) 폴리펩타이드를 지칭한다. Apo(a)는 인간의 LPA 유전자에 의해 암호화되는 다형성 당단백질이다. LPA mRNA 및 apo(a) 폴리펩타이드는 주로 간에서 발현된다. 지단백(a)(Lp(a)로 약칭됨)는 간에서 형성되는 지단백의 클래스이며, apo(a)에 공유적으로 연결된 아포지단백(apo) B-100(Apo-B100)의 단일 카피를 포함한다. 인간에서, apo(a)는 KIV1 각각 1 카피, KIV2의 여러 개의 카피 및 KIV3-KIV10, KV 및 불활성 프로테이스-유사 도메인 각각 1 카피로 구성된 KIV 반복부의 적어도 10개의 하위유형을 포함한다. apo(a)의 존재는 Lp(a)를 다른 모든 지단백 클래스와 구별한다(Marcovina et al., (1995) Clin Chem. 41(2):246-55). 본 개시내용의 목적을 위해, "아포지단백(a)" 또는 "apo(a)"는 인간, 마우스, 영장류, 원숭이, 소, 닭, 설치류, 래트, 돼지, 양 및 기니피그를 포함하지만 이들로 제한되지 않는 임의의 척추동물 또는 포유동물로부터의 apo(a) 폴리펩타이드를 지칭한다. "Apo(a)"는 또한 천연 apo(a)의 적어도 하나의 생체내 또는 시험관내 활성을 유지하는 천연 apo(a)의 단편 및 변이체를 지칭한다. Apo(a)는 Apo(a)의 전체 길이의 처리되지 않은 전구체 형태뿐만 아니라 번역 후 처리로 인한 성숙한 형태를 포함한다. 인간 LPA mRNA 전사체의 예시적인 서열은 공개적으로 이용 가능하며(GenBank 등록 번호 NM_005577.3), 본 명세서에 개시되어 있다(서열번호 1). 사이노몰구스 원숭이 LPA mRNA의 예시적인 서열은 공개적으로 이용 가능하며(GenBank 등록 번호 XM_015448517.1), 본 명세서에 개시되어 있다(서열번호 2).
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "아시알로당단백질 수용체" 또는 "ASGPR"은 주요 48kDa 서브유닛(ASGPR-1) 및 소수의 40kDa 서브유닛(ASGPR-2)에 의해 형성된 이분(bipartite) C-형 렉틴을 지칭한다. ASGPR은 간세포의 동양혈관(sinusoidal) 표면에서 발현되며, 말단 갈락토스 또는 GalNAc 잔기를 포함하는 순환 당단백질(아시알로당단백질)의 연결, 내재화 및 후속 제거에 중요한 역할을 한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "감쇠하다", "감쇠하는", "감쇠" 등은 감소시키거나 또는 효과적으로 정지시키는 것을 지칭한다. 비제한적인 예로서, 본 명세서의 치료 중 하나 이상은 대상체에서 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH를 포함하는 심혈관대사성 질환의 발병 또는 진행을 감소시키거나 또는 효과적으로 정지시킬 수 있다. 이러한 감쇠는, 예를 들어, 달리 예상될 수 있는 경우 대상체에서 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH를 포함하는 심혈관대사성 질환의 하나 이상의 양태(예를 들어, 증상, 조직 특징 및 세포, 염증성 또는 면역학적 활성 등)의 감소, 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH를 포함하는 심혈관대사성 질환의 하나 이상의 양태의 검출 가능한 진행(악화)의 부재 또는 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH를 포함하는 심혈관대사성 질환의 검출 가능한 양태의 부재로 예시될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "상보적인"은 2개의 뉴클레오타이드가 서로 염기쌍을 형성하도록 허용하는 2개의 뉴클레오타이드(예를 들어, 2개의 서로 다른 핵산 또는 단일 핵산 가닥의 서로 다른 영역에 있음) 사이의 구조적 관계를 지칭한다. 예를 들어, 서로 다른 핵산의 피리미딘 뉴클레오타이드에 상보적인 하나의 핵산의 퓨린 뉴클레오타이드는 서로 수소 결합을 형성함으로써 함께 염기쌍을 이룰 수 있다. 일부 실시형태에서, 상보적인 뉴클레오타이드는 왓슨-크릭 방식 또는 안정적인 이중체의 형성을 허용하는 임의의 다른 방식으로 염기쌍을 이룰 수 있다. 일부 실시형태에서, 2개의 핵산은 본 명세서에 기재된 바와 같이 상보성 영역을 형성하기 위해 서로 상보적인 다중 뉴클레오타이드 영역을 가질 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "데옥시리보뉴클레오타이드"는 리보뉴클레오타이드와 비교할 때 펜토스 당의 2' 위치에 하이드록실 대신에 수소를 갖는 뉴클레오타이드를 지칭한다. 변형된 데옥시리보뉴클레오타이드는 당, 포스페이트기 또는 염기에서의 또는 이들의 변형 또는 치환을 포함하여 2' 위치 이외의 원자의 하나 이상의 변형 또는 치환을 갖는 데옥시리보뉴클레오타이드이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "이중 가닥 올리고뉴클레오타이드" 또는 "ds 올리고뉴클레오타이드"는 실질적으로 이중체 형태인 올리고뉴클레오타이드를 지칭한다. 일부 실시형태에서, ds 올리고뉴클레오타이드의 이중체 영역(들)의 상보적인 염기-페어링은 공유적으로 분리된 핵산 가닥의 뉴클레오타이드의 역평행 서열 사이에 형성된다. 일부 실시형태에서, ds 올리고뉴클레오타이드의 이중체 영역(들)의 상보적인 염기-페어링은 공유적으로 연결된 핵산 가닥의 뉴클레오타이드의 역평행 서열 사이에 형성된다. 일부 실시형태에서, ds 올리고뉴클레오타이드의 이중체 영역(들)의 상보적인 염기-페어링은 함께 염기쌍을 이루는 뉴클레오타이드의 상보적인 역평행 서열을 제공하기 위해 접히는(예를 들어, 헤어핀을 통해) 단일 핵산 가닥으로부터 형성된다. 일부 실시형태에서, ds 올리고뉴클레오타이드는 서로 완전히 이중체화된 2개의 공유적으로 분리된 핵산 가닥을 포함한다. 그러나, 일부 실시형태에서, ds 올리고뉴클레오타이드는 부분적으로 이중체화된(예를 들어, 한쪽 또는 양쪽 말단에 오버행을 가짐) 2개의 공유적으로 분리된 핵산 가닥을 포함한다. 일부 실시형태에서, ds 올리고뉴클레오타이드는 부분적으로 상보적인 뉴클레오타이드의 역평행 서열을 포함하며, 따라서 내부 미스매치 또는 말단 미스매치를 포함할 수 있는 하나 이상의 미스매치를 가질 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 핵산(예를 들어, 올리고뉴클레오타이드)와 관련하여 "이중체"는 뉴클레오타이드의 2개의 역평행 서열의 상보적인 염기 페어링을 통해 형성된 구조를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "부형제"는, 예를 들어, 목적하는 일관성 또는 안정화 효과를 제공하거나 또는 이에 기여하기 위해 조성물에 포함될 수 있는 비치료제를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "간세포" 또는 "간세포들"은 간 실질 조직의 세포를 지칭한다. 이러한 세포는 간 질량의 약 70% 내지 85%를 구성하고, 혈청 알부민, FBN 및 응고 인자의 프로트롬빈 그룹(인자 3 및 4 제외)을 제조한다. 간세포 계통 세포에 대한 마커는 트랜스티레틴(Ttr), 글루타민 합성효소(Glul), 간세포 핵 인자 1a(Hnf1a) 및 간세포 핵 인자 4a(Hnf4a)를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 성숙한 간세포에 대한 마커는 사이토크롬 P450(Cyp3a11), 퓨마릴아세토아세테이트 하이드롤레이스(Fah), 글루코스 6-포스페이트(G6p), 알부민(Alb) 및 OC2-2F8을 포함할 수 있지만 이들로 제한되지 않는다. 예를 들어, 문헌[Huch et al. (2013) Nature 494:247-250] 참조.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "간독성 작용제(hepatotoxic agent)"는 화학적 화합물, 바이러스 또는 그 자체로 간에 독성이 있거나 또는 처리되어 간에 독성이 있는 대사산물을 형성할 수 있는 기타 물질을 지칭한다. 간독성 작용제는 사염화탄소(CCl4), 아세트아미노펜(파라세타몰), 바이닐 클로라이드, 비소, 클로로폼, 비스테로이드성 항-염증성 약물(예컨대, 아스피린 및 페닐뷰타존)을 포함할 수 있지만 이들로 제한되지 않는다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "불안정한 링커"는 (예를 들어, 산성 pH에 의해) 절단될 수 있는 링커를 지칭한다. "상당히 안정적인 링커"는 절단될 수 없는 링커를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "간 염증" 또는 "간염"은 특히 간독성 작용제에 대한 노출에 의해 야기될 수 있는 바와 같은 손상 또는 감염의 결과로 인해 간이 팽창하고, 제대로 기능하지 않고/않거나 고통스러워지는 신체 상태를 지칭한다. 증상은 황달(피부 또는 눈의 황변), 피로, 쇠약, 메스꺼움, 구토, 식욕 감소 및 체중 감소를 포함할 수 있다. 간 염증을 치료하지 않고 방치하면, 섬유증, 간경변증, 간부전 또는 간암으로 진행될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "간 섬유증" 또는 "간의 섬유증"은 염증 및 간세포 사멸을 초래하는 콜라겐(I, III 및 IV), FBN, 운둘린, 엘라스틴, 라미닌, 하이알루로난 및 프로테오글리칸을 포함할 수 있는 세포외 매트릭스 단백질이 간에서 과도하게 축적되는 것을 지칭한다. 간 섬유증을 치료하지 않고 방치하면, 간경변증, 간부전 또는 간암으로 진행될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "루프"는 적절한 혼성화 조건(예를 들어, 포스페이트 완충액, 세포 내)하에서 페어링되지 않은 영역 옆에 있는 2개의 역평행 영역이 혼성화하여 이중체("스템(stem)"라고 지칭됨)를 형성하도록 하는 서로 충분히 상보적인 핵산의 2개의 역평행 영역의 옆에 있는 핵산(예를 들어, 올리고뉴클레오타이드)의 페어링되지 않은 영역을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "변형된 뉴클레오타이드간 연결"은 포스포다이에스터 결합을 포함하는 참조 뉴클레오타이드간 연결과 비교할 때 하나 이상의 화학적 변형을 갖는 뉴클레오타이드간 연결을 지칭한다. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 자연적으로 발생하지 않는 연결이다. 전형적으로, 변형된 뉴클레오타이드간 연결은 변형된 뉴클레오타이드간 연결이 존재하는 핵산에 하나 이상의 바람직한 특성을 부여한다. 예를 들어, 변형된 뉴클레오타이드는 열 안정성, 분해에 대한 저항성, 뉴클레이스 저항성, 용해도, 생체이용률, 생체활성, 감소된 면역원성 등을 개선할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "변형된 뉴클레오타이드"는 아데닌 리보뉴클레오타이드, 구아닌 리보뉴클레오타이드, 사이토신 리보뉴클레오타이드, 우라실 리보뉴클레오타이드, 아데닌 데옥시리보뉴클레오타이드, 구아닌 데옥시리보뉴클레오타이드, 사이토신 데옥시리보뉴클레오타이드 및 티미딘 데옥시리보뉴클레오타이드로부터 선택되는 상응하는 참조 뉴클레오타이드와 비교할 때 하나 이상의 화학적 변형을 갖는 뉴클레오타이드를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 자연적으로 발생하지 않는 뉴클레오타이드이다. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 당, 핵염기 및/또는 포스페이트기에 하나 이상의 화학적 변형을 갖는다. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 상응하는 참조 뉴클레오타이드에 접합된 하나 이상의 화학적 모이어티를 갖는다. 전형적으로, 변형된 뉴클레오타이드는 변형된 뉴클레오타이드가 존재하는 핵산에 하나 이상의 바람직한 특성을 부여한다. 예를 들어, 변형된 뉴클레오타이드는 열 안정성, 분해에 대한 저항성, 뉴클레이스 저항성, 용해도, 생체이용률, 생체활성, 감소된 면역원성 등을 개선할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "열린 테트라루프(nicked tetraloop) 구조"는 별개의 센스(패신저(passenger)) 및 안티센스(가이드) 가닥을 특징으로 하는 RNAi 올리고뉴클레오타이드의 구조를 지칭하며, 여기서 센스 가닥은 안티센스 가닥과 상보성 영역을 가지며, 적어도 하나의 가닥 중 일반적으로 센스 가닥은 적어도 하나의 가닥 내에 형성된 인접한 스템 영역을 안정화하도록 구성된 테트라루프를 갖는다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "올리고뉴클레오타이드"는 짧은 핵산(예를 들어, 약 100개 미만의 뉴클레오타이드 길이)을 지칭한다. 올리고뉴클레오타이드는 단일-가닥(ss) 또는 ds일 수 있다. 올리고뉴클레오타이드는 이중체 영역을 가질 수 있거나 또는 가지지 않을 수 있다. 일습의 비제한적인 예로서, 올리고뉴클레오타이드는 작은 간섭 RNA(siRNA), 마이크로RNA(miRNA), 짧은 헤어핀 RNA(shRNA), 다이서 기질 간섭 RNA(dsiRNA), 안티센스 올리고뉴클레오타이드, 짧은 siRNA 또는 ss siRNA일 수 있으나 이들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, ds 올리고뉴클레오타이드는 RNAi 올리고뉴클레오타이드이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "오버행"은 하나의 가닥 또는 영역이 이중체를 형성하는 상보성 가닥의 말단 너머로 연장되는 하나의 가닥 또는 영역으로부터 생성되는 말단 비염기 페어링 뉴클레오타이드(들)를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 오버행은 ds 올리고뉴클레오타이드의 5' 말단 또는 3' 말단에서 이중체 영역으로부터 연장되는 하나 이상의 페어링되지 않은 뉴클레오타이드를 포함한다. 소정의 실시형태에서, 오버행은 ds 올리고뉴클레오타이드의 안티센스 가닥 또는 센스 가닥 상의 3' 또는 5' 오버행이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "포스페이트 유사체"는 포스페이트기의 정전기적 및/또는 입체 특성을 모방하는 화학적 모이어티를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 포스페이트 유사체는 종종 효소적 제거에 민감한 5'-포스페이트 대신 올리고뉴클레오타이드의 5' 말단 뉴클레오타이드에 위치한다. 일부 실시형태에서, 5' 포스페이트 유사체는 포스파테이스-저항성 연결을 포함한다. 포스페이트 유사체의 예는 5' 메틸렌포스포네이트(5'-MP) 및 5'-(E)-바이닐포스포네이트(5'-VP)와 같은 5' 포스포네이트를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 5'-말단 뉴클레오타이드에서 당의 4'-탄소 위치에 포스페이트 유사체("4'-포스페이트 유사체"로 지칭됨)를 갖는다. 4'-포스페이트 유사체의 예는 옥시메틸기의 산소 원자가 당 모이어티(예를 들어, 이의 4'-탄소에) 또는 이의 유사체에 결합된 옥시메틸포스포네이트이다. 예를 들어, 미국 특허 가출원 제62/383,207호(2016년 9월 2일자로 출원됨) 및 제62/393,401호(2016년 9월 12일자로 출원됨) 참조. 올리고뉴클레오타이드의 5' 말단에 대한 다른 변형이 개발되었다(예를 들어, 국제 출원 제WO 2011/133871호; 미국 특허 제8,927,513호; 및 문헌[Prakash et al. (2015) Nucleic Acids Res. 43:2993-3011] 참조).
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 유전자(예를 들어, LPA)의 "감소된 발현"은 적절한 참조(예를 들어, 참조 세포, 세포 집단, 샘플 또는 대상체)와 비교할 때 RNA 전사체(예를 들어, LPA mRNA) 또는 유전자에 의해 암호화된 단백질의 양 또는 수준의 감소 및/또는 세포, 세포 집단, 샘플 또는 대상체에서의 유전자 활성의 양 또는 수준의 감소를 지칭한다. 예를 들어, 세포를 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, LPA mRNA를 포함하는 뉴클레오타이드 서열에 상보적인 뉴클레오타이드 서열을 갖는 안티센스 가닥을 포함하는 올리고뉴클레오타이드)와 접촉시키는 행위는 ds 올리고뉴클레오타이드로 처리되지 않은 세포와 비교할 때 LPA mRNA, apo(a) 단백질 및/또는 apo(a) 활성의 양 또는 수준을 감소시킬 수 있다(예를 들어, RNAi 경로에 의한 LPA mRNA의 불활성화 및/또는 분해를 통해). 유사하게는 그리고 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "발현을 감소시키는 것"은 유전자(예를 들어, LPA)의 발현을 감소시키는 행위를 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "LPA 발현의 감소"는 적절한 참조(예를 들어, 참조 세포, 세포 집단, 샘플 또는 대상체)와 비교할 때 세포, 세포 집단, 샘플 또는 대상체에서 LPA mRNA, apo(a) 단백질 및/또는 apo(a) 활성의 양 또는 수준이 감소하는 것을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "상보성 영역"은 적절한 혼성화 조건(예를 들어, 포스페이트 완충액, 세포 내 등)하에서 2개의 뉴클레오타이드 서열 사이의 혼성화를 허용하기 위해 뉴클레오타이드의 역평행 서열에 충분히 상보적인 핵산(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)의 뉴클레오타이드 서열을 지칭한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 mRNA 표적 서열에 상보적인 영역을 갖는 표적화 서열을 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "리보뉴클레오타이드"는 2' 위치에 하이드록실기를 포함하는 펜토스 당으로서 리보스를 갖는 뉴클레오타이드를 지칭한다. 변형된 리보뉴클레오타이드는 리보스, 포스페이트기 또는 염기에서의 또는 이의 변형 또는 치환을 포함하여 2' 위치 이외의 원자의 하나 이상의 변형 또는 치환을 갖는 리보뉴클레오타이드이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "RNAi 올리고뉴클레오타이드"는 (a) 안티센스 가닥 또는 안티센스 가닥의 일부가 표적 mRNA(예를 들어, LPA mRNA)의 절단에서 아르고노트 2(Argonaute 2: Ago2) 엔도뉴클레이스에 의해 사용되는, 센스 가닥(패신저) 및 안티센스 가닥(가이드)을 갖는 ds 올리고뉴클레오타이드 또는 (b) 안티센스 가닥(또는 해당 안티센스 가닥의 일부)이 표적 mRNA(예를 들어, LPA mRNA)의 절단에서 Ago2 엔도뉴클레이스에 의해 사용되는 단일 안티센스 가닥을 갖는 ss 올리고뉴클레오타이드 중 하나를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "가닥"은 뉴클레오타이드간 연결(예를 들어, 포스포다이에스터 연결 또는 포스포로티오에이트 연결)을 통해 함께 연결된 뉴클레오타이드의 단일 연속 서열을 지칭한다. 일부 실시형태에서, 가닥은 2개의 자유 말단(예를 들어, 5' 말단 및 3' 말단)을 갖는다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "대상체"는 마우스, 토끼 및 인간을 포함하는 임의의 포유동물을 의미한다. 일 실시형태에서, 대상체는 인간 또는 NHP이다. 더욱이, "개체" 또는 "환자"는 "대상체"와 상호교환적으로 사용될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "합성"은 인공적으로 합성되거나(예를 들어, 기계(예를 들어, 고체-상태 핵산 합성기)를 사용하여) 또는 달리 정상적으로 분자를 생산하는 천연 공급원(예를 들어, 세포 또는 유기체)으로부터 유래되지 않는 핵산 또는 기타 분자를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "표적화 리간드"는 관심 조직 또는 세포에 다른 물질을 표적화할 목적으로 관심 조직 또는 세포의 동족 분자(예를 들어, 수용체)에 선택적으로 결합하고 또 다른 물질에 접합 가능한 분자(예를 들어, 탄수화물, 아미노 당, 콜레스테롤, 폴리펩타이드 또는 지질)를 지칭한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 표적화 리간드는 특정 관심 조직 또는 세포에 올리고뉴클레오타이드를 표적화할 목적으로 올리고뉴클레오타이드에 접합될 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적화 리간드는 세포 표면 수용체에 선택적으로 결합한다. 따라서, 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드에 접합된 경우 표적화 리간드는 세포의 표면에 발현된 수용체에 대한 선택적 결합 및 올리고뉴클레오타이드, 표적화 리간드 및 수용체를 포함하는 복합체의 세포에 의한 엔도솜 내재화를 통해 특정 세포로의 올리고뉴클레오타이드의 전달을 촉진한다. 일부 실시형태에서, 표적화 리간드는 올리고뉴클레오타이드가 세포 내에서 표적화 리간드로부터 방출되도록 세포 내재화 후 또는 동안에 절단되는 링커를 통해 올리고뉴클레오타이드에 접합된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "테트라루프"는 뉴클레오타이드의 측면 서열의 혼성화에 의해 형성된 인접한 이중체의 안정성을 증가시키는 루프를 지칭한다. 안정성의 증가는 뉴클레오타이드의 무작위로 선택된 서열로 구성된 유사한 길이의 루프의 세트로부터 평균적으로 예상되는 인접한 스템 이중체의 용융 온도(Tm)보다 더 높은 인접한 스템 이중체의 Tm의 증가로서 검출 가능하다. 예를 들어, 테트라루프는 10mM NaHPO4에서 적어도 약 50℃, 적어도 약 55℃, 적어도 약 56℃, 적어도 약 58℃, 적어도 약 60℃, 적어도 약 65℃ 또는 적어도 약 75℃의 Tm을 적어도 2개의 염기쌍(bp) 길이의 이중체를 포함하는 헤어핀에 부여할 수 있다. 일부 실시형태에서, 테트라루프는 상호작용을 스태킹함으로써 인접한 스템 이중체에서 bp를 안정화시킬 수 있다. 또한, 테트라루프에서 뉴클레오타이드 간의 상호작용은 비-왓슨-크릭 염기 페어링, 상호작용 스태킹, 수소 결합 및 접촉 상호작용을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다(Cheong et al. (1990) Nature 346:680-82; Heus & Pardi (1991) Science 253:191-94). 일부 실시형태에서, 테트라루프는 3개 내지 6개의 뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 이로 이루어지며, 전형적으로 4개 내지 5개의 뉴클레오타이드이다. 소정의 실시형태에서, 테트라루프는 변형될 수 있거나 또는 변형되지 않을 수 있는(예를 들어, 표적화 모이어티에 접합될 수 있거나 또는 접합되지 않을 수 있는) 3개, 4개, 5개 또는 6개의 뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 일 실시형태에서, 테트라루프는 4개의 뉴클레오타이드로 이루어진다. 임의의 뉴클레오타이드가 테트라루프에 사용될 수 있으며, 이러한 뉴클레오타이드에 대한 표준 IUPAC-IUB 기호는 문헌[Cornish-Bowden (1985) Nucleic Acids Res. 13:3021-3030]에 기술되어 있는 바와 같이 사용될 수 있다. 예를 들어, 문자 "N"은 해당 위치에 임의의 염기가 있을 수 있음을 의미하는 데 사용될 수 있고, 문자 "R"은 해당 위치에 A(아데닌) 또는 G(구아닌)이 있을 수 있음을 나타내는 데 사용될 수 있으며, "B"는 해당 위치에 C(사이토신), G(구아닌), T(티민) 또는 U(우라실)이 있을 수 있음을 나타내는 데 사용될 수 있다. 테트라루프의 예는 테트라루프의 UNCG 패밀리(예를 들어, UUCG), 테트라루프의 GNRA 패밀리(예를 들어, GAAA) 및 CUUG 테트라루프(Woese et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8467-8471; Antao et al. (1991) Nucleic Acids Res. 19:5901-5905)를 포함한다. DNA 테트라루프의 예는 테트라루프의 d(GNNA) 패밀리(예를 들어, d(GTTA), 테트라루프의 d(GNRA)) 패밀리, 테트라루프의 d(GNAB) 패밀리, 테트라루프의 d(CNNG) 패밀리 및 테트라루프의 d(TNCG) 패밀리(예를 들어, d(TTCG))를 포함한다. 예를 들어, 문헌[Nakano et al. (2002) Biochem. 41:4281-14292; Shinji et al. (2000) Nippon Kagakkai Koen Yokoshu 78:731] 참조. 일부 실시형태에서, 테트라루프는 열린 테트라루프 구조 내에 포함된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "치료하다" 또는 "치료하는"은, 예를 들어, 기존의 병태(예를 들어, 질환, 장애)와 관련하여 대상체의 건강 및/또는 웰빙을 개선하거나 또는 병태의 발생 가능성을 방지하거나 또는 감소시킬 목적으로 치료제(예를 들어, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드)를 대상체에게 투여함으로써 이를 필요로 하는 대상체에게 치료를 제공하는 행위를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 치료는 대상체가 경험하는 병태(예를 들어, 질환, 장애)의 적어도 하나의 징후, 증상 또는 기여 요인의 빈도 또는 중증도를 줄이는 것을 포함한다.
II. LPA 발현의 올리고뉴클레오타이드 저해제
본 개시내용은 그 중에서도 LPA 발현을 저해하는 올리고뉴클레오타이드를 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에서 LPA 발현을 저해하는 올리고뉴클레오타이드는 LPA mRNA를 표적으로 한다.
i. LPA 표적 서열
일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 LPA mRNA를 포함하는 표적 서열을 표적으로 한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드 또는 이의 일부, 단편 또는 가닥(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드의 안티센스 가닥 또는 가이드 가닥)은 LPA mRNA를 포함하는 표적 서열에 결합 또는 어닐링함으로써 LPA 발현을 저해한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 생체내 LPA 발현의 저해를 목적으로 LPA 표적 서열을 표적으로 한다. 일부 실시형태에서, LPA 표적 서열을 표적으로 하는 올리고뉴클레오타이드에 의한 LPA 발현 저해의 양 또는 정도는 올리고뉴클레오타이드의 효능과 상관관계가 있다. 일부 실시형태에서, LPA 표적 서열을 표적으로 하는 올리고뉴클레오타이드에 의한 LPA 발현 저해의 양 또는 정도는 올리고뉴클레오타이드로 치료되는 LPA의 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태가 있는 대상체 또는 환자에서의 치료적 이점의 양 또는 정도와 상관관계가 있다.
다수의 상이한 종(예를 들어, 인간, 사이노몰구스 원숭이 및 레서스 원숭이; 예를 들어, 실시예 1을 참조)의 mRNA를 포함하는 apo(a)를 암호화하는 LPA mRNA의 뉴클레오타이드 서열의 검사 및 분석을 통해, 시험관내 및 생체내 테스트의 결과로서(예를 들어, 실시예 2 및 실시예 3을 참조), LPA mRNA의 소정의 뉴클레오타이드 서열은 LPA 발현의 올리고뉴클레오타이드-기반 저해에 대해 다른 것보다 더 순응적(amenable)이며, 따라서 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드에 대한 표적 서열로서 유용하다는 것이 발견되었다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된(예를 들어, 표 5) 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)의 센스 가닥은 LPA 표적 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된(예를 들어, 표 5) ds 올리고뉴클레오타이드의 센스 가닥의 일부 또는 영역은 LPA 표적 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, LPA 표적 서열은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 서열을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
ii. LPA 표적화 서열
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 세포에서 LPA mRNA를 표적화하고 LPA 발현을 저해할 목적으로 LPA mRNA에 대한 상보성 영역(예를 들어, LPA mRNA의 표적 서열 내)을 갖는다. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 상보성(왓슨-크릭) 염기 페어링에 의해 LPA 표적 서열에 결합 또는 어닐링하는 상보성 영역을 갖는 LPA 표적화 서열(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드의 안티센스 가닥 또는 가이드 가닥)을 포함한다. 표적화 서열 또는 상보성 영역은 일반적으로 LPA mRNA의 발현을 저해할 목적으로 올리고뉴클레오타이드(또는 이의 가닥)를 LPA mRNA에 연결 또는 어닐링할 수 있는 적합한 길이 및 염기 함량을 갖는다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 적어도 약 12개, 적어도 약 13개, 적어도 약 14개, 적어도 약 15개, 적어도 약 16개, 적어도 약 17개, 적어도 약 18개, 적어도 약 19개, 적어도 약 20개, 적어도 약 21개, 적어도 약 22개, 적어도 약 23개, 적어도 약 24개, 적어도 약 25개, 적어도 약 26개, 적어도 약 27개, 적어도 약 28개, 적어도 약 29개 또는 적어도 약 30개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 약 12개 내지 약 30개(예를 들어, 12개 내지 30개, 12개 내지 22개, 15개 내지 25개, 17개 내지 21개, 18개 내지 27개, 19개 내지 27개 또는 15개 내지 30개)의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 약 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개, 25개, 26개, 27개, 28개, 29개 또는 30개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 18개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 19개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 20개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 21개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 22개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 23개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 24개의 뉴클레오타이드 길이이다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 LPA 표적 서열에 완전히 상보적인 표적화 서열 또는 상보성 영역(예를 들어, 이중 가닥 올리고뉴클레오타이드의 안티센스 가닥 또는 가이드 가닥)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 LPA 표적 서열에 부분적으로 상보적이다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 서열에 완전히 상보적인 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 서열에 부분적으로 상보적인 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 LPA mRNA를 포함하는 뉴클레오타이드의 연속 서열에 상보적인 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함하되, 뉴클레오타이드의 연속 서열은 약 12개 내지 약 30개의 뉴클레오타이드 길이(예를 들어, 12개 내지 30개, 12개 내지 28개, 12개 내지 26개, 12개 내지 24개, 12개 내지 20개, 12개 내지 18개, 12개 내지 16개, 14개 내지 22개, 16개 내지 20개, 18개 내지 20개 또는 18개 내지 19개의 뉴클레오타이드 길이)이다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 LPA mRNA를 포함하는 뉴클레오타이드의 연속 서열에 상보적인 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함하되, 뉴클레오타이드의 연속 서열은 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개 또는 20개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 LPA mRNA를 포함하는 뉴클레오타이드의 연속 서열에 상보적인 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함하되, 뉴클레오타이드의 연속 서열은 19개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 LPA mRNA를 포함하는 뉴클레오타이드의 연속 서열에 상보적인 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함하되, 뉴클레오타이드의 연속 서열은 20개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 뉴클레오타이드의 연속 서열에 상보적인 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함하되, 선택적으로 뉴클레오타이드의 연속 서열은 19개의 뉴클레오타이드 길이이다.
일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 표적화 서열 또는 상보성 영역은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 서열의 연속 뉴클레오타이드에 상보적이며, 안티센스 가닥의 전체 길이에 걸쳐 있다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 상보성 영역은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 서열의 연속 뉴클레오타이드에 상보적이며, 안티센스 가닥의 전체 길이의 일부에 걸쳐 있다. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 서열의 1번 내지 20번 뉴클레오타이드에 걸쳐 있는 뉴클레오타이드의 연속 신장부(stretch)에 적어도 부분적으로(예를 들어, 완전히) 상보적인 상보성 영역(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드의 안티센스 가닥 상에)을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 상응하는 LPA 표적 서열과 하나 이상의 염기쌍(bp) 미스매치를 갖는 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 상응하는 LPA 표적 서열과 최대 약 1개, 최대 약 2개, 최대 약 3개, 최대 약 4개, 최대 약 5개 등의 미스매치를 가질 수 있되, 단, 적절한 혼성화 조건하에서 표적화 서열 또는 상보성 영역이 LPA mRNA에 결합 또는 어닐링하는 능력 및/또는 LPA 발현을 감소시키거나 또는 저해하는 올리고뉴클레오타이드의 능력이 유지되어야 한다. 대안적으로, 일부 실시형태에서, 표적화 서열 또는 상보성 영역은 상응하는 LPA 표적 서열과 1개 이하, 2개 이하, 3개 이하, 4개 이하 또는 5개 이하의 미스매치를 포함하되, 단, 적절한 혼성화 조건하에서 표적화 서열 또는 상보성 영역이 LPA mRNA에 결합 또는 어닐링하는 능력 및/또는 LPA 발현을 감소시키거나 또는 저해하는 올리고뉴클레오타이드의 능력이 유지되어야 한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 상응하는 표적 서열과 1개의 미스매치를 갖는 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 상응하는 표적 서열과 2개의 미스매치를 갖는 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 상응하는 표적 서열과 3개의 미스매치를 갖는 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 상응하는 표적 서열과 4개의 미스매치를 갖는 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 상응하는 표적 서열과 5개의 미스매치를 갖는 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 상응하는 표적 서열과 하나 이상의 미스매치(예를 들어, 2개, 3개, 4개, 5개 이상의 미스매치)를 갖는 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함하되, 적어도 2개(예를 들어, 전부)의 미스매치는 연속적으로 위치하거나(예를 들어, 한 행에 2개, 3개, 4개, 5개 이상의 미스매치) 또는 미스매치는 표적화 서열 또는 상보성 영역 전체에 걸쳐 임의의 위치에 산재되어 있다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 상응하는 표적 서열과 하나 이상의 미스매치(예를 들어, 2개, 3개, 4개, 5개 이상의 미스매치)를 갖는 표적화 서열 또는 상보성 영역을 포함하되, 적어도 2개(예를 들어, 전부)의 미스매치는 연속적으로 위치하거나(예를 들어, 한 행에 2개, 3개, 4개, 5개 이상의 미스매치) 또는 적어도 하나 이상의 미스매치되지 않은 염기쌍은 미스매치 또는 이들의 조합 사이에 위치한다.
iii. 올리고뉴클레오타이드의 유형
RNAi 올리고뉴클레오타이드, 안티센스 올리고뉴클레오타이드, miRNA 등을 포함하지만 이들로 제한되지 않는 다양한 올리고뉴클레오타이드 유형 및/또는 구조가 본 명세서의 방법에서 LPA mRNA를 표적화하는데 유용하다. 본 명세서 또는 다른 곳에 기재된 임의의 올리고뉴클레오타이드 유형은 LPA 발현을 저해할 목적으로 본 명세서에서 LPA mRNA 표적화 서열을 혼입시키기 위한 프레임워크로서 사용하기 위해 상정된다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 다이서 개입(involvement) 상류 또는 하류의 RNA 간섭(RNAi) 경로에 결합함으로써 LPA 발현을 저해한다. 예를 들어, RNAi 올리고뉴클레오타이드는 1개 내지 5개의 뉴클레오타이드의 적어도 하나의 3' 오버행과 함께 약 19개 내지 25개의 뉴클레오타이드 크기를 갖는 각 가닥으로 개발되었다(예를 들어, 미국 특허 제8,372,968호 참조). 활성 RNAi 산물을 생성하기 위해 다이서에 의해 처리되는 더 긴 올리고뉴클레오타이드가 또한 개발되었다(예를 들어, 미국 특허 제8,883,996호 참조). 추가 작업은 가닥 중 하나가 열역학적으로 안정화되는 테트라루프 구조를 포함하는 구조를 포함하여 적어도 하나의 가닥의 적어도 하나의 말단이 이중체 표적화 영역 너머로 연장되는 연장된 ds 올리고뉴클레오타이드를 생산하였다(예를 들어, 미국 특허 제8,513,207호 및 제8,927,705호뿐만 아니라 국제 공개 제WO 2010/033225호 참조). 이러한 구조는 ds 연장뿐만 아니라 ss 연장(분자의 한쪽 또는 양쪽에서)을 포함할 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 다이서 개입(예를 들어, 다이서 절단) 하류의 RNAi 경로에 결합한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥의 3' 말단에 오버행(예를 들어, 1개, 2개 또는 3개의 뉴클레오타이드 길이)을 갖는다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, siRNA)는 표적 mRNA(예를 들어, LPA mRNA)에 대해 안티센스인 21개 뉴클레오타이드의 가이드 가닥 및 상보성 패신저 가닥을 포함하며, 여기에서 두 가닥은 어닐링되어 19-bp 이중체를 형성하고, 3' 말단 중 하나 또는 둘 다에서 2개의 뉴클레오타이드 오버행을 형성한다. 23개 뉴클레오타이드의 가이드 가닥 및 21개 뉴클레오타이드의 패신저 가닥을 갖는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 더 긴 올리고뉴클레오타이드 설계가 또한 상정되되, 여기서 분자의 오른쪽에 평활 말단(패신저 가닥의 3' 말단/가이드 가닥의 5' 말단)과 분자의 왼쪽에 2개의 뉴클레오타이드 3'-가이드 가닥 오버행(패신저 가닥의 5' 말단/가이드 가닥의 3' 말단)이 있다. 이러한 분자에는 21bp 이중체 영역이 있다. 예를 들어, 미국 특허 제9,012,138호; 제9,012,621호 및 제9,193,753호 참조.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 둘 다 약 17개 내지 26개(예를 들어, 17개 내지 26개, 20개 내지 25개 또는 21개 내지 23개)의 뉴클레오타이드 길이 범위인 센스 및 안티센스 가닥을 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 둘 다 약 19개 내지 22개의 뉴클레오타이드 길이 범위인 센스 및 안티센스 가닥을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 및 안티센스 가닥은 동일한 길이이다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 또는 안티센스 가닥 중 하나 또는 센스 및 안티센스 가닥 모두에 3'-오버행이 있는 센스 및 안티센스 가닥을 포함한다. 일부 실시형태에서, 둘 다 약 21개 내지 23개의 뉴클레오타이드 길이 범위인 센스 및 안티센스 가닥을 갖는 올리고뉴클레오타이드의 경우, 센스, 안티센스 또는 센스 및 안티센스 가닥 모두의 3' 오버행은 1개 또는 2개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 22개 뉴클레오타이드의 가이드 가닥 및 20개 뉴클레오타이드의 패신저 가닥을 갖되, 분자의 오른쪽에 평활 말단(패신저 가닥의 3' 말단/가이드 가닥의 5' 말단)과 분자의 왼쪽에 2개의 뉴클레오타이드 3'-가이드 가닥 오버행(패신저 가닥의 5' 말단/가이드 가닥의 3' 말단)이 있다. 이러한 분자에는 20bp 이중체 영역이 있다.
본 명세서의 조성물 및 방법과 함께 사용하기 위한 다른 올리고뉴클레오타이드 디자인은 다음을 포함한다: 16량체 siRNA(예를 들어, 문헌[Nucleic Acids in Chemistry and Biology, Blackburn (ed.), Royal Society of Chemistry, 2006] 참조), shRNA(예를 들어, 19bp 또는 더 짧은 스템을 가짐; 예를 들어, 문헌[Moore et al. (2010) Methods Mol. Biol. 629:141-58] 참조), 평활 siRNA(예를 들어, 19bp 길이; 예를 들어, 문헌[Kraynack & Baker (2006) RNA 12:163-76] 참조), 비대칭 siRNA(aiRNA; 예를 들어, 문헌[Sun et al. (2008) NAT. BIOTECHNOL. 26:1379-82] 참조), 비대칭 더 짧은-이중체 siRNA(예를 들어, 문헌[Chang et al. (2009) MOL. THER. 17:725-32] 참조), 포크(fork) siRNA(예를 들어, 문헌[Hohjoh (2004) FEBS LETT. 557:193-198] 참조), ss siRNA(Elsner (2012) NAT. BIOTECHNOL. 30:1063), 아령 모양 원형 siRNA(예를 들어, 문헌[Abe et al. (2007) J. AM. CHEM. SOC. 129:15108-09] 참조) 및 작은 내부 분할 간섭 RNA(siRNA; 예를 들어, 문헌[Bramsen et al. (2007) NUCLEIC ACIDS RES. 35:5886-97] 참조). LPA의 발현을 감소시키거나 또는 저해하기 위해 일부 실시형태에서 사용될 수 있는 올리고뉴클레오타이드 구조의 추가의 비제한적인 예는 마이크로RNA(miRNA), 짧은 헤어핀 RNA(shRNA) 및 짧은 siRNA(예를 들어, 문헌[Hamilton et al. (2002) EMBO J. 21:4671-79] 참조; 또한 미국 공개 제2009/0099115호 참조)이다.
여전히, 일부 실시형태에서, 본 명세서에서 LPA 발현을 감소시키거나 또는 저해하기 위한 올리고뉴클레오타이드는 단일-가닥(ss)이다. 이러한 구조는 ss RNAi 분자를 포함할 수 있지만 이들로 제한되지 않는다. 최근의 노력으로 ss RNAi 분자의 활성이 입증되었다(예를 들어, 문헌[Matsui et al. (2016) Mol. Ther. 24:946-955] 참조). 그러나, 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 안티센스 올리고뉴클레오타이드(ASO)이다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 5'에서 3' 방향으로 쓰여지거나 또는 묘사될 때 특정 핵산의 표적화된 분절의 역 상보를 포함하고, 세포에서 표적 RNA의 RNaseH-매개성 절단을 유도하도록(예를 들어, 갭머(gapmer)로) 또는 세포에서 표적 mRNA의 번역을 저해하도록(예를 들어, 믹스머(mixmer)로) 적합하게 변형된 핵염기 서열을 갖는 ss 올리고뉴클레오타이드이다. 본 명세서에서 사용하기 위한 ASO는, 예를 들어, 미국 특허 제9,567,587호에 나타나 있는 바와 같은 것을 포함(예를 들어, 핵염기(피리미딘, 퓨린)의 길이, 당 모이어티 및 핵염기의 헤테로고리형 부분의 변경 포함)하여 당업계에 공지된 임의의 적합한 방식으로 변형될 수 있다. 또한, ASO는 특정 표적 유전자의 발현을 감소시키기 위해 수십 년 동안 사용되어 왔다(예를 들어, 문헌[Bennett et al. (2017) Annu. Rev. Pharmacol. 57:81-105] 참조).
iv. 이중 가닥 올리고뉴클레오타이드
본 개시내용은 센스 가닥(본 명세서에서 패신저 가닥으로도 지칭됨) 및 안티센스 가닥(본 명세서에서 가이드 가닥으로도 지칭됨)을 포함하는, LPA mRNA를 표적화하고 LPA 발현을 저해(예를 들어, RNAi 경로를 통해)하기 위한 이중 가닥(ds) 올리고뉴클레오타이드를 제공한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 별개의 가닥이며, 공유적으로 연결되지 않는다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 공유적으로 연결된다.
일부 실시형태에서, 센스 가닥은 제1 영역(R1) 및 제2 영역(R2)을 갖되, R2는 제1 하위영역(S1), 테트라루프(L) 또는 트라이루프(triL) 및 제2 하위영역(S2)을 포함하고, L 또는 triL은 S1과 S2 사이에 위치하며, S1 및 S2는 제2 이중체(D2)를 형성한다. D2는 다양한 길이를 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, D2는 약 1bp 내지 6bp 길이이다. 일부 실시형태에서, D2는 2bp 내지 6bp, 3bp 내지 6bp, 4bp 내지 6bp, 5bp 내지 6bp, 1bp 내지 5bp, 2bp 내지 5bp, 3bp 내지 5bp 또는 4bp 내지 5bp 길이이다. 일부 실시형태에서, D2는 1bp, 2bp, 3bp, 4bp, 5bp 또는 6bp 길이이다. 일부 실시형태에서, D2는 6bp 길이이다.
일부 실시형태에서, 센스 가닥의 R1과 안티센스 가닥은 제1 이중체(D1)를 형성한다. 일부 실시형태에서, D1은 적어도 15개(예를 들어, 적어도 15개, 적어도 16개, 적어도 17개, 적어도 18개, 적어도 19개, 적어도 20개 또는 적어도 21개)의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, D1은 약 12개 내지 30개의 뉴클레오타이드 길이(예를 들어, 12개 내지 30개, 12개 내지 27개, 15개 내지 22개, 18개 내지 22개, 18개 내지 25개, 18개 내지 27개, 18개 내지 30개 또는 21개 내지 30개의 뉴클레오타이드 길이) 범위이다. 일부 실시형태에서, D1은 적어도 12개의 뉴클레오타이드 길이(예를 들어, 적어도 12개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개 또는 적어도 30개 뉴클레오타이드 길이)이다. 일부 실시형태에서, D1은 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개, 25개, 26개, 27개, 28개, 29개 또는 30개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, D1은 20개의 뉴클레오타이드 길이이다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 D1은 센스 가닥 및/또는 안티센스 가닥의 전체 길이에 걸쳐 있지 않다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 D1은 센스 가닥 또는 안티센스 가닥 중 하나 또는 둘 다의 전체 길이에 걸쳐 있다. 소정의 실시형태에서, 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 D1은 센스 가닥 및 안티센스 가닥 둘 다의 전체 길이에 걸쳐 있다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 ds 올리고뉴클레오타이드는 표 3에 정리되어 있는 바와 같이 서열번호 388 내지 403 중 어느 하나의 서열을 갖는 센스 가닥 및 서열번호 788 내지 803으로부터 선택되는 상보성 서열을 포함하는 안티센스 가닥을 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 서열번호 393의 서열을 포함하고, 안티센스 가닥은 서열번호 793의 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, 서열 목록에 제시된 서열은 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드) 또는 다른 핵산의 구조를 기술할 때 언급될 수 있음을 이해하여야 한다. 이러한 실시형태에서, 실제 올리고뉴클레오타이드 또는 다른 핵산은 명시된 서열과 본질적으로 동일하거나 또는 유사한 상보적 특성을 유지하면서 명시된 서열과 비교할 때 하나 이상의 대체 뉴클레오타이드(예를 들어, DNA 뉴클레오타이드의 RNA 대응물 또는 RNA 뉴클레오타이드의 DNA 대응물) 및/또는 하나 이상의 변형된 뉴클레오타이드 및/또는 하나 이상의 변형된 뉴클레오타이드간 연결 및/또는 하나 이상의 다른 변형을 가질 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 ds 올리고뉴클레오타이드는 다이서 효소에 의해 작용될 때 성숙한 RISC에 혼입되는 안티센스 가닥을 생성하는 25개 뉴클레오타이드의 센스 가닥 및 27개 뉴클레오타이드의 안티센스 가닥을 포함한다. 일부 실시형태에서, ds 올리고뉴클레오타이드의 센스 가닥은 27개 뉴클레오타이드보다 더 길다(예를 들어, 28개, 29개, 30개, 31개, 32개, 33개, 34개, 35개, 36개, 37개, 38개, 39개 또는 40개 뉴클레오타이드). 일부 실시형태에서, ds 올리고뉴클레오타이드의 센스 가닥은 25개 뉴클레오타이드보다 더 길다(예를 들어, 26개, 27개, 28개, 29개 또는 30개 뉴클레오타이드).
일부 실시형태에서, 본 명세서의 ds 올리고뉴클레오타이드는 다른 5' 말단과 비교할 때 열역학적으로 덜 안정적인 하나의 5' 말단을 갖는다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥의 3' 말단에 평활 말단 및 안티센스 가닥의 3' 말단에 3'-오버행을 포함하는 비대칭 ds 올리고뉴클레오타이드가 제공된다. 일부 실시형태에서, 안티센스 가닥에 있는 3'-오버행은 약 1개 내지 8개의 뉴클레오타이드 길이(예를 들어, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개 또는 8개의 뉴클레오타이드 길이)이다. 전형적으로, RNAi에 대한 ds 올리고뉴클레오타이드는 안티센스(가이드) 가닥의 3' 말단에 2개 뉴클레오타이드의 오버행을 갖는다. 그러나, 다른 오버행도 가능하다. 일부 실시형태에서, 오버행은 1개 내지 6개의 뉴클레오타이드, 선택적으로 1개 내지 5개, 1개 내지 4개, 1개 내지 3개, 1개 내지 2개, 2개 내지 6개, 2개 내지 5개, 2개 내지 4개, 2개 내지 3개, 3개 내지 6개, 3개 내지 5개, 3개 내지 4개, 4개 내지 6개, 4개 내지 5개, 5개 내지 6개의 뉴클레오타이드 또는 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 뉴클레오타이드 길이를 포함하는 3'-오버행이다. 그러나, 일부 실시형태에서, 오버행은 1개 내지 6개의 뉴클레오타이드, 선택적으로 1개 내지 5개, 1개 내지 4개, 1개 내지 3개, 1개 내지 2개, 2개 내지 6개, 2개 내지 5개, 2개 내지 4개, 2개 내지 3개, 3개 내지 6개, 3개 내지 5개, 3개 내지 4개, 4개 내지 6개, 4개 내지 5개, 5개 내지 6개의 뉴클레오타이드 또는 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 뉴클레오타이드 길이를 포함하는 5'-오버행이다.
일부 실시형태에서, 안티센스 가닥의 3' 말단 상의 2개의 말단 뉴클레오타이드가 변형된다. 일부 실시형태에서, 안티센스 가닥의 3' 말단 상의 2개의 말단 뉴클레오타이드는 표적 mRNA(예를 들어, LPA mRNA)와 상보적이다. 일부 실시형태에서, 안티센스 가닥의 3' 말단 상의 2개의 말단 뉴클레오타이드는 표적 mRNA와 상보적이지 않다. 일부 실시형태에서, 열린 테트라루프 구조에서 올리고뉴클레오타이드의 각 3' 말단 상의 2개의 말단 뉴클레오타이드는 GG이다. 전형적으로, ds 올리고뉴클레오타이드의 각 3' 말단 상의 2개의 말단 GG 중 하나 또는 둘 모두는 표적 mRNA와 상보적이지 않다.
일부 실시형태에서, 센스 가닥과 안티센스 가닥 사이에 1개 이상(예를 들어, 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개)의 미스매치(들)가 있다. 센스 가닥과 안티센스 가닥 사이에 하나 이상의 미스매치가 있는 경우, 이들은 연속적으로(예를 들어, 연속으로 2개, 3개 또는 그 이상) 위치하거나 또는 상보성 영역 전체에 걸쳐 산재될 수 있다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥의 3' 말단은 하나 이상의 미스매치를 포함한다. 일 실시형태에서, 2개의 미스매치가 센스 가닥의 3' 말단에 혼입된다. 일부 실시형태에서, 염기 미스매치 또는 올리고뉴클레오타이드의 센스 가닥의 3' 말단 분절의 불안정화는 ds 올리고뉴클레오타이드의 효능을 개선하거나 또는 증가시킨다.
a. 안티센스 가닥
일부 실시형태에서, LPA mRNA를 표적화하고 LPA 발현을 저해하기 위한 본 명세서에 개시된 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)는 서열번호 404 내지 803 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 서열을 포함하거나 또는 이로 이루어지는 안티센스 가닥을 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 서열번호 404 내지 803 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 서열의 적어도 약 12개(예를 들어, 적어도 12개, 적어도 13개, 적어도 14개, 적어도 15개, 적어도 16개, 적어도 17개, 적어도 18개, 적어도 19개, 적어도 20개, 적어도 21개, 적어도 22개 또는 적어도 23개)개의 연속 뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 이로 이루어지는 안티센스 가닥을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)는 최대 약 40개의 뉴클레오타이드 길이(예를 들어, 최대 40, 최대 35, 최대 30, 최대 27, 최대 25, 최대 21, 최대 19, 최대 17 또는 최대 12개의 뉴클레오타이드 길이)의 안티센스 가닥을 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 적어도 약 12개의 뉴클레오타이드 길이(예를 들어, 적어도 12개, 적어도 15개, 적어도 19개, 적어도 21개, 적어도 22개, 적어도 25개, 적어도 27개, 적어도 30개, 적어도 35개 또는 적어도 38개 뉴클레오타이드 길이)의 안티센스 가닥을 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 약 12개 내지 약 40개(예를 들어, 12개 내지 40개, 12개 내지 36개, 12개 내지 32개, 12개 내지 28개, 15개 내지 40개, 15개 내지 36개, 15개 내지 32개, 15개 내지 28개, 17개 내지 22개, 17개 내지 25개, 19개 내지 27개, 19개 내지 30개, 20개 내지 40개, 22개 내지 40개, 25개 내지 40개 또는 32개 내지 40개)의 뉴클레오타이드 길이 범위의 안티센스 가닥을 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개, 25개, 26개, 27개, 28개, 29개, 30개, 31개, 32개, 33개, 34개, 35개, 36개, 37개, 38개, 39개 또는 40개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 가질 수 있다.
일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 안티센스 가닥은 "가이드 가닥"으로 지칭된다. 예를 들어, RNA-유도성 침묵 복합체(RNA-induced silencing complex: RISC)와 결합하고, Ago2와 같은 아르고노트 단백질에 결합하거나 또는 하나 이상의 유사한 인자와 결합하거나 이에 결합하고, 표적 유전자의 침묵을 지시하는 안티센스 가닥은 가이드 가닥으로 지칭된다. 일부 실시형태에서, 가이드 가닥에 상보적인 센스 가닥은 "패신저 가닥"으로 지칭된다.
b. 센스 가닥
일부 실시형태에서, LPA mRNA를 표적화하고 LPA 발현을 저해하기 위한 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)는 서열번호 4 내지 403 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 센스 가닥 서열을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 서열번호 4 내지 403 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 서열의 적어도 약 12개(예를 들어, 적어도 13개, 적어도 14개, 적어도 15개, 적어도 16개, 적어도 17개, 적어도 18개, 적어도 19개, 적어도 20개, 적어도 21개, 적어도 22개 또는 적어도 23개)개의 연속 뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 이로 이루어진 센스 가닥을 갖는다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)는 최대 약 40개의 뉴클레오타이드 길이(예를 들어, 최대 40개, 최대 36개, 최대 30개, 최대 27개, 최대 25개, 최대 21개, 최대 19개, 최대 17개 또는 최대 12개의 뉴클레오타이드 길이)의 센스 가닥(또는 패신저 가닥)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 적어도 약 12개의 뉴클레오타이드 길이(예를 들어, 적어도 12개, 적어도 15개, 적어도 19개, 적어도 21개, 적어도 25개, 적어도 27개, 적어도 30개, 적어도 36개 또는 적어도 38개의 뉴클레오타이드 길이)의 센스 가닥을 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 약 12개 내지 약 40개(예를 들어, 12개 내지 40개, 12개 내지 36개, 12개 내지 32개, 12개 내지 28개, 15개 내지 40개, 15개 내지 36개, 15개 내지 32개, 15개 내지 28개, 17개 내지 21개, 17개 내지 25개, 19개 내지 27개, 19개 내지 30개, 20개 내지 40개, 22개 내지 40개, 25개 내지 40개 또는 32개 내지 40개)의 뉴클레오타이드 길이 범위의 센스 가닥을 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개, 25개, 26개, 27개, 28개, 29개, 30개, 31개, 32개, 33개, 34개, 35개, 36개, 37개, 38개, 39개 또는 40개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥을 가질 수 있다.
일부 실시형태에서, 센스 가닥은 3' 말단에 스템-루프 구조를 포함한다. 일부 실시형태에서, 센스 가닥은 5' 말단에 스템-루프 구조를 포함한다. 일부 실시형태에서, 스템은 2bp, 3bp, 4bp, 5bp, 6bp, 7bp, 8bp, 9bp, 10bp, 11bp, 12bp, 13bp 또는 14bp 길이의 이중체이다. 일부 실시형태에서, 스템-루프는 분해(예를 들어, 효소적 분해)에 대해 올리고뉴클레오타이드 보호를 제공하고, 표적 세포, 조직 또는 기관(예를 들어, 간) 또는 둘 다에 대한 표적화 및/또는 전달을 촉진 또는 개선한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 스템-루프의 루프는 표적 mRNA(예를 들어, LPA mRNA)에 대한 표적화, 표적 유전자 발현(예를 들어, LPA 발현)의 저해 및/또는 표적 세포, 조직 또는 기관(예를 들어, 간) 또는 둘 다로의 전달을 촉진하거나, 개선하거나 또는 증가시키는 하나 이상의 변형을 포함하는 뉴클레오타이드를 제공한다. 일부 실시형태에서, 스템-루프 자체 또는 스템-루프에 대한 변형(들)은 올리고뉴클레오타이드의 고유한 유전자 발현 저해 활성에 실질적으로 영향을 미치지 않지만, 안정성(예를 들어, 분해에 대한 보호를 제공함) 및/또는 표적 세포, 조직 또는 기관(예를 들어, 간)으로의 올리고뉴클레오타이드의 전달을 촉진하거나, 개선하거나 또는 증가시킨다. 소정의 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 (예를 들어, 3' 말단에) S1-L-S2로 제시되는 스템-루프를 포함하는 센스 가닥을 포함하며; 여기서 S1은 S2에 상보적이고, L은 S1과 S2의 사이에 최대 약 10개의 뉴클레오타이드 길이(예를 들어, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개의 뉴클레오타이드 길이)의 단일-가닥 루프를 형성한다. 일부 실시형태에서, 루프(L)는 4개의 뉴클레오타이드 길이이다. 도 10은 이러한 올리고뉴클레오타이드의 비제한적인 예를 도시한다. 일부 실시형태에서, 위에 기재된 바와 같은 S1-L-S2 구조를 갖는 스템-루프의 루프(L)는 테트라루프(예를 들어, 열린 테트라루프 구조 내)이다. 일부 실시형태에서, 테트라루프는 리보뉴클레오타이드, 데옥시리보뉴클레오타이드, 변형된 뉴클레오타이드, 전달 리간드 및 이들의 조합을 포함한다.
v. 올리고뉴클레오타이드 변형
a. 당 변형
일부 실시형태에서, 변형된 당(본 명세서에서 당 유사체로도 지칭됨)은, 예를 들어, 당의 2', 3', 4' 및/또는 5' 탄소 위치에서 하나 이상의 변형이 발생하는 변형된 데옥시리보스 또는 리보스 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 변형된 당은 또한 잠금 핵산("LNA(locked nucleic acid)"; 예를 들어, 문헌[Koshkin et al. (1998) TETRAHEDON 54:3607-30] 참조), 비잠금 핵산("UNA(unlocked nucleic acid)"; 예를 들어, 문헌[Snead et al. (2013) MOL. THER-NUCL. ACIDS 2:e103] 참조) 및 브리지된 핵산("BNA(bridged nucleic acid)"; 예를 들어, 문헌[Imanishi & Obika (2002) CHEM COMMUN. (CAMB) 21:1653-59] 참조)에 존재하는 것과 같은 비천연 대체 탄소 구조를 포함할 수 있다.
일부 실시형태에서, 당에서의 뉴클레오타이드 변형은 2'-변형을 포함한다. 일부 실시형태에서, 2'-변형은 2'-O-프로파르길, 2'-O-프로필아민, 2'-아미노, 2'-에틸, 2'-플루오로(2'-F), 2'-아미노에틸(EA), 2'-O-메틸(2'-OMe), 2'-O-메톡시에틸(2'-MOE), 2'-O-[2-(메틸아미노)-2-옥소에틸](2'-O-NMA) 또는 2'-데옥시-2'-플루오로-β-d-아라비노뉴클레산(2'-FANA)일 수 있다. 일부 실시형태에서, 변형은 2'-F, 2'-OMe 또는 2'-MOE이다. 일부 실시형태에서, 당에서의 변형은 당 고리의 하나 이상의 탄소의 변형을 포함할 수 있는 당 고리의 변형을 포함한다. 예를 들어, 뉴클레오타이드의 당의 변형은 당의 1'-탄소 또는 4'-탄소에 연결된 당의 2'-산소 또는 에틸렌 또는 메틸렌 브리지를 통해 1'-탄소 또는 4'-탄소에 연결된 2'-산소를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 2'-탄소 내지 3'-탄소 결합이 결여된 비고리형 당을 갖는다. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는, 예를 들어, 당의 4' 위치에 티올기를 갖는다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 올리고뉴클레오타이드는 적어도 약 1개의 변형된 뉴클레오타이드(예를 들어, 적어도 1개, 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개, 적어도 30개, 적어도 35개, 적어도 40개, 적어도 45개, 적어도 50개, 적어도 55개, 적어도 60개 이상)를 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 센스 가닥은 적어도 약 1개의 변형된 뉴클레오타이드(예를 들어, 적어도 1개, 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개, 적어도 30개, 적어도 35개 이상)를 포함한다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 안티센스 가닥은 적어도 약 1개의 변형된 뉴클레오타이드(예를 들어, 적어도 1개, 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개 이상)를 포함한다.
일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 센스 가닥의 모든 뉴클레오타이드가 변형된다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 안티센스 가닥의 모든 뉴클레오타이드가 변형된다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 모든 뉴클레오타이드(즉, 센스 가닥 및 안티센스 가닥 둘 다)가 변형된다. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 2'-변형(예를 들어, 2'-F 또는 2'-OMe, 2'-MOE 및 2'-데옥시-2'-플루오로-β-d-아라비노뉴클레산)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 2'-변형(예를 들어, 2'-F 또는 2'-OMe)을 포함한다.
본 개시내용은 상이한 변형 패턴을 갖는 올리고뉴클레오타이드를 제공한다. 일부 실시형태에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 표 3 및 표 4(뿐만 아니라 도 10) 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 변형 패턴을 갖는 센스 가닥 및 표 3 및 표 4(뿐만 아니라 도 10) 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 변형 패턴을 갖는 안티센스 가닥을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이들 올리고뉴클레오타이드에 대해, 센스 가닥의 8번, 9번, 10번 또는 11번 위치 중 하나 이상이 2'-F 그룹으로 변형된다. 다른 실시형태에서, 이들 올리고뉴클레오타이드에 대해, 센스 가닥의 1번 내지 7번 및 12번 내지 20번 위치에 있는 각각의 뉴클레오타이드의 당 모이어티는 2'-OMe로 변형된다.
일부 실시형태에서, 안티센스 가닥은 당 모이어티의 2'-위치에서 2'-F로 변형된 3개의 뉴클레오타이드를 갖는다. 일부 실시형태에서, 안티센스 가닥의 2번, 5번 및 14번 위치에 있는 당 모이어티 및 선택적으로 1번, 3번, 7번 및 10번 위치에 있는 뉴클레오타이드 중 최대 3개는 2'-F로 변형된다. 다른 실시형태에서, 안티센스 가닥의 2번, 5번 및 14번 위치의 각 위치에 있는 당 모이어티는 2'-F로 변형된다. 다른 실시형태에서, 안티센스 가닥의 1번, 2번, 5번 및 14번 위치의 각 위치에 있는 당 모이어티는 2'-F로 변형된다. 또 다른 실시형태에서, 안티센스 가닥의 1, 2, 3, 5, 7 및 14번 위치의 각 위치에 있는 당 모이어티는 2'-F로 변형된다. 또 다른 실시형태에서, 안티센스 가닥의 1번, 2번, 3번, 5번, 10번 및 14번 위치의 각 위치에 있는 당 모이어티는 2'-F로 변형된다. 또 다른 실시형태에서, 안티센스 가닥의 2번, 3번, 5번, 7번, 10번 및 14번 위치의 각 위치에 있는 당 모이어티는 2'-F로 변형된다.
b. 5' 말단 포스페이트
일부 실시형태에서, RNAi 올리고뉴클레오타이드의 5'-말단 포스페이트기는 Ago2와의 상호작용을 향상시킨다. 그러나, 5'-포스페이트기를 포함하는 올리고뉴클레오타이드는 포스파테이스 또는 다른 효소를 통한 분해에 민감할 수 있으며, 이는 생체내 생체이용률을 제한할 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)는 이러한 분해에 저항성인 5' 포스페이트의 유사체를 포함한다. 일부 실시형태에서, 포스페이트 유사체는 옥시메틸포스포네이트, 바이닐포스포네이트 또는 말로닐 포스포네이트 또는 이들의 조합이다. 소정의 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드 가닥의 3' 말단은 천연 5'-포스페이트기의 정전기적 및 입체 특성을 모방하는 화학적 모이어티("포스페이트 모방체")에 부착된다.
일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 당의 4'-탄소 위치에 포스페이트 유사체("4'-포스페이트 유사체"로 지칭됨)를 갖는다. 예를 들어, 국제 공개 제WO 2018/045317호 참조. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 5'-말단 뉴클레오타이드에 4'-포스페이트 유사체를 포함한다. 일부 실시형태에서, 포스페이트 유사체는 옥시메틸기의 산소 원자가 당 모이어티에(예를 들어, 이의 4'-탄소에) 결합된 옥시메틸포스포네이트 또는 이의 유사체이다. 다른 실시형태에서, 4'-포스페이트 유사체는 티오메틸기의 황 원자 또는 아미노 메틸기의 질소 원자가 당 모이어티의 4'-탄소에 결합된 티오메틸포스포네이트 또는 아미노메틸포스포네이트 또는 이의 유사체이다. 소정의 실시형태에서, 4'-포스페이트 유사체는 옥시메틸포스포네이트이다. 일부 실시형태에서, 옥시메틸포스포네이트는 화학식 -O-CH2-PO(OH)2 또는 -O-CH2-PO(OR)2로 표시되며, 여기서 R은 독립적으로 H, CH3, 알킬기, CH2CH2CN, CH2OCOC(CH3)3, CH2OCH2CH2Si(CH3)3 또는 보호기로부터 선택된다. 소정의 실시형태에서, 알킬기는 CH2CH3이다. 보다 전형적으로, R은 독립적으로 H, CH3 또는 CH2CH3로부터 선택된다.
c. 변형된 뉴클레오사이드내 연결
일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 변형된 뉴클레오사이드간 연결을 포함한다. 일부 실시형태에서, 포스페이트 변형 또는 치환은 적어도 약 1개(예를 들어, 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개 또는 적어도 5개)의 변형된 뉴클레오타이드간 연결을 포함하는 올리고뉴클레오타이드를 생성한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 올리고뉴클레오타이드 중 어느 하나는 약 1개 내지 약 10개(예를 들어, 1개 내지 10개, 2개 내지 8개, 4개 내지 6개, 3개 내지 10개, 5개 내지 10개, 1개 내지 5개, 1개 내지 3개 또는 1개 내지 2개)의 변형된 뉴클레오타이드간 연결을 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 올리고뉴클레오타이드 중 어느 하나는 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개의 변형된 뉴클레오타이드간 연결을 포함한다.
변형된 뉴클레오타이드간 연결은 포스포로다이티오에이트 연결, 포스포로티오에이트 연결, 포스포트라이에스터 연결, 티오알킬포스포네이트 연결, 티오알킬포스포트라이에스터 연결, 포스포라미다이트 연결, 포스포네이트 연결 또는 보라노포스페이트 연결일 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 바와 같은 올리고뉴클레오타이드 중 어느 하나의 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드간 연결은 포스포로티오에이트 연결이다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥의 1번 및 2번 위치, 안티센스 가닥의 1번 및 2번 위치, 안티센스 가닥의 2번 및 3번 위치, 안티센스 가닥의 3번 및 4번 위치, 안티센스 가닥의 20번 및 21번 위치 및 안티센스 가닥의 위치 21번 및 22번 위치 중 하나 이상 사이에 포스포로티오에이트 연결을 갖는다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥의 1번 및 2번 위치, 안티센스 가닥의 1번 및 2번 위치, 안티센스 가닥의 2번 및 3번 위치, 안티센스 가닥의 20번 및 21번 위치 및 안티센스 가닥의 21번 및 22번 위치 각각의 사이에 포스포로티오에이트 연결을 갖는다.
d. 염기 변형
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 하나 이상의 변형된 핵염기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 변형된 핵염기(본 명세서에서 염기 유사체로도 지칭됨)는 뉴클레오타이드 당 모이어티의 1' 위치에 연결된다. 소정의 실시형태에서, 변형된 핵염기는 질소성 염기이다. 소정의 실시형태에서, 변형된 핵염기는 질소 원자를 포함하지 않는다. 예를 들어, 미국 공개 제2008/0274462호 참조. 일부 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 보편적인 염기를 포함한다. 그러나, 소정의 실시형태에서, 변형된 뉴클레오타이드는 핵염기를 포함하지 않는다(비염기성).
일부 실시형태에서, 보편적인 염기는 변형된 뉴클레오타이드에서 뉴클레오타이드 당 모이어티의 1' 위치 또는 뉴클레오타이드 당 모이어티 치환에서 동등한 위치에 위치한 헤테로고리형 모이어티이며, 이중체에 존재할 때 이중체의 구조를 실질적으로 변경하지 않고 염기의 하나 이상의 유형에 대해 반대쪽에 위치할 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적 핵산에 완전히 상보적인 참조 단일-가닥 핵산(예를 들어, 올리고뉴클레오타이드)과 비교할 때, 보편적인 염기를 포함하는 단일-가닥 핵산은 상보적인 핵산으로 형성된 이중체보다 낮은 Tm을 갖는 표적 핵산과 이중체를 형성한다. 그러나, 일부 실시형태에서, 보편적인 염기가 염기로 대체되어 단일 미스매치를 생성하는 참조 단일-가닥 핵산과 비교할 때, 보편적인 염기를 포함하는 단일-가닥 핵산은 미스매치된 염기를 포함하는 핵산으로 형성된 이중체보다 더 높은 Tm을 갖는 표적 핵산과 이중체를 형성한다.
보편적인 연결 뉴클레오타이드의 비제한적인 예는 이노신, 1-β-D-리보퓨라노실-5-나이트로인돌 및/또는 1-β-D-리보퓨라노실-3-나이트로피롤을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다(미국 공개 제2007/0254362호; 문헌[Van Aerschot et al. (1995) NUCLEIC ACIDS RES. 23:4363-70; Loakes et al. (1995) NUCLEIC ACIDS RES. 23:2361-66; 및 Loakes & Brown (1994) NUCLEIC ACIDS RES. 22:4039-43] 참조).
e. 가역적 변형
표적 세포에 도달하기 전에 생체내 환경으로부터 올리고뉴클레오타이드를 보호하기 위한 소정의 변형이 이루어질 수 있지만, 올리고뉴클레오타이드가 표적 세포의 세포질에 도달하면 올리고뉴클레오타이드의 효능 또는 활성을 감소시킬 수 있다. 가역적 변형은 분자가 세포 외부의 바람직한 특성을 유지하도록 이루어질 수 있으며, 이는 이후에 세포의 세포질 환경에 들어갈 때 제거된다. 가역적 변형은, 예를 들어, 세포내 효소의 작용에 의해 또는 세포 내부의 화학적 조건에 의해(예를 들어, 세포내 글루타티온에 의한 환원을 통해) 제거될 수 있다.
일부 실시형태에서, 가역적으로 변형된 뉴클레오타이드는 글루타티온-민감성 모이어티를 포함한다. 전형적으로, 핵산 분자는 뉴클레오타이드간 다이포스페이트 연결에 의해 생성된 음전하를 차폐하고 세포 흡수 및 뉴클레이스 저항성을 개선하기 위해 고리형 이황화 모이어티로 화학적으로 변형되었다. 미국 공개 제2011/0294869호, 국제 공개 제WO 2014/088920호 및 제WO 2015/188197호 및 문헌[Meade et al. (2014) NAT. BIOTECHNOL. 32:1256-63] 참조. 뉴클레오타이드간 다이포스페이트 연결의 이러한 가역적 변형은 세포질(예를 들어 글루타티온)의 환원 환경에 의해 세포내에서 절단되도록 설계되었다. 이전의 예는 세포 내에서 절단 가능한 것으로 보고된 중화 포스포트라이에스터 변형을 포함한다(문헌[Dellinger et al. (2003) J. AM. CHEM. SOC. 125:940-50] 참조).
일부 실시형태에서, 이러한 가역적 변형은 올리고뉴클레오타이드가 뉴클레이스 및 다른 가혹한 환경 조건(예를 들어, pH)에 노출될 생체내 투여(예를 들어, 혈액 및/또는 세포의 리보솜/엔도솜 구획을 통한 이동) 동안 보호를 허용한다. 글루타티온의 수준이 세포외 공간과 비교하여 더 높은 세포의 세포질로 방출되면, 변형은 역전되어 절단된 올리고뉴클레오타이드가 생성된다. 가역적인 글루타티온-민감성 모이어티를 사용하면, 비가역적 화학적 변형을 사용할 수 있는 옵션과 비교할 때 관심 올리고뉴클레오타이드에 입체적으로 더 큰 화학 그룹을 도입할 수 있다. 이는 이러한 더 큰 화학 그룹이 세포질에서 제거될 것이기 때문에, 세포의 세포질 내부에 있는 올리고뉴클레오타이드의 생물학적 활성을 방해하지 않아야 한다. 그 결과, 이러한 더 큰 화학 그룹은 뉴클레이스 저항성, 친유성, 전하, 열 안정성, 특이성 및 감소된 면역원성과 같은 다양한 이점을 뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드에 부여하도록 조작될 수 있다. 일부 실시형태에서, 글루타티온-민감성 모이어티의 구조는 이의 방출 동역학을 변경하도록 조작될 수 있다.
일부 실시형태에서, 글루타티온-민감성 모이어티는 뉴클레오타이드의 당에 부착된다. 일부 실시형태에서, 글루타티온-민감성 모이어티는 변형된 뉴클레오타이드의 당의 2'-탄소에 부착된다. 일부 실시형태에서, 글루타티온-민감성 모이어티는 특히 변형된 뉴클레오타이드가 올리고뉴클레오타이드의 5'-말단 뉴클레오타이드인 경우 당의 5'-탄소에 위치한다. 일부 실시형태에서, 글루타티온-민감성 모이어티는 특히 변형된 뉴클레오타이드가 올리고뉴클레오타이드의 3'-말단 뉴클레오타이드인 경우 당의 3'-탄소에 위치한다. 일부 실시형태에서, 글루타티온-민감성 모이어티는 설폰일기를 포함한다. 예를 들어, 2016년 8월 23일자로 출원된 "Compositions Comprising Reversibly Modified Oligonucleotides and Uses Thereof"라는 명칭의 미국 특허 가출원 제62/378,635호 참조.
vi. 표적화 리간드
일부 실시형태에서, 본 개시내용의 올리고뉴클레오타이드를 하나 이상의 세포 또는 하나 이상의 기관으로 표적화하는 것이 바람직하다. 이러한 전략은 다른 기관에서 바람직하지 않은 효과를 피하거나 또는 올리고뉴클레오타이드로부터 이익을 얻지 못할 세포, 조직 또는 기관에 대한 올리고뉴클레오타이드의 과도한 손실을 피하는 데 도움이 될 수 있다. 따라서, 일부 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 올리고뉴클레오타이드는 조직, 세포 또는 기관으로의 표적화 및/또는 전달을 용이하게 하기 위해(예를 들어, 간으로의 올리고뉴클레오타이드의 전달을 용이하게 하기 위해) 변형된다. 소정의 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 올리고뉴클레오타이드는 간의 간세포로의 올리고뉴클레오타이드의 전달을 용이하게 하기 위해 변형된다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 하나 이상의 표적화 리간드(들)에 접합된 적어도 하나의 뉴클레오타이드(예를 들어, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 6개 이상의 뉴클레오타이드)를 포함한다.
일부 실시형태에서, 표적화 리간드는 탄수화물, 아미노 당, 콜레스테롤, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질 또는 단백질의 일부(예를 들어, 항체 또는 항체 단편) 또는 지질을 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적화 리간드는 압타머이다. 예를 들어, 표적화 리간드는 종양 맥관구조 또는 신경교종 세포를 표적화하는 데 사용되는 RGD 펩타이드, 종양 맥관구조 또는 기공(stoma)을 표적으로 하는 CREKA 펩타이드, CNS 맥관구조에서 발현되는 트랜스페린 수용체를 표적으로 하는 트랜스페린, 락토페린 또는 압타머 또는 신경교종 세포 상의 EGFR을 표적으로 하는 항-EGFR 항체일 수 있다. 소정의 실시형태에서, 표적화 리간드는 하나 이상의 GalNAc 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 1개 이상(예를 들어, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개)의 뉴클레오타이드는 별도의 표적화 리간드에 접합된다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 2개 내지 4개의 뉴클레오타이드는 각각 별도의 표적화 리간드에 접합된다. 일부 실시형태에서, 표적화 리간드는 표적화 리간드는 칫솔모와 유사하고 올리고뉴클레오타이드는 칫솔과 유사하도록 센스 또는 안티센스 가닥의 말단에서 2개 내지 4개의 뉴클레오타이드에 접합된다(예를 들어, 표적화 리간드는 센스 또는 안티센스 가닥의 5' 말단 또는 3' 말단 상의 2개 내지 4개의 뉴클레오타이드 오버행 또는 연장부에 접합된다). 예를 들어, 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥의 5' 말단 또는 3' 말단에 스템-루프를 포함할 수 있고, 스템 루프의 1개, 2개, 3개 또는 4개의 뉴클레오타이드는 표적화 리간드에 개별적으로 접합될 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용에 의해 제공되는 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)는 센스 가닥의 3' 말단에 스템-루프를 포함하되, 스템-루프의 루프는 트라이루프 또는 테트라루프를 포함하고, 각각 트라이루프 또는 테트라루프를 포함하는 3개 또는 4개의 뉴클레오타이드는 표적화 리간드에 개별적으로 접합된다.
GalNAc는 ASGPR에 대해 고친화성 리간드이며, 주로 간세포의 동양혈관 표면에서 발현되고 말단 갈락토스 또는 GalNAc 잔기(아시알로당단백질)를 포함하는 순환하는 당단백질을 결합시키고, 내재화하고 후속 제거하는 데 중요한 역할을 한다. 본 개시내용의 올리고뉴클레오타이드에 대한 GalNAc 모이어티의 접합(간접적 또는 직접적)은 이러한 올리고뉴클레오타이드를 세포에서 발현되는 ASGPR로 표적화하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용의 올리고뉴클레오타이드는 적어도 하나 이상의 GalNAc 모이어티에 접합되되, GalNAc 모이어티는 올리고뉴클레오타이드를 인간 간 세포(예를 들어, 인간 간세포)에서 발현되는 ASGPR로 표적화한다. 일부 실시형태에서, GalNAc 모이어티는 올리고뉴클레오타이드를 간으로 표적화한다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용의 올리고뉴클레오타이드는 1가 GalNAc에 직접적으로 또는 간접적으로 접합된다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 하나 이상의 1가 GalNAc에 직접적으로 또는 간접적으로 접합된다(즉, 2개, 3개 또는 4개의 1가 GalNAc 모이어티에 접합되고, 전형적으로 3개 또는 4개의 1가 GalNAc 모이어티에 접합된다). 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 하나 이상의 2가 GalNAc, 3가 GalNAc 또는 4가 GalNAc 모이어티에 접합된다.
일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드의 1개 이상(예를 들어, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개)의 뉴클레오타이드가 각각 GalNAc 모이어티에 접합된다. 일부 실시형태에서, 테트라루프의 2개 내지 4개의 뉴클레오타이드가 각각 별도의 GalNAc에 접합된다. 일부 실시형태에서, 트라이루프의 1개 내지 3개의 뉴클레오타이드가 각각 별도의 GalNAc에 접합된다. 일부 실시형태에서, 표적화 리간드는 GalNAc 모이어티가 칫솔모와 유사하고 올리고뉴클레오타이드가 칫솔과 유사하도록 센스 또는 안티센스 가닥의 말단에서 2개 내지 4개의 뉴클레오타이드에 접합된다(예를 들어, 리간드는 센스 또는 안티센스 가닥의 5' 말단 또는 3' 말단 상의 2개 내지 4개의 뉴클레오타이드 오버행 또는 연장부에 접합된다). 일부 실시형태에서, GalNAc 모이어티는 센스 가닥의 뉴클레오타이드에 접합된다. 예를 들어, 4개의 GalNAc 모이어티가 각 GalNAc 모이어티가 1개의 뉴클레오타이드에 접합된 센스 가닥의 테트라루프에서 뉴클레오타이드에 접합될 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 하기 도시된 바와 같이 [ademG-GalNAc] 또는 2'-아미노다이에톡시메탄올-구아닌-GalNAc로 지칭되는 구아닌 뉴클레오타이드에 부착된 1가 GalNAc를 포함한다:
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 하기 도시된 바와 같이 [ademA-GalNAc] 또는 2'-아미노다이에톡시메탄올-아데닌-GalNAc로 지칭되는 아데닌 뉴클레오타이드에 부착된 1가 GalNAc를 포함한다:
뉴클레오타이드 서열 GAAA(L = 링커, X = 헤테로원자) 스템 부착 지점을 5'에서 3'로 포함하는 루프에 대해 이러한 접합의 예를 아래에 나타내었다. 이러한 루프는, 예를 들어, 표 5에 열거되고 도 3에 도시된 바와 같이 센스 가닥의 27번 내지 30번 위치에 존재할 수 있다. 화학식에서, 
는 올리고뉴클레오타이드 가닥에 대한 부착 지점을 설명하는 데 사용된다.
적절한 방법 또는 화학(예를 들어, 클릭 화학)이 표적화 리간드를 뉴클레오타이드에 연결하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적화 리간드는 클릭 링커를 사용하여 뉴클레오타이드에 접합된다. 일부 실시형태에서, 아세탈계 링커가 표적화 리간드를 본 명세서에 기재된 올리고뉴클레오타이드 중 어느 하나의 뉴클레오타이드에 접합시키는 데 사용된다. 아세탈계 링커는, 예를 들어, 국제 공개 제WO 2016/100401호에 개시되어 있다. 일부 실시형태에서, 링커는 불안정한 링커이다. 그러나, 다른 실시형태에서, 링커는 안정적이다. GalNAc 모이어티가 아세탈 링커를 사용하여 루프의 뉴클레오타이드에 부착된 뉴클레오타이드 GAAA를 5'에서 3'로 포함하는 루프에 대한 예가 아래에 나타나 있다. 이러한 루프는, 예를 들어, 표 3 또는 표 4에 열거되어 있고 도 10에 도시되어 있는 바와 같은 센스 가닥 중 어느 하나의 27번 내지 30번 위치에 존재할 수 있다. 화학식에서, 
는 올리고뉴클레오타이드 가닥에 대한 부착 지점이다.
언급한 바와 같이, 다양한 적절한 방법 또는 화학 합성 기법(예를 들어, 클릭 화학)이 표적화 리간드를 뉴클레오타이드에 연결하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적화 리간드는 클릭 링커를 사용하여 뉴클레오타이드에 접합된다. 일부 실시형태에서, 아세탈계 링커는 표적화 리간드를 본 명세서에 기재된 올리고뉴클레오타이드 중 어느 하나의 뉴클레오타이드에 접합시키는 데 사용된다. 아세탈계 링커는, 예를 들어, 국제 공개 제WO 2016/100401호에 개시되어 있다. 일부 실시형태에서, 링커는 불안정한 링커이다. 그러나, 다른 실시형태에서, 링커는 안정적인 링커이다.
일부 실시형태에서, 표적화 리간드(예를 들어, GalNAc 모이어티)와 ds 올리고뉴클레오타이드 사이에 이중체 연장부(예를 들어, 최대 3bp, 4bp, 5bp 또는 6bp 길이)가 제공된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 거기에 접합된 GalNAc를 갖지 않는다.
III. 제형
올리고뉴클레오타이드의 사용을 용이하게 하기 위해 다양한 제형이 개발되었다. 예를 들어, 올리고뉴클레오타이드는 분해를 최소화하거나, 전달 및/또는 흡수를 용이하게 하거나 또는 제형 내의 올리고뉴클레오타이드에 또 다른 유익한 특성을 제공하는 제형을 사용하여 대상체 또는 세포 환경으로 전달될 수 있다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 인산 완충 식염수 용액과 같은 완충 용액, 리포솜, 미셀 구조 및 캡시드에서 제형화된다.
양이온성 지질을 갖는 올리고뉴클레오타이드의 제형은 올리고뉴클레오타이드의 세포로의 형질감염을 용이하게 하기 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 양이온성 지질, 예컨대, 리포펙틴, 양이온성 글리세롤 유도체 및 다가양이온성 분자(예를 들어, 폴리라이신)이 사용될 수 있다. 적합한 지질은 Oligofectamine, Lipofectamine(라이프 테크놀로지스(Life Technologies)), NC388(리보자임 파마슈티칼스, 인크.(Ribozyme Pharmaceuticals, Inc.), 콜로라도주 볼더 소재) 또는 FuGene 6(로슈(Roche))를 포함하며, 이들 모두 제조업체의 지침서에 따라 사용될 수 있다.
따라서, 일부 실시형태에서, 제형은 지질 나노입자를 포함한다. 일부 실시형태에서, 부형제는 리포솜, 지질, 지질 복합체, 마이크로스피어, 마이크로입자, 나노스피어 또는 나노입자를 포함하거나, 또는 그렇지 않으면 이를 필요로 하는 대상체의 세포, 조직, 기관 또는 신체에 투여하기 위해 제형화될 수 있다(예를 들어, 문헌[Remington: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, 22nd edition, Pharmaceutical Press, 2013] 참조).
일부 실시형태에서, 본 명세서의 제형은 부형제를 포함한다. 일부 실시형태에서, 부형제는 조성물에 활성 성분의 개선된 안정성, 개선된 흡수, 개선된 가용성 및/또는 치료적 향상을 부여한다. 일부 실시형태에서, 부형제는 완충제(예를 들어, 소듐 시트레이트, 소듐 포스페이트, Tris 염기 또는 소듐 하이드록사이드) 또는 비히클(예를 들어, 완충 용액, 광유, 다이메틸 설폭사이드 또는 미네랄 오일)이다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 저장 수명을 연장하기 위해 동결건조된 다음 사용(예를 들어, 대상체에게 투여) 전 용액으로 만들어진다. 따라서, 본 명세서에 기재된 올리고뉴클레오타이드 중 어느 하나를 포함하는 조성물 내의 부형제는 동결건조보호제(예를 들어, 만니톨, 락토스, 폴리에틸렌 글리콜 또는 폴리바이닐피롤리돈) 또는 붕괴 온도 조절제(예를 들어, 덱스트란, Ficoll™ 또는 젤라틴)일 수 있다.
일부 실시형태에서, 약제학적 조성물은 의도된 투여 경로에 적합하게 제형화된다. 투여 경로의 예는 비경구(예를 들어, 정맥내, 근육내, 복강내, 피내, 피하), 경구(예를 들어, 흡입), 경피(예를 들어, 국소), 경점막 및 직장 투여를 포함한다.
주사용으로 적합한 약제학적 조성물은 멸균 수용액(수용성인 경우) 또는 분산액 및 멸균 주사용 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 정맥내 투여를 위해, 적합한 담체는 생리학적 식염수, 정균수, Cremophor EL™(바스프(BASF), 뉴저지주 파시패니 소재) 또는 인산 완충 식염수(PBS)를 포함한다. 담체는, 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등) 및 이들의 적합한 혼합물을 포함하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 많은 경우에, 등장화제, 예를 들어, 당, 폴리알코올, 예컨대, 만니톨, 소르비톨, 소듐 클로라이드를 조성물에 포함시키는 것이 바람직할 것이다. 멸균 주사용 용액은 필요에 따라 위에 열거된 성분 중 하나 또는 이들의 조합과 함께 선택된 용제에 필요한 양의 올리고뉴클레오타이드를 혼입시킨 다음 여과 멸균함으로써 제조될 수 있다.
일부 실시형태에서, 조성물은 적어도 약 0.1% 이상의 치료제를 포함할 수 있지만, 활성 성분(들)의 백분율은 총 조성물의 중량 또는 부피의 약 1% 내지 약 80% 이상일 수 있다. 용해도, 생체이용률, 생물학적 반감기, 투여 경로, 제품 유통 기간뿐만 아니라 다른 약리학적 고려사항과 같은 인자는 이러한 약제학적 제형을 제조하는 기술 분야의 당업자에 의해 상정될 것이며, 따라서 다양한 투여량 및 치료 양생법이 바람직할 수 있다.
몇몇 실시형태가 임의의 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드의 간-표적화된 전달에 관한 것이지만, 다른 조직의 표적화도 또한 상정된다.
IV. 사용 방법
i. 세포에서 LPA 발현의 감소
본 개시내용은 LPA 발현을 감소시킬 목적으로 유효량의 임의의 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)를 세포 또는 세포 집단에 접촉시키거나 또는 전달하는 방법을 제공한다. 일부 실시형태에서, LPA 발현의 감소는 세포에서 LPA mRNA, apo(a) 단백질 또는 apo(a) 활성의 양 또는 수준의 감소를 측정함으로써 감소된다. 방법은 본 명세서에 기재된 단계를 포함할 수 있고, 이들은 반드시 그런 것은 아니지만 기술된 순서대로 수행될 수 있다. 그러나, 다른 서열도 또한 생각할 수 있다. 더욱이, 개별 또는 여러 단계는 병렬로 그리고/또는 시간적으로 중첩되고/되거나 개별적으로 또는 다중 반복 단계로 수행될 수 있다. 또한, 방법은 추가적인, 명시되지 않은 단계를 포함할 수 있다.
본 명세서의 방법은 임의의 적절한 세포 유형에 유용하다. 일부 실시형태에서, 세포는 mRNA를 발현하는 임의의 세포(예를 들어, 간세포, 대식세포, 단핵구-유래 세포, 전립선 암세포, 뇌 세포, 내분비 조직, 골수, 림프절, 폐, 담낭, 간, 십이지장, 소장, 췌장, 신장, 위장관, 방광, 지방 및 연조직 및 피부)이다. 일부 실시형태에서, 세포는 대상체로부터 얻은 1차 세포이다. 일부 실시형태에서, 1차 세포는 세포가 천연 표현형 특성을 실질적으로 유지하는 제한된 수의 계대를 거쳤다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드가 전달되는 세포는 생체외 또는 시험관내이다(즉, 배양 중인 세포 또는 세포가 상주하는 유기체로 전달될 수 있다).
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 용액의 주입, 올리고뉴클레오타이드가 들어있는 유전자 총, 세포 또는 세포 집단을 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 용액에 노출시키는 것 또는 올리고뉴클레오타이드의 존재하에 세포막의 전기천공을 포함하지만 이들로 제한되지 않는 당업계에 공지된 핵산 전달 방법을 사용하여 세포 또는 세포 집단에 전달된다. 올리고뉴클레오타이드를 세포로 전달하기 위해 당업계에 공지된 다른 방법, 예컨대, 지질-매개성 담체 수송, 화학적-매개성 수송 및 양이온성 리포솜 형질감염, 예컨대, 칼슘 포스페이트 등이 사용될 수 있다.
일부 실시형태에서, LPA 발현의 감소는 LPA 발현과 관련된 세포 또는 세포 집단의 하나 이상의 분자, 특성 또는 특징을 평가하는 검정 또는 기법(예를 들어, LPA 발현 바이오마커 사용) 또는 세포 또는 세포 집단에서 LPA 발현을 직접적으로 나타내는 분자(예를 들어, LPA mRNA 또는 apo(a) 단백질)를 평가하는 검정 또는 기법에 의해 결정된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드가 LPA 발현을 감소시키는 정도는 올리고뉴클레오타이드와 접촉한 세포 또는 세포 집단에서의 LPA 발현을 대조군 세포 또는 세포 집단(예를 들어, 올리고뉴클레오타이드와 접촉하지 않거나 또는 대조군 올리고뉴클레오타이드와 접촉한 세포 또는 세포 집단)과 비교함으로써 평가된다. 일부 실시형태에서, 대조군 세포 또는 세포 집단에서 LPA 발현의 대조군 양 또는 수준은 검정 또는 기법이 수행되는 모든 경우에서 대조군 양 또는 수준이 측정될 필요가 없도록 미리 결정된다. 미리 결정된 수준 또는 값은 다양한 형태를 취할 수 있다. 일부 실시형태에서, 미리 결정된 수준 또는 값은 중앙값 또는 평균과 같은 단일 컷-오프 값일 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)를 세포 또는 세포 집단에 접촉시키거나 또는 전달하는 것은 LPA 발현을 감소시킨다. 일부 실시형태에서, LPA 발현의 감소는 올리고뉴클레오타이드와 접촉하지 않거나 또는 대조군 올리고뉴클레오타이드와 접촉한 세포 또는 세포 집단에서 LPA 발현의 대조군 양 또는 수준에 상대적이다. 일부 실시형태에서, LPA 발현의 감소는 LPA 발현의 대조군 양 또는 수준에 비해 약 1% 이하, 약 5% 이하, 약 10% 이하, 약 15% 이하, 약 20% 이하, 약 25% 이하, 약 30% 이하, 약 35% 이하, 약 40% 이하, 약 45% 이하, 약 50% 이하, 약 55% 이하, 약 60% 이하, 약 70% 이하, 약 80% 이하 또는 약 90% 이하이다. 일부 실시형태에서, LPA 발현의 대조군 양 또는 수준은 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드와 접촉하지 않은 세포 또는 세포 집단에서 LPA mRNA 및/또는 apo(a) 단백질의 양 또는 수준이다. 일부 실시형태에서, 본 명세서의 방법에 따른 세포 또는 세포 집단에 대한 올리고뉴클레오타이드의 전달 효과는 임의의 한정된 기간 또는 시간(예를 들어, 분, 시간, 일, 주, 개월) 후에 평가된다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, LPA 발현은 올리고뉴클레오타이드를 세포 또는 세포 집단에 접촉시키거나 또는 전달한 후 적어도 약 4시간, 약 8시간, 약 12시간, 약 18시간, 약 24시간; 또는 적어도 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 4일, 약 5일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 9일, 약 10일, 약 11일, 약 12일, 약 13일, 약 14일, 약 21일, 약 28일, 약 35일, 약 42일, 약 49일, 약 56일, 약 63일, 약 70일, 약 77일 또는 약 84일 이상 후에 세포 또는 세포 집단에서 결정된다. 일부 실시형태에서, LPA 발현은 적어도 올리고뉴클레오타이드를 세포 또는 세포 집단에 접촉시키거나 또는 전달한 후 약 1개월, 약 2개월, 약 3개월, 약 4개월, 약 5개월 또는 약 6개월 이상 후에 세포 또는 세포 집단에서 결정된다.
일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 세포에서 올리고뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 가닥(예를 들어, 이의 센스 및 안티센스 가닥)을 발현하도록 조작된 이식 유전자의 형태로 전달된다. 일부 실시형태에서, 올리고뉴클레오타이드는 임의의 본 명세서에 개시된 올리고뉴클레오타이드를 발현하도록 조작된 이식 유전자를 사용하여 전달된다. 이식 유전자는 바이러스 벡터(예를 들어, 아데노바이러스, 레트로바이러스, 백시니아 바이러스, 폭스바이러스, 아데노-관련 바이러스 또는 단순포진 바이러스) 또는 비바이러스 벡터(예를 들어, 플라스미드 또는 합성 mRNA)를 사용하여 전달될 수 있다. 일부 실시형태에서, 이식 유전자는 대상체에게 직접 주입될 수 있다.
ii. 의학적 용도
본 개시내용은 또한 LPA 발현을 감소시키는 것으로부터 이익을 얻을 대상체(예를 들어, LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 인간)를 치료하는 데 사용하기 위한 또는 사용하기에 적합한 올리고뉴클레오타이드를 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 LPA의 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체를 치료하는 데 사용하기 위한 또는 사용하기 위해 적합화된 올리고뉴클레오타이드를 제공한다. 본 개시내용은 또한 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 치료하기 위한 약제 또는 약제학적 조성물의 제조에 사용하기 위한 또는 사용하기에 적합한 올리고뉴클레오타이드를 제공한다. 일부 실시형태에서, 사용하기 위한 또는 사용하기에 적합한 올리고뉴클레오타이드는 표적 LPA mRNA를 표적화하고, (예를 들어, RNAi 경로를 통해) LPA 발현을 감소시킨다. 일부 실시형태에서, 사용하기 위한 또는 사용하기에 적합한 올리고뉴클레오타이드는 LPA mRNA를 표적화하고, LPA mRNA, apo(a) 단백질 및/또는 apo(a) 활성의 양 또는 수준을 감소시킨다.
또한, 본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드(예를 들어, ds 올리고뉴클레오타이드)로 치료하기 위해 LPA 발현과 관련되거나 또는 이에 소인이 있는(predisposed) 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체가 선택된다. 일부 실시형태에서, 방법은 LPA 발현과 관련되거나 또는 이에 소인이 있는 질환, 장애 또는 병태에 대한 LPA mRNA, apo(a) 단백질, 지단백(a) 또는 이들의 조합과 같으나 이로 제한되지 않는 마커(예를 들어, 바이오마커)를 갖거나 개체를 선택하는 단계를 포함한다. 마찬가지로 그리고 아래 기술되는 바와 같이, 본 개시내용에 의해 제공된 방법의 일부 실시형태는 LPA 발현 마커(예를 들어, 지단백(a))에 대한 기준선 값을 측정하거나 또는 얻은 다음, 이러한 얻은 값을 하나 이상의 다른 기준선 값 또는 치료의 효과를 평가하기 위해 대상체에게 올리고뉴클레오타이드를 투여한 후 얻은 값과 비교하는 것과 같은 단계를 포함한다.
iii. 치료 방법
본 개시내용은 또한 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖거나 또는 이를 갖는 것으로 의심되거나 또는 이를 발병할 위험이 있는 것으로 의심되는 대상체를 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드로 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드를 사용하여 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태의 발병 또는 진행을 치료하거나 또는 약화시키는 방법을 제공한다. 다른 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드를 사용하여 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에서 하나 이상의 치료적 이익을 달성하기 위한 방법을 제공한다. 본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 대상체는 치료학적 유효량의 임의의 하나 이상의 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드를 투여함으로써 치료된다. 일부 실시형태에서, 치료는 LPA 발현을 감소시키는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 대상체는 치료적으로 치료된다. 일부 실시형태에서, 대상체는 예방적으로 치료된다.
본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 약제학적 조성물은 LPA 발현이 대상체에서 감소되어 대상체를 치료하도록 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, LPA mRNA의 양 또는 수준이 대상체에서 감소된다. 일부 실시형태에서, apo(a) 단백질의 양 또는 수준이 대상체에서 감소된다. 일부 실시형태에서, 지단백(a)의 양 또는 수준이 대상체에서 감소된다. 일부 실시형태에서, apo(a) 활성의 양 또는 수준이 대상체에서 감소된다. 일부 실시형태에서, 트라이글리세리드(TG)(예를 들어, 하나 이상의 TG(들) 또는 총 TG)의 양 또는 수준이 대상체에서 감소된다. 일부 실시형태에서, 콜레스테롤(예를 들어, 총 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤 및/또는 HDL 콜레스테롤)의 양 또는 수준이 대상체에서 감소된다. 일부 실시형태에서, 저밀도 지단백(LDL) 콜레스테롤의 양 또는 수준이 대상체에서 감소된다. 일부 실시형태에서, OxPL의 양 또는 활성이 대상체에서 감소되거나 또는 변경된다. 일부 실시형태에서, LDL-C의 양 또는 활성이 대상체에서 감소되거나 또는 변경된다. 일부 실시형태에서, apoB-100의 양 또는 활성이 대상체에서 감소되거나 또는 변경된다. 일부 실시형태에서, 다음의 임의의 조합이 대상체에서 감소되거나 또는 변경된다: LPA 발현, LPA mRNA의 양 또는 수준, apo(a) 단백질의 양 또는 수준, apo(a) 활성의 양 또는 수준, TG의 양 또는 수준, 콜레스테롤의 양 또는 수준, OxPL의 양 또는 활성, LDL-C의 양 또는 활성 및/또는 apoB-100의 양 또는 활성.
본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 약제학적 조성물은 LPA 발현이 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물의 투여 전 LPA 발현과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소되도록 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, LPA 발현은 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물을 투여받지 않거나 또는 대조군 올리고뉴클레오타이드, 약제학적 조성물 또는 치료제를 투여받은 대상체(예를 들어, 참조 또는 대조군 대상체)에서 LPA 발현과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소된다.
본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 약제학적 조성물은 LPA mRNA의 양 또는 수준이 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물의 투여 전 LPA mRNA의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소되도록 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에 투여된다. 일부 실시형태에서, LPA mRNA의 양 또는 수준은 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물을 투여받지 않거나 또는 대조군 올리고뉴클레오타이드, 약제학적 조성물 또는 치료제를 투여받은 대상체(예를 들어, 참조 또는 대조군 대상체)에서 LPA mRNA의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소된다.
본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 약제학적 조성물은 apo(a) 단백질의 양 또는 수준이 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물의 투여 전 apo(a) 단백질의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소되도록 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, apo(a) 단백질의 양 또는 수준은 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물을 투여받지 않거나 또는 대조군 올리고뉴클레오타이드, 약제학적 조성물 또는 치료제를 투여받은 대상체(예를 들어, 참조 또는 대조군 대상체)에서 apo(a) 단백질의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소된다.
본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 약제학적 조성물은 apo(a) 활성의 양 또는 수준이 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물의 투여 전 apo(a) 활성의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소되도록 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, apo(a) 활성의 양 또는 수준은 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물을 투여받지 않거나 또는 대조군 올리고뉴클레오타이드, 약제학적 조성물 또는 치료제를 투여받은 대상체(예를 들어, 참조 또는 대조군 대상체)에서 apo(a) 활성의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소된다.
본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 약제학적 조성물은 지단백(a)의 양 또는 수준이 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물의 투여 전 지단백(a)의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소되도록 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, 지단백(a)의 양 또는 수준은 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물을 투여받지 않거나 또는 대조군 올리고뉴클레오타이드, 약제학적 조성물 또는 치료제를 투여받은 대상체(예를 들어, 참조 또는 대조군 대상체)에서 지단백(a)의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소된다.
지단백(a) 수준은 0.1 ㎎/㎗ 미만 내지 200 ㎎/㎗ 초과 범위의 혈장 수준을 갖는 인간 성인에서 광범위하게 분포하며, 따라서 개인 간에 최대 3자릿수의 차이를 나타낸다(Schmidt et al., (2016) J Lipid Res. 57(8):1339-1359). 미국과 캐나다에서 30 ㎎/㎗ 미만의 지단백(a) 수준은 최적으로 간주된다(Anderson et al., (2016) Can J Cardiol 32:1263-82). 유럽 죽상동맥경화증 학회(European Atherosclerosis Society: EAS)는 50 ㎎/㎗ 미만을 최적으로 제안하였으며, 60 ㎎/㎗ 초과의 지단백(a) 수준은 독일과 영국에서 성분채집술의 상환을 위한 컷오프로서 사용된다(Tsimikas (2017) J Am Coll Cardiol. 69(6):692-711). 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드로 치료되는 대상체는 약 30 ㎎/㎗ 이상의 지단백(a)의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드로 치료되는 대상체는 30 ㎎/㎗ 초과의 지단백(a)의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드로 치료되는 대상체는 약 50 ㎎/㎗ 이상의 지단백(a)의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드로 치료되는 대상체는 약 60 ㎎/㎗ 이상의 지단백(a)의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드로 치료되는 대상체는 30 ㎎/㎗ 내지 300 ㎎/㎗ 범위의 지단백(a)의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다.
일반적으로, 인간 환자에 대한 정상적인 또는 바람직한 TG 범위는 혈액 중 150 ㎎/㎗ 미만이며, 100 미만이 이상적인 것으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 150㎎/㎗ 이상의 TG의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 150 ㎎/㎗ 내지 199 ㎎/㎗ 범위의 TG의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정되며, 이는 높은 TG 수준의 경계선으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 200 ㎎/㎗ 내지 499 ㎎/㎗ 범위의 TG의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정되며, 이는 높은 TG 수준으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 500㎎/㎗ 또는 그 이상(즉, 500 ㎎/㎗ 이상) 범위의 TG의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정되며, 이는 매우 높은 TG 수준으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 150 ㎎/㎗ 이상, 200 ㎎/㎗ 이상 또는 500 ㎎/㎗ 이상인 TG의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 200 ㎎/㎗ 내지 499 ㎎/㎗ 또는 500㎎/㎗ 이상의 TG의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 200 ㎎/㎗ 이상인 TG의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다.
본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 약제학적 조성물은 콜레스테롤(예를 들어, 총 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤 및/또는 HDL 콜레스테롤)의 양 또는 수준이 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물의 투여 전 콜레스테롤의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소되도록 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, 콜레스테롤의 양 또는 수준은 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물을 투여받지 않거나 또는 대조군 올리고뉴클레오타이드, 약제학적 조성물 또는 치료제를 투여받은 대상체(예를 들어, 참조 또는 대조군 대상체)에서 콜레스테롤의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소된다.
일반적으로, 성인 인간 환자에 대한 정상적인 또는 바람직한 콜레스테롤 범위(총 콜레스테롤)는 혈액 중 200 ㎎/㎗이다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 200㎎/㎗ 이상의 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 200 ㎎/㎗ 내지 239 ㎎/㎗ 범위의 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정되며, 높은 콜레스테롤 수준의 경계선으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 240㎎/㎗ 및 그 이상(즉, 240 ㎎/㎗ 이상)의 범위의 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정되며, 이는 높은 콜레스테롤 수준으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 200 ㎎/㎗ 내지 239 ㎎/㎗ 또는 240㎎/㎗ 이상의 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 200 ㎎/㎗ 이상 또는 240 ㎎/㎗ 이상인 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다.
본 명세서의 방법의 일부 실시형태에서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 약제학적 조성물은 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준이 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물의 투여 전 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소되도록 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준은 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물을 투여받지 않거나 또는 대조군 올리고뉴클레오타이드, 약제학적 조성물 또는 치료제를 투여받은 대상체(예를 들어, 참조 또는 대조군 대상체)에서 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준과 비교할 때 대상체에서 적어도 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 99% 이상 감소된다.
일반적으로, 성인 인간 환자에 대한 정상적인 또는 바람직한 LDL 콜레스테롤 범위는 혈액 중 100 ㎎/㎗ 미만이다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 100㎎/㎗ 이상의 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 100 ㎎/㎗ 내지 129 ㎎/㎗ 범위의 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정되며, 이는 최적 이상으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 130 ㎎/㎗ 내지 159 ㎎/㎗ 범위의 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정되며, 이는 높은 수준의 경계선으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 160 ㎎/㎗ 내지 189 ㎎/㎗ 범위의 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정되며, 이는 높은 LDL 콜레스테롤 수준으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 190 ㎎/㎗ 및 그 이상(즉, 190 ㎎/㎗ 이상) 범위의 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정되며, 이는 매우 높은 LDL 콜레스테롤 수준으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 100 ㎎/㎗ 이상, 130 ㎎/㎗ 이상, 160 ㎎/㎗ 또는 190 ㎎/㎗ 이상, 바람직하게는 160 ㎎/㎗ 이상 또는 190 ㎎/㎗ 이상인 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다. 일부 실시형태에서, 치료를 위해 선택되거나 또는 치료되는 환자는 100 ㎎/㎗ 내지 129 ㎎/㎗, 130 ㎎/㎗ 내지 159 ㎎/㎗, 160 ㎎/㎗ 내지 189 ㎎/㎗ 또는 190 ㎎/㎗ 이상의 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준을 갖는 것으로 확인 또는 결정된다.
대상체 또는 대상체로부터의 샘플에서 LPA 발현, LPA mRNA의 양 또는 수준, apo(a) 단백질의 양 또는 수준, apo(a) 활성의 양 또는 수준, 지단백(a)의 양 또는 수준 및/또는 OxPL, LDL-C, apoB-100, TG 및/또는 LDL 콜레스테롤의 양 또는 수준을 결정하는 데 적합한 방법은 당업계에 공지되어 있다. 또한, 본 명세서에 제시된 실시예는 LPA 발현을 결정하기 위한 예시적인 방법을 예시한다.
일부 실시형태에서, LPA 발현, LPA mRNA, apo(a) 단백질, apo(a) 활성, OxPL, LDL-C, apoB-100, TG, LDL 콜레스테롤 또는 임의의 이들의 조합의 양 또는 수준은 세포(예를 들어, 간세포), 세포 집단 또는 그룹(예를 들어, 오르가노이드), 기관(예를 들어, 간), 혈액 또는 이의 분획(예를 들어, 혈장), 조직(예를 들어, 간 조직), 샘플(예를 들어, 간 생검 샘플) 또는 대상체로부터 얻거나 또는 단리된 임의의 다른 생물학적 물질에서 감소된다. 일부 실시형태에서, LPA 발현, LPA mRNA, apo(a) 단백질, apo(a) 활성, OxPL, LDL-C, apoB-100, TG, LDL 콜레스테롤 또는 임의의 이들의 조합의 양 또는 수준은 대상체로부터 얻거나 또는 단리된 하나 이상의 세포 유형(예를 들어, 간세포 및 하나 이상의 다른 세포 유형(들)), 하나 이상의 세포 그룹, 하나 이상의 기관(예를 들어, 간 및 하나 이상의 다른 기관(들)), 하나 이상의 혈액 분획(예를 들어, 혈장 및 하나 이상의 다른 혈액 분획(들)), 하나 이상의 조직 유형(예를 들어, 간 조직 및 하나 이상의 다른 조직 유형(들)), 하나 이상의 샘플 유형(예를 들어, 간 생검 샘플 및 하나 이상의 다른 생검 샘플 유형(들))에서 감소된다.
LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태의 예는 버거씨병, 말초 동맥 질환, 관상 동맥 질환, 대사 증후군, 급성 관상동맥 증후군, 대동맥 판막 협착증, 대동맥 판막 역류, 대동맥 박리, 망막 동맥 폐색, 뇌혈관 질환, 장간막 허혈, 상장간막 동맥 폐색, 신동맥 협착증, 안정/불안정 협심증, 급성 관상동맥 증후군, 이형접합 또는 동형접합 가족성 고콜레스테롤혈증, 고아포베타지단백혈증, 뇌혈관 죽상동맥경화증, 뇌혈관 질환 및 정맥 혈전증 또는 이들의 조합을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
높은 특이성으로 인해, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 세포, 조직 또는 기관(예를 들어, 간)의 표적 유전자의 mRNA를 특이적으로 표적화한다. 질환의 예방에 있어서, 표적 유전자는 질환의 개시 또는 유지에 필요하거나 또는 질환에 걸릴 위험이 더 높은 것과 관련된 것으로 확인된 것일 수 있다. 질환의 치료에 있어서, 올리고뉴클레오타이드는 질환을 매개하거나 또는 매개하는 역할을 하는 세포 또는 조직과 접촉할 수 있다. 예를 들어, LPA 발현과 관련된 장애 또는 병태와 관련된 야생형(즉, 천연) 또는 돌연변이된 유전자의 전부 또는 일부와 실질적으로 동일한 올리고뉴클레오타이드는 간세포 또는 다른 간 세포와 같은 관심 세포 또는 조직 유형과 접촉하거나 또는 이에 도입될 수 있다.
일부 실시형태에서, 표적 유전자는 인간과 같은 임의의 포유동물로부터의 표적 유전자일 수 있다. 임의의 유전자는 본 명세서에 기재된 방법에 따라 침묵될 수 있다.
본 명세서에 기재된 방법은 전형적으로 치료학적 유효량, 즉, 바람직한 치료 결과를 생성할 수 있는 양의 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 치료적으로 허용 가능한 양은 질환 또는 장애를 치료적으로 치료할 수 있는 양일 수 있다. 임의의 하나의 대상체에 대한 적절한 투여량은 대상체의 크기, 체표면적, 연령, 투여될 특정 조성물, 조성물 내 활성 성분(들), 투여 시간 및 경로, 일반적인 건강 및 동시에 투여될 다른 약물을 포함하는 소정의 요인에 따라 달라질 것이다.
일부 실시형태에서, 대상체에게 본 명세서의 조성물 중 어느 하나가 장내로(예를 들어, 경구로, 위 영양관에 의해, 십이지장 영양관에 의해, 위절개술을 통해 또는 직장으로), 비경구로(예를 들어, 피하 주사, 정맥내 주사 또는 주입, 동맥내 주사 또는 주입, 골내 주입, 근육내 주사, 뇌내 주사, 뇌실내 주사, 경막내), 국소로(예를 들어, 경피, 흡입, 점안액 또는 점막을 통해) 또는 표적 기관으로의 직접 주사(예를 들어, 대상체의 간)에 의해 투여된다. 전형적으로, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 정맥내로 또는 피하로 투여된다.
비제한적인 예로서, 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드는 전형적으로 분기별로(3개월마다 1회), 격월로(2개월마다 1회), 매월 또는 매주 투여될 것이다. 예를 들어, 올리고뉴클레오타이드는 매주, 또는 2주 또는 3주 간격으로 투여될 수 있다. 대안적으로, 올리고뉴클레오타이드는 매일 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 대상체에게 올리고뉴클레오타이드의 1회 이상의 로딩 용약에 이어 올리고뉴클레오타이드의 1회 이상의 유지 용량이 투여된다.
일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 인간 또는 비인간 영장류 또는 다른 포유동물 대상체이다. 다른 예시적인 대상체는 개 및 고양이와 같은 사육 동물; 말, 소, 돼지, 양, 염소, 닭 등의 가축; 및 마우스, 래트, 기니피그 및 햄스터와 같은 동물을 포함한다.
V. 키트
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 및 사용 지침서를 포함하는 키트를 제공한다. 일부 실시형태에서, 키트는 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드, 및 키트 및/또는 이의 임의의 구성요소의 사용 지침서를 포함하는 패키지 삽입물을 포함한다. 일부 실시형태에서, 키트는 적합한 용기에 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드, 하나 이상의 대조군 및 다양한 완충액, 시약, 효소 및 당업계에 잘 알려져 있는 다른 표준 성분을 포함한다. 일부 실시형태에서, 용기는 적어도 하나의 바이알, 웰, 테스트 튜브, 플라스크, 병, 주사기 또는 올리고뉴클레오타이드가 배치되고 일부 경우에 적합하게 분취되는 다른 용기 수단을 포함한다. 추가적인 구성요소가 제공되는 일부 실시형태에서, 키트는 이 구성요소가 배치되는 추가적인 용기를 포함한다. 키트는 또한 상업적 판매를 위해 엄중히 밀봉한(close confinement) 올리고뉴클레오타이드 및 임의의 다른 시약을 담기 위한 수단을 포함할 수 있다. 이러한 용기는 목적하는 바이알이 보관되는 사출 또는 취입 성형 플라스틱 용기를 포함할 수 있다. 용기 및/또는 키트는 사용 지침서 및/또는 경고가 포함된 라벨을 포함할 수 있다.
일부 실시형태에서, 키트는 본 명세서의 올리고뉴클레오타이드 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 약제학적 조성물 및 이를 필요로 하는 대상체에서 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 치료하거나 또는 이의 진행을 지연시키기 위한 지침서를 포함한다.
실시예
본 개시내용은 하기 실시예에 제시된 특정 실시형태를 참조하여 기술되었지만, 당업자는 본 개시내용의 진정한 사상 및 범위를 벗어나지 않고 다양한 변화가 이루어질 수 있으며 등가물이 대체될 수 있음을 이해하여야 한다. 또한, 하기 실시예는 예시로서 제공되며 어떠한 방식으로든 본 개시내용의 범위를 제한하려는 의도가 아니다. 또한, 본 개시내용의 목적, 사상 및 범위에 맞게 상황, 물질, 물질의 조성, 과정, 과정의 단계 또는 단계들에 수정이 이루어질 수 있다. 모든 이러한 수정은 본 개시내용의 범위 내에 있는 것으로 의도된다. 당업계에 잘 알려진 표준 기법 또는 아래에 구체적으로 기술되는 기법이 이용된다.
실시예 1: 이중 가닥 RNAi 올리고뉴클레오타이드의 제조
올리고뉴클레오타이드 합성 및 정제
앞선 예에서 기술된 ds RNAi 올리고뉴클레오타이드를 본 명세서에 기재된 방법을 사용하여 화학적으로 합성하였다. 일반적으로, ds RNAi 올리고뉴클레오타이드는 19량체 내지 23량체 siRNA에 대해 기술되어 있는 바와 같이 고체상 올리고뉴클레오타이드 합성 방법을 사용하여 합성된다(예를 들어, 문헌[Scaringe et al. (1990) NUCLEIC ACIDS RES. 18:5433-41 및 Usman et al. (1987) J. AM. CHEM. SOC. 109:7845-45] 참조; 또한, 미국 특허 제5,804,683호; 제5,831,071호; 제5,998,203호; 제6,008,400호; 제6,111,086호; 제6,117,657호; 제6,353,098호; 제6,362,323호; 제6,437,117호 및 제6,469,158호).
개별 RNA 가닥을 합성하고, 표준 방법에 따라 HPLC(인테그레이티드 디엔에이 테크놀로지스(Integrated DNA Technologies); 아이오와주 코랄빌 소재) 정제하였다. 예를 들어, RNA 올리고뉴클레오타이드는 표준 기법을 사용하여 NAP-5 칼럼(아머샴 파마시아 바이오테크(Amersham Pharmacia Biotech); 뉴저지주 피스카타웨이 소재)에서 탈보호되고 탈염된 고체상 포스포라미다이트 화학을 사용하여 합성하였다(Damha & Olgivie (1993) METHODS MOL. BIOL. 20:81-114; Wincott et al. (1995) NUCLEIC ACIDS RES. 23:2677-84). 올리고머를 15분 단계-선형 구배를 사용하는 Amersham Source 15Q 칼럼(1.0㎝×25㎝; 아머샴 파마시아 바이오테크)에서 이온-교환 고성능 액체 크로마토그래피(IE-HPLC)를 사용하여 정제하였다. 구배는 90:10 완충액 A:B에서 52:48 완충액 A:B까지 다양하며, 여기서 완충액 A는 100mM Tris(pH 8.5)이고, 완충액 B는 100mM Tris(pH 8.5), 1M NaCl이다. 샘플을 260㎚에서 모니터링하고, 전장 올리고뉴클레오타이드 종에 해당하는 피크를 수집하고, 풀링하고, NAP-5 칼럼에서 탈염하고, 동결건조하였다.
각 올리고머의 순도를 Beckman PACE 5000(벡크만 쿨터, 인크.(Beckman Coulter, Inc.); 캘리포니아주 풀러턴 소재)에서 모세관 전기영동(capillary electrophoresis: CE)에 의해 결정하였다. CE 모세관은 내경이 100㎛이며, ssDNA 100R Gel(벡크만-쿨터)을 포함한다. 전형적으로, 약 0.6n㏖의 올리고뉴클레오타이드를 모세관에 주입하고, 444 V/㎝의 전기장에서 전개하고, 260㎚에서 UV 흡광도로 검출하였다. 변성 Tris-보레이트-7M-우레아 전개 완충액은 벡크만-쿨터로부터 구입하였다. 아래 기재된 실험에서 사용하기 위해 CE에 의해 평가된 바와 같이 적어도 90% 순수한 올리고리보뉴클레오타이드를 얻었다. 제조업체의 권장 프로토콜에 따라 Voyager DE™ Biospectometry Work Station(어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems); 캘리포니아주 포스터 시티 소재)에서 매트릭스-보조 레이저 탈착 이온화 비행 시간(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight: MALDI-TOF) 질량 분광법에 의해 화합물의 정체를 확인하였다. 모든 올리고머의 상대적인 분자 질량은 종종 예상된 분자 질량의 0.2% 이내에서 얻어진다.
이중체의 제조
ssRNA 올리고머를 100mM 포타슘 아세테이트, 30mM HEPES(pH 7.5)로 이루어진 이중체 완충액에 (예를 들어, 100μM 농도로) 재현탁시켰다. 상보성 센스 및 안티센스 가닥을 동일한 몰량으로 혼합하여, 예를 들어, 50μM 이중체의 최종 용액을 생성하였다. 샘플을 RNA 완충액(IDT)에서 5'분 동안 100℃로 가열하고, 사용 전에 실온으로 냉각시켰다. ds RNA 올리고뉴클레오타이드는 -20℃에서 보관하였다. ss RNA 올리고머는 동결건조시키거나 또는 뉴클레이스가 없는 물에 -80℃에서 보관하였다.
실시예 2: 시험관내
LPA
발현의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 저해
LPA mRNA 표적 서열 확인
LPA 발현의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 저해제를 확인하기 위해, 컴퓨터-기반 알고리즘을 사용하여 RNAi 경로에 의한 LPA 발현의 저해를 검정하기에 적합한 LPA mRNA 표적 서열을 컴퓨터로 확인하였다. 알고리즘은 인간 LPA mRNA의 적합한 LPA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 각각 갖는 RNAi 올리고뉴클레오타이드 가이드(안티센스) 가닥 서열(예를 들어, 서열번호 1; 표 1)을 제공한다. 알고리즘에 의해 확인된 일부 가이드 가닥 서열은 또한 원숭이 LPA mRNA의 상응하는 LPA 표적 서열에 상보적이다(서열번호 2; 표 1). RNAi 올리고뉴클레오타이드(DsiRNA 올리고뉴클레오타이드로 형식화됨)를 생성하였으며(표 2), 각각은 알고리즘에 의해 확인된 LPA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 갖는 독특한 가이드 가닥을 갖는다. 표 2에 제공된 DsiRNA의 패신저(센스) 가닥은 알고리즘에 의해 확인된 독특한 인간 LPA mRNA 표적 서열을 포함한다.
시험관내 세포-기반 검정
LPA 발현을 저해하는 표 2에 열거된 각각의 DsiRNA의 능력을 시험관내 세포-기반 검정을 사용하여 결정하였다. 간략하게는, 인간 LPA 유전자를 안정적으로 발현하는 인간 배아 신장 293(HEK293) 세포 또는 HepG2 세포를 다중-웰 세포-배양 플레이트의 별도의 웰에서 0.5nM의 표 2에 열거된 DsiRNA로 각각 형질감염시켰다. 세포를 형질감염 후 24시간 동안 유지한 다음, 형질감염된 세포로부터 남아있는 LPA mRNA의 양을 TAQMAN®-기반 qPCR 검정을 사용하여 결정하였다. 2개의 qPCR 검정인 3' 검정 및 5' 검정을 사용하여 6-카복시플루오레세인(6-FAM)에 접합된 PCR 프로브를 사용하여 측정된 바와 같이 LPA mRNA 수준을 결정하였다.
LPA 발현을 저해하는 표 2에 열거된 DsiRNA의 능력을 평가하기 위한 HEK293 및 HepG2 세포-기반 검정의 결과는 도 1 내지 도 4 및 도 5에 각각 나타나 있다. GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드(GalXC-LPA-3675 서열번호 1188 및 1189)로 형질감염된 세포를 양성 대조군으로 사용하였다. 모의-형질감염된 세포와 비교할 때 DsiRNA-형질감염된 세포에 남아있는 약 15% 내지 20% 이하의 LPA mRNA를 초래하는 DsiRNA는 일반적으로 추가 평가를 위한 표적 mRNA 발현의 넉다운 또는 감소의 적합한 양을 제공하는 서열을 포함하는 것으로 간주하였다. 도 1 내지 도 5에는, 시간-일치된 대조군 세포와 비교하여 표시된 DsiRNA로 형질감염된 세포에 남아있는 LPA mRNA의 백분율이 나타나 있다(3' 검정 = 원 모양; 5' 검정 = 삼각형 모양).
DsiRNA 히트를 추가로 평가하기 위해, 표 2에 열거된 DsiRNA의 서브세트를 테스트하여 2개의 상이한 DsiRNA 농도에서 시험관내 세포-기반 검정을 사용하여 LPA 발현을 저해하는 능력을 결정하였다(도 6 및 도 7). 간략하게는, 인간 LPA 유전자를 안정적으로 발현하는 HEK293 세포를 다중-웰 세포-배양 플레이트의 별도의 웰에서 0.1nM 및 0.5nM의 DsiRNA로 형질감염시켰다. 세포를 형질감염 후 24시간 동안 유지한 다음, 형질감염된 세포로부터 남아있는 LPA mRNA의 양을 TAQMAN®-기반 qPCR 검정을 사용하여 결정하였다. 2개의 qPCR 검정인 3' 검정 및 5' 검정을 사용하여 헥사클로로-플루오레세인(HEX)에 접합된 PCR 프로브를 사용하여 측정된 바와 같이 LPA mRNA 수준을 결정하였다. 형질감염되지 않은 세포(UT), 모의-형질감염된 세포(모의) 및 대조군 올리고뉴클레오타이드로 형질감염된 세포(NC1, 서열번호 1191 및 1192; NC5, 서열번호 1193 및 1194; 및 NC7, 서열번호 1195 및 1196)를 음성 대조군으로 사용하였다. 도 6 및 도 7에 도시된 바와 같이, 표시된 DsiRNA로 형질감염된 HEK293 세포에 남아있는 LPA mRNA의 백분율은 3' 검정 및 5' 검정으로부터의 LPA mRNA 수준의 평균이며, 시간-일치된, 모의-형질감염된 대조군 HEK293 세포에 대해 정규화하였다.
종합하면, 이들 결과는 인간 LPA mRNA를 표적화하도록 설계된 DsiRNA가 대조군 세포에 비해 DsiRNA-형질감염된 세포에서 감소된 양의 LPA mRNA에 의해 결정된 바와 같이 세포에서 LPA 발현을 저해함을 보여준다. 이들 결과는 DsiRNA를 포함하는 뉴클레오타이드 서열이 LPA 발현을 저해하는 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 생성하는 데 유용하다는 것을 입증한다. 또한, 이들 결과는 다수의 LPA mRNA 표적 서열이 LPA 발현의 RNAi-매개성 저해에 적합함을 입증한다.
실시예 3: 생체내
LPA
발현의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 저해
실시예 2에 기재된 세포-기반 검정에서 스크리닝된 DsiRNA 중에서, 생체내 추가 평가를 위해 14개의 DsiRNA의 뉴클레오타이드 서열을 선택하였다. 간략하게는, 14개의 선택된 DsiRNA의 뉴클레오타이드 서열을 사용하여 36량체 패신저 가닥 및 22량체 가이드 가닥을 갖는 열린 테트라루프 GalNAc-접합된 구조를 포함하는 14개의 상응하는 이중 가닥 RNAi 올리고뉴클레오타이드(본 명세서에서 "GalNac-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드 서열"로 지칭됨)를 생성하였다(표 3). 또한, GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드의 패신저 가닥 및 가이드 가닥을 포함하는 뉴클레오타이드 서열은 변형된 뉴클레오타이드 및 포스포로티오에이트 연결의 특유한 패턴을 갖는다(예를 들어, GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드의 일반 구조 및 화학적 변형 패턴(M1, M2 및 M3)의 개략도에 대해서는 도 10 참조). 테트라루프를 포함하는 3개의 아데노신 뉴클레오타이드를 각각 GalNAc 모이어티(CAS#: 14131-60-3)에 접합하였다.
마우스 연구
표 3에 열거된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드를 HDI 마우스 모델에서 평가하였으며, 여기서 HDI 마우스는 간세포에서 인간 LPA mRNA를 일시적으로 발현하도록 조작되었다. GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드 LPA-3675-M2를 사용하여 기준(benchmark) 대조군으로 사용하였다. 간략하게는, 6주 내지 8주령 암컷 CD-1 마우스(n = 5)에 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드를 0.5 ㎎/㎏의 용량 수준(도 8) 또는 0.25 ㎎/㎏, 0.5 ㎎/㎏ 및 1 ㎎/㎏의 용량 수준(도 9)으로 피하 처리하였다. 3일 후(72시간), 유비쿼터스 사이토메갈로바이러스(CMV) 프로모터 서열의 제어하에 완전한 인간 LPA 유전자를 암호화하는 DNA 플라스미드를 마우스에 유체역학적으로 주입(hydrodynamically injected: HDI)하였다. DNA 플라스미드 도입 1일 후, 마우스로부터 간 샘플을 수집하였다. 이들 마우스로부터 유래된 총 RNA를 동일한 부피의 PBS로만 처리한 마우스와 비교하여 LPA mRNA에 대한 qRT-PCR 분석을 수행하였다. 값을 플라스미드에 포함된 NeoR 유전자를 사용하여 형질감염 효율에 대해 정규화하였다.
도 8에 도시된 바와 같이, 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드는 PBS로 처리된 마우스에 비해 올리고뉴클레오타이드-처리된 HDI 마우스로부터의 간 샘플에서 LPA mRNA의 양의 감소에 의해 결정된 바와 같이 LPA 발현을 저해하였다. LPA 발현을 저해하는 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드의 능력을 추가로 평가하기 위해, 각각 상이한 화학적 변형 패턴(M2 및 M3)을 갖는 2개의 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드 서열(LPA-2900 및 LPA-3675)을 위에 기재된 HDI 마우스에서 세 가지 상이한 농도(0.25 ㎎/㎏, 0.5 ㎎/㎏ 및 1.0 ㎎/㎏)에서 LPA 발현을 저해하는 능력에 대해 테스트하였다. 도 9에 도시된 바와 같이, 표시된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드는 용량-의존적 방식으로 HDI 마우스에서 LPA 발현을 저해하였다.
종합하면, 이들 결과는 인간 LPA mRNA를 표적화하도록 설계된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드가 PBS로 처리된 대조군 마우스에 비해 HDI 마우스의 간에서 LPA mRNA의 양의 감소에 의해 결정된 바와 같이 마우스에서 LPA 발현을 저해함을 보여준다. 이들 결과에 기초하여, HDI 마우스에서 평가된 14개의 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드 중 10개를 선택하여 비인간 영장류(NHP)에서 LPA 발현을 저해하는 능력을 평가하였다. 표 4에 열거된 10개의 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드는 도 10에 도시된 바와 같은 패턴 M1, M2 또는 M3을 갖는 화학적으로 변형된 뉴클레오타이드를 포함한다.
비인간 영장류(NHP) 연구
표 4에 열거된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드를 사이노몰구스 원숭이(마카카 파스시쿨라리스(Macaca fascicularis))에서 평가하였다. 이 연구에서, 평균 체중(약 5.4㎏)이 대조군 그룹과 실험 그룹 간에 유사하도록 원숭이를 그룹화하였다. 각 코호트는 2마리의 수컷 및 3마리의 암컷 대상체를 포함한다. GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드를 연구 0일에 피하로 투여하였다. 연구 -8일, -5 및 0일 그리고 투여 후 매주 혈액 샘플을 수집하였다. 초음파-유도 코어 바늘 간 생검을 연구 28일, 56일 및 84일에 수집하였다. 각 시점에서, 간 생검 샘플로부터 유래된 총 RNA를 유사한 부피의 PBS로 처리한 원숭이와 비교하여 올리고뉴클레오타이드-처리된 원숭이에서 LPA mRNA를 측정하기 위해 qRT-PCR 분석하였다. 데이터를 정규화하기 위해, 측정값은 PPIB 및 18S rRNA의 2개의 참조 유전자의 기하 평균을 기준으로 만들었다. 도 11A(28일), 도 11B(56일) 및 도 11C(84일)에 도시된 바와 같이, 표 4에 열거된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드를 이용한 NHP의 처리는 PBS로 처리된 NHP에 비해 올리고뉴클레오타이드-처리된 NHP로부터의 간 샘플에서 LPA mRNA 양의 감소에 의해 결정된 바와 같이 간에서 LPA 발현을 저해하였다. 처리된 NHP의 간 샘플에서 플라스미노겐(PLG) mRNA의 양을 또한 결정하였고, 이를 도 11D에 나타내었다. 동일한 NHP 연구로부터, 처리된 NHP로부터의 apo(a) 단백질 혈청을 ELISA에 의해 측정함으로써 LPA 발현의 저해도 결정하였다. 도 12에 도시된 바와 같이, PBS로 처리된 NHP와 비교하여 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리된 NHP에서 혈청 apo(a) 단백질의 상당한 감소가 관찰되었다. 3개의 투여 전 샘플로부터의 값을 평균화하고, 100%로 설정하고, 데이터를 투여 전 평균과 비교하여 상대값으로 보고하였다. 종합하면, 이들 결과는 NHP를 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드로 처리하면 간에서 LPA mRNA의 양이 감소하고 혈청에서 apo(a) 단백질의 양이 감소함을 보여준다.
종합하면, 이들 결과는 인간 LPA mRNA를 표적화하도록 설계된 GalNAc-접합된 LPA 올리고뉴클레오타이드가 생체내에서 LPA 발현을 저해함(처리된 동물에서 LPA mRNA 및 apo(a) 단백질의 양의 감소에 의해 결정됨)을 보여준다.
서열 목록
하기 핵산 및/또는 아미노산 서열은 위의 개시내용에 언급되어 있으며, 참조를 위해 아래에 제공된다.
표 6에서의 수정사항:
mC, mA, mG, mU = 2'-OMe 리보뉴클레오사이드; fA, fC, fG, fU = 2'-F 리보뉴클레오사이드; s = 포스포로티오에이트; Me포스포네이트-4O-mUs =
ademA-GalNAc = 아데닌 뉴클레오타이드에 부착된 GalNAc:
SEQUENCE LISTING
<110> Dicerna Pharmaceuticals, Inc.
<120> Compositions and Metthods for Inhibiting LPA Expression
<130> WO 2022/032288
<140> PCT/US2021/071109
<141> 2021-08-05
<150> US 63/061,676
<151> 2020-08-05
<150> US 63/074,779
<151> 2020-09-04
<160> 1197
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 6414
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 1
ctgggattgg gacacacttt ctgggcactg ctggccagtc ccaaaatgga acataaggaa 60
gtggttcttc tacttctttt atttctgaaa tcagcagcac ctgagcaaag ccatgtggtc 120
caggattgct accatggtga tggacagagt tatcgaggca cgtactccac cactgtcaca 180
ggaaggacct gccaagcttg gtcatctatg acaccacatc aacataatag gaccacagaa 240
aactacccaa atgctggctt gatcatgaac tactgcagga atccagatgc tgtggcagct 300
ccttattgtt atacgaggga tcccggtgtc aggtgggagt actgcaacct gacgcaatgc 360
tcagacgcag aagggactgc cgtcgcgcct ccgactgtta ccccggttcc aagcctagag 420
gctccttccg aacaagcacc gactgagcaa aggcctgggg tgcaggagtg ctaccatggt 480
aatggacaga gttatcgagg cacatactcc accactgtca caggaagaac ctgccaagct 540
tggtcatcta tgacaccaca ctcgcatagt cggaccccag aatactaccc aaatgctggc 600
ttgatcatga actactgcag gaatccagat gctgtggcag ctccttattg ttatacgagg 660
gatcccggtg tcaggtggga gtactgcaac ctgacgcaat gctcagacgc agaagggact 720
gccgtcgcgc ctccgactgt taccccggtt ccaagcctag aggctccttc cgaacaagca 780
ccgactgagc aaaggcctgg ggtgcaggag tgctaccatg gtaatggaca gagttatcga 840
ggcacatact ccaccactgt cacaggaaga acctgccaag cttggtcatc tatgacacca 900
cactcgcata gtcggacccc agaatactac ccaaatgctg gcttgatcat gaactactgc 960
aggaatccag atgctgtggc agctccttat tgttatacga gggatcccgg tgtcaggtgg 1020
gagtactgca acctgacgca atgctcagac gcagaaggga ctgccgtcgc gcctccgact 1080
gttaccccgg ttccaagcct agaggctcct tccgaacaag caccgactga gcagaggcct 1140
ggggtgcagg agtgctacca cggtaatgga cagagttatc gaggcacata ctccaccact 1200
gtcactggaa gaacctgcca agcttggtca tctatgacac cacactcgca tagtcggacc 1260
ccagaatact acccaaatgc tggcttgatc atgaactact gcaggaatcc agatgctgtg 1320
gcagctcctt attgttatac gagggatccc ggtgtcaggt gggagtactg caacctgacg 1380
caatgctcag acgcagaagg gactgccgtc gcgcctccga ctgttacccc ggttccaagc 1440
ctagaggctc cttccgaaca agcaccgact gagcaaaggc ctggggtgca ggagtgctac 1500
catggtaatg gacagagtta tcgaggcaca tactccacca ctgtcacagg aagaacctgc 1560
caagcttggt catctatgac accacactcg catagtcgga ccccagaata ctacccaaat 1620
gctggcttga tcatgaacta ctgcaggaat ccagatgctg tggcagctcc ttattgttat 1680
acgagggatc ccggtgtcag gtgggagtac tgcaacctga cgcaatgctc agacgcagaa 1740
gggactgccg tcgcgcctcc gactgttacc ccggttccaa gcctagaggc tccttccgaa 1800
caagcaccga ctgagcaaag gcctggggtg caggagtgct accatggtaa tggacagagt 1860
tatcgaggca catactccac cactgtcaca ggaagaacct gccaagcttg gtcatctatg 1920
acaccacact cgcatagtcg gaccccagaa tactacccaa atgctggctt gatcatgaac 1980
tactgcagga atccagatgc tgtggcagct ccttattgtt atacgaggga tcccggtgtc 2040
aggtgggagt actgcaacct gacgcaatgc tcagacgcag aagggactgc cgtcgcgcct 2100
ccgactgtta ccccggttcc aagcctagag gctccttccg aacaagcacc gactgagcaa 2160
aggcctgggg tgcaggagtg ctaccatggt aatggacaga gttatcgagg cacatactcc 2220
accactgtca caggaagaac ctgccaagct tggtcatcta tgacaccaca ctcgcatagt 2280
cggaccccag aatactaccc aaatgctggc ttgatcatga actactgcag gaatccagat 2340
gctgtggcag ctccttattg ttatacgagg gatcccggtg tcaggtggga gtactgcaac 2400
ctgacgcaat gctcagacgc agaagggact gccgtcgcgc ctccgactgt taccccggtt 2460
ccaagcctag aggctccttc cgaacaagca ccgactgagc agaggcctgg ggtgcaggag 2520
tgctaccacg gtaatggaca gagttatcga ggcacatact ccaccactgt cactggaaga 2580
acctgccaag cttggtcatc tatgacacca cactcgcata gtcggacccc agaatactac 2640
ccaaatgctg gcttgatcat gaactactgc aggaatccag atcctgtggc agccccttat 2700
tgttatacga gggatcccag tgtcaggtgg gagtactgca acctgacaca atgctcagac 2760
gcagaaggga ctgccgtcgc gcctccaact attaccccga ttccaagcct agaggctcct 2820
tctgaacaag caccaactga gcaaaggcct ggggtgcagg agtgctacca cggaaatgga 2880
cagagttatc aaggcacata cttcattact gtcacaggaa gaacctgcca agcttggtca 2940
tctatgacac cacactcgca tagtcggacc ccagcatact acccaaatgc tggcttgatc 3000
aagaactact gccgaaatcc agatcctgtg gcagcccctt ggtgttatac aacagatccc 3060
agtgtcaggt gggagtactg caacctgaca cgatgctcag atgcagaatg gactgccttc 3120
gtccctccga atgttattct ggctccaagc ctagaggctt tttttgaaca agcactgact 3180
gaggaaaccc ccggggtaca ggactgctac taccattatg gacagagtta ccgaggcaca 3240
tactccacca ctgtcacagg aagaacttgc caagcttggt catctatgac accacaccag 3300
catagtcgga ccccagaaaa ctacccaaat gctggcctga ccaggaacta ctgcaggaat 3360
ccagatgctg agattcgccc ttggtgttac accatggatc ccagtgtcag gtgggagtac 3420
tgcaacctga cacaatgcct ggtgacagaa tcaagtgtcc ttgcaactct cacggtggtc 3480
ccagatccaa gcacagaggc ttcttctgaa gaagcaccaa cggagcaaag ccccggggtc 3540
caggattgct accatggtga tggacagagt tatcgaggct cattctctac cactgtcaca 3600
ggaaggacat gtcagtcttg gtcctctatg acaccacact ggcatcagag gacaacagaa 3660
tattatccaa atggtggcct gaccaggaac tactgcagga atccagatgc tgagattagt 3720
ccttggtgtt ataccatgga tcccaatgtc agatgggagt actgcaacct gacacaatgt 3780
ccagtgacag aatcaagtgt ccttgcgacg tccacggctg tttctgaaca agcaccaacg 3840
gagcaaagcc ccacagtcca ggactgctac catggtgatg gacagagtta tcgaggctca 3900
ttctccacca ctgttacagg aaggacatgt cagtcttggt cctctatgac accacactgg 3960
catcagagaa ccacagaata ctacccaaat ggtggcctga ccaggaacta ctgcaggaat 4020
ccagatgctg agattcgccc ttggtgttat accatggatc ccagtgtcag atgggagtac 4080
tgcaacctga cgcaatgtcc agtgatggaa tcaactctcc tcacaactcc cacggtggtc 4140
ccagttccaa gcacagagct tccttctgaa gaagcaccaa ctgaaaacag cactggggtc 4200
caggactgct accgaggtga tggacagagt tatcgaggca cactctccac cactatcaca 4260
ggaagaacat gtcagtcttg gtcgtctatg acaccacatt ggcatcggag gatcccatta 4320
tactatccaa atgctggcct gaccaggaac tactgcagga atccagatgc tgagattcgc 4380
ccttggtgtt acaccatgga tcccagtgtc aggtgggagt actgcaacct gacacgatgt 4440
ccagtgacag aatcgagtgt cctcacaact cccacagtgg ccccggttcc aagcacagag 4500
gctccttctg aacaagcacc acctgagaaa agccctgtgg tccaggattg ctaccatggt 4560
gatggacgga gttatcgagg catatcctcc accactgtca caggaaggac ctgtcaatct 4620
tggtcatcta tgataccaca ctggcatcag aggaccccag aaaactaccc aaatgctggc 4680
ctgaccgaga actactgcag gaatccagat tctgggaaac aaccctggtg ttacacaacc 4740
gatccgtgtg tgaggtggga gtactgcaat ctgacacaat gctcagaaac agaatcaggt 4800
gtcctagaga ctcccactgt tgttccagtt ccaagcatgg aggctcattc tgaagcagca 4860
ccaactgagc aaacccctgt ggtccggcag tgctaccatg gtaatggcca gagttatcga 4920
ggcacattct ccaccactgt cacaggaagg acatgtcaat cttggtcatc catgacacca 4980
caccggcatc agaggacccc agaaaactac ccaaatgatg gcctgacaat gaactactgc 5040
aggaatccag atgccgatac aggcccttgg tgttttacca tggaccccag catcaggtgg 5100
gagtactgca acctgacgcg atgctcagac acagaaggga ctgtggtcgc tcctccgact 5160
gtcatccagg ttccaagcct agggcctcct tctgaacaag actgtatgtt tgggaatggg 5220
aaaggatacc ggggcaagaa ggcaaccact gttactggga cgccatgcca ggaatgggct 5280
gcccaggagc cccatagaca cagcacgttc attccaggga caaataaatg ggcaggtctg 5340
gaaaaaaatt actgccgtaa ccctgatggt gacatcaatg gtccctggtg ctacacaatg 5400
aatccaagaa aactttttga ctactgtgat atccctctct gtgcatcctc ttcatttgat 5460
tgtgggaagc ctcaagtgga gccgaagaaa tgtcctggaa gcattgtagg ggggtgtgtg 5520
gcccacccac attcctggcc ctggcaagtc agtctcagaa caaggtttgg aaagcacttc 5580
tgtggaggca ccttaatatc cccagagtgg gtgctgactg ctgctcactg cttgaagaag 5640
tcctcaaggc cttcatccta caaggtcatc ctgggtgcac accaagaagt gaacctcgaa 5700
tctcatgttc aggaaataga agtgtctagg ctgttcttgg agcccacaca agcagatatt 5760
gccttgctaa agctaagcag gcctgccgtc atcactgaca aagtaatgcc agcttgtctg 5820
ccatccccag actacatggt caccgccagg actgaatgtt acatcactgg ctggggagaa 5880
acccaaggta cctttgggac tggccttctc aaggaagccc agctccttgt tattgagaat 5940
gaagtgtgca atcactataa gtatatttgt gctgagcatt tggccagagg cactgacagt 6000
tgccagggtg acagtggagg gcctctggtt tgcttcgaga aggacaaata cattttacaa 6060
ggagtcactt cttggggtct tggctgtgca cgccccaata agcctggtgt ctatgctcgt 6120
gtttcaaggt ttgttacttg gattgaggga atgatgagaa ataattaatt ggacgggaga 6180
cagagtgaag catcaaccta cttagaagct gaaacgtggg taaggattta gcatgctgga 6240
aataatagac agcaatcaaa cgaagacact gttcccagct accagctatg ccaaaccttg 6300
gcatttttgg tatttttgtg tataagcttt taaggtctga ctgacaaatt ctgtattaag 6360
gtgtcatagc tatgacattt gttaaaaata aactctgcac ttattttgat ttga 6414
<210> 2
<211> 5387
<212> DNA
<213> Macaca fascicularis
<400> 2
gatgctgcat acttaatgtc gaaaggttgc ttcatccaag agcctggagt tttcagagac 60
actgtcctga aactatgtcc tgaaactatg tcattgaaac tgaaacattg tcctgaagct 120
ggtattgggc aataccagcg cctgcaggca acagctcgga tgcacttaag atttaaatat 180
tacccacaga agttctggct tgtctgggaa aaccttttgc taaacagaag agcaacattt 240
tttttttttt cttttctgga atttgtaaac agcatttatt ctcagcctta ccttccaaac 300
gttgcacttg gaacattgct gggccccgtg gaaacagaag cgaacgtcag ccaggccggc 360
agggggcggc agaccccaca cttcgccggg cgccctcacc tccctgggag ggagtgtgca 420
gctgccaaaa tcttcggcgg ggttcagtcc aagcgacttc agccagcaga tggtcattct 480
cctgtgaccg tgtgtactac agactgtttc aaaaccgggc aggcaattaa caatgggaat 540
tctgccatca tcgctgacaa agtcatccca gtttgtctgc catccccaaa ttatgtggtc 600
gccaaccaga ctgaatgtta tgtcactggc tggggagaaa cccaagcact acctgagcaa 660
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<221> misc_feature
<222> (2395)..(2395)
<223> n is a, c, g, or t
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agcuugguca ucuaugacaa cacat 25
<210> 25
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 25
gucaucuaug acaccacaua aacat 25
<210> 26
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 26
cacagaaaac uacccaaaua cuggc 25
<210> 27
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 27
agaaaacuac ccaaaugcua gcutg 25
<210> 28
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 28
aaaacuaccc aaaugcugga uugat 25
<210> 29
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 29
acccaaaugc uggcuugaua augaa 25
<210> 30
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 30
cccaaaugcu ggcuugauca ugaac 25
<210> 31
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 31
gaacuacugc aggaauccaa augct 25
<210> 32
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 32
uacugcagga auccagauga ugugg 25
<210> 33
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 33
acugcaggaa uccagaugca guggc 25
<210> 34
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 34
ugcaggaauc cagaugcuga ggcag 25
<210> 35
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 35
aggugggagu acugcaacca gacgc 25
<210> 36
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 36
aaugcucaga cgcagaagga acugc 25
<210> 37
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 37
gacuguuacc ccgguuccaa gccta 25
<210> 38
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 38
acuguuaccc cgguuccaaa ccuag 25
<210> 39
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 39
cuguuacccc gguuccaaga cuaga 25
<210> 40
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 40
uguuaccccg guuccaagca uagag 25
<210> 41
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 41
guuaccccgg uuccaagcca agagg 25
<210> 42
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 42
uuaccccggu uccaagccua gaggc 25
<210> 43
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 43
uaccccgguu ccaagccuaa aggct 25
<210> 44
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 44
gugcuaccau gguaauggaa agagt 25
<210> 45
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 45
ugcuaccaug guaauggaca gagtt 25
<210> 46
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 46
gcuaccaugg uaauggacaa aguta 25
<210> 47
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 47
cuaccauggu aauggacaga guuat 25
<210> 48
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 48
uaccauggua auggacagaa uuatc 25
<210> 49
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 49
accaugguaa uggacagaga uaucg 25
<210> 50
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 50
ccaugguaau ggacagagua aucga 25
<210> 51
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 51
caugguaaug gacagaguua ucgag 25
<210> 52
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 52
augguaaugg acagaguuaa cgagg 25
<210> 53
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 53
ugguaaugga cagaguuaua gaggc 25
<210> 54
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 54
gguaauggac agaguuauca aggca 25
<210> 55
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 55
guaauggaca gaguuaucga ggcac 25
<210> 56
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 56
ggcacauacu ccaccacuga cacag 25
<210> 57
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 57
cuuggucauc uaugacacca cactc 25
<210> 58
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 58
gucaucuaug acaccacaca cgcat 25
<210> 59
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 59
ucaucuauga caccacacua gcata 25
<210> 60
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 60
caucuaugac accacacuca cauag 25
<210> 61
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 61
gcacauacuc caccacugua acugg 25
<210> 62
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 62
agccccuuau uguuauacga gggat 25
<210> 63
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 63
gccccuuauu guuauacgaa ggatc 25
<210> 64
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 64
ccaagccuag aggcuccuua ugaac 25
<210> 65
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 65
aggcuccuuc ugaacaagca ccaac 25
<210> 66
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 66
auggacagag uuaucaagga acata 25
<210> 67
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 67
uggacagagu uaucaaggca cauac 25
<210> 68
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 68
ggacagaguu aucaaggcaa auact 25
<210> 69
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 69
gacagaguua ucaaggcaca uactt 25
<210> 70
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 70
acagaguuau caaggcacaa acutc 25
<210> 71
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 71
cagaguuauc aaggcacaua cuuca 25
<210> 72
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 72
uacccaaaug cuggcuugaa caaga 25
<210> 73
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 73
ccaaaugcug gcuugaucaa gaact 25
<210> 74
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 74
ucaagaacua cugccgaaaa ccaga 25
<210> 75
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 75
caagaacuac ugccgaaaua cagat 25
<210> 76
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 76
aagaacuacu gccgaaauca agatc 25
<210> 77
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 77
gaacuacugc cgaaauccaa aucct 25
<210> 78
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 78
cuacugccga aauccagaua cugtg 25
<210> 79
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 79
uguggcagcc ccuuggugua auaca 25
<210> 80
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 80
guggcagccc cuugguguua uacaa 25
<210> 81
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 81
uggcagcccc uugguguuaa acaac 25
<210> 82
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 82
ggcagccccu ugguguuaua caaca 25
<210> 83
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 83
gcagccccuu gguguuauaa aacag 25
<210> 84
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 84
cagccccuug guguuauaca acaga 25
<210> 85
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 85
agccccuugg uguuauacaa cagat 25
<210> 86
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 86
gccccuuggu guuauacaaa agatc 25
<210> 87
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 87
ccccuuggug uuauacaaca gaucc 25
<210> 88
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 88
ggugggagua cugcaaccua acacg 25
<210> 89
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 89
gugggaguac ugcaaccuga cacga 25
<210> 90
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 90
ggaguacugc aaccugacaa gaugc 25
<210> 91
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 91
gaguacugca accugacaca augct 25
<210> 92
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 92
guacugcaac cugacacgaa gcuca 25
<210> 93
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 93
uacugcaacc ugacacgaua cucag 25
<210> 94
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 94
acugcaaccu gacacgauga ucaga 25
<210> 95
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 95
cugcaaccug acacgaugca cagat 25
<210> 96
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 96
ugcaaccuga cacgaugcua agatg 25
<210> 97
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 97
caaccugaca cgaugcucaa augca 25
<210> 98
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 98
accugacacg augcucagaa gcaga 25
<210> 99
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 99
ccugacacga ugcucagaua cagaa 25
<210> 100
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 100
cugacacgau gcucagauga agaat 25
<210> 101
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 101
ugacacgaug cucagaugca gaatg 25
<210> 102
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 102
gacacgaugc ucagaugcaa aaugg 25
<210> 103
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 103
acacgaugcu cagaugcaga augga 25
<210> 104
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 104
cacgaugcuc agaugcagaa uggac 25
<210> 105
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 105
ugcuacuacc auuauggaca gagtt 25
<210> 106
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 106
gcuacuacca uuauggacaa aguta 25
<210> 107
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 107
cuacuaccau uauggacaga guuac 25
<210> 108
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 108
uacuaccauu auggacagaa uuacc 25
<210> 109
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 109
acuaccauua uggacagaga uaccg 25
<210> 110
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 110
cuaccauuau ggacagagua accga 25
<210> 111
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 111
uaccauuaug gacagaguua ccgag 25
<210> 112
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 112
accauuaugg acagaguuaa cgagg 25
<210> 113
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 113
gaggcacaua cuccaccaca gucac 25
<210> 114
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 114
cuccaccacu gucacaggaa gaact 25
<210> 115
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 115
acaggaagaa cuugccaaga uuggt 25
<210> 116
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 116
caggaagaac uugccaagca uggtc 25
<210> 117
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 117
aggaagaacu ugccaagcua gguca 25
<210> 118
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 118
ggaagaacuu gccaagcuua gucat 25
<210> 119
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 119
gaagaacuug ccaagcuuga ucatc 25
<210> 120
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 120
aagaacuugc caagcuugga cauct 25
<210> 121
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 121
agaacuugcc aagcuuggua aucta 25
<210> 122
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 122
gaacuugcca agcuugguca ucuat 25
<210> 123
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 123
aacuugccaa gcuuggucaa cuatg 25
<210> 124
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 124
acuugccaag cuuggucaua uauga 25
<210> 125
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 125
cuugccaagc uuggucauca augac 25
<210> 126
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 126
uugccaagcu uggucaucua ugaca 25
<210> 127
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 127
ugccaagcuu ggucaucuaa gacac 25
<210> 128
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 128
gcuuggucau cuaugacaca acacc 25
<210> 129
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 129
uuggucaucu augacaccaa accag 25
<210> 130
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 130
uggucaucua ugacaccaca ccagc 25
<210> 131
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 131
gucaucuaug acaccacaca agcat 25
<210> 132
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 132
caucuaugac accacaccaa cauag 25
<210> 133
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 133
aucuaugaca ccacaccaga auagt 25
<210> 134
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 134
cuaugacacc acaccagcaa agucg 25
<210> 135
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 135
gucggacccc agaaaacuaa ccaaa 25
<210> 136
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 136
ucggacccca gaaaacuaca caaat 25
<210> 137
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 137
gaaaacuacc caaaugcuga ccuga 25
<210> 138
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 138
gcugagauuc gcccuuggua uuaca 25
<210> 139
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 139
cugagauucg cccuugguga uacac 25
<210> 140
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 140
gagauucgcc cuugguguua cacca 25
<210> 141
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 141
agauucgccc uugguguuaa accat 25
<210> 142
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 142
uucgcccuug guguuacaca augga 25
<210> 143
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 143
cuugguguua caccauggaa cccag 25
<210> 144
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 144
uugguguuac accauggaua ccagt 25
<210> 145
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 145
ugguguuaca ccauggauca cagtg 25
<210> 146
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 146
gguguuacac cauggaucca agugt 25
<210> 147
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 147
uguuacacca uggaucccaa uguca 25
<210> 148
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 148
gaaucaagug uccuugcaaa ucuca 25
<210> 149
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 149
aaucaagugu ccuugcaaca cucac 25
<210> 150
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 150
aucaaguguc cuugcaacua ucacg 25
<210> 151
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 151
auggacagag uuaucgagga ucatt 25
<210> 152
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 152
uggacagagu uaucgaggca cautc 25
<210> 153
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 153
acaccacacu ggcaucagaa gacaa 25
<210> 154
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 154
uugguguuau accauggaua ccaat 25
<210> 155
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 155
ugguguuaua ccauggauca caatg 25
<210> 156
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 156
gguguuauac cauggaucca aaugt 25
<210> 157
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 157
guguuauacc auggauccca augtc 25
<210> 158
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 158
ucagauggga guacugcaaa cugac 25
<210> 159
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 159
gaugggagua cugcaaccua acaca 25
<210> 160
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 160
augggaguac ugcaaccuga cacaa 25
<210> 161
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 161
ugggaguacu gcaaccugaa acaat 25
<210> 162
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 162
gggaguacug caaccugaca caatg 25
<210> 163
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 163
ggcuguuucu gaacaagcaa caacg 25
<210> 164
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 164
guuucugaac aagcaccaaa ggagc 25
<210> 165
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 165
cuccaccacu guuacaggaa ggaca 25
<210> 166
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 166
uccaccacug uuacaggaaa gaca 24
<210> 167
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 167
ccaccacugu uacaggaaga acag 24
<210> 168
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 168
gacaccacac uggcaucaga gaacc 25
<210> 169
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 169
acaccacacu ggcaucagaa aacca 25
<210> 170
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 170
agaauacuac ccaaauggua gccg 24
<210> 171
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 171
gaauacuacc caaaugguga ccuga 25
<210> 172
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 172
aauacuaccc aaauggugga cugac 25
<210> 173
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 173
uccuucugaa gaagcaccaa cugaa 25
<210> 174
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 174
ccuucugaag aagcaccaaa ugaaa 25
<210> 175
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 175
cuucugaaga agcaccaaca gaaaa 25
<210> 176
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 176
uucugaagaa gcaccaacua aaaac 25
<210> 177
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 177
ucugaagaag caccaacuga aaaca 25
<210> 178
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 178
cugaagaagc accaacugaa aacag 25
<210> 179
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 179
ugaagaagca ccaacugaaa acagc 25
<210> 180
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 180
gaagaagcac caacugaaaa cagca 25
<210> 181
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 181
aagaagcacc aacugaaaaa agcac 25
<210> 182
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 182
agaagcacca acugaaaaca gcac 24
<210> 183
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 183
gaagcaccaa cugaaaacaa cacg 24
<210> 184
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 184
aagcaccaac ugaaaacaga acugg 25
<210> 185
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 185
aggugaugga cagaguuaua gaggc 25
<210> 186
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 186
cuccaccacu aucacaggaa gaaca 25
<210> 187
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 187
uccaccacua ucacaggaaa aaca 24
<210> 188
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 188
ccaccacuau cacaggaaga acag 24
<210> 189
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 189
caccacuauc acaggaagaa caug 24
<210> 190
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 190
accacuauca caggaagaaa augc 24
<210> 191
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 191
ccacuaucac aggaagaaca uguca 25
<210> 192
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 192
cacuaucaca ggaagaacaa gucag 25
<210> 193
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 193
acuaucacag gaagaacaua ucag 24
<210> 194
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 194
cuaucacagg aagaacauga cagc 24
<210> 195
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 195
uaucacagga agaacaugua aguc 24
<210> 196
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 196
aucacaggaa gaacauguca guc 23
<210> 197
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 197
ucacaggaag aacaugucaa ucug 24
<210> 198
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 198
cacaggaaga acaugucaga cuugg 25
<210> 199
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 199
acaggaagaa caugucagua uugg 24
<210> 200
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 200
ggaagaacau gucagucuua gucg 24
<210> 201
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 201
gaagaacaug ucagucuuga ucgc 24
<210> 202
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 202
aagaacaugu cagucuugga cguc 24
<210> 203
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 203
agaacauguc agucuuggua guca 24
<210> 204
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 204
ggcaucggag gaucccauua uaca 24
<210> 205
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 205
acuauccaaa ugcuggccua accag 25
<210> 206
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 206
gcacagaggc uccuucugaa caagc 25
<210> 207
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 207
uccuucugaa caagcaccaa cugag 25
<210> 208
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 208
ccuucugaac aagcaccaca ugaga 25
<210> 209
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 209
cuucugaaca agcaccacca gagaa 25
<210> 210
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 210
uucugaacaa gcaccaccua agaaa 25
<210> 211
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 211
ucugaacaag caccaccuga gaaaa 25
<210> 212
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 212
cugaacaagc accaccugaa aaaag 25
<210> 213
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 213
ugaacaagca ccaccugaga aaagc 25
<210> 214
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 214
gaacaagcac caccugagaa aagcc 25
<210> 215
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 215
aacaagcacc accugagaaa agccc 25
<210> 216
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 216
caagcaccac cugagaaaaa cccg 24
<210> 217
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 217
aagcaccacc ugagaaaaga ccug 24
<210> 218
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 218
agcaccaccu gagaaaagca cugg 24
<210> 219
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 219
cugagaaaag cccuguggua cagga 25
<210> 220
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 220
gcccuguggu ccaggauuga uacca 25
<210> 221
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 221
cuguggucca ggauugcuaa caugg 25
<210> 222
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 222
cuccaccacu gucacaggaa ggacc 25
<210> 223
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 223
uccaccacug ucacaggaaa gacc 24
<210> 224
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 224
ucuuggucau cuaugauaca acac 24
<210> 225
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 225
cuuggucauc uaugauacca cacg 24
<210> 226
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 226
uuggucaucu augauaccaa acugg 25
<210> 227
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 227
uggucaucua ugauaccaca cuggc 25
<210> 228
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 228
ggucaucuau gauaccacaa uggca 25
<210> 229
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 229
gucaucuaug auaccacaca ggca 24
<210> 230
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 230
ucaucuauga uaccacacua gcac 24
<210> 231
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 231
caucuaugau accacacuga cauca 25
<210> 232
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 232
aucuaugaua ccacacugga aucag 25
<210> 233
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 233
ucuaugauac cacacuggca ucaga 25
<210> 234
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 234
cuaugauacc acacuggcaa cagag 25
<210> 235
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 235
ugauaccaca cuggcaucaa aggac 25
<210> 236
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 236
auaccacacu ggcaucagaa gaccc 25
<210> 237
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 237
agaggacccc agaaaacuaa ccaaa 25
<210> 238
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 238
gaggacccca gaaaacuaca caaa 24
<210> 239
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 239
agaacuacug caggaaucca gauc 24
<210> 240
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 240
acuacugcag gaauccagaa ucugg 25
<210> 241
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 241
uacugcagga auccagauua uggga 25
<210> 242
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 242
acugcaggaa uccagauuca gggaa 25
<210> 243
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 243
cugcaggaau ccagauucua ggaaa 25
<210> 244
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 244
ugcaggaauc cagauucuga gaaac 25
<210> 245
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 245
gcaggaaucc agauucugga aaaca 25
<210> 246
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 246
ggaauccaga uucugggaaa caacc 25
<210> 247
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 247
gggaaacaac ccugguguua cacaa 25
<210> 248
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 248
ggaaacaacc cugguguuaa acaac 25
<210> 249
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 249
ugugugaggu gggaguacua caac 24
<210> 250
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 250
gugugaggug ggaguacuga aauc 24
<210> 251
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 251
gugagguggg aguacugcaa ucuga 25
<210> 252
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 252
ugagguggga guacugcaaa cugac 25
<210> 253
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 253
cugacacaau gcucagaaaa agaa 24
<210> 254
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 254
ugacacaaug cucagaaaca gaac 24
<210> 255
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 255
gacacaaugc ucagaaacaa aauca 25
<210> 256
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 256
acacaaugcu cagaaacaga aucag 25
<210> 257
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 257
cacaaugcuc agaaacagaa ucagg 25
<210> 258
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 258
acaaugcuca gaaacagaaa cagg 24
<210> 259
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 259
caaugcucag aaacagaaua aggg 24
<210> 260
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 260
aaugcucaga aacagaauca ggug 24
<210> 261
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 261
augcucagaa acagaaucaa gugc 24
<210> 262
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 262
ugcucagaaa cagaaucaga ugucc 25
<210> 263
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 263
cucagaaaca gaaucaggua ucca 24
<210> 264
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 264
cagaaacaga aucaggugua cuaga 25
<210> 265
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 265
agaaacagaa ucagguguca uagag 25
<210> 266
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 266
gaaacagaau caggugucca agaga 25
<210> 267
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 267
aaacagaauc agguguccua gagac 25
<210> 268
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 268
aacagaauca gguguccuaa agac 24
<210> 269
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 269
cagaaucagg uguccuagaa acucc 25
<210> 270
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 270
gaaucaggug uccuagagaa uccca 25
<210> 271
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 271
aucagguguc cuagagacua ccac 24
<210> 272
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 272
gguguccuag agacucccaa ugug 24
<210> 273
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 273
ccuagagacu cccacuguua uucca 25
<210> 274
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 274
cuagagacuc ccacuguuga uccag 25
<210> 275
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 275
uagagacucc cacuguugua ccag 24
<210> 276
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 276
agagacuccc acuguuguua cag 23
<210> 277
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 277
gagacuccca cuguuguuca aguc 24
<210> 278
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 278
agacucccac uguuguucca guucc 25
<210> 279
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 279
gcucauucug aagcagcaca aacg 24
<210> 280
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 280
cucauucuga agcagcacca acuga 25
<210> 281
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 281
ucauucugaa gcagcaccaa cugag 25
<210> 282
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 282
cauucugaag cagcaccaaa ugagc 25
<210> 283
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 283
auucugaagc agcaccaaca gagca 25
<210> 284
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 284
uucugaagca gcaccaacua agcaa 25
<210> 285
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 285
ucugaagcag caccaacuga gcaaa 25
<210> 286
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 286
cugaagcagc accaacugaa caaac 25
<210> 287
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 287
ugaagcagca ccaacugaga aaacc 25
<210> 288
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 288
gaagcagcac caacugagca aaccc 25
<210> 289
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 289
aagcagcacc aacugagcaa acccc 25
<210> 290
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 290
cagugcuacc augguaauga ccaga 25
<210> 291
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 291
agugcuacca ugguaaugga cagag 25
<210> 292
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 292
acauucucca ccacugucaa aggaa 25
<210> 293
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 293
cacugucaca ggaaggacaa gucaa 25
<210> 294
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 294
acugucacag gaaggacaua ucaa 24
<210> 295
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 295
cugucacagg aaggacauga caac 24
<210> 296
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 296
ugucacagga aggacaugua aauc 24
<210> 297
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 297
gucacaggaa ggacauguca auc 23
<210> 298
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 298
ucacaggaag gacaugucaa ucug 24
<210> 299
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 299
acaggaagga caugucaaua uugg 24
<210> 300
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 300
caggaaggac augucaauca uggc 24
<210> 301
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 301
aggaaggaca ugucaaucua gguca 25
<210> 302
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 302
ggaaggacau gucaaucuua guca 24
<210> 303
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 303
gaaggacaug ucaaucuuga ucac 24
<210> 304
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 304
aaggacaugu caaucuugga caucc 25
<210> 305
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 305
aggacauguc aaucuuggua aucca 25
<210> 306
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 306
ggacauguca aucuugguca ucca 24
<210> 307
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 307
gacaugucaa ucuuggucaa ccag 24
<210> 308
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 308
acaugucaau cuuggucaua cauga 25
<210> 309
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 309
caugucaauc uuggucauca augac 25
<210> 310
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 310
augucaaucu uggucaucca ugaca 25
<210> 311
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 311
ugucaaucuu ggucauccaa gacac 25
<210> 312
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 312
gucaaucuug gucauccaua acacc 25
<210> 313
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 313
ucaaucuugg ucauccauga cacca 25
<210> 314
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 314
caaucuuggu cauccaugaa accac 25
<210> 315
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 315
aaucuugguc auccaugaca ccaca 25
<210> 316
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 316
aucuugguca uccaugacaa cacac 25
<210> 317
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 317
ugacaaugaa cuacugcaga aaucc 25
<210> 318
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 318
gacaaugaac uacugcagga aucca 25
<210> 319
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 319
acaaugaacu acugcaggaa uccag 25
<210> 320
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 320
caaugaacua cugcaggaaa ccaga 25
<210> 321
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 321
aaugaacuac ugcaggaaua caga 24
<210> 322
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 322
augaacuacu gcaggaauca agag 24
<210> 323
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 323
ugaacuacug caggaaucca gaugc 25
<210> 324
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 324
cuacugcagg aauccagaua ccga 24
<210> 325
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 325
caggcccuug guguuuuaca augga 25
<210> 326
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 326
cuugguguuu uaccauggaa cccag 25
<210> 327
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 327
uugguguuuu accauggaca ccagc 25
<210> 328
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 328
ugguguuuua ccauggacca cagca 25
<210> 329
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 329
gguguuuuac cauggaccca agca 24
<210> 330
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 330
guguuuuacc auggacccca gcac 24
<210> 331
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 331
guuuuaccau ggaccccaga aucag 25
<210> 332
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 332
ggaguacugc aaccugacga gaugc 25
<210> 333
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 333
gaguacugca accugacgca augc 24
<210> 334
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 334
guacugcaac cugacgcgaa gcuca 25
<210> 335
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 335
uacugcaacc ugacgcgaua cucag 25
<210> 336
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 336
ugcaaccuga cgcgaugcua agaca 25
<210> 337
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 337
ccugacgcga ugcucagaca cagaa 25
<210> 338
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 338
cugacgcgau gcucagacaa agaag 25
<210> 339
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 339
gaugcucaga cacagaagga acug 24
<210> 340
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 340
augcucagac acagaaggga cugg 24
<210> 341
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 341
agacacagaa gggacuguga ucgc 24
<210> 342
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 342
gcauccucuu cauuugauua uggga 25
<210> 343
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 343
cauccucuuc auuugauuga gggaa 25
<210> 344
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 344
auccucuuca uuugauugua ggaag 25
<210> 345
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 345
uccucuucau uugauuguga gaagc 25
<210> 346
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 346
ccucuucauu ugauugugga aagcc 25
<210> 347
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 347
cuucauuuga uugugggaaa ccuca 25
<210> 348
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 348
uucauuugau ugugggaaga cucaa 25
<210> 349
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 349
ucauuugauu gugggaagca ucaag 25
<210> 350
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 350
cauuugauug ugggaagcca caag 24
<210> 351
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 351
auuugauugu gggaagccua aagg 24
<210> 352
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 352
gugggaagcc ucaaguggaa ccgaa 25
<210> 353
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 353
aagaaauguc cuggaagcaa uguag 25
<210> 354
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 354
agaaaugucc uggaagcaua guagg 25
<210> 355
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 355
gaaauguccu ggaagcauua uaggg 25
<210> 356
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 356
aauguccugg aagcauugua ggggg 25
<210> 357
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 357
auguccugga agcauuguaa ggggg 25
<210> 358
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 358
agaacaaggu uuggaaagca cuuc 24
<210> 359
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 359
gaacaagguu uggaaagcaa uucg 24
<210> 360
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 360
aacaagguuu ggaaagcaca ucug 24
<210> 361
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 361
acaagguuug gaaagcacua cugg 24
<210> 362
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 362
caagguuugg aaagcacuua ugugg 25
<210> 363
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 363
aagguuugga aagcacuuca gugga 25
<210> 364
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 364
agguuuggaa agcacuucua uggag 25
<210> 365
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 365
uggaaagcac uucuguggaa gcacc 25
<210> 366
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 366
guggaggcac cuuaauauca ccaga 25
<210> 367
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 367
cuuaauaucc ccagagugga ugcg 24
<210> 368
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 368
uaauaucccc agagugggua cugac 25
<210> 369
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 369
agagugggug cugacugcua cucac 25
<210> 370
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 370
caaggucauc cugggugcaa accaa 25
<210> 371
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 371
ccugggugca caccaagaaa ugaac 25
<210> 372
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 372
gugcacacca agaagugaaa cucga 25
<210> 373
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 373
agcagauauu gccuugcuaa agca 24
<210> 374
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 374
gcagauauug ccuugcuaaa gcuaa 25
<210> 375
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 375
cagauauugc cuugcuaaaa cuaag 25
<210> 376
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 376
agauauugcc uugcuaaaga uaagc 25
<210> 377
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 377
gauauugccu ugcuaaagca aagca 25
<210> 378
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 378
auauugccuu gcuaaagcua agcag 25
<210> 379
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 379
uauugccuug cuaaagcuaa gcagg 25
<210> 380
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 380
ucaucacuga caaaguaaua ccagc 25
<210> 381
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 381
ggacugaaug uuacaucaca ggcg 24
<210> 382
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 382
gacugaaugu uacaucacua gcugg 25
<210> 383
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 383
acugaauguu acaucacuga cuggg 25
<210> 384
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 384
cugaauguua caucacugga ugggg 25
<210> 385
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 385
ugaauguuac aucacuggca gggga 25
<210> 386
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 386
aauguuacau cacuggcuga ggaga 25
<210> 387
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 387
gaaacccaag guaccuuuga gacg 24
<210> 388
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 388
uccaccacug ucacaggaaa gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 389
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 389
ugguaaugga cagaguuaua gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 390
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 390
uacugcaacc ugacacgaua gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 391
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 391
agaacuugcc aagcuuggua gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 392
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 392
aacuugccaa gcuuggucaa gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 393
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 393
uugccaagcu uggucaucua gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 394
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 394
auggacagag uuaucgagga gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 395
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 395
uggacagagu uaucgaggca gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 396
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 396
uggucaucua ugauaccaca gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 397
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 397
uacugcagga auccagauua gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 398
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 398
agaaaugucc uggaagcaua gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 399
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 399
gacaacagaa uauuauccaa gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 400
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 400
auggacagag uuaucaagga gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 401
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 401
gacaacagaa uauuauccaa gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 402
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 402
auggacagag uuaucaagga gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 403
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 403
gacaacagaa uauuauccaa gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 404
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 404
uccuguacca cauggcuuug cucaggu 27
<210> 405
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 405
caaucuugga ccacauggcu uugcuca 27
<210> 406
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 406
guagcuaucc uggaccacau ggcuuug 27
<210> 407
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 407
gguaguaauc cuggaccaca uggcuuu 27
<210> 408
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 408
ugguaucaau ccuggaccac auggcuu 27
<210> 409
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 409
augguugcaa uccuggacca cauggcu 27
<210> 410
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 410
caugguagca auccuggacc acauggc 27
<210> 411
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 411
ccauguuagc aauccuggac cacaugg 27
<210> 412
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 412
accauuguag caauccugga ccacaug 27
<210> 413
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 413
ugccuugaua acucugucca ucaccau 27
<210> 414
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 414
aggucuuucc ugugacagug guggagu 27
<210> 415
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 415
cagguucuuc cugugacagu gguggag 27
<210> 416
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 416
gcuugucagg uccuuccugu gacagug 27
<210> 417
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 417
augacuaagc uuggcagguc cuuccug 27
<210> 418
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 418
gaugaucaag cuuggcaggu ccuuccu 27
<210> 419
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 419
uagauuacca agcuuggcag guccuuc 27
<210> 420
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 420
auagaugacc aagcuuggca gguccuu 27
<210> 421
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 421
cauaguugac caagcuuggc agguccu 27
<210> 422
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 422
ucauauauga ccaagcuugg caggucc 27
<210> 423
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 423
gucauugaug accaagcuug gcagguc 27
<210> 424
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 424
auguguuguc auagaugacc aagcuug 27
<210> 425
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 425
auguuuaugu ggugucauag augacca 27
<210> 426
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 426
gccaguauuu ggguaguuuu cuguggu 27
<210> 427
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 427
caagcuagca uuuggguagu uuucugu 27
<210> 428
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 428
aucaauccag cauuugggua guuuucu 27
<210> 429
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 429
uucauuauca agccagcauu uggguag 27
<210> 430
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 430
guucaugauc aagccagcau uugggua 27
<210> 431
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 431
agcauuugga uuccugcagu aguucau 27
<210> 432
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 432
ccacaucauc uggauuccug caguagu 27
<210> 433
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 433
gccacugcau cuggauuccu gcaguag 27
<210> 434
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 434
cugccucagc aucuggauuc cugcagu 27
<210> 435
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 435
gcgucugguu gcaguacucc caccuga 27
<210> 436
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 436
gcaguuccuu cugcgucuga gcauugc 27
<210> 437
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 437
uaggcuugga accgggguaa cagucgg 27
<210> 438
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 438
cuagguuugg aaccggggua acagucg 27
<210> 439
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 439
ucuagucuug gaaccggggu aacaguc 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 440
cucuaugcuu ggaaccgggg uaacagu 27
<210> 441
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 441
ccucuuggcu uggaaccggg guaacag 27
<210> 442
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 442
gccucuaggc uuggaaccgg gguaaca 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 443
agccuuuagg cuuggaaccg ggguaac 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 444
acucuuucca uuaccauggu agcacuc 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 445
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 446
uaacuuuguc cauuaccaug guagcac 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 447
auaacucugu ccauuaccau gguagca 27
<210> 448
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 448
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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cgauaucucu guccauuacc augguag 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 450
ucgauuacuc uguccauuac cauggua 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 451
cucgauaacu cuguccauua ccauggu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 452
ccucguuaac ucuguccauu accaugg 27
<210> 453
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 453
gccucuauaa cucuguccau uaccaug 27
<210> 454
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 454
ugccuugaua acucugucca uuaccau 27
<210> 455
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 455
gugccucgau aacucugucc auuacca 27
<210> 456
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 456
cugugucagu gguggaguau gugccuc 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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cuaugugagu guggugucau agaugac 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 461
ccaguuacag ugguggagua ugugccu 27
<210> 462
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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aucccucgua uaacaauaag gggcugc 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 463
gauccuucgu auaacaauaa ggggcug 27
<210> 464
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 464
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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aguauuugcc uugauaacuc uguccau 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 470
gaaguuugug ccuugauaac ucugucc 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 471
ugaaguaugu gccuugauaa cucuguc 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 472
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 473
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 474
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 475
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 476
gaucuugauu ucggcaguag uucuuga 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 477
aggauuugga uuucggcagu aguucuu 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 478
cacaguaucu ggauuucggc aguaguu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 479
uguauuacac caaggggcug ccacagg 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 480
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 481
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<210> 482
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 482
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<210> 483
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 483
cuguuuuaua acaccaaggg gcugcca 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 484
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 485
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 486
gaucuuuugu auaacaccaa ggggcug 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 487
ggaucuguug uauaacacca aggggcu 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 488
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 490
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 492
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 494
ucugaucauc gugucagguu gcaguac 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 499
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 500
auucuucauc ugagcaucgu gucaggu 27
<210> 501
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 501
cauucugcau cugagcaucg ugucagg 27
<210> 502
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 502
ccauuuugca ucugagcauc gugucag 27
<210> 503
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 503
uccauucugc aucugagcau cguguca 27
<210> 504
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 504
guccauucug caucugagca ucguguc 27
<210> 505
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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aacucugucc auaaugguag uagcagu 27
<210> 506
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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uaacuuuguc cauaauggua guagcag 27
<210> 507
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 507
guaacucugu ccauaauggu aguagca 27
<210> 508
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gguaauucug uccauaaugg uaguagc 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 509
cgguaucucu guccauaaug guaguag 27
<210> 510
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 510
ucgguuacuc uguccauaau gguagua 27
<210> 511
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 511
cucgguaacu cuguccauaa ugguagu 27
<210> 512
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 512
ccucguuaac ucuguccaua augguag 27
<210> 513
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 513
gugacugugg uggaguaugu gccucgg 27
<210> 514
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 514
aguucuuccu gugacagugg uggagua 27
<210> 515
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 515
accaaucuug gcaaguucuu ccuguga 27
<210> 516
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 516
gaccaugcuu ggcaaguucu uccugug 27
<210> 517
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 517
ugaccuagcu uggcaaguuc uuccugu 27
<210> 518
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 518
augacuaagc uuggcaaguu cuuccug 27
<210> 519
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 519
gaugaucaag cuuggcaagu ucuuccu 27
<210> 520
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 520
agauguccaa gcuuggcaag uucuucc 27
<210> 521
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 521
uagauuacca agcuuggcaa guucuuc 27
<210> 522
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 522
auagaugacc aagcuuggca aguucuu 27
<210> 523
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 523
cauaguugac caagcuuggc aaguucu 27
<210> 524
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 524
ucauauauga ccaagcuugg caaguuc 27
<210> 525
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 525
gucauugaug accaagcuug gcaaguu 27
<210> 526
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 526
ugucauagau gaccaagcuu ggcaagu 27
<210> 527
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gugucuuaga ugaccaagcu uggcaag 27
<210> 528
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 528
gguguugugu cauagaugac caagcuu 27
<210> 529
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 529
cugguuuggu gucauagaug accaagc 27
<210> 530
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 530
gcuggugugg ugucauagau gaccaag 27
<210> 531
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 531
augcuugugu ggugucauag augacca 27
<210> 532
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 532
cuauguuggu guggugucau agaugac 27
<210> 533
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 533
acuauucugg ugugguguca uagauga 27
<210> 534
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 534
cgacuuugcu gguguggugu cauagau 27
<210> 535
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 535
uuugguuagu uuucuggggu ccgacua 27
<210> 536
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 536
auuuguguag uuuucugggg uccgacu 27
<210> 537
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 537
ucaggucagc auuuggguag uuuucug 27
<210> 538
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 538
uguaauacca agggcgaauc ucagcau 27
<210> 539
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 539
guguaucacc aagggcgaau cucagca 27
<210> 540
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 540
ugguguaaca ccaagggcga aucucag 27
<210> 541
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 541
augguuuaac accaagggcg aaucuca 27
<210> 542
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 542
uccauugugu aacaccaagg gcgaauc 27
<210> 543
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 543
cuggguucca ugguguaaca ccaaggg 27
<210> 544
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 544
acugguaucc augguguaac accaagg 27
<210> 545
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 545
cacugugauc caugguguaa caccaag 27
<210> 546
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 546
acacuuggau ccauggugua acaccaa 27
<210> 547
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 547
ugacauuggg auccauggug uaacacc 27
<210> 548
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 548
ugagauuugc aaggacacuu gauucug 27
<210> 549
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 549
gugaguguug caaggacacu ugauucu 27
<210> 550
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 550
cgugauaguu gcaaggacac uugauuc 27
<210> 551
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 551
aaugauccuc gauaacucug uccauca 27
<210> 552
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 552
gaaugugccu cgauaacucu guccauc 27
<210> 553
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 553
uugucuucug augccagugu gguguca 27
<210> 554
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 554
auugguaucc augguauaac accaagg 27
<210> 555
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 555
cauugugauc caugguauaa caccaag 27
<210> 556
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 556
acauuuggau ccaugguaua acaccaa 27
<210> 557
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 557
gacauuggga uccaugguau aacacca 27
<210> 558
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 558
gucaguuugc aguacuccca ucugaca 27
<210> 559
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 559
uguguuaggu ugcaguacuc ccaucug 27
<210> 560
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 560
uugugucagg uugcaguacu cccaucu 27
<210> 561
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 561
auuguuucag guugcaguac ucccauc 27
<210> 562
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 562
cauuguguca gguugcagua cucccau 27
<210> 563
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 563
cguuguugcu uguucagaaa cagccgu 27
<210> 564
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 564
gcuccuuugg ugcuuguuca gaaacag 27
<210> 565
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 565
uguccuuccu guaacagugg uggagaa 27
<210> 566
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 566
augucuuucc uguaacagug guggaga 27
<210> 567
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 567
cauguucuuc cuguaacagu gguggag 27
<210> 568
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 568
gguucucuga ugccagugug gugucau 27
<210> 569
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 569
ugguuuucug augccagugu gguguca 27
<210> 570
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 570
caggcuacca uuuggguagu auucugu 27
<210> 571
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 571
ucaggucacc auuuggguag uauucug 27
<210> 572
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 572
gucaguccac cauuugggua guauucu 27
<210> 573
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 573
uucaguuggu gcuucuucag aaggaag 27
<210> 574
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 574
uuucauuugg ugcuucuuca gaaggaa 27
<210> 575
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 575
uuuucuguug gugcuucuuc agaagga 27
<210> 576
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 576
guuuuuaguu ggugcuucuu cagaagg 27
<210> 577
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 577
uguuuucagu uggugcuucu ucagaag 27
<210> 578
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 578
cuguuuucag uuggugcuuc uucagaa 27
<210> 579
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 579
gcuguuuuca guuggugcuu cuucaga 27
<210> 580
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 580
ugcuguuuuc aguuggugcu ucuucag 27
<210> 581
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 581
gugcuuuuuu caguuggugc uucuuca 27
<210> 582
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 582
agugcuguuu ucaguuggug cuucuuc 27
<210> 583
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 583
caguguuguu uucaguuggu gcuucuu 27
<210> 584
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 584
ccaguucugu uuucaguugg ugcuucu 27
<210> 585
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 585
gccucuauaa cucuguccau caccucg 27
<210> 586
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 586
uguucuuccu gugauagugg uggagag 27
<210> 587
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 587
auguuuuucc ugugauagug guggaga 27
<210> 588
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 588
cauguucuuc cugugauagu gguggag 27
<210> 589
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 589
acauguucuu ccugugauag uggugga 27
<210> 590
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 590
gacauuuucu uccugugaua guggugg 27
<210> 591
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 591
ugacauguuc uuccugugau aguggug 27
<210> 592
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 592
cugacuuguu cuuccuguga uaguggu 27
<210> 593
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 593
acugauaugu ucuuccugug auagugg 27
<210> 594
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 594
gacugucaug uucuuccugu gauagug 27
<210> 595
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 595
agacuuacau guucuuccug ugauagu 27
<210> 596
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 596
aagacugaca uguucuuccu gugauag 27
<210> 597
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 597
caagauugac auguucuucc ugugaua 27
<210> 598
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 598
ccaagucuga cauguucuuc cugugau 27
<210> 599
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 599
accaauacug acauguucuu ccuguga 27
<210> 600
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 600
acgacuaaga cugacauguu cuuccug 27
<210> 601
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 601
gacgaucaag acugacaugu ucuuccu 27
<210> 602
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 602
agacguccaa gacugacaug uucuucc 27
<210> 603
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 603
uagacuacca agacugacau guucuuc 27
<210> 604
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 604
uaguauaaug ggauccuccg augccaa 27
<210> 605
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 605
cugguuaggc cagcauuugg auaguau 27
<210> 606
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 606
gcuuguucag aaggagccuc ugugcuu 27
<210> 607
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 607
cucaguuggu gcuuguucag aaggagc 27
<210> 608
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 608
ucucaugugg ugcuuguuca gaaggag 27
<210> 609
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 609
uucucuggug gugcuuguuc agaagga 27
<210> 610
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 610
uuucuuaggu ggugcuuguu cagaagg 27
<210> 611
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 611
uuuucucagg uggugcuugu ucagaag 27
<210> 612
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 612
cuuuuuucag guggugcuug uucagaa 27
<210> 613
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 613
gcuuuucuca gguggugcuu guucaga 27
<210> 614
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 614
ggcuuuucuc agguggugcu uguucag 27
<210> 615
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 615
gggcuuuucu cagguggugc uuguuca 27
<210> 616
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 616
caggguuuuu cucagguggu gcuuguu 27
<210> 617
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 617
acaggucuuu ucucaggugg ugcuugu 27
<210> 618
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 618
cacagugcuu uucucaggug gugcuug 27
<210> 619
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 619
uccuguacca cagggcuuuu cucaggu 27
<210> 620
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 620
ugguaucaau ccuggaccac agggcuu 27
<210> 621
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 621
ccauguuagc aauccuggac cacaggg 27
<210> 622
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 622
gguccuuccu gugacagugg uggagga 27
<210> 623
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 623
aggucuuucc ugugacagug guggagg 27
<210> 624
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 624
aguguuguau cauagaugac caagauu 27
<210> 625
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 625
caguguggua ucauagauga ccaagau 27
<210> 626
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 626
ccaguuuggu aucauagaug accaaga 27
<210> 627
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 627
gccagugugg uaucauagau gaccaag 27
<210> 628
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 628
ugccauugug guaucauaga ugaccaa 27
<210> 629
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 629
augccugugu gguaucauag augacca 27
<210> 630
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 630
gaugcuagug ugguaucaua gaugacc 27
<210> 631
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 631
ugaugucagu gugguaucau agaugac 27
<210> 632
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 632
cugauuccag ugugguauca uagauga 27
<210> 633
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 633
ucugaugcca gugugguauc auagaug 27
<210> 634
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 634
cucuguugcc agugugguau cauagau 27
<210> 635
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 635
guccuuugau gccagugugg uaucaua 27
<210> 636
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 636
gggucuucug augccagugu gguauca 27
<210> 637
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 637
uuugguuagu uuucuggggu ccucuga 27
<210> 638
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 638
auuuguguag uuuucugggg uccucug 27
<210> 639
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 639
gaaucuggau uccugcagua guucucg 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 640
ccagauucug gauuccugca guaguuc 27
<210> 641
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 641
ucccauaauc uggauuccug caguagu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 642
uucccugaau cuggauuccu gcaguag 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 643
uuuccuagaa ucuggauucc ugcagua 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 644
guuucucaga aucuggauuc cugcagu 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 645
uguuuuccag aaucuggauu ccugcag 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 646
gguuguuucc cagaaucugg auuccug 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 647
uuguguaaca ccaggguugu uucccag 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 648
guuguuuaac accaggguug uuuccca 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 650
agauuucagu acucccaccu cacacac 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 651
ucagauugca guacucccac cucacac 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 652
gucaguuugc aguacuccca ccucaca 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 653
auucuuuuuc ugagcauugu gucagau 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 654
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 655
ugauuuuguu ucugagcauu gugucag 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 656
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ccugauucug uuucugagca uuguguc 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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accuguuucu guuucugagc auugugu 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 659
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 660
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 661
gacacuugau ucuguuucug agcauug 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 662
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 663
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 664
ucuaguacac cugauucugu uucugag 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 665
cucuaugaca ccugauucug uuucuga 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 666
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ugggauucuc uaggacaccu gauucug 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 672
caacauuggg agucucuagg acaccug 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 673
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 674
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 675
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gaacuugaac aacaguggga gucucua 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 678
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 679
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 680
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 681
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 682
gcucauuugg ugcugcuuca gaaugag 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 683
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 684
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 685
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 686
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gguuuucuca guuggugcug cuucaga 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ggguuugcuc aguuggugcu gcuucag 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ucuggucauu accaugguag cacugcc 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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cucuguccau uaccauggua gcacugc 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 692
uuccuuugac agugguggag aaugugc 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 693
uugacuuguc cuuccuguga caguggu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 694
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 697
aagauugaca uguccuuccu gugacag 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 698
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 700
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<210> 701
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 701
ugaccuagau ugacaugucc uuccugu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 702
augacuaaga uugacauguc cuuccug 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 703
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 704
ggauguccaa gauugacaug uccuucc 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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uggauuacca agauugacau guccuuc 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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auggaugacc aagauugaca uguccuu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 707
caugguugac caagauugac auguccu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ucauguauga ccaagauuga caugucc 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 710
ugucauggau gaccaagauu gacaugu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 711
gugucuugga ugaccaagau ugacaug 27
<210> 712
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 712
gguguuaugg augaccaaga uugacau 27
<210> 713
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 713
uggugucaug gaugaccaag auugaca 27
<210> 714
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 714
gugguuucau ggaugaccaa gauugac 27
<210> 715
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ugugguguca uggaugacca agauuga 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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guguguuguc auggaugacc aagauug 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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uggauuccug caguaguuca uugucag 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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cuggauuccu gcaguaguuc auuguca 27
<210> 720
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 720
ucugguuucc ugcaguaguu cauuguc 27
<210> 721
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 721
aucuguauuc cugcaguagu ucauugu 27
<210> 722
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 722
caucuugauu ccugcaguag uucauug 27
<210> 723
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 723
gcaucuggau uccugcagua guucauu 27
<210> 724
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 724
aucgguaucu ggauuccugc aguaguu 27
<210> 725
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 725
uccauuguaa aacaccaagg gccugua 27
<210> 726
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 726
cuggguucca ugguaaaaca ccaaggg 27
<210> 727
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 727
gcuggugucc augguaaaac accaagg 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ugcugugguc caugguaaaa caccaag 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 729
augcuugggu ccaugguaaa acaccaa 27
<210> 730
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 730
gaugcugggg uccaugguaa aacacca 27
<210> 731
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 731
cugauucugg gguccauggu aaaacac 27
<210> 732
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 732
gcaucucguc agguugcagu acuccca 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 733
agcauugcgu cagguugcag uacuccc 27
<210> 734
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 734
ugagcuucgc gucagguugc aguacuc 27
<210> 735
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 735
cugaguaucg cgucagguug caguacu 27
<210> 736
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 736
ugucuuagca ucgcgucagg uugcagu 27
<210> 737
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 737
uucugugucu gagcaucgcg ucagguu 27
<210> 738
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 738
cuucuuuguc ugagcaucgc gucaggu 27
<210> 739
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 739
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<210> 740
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 740
cacagucccu ucugugucug agcaucg 27
<210> 741
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 741
agcgaucaca gucccuucug ugucuga 27
<210> 742
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 742
ucccauaauc aaaugaagag gaugcac 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 743
uucccucaau caaaugaaga ggaugca 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 744
cuuccuacaa ucaaaugaag aggaugc 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 745
gcuucucaca aucaaaugaa gaggaug 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 746
ggcuuuccac aaucaaauga agaggau 27
<210> 747
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 747
ugagguuucc cacaaucaaa ugaagag 27
<210> 748
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 748
uugagucuuc ccacaaucaa augaaga 27
<210> 749
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 749
cuugaugcuu cccacaauca aaugaag 27
<210> 750
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 750
acuuguggcu ucccacaauc aaaugaa 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 751
cacuuuaggc uucccacaau caaauga 27
<210> 752
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 752
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 753
cuacauugcu uccaggacau uucuucg 27
<210> 754
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 754
ccuacuaugc uuccaggaca uuucuuc 27
<210> 755
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 755
cccuauaaug cuuccaggac auuucuu 27
<210> 756
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 756
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 757
cccccuuaca augcuuccag gacauuu 27
<210> 758
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 758
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<210> 759
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 759
cagaauugcu uuccaaaccu uguucug 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 760
acagaugugc uuuccaaacc uuguucu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 761
cacaguagug cuuuccaaac cuuguuc 27
<210> 762
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 762
ccacauaagu gcuuuccaaa ccuuguu 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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uccacugaag ugcuuuccaa accuugu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 764
cuccauagaa gugcuuucca aaccuug 27
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 767
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 768
gucaguaccc acucugggga uauuaag 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 769
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 770
uugguuugca cccaggauga ccuugua 27
<210> 771
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 771
guucauuucu uggugugcac ccaggau 27
<210> 772
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 772
ucgaguuuca cuucuuggug ugcaccc 27
<210> 773
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 773
uagcuuuagc aaggcaauau cugcuug 27
<210> 774
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 774
uuagcuuuag caaggcaaua ucugcuu 27
<210> 775
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 775
cuuaguuuua gcaaggcaau aucugcu 27
<210> 776
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 776
gcuuaucuuu agcaaggcaa uaucugc 27
<210> 777
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 777
ugcuuugcuu uagcaaggca auaucug 27
<210> 778
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 778
cugcuuagcu uuagcaaggc aauaucu 27
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<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 779
ccugcuuagc uuuagcaagg caauauc 27
<210> 780
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 780
gcugguauua cuuugucagu gaugacg 27
<210> 781
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 781
cagccuguga uguaacauuc aguccug 27
<210> 782
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 782
ccagcuagug auguaacauu caguccu 27
<210> 783
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 783
cccagucagu gauguaacau ucagucc 27
<210> 784
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 784
ccccauccag ugauguaaca uucaguc 27
<210> 785
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 785
uccccugcca gugauguaac auucagu 27
<210> 786
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 786
ucuccucagc cagugaugua acauuca 27
<210> 787
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 787
cagucucaaa gguaccuugg guuucuc 27
<210> 788
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 788
uuuccuguga caguggugga gg 22
<210> 789
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 789
uauaacucug uccauuacca gg 22
<210> 790
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 790
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<210> 791
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 791
uaccaagcuu ggcaaguucu gg 22
<210> 792
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 792
uugaccaagc uuggcaaguu gg 22
<210> 793
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 793
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<210> 794
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 794
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<210> 795
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 795
ugccucgaua acucugucca gg 22
<210> 796
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 796
ugugguauca uagaugacca gg 22
<210> 797
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 797
uaaucuggau uccugcagua gg 22
<210> 798
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 798
uaugcuucca ggacauuucu gg 22
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<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 799
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<210> 800
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 800
uccuugauaa cucuguccau gg 22
<210> 801
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 801
uuggauaaua uucuguuguc gg 22
<210> 802
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 802
uccuugauaa cucuguccau gg 22
<210> 803
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 803
uuggauaaua uucuguuguc gg 22
<210> 804
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 804
cugagcaaag ccauguggu 19
<210> 805
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 805
agcaaagcca uguggucca 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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aagccaugug guccaggau 19
<210> 807
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 807
agccaugugg uccaggauu 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 808
gccauguggu ccaggauug 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 809
ccaugugguc caggauugc 19
<210> 810
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 810
cauguggucc aggauugcu 19
<210> 811
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 811
auguggucca ggauugcua 19
<210> 812
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 812
ugugguccag gauugcuac 19
<210> 813
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 813
ggugauggac agaguuauc 19
<210> 814
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 814
uccaccacug ucacaggaa 19
<210> 815
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 815
ccaccacugu cacaggaag 19
<210> 816
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 816
cugucacagg aaggaccug 19
<210> 817
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 817
ggaaggaccu gccaagcuu 19
<210> 818
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 818
gaaggaccug ccaagcuug 19
<210> 819
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 819
aggaccugcc aagcuuggu 19
<210> 820
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 820
ggaccugcca agcuugguc 19
<210> 821
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 821
gaccugccaa gcuugguca 19
<210> 822
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 822
accugccaag cuuggucau 19
<210> 823
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 823
ccugccaagc uuggucauc 19
<210> 824
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 824
agcuugguca ucuaugaca 19
<210> 825
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 825
gucaucuaug acaccacau 19
<210> 826
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 826
cacagaaaac uacccaaau 19
<210> 827
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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agaaaacuac ccaaaugcu 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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aaaacuaccc aaaugcugg 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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acccaaaugc uggcuugau 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 830
cccaaaugcu ggcuugauc 19
<210> 831
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 831
gaacuacugc aggaaucca 19
<210> 832
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 832
uacugcagga auccagaug 19
<210> 833
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 833
acugcaggaa uccagaugc 19
<210> 834
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 834
ugcaggaauc cagaugcug 19
<210> 835
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 836
aaugcucaga cgcagaagg 19
<210> 837
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 837
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<210> 838
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 838
acuguuaccc cgguuccaa 19
<210> 839
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 839
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 840
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<210> 841
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 841
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<210> 842
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 842
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 843
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 844
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 852
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 853
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 854
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 855
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 856
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 857
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 858
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<210> 859
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 859
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 860
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 863
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 864
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 865
aggcuccuuc ugaacaagc 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gaacuugcca agcuugguc 19
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<210> 925
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
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<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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uggucaucua ugacaccac 19
<210> 931
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gucaucuaug acaccacac 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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caucuaugac accacacca 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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aucuaugaca ccacaccag 19
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<212> RNA
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ucggacccca gaaaacuac 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gaaaacuacc caaaugcug 19
<210> 938
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
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gagauucgcc cuugguguu 19
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<211> 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 941
agauucgccc uugguguua 19
<210> 942
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 942
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<210> 943
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 943
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<210> 944
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 944
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<210> 945
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 945
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 946
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 947
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<211> 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 948
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<211> 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 949
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
<400> 951
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 955
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 961
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 962
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<210> 964
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 964
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<211> 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 968
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
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<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
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<220>
<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<212> RNA
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<223> Synthetic
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<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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cugaacaagc accaccuga 19
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ugaacaagca ccaccugag 19
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<212> RNA
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<220>
<223> Synthetic
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gaacaagcac caccugaga 19
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
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<220>
<223> Synthetic
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<223> Synthetic
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<212> RNA
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<220>
<223> Synthetic
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<212> RNA
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<220>
<223> Synthetic
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<210> 1020
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<210> 1022
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1022
cuccaccacu gucacagga 19
<210> 1023
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1023
uccaccacug ucacaggaa 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1024
ucuuggucau cuaugauac 19
<210> 1025
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1025
cuuggucauc uaugauacc 19
<210> 1026
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1026
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1027
uggucaucua ugauaccac 19
<210> 1028
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1028
ggucaucuau gauaccaca 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1029
gucaucuaug auaccacac 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1030
ucaucuauga uaccacacu 19
<210> 1031
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1031
caucuaugau accacacug 19
<210> 1032
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1032
aucuaugaua ccacacugg 19
<210> 1033
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1033
ucuaugauac cacacuggc 19
<210> 1034
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1034
cuaugauacc acacuggca 19
<210> 1035
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1035
ugauaccaca cuggcauca 19
<210> 1036
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1036
auaccacacu ggcaucaga 19
<210> 1037
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gaggacccca gaaaacuac 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1039
agaacuacug caggaaucc 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1040
acuacugcag gaauccaga 19
<210> 1041
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1041
uacugcagga auccagauu 19
<210> 1042
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1042
acugcaggaa uccagauuc 19
<210> 1043
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1043
cugcaggaau ccagauucu 19
<210> 1044
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1044
ugcaggaauc cagauucug 19
<210> 1045
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1045
gcaggaaucc agauucugg 19
<210> 1046
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1046
ggaauccaga uucugggaa 19
<210> 1047
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1047
gggaaacaac ccugguguu 19
<210> 1048
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1048
ggaaacaacc cugguguua 19
<210> 1049
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1049
ugugugaggu gggaguacu 19
<210> 1050
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1050
gugugaggug ggaguacug 19
<210> 1051
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1051
gugagguggg aguacugca 19
<210> 1052
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1052
ugagguggga guacugcaa 19
<210> 1053
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1053
cugacacaau gcucagaaa 19
<210> 1054
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1054
ugacacaaug cucagaaac 19
<210> 1055
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1055
gacacaaugc ucagaaaca 19
<210> 1056
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1056
acacaaugcu cagaaacag 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1057
cacaaugcuc agaaacaga 19
<210> 1058
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1058
acaaugcuca gaaacagaa 19
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<211> 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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caaugcucag aaacagaau 19
<210> 1060
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1060
aaugcucaga aacagaauc 19
<210> 1061
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1061
augcucagaa acagaauca 19
<210> 1062
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1062
ugcucagaaa cagaaucag 19
<210> 1063
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1063
cucagaaaca gaaucaggu 19
<210> 1064
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1064
cagaaacaga aucaggugu 19
<210> 1065
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1065
agaaacagaa ucagguguc 19
<210> 1066
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1066
gaaacagaau caggugucc 19
<210> 1067
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1067
aaacagaauc agguguccu 19
<210> 1068
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1068
aacagaauca gguguccua 19
<210> 1069
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1069
cagaaucagg uguccuaga 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1070
gaaucaggug uccuagaga 19
<210> 1071
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1071
aucagguguc cuagagacu 19
<210> 1072
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1072
gguguccuag agacuccca 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1073
ccuagagacu cccacuguu 19
<210> 1074
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1074
cuagagacuc ccacuguug 19
<210> 1075
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1075
uagagacucc cacuguugu 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1076
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gagacuccca cuguuguuc 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1078
agacucccac uguuguucc 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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cucauucuga agcagcacc 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1081
ucauucugaa gcagcacca 19
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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cauucugaag cagcaccaa 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1083
auucugaagc agcaccaac 19
<210> 1084
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1084
uucugaagca gcaccaacu 19
<210> 1085
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1085
ucugaagcag caccaacug 19
<210> 1086
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1086
cugaagcagc accaacuga 19
<210> 1087
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1087
ugaagcagca ccaacugag 19
<210> 1088
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1088
gaagcagcac caacugagc 19
<210> 1089
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1089
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1090
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1091
agugcuacca ugguaaugg 19
<210> 1092
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1092
acauucucca ccacuguca 19
<210> 1093
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1093
cacugucaca ggaaggaca 19
<210> 1094
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1094
acugucacag gaaggacau 19
<210> 1095
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1095
cugucacagg aaggacaug 19
<210> 1096
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1096
ugucacagga aggacaugu 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1097
gucacaggaa ggacauguc 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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ucacaggaag gacauguca 19
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1099
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1100
caggaaggac augucaauc 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1101
aggaaggaca ugucaaucu 19
<210> 1102
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1102
ggaaggacau gucaaucuu 19
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<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gaaggacaug ucaaucuug 19
<210> 1104
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1104
aaggacaugu caaucuugg 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1105
aggacauguc aaucuuggu 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1106
ggacauguca aucuugguc 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1107
gacaugucaa ucuugguca 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1108
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1109
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1110
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1111
ugucaaucuu ggucaucca 19
<210> 1112
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gucaaucuug gucauccau 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1113
ucaaucuugg ucauccaug 19
<210> 1114
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1114
caaucuuggu cauccauga 19
<210> 1115
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1115
aaucuugguc auccaugac 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1116
aucuugguca uccaugaca 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1117
ugacaaugaa cuacugcag 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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gacaaugaac uacugcagg 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
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acaaugaacu acugcagga 19
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<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1120
caaugaacua cugcaggaa 19
<210> 1121
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1121
aaugaacuac ugcaggaau 19
<210> 1122
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1122
augaacuacu gcaggaauc 19
<210> 1123
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1123
ugaacuacug caggaaucc 19
<210> 1124
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1124
cuacugcagg aauccagau 19
<210> 1125
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1125
caggcccuug guguuuuac 19
<210> 1126
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1126
cuugguguuu uaccaugga 19
<210> 1127
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1127
uugguguuuu accauggac 19
<210> 1128
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1128
ugguguuuua ccauggacc 19
<210> 1129
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1129
gguguuuuac cauggaccc 19
<210> 1130
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1130
guguuuuacc auggacccc 19
<210> 1131
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1131
guuuuaccau ggaccccag 19
<210> 1132
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1132
ggaguacugc aaccugacg 19
<210> 1133
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1133
gaguacugca accugacgc 19
<210> 1134
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1134
guacugcaac cugacgcga 19
<210> 1135
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1135
uacugcaacc ugacgcgau 19
<210> 1136
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1136
ugcaaccuga cgcgaugcu 19
<210> 1137
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1137
ccugacgcga ugcucagac 19
<210> 1138
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1138
cugacgcgau gcucagaca 19
<210> 1139
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1139
gaugcucaga cacagaagg 19
<210> 1140
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1140
augcucagac acagaaggg 19
<210> 1141
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1141
agacacagaa gggacugug 19
<210> 1142
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1142
gcauccucuu cauuugauu 19
<210> 1143
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1143
cauccucuuc auuugauug 19
<210> 1144
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1144
auccucuuca uuugauugu 19
<210> 1145
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1145
uccucuucau uugauugug 19
<210> 1146
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1146
ccucuucauu ugauugugg 19
<210> 1147
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1147
cuucauuuga uugugggaa 19
<210> 1148
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1148
uucauuugau ugugggaag 19
<210> 1149
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1149
ucauuugauu gugggaagc 19
<210> 1150
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1150
cauuugauug ugggaagcc 19
<210> 1151
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1151
auuugauugu gggaagccu 19
<210> 1152
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1152
gugggaagcc ucaagugga 19
<210> 1153
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1153
aagaaauguc cuggaagca 19
<210> 1154
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1154
agaaaugucc uggaagcau 19
<210> 1155
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1155
gaaauguccu ggaagcauu 19
<210> 1156
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1156
aauguccugg aagcauugu 19
<210> 1157
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1157
auguccugga agcauugua 19
<210> 1158
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1158
agaacaaggu uuggaaagc 19
<210> 1159
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1159
gaacaagguu uggaaagca 19
<210> 1160
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1160
aacaagguuu ggaaagcac 19
<210> 1161
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1161
acaagguuug gaaagcacu 19
<210> 1162
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1162
caagguuugg aaagcacuu 19
<210> 1163
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1163
aagguuugga aagcacuuc 19
<210> 1164
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1164
agguuuggaa agcacuucu 19
<210> 1165
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1165
uggaaagcac uucugugga 19
<210> 1166
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1166
guggaggcac cuuaauauc 19
<210> 1167
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1167
cuuaauaucc ccagagugg 19
<210> 1168
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1168
uaauaucccc agagugggu 19
<210> 1169
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1169
agagugggug cugacugcu 19
<210> 1170
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1170
caaggucauc cugggugca 19
<210> 1171
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1171
ccugggugca caccaagaa 19
<210> 1172
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1172
gugcacacca agaagugaa 19
<210> 1173
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1173
agcagauauu gccuugcua 19
<210> 1174
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1174
gcagauauug ccuugcuaa 19
<210> 1175
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1175
cagauauugc cuugcuaaa 19
<210> 1176
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1176
agauauugcc uugcuaaag 19
<210> 1177
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1177
gauauugccu ugcuaaagc 19
<210> 1178
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1178
auauugccuu gcuaaagcu 19
<210> 1179
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1179
uauugccuug cuaaagcua 19
<210> 1180
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1180
ucaucacuga caaaguaau 19
<210> 1181
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1181
ggacugaaug uuacaucac 19
<210> 1182
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1182
gacugaaugu uacaucacu 19
<210> 1183
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1183
acugaauguu acaucacug 19
<210> 1184
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1184
cugaauguua caucacugg 19
<210> 1185
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1185
ugaauguuac aucacuggc 19
<210> 1186
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1186
aauguuacau cacuggcug 19
<210> 1187
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1187
gaaacccaag guaccuuug 19
<210> 1188
<211> 36
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1188
gacaacagaa uauuauccaa gcagccgaaa ggcugc 36
<210> 1189
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1189
uuggauaaua uucuguuguc gg 22
<210> 1190
<211> 19
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1190
gacaacagaa uauuaucca 19
<210> 1191
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1191
cguuaaucgc guauaauacg cgua 24
<210> 1192
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1192
auacgcguau uauacgcgau uaacgac 27
<210> 1193
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1193
cauauugcgc guauagucgc guuag 25
<210> 1194
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1194
cuaacgcgac uauacgcgca auauggu 27
<210> 1195
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1195
ggcgcguaua gucgcgcgua uagc 24
<210> 1196
<211> 27
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1196
gacuauacgc gcgacuauac gcgccuc 27
<210> 1197
<211> 16
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1197
gcagccgaaa ggcugc 16
Claims (92)
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상기 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항에 있어서, 상기 센스 가닥은 15개 내지 50개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 센스 가닥은 18개 내지 36개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 안티센스 가닥은 15개 내지 30개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 안티센스 가닥은 22개의 뉴클레오타이드 길이이고, 상기 안티센스 가닥 및 상기 센스 가닥은 적어도 19개의 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 적어도 20개의 뉴클레오타이드 길이의 이중체 영역을 형성하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 상보성 영역은 적어도 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 적어도 20개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥의 3' 말단은 S1-L-S2로 제시되는 스템-루프(stem-loop)를 포함하되, S1은 S2에 상보적이며, L은 S1과 S2 사이에 3개 내지 5개의 뉴클레오타이드 길이의 루프를 형성하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 15개 내지 50개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상기 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 15개 내지 50개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 15개 내지 30개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상기 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 15개 내지 50개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상기 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 18개 내지 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상기 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 18개 내지 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 22개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상기 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 18개 내지 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 22개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 센스 가닥의 3' 말단은 S1-L-S2로 제시되는 스템-루프를 포함하며, S1은 S2에 상보적이고, L은 S1과 S2 사이에 3개 내지 5개 뉴클레오타이드 길이의 루프를 형성하며, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상기 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 22개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 센스 가닥의 3' 말단은 S1-L-S2로 제시되는 스템-루프를 포함하며, S1은 S2에 상보적이고, L은 S1과 S2 사이에 3개 내지 5개 뉴클레오타이드 길이의 루프를 형성하며, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상기 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 36개의 뉴클레오타이드 길이의 센스 가닥 및 22개의 뉴클레오타이드 길이의 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 적어도 19개의 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이의 이중체 영역을 형성하고, 상기 센스 가닥의 3' 말단은 S1-L-S2로 제시되는 스템-루프를 포함하며, S1은 S2에 상보적이고, L은 S1과 S2 사이에 3개 내지 5개 뉴클레오타이드 길이의 루프를 형성하며, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상기 상보성 영역은 19개의 연속 뉴클레오타이드 길이, 선택적으로 20개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제7항 및 제13항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, L은 트라이루프(triloop) 또는 테트라루프(tetraloop)인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제16항에 있어서, L은 테트라루프인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제17항에 있어서, 상기 테트라루프는 서열 5'-GAAA-3'를 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제16항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, S1 및 S2는 1개 내지 10개의 뉴클레오타이드 길이이며 동일한 길이를 갖는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제19항에 있어서, S1 및 S2는 1개의 뉴클레오타이드, 2개의 뉴클레오타이드, 3개의 뉴클레오타이드, 4개의 뉴클레오타이드, 5개의 뉴클레오타이드, 6개의 뉴클레오타이드, 7개의 뉴클레오타이드, 8개의 뉴클레오타이드, 9개의 뉴클레오타이드 또는 10개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제20항에 있어서, S1 및 S2는 6개의 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제16항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스템-루프는 서열 5'-GCAGCCGAAAGGCUGC-3'(서열번호 190)를 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 안티센스 가닥은 1개 이상의 뉴클레오타이드 길이의 3' 오버행 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제23항에 있어서, 상기 3' 오버행 서열은 2개의 뉴클레오타이드 길이이고, 선택적으로 상기 3' 오버행 서열은 GG인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제25항에 있어서, 상기 변형된 뉴클레오타이드는 2'-변형을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제26항에 있어서, 상기 2'-변형은 2'-아미노에틸, 2'-플루오로, 2'-O-메틸, 2'-O-메톡시에틸 및 2'-데옥시-2'-플루오로-β-d-아라비노뉴클레산으로부터 선택되는 변형인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제25항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되며, 선택적으로 상기 변형은 2'-플루오로 및 2'-O-메틸로부터 선택되는 2'-변형인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드간 연결을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제29항에 있어서, 상기 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드간 연결은 포스포로티오에이트 연결인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 안티센스 가닥의 5'-뉴클레오타이드의 당의 4'-탄소는 포스페이트 유사체를 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제31항에 있어서, 상기 포스페이트 유사체는 옥시메틸포스포네이트, 바이닐포스포네이트 또는 말로닐 포스포네이트이며, 선택적으로 상기 포스페이트 유사체는 5'-메톡시포스포네이트-4'-옥시를 포함하는 4'-포스페이트 유사체인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오타이드의 적어도 하나의 뉴클레오타이드는 하나 이상의 표적화 리간드에 접합되는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제33항에 있어서, 상기 각 표적화 리간드는 탄수화물, 아미노 당, 콜레스테롤, 폴리펩타이드 또는 지질을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제33항에 있어서, 상기 각 표적화 리간드는 N-아세틸갈락토사민(GalNAc) 모이어티를 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제35항에 있어서, 상기 GalNAc 모이어티는 1가 GalNAc 모이어티, 2가 GalNAc 모이어티, 3가 GalNAc 모이어티 또는 4가 GalNAc 모이어티인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제16항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스템-루프의 L의 최대 4개의 뉴클레오타이드는 각각 1가 GalNAc 모이어티에 접합되는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402 및 403 중 어느 하나의 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 800, 801, 802 및 803 중 어느 하나의 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드:
(a) 각각 서열번호 393 및 793;
(b) 각각 서열번호 388 및 788;
(c) 각각 서열번호 389 및 789;
(d) 각각 서열번호 390 및 790;
(e) 각각 서열번호 391 및 791;
(f) 각각 서열번호 392 및 792;
(g) 각각 서열번호 394 및 794;
(h) 각각 서열번호 395 및 795;
(i) 각각 서열번호 396 및 796;
(j) 각각 서열번호 397 및 797;
(k) 각각 서열번호 398 및 798;
(l) 각각 서열번호 399 및 799;
(m) 각각 서열번호 400 및 800;
(n) 각각 서열번호 401 및 801;
(o) 각각 서열번호 402 및 802; 및
(p) 각각 서열번호 403 및 803. - 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 393에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 793에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 388에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 788에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 389에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 789에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 390에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 790에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 391에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 791에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 392에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 792에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 394에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 794에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 395에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 795에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 396에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 796에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 397에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 797에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 398에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 798에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 399에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 799에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 400에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 800에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 401에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 801에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 402에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 802에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 403에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 803에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되며, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상기 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되며, 상기 안티센스 가닥의 5'-뉴클레오타이드의 당의 4'-탄소는 포스페이트 유사체를 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상기 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되며, 상기 안티센스 가닥의 5'-뉴클레오타이드의 당의 4'-탄소는 포스페이트 유사체를 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상기 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현을 감소시키기 위한 RNAi 올리고뉴클레오타이드로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 모든 뉴클레오타이드는 변형되며, 상기 안티센스 가닥 및 센스 가닥은 하나 이상의 2'-플루오로 및 2'-O-메틸 변형된 뉴클레오타이드 및 적어도 하나의 포스포로티오에이트 연결을 포함하고, 상기 안티센스 가닥의 5'-뉴클레오타이드의 당의 4'-탄소는 포스페이트 유사체를 포함하며, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하고, 상기 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이인, RNAi 올리고뉴클레오타이드.
- LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체를 치료하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 제1항 내지 제60항 중 어느 한 항의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 이의 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여함으로써 상기 대상체를 치료하는 단계를 포함하는, 방법.
- 약제학적 조성물로서 제1항 내지 제60항 중 어느 한 항의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 및 약제학적으로 허용 가능한 담체, 전달제 또는 부형제를 포함하는, 약제학적 조성물.
- 대상체에게 올리고뉴클레오타이드를 전달하는 방법으로서, 제61항의 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
- 세포, 세포 집단 또는 대상체에서 LPA 발현을 감소시키는 방법으로서,
i. 상기 세포 또는 세포 집단을 제1항 내지 제60항 중 어느 한 항의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 제62항의 약제학적 조성물과 접촉시키는 단계; 또는
ii. 제1항 내지 제83항 중 어느 한 항의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 제85항의 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 단계
를 포함하는, 방법. - 제64항에 있어서, 상기 LPA 발현을 감소시키는 것은 LPA mRNA의 양 또는 수준, LPA 단백질의 양 또는 수준 또는 둘 다를 감소시키는 것을 포함하는, 방법.
- 제64항 또는 제65항에 있어서, 상기 대상체는 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는, 방법.
- 제66항에 있어서, 상기 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태는 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH인, 방법.
- 제61항 및 제63항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물은 제2 조성물 또는 치료제와 조합하여 투여되는, 방법.
- LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체를 치료하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하되, 상기 센스 가닥 및 상기 안티센스 가닥은 이중체 영역을 형성하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 4 내지 387 중 어느 하나의 LPA mRNA 표적 서열에 대한 상보성 영역을 포함하며, 상기 상보성 영역은 적어도 15개의 연속 뉴클레오타이드 길이인, 방법.
- LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체를 치료하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 표 5에 제시된 열로부터 선택된 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 이의 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여함으로써 상기 대상체를 치료하는 단계를 포함하는, 방법.
- LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체를 치료하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 RNAi 올리고뉴클레오타이드를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하되, 상기 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법:
(a) 각각 서열번호 393 및 793;
(b) 각각 서열번호 388 및 788;
(c) 각각 서열번호 389 및 789;
(d) 각각 서열번호 390 및 790;
(e) 각각 서열번호 391 및 791;
(f) 각각 서열번호 392 및 792;
(g) 각각 서열번호 394 및 794;
(h) 각각 서열번호 395 및 795;
(i) 각각 서열번호 396 및 796;
(j) 각각 서열번호 397 및 797;
(k) 각각 서열번호 398 및 798;
(l) 각각 서열번호 399 및 799;
(m) 각각 서열번호 400 및 800;
(n) 각각 서열번호 401 및 801;
(o) 각각 서열번호 402 및 802; 및
(p) 각각 서열번호 403 및 803. - 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 393에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 793에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 388에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 788에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 389에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 789에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 390에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 790에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 391에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 791에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 392에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 792에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 394에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 794에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 395에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 795에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 396에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 796에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 397에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 797에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 398에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 798에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 399에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 799에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 400에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 800에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 401에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 801에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 402에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 802에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 방법.
- 제71항에 있어서, 상기 센스 가닥은 서열번호 403에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 안티센스 가닥은 서열번호 803에 제시된 바와 같은 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 방법.
- 제69항 내지 제87항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태는 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH인, 방법.
- LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태의 치료, 선택적으로 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH의 치료를 위한 약제의 제조에서의, 제1항 내지 제60항 중 어느 한 항의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 제62항의 약제학적 조성물의 용도.
- LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태의 치료, 선택적으로 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH의 치료에 사용하기 위한 또는 사용하기에 적합한, 제1항 내지 제60항 중 어느 한 항의 RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 제62항의 약제학적 조성물.
- 키트로서, 제1항 내지 제60항 중 어느 한 항의 RNAi 올리고뉴클레오타이드, 선택적인 약제학적으로 허용 가능한 담체, 및 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 갖는 대상체에게 투여하기 위한 지침서를 포함하는 패키지 삽입물을 포함하는, 키트.
- 제89항, 제90항 및 제91항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 LPA 발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태는 심혈관대사성 질환, 선택적으로 죽상동맥경화증, 이상지질혈증, NAFLD 및 NASH인, 용도, RNAi 올리고뉴클레오타이드 또는 약제학적 조성물, 또는 키트.
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