KR20220099164A - 천연 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 또는 인플루엔자바이러스 또는 코로나바이러스에 대한 항바이러스용 조성물 - Google Patents

천연 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 또는 인플루엔자바이러스 또는 코로나바이러스에 대한 항바이러스용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 천연 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 또는 인플루엔자바이러스(Influenza virus) 또는 코로나바이러스(Corona virus)에 대한 항바이러스용 조성물에 관한 것으로서, 상기 천연 복합 추출물은 선천적 방어 면역시스템에서 인터페론(interferon)의 분비를 촉진시킴으로써 바이러스 감염으로부터의 보호를 유도하므로, 이를 효과적으로 항바이러스 용도로 이용할 수 있다.

Description

천연 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 또는 인플루엔자바이러스 또는 코로나바이러스에 대한 항바이러스용 조성물{Composition for innate immunity, or antiviral against influenza virus or corona virus containing natural extracts}
본 발명은 천연 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 인플루엔자바이러스(Influenza virus; PR8) 또는 코로나바이러스(Corona virus)에 대한 항바이러스, 또는 바이러스 감염증 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 선천적 방어 면역시스템에서 인터페론(interferon)의 분비를 촉진시킴으로써 바이러스 감염으로부터의 보호를 유도하고, 이에 의하여 효과적으로 항바이러스 용도로 이용할 수 있는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 바이러스 감염증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.
면역이란 생체가 자기 성분 이외의 물질 등이 생체의 항상성을 깨뜨리거나 자기를 위협하는 것을 배제하기 위해 일어나는 일련의 생체 방어 반응을 의미한다. 체내 병원균의 유입으로 인해 활성화되었던 염증 반응을 포함한 모든 면역작용은 병원균의 제거가 이루어지고 나면 정상의 상태로 돌아오게 되지만 면역 조절에 어려움이 있는 경우, 면역 반응이 정상인 사람에 비해 현저히 높거나 낮게 발생한다.
면역기능이 결핍되거나 저하된 상태를 면역부전이라고 하며 이 상태에서는 면역반응이 제대로 활성화되지 못하여 체내에 유입되는 이물질 (세균, 바이러스 등)에 대한 반응을 제대로 못하여 감염을 일으키게 된다.
반대로 면역 과민 반응은 일부의 면역반응이 과하게 반응하여 면역체계가 불균형을 이루어 결과적으로 알레르기 반응을 일으키는 것이다. 면역 체계가 정상적으로 조절되지 못하고 불균형을 이루게 되면 체내 사이토카인의 불균형, T/B 세포의 증식 불균형, 항산화 영양소 고갈 등의 원인으로 면역 조절에 장애가 발생하여 염증성 물질 분비가 증가하여 세포와 조직에 손상을 입히게 되며 병원체 유입에 대처하지 못하여 염증의 심화가 이루어질 수 있다. 따라서 인체의 면역 반응은 균형을 이루어 조절이 정상적으로 되어야 건강을 유지할 수 있으므로 면역 조절 능력은 질병 예방과 치료에 중요시된다.
현재, 자가면역질환에 사용되는 의약품 중 가장 큰 비중을 차지하고 있는 것은 항체의약품이다. 항체의약품은 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 항체를 이용해 면역질환을 치료하는 것으로, 대표적인 항체의약품에는 암젠의 엔브렐과 존슨앤존슨의 레임케이드 등이 있다. 이들은 주로 류마티스 관절염 등의 면역질환에 사용되는 의약품으로 세포 기전 중 사이토카인인 TNF-α를 억제하여 과도한 면역반응을 조절하는 치료제로 현재 면역치료제로 각광받고 있는 의약품이다. 그러나, 이들 의약품은 면역반응을 억제하는 의약품으로 과복용시 감염질환, 알러지반응, 가려움, 주사부위홍반(출혈, 타박상, 홍반, 통증, 종창 포함), 호흡곤란, 발열 등의 증세가 나타날 수 있다.
또, 면역조절 실패로 인한 면역저하는 바이러스 등의 감염의 원인이 될 수 있다. 바이러스(virus)는 라틴어로 독성물질을 의미하며, 세균여과지(0.22 um)를 통과하는 일군의 감염형 병원성 입자이다. 바이러스는 숙주세포의 종류에 따라 박테리오파지, 식물 바이러스, 동물 바이러스로 분류하기도 하며, 핵산의 종류에 따라 DNA 바이러스, RNA 바이러스로 분류할 수 있다. 최근 COVID-19, 신종 플루, AI 및 구제역 등 다양한 바이러스 질병이 사회적으로 큰 문제를 일으켰으며, 이에 따라 바이러스 질병의 효과적인 대책에 대한 고민이 사회적으로 큰 관심을 불러일으키고 있다.
현재 바이러스성 질병을 예방하기 위한 가장 좋은 방법은 백신 접종이지만, 바이러스에 의한 질병의 경우, 대체로 많은 바이러스 혈청형(아형) 생성 등에 따른 백신의 효율성 문제가 중요하게 제기되고 있다. 이러한 백신의 문제점을 보완해 줄 수 있는 바이러스 예방용 억제제의 개발 및 보급은 중요한 사항이며, 이를 위해 특히 바이러스에 대한 초기 방어시스템인 생체 내 선천적 면역시스템을 자극하여 개체 동물의 면역력을 높여주는 것은 또 하나의 해결책이 될 수 있다.
최근 들어, 생체 내 선천적 방어 면역시스템 중에서 인터페론(interferon)에 의해 유도되는 선천성 면역분야가 주목을 받고 있는데, 이는 선천성 면역의 방어 기작 중 하나로, 면역 인자(염증 사이토카인)의 분비를 유도해 체내 염증반응을 일으켜 병원체를 방어하는 것이다. 따라서, 적정 수준의 염증 반응 유도는 바이러스 등의 병원체에 의해 발생하는 감염병의 예방에 유효할 것으로 보이며, 이는 선천성 면역 증진 제제의 연구가 필요한 이유이다. 특히, 제제의 원료로 독성 및 부작용이 거의 없는 생약 추출물 또는 식물 추출물을 활용한다면 식품이나 건강기능식품으로도 활용가능한 제제를 개발할 수 있을 것이다.
본 발명은 상술한 문제를 해결하기 위한 것으로, 본 발명자들은 종래 사용되는 의약품들의 단점인 부작용이 거의 없는 식품으로 사용 가능한 천연물들을 이용하여, 선천성 면역 증진, 항바이러스, 바이러스 감염 예방 및 치료용 조성물을 개발하는 것이며, 개발하고자 하는 추출물이 선천성 면역 증진 및 항바이러스에 우수한 효과가 있음을 확인하였다.
이에, 본 발명이 해결하고자 하는 첫 번째 과제는 사삼과 지황을 포함한 인삼, 복령, 산사, 도라지 중 1종 이상 선택되는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 바이러스 감염증의 예방 및 치료용 조성물과 이를 이용한 건강기능식품을 제공하는 것이다.
이에, 본 발명의 목적은 사삼 및 지황 복합 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 사삼 및 지황 복합 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증 개선용 건강기능식품을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 사삼 및 지황 복합 추출물의 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증 예방, 치료 또는 개선 용도를 제공하는 것이다.
상술한 첫 번째 과제를 해결하기 위한 본 발명은 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공하는 것으로써 사삼과 지황을 포함한 인삼, 지황, 복령, 산사, 도라지 중 1종 이상으로 선택되는 복합 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있는 것을 특징으로 한다. 또한, 본 발명은 사삼, 지황을 포함한 인삼, 복령, 산사, 도라지 중 1종 이상으로 선택되는 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 바이러스 감염증의 예방 및 치료용 건강기능식품을 제공하는 것이다.
이하 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.
본 발명의 일 양태는 사삼 및 지황 복합 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증 예방 또는 치료용 약제학적 조성물이다.
상기 복합 추출물은 사삼 5.9 내지 8.9 중량% 및 지황 74.1 내지 94.1 중량%를 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 사삼 6.7 내지 8.1 중량% 및 지황 83.3 내지 93.3 중량%를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 복합 추출물은 인삼 및 도라지로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 추가적으로 포함하는 것일 수 있다.
상기 복합 추출물은 사삼 5.4 내지 8.2 중량%, 인삼 6.4 내지 9.6 중량% 및 지황 68.2 내지 88.2 중량%를 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 사삼 6.1 내지 7.5 중량%, 인삼 7.2 내지 8.8 중량% 및 지황 76.7 내지 86.7 중량%를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한 상기 복합 추출물은 사삼 5.0 내지 7.4 중량%, 지황 62.0 내지 82.0 중량% 및 도라지 13.0 내지 19.6 중량%를 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 사삼 5.6 내지 6.8 중량%, 지황 69.8 내지 79.8 중량% 및 도라지 14.7 내지 17.9 중량%를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 복합 추출물은 복령 및 산사로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 추가적으로 포함하는 것일 수 있다.
상기 복합 추출물은 사삼 4.0 내지 6.0 중량%, 인삼 4.7 내지 7.1 중량%, 지황 50.2 내지 70.2 중량%, 복령 9.7 내지 14.5 중량%, 산사 0.9 내지 1.3 중량% 및 도라지 10.6 내지 15.8 중량%를 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 사삼 4.5 내지 5.5 중량%, 인삼 5.3 내지 6.5 중량%, 지황 56.4 내지 66.4 중량%, 복령 10.9 내지 13.3 중량%, 산사 1.0 내지 1.2 중량% 및 도라지 11.9 내지 14.5 중량%를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서상의 용어 “사삼”은 초롱꽃과(桔梗科: Campanulaceae)에 속한 다년생 본초인 잔대(Adenophora triphylla var. japonica Hara), 모시대 (Adenophora remotiflora (Siebold & Zucc.) Miq.), 당잔대(Adenophora stricta Miq.), 털잔대(Adenophora triphylla var. hirsuta Nakai) 또는 동속근연식물로, 생김새를 보면 줄기는 곧게 서며 높이 50 내지 100 cm 정도이고 꺾으면 흰색의 액이 나온다. 잎은 긴 타원형인데 4-5개가 돌려나기하며 줄기와 잎에는 털이 있다. 7-10월에 줄기 끝에 담자색의 꽃이 여러 개 돌려 달린다. 꽃부리는 종 모양이고 길이 13 내지 22 mm이다. 암술 대는 3개로 갈라지며 꽃부리보다 다소 길고 수술은 5개이며 꽃통으로부터 떨어지며 수술대는 밑부분이 넓고 털이 있다. 사삼은 인삼(人參), 현삼(玄蔘), 단삼(丹參), 고삼(苦參)과 함께 오삼(五參)이라 부르는데, 이것은 형태는 모두 다르나 치료하는 바는 비슷하기 때문이다. 약리작용으로는 거담 작용, 항균작용, 용혈작용, 강심작용 등이 보고되었다.
본 발명에 있어서 사삼은 잔대, 모시대 또는 당잔대인 것일 수 있고, 뿌리를 선택하여 사용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서상의 용어 “인삼”은 두릅나무과(五加科: Araliaceae)에 속한 다년생 본초인 인삼(Panax ginseng C.A Mey)으로 높이는 60 cm 정도이고, 삼대(줄기)는 해마다 1개가 곧게 자라며 그 끝에 1개의 꽃대(화경)가 이어지고, 3~6개의 잎자루가 돌려난다. 잎은 잎자루가 길고 잎몸은 3 내지 5개로 갈라져서 장상복엽을 이룬다. 잎 앞면의 맥 위에는 털이 있다. 여름에 1개의 가는 꽃줄기가 나와서 그 끝에 4 내지 40개의 담황록색의 작은 꽃이 산형꽃차례에 달린다. 꽃잎과 수술은 5개이며 암술은 1개로 씨방은 하위이다. 열매는 핵과로 편구형이고 성숙하면 선홍색으로 된다. 인삼은 예로부터 불로장생, 익기(益氣), 경신(經身)의 명약으로 일컬어진다.
본 발명에 있어서 인삼은 고려삼(Panax ginseng), 회기삼(P. quiquefolius), 전칠삼(P. notoginseng), 죽절삼(P. japonicus), 삼엽삼(P. trifolium), 히말라야삼(P. pseudoginseng) 및 베트남삼(P. vietnamensis)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것일 수 있고, 바람직하게는 고려삼 또는 전칠삼인 것일 수 있으며, 수삼, 미삼, 백삼 및 홍삼으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것일 수 있고, 뿌리를 선택하여 사용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서상의 용어 “지황”은 현삼과(Scrophulariaceae)에 속하는 다년생 본초인 지황(Rehmannia glutinosa (Gaertner) Liboschitz) 또는 회경지황 (Rehmannia glutinosa for. hueichingensis (Chao et Schih) Hsia.)으로 높이는 30 cm 정도이다. 잎은 타원형으로 뿌리에서 나오고, 6-7월에 홍자색의 꽃이 핀다. 한방에서는 뿌리의 생것을 생지황, 건조시킨 것을 건지황, 쪄서 말린 것을 숙지황이라고 한다. 숙지황은 보혈제로 쓰이고 생리불순, 허약 체질, 어린이의 발육 부진, 치매, 조루증, 발기부전에 사용하며, 생지황은 허약 체질, 토혈, 코피, 자궁 출혈, 생리불순, 변비에 사용하고, 건지황은 열병 후에 생기는 갈증과 장기 내부의 열로 인한 소갈증에 효과가 있으며 토혈과 코피를 그치게 한다고 보고되었다.
본 명세서상의 용어 “건조”는 열풍건조(AD), 냉풍건조, 진공건조(Vacuum Dry: VD), 분무건조(Spray Dry: SD) 그리고 동결건조(Freeze Dry: FD) 방법을 통하여 수행되는데, 본 발명에서는 열풍건조 방법을 사용하여 진행하였다. 열풍건조는 열풍을 이용해서 건조하는 방식으로 습도가 낮은 공기를 가열하여 이를 피 건조물 사이로 흐르게 하여 피 건조물에 함유된 수분을 증발시켜 건조하는 방식이다.
본 발명에서 지황은 생지황인 것일 수 있고, 뿌리를 선택하여 사용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서상의 용어 “복령”은 담자균류 민주름버섯목 구멍장이버섯과(多孔菌科: Polyporaceae)에 속한 진균인 복령(Poria cocos Wolf)의 균핵으로, 땅속에서 소나무 등의 나무뿌리에 기생한다. 균핵(菌核)의 크기는 10 내지 30 cm이며 둥근 모양 또는 길쭉하거나 덩어리 모양이다. 표면은 적갈색, 담갈색 또는 흑갈색이고 꺼칠꺼칠한 편이며, 때로는 근피(根皮)가 터져 있는 것도 있다. 살은 백색이고 점차 담홍색으로 변한다. 백색인 것을 백복령(白茯笭), 적색인 것을 적복령(赤茯笭)이라 한다. 또 복령 속에 소나무 뿌리가 꿰뚫고 있는 것을 복신(茯神)이라고 한다. 모두 한약재로 강장, 이뇨, 진정 등에 효능이 있어 신장병, 방광염, 요도염에 이용한다.
본 명세서상의 용어 “산사”는 장미과(薔薇科: Rosaceae)의 산사(Crataegus pinnatifida Bge), 야산사(Crataegus cuneata Sieb. et Zucc), 산리홍(Crataegus pinnatifida var. major N. E. Br), 좁은잎산사(Crataegus pinnatifida for. psilosa (C.K.Schneid.) Kitag) 및 동속 식물의 익은 열매를 말린 약재로서, 산사라는 이름은 열매가 사과 맛이 나고 색이 붉어 작은 사과와 같아서 붙여진 이름이다. 산사의 모양이 붉은 대추와 비슷하기 때문에 적조자(赤棗子)라 부르기도 하였다. 강심작용, 혈액순환개선 작용, 혈압강하작용이 보고되었다.
상기 산사는 열매를 선택하여 사용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서상의 용어 “도라지”는 초롱꽃과(桔梗科: Campanulaceae)에 속한 다년생 본초(Platycodon grandiflorum (Jacq.) A. DC.)로, 높이가 40 내지 100 cm이며, 잎은 어긋나고 타원형이다. 뿌리는 통통하고 줄기는 한 대 또는 여러 대가 모여난다. 7-8월에 흰색이나 하늘색 꽃이 피고 열매는 삭과이다. 뿌리는 “길경”으로 칭하며 식용하거나 거담이나 진해의 약재로 쓴다.
상기 도라지는 뿌리를 선택하여 사용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서상의 용어 “추출”은 액체 또는 고체원료 중에 포함되어 있는 유용한 가용성 성분을 용매에 녹여 분리하는 방법으로, 일반적으로 추출은 상온추출, 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 증기추출, 환류 냉각 추출, 감압 또는 가압 추출법이 있다. 본 발명의 일 구현예에서는 환류 추출을 진행하였다. 환류 추출은 추출 용기 윗부분에 냉각장치가 부착되어 있어, 증발하는 용매를 냉각 및 농축시켜 용액에서 증발하는 용매의 양을 최소화하는 추출법이다.
본 명세서상의 용어 “농축”은 액체함량이 높은 액상물질의 액체를 제거하여 고형물의 농도를 높이는 조작이다. 본 발명의 일 구현예에서는 감압 농축법을 이용하여 농축하였다. 감압 농축은 감압하여 용매의 끊는점을 내려 용매를 빠르게 증발시켜 용액의 용질 농도를 높이는 방법이다.
본 명세서상의 용어 “바이러스(virus)”는 라틴어로 독성물질을 의미하며, 세균여과지(0.22 um)를 통과하는 일군의 감염형 병원성 입자이다. 본 발명의 일 구현예에서 사용한 바이러스는 인플루엔자바이러스(Influenza virus; PR8-GFP)이다.
본 명세서상의 용어 “대식세포”는 선천 면역을 담당하는 주요한 세포로 세포 조직이나 이물질, 미생물, 암세포 등 건강한 몸에 존재하는 단백질이 아닌 것을 흡수하고 소화시키는 식세포 작용을 하는 백혈구의 한 유형이다. 본 발명의 일 구현예에서 사용한 대식세포는 RAW 264.7 세포이다.
본 발명에 있어서 약제학적 조성물은 인플루엔자바이러스(Influenza virus), 코로나바이러스(Corona virus), 수포성구내염바이러스(Vesicular stomatitis virus) 및 뉴캐슬병바이러스(Newcastle disease virus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상에 대한 항바이러스, 또는 이를 원인균으로 하는 바이러스 감염증 예방 또는 치료 활성을 나타내는 것일 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 복합 추출물의 성인 기준 1일 섭취량이 0.01 내지 20.00 g, 0.01 내지 15.00 g, 0.01 내지 10.00 g, 0.01 내지 5.00 g, 0.01 내지 2.00 g, 0.10 내지 20.00 g, 0.10 내지 15.00 g, 0.10 내지 10.00 g, 0.10 내지 5.00 g, 0.50 내지 2.00 g, 1.00 내지 20.00 g, 1.00 내지 15.00 g, 1.00 내지 10.00 g, 1.00 내지 5.00 g, 1.00 내지 2.00 g, 또는 1.00 내지 2.00 g의 농도로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 선천성 면역 증진은 TNF(Tumor necrosis factor)-α 또는 IL(interleukin)-6과 같은 면역 사이토카인의 생성에 의해 유도되는 것일 수 있다.
본 명세서상의 용어 “TNF-α”는 생체 내 다양한 면역세포에서 분비되는 사이토카인으로, 여러 면역 매개 염증성 질환에서 중요한 역할을 하는 인자이다. TNF-α는 증식, 생존, 분화 및 자멸사 (세포사)와 같은 다양한 종류의 세포 활동을 매개하며, 염증성 면역반응의 유도 및 유지에 중요한 역할을 한다.
본 명세서상의 용어 “IL-6”은 면역 매개 염증성 질환에서 핵심적 역할을 담당하는 전 염증성 사이토카인으로, 많은 만성 염증성 질환과 관련된 JAK/STAT 경로를 통해 염증 반응을 위한 신호를 전달한다. IL-6는 나이브(na
Figure pat00001
ve) T 세포를 Th17 세포로 분화하기 위해 필요한 인자이다.
본 발명의 약제학적 조성물은 복합 추출물의 약제학적 유효량 및/또는 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물로 이용될 수 있다.
본 명세서에서 용어 "약제학적 유효량"은 상술한 복합 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.
본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 인간을 포함하는 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여 방식은 통상적으로 사용되는 모든 방식일 수 있으며, 예컨대, 경구, 피부, 정맥, 근육, 피하 등의 경로로 투여될 수 있으며, 바람직하게는 경구로 투여될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여방식, 환자의 연령, 체중, 성별, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제, 캅셀제 또는 젤(예컨대, 하이드로젤) 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태는 사삼 및 지황 복합 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증 개선용 건강기능식품이다.
상기 복합 추출물은 사삼 5.9 내지 8.9 중량% 및 지황 74.1 내지 94.1 중량%를 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 사삼 6.7 내지 8.1 중량% 및 지황 83.3 내지 93.3 중량%를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 복합 추출물은 인삼 및 도라지로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 추가적으로 포함하는 것일 수 있다.
상기 복합 추출물은 사삼 5.4 내지 8.2 중량%, 인삼 6.4 내지 9.6 중량% 및 지황 68.2 내지 88.2 중량%를 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 사삼 6.1 내지 7.5 중량%, 인삼 7.2 내지 8.8 중량% 및 지황 76.7 내지 86.7 중량%를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한 상기 복합 추출물은 사삼 5.0 내지 7.4 중량%, 지황 62.0 내지 82.0 중량% 및 도라지 13.0 내지 19.6 중량%를 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 사삼 5.6 내지 6.8 중량%, 지황 69.8 내지 79.8 중량% 및 도라지 14.7 내지 17.9 중량%를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 복합 추출물은 복령 및 산사로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 추가적으로 포함하는 것일 수 있다.
상기 복합 추출물은 사삼 4.0 내지 6.0 중량%, 인삼 4.7 내지 7.1 중량%, 지황 50.2 내지 70.2 중량%, 복령 9.7 내지 14.5 중량%, 산사 0.9 내지 1.3 중량% 및 도라지 10.6 내지 15.8 중량%를 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 사삼 4.5 내지 5.5 중량%, 인삼 5.3 내지 6.5 중량%, 지황 56.4 내지 66.4 중량%, 복령 10.9 내지 13.3 중량%, 산사 1.0 내지 1.2 중량% 및 도라지 11.9 내지 14.5 중량%를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 건강기능식품은 인플루엔자바이러스, 코로나바이러스, 수포성구내염바이러스 및 뉴캐슬병바이러스로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상에 대한 항바이러스, 또는 이를 원인균으로 하는 바이러스 감염증 개선 활성을 나타내는 것일 수 있다.
본 발명의 식품 조성물을 건강기능식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 식품 조성물은 건강기능식품에 대하여 10 내지 60 중량%, 바람직하게는 30 내지 50 중량%의 양으로 첨가될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
상기 음료는 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 당업자의 선택에 의해 적절하게 결정될 수 있다.
상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율 또한 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.
본 발명의 천연 복합 추출물은 선천성 면역 증진과 염증성 인자(사이토카인)의 유도에 의한 인터페론(interferon)의 분비를 촉진시킴으로써 인플루엔자바이러스(Influenza virus) 또는 코로나바이러스(Corona virus) 등과 같은 바이러스의 감염을 예방 및 치료하는 효과를 나타내므로, 효과적인 면역증진 또는 바이러스 감염의 예방 또는 치료 및 개선에 크게 도움이 될 수 있으며, 가장 큰 특징은 부작용이 거의 없다는 것이다.
도 1a는 본 발명의 실시예에 따른 복합 추출물을 처리한 대식세포의 인플루엔자 바이러스(Influenza virus; PR8) 감염률을 나타낸 사진이다.
도 1b는 본 발명의 실시예에 따른 복합 추출물을 처리한 대식세포의 인플루엔자 바이러스 감염률을 나타낸 그래프이다.
도 2a는 본 발명의 실시예에 따른 복합 추출물을 처리한 대식세포에서 TNF(Tumor necrosis factor)-α의 생성량을 나타낸 그래프이다.
도 2b는 본 발명의 실시예에 따른 복합 추출물을 처리한 대식세포에서 IL(interleukin)-6의 생성량을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 복합 추출물의 고형분 함량을 추출 온도 및 추출 시간에 따라 비교한 그래프이다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 "%"는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (중량/중량)%, 고체/액체는 (중량/부피)%, 그리고 액체/액체는 (부피/부피)%이다.
상술한 바와 같이 종래의 면역치료제는 면역반응을 억제하는 의약품으로 과복용시 감염질환, 알러지반응, 가려움, 주사부위홍반 (출혈, 타박상, 홍반, 통증, 종창 포함), 호흡곤란, 발열 등의 증세가 나타날 수 있으며, 면역조절 실패로 인한 면역저하 등으로 인해 바이러스 감염에 노출될 위험이 있다.
이에 본 발명의 한 측면에 따르면, 사삼과 지황을 포함해 인삼, 복령, 산사, 도라지 중 1종 이상으로 선택되는 (사삼, 인삼, 지황, 복령 산사, 도라지 중 2종 이상을 포함하는) 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공하여 상술한 문제의 해결을 모색하였다. 이를 통해 선천적 방어 면역시스템에서 인터페론의 분비를 촉진시켜 면역력 및 바이러스 감염에 대한 개선 효과가 우수함을 확인하여, 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증의 예방, 치료 또는 개선에 크게 도움이 될 수 있다.
제조예 1: 복합 추출물의 제조
1-1. 실시예 1의 제조
복합 추출물을 제조하기 위하여 미리 선별하여 적절한 크기로 절단하여 사삼 7.4 중량%, 지황 92.6 중량%의 비율로 원료를 준비하고, 원료 전체 중량의 10배수의 1차 증류수를 첨가하여 100℃에서 120분간 환류 추출하였다. 추출한 용액을 0.45 um 여과지로 1차 여과하고, 0.22 um 여과지로 2차 여과하여 침전물을 제거하였으며, 45 내지 55℃에서 감압 농축 후, -80℃, 5 mTorr에서 동결건조를 진행하여 분말화하였다. 분말화한 복합 추출물은 1.5 ml Ep-튜브에 1 g씩 분주하고 -20℃에서 저장하여 실시예 1로 지정하고 시험에 사용하였다.
1-2. 실시예 2의 제조
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 사삼 6.8 중량%, 인삼 8.0 중량%, 지황 85.2 중량%의 비율로 원료를 준비하고, 분말화한 복합 추출물은 실시예 2로 지정하여 시험에 사용하였다.
1-3. 실시예 3의 제조
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 사삼 6.2 중량%, 지황 77.5 중량%, 도라지 16.3 중량%의 비율로 원료를 준비하고, 분말화한 복합 추출물은 실시예 3으로 지정하여 시험에 사용하였다.
1-4. 실시예 4의 제조
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 사삼 5.0 중량%, 인삼 5.9 중량%, 지황 62.7 중량%, 복령 12.1 중량%, 산사 1.1 중량%, 도라지 13.2 중량%의 비율로 원료를 준비하고, 분말화한 복합 추출물은 실시예 4로 지정하여 시험에 사용하였다.
시험예 1: 마우스 대식 세포주를 이용한 복합 추출물의 항바이러스 활성 분석
GFP(green fluorescent protein) 형광 표지된 인플루엔자바이러스(Influenza virus; PR8-GFP)에 대한 복합 추출물의 항바이러스 활성 분석을 수행하였다.
구체적으로, 24 웰 TC(Tissue culture) 플레이트에 Raw 264.7 세포(대식세포)를 2×105 cell/웰 만큼 1% 소태아혈청(Fetal Bovine Serum; FBS)가 첨가된 RPMI 배지에서 24시간 동안 배양한 후, 상기 제조예 1에서 제조한 실시예 1 내지 4를 시료로 하여 200 ug/ml 농도로 각각 18시간 동안 처리하였다.
18시간 동안 시료 처리 후, 인플루엔자 바이러스(A/PR8/34-GFP)(MOI(multiplicity of infection): 1.0)를 함유하는 접종액을 2시간 동안 감염시켰고, 감염 2시간 후, 접종액을 제거하고 PBS(phosphate buffer saline)로 3회 세척하였으며, 다시 24시간 동안 RPMI 배지에서 배양 후 상기 접종한 각 바이러스의 감염 정도를 확인하였다. 이후 GFP 발현을 확인할 수 있는 형광현미경과 유세포분석기를 이용하여 인플루엔자 바이러스의 증식 억제를 확인하였다.
1% FBS가 첨가된 RPMI 배지를 음성 대조군(Vehicle)으로 하였고, 바이러스 감염 배지에 마우스 IFN-β(1,000 units/ml)를 처리한 것을 양성 대조군(IFN)으로 하여 표 1에 나타내었다.
CON Vehicle 실시예1 실시예2 실시예3 실시예4 IFN-β
PR8-GFP - + + + + + +
GFP 0.97 12.74 4.54 3.39 3.64 2.10 1.45
표 1, 도 1a 및 1b에서 확인할 수 있듯이, 실시예 1 내지 4의 시료를 처리한 세포를 인플루엔자 바이러스로 감염시킨 결과, 인플루엔자 바이러스의 감염률이 현저하게 떨어진 것을 확인할 수 있으며, 특히 실시예 4의 복합 추출물(OCD20015)은 양성 대조군인 IFN-β를 처리한 세포와 비교해도 큰 차이가 없는 것을 알 수 있었다. 이는 복합 추출물이 세포의 면역력을 향상시킴으로써 바이러스에 대한 내성을 증가시킨다는 것을 확인할 수 있는 결과이다.
시험예 2: 마우스 대식 세포주를 이용한 복합 추출물의 선천성 면역 증진 활성 분석
복합 추출물의 선천성 면역 증진 활성을 확인하기 위해 면역 사이토카인을 측정하였다.
구체적으로, 96 웰 TC 플레이트에 Raw 264.7 세포 2×105 cell/웰을 배양한 후, 1% FBS가 첨가된 RPMI 배지에 상기 실시예 1 내지 4에서 제조한 복합 추출물을 200 ug/ml 농도로 하여 각각 처리하였다. 상기 추출물을 처리하고 24시간 후, 상층액을 취하여 샌드위치(sandwich) ELISA법을 이용해 TNF(Tumor necrosis factor)-α 및 IL(interleukin)-6을 측정하였다. 세포에 LPS(Lipopolysaccharide) 200 ng/ml을 처리한 것을 양성대조군으로 하였다.
실시예 1 내지 4의 복합 추출물 처리 후 24시간 뒤 면역 사이토카인을 측정하였으며, 결과는 하기 표 2와 같다.
CON LPS 실시예1 실시예2 실시예3 실시예4
TNF-α(pg/ml) 0 16,055 10,505 12,333 11,524 13,021
IL-6(pg/ml) 0 26,002 12,511 13,584 15,511 16,003
표 2, 도 2a 및 2b에서 확인할 수 있듯이, 실시예 1 내지 4의 복합 추출물 시료를 24시간 처리한 결과, 대조군과 비교하였을 때 현격히 면역 사이토카인의 생성량이 증가되는 것을 확인할 수 있었다. 특히, 실시예 4의 복합 추출물(OCD20015)이 다른 추출물들과 비교하였을 때, 높은 수준으로 증가되는 것을 알 수 있었다. 이는 OCD20015 복합 추출물이 세포의 면역력 향상에 영향을 준다는 것을 확인할 수 있는 결과이다.
제조예 2: 실시예 5 내지 49의 제조
추출 시 고형분함량을 확인하기 위해 각기 다른 조건에서 복합 추출물을 제조하였다. 상기 실시예 4를 제조한 제조예 1-4에서와 동일한 비율로 원료를 준비하고, 원료 전체 중량의 10배수의 1차 증류수를 첨가하여 온도는 40, 60, 80, 100 및 120℃로, 시간은 1, 2, 4, 8, 12, 24, 48, 72, 96 및 120시간으로 각각 열수 추출하였다. 추출한 용액은 1 um 여과지에 여과하였다. 각 추출 조건은 하기 표 3에 나타내었다.
  온도(℃) 시간(H)   온도(℃) 시간(H)   온도(℃) 시간(H)
실시예5 40 1 실시예20 60 72 실시예35 100 12
실시예6 40 2 실시예21 60 96 실시예36 100 24
실시예7 40 4 실시예22 60 120 실시예37 100 48
실시예8 40 12 실시예23 80 1 실시예38 100 72
실시예9 40 24 실시예24 80 2 실시예39 100 96
실시예10 40 48 실시예25 80 4 실시예40 100 120
실시예11 40 72 실시예26 80 12 실시예41 120 1
실시예12 40 96 실시예27 80 24 실시예42 120 2
실시예13 40 120 실시예28 80 48 실시예43 120 4
실시예14 60 1 실시예29 80 72 실시예44 120 12
실시예15 60 2 실시예30 80 96 실시예45 120 24
실시예16 60 4 실시예31 80 120 실시예46 120 48
실시예17 60 12 실시예32 100 1 실시예47 120 72
실시예18 60 24 실시예33 100 2 실시예48 120 96
실시예19 60 48 실시예34 100 4 실시예49 120 120
시험예 3: 고형분 함량 비교를 통한 추출 조건 설정
제조예 2에 따라 실시예 5에서 실시예 49까지 추출한 각 추출액의 고형분 함량을 측정 및 비교하였다. 각 추출액 샘플 3 내지 4 g을 취하여 수분함량측정기 (Infrared moisture analyzer model FD-720)로 105℃ 조건에서 고형분 함량(%, g/g)을 측정하였으며, 결과는 하기 표 4와 같다.
고형분함량(%) 고형분함량(%) 고형분함량(%)
실시예5 3.60 실시예20 5.15 실시예35 5.11
실시예6 3.98 실시예21 5.19 실시예36 5.14
실시예7 4.21 실시예22 5.19 실시예37 5.24
실시예8 4.23 실시예23 4.41 실시예38 5.33
실시예9 4.25 실시예24 4.78 실시예39 5.39
실시예10 4.28 실시예25 5.09 실시예40 5.39
실시예11 4.31 실시예26 5.09 실시예41 4.45
실시예12 4.34 실시예27 5.12 실시예42 4.80
실시예13 4.34 실시예28 5.21 실시예43 5.11
실시예14 4.30 실시예29 5.27 실시예44 5.11
실시예15 4.69 실시예30 5.30 실시예45 5.15
실시예16 4.99 실시예31 5.30 실시예46 5.24
실시예17 5.01 실시예32 4.44 실시예47 5.34
실시예18 5.05 실시예33 4.81 실시예48 5.39
실시예19 5.09 실시예34 5.10 실시예49 5.39
표 4 및 도 3에서 확인할 수 있듯이, 추출온도 대비 고형분 함량은 40℃와 비교할 때 60℃에서 급격히 증가하였고, 그 이상의 온도에서는 증가폭이 감소하였으나, 100℃ 이상에서는 고형분 함량의 변화가 없었다. 추출시간 대비 고형분 함량은 1 내지 4시간 구간에서는 급격히 증가하다가, 4시간 이후에는 증가폭이 감소하였으며, 96시간 이후에는 고형분 함량의 변화가 없었다.
추출온도 및 추출시간에 따른 고형분 함량을 고려할 때, 최소 60℃ 이상의 온도로 최소 4시간 이상을 추출하는 조건이 필요하며, 이보다 고형분 함량을 더 증가시키기 위해 추출온도는 100℃까지 증가시킬 수 있고, 추출시간은 96시간까지 증가시킬 수 있으나, 그 이상의 조건에서는 고형분 함량의 변화가 없는 것을 확인하였다.
따라서 추출온도 및 추출시간은 양산 공정 단계에서의 소모비용을 고려하여 적절한 조건 범위 안에서 추출하면 될 것으로 사료된다.

Claims (16)

  1. 사삼 및 지황 복합 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 복합 추출물은 사삼 5.9 내지 8.9 중량% 및 지황 74.1 내지 94.1 중량%를 포함하는 것인, 약제학적 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 복합 추출물은 인삼 및 도라지로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 추가적으로 포함하는 것인, 약제학적 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 복합 추출물은 사삼 5.4 내지 8.2 중량%, 인삼 6.4 내지 9.6 중량% 및 지황 68.2 내지 88.2 중량%를 포함하는 것인, 약제학적 조성물.
  5. 제3항에 있어서, 복합 추출물은 사삼 5.0 내지 7.4 중량%, 지황 62.0 내지 82.0 중량% 및 도라지 13.0 내지 19.6 중량%를 포함하는 것인, 약제학적 조성물.
  6. 제3항에 있어서, 복합 추출물은 복령 및 산사로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 추가적으로 포함하는 것인, 약제학적 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 복합 추출물은 사삼 4.0 내지 6.0 중량%, 인삼 4.7 내지 7.1 중량%, 지황 50.2 내지 70.2 중량%, 복령 9.7 내지 14.5 중량%, 산사 0.9 내지 1.3 중량% 및 도라지 10.6 내지 15.8 중량%를 포함하는 것인, 약제학적 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 약제학적 조성물은 인플루엔자바이러스(Influenza virus), 코로나바이러스(Corona virus), 수포성구내염바이러스(Vesicular stomatitis virus) 및 뉴캐슬병바이러스(Newcastle disease virus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상에 대한 항바이러스, 또는 이를 원인균으로 하는 바이러스 감염증 예방 또는 치료 활성을 나타내는 것인, 약제학적 조성물.
  9. 사삼 및 지황 복합 추출물을 포함하는 선천성 면역 증진, 항바이러스, 또는 바이러스 감염증 개선용 건강기능식품.
  10. 제9항에 있어서, 복합 추출물은 사삼 5.9 내지 8.9 중량% 및 지황 74.1 내지 94.1 중량%를 포함하는 것인, 건강기능식품.
  11. 제9항에 있어서, 복합 추출물은 인삼 및 도라지로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 추가적으로 포함하는 것인, 건강기능식품.
  12. 제11항에 있어서, 복합 추출물은 사삼 5.4 내지 8.2 중량%, 인삼 6.4 내지 9.6 중량% 및 지황 68.2 내지 88.2 중량%를 포함하는 것인, 건강기능식품.
  13. 제11항에 있어서, 복합 추출물은 사삼 5.0 내지 7.4 중량%, 지황 62.0 내지 82.0 중량% 및 도라지 13.0 내지 19.6 중량%를 포함하는 것인, 건강기능식품.
  14. 제11항에 있어서, 복합 추출물은 복령 및 산사로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 추가적으로 포함하는 것인, 건강기능식품.
  15. 제14항에 있어서, 복합 추출물은 사삼 4.0 내지 6.0 중량%, 인삼 4.7 내지 7.1 중량%, 지황 50.2 내지 70.2 중량%, 복령 9.7 내지 14.5 중량%, 산사 0.9 내지 1.3 중량% 및 도라지 10.6 내지 15.8 중량%를 포함하는 것인, 건강기능식품.
  16. 제9항에 있어서, 건강기능식품은 인플루엔자바이러스(Influenza virus), 코로나바이러스(Corona virus), 수포성구내염바이러스(Vesicular stomatitis virus) 및 뉴캐슬병바이러스(Newcastle disease virus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상에 대한 항바이러스, 또는 이를 원인균으로 하는 바이러스 감염증 개선 활성을 나타내는 것인, 건강기능식품.
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