KR20220146496A - 뉴클레오티드계 화합물의 코로나 바이러스 감염증의 치료에의 사용 - Google Patents

뉴클레오티드계 화합물의 코로나 바이러스 감염증의 치료에의 사용 Download PDF

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Abstract

코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료제를 제조하기 위한 식(I)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 사용으로서, 상기 식(I)로 표시되는 화합물에서 신형 코로나 바이러스 폐렴 환자를 치료하면 바이러스 핵산 검사에서 음성화율, 음성화까지의 치료 기간, 치유 및 퇴원까지의 시간 중 어느 것에서도 명백한 우위를 나타낸다.

Description

뉴클레오티드계 화합물의 코로나 바이러스 감염증의 치료에의 사용
본 발명은 뉴클레오티드계 화합물의 신규 항바이러스 사용에 관한 것이다.
코로나바이러스(Coronavirus, CoV)는 바이러스 엔벨로프를 가지는 포워드 단일 가닥 RNA 바이러스로, 인류, 기타 포유동물 및 조류에서 널리 전파되어 호흡기관, 장관, 간 및 신경계 등의 질환을 야기할 수 있다 있다. 현재, 7종류의 CoV가 인류의 질환을 일으키는 것으로 알려져 있지만, 그 중에서 CoV-229E, -OC43, -NL63 및 -HKU1의 4종류가 군중에서 유행하고, 통상, 일반적인 감기의 증상 초래한다. 다른 SARS-CoV, MERS-CoV 및 신형 코로나바이러스(2019-nCoV, 또는 COVID-19)의 3종류는 모두, 발병 기간이 짧고, 전염성이 강하고, 치사율이 높다고 하는 중대한 위험성이 있다.
따라서 직접 항바이러스제를 신속하게 개발하여 신형 코로나바이러스 감염을 치료할 필요가 절박하다.
식(I)로 표시되는 화합물은 에이즈 치료제로서 II기 임상 시험을 마쳤으며, 그의 안전성이 우수하다.
[화 1]
Figure pct00001
본 발명자는 신형 코로나 바이러스로 감염된 MRC-5 세포 내에서 식(I)로 표시되는 화합물의 시험관내 항바이러스 활성을 측정한 결과, 식(I)로 표시되는 화합물은 미약한 신형 코로나바이러스의 억제활성밖에 갖지 않는 것을 확인하였다(EC50이 25μM).
그러나, 본 발명자는 식(I)로 표시되는 화합물을 그대로 연구성 임상 시험에 사용한 바, 놀랍게도, 대조로 되는 통상의 치료와 비교하여, 식(I)로 표시되는 화합물로 신형 코로나바이러스 폐렴의 환자를 치료할 경우, 바이러스 핵산 검사에서 음성화율, 음성화까지의 치료기간, 치유 및 퇴원까지의 시간 중 어느 것에서도 명백한 우위성을 나타내는 것을 발견하였다. 본 발명자의 견해로는, 식(I)로 표시되는 화합물이 명확한 바이러스 억제작용을 나타내지 않았던 것은 시험관 내에서 효과적으로 인산에스테르화할 수 없었던 것에 관계하고 있다.
이를 감안하여, 본 발명은 일 측면에서, 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료제를 제조하기 위한 식(I)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도를 제공하고, 또 다른 국면에서, 본 발명은 치료 또는 예방 유효용량의 식(I)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을, 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 코로나 바이러스 감염 예방 또는 치료법을 제공한다.
코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료제를 제조하기 위한 식(I)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 사용으로서, 상기 식(I)로 표시되는 화합물에서 신형 코로나 바이러스 폐렴 환자를 치료하면 바이러스 핵산 검사에서 음성화율, 음성화까지의 치료 기간, 치유 및 퇴원까지의 시간 중 어느 것에서도 명백한 우위를 나타낸다.
식(I)의 구조식은 다음과 같다.
Figure pct00002
식(I) 중,
R1은 OR1기가 생체 내(in vivo)에서 대사되어 히드록시기를 방출하거나, O-인산기를 형성할 수 있는 기이며, OR1은 바람직하기로는 에스테르기이고, R1은 바람직하기로는, H, R5-CO-, 또는
Figure pct00003
이고, 그 중, Ar은 페닐 및 치환 페닐기, 나프틸기 및 치환 나프틸기이며, 상기 치환기는 C1-6알킬기, F, Cl, Br, I, CN, N3, OH, NH2, OR5, NHR5로부터 선택된 것이며,
R2는 H, 아지드기, C1-C6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기), C1-C6알콕시기(예를 들면, 메톡시기, 에톡시기), C2-C6알키닐기(예를 들면, 에티닐기), C2-C6알케닐기(예를 들면, 에틸렌기), 할로겐화 C1-C6알킬기(예를 들면, 2-클로로에틸기, 2-플루오로에틸기, 트리플루오로에틸기)로부터 선택된 것이며,
R3은 H, 치환되어 있어도 좋은 R-CO-, 치환되어 있어도 좋은 RO(C=O)-, 및 치환되어 있어도 좋은 RNH-CO-, 그 중에서 R로부터 선택되는 C1-C6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기, 이소부틸기, 펜틸기, 이소아밀기 등)로부터 선택된 것이며, 그 중 치환기는 C1-C6알킬기, 할로겐 원자(예를 들면, F, Cl), CN, N3 및 OR5로부터 선택된다.
R4는 H, OH, 할로겐 원자(예를 들면, F), C1-C6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기), C1-C6알콕시기(예를 들면, 메톡시기, 에톡시기)로부터 선택된 것이며,
B는 하기에서 선택된 것이며,
Figure pct00004
식 중, X1은 -OH, -NH2, R5CONH-, R5COO-, R5O(C=O)NH-로부터 선택된 것이며,
X2는, -OH, -SH, -NH2, R5COO-, R5COS-, R5CONH2-, R5O(C=O)NH-로부터 선택된 것이며,
X3은 H, F, -OH 및 -NH2로 이루어진 군으로부터 선택된 것이며,
Y는 CH 및 N으로 이루어진 군으로부터 선택된 것이며,
Z는 H, -OH, 또는 F이고,
R5는 H, C1-C6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기), C2-C6알키닐기(예를 들면, 에티닐기), C2-C6알케닐기(예를 들면, 에틸렌기), 할로겐화 C1-C6알킬기(예를 들어, 2-클로로에틸기, 2-플루오로에틸기, 트리플루오로에틸기), C1-6알킬기, C1-6알콕시기, CN, N3, OH, NH2, 할로겐 원자(예를 들어, F, Cl, Br, I)로 치환되어도 좋은 페닐기, C1-6알킬기, C1-6알콕시기, CN, N3, OH, NH2, 할로겐 원자(예를 들어, F, Cl, Br, I)로 치환되어도 좋은 나프틸기로부터 선택된 것이다.
바람직하기로는, 하기 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염이다.
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
식(I)로 표시되는 화합물의 약학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어, 식(I)로 표시되는 화합물과 하기 산으로 형성된 염을 포함하나, 이에 한정되지 않으며, 상기 산은 염산, 브롬화수소산, 설파민산, 황산, 인산, 질산, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 옥살산, 글리콜산, 말론산, 벤조산, 락트산, 글루콘산, 시트르산, 타르타르산, 숙신산, 푸마르산, 말레산, 만델산, 말산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 이세티온산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 나프탈렌술폰산, 나프탈렌디술폰산, 캄퍼술폰산, 팔미트산 아스코르빌, 살리실산, 2-히드록시-3-나프토에산, 프탈산, 라이신, 아르기닌, 글루탐산, 글리신, 세린, 트레오닌, 알라닌, 이소류신, 류신 등이다.
식(I)로 표시되는 화합물은 시판의 것으로부터 입수하거나 공지의 방법으로 제조할 수 있다.
본원 명세서에 있어서, 코로나바이러스 감염증은 코로나바이러스과(科)의 바이러스 감염에 기인하는 질환이며, 사람 또는 다른 동물에 감염되어 유발되는 질환을 포함한다. 특히, 사람 코로나 바이러스가 사람에 감염되어 유발되는 질환이며, CoV-229E, -OC43, -NL63, -HKU1, SARS-CoV, MERS-CoV 및 신형 코로나 바이러스(2019-nCoV 또는 COVID-19) 라고도 불리는) 감염으로 인한 질병을 포함하나, 이에 국한되는 것은 아니다.
식(I)로 표시되는 화합물의 코로나바이러스 감염의 치료 및 예방을 위한 유효용량은 당업자가 본 명세서에 기재된 정보에 기초하여 특정할 수 있다. 예를 들어, 성인의 사용량은 1~500mg/일이면 좋고, 1~50mg/일이어도 좋으며, 1~20mg/일이어도 좋고, 1~10mg/일이어도 좋고, 또한 5mg/day이어도 좋다. 1회 또는 복수회로 나누어 투여할 수 있다.
투여 방법은 경구투여 또는 비경구투여용이어도 좋다. 즉시 방출 제형이어도 좋고, 서방제형, 방출제어제형이어도 좋다. 구체적인 제형은 당업계의 다양한 통상의 제형이어도 좋다. 예를 들어, 경구투여 제제는 정제, 하드 캡슐제 또는 소프트 캡슐제, 수성 또는 유성 현탁제, 입제, 유제, 시럽제 또는 엘릭실제 등을 포함한다. 주사제로서는, 주사액, 분말 주사제 등을 들 수 있다.
[실시예]
이하, 본 발명을 실시하기 위한 형태에 의해 본 발명을 더 상세히 설명한다. 여기에 기술된 발명을 실시하기 위한 형태는 본 발명을 예시적으로 설명하는 것에 지나지 않으며, 본 발명을 제한하는 것은 아님을 이해해야 한다.
시험예 1. 아즈부딘(Azvudine) 아민 포스페이트 프로드럭 CL-236의 항 신형코로나바이러스 활성시험
(1) 실험재료와 시약
1. 세포주: Huh 7 세포, 본 실험실에서 보존
2. 바이러스 균주: 2019-nCoV(COVID-19)
3. 시험약：아즈부딘 아민 포스페이트 프로드럭(CL-236)
4. 양성 대조약: 렘데시비르
5. 시약: DMEM 배지(Gibco), 소태아혈청(Gibco), 페니실린-스트렙토마이신 용액, 판크레아틴, MTT(Amresco) 등
6. 키트: QIAamp viral RNAmini kit(52906, Qiagen), One Step TB Green PrimeScript PLUS RT-PCR Kit(Perfect Real Time)(RR096A TaKaRa)
7. 소모품: 세포 배양 플레이트, 96-웰 ELISA 플레이트 등
8. 기구: 다기능 효소 마커, StepOnePlus 형광 정량 PCR, CO2 인큐베이터 등
(2) 실험 절차
1. 아즈부딘 아민 포스페이트 프로드럭 약물 CL-236의 세포독성측정
MTT법에 의해 아즈부딘 아민 포스페이트 프로드럭 CL-236의 Huh 7 세포에 대한 독성을 측정하였다. MTT는 3-(4,5)-디메틸티아히아조(-z-y1)-3,5-디-페닐테트라졸륨로미드의 약칭이며, 황색 염료이다. MTT 비색법은 세포의 생존 및 성장을 측정하는 방법이다. 그의 검출 원리로서는, 생세포 미토콘드리아에 있어서의 숙신산 데히드로게나아제는, 외인성 MTT를 수불용성의 청자색의 결정인 포르마잔(Formazan)으로 환원하여 세포 내에서 침착할 수 있지만, 사멸된 세포에는 이러한 기능이 없다. 10% SDS(0.01mol/L HCl 용액에 용해)는 세포에서 포르마잔을 용해할 수 있고, 다기능 마이크로플레이트 리더를 사용하여 570nm 파장에서 그의 흡광도 값을 측정함으로써 생세포의 수를 간접적으로 반영할 수 있다. 일정 세포수 범위 내에서, 형성된 MTT 결정의 양은 세포수에 비례한다. 상이한 인터페론 농도에서 570nm 파장에서의 흡광도 값을 측정함으로써, 상기 의약품 농도에서 세포의 생존율을 산출할 수 있고, 이것에 의해 당해 의약품의 50% 세포독성 농도(CC50)를 산출한다.
1일 전에 Huh 7 세포를 96-웰 플레이트에 접종해놓고, 1웰당 1×104개이며(96-웰 플레이트의 가장자리 웰을 실험 웰으로 하지 않고, PBS를 첨가하여 다른 웰의 배지의 휘발 방지에 유의) 세포의 상태를 관찰했다. 약 50%로 된 시점에서, 아즈부딘 아민 포스페이트 프로 드럭 CL-236을 2% FBS를 함유하는 DMEM 배지로 2배 희석한 후, 100㎕/웰으로 세포 플레이트에 접종하고, 각 농도의 평행 웰을 6개 설치하고, 동시에 대조군(의약품을 포함하지 않는 군) 및 블랭크 군(세포를 포함하지 않는 군)을 설치하고, 37℃, 5% CO2의 인큐베이터에 넣어 배양하였다. 의약품을 첨가한 48시간 후, 1웰당 25㎕ MTT 용액(5mg/mL)을 첨가하고, 계속해서 4시간 배양한 후, 1웰당 125㎕ 10% SDS(0.01mol/L HCl 용액에 용해)를 첨가하고, 가볍게 통기하고, 2시간 방치하여 결정을 충분히 용해하고, 블랭크 군으로 제로를 교정하고, OD570을 측정하고, 하기 식으로 생존율을 산출하였다. 또한, 의약품의 50% 세포독성 농도(CC50)를 산출하였다.
생존율(%)=시험약군 OD570/대조군 OD570×100%
2. 아즈부딘 아민 포스페이트 프로드럭 CL-236의 2019-nCoV(COVID-19) 바이러스에 대한 억제효과 평가
Huh 7세포 모델로 항바이러스의 활성을 측정하고, 각 시험에 리플리케이트 웰을 3개 설치하고, 총 3회 반복하였다.
1) Huh 7세포를 1웰당 5×104개로 24-웰 세포 배양 플레이트에 접종하고, 37℃, 5% CO2의 배양 조건에서 배양하고, 컨플루언스가 60%가 된 시점에서, 감염 다중도 MOI을 0.005로 하여, 웰당 2% FBS를 포함하는 DMEM 배지로 희석 후의 2019-nCoV(COVID-19) 바이러스액 200㎕를 각각 첨가하고, 37℃, 5% CO2의 인큐베이터로 1시간 흡착시킨 후, 바이러스 용액을 버리고 양성 대조군 약제 및 아즈부딘 아민 포스페이트 프로 드럭 CL-236을 2% FBS를 함유하는 DMEM 배지에서 최대 비독성 농도로부터 2배로 희석하고, 500㎕/웰로 세포 플레이트에 첨가하였다. 동시에 대조군(의약품을 포함하지 않는 군)을 설치하고, 감염 48시간 후에 상청액 바이러스 액을 수집하였다.
2) real-time RT-PCR(qRT-PCR)로 수집된 바이러스를 RNA 정량하였다.
수집된 상등액 바이러스 용액을 각각 140㎕ 취하여 QIAamp viral RNAmini kit의 사용 설명서에 따라 RNA를 추출하였다. One Step TB Green PrimeScript PLUS RT-PCR Kit(Perfect Real Time)을 사용하여 qRT-PCR 측정을 수행하였고,
프라이머는 RBD-qF1, 즉, 5'-CAATGGTTTAACAGGCACAGG-3'이었고,
RBD-qR1은 5'-CTCAAGGTGTCTGTGGATCATGG-3'이었다.
반응계의 합계 체적은 20㎕이며, 상세히는 10㎕　2X　One Step TB Green RT-PCR Buffer 4, 1.2㎕　TaKaRa Ex Tag HS Mix, 0.4㎕ PrimeScript PLUS RTase Mix, RBD-qF1 및 RBD-qR1 각 0.8㎕, 0.4㎕ ROX Reference Dye(50X), 2㎕ 바이러스 RNA, 4.4㎕ RNase Free dH2O이다. 반응 파라미터는 역전사 42℃ 5min, 예비 변성 95℃ 10s이고, PCR 40순환은 변성 95℃ 10s, 어닐링 및 신장 60℃ 30s를 포함한다.
3) 각 농도에서의 의약품의 억제율을 산출하였다.
억제율(%)=1-실험 군의 바이러스 RNA 카피수/의약품을 포함하지 않는 군의 바이러스 RNA 카피수×100%
또한, 의약품의 반감효과농도(EC50)를 산출하고, 치료지수(TI)=50% 세포 독성 농도(CC50)/반수 효과 농도(EC50)를 산출했다.
(3) 실험결과 계산
시험약 농도(μM) 바이러스억제율(%) EC50 CC50 S1



CL-236		 0.1 9.38

3.20μM

66.15μM

20.7
0.4 18.75
1.6 37.50
6.4 65.63
25.6 75.00
102.4 81.25
램데비르 1.50μM >45.0μM >30
<아즈부딘 아민 포스페이트 프로드럭 CL-236의 신형 코로나 바이러스(COVID-19)에 대한 억제활성>
시험예 2
임상 시험에 의해 식(I)로 표시되는 화합물을 신형 코로나 바이러스(COVID-19) 폐렴의 치료에 사용하는 효능 및 안전성을 검증하였다.
핵산시약 검정에 의해 감염 확정된 신형 코로나 바이러스 감염의 환자를 20례 선택하여, 아즈부딘(식(I)로 표시되는 화합물) 군 및 카레트라 대조군으로 나누어, 1군당 10례로 하였다. 아즈부딘 루프 치료 계획: 1일에 5mg을 복용한다(경구투여, 5정, 1 정제 당 1mg). 카레트라 대조군 치료 계획: 카레트라(경구투여, 2정/일, 250mg/정) + 아비돌 정제(경구투여 200mg/회, 3회/일) + 인터페론(500만U, 에어로졸 흡입 투여 1일 2회). 핵산의 변화, 체온의 변화를 측정하여 각종 증상에 대해 관찰하였다.
결과를 하기 표에 나타내었다.
환자번호 카레트라 대조군
핵산검사에서 감염 확정으로부터 음성화/퇴원까지		 아즈부딘정 군
핵산검사에서 감염 확정으로부터 음성화/퇴원까지
환자 1 음성화: 6일째, 치료를 계속중
환자 2 음성화: 3일째
퇴원: 5일째
환자 3 음성화: 4일째
퇴원: 7일째
환자 4 7일째 치료를 계속중
환자 5 6일째 치료를 계속중
환자 6 음성화: 4일째
환자 7 음성화: 2일째
퇴원: 5일째
환자 8 6일째 치료를 계속중
환자 9 5일째 치료를 계속중
환자 10 음성화: 3일째
환자 11 음성화: 4일째
퇴원: 7일째
환자 12 음성화: 4일째
퇴원: 6일째
환자 13 음성화: 4일째
퇴원: 6일째
환자 14 음성화: 4일째
퇴원: 8일째
환자 15 음성화: 2일째
퇴원: 7일째
환자 16 1주일 후에 음성화
환자 17 1주일 후에 음성화
환자 18 음성화: 3일째
퇴원: 6일째
환자 19 음성화: 2일째
퇴원: 5일째
환자 20 음성화: 3일째
임상 연구 결과로부터, 10례의 신형 코로나바이러스 감염 환자 중, 아즈부딘 군의 환자는 모두 핵산 검사로 음성화하였고, 그 중 7명은 8일 이내에 퇴원한 것을 알았다.
상기 임상 시험 결과로부터 식(I)로 표시되는 화합물로 신형 코로나바이러스 폐렴을 치료한 경우, 환자의 핵산 검사에서의 음성화율, 음성화까지의 치료 기간, 치유율 및 치유 기간의 몇몇 지표 중 어느 것에서도 명백한 임상 치료의 우위성을 나타내는 것으로 밝혀졌다.
그 중에서도, 1례의 카레트라로 서포트하여 20일간 별로 치료해도 음성화될 수 없었던 환자는, 식(I)로 표시되는 화합물로 치료한 후 3일 후에 음성화하였다. 치료 중 의약품 관련 독성 부작용은 전혀 관찰되지 않았다.
시험관내 측정 시스템에서, 아즈부딘은 효과적으로 인산에스테르화되어 활성화될 수 없었기 때문에, 아즈부딘의 아민 포스페이트 프로드럭(CL-236)을 이용하여 그 항신형 코로나바이러스 활성을 간접적으로 측정했다. 아즈부딘으로 에이즈를 치료하는 임상시험에서, 아즈부딘은 사람 생체 내에서 효과적으로 활성화되는 것을 알 수 있었기 때문에, 사람 임상 임상시험에서는 아즈부딘 아민 포스페이트 프로드럭가 아니라, 아즈부딘을 그대로 사용하여 신형 코로나바이러스성 폐렴을 치료했다.

Claims (10)

  1. 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료제를 제조하기 위한 식(I)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도
    Figure pct00012

    식(I) 중,
    R1은 H, R5-CO-, 또는
    Figure pct00013

    이고, Ar은 페닐기, 치환 페닐기, 나프틸기, 또는 치환 나프틸기이며, 그 중 치환기는 C1-6알킬기, F, Cl, Br, I, CN, N3, OH, NH2, OR5, NHR5로부터 선택된 것이며,
    R2는 H, 아지드기, C1-C6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기), C1-C6알콕시기(예를 들면, 메톡시기, 에톡시기), C2-C6알키닐기(예를 들면, 에티닐기), C2-C6알케닐기(예를 들면, 에틸렌기), 또는 할로겐화 C1-C6알킬기(예를 들면, 2-클로로에틸기, 2-플루오로에틸기, 트리플루오로에틸기)이고,
    R3은 H, 치환되어도 좋은 R-CO-, 치환되어도 좋은 R-O(C=O)-, 또는 치환되어도 좋은 RNH-CO-이고, R은 C1-C6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기, 이소부틸기, 펜틸기, 이소아밀기 등)이며, 그 중 치환기는 C1-C6알킬기, 할로겐 원자(예를 들면, F, Cl), CN, N3 및 OR5로부터 선택된 것이며,
    R4는 H, OH, 할로겐 원자(예를 들면, F), C1-C6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기), 또는 C1-C6알콕시기(예를 들면, 메톡시기, 에톡시기)이고,
    B는, 하기로부터 선택된 것이며,
    Figure pct00014

    식 중, X1은 -OH, -NH2, R5CONH-, R5COO-, 또는 R5O(C=O)NH-이고,
    X2는 OH, SH, NH2, R5COO-, R5COS-, R5CONH2-, 또는 R5O(C=O)NH-이고,
    X3은 H, F, OH 또는 NH2이고,
    Y는 CH 또는 N이고,
    Z는 H, OH 또는 F이고,
    R5는 H, C1-C6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기), C2-C6알키닐기(예를 들면, 에티닐기), C2-C6알케닐기(예를 들면, 에틸렌기), 할로겐화 C1-C6알킬기(예를 들어, 2-클로로에틸기, 2-플루오로에틸기, 트리플루오로에틸기), C1-6알킬기, C1-6알콕시기, CN, N3, OH, NH2, 할로겐 원자(예를 들어, F, Cl, Br, I)로 치환되어도 좋은 페닐기, C1-6알킬기, C1-6알콕시기, CN, N3, OH, NH2, 할로겐 원자(예를 들어, F, Cl, Br, I)로 치환되어도 좋은 나프틸기로부터 선택된 것이다.
  2. 청구항 1에 있어서,
    식(I)로 표시되는 화합물은 하기 화합물인, 코로나바이러스 감염증의 예방 또는 치료제를 제조하기 위한, 식(I)로 표시되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염의 사용.
    Figure pct00015

    Figure pct00016

    Figure pct00017

    Figure pct00018

    Figure pct00019

    Figure pct00020

    또는
    Figure pct00021
  3. 청구항 1 또는 2에 있어서,
    식(I)로 표시되는 화합물의 약학적으로 허용가능한 염은 식(I)로 표시되는 화합물 및 하기 산으로 형성된 염을 포함하며, 상기 산은 염산, 브롬화수소산, 설파민산, 황산, 인 산, 질산, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 옥살산, 글리콜산, 말론산, 벤조산, 락트산, 글루콘산, 시트르산, 타르타르산, 숙신산, 푸마르산, 말레산, 만델산, 말산, 메탄술폰 산, 에탄설폰산, 이세티온산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 나프탈렌설폰산, 나프탈렌디술폰산, 캄퍼설폰산, 팔미트산 아스코르빌, 살리실산, 술포살리실산, 2-히드록시-3 산, 라이신, 아르기닌, 글루탐산, 글리신, 세린, 트레오닌, 알라닌, 이소류신 또는 류신 인 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료제를 제조하기 위한 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도.
  4. 청구항 1 내지 3의 어느 한 항에 있어서,
    상기 코로나바이러스 감염은 코로나바이러스과의 바이러스 감염으로 인한 질환이며, 사람 또는 다른 동물에 감염되어 일어나는 질환을 포함하며, 특히 사람 코로나바이러스가 사람에 감염되어 일어나는 질환이다. 예를 들어, CoV-229E, -OC43, -NL63, -HKU1, SARS-CoV, MERS-CoV 또는 COVID-19의 감염으로 인한 질병인 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료제를 제조하기 위한 식 I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도.
  5. 청구항 1 내지 3의 어느 한 항에 있어서,
    상기 의약품의 투여 형태는 즉시 방출 투여 형태, 서방 투여 형태, 또는 방출 제어 투여 형태이며, 예를 들면, 정제, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 수성 또는 유성 현탁액, 과립, 유제, 시럽, 엘릭시르제, 주사액 또는 분말 주사제인, 코로나바이러스 감염증의 예방 또는 치료제를 제조하기 위한 식(I)로 표시되는 화합물 또는 그것의 약학적으로 허용되는 염의 사용.
  6. 치료 또는 예방 유효 용량의 식(I)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을이를 필요로하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료방법.
    Figure pct00022

    식(I) 중,
    R1은 H, R5-CO-, 또는
    Figure pct00023

    이고, Ar은 페닐기, 치환 페닐기, 나프틸기, 또는 치환 나프틸기이며, 그 중 치환기는 C1-6알킬기, F, Cl, Br, I, CN, N3, OH, NH2, OR5, NHR5로부터 선택된 것이며,
    R2는 H, 아지드기, C1-6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기), C1-6알콕시기(예를 들면, 메톡시기, 에톡시기), C2-6알키닐기(예를 들면, 에티닐기), C2-6알케닐기(예를 들면, 에틸렌기), 또는 할로겐화 C1-6알킬기(예를 들면, 2-클로로에틸기, 2-플루오로에틸기, 트리플루오로에틸기)이고,
    R3은 H, 치환되어 있어도 좋은 R-CO-, 치환되어 있어도 좋은 RO(C=O)-, 또는 치환되어 있어도 좋은 RNH-CO-이고, 그 중, R은, C1-6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기, 이소부틸기, 펜틸기, 이소아밀기 등) 중, 치환기는 C1-6알킬기, 할로겐 원자(예를 들면, F, Cl), CN, N3 및 OR5로부터 선택된 것이며,
    R4는 H, OH, 할로겐 원자(예를 들면, F), C1-6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기), 또는 C1-6알콕시기(예를 들면, 메톡시기, 에톡시기)이고,
    B는, 하기로부터 선택된 것이며,
    Figure pct00024

    식 중, X1은 -OH, -NH2, R5CONH-, R5COO-, 또는 R5O(C=O)NH-이고,
    X2는 OH, SH, NH2, R5COO-, R5COS-, R5CONH2-, 또는 R5O(C=O)NH-이고,
    X3은 H, F, OH 또는 NH2이고,
    Y는 CH 또는 N이고,
    Z는 H, OH 또는 F이고,
    R5는 H, C1-6알킬기(예를 들면, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기), C2-6알키닐기(예를 들면, 에티닐기), C2-6알케닐기(예를 들면, 에틸렌기), 할로겐화 C1-6알킬기(예를 들어, 2-클로로에틸기, 2-플루오로에틸기, 트리플루오로에틸기), C1-6알킬기, C1-6알콕시기, CN, N3, OH, NH2, 할로겐 원자(예를 들어, F, Cl, Br, I)로 치환되어도 좋은 페닐기, C1-6알킬기, C1-6알콕시기, CN, N3, OH, NH2, 할로겐 원자(예를 들어, F, Cl, Br, I)로 치환되어도 좋은 나프틸기로부터 선택된 것이다.
  7. 청구항 6에 있어서, 식(I)로 표시되는 화합물이 하기 화합물인 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료방법.
    Figure pct00025

    Figure pct00026

    Figure pct00027

    Figure pct00028

    Figure pct00029

    Figure pct00030

    또는
    Figure pct00031
  8. 청구항 6 또는 7에 있어서,
    식(I)로 표시되는 화합물의 약학적으로 허용가능한 염은 식(I)로 표시되는 화합물 및 하기 산으로 형성된 염을 포함하며, 상기 산은 염산, 브롬화수소산, 설파민산, 황산, 인 산, 질산, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 옥살산, 글리콜산, 말론산, 벤조산, 락트산, 글루콘산, 시트르산, 타르타르산, 숙신산, 푸마르산, 말레산, 만델산, 말산, 메탄술폰 산, 에탄설폰산, 이세티온산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 나프탈렌설폰산, 나프탈렌디술폰산, 캄퍼설폰산, 팔미트산 아스코르빌, 살리실산, 술포살리실산, 2-히드록시-3-나프토산, 프탈산, 라이신, 아르기닌, 글루탐산, 글리신, 세린, 트레오닌, 알라닌, 이소류신 또는 류신인 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료방법.
  9. 청구항 6 내지 8의 어느 한항에 있어서,
    상기 코로나바이러스 감염은 코로나바이러스과의 바이러스 감염으로 인한 질환이며, 사람 또는 다른 동물에 감염되어 일어나는 질환을 포함하며, 특히 사람 코로나바이러스가 사람에 감염되어 일어나는 질환인, 예를 들어 CoV-229E, -OC43, -NL63, -HKU1, SARS-CoV, MERS-CoV 또는 COVID-19의 감염으로 인한 질병인 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료방법.
  10. 청구항 6 내지 8의 어느 한항에 있어서,
    상기 의약품의 투여 형태는 즉시 방출 투여 형태, 서방 투여 형태, 또는 방출 제어 투여 형태이며, 예를 들면, 정제, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 수성 또는 유성 현탁액, 과립, 유제, 시럽, 엘릭시르제, 주사액 또는 분말주사제인 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료방법.
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114288313B (zh) * 2022-02-18 2023-07-04 常晓宇 嘧啶核苷类药物在制备预防或治疗冠状病毒感染性疾病药物中的用途
CN118021821A (zh) * 2022-03-03 2024-05-14 苏州旺山旺水生物医药股份有限公司 治疗、预防由病毒感染引起的相关疾病的药物及其用途

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2002326736B2 (en) * 2001-08-24 2007-08-02 Koronis Pharmaceuticals, Inc. Mutagenic nucleoside analogs for the treatment of viral disease
US20040259934A1 (en) * 2003-05-01 2004-12-23 Olsen David B. Inhibiting Coronaviridae viral replication and treating Coronaviridae viral infection with nucleoside compounds
CN100398555C (zh) * 2003-05-06 2008-07-02 西托维亚公司 冠状病毒和sars-cov的蛋白酶抑制剂及其应用
WO2005020885A2 (en) * 2003-05-21 2005-03-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of severe acute respiratory syndrome (sars)
CN1237185C (zh) * 2003-06-04 2006-01-18 中国科学院上海药物研究所 Sars冠状病毒3cl蛋白酶三维结构模型与抗sars药物
PL3347352T3 (pl) * 2016-08-19 2019-12-31 Gilead Sciences, Inc. Związki terapeutyczne użyteczne do profilaktycznego lub terapeutycznego leczenia zakażenia wirusem HIV
US20190185509A1 (en) * 2017-12-20 2019-06-20 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'2' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
JP7083398B2 (ja) * 2018-02-15 2022-06-10 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ピリジン誘導体およびｈｉｖ感染を処置するためのその使用
TWI766172B (zh) * 2018-07-30 2022-06-01 美商基利科學股份有限公司 抗hiv化合物

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