KR20220164029A - 아미노산 및 igf-1을 함유하는 보충물 및 조성물, 및 사용 방법 - Google Patents

아미노산 및 igf-1을 함유하는 보충물 및 조성물, 및 사용 방법 Download PDF

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KR20220164029A
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브렛 케이스볼트
매튜 에이. 본
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퓨어테인 바이오사이언스, 엘엘씨.
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Abstract

유리 아미노산 L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염, 및 활성 IGF-1을 포함하는 보충물이 본원에 제공된다. L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염은 대략 3:1:1의 비로 존재할 수 있다. 또한, 식료품과 같은 보충물을 포함하는 조성물이 제공된다. 본 개시는 또한 동물의 성과를 개선하거나, 동물의 가공 인자를 개선하거나, 동물의 장 건강을 증가시키는 것을 포함하는, 보충물을 사용하기 위한 방법을 포함하지만, 이로 제한되지 않으며, 상기 방법은 보충물이 있는 식료품을 동물에게 투여하는 것을 포함한다.

Description

아미노산 및 IGF-1을 함유하는 보충물 및 조성물, 및 사용 방법
본 개시는 일반적으로 IGF-1 및 특정 아미노산을 갖는 보충물 및 조성물, 및 상기 보충물 및 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.
생애 초기에 동물의 영양은 면역계 및 골격 근육계의 발달에 중요하다. 전형적으로, 사료는 곡류, 단백질, 비타민, 미네랄 등을 포함하는 과량의 성분을 임의로 포함하여 제공된다. 본 발명자들은 활성 IGF-1과 3 종의 아미노산의 조합물을 식품에 첨가하는 것이 특정의 유용한 특징에 있어서 예상치 못한 변화를 야기한다는 것을 발견하였다. IGF-1과 3 종의 아미노산의 조합은 영양 상승작용을 야기하며, 여기서 IGF-1과 3 종의 아미노산의 조합은 임의의 시험된 용량에서 단독으로 사용된 임의의 성분보다 영양학적으로 우수하다. 또한, 3종의 아미노산의 양은 동물의 식료품에 일반적으로 사용되는 것보다 적다.
본원에서 사용되는 용어는 달리 명시되지 않는 한 관련 기술 분야에서 이들의 통상적인 의미를 갖는 것으로 이해될 것이다. 본원에서 사용되는 여러 용어 및 이들의 의미는 하기에 제시되어 있다.
용어 "중량 퍼센트", "중량%", 및 "wt%"는 본원에서 상호교환적으로 사용되며 보충물 또는 조성물 중의 화합물의 중량을 지칭한다. 예를 들어, 100 그램의 조성물 중 1 그램의 아미노산은 조성물 중 1 wt%의 아미노산이다.
용어 "및/또는"은, 나열된 요소 중 하나 또는 전부, 또는 나열된 요소 중 임의의 2 개 이상의 조합을 의미한다.
단어 "바람직한" 및 "바람직하게는"은, 특정 상황 하에서 특정 이익을 제공할 수 있는 본 개시의 구현예를 지칭한다. 그러나, 동일하거나 다른 상황 하에서 다른 구현예가 또한 바람직할 수 있다. 더욱이, 하나 이상의 바람직한 구현예의 열거는, 다른 구현예가 유용하지 않음을 암시하는 것이 아니며, 본 개시의 범위로부터 다른 구현예를 배제하도록 의도된 것이 아니다.
용어 "포함하다" 및 이의 변형은, 이러한 용어가 설명 및 청구범위에 출현하는 위치에서 제한된 의미를 갖지 않는다.
구현예가 본원에 "~들이 포함하다", "~이 포함하다" 또는 "~을 포함하는" 등의 언어로 기술될 때마다, "~로 이루어지는" 및/또는 "~로 본질적으로 이루어지는"과 관련하여 기술된 달리 유사한 구현예가 또한 제공되는 것으로 이해된다. 용어 "~로 이루어지는"은 "~로 이루어지는"이라는 어구에 뒤따르는 것이 무엇이건간에, 이를 포함하고 이에 제한되는 것을 의미한다. 즉, "~로 이루어지는"은 나열된 요소가 요구되거나 필수이며, 다른 요소가 존재할 수 없음을 나타낸다. 용어 "~로 본질적으로 이루어지는"은 어구 뒤에 나열된 임의의 요소가 포함되고, 나열된 것들 이외의 다른 요소들이 나열된 요소에 대하여 본 개시에 명시된 활성 또는 작용을 방해하거나 그에 기여하지 않는다면 포함될 수 있다는 것을 나타낸다.
달리 명시되지 않으면, 단수 형태인 부정관사("a", "an") 및 정관사("the") 및 "적어도 하나"는 상호교환적으로 사용되며, 하나 또는 하나 초과를 의미한다.
사건이 발생하기에 "적합한" 조건, 또는 "적합한" 조건은 이러한 사건이 발생하는 것을 막지 않는 조건이다. 따라서, 이들 조건은 사건을 허용, 향상, 촉진 및/또는 조장한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 물질을 "실질적으로 함유하지 않는"은 10% 미만의 물질, 5% 미만의 물질, 4% 미만의 물질, 3% 미만의 물질, 2% 미만의 물질, 또는 1% 미만의 물질을 갖는 보충물 또는 조성물을 지칭한다. 일 구현예에서, 보충물 또는 조성물에서 물질의 존재는 검출 불가능하다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 보충물 또는 조성물의 문맥에서 "제공하는"은 보충물 또는 조성물을 제조하거나, 조성물 또는 보충물을 구입하거나, 보충물 또는 조성물을 달리 수득하는 것을 의미한다.
또한 본원에서, 종점에 의한 수치 범위의 열거는 그 범위 내 포괄되는 모든 수를 포함한다(예를 들어, 1 내지 5는 1, 1.5, 2, 2.75, 3, 3.80, 4, 5 등을 포함한다).
본 명세서 전반에 걸쳐 "일 구현예", "구현예", "특정 구현예" 또는 "일부 구현예" 등에 대한 언급은 구현예와 연관하여 기재된 특정한 특색, 설정, 보충물, 조성물, 또는 특징이 본 개시의 적어도 하나의 구현예에 포함된다는 것을 의미한다. 따라서, 본 명세서 전반에 걸쳐 다양한 위치에서 이러한 어구의 출현은 반드시 본 개시의 동일한 구현예를 지칭하는 것은 아니다. 또한, 특정한 특색, 설정, 보충물, 조성물, 또는 특징은 하나 이상의 구현예에서 임의의 적합한 방식으로 조합될 수 있다.
별개의 단계들을 포함하는 본원에 개시된 임의의 방법의 경우, 단계들은 임의의 실행 가능한 순서로 수행될 수 있다. 그리고, 적절하게는, 둘 이상의 단계의 임의의 조합이 동시에 수행될 수도 있다.
본 개시의 예시적인 구현예의 하기 상세한 설명은 하기 도면과 함께 읽을 때 가장 잘 이해될 수 있다.
도 1은 8 개 중 1 개의 처리로 처리된 돼지 위성 세포를 보여준다. 2% (vol/vol) 소 태아 혈청이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium)로 이루어진 CON 처리; IGF-1, CON 배지 + 활성 5 ng/mL IGF-1; GLUT, CON 배지 + 4 mM L-글루타민; LEU, CON 배지 + 1 mM L-류신; ARG, CON 배지 + 1 mM L-아르기닌; LYS, CON 배지 + 10 mM L-리신; MET, CON 배지 + 10 μM L-메티오닌. a,b,c,d상이한 위 첨자가 있는 평균은 상이하다, P < 0.05.
도 2는 3 개 중 1 개의 처리로 처리된 돼지 위성 세포를 보여준다. 2% (vol/vol) 소 태아 혈청이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지로 이루어진 CON 처리; IGF-1, CON 배지 + 5 ng/gml 활성 IGF-1; COMBO, CON 배지 + 5 ng/mL IGF-1, 4 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌. a,b,c상이한 위 첨자가 있는 평균은 상이하다, P < 0.0001.
도 3은 7 개 중 1 개의 처리로 처리된 돼지 위성 세포를 보여준다. 2% (vol/vol) 소 태아 혈청이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지로 이루어진 CON 처리; IGF-1, CON 배지 + 활성 5 ng/mL IGF-1; COMBO 0, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 0 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; COMBO 1, CON 배지 + 활성 5 ng/mL IGF-1, 1 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; COMBO 2, CON 배지 + 활성 5 ng/mL IGF-1, 2 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; COMBO 3, CON 배지 + 활성 5 ng/mL IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; COMBO 4, CON 배지 + 활성 5 ng/mL IGF-1, 4 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌. a,b,c,d상이한 위 첨자가 있는 평균은 상이하다, P < 0.05.
도 4는 5 개 중 1 개의 처리로 처리된 돼지 위성 세포를 보여준다. 2% (vol/vol) 소 태아 혈청이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지로 이루어진 CON 처리; IGF-1, CON 배지 + 5 ng/g 활성 IGF-1; COMBO 0.5, CON 배지 + 5 ng/mL IGF-1, 3 mM L-글루타민, 0.5 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; COMBO 1, CON 배지 + 5 ng/mL IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; COMBO 2, CON 배지 + 5 ng/mL IGF-1, 3 mM L-글루타민, 2 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌. a,b,c,d,e상이한 위 첨자가 있는 평균은 상이하다, P < 0.05.
도 5는 9 개 중 1 개의 처리로 처리된 돼지 위성 세포를 보여준다. 2% (vol/vol) 소 태아 혈청이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지로 이루어진 CON 처리; IGF-1, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1; COMBO 0, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 0 mM L-아르기닌; COMBO 0.1, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 0.1 mM L-아르기닌; COMBO 0.25, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 0.25 mM L-아르기닌; COMBO 0.5, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 0.5 mM L-아르기닌; COMBO 1, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; COMBO 2, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 2 mM L-아르기닌; COMBO 3, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 3 mM L-아르기닌. a,b,c,d,e,f상이한 위 첨자가 있는 평균은 상이하다, P < 0.05.
도 6은 3 개 중 1 개의 처리로 처리된 돼지 위성 세포를 보여준다. 2% (vol/vol) 소 태아 혈청이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지로 이루어진 CON 처리; IGF-1, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1; COMBO, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; COMBO 0.5, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 1 mM L-아르기닌, 및 0.5 mM L-메티오닌; COMBO 1, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 1 mM L-아르기닌, 및 1 mM L-메티오닌; COMBO 2, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 1 mM L-아르기닌, 및 2 mM L-메티오닌, COMBO 3; CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 1 mM L-아르기닌, 및 3 mM L-메티오닌. a,b,c,d,e상이한 위 첨자가 있는 평균은 상이하다, P < 0.05.
도 7은 3 개 중 1 개의 처리로 처리된 돼지 위성 세포를 보여준다. 2% (vol/vol) 소 태아 혈청이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지로 이루어진 CON 처리; IGF-1, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1; COMBO, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; COMBO 0.5, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 1 mM L-아르기닌, 및 0.5 mM L-리신; COMBO 1, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 1 mM L-아르기닌, 및 1 mM L-리신; COMBO 2, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 1 mM L-아르기닌, 및 2 mM L-리신; COMBO 3, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 1 mM L-아르기닌, 및 3 mM L-리신. a,b,c,d상이한 위 첨자가 있는 평균은 상이하다, P < 0.05.
도 8은 50 nM 라파마이신의 존재 또는 부재 하에 3 개 중 1 개의 처리로 처리된 돼지 위성 세포를 보여준다. 2% (vol/vol) 소 태아 혈청이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지로 이루어진 CON 처리; IGF-1, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1; COMBO, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌. a,b,c상이한 위 첨자가 있는 평균은 상이하다, P < 0.0001.
도 9는 6 개 중 1 개의 처리로 처리된 조류(avian) 위성 세포를 보여준다. 2% (vol/vol) 소 태아 혈청이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지로 이루어진 CON 처리; IGF-1, CON 배지 + 5 ng/g 활성 IGF-1; COMBO, CON 배지 + 5 ng/mL 활성 IGF-1, 3 mM L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌; GLUT, CON 배지 + 3 mM L-글루타민; ARG, CON 배지 + 1 mM L-아르기닌; LEU, CON 배지 + 1 mM L-류신. a,b,c상이한 위 첨자가 있는 평균은 상이하다, P < 0.05.
도 10은 42 일의 체중을 보여준다. 1기 식이는 시험 0 일 내지 7 일에 공급되고, 2기 식이는 8 일 내지 21 일에 공급되고, 3기 식이는 22 일 내지 42 일에 공급되었다. 기초 식이에 임의의 첨가제를 함유하지 않은 대조 식이(CON), 1기에 톤당 2.5 kg 및 2기에 톤당 1.5 kg의 betaGRO®를 함유한 양성 대조(BG), 1기에 톤당 2.5 kg 및 2기에 톤당 1.5 kg의 보충물을 함유한 처리(CT1), 모든 3 개의 시기에 톤당 350 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 및 모든 3 개의 시기에 톤당 175 g의 보충물을 함유한 처리(CT3).
도 11은 42 일의 사료 요구율을 보여준다. 1기 식이는 시험 0 일 내지 7 일에 공급되고, 2기 식이는 8 일 내지 21 일에 공급되고, 3기 식이는 22 일 내지 42 일에 공급되었다. 기초 식이에 임의의 첨가제를 함유하지 않은 대조 식이(CON), 1기에 톤당 2.5 kg 및 2기에 톤당 1.5 kg의 betaGRO®를 함유한 양성 대조(BG), 1기에 톤당 2.5 kg 및 2기에 톤당 1.5 kg의 보충물을 함유한 처리(CT1), 모든 3 개의 시기에 톤당 350 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 및 모든 3 개의 시기에 톤당 175 g의 보충물을 함유한 처리(CT3).
도 12는 대변 설사 점수를 보여준다. 1기 식이는 시험 0 일 내지 7 일에 공급되고, 2기 식이는 8 일 내지 21 일에 공급되고, 3기 식이는 22 일 내지 42 일에 공급되었다. 기초 식이에 임의의 첨가제를 함유하지 않은 대조 식이(CON), 1기에 톤당 2.5 kg 및 2기에 톤당 1.5 kg의 betaGRO®를 함유한 양성 대조(BG), 1기에 톤당 2.5 kg 및 2기에 톤당 1.5 kg의 보충물을 함유한 처리(CT1), 모든 3 개의 시기에 톤당 350 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 및 모든 3 개의 시기에 톤당 175 g의 보충물을 함유한 처리(CT3).
도 13은 84 일의 체중을 보여준다. 전기 식이는 시험 0 일 내지 28 일에 공급되고, 육성기 식이는 29 일 내지 56 일에 공급되고, 후기 식이는 57 일 내지 84 일에 공급되었다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 전기에 톤당 300 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT1), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 100 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT3).
도 14는 84 일의 사료 요구율을 보여준다. 전기 식이는 시험 0 일 내지 28 일에 공급되고, 육성기 식이는 29 일 내지 56 일에 공급되고, 후기 식이는 57 일 내지 84 일에 공급되었다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 전기에 톤당 300 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT1), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 100 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT3).
도 15는 84 일의 병변 점수 및 이. 콜라이(E. coli) 유병률을 보여준다. 전기 식이는 시험 0 일 내지 28 일에 공급되고, 육성기 식이는 29 일 내지 56 일에 공급되고, 후기 식이는 57 일 내지 84 일에 공급되었다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 전기에 톤당 300 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT1), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 100 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT3).
도 16은 살모넬라(Salmonella) 발병률 및 클로스트리디움 퍼프린제스(Clostridium perfringes) 유병률을 보여준다. 전기 식이는 시험 0 일 내지 28 일에 공급되고, 육성기 식이는 29 일 내지 56 일에 공급되고, 후기 식이는 57 일 내지 84 일에 공급되었다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 전기에 톤당 300 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT1), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 100 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT3).
도 17은 84 일의 회장 융모 높이를 보여준다. 전기 식이는 시험 0 일 내지 28 일에 공급되고, 육성기 식이는 29 일 내지 56 일에 공급되고, 후기 식이는 57 일 내지 84 일에 공급되었다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 전기에 톤당 300 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT1), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 100 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT3).
도 18은 3 주의 사료 요구율을 보여준다. 완전 기초 식이에 첨가제를 첨가하지 않은 대조(CON), 및 사료 1 톤당 0.000050 g, 0.00015 g, 및 0.00045 g으로 기초 식이에 보충물을 첨가한 3 개의 처리(각각, CT 0.05, CT 0.15, 및 CT 0.45).
도 19는 3주의 헤마토크리트(hematocrit) 수준 및 혈청 단백질 수준을 보여준다. 완전 기초 식이에 첨가제를 첨가하지 않은 대조(CON), 및 사료 1 톤당 0.000050 g, 0.00015 g, 및 0.00045 g으로 기초 식이에 보충물을 첨가한 3 개의 처리(각각, CT 0.05, CT 0.15, 및 CT 0.45).
도 20은 3주의 리소자임 및 코티솔(cortisol) 농도를 보여준다. 완전 기초 식이에 첨가제를 첨가하지 않은 대조(CON), 및 사료 1 톤당 0.000050 g, 0.00015 g, 및 0.00045 g으로 기초 식이에 보충물을 첨가한 3 개의 처리(각각, CT 0.05, CT 0.15, 및 CT 0.45).
도 21은 분만 시 모돈(sow) 체중 상태 점수를 보여준다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 사료 1 메트릭톤당 1000 ppm 또는 1-kg의 보충물을 함유한 식이(CT1), 사료 1 메트릭톤당 350 ppm 또는 0.35-kg의 보충물을 함유한 식이(CT2), 및 사료 1 메트릭톤당 100 ppm 또는 0.10-kg의 보충물을 함유한 식이(CT3). 모돈 발정 전에 7 일 내지 10 일의 적응 기간이 있었고, 시험 0 일은 발정 시점이었다.
도 22는 이유부터 발정까지의 간격(일)을 보여준다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 사료 1 메트릭톤당 1000 ppm 또는 1-kg의 보충물을 함유한 식이(CT1), 사료 1 메트릭톤당 350 ppm 또는 0.35-kg의 보충물을 함유한 식이(CT2), 및 사료 1 메트릭톤당 100 ppm 또는 0.10-kg의 보충물을 함유한 식이(CT3). 모돈 발정 전에 7 일 내지 10 일의 적응 기간이 있었고, 시험 0 일은 발정 시점이었다.
도 23은 자돈(piglet) 평균 일일 증체량을 보여준다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 사료 1 메트릭톤당 1000 ppm 또는 1-kg의 보충물을 함유한 식이(CT1), 사료 1 메트릭톤당 350 ppm 또는 0.35-kg의 보충물을 함유한 식이(CT2), 및 사료 1 메트릭톤당 100 ppm 또는 0.10-kg의 보충물을 함유한 식이(CT3). 모돈 발정 전에 7 일 내지 10 일의 적응 기간이 있었고, 시험 0 일은 발정 시점이었다. 자돈에게 사육 및 후기 시기에 자돈의 영양 요구에 부합하도록 공통 식이가 공급되었다.
도 24는 126 일의 자돈의 증체량을 보여준다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 사료 1 메트릭톤당 1000 ppm 또는 1-kg의 보충물을 함유한 식이(CT1), 사료 1 메트릭톤당 350 ppm 또는 0.35-kg의 보충물을 함유한 식이(CT2), 및 사료 1 메트릭톤당 100 ppm 또는 0.10-kg의 보충물을 함유한 식이(CT3). 모돈 발정 전에 7 일 내지 10 일의 적응 기간이 있었고, 시험 0 일은 발정 시점이었다. 자돈에게 사육 및 후기 시기에 자돈의 영양 요구에 부합하도록 공통 식이가 공급되었다.
도 25는 126 일의 자돈의 사료 요구율을 보여준다. 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 사료 1 메트릭톤당 1000 ppm 또는 1-kg의 보충물을 함유한 식이(CT1), 사료 1 메트릭톤당 350 ppm 또는 0.35-kg의 보충물을 함유한 식이(CT2), 및 사료 1 메트릭톤당 100 ppm 또는 0.10-kg의 보충물을 함유한 식이(CT3). 모돈 발정 전에 7 일 내지 10 일의 적응 기간이 있었고, 시험 0 일은 발정 시점이었다. 자돈에게 사육 및 후기 시기에 자돈의 영양 요구에 부합하도록 공통 식이가 공급되었다.
상세한 설명
본 개시는 아미노산 L-글루타민(본원에서 Gln 또는 Q로도 지칭됨), L-류신(본원에서 Leu 또는 L로도 지칭됨) 및 L-아르기닌(본원에서 Arg 또는 R로도 지칭됨)을 포함하는 보충물을 제공한다. 상기 아미노산들은, 예를 들어, 단백질을 형성하기 위해 다른 아미노산에 공유 결합되지 않는 유리 아미노산, 아미노산의 염, 또는 아미노산의 유리 및 염 형태 둘 모두의 혼합으로서 보충물에 존재할 수 있다. 따라서, 보충물에서 글루타민은 완전히 유리 형태, 완전히 염 형태, 또는 둘 모두의 혼합일 수 있고; 보충물에서 류신은 완전히 유리 형태, 완전히 염 형태, 또는 둘 모두의 혼합일 수 있고; 보충물에서 아르기닌은 완전히 유리 형태, 완전히 염 형태, 또는 둘 모두의 혼합일 수 있다. 문맥에서 달리 지시되지 않는 한, 본원에서 아미노산에 대한 언급은 유리 아미노산 및 아미노산의 염을 포함한다. 아미노산 글루타민, 류신, 및 아르기닌 및 이들의 염 형태는 용이하게 이용 가능하다.
일 구현예에서, 3 종의 아미노산은 본 개시의 보충물에 공지된 비율로 존재한다. 일 구현예에서, 3 종의 아미노산의 비율은 각 아미노산의 몰 비율(몰비)에 기초한다.
류신과 아르기닌에 대한 글루타민의 몰비는 2 내지 4로 다양할 수 있고, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 및 4를 포함한다. 글루타민과 아르기닌에 대한 류신의 몰비는 0.5 내지 2로 다양할 수 있고, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 및 2를 포함한다. 글루타민과 류신에 대한 아르기닌의 몰비는 0.5 내지 3으로 다양할 수 있고, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 및 3을 포함한다. 본 개시의 보충물에 존재할 수 있는 Q:L:R의 몰비의 비제한적인 예는 2:1:1, 4:1:1, 3:0.5:1, 3:1.5:1, 3:1:0.5, 및 3:1:1.5를 포함한다. 일 구현예에서, Q:L:R의 비는 3:1:1이다.
전형적으로, 요망되는 비율을 달성하는 데 필요한 각 아미노산의 양을 결정하기 위해, 각 아미노산의 몰 수는 질량으로 전환될 수 있고, 이러한 양의 아미노산이 배합될 수 있다. 예를 들어, Q:L:R의 비가 3:1:1 일 때, 44 그램의 L-글루타민, 13 그램의 L-류신, 및 17 그램의 L-아르기닌이 배합되어 아미노산의 정확한 비가 생성될 수 있다.
보충물은 또한 활성 인슐린-유사 성장 인자 1(IGF-1, 본원에서 IGF로도 지칭됨)을 포함한다. 단백질이 IGF-1인지의 여부는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 예를 들어, IGF-1에 특이적으로 결합하는 다클론성 및 단클론성 항체는 상업적으로 이용 가능하고, 인간, 말, 개, 소, 돼지, 양, 및 조류를 포함하는 다양한 종으로부터의 IGF-1과 특이적으로 반응한다. 이들 용이하게 이용 가능한 항체는 다른 밀접하게 관련된 단백질 및 결합 단백질에 의한 교차반응성 및/또는 간섭이 결여되어 있다. 단백질이 IGF-1 단백질인지의 여부를 결정하기 위해 IGF의 상이한 영역, 예컨대, N-말단, C-말단, 또는 단백질의 말단 사이에 존재하는 아미노산을 인식하는 단일 항체 또는 항체의 패널이 사용될 수 있다. IGF-1 단백질이 활성인지의 여부를 결정하기 위한 방법은 당 분야에 공지되어 있으며 일상적이다.
IGF는 인슐린과 높은 서열 유사성을 갖는 단백질이지만, 인슐린과 달리 IGF는 혈청 및 다른 생물학적 유체에 존재하는 별개의 결합 단백질과 회합한다(Baxter, 2000, Am J Physiol Endocrinol Metab, 278: E967-E976; Hwa et al., 1999, Endocrine Reviews, 20(6):761-787). 동물로부터 유래된 산물, 이로 제한되지는 않지만, 예컨대, 혈액 및 혈액-유래 산물, 유즙 및 유즙-유래 산물, 및 초유 및 초유-유래 산물에 존재하는 대부분의 IGF는 결합 단백질에 결합된다. 그러나, 이들 결합 단백질은 IGF의 활성을 억제하므로, 동물 유래 산물에 존재하는 대부분의 IGF는 이의 결합 단백질에의 결합으로 인해 비활성이다. 예를 들어, 혈장 내의 IGF-1 중 1% 미만이 결합 단백질에 결합되지 않는다(Carel et al., Safety of Recombinant Human Growth Hormone, In: Current Indications for Growth Hormone Therapy, 2nd rev. ed., vol. ed.: Hindmarsh, Karger, Switzerland, p. 48).
IGF는 결합 단백질에 결합되지 않은 경우에 활성인 것으로 간주되고, 결합 단백질에 결합된 경우에 비활성인 것으로 간주된다. 활성 IGF는 유리, 비결합, 생활성, 및/또는 활성으로 당 분야에서 흔히 지칭된다. 활성 IGF의 농도를 측정하기 위한 방법은 당업자에게 공지되어 있으며 일상적이다. 결합 단백질에 결합되지 않은 IGF의 측정을 가능하게 하는 고상 샌드위치 ELISA 검정을 포함하는 검정이 상업적으로 이용 가능하다(예를 들어, R&D Systems, 미니애폴리스, MN, 카탈로그 번호 DFG100).
본 개시의 보충물 및 방법에 유용한 IGF는 다양한 공급원으로부터 수득 가능하다. 일 구현예에서, 공급원은 동물로부터의 생물학적 물질과 같은 천연 공급원이다. 동물의 예는 소, 돼지, 조류, 말, 및 양 동물을 포함하는 척추동물을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 상이한 동물로부터의 IGF의 아미노산 서열은 고도로 보존되어 있으며, 그 결과 한 유형의 동물로부터의 IGF는 전형적으로 다른 동물에서 생물학적으로 활성이다. 예를 들어, 실시예는 돼지 IGF가 닭, 칠면조, 및 농어와 같은 어류를 포함하는 다른 동물에서 기능한다는 것을 보여준다.
IGF의 공급원으로서 활용될 수 있는 생물학적 물질의 예는 혈액 및 혈액-유래 산물(예를 들어, 전혈, 적혈구 세포, 혈장, 및 이들의 유도체); 유즙 및 유즙 산물(예를 들어, 액체 유즙, 분말 유즙, 치즈, 유장 및 유장 산물, 응유, 치즈, 카세인, 락토스, 유지방 및 이들의 유도체); 초유 및 초유-유래 산물(예를 들어, 액체 초유, 건조 초유); 알 및 알-유래 산물(예를 들어, 난황, 난백, 난막), 체액(예를 들어, 타액, 정액), 및 조직(예를 들어, 점막 조직, 장 조직, 배아 조직)을 포함하지만, 이로 제한되지는 않는다. 활성 IGF를 갖는 보충물을 생산하는 데 유용한 생물학적 물질은 상업적으로 용이하게 이용 가능하다.
일 구현예에서, 본원에 기재된 방법에 유용한 IGF는 재조합 기술을 사용하여 생성되거나, 화학적으로 또는 효소적으로 합성된다. 재조합 생산은 박테리아(예를 들어, 이. 콜라이)과 같은 원핵, 및 진핵(예를 들어, 효모) 시스템을 포함하지만, 이로 제한되지 않는 본질적으로 임의의 발현 시스템에서 달성될 수 있다. 활성 IGF를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열은 용이하게 이용 가능하며 재조합 IGF를 생산하는 방법은 공지되어 있으며 일상적이다. 재조합 기술을 사용하여 생산되거나 화학적으로 또는 효소적으로 합성된 IGF는 결합 단백질에 노출되지 않기 때문에 전형적으로 활성이다.
일 구현예에서, 보충물 중 아미노산 글루타민의 양은 보충물 1 킬로그램(kg)당 적어도 0.5 그램(g)의 글루타민, 보충물 1 kg당 적어도 5 g, 적어도 10 g, 적어도 20 g, 적어도 30 g, 적어도 40 g, 적어도 50 g, 또는 적어도 60 g일 수 있다. 일 구현예에서, 보충물 중 아미노산 글루타민의 양은 보충물 1 kg당 500 g 이하, 보충물 1 kg당 400 g 이하, 300 g 이하, 200 g 이하, 100 g 이하, 80 g 이하, 60 g 이하, 50 g 이하, 40 g 이하, 또는 30 g 이하일 수 있다. 예를 들어, 본 개시의 보충물 중 글루타민의 양은 0.5 g/kg 내지 500 g/kg, 10 g/kg 내지 100 g/kg, 20 g/kg 내지 80 g/kg, 또는 30 g/kg 내지 60 g/kg의 범위일 수 있다.
일 구현예에서, 보충물 중 아미노산 류신의 양은 보충물 1 kg당 적어도 0.1 g의 류신, 보충물 1 kg당 적어도 1 g, 적어도 5 g, 적어도 10 g, 적어도 15 g, 적어도 20 g, 또는 적어도 25 g일 수 있다. 일 구현예에서, 보충물 중 아미노산 류신의 양은 보충물 1 kg당 100 g 이하, 보충물 1 kg당 75 g 이하, 50 g 이하, 40 g 이하, 30 g 이하, 25 g 이하, 20 g 이하, 15 g 이하, 또는 10 g 이하일 수 있다. 예를 들어, 본 개시의 보충물 중 류신의 양은 0.1 g/kg 내지 100 g/kg, 1 g/kg 내지 75 g/kg, 또는 5 g/kg 내지 50 g/kg의 범위일 수 있다.
일 구현예에서, 보충물 중 아미노산 아르기닌의 양은 보충물 1 kg당 적어도 0.1 g 아르기닌, 보충물 1 kg당 적어도 1 g, 적어도 10 g, 적어도 20 g, 적어도 30 g, 적어도 40 g, 또는 적어도 50 g일 수 있다. 일 구현예에서, 보충물 중 아미노산 아르기닌의 양은 보충물 1 kg당 200 g 이하, 보충물 1 kg당 100 g 이하, 75 g 이하, 50 g 이하, 40 g 이하, 30 g 이하, 20 g 이하, 10 g 이하, 또는 1 g 이하일 수 있다. 예를 들어, 본 개시의 보충물 중 아르기닌의 양은 0.1 g/kg 내지 200 g/kg, 또는 1 g/kg 내지 100 g/kg의 범위일 수 있다.
일 구현예에서, 보충물 중 활성 IGF-1의 양은 보충물 1 킬로그램(kg)당 적어도 100 나노그램(ng), 보충물 1 kg당 적어도 200 μg, 적어도 300 μg, 적어도 400 μg, 적어도 500 μg, 적어도 600 μg, 또는 적어도 700 μg일 수 있다. 일 구현예에서, 보충물 중 활성 IGF-1의 양은 보충물 1 킬로그램(kg)당 2000 마이크로그램(μg) 이하, 보충물 1 kg당 1750 μg 이하, 1500 μg 이하, 1250 μg 이하, 1000 μg 이하, 800 μg 이하, 700 μg 이하, 600 μg 이하, 500 μg 이하, 400 μg 이하, 300 μg 이하, 또는 200 μg 이하일 수 있다. 일 구현예에서, 본 개시의 보충물 중 IGF-1의 양은 100 μg/kg 내지 2000 μg/kg, 200 μg/kg 내지 1750 μg/kg, 300 μg/kg 내지 1500 μg/kg, 또는 400 μg/kg 내지 1250 μg/kg의 범위일 수 있다.
본 개시의 보충물은 또한 곡류, 단백질, 비타민, 미네랄, 보존제, 항생제, 안료, 열 안정화제를 포함하는 안정화제, 및 다른 첨가제를 포함하지만, 이로 제한되지 않는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 일 구현예에서, 보충물은 효모를 포함한다. 일 구현예에서, 성분은 IGF가 발현된 세포의 추출물을 포함한다. 예를 들어, 재조합 IGF가 효모에서 발현되는 경우, IGF를 함유하는 효모가 용해되어 생성된 추출물이 사용될 수 있다. 일 구현예에서, 성분은 불활성일 수 있다.
일 구현예에서, 보충물은 30 g/kg 내지 60 g/kg(예를 들어, 44 g/kg)의 글루타민, 5 g/kg 내지 50 g/kg(예를 들어, 13 g/kg)의 류신, 1 g/kg 내지 100 g/kg(예를 들어, 17 g/kg)의 아르기닌, 300 μg/kg 내지 1500 μg/kg(예를 들어, 450 μg/kg)의 활성 IGF, 및 효모(예를 들어, 93 wt%)를 포함한다.
일 구현예에서, 보충물은 재조합 시스템, 예컨대, 원핵생물 발현 시스템(예를 들어, 이. 콜라이) 또는 진핵생물 시스템(예를 들어, 효모)을 사용하여 생산된 활성 IGF를 포함한다. IGF는 임의의 공급원, 예를 들어, 말, 개, 소, 돼지, 양, 또는 조류로부터 유래될 수 있다. 일 구현예에서, 재조합 IGF는 돼지의 것이다.
일 구현예에서, 본 개시의 보충물은 동물용 식료품 또는 물에 첨가하기 위한 보충물로서 사용된다. 따라서, 본 개시의 보충물은 식료품 또는 물에 첨가하기에 유용한 임의의 형태를 취할 수 있다. 예를 들어, 보충물은 액체, 에멀젼, 분말(예를 들어, 분무 건조된 분말), 케이크, 밀(meal), 펠렛, 크럼블, 과립 등의 형태일 수 있다.
또한, 보충물을 포함하는 조성물이 본 개시에 의해 제공된다. 일 구현예에서, 조성물은 식료품이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "식료품"은 동물에 의해 소비될 수 있고 그러한 동물에 영양을 제공하는 화합물 또는 화합물들의 혼합물이다. 일 구현예에서, 식료품은 동물용, 예를 들어, 길들인(domesticated) 동물, 예컨대, 반려 동물, 비제한적인 예로, 개 또는 고양이, 및 가축, 비제한적인 예로, 소, 돼지, 조류, 말, 및 양에게 공급하기 위한 사료이다. 또 다른 구현예에서, 동물은 농어, 새우, 또는 뱀장어를 포함하는 어류와 같지만, 이로 제한되지 않는 양식에 활용되는 수생 동물이다. 식료품은 고체, 반고체, 또는 액체일 수 있다. 동물에게 투여하기에 유용한 다양한 식료품이 이용 가능하다. 일 구현예에서, 식료품은 육류 생산에 활용되는 동물에게 사료를 공급하도록 설계된 것이다. 일 구현예에서, 식료품은 알 생산에 활용되는 동물에게 공급하도록 설계된 것이다. 일 구현예에서, 보충물은 동물의 물 공급원에 첨가된다.
식료품과 같은 조성물에 첨가되는 본 개시의 보충물의 양은 본원에 기재된 방법에서 효용을 갖기에 충분하다.
일 구현예에서, 식료품, 예컨대, 동물 사료 또는 물에 첨가되는 보충물의 양은 식료품 1 톤(ton)당 적어도 0.0000005 그램(g), 적어도 0.000005 g, 적어도 0.00005 g, 적어도 0.0005 g, 또는 적어도 0.005 g이다. 일 구현예에서, 식료품에 첨가되는 보충물의 양은 보충물 1 톤당 0.05 g 이하, 0.005 g 이하, 0.0005 g 이하, 0.00005 g 이하, 또는 0.000005 g 이하이다. 일 구현예에서, 식료품 중 본 개시의 보충물의 양은 0.000005 g/톤 내지 0.005 g/톤, 0.00005 g/톤 내지 0.005 g/톤 또는 0.00005 g/톤 내지 0.0005 g/톤의 범위일 수 있다.
일 구현예에서, 식료품에 첨가되는 보충물의 양은 식료품 1 톤(ton)당 적어도 5 그램(g), 적어도 25 g, 적어도 50 g, 적어도 100 g, 적어도 250 g, 적어도 500 g, 또는 적어도 750 g이다. 일 구현예에서, 식료품에 첨가되는 보충물의 양은 보충물 1 톤당 2750 g 이하, 2600 g 이하, 2400 g 이하, 2250 g 이하, 2000 g 이하, 1750 g 이하, 1500 g 이하, 1250 g 이하, 1000 g 이하, 750 g 이하, 500 g 이하, 250 g 이하, 100 g 이하, 또는 50 g 이하이다. 일 구현예에서, 식료품 중 본 개시의 보충물의 양은 5 g/톤 내지 2750 g/톤, 또는 50 g/톤 내지 2600 g/톤의 범위일 수 있다.
일 구현예에서, 식료품 중 아미노산 글루타민의 양은 식료품의 적어도 0.0000002 wt%, 식료품의 적어도 0.000002 wt%, 적어도 0.00002 wt%, 또는 적어도 0.0002 wt%일 수 있다. 일 구현예에서, 식료품 중 아미노산 글루타민의 양은 보충물의 0.1 wt% 이하, 식료품의 0.01 wt% 이하, 또는 0.001 wt% 이하일 수 있다. 일 구현예에서, 본 개시의 식료품 중 글루타민의 양은 0.0000002 wt% 내지 0.1 wt%, 0.000002 wt% 내지 0.1 wt%, 0.00002 wt% 내지 0.1 wt%, 0.0002 wt% 내지 0.1 wt%, 0.002 wt% 내지 0.1 wt%, 또는 0.02 wt% 내지 0.1 wt%의 범위일 수 있다.
일 구현예에서, 식료품 중 아미노산 류신의 양은 식료품의 적어도 0.00000006 wt%, 식료품의 적어도 0.0000006 wt%, 적어도 0.000006 wt%, 적어도 0.00006 wt%, 또는 적어도 0.0006 wt%일 수 있다. 일 구현예에서, 식료품 중 아미노산 류신의 양은 보충물의 0.03 wt% 이하, 식료품의 0.003 wt% 이하, 또는 0.0003 wt% 이하일 수 있다. 일 구현예에서, 본 개시의 식료품 중 류신의 양은 0.00000006 wt% 내지 0.03 wt%, 0.0000006 wt% 내지 0.03 wt%, 0.000006 wt% 내지 0.03 wt%, 0.00006 wt% 내지 0.03 wt%, 0.0006 wt% 내지 0.03 wt%, 또는 0.006 wt% 내지 0.03 wt%의 범위일 수 있다.
일 구현예에서, 식료품 중 아미노산 아르기닌의 양은 식료품의 적어도 0.00000006 wt%, 식료품의 적어도 0.0000006 wt%, 적어도 0.000006 wt%, 적어도 0.00006 wt%, 또는 적어도 0.0006 wt%일 수 있다. 일 구현예에서, 식료품 중 아미노산 아르기닌의 양은 보충물의 0.06 wt% 이하, 식료품의 0.006 wt% 이하, 0.0006 wt% 이하일 수 있다. 일 구현예에서, 본 개시의 식료품 중 아르기닌의 양은 0.00000006 wt% 내지 0.06 wt%, 0.0000006 wt% 내지 0.06 wt%, 0.000006 wt% 내지 0.06 wt%, 0.00006 wt% 내지 0.06 wt%, 0.0006 wt% 내지 0.06 wt%, 또는 0.006 wt% 내지 0.06 wt%의 범위일 수 있다.
일 구현예에서, 보충물에 의해 첨가되는 조성물 중 L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염의 총 중량 퍼센트(wt%)는 조성물 중 임의의 다른 유리 천연 아미노산 또는 이의 염의 총 wt%보다 적다. 일 구현예에서, 보충물에 의해 첨가되는 조성물 중 L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염의 총 중량 퍼센트(wt%)는 조성물 중 다른 유리 천연 아미노산 또는 이의 염의 조합물의 총 wt%보다 적다.
본 개시는 또한 본원에 기재된 보충물을 사용하기 위한 방법을 제공한다. 일 구현예에서, 방법은 본원에 기재된 식료품을 제조하는 것을 포함한다. 방법은 보충물을 본원에 기재된 바와 같은 양의 식료품과 조합하는 것을 포함한다.
일 구현예에서, 방법은 식료품을 동물에게 투여하는 것을 포함한다. 투여는 동물이 식료품을 이용 가능하도록 하는 것을 포함한다. 투여는 가능한 한 출생 직후에 시작할 수 있다. 예를 들어, 식료품은 비-포유류 동물, 예를 들어, 가금류가 출생 직후 이용 가능하도록 할 수 있다. 포유류 동물의 경우, 동물이 이유될 때 식료품이 이용 가능하도록 할 수 있다. 식료품은 동물의 일생 동안 또는 이유 전, 이유 후 및 성체기 전, 및/또는 성체기와 같은 상이한 단계에 동물에게 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 식료품은 하나 이상의 배급으로 투여될 수 있다. 가축을 위한 배급은 동물의 일생 동안 상이한 시점에 동물에게 제공되는 식이 내로 배분될 수 있고, 종종 당 분야에서 전기전 배급, 전기 배급, 육성기 배급, 및 후기 배급으로 지칭된다. 일 구현예에서, 식품은 임의로 이용 가능하다.
일 구현예에서, 동물이 돼지, 예컨대, 자돈, 모돈, 어린 암퇘지, 및/또는 수퇘지인 경우, 보충물은 식품 1 톤당 10 그램 내지 2.75 kg, 또는 식품 1 톤당 100 g 내지 2.5 kg 보충물의 범위로 조성물에 존재한다. 일 구현예에서, 동물이 칠면조일 때, 보충물은 식품 1 톤당 50 그램 내지 1200 g, 또는 100 g 내지 600 g 보충물의 범위로 조성물에 존재한다. 일 구현예에서, 동물이 산란계인 경우, 보충물은 식품 1 톤당 30 그램 내지 90 g, 또는 50 g 내지 70 g 보충물의 범위로 조성물에 존재한다. 일 구현예에서, 동물이 육계(chicken broiler)인 경우, 보충물은 식품 1 톤당 25 그램 내지 600 g, 또는 50 g 내지 300 g 보충물의 범위로 조성물에 존재한다. 일 구현예에서, 동물이 아시아 농어와 같은 어류인 경우, 보충물은 식품 1 톤당 0.000050 그램 내지 0.0005 g, 또는 0.000050 g 내지 0.00045 g 보충물의 범위로 조성물에 존재한다.
일 구현예에서, 방법은 동물의 성과를 개선하거나, 동물의 가공 인자를 개선하거나, 동물의 장 건강 인자를 증가시키거나, 또는 이들의 조합을 위한 것이다. 일 구현예에서, 동물은 고스트레스 환경에 수용되는 가축이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "고스트레스 환경"은 동물의 성장에 최적이 아닌 환경을 지칭한다. 고스트레스인 환경 조건의 예는 바람직하지 않은 주변 온도(너무 높거나 너무 낮은), 및 환경에서 병원체의 존재를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "저스트레스 환경"은 동물의 성장에 최적인 환경을 지칭한다. 동물의 성장에 최적인 환경 조건은 당업자에게 공지되어 있다.
성과의 예는 체중 증가, 사료 요구율 증가, 폐사율 감소, 및 예를 들어, 체중 변화에 의해 측정되는 바와 같은 무리 균일성 증가를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 전형적으로, 체중, 사료 요구율, 폐사율, 무리 균일성, 면역 반응, 장 건강, 및/또는 전신 스트레스에 반응하는 능력에 변화가 있는지 여부를 결정하는 것은 보충물을 공급받지 않은 동물의 집단과 보충물을 공급받은 동물의 집단을 비교함으로써 이루어진다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 체중 증가를 야기한다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 사료 요구율 증가를 야기한다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 폐사율 감소를 야기한다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 무리 균일성 증가를 야기한다.
일 구현예에서, 동물의 체중 증가, 사료 요구율 증가, 무리 균일성 증가, 폐사율 감소, 면역 반응, 장 건강, 및/또는 전신 스트레스에 반응하는 능력은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 통계적으로 유의한 변화이다. 일 구현예에서, 체중 증가, 사료 요구율 증가, 무리 균일성 증가, 폐사율 감소, 면역 반응, 장 건강, 및/또는 전신 스트레스에 반응하는 능력은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 적어도 0.1%, 적어도 0.25%, 적어도 0.5%, 적어도 1%, 적어도 3%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 9%, 적어도 11%, 또는 적어도 13%의 변화이다.
가공 인자의 예는 생체중의 백분율로서 냉장 도체 수율 및 총 가슴살 수율을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 전형적으로, 냉장 도체 수율 및/또는 총 가슴살 수율 증가에 변화가 있는지 여부를 결정하는 것은 보충물을 공급받지 않은 동물의 집단과 보충물을 공급받은 동물의 집단을 비교함으로써 이루어진다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 냉장 도체 수율의 증가를 야기한다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 생체중의 백분율로서 동물의 총 가슴살 수율의 증가를 야기한다.
일 구현예에서, 생체중의 백분율로서 냉장 도체 수율의 증가 및/또는 총 가슴살 수율의 증가는 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 통계적으로 유의한 변화이다. 일 구현예에서, 동물의 생체중의 백분율로서 냉장 도체 수율의 증가 및/또는 총 가슴살 수율의 증가는 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 적어도 0.1%, 적어도 0.25%, 적어도 0.5%, 적어도 1%, 적어도 3%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 9%, 적어도 11%, 또는 적어도 13%의 변화이다.
장내 건강 인자의 예는 융모 발달, 장내 병변, 장내 세균, 및 설사를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 전형적으로, 융모 발달, 장내 병변, 장내 세균, 및/또는 설사에 변화가 있는지 여부를 결정하는 것은 보충물을 공급받지 않은 동물의 집단과 보충물을 공급받은 동물의 집단을 비교함으로써 이루어진다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 융모 세포 높이의 증가 및/또는 크립트(crypt) 깊이의 증가를 야기한다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 장내 병변의 감소를 야기한다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 장내 세균(예를 들어, 이. 콜라이, 살모넬라, 및/또는 클로스트리디아)의 감소를 야기한다. 일 구현예에서, 본 개시의 방법은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 동물의 설사의 감소를 야기한다.
일 구현예에서, 융모 발달, 장내 병변의 감소, 및/또는 장내 세균의 감소에 있어서의 변화는 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 통계적으로 유의한 변화이다. 일 구현예에서, 융모 발달, 장내 병변의 감소, 및/또는 장내 세균의 감소에 있어서의 변화는 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 적어도 0.1%, 적어도 0.25%, 적어도 0.5%, 적어도 1%, 적어도 3%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 9%, 적어도 11%, 또는 적어도 13%의 변화이다.
일 구현예에서, 보충물을 함유하는 식료품은 자손을 이유한 후 및 발정될 때까지 모돈과 같은 동물에게 제공된다. 식료품은 이유와 발정 사이의 간격의 감소를 야기할 수 있다. 이유부터 발정까지의 간격의 감소는 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 적어도 0.1%, 적어도 0.25%, 적어도 0.5%, 적어도 1%, 적어도 3%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 9%, 적어도 11%, 또는 적어도 13%, 또는 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 적어도 0.5 일, 적어도 1 일, 적어도 1.5 일, 또는 적어도 2 일 만큼의 변화일 수 있다.
일 구현예에서, 보충물을 함유하는 식료품은 자돈과 같은 동물에게 제공된다. 식이에 대한 보충물의 첨가는 평균 일일 증체량 증가, 126-일 체중 증가, 대변 설사 감소, 및/또는 사료 요구율 개선을 야기할 수 있다. 평균 일일 증체량 증가, 이유로부터 126 일 후 체중과 같은 체중의 증가, 대변 설사 감소, 및/또는 사료 요구율 개선은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 적어도 0.1%, 적어도 0.25%, 적어도 0.5%, 적어도 1%, 적어도 3%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 9%, 적어도 11%, 또는 적어도 13%의 변화일 수 있다.
일 구현예에서, 보충물을 함유하는 식료품은 동물, 예컨대, 조류 암컷, 예를 들어, 산란계에 제공된다. 식이에 대한 보충물의 첨가는 체중 증가, 장내 병변 감소 및/또는 체중 백분율로서 지방 패드 증가에 의해 측정되는 바와 같은 건강 개선, 알 생산 증가, 총 산란율 증가, 및/또는 사료 요구율 개선을 야기할 수 있다. 놀랍게도, 알 생산 증가 및 총 산란율 증가는 알 중량 감소 및 난각 중량 감소를 초래하지 않았다. 체중 증가, 장내 병변 감소 및/또는 체중의 백분율로서 지방 패드의 증가에 의해 측정되는 바와 같은 건강 개선, 알 생산 증가, 총 산란율 증가, 및/또는 사료 요구율 개선은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 적어도 0.1%, 적어도 0.25%, 적어도 0.5%, 적어도 1%, 적어도 3%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 9%, 적어도 11%, 또는 적어도 13%의 변화일 수 있다.
일 구현예에서, 보충물을 함유하는 식료품은 어류, 예컨대 아시아 농어와 같은 동물에게 제공된다. 식이에 대한 보충물의 첨가는 더 큰 헤마토크리트(hematocrit) 수준에 의해 나타나는 바와 같은 면역 반응 증가, 더 큰 농도의 혈청 단백질, 더 큰 리소자임 농도에 의해 나타나는 바와 같은 장 건강 개선, 및/또는 혈청 코티솔 농도의 증가에 의해 나타나는 바와 같은 전신 스트레스에 대한 더 큰 반응 능력을 야기할 수 있다. 면역 반응 증가, 더 큰 농도의 혈청 단백질, 장 건강 개선, 및/또는 전신 스트레스에 대한 더 큰 반응 능력은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품이 공급되지 않은 동물과 비교하여 적어도 0.1%, 적어도 0.25%, 적어도 0.5%, 적어도 1%, 적어도 3%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 9%, 적어도 11%, 또는 적어도 13%의 변화일 수 있다.
예시적인 구현예
구현예 1. 유리 아미노산 L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염, 및 활성 IGF-1을 포함하는 보충물로서, L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염은 2 내지 4:1:1, 3:0.5 내지 2:1, 또는 3:1:0.5 내지 3의 비로 존재하는, 보충물.
구현예 2. 구현예 1에 있어서, L-글루타민, L-류신, 및 L-아르기닌 중 적어도 하나는 염 형태로 존재하는, 보충물.
구현예 3. 구현예 1 또는 구현예 2 중 어느 하나에 있어서, L-글루타민 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.5 그램 내지 500 그램 이하의 아미노산인, 보충물.
구현예 4. 구현예 1 내지 구현예 3 중 어느 하나에 있어서, L-류신 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.1 그램 내지 100 그램 이하의 아미노산인, 보충물.
구현예 5. 구현예 1 내지 구현예 4 중 어느 하나에 있어서, L-아르기닌 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.1 그램 내지 200 그램 이하의 아미노산인, 보충물.
구현예 6. 구현예 1 내지 구현예 5 중 어느 하나에 있어서, 활성 IGF-1의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 100 마이크로그램 내지 2000 마이크로그램 이하의 활성 IGF-1인, 보충물.
구현예 7. 구현예 1 내지 구현예 6 중 어느 하나에 있어서, L-글루타민 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.5 그램 내지 500 그램의 아미노산이고, L-류신 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.1 그램 내지 100 그램 이하의 아미노산이고, L-아르기닌 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.1 그램 내지 200 그램 이하의 아미노산이고, 활성 IGF-1의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 100 그램 내지 2000 마이크로그램 이하의 IGF-1인, 보충물.
구현예 8. 구현예 1 내지 구현예 7 중 어느 하나에 있어서, 활성 IGF-1은 재조합 IGF-1인, 보충물.
구현예 9. 구현예 1 내지 구현예 8 중 어느 하나에 있어서, 식료품을 추가로 포함하는, 보충물.
구현예 10. 톤당 적어도 0.000005 g 및 0.005 g 이하의 양으로 식료품에 존재하는 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는 식료품.
구현예 11. 식료품 1 톤당 적어도 50 그램(g) 및 2600 g 이하의 양으로 식료품에 존재하는 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는, 식료품.
구현예 12. 구현예 10 또는 구현예 11에 있어서, L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염의 총 중량 퍼센트(wt%)는 보충물 중 다른 아미노산의 총 wt%보다 적은, 식료품.
구현예 13. 구현예 10 내지 구현예 12 중 어느 하나에 있어서, L-글루타민, L-류신, 및 L-아르기닌 중 1 종, 2 종, 또는 3 종 모두가 염 형태로 존재하는, 식료품.
구현예 14. 구현예 10 내지 구현예 13 중 어느 하나에 있어서, L-글루타민 또는 이의 염의 양은 적어도 0.0000002 wt%인, 식료품.
구현예 15. 구현예 10 내지 구현예 14 중 어느 하나에 있어서, L-류신 또는 이의 염의 양은 적어도 0.00000006 wt%인, 식료품.
구현예 16. 구현예 10 내지 구현예 15 중 어느 하나에 있어서, L-아르기닌 또는 이의 염의 양은 적어도 0.00000006 wt%인, 식료품.
구현예 17. 동물에게 유효량의 (i) 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는 식료품, 또는 (ii) 구현예 10 내지 구현예 16 중 어느 하나의 식료품을 투여하는 것을 포함하는 방법.
구현예 18. 동물에게 (i) 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는 식료품, 또는 (ii) 구현예 10 내지 구현예 16 중 어느 하나의 식료품을 투여하는 것을 포함하여 동물의 성과를 개선하는 방법으로서, 성과의 개선은 체중 증가, 사료 요구율 개선, 폐사율 감소, 무리 균일성 증가, 또는 이들의 조합을 포함하는, 방법.
구현예 19. 동물에게 (i) 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는 식료품, 또는 (ii) 구현예 10 내지 구현예 16 중 어느 하나의 식료품을 투여하는 것을 포함하여 동물의 가공 인자를 개선하는 방법으로서, 가공 인자의 개선은 냉장 도체 수율의 증가, 총 가슴살 수율의 증가, 또는 이들의 조합인, 방법.
구현예 20. 동물에게 (i) 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는 식료품, 또는 (ii) 구현예 10 내지 구현예 16 중 어느 하나의 식료품을 투여하는 것을 포함하여 동물의 장 건강을 증가시키기 위한 방법으로서, 장 건강의 개선은 장내 세균의 감소, 장내 병변의 감소, 대변 설사의 감소, 또는 이들의 조합인, 방법.
구현예 21. 구현예 17 내지 구현예 20 중 어느 하나에 있어서, 식료품은 보충물을 톤당 적어도 50 g의 양으로 포함하는, 방법.
구현예 22. 구현예 17 내지 구현예 21 중 어느 하나에 있어서, 동물은 돼지 동물 또는 조류 동물인, 방법.
구현예 23. 구현예 17 내지 구현예 22 중 어느 하나에 있어서, 동물은 고스트레스 환경에 수용되는, 방법.
구현예 24. 동물에게 (i) 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는 식료품, 또는 (ii) 구현예 10 내지 구현예 16 중 어느 하나의 식료품을 투여하는 것을 포함하여, 자손의 이유부터 발정으로 되돌아가는 시간을 감소시키는 방법으로서, 자손의 이유부터 발정으로 되돌아가는 시간은 유사한 환경에 있지만 조성물을 공급하지 않은 동물과 비교하여 감소되는, 방법.
구현예 25. 구현예 24에 있어서, 동물은 모돈(sow)인, 방법.
구현예 26. 구현예 24 또는 구현예 25에 있어서, 보충물은 식품 1 톤당 100 그램 내지 2.5 kg의 보충물로 존재하는, 방법.
구현예 27. 동물에게 (i) 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는 식료품, 또는 (ii) 구현예 10 내지 구현예 16 중 어느 하나의 식료품을 투여하는 것을 포함하여, 동물에서 평균 일일 증체량을 증가시키고/증가시키거나, 체중을 증가시키고/증가시키거나, 대변 설사를 감소시키고/감소시키거나, 사료 요구율을 개선하는 방법으로서, 평균 일일 증체량의 증가, 체중의 증가, 대변 설사의 감소, 및/또는 사료 요구율의 개선은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품을 공급하지 않은 동물과 비교되는 변화인, 방법.
구현예 28. 구현예 27에 있어서, 동물은 자돈(piglet)인, 방법.
구현예 29. 구현예 27 또는 구현예 28에 있어서, 보충물은 식품 1 톤당 100 그램 내지 2.5 kg의 보충물로 존재하는, 방법.
구현예 30. 동물에게 (i) 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는 식료품, 또는 (ii) 구현예 10 내지 구현예 16 중 어느 하나의 식료품을 투여하는 것을 포함하여, 조류 암컷에서 체중을 증가시키고/증가시키거나, 장내 병변 감소 및/또는 체중의 백분율로서 지방 패드의 증가에 의해 측정되는 바와 같은 건강을 개선하고/개선하거나, 알 생산을 증가시키고/증가시키거나, 총 산란율을 증가시키고/증가시키거나, 사료 요구율을 개선하는 방법으로서, 체중의 증가, 장내 병변 감소 및/또는 체중의 백분율로서 지방 패드의 증가에 의해 측정되는 바와 같은 건강의 개선, 알 생산의 증가, 총 산란율의 증가, 및/또는 사료 요구율의 개선은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품을 공급하지 않은 동물과 비교되는 변화인, 방법.
구현예 31. 구현예 30에 있어서, 조류 암컷은 닭인, 방법.
구현예 32. 구현예 30 또는 구현예 31에 있어서, 보충물은 식품 1 톤당 30 그램 내지 90 g의 보충물로 존재하는, 방법.
구현예 33. 동물에게 (i) 구현예 1 내지 구현예 9 중 어느 하나의 보충물을 포함하는 식료품, 또는 (ii) 구현예 10 내지 구현예 16 중 어느 하나의 식료품을 투여하는 것을 포함하여, 어류에서 헤마토크리트 수준을 증가시키고/증가시키거나, 혈청 단백질의 농도를 증가시키고/증가시키거나, 리소자임 농도를 증가시키고/증가시키거나, 혈청 코티솔 농도를 증가시키는 방법으로서, 헤마토크리트 수준의 증가, 혈청 단백질의 농도의 증가, 리소자임 농도의 증가, 및/또는 혈청 코티솔 농도의 증가는 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품을 공급하지 않은 동물과 비교되는 변화인, 방법.
구현예 34. 구현예 33에 있어서, 어류는 아시아 농어인, 방법.
구현예 35. 구현예 33 또는 구현예 34에 있어서, 보충물은 식품 1 톤당 0.000050 그램 내지 0.0005 g의 보충물로 존재하는, 방법.
실시예
본 개시는 하기 실시예에 의해 예시된다. 특정 예, 재료, 양, 및 절차는 본원에 기재된 바와 같이 본 개시의 범위 및 사상에 따라 광범위하게 해석되어야 하는 것으로 이해되어야 한다.
실시예 1
조류 및 돼지 종의 골격근 구동 성장(Skeletomuscular Driven Growth)에 대한 IGF-1, L-글루타민, L-류신, 및 L-아르기닌의 조합 영향
생물활성 아미노산(AA) 및 인슐린 유사 성장 인자-1(IGF-1)의 용도가 개별 AA 또는 특정 조합으로서 심층적으로 연구되었다. 아미노산 보충은 상업적 가축 사료용 보충물로 가장 흔히 사용되고 있는 리신 및 메티오닌과 함께 필수 아미노산을 전형적으로 포함한다. 본 보고는 활성 IGF-1과 조합된 L-류신과 함께 2 종의 비필수 아미노 L-글루타민 및 L-아르기닌이 가축 종의 상업적 생산에 유용하다는 놀라운 발견을 예시한다.
재료 및 방법
돼지 및 조류 위성 세포를 이전에 기재된 바와 같이 단리하였다(Vaughn et al., 2017). 돼지 위성 세포(SC)를 cm2 당 5000 개 세포의 밀도로 플레이팅하고, 10%(vol/vol) 소 태아 혈청(GE Healthcare, 피츠버그, PA), 100 U 페니실린/mL, 100 μg의 스트렙토마이신/mL, 및 20 μg의 젠타마이신/mL이 보충된 고글루코스 둘베코 변형 이글 배지(Invitrogen, 카를스바드, CA)로 이루어진 성장 배지(GM)에서 3 일 동안 배양하여 SC가 70 퍼센트의 전면생장에 도달하도록 하였다. 이 시점에, 배양 배지를 2%(vol/vol) 소 태아 혈청(GE Healthcare, 피츠버그, PA), 100 U 페니실린/mL, 100 μg의 스트렙토마이신/mL, 및 20 μg의 젠타마이신/mL이 보충된 저-글루코스 둘베코 변형 이글 배지(Invitrogen, 카를스바드, CA)로 이루어진 분화 배지(DM)로 4 일 동안 교체하여 근관 발달을 유도하였다. 이 시점에 분화된 SC를 72 시간의 처리 기간 동안 하기 기재된 바와 같이 DM에서 처리하여 적용하였다.
첫 번째 일련의 실험은 DM으로 이루어진 음성 대조와 함께 돼지 위성 세포에서 수행하였다. 효모 브로쓰의 보충으로 5 ng/mL의 효모 생산 활성 IGF-1, L-류신(1 mM), L-아르기닌(1 mM), L-글루타민(4 mM), L-리신(10 mM), 및 L-메티오닌(10 μM)을 이들을 DM에 첨가함으로써 평가하고, 투여량은 문헌에 보고된 용량을 기준으로 하고, 데이터는 도 1에 나타나 있다. 이러한 결과에 기초하여, 첫 번째 실험에서 사용된 것과 동일한 투여량으로 글루타민, 아르기닌, 및 류신을 조합함으로써 후속 실험을 수행하였고, 데이터는 도 2에 나타나 있다. 도 3 내지 도 7에 개략된 바와 같이, 각각의 아미노산의 유용한 농도를 결정하기 위해, 각각의 개별 아미노산을 아미노산들의 조합으로 적정함으로써 다음 일련의 실험을 수행하였다.
이전 실험에서, 아미노산의 농도 및 포함은 5 ng/mL의 효모 생산 활성 IGF-1을 함유하는 DM에 첨가된 1 mM L-류신, 1 mM 아르기닌, 3 mM 글루타민인 것으로 결정되었다. 여기서 잠재적인 작용 방식인 중추 세포 신호전달 경로는 라파마이신 경로 신호전달의 포유류 표적(mTOR)이다. 이것이 이러한 아미노산 조합의 작용 방식인지 시험하기 위해 라파마이신을 배양 배지에 첨가하였고, 데이터는 도 8에 개략되어 있다.
종간 효능을 평가하기 위해 조류 위성 세포로 실험을 수행하였다. DM으로 이루어진 대조, 및 5 ng/mL 효모 생산 IGF-1, 5 ng/mL 효모 생산 IGF-1, L-류신(1 mM), L-아르기닌(1 mM), L-글루타민(3 mM)의 조합, 및 각각의 아미노산을 개별적으로 함유하는 처리를 사용하여 조류 위성 세포를 이들을 DM에 첨가함으로써 평가하였고, 데이터는 도 9에 나타나 있다.
결과
도 1에 개략된 바와 같이, 활성 IGF-1 및 개별 아미노산은 대조 처리와 비교하여 근관 크기를 증가시킬 수 있었고, L-글루타민, L-류신, 및 L-아르기닌을 사용한 경우 L-메티오닌, 또는 L-리신에 비해 더 뛰어난 근관 성장 반응을 가졌다. 이러한 발견은 효모 생산 활성 IGF-1, L-글루타민, L-류신, 및 L-아르기닌을 위성 세포에 조합하여 적용한 다음 실험으로 이어졌다. 활성 IGF-1과 아미노산의 이러한 특정 조합은 근관 성장에서 부가적 반응을 야기하였다.
다음 일련의 실험은 각각의 개별 아미노산의 유용한 포함을 결정하도록 설정되었다. 각 아미노산의 유용한 포함은 최대 성장 반응을 생성하는 데 필요한 각각의 최소량이다. 도 3 내지 도 5에 개략되어 있는 수집된 데이터에서, 아미노산의 블렌드는 3 mM의 L-글루타민, 1 mM L-류신, 및 1 mM L-아르기닌이었다. 이러한 아미노산이 아미노산의 유용한 조합임을 확인하기 위해 L-메티오닌 및 L-리신을 적정함으로써 실험을 수행하였다. 도 6 및 도 7에 예시된 바와 같이, L-메티오닌 및 L-리신의 첨가는 근관 성장의 어떠한 증가도 제공하지 않았다. 마지막으로, 본 발명자들은 아미노산의 독특한 조합의 작용 방식이 mTOR 경로 신호전달을 촉발시키는 것에 의한 것이라는 가설을 세웠고, 이것은 라파마이신이 첨가되었을 때 처리된 SC가 대조 배양물과 유사한 근관 크기를 가졌기 때문에 입증되었다(도 8).
종간 효능의 평가를 조류 위성 세포를 이용한 실험에 의해 확인하였다. 도 9에 개략된 데이터는 돼지 위성 세포 성장을 개선하는 데 효과적이었던 각각의 성분이 또한 조류 위성 세포 성장을 개선하는 데 효과적이었다는 것을 보여준다. 또한, 5 ng/mL의 효모 생산 활성 IGF-1, 3 mM의 L-글루타민, 1 mM의 L-류신, 및 1 mM의 L-아르기닌의 특정 조합이 유용한 세포 반응을 제공하였다. 동물 성장을 위한 모델로서 위성 세포를 이용했던 이전의 기계론적 연구는 활성 IGF-1, L-글루타민, L-류신, 및 L-아르기닌의 조합 포함이 돼지 및 닭에게 공급될 때 사료 보충물로서 사용하는 경우 성장 촉진에 효과적일 것임을 시사한다(Shappell et al., 2000; Vaughn et al., 2017).
실시예 1에 대한 인용
Figure pct00001
실시예 2
육계 성과에 대한 보충물의 평가
보충물(CT)의 효능을 결정하기 위해 상업적 연구 기관에서 42-일 사양(飼養) 시험을 수행하였다. 보충물 CT는 450 ng/g의 효모 유래 활성 IGF-1, 93 wt%의 효모, 4.4 wt%의 L-글루타민, 1.7 wt%의 L-아르기닌, 및 1.3 wt%의 L-류신을 함유하였다. 새(bird)를 2 개의 상이한 환경에서 성장시켰다. 하나는 깨끗한 목재 대팻밥 깔짚을 사용한 "저스트레스" 환경인 반면, 다른 하나는 높은 폐사율을 겪은 상업적 농장으로부터 입수된 목재 대팻밥을 사용한 "고스트레스" 환경이었고; 대팻밥에는 또한 상업적 환경 난제를 시뮬레이션하기 위해 콕시디아 난포낭 및 클로스트리디아 박테리아가 시딩되었다. 보충물을 전기 닭 사료(0 내지 14 d) 중 톤당 300 g CT 및 육성기 닭 사료(14 내지 28 d) 중 톤당 50 g CT 및 후기 닭 사료(28 내지 42 d) 식이 톤당 중 50 g CT의 비율로 공급하였다. 저스트레스 환경에서 또 다른 그룹의 새에게는 전기 닭 사료 중에서만 톤당 300 g 보충물을 공급하였다.
고스트레스 환경에서 성장한 새는 전반적인 새 성과에 부정적인 영향을 미쳤지만; CT의 첨가는 고스트레스 환경의 손해를 성공적으로 완화시켰고, 많은 경우에 있어서 성과는 저스트레스 환경에서 음성 대조 식이(보충물이 없는 완전 식이)에 대한 새의 성과와 동일하거나 그보다 더 우수하였다. CT의 첨가로 인해 두 환경 모두에서 성장한 병아리에서 42 일 체중 및 사료 요구율에 유의한 개선이 관찰되었다. CT를 공급한 새는 각각의 음성 대조 식이에서 성장한 새보다 더 균일하였고 이는 가공에 있어서 중요한 인자이다. 극심한 스트레스 환경에서 새의 폐사율은 CT의 첨가에 의해 유의하게 감소하였다. CT의 첨가는 도체 중량의 백분율과 생산된 총량 둘 모두로 표현되는 총 도체 수율 및 가슴살 수율의 유의한 개선을 야기하였다. 이는 두 환경 조건 모두에서 관찰되었다.
문제 설명
육계의 부화 후 기간은 영양 변화에 대한 소장의 발달 및 적응에 중요하다(Whitten et al., 2012). 또한, 부화 후 기간 동안 육계의 면역계는 미성숙하고, 골격근은 그의 가장 큰 대사 요구를 갖는다. 부화 후 영양은 평생 면역 및 근육 대사를 계획하는 잠재력을 갖는다. 처음 14 일 동안 에너지 및 아미노산 밀도의 제한은 생산 성과를 방해하고 근육 근병증을 악화시켰으며(Meloche et al., 2018), 따라서 골격근 발달에 대한 생애 첫 14 일의 중요성을 암시한다. 또한, 부화 후 사료 제한은 근원성 신호전달 조절 경로의 저하를 초래한다(Velleman et al., 2010; Velleman et al., 2014). 수년 동안, 분무-건조 플라즈마(SDP) 단백질은 돼지 사육용 식이에 폭넓게 사용되어 왔다. SDP는 세포 신호전달에서 결정적인 역할을 할 수 있는 면역글로불린 및 생물학적 활성 펩티드를 포함하는 기능성 단백질을 함유한다. 최근, 연구에서 가금류 식이에 SDP의 사용은 긍정적인 결과로 평가되었다(Campbell et al., 2003; Bregendahl et al., 2005; Jamroz et al., 2012; Henn et al., 2013). 이러한 긍정적인 결과는 병원성 박테리아에 노출되는 동안 현저한 이점과 함께 더 큰 증체량을 포함한다(King et al., 2005; Beski et al., 2015; Beski et al., 2016).
재료 및 방법
보충물(CT)을 갖는 식이를 공급한 육계의 성과를 평가하기 위해 연구를 수행하였다. 보충물 CT를 450 ng/g의 효모 유래 IGF-1, 93%의 효모, 4.4%의 L-글루타민, 1.7%의 L-아르기닌, 및 1.3%의 L-류신을 함유하도록 제조하였다. 상업적 환경을 시뮬레이션하기 위해 미국에서 잘 알려진 상업적 시험 실험실에서 시험을 수행하였다.
생성물을 2 개의 환경 시나리오 하에서 평가하였다: 깨끗한 목재 대팻밥 깔짚을 사용하는 저스트레스 환경, 및 이전에 높은 폐사율을 겪었던 상업적 농장으로부터 깔짚을 입수한 극심한 스트레스 환경. 또한, 클로스트리디아 박테리아 및 콕시디아 난포낭이 이러한 우리(pen)의 깔짚에 산재되어 있었다. CT를 전기(0 내지 14d) 식이 중 톤당 300 g 및 육성기(14 내지 28d) 및 후기(28 내지 42d) 식이 중 톤당 50 g의 비율로 공급하였다. 시험 물품에 대한 담체로서 공통의 기초 식이를 사용하였다(표 1). 식이를 강화하기 위해 영양학적으로 완전한 비타민 및 미량 미네랄 혼합을 사용하였다. 공통 기초 식이를 조제하고, 분취량을 시험 식이 조제에 사용하였다.
[표 1] 식이의 조성(%) 및 영양소 분석
Figure pct00002
시험 기간은 시험 0 일(병아리 부화일)에 시작하여 시험 42 일에 종료하였다. 각 우리는 그룹 당 12 개 복제물로 무작위 배정된 52 마리의 혼성 Cobb 육계(50:50 비)를 포함하였다. 66 마리의 병아리를 0 일에 각 우리에 넣었고, 개별 새에 대한 작물-충전 측정 및 깃털 확인에 의한 성별 확인 후 1 일에 수를 52 마리로 감소시켰다. 연구의 나머지 기간 동안 새를 교체하지 않았다. 비정상적인 생육 패턴 또는 건강 문제의 징후에 대해 병아리를 매일 관찰하였다. 모든 새는 부화장에서 콕시듐증(Coccidiosis) 백신을 맞았다. 전체 시험 동안 항생제는 투여되지 않았다.
1 일령, 7 일령, 14 일령, 28 일령 및 42 일령에 새의 체중을 개별적으로 측량하고, 사료 소비량을 결정하였다. 가공 시 USDA/FSIS에 의해 요구되는 계수를 시뮬레이션하기 위해 살모넬라 발생률을 시험하였다(14 일에 우리 당 2 마리의 수컷 및 2 마리의 암컷 및 42 일에 우리 당 5 마리의 수컷 및 5 마리의 암컷). 또한, 14 일 및 42 일에 장 샘플을 우리 당 2 마리의 수컷 및 2 마리의 암컷으로부터 취하였다. 샘플은 새 당 2 곳의 내장 부위, 즉, 십이지장 루프의 원위 말단에서 하나 및 메켈(Meckel) 게실에서 약 2인치 전방에 있는 두 번째로부터 취하였다. 병변 점수를 문헌[Johnson and Reid(1970)]의 방법에 의해 결정하고, 다양한 유기체의 수를 결정하였다. 회장 융모 높이 및 크립트 깊이를 측정하였다. 우리 당 10 마리의 42 일령된 새를 가공하고 부분 수율을 결정하였다.
데이터를 SAS 9.4로 분석하였다. 그럽스 검정(Grubb's Test)을 활용하여 잠재적인 '이상치'를 관찰하고 제거하였다. 이들 연구에서는 발견되지 않았다. 처리는 범주형 고정 효과로서 포함되었다. 보충된 그룹을 참조로서 미처리 대조군과 비교하였다. 각 시기에 대해 모든 데이터 세트를 SAS 통계 팩키지(SAS Statistical Package)를 사용하여 정렬된 회귀 모델을 사용하여 분석하였다. 모델 적합성을 평가하기 위해 잔차 플롯을 확인하였다. 통계적 유의성은 P ≤ 0.05에서 결정되었다.
결과 및 고찰
육계의 성과는 성장 환경에 의해 전반적으로 유의하게 영향을 받았다(표 2). 거의 모든 생산 측정은 극심한 스트레스 환경에 의해 부정적인 영향을 받았다. 그러나, 전기 식이 중 톤당 300 g 및 육성기 및 후기 식이 중 톤당 50 g의 CT의 첨가(300-50-50)는 성과 저하를 극복하는 데 도움이 되었다. 체중은 CT의 첨가에 의해 7 일령, 14 일령, 28 일령, 및 42 일령에서 유의하게 개선되었다. 이러한 개선은 극심한 환경 스트레스를 받은 새의 그룹에서 특히 두드러졌다. 저스트레스 환경에서 성장한 새에서, 42 일에, CT를 공급한 새는 음성 대조를 공급한 새보다 175 g 더 무거웠다. 극심한 스트레스 환경에서 성장한 새에서, CT를 공급한 새는 각각의 음성 대조 새보다 262 g 더 무거웠다. CT를 공급한 극심한 환경 그룹의 새는 저스트레스 환경에서 음성 대조를 공급한 새보다 유의하게 더 무거웠다.
[표 2] 상이한 환경 조건 하에서 betaGRO 및 보충물을 공급한 새의 생체 성과
Figure pct00003
사료 요구율에 대해 유사한 반응이 관찰되었다. 극심한 스트레스 환경 하에 성장한 새는 저스트레스 환경 하에 성장한 코호트 새보다 유의하게 더 불량한 사료 요구율을 가졌다. 그러나, 식이에 전기 식이 중 톤당 300 g 및 육성기 및 후기 식이 중 톤당 50 g으로 CT의 첨가는 두 환경 시나리오 모두에서 사료 요구율을 유의하게 개선하였다. 저스트레스 환경에서 CT를 공급한 새는 음성 대조를 공급한 새보다 0.07 포인트 더 낮은 0 일 내지 42 일 사료 요구율을 가졌다. 극심한 스트레스 환경에서 CT를 공급한 새는 음성 대조를 공급한 새와 비교하여 42 일에 0.14 및 0.13 포인트 더 낮은 사료 요구율을 가졌다. 극심한 환경에서 CT가 있는 식이를 공급한 새는 저스트레스 환경 하에 음성 대조를 공급한 새와 유의하게 다르지 않았다.
폐사율은 새가 성장된 환경에 의해 심하게 영향을 받았다. 저스트레스 환경 하에 성장한 새는 상이한 식이 처리에 대하여 새들 사이에 유의한 차이 없이 최소한의 폐사를 겪었다. 그러나, 극심한 스트레스 환경 하에서 성장한 새는 예상될 수 있는 바와 같이 심각한 폐사를 겪었다. CT의 첨가는 음성 대조 식이를 공급한 새와 비교하여 이러한 환경에서 성장한 새에서 폐사율을 거의 절반까지 유의하게 감소시켰다.
처리 동안 중요한 인자인 무리 균일성은 두 환경 모두에서 유의하게 개선되었다. CT를 공급한 새는 각각의 음성 대조를 공급한 새보다 유의하게 더 우수한 무리 균일성을 가졌다. 극심한 환경 스트레스 조건은 음성 대조 식이를 공급한 그룹의 무리 균일성을 감소시켰지만, CT가 있는 식이를 공급한 그룹에는 유의하게 영향을 미치지 않았다.
유럽 생산 효율 인자(European Production Efficiency Factor; EPEF)는 체중 증가, 사료 요구율, 및 폐사율을 고려하여 성과의 전반적인 상황을 제공하는 단일 값을 산출하는 공식이다. 더 우수한 증가, 사료 요구율 개선, 및 폐사율 감소로 인해, CT가 있는 식이를 공급한 새는 두 환경 조건 모두 하에서 음성 대조 식이를 공급한 새보다 유의하게 더 높은 EPEF 값을 가졌다.
경제적으로 중요한 가공 인자는, 새가 성장한 환경 조건과 CT의 포함 둘 모두에 의해 유의하게 영향을 받았다(표 3). 저스트레스 조건 하에 성장한 새의 경우, CT를 공급한 새는 대조 식이를 공급한 새와 비교하여 0.95% 더 높은 냉장 도체 수율을 가졌다. 극심한 스트레스 환경에서 음성 대조 식이를 공급한 새는 저스트레스 환경에서 음성 대조 식이를 공급한 새보다 2.93% 더 낮은 냉각 도체 수율을 가졌다. 그러나, 고스트레스 조건 하에 식이 CT를 공급한 새는 저스트레스 조건 하에 CT를 공급한 새의 것과 유사한 냉각 도체 수율을 가졌고, 극심한 환경 조건 하에 음성 대조 식이를 공급한 새보다 4.45% 더 높았다.
[표 3] 상이한 환경 조건 하에서 betaGRO 및 보충물을 공급한 새의 42 일 가공 수율.
Figure pct00004
총 가슴살 수율은 또한 닭이 사육된 환경 조건 둘 모두에 의해 유의하게 영향을 받았다. 저스트레스 조건 하에 성장할 때, CT를 공급한 새는 생체중의 백분율로서 1.39% 더 큰 총 가슴살 수율을 가졌다. 고스트레스 조건 하에 성장했을 때, 음성 대조 식이를 공급한 새는 저스트레스 조건 하에 동일한 식이를 공급한 새보다 1.84% 적은 총 가슴살을 가졌다. 극심한 스트레스 조건 하에 CT가 있는 식이를 공급한 새는 음성 대조 식이를 공급한 새보다 2.47% 더 높은 총 가슴살 수율을 가졌고, 저스트레스 조건 하에 음성 대조 식이를 공급한 새보다 유의하게 더 높은 수율이었다.
중요한 가슴살 마케팅 인자를 조사하면, 전기 식이 중 톤당 300 g 및 육성기 및 후기 식이 중 톤당 50 g의 CT의 첨가는 각각의 환경 조건 하에서 음성 대조를 공급한 것보다 유의하게 더 많은 대흉근, 소흉근 및 총 가슴살 수율을 야기하였다. 실제로, 극심한 스트레스 환경 하에 CT를 공급한 육계의 가슴살의 양은 저스트레스 환경에서 음성 대조를 공급한 새의 것과 같거나 더 많았다.
저스트레스 환경 하에 성장한 새의 경우, 음성 대조 식이 또는 CT가 있는 식이를 공급한 새 사이에서 융모 발달 장내 병변 점수에 유의한 차이가 없었다(표 4). 그러나, 극심한 스트레스 환경 하에서, CT를 공급한 새는 음성 대조를 공급한 새보다 유의하게 더 큰 융모 세포 높이 및 크립트 깊이를 가졌다. 예상되는 바와 같이, 저스트레스 환경과 극심한 스트레스 환경 하에 공급받은 새 사이에는 병변 점수에 유의한 차이가 있었다. 극심한 스트레스 루틴 하에 공급받은 새에서, CT로의 보충은 음성 대조 식이를 공급한 새보다 병변 점수가 유의하게 더 낮았다. 이러한 개선은 식이 영양소의 더 우수한 소화력에 도움이 될 것이다.
[표 4] 상이한 환경 조건 하에서 betaGRO 및 보충물을 공급한 새의 장 측정
Figure pct00005
또한, 극심한 스트레스 환경 하에 공급받은 닭은 14 일 및 42 일에 저스트레스 환경 하에 공급받은 새보다 더 많은 수의 이. 콜라이를 가졌고, CT를 공급한 새에서는 유의하게 감소하였다. 살모넬라의 발생률은 극심한 스트레스 환경 하에 공급받은 새에서 더 높았고, CT가 있는 식이를 공급한 경우 수치가 14 일령과 42 일령 둘 모두에서 유의하게 더 낮았다. 괴사성 장염과 강하게 관련된 클로스트리디아 유기체의 발생률은 극심한 스트레스 환경 하에서 공급받은 새에서 유의하게 더 높았지만 CT를 공급한 새에서는 유의하게 감소하였다. 식이 또는 환경 어느 것도 항원 제시 세포(APC) 또는 난포낭 수에 유의한 영향을 미치지 않았다.
CT의 첨가로부터 주지된 체중 및 사료 요구율의 개선은 돼지 또는 소 혈장 단백질을 함유하는 식이를 공급한 문헌[Campbell et al. (2003), Bregendahl et al. (2005), Jamroz et al. (2012), 및 Henn et al. (2013)]의 결과와 일치한다. 난제 조건 하에서 CT에 대한 더 큰 반응은 문헌[Henn et al., (2013)]의 결과와 일치한다. 장 형태학에서 관찰된 개선은 문헌[King et al. (2005) 및 Beski et al. (2015)]의 결과와 일치한다. 고병원성 박테리아에 노출되는 동안 CT를 공급한 새의 성과에서의 개선은 문헌[Beski et al. (2016)]의 연구와 일치한다. 종합적으로, 이러한 비교는 이전에 동물-유래 단백질 혼합물을 공급하는 것과 관련된 생물학적 효과를 발휘하는 비-동물 유래 산물로서의 CT의 독특하고 예상치 못한 성질을 가리키는 것이다.
보충 CT에 대한 현재 연구에서 관찰된 많은 반응은 육계에 분무-건조 플라즈마(SDP)를 사용하여 보충할 때 이전에 보고된 데이터와 일치하지만(Campbell et al., 2003; Bregendahl et al., 2005; Kind et al., 2005; Jamroz et al., 2012; Henn et al., 2013; Beski et al., 2015; Beski et al., 2016); 식이 내로의 CT의 포함 비율은 유의하게 더 낮았고; SDP의 포함 비율의 단지 1.5 내지 6 퍼센트였다. 따라서, CT 보충에 대한 반응은 영양이 아니라 대사 개선으로 인한 듯하다. 최근 연구는 CT와 유사한 비율로 공급한 동물 단백질 유래 산물인 betaGRO(BG)가 시험관내에서 면역 세포 기능 및 골격근 성장을 촉진시켰음을 입증하였다(Vaughn et al. 2017; Vaughn et al. 2018). 배양 배지에 10 mg/mL으로의 BG의 포함은 유의하게 더 큰 근관 크기를 야기하였고, 이는 라파마이신의 기계론적 표적(mTOR) 신호전달 단백질의 양성 변화에 의해 매개되었다(Vaughn et al., 2017). 문헌[Vaughn et al. (2018)]에 의해 수행된 면역 연구에서 2배 넘게 왕성하게 성장하는 β-림프구 세포의 호흡 대사 증가가 관찰되었고, 이는 라파마이신의 첨가가 모든 양성 처리 효과를 폐지했기 때문에 mTOR 경로 신호전달에 의해 매개되었다. 이는 현재 데이터와 관련하여, 극심한 스트레스 환경에서 CT의 보충이 육계 면역계를 강화하여 성과 손해를 초래하는 소장에 대한 박테리아 간섭을 완화시키는 동시에 우수한 기름기가 적은 조직 성장을 촉진한다는 것을 시사한다.
결론 및 적용
0 일 내지 14 일에 식이 중 톤당 300 g 및 이어서 42 일까지 톤당 50 g의 비율로 효모-기반 산물인 CT의 첨가는 육계의 성장률, 사료 요구율, 생존율, 드레싱 백분율, 및 가슴살 수율을 유의하게 개선하였다.
극심한 스트레스 환경 하에 성장한 새는 더 낮은 스트레스 환경에서 공급받은 새보다 CT 첨가에 대해 더 크게 반응하였다.
CT를 공급한 새에서 융모 높이 및 크립트 깊이의 개선은 성과에서의 개선과 관련이 있을 수 있다.
CT를 공급한 새는 음성 대조 식이를 공급한 새보다 도체 살모넬라의 발병률이 더 낮았고, 장내 세균이 더 적었고, 병변 점수가 더 낮았다.
CT의 낮은 포함 비율은, 성과 개선이 기계론적 대사 개선에 의해 유도되어, 더 큰 성장률을 갖는 더 건강한 육계를 생산한다는 것을 시사한다.
실시예 2에 대한 인용
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
실시예 3
자돈 성과에 대한 보충물의 평가
재료 및 방법
실시예 2에 기재된 사료 보충물을 돼지 사육에 있어서 성장 성과, 사료 효율, 및 장 건강에 영향을 미치는 이의 능력에 대해 평가하였다. 상업적 연구 시설에서 42-일 시험을 수행하였다. 식이는 자돈 영양 요구에 가장 잘 부합하도록 3 개의 시기로 제형화되었다. 자돈은 시험 0 일로 간주되는 19 일령에 이유하였고, 시험 0 일 내지 7 일에 1기 식이를 공급하고, 시험 8 일 내지 21 일에 2기 식이를 공급하고, 시험 22 일 내지 42 일에 3기 식이를 공급하였다. 기초 식이에 임의의 첨가제를 함유하지 않은 대조 식이(CON), 1기에 톤당 2.5 kg 및 2기에 톤당 1.5 kg의 betaGRO®를 함유한 양성 대조(BG), 1기에 톤당 2.5 kg 및 2기에 톤당 1.5 kg의 보충물을 함유한 처리(CT1), 모든 3 개의 시기에 톤당 350 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 및 모든 3 개의 시기에 톤당 175 g의 보충물을 함유한 처리(CT3)가 있었다. 반응 기준은 증체량, 사료 요구율, 및 대변 점수를 포함하였다.
결과(도 10 내지 도 12)
betGRO 및 보충물의 첨가는 대조보다 시험 42 일에 더 큰 체중을 야기하였다(P < 0.05). CT2 처리 내의 돼지는 모든 처리 중 가장 큰 42 일 체중을 가졌다(P < 0.05). BG 및 CT1 처리에서 돼지는 CT3 및 CON과 비교하여 유사한 42 일 체중 및 더 큰 42 일 체중을 가졌다(P < 0.05). CT3는 CON 처리와 비교하여 더 큰 42 일 체중을 가졌다.
식이에 betaGRO 및 보충물의 첨가는 개선된 사료 요구율을 야기하였다(P < 0.05). BG, CT1, 및 CT2를 공급한 돼지는 CT3와 비교하여 더 우수한 사료 요구율을 가졌고(P < 0.05), CT3는 CON과 비교하여 더 우수한 사료 요구율을 가졌다. 장 건강에 대한 지표로서 대변 설사 점수를 수집하였다.
시험 21 일과 42 일 둘 모두에, betaGRO 또는 보충물을 공급한 자돈은 CON과 비교하여 감소된 대변 설사 점수를 가졌다(P < 0.05). 시험 21 일에 BG 및 CT2로부터의 대변 점수는 CT3과 비교하여 더 낮은 대변 점수를 가졌고(P < 0.05), 반면에 CT1 대변 점수는 중간이었다(P > 0.05). 시험 42 일에 CT1 및 CT2로부터의 자돈은 다른 모든 처리와 비교하여 더 낮은 대변 점수를 가졌고(P < 0.05), BG 및 CT3는 CON보다 더 낮은 대변 점수를 가졌다(P < 0.05).
실시예 4
조류 종의 골격근 유도 성장에 대한 보충물의 평가
재료 및 방법
실시예 2에 기재된 사료 보충물을 칠면조 새끼에서 성장 성과, 사료 효율, 및 장 건강에 영향을 미치는 이의 능력에 대해 평가하였다. 상업적 연구 시설에서 84-일 시험을 수행하였다. 식이는 칠면조의 영양 요구에 가장 잘 부합하도록 3 개의 시기로 제형화되었다.
전기 식이는 시험 0 일 내지 28 일에 공급되고, 육성기 식이는 29 일 내지 56 일에 공급되고, 후기 식이는 57 일 내지 84 일에 공급되었다.
대조 식이는 기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않았고(CON), 전기에 톤당 300 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT1), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 100 g의 보충물을 함유한 처리(CT2), 전기에 톤당 600 g 및 2기에 톤당 50 g의 보충물을 함유한 처리(CT3)가 있었다. 반응 기준은 증체량, 사료 요구율, 장 건강, 및 장내 세균 유병률을 포함하였다.
결과(도 13 내지 도 17)
보충물이 칠면조 새끼에게 투여되었을 때 CON과 비교하여 모든 보충물 용량에서 체중이 증가하였고 사료 요구율이 개선되었다(P < 0.05). CT2 처리에서 칠면조는 모든 처리 중에서 가장 큰 체중을 가졌고(P < 0.05), 반면에 CT1 및 CT3을 공급한 칠면조는 유사한 체중을 가졌는데(P > 0.05), 이는 CON 칠면조 체중보다 더 컸다(P < 0.05). 또한, CT2는 CT1 및 CT3과 비교하여 더 우수한 사료 요구율을 가졌고(P < 0.05), CT3은 CT1보다 더 우수한 사료 요구율을 가졌다(P < 0.05).
장내 병변의 객관적인 규모에 대해, 모든 투여량의 보충물을 공급한 칠면조는 CON 처리에서의 칠면조와 비교하여 더 낮은 병변 점수를 가졌고(P < 0.05), 모든 보충물 처리는 유사한 병변 점수를 가졌다(P > 0.05). 소장에서 이. 콜라이 존재가 측정되었을 때, 모든 보충물 처리 중에서 칠면조는 CON 공급된 칠면조와 비교하여 이. 콜라이의 감소된 유병률을 가졌다(P < 0.05). 소장에 존재하는 살모넬라를 갖는 칠면조의 백분율은 CON 처리와 비교하여 모든 보충물 처리에 대해 더 적었다(P < 0.05). CT2 용량을 공급한 칠면조는 CT3 칠면조와 비교하여 살모넬라를 갖는 칠면조의 백분율이 감소하였고(P < 0.05), 여기서 살모넬라를 갖는 CT1 칠면조의 백분율은 CT2 및 CT3와 유사하였다(P > 0.05). 클로스트리디움 퍼프린제스의 로그 형성은 CON 처리에서의 칠면조와 비교하여 모든 투여량의 보충물을 공급한 칠면조에 대해 더 낮았고(P < 0.05), 이때 모든 보충물 투여량은 유사하였다(P > 0.05). 회장 융모 높이를 측정하였고, 보충물의 모든 투여량은 CON 처리와 비교하여 더 큰 회장 융모 높이를 야기하였다(P < 0.05).
실시예 6
농어 성과에 대한 보충물의 평가
재료 및 방법
실시예 2에 기재된 보충물을 아시아 농어(라테스 캘리칼리퍼(Lates calcalifer))에서 성장 성과, 면역, 및 건강에 영향을 미치는 이의 능력에 대해 평가하였다. 12-주 연구는 대학 연구 시설에서 수행되었다. 완전 기초 식이에 첨가제를 첨가하지 않은 대조, 및 사료 1 톤당 0.000050 g, 0.00015 g, 및 0.00045 g으로 기초 식이에 첨가된 보충물을 가진 3 개의 처리가 있었다. 반응 기준은 성장률, 사료 소비, 사료 효율, 면역, 및 장 건강을 포함하였다.
결과(도 18 내지 도 20)
보충물을 농어에 공급하였을 때, 시험의 처음 3주 동안 사료 요구율이 유의하게 개선되어(P < 0.05), 더 효율적인 성장을 야기하였다. 보충물은 또한 톤당 0.00045 g의 보충물에서 더 큰 헤마토크리트 수준으로 나타난 바와 같이 면역 반응을 증가시켰고(P < 0.05), 보충물이 기초 식이 1 톤당 0.00015 g 및 0.00045 g으로 첨가되었을 때 혈청 단백질의 농도가 더 켰다(P < 0.05). 모든 수준의 보충은 더 큰 리소자임 농도를 야기하였는데(P < 0.05), 이는 농어의 장 건강이 보충에 의해 개선되었음을 나타낸다. 혈청 코티솔 농도는 전신 스트레스에 반응하는 능력을 나타내며, 톤당 0.00045 g으로 보충했을 때 코티솔 수준은 대조와 비교하여 증가하였다(P < 0.05). 0.00005 및 0.00015의 보충은 다른 처리와 비교하여 유사한 코티솔 농도를 가졌다(P > 0.05).
실시예 6
모돈 임신 및 신생아 생체 성과에 대한 보충물의 평가
모돈 분만 기간을 돕고, 특히 이유를 통해 자돈 품질을 개선하기 위해 수많은 시험 산물을 현대의 모돈 및 자돈 생산에 거의 일상적으로 공급한다. 생체 성과 및 장의 장내 건강은 자돈 체중 균일성에 직접적인 영향을 미치기 때문에, 본 발명자들은 보충물이 투여될 때 사육장에서 자돈 체중이 영향을 받는지 결정하였다.
재료 및 방법
시험은 상업적 연구 시설에서 수행되었으며, 처리당 20 마리의 모돈 및 처리당 160 마리의 자돈을 사육장을 통해 성과에 대해 추적하였다. 실시예 2에 기재된 보충물을 사용하였다.
기초 식이에 어떠한 첨가제도 함유하지 않은 대조 식이(CON), 사료 1 메트릭톤당 1000 ppm 또는 1-kg의 보충물을 함유한 식이(CT1), 사료 1 메트릭톤당 350 ppm 또는 0.35-kg의 보충물을 함유한 식이(CT2), 및 사료 1 메트릭톤당 100 ppm 또는 0.10-kg의 보충물을 함유한 식이(CT3)가 있었다. 모돈 발정 전에 7 일 내지 10 일의 적응 기간이 있었고, 시험 0 일은 발정 시점이었다. 자돈에게 사육 및 후기 시기에 자돈의 영양 요구에 부합하도록 공통 식이를 공급하였다.
모돈에 대한 시험 파라미터 기준은 신체 상태 점수 및 이유부터 발정까지의 간격이었다. 자돈에 대한 반응 기준은 평균 일일 증체량, 126-일 체중, 및 사료 요구율을 포함하였다.
결과(도 21 내지 도 25)
모돈은 보충에 반응하였는데, 여기서 CT1 및 CT2는 CT3 및 CON과 비교하여 분만 말기에 더 큰 신체 상태 점수를 가졌다(P < 0.05). 또한, 모든 보충물-처리된 모돈은 CON 모돈과 비교하여 이유부터 발정까지의 간격에 감소가 있었다(P < 0.05). CT1 처리에서의 모돈은 이유부터 발정까지의 간격이 CT3 처리에서의 모돈과 비교하여 더 짧았고(P < 0.05), CT2에서의 모돈은 CT1 및 CT3 처리에서의 모돈과 유사한 이유부터 발정까지의 간격을 가졌다(P > 0.05).
126 일의 사양 기간 동안, 보충물을 공급한 모돈으로부터 양육된 자돈은 CON 모돈으로부터 양육된 자돈과 비교하여 더 큰 평균 일일 증체량을 가졌다(P < 0.05). 비록 CT2 모돈으로부터의 자돈은 CT1 및 CT3 모돈으로부터의 자돈과 비교하여 유사한 평균 일일 증체량을 가졌으나(P > 0.05), CT1 모돈으로부터의 자돈은 CT3 모돈으로부터의 자돈보다 더 큰 평균 일일 증체량을 가졌다(P < 0.05). 또한, 보충물을 공급한 모돈으로부터 양육된 자돈의 126-일 체중은 CON 모돈으로부터 양육된 자돈과 비교하여 더 컸다(P < 0.05). 비록 CT2 모돈으로부터의 자돈은 CT1 및 CT3 모돈으로부터의 자돈과 비교하여 유사한 126 일 체중을 가졌으나(P > 0.05), CT1 모돈으로부터의 자돈은 CT3 모돈으로부터의 자돈보다 더 큰 126 일 체중을 가졌다(P < 0.05). CT1 모돈으로부터의 자돈은 126 일 사양 기간 동안 모든 다른 처리와 비교하여 가장 우수한 사료 요구율을 가졌다(P > 0.05). CT2 모돈으로부터의 자돈은 CT3 및 CON 모돈으로부터의 자돈과 비교하여 개선된 사료 요구율을 가졌고(P > 0.05), CT3 모돈으로부터의 자돈은 CON 모돈으로부터의 자돈과 비교하여 더 우수한 사료 요구율을 가졌다(P > 0.05).
실시예 7
암컷 알 생산, 성장 성과, 및 사료 효율에 대한 보충물의 평가
재료 및 방법
실시예 2에 기재된 보충물을 산란계에서 알 생산, 성장 성과, 및 사료 효율에 영향을 미치는 이의 능력에 대해 평가하였다. 상업적 연구 시설에서 140-일 시험을 수행하였다. 각 처리(또는 실험) 그룹은 연구 중인 총 120 마리의 동물에 대해 복제물 당 60 마리의 상용 산란계를 포함하는 그룹 당 20 개 복제물로 무작위 배정된 3 마리의 상용 산란계를 포함하였다. 시험 기간은 18주령의 연령에 무작위로 배정된 산란계로 0 일에 시작하였다. 시험은 산란계의 영양 요구를 가장 잘 충족시키기 위해 전체 시험 기간 동안 일관된 산업 표준 식이를 공급하면서 140 일에 완료하였다. 대조 식이는 기초 식이에 임의의 첨가제를 함유하지 않았고(CON), 처리 식이는 톤당 60 그램의 보충물을 함유하였다(CT). 반응 기준은 암탉 체중, 암탉의 지방 패드(체중의 %), 암탉 장내 병변 점수, 알 생산(%), 알 중량, 난각 중량, 난각 두께, 총 산란 및 산란된 알 당 사료 요구율을 포함하였다.
결과
체중(표 5). 보충물이 상용 산란계에 제공되었을 때, 체중은 28 일(p<0.05), 56 일(p<0.05), 84 일(p<0.05), 112 일 및 140 일(p<0.05)에서 개선되었다.
[표 5]
Figure pct00010
새 건강(표 6). 연구 종료 시 나머지 모든 암탉을 총체적 부검하고, 장내 병변 점수를 결정하고, 체중의 %로서 지방 패드를 측정하였다. 보충에 의해, 지방 패드는 개선되었고(p<0.05), 장내 병변 점수는 감소되고 개선되었다.
[표 6]
Figure pct00011
알 생산(표 7). 알 생산(%)은 일일 처리군별 암탉 당 생산된 알의 백분율로 측정된다. 알 생산(%)은 암탉의 사료가 보충된 0 일 내지 28 일(p<0.05), 29 일 내지 56 일(p<0.05), 57 일 내지 84 일(p<0.05), 85 일 내지 112 일(p<0.05), 113 일 내지 140 일(p<0.05)의 기간에 그리고 0 일 내지 140 일(p<0.05)의 시험 기간의 지속 동안 증가되었다.
[표 7]
Figure pct00012
알 중량(표 8). 알 중량은 처리군별 알 평균 당 그램으로 측정되었다. 평균 알 중량은 보충물이 있는 암탉 식이로부터 0 일 내지 28 일(p<0.05), 29 일 내지 56 일, 57 일 내지 84 일, 85 일 내지 112 일, 및 113 일 내지 140 일의 측정 기간에 개선되었다.
[표 8]
Figure pct00013
난각 중량(표 9). 알 중량은 처리군별 알 평균 당 그램으로 측정되었다. 평균 난각 중량은 29 일 내지 56 일, 57 일 내지 84 일, 85 일 내지 112 일, 및 113 일 내지 140 일의 측정 기간에 개선되었다.
[표 9]
Figure pct00014
총 산란, 산란의 총 킬로그램(표 10). 보충물을 공급한 암탉에 의한 총 산란 및 산란의 총 중량(킬로그램)이 개선되었다.
[표 10]
Figure pct00015
사료 요구율(12 개 알 당 사료 킬로그램)(표 11). 12 개 알 당 킬로그램인 사료 요구율을 처리군 당 소비된 총 사료량을 각 처리군에 의해 생산된 12 개의 알의 총 수로 나누어 계산하였다. 더 낮은 숫자는 동일한 양의 사료를 소비하는 것을 가정했을 때 더 많은 수의 알이 생산됨(또는, 달리 말하면, 더 적은 사료를 소비하는 암탉으로부터 동일한 수의 알이 생산될 수 있음)을 의미한다. 보충물을 공급한 암탉은 시험 기간에 사료 요구율(알 12 개 당 사료 kg)이 개선되었다: 0 일 내지 28 일(p<0.05), 29 일 내지 56 일(p<0.05), 57 일 내지 84 일(p<0.05), 85 일 내지 112 일(p<0.05), 113 일 내지 140 일(p<0.05) 및 0 일 내지 140 일 전체(p<0.05).
[표 11]
Figure pct00016
사료 요구율(알 킬로그램 당 사료 킬로그램)(표 12). 생산된 알의 킬로그램 당 사료의 킬로그램인 사료 요구율을 처리군 당 소비된 총 사료량(킬로그램으로)을 각 처리군에 의해 생산된 알의 킬로그램 총 수로 나누어 계산하였다. 더 낮은 숫자는 동일한 양의 사료를 소비하는 것을 가정했을 때 더 많은 총 중량의 알이 생산됨(또는, 달리 말하면, 더 적은 사료를 소비하는 암탉으로부터 동일한 중량의 알이 생산될 수 있음)을 의미한다. 보충물을 공급한 산란계는 시험 기간에 사료 요구율(알 kg 당 사료 kg)을 개선하였다: 0 일 내지 28 일(p<0.05), 29 일 내지 56 일(p<0.05), 57 일 내지 84 일(p<0.05), 85 일 내지 112 일(p<0.05), 113 일 내지 140 일(p<0.05) 및 0 일 내지 140 일 전체(p<0.05).
[표 12]
Figure pct00017
본원에 인용된 모든 특허, 특허 출원, 및 간행물, 및 전자적으로 이용 가능한 자료의 완전한 개시는 그 전체가 참조로 포함된다. 간행물에 언급된 보충 자료(예컨대, 보충 표, 보충 도면, 보충 자료 및 방법, 및/또는 보충 실험 데이터)는 마찬가지로 그 전체가 참조로서 포함된다. 본 출원의 개시와 참조로서 본원에 포함된 임의의 문헌의 개시(들) 사이에 임의의 불일치가 존재하는 경우, 본 출원의 개시가 우선할 것이다. 상기 상세한 설명 및 실시예는 단지 이해의 명료함을 위해 제공되었다. 이로부터 불필요한 제한이 없음이 이해되어야 한다. 본 개시는 제시되고 기재된 정확한 세부사항으로 제한되지 않으며, 당업자에게 명백한 변형이 청구범위에 의해 규정되는 본 개시 내에 포함될 것이다.
달리 표시하지 않는 한, 명세서 및 청구범위에서 사용되는 성분의 양, 분자량 등을 나타내는 모든 수는 모든 예에서 용어 "약"에 의해 수식되는 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 반대로 달리 표시하지 않는 한, 명세서 및 청구범위에 기재된 숫자상의 파라미터는 본 개시에 의해 획득되는 것으로 추구되는 원하는 특성에 따라 달라질 수 있는 근사치이다. 최소한, 그리고 청구범위의 범위에 대한 등가물의 교시를 제한하고자 하는 시도로서가 아니라, 각각의 숫자상의 파라미터는 적어도 보고된 유의한 자릿수의 수에 비추어 통상적인 반올림 기법을 적용시킴으로써 해석되어야 한다.
본 개시의 광범위한 범위를 기재하는 숫자상의 범위 및 파라미터가 근사치임에도 불구하고, 특정 실시예에 기재된 숫자상의 값은 가능한 한 정확하게 보고된 것이다. 그러나, 모든 숫자상의 값은 이들의 각각의 시험 측정에서 발견되는 표준 편차로부터 필연적으로 발생하는 범위를 본질적으로 포함한다.
모든 제목은 독자의 편의를 위한 것으로, 별도로 명시되지 않는 한 제목에 후속되는 본문의 의미를 제한하기 위해 사용되어서는 안된다.

Claims (35)

  1. 유리 아미노산 L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염, 및 활성 IGF-1을 포함하는 보충물로서, L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염은 2 내지 4:1:1, 3:0.5 내지 2:1, 또는 3:1:0.5 내지 3의 비로 존재하는, 보충물.
  2. 제1항에 있어서, L-글루타민, L-류신, 및 L-아르기닌 중 적어도 하나는 염 형태인, 보충물.
  3. 제1항에 있어서, L-글루타민 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.5 그램 내지 500 그램 이하의 아미노산인, 보충물.
  4. 제1항에 있어서, L-류신 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.1 그램 내지 100 그램 이하의 아미노산인, 보충물.
  5. 제1항에 있어서, L-아르기닌 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.1 그램 내지 200 그램 이하의 아미노산인, 보충물.
  6. 제1항에 있어서, 활성 IGF-1의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 100 마이크로그램 내지 2000 마이크로그램 이하의 활성 IGF-1인, 보충물.
  7. 제1항에 있어서, L-글루타민 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.5 그램 내지 500 그램 이하의 아미노산이고, L-류신 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.1 그램 내지 100 그램 이하의 아미노산이고, L-아르기닌 또는 이의 염의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 0.1 그램 내지 200 그램 이하의 아미노산이고, 활성 IGF-1의 양은 보충물 1 킬로그램 당 적어도 100 그램 내지 2000 마이크로그램 이하의 IGF-1인, 보충물.
  8. 제1항에 있어서, 활성 IGF-1은 재조합 IGF-1인, 보충물.
  9. 제1항에 있어서, 식료품을 추가로 포함하는, 보충물.
  10. 톤당 적어도 0.000005 g 및 0.005 g 이하의 양으로 식료품에 존재하는 제1항의 보충물을 포함하는 식료품.
  11. 식료품 1 톤당 적어도 50 그램(g) 및 2600 g 이하의 양으로 식료품에 존재하는 제1항의 보충물을 포함하는 식료품.
  12. 제10항 또는 제11항에 있어서, L-글루타민 또는 이의 염, L-류신 또는 이의 염, 및 L-아르기닌 또는 이의 염의 총 중량 퍼센트(wt%)는 보충물 중 다른 아미노산의 총 wt%보다 적은, 식료품.
  13. 제11항에 있어서, L-글루타민, L-류신, 및 L-아르기닌 중 1 종, 2 종, 또는 3 종 모두는 염 형태로 존재하는, 식료품.
  14. 제11항에 있어서, L-글루타민 또는 이의 염의 양은 적어도 0.0000002 wt%인, 식료품.
  15. 제11항에 있어서, L-류신 또는 이의 염의 양은 적어도 0.00000006 wt%인, 식료품.
  16. 제11항에 있어서, L-아르기닌 또는 이의 염의 양은 적어도 0.00000006 wt%인, 식료품.
  17. 동물에게 유효량의 (i) 제1항의 보충물을 포함하는 식료품, 또는 (ii) 제10항 또는 제11항의 식료품을 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  18. 동물에게 (i) 제1항의 조성물이 보충된 식료품 또는 (ii) 제10항 또는 제11항의 식료품을 투여하는 것을 포함하여 동물의 성과를 개선하는 방법으로서, 성과의 개선은 체중 증가, 사료 요구율 개선, 폐사율 감소, 무리 균일성 증가, 또는 이들의 조합을 포함하는, 방법.
  19. 동물에게 (i) 제1항의 조성물이 보충된 조성물 또는 (ii) 제10항 또는 제11항의 식료품을 투여하는 것을 포함하여 동물의 가공 인자를 개선하는 방법으로서, 가공 인자의 개선은 냉장 도체 수율의 증가, 총 가슴살 수율의 증가, 또는 이들의 조합인, 방법.
  20. 동물에게 (i) 제1항의 조성물이 보충된 조성물 또는 (ii) 제10항 또는 제11항의 식료품을 투여하는 것을 포함하여 동물의 장 건강을 증가시키기 위한 방법으로서, 장 건강의 개선은 장내 세균의 감소, 장내 병변의 감소, 대변 설사의 감소, 또는 이들의 조합인, 방법.
  21. 제17항에 있어서, 식료품은 보충물을 톤당 적어도 50 g의 양으로 포함하는, 방법.
  22. 제17항에 있어서, 동물은 돼지 동물 또는 조류 동물인, 방법.
  23. 제17항에 있어서, 동물은 고스트레스 환경에 수용되는, 방법.
  24. 동물에게 (i) 제1항의 조성물이 보충된 조성물 또는 (ii) 제10항의 식료품을 투여하는 것을 포함하여, 자손의 이유부터 발정으로 되돌아가는 시간을 감소시키는 방법으로서, 자손의 이유부터 발정으로 되돌아가는 시간은 유사한 환경에 있지만 조성물을 공급하지 않은 동물과 비교하여 감소되는, 방법.
  25. 제24항에 있어서, 동물은 모돈(sow)인, 방법.
  26. 제25항에 있어서, 보충물은 식품 1 톤당 100 그램 내지 2.5 kg의 보충물로 존재하는, 방법.
  27. 동물에게 (i) 제1항의 조성물이 보충된 조성물, 또는 (ii) 제10항의 식료품을 투여하는 것을 포함하여, 동물에서 평균 일일 증체량을 증가시키고/증가시키거나, 체중을 증가시키고/증가시키거나, 대변 설사를 감소시키고/감소시키거나, 사료 요구율을 개선하는 방법으로서, 평균 일일 증체량의 증가, 체중의 증가, 대변 설사의 감소, 및/또는 사료 요구율의 개선은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품을 공급하지 않은 동물과 비교되는 변화인, 방법.
  28. 제27항에 있어서, 동물은 자돈(piglet)인, 방법.
  29. 제28항에 있어서, 보충물은 식품 1 톤당 100 그램 내지 2.5 kg의 보충물로 존재하는, 방법.
  30. 동물에게 (i) 제1항의 조성물이 보충된 조성물, 또는 (ii) 제10항의 식료품을 투여하는 것을 포함하여, 조류 암컷에서 체중을 증가시키고/증가시키거나, 장내 병변 감소 및/또는 체중의 백분율로서 지방 패드의 증가에 의해 측정되는 바와 같은 건강을 개선하고/개선하거나, 알 생산을 증가시키고/증가시키거나, 총 산란율을 증가시키고/증가시키거나, 사료 요구율을 개선하는 방법으로서, 체중의 증가, 장내 병변 감소 및/또는 체중의 백분율로서 지방 패드의 증가에 의해 측정되는 바와 같은 건강의 개선, 알 생산의 증가, 총 산란율의 증가, 및/또는 사료 요구율의 개선은 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품을 공급하지 않은 동물과 비교되는 변화인, 방법.
  31. 제30항에 있어서, 조류 암컷은 닭인, 방법.
  32. 제31항에 있어서, 보충물은 식품 1 톤당 30 그램 내지 90 g의 보충물로 존재하는, 방법.
  33. 동물에게 (i) 제1항의 조성물이 보충된 조성물, 또는 (ii) 제11항의 식료품을 투여하는 것을 포함하여, 어류에서 헤마토크리트(hematocrit) 수준을 증가시키고/증가시키거나, 혈청 단백질의 농도를 증가시키고/증가시키거나, 리소자임 농도를 증가시키고/증가시키거나, 혈청 코티솔(cortisol) 농도를 증가시키는 방법으로서, 헤마토크리트 수준의 증가, 혈청 단백질의 농도의 증가, 리소자임 농도의 증가, 및/또는 혈청 코티솔 농도의 증가는 유사한 환경에 있지만 보충물을 함유하는 식료품을 공급하지 않은 동물과 비교되는 변화인, 방법.
  34. 제33항에 있어서, 어류는 아시아 농어인, 방법.
  35. 제34항에 있어서, 보충물은 식품 1 톤당 0.000050 그램 내지 0.0005 g의 보충물로 존재하는, 방법.
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5985336A (en) * 1995-06-07 1999-11-16 Novus International, Inc. Nutrient formulation and process for feeding young poultry and other animals
AUPP327198A0 (en) * 1998-04-30 1998-05-21 Northfield Laboratories Pty Ltd A food composition and method of using same
AU741299B2 (en) * 1998-04-30 2001-11-29 N.V. Nutricia A food composition and method of using same
DE10351615A1 (de) * 2003-09-19 2005-04-14 Bomba Energia Getränkevertriebs GmbH Mineral-, vitamin- und aminosäurehaltiges Getränk
WO2005029979A1 (de) * 2003-09-19 2005-04-07 Bomba Energia Getränkevertriebs GmbH Mineral-, vitamin- und aminosäurehaltiges getränk
BR112017016381A2 (pt) * 2015-02-04 2018-03-27 Puretein Bioscience Llc métodos para aumentar características de desempenho em proles
CN105441376B (zh) * 2015-12-22 2018-03-20 肇庆大华农生物药品有限公司 一种用于培养病毒的无血清培养基及其制备方法

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