KR20220062030A - 다중-티로신 키나제 억제제 및 면역 관문 억제제를 포함하는 조합을 사용한 암의 치료 - Google Patents

다중-티로신 키나제 억제제 및 면역 관문 억제제를 포함하는 조합을 사용한 암의 치료 Download PDF

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베이진 엘티디
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Abstract

면역 관문 억제제와 조합하여 다중-티로신 키나제 억제제인 N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 암의 예방, 진행 지연 또는 치료 방법이 본원에서 제공된다. 또한, 면역 관문 억제제와 조합하여 다중-티로신 키나제 억제제인 N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 약제학적 조합물 및 이의 용도가 제공된다.

Description

다중-티로신 키나제 억제제 및 면역 관문 억제제를 포함하는 조합을 사용한 암의 치료
관련 출원의 상호 참조
본 출원은 2019년 9월 11일에 출원된 국제 특허 출원 PCT/CN2019/105418의 우선권의 이익을 주장하며, 그 개시 내용은 모든 목적을 위해 그 전체가 참고로 본원에 포함된다.
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개시내용의 분야
면역 관문 억제제와 조합하여 다중-티로신 키나제 억제제(예를 들어, N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염)를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 암의 예방, 진행 지연 또는 치료 방법이 본원에 개시되어 있다. 또한 면역 관문 억제제와 조합하여 다중-티로신 키나제 억제제(예를 들어, N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염)를 포함하는 약제학적 조합물 및 이의 용도가 본원에 개시되어 있다.
암세포는 치료를 받는 동안 선택적인 압력에 직면하며, 개별 암세포에서 발생하는 돌연변이는 원래의 암의 지속적인 진화를 나타낸다. 많은 악성 종양에서 개별 항암 요법에 대한 내성이 발생한다. 이것은 초기 의미있는 반응을 달성한 치료 환자의 대부분에서 획득 내성이 발생하는 면역 관문 차단제의 경우에도 해당된다. 이러한 획득된 내성 현상은 암세포가 환경에 적응하고 면역 공격에서 살아남도록 돕는다는 점에서 극복해야 하는 치료적 난관을 상기시킨다[Syn NL, Teng MWL , Mok TSK, et al. De-novo and acquired resistance to immune checkpoint targeting. Lancet Oncol . 2017;18(12) : e731-41.].
PD-1 또는 PD-L1을 표적으로 하는 모노클로날 항체는 이러한 상호작용을 차단하고 암세포에 대한 면역 반응을 향상시킬 수 있다. 이 항체는 피부 흑색종, 비-소세포폐암(NSCLC), 신장암, 방광암, 두경부암, 및 호지킨 림프종을 포함하는 여러 유형의 암을 치료하는 데 도움이 되는 것으로 나타났다. 단일-작용제 관문 억제제에 반응하지 않는 대부분의 암세포는 암세포가 성장하고 생존할 수 있도록 하는 선천적 메커니즘을 통해 탈출한다. 결과적으로 질병은 자연사와 일치하는 속도로 진행된다. 그러나 내인성 내성과 달리, 이전에 임상 시험을 장기간 추적한 후 임상적 이점이 있었던 환자에서 현재 후기 재발이 나타나고 있으며, 이는 획득 내성의 출현을 시사한다[Jenkins RW, Barbie DA, and Flaherty KT. Mechanisms of resistance to immune checkpoint inhibitors. Br J Cancer. 2018;118(1) :9-16.]. 선천적 또는 획득 내성을 극복하여 관문 억제제의 임상적 효능을 개선시키는 전략이 필요하다.
국제공개공보 WO2009/026717A에는 다중 단백질 티로신 키나제의 억제 활성, 예를 들어 VEGF 수용체 키나제 및 HGF 수용체 키나제의 억제 활성을 갖는 화합물이 개시되어 있다. 특히, 본원에는 다중-티로신 키나제 억제제인 N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드(화합물 1)가 개시되며, 이와 밀접하게 관련된 티로신 키나제 스펙트럼(RET, CBL, CHR4q12, DDR 및 Trk 등)은 다중 세포 성장, 생존 및 종양 진행으로 이어지는 신호전달 경로의 주요 조절자로서, 강력한 억제 효과가 입증되어 있다.
Figure pct00001
본 출원의 발명자들은 다중-티로신 키나제 억제제(예를 들어, 상기 언급된 화합물 1)와 면역 관문 억제제(예를 들어, 본 개시내용에서 항-PD-1 항체 Mab-1) 의 조합이 각각의 상기 활성 약제학적 작용제 단독의 단일요법과 비교하여 암에서 종양 성장의 상당한 억제를 생성한다는 것을 발견했다. Mab -1 및 화합물 1로의 병용 치료는 난소암을 포함하는 다양한 암 환자에서 항종양 활성이 있어 유망하다.
첫 번째 양태에서, 치료 유효량의 면역 관문 억제제와 조합하여 치료적 유효량의 다중-티로신 키나제 억제제(예를 들어, N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염)를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 암의 예방, 진행 지연 또는 치료 방법이 본원에 개시되어 있다.
두 번째 양태에서, 암의 예방, 진행 지연 또는 치료에 사용하기 위한, 면역 관문 억제제와 조합하여 다중-티로신 키나제 억제제(예를 들어, N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염)를 포함하는 약제학적 조합물이 본원에 개시되어 있다.
세 번째 양태에서, 면역 관문 억제제와 조합하여 암의 예방, 진행 지연 또는 치료에 사용하기 위한, 다중-티로신 키나제 억제제(예를 들어, N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염)가 본원에 개시되어 있다. 이 양태의 한 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제(예를 들어, N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염)와 조합하여 암의 예방, 진행 지연 또는 치료에 사용하기 위한 면역 관문 억제제가 본원에 개시되어 있다.
네 번째 양태에서, 암의 예방, 진행 지연 또는 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에서의 약제학적 조합물의 용도가 본원에 개시되어 있으며, 상기 약제학적 조합물은 다중-티로신 키나제 억제제(예를 들어, N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염), 및 면역 관문 억제제를 포함한다.
다섯 번째 양태에서, 제1 용기, 제2 용기 및 패키지 삽입물을 포함하는 제조 물품 또는 "키트"가 본원에 개시되어 있으며, 여기서 제1 용기는 다중-티로신 키나제 억제제(예를 들어, N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염)를 포함하는 약제의 적어도 1회 용량을 포함하고, 제2 용기는 면역 관문 억제제를 포함하는 약제의 적어도 1회 용량을 포함하고, 패키지 삽입물은 약제를 사용하여 대상체의 암을 치료하기 위한 설명서를 포함한다.
병용 요법으로서 본원에 개시된 방법 및 약제학적 조합은 치료제 중 하나의 투여보다 상당히 더 효과적이다.
상기 5가지 양태 각각의 구현예에서, 면역 관문 억제제는 모노클로날 항체이다. 상기 5가지 측면 각각의 구현예에서, 면역 관문 억제제는 항-PD-1 항체이다.
상기 5가지 양태 각각의 구현예에서, 암은 비-소세포폐암(NSCLC), 난소암(OC), 신세포 암종(RCC) 또는 흑색종을 포함하는 폐암으로부터 선택된다.
상기 5가지 양태 각각의 구현예에서, 암 또는 종양은 항-PD-1 항체 또는 항-PD-L1 항체로부터 선택되는 관문 억제제에 대해 내성이거나 불응성이다.
본 개시내용의 구현예에서, 암은 PD-L1 발현이다.
본 개시내용의 구현예에서, 암은 국소 진행성, 재발성 또는 전이성을 포함하는 이의 병기에 의해 선택된다.
본 개시내용의 구현예에서, 암은 비-편평 비-소세포폐암(NSCLC), 편평 비-소세포폐암(NSCLC), 상피성 난소암(OC), 신세포 암종(RCC) 또는 흑색종이다.
본 개시내용의 구현예에서, 비-편평 비-소세포폐암(NSCLC)은 다음과 같다: 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 전이성, 비-편평 NSCLC; 항-PD-1/PD-L1 항체 미경험 전이성, 비-편평 NSCLC; 또는 전이성 조건에서의 사전 전신 치료가 이루어지지 않은 PD-L1 양성, 국소 진행성 또는 전이성 비-편평 NSCLC.
본 개시내용의 구현예에서, 편평 비-소세포폐암(NSCLC)은 다음과 같다: 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 전이성, 편평 NSCLC; 항-PD-1/PD-L1 항체 미경험 전이성, 편평 NSCLC; 또는 전이성 조건에서의 사전 전신 치료가 이루어지지 않은 PD-L1 양성, 국소 진행성 또는 전이성 편평 NSCLC.
본 개시내용의 구현예에서, 신세포 암종(RCC)은 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 전이성 또는 진행성 RCC, 또는 사전 전신 요법이 이루어지지 않은 전이성 또는 진행성 RCC이다.
본 개시내용의 구현예에서, 흑색종은 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 절제불가능 또는 전이성 흑색종이다.
본 개시내용의 한 구현예에서, 난소암(OC)은 미경험 재발성 및 백금-내성 상피성 OC이다.
상기 5가지 양태 각각의 구현예에서, 면역 관문 억제제는 PD-1 길항제이며, 이는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(Vk), 및 서열번호 88을 포함하는 IgG4 중쇄 이펙터 또는 불변 도메인을 포함하는 항체(Mab - 1)이고, 여기서 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(Vk)은 각각 서열번호 24 및 서열번호 26을 포함한다.
상기 5가지 양태 각각의 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제는 N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드(화합물 1)이다. 한 구현예에서, 화합물 1은 결정 형태 D이다. 또 다른 구현예에서, 결정 형태 D는 도 1a에 나타낸 바와 같이 실질적으로 XRPD 패턴을 갖는다.
상기 5가지 양태 각각의 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제 및 면역 관문 억제제는 동시에, 순차적으로 또는 간헐적으로 투여된다.
도 1a는 화합물 1의 결정 형태 D(화합물 1 형태 D)의 X-선 분말 회절(XRPD) 패턴을 설명한다.
도 2a는 A431 동종이계 마우스 모델에서 Mab -1 및 화합물 1의 조합 효능을 나타낸다(*는 P<0.05를 나타낸다).
도 2b는 CT26WT 동계 마우스 모델에서 muCh15mt 및 화합물 1의 조합 효능을 나타낸다(***는 P<0.001을 나타낸다).
도 2c는 MC38 동계 마우스 모델에서 muCh15mt 및 화합물 1의 조합 효능을 나타낸다(****는 P<0.0001을 나타낸다).
도 2d는 A20 동계 마우스 모델에서 muCh15mt 및 화합물의 조합 효능을 나타낸다(*는 P<0.05를 나타낸다).
정의
이 문서의 다른 곳에서 구체적으로 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 다른 모든 기술 및 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 기술 분야의 당업자가 일반적으로 이해하는 의미를 갖는다.
첨부된 청구범위를 포함하여 본원에 사용된 바와 같이, 단어의 단수 형태(예를 들어, "a", "an", 및 "the")는 문맥이 명백하게 달리 나타내지 않는 한 대응하는 복수 대상을 포함한다.
"또는"이라는 용어는 문맥에서 명백하게 달리 지시하지 않는 한 "및/또는"이라는 용어를 의미하는 데 사용되며 이와 상호교환적으로 사용된다.
본 명세서 및 뒤따르는 청구범위 전체에 걸쳐, 문맥이 달리 요구하지 않는 한, "포함하다"라는 단어, 및 "포함한다" 및 "포함하는"과 같은 변형어는 활성제(예를 들어, mAb 또는 다중-티로신 키나제 억제제) 또는 언급된 아미노산 서열을 포함하지만, 임의의 다른 활성 성분 또는 아미노산 서열이 제외되지 않음을 의미하는 것으로 이해될 것이다.
"약제학적으로 허용되는 염"이라는 용어는 적절한 의학적 판단의 범주 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등 없이 인간 및 하등 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하고, 합리적인 이익/위험 비율에 상응하는 염을 지칭한다. 이는 예를 들어 하이드로클로레이트, 포스페이트, 디포스페이트, 하이드로브로메이트, 설페이트, 설피네이트 및 니트레이트로부터 선택되는 무기산과의 염; 뿐만 아니라 예를 들어 푸마레이트, 락테이트, 메탄설포네이트, p-톨루엔설포네이트, 2-하이드록시에틸설포네이트, 벤조에이트, 살리실레이트, 스테아레이트, 아세테이트 같은 알카노에이트, 및 HOOC-(CH2)n-COOH와의 염으로부터 선택되는 유기산과의 염을 포함하나 이로 제한되지 않으며, 여기서 n은 0 내지 4로부터 선택된다. 유사하게, 약제학적으로 허용가능한 양이온의 예는 나트륨, 칼륨, 칼슘, 알루미늄, 리튬 및 암모늄을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
또한, 화합물이 산 부가염으로서 수득되는 경우, 산염의 용액을 염기성화함으로써 유리 염기를 수득할 수 있다. 반대로, 생성물이 유리 염기인 경우, 약제학적으로 허용되는 부가염과 같은 부가염은 유리 염기를 적합한 유기 용매에 용해시키고 용액을 산으로 처리함으로써 염기 화합물의 산 부가염의 통상적인 제조 절차에 따라 생성될 수 있다. 당업자는 무독성의 약제학적으로 허용되는 부가염을 제조하기 위해 과도한 실험 없이 사용될 수 있는 다양한 합성 방법을 인식할 것이다.
본원에 정의된 "이의 약제학적으로 허용되는 염"은 화합물 1의 염, 및 화합물 1의 입체이성질체 염, 예를 들어 거울상이성질체의 염 및/또는 부분입체이성질체의 염을 포함한다.
"유효량"은 대상체에서 질병 또는 장애를 "치료"하는 데 효과적인 적어도 하나의 화합물 1 및/또는 이의 적어도 하나의 입체이성질체, 및/또는 이의 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 염의 양을 지칭하고, 투여되는 경우와 같이 찾고자 하는 조직, 시스템, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 상당한 어느 정도로 이끌어낼 것이며, 이는 치료 중인 상태 또는 장애의 하나 이상의 증상의 발병을 예방하거나 어느 정도 완화하기에 충분하다. 치료적 유효량은 화합물, 질병 및 그의 중증도 및 치료될 포유동물의 연령, 체중 등에 따라 달라질 것이다.
용어 "적어도 하나의 치환기"는, 예를 들어 1 내지 4개, 예를 들어 1 내지 3개, 추가로 1 또는 2개의 치환기를 포함한다. 예를 들어, 본원에서 "적어도 하나의 치환기 R16"은 본원에 기재된 바와 같은 R<16>의 목록으로부터 선택되는 1 내지 4개, 예를 들어 1 내지 3개, 추가로 1 또는 2개의 치환기를 포함한다.
본원에서 용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되며 면역 관문(예를 들어, PD-1)과 같은 항원을 인식하는 한 항체(전장 모노클로날 항체를 포함함) 및 항체 단편을 구체적으로 포함한다. 항체 분자는 일반적으로 단일특이성이지만, 이디오특이성(idiospecific), 이종특이성 또는 다중특이성으로도 기재될 수 있다. 항체 분자는 특정 결합 부위를 통해 항원 상의 특정 항원 결정기 또는 에피토프에 결합한다.
본원에서 용어 "모노클로날 항체" 또는 "mAb" 또는 "Mab"는 실질적으로 균질한 항체의 집단을 의미하며, 즉 집단에 포함된 항체 분자는 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이를 제외하고 아미노산 서열이 동일하다. 대조적으로, 통상적인 (폴리클로날) 항체 제제는 통상적으로 가변 도메인, 특히 종종 상이한 에피토프에 특이적인 그의 CDR에 상이한 아미노산 서열을 갖는 다수의 상이한 항체를 포함한다. 수식어 "모노클로날"은 항체의 실질적으로 균질한 집단으로부터 얻어지는 항체의 특성을 나타내며, 임의의 특정 방법에 의한 항체의 생산을 필요로 하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 모노클로날 항체(mAb)는 당업자에게 공지된 방법에 의해 수득될 수 있다. 예를 들어, U.S. 특허 4,376,110을 참조한다. 본원에 개시된 mAb는 IgG, IgM, IgD, IgE, IgA, 및 이들의 임의의 하위부류를 포함하는 임의의 면역글로불린 부류일 수 있다. mAb를 생산하는 하이브리도마는 시험관내 또는 생체내에서 배양될 수 있다. 높은 역가의 mAb는 원하는 mAb의 고농도를 함유하는 복수액을 생성하기 위해 원시-프라이밍된(pristine-primed) Balb/c 마우스와 같은 마우스에 개별 하이브리도마의 세포를 복강내 주사하는 생체내 생산에서 얻을 수 있다. 아이소타입 IgM 또는 IgG의 mAb는 당업자에게 잘 알려진 컬럼 크로마토그래피 방법을 사용하여 이러한 복수액으로부터 또는 배양 상청액으로부터 정제될 수 있다.
일반적으로, 기본 항체 구조 단위는 사량체를 포함한다. 각각의 사량체는 2개의 동일한 폴리펩티드 사슬 쌍을 포함하며, 각 쌍은 하나의 "경쇄"(약 25 kDa) 및 하나의 "중쇄"(약 50 내지 70 kDa)를 갖는다. 각 사슬의 아미노-말단 부분은 항원 인식을 주로 담당하는 약 100 내지 110개 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함한다. 중쇄의 카르복시-말단 부분은 주로 이펙터 기능을 담당하는 불변 영역을 한정할 수 있다. 통상적으로 인간 경쇄는 카파 및 람다 경쇄로 분류된다. 또한, 인간 중쇄는 통상적으로 α, δ, ε, γ 또는 μ로 분류되며 항체의 아이소타입을 각각 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM으로 정의한다. 경쇄 및 중쇄 내에서, 가변 및 불변 영역은 약 12개 이상의 아미노산의 "J" 영역에 의해 연결되며, 중쇄는 또한 약 10개 이상의 아미노산의 "D" 영역을 포함한다.
각 경쇄/중쇄(V1/Vh) 쌍의 가변 영역은 항체 결합 부위를 형성한다. 따라서 일반적으로 온전한 항체에는 두 개의 결합 부위가 있다. 이중작용성 또는 이중특이성 항체를 제외하고, 두 결합 부위는 일반적으로 동일하다.
통상적으로, 중쇄 및 경쇄 둘 모두의 가변 도메인은 상대적으로 보존된 프레임워크 영역(FR) 사이에 위치하는 "상보성 결정 영역( CDR )"이라고도 하는 3개의 초가변 영역을 포함한다. CDR은 일반적으로 프레임워크 영역에 의해 정렬되어 특이적 에피토프에 결합할 수 있다. 일반적으로, N-말단에서 C-말단으로, 경쇄 및 중쇄 가변 도메인 둘 모두는 FR-1(또는 FR1), CDR-1(또는 CDR1), FR-2(FR2), CDR-2(CDR2), FR-3(또는 FR3), CDR-3(CDR3), 및 FR-4(또는 FR4)를 포함한다. 각 도메인에 대한 아미노산 할당은 일반적으로 면역학적 관심 단백질 서열(Sequences of Proteins of Immunological Interest)의 정의에 따른다(Kabat , et al., National Institutes of Health, Bethesda, Md . ; 5<m> ed.; NIH Publ . No. 91-3242 (1991); Kabat (1978) Adv. Prot . Chem . 32: 1 -75; Kabat , et al., (1977) J. Biol . Chem . 252:6609-6616; Chothia , et al, (1987) J Mol . Biol . 196:901-917 or Chothia , et al, (1989) Nature 342:878-883).
용어 "초가변 영역"은 항원-결합을 담당하는 항체의 아미노산 잔기를 의미한다. 초가변 영역은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"(즉, 경쇄 가변 도메인의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 중쇄 가변 도메인에서 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3)의 아미노산 잔기를 포함한다. 문헌[Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.](서열에 의한 항체의 CDR 영역을 정의함)을 포함하고; 또한 문헌[Chothia and Lesk (1987) J. Mol . Biol . 196: 901 - 917](구조에 의한 항체의 CDR 영역을 정의함)을 참조한다. 용어 "프레임워크" 또는 "FR"은 CDR 잔기로서 본원에 정의된 초가변 영역 잔기 이외의 가변 도메인 잔기를 의미한다.
달리 지시되지 않는 한, "항체 단편" 또는 "항원-결합 단편"은 항체의 항원 결합 단편, 즉 전장 항체에 의해 결합된 항원에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하는 항체 단편, 예를 들어 하나 이상의 CDR 영역을 보유하는 단편을 의미한다. 항원 결합 단편의 예에는 Fab, Fab', F(ab')2, 및 Fv 단편; 디아바디; 선형 항체; 단일-사슬 항체 분자, 예를 들어 단일 사슬 Fv(ScFv); 항체 단편으로부터 형성된 나노바디 및 다중특이적 항체가 포함되나 이에 제한되지는 않는다.
특정 표적 단백질에 "특이적으로 결합하는" 항체는 다른 단백질과 비교하여 그 표적에 우선적인 결합을 나타내는 항체이지만, 이러한 특이성은 절대 결합 특이성을 요구하지 않는다. 항체의 결합이 샘플에서 표적 단백질의 존재를 결정하는 경우, 예를 들어 위양성과 같은 원하지 않는 결과를 생성하지 않는다면, 항체는 의도된 표적에 대해 "특이적"인 것으로 간주된다. 본 개시내용에 유용한 항체 또는 이의 결합 단편은 비-표적 단백질에 대한 친화도 보다 적어도 2배, 바람직하게는 적어도 10배, 보다 바람직하게는 적어도 20배, 가장 바람직하게는 적어도 100배 큰 친화도로 표적 단백질에 결합할 것이다. 해당 서열을 포함하는 폴리펩티드에 결합하지만 해당 서열이 없는 단백질에는 결합하지 않는 경우, 본원에서 항체는 주어진 아미노산 서열, 예를 들어 성숙한 인간 PD-1 분자의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드에 특이적으로 결합한다고 말할 수 있다.
본원에서 "인간 항체"라는 용어는 인간 면역글로불린 단백질 서열만을 포함하는 항체를 의미한다. 인간 항체는 마우스, 설치류 세포 또는 마우스 세포에서 유래한 하이브리도마에서 생산되는 경우 설치류 탄수화물 사슬을 포함할 수 있다. 유사하게, "마우스 항체" 또는 "래트 항체"는 각각 마우스 또는 래트 면역글로불린 단백질 서열만을 포함하는 항체를 의미한다.
용어 "인간화 항체"는 인간 항체뿐만 아니라 비-인간(예를 들어, 뮤린) 항체로부터의 서열을 함유하는 항체의 형태를 의미한다. 이러한 항체는 비-인간 면역글로불린에서 유래한 최소 서열을 포함한다. 일반적으로, 인간화 항체는 적어도 1개, 통상적으로 2개의 가변 도메인을 실질적으로 모두 포함할 것이며, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 초가변 루프는 비-인간 면역글로불린의 것에 상응하고 모든 또는 실질적으로 모든 FR 영역은 인간 면역 글로불린 서열의 것이다. 인간화 항체는 또한 선택적으로 면역글로불린 불변 영역(Fc)의 적어도 일부, 통상적으로 인간 면역글로불린의 불변 영역을 포함할 것이다. " hum ", " hu ", "Hu" 또는 "h" 접두사는 인간화 항체를 모 설치류 항체와 구별하기 위해 필요한 경우 항체 클론 명칭에 추가된다. 설치류 항체의 인간화 형태는 일반적으로 모 설치류 항체의 동일한 CDR 서열을 포함할 것이지만, 인간화 항체의 친화도를 증가시키고, 안정성을 증가시키고, 또는 다른 이유로 특정 아미노산 치환이 포함될 수 있다.
"부분입체이성질체"는 2개 이상의 키랄 중심을 갖지만 서로의 거울상은 아닌 화합물의 입체이성질체를 지칭한다. 부분입체이성질체 혼합물은 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화와 같은 당업자에게 잘 알려진 방법에 의해 물리적 화학적 차이에 기초하여 개별 부분입체이성질체로 분리될 수 있다. 거울상이성질체는 적절한 광학 활성 화합물(예를 들어, 키랄 알코올 또는 모셔의 산 클로라이드(Mosher's acid chloride)와 같은 키랄 보조제)과의 반응에 의해 거울상이성질체 혼합물을 부분입체이성질체 혼합물로 전환하고, 부분입체이성질체를 분리하고, 개별 부분입체 이성질체를 상응하는 순수한 거울상이성질체로 전환(예를 들어, 가수분해)하여 분리될 수 있다. 거울상이성질체는 또한 키랄 HPLC 컬럼을 사용하여 분리될 수 있다.
단일 입체이성질체, 예를 들어 실질적으로 순수한 거울상이성질체는 광학 활성 분할제를 사용한 부분입체이성질체의 형성과 같은 방법을 사용하여 라세미 혼합물의 분할에 의해 수득될 수 있다[Eliel, E. and Wilen, S. Stereochemistry of Organic Compounds. New York: John Wiley & Sons, Inc., 1994; Lochmuller, C. H., et al. "Chromatographic resolution of enantiomers : Selective review." J. Chromatogr., 113(3)(1975): pp. 283-302]. 본 개시내용의 키랄 화합물의 라세미 혼합물은 다음을 포함하는 임의의 적합한 방법에 의해 분리 및 단리될 수 있다: (1) 키랄 화합물과 이온성 부분입체이성질체 염의 형성, 및 분별 결정화 또는 기타 방법에 의한 분리, (2) 키랄 유도체화 시약과 부분입체이성질체 화합물의 형성, 부분입체이성질체의 분리, 및 순수한 입체이성질체로의 전환 및 (3) 키랄 조건 하에서 직접 실질적으로 순수하거나 풍부한 입체이성질체의 분리. 문헌[Wainer, Irving W., Ed. Drug Stereochemistry : Analytical Methods and Pharmacology. New York: Marcel Dekker, Inc., 1993]을 참조한다.
본원에서 용어 "투여", "투여하는", "치료하는" 및 "치료"는 동물, 인간, 실험 대상체, 세포, 조직, 기관, 또는 생물학적 유체에 적용될 때, 동물, 인간, 대상체, 세포, 조직, 기관 또는 생물학적 유체에 대한 외인성 약제, 치료제, 진단제 또는 조성물의 접촉을 의미한다. 세포의 치료는 세포에 대한 시약의 접촉 뿐만 아니라, 유체가 세포와 접촉하는 경우 유체에 대한 시약의 접촉을 포함한다. 용어 "치료하는" 및 "치료"는 또한 시약, 진단제, 결합 화합물, 또는 다른 세포에 의한 세포의 시험관내 및 생체외 치료를 의미한다. 본원에서 용어 "대상체"는 임의의 유기체, 바람직하게는 동물, 보다 바람직하게는 포유동물(예를 들어, 래트, 마우스, 개, 고양이, 토끼) 및 가장 바람직하게는 인간을 포함한다.
"가능성을 감소시키는"이라는 어구는 질병, 감염 또는 장애의 발병 또는 발달 또는 진행을 지연시키는 것을 지칭한다.
용어 "치료적으로 허용되는 양" 또는 "치료적 유효 용량"은 상호교환가능하게 원하는 결과(즉, 종양 크기의 감소, 종양 성장의 억제, 전이의 예방, 바이러스, 박테리아, 곰팡이 또는 기생충 감염의 억제 또는 예방)에 영향을 미치기에 충분한 양을 지칭한다. 일부 양태에서, 치료적으로 허용되는 양은 바람직하지 않은 부작용을 유도하거나 유발하지 않는다. 치료적으로 허용되는 양은 먼저 저용량을 투여한 다음, 원하는 효과가 달성될 때까지 해당 용량을 점진적으로 증가시켜 결정될 수 있다. 본 개시내용의 분자의 "예방적 유효 투여량" 및 "치료적 유효 투여량"은 각각 폴리오마 바이러스 감염과 연관된 증상을 비롯한 질병 증상의 발병을 예방하거나 그 중증도를 감소시킬 수 있다.
"공동-투여"라는 용어는 개체의 혈액에 2개의 활성제가 동시에 존재하는 것을 지칭한다. 공동-투여되는 활성제는 동시에 또는 순차적으로 전달될 수 있다.
"유효량"은 대상체에서 질병 또는 장애를 "치료"하는 데 효과적인 적어도 하나의 화합물 1 및/또는 이의 적어도 하나의 입체이성질체, 및/또는 이의 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 염의 양을 지칭하고, 투여되는 경우와 같이 찾고자 하는 조직, 시스템, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 상당한 어느 정도로 이끌어낼 것이며, 이는 치료 중인 상태 또는 장애의 하나 이상의 증상의 발병을 예방하거나 어느 정도 완화하기에 충분하다. 치료적 유효량은 화합물, 질병 및 그의 중증도 및 치료될 포유동물의 연령, 체중 등에 따라 달라질 것이다.
본원에서 용어 "암" 또는 "종양"은 신체의 다른 부분을 침범하거나 퍼질 가능성이 있는 비정상적인 세포 성장을 포함하는 생리학적 상태를 의미하거나 설명한다.
본원에 사용된 용어 "내성", "내성 암" 또는 "불응성"은 암이 치료제에 대해 감소된 감수성을 나타내는 상태를 지칭한다. 예를 들어, 내성 암의 경우 동일한 유형의 민감한 암에서 암세포를 제거하는 데 사용되는 치료제의 농도에 의해 제거되는 암세포가 더 적다. 암은 치료 초기에 내성이 있을 수도 있고 치료 중에 내성이 될 수도 있다. 내성은 다음과 같은 여러 메커니즘으로 인한 것일 수 있지만 이에 제한되지는 않는다: 약물-표적의 변화, 약물 축적 감소, 세포 내 약물 분포의 변화, 약물-표적 상호작용 감소, 해독 반응 증가, 세포 주기 조절 해제, 손상된 DNA 복구 증가, 및 세포자연사 반응 감소. 상기 메커니즘 중 몇몇은 동시에 발생할 수 있고/있거나 서로 상호작용할 수 있다.
용어 "질병"은 임의의 질병, 불편함, 아픔, 증상 또는 적응증을 나타내며, 용어 "장애" 또는 "상태"로 대체될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "약제학적 조합"은 하나의 투여 단위 형태의 고정 조합, 또는 비-고정 조합, 또는 2개 이상의 치료제가 독립적으로 동시에 또는 시간 간격 내에서 개별적으로 투여될 수 있는, 특히 이러한 시간 간격이 조합 파트너가 협력적, 예를 들어 상승 효과를 나타내는 것을 가능하게 하는 조합 투여용 부품 키트를 지칭한다.
용어 "병용 요법" 또는 "병용 치료"는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 암 또는 암의 결과를 치료하기 위한 2 이상의 치료제의 투여를 지칭한다. 이러한 투여는 고정된 비율의 활성 성분을 갖는 단일 캡슐과 같이 실질적으로 동시적인 방식으로 이들 치료제의 공동-투여를 포함한다. 대안적으로, 이러한 투여는 각각의 활성 성분에 대해 다중 또는 별도의 용기(예를 들어, 캡슐, 분말 및 액체)에서의 공동 투여를 포함한다. 분말 및/또는 액체는 투여 전에 재구성되거나 원하는 용량으로 희석될 수 있다. 추가로, 이러한 투여는 또한 대략 동일한 시간에 또는 상이한 시간에 순차적 방식으로 각 유형의 치료제를 사용하는 것을 포함한다. 어느 경우든, 치료 요법은 본원에 기재된 상태 또는 장애를 치료하는 데 있어서 치료 조합의 유익한 효과를 제공할 것이다.
이 문서의 다른 곳에서 구체적으로 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 다른 모든 기술 및 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 기술 분야의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 의미를 갖는다.
병용 요법은 "상승작용"을 제공하고 "상승작용적"인 것으로 입증될 수 있으며, 즉 활성 성분을 함께 사용하는 경우 달성되는 효과가 화합물을 개별적으로 사용함으로써 초래되는 효과의 합보다 더 크다. 활성 성분이 다음과 같은 경우 상승 효과가 달성될 수 있다: (1) 조합된 단위 투여 제형으로 동시에 공동-제형화 및 투여 또는 전달; (2) 교대로 또는 병행하여 별도의 제형으로 전달; 또는 (3) 일부 다른 요법에 의함. 교대 요법으로 전달되는 경우, 화합물이 순차적으로 투여되거나 전달될 때, 예를 들어 별도의 주사기로 상이한 주사로 전달될 때 상승 효과가 달성될 수 있다. 일반적으로, 교대 요법에서는 각 활성 성분의 유효 투여량을 순차적으로, 즉 연속적으로 투여하는 반면, 병용 요법에서는 2개 이상의 활성 성분의 유효 투여량이 함께 투여된다.
본 개시내용의 일부 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제는 PD-1 길항제와 공동-투여된다. 본 개시내용의 일부 구현예에서, PD-1 길항제는 항체 또는 이의 단편 항원 결합이다.
PD-1 길항제
PD-1은 면역 관문 단백질로, 감염에 대한 염증 반응 시 말초 조직에서 T 세포의 활성을 제한하고 혼합 림프구 반응에서 특이적 항원 표적 또는 동종이계 세포에 의한 공격에 대한 반응으로 시험관 내에서 자가면역 PD-1 차단을 제한하기 위해 T 세포 증식 및 사이토카인 생성을 향상시킨다. PD-1 발현 및 반응 사이의 강한 상관관계는 PD-1의 차단으로 보여주었다(Pardoll , Nature Reviews Cancer, 12: 252-264, 2012). PD-1 차단은 PD-1 또는 이의 리간드에 결합하는 항체를 포함하는 다양한 메카니즘에 의해 달성될 수 있다.
본 개시내용의 일부 구현예에서, 면역 관문 억제제는 WO 2015/035606 A1에 개시된 모노클로날 항체 또는 이의 단편인 PD-1 길항제이다. 본 개시내용의 일부 구현예에서, 면역 관문 억제제는 항-PD-1 항체이다.
바람직하게는, 항-PD-1 모노클로날 항체는 하기 표 1에 열거된 상보성 결정 영역(CDR)을 함유하는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(V1)을 포함하는 항체이다.
a) mu317 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 12, 13); 및
CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 14, 15, 16);
b) mu326 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 17, 18, 19); 및CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 20, 21, 22);
c) 317-4B6 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 31, 32, 33); 및CDR-L1 , CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 34, 35, 36);
d) 326-4A3 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 37, 38, 39); 및CDR-L1, CDR--L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 40, 41, 42);
e) 317-1H CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 59, 13); 및CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 14, 15, 16);
f) 317-4B2 CDR-HL CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 60, 13); 및CDR-L1 , CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 61 , 15, 16);
g) 317-4B5 CDR-Hl, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 60, 13); 및CDR-L1 , CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호: 61 , 15, 16);
h) 317-4B6 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 32, 13); 및CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 61, 15, 16);
i) 326-1 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 17, 62, 19); 및CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 20, 21, 22);
j) 326-3B1 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 17, 62, 19); 및CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 20, 21, 22);
또는 k) 326-3G1 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H (각각, 서열번호 17, 62, 19); 및CDR-L1, CDR-I2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 20, 21, 22).
바람직하게는, 항-PD-1 모노클로날 항체는 하기 표 2에 열거된 CDR의 임의의 조합을 함유하는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(V1)을 포함하는 항체이다.
(a) CDR-H1(서열번호 31), CDR-H2(서열번호 12, 32, 59 또는 60) 및 CDR-H3(서열번호 33),
CDR-L1(서열번호 14, 34 또는 61), CDR-L2(서열번호 35) 및 CDR-L3(서열번호 36); 또는
(b) CDR-H1(서열번호 37), CDR-H2(서열번호 18, 38 또는 62) 및 CDR-H3(서열번호 39 ), CDR-L1(서열번호 40), CDR-L2(서열번호 41) 및 CDR-L3(서열번호 42).
바람직하게는, 항-PD-1 모노클로날 항체는 하기에 열거된 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(V1)을 포함하는 항체이다.
a) mu317(각각, 서열번호 4 및 6);
b) mu326(각각, 서열번호 8 및 10);
c) 317-4B6(각각, 서열번호 24 및 26);
d) 326-4A3(각각, 서열번호 28 및 30);
e) 317-4B2(각각, 서열번호 43 및 44);
f) 317-4B5(각각, 서열번호 45 및 46);
g) 317-1(각각, 서열번호 48 및 50);
h) 326-3B1(각각, 서열번호 51 및 52);
i) 326-3GI(각각, 서열번호 53 및 54);
j) 326-1(각각, 서열번호 56 및 58);
k) 317-3A1(각각, 서열번호 64 및 26);
l) 317-3C1(각각, 서열번호 65 및 26);
m) 317-3E1(각각, 서열번호 66 및 26);
n) 317-3F1(각각, 서열번호 67 및 26);
o) 317-3G1(각각, 서열번호 68 및 26); 		p) 317-3H1(각각, 서열번호 69 및 26);
q) 317-311(각각, 서열번호 70 및 26);

r) 317-4B 1(각각, 서열번호 71 및 26);
s) 317-4B3(각각, 서열번호 72 및 26);
t) 317-4B4(각각, 서열번호 73 및 26);
u) 317-4A2(각각, 서열번호 74 및 26);
v) 326-3 A 1(각각, 서열번호 75 및 30);
w) 326-3C1(각각, 서열번호 76 및 30);
x) 326-3D1(각각, 서열번호 77 및 30);
y) 326-3E1(각각, 서열번호 78 및 30);
z) 326-3F1(각각, 서열번호 79 및 30);
aa) 326-3B N55D(각각, 서열번호 80 및 30);
ab) 326-4A1(각각, 서열번호 28 및 81); 또는
ac) 326-4A2(각각, 서열번호 28 및 82).
바람직하게는, 항-PD-1 모노클로날 항체는 서열번호 83 내지 88 중 임의의 것을 포함하는 IgG4 중쇄 이펙터 또는 불변 도메인을 포함하는 항체이다.
바람직하게는, 항-PD-1 모노클로날 항체는 중쇄 가변 영역(Vh), 경쇄 가변 영역(V1), 및 IgG4 중쇄 이펙터 또는 불변 도메인을 포함하는, 상기 언급된 도메인을 포함하는 F(ab) 또는 F(ab)2를 함유하는 항체이다.
바람직하게는, 항-PD-1 모노클로날 항체는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(V1), 및 서열번호 87 또는 88을 포함하는 IgG4 중쇄 이펙터 또는 불변 도메인을 포함하는 항체이고, 여기서 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(V1)은 표 4에 제시되어 있다.
a) mu317(각각, 서열번호 4 및 6);
b) mu326(각각, 서열번호 8 및 10);
c) 317-4B6(각각, 서열번호 24 및 26);
d) 326-4A3(각각, 서열번호 28 및 30);
e) 317-4B2(각각, 서열번호 43 및 44);
f) 317-4B5(각각, 서열번호 45 및 46);
g) 317-1(각각, 서열번호 48 및 50);
h) 326-3B1(각각, 서열번호 51 및 52);
i) 326-3GI(각각, 서열번호 53 및 54);
j) 326-1(각각, 서열번호 56 및 58);
k) 317-3A1(각각, 서열번호 64 및 26);
l) 317-3C1(각각, 서열번호 65 및 26);
m) 317-3E1(각각, 서열번호 66 및 26);
n) 317-3F1(각각, 서열번호 67 및 26);
o) 317-3G1(각각, 서열번호 68 및 26); 		p) 317-3H1(각각, 서열번호 69 및 26);
q) 317-311(각각, 서열번호 70 및 26);

r) 317-4B 1(각각, 서열번호 71 및 26);
s) 317-4B3(각각, 서열번호 72 및 26);
t) 317-4B4(각각, 서열번호 73 및 26);
u) 317-4A2(각각, 서열번호 74 및 26);
v) 326-3 A 1(각각, 서열번호 75 및 30);
w) 326-3C1(각각, 서열번호 76 및 30);
x) 326-3D1(각각, 서열번호 77 및 30);
y) 326-3E1(각각, 서열번호 78 및 30);
z) 326-3F1(각각, 서열번호 79 및 30);
aa) 326-3B N55D(각각, 서열번호 80 및 30);
ab) 326-4A1(각각, 서열번호 28 및 81); 또는
ac) 326-4A2(서열번호: 28 및 82).
바람직하게는, 항-PD-1 모노클로날 항체는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(V1)(각각, 서열번호 24 및 서열번호 26을 포함함) 및 IgG4 중쇄 이펙터 또는 불변 도메인(서열번호 88을 포함함)을 포함하는 항체(이하, Mab - 1)이며, 이는 PD-1, 특히 K45 및 I93; 또는, I93, L95 및 P97을 포함하는 PD-1 잔기에 특이적으로 결합하고, PD-1-매개 세포 신호전달 및 면역 세포, 이의 리간드 결합에 필요한 아미노산 잔기 세트에 결합하는 항체에서의 활성을 억제한다.
항-PD1 모노클로날 항체 및 이의 항체 단편은 WO2015/035606 A1의 개시내용에 따라 제조될 수 있으며, 이의 전체 개시내용은 본원에 참조로 명백히 포함된다. 본 개시내용의 한 구현예에서, 항-PD1 모노클로날 항체는 Mab -1이고, 이는 약 30 내지 300 mg QW, 또는 Q2W, 또는 Q3W, 또는 Q4W의 용량의 투여량으로 비경구로 투여된다. 본 개시내용의 바람직한 구현예에서, 항-PD1 모노클로날 항체는 Mab -1이고, 이는 약 200 mg Q3W의 용량의 투여량으로 비경구로 투여된다.
병용 요법
병용 요법은 동시 또는 개별 또는 순차 요법으로 투여될 수 있다. 순차적으로 투여되는 경우, 조합은 2회 이상의 투여로 투여될 수 있다. 조합 투여는 별도의 제형을 사용하는 공동-투여, 및 임의의 순서의 연속 투여를 포함하며, 여기서 바람직하게는 두(또는 모든) 활성제가 동시에 생물학적 활성을 발휘하는 기간이 존재한다.
임의의 상기 공동-투여된 작용제에 대한 적합한 투여량은 현재 사용되는 투여량이며, 치료 지수를 증가시키거나 독성 또는 기타 부작용 또는 결과를 완화시키는 것과 같은, 다중-티로신 키나제 억제제 및 항-PD-1 항체의 조합된 작용(상승작용)으로 인해 낮아질 수 있다.
항암 요법의 특정 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제 및 항-PD-1 항체는 외과 요법 및 방사선요법과 추가로 조합될 수 있다.
상기 5가지 양태 각각의 구현예에서, 본원에 개시된 다중-티로신 키나제 억제제 및 항-PD-1 항체의 양 및 상대적 투여 시점은 치료될 환자의 개별 요구, 투여 경로, 질병 또는 병의 중증도, 투여 일정뿐만 아니라, 지정된 의사의 평가 및 판단에 의해 결정되어야 한다.
본원에 개시된 다중-티로신 키나제 억제제 및 항-PD-1 항체는 경구, 국소, 직장, 비경구, 흡입 스프레이 또는 이식된 저장소와 같은 다양한 공지된 방식으로 투여될 수 있지만, 주어진 경우에 가장 적합한 경로는 활성 성분이 투여되는 특정 숙주, 상태의 성질 및 중증도에 따라 달라질 것이다. 본원에 사용된 용어 "비경구"는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 동맥내, 활막내, 흉골내, 척추강내, 병변내, 및 두개내 주사 또는 주입 기법을 포함한다.
상기 5가지 양태 각각의 한 구현예에서, 본원에 개시된 다중-티로신 키나제 억제제 및 항-PD-1 항체는 상이한 경로로 투여될 수 있다. 바람직한 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제는 경구 투여되고, 항-PD-1 항체는 피하, 피내, 정맥내 또는 복강내와 같은 비경구 투여된다.
바람직한 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제(구체적으로, N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염)은 1일 1회(매일 1회, QD), 1일 2회(매일 2회, BID), 1일 3회, 1일 4회 또는 1일 5회 투여되고, 약 40 mg/일 내지 약 640 mg/일의 투여량으로 투여된다. 바람직한 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제는 40 mg QD 내지 200 QD의 용량으로 투여된다. 바람직한 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제는 40 mg QD 내지 150 mg QD의 용량으로 투여된다. 보다 바람직한 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제는 60 mg QD 내지 150 mg QD의 용량으로 투여된다. 가장 바람직한 구현예에서, 다중-티로신 키나제 억제제는 120 mg QD의 용량으로 투여된다.
바람직한 구현예에서, 항-PD-1 항체(구체적으로, 항-PD1 모노클로날 항체 Mab-1)는 3주마다 1회(Q3W) 200 mg IV의 용량으로 투여된다.
실시예
본 개시내용은 본원에 예시된 하기 실시예에 의해 추가로 예시되지만 이에 제한되지는 않는다.
실시예 1은 N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드(화합물 1 형태 D)의 제조를 예시한다. 그리고, 화합물 1 형태 D는 본원의 전임상 및 임상 시험 연구에서 추가로 사용되었다.
실시예 1
N-(3- 플루오로 -4-((2- (5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸) 피리딘-2-일) 티에노[3,2-b]피리딘 -7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드의 결정 형태 D(화합물 1 형태 D)의 제조
실시예 1A: 화합물 1의 제조
단계 1: N-((6- 브로모피리딘 -3-일) 메틸 )-2- 메톡시에탄 -1- 아민 (화합물 1A)
Figure pct00002
디클로로메탄(DCM)(12 vol) 중 2-메톡시에틸아민(3.0 당량)의 교반된 용액에 분자체(0.3 w/w)를 첨가하고 질소 대기 하에 25±5
Figure pct00003
에서 2시간 동안 교반하였다. 물 함량 한계가 0.5% w/w에 도달할 때까지 반응물 물 함량을 칼 피셔(Karl Fischer) 분석으로 모니터링했다. 일단 수분 함량 한계에 도달하면, 반응물을 5±5
Figure pct00004
까지 냉각하고 6-브로모니코틴알데히드(1.0 당량)를 5±5
Figure pct00005
에서 상기 반응물에 30분에 걸쳐 로트 방식으로(lot wise)으로 첨가하였다. 반응물을 5±5
Figure pct00006
에서 30±5분 동안 교반하고 아세트산(1.05 당량)을 5±5
Figure pct00007
에서 적가하였다. 첨가 완료 후, 상기 반응물을 25±5
Figure pct00008
까지 천천히 가온하고 8시간 동안 교반하여 화합물 1A를 얻었다. 이민 형성을 HPLC로 모니터링하였다.
단계 2: tert - 부틸((6-브로모피리딘-3-일)메틸)(2-메톡시에틸)카르바메이트(화합물 1B)
Figure pct00009
THF(5.0 vol) 중 충전된 화합물 1A(1.0 당량)를 첨가하고 반응물을 질소 대기 하에 25±5
Figure pct00010
에서 30분 동안 교반하였다. 반응물을 약 10±5
Figure pct00011
의 온도까지 냉각시켰다. 디-tert-부틸 디카르보네이트(1.2 당량)를 질소 대기 하에 10±5
Figure pct00012
에서 반응물에 첨가하고, 반응물 온도를 25±5
Figure pct00013
까지 올리고 반응물을 약 2시간 동안 하였다. 반응의 진행을 HPLC로 모니터링하였다. IPC 완료 후, 2 M 수성 NaOH(3.1 vol) 중 타우린(1.5 당량)의 제조된 용액을 충전하고 10±5
Figure pct00014
에서 16시간 내지 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 1 M NaOH 수용액(3.7 vol)으로 추가로 희석하고 층을 분리하였다. 수성 층을 DCM(2Х4.7 vol)으로 추출하고 추출물을 유기 층과 합하였다. 합한 유기 층을 1 M NaOH 수용액(3.94 vol), 이어서 물(2Х4.4 vol)로 세척하고, 황산나트륨(2.0 w/w) 상에서 건조시켰다. 여액을 증류액이 관찰되지 않을 때까지 감압 하에 40
Figure pct00015
미만에서 농축시켰다. 테트라하이드로푸란(THF)을 순차적으로 첨가하고(1Х4 vol 및 1Х6 vol), 증류액이 관찰되지 않을 때까지 40
Figure pct00016
미만의 감압 하에 농축하여 연황색 시럽 액체로서 화합물 1B를 얻었다.
단계 3: tert - 부틸((6-(7-클로로티에노[3,2-b] 피리딘-2-일)피리딘-3-일) 메틸 )(2-메톡시에틸)카르바메이트(화합물 1C)
Figure pct00017
테트라하이드로푸란(7 vol) 중 7-클로로티에노[3,2-b]피리딘(1.05 당량)의 교반된 용액에 -15±10
Figure pct00018
에서 n-부틸 리튬(헥산 중 2.5 M)을 적가하고 질소 대기 하에서 동일한 온도에서 90분 동안 교반하였다. 염화아연(1.05 당량)을 -15±10
Figure pct00019
에서 반응물에 첨가하였다. 반응물을 25±5
Figure pct00020
까지 천천히 가온하고 질소 대기 하에 45분 동안 교반하여 화합물 1C를 수득하였다. 반응의 진행을 HPLC로 모니터링하였다.
단계 4: tert -부틸((6-(7-(4-아미노-2-플루오로페녹시)티에노[3,2-b]피리딘-2-일)피리딘-3-일)메틸)(2-메톡시에틸)카르바메이트(화합물 1D)
Figure pct00021
25±5
Figure pct00022
에서 DMSO(3.9 vol) 중 3-플루오로-4-하이드록시벤젠아미늄 클로라이드(1.2 당량)를 질소 대기 하에 충전하고 반응물을 25±5
Figure pct00023
에서 투명한 용액이 관찰될 때까지 교반하였다. t-BuOK를 25±10
Figure pct00024
의 질소 대기에서 로트 방식으로 첨가하였다. 반응물 온도를 45±5
Figure pct00025
까지 상승시키고 질소 대기 하에 30분 동안 유지하였다. 화합물 1C를 질소 대기 하에 45±5
Figure pct00026
에서 로트 방식으로 충전하고 45±5
Figure pct00027
에서 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 100±5
Figure pct00028
까지 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 HPLC로 모니터링한다.
반응 완료 후, 반응물을 10±5
Figure pct00029
까지 냉각시키고 10±5
Figure pct00030
에서 냉각수(20 vol)로 켄칭하였다. 반응물 온도를 25±5
Figure pct00031
까지 상승시키고 7 내지 8시간 동안 교반하였다. 생성된 화합물 1D 조 물질을 여과에 의해 수집하고 2 vol의 물로 세척하였다. 조 화합물 1D 물질을 물(10 vol)에서 취하고 25±5
Figure pct00032
에서 최대 20분 동안 교반하였다. 반응물을 45±5
Figure pct00033
까지 가열하고 45±5
Figure pct00034
에서 2 내지 3시간 동안 교반하고, 여과하고 진공 건조시켰다.
조 화합물 1D를 25±5
Figure pct00035
에서 MTBE(5 vol)에서 취하고 25±5
Figure pct00036
에서 약 20분 동안 교반하였다. 반응물 온도를 45±5
Figure pct00037
까지 상승시키고, 45±5
Figure pct00038
에서 3 내지 4시간 동안 교반한 다음, 20±5
Figure pct00039
까지 냉각시켰다. 반응물을 20±5
Figure pct00040
에서 약 20분 동안 교반하고, 여과한 다음, 물(0.5 vol)로 베드 세척하고, 진공 건조시켰다.
조 물질을 25±5
Figure pct00041
에서 아세톤(10 vol)에 용해시키고 25±5
Figure pct00042
에서 약 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 셀라이트 베드를 통해 여과하고 아세톤(2.5 vol)으로 세척했다. 여액을 25±5
Figure pct00043
에서 물(15 vol)로 천천히 희석하였다. 반응물을 2 내지 3시간 동안 25±5
Figure pct00044
에서 교반하고, 여과하고, 물(2 vol)로 베드 세척하고, 진공 건조하여 화합물 1D를 갈색 고체로서 수득하였다.
단계 5: 1-((4-((2-(5-(((tert-부톡시카르보닐)(2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)-3-플루오로페닐)카르바모일)시클로프로판-1-카르복실산(화합물 1E)
Figure pct00045
테트라하이드로푸란(7 vol.) 중 화합물 1D(1.0 당량)의 용액에 물(8 vol.) 중 수성 탄산칼륨(1.0 당량)을 첨가하였다. 용액을 5±5
Figure pct00046
까지 냉각시키고, 약 60분 동안 교반하였다. 교반하면서, 별도로 트리에틸아민(2.0 당량)을 테트라하이드로푸란(8 vol.) 중 1,1-시클로프로판디카복실산(2.0 당량)의 용액에 5±5
Figure pct00047
에서 첨가한 다음, 티오닐 클로라이드(2.0 당량)를 첨가한 후 약 60분 동안 교반하였다. 산 클로라이드 물질을 5±5
Figure pct00048
에서 화합물 1D 용액에 천천히 첨가하였다. 온도를 25±5
Figure pct00049
까지 상승시키고 3.0시간 동안 교반하였다. 반응을 HPLC 분석으로 모니터링하였다.
반응 완료 후, 매스를 에틸 아세테이트(5.8 vol.), 물(5.1 vol.), 10%(w/w) 염산 수용액(0.8 vol.) 및 25%(w/w) 염화나트륨 수용액(2 vol.)으로 희석하였다. 수성 층을 분리하고 에틸 아세테이트(2Х5 vol.)로 추출하였다. 합한 유기층을 0.5 M 중탄산나트륨 수용액(7.5 vol.)으로 세척하였다. 유기층을 다코(Darco) 활성탄(0.5 w/w) 및 황산나트륨(0.3 w/w)으로 25±5
Figure pct00050
에서 1.0시간 동안 처리하였다. 유기층을 셀라이트를 통해 여과하고 테트라하이드로푸란(5.0 vol.)으로 세척하였다. 여액을 50
Figure pct00051
미만의 진공 하에 약 3 vol로 농축시키고, 50
Figure pct00052
미만의 진공 하에 약 3.0 vol.까지 에틸 아세테이트(2Х5 vol.)와 공-증류시켰다. 유기층을 15±5
Figure pct00053
까지 냉각시키고, 약 60분 동안 교반하고, 여과하고, 고체를 에틸 아세테이트(2.0 vol.)로 세척하였다. 물 함량이 1% 미만이 될 때까지 물질을 진공 하에 40±5
Figure pct00054
에서 건조시켜 화합물 1E를 갈색 고체로서 수득하였다.
단계 6: tert-부틸((6-(7-(2-플루오로-4-(1-((4-플루오로페닐)카르바모일)시클로프로판-1-카르복스아미도)페녹시)티에노[3,2-b]피리딘-2-일)피리딘-3-일)메틸)(2-메톡시에틸)카르바메이트(화합물 1F)
Figure pct00055
피리딘(1.1 당량)을 테트라하이드로푸란(10 vol.) 중 화합물 1E(1.0 당량)의 현탁액에 첨가하고 5±5
Figure pct00056
까지 냉각시켰다. 티오닐 클로라이드(2.0 당량)를 첨가하고 약 60분 동안 교반하였다. 생성된 산 클로라이드 형성을 샘플을 메탄올에서 켄칭한 후 HPLC 분석에 의해 확인하였다. 별도로, 탄산칼륨(2.5 당량) 수용액(물 중 7.0 vol.)을 테트라하이드로푸란(10 vol.) 중 4-플루오로아닐린(3.5 당량)의 용액에 첨가하고, 5±5
Figure pct00057
까지 냉각시키고, 약 60분 동안 교반하였다. 5±5
Figure pct00058
에서 산 클로라이드 물질의 온도를 약 25±5
Figure pct00059
의 온도까지 상승시키고 3시간 동안 교반하였다. 반응을 HPLC 분석으로 모니터링하였다.
반응 완료 후, 용액을 에틸 아세테이트(25 vol.)로 희석하고, 유기층을 분리하여 1 M 수산화나트륨 수용액(7.5 vol.), 1 M 염산 수용액(7.5 vol.) 및 25%(w/w) 염화나트륨 수용액(7.5 vol.)으로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 황산나트륨(1.0 w/w)으로 여과하였다. 여액을 50
Figure pct00060
미만의 진공 하에 약 3 vol.로 농축하고 50
Figure pct00061
미만의 진공 하에 에틸 아세테이트(3Х5 vol.)로 약 3.0 vol.로 공-증류시켰다. 에틸 아세테이트(5 vol.) 및 MTBE(10 vol.)를 채우고 50±5
Figure pct00062
까지 가열하고 30 내지 60분 동안 교반하였다. 혼합물을 15±5
Figure pct00063
까지 냉각시키고, 약 30분 동안 교반하고, 여과하고, 고체를 에틸 아세테이트(2.0 vol.)로 세척하였다. MGB3 함량을 HPLC 분석으로 분석하였다. 물 함량이 약 3.0%에 도달할 때까지 물질을 진공 하에 40±5
Figure pct00064
에서 건조시켜 화합물 1F를 갈색 고체로서 수득하였다.
단계 7: N-(3-플루오로-4-((2-(5-(((2-메톡시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)티에노[3,2-b]피리딘-7-일)옥시)페닐)-N-(4-플루오로페닐)시클로프로판-1,1-디카르복스아미드(화합물 1)
Figure pct00065
빙초산(3.5 vol.) 중 화합물 1F의 혼합물에 진한 염산(0.5 vol.)을 첨가하고 25±5
Figure pct00066
에서 1.0시간 동안 교반하였다. 반응을 HPLC 분석으로 모니터링하였다.
반응 완료 후, 물질을 물(11 vol.)에 첨가하고 20±5
Figure pct00067
에서 30분 동안 교반하였다. 10%(w/w) 중탄산나트륨 수용액을 사용하여 pH를 3.0±0.5로 조정하고 약 3.0시간 동안 20±5
Figure pct00068
에서 교반하였다. 물질을 여과하고 물(4Х5.0 vol.)로 세척하고 매 세척 후 여액의 pH를 확인했다. 물 함량이 약 10%가 될 때까지 물질을 50±5
Figure pct00069
에서 진공 하에 건조시켰다.
조 화합물 1을 에틸 아세테이트(30 vol.)에서 취하고, 70±10
Figure pct00070
까지 가열하고, 1.0시간 동안 교반하고, 25±5
Figure pct00071
까지 냉각시키고, 여과하고, 에틸 아세테이트(2 vol.)로 세척하였다. 물질을 45±5
Figure pct00072
에서 6.0시간 동안 진공 하에 건조시켰다.
조 화합물 1을 폴리시 여과된(polish filtered) 테트라하이드로푸란(30 vol.) 및 사전 세척된 Amberlyst® A-21 이온 교환 수지에서 취하고 용액이 투명해질 때까지 25±5
Figure pct00073
에서 교반하였다. 투명한 용액을 얻은 후, 수지를 여과하고 폴리시 여과된 테트라하이드로푸란(15 vol.)으로 세척하였다. 여액을 50
Figure pct00074
미만의 진공 하에 약 50%까지 농축시키고 폴리시 여과된 IPA(3Х15.0 vol.)와 함께 공-증류하고 50
Figure pct00075
미만의 진공 하에 약 50%까지 농축시켰다. 충전된 폴리시 여과된 IPA(15 vol.)를 첨가하고 용액을 50
Figure pct00076
미만의 진공 하에 약 20 vol.로 농축시켰다. 반응물을 80±5
Figure pct00077
까지 가열하고, 60분 동안 교반하고 25±5
Figure pct00078
까지 냉각시켰다. 생성된 반응물을 25±5
Figure pct00079
에서 약 20시간 동안 교반하였다. 반응물을 0±5
Figure pct00080
까지 냉각하고, 4 내지 5시간 동안 교반하고, 여과하고, 폴리시 여과된 IPA(2 vol.)로 세척하였다. 물질을 수분 함량이 약 2%가 될 때까지 45±5
Figure pct00081
에서 진공 건조하여 원하는 생성물인 화합물 1을 얻었다. 1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6): δ10.40(s, 1H), 10.01(s, 1H), 8.59 - 8.55(m, 1H), 8.53(d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.32(s, 1H), 8.23(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.96 - 7.86(m, 2H), 7.70 - 7.60(m, 2H), 7.56 - 7.43(m, 2H), 7.20 - 7.11(m, 2H), 6.66(d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.78(s, 2H), 3.41(t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.25(s, 3H), 2.66(t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.48(s, 4H)ppm. MS: M/e 630 (M+1)+.
실시예 1B: 화합물 1 결정 형태 D의 제조
50 L 반응기에 7.15 Kg의 화합물 1, 결정 시드로서 40 g의 형태 D 및 21 L의 아세톤(99% 이상)을 첨가하였다. 혼합물을 1 내지 2시간 동안 환류 가열(약 56
Figure pct00082
했다. 혼합물을 20±5
Figure pct00083
의 내부 온도에서 적어도 24시간 동안 교반하였다. 그 다음 현탁액을 여과하고 여과 케이크를 7 L 아세톤으로 세척하였다. 습윤 케이크를 45
Figure pct00084
이하에서 진공 건조하여 5.33 kg의 원하는 형태 D의 화합물 1을 얻었다.
X-선 분말 회절( XRPD )
옵틱스(Optix)의 긴 미세-초점 소스를 사용하여 생성된 Cu 방사선의 입사 빔을 사용하여 PANalytical X' Pert PRO MPD 회절계로 XRPD 패턴을 수집하였다. 타원형으로 구배된 다층 거울을 사용하여 Cu Ka X-선을 표본을 통해 검출기에 초점을 맞추었다. 분석 전에 실리콘 표본(NIST SRM 640e)을 분석하여 관찰된 Si Ill 피크의 위치가 NIST-인증 위치와 일치하는지 확인했다. 각 샘플의 표본을 3 μm 두께의 필름 사이에 끼우고 투과 형상으로 분석했다. 빔-스톱, 짧은 항산란 연장 및 항산란 나이프 에지를 사용하여 공기에 의해 생성된 배경을 최소화했다. 입사 광선과 회절 광선에 대한 솔러(Soller) 슬릿을 사용하여 축 발산으로 인한 확장을 최소화했다. 표본에서 240 mm 떨어진 스캐닝 위치-감지 검출기(X'Celerator) 및 데이터 컬렉터(Data Collector) 소프트웨어 v. 2.2b를 사용하여 회절 패턴을 수집하였다. 패턴 매치(Pattern Match) v2.3.6을 사용하여 XRPD 패턴을 생성했다.
X-선 분말 회절(XRPD) 패턴을 사용하여 수득된 화합물 1을 특성화하였으며, 이는 화합물 1이 화합물 1의 결정 형태 D(화합물 1 형태 D)임을 나타내었다(도 1a참조).
실시예 2C: 화합물 1 형태 D의 제조
427.0 mg의 화합물 1을 5 mL의 THF에 용해시켜 투명한 갈색 용액을 얻었다. 생성된 용액을 여과하고, 여과액을 질소 기류하에 증발시켰다. 끈적끈적한 고체를 얻었고, 이것을 진공 하에 실온에서 약 5분 동안 건조시켰고, 여전히 끈적거리는 갈색 고체를 얻었다. 이를 0.2 mL의 EtOAc에 용해시키고 초음파 처리하여 용해시켰다. 얻어진 용액을 실온에서 15분 동안 교반하여, 고체를 침전시켰다. 생성된 고체에 0.4 mL의 EtOAc를 첨가하고 실온에서 21시간 40분 동안 교반하여 현탁액을 얻었다. 고체를 원심분리에 의해 모액으로부터 분리한 다음, 생성된 고체를 0.6 mL의 EtOAc에 재현탁시키고 실온에서 2일 동안 교반하였다. 고체를 원심분리로 분리하여 원하는 형태 D의 화합물 1을 얻었다.
X-선 분말 회절(XRPD) 패턴을 사용하여 수득된 화합물 1을 특성화하였으며, 이는 화합물 1이 화합물 1의 결정 형태 D(화합물 1 형태 D)임을 나타내었다.
실시예 1의 결정화는 결정 시드를 사용하거나 사용하지 않고 수행될 수 있다. 결정 시드는 원하는 결정 형태의 임의의 이전 배치에서 올 수 있다. 결정 시드의 첨가는 본 개시내용에서 결정 형태의 제조에 영향을 미치지 않을 수 있다.
실시예 2
항 PD-1 항체와 조합된 다중-티로신 키나제 억제제에 대한 조합 효능
실시예 2A: A431 동종이계 모델에서 Mab -1과 조합된 화합물 1의 연구
방법
암컷 Nod-Scid 마우스를 시클로포스파미드(식염수 중, 100 mg/kg 복강내, QD Х 2) 및 디설피람(시클로포스파미드 투여 2시간 후 식염수 125mg/kg 경구 위관영양법 중 0.8% Tween-80 중)으로 전처리했다. 2일 후, 체중이 더 나가는 마우스의 오른쪽 옆구리에 2.5Х106 A431(상피 암종) 세포 및 5Х106 새로 분리된 말초혈액 단핵 세포(PBMC)를 피하 이식했다. 접종 후 마우스를 체중에 따라 각 군에 10마리씩 4개 군으로 무작위 배정하였다. 그런 다음, 마우스를 비히클(식염수 중 PEG400/0.1 N HCL, 40/60), Mab -1, 화합물 1, 및 Mab -1과 화합물 1의 조합으로 각각 처리하였다. Mab -1을 복강내(i.p.) 주사로 10 mg/kg 주 1회(QW) 투여하였고, 화합물 1을 경구 위관영양법(P.O.)에 의해 1.5 mg/kg 1일 1회(QD) 투여하였다. 캘리퍼를 사용하여 종양 부피를 2차원으로 매주 2회 측정하고 다음 공식을 사용하여 mm3로 표시했다: V = 0.5(a Х b2)(여기서, a 및 b는 각각 종양의 장경 및 단경임).
데이터는 평균 종양 부피 ± 평균의 표준 오차(SEM)로 제시된다. 종양 성장 억제(TGI)는 다음 공식을 사용하여 계산된다:
Figure pct00085
treated t = 시간 t에서 처리된 종양 부피; treated t0 = 시간 0에서 처리된 종양 부피;
placebo t = 시간 t에서의 위약 종양 부피;
placebo t0 = 시간 0에서의 위약 종양 부피.
결과
Mab -1 및 화합물 1에 대한 A431 동종이계 이종이식편의 반응을 도 2a 및 표 2A에 나타내었다. 26일째에, Mab -1(10 mg/kg QW Х 4), 화합물 1(1.5 mg/kg QD Х 26), 및 이들의 조합 치료는 각각 50%, 37% 및 79% 통계적으로 유의한 종양 성장 억제(TGI)를 나타냈으며, 이는 A431 동종이계 모델에서 Mab -1 및 화합물 1의 강력한 조합 효과를 시사했다. 전체 치료 기간 동안 독성 징후가 관찰되지 않았다.
Figure pct00086
실시예 2B: CT26WT 동계 모델에서 muCh15mt와 조합된 화합물 1의 연구
본원에 사용된 muCh15mt는 내부적으로 생성된 항-PD-1 항체이다.
방법
암컷 BALB/c 마우스의 오른쪽 옆구리에 PBS 150 μl당 2 Х 105 CT26WT(결장암종) 세포를 피하(s.c.) 이식하였다. 접종 후, 마우스를 각 군에 12마리의 동물이 있는 4개의 군으로 무작위화했다. 마우스를 비히클(식염수 중 PEG400/0.1 N HCL, 40/60), muCh15mt, 화합물 1, 및 muCh15mt과 화합물 1의 조합으로 각각 처리하였다. muCh15mt는 복강내(i.p.) 주사에 의해 주당 1회(QW) 3 mg/kg으로 제공되었고, 화합물 1은 경구 위관영양법에 의해 5 mg/kg으로 1일 1회(QD) 투여되었다. 캘리퍼스를 사용하여 종양 부피를 2차원으로 매주 2회 측정하고 다음 공식을 사용하여 mm3로 표시했다: V = 0.5(a Х b2)(여기서, a 및 b는 각각 종양의 장경 및 단경임). 데이터는 평균 종양 부피 ± 평균의 표준 오차(SEM)로 제시된다. 종양 성장 억제(TGI)는 다음 공식을 사용하여 계산된다:
Figure pct00087
treated t = 시간 t에서 처리된 종양 부피;
treated t0 = 시간 0에서 처리된 종양 부피;
placebo t = 시간 t에서의 위약 종양 부피;
placebo t0 = 시간 0에서의 위약 종양 부피.
결과
muCh15mt 및 화합물 1에 대한 CT26WT 동계 모델의 반응을 도 2b 및 표 2B에 나타내었다. 28일째에, muCh15mt(3 mg/kg QW Х 4), 화합물 1(5 mg/kg QD Х 28) 및 이들의 조합 치료는 각각 64%, 71% 및 96% 종양 성장 억제를 초래했다. 한편, 치료는 또한 종양이 없는 동물을 각각 20%, 6.7% 및 66.7% 유도했다. 데이터는 CT26WT 모델에서 화합물 1 및 muCh15mt의 강력한 조합 항종양 활성을 시사했다. 전체 치료 기간 동안 독성 징후가 관찰되지 않았다.
Figure pct00088
실시예 2C: MC38 동계 모델에서 muCh15mt와 조합된 화합물 1의 연구
방법
암컷 BALB/C 마우스의 오른쪽 옆구리에 PBS 150 μl당 1Х106 MC38(결장 선암종) 세포를 피하(s.c.) 이식하였다. 접종 후, 마우스를 각 군에 15마리의 동물이 있는 4개의 군으로 무작위화했다. 마우스를 비히클(식염수 중 PEG400/0.1 N HCL, 40/60), muCh15mt, 화합물 1, 및 muCh15mt와 화합물 1의 조합 처리로 각각 처리하였다. muCh15mt는 복강 내(i.p.) 주사에 의해 주당 1회(QW) 3 mg/kg으로 제공되었고, 화합물 1은 경구 위관영양법(P.O.)에 의해 25일 동안 5 mg/kg으로 1일 1회(QD) 투여되었다. 캘리퍼스를 사용하여 종양 부피를 2차원으로 매주 2회 측정하고 다음 공식을 사용하여 mm3로 표시했다: V = 0.5(a Х b2)(여기서, a와 b는 각각 종양의 장경과 단경임).
데이터는 평균 종양 부피 ± 평균의 표준 오차(SEM)로 제시된다. 종양 성장 억제(TGI)는 다음 공식을 사용하여 계산된다:
Figure pct00089
treated t = 시간 t에서 처리된 종양 부피;
treated t0 = 시간 0에서 처리된 종양 부피;
placebo t = 시간 t에서의 위약 종양 부피;
placebo t0 = 시간 0에서의 위약 종양 부피.
결과
muCh15mt 및 화합물 1에 대한 MC38 동계 모델의 반응을 도 2c 및 표 2C에 나타내었다. 25일째에, muCh15mt(3 mg/kg QW Х 4), 화합물 1(5 mg/kg QD Х 25) 및 이들의 조합 치료는 각각 42%, 56% 및 96% 종양 성장 억제를 초래했다. 한편, 조합 치료는 종양이 없는 동물을 40% 유도했다. 데이터는 MC38 동계 모델에서 화합물 1과 muCh15mt의 강력한 조합 항종양 활성을 시사했다.
Figure pct00090
실시예 2D: A20 동계 모델에서 muCh15mt와 조합된 화합물 1의 연구
방법
암컷 BALB/C 마우스의 오른쪽 옆구리에 PBS 150 μl당 1Х105 A20(B 세포 림프종) 세포를 피하(s.c.) 이식하였다. 접종 후, 캘리퍼스를 사용하여 종양 부피를 2차원으로 매주 2회 결정하였고, 다음 공식을 사용하여 mm3로 표시했다: V = 0.5(a Х b2)(여기서, a와 b는 각각 종양의 장경과 단경임). 종양 부피가 약 100mm3에 도달했을 때, 마우스를 종양 부피에 따라 각 군에 12마리의 동물이 있는 4개의 군으로 무작위화했다. 그 다음, 마우스를 비히클(식염수 중 PEG400/0.1 N HCL, 40/60), muCh15mt, 화합물 1, 및 조합으로 각각 처리하였다. muCh15mt는 복강내(i.p.) 주사에 의해 주당 1회(QW) 3 mg/kg으로 제공되었고, 화합물 1은 경구 위관 영양법(P.O.)에 의해 5 mg/kg으로 1일 1회(QD) 투여되었다.
데이터는 평균 종양 부피 ± 평균의 표준 오차(SEM)로 제시된다. 종양 성장 억제(TGI)는 다음 공식을 사용하여 계산된다:
Figure pct00091
treated t = 시간 t에서 처리된 종양 부피;
treated t0 = 시간 0에서 처리된 종양 부피;
placebo t = 시간 t에서의 위약 종양 부피;
placebo t0 = 시간 0에서의 위약 종양 부피.
결과
muCh15mt 및 화합물 1에 대한 A20 동계 모델의 반응을 도 2d 및 표 2D에 나타내었다. 15일째에, muCh15mt(3 mg/kg QW Х 3), 화합물 1(5 mg/kg QD Х 18) 및 이들의 조합 치료는 각각 81%, 71% 및 97% 종양 성장 억제를 초래했다. 한편, 치료는 또한 종양이 없는 동물을 각각 33.3%, 8.3% 및 91.7% 유도했다. 데이터는 A20 동계 모델에서 화합물 1과 muCh15mt의 강력한 조합 항종양 활성을 시사했다.
Figure pct00092
a: 종양 부피 > 2000 mm3인 2마리의 동물을 희생시켰기 때문에 데이터를 표시되지 않았다.
실시예 3
Mab -1과 조합된 다중-티로신 키나제 억제제에 대한 임상 시험
실시예 3A: 임상 시험 I상 연구
방법
이것은 편평 또는 비-편평 비-소세포폐암(NSCLC), 신세포 암종(RCC), 난소암(OC) 또는 흑색종을 포함하는 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 국소 진행성 또는 전이성 종양 환자를 위한 공개된 다기관의 비-무작위 1b상 임상 시험이다.
모든 환자는 질병 진행(PD), 허용할 수 없는 독성, 사망, 동의 철회 또는 연구 종료가 발생할 때까지 화합물 1 120 mg을 1일 1회 (QD) 경구로, Mab -1 200 mg을 3주마다 1회(Q3W) IV로 조합하여 투여받을 것이다.
연구의 1차 목적은 병용 요법으로서 화합물 1 및 Mab -1의 안전성 및 내약성을 평가하는 것이었다. 전체 반응률, 반응 기간(DOR), 질병 통제율 및 무진행 생존(PFS)을 2차 평가변수로 평가했다.
연구에는 9개의 코호트(코호트 A 내지 I)가 있다. 최대 60명의 환자로 확장된 코호트 E를 제외하고 각 코호트에 약 20명의 환자를 등록할 것이다. 종양 유형 및 이전의 항-세포예정사 단백질-1(PD-1)/PD-L1 항체 치료에 따라 환자를 등록할 것이다.
a) 코호트 A: 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 전이성, 비-편평 NSCLC;
b) 코호트 B: 항-PD-1/PD-L1 항체 미경험 전이성, 비-편평 NSCLC;
c) 코호트 C: 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 전이성 또는 진행성 RCC;
d) 코호트 D: 이전의 전신 요법이 없는 전이성 또는 진행성 RCC;
e) 코호트 E: 항-PD-1/PD-L1 항체 미경험 재발성 및 백금 내성 상피 OC;
f) 코호트 F: 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 전이성, 편평 NSCLC;
g) 코호트 G: 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/저항성 절제불가능 또는 전이성 흑색종;
h) 코호트 H: 양성 PD-L1 발현, 치료 미경험, 국소 진행성 또는 전이성 비-편평 NSCLC;
i) 코호트 I: 양성 PD-L1 발현, 치료 미경험, 국소 진행성 또는 전이성 편평 NSCLC.
기준
포함 기준:
1. 서면 동의서를 제공할 수 있고 연구의 요구 사항 및 평가 일정을 이해하고 준수하는 데 동의할 수 있다.
2. 동의서에 서명한 날의 나이 ≥ 18세(또는 연구가 진행되는 관할권의 법적 동의 연령)
3. RECIST v1.1에 정의된 적어도 1개의 측정가능한 병변
4. 가능한 경우 보관 종양 조직(종양 조직 또는 염색되지 않은 슬라이드가 있는 포르말린-고정 파라핀-포매 블록[FFPE])을 제공한다.
5. 동부협력종양학회(Eastern Cooperative Oncology Group; ECOG) 수행 상태 ≤ 1
6. 적절한 혈액 및 말단-기관 기능
7. 비활성/무증상 보균자, 만성 또는 활성 B형 간염 바이러스(HBV)가 있는 환자는 스크리닝 시 HBV 데옥시리보핵산(DNA) < 500 IU/mL(또는 2500 카피/mL)이어야 한다.
8. 가임 여성은 연구 기간 동안 및 연구 약물의 마지막 투여 후 ≥ 120일 동안 매우 효과적인 피임 방법을 기꺼이 사용하고 연구 약물의 첫 번째 투여 후 ≤ 7일 혈청 임신 검사에서 음성이어야 한다.
9. 비-불임 남성은 연구 기간 동안 및 연구 약물의 마지막 투여 후 ≥ 120일 동안 매우 효과적인 피임법을 기꺼이 사용해야 한다.
배제 기준:
1. 이전의 항-PD-1/PD-L1 치료에 대한 허용할 수 없는 독성.
2. 활성 연수막 질병 또는 조절되지 않는 뇌 전이.
3. 활성 자가면역 질병 또는 재발할 수 있는 자가면역 질병의 병력.
4. 모든 활성 악성 종양 ≤ 2년
5. 연구 약물의 첫 번째 투여 ≤ 14일에 코르티코스테로이드(1일 프레드니손 또는 등가물이 > 10 mg) 또는 기타 면역억제 약물로 전신 치료가 필요한 모든 상태
6. 폐섬유증, 급성 폐질환을 포함하여 간질성 폐질환, 비감염성 폐렴 또는 조절되지 않는 질병의 병력
7. 8. 연구 약물의 첫 번째 투여 전 14일 이내에 전신 항균, 항진균 또는 항바이러스 치료가 필요한 중증의 만성 또는 활동성 감염(결핵 감염 등을 포함함)
8. HIV 감염의 알려진 병력
9. 활동성 C형 간염 환자.
10. 연구 약물의 첫 번째 투여 전 ≤ 28일에 전신 마취가 필요한 모든 주요 외과적 절차
11. 이전의 동종이계 줄기세포 이식 또는 장기 이식
12. 티슬레리주맙 또는 시트라바티닙, 제형의 임의의 성분 또는 용기의 임의의 구성요소에 대한 과민성
13. 연구 약물의 첫 번째 투여 전 6개월 이내에 치료적 INR 모니터링이 필요한 출혈 또는 혈전 장애 또는 와파린 또는 유사 작용제와 같은 항응고제의 사용
15. 다른 치료적 임상시험에 동시 참여
결론/결과
Mab -1 및 화합물 1을 사용한 병용 치료는 비-소세포폐암(NSCLC) 환자, 신세포 암종(RCC) 환자, 난소암(OC) 환자 또는 흑색종 환자에서 유망한 항종양 활성을 가질 수 있다.
2019년 7월 17일 데이터 컷오프 기준으로, 코호트 E(재발, 백금-내성, 상피 OC가 있는 항-PD-1/PD-L1 항체 미경험 환자)에 대해 20명의 환자를 등록하였다. 연구 약물을 받은 20명의 모든 환자를 안전성 분석에 포함하였다. ≥ 30%의 환자에서 발생한 치료-응급 부작용(TEAE)은 설사, 고혈압, 복통, 메스꺼움, 피로, 식욕 감소 및 저마그네슘혈증이었다. 8명의 환자(40.0%)는 화합물 1과 관련된 ≥ 3등급의 TEAE를 경험한 반면, 2명의 환자(10.0%)는 Mab -1과 관련된 ≥ 3등급의 TEAE를 경험했다. RECIST 버전 1.1 기준]에 따라 17명의 유효성-평가가능한 환자 중 4명의 환자가 부분 반응을 달성하고, 11명의 환자가 안정적인 질병을 갖고, 2명의 환자가 진행성 질병을 가졌다. PFS 중앙값은 18.0주이고, DOR 중앙값은 NR(두 범위, 12.29주-NR)이었다. Mab -1 및 화합물 1로의 병용 치료는 난소암 환자에서 유망한 항종양 활성으로 관리가능했다.
2020년 6월 26일 현재, 총 160명의 대상체를 등록 및 치료하였다. 치료 관련 3등급 이상 AE는 67명의 대상체(42%)에서 보고되었으며, 5명 이상의 대상체(≥3%)에서 보고된 부작용은 고혈압(16%), ALT 증가(7[4%]), 설사(7[4%]) 및 구내염(5 [3%])이었다. 이용가능한 안전성 데이터가 있는 160명의 대상체 중 44명 대상체(28%)에서 치료 관련 SAE가 보고되었으며, 6명의 대상체(4%)에서 설사가 포함되었으며, 각각 4명의 대상체(3%)에서 폐렴 및 트랜스아미나제가 증가했다. 다른 모든 치료 관련 SAE는 전체적으로 2명 이하의 대상체(2% 미만)에서 발생했다.
Mab -1 및 화합물 1의 조합은 일반적으로 관리가능한 안전성 프로파일을 보였고, 말기 암으로 진단된 환자에서 유망한 항종양 활성을 나타내었다. 이를 통해 관문 억제제 미경험, 내성 또는 불응성 환자에 대한 충족되지 않은 의학적 요구가 해소된다.
특정 구현예에 대한 전술한 실시예 및 설명은 청구범위에 의해 정의된 바와 같이 본 개시내용을 제한하기보다는 예시하는 것으로 간주되어야 한다. 용이하게 이해되는 바와 같이, 상기 제시된 특징의 다양한 변형 및 조합이 청구범위에 제시된 바와 같은 본 개시내용을 벗어나지 않고 이용될 수 있다. 이러한 모든 변형은 본 개시내용의 범주 내에 포함되고자 한다. 인용된 모든 참고 문헌은 그 전체가 참고로 본원에 포함된다.
<110> BeiGene, Ltd. <120> TREATMENT OF CANCER USING A COMBINATION COMPRISING MULTI-TYROSINE KINASE INHIBITOR AND IMMUNE CHECKPOINT INHIBITOR <130> F19W0712PR1 <160> 90 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 444 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 ccaggatggt tcttagactc cccagacagg ccctggaacc cccccacctt ctccccagcc 60 ctgctcgtgg tgaccgaagg ggacaacgcc accttcacct gcagcttctc caacacatcg 120 gagagcttcg tgctaaactg gtaccgcatg agccccagca accagacgga caagctggcc 180 gccttccccg aggaccgcag ccagcccggc caggactgcc gcttccgtgt cacacaactg 240 cccaacgggc gtgacttcca catgagcgtg gtcagggccc ggcgcaatga cagcggcacc 300 tacctctgtg gggccatctc cctggccccc aaggcgcaga tcaaagagag cctgcgggca 360 gagctcaggg tgacagagag aagggcagaa gtgcccacag cccaccccag cccctcaccc 420 aggccagccg gccagttcca aacc 444 <210> 2 <211> 148 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr 1 5 10 15 Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe 20 25 30 Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr 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<212> PRT <213> Mus musculus <400> 4 Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Lys 1 5 10 15 Asn Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met 50 55 60 Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Arg Ser Gln Val Phe Leu 65 70 75 80 Arg Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val Trp Gly Ala Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 5 <211> 321 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 5 gacattgtga tgacccagac tcccaaattc ctgcttgtat cagcaggaga cagggttacc 60 ataacctgca aggccagtca gagtgtgagt aatgatgtag cttggtacca acagaagcca 120 gggcagtctc ctaaactgct gataaactat gcatttcatc gcttcactgg agtccctgat 180 cgtttcactg gcagtggata tgggacggat ttcattttca ccatcagcac tgtgcaggct 240 gaagacctgg cagtttattt ctgtcaccag gcttatagtt ctccgtacac gttcggaggg 300 gggaccaagc 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atatccgacg 300 ttcggtggag gcaccaagct ggaagtcaaa 330 <210> 10 <211> 110 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 10 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Tyr Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Asp Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Val Lys 100 105 110 <210> 11 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 11 Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Val His 1 5 10 <210> 12 <211> 16 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 12 Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser 1 5 10 15 <210> 13 <211> 12 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 13 Ala Arg Ala Tyr Gly Asn Tyr Trp Tyr Ile Asp Val 1 5 10 <210> 14 <211> 11 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 14 Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp Val Ala 1 5 10 <210> 15 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 15 Tyr Ala Phe His Arg Phe Thr 1 5 <210> 16 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 16 His Gln Ala Tyr Ser Ser Pro Tyr Thr 1 5 <210> 17 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 17 Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Met Asn 1 5 10 <210> 18 <211> 17 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 18 Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 19 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 19 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr 1 5 <210> 20 <211> 15 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 20 Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr Gly Tyr Ser Phe Met His 1 5 10 15 <210> 21 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 21 Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 22 <211> 8 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 22 Gln Gln Ser Lys Glu Tyr Pro Thr 1 5 <210> 23 <211> 354 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 317-4B6 cDNA-Vh <400> 23 caggtgcagc tgcaggagtc 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gatgggctgg atcaacaaca acaacggcga gcccacctac 180 gcccagggct tcagaggcag attcgtgttc agcctggaca ccagcgccag caccgcctac 240 ctgcagatca gcagcctgaa gaccgaggac accgccgtgt acttctgcgc cagagacgtg 300 atggactact ggggccaggg caccaccgtg accgtgagca gc 342 <210> 56 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-1 pro-Vh <400> 56 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Asn Asn Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gln Gly Phe 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 57 <211> 330 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 326-1 cDNA-Vk <400> 57 gacattgtgc tgacccagtc tccagcctcc ttggccgtgt ctccaggaca 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huIgG4mt6 pro <400> 85 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Ala Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 86 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> huIgG4mt8 pro <400> 86 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Thr Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 87 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> huIgG4mt9 pro <400> 87 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Ala Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 88 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> huIgG4mt10 pro <400> 88 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Ala Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 89 <211> 367 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> OS8 pro <400> 89 Met Glu Arg His Trp Ile Phe Leu Leu Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Val His Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn 65 70 75 80 Gln Lys Phe Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp 115 120 125 Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 130 135 140 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser 145 150 155 160 Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys 165 170 175 Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Ser 180 185 190 Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser 195 200 205 Gly Val Pro Ala His Phe Arg Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser 210 215 220 Leu Thr Ile Ser Gly Met Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys 225 230 235 240 Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu 245 250 255 Glu Ile Asn Ser Ser Val Val Pro Val Leu Gln Lys Val Asn Ser Thr 260 265 270 Thr Thr Lys Pro Val Leu Arg Thr Pro Ser Pro Val His Pro Thr Gly 275 280 285 Thr Ser Gln Pro Gln Arg Pro Glu Asp Cys Arg Pro Arg Gly Ser Val 290 295 300 Lys Gly Thr Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro 305 310 315 320 Leu Ala Gly Ile Cys Val Ala Leu Leu Leu Ser Leu Ile Ile Thr Leu 325 330 335 Ile Cys Tyr His Arg Ser Arg Lys Arg Val Cys Lys Cys Pro Arg Pro 340 345 350 Leu Val Arg Gln Glu Gly Lys Pro Arg Pro Ser Glu Lys Ile Val 355 360 365 <210> 90 <211> 304 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> P3Z pro <400> 90 Met Gln Ile Pro Gln Ala Pro Trp Pro Val Val Trp Ala Val Leu Gln 1 5 10 15 Leu Gly Trp Arg Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp 20 25 30 Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp 35 40 45 Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val 50 55 60 Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala 65 70 75 80 Ala Phe Pro Glu Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg 85 90 95 Val Thr Gln Leu Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg 100 105 110 Ala Arg Arg Asn Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu 115 120 125 Ala Pro Lys Ala Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val 130 135 140 Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro 145 150 155 160 Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Thr Leu Val Val Gly Val Val Gly Gly 165 170 175 Leu Leu Gly Ser Leu Val Leu Leu Val Trp Val Leu Ala Val Ile Arg 180 185 190 Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln 195 200 205 Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp 210 215 220 Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro 225 230 235 240 Gln Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 245 250 255 Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg 260 265 270 Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 275 280 285 Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 290 295 300

Claims (27)

  1. 대상체에서의 암의 예방, 진행 지연 또는 치료 방법으로서, 상기 방법은 치료적 유효량의 PD-1 길항제와 조합하여 치료적 유효량의 다중-티로신 키나제 억제제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고,
    여기서 상기 다중-티로신 키나제 억제제는 화합물 1,
    Figure pct00093

    또는 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이고,
    상기 PD-1 길항제는 하기에 기재된 상보성 결정 영역(CDR)을 함유하는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(Vk)을 포함하는 인간 PD-1에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 단편 항원 결합인, 방법:
    a) mu317 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 12, 13); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 14, 15, 16);
    b) mu326 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 17, 18, 19); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 20, 21, 22);
    c) 317-4B6 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 31, 32, 33); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 34, 35, 36);
    d) 326-4A3 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 37, 38, 39); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 40, 41, 42);
    e) 317-1H CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 59, 13); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 14, 15, 16);
    f) 317-4B2 CDR-HL CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 60, 13); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 61, 15, 16);
    g) 317-4B5 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 60, 13); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 61, 15, 16);
    h) 317-4B6 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 11, 32, 13); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 61, 15, 16);
    i) 326-1 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 17, 62, 19); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 20, 21, 22);
    j) 326-3B1 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 17, 62, 19); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 20, 21, 22); 또는
    k) 326-3G1 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 17, 62, 19); 및
    CDR-L1, CDR-12 및 CDR-L3(각각, 서열번호 20, 21, 22).
  2. 제1항에 있어서, 상기 PD-1 길항제는 하기를 포함하는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(Vk)을 포함하는 항체인, 방법:
    a) mu317(각각, 서열번호 4 및 6);
    b) mu326(각각, 서열번호 8 및 10);
    c) 317-4B6(각각, 서열번호 24 및 26);
    d) 326-4A3(각각, 서열번호 28 및 30);
    e) 317-4B2(각각, 서열번호 43 및 44);
    f) 317-4B5(각각, 서열번호 45 및 46);
    g) 317-1(각각, 서열번호 48 및 50);
    h) 326-3B1(각각, 서열번호 51 및 52);
    i) 326-3GI(각각, 서열번호 53 및 54);
    j) 326-1(각각, 서열번호 56 및 58);
    k) 317-3A1(각각, 서열번호 64 및 26);
    l) 317-3C1(각각, 서열번호 65 및 26);
    m) 317-3E1(각각, 서열번호 66 및 26);
    n) 317-3F1(각각, 서열번호 67 및 26);
    o) 317-3G1(각각, 서열번호 68 및 26);
    p) 317-3H1(각각, 서열번호 69 및 26);
    q) 317-311(각각, 서열번호 70 및 26);
    r) 317-4B1(각각, 서열번호 71 및 26);
    s) 317-4B3(각각, 서열번호 72 및 26);
    t) 317-4B4(각각, 서열번호 73 및 26);
    u) 317-4A2(각각, 서열번호 74 및 26);
    v) 326-3A1(각각, 서열번호 75 및 30);
    w) 326-3C1(각각, 서열번호 76 및 30);
    x) 326-3D1(각각, 서열번호 77 및 30);
    y) 326-3E1(각각, 서열번호 78 및 30);
    z) 326-3F1(각각, 서열번호 79 및 30);
    aa) 326-3B N55D(각각, 서열번호 80 및 30);
    ab) 326-4A1(각각, 서열번호 28 및 81); 또는
    ac) 326-4A2(각각, 서열번호 28 및 82).
  3. 제1항에 있어서, 상기 PD-1 길항제는 서열번호 83 내지 88 중 임의의 것을 포함하는 IgG4 중쇄 이펙터 또는 불변 도메인을 함유하는 항체인, 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 PD-1 길항제는 제2항의 도메인을 포함하는 F(ab) 또는 F(ab)2를 함유하는 항체인, 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 PD-1 길항제는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(Vk), 및 서열번호 87 또는 88을 포함하는 IgG4 중쇄 이펙터 또는 불변 도메인을 포함하는 항체이고, 여기서 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(Vk)은 하기를 포함하는, 방법:
    a) mu317(각각, 서열번호 4 및 6);
    b) mu326(각각, 서열번호 8 및 10);
    c) 317-4B6(각각, 서열번호 24 및 26);
    d) 326-4A3(각각, 서열번호 28 및 30);
    e) 317-4B2(각각, 서열번호 43 및 44);
    f) 317-4B5(각각, 서열번호 45 및 46);
    g) 317-1(각각, 서열번호 48 및 50);
    h) 326-3B1(각각, 서열번호 51 및 52);
    i) 326-3GI(각각, 서열번호 53 및 54);
    j) 326-1(각각, 서열번호 56 및 58);
    k) 317-3A1(각각, 서열번호 64 및 26);
    l) 317-3C1(각각, 서열번호 65 및 26);
    m) 317-3E1(각각, 서열번호 66 및 26);
    n) 317-3F1(각각, 서열번호 67 및 26);
    o) 317-3G1(각각, 서열번호 68 및 26);
    p) 317-3H1(각각, 서열번호 69 및 26);
    q) 317-311(각각, 서열번호 70 및 26);
    r) 317-4B1(각각, 서열번호 71 및 26);
    s) 317-4B3(각각, 서열번호 72 및 26);
    t) 317-4B4(각각, 서열번호 73 및 26);
    u) 317-4A2(각각, 서열번호 74 및 26);
    v) 326-3A1(각각, 서열번호 75 및 30);
    w) 326-3C1(각각, 서열번호 76 및 30);
    x) 326-3D1(각각, 서열번호 77 및 30);
    y) 326-3E1(각각, 서열번호 78 및 30);
    z) 326-3F1(각각, 서열번호 79 및 30);
    aa) 326-3B N55D(각각, 서열번호 80 및 30);
    ab) 326-4A1(각각, 서열번호 28 및 81); 또는
    ac) 326-4A2(각각, 서열번호 28 및 82).
  6. 제1항에 있어서, 상기 PD-1 길항제는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(Vk), 및 서열 번호 88을 포함하는 IgG4 중쇄 이펙터 또는 불변 도메인을 포함하는 항체이고, 여기서 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(Vk)은 각각 서열번호 24 및 서열번호 26을 포함하는 것인, 방법.
  7. 제1항에 있어서, 화합물 1은 결정 형태 D인, 방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 결정 형태 D는 실질적으로 도 1a에 나타낸 XRPD 패턴을 갖는 것인, 방법.
  9. 제1항에 있어서, 상기 암은 고형암 또는 종양인, 방법.
  10. 제9항에 있어서, 상기 암은 비-소세포폐암(NSCLC), 난소암(OC), 신세포 암종(RCC) 또는 흑색종을 포함하는 폐암으로부터 선택되는 것인, 방법.
  11. 제9항에 있어서, 암은 다중-티로신 키나제-관련 암인, 방법.
  12. 제9항에 있어서, 상기 암은 항-PD-1 항체 및/또는 항-PD-L1 항체로부터 선택되는 관문 억제제에 대해 내성 또는 불응성인, 방법.
  13. 제9항에 있어서, 상기 암은 PD-L1 발현인, 방법.
  14. 제9항에 있어서, 상기 암은 국소 진행성, 재발성 또는 전이성을 포함하는 병기에 의해 선택되는 것인, 방법.
  15. 제10항에 있어서, 상기 암은 비-편평 비-소세포폐암(NSCLC), 편평 비-소세포폐암(NSCLC), 상피 난소암(OC), 신세포 암종(RCC) 또는 흑색종인, 방법.
  16. 제15항에 있어서, 상기 비-편평 비-소세포폐암(NSCLC)은 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 전이성, 비-편평 NSCLC; 항-PD-1/PD-L1 항체 미경험 전이성, 비-편평 NSCLC; 또는 전이성 조건에서의 사전 전신 치료가 이루어지지 않은 PD-L1 양성, 국소 진행성 또는 전이성 비-편평 NSCLC인, 방법.
  17. 제15항에 있어서, 상기 편평 비-소세포폐암(NSCLC)은 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 전이성, 편평 NSCLC; 항-PD-1/PD-L1 항체 미경험 전이성, 편평 NSCLC; 또는 전이성 조건에서의 사전 전신 치료가 이루어지지 않은 PD-L1 양성, 국소 진행성 또는 전이성 편평 NSCLC인, 방법.
  18. 제15항에 있어서, 상기 신세포 암종(RCC)은 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 전이성 또는 진행성 RCC, 또는 사전 전신 요법이 이루어지지 않은 전이성 또는 진행성 RCC인, 방법.
  19. 제15항에 있어서, 상기 흑색종은 항-PD-1/PD-L1 항체 불응성/내성 절제불가능 또는 전이성 흑색종인, 방법.
  20. 제15항에 있어서, 상기 난소암(OC)은 미경험 재발성 및 백금-내성 상피 OC인, 방법.
  21. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 PD-1 길항제는 30 내지 300 mg QW, 또는 Q2W, 또는 Q3W, 또는 Q4W의 용량으로 비경구 투여되는 것인, 방법.
  22. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 PD-1 길항제는 200 mg Q3W의 용량으로 비경구 투여되는 것인, 방법.
  23. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 1은 40 내지 150 mg QD의 용량으로 경구 투여되는 것인, 방법.
  24. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 1은 60 내지 150 mg QD의 용량으로 경구 투여되는 것인, 방법.
  25. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 1은 120 mg QD의 용량으로 경구 투여되는 것인, 방법.
  26. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물 1은 200 mg IV Q3W의 용량의 PD-1 길항제와 조합하여 120 mg QD의 용량으로 경구 투여되는 것인, 방법.
  27. PD-1 길항제 및 다중-티로신 키나제 억제제를 포함하는, 암의 예방, 진행 지연 또는 치료에 사용하기 위한 약제학적 조합물로서, 여기서 상기 PD-1 길항제는 인간 PD-1에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 단편 항원 결합이며 하기에 나열된 상보성 결정 영역(CDR)을 함유하는 중쇄 가변 영역(Vh) 및 경쇄 가변 영역(Vk)을 포함하고:
    CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3(각각, 서열번호 31, 32, 33); 및
    CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3(각각, 서열번호 34, 35, 36); 및
    여기서, 상기 다중-티로신 키나제 억제제는 화합물 1,
    Figure pct00094

    또는 이의 입체이성질체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인, 약제학적 조합물.




























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