KR20220074757A - 난용성 캄토테신 화합물을 포함하는 나노 입자를 포함하는 암 치료용 약제학적 조성물 및 이의 병용요법 - Google Patents

난용성 캄토테신 화합물을 포함하는 나노 입자를 포함하는 암 치료용 약제학적 조성물 및 이의 병용요법 Download PDF

Info

Publication number
KR20220074757A
KR20220074757A KR1020210162582A KR20210162582A KR20220074757A KR 20220074757 A KR20220074757 A KR 20220074757A KR 1020210162582 A KR1020210162582 A KR 1020210162582A KR 20210162582 A KR20210162582 A KR 20210162582A KR 20220074757 A KR20220074757 A KR 20220074757A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cancer
group
camptothecin
tumor
snb
Prior art date
Application number
KR1020210162582A
Other languages
English (en)
Inventor
박영환
Original Assignee
주식회사 에스엔바이오사이언스
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 에스엔바이오사이언스 filed Critical 주식회사 에스엔바이오사이언스
Publication of KR20220074757A publication Critical patent/KR20220074757A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5138—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A61K9/5153—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery

Abstract

본 발명은 난용성 캄토테신계 화합물을 포함하는 나노입자의 암 치료용도 및 이를 이용한 항종양제와의 병용 투여 요법에 관한 것이다. 본 발명의 나노입자를 포함하는 약제학적 조성물은 항종양제와 병용시 시너지적인 암 치료 효과를 나타내는 바, 암 치료제 및 병용 요법 제제로서 용이하게 사용할 수 있다.

Description

난용성 캄토테신 화합물을 포함하는 나노 입자를 포함하는 암 치료용 약제학적 조성물 및 이의 병용요법{PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR TREATING CANCER COMPRISING NANOPARTICLE COMPRISING INSOLUBLE CAMPTOTHECIN COMPOUNDS AND COMBINATION THERAPY THEREOF}
본 특허출원은 2020년 11월 27일에 대한민국 특허청에 제출된 대한민국 특허출원 제10-2020-0163156호에 대하여 우선권을 주장하며, 상기 특허출원의 개시사항은 본 명세서에 참조로서 삽입된다.
본 발명은 난용성 캄토테신 화합물을 포함하는 나노 입자를 포함하는 암 치료용 약제학적 조성물 및 이의 병용요법에 관한 것이다.
암의 치료방법은 수술, 방사선 치료와 약물치료(항암화학요법 또는 항암제치료)로 구분되는데, 악성 종양의 경우 1차적 치료방법인 수술이 불가하여 항암화학요법(단독 또는 병용)을 선택하게 된다. 악성 종양의 화학요법에 사용되는 세포독성항암제로는 전세계적으로 DNA 토포이소머라제 저해제인 이리노테칸 (irinotecan)을 포함하는 캄토테신계 항암제, 항대사제 (antimetabolites)인 젬시타빈(Gemcitabine), 미세소관 (microtubule) 저해제인 파클리탁셀(Paclitaxel)이 사용되고 있다.
이리노테칸(Irinotecan)은 천연물 알칼로이드, 캄토테신의 반-합성 및 수용성 유사체 CPT-11로 알려져 있으며, 토포이소머라제에 의한 DNA의 풀림을 억제하여 DNA 복제를 예방함에 의해 세포 증식을 억제하는 작용을 한다. 이리노테칸은 현재 캄토사르TM (이리노테칸 염산염 주사제)와 같은 수용액으로서 제형화되어 시판되고 있다. 이리노테칸은 프로드러그(prodrug)형 항암제로서 체내에서 카르복실에스테라제 2(Carboxyesterase 2, CES2)에 의해 활성대사물인 SN-38로 변환되어 작용을 나타낸다. 활성형인 SN-38은 이리노테칸보다 100배 ~ 1,000배 가량 높은 항암활성을 가지나 체내 pH에서 불안정하고, 극도의 난용성으로 제제개발이 어렵다. 또한 이리노테칸은 체내에서 SN-38로의 변환비율 (conversion rate)이 2~8%로서 매우 낮고, 환자 간에 큰 편차(4배 이상)를 보여, 환자에 따른 정밀한 투여량 계산(mg/m2)이 필수적인 세포독성항암제로서 그 정확한 효과 또는 부작용을 예측할 수 없다는 단점이 있다. 상기 활성형의 SN-38은 매우 난용성의 물질로 일반적인 가용화의 방법으로 용해되지 않아 현재 많은 가용화 연구 및 개발이 진행중에 있다. 이리노테칸을 활성형인 SN-38로 변환시키는 카르복실에스테라제 2(CES2)는 다양한 종양조직에서 발현비율이 큰 편차를 나타낸다. CES2는 이리노테칸의 주 적응증인 소장 및 대장에서 가장 많이 발현되지만, 췌장암, 담낭암, 유방암, 폐암, 신장암, 전립선암 등에서는 CES2가 거의 발현되지 않는다. 따라서 활성형의 SN-38을 직접 투여할 수 있다면 CES2RK 거의 발현되지 않는 상기 종양조직에 대해서도 항암 효과를 발휘할 수 있을 것으로 기대된다.
한편, 젬시타빈은 유용한 항암제로서 특히 췌장암에는 현재 단일요법 1차 표준 치료제로 사용된다. 그러나, 종양억제 효능이 낮고, 암환자의 생존기간 연장 효과도 낮다. 또한 파클리탁셀이나 냅파클리탁셀(알부민 나노입자화 파클리탁셀) 등의 탁산계 항암제도 단일요법의 경우 종양에 따른 감수성이 달라, 환자마다 그 항암효과가 일정하지 않다는 한계점이 있다. 따라서 임상적으로 각 세포독성항암제 단독요법의 한계를 극복하고자, 약물전달기술을 개선하거나 작용기전이 다른 항암제와의 병용 등을 통해 약효를 증강시키고 안전성을 높이려는 연구가 활발히 이루어지고 있다.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
Marupudi NI et al. (2007). Paclitaxel: a review of adverse toxicities and novel delivery strategies. Expert Opin Drug Saf 6:609-21. Desai N et al. (2006). Increased antitumor activity, intratumor paclitaxel concentrations, and endothelial cell transport of cremophor-free, albumin-bound paclitaxel, ABI-007, compared with cremophor-based paclitaxel. Clin Cancer Res. 12:1317-24. Von Hoff DD, et al. (2013). Increased survival in pancreatic cancer with nab-paclitaxel plus gemcitabine. New England Journal of Medicine; 369: 1691-1703. Goldstein D, et al. (2014). Updated survival from a randomized phase III trial (MPACT) of nab-paclitaxel plus gemcitabine versus gemcitabine alone for patients (pts) with metastatic adenocarcinoma of the pancreas. Journal of Clinical Oncology; 32(suppl 3): Abstract #178. Conroy F, et al. (2011). FOLFIRINOX versus gemcitabine for metastatic pancreatic cancer. New England Journal of Medicine; 364: 1817-1825 Wang-Gillam A, Li et al. (2016). Nanoliposomal irinotecan with fluorouracil and folinic acid in metastatic pancreatic cancer after previous gemcitabine-based therapy (NAPOLI-1): a global, randomised, open-label, phase 3 trial. Lancet. 387(10018):545-557. Nakagawa et al., A dual c-Met and VEGFR-2 tyrosine kinase inhibitor promotes tumor regression and prolongs survival in mouse xenograft models. Cancer Sci. 2010 Jan;101(1):210-5 Sato et al., In vivo antitumour efficacy of MGI-114 (6-hydroxymethylacylfulvene, HMAF) in various human tumorxenograft models including several lung and gastric tumours. Eur J Cancer. 2001 Jul;37(11):1419-28 Gavine et al., Volitinib, a potent and highly selective c-Met inhibitor, effectively blocks c-Met signaling and growth in c-MET amplified gastric cancer patient-derived tumor xenograft models. Mol Oncol. 2015 Jan;9(1):323-33
일반적으로 화학항암제의 항종양효과가 낮은 것은 약물의 혈중체류시간이 짧을 뿐만 아니라, 종양조직으로의 선택적 약물 전달 효율이 낮고, 변이율이 높은 종양의 특성상 종양마다 약물에 대한 감수성이 크게 다르기 때문인 것으로 알려져 있다. 따라서, 본 발명자들은 항암활성이 높은 항암제를 종양조직에 효율적으로 전달할 뿐만 아니라, 서로 다른 작용기전의 항종양제를 병용하여 종양에 대한 감수성을 증가시켜 항종양 효과 (Efficacy)를 극대화시키고, 안전성 (Safety)은 향상된 병용요법을 개발하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과 항종양제제와 소수성 캄토테신 및 친수성 캄토테신을 포함하는 나노입자 제제를 병용하면 항종양 효과가 우수하게 나타남을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 항종양제와 병용투여되는 암 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 소수성 캄토테신계 화합물, 친수성 캄토테신계 화합물, 및 소수성 블록 및 친수성 블록으로 이루어진 양친매성 블록 공중합체를 포함하는 입자; 및 항종양제를 유효성분으로 포함하고, 암 치료를 위해 동시적, 개별적 또는 순차적으로 투여되는 약제학적 병용 제제를 제공하는 것이다.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 항종양제와 병용투여되는 암 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 약제학적 조성물은 소수성 캄토테신계 화합물, 친수성 캄토테신계 화합물, 및 소수성 블록 및 친수성 블록으로 이루어진 양친매성 블록 공중합체를 포함하는 입자를 유효성분으로 포함한다.
본 명세서에서 캄토테신(camptothecin)은 행운목(Camptotheca, Happy tree)의 껍질과 줄기에서 발견된 토포아이소머라제(topoisomerase) 억제제로서 전임상 단계에서는 매우 우수한 항암 효과를 나타내었으나, 낮은 용해도 때문에 사용할 수 없었던 약물이다. 따라서 많은 연구자들이 이의 용해도를 높이기 위한 캄토테신 유사체를 개발해 왔으며, 현재 이리노테칸(irinotecan), 토포테칸(topotecan), 벨로테칸(belotecan) 3 종류의 캄토테신 유도체가 승인되어 암에 대한 화학치료에 사용되고 있다.
본 명세서에서 용어, "소수성(hydrophobicity)"은 비극성 물질에서 나타나는 경향으로 물 분자에서 배제되어 응집되는 것을 말한다. 소수성 물질이 친수성 액체 내에 있을 때 마치 물을 두려워하듯 소수성 결합을 증가시키면서 소수성 물질들이 응집한다.
본 명세서에서 용어, "친수성(hydrophilicity)"은 주로 극성 물질에서 나타나는 경향으로 물과 같은 극성 용매에 강한 친화력을 가지고 잘 용해되는 성질을 의미한다. 예컨대 친수성 고분자 화합물이나 계면활성제의 미셀 콜로이드의 표면은 친수성이 강하다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 소수성 캄토테신계 화합물은 SN-38(7-에틸-10-히드록시캄토테신), 캄토테신, 10-히드록시캄토테신 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상이나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 다른 일 구현예에 있어서, 상기 친수성 캄토테신계 화합물은 이리노테칸, 토포테칸, 벨로테칸, 엑사테칸, 루르토테칸, 시노테칸, 루비테칸, 9-니트로캄토테신, 9-아미노캄토테신, 지마테칸, 카레니테신(Karenitecin), 실라테칸(Silatecan), 다이플로모테칸(diflomotecan), 엘로모테칸(Elomotecan), 이들의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 글루쿠로나이드 대사체, 및 상기 소수성 캄토테신계 화합물의 글루쿠로나이드 대사체로부터 선택되는 1종 이상이나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 언급된 친수성 캄토테신계 화합물에는 일반적으로 소수성 약물로 분류되는 종류의 화합물이 포함되어 있을 수 있으나, 상기 "친수성"은 본 발명의 입자를 구성하는 성분들 중에서 상술한 소수성 캄토테신계 화합물의 종류와 비교하여 상대적인 친수성을 의미하는 것으로 이해되어야 한다. 즉, 상기 친수성 캄토테신계 화합물은, 본 발명의 입자 내 포함되는 소수성 캄토테신계 화합물과 비교하여 상대적으로 친수성인 캄토테신계 화합물을 의미한다.
본 발명의 구체적인 구현예에 따르면, 본 발명의 입자를 이루는 상기 소수성 캄토테신계 화합물은 캄토테신, SN-38, 또는 이들의 혼합물일 수 있고, 상기 친수성 캄토테신계 화합물은 이리노테칸의 염산염, 토포테칸의 염산염, SN-38의 글루쿠로나이드 유사체이다.
본 명세서에서 용어, "공중합체(copolymer)"는 둘 이상의 서로 다른 단량체(monomer)들로부터 만들어진 고분자를 말한다. 예를 들어, 스타이렌과 아크릴로나이트릴을 같은 반응 용기 안에서 반응을 시키면, 두 단량체를 동시에 갖는 공중합체가 형성된다. "블록 공중합체(block copolymer)"는 한 단량체의 블록이 다른 단량체의 블록으로 연결되는 형태를 취하는 공중합체를 말한다. A 물질 블록 후 B 물질 블록이 이어지는 경우를 -[-AB-]- 라고 표현한다. 사슬이 오직 각각의 단량체의 한 개 가닥으로 구성되어 있으면 AB형이 되고, 중앙에 B블록이 있고 양 끝에 A블록이 존재하면 ABA형, 주사슬에 3가지의 다른 블록이 존재하면 ABC 형이라고 한다. 블록 공중합체는 주로 이온 중합에 의해 형성된다. 다른 공중합체와 다르게 이 블록 공중합체는 두 단량체로부터 만들어진 동종 중합체의 물리적 성질들을 많이 가진다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 입자를 구성하는 상기 양친매성 블록 공중합체는 A-B 또는 A-B-A 블록으로 이루어져 있다. 여기에서 상기 A는 친수성 고분자로 모노메톡시폴리에틸렌글리콜, 디메톡시폴리에틸렌 글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 폴리프로필렌글리콜, 모노메톡시폴리프로필렌글리콜, 폴리에틸렌옥사이드, 폴리아크릴산 등으로부터 선택되나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 상기 B는 소수성 고분자로 폴리락트산, 폴리-L-락타이드, 폴리-D-락타이드, 폴리-D,L-락타이드, 폴리(락타이드-코-글리콜라이드), 폴리글리콘산, 폴리글리콜라이드, 폴리락트산-글리콘산 공중합체, 폴리만델릭산, 폴리카프로락톤, 폴리디옥산-2-온, 폴리글루탐산, 폴리아스파라긴산, 폴리오르니틴, 폴리오르토에스터, 이들의 유도체, 또는 이로부터 선택된 1 이상의 화합물이나, 이에 한정되는 것은 아니며, 당업계에서 사용될 수 있는 양친매성 블록 공중합체를 이룰 수 있는 화합물이라면 제한 없이 사용할 수 있음은 당업자에게 자명하다.
본 발명의 구체적인 구현예에 있어서, 상기 양친매성 블록 공중합체는 mPEG-PDLLA (mPEG-Poly(D,L) Lactic Acid); PEG-PCL [poly(ethylene glycol)-b-poly(carprolactone)]; PEG-PLA [poly(ethylene glycol)-b-poly(lactic acid)]; mPEG-PGA [monomethoxy poly(ethylene glycol)-b-poly(glycolic acid)]; mPEG-PLGA [monomethoxy poly(ethylene glycol)-b-poly(lactide-co-glycolide)]; PEG-PBLA [poly(ethylene glycol)-b-poly(β-benzyl-L-aspartic acid)]; PEG-p(Glu) [poly(ethylene glycol)-b-poly(glutamic acid)]; PEG-p(Asp) [poly(ethylene glycol)-b-poly(aspartic acid)]; 및/또는 PEG-PLA-PEG [poly(ethylene glycol)-b-poly(lactic acid)-b-poly(ethylene glycol)]이다.
본 발명의 가장 구체적인 구현예에 따르면, 본 발명의 입자의 특성 및 제조방법은 본 출원인의 대한민국 등록특허 제10-2094543호에 상세히 기재되어 있으며, 상기 특허에 개시된 사항은 본 명세서에 참조로서 삽입된다.
상기 등록특허 또는 하기 실시예에 따라 제조된 소수성 캄토테신계 화합물로 SN-38을, 친수성 캄토테신계 화합물로 이리노테칸염산염을 포함하며, 양친매성 블록 공중합체로 mPEG-PDLLA를 포함하는 입자는 SNB-101로 명명되었다.
본 발명의 다른 구현예에 있어서, 본 발명의 입자를 구성하는 상기 소수성 캄토테신계 화합물과 상기 친수성 캄토테신계 화합물의 중량비는 1-10:1-10, 1-10:1-5, 1-10:1-3, 1-10:1, 1-5:1-10, 1-3:1-10, 1:1-10 이고, 구체적으로는 1-5:1-5, 1-5:1-3, 1-5:1, 1-3:1-5, 1:1-5 이며, 보다 구체적으로는 1-3:1-3, 1-3:1, 1:1-3 이나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 구체적인 구현예에 있어서, 상기 소수성 캄토테신계 화합물과, 상기 친수성 캄토테신계 화합물의 중량비는 1:1-10, 1:1-5, 1:1-3, 또는 1:1-2일 수 있고, 가장 구체적으로는 1:1.59 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 (a) 소수성 캄토테신계 화합물 및 친수성 캄토테신계 화합물의 합과, (b) 양친성 블록 공중합체의 중량비는 1:0.1-200, 1:0.5-200 1:1-200, 1:2-200, 1:5-200, 1:10-200, 1:50-200, 1:100-200, 1:150-200, 1:0.1-100, 1:0.5-100, 1:1-100, 1:2-100, 1:5-100, 1:10-100, 1:20-100, 1:50-100, 1:0.1-50, 1:0.5-50, 1:1-50, 1:5-50, 1:10-50, 1:20-50, 1:0.1-20, 1:0.5-20, 1:1-20, 1:5-20, 1:10-20, 1:0.1-10, 1:0.5-10, 또는 1:1-10 이나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 바로서, 두 수치 사이에 기재된 용어 '내지', '-', 또는 '~'는 앞뒤에 기재된 수치를 포함하는 상기 수치 사이 구간을 의미한다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기한 본 발명의 입자는 다음과 같은 방법에 의해 제조된다. 먼저 소수성 캄토테신(e.g. SN-38)을 친수성 캄토테신(e.g. 이리노테칸염산염)과 함께 유기용매에 넣고 교반하여 완전히 용해하고, 여기에 미리 유기용매에 용해시킨 양친매성 블록 공중합체(e.g. mPEG-PDLLA)를 첨가하면서 교반한다. 이 혼합액을 회전증발 감압건조기 또는 진공건조기로 건조하고, 잔류물에 수성용매(e.g. 증류수, PBS)를 넣어 초음파세척기에 초음파를 가하면 본 발명의 입자가 제조된다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 유기용매는 C1 내지 C5의 알코올, (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, n-부탄올, 이소-프로판올, 1-펜탄올, 2-부톡시에탄올, 이소부틸알콜 등) 알킬아세테이트, 아세톤, 아세토니트릴, 클로르포름, 벤젠, 톨루엔, 자일렌, 아세톤, 플루오로알칸, 펜탄, 헥산, 2,2,4-트리메틸펜탄, 데칸, 사이클로헥산, 사이클로펜탄, 디이소부틸렌, 1-펜텐, 1-클로로부탄, 1-클로로펜탄, 디이소프로필 에테르, 2-클로로프로판, 1-클로로프로판, 클로로벤젠, 벤젠, 디에틸 에테르, 디에틸 설파이드, 디클로로메탄, 1,2-디클로로에탄, 어닐린, 디에틸아민, 에테르, 사염화탄소, THF(Tetrahydrofuran) 또는 이들의 혼합용매이나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약제학적 조성물은 항종양제를 포함한다.
상기 항종양제는 탁산(taxane) 계열 항암제, 알부민이 결합된 탁산 계열 항암제, 혈관내피세포성장인자(vascular endothelial growth factor: VEGF) 억제제 및 젬시타빈(gemcitabine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함한다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 탁산계열 항암제는 파클리탁셀, 도세탁셀, 라로탁셀, 카바지탁셀, 및 이들의 약제학적으로 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 알부민이 결합된 탁산 계열 항암제는 알부민-결합 파클리탁셀(알부민 나노입자 파클리탁셀 또는 냅파클리탁셀), 및 알부민-결합 도세탁셀(알부민 나노입자 도세탁셀 또는 냅도세탁셀)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 혈관내피세포성장인자(vascular endothelial growth factor: VEGF) 억제제는 베바시주맙(bevacizumab), 라니비주맙(ranibizumab) 및 애플리버셉트(aflibercept)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 구체적인 구현예에 있어서, 상기 소수성 캄토테신계 화합물은 SN-38이고, 상기 친수성 캄토테신계 화합물은 이리노테칸 염산염이며, 상기 양친매성 블록 공중합체는 mPEG-PDLLA (mPEG-Poly(D,L) Lactic Acid)이다.
상기 구체적인 구현예에 따라 제조된 본 발명의 입자는 본 발명자들에SNB-101로 명명되었다.
상기 SN-38 및 이리노테칸 염산염의 안정한 나노입자 제형(SNB-101)은 극도의 난용성인 SN-38을 가용화 및 제제화한 제형으로서 항암효과가 우수하나 용해도가 낮아 활용할 수 없었던 SN-38을 직접 투여할 수 있어, 카르복실에스터라제가 부재한 췌장암, 난소암, 폐암, 유방암 등에 대하여 항암효과를 나타낼 수 있어, 신규 적응증으로서의 효과도 기대할 수 있다.
본 발명의 구체적인 구현예에 따른 상기 본 발명의 약제학적 조성물의 유효성분인 입자는 SN-38을 기준으로 입자 조성물에 대하여 0.1 ~ 1 mg/ml 포함하는 것이 바람직하고, 0.2~1.0 mg/ml인 것이 보다 바람직하다. 또한, 이리노테칸염산염은 상기 입자 조성물에 대하여 0.1 ~ 2 mg/ml인 것이 바람직하고, 0.2~1.6 mg/ml인 것이 보다 바람직하다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 입자는 이중 구조를 갖는다. 상기 이중 구조는 상기 친수성 캄토테신계 화합물과 소수성 캄토테신계 화합물이 이루는 내부 구조; 및 상기 양친매성 블록 공중합체가 이루는 외부 구조로 이루어진다.
본 발명의 상기 이중 구조를 가진 입자의 제조과정에 있어서, 먼저 친수성 캄토테신계 화합물과 소수성 캄토테신계 화합물은 유기용매에서 혼합 및 용해되고, 상기 혼합물에 유기용매에 용해된 양친매성 고분자(양친매성 블록 공중합체)를 첨가하면서 교반한 후 건조한다. 상기 건조물을 수성 용매에서 초음파 처리 등 유화시키면 수분산성 나노 입자가 형성된다.
블록 친수성 블록과 소수성 블록이 특정 비율로 결합된 양친매성 블록 공중합체는 수용액 상에서 자가 조립하여 미셀과 유사한 수분산성 입자를 형성하는 것으로 알려져 있으므로, 본 발명의 입자는 상술한 친수성 캄토테신계 화합물과 소수성 캄토테신계 화합물을 수분산성 입자의 내부에 포함하고, 상기 양친매성 블록 공중합체는 외부의 쉘(shell)을 이룰 것으로 추정된다. 보다 구체적으로는, 본 발명의 수분산성 입자의 구조에 있어서, 상기 양친매성 블록 공중합체 중 소수성 블록은 비교적 소수성인, 캄토테신계 화합물들이 이루는 내부 구조 쪽을 향하고, 친수성 블록은 외부의 수성용매 쪽을 향하여 쉘을 이룰 것으로 추정된다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 본 발명의 이중 구조의 수분산성 입자는 수용액에 분산하였을 때 자발적으로 입자를 형성하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 구현예에 있어서, 상기 입자의 평균 지름은 2 ~ 200 nm이다. 본 발명과 같이 제조된 입자의 크기가 200 nm 이하인 경우 체내의 세망내피계(RES system)의 비선택적 제거를 회피할 수 있으므로 200 nm 이하의 균질한 입자크기를 가진 입자를 제조하는 것이 바람직하다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 상기 수분산성 입자는 트레할로스, 만니톨과 같은 동결건조보호제와 혼합된 후 동결건조 될 수 있다.
본 발명에 따른 상기 입자의 평균 지름(입자크기)는 약 200 nm 이하로서, 종양조직의 특징인 증진된 침투성 및 보유 효과(EPR; Enhanced Permeation & Retention)를 이용하여 상기 약물의 종양조직으로의 전달을 극대화할 수 있다. EPR은 혈관계(특히 모세관)의 정상적인 통합성이 손상되어 나노 크기의 입자 전달체 (나노파티클, 리포좀, 미셀)와 같은 입자체가 모세관으로부터 누설되어 종양부위에 전달체가 침적되도록 한다.
따라서, 이러한 본 발명의 입자(SNB-101)의 특성으로 인해 SNB-101에 함유된 SN-38 및 이리노테칸은 혈중에 장시간 존재 가능하여, 약물이 종양조직으로 축적되는 것을 촉진시킬 수 있다. 따라서, 종양내 암세포에 약물의 노출량은 늘리고, 정상조직에 대한 약물노출은 감소시킴으로써, 안전성 (Safety)을 향상시켜, 약물의 최대내약용량 (Maximum Tolerated Dose; MTD)도 증가시킬 수 있을 것으로 예상된다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 상기 일 양태에 따른 약제학적 조성물은 암의 치료용이다. 상기 암은 위암, 난소암, 자궁암, 자궁경부암, 소세포폐암, 비소세포폐암, 췌장암, 유방암, 식도암, 망막모세포종, 구강암, 침샘암, 후두암, 인두암, 직장암, 결장암, 대장암(직결장암), 신장암, 전립선암, 흑색종, 간암, 담낭 및 기타 담도암, 갑상선암, 방광암, 뇌 및 중추신경계암, 골종양, 피부암, 비호지킨성 및 호지킨성 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택되나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 뇌암은 신경교종, 뇌수막종, 신경초종, 뇌하수체종양, 전이성 뇌종양, 두개저 종양일 수 있다. 상기 신경교종은 성상세포종(astrocytoma), 핍지교종(oligodendroglioma), 상의세포종(ependymoma) 또는 이들의 혼합형을 포함한다.
본 발명의 구체적인 구현예에 있어서, 상기 약제학적 조성물의 치료 대상 질병인 암은 췌장암, 위암, 유방암, 폐암, 대장암, 또는 이들의 조합이다.
본 발명의 입자, 또는 이를 포함하는 조성물이 약제학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함할 수 있다. 상기 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시 벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.
본 발명의 구체적인 구현예에 있어서, 본 발명의 약제학적 조성물은 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 글리세린, 트레할로스, 폴리에틸렌글리콜류의 부형제, 및 사이클로덱스트린류(알파, 베타, 감마-사이클로덱스트린, 히드록시 사이클로덱스트린 내지 사이클로덱스트린의 유도체 등)의 부형제를 추가적으로 포함한다. 상기 부형제는 본 약제학적 조성물의 유효성분인 입자에 첨가되어 동결보호제 또는 삼투압조절제로 기능하며, 동결건조, 용매증발법 등으로 인해 제형화 된다.
본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구의 경로로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 투여, 동맥 내 투여, 직장내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 근육내 투여, 비강내 투여, 점막내 투여, 경막 내 투여, 복강내 투여, 안구내 투여 등으로 투여할 수 있으며, 구체적으로는 정맥내 투여할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 본 발명의 구체적인 구현예에 따르면, 본 발명의 약제학적 조성물의 1일 투여량은 0.001-100 ㎎/㎏이다.
본 발명의 구체적인 구현예에 있어서, 본 발명의 SNB-101에 포함되는 SN-38 및 이리노테칸 염산염의 투여량 및 투여횟수는 1일당 SN-38을 기준으로 1~5 mg/m2 투여할 수 있고, 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 예를 들면, 주사제의 경우 인간 환자(체중 60kg 기준; 체표면적 1.67 m2)에게 1일당 1 ~ 100 mg, 구체적으로는 20 mg ~ 85 mg, 보다 구체적으로는 30 mg ~ 85 mg을 정맥주사에 의하여 1회 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 이들 투여량 및 투여 횟수에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화 함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 암의 치료 효과를 가지는 공지의 화합물 또는 약제학적 조성물과 병행하여 투여할 수 있다.
본 발명의 일구현예에 있어서, 상기 공지의 화합물 또는 약제학적 조성물은 탁산(taxane) 계열 항암제, 알부민이 결합된 탁산 계열 항암제, 혈관내피세포성장인자(vascular endothelial growth factor: VEGF) 억제제 및 젬시타빈(gemcitabine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함한다.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 투여가 필요한 대상체(subject)에게 (a) 소수성 캄토테신계 화합물, 친수성 캄토테신계 화합물, 및 소수성 블록 및 친수성 블록으로 이루어진 양친매성 블록 공중합체를 포함하는 입자를 포함하는 제1약제학적 조성물을 (b) 항종양제를 유효성분으로 포함하는 제2약제학적 조성물 또는 항암요법과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는 암의 치료방법을 제공한다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 제1약제학적 조성물과 상기 제2약제학적 조성물은 동시적, 개별적 또는 순차적으로 투여된다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 제1약제학적 조성물과 제2약제학적 조성물은 복합제제 또는 단일제제로 투여된다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 항종양 요법은 수술요법, 방사선 요법, 또는 이들의 조합을 포함한다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 상기 암은 위암, 난소암, 자궁암, 자궁경부암, 소세포폐암, 비소세포폐암, 췌장암, 유방암, 식도암, 망막모세포종, 구강암, 침샘암, 후두암, 인두암, 직장암, 결장암, 대장암(직결장암), 신장암, 전립선암, 흑색종, 간암, 담낭 및 기타 담도암, 갑상선암, 방광암, 뇌암, 중추신경계암, 골종양, 피부암, 비호지킨성 및 호지킨성 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택되나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 뇌암은 신경교종, 뇌수막종, 신경초종, 뇌하수체종양, 전이성 뇌종양, 두개저 종양일 수 있다. 상기 신경교종은 성상세포종(astrocytoma), 핍지교종(oligodendroglioma), 상의세포종(ependymoma) 또는 이들의 혼합형을 포함한다.
본 발명의 구체적인 구현예에 있어서, 상기 암은 췌장암, 위암, 유방암, 폐암, 대장암, 또는 이들의 조합이다.
본 발명의 다른 일 양태에 따르면, 본 발명은 소수성 캄토테신계 화합물, 친수성 캄토테신계 화합물, 및 소수성 블록 및 친수성 블록으로 이루어진 양친매성 블록 공중합체를 포함하는 입자; 및 항종양제를 유효성분으로 포함하는 약제학적 병용제제를 제공한다.
상기 약제학적 병용제제는 암 치료를 위해 각 유효성분이 동시적, 개별적 또는 순차적으로 투여된다.
본 발명의 또 다른 일 양태에 따르면, 본 발명은 소수성 캄토테신계 화합물, 친수성 캄토테신계 화합물, 및 소수성 블록 및 친수성 블록으로 이루어진 양친매성 블록 공중합체를 포함하는 입자를 제1약제학적 조성물로 포함하고; 항종양제를 제2약제학적 조성물로 포함하는 암 치료용 키트를 제공한다.
상기 암 치료용 키트의 제1약제학적 조성물과 제2약제학적 조성물은 암의 치료를 위해 동시적, 개별적 또는 순차적으로 투여된다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 제1약제학적 조성물과 제2약제학적 조성물은 복합제제 또는 단일제제로 투여된다.
본 명세서에서 사용된 용어, "투여" 또는 "투여하다"는 본 발명의 조성물의 치료적 유효량을 암이 발병한 대상체(개체)에 직접적으로 투여함으로써 대상체의 체내에서 동일한 양이 형성되도록 하는 것을 말한다.
상기 조성물의 "치료적 유효량"은 조성물을 투여하고자 하는 대상체에게 치료적 또는 예방적 효과를 제공하기에 충분한 조성물의 함량을 의미하며, 이에 "예방적 유효량"을 포함하는 의미이다. 또한, 본 명세서에서 사용된 용어, "대상체"는 제한 없이 인간, 마우스, 랫트, 기니아 피그, 개, 고양이, 말, 소, 돼지, 원숭이, 침팬지, 비비(baboon) 또는 붉은털 원숭이를 포함한다. 구체적으로는, 본 발명의 대상체는 인간이다.
본 발명의 상기 암의 치료방법, 약제학적 병용제제 및 암 치료용 키트는 본 발명의 일 양태인 암의 치료용 약제학적 조성물과 동일한 유효성분을 포함하며, 병용제제로서 항종양제를 사용하는 발명이므로, 중복되는 내용에 대해서는 상술한 본 발명의 일 양태에 관하여 기재된 내용이 동일하게 적용된다.
본 발명은 난용성 캄토테신계 화합물을 포함하는 나노입자의 암 치료용도 및 이를 이용한 탁산계 항종양제와의 병용 투여 요법에 관한 것이다. 본 발명의 나노입자를 포함하는 약제학적 조성물은 탁산계 항종양제와 병용시 시너지적인 암 치료 효과를 나타내는 바, 암 치료제 및 병용 요법 제제로서 용이하게 사용할 수 있다.
도 1은 AsPC-1 피하 이식 췌장암 모델 마우스에서 투여 후 마우스 체중의 변화를 나타낸 도이다.
도 2는 AsPC-1 피하 이식 췌장암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양억제효과를 종양의 체적 변화를 통해 나타낸 도이다.
도 3은 AsPC-1 피하 이식 췌장암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양억제효과를 종양의 무게 변화를 통해 나타낸 도이다.
도 4는 AsPC-1 피하 이식 췌장암 모델 마우스에서 시험물질을 처리한 후 22일째에 종양을 적출한 사진이다.
도 5는 Hs746T 피하 이식 위암 모델 마우스에서 투여 후 마우스 체중의 변화를 나타낸 도이다.
도 6은 Hs746T 피하 이식 위암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양억제효과를 종양의 체적 변화를 통해 나타낸 도이다.
도 7은 Hs746T 피하 이식 위암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양억제효과를 종양의 무게 변화를 통해 나타낸 도이다.
도 8은 Hs746T 피하 이식 위암 모델 마우스에서 시험물질을 처리한 후 22일째에 종양을 적출한 사진이다.
도 9는 MDA-MB231 피하 이식 유방암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양 억제 효과를 종양의 체적 변화를 통해 나타낸 도이다.
도 10은 MDA-MB231 피하 이식 유방암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 마우스 체중의 변화를 나타낸 도이다.
도 11은 A549 피하 이식 폐암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양 억제 효과를 종양의 체적 변화를 통해 나타낸 도이다.
도 12는 A549 피하 이식 폐암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 마우스 체중의 변화를 나타낸 도이다.
도 13은 HT-29 피하 이식 대장암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양 부피 변화를 나타낸 도이다.
도 14는 NCI-H69 피하 이식 소세포폐암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양 부피 변화를 나타낸 도이다.
도 15는 NCI-H69 피하 이식 소세포폐암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양 사진을 나타낸 도이다.
도 16은 HCT116 피하 이식 대장암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양 부피 변화를 나타낸 도이다.
도 17은 HCT116 피하 이식 대장암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양 사진을 나타낸 도이다.
도 18은 A549 피하 이식 비소세포폐암 모델 마우스에서 시험물질 처리에 의한 종양 부피 변화를 나타낸 도이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예
본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 "%"는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (중량/중량) %, 고체/액체는 (중량/부피) %, 그리고 액체/액체는 (부피/부피) %이다.
실시예 1: 본 발명의 나노입자(SNB-101)의 제조
본 발명자들은 소수성 캄토테신으로 SN-38(7-에틸-10-히드록시캄토테신) 20mg 과 친수성 캄토테신으로 이리노테칸 염산염(삼수화물) 30mg 을 둥근바닥 플라스크에 넣은 후, 아세토니트릴 10ml 을 첨가하고 세척용 초음파기 (sonicator) 에서 초음파를 가하여 두 약물을 완전히 용해시켰다. 다음으로 메톡시폴리에틸렌글리콜-폴리(D,L,락트산) [mPEG-Poly(D,L) Lactic Acid] (mPEG-PDLLA) 100mg 을 둥근바닥 플라스크에 칭량하고 유기용매(에탄올-아세토니트릴 50:50 v/v 혼합액) 10ml 을 첨가한 후 30 분간 교반하여 완전히 용해시켰다. 완전히 용해된 mPEG-PDLLA 용액을, SN-38 및 이리노테칸 염산염이 용해된 약물 용액에 천천히 수회로 나누어서 매회 10~15초 동안 교반하면서 첨가하였다. 위 혼합용액을 둥근바닥 플라스크에서 혼합한 후 회전증발 감압건조기 (rotary evaporator)에서 건조함으로써 유기용매를 완전히 제거하여 얇은 필름을 수득하였다. 여기에 멸균 증류수 20ml 을 첨가한 후 초음파 세척기에서 초음파를 가하여 약물 필름을 완전히 용해시켰다.
제조된 이중 구조의 나노 입자의 평균 입자지름은 시료를 증류수로 희석하여 SN-38로서 1 mg/ml로 조제한 후 맬번사 (Malvern, UK)의 Zetasizer Nano System을 이용하여 동적광산란법 (dynamic light scattering)으로 강도 평균 입자 지름 (intensity weight-averaged diameter)을 측정하였다.
다음으로, 동결건조보호제로서 트레할로스 (Trehalose) 200mg 과 만니톨 (D-Mannitol) 300mg 을 멸균 증류수 20ml 에 넣고 교반을 진행하여 완전히 용해시켰다.
최종적으로, 혼합약물의 나노 입자 용액에 동결건조보호제 용액 전부를 교반하면서 매회 10~15초를 거쳐 전부 첨가하였다. 최종 혼합 용액은 0.22 μm의 셀룰로즈 아세테이트 멤브레인 필터로 여과하고 포장용 바이알에 충전하였다. 충전이 완료된 바이알을 동결건조한 후 건조 분말 또는 케이크 형태의 완제품 (SNB-101로 명명함)을 얻었다.
실시예 2: 본 발명의 나노 입자(SNB-101)의 췌장암 병용 투여 효과
2-1. 실험 재료
시험에 사용한 물질로서 5% 포도당 주사액, 이리노테칸 염산염(Irinotecan HCl; 캄토프주TM, CJ헬스케어, 대한민국), 냅파클리탁셀 (Nab-paclitaxel; 아브락산TM, Abraxis BioScience, LLC), 및 SN-38과 이리노테칸 염산염을 포함하는 나노입자 조성물 (SNB-101로 명명함)을 이용하였다. 상기 이리노테칸염산염(캄토프주TM)는 100 mg/5 mL이며 CJ 헬스케어사에서 구입하였다. 아브락산은 Abraxis BioScience, LLC (미국)에서 구입하였으며, 100 mg/vial의 동결건조주사제인 것을 이용하였다.
본 발명에서 사용된 상기 SN-38 및 이리노테칸 염산염을 포함하는 나노입자 조성물(SNB-101)은 주사제로서 안정한 나노입자 제형이고, 대한민국 등록특허 제10-2094543호에 그 제조방법이 소개되어 있다. 상기 SNB-101의 정맥주사제는 바이알 당 주성분의 양은 SN-38 10 mg, 이리노테칸염산염 15.9 mg 이며, 조제방법은 9.64 mL 5% 덱스트로스 주사액 USP 로 희석시킬 수 있고 90분의 시간에 걸쳐 주입될 수 있다.
2-2. 시험방법
1) AsPC-1 세포배양
췌장암의 이종이식모델을 위한 췌장암 세포주로서는 AsPC-1을 사용하였다. AsPC-1 세포주는 공격적인 세포주로서, 젬시타빈에 저항성을 가지는 것으로 알려져 있다. AsPC-1 세포는 10% fetal bovine serum (FBS), 1% penicillin/streptomycin이 포함된 Roswell Park Memorial Institute medium (RPMI-1640)을 사용하여 175 cm2 Flask에서 배양하였다. FBS, RPMI-1640, Penicillin-Streptomycin은 ATCC (Manassas, VA)에서 구입하여 실험에 사용하였으며, 세포는 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. 배양된 각각의 암세포는 일주일에 2-3 회 refeeding하였고 인산염완충액 (PBS; phosphate buffered saline, pH 7.4)로 세척한 후 0.05% trypsin-0.02% EDTA로 부착된 세포를 분리하였다. 분리된 세포는 원심분리(3 분, 1500 rpm)하여 집적된 암세포에 배지를 넣고, 피펫으로 골고루 분산되도록 잘 혼합하여 계대배양 하면서 실험에 사용하였다.
2) 췌장암 이종이식 마우스 동물모델의 유도
본 시험에 사용한 동물은 이종 이식 동물모델에 널리 사용되고 있는 BALB/c nu/nu 수컷 마우스 (약 5주령, 평균체중은 19g±20%)을 사용하였으며, 입수 후 약 5-7일의 순화과정을 거쳤다. 접종 당일 배양된 암세포는 인산염완충액 (PBS, pH 7.4)로 세척한 후 0.05% Trypsin-0.02% EDTA로 부착된 세포를 분리하였다. 분리된 세포는 원심분리(3 분, 1500 rpm)하여 PBS로 희석 후 마리당 5 x 106 cells/0.2 mL 되도록 마우스 오른쪽 옆구리에 피하 주사하였고, 주사부위에서 종양세포 현탁액이 유출되지 않는 것을 확인하였다.
군 구성 및 투여용량 설정
마우스 군 분리는 췌장암 종양체적 (tumor volume) 평균 200±20 mm3을 근거로 군 분리를 시행하였으며, 대조군 및 시험군의 구성과 투여용량은 다음과 같았다.
군 대조군/시험군 용량 (mg/kg/day) 마리수
G1 비히클군 5% 포도당 주사액 - 11
G2 양성대조군 1 냅파클리탁셀 5 11
G3 양성대조군 2 이리노테칸염산염 50 11
G4 양성대조군 3 냅파클리탁셀 + 이리노테칸염산염 5 + 50 11
G5 시험군 1(저용량군) SNB-101 10/15.9 * 11
G6 시험군 2(고용량군) SNB-101 20/31.8 * 11
G7 시험군 3(병용 저용량군) 냅파클리탁셀 + SNB-101 5 + 10/15.9 * 11
G8 시험군 4
(병용 고용량군)		 냅파클리탁셀 + SNB-101 5 + 20/31.8 * 11
* SNB-101의 SN-38/이리노테칸 염산염으로서의 용량 표기
3) 투여 부위 및 투여방법
시험물질은 투여 직전의 체중을 근거로 개체 별 투여량을 환산하여 미정맥투여(Intravenous, i.v.)하였다. 시험물질은 주 1 회 (0 일, 7 일, 14일, 17일 및 21 일), 총 5 회 투여하였으며, 22 일에 부검하였다.
4) 관찰 및 검사항목
시험기간 중 1일 1회 임상증상 관찰하였으며, 약물 투여와 함께 종양부피는 주 3 회 측정하였다. 시험 종료 후, 동물은 이소플루란(Isoflurane)으로 마취 후 방혈한 뒤, 개체 별로 종양 조직을 적출하였다. 적출한 종양은 중량 측정 후 사진 촬영하였다. 종양체적은 버니어캘리퍼스(Mitutoyo Corp., Model No.: CD-15CPX, Japan)를 사용하여 종양의 장축 및 단축 크기를 측정하고 하기 식 1의 계산식에 따라 종양체적 (tumor volume)을 산출하였다.
식 1
종양체적 (tumor volume) = (단축)2 x 장축 x 0.5
5) 통계분석
시험결과는 상용 통계 프로그램(IBM SPSS statistics version 19.0)을 사용하여 Mann-Whitney 분석을 통해 데이터를 통계 분석하였다.
2-3. 시험결과
1) 체중측정 결과
시험물질 투여 22 일째(부검일)에 체중을 측정한 결과는 표 2 및 도 1에 나타내었다.
Group 0 days 3 days 7 days 11 day 14 days 17 days 21 days 22 days
G1 21.5 ± 1.1 22.3 ± 1.0 22.3 ± 1.1 23.6 ± 1.1 23.5 ± 1.3 24.2 ± 1.1 24.1 ± 1.0 24.1 ± 1.0
G2 21.9 ± 1.0 23.0 ± 1.0 22.9 ± 0.7 24.0 ± 0.9 24.1 ± 0.9 24.6 ± 1.0 24.5 ± 1.0 24.2 ± 1.1
G3 21.3 ± 0.9 22.1 ± 1.1 22.8 ± 1.1 22.9 ± 1.2 23.4 ± 1.2 22.9 ± 1.2 22.6 ± 1.2 21.7 ± 1.3
G4 21.9 ± 0.7 22.5 ± 0.9 22.7 ± 1.0 23.3 ± 1.2 23.9 ± 1.2 23.6 ± 1.1 23.1 ± 1.1 21.7 ± 1.2
G5 21.6 ± 1.5 22.2 ± 1.6 22.1 ± 1.5 23.0 ± 1.4 23.4 ± 1.5 23.5 ± 1.7 22.8 ± 1.6 21.7 ± 1.5
G6 21.2 ± 1.2 21.3 ± 1.3 22.1 ± 1.1 22.1 ± 1.2 23.0 ± 1.1 22.4 ± 1.2 22.1 ± 1.0 20.4 ± 0.9
G7 21.5 ± 1.1 22.2 ± 0.9 22.5 ± 0.8 23.0 ± 1.0 23.4 ± 1.0 23.2 ± 1.2 22.7 ± 1.2 21.1 ± 1.2
G8 21.2 ± 1.4 21.0 ± 1.8 21.8 ± 1.8 22.1 ± 1.7 22.9 ± 1.5 22.0 ± 1.4 21.4 ± 1.2 19.9 ± 1.1
G1 (비히클군)에 비해 모든 시험물질 투여군(G3-G8)에서 각 10.0%, 10.0%, 10.0%, 15.4%, 12.4% 및 17.4% 로서, 체중감소율이 20%를 초과하지 않아 위독한 최저체중에 이르지 않은 것으로 판단되었다(도 1).
2) 종양 부피 측정결과
췌장암 종양 부피 측정결과는 하기 표 3 및 도 2에 나타내었다.
Group 0 day 3 days 7 days 9 days 14 day 17 days 21 days 22 days
G1 208.1 ±
56.5		 249.4 ±
57.1		 370.4 ±
67.8		 457.9 ±
94.4		 594.4 ± 132.0 705.3 ± 169.2 843.1 ± 201.8 906.7 ± 210.9
G2 202.3 ±53.8 237.0 ±
39.6		 346.3 ±
74.9		 467.9 ±
117.4		 614.7 ± 163.6 701.8 ± 213.2 837.7 ± 253.2 895.2 ± 276.6
G3 205.0 ±50.2 244.2 ±
62.6		 349.5 ± 116.4 423.3 ± 100.8 513.3 ± 155.9 599.0 ± 178.5 681.0 ± 183.8 693.8 ± 180.5
G4 206.8 ±48.5 238.5 ±
65.7		 316.7 ±
87.7		 383.2 ± 119.1 472.2 ± 136.3 556.4 ± 165.0 602.0 ± 180.8 605.0 ± 164.3
G5 203.4 ±40.5 222.8 ±
33.0		 302.8 ±
61.9		 389.9 ±
77.5		 473.9 ±
79.8		 525.2 ±
88.1		 618.3 ± 115.8 628.0 ± 108.5
G6 202.3 ±39.8 239.0 ±
55.2		 323.9 ±
93.9		 347.3 ± 121.2 477.8 ± 162.9 522.3 ± 178.8 572.4 ± 181.8 558.9 ± 186.8
G7 203.5 ±41.2 243.2 ±
41.9		 325.2 ±
63.6		 371.9 ±
94.0		 486.2 ± 128.8 540.5 ± 122.6 577.0 ± 160.8 590.5 ± 153.1
G8 204.4 ±
42.7		 229.9 ±
52.8		 277.6 ±
71.4		 289.9 ±
75.6		 379.8 ±
87.0		 412.1 ±
96.1		 445.6 ±
93.7		 430.0 ±
93.6
췌장암 종양의 부피는 비히클군 (G1)과 냅파클리탁셀 단독투여군 (G2; 5 mg/kg)에서 군 분리 후 22 일까지 지속적으로 증가하였으며, 종양 성장률은 다른 군보다 높게 나타났다.
비히클군에 비해 냅파클리탁셀+SNB-101 (고용량) 병용투여군 (G8)에서 7 일째부터 종양 부피가 유의하게 감소하였고, SNB-101 (저, 고용량) 단독투여군(G5, G6)과 냅파클리탁셀+SNB-101 (고용량) 병용투여군(G8)은 17 일째부터 22 일째까지 비히클군보다 모두 유의하게 감소하였다 (p<0.05).
22 일째에 냅파클리탁셀+이리노테칸 염산염 병용투여군(G4)은 냅파클리탁셀 단독투여군 (G2)보다 32.4% 유의하게 감소하였고, 이리노테칸 염산염 단독투여군 (G3)보다 12.8% 감소하였으나 통계학적으로 유의한 차이는 관찰되지 않았다 (p>0.05).
SNB-101 (저, 고용량) 단독투여군간 비교 (G5 vs. G6)에서는 고용량 단독 투여군(G6)이 저용량 단독 투여군(G5)보다 11.0% 유의하게 감소하여 SNB-101의 췌장암 종양억제 효과가 용량 의존적임을 보여주었다 (10/15.9 mg/kg 대 20/31.8 mg/kg as SN-38/Irinotecan HCl).
한편, 냅파클리탁셀 단독 (G2) 혹은 SNB-101 (저, 고용량) 단독투여군 (G5, G6)과 냅파클리탁셀 +SNB-101 (저, 고용량) 병용투여군 (G7, G8)과의 비교에서는 두 병용투여군 모두 각각의 단독투여군보다도 더 높은 종양성장억제 효과를 보였다 (p<0.05, p<0.01). 냅파클리탁셀+SNB-101(저, 고용량) 군간(G7, G8)의 비교에서는 SNB-101의 용량증가에 따라 종양성장 억제효과도 통계적으로 유의하게 증가하였다 (p<0.05).
한편, 냅파클리탁셀 (5mg/kg) 단독(G2)으로는 종양억제효과를 확인할 수 없었으나, 냅파클리탁셀 +SNB-101 고용량군 (G8) (20/31.9 mg/kg as SN-38/irinotecan HCl)의 경우, SNB-101 고용량 단독투여군(G6) 자체의 종양억제효과 (38.4%)보다도 더욱 높은 종양 성장억제효과 (52.6%)를 관찰할 수 있었다. 또한, 냅파클리탁셀+SNB-101 고용량군 (G8)은 냅파클리탁셀+이리노테칸 염산염 병용투여군 (G4)과 비교시에도 통계적으로 유의한 수준의 우수한 종양 성장억제효과 (29.5%)를 보여주었다 (p<0.05).
이러한 결과는 냅파클리탁셀과 SNB-101과 병용투여시 췌장 종양 성장을 억제하는데 있어서 상승적 (synergistic) 효과를 나타낼 수 있음을 보여준다.
3) 종양 무게 측정 결과
종양 무게를 측정한 결과는 하기 표 4 및 도 3에 나타내었다.
Group Tumor weight (g)
G1 0.623 ± 0.117
G2 0.636 ± 0.150
G3 0.489 ± 0.101
G4 0.440 ± 0.096
G5 0.474 ± 0.102
G6 0.379 ± 0.112
G7 0.431 ± 0.097
G8 0.310 ± 0.050
상기 표 4 및 도 3에 나타낸 바와 같이, 비처리군(비히클군, G1)의 종양 무게는 평균 0.62±0.11 g, 냅파클리탁셀 처리군(G2)의 종양 무게는 0.64±0.15 g, SNB-101 (저, 고용량) 단독 투여군(G5, G6)은 각각 0.47±0.10g, 0.38 ± 0.11g 이었다. 또한, 냅파클리탁셀+SNB-101 (저, 고용량) 병용투여군(G7, G8)의 종양무게는 각각 0.43±0.10, 0.31±0.05g으로서 병용투여군은 냅파클리탁셀 단독투여군(G2)보다 50 % 이상, SNB-101 (저, 고용량) 단독투여군(G5, G6)보다는 10~22.5% 이상의 종양억제효과를 나타냈다. 상기 결과로부터 냅파클리탁셀과 SNB-101은 췌장암 치료요법에 있어 효과가 우수한 병용 투여 요법으로서의 가능성이 있음을 확인하였다.
냅파클리탁셀+이리노테칸 염산염 병용투여군(G4)은 냅파클리탁셀 단독 투여군(G2)보다 30.8% 유의하게 감소하였고, SNB-101 (저, 고용량) 단독 투여군간 비교에서는 저용량 투여군(G5)보다 고용량 투여군(G6)에서 20.0% 감소하였다.
실시예 3: 본 발명의 나노 입자(SNB-101)의 위암 병용 투여 효과
3-1. 실험 재료
시험에 사용한 물질로서 5% 포도당 주사액, 이리노테칸 염산염(Irinotecan HCl; 캄토프주TM, CJ헬스케어, 대한민국), 도세탁셀 (Docetaxel; 탁소텔주TM, 사노피-아벤티스 코리아), 및 SN-38과 이리노테칸 염산염을 포함하는 나노 입자 조성물 (SNB-101로 명명함)을 이용하였다. 상기 이리노테칸염산염(캄토프주TM)는 100 mg/5 mL이며 CJ 헬스케어사에서 구입하였다. 도세탁셀은 사노피-아벤티스 코리아에서 구입하였으며, 20 mg/mL 였다. 본 발명에서 사용된 상기 SN-38 및 이리노테칸 염산염을 포함하는 나노입자 조성물(SNB-101)은 주사제로서 안정한 나노 입자 제형이고, 대한민국 등록특허 제10-2094543호에 그 제조방법이 소개되어 있다. 상기 SNB-101의 정맥주사제는 바이알 당 주성분의 양은 SN-38 10 mg, 이리노테칸염산염 15.9 mg 이며, 조제방법은 9.64 mL 5% 덱스트로스 주사액 USP 로 희석시킬 수 있고 90분의 시간에 걸쳐 주입될 수 있다.
3-2. 시험방법
1) 위암세포주 Hs746T의 배양
위암의 이종이식모델을 위한 위암 세포주로는 Hs746T 를 사용하였다. Hs746T 세포는 10% fetal bovine serum (FBS), 1% penicillin/streptomycin이 포함된 Dulbecco's modified eagle's medium (DMEM)을 사용하여 175-cm2 Flask에서 배양하였다. FBS, DMEM, Penicillin-Streptomycin은 ATCC (Manassas, VA)에서 구입하여 실험에 사용하였으며, 세포는 37℃, 95% air, 5% CO2 로 배양하였다. 배양된 각각의 암세포는 일주일에 2 ~ 3 회 Refeeding하였고 인산염완충액 (PBS; phosphate buffered saline, pH 7.4)로 세척한 후 0.05% trypsin-0.02% EDTA로 부착된 세포를 분리하였다. 분리된 세포를 원심분리(3 분, 1500 rpm)하여 집적된 암세포에 배지를 넣고, 피펫으로 골고루 분산되도록 잘 혼합하여 계대배양 하면서 실험에 사용하였다.
접종 당일 배양된 암세포는 PBS로 세척한 후 0.05% Trypsin-0.02% EDTA로 부착된 세포를 분리하였다. 분리된 세포는 원심분리(3 분, 1500 rpm)하여 PBS로 희석 후 마리 당 4 x 106 cells/0.2 mL 되도록 준비하였다.
2) 위암 이종이식 마우스 동물모델의 유도
본 시험에 사용한 동물은 이종 이식 동물모델에 널리 사용되고 있는 BALB/c nu/nu 수컷 마우스 (약 5주령, 평균체중은 19g±20%)을 사용하였으며, 입수 후 약 5-7일의 순화과정을 거쳤다. 접종 당일 배양된 암세포는 인산염완충액 (PBS, pH 7.4)로 세척한 후 0.05% Trypsin-0.02% EDTA로 부착된 세포를 분리하였다. 분리된 세포는 원심분리(3 분, 1500 rpm)하여 PBS로 희석 후 마리당 5 x 106 cells/0.2 mL 되도록 마우스 오른쪽 옆구리에 피하 주사하였고, 주사부위에서 종양세포 현탁액이 유출되지 않는 것을 확인하였다.
군 구성 및 투여용량 설정
마우스 군 분리는 위암 종양체적 (tumor volume) 평균 80±20 mm3을 근거로 군 분리를 시행하였으며, 대조군 및 시험군의 구성과 투여용량은 다음과 같았다.
군 대조군/시험군 용량 (mg/kg/day) 마리수
G1 비히클군 5% 포도당 주사액 - 9
G2 양성대조군 1 도세탁셀 5 9
G3 양성대조군 2 이리노테칸염산염 60 9
G4 양성대조군 3 도세탁셀 + 이리노테칸염산염 5 + 60 9
G5 시험군 1 (단독) SNB-101 20/31.8 * 9
G6 시험군 2 (병용) 도세탁셀 + SNB-101 5 + 20/31.8 * 9
* SNB-101의 SN-38/이리노테칸 염산염으로서의 용량 표기
3) 투여 부위 및 투여방법
시험물질은 투여 직전의 체중을 근거로 개체 별 투여량을 환산하여 미정맥투여(Intravenous, i.v.)하였다. 시험물질은 주 1 회 (0 일, 7 일, 14일), 총 3 회 투여하였으며, 15 일에 부검하였다.
4) 관찰 및 검사항목
시험기간 중 1일 1회 임상증상 관찰하였으며, 약물 투여와 함께 종양부피는 주 3 회 측정하였다. 시험 종료 후, 동물은 이소플루란(Isoflurane)으로 마취 후 방혈한 뒤, 개체 별로 종양 조직을 적출하였다. 적출한 종양은 중량 측정 후 사진 촬영하였다. 종양체적은 버니어캘리퍼스(Mitutoyo Corp., Model No.: CD-15CPX, Japan)를 사용하여 종양의 장축 및 단축 크기를 측정하고 하기 식 1의 계산식에 따라 종양체적 (tumor volume)을 산출하였다.
식 1
종양체적 (tumor volume) = (단축)2 x 장축 x 0.5
5) 통계분석
시험결과는 상용 통계 프로그램(IBM SPSS statistics version 19.0)을 사용하여 Mann-Whitney 분석을 통해 데이터를 통계 분석하였다.
3-3. 시험결과
1) 체중측정 결과
시험물질 투여 15 일째(부검일)에 체중(g)을 측정한 결과는 표 6 및 도 5에 나타내었다.
Group 0 days 4 days 7 days 11 day 14 days 15 days
G1 21.2 ± 1.2 21.6 ± 1.0 21.7 ± 1.1 21.7 ± 1.1 22.7 ± 1.3 22.2 ± 1.1
G2 21.9 ± 1.6 22.5 ± 1.6 22.4 ± 1.3 22.3 ± 1.5 22.8 ± 1.4 22.2 ± 1.4
G3 21.1 ± 1.3 21.7 ± 1.1 21.7 ± 1.1 21.8 ± 1.1 22.8 ± 1.1 21.9 ± 1.1
G4 22.0 ± 0.9 21.4 ± 0.7 21.7 ± 0.7 20.8 ± 0.8 21.6 ± 1.2 20.1 ± 1.1
G5 21.5 ± 1.2 21.8 ± 1.0 21.9 ± 0.8 21.8 ± 1.3 23.1 ± 1.5 21.5 ± 1.3
G6 21.0 ± 1.6 20.3 ± 2.5 20.6 ± 2.6 19.1 ± 1.6 20.7 ± 1.9 19.1 ± 1.9
Unit: g, Data are expressed in mean ± SD (n=9)G1: Vehicle control (5% 포도당 주사액)
G2: Positive control 1 (5 mg/kg/day Docetaxel)
G3: Positive control 2 (60 mg/kg/day Irinotecan HCl)
G4: Positive control 3 (5 mg/kg/day Docetaxel + 60 mg/kg/day Irinotecan HCl)
G5: Test article 1 (20/31.8 mg/kg/day (as SN-38/Irinotecan HCl) SNB-101)
G6: Test article 2 (5 mg/kg/day Docetaxel + 20/31.8 mg/kg/day (as SN-38/Irinotecan HCl) SNB-101)
입수 시, 군 분리 시 모든 군에서 체중의 유의적인 차이는 관찰되지 않았다. 시험물질 투여 15 일째(부검일)에 체중을 측정한 결과, G4 (Docetaxel + Irinotecan HCl), G6 (Docetaxel + SNB-101)의 병용 투여군에서 체중감소가 관찰되었으며, 15 일째에 병용투여군들의 체중은 부형제 대조군인 G1 (5% 포도당주사액), G2 (Docetaxel), G3 (Irinotecan HCl) 및 G4 (SNB-101)의 단독 투여군들보다 모두 유의하게 감소하였다. G1 (비히클군)에 비해 모든 시험물질 투여군(G2-G6)에서 체중감소율이 20%를 초과하지 않아 위독한 최저체중에 이르지 않은 것으로 판단되었다(도 5).
2) 종양 부피 측정결과
위암 종양 부피(mm3) 측정결과는 하기 표 7 및 도 6에 나타내었다.
Group 0 day 2 days 4 days 7 days 9 day 11 days 14 days
G1 84.0 ± 19.6 98.9 ± 25.0 129.9 ± 28.8 178.2 ± 44.7 305.6 ± 109.3 499.8 ± 190.8 708.2 ± 308.8
G2 89.6 ± 22.1 99.8 ± 21.6 127.2 ± 40.1 146.0 ± 80.4 203.5 ± 109.3 227.1 ± 136.3** 224.8 ± 158.3**
G3 81.7 ± 26.5 100.0 ± 37.2 127.5 ± 56.5 145.8 ± 67.7 155.7 ± 83.9* 133.3 ± 79.7** 99.4 ± 80.8**
G4 84.4 ± 28.1 99.3 ± 33.9 121.5 ± 41.7 110.2 ± 47.3** 116.2 ± 44.8** 83.9 ± 46.2**# 67.9 ± 51.6**#
G5 86.0 ± 25.0 105.2 ± 24.9 142.5 ± 39.9 127.7 ± 42.5* 108.8 ± 42.4** 70.1 ± 37.7**## 41.9 ± 13.9**#
G6 92.4 ± 23.6 100.5 ± 31.8 103.5 ± 41.9 101.5 ± 37.1** 79.2 ± 30.0**#¶ 62.9 ± 26.8**#¶ 30.5 ± 15.1**##¶¶
Unit: g, Data are expressed in mean ± SD (n=9)*Compared with G1: *p<0.05, **p<0.01; #Compared with G2: # p<0.05, ## p<0.01; Compared with G3: p<0.05, ¶¶ p<0.01
G1: Vehicle control (5% 포도당 주사액)
G2: Positive control 1 (5 mg/kg/day Docetaxel)
G3: Positive control 2 (60 mg/kg/day Irinotecan HCl)
G4: Positive control 3 (5 mg/kg/day Docetaxel + 60 mg/kg/day Irinotecan HCl)
G5: Test article 1 (20/31.8 mg/kg/day (as SN-38/Irinotecan HCl) SNB-101)
G6: Test article 2 (5 mg/kg/day Docetaxel + 20/31.8 mg/kg/day (as SN-38/Irinotecan HCl) SNB-101)
위암 Tumor volume 측정결과에서는 부형제 대조군 G1에서 군 분리 후 15 일까지 지속적으로 증가하였으며, 종양 성장률은 다른 군보다 높게 나타났다.
부형제 대조군 G1에 비해 G4 (Docetaxel + Irinotecan HCl 병용 투여군), G5 (SNB-101 단독 투여군) 및 G6 (Docetaxel + SNB-101 병용투여군)에서 종양 부피가 7 일째부터 유의하게 감소하였고, 15 일째에는 양성대조물질(G2, G3, G4)과 시험물질 투여군(G5, G6)들에서 모두 유의하게 감소하였다.
G4 (Docetaxel + Irinotecan HCl 병용 투여군)는 G2 (Docetaxel 단독 투여군)보다 11 일째부터 통계학적으로 유의하게 감소하였고, G6 (Docetaxel + SNB-101 병용투여군)은 G2 (Docetaxel 단독 투여군)과 G3 (Irinotecan HCl 단독 투여군)보다 9 일째부터 유의한 감소를 보였다.
3) 종양 무게 측정 결과
종양 무게를 측정한 결과는 하기 표 8 및 도 7에 나타내었다.
Group Tumor weight (g)
G1 0.494 ± 0.178
G2 0.092 ± 0.128**
G3 0.029 ± 0.035**
G4 0.006 ± 0.006**#
G5 0.004 ± 0.003**#¶
G6 0.003 ± 0.003**##¶
Data are expressed in mean ± SD (n=9);*Compared with G1: ** p<0.01;
#Compared with G2: # p<0.05, ## p<0.01;
Compared with G3: p<0.05
G1: Vehicle control (5% 포도당 주사액)
G2: Positive control 1 (5 mg/kg/day Docetaxel)
G3: Positive control 2 (60 mg/kg/day Irinotecan HCl)
G4: Positive control 3 (5 mg/kg/day Docetaxel + 60 mg/kg/day Irinotecan HCl)
G5: Test article 1 (20/31.8 mg/kg/day (as SN-38/Irinotecan HCl) SNB-101)
G6: Test article 2 (5 mg/kg/day Docetaxel + 20/31.8 mg/kg/day (as SN-38/Irinotecan HCl) SNB-101)
상기 표 8 및 도 7에 나타낸 바와 같이, 종양을 적출하여 종양무게를 비교한 결과 부형제 대조군 G1에 비해 양성대조물질(G2, G3, G4)과 시험물질 단독(G5), 병용투여군(G6)에서 모두 유의하게 감소하였다. G2(Docetaxel 단독 투여군)에 비해 G4(Docetaxel + Irinotecan HCl 병용 투여군), G5(SNB-101 단독 투여군) 및 G6 (Docetaxel + SNB-101 병용투여군)에서 유의한 감소를 보였다. 또한, Irinotecan HCl 단독 투여군에 비해 SNB-101 단독 투여군 및 Docetaxel + SNB-101 병용투여군에서 유의한 감소를 나타냈다.
따라서 본 시험조건에서 위암 세포주 Hs746T를 이용한 Xenograft model에서 양성대조물질 G2 (5 mg/kg/day Docetaxel), G3 (60 mg/kg/day Irinotecan HCl 단독 투여), G4 (5 mg/kg/day Docetaxel + 60 mg/kg/day Irinotecan HCl 병용 투여), 시험물질인 G5 (20/31.8 mg/kg/day (as SN-38/Irinotecan HCl)) SNB-101 단독 투여) 및 G6 (5 mg/kg/day Docetaxel + 20/31.8 mg/kg/day (as SN-38/Irinotecan HCl) SNB-101 병용 투여)에서 모두 종양성장 억제에 효력이 있는 것으로 판단되었으며, 양성대조물질 단독 투여(G2, G3)보다 병용투여(G4, G6)에서 더 높은 종양 억제를 보였다.
실시예 4: 본 발명의 나노 입자(SNB-101)의 유방암 및 폐암에 대한 병용 투여 효과
4-1. 실험 재료
시험에 사용한 물질로서 5% 포도당 주사액, 도세탁셀 (Docetaxel; 탁소텔주TM, 사노피-아벤티스 코리아), 및 SN-38과 이리노테칸 염산염을 포함하는 나노 입자 조성물 (SNB-101로 명명함)을 이용하였다. 도세탁셀은 사노피-아벤티스 코리아에서 구입하였으며, 20 mg/mL 였다.
본 발명에서 사용된 상기 SN-38 및 이리노테칸 염산염을 포함하는 나노입자 조성물(SNB-101)은 주사제로서 안정한 나노 입자 제형이고, 대한민국 등록특허 제10-2094543호에 그 제조방법이 소개되어 있다. 상기 SNB-101의 정맥주사제는 바이알 당 주성분의 양은 SN-38 10 mg, 이리노테칸염산염 15.9 mg 이며, 조제방법은 9.64 mL 5% 덱스트로스 주사액 USP 로 희석시킬 수 있고 90분의 시간에 걸쳐 주입될 수 있다.
4-2. 시험방법
1) 유방암 세포주(MDA-MB-231) 및 폐암 세포주(A549)의 배양
이종이식모델을 위한 유방암 및 폐암 세포주로는 MDA-MB-231, A549를 각각 사용하였다. 동결 세포주 MDA-MB-231, A549를 해동하여 각각 RPMI1640 medium-10% FBS-1% Penicillin-Streptomycin, RPMI1640 medium-5% FBS-1% Penicillin-Streptomycin 로 37℃ 5% CO2 조건으로 배양하였다. 해동한 세포는 1주일 이상 배양하였고, 2~3일 간격으로 계대배양 하면서 생존율 (trypan blue), bacteria와 yeast 감염 (세포 이미지), 및 마이코플라즈마 감염 (MycoAlert Mycoplasma detection kit)이 없음을 확인하였고 trypan blue로 염색하여 생존율이 90% 이상인 상태의 것을 이식에 사용하였다.
2) 유방암 및 폐암 이종이식 마우스 동물모델의 유도
본 시험에 사용한 동물은 이종 이식 동물모델에 널리 사용되고 있는 BALB/c nu/nu 수컷 마우스 (약 5주령, 평균체중은 19g±20%)을 사용하였으며, 입수 후 약 5-7일의 순화과정을 거쳤다. 접종 당일 배양된 암세포는 인산염완충액 (PBS, pH 7.4)로 세척한 후 0.05% Trypsin-0.02% EDTA로 부착된 세포를 분리하였다. 분리된 세포는 원심분리(3 분, 1500 rpm)하여 PBS로 희석 후 MDA-MB-231, A549 세포를 각각 마리당 5x106 cells/100 ㎕를 Balb/c-nu 마우스의 오른쪽 어깨에 피하 이식하였고, 주사부위에서 종양세포 현탁액이 유출되지 않는 것을 확인하였다.
3) 군 구성, 투여용량, 투여부위 및 투여 방법 설정
마우스 군 분리는 전체 마우스 종양체적 (tumor volume) 평균이 90~105 mm3 일 때 paired-matching 방법으로 군 분리를 시행하였으며, 대조군 및 시험군의 구성과 투여용량은 표 9 및 표 10과 같았다.
유방암 MDA-MB-231 세포주
Group No. Drug N Dose (mg/kg) Route Treatment Frequency
G1 Vehicle 10 - i.v. Q1W x 6**
G2 Docetaxel 10 5 -> 15* i.v. Q1W x 6**
G3 SNB-101 10 20*** i.v. Q1W x 6**
G4 SNB-101
+ docetaxel		 10 20***
5 -> 15* 		i.v. Q1W x 6**
* Docetaxel 투여농도는 5 mg/kg (1-3회차 투여)에서 15 mg/kg (4-6회차 투여)으로 시험 진행 중 변경되었음.** 모든 그룹의 약물 투여횟수는 일주일에 1회씩 3주간(Q1W x 3회)에서 일주일에 1회씩 6주간 (Q1W x 6회)으로 시험 진행 중 변경되었음.
*** SNB-101의 용량 20 mg/kg은 SN-38의 함량 기준임.
폐암 A549 세포주
Group No. Drug N Dose (mg/kg) Route Treatment Frequency
G1 Vehicle 10 - i.v. Q1W x 5**
G2 Docetaxel 10 5 -> 10* i.v. Q1W x 5**
G3 SNB-101 10 20 i.v. Q1W x 5**
G4 SNB-101
+ docetaxel		 10 20
5 -> 10* 		i.v. Q1W x 5**
* Docetaxel 투여농도는 5 mg/kg (1회차 투여)에서 10 mg/kg (2-5회차 투여)으로 시험 진행 중 변경되었음.** 모든 그룹의 약물 투여횟수는 일주일에 1회씩 3주간 (Q1W x 3회)에서 일주일에 1회씩 5주간 (Q1W x 5회)으로 시험 진행 중 변경되었음.
*** SNB-101의 용량 20 mg/kg은 SN-38의 함량 기준임.
종양 부피와 몸무게는 분류 시점부터 시험 종료 시까지 일주일에 2회 (3일 또는 4일 간격) 측정하였으며, 약물 투여 개시일부터 시험 종료 시까지의 종양 부피로 종양성장 곡선을 작성하였다.
심각한 괴사 및 몸무게의 감소가 발견되었을 때 동물실험윤리위원회 (IACUC) 규정에 따라 의뢰사와 협의 하에 안락사시켜 시험을 종료하고 종양을 적출하여 사진을 촬영하였다.
4-3. 유방암 MDA-MB-231 xenograft 모델 시험결과
1) 종양 체적 측정 및 결과 분석
실험 종료일 (약물투여 후 35일) 기준으로 G1 (vehicle)과 비교하여 G2 (docetaxel 단독투여) 또는 G3 (SNB-101 단독투여)와 G4(SNB-101 + docetaxel 병용투여) 그룹의 종양 성장 억제 효능을 확인하였다.
G1 (Vehicle), G2 (docetaxel), G3 (SNB-101), G4 (SNB-101 + docetaxel) 투여그룹의 평균 종양 부피는 각각 1,662.48 mm3, 1,228.93 mm3, 657.30 mm3, 364.10 mm3로 병용투여(G4)가 단독투여(G2, G3)에 비해 종양 형성 억제에 효과적이었다. 결과는 하기 도 9에 나타내었다.
실험 종료일 기준 vehicle 대비 종양 성장 억제율(Tumor growth inhibition, TGI)을 하기 식을 이용해 구하였다.
식 2
Tumor growth inhibition (TGI)(%) = {1-(△T/△C)} x 100
그룹 별 TGI는 표 11에 나타내었다.
Group TGI (%)
G2 (Docetaxel) 27.6
G3 (SNB-101) 64.0
G4 (SNB-101 + docetaxel) 82.6
표 11에 나타낸 바와 같이, vehicle 대비 TGI는 docetaxel 단독 투여군(G2)에서 27.6%, SNB-101 단독 투여군(G3)에서 64.0%, SNB-101 + docetaxel 병용 투여군(G4)에서 82.6%이었다. 상기 결과로부터, 유방암 세포에 대해 본 발명의 SNB-101과 docetaxel의 병용투여에서 시너지 효과가 나타남을 확인할 수 있었다.
2) 체중 측정 결과
군별 체중 측정 결과는 하기 도 10에 나타내었다.
약물 투여 개시 시점(day 0)에 vehicle, docetaxel, SNB-101, SNB-101 + docetaxel 체중은 각각 19.70 g, 19.63 g, 20.99 g, 21.46 g이었으며, 시험 종료 시점(day 35)에는 22.46 g, 20.25 g, 22.43 g, 19.37 g이었다. 즉, 체중감소율이 20%를 초과하지 않아 위독한 최저체중에 이르지 않은 것을 확인하였다.
3) 결론
종합하면, 유방암 세포주 MDA-MB-231이종이식모델에서 docetaxel(G2)과 SNB-101 단독투여(G3) 대비, SNB-101 + docetaxel 병용투여(G4)는 종양 성장 억제 효과가 매우 뛰어남을 알 수 있었다.
4-4. 폐암 A549 xenograft 모델 시험결과
1) 종양 체적 측정 및 결과 분석
실험 종료일 (약물투여 후 37일) 기준으로 G1 (vehicle)과 비교하여 G2 (docetaxel 단독투여) 또는 G3 (SNB-101 단독투여)와 G4(SNB-101 + docetaxel 병용투여) 그룹의 종양 성장 억제 효능을 확인하였다.
G1 (Vehicle), G2 (docetaxel), G3 (SNB-101), G4 (SNB-101 + docetaxel) 투여그룹의 평균 종양 부피는 각각 704.10 mm3, 402.70 mm3, 557.60 mm3, 181.08 mm3로 병용투여(G4)가 단독투여(G2, G3)에 비해 종양 형성 억제에 효과적이었다. 결과는 하기 도 11에 나타내었다.
실험 종료일 기준 vehicle 대비 종양 성장 억제율(Tumor growth inhibition, TGI)을 하기 식을 이용해 구하였다.
식 2
Tumor growth inhibition (TGI)(%) = {1-(△T/△C)} x 100
그룹 별 TGI는 표 12에 나타내었다.
Group TGI (%)
G2 (Docetaxel) 50.0
G3 (SNB-101) 24.3
G4 (SNB-101 + docetaxel) 86.7
표 12에 나타낸 바와 같이, vehicle 대비 TGI는 docetaxel 단독 투여군(G2)에서 50.0%, SNB-101 단독 투여군(G3)에서 24.3%, SNB-101 + docetaxel 병용 투여군(G4)에서 86.7%이었다.
상기 결과로부터, 폐암 세포주 A549 이종이식모델에 대해 본 발명의 SNB-101과 docetaxel의 병용투여에서 시너지 효과가 나타남을 확인할 수 있었다.
2) 체중 측정 결과
군별 체중 측정 결과는 하기 도 12에 나타내었다.
약물 투여 개시 시점(day 0)에 vehicle, docetaxel, SNB-101, SNB-101 + docetaxel 체중은 각각 17.86 g, 17.93 g, 18.04 g, 18.68 g이었으며, 시험 종료 시점(day 37)에는 20.19 g, 19.10 g, 19.79 g, 17.97 g이었다. 즉, 체중감소율이 20%를 초과하지 않아 위독한 최저체중에 이르지 않은 것을 확인하였다.
3) 결론
종합하면, 폐암 세포주 A549 이종이식모델에서 docetaxel(G2)과 SNB-101 단독투여(G3) 대비, SNB-101 + docetaxel 병용투여(G4)는 종양 성장 억제 효과가 매우 뛰어남을 알 수 있었다.
실시예 5: 본 발명의 나노 입자(SNB-101) 및 베바시주맙(상표명: 아바스틴) 병용 시, 대장암 치료의 시너지 효과 평가
단일클론 항체이며 표적 항암제인 베바시주맙과 병용 시, 대장암에서 치료 시너지 효과를 평가하기 위해 실험을 수행하였다.
5-1. 시험방법
1) 실험동물
총 150 마리의 BALB/c 누드 마우스 (5 주령 수컷)을 입수하여, 약 1 주간 순화 후, 우측 둔부 피하부위에 HT-29 대장암 세포를 이식한 다음, 종양세포 이식 7 일 후 종양 부피를 기준으로 다시 이식 마우스 50 마리를 선정하여, 군 당 10 마리씩 본 실험에 사용하였다.
2) 종양세포이식
HT-29 (KCLB No. 300038, 한국세포주은행) 인간 대장암 세포를 10% fetal bovine serum (FBS) 및 100 IU/ml penicillin/streptomycin 첨가된 RPMI 1640 배지를 사용하여 37°C, 5% CO2 incubator 에서 계대 배양하여 유지하였으며, 3.0Х106 cell/0.1ml이 되도록 종양세포 부유액을 만들어, 마우스의 우측 둔부 피하부위에 HT-29 종양세포 부유액 0.1 mL 씩을 이식하여, 고형 종괴를 형성시켰다.
3) 군 분리
HT-29 대장암 세포주 이식 8일 후, 종양 부피를 기준으로 마우스를 선정하고, 무작위로 총 5개군 (10마리/군)으로 분리하였다. 약물 투여군은 하기 표 13과 같이 설정하였다.
그룹 약물 마리수 처리농도
(mg/kg)		 투여경로
G1 Vehicle (Dextrose 5%) 10 - 정맥
G2 SNB-101 10 20/31.8* 정맥
G3 베바시주맙 10 5 복강
G4 이리노테칸+베바시주맙 10 50+5 정맥+복강
G5 SNB-101+베바시주맙 10 20/31.8*+5 정맥+복강
*: dose as SN-38/이리노테칸 HCl
4) 약물투여
시험 물질인 SNB-101과 베바시주맙(5mg/kg)은 단독 및 병용 시 총 3 회 동일 날짜(1, 4, 7 일)에 투여하였다. SNB-101 은 투여시 체중을 근거로 개체 별 투여량을 환산하여 정맥 투여하였고, 베바시주맙은 복강내로 투여하였다. 28 일에 부검하였다. Control로서 Vehicle 로 사용되는 5% dextrose 용액은 10 mL/kg 용량으로 동일하게 투여하였다.
5-2. 시험결과
시험결과를 평균±S.D.로 하기 표 14에 나타내었다.
그룹 종양 부피 (mm3) 종양 부피
변화 (mm3)
[B-A]
시험시작
A (day 1)		 시험종료
B (day 28)
G1 99.53 ± 10.93 1343.90 ± 386.02 1244.37 ± 382.42
G2 96.32 ± 12.22 438.23 ± 168.93 341.91 ± 165.88
G3 96.67 ± 14.79 709.38 ± 266.87 612.71 ± 259.64
G4 93.27 ± 12.86 432.26 ± 91.46 338.98 ± 91.09
G5 94.88 ± 15.17 290.67 ± 114.28 195.79 ± 105.71
상기 표 14에 나타낸 바와 같이, SNB-101 단독 투여군(G2) 및 베바시주맙 단독 투여군(G3) 대비, 이들의 병용 투여군(G5)은, 대장암 치료에서 병용에 의한 치료 시너지 효과가 매우 우수함을 확인하였다. 상기 표 14 데이터에 해당하는 종양 성장 그래프는 도 13에 나타내었다. 그룹 간 다른 시간에 종양 부피 차이의 통계적 유의도(Statistical significance)는 Holm-Sidak 다중 비교 테스트와 함께 Two-way ANOVA로 분석하였다(*, P < 0.05; **, P < 0.01; ***, P < 0.001, ns: non-significant).
실시예 6: 본 발명의 나노 입자(SNB-101), 냅파클리탁셀 및 젬시타빈 병용 시, 췌장암 치료의 시너지 효과 평가
6-1. 실험재료
- BALB/c-nu 마우스 (오리엔트바이오 가평센터), Male, 6주령
- 췌장암 AsPC-1 세포주 (ATCC, Cat. No. CRL-1682)
- 시험약물: SNB-101 (SN-38 10 mg, 이리노테칸 HCl·3H2O 15.9 mg/vial), 냅파클리탁셀 (세엘진코리아, 아브락산, Lot. No. 6200676A), 젬시타빈 (한국릴리, Lot. No. 186053A)
- Vehicle: 5% 포도당주사액 50 ml (CJ헬스케어, 보험코드 640001361)
- RPMI1640 medium (Gibco, A10491-01) supplemented with 10% fetal bovine serum (Gibco, Cat. No. 16000)
- 1% Penicillin-Streptomycin (Gibco, Cat. No. 15140122)
- Trypsin-EDTA (Gibco, Cat. No. 25200-072)
- Cold-DPBS (Hyclone, Cat. No. SH30258.02)
- Trypan blue (Gibco, Cat. No. 15250061)
- MycoAlert Mycoplasma detection kit (LONZA, Cat. No. LT-07-318)
- 150 mm cell culture dish, Conical tubes, Pipettes
- 마우스 귀 색인표 (ear tag), 주사기, 캘리퍼
6-2. 시험방법
소화기질환 T2B 기반구축센터 (NCEED) 제공 췌장암 세포주 AsPC-1을 RPMI1640 medium-10% FBS-1% Penicillin-Streptomycin으로 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 해동한 세포는 1주일 이상 배양하고, 2-3일 간격으로 계대배양 하면서 생존율, 박테리아와 효모균 감염, 및 마이코플라즈마 감염(MycoAlert Mycoplasma detection kit)이 없음을 확인하고, trypan blue로 염색하여 생존율이 90% 이상인 상태의 것을 이식에 사용하였다. 세포를 trypsin-EDTA를 사용해 부유시키고 차가운 PBS로 현탁하였다. BALB/c-nu 마우스의 오른쪽 허벅지에 AsPC-1 세포 5x106 cells/200 μl를 피하 이식하였다. 주기적으로 종양 형성과 성장을 관찰하며 측정된 종양 길이를 사용하여 종양의 부피를 아래 수식에 따라 계산하였다.
[종양 부피=(a2b)/2, a는 짧은 직경, b는 긴 직경]
투여 당일의 전체 마우스 종양 부피 평균이 123.6 mm3일 때, paired-matching 방법으로 그룹화하였다. 각 그룹의 마우스에 아래 표 15에 기재된 용량 용법으로 약물을 투여 후 2주간 관찰하였다.
그룹 약물 마리수 처리농도
(mg/kg)		 투여
경로		 투여빈도 및 기간
G1 Vehicle 8 - i.v 2QW x 2wk
G2 SNB-101 8 30/47.7* i.v 2QW x 2wk
G3 냅파클리탁셀+젬시타빈 8 5+25 i.v 2QW x 2wk
G4 SNB-101+냅파클리탁셀+젬시타빈 8 30/47.7* +
5+25		 i.v 2QW x 2wk
*: dose as SN-38/이리노테칸 HCl
종양 부피와 몸무게는 분류 시점부터 시험 종료 시까지 일주일에 2회 (3일 또는 4일 간격) 측정하였으며, 약물 투여 개시일부터 시험 종료 시까지의 종양성장 억제 정도를 평가하였다.
6-3. 시험결과
실험 종료일 기준, vehicle 대비 종양 성장 억제율(Tumor growth inhibition, TGI)을 전술한 식 2를 이용해 구하였다.
그룹 별 TGI는 표 16에 나타내었다.
그룹 약물 마리수 처리농도
(mg/kg)		 TGI (%)
G2 SNB-101 8 30/47.7* 72.5
G3 냅파클리탁셀+젬시타빈 8 5+25 56.3
G4 SNB-101+냅파클리탁셀+젬시타빈 8 30/47.7* +
5+25		 83.4
상기 표 16에 나타낸 바와 같이, vehicle 대비 TGI는 SNB-101 단독 투여군(G2)에서 72.5%, 냅파클리탁셀+젬시타빈 투여군(G3)에서 56.3%이었다. 반면, SNB-101+냅파클리탁셀+젬시타빈 병용 투여군(G4)에서 TGI는 83.4%로 나타나, 췌장암 치료 시 SNB-101+냅파클리탁셀+젬시타빈 병용에 의한 치료 시너지 효과가 매우 우수함을 확인하였다.
아울러, 모든 처리군에서 육안상 부작용, 체중 감소, 혈액 분석에서의 독성이 관찰되지 않았다.
실시예 7: 본 발명의 나노 입자(SNB-101) 투여 및 방사선 조사 병용 시, 대장암 및 폐암 치료의 시너지 효과 평가
7-1. 실험재료
- BALB/c-nu 마우스 (중아바이오), Male, 6주령
- 소세포폐암 NCI-H69 세포주 (ATCC, Cat. No. HTB-119)
- 비소세포폐암 A549 세포주 (ATCC, Cat. No. CCL-185)
- 대장암 HCT116 세포주 (ATCC, Cat. No. CCL-247)
- 시험약물: SNB-101 ((주)에스엔바이오사이언스, SN-38 10 mg, 이리노테칸 HCl·3H2O 15.9 mg/vial)
- Vehicle: 5% 포도당주사액 50 ml (CJ헬스케어, 보험코드 640001361)
- RPMI1640 medium (Gibco, 22400-089), F12K (Gibco, 21127-022), McCoy's 5A (Gibco, 16600-082) supplemented with 10% fetal bovine serum (Gibco, Cat. No. 16000)
- 1% antibiotic-antimycotic (Gibco, Cat. No. 15240-062)
- Trypsin-EDTA (Gibco, Cat. No. 25200-072)
- Cold-DPBS (Gibco, Cat. No. 14200-075)
- Trypan blue (Gibco, Cat. No. 15250061)
- MycoAlert Mycoplasma detection kit (LONZA, Cat. No. LT-07-318)
- 150 mm cell culture dish, Conical tubes, Pipettes
- 마우스 귀 색인표 (ear tag), 주사기, 캘리퍼
7-2. 시험방법
항암 T2B 기반구축센터에서 보유한 동결 세포주 NCI-H69(소세포폐암), HCT116(대장암), A549(비소세포폐암)을 해동하여 각각 RPMI1640, F12K, McCoy's 5A medium-10% FBS-1% antibiotic-antimycotic으로 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 해동한 세포는 1주일 이상 배양하고, 2~3일 간격으로 계대배양 하면서 생존율, 박테리아와 효모균 감염, 및 마이코플라즈마 감염(MycoAlert Mycoplasma detection kit)이 없음을 확인하고, trypan blue로 염색하여 생존율이 90% 이상인 상태의 것을 이식에 사용하였다. 세포를 trypsin-EDTA를 사용해 부유시키고 차가운 PBS로 현탁하였다. BALB/c-nu 마우스의 오른쪽 허벅지에 NCI-H69 세포 1x107 cells/100 μl 및 A549, HCT116 세포 1x106 cells/50 μl를 각각 피하 이식하였다. 주기적으로 종양 형성과 성장을 관찰하며 측정된 종양 길이를 사용하여 종양의 부피를 아래 수식에 따라 계산하였다.
[종양 부피=(a2b)/2, a는 짧은 직경, b는 긴 직경]
투여 당일의 전체 마우스 종양 부피 평균이 100±20 mm3일 때, paired-matching 방법으로 그룹화하였다. 각 그룹의 마우스에 아래 표 17, 표 18에 기재된 용량 용법으로 약물을 투여 후 2-3주간 관찰하였다.
NCI-H69 및 HCT116 모델은 주 1회로 1번, A549 모델은 주 2회로 5번 반복 투여하였다. 약물 투여 후 HCT116 모델은 21일까지, NCI-H69 모델은 38일까지, A549 모델은 45일까지 종양 부피 및 몸무게를 측정하였다.
[NCI-H69(소세포폐암), HCT116(대장암) xenograft 모델 공통]
그룹 약물 마리수 처리농도 투여
경로		 투여빈도 및 기간
G1 Vehicle 5 - i.v Single
G2 SNB-101 5 20/31.8* mg/kg i.v Single
G3 RT 5 5 Gy External Single
G4 SNB-101+RT 5 20/31.8* mg/kg + 5 Gy i.vExternal Single (SNB-101, 2hr before RT)
*: dose as SN-38/이리노테칸 HCl
[A549(비소세포폐암) xenograft 모델 공통]
그룹 약물 마리수 처리농도 투여
경로		 투여빈도 및 기간
G1 Vehicle 5 - i.v Single+(9D interval)+BIW X 2***
G2 SNB-101 5 20/31.8* mg/kg** i.v Single+(9D interval)+BIW X 2***
G3 RT 5 5 Gy External Single+(14D interval)+Single
G4 SNB-101+RT 5 20/31.8* mg/kg** + 5 Gy i.vExternal Single+(9D interval)+BIW X 2***
Single+(14D interval)+Single
(SNB-101,
2hr before RT)
*: dose as SN-38/이리노테칸 HCl, **: A549 xenograft 모델에서 SNB-101 투여 용량은 20 mg/kg (1차) → 30 mg/kg (2차, 폐사개체 발생) → 20 mg/kg (3-5차)로 시험 진행 도중에 상호 협의 하에 변경되었음.
***: SNB-101 투여군의 약물 투여 빈도는 1차 투여 9일 경과 후부터 BIW로 2주간 4회 (총 5회)로 시험 진행 도중에 상호 협의 하에 변경되었음.
종양 부피와 몸무게는 분류 시점부터 시험 종료 시까지 일주일에 2회 (3일 또는 4일 간격) 측정하였으며, 약물 투여 개시일부터 시험 종료 시까지의 종양 부피로 종양성장 곡선을 작성하였다. 종양 부피가 동물실험윤리위원회 (IACUC) 규정의 한계치에 이르면 의뢰사와 협의 하에 안락사 시켜 시험을 종료하였고, 종양을 적출하여 분석하였다.
7-3. 시험결과
실험 종료일 기준, vehicle 대비 종양 성장 억제율(Tumor growth inhibition, TGI)을 전술한 식 2를 이용해 구하였다.
NCI-H69의 경우, 그룹 별 TGI는 표 19에 나타내었다.
종양 부피 변화 곡선은 도 14에 나타내었다.
종양 적출 사진은 도 15에 나타내었다.
그룹 약물 마리수 처리농도 TGI (%)
G2 SNB-101 5 20/31.8 mg/kg 50.9
G3 RT 5 5 Gy 81.3
G4 SNB-101+RT 5 20/31.8 mg/kg + 5 Gy 101.5
HCT116의 경우, 그룹 별 TGI는 표 20에 나타내었다.
종양 부피 변화 곡선은 도 16에 나타내었다.
종양 적출 사진은 도 17에 나타내었다.
그룹 약물 마리수 처리농도 TGI (%)
G2 SNB-101 5 20/31.8 mg/kg 62.6
G3 RT 5 5 Gy 41.4
G4 SNB-101+RT 5 20/31.8 mg/kg + 5 Gy 95.4
A549의 경우, 그룹 별 TGI는 표 21에 나타내었다.
종양 부피 변화 곡선은 도 18에 나타내었다.
그룹 약물 마리수 처리농도 TGI (%)
G2 SNB-101 5 20/31.8 mg/kg -11.2
G3 RT 5 5 Gy 33.9
G4 SNB-101+RT 5 20/31.8 mg/kg + 5 Gy 49.0
표 19-21에 나타낸 바와 같이, vehicle 대비 TGI는 SNB-101 단독 투여군(G2) 및 방사선 단독 처리군(G3)보다, 이들의 병용 처리군(G4)에서 현저히 높음을 확인하였다. 이로부터, 대장암 및 폐암 치료 시 SNB-101 및 방사선 조사 병용 치료 시너지 효과가 매우 우수함을 확인하였다.
아울러, 모든 처리군에서 육안상 부작용, 체중 감소, 혈액 분석에서의 독성이 관찰되지 않았다.
종합하면, 전술한 실시예 2 내지 실시예 7을 통해 하기 표 22에 정리한 병용 투여, 또는 방사선 치료 병용 시 암 치료에 현저한 상승효과가 달성됨을 확인하였다.
실시예 병용 처리 암
2 SNB-101 냅파클리탁셀 췌장암
3 도세탁셀 위암
4 도세탁셀 유방암, 폐암
5 베바시주맙 대장암
6 냅파클리탁셀+젬시타빈 췌장암
7 방사선 치료 대장암, 폐암

Claims (18)

  1. 소수성 캄토테신계 화합물, 친수성 캄토테신계 화합물, 및 소수성 블록 및 친수성 블록으로 이루어진 양친매성 블록 공중합체를 포함하는 입자; 및
    탁산(taxane) 계열 항암제, 알부민이 결합된 탁산 계열 항암제, 혈관내피세포성장인자(vascular endothelial growth factor: VEGF) 억제제 및 젬시타빈(gemcitabine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 항종양제를 유효성분으로 포함하는 암 치료용 약제학적 병용제제.
  2. 제1항에 있어서, 상기 소수성 캄토테신계 화합물은 SN-38(7-에틸-10-히드록시캄토테신), 캄토테신, 10-히드록시캄토테신 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인, 약제학적 병용제제.
  3. 제1항에 있어서, 상기 친수성 캄토테신계 화합물은 이리노테칸, 토포테칸, 벨로테칸, 엑사테칸, 루르토테칸, 시노테칸, 루비테칸, 9-니트로캄토테신, 9-아미노캄토테신, 지마테칸, 카레니테신(Karenitecin), 실라테칸(Silatecan), 다이플로모테칸(diflomotecan), 엘로모테칸(Elomotecan), 이들의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 글루쿠로나이드 대사체, 및 상기 소수성 캄토테신계 화합물의 글루쿠로나이드 대사체로부터 선택되는 1종 이상인, 약제학적 병용제제.
  4. 제1항에 있어서, 상기 양친매성 블록 공중합체는 A-B 또는 A-B-A 블록으로 구성되고, (a) 상기 A는 친수성 고분자로 모노메톡시폴리에틸렌글리콜, 디메톡시폴리에틸렌 글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 폴리프로필렌글리콜, 모노메톡시폴리프로필렌글리콜, 폴리에틸렌옥사이드, 폴리아크릴산 또는 이들의 중합체이고;
    (b) 상기 B는 소수성 고분자로 폴리락트산, 폴리-L-락타이드, 폴리-D-락타이드, 폴리-D,L-락타이드, 폴리(락타이드-코-글리콜라이드), 폴리글리콘산, 폴리글리콜라이드, 폴리락트산-글리콘산 공중합체, 폴리만델릭산, 폴리카프로락톤, 폴리디옥산-2-온, 폴리글루탐산, 폴리아스파라긴산, 폴리오르니틴, 폴리오르토에스터, 또는 이들의 유도체인, 약제학적 병용제제.
  5. 제1항에 있어서, 상기 혈관내피세포성장인자(vascular endothelial growth factor: VEGF) 억제제는 베바시주맙(bevacizumab), 라니비주맙(ranibizumab) 및 애플리버셉트(aflibercept)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인, 약제학적 병용제제.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서 상기 입자의 평균 지름은 2 ~ 200 nm인, 약제학적 병용제제.
  7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 위암, 난소암, 자궁암, 자궁경부암, 소세포폐암, 비소세포폐암, 췌장암, 유방암, 대장암, 식도암, 망막모세포종, 구강암, 침샘암, 후두암, 인두암, 신장암, 전립선암, 흑색종, 간암, 담낭암, 담도암, 갑상선암, 방광암, 뇌암, 중추신경계암, 골종양, 피부암, 비호지킨성 및 호지킨성 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 약제학적 병용제제.
  8. 소수성 캄토테신계 화합물, 친수성 캄토테신계 화합물, 및 소수성 블록 및 친수성 블록으로 이루어진 양친매성 블록 공중합체를 포함하는 입자를 포함하며, 방사선 치료(Radiotherapy, RT)와 병용되는 것인 암 치료용 약제학적 조성물.
  9. 투여가 필요한 대상체에게 (a) 소수성 캄토테신계 화합물, 친수성 캄토테신계 화합물, 및 소수성 블록 및 친수성 블록으로 이루어진 양친매성 블록 공중합체를 포함하는 입자를 포함하는 제1약제학적 조성물을 (b) 탁산(taxane) 계열 항암제, 알부민이 결합된 탁산 계열 항암제, 혈관내피세포성장인자(vascular endothelial growth factor: VEGF) 억제제 및 젬시타빈(gemcitabine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 항종양제를 유효성분으로 포함하는 제2약제학적 조성물 또는 항종양 요법과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는 암의 치료방법.
  10. 제9항에 있어서, 상기 제1약제학적 조성물과 상기 제2약제학적 조성물은 동시적, 개별적 또는 순차적으로 투여되는 것인, 암의 치료방법.
  11. 제9항에 있어서, 상기 제1약제학적 조성물과 제2약제학적 조성물은 복합제제 또는 단일제제로 투여되는 것인, 암의 치료방법.
  12. 제9항에 있어서, 상기 소수성 캄토테신계 화합물은 SN-38(7-에틸-10-히드록시캄토테신), 캄토테신, 10-히드록시캄토테신 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인, 암의 치료방법.
  13. 제9항에 있어서, 상기 친수성 캄토테신계 화합물은 이리노테칸, 토포테칸, 벨로테칸, 엑사테칸, 루르토테칸, 시노테칸, 루비테칸, 9-니트로캄토테신, 9-아미노캄토테신, 지마테칸, 카레니테신(Karenitecin), 실라테칸(Silatecan), 다이플로모테칸(diflomotecan), 엘로모테칸(Elomotecan), 이들의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 글루쿠로나이드 대사체, 및 상기 소수성 캄토테신계 화합물의 글루쿠로나이드 대사체로부터 선택되는 1종 이상인, 암의 치료방법.
  14. 제9항에 있어서, 상기 양친매성 블록 공중합체는 A-B 또는 A-B-A 블록으로 구성되고, (a) 상기 A는 친수성 고분자로 모노메톡시폴리에틸렌글리콜, 디메톡시폴리에틸렌 글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 폴리프로필렌글리콜, 모노메톡시폴리프로필렌글리콜, 폴리에틸렌옥사이드, 폴리아크릴산 또는 이들의 중합체이고;
    (b) 상기 B는 소수성 고분자로 폴리락트산, 폴리-L-락타이드, 폴리-D-락타이드, 폴리-D,L-락타이드, 폴리(락타이드-코-글리콜라이드), 폴리글리콘산, 폴리글리콜라이드, 폴리락트산-글리콘산 공중합체, 폴리만델릭산, 폴리카프로락톤, 폴리디옥산-2-온, 폴리글루탐산, 폴리아스파라긴산, 폴리오르니틴, 폴리오르토에스터, 또는 이들의 유도체인, 암의 치료방법.
  15. 제9항에 있어서, 상기 혈관내피세포성장인자(vascular endothelial growth factor: VEGF) 억제제는 베바시주맙(bevacizumab), 라니비주맙(ranibizumab) 및 애플리버셉트(aflibercept)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인, 암의 치료방법.
  16. 제9항에 있어서, 상기 항종양 요법은 수술요법, 방사선 요법, 또는 이들의 조합인, 암의 치료방법.
  17. 제9항에 있어서 상기 입자의 평균 지름은 2 ~ 200 nm인, 암의 치료방법.
  18. 제9항에 있어서, 상기 암은 위암, 난소암, 자궁암, 자궁경부암, 소세포폐암, 비소세포폐암, 췌장암, 유방암, 대장암, 식도암, 망막모세포종, 구강암, 침샘암, 후두암, 인두암, 직장암, 전립선암, 흑색종, 간암, 담낭암, 담도암, 갑상선암, 방광암, 뇌암, 중추신경계암, 골종양, 피부암, 비호지킨성 및 호지킨성 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 암의 치료방법.
KR1020210162582A 2020-11-27 2021-11-23 난용성 캄토테신 화합물을 포함하는 나노 입자를 포함하는 암 치료용 약제학적 조성물 및 이의 병용요법 KR20220074757A (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200163156 2020-11-27
KR20200163156 2020-11-27

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220074757A true KR20220074757A (ko) 2022-06-03

Family

ID=81756232

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020210162582A KR20220074757A (ko) 2020-11-27 2021-11-23 난용성 캄토테신 화합물을 포함하는 나노 입자를 포함하는 암 치료용 약제학적 조성물 및 이의 병용요법

Country Status (9)

Country Link
US (1) US20230414602A1 (ko)
EP (1) EP4252747A1 (ko)
JP (1) JP2023550990A (ko)
KR (1) KR20220074757A (ko)
CN (1) CN116528860A (ko)
AU (1) AU2021387448A1 (ko)
CA (1) CA3199407A1 (ko)
IL (1) IL303103A (ko)
WO (1) WO2022114736A1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114989375B (zh) * 2022-06-09 2023-05-26 北京化工大学 一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110448533B (zh) * 2014-12-05 2022-03-29 天津键凯科技有限公司 一种聚乙二醇修饰的喜树碱类衍生物的药物组合物及其制备方法
AU2018289188B2 (en) 2017-06-22 2020-12-24 SNBioScience Inc. Particle and pharmaceutical composition comprising an insoluble camptothecin compound with double core-shell structure and method for manufacturing the same
CN109303780B (zh) * 2017-07-28 2021-09-21 烟台药物研究所 一种还原响应型7-乙基-10-羟基喜树碱的两亲性聚合物药物前体及其制备方法

Non-Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Conroy F, et al. (2011). FOLFIRINOX versus gemcitabine for metastatic pancreatic cancer. New England Journal of Medicine; 364: 1817-1825
Desai N et al. (2006). Increased antitumor activity, intratumor paclitaxel concentrations, and endothelial cell transport of cremophor-free, albumin-bound paclitaxel, ABI-007, compared with cremophor-based paclitaxel. Clin Cancer Res. 12:1317-24.
Gavine et al., Volitinib, a potent and highly selective c-Met inhibitor, effectively blocks c-Met signaling and growth in c-MET amplified gastric cancer patient-derived tumor xenograft models. Mol Oncol. 2015 Jan;9(1):323-33
Goldstein D, et al. (2014). Updated survival from a randomized phase III trial (MPACT) of nab-paclitaxel plus gemcitabine versus gemcitabine alone for patients (pts) with metastatic adenocarcinoma of the pancreas. Journal of Clinical Oncology; 32(suppl 3): Abstract #178.
Marupudi NI et al. (2007). Paclitaxel: a review of adverse toxicities and novel delivery strategies. Expert Opin Drug Saf 6:609-21.
Nakagawa et al., A dual c-Met and VEGFR-2 tyrosine kinase inhibitor promotes tumor regression and prolongs survival in mouse xenograft models. Cancer Sci. 2010 Jan;101(1):210-5
Sato et al., In vivo antitumour efficacy of MGI-114 (6-hydroxymethylacylfulvene, HMAF) in various human tumorxenograft models including several lung and gastric tumours. Eur J Cancer. 2001 Jul;37(11):1419-28
Von Hoff DD, et al. (2013). Increased survival in pancreatic cancer with nab-paclitaxel plus gemcitabine. New England Journal of Medicine; 369: 1691-1703.
Wang-Gillam A, Li et al. (2016). Nanoliposomal irinotecan with fluorouracil and folinic acid in metastatic pancreatic cancer after previous gemcitabine-based therapy (NAPOLI-1): a global, randomised, open-label, phase 3 trial. Lancet. 387(10018):545-557.

Also Published As

Publication number Publication date
US20230414602A1 (en) 2023-12-28
CN116528860A (zh) 2023-08-01
EP4252747A1 (en) 2023-10-04
WO2022114736A1 (ko) 2022-06-02
JP2023550990A (ja) 2023-12-06
AU2021387448A1 (en) 2023-07-13
IL303103A (en) 2023-07-01
CA3199407A1 (en) 2022-06-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zhao et al. Simultaneous inhibition of growth and metastasis of hepatocellular carcinoma by co-delivery of ursolic acid and sorafenib using lactobionic acid modified and pH-sensitive chitosan-conjugated mesoporous silica nanocomplex
He et al. Poly (2-oxazoline) based micelles with high capacity for 3rd generation taxoids: Preparation, in vitro and in vivo evaluation
Sarisozen et al. Nanomedicine based curcumin and doxorubicin combination treatment of glioblastoma with scFv-targeted micelles: In vitro evaluation on 2D and 3D tumor models
Feng et al. Synergistic co-delivery of doxorubicin and paclitaxel by porous PLGA microspheres for pulmonary inhalation treatment
Koudelka et al. Liposomal paclitaxel formulations
Batrakova et al. Effects of pluronic and doxorubicin on drug uptake, cellular metabolism, apoptosis and tumor inhibition in animal models of MDR cancers
US11857634B2 (en) Cationic amphiphilic polymers for codelivery of hydrophobic agents and nucleic acids
US10980891B2 (en) Oligolactic acid conjugates and micelles with enhanced anticancer efficacy
EP3210621A1 (en) Micellar polypeptide vaccine having pegylated phospholipids as carrier
JP7027666B2 (ja) 二重コア－シェル構造を有する難溶性カンプトテシン化合物を含む粒子、薬剤学的組成物及びその製造方法
Shi et al. An esterase-activatable prodrug formulated liposome strategy: potentiating the anticancer therapeutic efficacy and drug safety
JP6229865B2 (ja) エピルビシン複合化ブロック共重合体と、抗癌剤とを含むミセル、及び当該ミセルを含む癌又は耐性癌、転移癌の治療に適用可能な医薬組成物
KR20220074757A (ko) 난용성 캄토테신 화합물을 포함하는 나노 입자를 포함하는 암 치료용 약제학적 조성물 및 이의 병용요법
Kumar et al. Polymeric nanomedicine for overcoming resistance mechanisms in hedgehog and Myc-amplified medulloblastoma
Hong et al. Efficacy and tissue distribution of DHP107, an oral paclitaxel formulation
KR20210075147A (ko) 제제의 전달을 위한 소형 중합체 담체
WO2014180304A1 (zh) J1-001化合物作为抗癌药物的用途
Ye et al. Binary blended co-delivery nanoparticles with the characteristics of precise pH-responsive acting on tumor microenvironment
CN114025743A (zh) 含有混合聚合物胶束的药物组合物
Majumdar et al. Anticancer activity of drug conjugates in head and neck cancer cells
Zhang et al. Reversing multi-drug resistance by polymeric metformin to enhance antitumor efficacy of chemotherapy
CN113350281B (zh) 载药聚合物胶束及其制剂和制备方法
US20240131170A1 (en) Cationic amphiphilic polymers for codelivery of hydrophobic agents and nucleic acids
KR102072419B1 (ko) 항암제 봉입 마이셀 제제 조성물
WO2023154464A1 (en) Locally administered compositions and methods of use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal