KR20220069880A - 포자-함유 프로바이오틱 액체 조성물 및 이의 제조 방법 - Google Patents

포자-함유 프로바이오틱 액체 조성물 및 이의 제조 방법 Download PDF

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KR20220069880A
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벤자민 조지
조셉 엠. 브래들리
하워드 캐쉬
스티븐 쥐. 코브
누사이어 이맘
에일린 오셰이
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케리 룩셈부르크 에스.아.에르.엘.
벤자민 조지
조셉 엠. 브래들리
하워드 캐쉬
스티븐 쥐. 코브
누사이어 이맘
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Abstract

상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법이 개시되어 있으며, 상기 방법은 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주 유래의 포자, 당류, 및 습윤제를 포함하는 액체 슬러리를 제공하는 단계; 및 액체 슬러리를 저온 살균하여 식이성 첨가제를 산출하는 단계를 포함한다. 식이성 첨가제는 수분 활성도(Aw)가 약 0.7 미만일 수 있다. 식이성 첨가제는 pH가 약 2.0 내지 9.5일 수 있다. 복수의 포자는 발아되지 않은 상태로 남아 있고 저온 살균 후 적어도 2개월 동안 균일하게 현탁된 상태를 유지하여 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 산출할 수 있다.

Description

포자-함유 프로바이오틱 액체 조성물 및 이의 제조 방법
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 35 U.S.C. §119(e)에 따라 2019년 4월 23일자로 출원된 미국 가출원 제62/837,589호에 대한 이익을 주장하고, 이의 전체 내용은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
분야
포자-함유 프로바이오틱 조성물 및 방법이 제공된다.
적절한 양으로 섭취될 때 프로바이오틱 미생물은 숙주에 건강 효과를 부여할 수 있다. 오늘날 프로바이오틱스는 식품, 식사 대용품, 식이 보충제, 기능식품, 일반의약품뿐만 아니라 전문의약품과 같은 다양한 분야에서 응용되고 있다. 프로바이오틱 제품은 유제품 및 프로바이오틱 강화 식품을 포함한다. 제품은 일반적으로 프로바이오틱 활성을 유지하기 위해 저온에서의 보관을 필요로 한다. 이들 제품에서 프로바이오틱 미생물의 성장은 제품에 불쾌한 냄새를 야기할 수 있다.
많은 프로바이오틱 제형이 고체 경구 투약 형태로 제공된다. 액체 제형은 식품 및 음료 가공 응용 분야에서 적용 용이성을 촉진시킬 수 있지만, 현재까지 이와 같은 제형은 액체 프로바이오틱 제형과 연관된 결점, 예를 들어 제형의 보관 수명 안정성을 유지하면서 투약 정확성을 가능하게 하는 균일한 현탁액을 달성하는 것과 연관된 결점으로 인해 존재하지 않는다. 액체 프로바이오틱 제형은 전형적으로 기질로 작용할 수 있고 원치않는 대사산물 생성의 위험을 높일 수 있는 당을 포함한다. 가스를 생성하는 프로바이오틱스는 용기의 벌징(bulging) 및 불쾌한 냄새와 맛의 생성을 초래할 수 있다. 또한, 대사산물 생성은 프로바이오틱 균주의 사멸을 초래하고 프로바이오틱의 생존 가능한 수를 감소시킬 수 있다. 결과적으로, 이와 같은 액체 프로바이오틱 제형은 저온 조건(예컨대, 2℃ 내지 8℃)에서 저장되어야 하고, 이는 식품 응용 분야에서 액체 프로바이오틱 제형의 사용을 제한하고, 유통 비용을 증가시킬 수 있다.
건강 보조 식품으로서 이용 가능한 몇 가지 상업적으로 이용 가능한 액체 프로바이오틱 제형이 있다. 예를 들어, Sanofi에 의해 생산되고 시판되는 "Enterogermina"는 정제수에 20억 CFU/5㎖ 농도로, 바실러스 코아귤런스(Bacillus coagulans)와 별개의 종인 바실러스 클라우시(Bacillus clausii)의 4가지 균주를 포함하는 액체 경구 현탁액이다. Enterogermina는 구체적으로 설사가 있는 사람에게 사용하는 것이 권장된다. "Bacilliq SC"는 또한 Synergia Life Sciences Pvt. Ltd.에 의해 생산되고 시판되며 콜드 체인 저장을 필요로 하지 않는다. Bacilliq SC는 별개의 프로바이오틱 균주인 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) HU58 및 바실러스 코아귤런스 SC208, 및 당을 포함한다.
추가적으로, 통상적인 프로바이오틱 조성물은 NCH Corporation에 의한 미국 특허출원 공개 제2015/0118203호에 개시되어 있다("'203 공개"). '203 공개는 식물 또는 동물에 의한 소비 지점으로 중력 급유 또는 비접촉 펌프에 의해 프로바이오틱 조성물을 전달하기 위한 시스템을 개시한다. 프로바이오틱 조성물은 포자 형태의 하나 이상의 박테리아 종, 증점제, 하나 이상의 산 또는 산의 염 및 선택적으로 수분 활성 감소제를 포함한다.
'203 공개에는 프로바이오틱 조성물의 인간 섭취에 대한 고려 사항이 없다. 또한, '203 공개는 인간 섭취용으로 의도된 식품에 첨가하는 것과 관련하여 반복성, 제형화 및 식품 안전 가공의 결여에서 단점이 있다. 예를 들어, '203 공개는 제품의 반복 가능한 생산과 관련하여 어떠한 가공 정보를 기재하지 않는다. 이는, 예를 들어 성분이 잘 분산되지 않거나, 용해되지 않거나 수화되지 않도록 할 수 있어서, 결국 미생물 성장 또는 오염의 방지에 적합하지 않은 제형으로 이어질 수 있다. 또한, 예를 들어 5-log 사멸 단계의 결여는 '203 공개의 프로바이오틱 조성물뿐만 아니라, 해당 조성물과 함께 투약되는 잠재적인 식품에도 고유한 위험을 나타낸다. 적절하게 정의된 5-log 사멸 단계 없이, 일단 물 및 식품 공급원을 포함하는 최적 성장 인자를 제공하는 식료품에 첨가되면 본 발명 조성물에서 휴면 상태를 나타낼 수 있는 미생물 오염의 위험이 성장할 것이다. 정의된 사멸 단계가 없으면 또한 옥수수 시럽, 프리바이오틱스, 및 증점제를 포함한 성분의 사용을 통한 배경 오염에 대한 기회도 나타난다.
상기 요약된 기술적 문제에 비추어, 본 개시내용의 목표 중 하나는 식이성 프로바이오틱 제형 및 당업자에 의해 재현 가능하고 선행 기술 및 종래 조성물 및 방법의 단점을 피하는 가공 방법을 제공하고, 인간이 섭취하기에 안전하고 효과적인 제품을 보장하는 것이었다.
본 개시내용은 장기간에 걸쳐 상온, 냉장, 및 냉동 조건 하에 세포 생존력을 유지할 수 있고 이 후 식품 및 음료 제품에 첨가되어 안정적으로 유지될 수 있는 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 개선된 전달을 제공한다.
따라서, 특정 실시형태에서, 상온에서 안정적인(shelf stable) 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법은 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주 유래의 포자, 당류, 및 습윤제를 포함하는 액체 슬러리를 제공하는 단계; 및 액체 슬러리를 저온 살균하여 식이성 첨가제를 산출하는 단계를 포함하고, 여기서 식이성 첨가제는 약 0.7 미만의 수분 활성도(Aw)를 포함하고; 식이성 첨가제는 약 2.0 내지 9.5의 pH를 포함하고; 복수의 포자가 발아되지 않은 상태로 남아 있고 저온 살균 단계 후 적어도 2개월 동안 균일하게 현탁된 상태를 유지하여 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 산출한다.
특정 실시형태에서, 포자의 적어도 90, 95, 또는 99%는 저온 살균 단계 후 적어도 2개월 동안 발아되지 않은 상태로 남아 있다. 특정 실시형태에서, 포자의 적어도 90, 95, 99%는 발아 적격으로 남아 있다. 특정 실시형태에서, 포자의 적어도 90, 95, 99%는 발아-허용 조건에 노출된 후 발아한다.
특정 실시형태에서, 포자의 적어도 90, 95, 또는 99%는 포유동물이 섭취한 후 발아한다. 특정 실시형태에서, 발아-허용 조건은 적어도 1 Aw 및 37℃를 포함한다. 특정 실시형태에서, 포자의 적어도 90%는 저온 살균 후에 생존 가능하다.
특정 실시형태에서, 식이성 첨가제는 1%(w/v) 미만의 영양형 박테리아 세포(vegetative bacterial cell)를 포함한다.
특정 실시형태에서, 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주는 적어도 하나의 바실러스 박테리아 균주를 포함한다. 특정 실시형태에서, 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주는 적어도 하나의 바실러스 코아귤런스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 서브틸리스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 클라우시 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 인디커스(Bacillus indicus) 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 리케니포미스(Bacillus licheniformis) 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 푸밀러스(Bacillus pumilus) 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquifaciens) 박테리아 균주, 또는 적어도 하나의 바실러스 메가테리움(Bacillus megaterium) 박테리아 균주를 포함한다. 특정 실시형태에서, 적어도 하나의 바실러스 코아귤런스 박테리아 균주는 바실러스 코아귤런스 GBI-30 균주(ATCC 지정 번호 PTA-6086)를 포함한다.
특정 실시형태에서, 복수의 포자는 식이성 첨가제에 조성물의 중량을 기준으로 약 5억 CFU/g 내지 1조 CFU/g의 양으로 존재한다.
특정 실시형태에서, 적어도 하나의 습윤제는 글리세린, 당, 염, 프로필렌 글라이콜 또는 검 중 적어도 하나이다.
특정 실시형태에서, 식이성 첨가제는 이눌린을 포함하지 않는 적어도 하나의 레올로지 개질제를 추가로 포함하고, 여기서 적어도 하나의 레올로지 개질제는 조성물의 중량을 기준으로 약 0.01% 내지 0.3%의 양으로 존재한다. 특정 실시형태에서, 적어도 하나의 레올로지 개질제는 잔탄검, 아라비아검, 젤란검, 구아검 또는 카라기난 중 적어도 하나이다.
본 개시내용은 또한 포자-함유 프로바이오틱 조성물을 제공한다. 특정 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은, 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주 유래의 복수의 포자를 포함하는 프로바이오틱 물질(여기서, 포자의 적어도 90%는 저온 살균 시간 및 온도에서 생존 가능함); 당류, 및 적어도 하나의 습윤제, 또는 이들의 조합물을 포함하는 액체 슬러리를 포함하고, 여기서 조성물은 수분 활성도(Aw)가 약 0.7 미만이고, pH는 약 5.0 미만이다.
본 개시내용은 또한 포자-함유 프로바이오틱 조성물을 포함하는, 식료품을 제공한다.
본 개시내용은 또한 포자-함유 프로바이오틱 조성물을 포함하는, 음료 제품을 제공한다.
본 명세서에 기재된 조성물 및 방법은 기존 프로바이오틱 제품의 결점 및 한계에 대한 해결책을 제공한다. 식료품 및 음료 제품에 첨가될 때 일관된 미생물학적 생존력, 및 후속 활성을 전달하도록 저온 살균될 때 특정 시간-온도, pH, 및 수분 활성 환경에서 생존할 수 있는 포자-함유(비영양형(non- vegetative)) 프로바이오틱 조성물이 제공된다. 예를 들어, 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 프로바이오틱 생존력은 저온 살균 공정 후 조성물의 중량을 기준으로 약 5억(M) 콜로니 형성 단위(CFU)/그램(g) 내지 1조(T) 콜로니 형성 단위(CFU)/그램(g)일 수 있다.
본 명세서에 기재된 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 균일하게 현탁되고 분산 가능한 액체 슬러리의 형태일 수 있다. 액체 슬러리는 적어도 식료품 또는 음료 제품(예컨대, 냉장 식료품 또는 음료 제품 또는 냉동 식료품 또는 음료 제품 또는 상온 식료품 또는 상온 음료)에 첨가되기 전에 상온 저장 조건에서 안정적으로 유지될 수 있도록 설계된다. 액체 슬러리 형태는 분말 형태와 비교하여 식료품 또는 음료 제품에 더 용이하게 그리고 경제적으로 첨가될 수 있으며, 예를 들어 가공 시간이 더 짧고, 생산, 제조, 및 가공하는 데 비용이 더 저렴하고, 조성물 전체에 걸쳐 균일하게 농축될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "식품"은 인간 식품, 애완동물 사료(예컨대, 개, 고양이 등과 같은 반려 동물이 섭취하도록 설계된 사료), 또는 동물 사료(예컨대, 가축 등과 같은 비-반려 동물이 섭취하도록 설계된 사료)를 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "음료"는 인간 음료, 애완동물 음료(예컨대, 개, 고양이 등과 같은 반려 동물이 섭취하도록 설계된 음료), 또는 동물 음료(예컨대, 가축 등과 같은 비-반려 동물이 섭취하도록 설계된 음료)를 지칭한다. 또한, 액체 슬러리는 저온 살균 방법, 예컨대, 고온단시간살균(High Temperature Short Time: HTST), 고압 저온 살균(High Pressure Pasteurization: HPP) 등을 견딜 수 있도록 설계된다. 일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 연장된 보관 수명을 가질 수 있다. 예를 들어, 연장된 보관 수명은 최대 3개월, 최대 6개월, 또는 식료품 또는 음료 제품의 최대 보관 수명일 수 있다. 또한, 액체 슬러리의 조성 구성은 액체 슬러리가 임의의 적합한 액체 전달 시스템(예컨대, 투약 시스템)을 사용하여 식료품 또는 음료 제품에 첨가될 수 있게 하는 점도 및 레올로지 특성을 초래한다.
포자-함유 프로바이오틱 조성물은 일반적으로 프로바이오틱 물질을 포함한다. 일부 실시형태에서, 조성물에 존재하는 프로바이오틱 물질은 조성물의 중량을 기준으로 약 5% 내지 70%, 약 30% 내지 70%, 약 40% 내지 60%, 약 40% 내지 50%, 약 5% 내지 30%, 약 5% 내지 25%, 또는 약 5% 내지 20%의 양일 수 있다. 다른 실시형태에서, 프로바이오틱 물질은 이들 나열된 값 중 임의의 것 사이의 양으로 조성물에 존재할 수 있다.
프로바이오틱 물질은 복수의 포자 및 하기 기재된 바와 같은 적어도 하나의 부형제를 포함한다. 복수의 포자는 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주로부터 유래한다. 일부 실시형태에서, 조성물에 존재하는 복수의 포자는 조성물의 중량을 기준으로 약 5억(M) CFU/g 내지 1조(T) CFU/g, 약 10억(B) CFU/g 내지 1조(T) CFU/g, 약 5억(M) CFU/g 내지 50억(B) CFU/g, 또는 약 5억(M) CFU/g 내지 100억(B) CFU/g의 양일 수 있다. 다른 실시형태에서, 조성물에 존재하는 복수의 포자는 이들 나열된 값 중 임의의 것 사이의 양일 수 있다.
적어도 하나의 포자-형성 박테리아 균주는 임의의 포자-형성 박테리아 균주(들)를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주는 적어도 하나의 바실러스 박테리아 균주일 수 있다. 적합한 포자-형성 박테리아 균주의 비-제한적인 예는 적어도 하나의 바실러스 코아귤런스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 서브틸리스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 클라우시 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 인디커스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 리케니포미스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 푸밀러스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 메가테리움 박테리아 균주, 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다.
일부 실시형태에서, 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주는 적어도 하나의 바실러스 코아귤런스 박테리아 균주일 수 있다. 예를 들어, 적어도 하나의 바실러스 코아귤런스 박테리아 균주는 바실러스 코아귤런스 GBI-30 균주(ATCC 지정 번호 PTA-6086)를 포할 수 있다. 바실러스 코아귤런스 GBI-30 균주의 추가적인 상세 내용은 미국 특허 제6,849,256호, 제7,713,726호, 및 제8,277,799호에서 찾을 수 있으며, 이들 각각은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
포자-함유 프로바이오틱 조성물 전체에 걸친 포자 분포의 균질성은 안정적일 수 있다. 예를 들어, 조성물은 실질적인 침강(예컨대, 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 부피를 기준으로 포자 양의 5%를 초과) 또는 상 분리(예컨대, 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 부피를 기준으로 포자 양의 5%를 초과)를 겪지 않는다. 이러한 균질성은 단독으로 또는 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 비중과 함께 식료품 또는 음료 제품 내에 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 재현 가능한 투약을 용이하게 한다. 일부 실시형태에서, 조성물의 비중은 약 1.0 내지 1.5 또는 약 1.25 내지 1.45일 수 있다. 다른 실시형태에서, 조성물의 비중은 이들 나열된 값 중 임의의 것 사이일 수 있다.
일부 실시형태에서, 프로바이오틱 물질은 또한 적어도 하나의 당류를 포함할 수 있다. 적합한 당류의 비제한적인 예는 단당류 및 다당류, 예컨대, 이눌린 또는 막토덱스트린, 갈락토당류, 프럭토올리고당류를 포함한다. 예를 들어, 이눌린은 프로바이오틱 물질의 중량을 기준으로 약 75% 내지 95%, 약 80% 내지 90%, 또는 약 75% 내지 80%의 양으로 존재할 수 있다. 이와 같은 실시형태에서, 이눌린은 레올로지 개질제로서 기능할 수 있다.
다른 실시형태에서, 프로바이오틱 물질은 이눌린을 포함하지 않는다. 이와 같은 실시형태에서, 이눌린은 포자-함유 프로바이오틱 조성물에 별도로 첨가될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "첨가된 이눌린"은 프로바이오틱 물질 내에 함유되지 않고, 오히려 포자-함유 프로바이오틱 조성물에 별도로 첨가되는 이눌린을 지칭하는 데 사용된다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 별도로 첨가된 이눌린은 조성물의 중량을 기준으로 약 0.1% 내지 30%, 약 0.1% 내지 25%, 또는 약 0.1% 내지 20%의 양으로 존재할 수 있다. 이와 같은 경우에, 별도로 첨가된 이눌린은 레올로지 개질제로서 기능할 수 있다.
일부 실시형태에서, 프로바이오틱 물질은 말토덱스트린을 포함할 수 있다. 이와 같은 실시형태에서, 이눌린은 포자-함유 프로바이오틱 조성물에 별도로 첨가될 수 있으며, 본 명세서에서 "첨가된 이눌린"으로 지칭될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 첨가된 이눌린은 조성물의 중량을 기준으로 약 0.1% 내지 30%, 약 0.1% 내지 25%, 또는 약 0.1% 내지 20%의 양으로 존재할 수 있다.
일부 실시형태에서, 프로바이오틱 물질은 무지방 분유를 포함할 수 있다. 이와 같은 실시형태에서, 이눌린은 포자-함유 프로바이오틱 조성물에 별도로 첨가될 수 있으며, 본 명세서에서 "첨가된 이눌른"으로 지칭될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 별도로 첨가된 이눌린은 조성물의 중량을 기준으로 약 0% 내지 30%, 약 0% 내지 25%, 또는 약 0% 내지 20%의 양으로 존재할 수 있다.
프로바이오틱 물질에 추가적으로, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 물을 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 물은 조성물의 중량을 기준으로 약 20% 내지 60%, 약 20% 내지 50%, 또는 약 20% 내지 40%의 양으로 존재한다.
또한, 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 포자의 휴면상태는 수분 활성도를, 예를 들어 약 0.95 수분 활성도(Aw) 미만으로 최소화함으로써 유지될 수 있다. 즉, 낮은 수분 활성도는 포자의 발아를 저해할 수 있다. 낮은 수분 활성도는 또한 일정 기간 동안, 예를 들어 약 최대 3개월, 최대 6개월, 또는 상기 조성물(들)을 함유하는 식료품 또는 음료 제품의 최대 보관 수명 동안 조성물 내 침강 또는 상 분리를 감소시킨다. 결과적으로, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 조성물을 제품, 예를 들어 식료품 또는 음료 제품에 첨가하기 전에, 균일하게 현탁된 상태로 남아 있을 수 있다. 즉, 종래의 포자-함유 프로바이오틱 조성물, 예를 들어 Sanofi에 의해 생산되고 시판되는 Enterogermina와 달리, 본 발명의 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 식료품 또는 음료 제품에 첨가하기 전에 조성물을 완전히 혼합할 필요 없이 식료품 또는 음료 제품에 첨가될 수 있다. 따라서, 본 명세서에 기재된 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 장점은 장기간 동안 균일한 현탁액을 유지하는 것이다.
더욱이, 낮은 수분 활성도를 통한 포자 발아의 저해는 다른 장점을 야기할 수 있다. 예를 들어, 원하는 사용 전에, 포자는 장기간 동안 조성물 전체에 걸쳐 균일하게 분산된 상태로 유지되어, 보관 수명을 증가시킬 수 있다. 또한, 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 포자는 환경 요인에 반응하여 발아 또는 증식하지 않도록 저항성 상태로 남아 있을 수 있다. 결과적으로, 포자는, 고온단시간살균(HTST), 고압 저온 살균(HPP) 등과 같은 저온 살균 후에 생존할 수 있다.
일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 수분 활성도는 약 0.001 Aw 내지 약 0.99 Aw일 수 있다. 일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 수분 활성도는 약 0.95 Aw 이하, 또는 약 0.90 Aw 이하, 또는 0.85 Aw 이하, 또는 약 0.80 Aw 이하, 또는 약 0.75 Aw 이하, 또는 약 0.70 Aw 이하, 또는 약 0.65 Aw 이하, 또는 약 0.60 Aw 이하, 또는 약 0.55 Aw 이하, 또는 약 0.50 Aw 이하, 또는 약 0.45 Aw 이하, 또는 약 0.40 Aw 이하, 또는 약 0.35 Aw 이하, 또는 약 약 0.30 Aw 이하, 또는 약 0.25 Aw 이하, 또는 약 0.20 Aw 이하, 또는 약 0.15 Aw 이하, 또는 약 0.10 Aw 이하, 또는 약 0.05 Aw 이하, 또는 약 0.01 Aw 이하, 또는 약 0.005 Aw 이하, 또는 약 0.004 Aw 이하, 또는 약 0.003 Aw 이하, 또는 약 0.002 Aw 이하이다. 이 매개변수는 적어도 하나의 습윤제의 포함에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 적어도 하나의 습윤제를 포함할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "습윤제"는 물을 끌어당기고 보유하는, 흡습성 물질이다. 적어도 하나의 습윤제는 글리세린일 수 있다. 글리세린은 조성물의 중량을 기준으로 약 30% 내지 75%, 약 30% 내지 70%, 약 40% 내지 75%, 약 50% 내지 75%, 약 55% 내지 65%, 약 50% 내지 70%, 약 40% 내지 60%, 또는 약 40% 내지 50%의 양일 수 있다. 다른 적합한 습윤제의 비-제한적인 예는 당, 예를 들어 솔비톨(예컨대, 조성물의 중량을 기준으로 약 30% 내지 75%), 염(예컨대, 조성물의 중량을 기준으로 약 30% 내지 75%), 프로필렌 글라이콜(예컨대, 조성물의 중량을 기준으로 약 30% 내지 75%), 및 검, 예를 들어 잔탄 아카시아검(예컨대, 조성물의 중량을 기준으로 10% 내지 30%)을 포함할 수 있다.
포자-함유 프로바이오틱 조성물은 이눌린 및/또는 첨가된 이눌린을 함유하지 않는 적어도 하나의 레올로지 개질제를 포함할 수 있다. 이눌린 및/또는 첨가된 이눌린을 함유하지 않는 적합한 레올로지 개질제의 비-제한적인 예는 잔탄검, 구아검, 아라비아검, 카라기난, 젤란검 등을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이눌린 및/또는 첨가된 이눌린을 함유하지 않는 적어도 하나의 레올로지 개질제는 조성물의 중량을 기준으로 약 0.01% 내지 0.3%의 양으로 존재한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 이눌린 및/또는 첨가된 이눌린을 함유하지 않는 적어도 하나의 레올로지 개질제는 조성물의 중량을 기준으로 약 0.01% 내지 0.3%의 양으로 존재하는 잔탄검이다. 다른 실시형태에서, 이눌린 및/또는 첨가된 이눌린을 함유하지 않는 적어도 하나의 레올로지 개질제는 조성물의 중량을 기준으로 약 0.01% 내지 0.3%의 양으로 존재하는 아라비아검이다. 다른 실시형태에서, 이눌린 및/또는 첨가된 이눌린을 함유하지 않는 적어도 하나의 레올로지 개질제는 조성물의 중량을 기준으로 약 0.01% 내지 0.3%의 양으로 존재하는 젤란검이다.
일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 염을 함유하지 않는다. 다른 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 조성물의 중량을 기준으로 약 10% 미만, 약 5% 미만, 약 1% 미만, 약 0.1% 미만, 약 0.01% 미만, 약 0.001% 미만, 또는 약 0.0001% 미만의 양으로 존재하는 염을 포함할 수 있다. 염의 비-제한적인 예는 식용 소금, 예를 들어 NaCl, 코셔 소금(kosher salt), 요오드 첨가 소금, 바다 소금, 히말라야 소금을 포함한다. 다른 염은, 예를 들어 칼륨, 마그네슘, 칼슘, 암모늄의 염화 염을 포함한다.
일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 4℃의 온도에서 측정된 점도가 약 25 센티푸아즈(cP) 내지 2000 센티푸아즈(cP)일 수 있다. 예를 들어, 4℃의 온도에서 측정된 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 점도는 약 5 cP 내지 100,000 cP, 약 5 cP 내지 10,000 cP, 또는 약 5 cP 내지 50,000 cP일 수 있다.
포자-함유 프로바이오틱 조성물은 또한 추가적인 요소, 예컨대, 천연 향료(들), 방부제, 산미료 등, 및 이들의 임의의 조합물을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 조성물의 중량을 기준으로 약 0% 내지 2%의 양으로 존재하는 적어도 하나의 천연 향료를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 조성물의 중량을 기준으로 약 0% 내지 2%의 양으로 존재하는 적어도 하나의 방부제를 포함할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "방부제"는 바람직하지 않은 미생물의 성장을 저해하는 성분을 지칭한다. 적합한 방부제의 비-제한적인 예는 솔빈산칼륨, 벤조산나트륨, 솔빈산, 벤조산, 및 프로피온산을 포함한다.
일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 조성물의 중량을 기준으로 약 0% 내지 2%의 양으로 존재하는 적어도 하나의 산미료를 포함할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "산미료"는 조성물의 pH를 최종 pH(예컨대, 약 5 미만)로 낮추는 성분을 지칭한다. 적어도 하나의 산미료는 유기산 또는 무기산일 수 있다. 적합한 산미료의 비-제한적인 예는 락트산, 아세트산, 시트르산, 염산, 말산, 및 인산을 포함한다. 포자-함유 프로바이오틱 조성물에 적어도 하나의 산미료를 첨가하면 조성물의 pH를 변형시켜, 예를 들어 변질 미생물의 성장을 저해시킬 수 있다. 일부 실시형태에서, 산미료(예컨대, 락트산)를 포함하는 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 pH는 pH가 4.6 미만일 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 pH가 약 2.0 내지 5, 약 2.5 내지 5, 또는 약 3.0 내지 5일 수 있다.
일부 실시형태에서, 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 pH가 약 2.0 내지 9.5, 약 3.0 내지 8.0, 또는 약 2.5 내지 8.5일 수 있다.
포자-함유 프로바이오틱 조성물은 임의의 적합한 방법을 사용하여 생성될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 방법은 물과 글리세린을 함께 혼합하여 제1 혼합물을 형성하는 단계, 적어도 하나의 레올로지 개질제를 프로바이오틱 물질에 (예컨대, 1:10 비율로) 첨가하여 제2 혼합물을 형성하는 단계, 및 그 다음 제1 및 제2 혼합물을 (예컨대, 고전단 하에서) 합하고 혼합하여 액체 슬러리를 형성하는 단계를 포함할 수 있다. 방법은 또한 적어도 하나의 산미료, 예를 들어 락트산, 또는 방부제, 예를 들어 솔빈산칼륨, 벤조산나트륨, 및/또는 솔빈산을 첨가하는 단계를 포함할 수 있다. 방법은 또한, 적어도 하나의 산미료 또는 방부제를 첨가한 후, 고전단 하에 액체 슬러리를 균질화하는 단계를 포함할 수 있다. 균질화 후, 액체 슬러리는 (예컨대, HPP 또는 HTST를 통해) 저온 살균하여 포자-함유 프로바이오틱 조성물을 형성한 후 (예컨대, 캡이 있거나 없는 0.1 내지 20ℓ 백에) 포장될 수 있다. 대안적으로, 적어도 하나의 산미료 또는 방부제를 첨가한 후, 고전단 하에 액체 슬러리를 균질화하는 단계에 의해 포자-함유 프로바이오틱 조성물이 생성되고, 이는 이 후에 포장될 수 있다. 일부 실시형태에서, 포장된 포자-함유 프로바이오틱 조성물은 이 후에 (예컨대, HPP를 통해) 저온 살균될 수 있다.
포장된 포자-함유 프로바이오틱 조성물은, 예를 들어 혼합, 예를 들어 저속 교반 또는 고속 교반, 또는 분무를 통해, 식료품 또는 음료 제품에 첨가될 수 있다. 일부 실시형태에서, 포장된 슬러리를 식료품 또는 음료 제품으로 전달하는 것은 무균 조건 하에 수행될 수 있다.
포자-함유 프로바이오틱 액체 슬러리 조성물은 식료품 또는 음료 제품에 대한 첨가제일 수 있다. 식료품 또는 음료 제품은 냉장, 냉동, 또는 상온 상태일 수 있다.
포자-함유 조성물 및 방법은 하기 비-제한적인 실시예에 의해 추가로 이해될 수 있다.
실시예
실시예 1: 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 제조
하기 기재된 예시적인 절차를 사용하여 16개의 상이한 포자-함유 프로바이오틱 조성물의 샘플을 제조하였다.
재킷이 있는 스테인리스강 혼합 용기에서 물을 40℉ 내지 100℉까지 가열하거나 냉각한다. 고전단 용해기 속도 20% 내지 80% 및 측면 스윕 교반 50% 내지 100%로 물을 교반한다. 교반 동안, pH가 4.0 내지 4.6이 될 때까지 산미료를 물에 첨가한다. 선택적으로 방부제를 첨가한다. 잔탄검 및/또는 아라비아검 및/또는 젤란검을 대략 1:10의 비율로 포자-함유 프로바이오틱 분말과 혼합한다. 건조 물질을 물/산미료에 첨가하고 고전단 용해기 속도 20% 내지 80% 및 측면 스윕 교반 50% 내지 100%로 블렌딩하여 액체 슬러리를 형성한다. 이를 5분 동안 혼합한다. 교반 동안, 40℉ 내지 100℉에서 글리세린을 액체 슬러리에 첨가한다. 고전단 용해기 속도 20% 내지 80% 및 측면 스윕 교반 50% 내지 100%를 사용하여 액체 슬러리를 5 내지 20분 동안 혼합한다. 용기에서 인라인 고전단 장비(예컨대, IKA, Greerco, GEA, Niro Soavi Homogenizer)를 통해 액체 슬러리를 옮긴다. 그 다음 전단 장비에서 열처리 장비(예컨대, 플레이트 또는 표면긁기 열 교환기) 내로 및 이를 통해 액체 슬러리를 옮겨서 액체 슬러리를 160℉ 내지 200℉의 온도까지 15 내지 45초 동안 가열한다. 그 다음 가열된 액체 슬러리를 인라인 냉각 열 교환기(플레이트 또는 표면긁기)를 통해 50℉ 이하의 온도까지 냉각시킨다. 그 다음 냉각된 액체 슬러리를 0.1ℓ 내지 20ℓ 백 인 박스(bag-in-box)와 같은 용기에 포장한다.
샘플 1 내지 8 및 9 내지 16의 조성 구성이 각각 표 1A 및 표 1B에 표시되어 있다.
Figure pct00001
Figure pct00002
실시예 2: 포자-함유 조성물의 특성화
실시예 1에서 제조된 바와 같은 샘플 1 내지 16을 각각 특성화하였다. 표 2는 수행한 다양한 분석 및 사용한 방법을 나타낸다. 표 3A는 샘플 1 내지 8에 대한 이들 분석 결과를 나타내고 표 3B는 샘플 9 내지 16에 대한 이들 분석 결과를 나타낸다.
Figure pct00003
Figure pct00004
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
실시예 3: 비교 테스트 - 침강
액체 조성물을 교반 없이 2주 동안 보관하였다. 액체 조성물을 육안으로 검사하여, 액체 조성물의 성분이 침강되지 않았음을 확인하였다.
실시예 4: 비교 테스트 - 수분 활성도 및 점도
Enterogermina 샘플(미국 제2015/0118203호)을 수분 활성도 및 점도에 대해 테스트하고 본 명세서의 샘플과 비교하였다. Enterogermina 제품의 Aw는 1이었다. 대조적으로, 본 명세서의 샘플 1 내지 16의 Aw는 약 0.6 내지 약 0.7이었다.
정의
본 명세서에서 사용되는 용어는 단지 특정 실시형태를 기재하기 위한 것으로, 본 개시내용을 제한하려는 것으로 의도되지 않는다. 달리 구체적으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술 및 과학 용어는 (예컨대, 세포 배양, 세균학, 분자 유전학, 및 생화학에서) 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 가지는 것으로 간주되어야 한다.
값 또는 범위는 "약" 및/또는 "약" 하나의 특정 값에서 다른 특정 값까지로 표현될 수 있다. 이와 같은 값 또는 범위가 표현될 때, 개시된 다른 실시형태는 나열된 특정 값 및/또는 하나의 특정 값에서 다른 특정 값까지를 포함한다. 유사하게, 값이 근사치로 표현될 때, 앞에 "약"을 사용함으로써, 여기에 다수의 값이 개시되어 있고, 특정 값이 다른 실시형태를 형성한다는 것을 이해할 것이다. 그 안에 다수의 값이 개시되어 있고, 각각의 값은 또한 본 명세서에서 값 자체에 추가적으로 "약" 해당 특정 값으로 개시되어 있음을 추가로 이해할 것이다. 실시형태에서, "약"은, 예를 들어 나열된 값의 10% 이내, 나열된 값의 5% 이내 또는 나열된 값의 2% 이내를 의미하는 데 사용될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태는 문맥이 달리 명백하게 나타내지 않는 한, 복수 형태도 또한 포함하는 것으로 의도된다. 또한, 용어 "포함하는(including)", "포함한다", "가지는", "가진다", "~이 있는", 또는 이들의 변형어가 상세한 설명 및/또는 청구범위에서 사용될 경우, 용어 "포함하는(comprising)"과 유사한 방식으로 포괄적인 것으로 의도된다.
본 명세서서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 바와 같이, 용어 "또는"은 문맥이 달리 명백하게 지시하지 않는 한 일반적으로 "및/또는"을 포함하는 의미로 이용된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 항목, 구성, 장치, 방법, 공정, 시스템 등의 정의되거나 기재된 요소와 관련하여 용어 "포함하는", "포함하다" 또는 "포함된", 및 이들의 변형어는 추가적인 요소를 허용하는 포괄적이거나 개방형인 것으로 의미되며, 이에 의해 정의되거나 기재된 항목, 구성, 장치, 방법, 공정, 시스템 등은 명시된 요소(또는, 적절한 경우 이들의 등가물)를 포함하고 다른 요소가 포함될 수 있고 여전히 정의된 항목, 구성, 장치, 방법, 공정, 시스템 등의 범주/정의에 포함될 수 있음을 나타낸다.
본 교시내용을 기재하고 정의하기 위해, 달리 나타내지 않는 한, 용어 "실질적으로"는 본 명세서에서 임의의 양적 비교, 값, 측정, 또는 다른 표현에 기인할 수 있는 고유한 불확실성 정도를 나타내는 데 이용되는 것에 유의한다. 용어 "실질적으로"는 또한 본 명세서에서 정량적 표현이 문제가 되는 주제의 기본적인 기능을 변경하지 않으면서 언급된 참조와 다를 수 있는 정도를 나타내는 데 이용된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "발아-허용 조건"은 포자의 발아를 가능하게 하는 환경 조건이다. 이러한 환경 조건은 온도, 영양소, pH 수준 등을 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "상온에서 안정적"은 주변, 냉장 또는 냉동 조건 하에서 안정적이고 섭취에 안전한 조성물을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "식이성 첨가제"는 인간 또는 동물 섭취용으로 의도된 고체 및/또는 유체 영양 첨가제이다.
본 명세서에 기재된 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제가 시판, 판매, 유통, 저장 등이 되는 방식에 제한이 없다. 예를 들어, 상기 실시예는 포자-함유 프로바이오틱 조성물이 캡이 있거나 없는 백 및 백 인 박스와 같은 다양한 형태로 포장되는 실시형태를 기재한다. 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제는 식품 및 음료 적용을 위한 산업적 가공을 위해 이러한 또는 유사한 형식으로 유통될 수 있다. 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제는 또한 식이 보충제와 같은 개별 소비자 섭취를 위해 포장 및 유통될 수 있다. 이는, 밀봉된 바이알, 액체 보충제 등을 포함하여, 임의의 잘 알려진 1회 제공량 및 다회 제공량 포장을 포함할 수 있다.
상기 기재가 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주의 사용 및 휴면 상태를 유지하기 위한 조건에 초점을 맞출 수 있지만, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제는 또한 (포자와 별개로 또는 포자에 추가적으로) 캡슐화된(비-포자형성) 영양형 프로바이오틱스(vegetative probiotics), 예를 들어 락토바실러스(Lactobacillus) 및 비피도박테리움(Bifidobacterium) 종을 사용하여 제조될 수 있음을 이해할 것이다.
당업자라면 상기 기재된 실시형태를 기반으로 하여 본 개시내용의 특징 및 장점을 추가로 이해할 것이다. 따라서, 본 발명은 첨부된 청구범위에 의해 지시되는 경우를 제외하고, 특별히 나타내고 기재된 것에 의해 제한되어서는 안 된다. 본 명세서에서 인용된다고 하는 모든 간행물 및 참조문헌은 명백히 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다. 전체적으로 또는 부분적으로 본 명세서에 참조에 의해 원용된 임의의 특허, 간행물, 또는 정보는 원용된 자료가 이러한 문헌에 제시된 기존 정의, 진술, 또는 다른 개시 자료와 충돌하지 않는 범위 내에서만 본 명세서에서 원용된다. 이와 같이, 본 명세서에 명시적으로 제시된 개시내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된 임의의 상충하는 자료를 대체한다.

Claims (25)

  1. 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법으로서,
    적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주 유래의 포자, 당류, 및 습윤제를 포함하는 액체 슬러리를 제공하는 단계; 및
    액체 슬러리를 저온 살균하여 식이성 첨가제를 산출하는 단계
    를 포함하되, 식이성 첨가제는 약 0.7 미만의 수분 활성도(Aw)를 포함하고;
    식이성 첨가제는 약 2.0 내지 9.5의 pH를 포함하고;
    복수의 포자가 발아되지 않은 상태로 남아 있고 저온 살균 후 적어도 2개월 동안 균일하게 현탁된 상태를 유지하여 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 산출하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 포자의 적어도 90%는 저온 살균 후 적어도 2개월 동안 발아되지 않은 상태로 남아 있는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 식이성 첨가제는 1%(w/v) 미만의 영양형 박테리아 세포(vegetative bacterial cell)를 포함하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 포자의 적어도 90%는 저온 살균 후 발아 적격으로 남아 있는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제 중 포자의 적어도 90%는 발아-허용 조건에 노출된 후 발아하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  6. 제5항에 있어서, 상기 발아-허용 조건은 적어도 1 Aw 및 37℃를 포함하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제 중 포자의 적어도 90%는 포유동물이 섭취한 후 발아하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  8. 제1항에 있어서, 상기 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주는 적어도 하나의 바실러스(Bacillus) 박테리아 균주를 포함하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주는 적어도 하나의 바실러스 코아귤런스(Bacillus coagulans) 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 클라우시(Bacillus clausii) 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 인디커스(Bacillus indicus) 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 리케니포미스(Bacillus licheniformis) 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 푸밀러스(Bacillus pumilus) 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquifaciens) 박테리아 균주, 또는 적어도 하나의 바실러스 메가테리움(Bacillus megaterium) 박테리아 균주를 포함하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  10. 제8항에 있어서, 상기 적어도 하나의 바실러스 코아귤런스 박테리아 균주는 바실러스 코아귤런스 GBI-30 균주(ATCC 지정 번호 PTA-6086)를 포함하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  11. 제1항에 있어서, 상기 포자의 적어도 95%는 저온 살균 후 생존 가능한, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  12. 제1항에 있어서, 상기 복수의 포자는 조성물의 중량을 기준으로 약 5억 CFU/g 내지 1조 CFU/g의 양으로 존재하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  13. 제1항에 있어서, 상기 적어도 하나의 습윤제는 글리세린, 당, 염, 프로필렌 글라이콜 또는 검 중 적어도 하나인, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  14. 제1항에 있어서, 이눌린을 포함하지 않는 적어도 하나의 레올로지 개질제를 추가로 포함하되, 적어도 하나의 레올로지 개질제는 조성물의 중량을 기준으로 약 0.01% 내지 0.3%의 양으로 존재하는, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  15. 제14항에 있어서, 상기 적어도 하나의 레올로지 개질제는 잔탄검, 아라비아검, 젤란검, 구아검 또는 카라기난 중 적어도 하나인, 상온에서 안정적인 포자-함유 프로바이오틱 식이성 첨가제를 제조하는 방법.
  16. 포자-함유 프로바이오틱 조성물로서,
    액체 슬러리를 포함하되, 상기 액체 슬러리는,
    적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주 유래의 포자를 포함하는 프로바이오틱 물질로서, 포자의 적어도 90%는 저온 살균 시간 및 온도에서 생존 가능한, 상기 프로바이오틱 물질;
    당류 및
    적어도 하나의 습윤제
    를 포함하고, 상기 조성물은 수분 활성도(Aw)가 약 0.7 미만이고, pH는 약 5.0 미만인, 포자-함유 프로바이오틱 조성물.
  17. 제16항에 있어서, 상기 적어도 하나의 습윤제는 글리세린, 당, 염, 프로필렌 글라이콜 또는 검 중 적어도 하나인, 포자-함유 프로바이오틱 조성물.
  18. 제16항에 있어서, 상기 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주는 적어도 하나의 바실러스 박테리아 균주를 포함하는, 포자-함유 프로바이오틱 조성물.
  19. 제18항에 있어서, 상기 적어도 하나의 포자-형성 프로바이오틱 박테리아 균주는 적어도 하나의 바실러스 코아귤런스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바셀러스 서브틸리스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 클라우시 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 인디커스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 리케니포미스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 푸밀러스 박테리아 균주, 적어도 하나의 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 박테리아 균주, 또는 적어도 하나의 바실러스 메가테리움 박테리아 균주를 포함하는, 포자-함유 프로바이오틱 조성물.
  20. 제18항에 있어서, 상기 적어도 하나의 바실러스 코아귤런스 박테리아 균주는 바실러스 코아귤런스 GBI-30 균주(ATCC 지정 번호 PTA-6086)를 포함하는, 포자-함유 프로바이오틱 조성물.
  21. 제16항에 있어서, 복수의 포자는 조성물의 중량을 기준으로 약 5억 CFU/g 내지 1조 CFU/g의 양으로 조성물에 존재하는, 포자-함유 프로바이오틱 조성물.
  22. 제16항에 있어서, 이눌린을 포함하지 않는 적어도 하나의 레올로지 개질제를 추가로 포함하되, 적어도 하나의 레올로지 개질제는 조성물의 중량을 기준으로 약 0.01% 내지 0.3%의 양으로 존재하는, 포자-함유 프로바이오틱 조성물.
  23. 제22항에 있어서, 상기 적어도 하나의 레올로지 개질제는 잔탄검, 아라비아검, 젤란검, 구아검, 또는 카라기난 중 적어도 하나인, 포자-함유 프로바이오틱 조성물.
  24. 식료품으로서,
    식품 및
    제16항 내지 제23항 중 어느 한 항의 포자-함유 프로바이오틱 조성물
    을 포함하는, 식료품.
  25. 음료 제품으로서,
    액체 음료 및
    제16항 내지 제23항 중 어느 한 항의 포자-함유 프로바이오틱 조성물
    을 포함하는, 음료 제품.
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