KR20220054321A - 191p4d12 단백질에 결합하는 항체 약물 컨쥬게이트(adc)를 사용한 암의 치료 - Google Patents

191p4d12 단백질에 결합하는 항체 약물 컨쥬게이트(adc)를 사용한 암의 치료 Download PDF

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오예웨일 오. 아비도예
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어젠시스 인코포레이티드
씨젠 인크.
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Abstract

191P4D12 단백질에 결합하는 항체 약물 컨쥬게이트(ADC)로 암을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.

Description

191P4D12 단백질에 결합하는 항체 약물 컨쥬게이트(ADC)를 사용한 암의 치료
관련된 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2019년 8월 13일에 출원된 미국 가특허출원 제62/886,270호에 대한 우선권의 이익을 주장하며, 그 개시 내용은 그 전체가 참고로 여기에 통합된다.
1. 분야
191P4D12 단백질에 결합하는 항체 약물 컨쥬게이트(ADC)로 암을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.
2. 배경
암은 미국에서 35세 내지 65세 인구의 주요 사망 원인이며 전 세계적으로 두 번째 주요 사망 원인이다. 2019년에는 미국에서 대략 170만 건의 새로운 암 사례가 발생하고 대략 610000명이 암으로 사망할 것으로 추정되었다(National Cancer Institute. 2019. Cancer Stat Facts: Cancer of Any Site. https://seer.cancer.gov/ statfacts/html/all.html. 2019년 6월 5일에 액세스함). 전 세계적으로 2018년에 약 1,810만 건의 새로운 암 사례가 있었고 2018년에는 암으로 인해 대략 960만 명이 사망했다(World Health Organization. Press Release. Sept 2018. https://www.who.int/cancer/PRGlobocanFinal.pdf. 2019년 6월 5일 액세스함). 대부분의 사망은 현재 전이성 암 환자에서 발생한다. 실제로 지난 20년 동안 수술, 방사선 요법 및 보조 화학 요법을 포함한 치료의 발전으로 국소 암을 갖는 대부분의 환자가 치료되었다. 암이 전이성 질환으로 나타나거나 재발한 환자는 전체 생존(OS) 측면에서 기존 요법의 이점을 거의 얻지 못했고 거의 치료되지 않았다.
전이성 암에 대한 새로운 치료 전략은 암세포 생존 및 신규 세포독성 화합물에 중요한 표적 분자 경로를 포함한다. 상기 새로운 약물의 이점은 연장된 생존에 반영된다; 그러나 원격 전이가 있는 대부분의 환자에 대한 결과는 여전히 좋지 않으며 새로운 요법이 필요하다.
191P4D12(넥틴-4로도 알려짐)는 I형 막횡단 단백질이며 세포-대-세포 부착과 관련된, 관련 면역글로불린-유사 부착 분자 패밀리의 멤버이다. 191P4D12는 부착 분자의 넥틴 패밀리에 속한다. 191P4D12는 3개의 Ig-유사 서브도메인을 함유하는 세포외 도메인(ECD), 막횡단 나선 및 세포내 영역으로 구성된다(Takai Y et al, Annu Rev Cell Dev Biol 2008;24:309-42). 넥틴은 카드헤린을 모집하고 세포골격 재배치를 조절할 수 있는 부착 접합(adherens junctions)에서 동종 및 이종 트랜스 상호작용 모두를 통해 Ca2+-독립적 세포-세포 부착을 매개하는 것으로 생각된다(Rikitake & Takai, Cell Mol Life Sci. 2008;65(2):253- 63). 다른 Nectin 패밀리 멤버에 대한 191P4D12의 서열 동일성은 낮고 ECD에서 25% 내지 30% 범위이다(Reymond N et al, J Biol Chem 2001;43205-15). 넥틴 촉진 부착은 면역 조절, 숙주-병원체 상호작용 및 면역 회피와 같은 여러 생물학적 프로세스를 지원한다(Sakisaka T et al, Current Opinion in Cell Biology 2007;19:593-602).
유방암
전 세계적으로 2018년에 새로 진단된 여성 유방암 사례는 대략 210만 건이 될 것이며, 이는 여성의 암 사례 4건 중 거의 1건을 차지한다. 이 질환(disease)은 대다수 국가에서 가장 흔히 진단되는 암이며, 여성의 암 관련 사망의 주요 원인이기도 하다. 전이 진단 후, 예후는 5년 생존율이 약 15%로 좋지 않다.
전이성 유방암에 대한 적절한 요법의 선택은 질환의 많은 치료 옵션 및 생물학적 이질성 때문에 복잡하다. 잠재적인 치료 옵션은 에스트로겐 및 프로게스테론 수용체와 종양의 인간 표피 성장 인자 수용체 2(HER2) 상태에 영향을 받는다. 전이성 유방암을 나타내는 대상에 대한 치료 옵션은 무슨 보조 요법이 사용되었는지, 보조 요법 후 얼마나 빨리 대상이 재발하는지, 및 전이 부위에 의해 또한 영향을 받을 수 있다.
호르몬 수용체 양성, 인간 표피 성장 인자 수용체 2 음성 유방암
호르몬 수용체 양성 (HR+)/HER2- 음성 유방암은 폐경 후의 여성에게 우세하게 발생하는, 가장 흔한 유방암 서브타입이다(> 70%). 전이성 질환이 있는 여성의 초기 치료는 주로 내분비 요법으로 구성된다. 이는 일반적으로 단독으로, CDK4/6 억제제와 함께, 또는 이중 내분비 차단제로 투여된다. 내분비 난치성인 여성 또는 증상이 있는 내장 질환을 갖는 여성의 경우, 전신 화학 요법이 권장된다.
안트라사이클린, 탁산, 젬시타빈, 카페시타빈, 비노렐빈, 에리불린, 및 익사베필론을 포함하는 여러 세포독성 화학요법제는 전이성 유방암에서 활성을 나타낸다. 이들 제제의 반응률은 이전 요법의 타입 뿐만 아니라 유방암 서브 타입에 따라 다르다. 일반적으로, 안트라사이클린-계 병용 요법 및 파클리탁셀 및 도시탁셀과 같은 탁산이 가장 활성을 보이는 것으로 생각된다(Piccart M, Clin Breast Cancer 2008;100-13). 보조 환경(adjuvant setting)에서 안트라사이클린의 광범위한 사용 및 심장독성의 증가된 위험을 감안할 때, 전이 환경에서 안트라사이클린의 사용은 제한된다. 탁산은 특히 프론트-라인 환경에서, 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖는 환자에게 가장 일반적으로 사용되는 제제이다(Greene & Hennessy, J Oncol Pharm Pract 2015;201-12). 더 낮은 독성 및 제한된 생존 이익으로 인해 순차 단일 제제 요법이 병용 요법보다 권장된다. HR+/HER2 음성 유방암을 갖는 환자의 일반적으로 사용되는 단일 제제 화학요법 대한 반응은 주로 서브 그룹 분석으로 제한되며, 이들은 11% 내지 36%의 범위이다(Robson M et al, N Engl J Med. 2017;377(18):1792-3; Kaufman PA et al, J Clin Onco. 2015;33(6):594-601; Cortes J et al, Lancet. 2011;377:914-23). 일반적으로, 반응은 10% 내지 13% 사이의 보고 범위로 사전에 치료된 환자에게 더 낮은 경향이 있었다(Perez EA et al, J Clin Oncol. 2007;25:3407-14; Jones S et al, J Clin Oncol. 1995;13(10):2567-74).
삼중 음성 유방암
삼중 음성 유방암(TNBC)은 에스트로겐 수용체(ER), 프로게스테론 수용체(PR), 및 HER2에 대한 면역염색의 부재로 정의된다. 전체적으로, 유방암의 대략 15% 내지 20%는 TNBC로 분류된다. TNBC는 악성 종양 생물학(aggressive tumor biology), 내장 전이 및 나쁜 예후와 관련된다(Plasilova ML et al, Medicine (Baltimore). 2016;95(35):e4614).
탁산-계 요법은 TNBC를 포함하는, 전이성 유방암을 갖는 환자에 대한 1차 요법의 표준 치료로 고려된다. 보다 최근에 FDA는 종양이 프로그래밍된 사멸-리간드 1(PD-L1; 7.5 개월 대 5.0 개월의 중앙 무진행 생존 기간(PFS); 56% 대 46%의 목적반응 비율(ORR))을 발현하는 절제 불가능한 국소 진행성 또는 전이성 TNBC를 갖는 환자의 치료를 위한 냅-파클리탁셀과 병용한 아테졸리주맙에 대한 가속 승인을 승인했다(Schmid P et al, N Engl J Med. 2019;380(10):987-988). 2차 또는 추가 치료에 대한 표준 접근 방식이 존재하지 않으며, 화학 요법에 대한 옵션은 다른 서브타입에 대한 것과 동일하다. 단일-제제 세포독성 화학요법제는 악성 질환 및 내장 침범을 제외하고 생존 이점의 결여 및 증가된 독성으로 인해 병용 화학요법보다 일반적으로 선호된다(Cardoso F et al, Ann Oncol. 2017;28(2):208-217; National Comprehensive Cancer Network, 2017, Non-small cell lung cancer, NCCN clinical practice guidelines in oncology (NCCN guidelines), http://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/nscl.pdf. Accessed 5 Jun 2019). 사전 치료를 받은 환자의 표준 화학 요법은 낮은 반응률(10% 내지 15%) 및 짧은 무진행 생존 기간(2 내지 3 개월)과 관련이 있다(Hurvitz & Mead, Curr Opin Obstet Gynecol. 2016;28(1):59-69).
비소세포 폐암
폐암(소세포 및 비소세포 모두)은 미국의 암 사망의 주요 원인이다(American Cancer Society. Key Statistics for Lung Cancer. 8 Jan 2019a. https://www.cancer.org/cancer/non-small-cell-lung-cancer/about/key-statistics.html. Accessed 5 Jun 2019). 폐암 진단을 받은 대부분의 환자는 65세 이상이고, 진단 당시 평균 연령은 대략 70세이다.
비소세포폐암(NSCLC)은 전체 폐암의 대략 85%를 차지하고(Tan & Huq, Non-Small Cell Lung Cancer (NSCLC), April 13, 2019, https://emedicine.medscape.com/article/279960-overview, accessed 5 Jun 2019; American Cancer Society: What is non-small cell lung cancer, 16 May 2016, https://www.cancer.org/cancer/non-small-cell-lung-cancer/about/what-is-non-small-cell-lung-cancer.html, accessed 5 Jun 2019), 편평(squamous)(NSCLC 사례의 대략 30%) 및 비편평(NSCLC 사례의 대략 40%) 조직학적 타입으로 하위분류될 수 있다(American Cancer Society. Non-Small Cell Lung Cancer. 2019b. http://www.cancer.org/Cancer/LungCancer-Non-SmallCell/DetailedGuide/lung-cancer--non-small-cell--non-small-cell-lung-cancer. Accessed 5 Jun 2019).
편평 비소세포폐암
편평 NSCLC는 고령, 진단 시 전이성(악성 또는 전이성 악성을 포함) 질환, 동반이환 질환, 및 중양의 중심 위치를 포함하는 특정 환자 및 질환 특성의 결과로 치료하기 어려운 NSCLC의 뚜렷한 조직학적 서브타입이다(Socinski M et al, Cell Lung Cancer 2018;165-183). 이러한 특징은 전이성(악성 또는 전이성 악성을 포함) 편평 NSCLC의 치료 결과에 영향을 미치므로 다른 NSCLC 서브타입을 갖는 환자보다 대략 30% 더 짧은 중앙 생존율을 결과한다.
특히, 생존 결과에 영향을 미치는 전이성(악성 또는 전이성 악성을 포함) 편평 NSCLC의 1차 치료에 대한 제한된 치료 옵션이 있다(National Comprehensive Cancer Network. 2017, Non-small cell lung cancer, NCCN clinical practice guidelines in oncology (NCCN guidelines), http://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/nscl.pdf, accessed 5 Jun 2019; Novello S et al, Ann Oncol 2016;27 (Supple 5):v1-v27; Masters GA et al, J Clin Oncol 2015;33(30):3488-3515).
전이성(악성 또는 전이성 악성을 포함) NSCLC에 대한 표적 요법 및 면역 요법의 최근 승인 및 폐암 치료의 개인화를 향한 지속을 감안할 때, 전이성(악성 또는 전이성 악성을 포함) 편평 NSCLC에 대한 상기 새로운 치료의 효과를 평가할 필요가 있다.
비편평 비소세포암
비편평 NSCLC는 병기, 전이의 존재, 및 다른 고려사항 중에서 동반 질환의 존재를 포함하는 환자 인자에 의존하는 다중 치료 옵션을 갖는 이종 질환이다. 따라서, 현재 치료 옵션은 외과적 절제, 화학 요법, 방사선, 면역 요법, 및 표적 요법을 포함한다. 현재, 표적화 가능한 유전적 이상(genetic aberrations)이 없는 전이성(악성 또는 전이성 악성을 포함) 비편평 NSCLC를 갖는 환자의 1차 요법은 백금-이중 화학요법이다. 베바시주맙을 제외하고, 그리고 다중 표적 및 세포독성 제제의 광범위한 연구에도 불구하고, 백금-이중 화학요법에의 제3의 제제의 추가는 무작위 연구에서 백금-이중 화학요법 단독에 비해 무진행 또는 OS를 개선하는 것으로 나타나지 않는다(Reck M et al, Ann Oncol 2010;1804-09; Sandler A et al, N Engl J Med 2006; 355:2542-50).
두경부암
두경부암은 입, 코, 인후, 후두, 부비강, 또는 침샘에서 시작하는 암 그룹이다(National Cancer Institute, Head and Neck Cancers, 29 Mar 2017, https://www.cancer.gov/types/head-and-neck/head-neck-fact-sheet, accessed 5 Jun 2019). 전 세계적으로, 두경부암은 550만 명 이상의 사람들에게 영향을 미치고(입 240만 명, 인후 170만 명, 및 후두 140만 명), 379000명 이상의 사망을 초래했다(GBD. 2016a. Global, regional, and national incidence, prevalence, and years lived with disability for 310 diseases and injuries, 1990-2015: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2015, accessed 5 Jun 2019, https://www.thelancet.com/journals/lancet/article/PIIS0140-6736(16)31678-6/fulltext; GBD. 2016b. Global, regional, and national life expectancy, all-cause mortality, and cause-specific mortality for 249 causes of death, 1980-2015: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2015, https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0140673616310121, accessed 5 Jun 2019). 전 세계적으로, 두경부암의 대략 600000건의 사례가 올 해 발생할 것이며, 환자의 40% 내지 60%만이 5년 동안 생존할 것이다(Rene Leemans C, et al. The molecular biology of head and neck cancer, Nature Reviews Cancer, 16 Dec 2011, accessed 5 Jun 2019, https://www.nature.com/articles/nrc2982).
가장 중요한 위험 인자는 흡연 및 음주이며, 이들은 시너지 효과가 있는 것으로 보인다(Decker & Goldstein, N Engl J Med. 1982;1151-1155). 두경부암의 서브그룹, 특히 구인두(oropharynx)의 암은 고-위험 타입의 인간 유두종바이러스(human papillomavirus, HPV)의 감염에 의해 발생된다(Rene Leemans C, et al. The molecular biology of head and neck cancer, Nature Reviews Cancer, 16 Dec 2011, accessed 5 Jun 2019, https://www.nature.com/articles/nrc2982).
치료는 발병 단계에 따라 주로 결정되지만, 수술, 방사선 요법, 화학 요법, 및 표적 요법의 조합을 포함할 수 있다(National Cancer Institute, 2019, Cancer Stat Facts: Cancer of Any Site, https://seer.cancer.gov/statfacts/html/all.html, accessed 5 Jun 2019). 생존율은, 그러나, 환자에게 종종 국소 재발, 원격 전이, 및 2차 원발성 종양이 발생하기에 최근 수십년 동안 크게 향상되지 않았다. 두경부암의 분자적 발암성 및 질병의 유전적 및 생물학적 이질성에 대한 이용할 수 있는 제한된 정보는 새로운 치료 전략의 개발을 방해했다.
위암 또는 식도암
2019년에는 미국에서 약 17650명의 성인 환자가 위암으로 진단될 것이며, 대략 16080명의 사망이 상기 질병으로부터 발생할 것이다(American Cancer Society, Survival Rates for Esophageal Cancer, 31 Jan 2019c, https://www.cancer.org/cancer/esophagus-cancer/detection-diagnosis-staging/survival-rates.html, accessed 6 Jun 2019). 2019년에는 미국에서 약 27510명의 성인은 식도암으로 진단될 것이고 대략 11140명의 사망이 상기 질병으로부터 발생할 것이다(American Cancer Society, Key Statistics About Stomach Cancer, 09 Jan 2019d, https://www.cancer.org/cancer/stomach-cancer/about/key-statistics.html, accessed 6 Jun 2019). 식도선암(esophageal adenocarcinoma) 및 위 심장선암(gastric cardia adenocarcinoma)의 비율이 증가하는 반면, 식도 편평 세포 암종(esophageal squamous cell carcinoma) 및 위 비심장 선암종의 비율은 감소하여, 뚜렷한 병인을 시사한다(Crew & Neugut, World J Gastroenterol. 2016;354-362).
화학요법은 절제할 수 없는, 국소 진행성, 또는 전이성 질환을 갖는 환자에 대한 증상의 유의한 감소를 제공할 수 있다. 부분 반응(PR)률(시스플라틴, 독소루비신, 및 미토마이신)을 생성하는 단일 제제는 위장관(GI) 암에서 가장 활성적인 것으로 간주된다(Preusser P et al, Oncology 1998;99 102). 이러한 제제를 사용하는 조합 요법은 단일 제제 요법과 비교하여, 더 높은 반응률(30% 내지 50%)을 나타내지만, 더 큰 독성과 관련되고 유사한 OS(6 내지 10 개월 범위)를 생성한다(Preusser P et al, Oncology 1998;99 102). 따라서, 환자 생존의 연장이 달성되기 위해 새로운 제제의 식별이 필수적이다.
암에 대한 추가적인 치료 방법에 대한 상당한 필요성이 있다. 이들은 치료 양상(modalities)으로서 항체 및 항원 약물 컨쥬게이트의 사용을 포함한다.
3. 요약
하나의 관점에서, 본원에서 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트(conjugate)를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 대상은 호르몬 수용체 양성 및 인간 표피 성장 인자 수용체 2 음성(HR+/HER2-) 유방암을 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현 예에서, HR+/HER2- 유방암은 에스트로겐 수용체(ER) 양성 및/또는 프로게스테론 수용체(PR) 양성, 그리고 HER2 음성이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현 예에서, 대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현 예에서, 대상은 전이성 또는 국소 진행성 환경에서 내분비 요법 및 사이클린 의존성 키나제(CDK) 4/6 억제제 중 적어도 하나의 계열(line)을 이전에 받았다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현 예에서, 대상은 탁산 또는 안트라사이클린으로 치료를 이전에 받았다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현 예에서, 대상은 유방암 감수성 유전자 (BRCA)1 또는 BRCA2에 유해한 생식계열 돌연변이를 갖고, 대상은 폴리 ADP 리보스 폴리머라제(PARP) 억제제로 이전에 치료받았다.
몇몇 관점에서, 본원에 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 대상은 ER 음성, PR 음성, 및 HER2 음성(ER-/PR-/HER2-) 유방암을 갖는다.
본원에 제공된 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 대상은 적어도 2 계열의 전신 요법을 이전에 받았다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 대상은 탁산으로 치료를 이전에 받았다.
본원에 제공된 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 내지 네 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 유방암 감수성 유전자 (BRCA)1 또는 BRCA2에 유해한 생식계열 돌연변이를 갖고, 대상은 폴리 ADP 리보스 폴리머라제(PARP) 억제제로 이전에 치료받았다.
몇몇 관점에서, 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 대상은 편평 비소세포폐암(NSCLC)을 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 대상은 백금-계 요법 후에 진행되거나 또는 재발된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 대상은 백금-계 요법 후 12 개월 이내에 진행되거나 또는 재발된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 대상은 프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1)의 억제제 또는 프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)의 억제제의 요법을 이전에 받았고 여기서 선택적으로 PD-1의 억제제는 니볼루맙이고, 여기서 선택적으로 PD-L1의 억제제는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 및 더발루맙으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
몇몇 관점에서, 본원에 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트(conjugate)를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 대상은 비-편평 NSCLC를 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 대상은 야생-형 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 및 야생-형 역형성 림프종 키나제(ALK)를 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 내지 두 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 내지 세 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 백금-계 요법 후에 진행되거나 또는 재발된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 내지 네 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 백금-계 요법 후 12 개월 이내에 진행되거나 또는 재발된다.
본원에 제공된 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 내지 다섯 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1)의 억제제 또는 프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)의 억제제의 요법을 이전에 받았고, 여기서 선택적으로 PD-1의 억제제는 니볼루맙이고, 여기서 선택적으로 PD-L1의 억제제는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 및 더발루맙으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
몇몇 관점에서, 본원에 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 대상은 국소 진행성 또는 전이성 두경부암을 갖는다.
본원에 제공된 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 백금-계 요법 후에 진행되거나 또는 재발된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 대상은 백금-계 요법 후 6 개월 이내에 진행되거나 또는 재발된다.
본원에 제공된 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 내지 세 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1)의 억제제 또는 프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)의 억제제의 요법을 이전에 받았고, 여기서 선택적으로 PD-1의 억제제는 니볼루맙이고, 여기서 선택적으로 PD-L1의 억제제는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 및 더발루맙으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
몇몇 관점에서, 본원에 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 대상은 위암 또는 식도암을 갖는다.
본원에 제공된 방법의 몇몇 구현예에서, 예를 들어, 그러나 이에 제한되는 것 없이, 본 단락 이전의 첫 번째 단락에 기술된 방법에서, 대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는다.
본원에 제공된 방법의 몇몇 구현예에서, 대상은 백금-계 요법 및/또는 플루오로피리미딘을 포함한 화학요법 후에 진행되거나 재발된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 대상은 백금-계 요법 또는 플루오로피리미딘을 포함한 화학요법 후 6 개월 이내에 진행되거나 재발된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 위암 또는 식도암은 HER2 양성 암이고, 대상은 HER2 지시 요법을 이전에 받았다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H1, SEQ ID NO:10의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H2, SEQ ID NO:11의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H3; SEQ ID NO:12의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L1, SEQ ID NO:13의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L2, 및 SEQ ID NO:14의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L3을 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:16의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H1, SEQ ID NO:17의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H2, SEQ ID NO:18의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H3; SEQ ID NO:19의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L1, SEQ ID NO:20의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L2, 및 SEQ ID NO:21의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L3을 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체는 SEQ ID NO:7의 20번째 아미노산(글루탐산) 내지 466번째 아미노산(리신) 범위의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 SEQ ID NO:8의 23번째 아미노산(아스파르트산) 내지 236번째 아미노산(시스테인) 범위의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항원 결합 단편은 Fab, F(ab')2, Fv 또는 scFv 단편이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체는 완전 인간 항체(fully human antibody)이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 재조합으로 생성되는 것이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 다음의 구조를 갖고:
Figure pct00001
여기서 L-은 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 나타내고 p는 1 내지 10이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, p는 2 내지 8이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, p는 3 내지 5이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 링커를 통해 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 각 유닛에 연결되는 것이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 링커는 효소-절단가능한 링커이고, 링커는 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 황 원자와 결합을 형성한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 링커는 -Aa-Ww-Yy-의 화학식을 갖고; 여기서 -A-는 스트레처 유닛이고, a는 0 또는 1이고; -W-는 아미노산 유닛이고, w는 0 내지 12 범위의 정수이며; -Y-는 스페이서 유닛이고, y는 0, 1 또는 2이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 스트레처 유닛은 하기 화학식 (1)의 구조를 가지며; 아미노산 유닛은 발린 시트룰린이고; 스페이서 유닛은 하기 화학식 (2)의 구조를 포함하는 PAB 기이다:
Figure pct00002
화학식 (1)
Figure pct00003
화학식 (2).
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 스트레처 유닛은 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 황 원자와 결합을 형성하고; 스페이서 유닛은 카바메이트 기를 통해 MMAE에 연결된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 항체 또는 그의 항원 결합 단편당 1 내지 10 유닛의 MMAE를 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 항체 또는 그의 항원 결합 단편당 2 내지 8 유닛의 MMAE를 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 항체 또는 그의 항원 결합 단편당 3 내지 5 유닛의 MMAE를 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 약제학적 조성물로 제형화되고, 여기서 약제학적 조성물은 L-히스티딘, 폴리소르베이트-20(TWEEN-20), 및 트레할로스 이수화물 및 수크로스 중 적어도 하나를 포함하는 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 1 내지 20 mg/mL, 5 내지 15 mg/mL, 8 내지 12 mg/mL의 농도로 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 약 10 mg/mL의 농도이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, L-히스티딘은 5 내지 50mM, 10 내지 40mM, 15 내지 35mM, 15 내지 30mM, 또는 15 내지 25mM의 범위로 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, L-히스티딘은 약 20mM으로 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 0.001 내지 0.1%(v/v), 0.0025 내지 0.075%(v/v), 0.005 내지 0.05%(v/v), 또는 0.01 내지 0.03%(v/v)의 범위 내이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.02%(v/v)이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 트레할로스 이수화물을 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 트레할로스 이수화물은 1 내지 20%(w/v), 2 내지 15%(w/v), 3 내지 10%(w/v) 또는 4 내지 6%(w/v)의 범위로 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 트레할로스 이수화물은 약 5.5%(w/v)로 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 트레할로스 이수화물은 50mM 내지 300mM, 75mM 내지 250mM, 100mM 내지 200mM, 또는 130mM 내지 150mM의 범위로 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 트레할로스 이수화물은 약 146 mM로 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 수크로스를 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 수크로스는 1 내지 20%(w/v), 2 내지 15%(w/v), 3 내지 10%(w/v), 또는 4 내지 6%(w/v)의 범위 내에 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 수크로스는 약 5.5%(w/v)로 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 수크로스는 50mM 내지 300mM, 75mM 내지 250mM, 100mM 내지 200mM, 또는 130mM 내지 150mM의 범위로 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 수크로스는 약 146mM으로 존재한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 5.5 내지 6.5 또는 5.7 내지 6.3 범위의 pH를 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 6.0의 pH를 갖는다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, pH는 실온, 15℃ 내지 27℃, 약 4℃, 또는 약 25℃에서 취해진다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 염산(HCl) 또는 숙신산을 포함한다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5.5%(w/v) 트레할로스 이수화물, 및 HCl을 포함하고; pH는 25℃에서 약 6.0이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5.5%(w/v) 트레할로스 이수화물, 및 숙신산을 포함하고; pH는 25℃에서 약 6.0이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5.5%(w/v) 수크로스, 및 HCl을 포함하고; pH는 25℃에서 약 6.0이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5.5%(w/v) 수크로스, 및 숙신산을 포함하고; pH는 25℃에서 약 6.0이다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 대상의 체중의 1 내지 10 mg/kg, 대상의 체중의 1 내지 5 mg/kg, 대상의 체중의 1 내지 2.5 mg/kg, 또는 대상의 체중의 1 내지 1.25 mg/kg의 용량으로 투여된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 대상의 체중의 약 1 mg/kg의 용량으로 투여된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 대상의 체중의 약 1.25 mg/kg의 용량으로 투여된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 3주 주기마다 2회 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 매 3주 주기의 1일 및 8일에 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 4주 주기마다 3회 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트는 매 4주 주기의 1일, 8일, 및 15일에 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여된다.
4. 도면의 간단한 설명
도 1a-e는 191P4D12 단백질(도 1a)의 뉴클레오티드 및 아미노산 서열 Ha22-2(2.4)6.1의 중쇄(도 1b) 및 경쇄(도 1c)의 뉴클레오티드 및 아미노산 서열, 및 Ha22-2(2.4)6.1의 중쇄(도 1d) 및 경쇄(도 1e)의 아미노산 서열을 도시한다.
도 2는 SCID 마우스에서 피하 확립된 인간 폐암 이종이식편 AG-L4에서 Ha22-2(2,4)6.1-vcMMAE의 효능을 도시한다. 결과는 Ha22-2(2,4)6.1-vcMMAE를 사용한 처리가 처리된 대조군 및 처리되지 않은 대조군 둘 다에 비해 누드 마우스에 피하 이식된 AG-L4 폐암 이종이식편의 성장을 유의하게 억제함을 보여준다.
도 3은 SCID 마우스에서 피하 확립된 인간 유방암 이종이식편 BT-483에서 Ha22-2(2,4)6.1-vcMMAE의 효능을 도시한다. 결과는 Ha22-2(2,4)6.1-vcMMAE를 사용한 처리가 처리 및 비처리된 대조군 ADC와 비교하여 SCID 마우스에 피하 이식된 BT-483 유방 종양 이종이식편의 성장을 유의하게 억제함을 보여준다.
도 4a-h. IHC에 의한 암 환자 표본에서 191P4D12 단백질 검출. 도 4a-b는 유방암 표본을 나타낸다. 도 4c-d는 폐암 표본을 나타낸다. 도 4e-f는 식도암 표본을 나타낸다. 도 4g-h는 두경부암 표본을 나타낸다.
본 개시를 더 설명하기에 앞서, 본 개시는 여기에서 설명되는 특정 구현예에 제한되지 않음이 이해되어야 하고, 여기에서 사용되는 용어는 특정 구현예만을 설명하기 위한 것이며, 제한하려는 의도가 아님이 또한 이해되어야 한다.
여기에서 기술되거나 또는 참조되는 기술 및 절차는 예를 들어, 하기에 기술된 널리 사용되는 방법론과 같이, 당업자에 의해 기존의 방법론을 사용하여 일반적으로 잘 이해되거나 및/또는 일상적으로 사용되는 것들을 포함한다: Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3d ed. 2001); Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel et al. eds., 2003); Therapeutic Monoclonal Antibodies: From Bench to Clinic (An ed. 2009); Monoclonal Antibodies: Methods and Protocols (Albitar ed. 2010); 및 Antibody Engineering Vols 1 and 2 (Kontermann and Dubel eds., 2d ed. 2010).
본원에서 달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 기술 및 과학 용어는 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 의미를 갖는다. 본 명세서를 해석할 목적으로, 용어에 대한 다음 설명이 적용될 것이며, 적절할 때마다 단수로 사용된 용어는 복수도 포함할 것이며 그 반대의 경우도 마찬가지이다. 명시된 용어에 대한 설명이 본원에 참조로 통합된 임의의 문서와 충돌하는 경우, 아래에 명시된 용어의 설명이 우선한다..
용어 "항체", "면역글로불린" 또는 "Ig"는 본원에서 상호교환가능하게 사용되며, 가장 넓은 의미로 사용되며 특히 예를 들어 하기에 기술하는 바와 같은, 모노클로날 항체(작용제, 길항제, 중화 항체, 전장 또는 온전한 모노클로날 항체), 폴리에피토프 또는 모노에피토프 특이성을 갖는 항체 조성물, 폴리클로날 또는 1가 항체, 다가 항체, 적어도 2개의 온전한 항체로부터 형성되는, 다중특이적 항체(예컨대, 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 이중특이적 항체), 단일 사슬 항체, 및 이의 단편을 커버한다. 항체는 인간, 인간화, 키메라 및/또는 친화성 성숙된 항체일 수 있고, 예를 들어 마우스 및 토끼 등과 같은 다른 종의 항체일 수 있다. 용어 "항체"는 특정 분자 항원에 결합할 수 있고 2개의 동일한 폴리펩티드 사슬 쌍으로 구성되는 폴리펩티드의 면역글로불린 클래스 내의 B 세포의 폴리펩타이드 생성물을 포함하는 것으로 의도되며, 여기서 각 쌍은 하나의 중쇄(약 50-70 kDa) 및 하나의 경쇄(약 25 kDa)를 포함하고, 각 사슬의 각 아미노-말단 부분은 약 100 내지 약 130개 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함하고, 각 사슬의 각 카르복시-말단 부분은 불변 영역을 포함한다. 예컨대, Antibody Engineering (Borrebaeck ed., 2d ed. 1995); 및 Kuby, Immunology (3d ed. 1997) 참조. 특정 구현예에서, 특정 분자 항원은 폴리펩티드 또는 에피토프를 포함하는 본원에 제공된 항체에 의해 결합될 수 있다. 항체는 또한 합성 항체, 재조합적으로 생성된 항체, 낙타화된(camelized) 항체, 인트라바디, 항-이디오타입(항-Id)) 항체, 및 상기 중 임의의 것의 기능적 단편(예컨대, 항원-결합 단편)을 포함하지만 이에 제한되지 않으며, 이는 단편이 유래된 항체의 결합 활성의 일부 또는 전부를 보유하는 항체 중쇄 또는 경쇄 폴리펩티드의 일부를 지칭한다. 기능적 단편(예컨대 항원-결합 단편)의 비-제한적 예는 단일-사실 Fv(scFv)(예컨대, 단일특이적, 이중특이적 등 포함), Fab 단편, F(ab') 단편, F(ab)2 단편, F(ab')2 단편, 이황화 결합된 Fv(dsFv), Fd 단편, Fv 단편, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디 및 미니바디를 포함한다.특히, 본원에 제공되는 항체는 예를 들어, 항원-결합 도메인 또는 항원에 결합하는 항원-결합 부위를 함유하는 분자(예컨대, 항체의 하나 이상의 CDR)와 같은, 면역글로불린 분자 및 면역글로불린 분자의 면역학적 활성 부분을 포함한다. 이러한 항체 단편은 예를 들어 Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual (1989); Mol. Biology and Biotechnology: A Comprehensive Desk Reference (Myers ed., 1995); Huston et al., 1993, Cell Biophysics 22:189-224; Pluckthun and Skerra, 1989, Meth. Enzymol. 178:497-515; 및 Day, Advanced Immunochemistry (2d ed. 1990)에서 찾을 수 있다. 본원에서 제공되는 항체는 면역글로불린 분자의 임의의 클래스(예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD 및 IgA) 또는 임의의 서브클래스(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, 및 IgA2)일 수 있다. 항체는 작용 항체(agonistic antibodies) 또는 길항 항체(antagonistic antibodies)일 수 있다.
용어 "모노클로날 항체"는 실질적으로 균질한 항체 집단으로부터 수득된 항체를 지칭하며, 즉 집단을 구성하는 개별 항체는 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이를 제외하고는 동일하다. 모노클로날 항체는 단일 항원 부위에 대해 매우 특이적이다. 상이한 결정인자(에피토프)에 대한 상이한 항체를 포함할 수 있는 폴리클로날 항체 제제와 대조적으로, 각 모노클로날 항체는 항원의 단일 결정인자에 대한 것이다.
"항원"은 항체가 선택적으로 결합할 수 있는 구조이다. 표적 항원은 폴리펩티드, 탄수화물, 핵산, 지질, 합텐, 또는 기타 천연 발생 또는 합성 화합물일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 표적 항원은 폴리펩티드이다. 특정 구현예에서, 항원은, 세포와 관련되며(associated with), 예를 들어 암 세포와 같은, 세포 상에 또는 세포 내에 존재한다.
"온전한" 항체는 항원 결합 부위 뿐만 아니라 CL 및 적어도 중쇄 불변 영역, CH1, CH2 및 CH3을 포함하는 항체이다. 불변 영역은 인간 불변 영역 또는 이의 아미노산 서열 변이체를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 온전한 항체는 하나 이상의 이펙터 기능을 갖는다.
용어 "항원 결합 단편", "항원 결합 도메인", "항원 결합 영역" 및 유사한 용어는 항원과 상호작용하고 결합에 부여하는 항원에 대한 그의 특이성 및 친화성을 결합제에 부여하는 아미노산 잔기를 포함하는 항체의 일부를 지칭한다(예컨대, CDR). 본원에 사용된 "항원-결합 단편"은 온전한 항체의 가변 영역 또는 항원-결합과 같은 온전한 항체의 일부를 포함하는 "항체 단편"을 포함한다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')2, 및 Fv 단편; 디아바디와 디-디아바디(예컨대, Holliger et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. 90:6444-48; Lu et al., 2005, J. Biol. Chem. 280:19665-72; Hudson et al., 2003, Nat. Med. 9:129-34; WO 93/11161; 및 U.S. Pat. Nos. 5,837,242 및 6,492,123 참고); 단일 사슬 항체 분자(예를 들어, 미국 특허 번호 4,946,778; 5,260,203; 5,482,858; 및 5,476,786 참조); 이중 가변 도메인 항체(예를 들어, 미국 특허 번호 7,612,181 참조); 단일 가변 도메인 항체(sdAbs)(예를 들어, Woolven et al., 1999, Immunogenetics 50:98-101; 및 Streltsov et al., 2004, Proc Natl Acad Sci USA. 101:12444-49 참조); 및 항체 단편으로부터 형성된 다중특이성 항체를 포함하나 이에 제한되지 않는다.
용어 "결합" 또는 "결합하는"은 예를 들어 복합체를 형성하는 것을 포함하는 분자 간의 상호작용을 지칭한다. 상호작용은 예를 들어 수소 결합, 이온 결합, 소수성 상호작용, 및/또는 반 데르 발스 상호작용을 포함하는 비공유 상호작용일 수 있다. 복합체는 또한 공유 또는 비공유 결합, 상호작용 또는 힘에 의해 함께 유지되는 둘 이상의 분자의 결합을 포함할 수 있다. 항체의 단일 항원 결합 부위와 항원과 같은 표적 분자의 단일 에피토프 사이의 전체 비공유 상호작용의 강도는 해당 에피토프에 대한 항체 또는 기능적 단편의 친화도이다. 1가 항원에 대한 결합 분자(예컨대 항체)의 결합 속도(kon)에 대한 해리 속도(koff)의 비율(koff/kon)은 친화도와 반비례하는 해리 상수 KD이다. KD 값이 낮을수록 항체의 친화도가 높아진다. KD의 값은 항원 및 항체의 복합체에 따라 다르며 kon과 koff 모두에 의존한다. 본원에 제공된 항체에 대한 해리 상수 KD는 본원에 제공된 임의의 방법 또는 당업자에게 널리 공지된 임의의 다른 방법을 사용하여 결정될 수 있다. 한 결합 부위의 친화도가 항체와 항원 간의 상호작용의 진정한 강도를 항상 반영하는 것은 아니다. 다가 항원과 같은 다중 반복 항원 결정기를 함유하는 복합 항원이 다중 결합 부위를 함유하는 항체와 접촉할 때, 한 부위에서 항원과의 항체의 상호작용은 두 번째 부위에서 반응의 확률을 증가시킬 것이다. 다가 항체와 항원 사이의 이러한 다중 상호작용의 강도는 결합력(avidity)이라고 한다.
본원에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합 단편과 관련하여 "~에 결합하는", "~에 특이적으로 결합하는"과 같은 용어 및 유사한 용어는 또한 본원에서 상호교환가능하게 사용되며, 폴리펩티드와 같은 항원에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인의 결합 분자를 지칭한다. 항원에 결합하거나 항원에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항원 결합 단편은 관련된 항원과 교차 반응할 수 있다. 특정 구현예에서, 항원에 결합하거나 특이적으로 결합하는 항체 또는 항원 결합 단편은 다른 항원과 교차 반응하지 않는다. 항원에 결합하거나 또는 특이적으로 결합하는 항체 또는 항원 결합 단편은 예를 들어 면역분석, Octet®, Biacore®, 또는 당업자에게 공지된 기타 기술에 의해 확인될 수 있다. 몇몇 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 방사선면역검정(RIA) 및 효소 결합 면역흡착분석(ELISA)와 같은 실험 기술을 사용하여 결정된 바와 같이 임의의 교차 반응성 항원보다 더 높은 친화도로 항원에 결합할 때, 항원에 결합하거나 또는 특이적으로 결합한다. 일반적으로 특정 또는 선택적 반응은 백그라운드 신호 또는 노이즈의 적어도 2배일 것이고, 백그라운드의 10배 초과일 수 있다. 예컨대, 결합 특이성에 관한 논의는 Fundamental Immunology 332-36(Paul ed., 2d ed. 1989)을 참조. 특정 구현예에서, "비-표적" 단백질에 대한 항체 또는 항원 결합 단편의 결합 정도는 예를 들어 형광 활성화 세포 분류(FACS) 분석 또는 RIA에 의해 결정되는 바와 같이, 특정 표적 항원에 대한 결합 분자 또는 항원 결합 도메인의 결합의 약 10% 미만이다. "특이적 결합", "~에 특이적으로 결합하는" 또는 "~에 특이적인"과 같은 용어는 비특이적 상호작용과 측정 가능하게 상이한 결합을 의미한다. 특이적 결합은 예를 들어, 일반적으로 결합 활성을 갖지 않는 유사한 구조의 분자인 대조 분자의 결합과 비교하여 분자의 결합을 결정함으로써 측정될 수 있다. 예를 들어, 특이적 결합은 표적, 예를 들어 과량의 표지되지 않은 표적과 유사한 대조군 분자와의 경쟁에 의해 결정될 수 있다. 이 경우, 표지된 표적과 프로브의 결합이 과잉의 표지되지 않은 표적에 의해 경쟁적으로 억제되면 특이적 결합이 표시된다. 항원에 결합하는 항체 또는 항원 결합 단편은 결합 분자가 예를 들어 항원을 표적화하는데 진단제로서 유용하도록 충분한 친화도로 항원에 결합할 수 있는 것을 포함한다. 특정 구현예에서, 항원에 결합하는 항체 또는 항원 결합 단편은 1000 nM, 800 nM, 500 nM, 250 nM, 100 nM, 50 nM, 10 nM, 5 nM, 4nM, 3nM, 2nM, 1nM, 0.9nM, 0.8nM, 0.7nM, 0.6nM, 0.5nM, 0.4nM, 0.3nM, 0.2nM 또는 0.1 nM 이하의 해리 상수(KD)를 갖는다. 특정 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 상이한 종으로부터의 항원 중에서(예를 들어, 인간 및 사이노 종 사이) 보존된 항원의 에피토프에 결합한다.
"결합 친화도"는 일반적으로 분자(예를 들어, 항체와 같은 결합 단백질)의 단일 결합 부위와 그의 결합 파트너(예를 들어, 항원) 사이의 비공유 상호작용의 총계의 강도를 지칭한다. 달리 나타내지 않는 한, 본원에 사용된 "결합 친화도"는 결합 쌍의 구성원(예를 들어, 항체 및 항원) 간의 1:1 상호작용을 반영하는 고유 결합 친화도를 지칭한다. 결합 파트너 Y에 대한 결합 분자 X의 친화도는 일반적으로 해리 상수(KD)로 나타내질 수 있다. 친화도는 본 명세서에 기재된 것을 포함하여 당업계에 공지된 통상적인 방법에 의해 측정될 수 있다. 저-친화성 항체는 일반적으로 항원에 천천히 결합하고 쉽게 해리되는 경향이 있는 반면, 고-친화성 항체는 일반적으로 항원에 더 빨리 결합하고 더 오래 결합된 상태를 유지하는 경향이 있다. 결합 친화도를 측정하는 다양한 방법이 당업계에 공지되어 있으며, 이들 중 임의의 것이 본 개시내용의 목적을 위해 사용될 수 있다.특정 예시적인 구현예는 다음을 포함한다. 하나의 구현예에서, "KD" 또는 "KD 값"은 예를 들어 결합 어세이와 같은, 당업계에 공지된 어세이에 의해, 측정될 수 있다. KD는 예를 들어 관심 항체 및 그의 항원의 Fab 버전으로 수행되는, RIA에서 측정될 수 있다(Chen et al., 1999, J. Mol Biol 293:865-81). KD 또는 KD 값은 또한 예를 들어 Octet® QK384 시스템을 사용하는 Octet®에 의한, 또는 예를 들어 Biacore®TM-2000 또는 Biacore®TM-3000을 사용하는 Biacore®에 의한 생물층 간섭계(BLI) 또는 표면 플라즈몬 공명(SPR) 어세이를 사용하여 측정될 수 있다. "on-rate" 또는 "결합 속도" 또는 "결합 속도" 또는 "kon"은 또한 예를 들어 Octet®QK384, Biacore®TM-2000 또는 Biacore®TM-3000 시스템을 사용하는, 위에서 설명한 것과 동일한 생물층 간섭계(BLI) 또는 표면 플라즈몬 공명(SPR) 기술로 결정될 수 있다.
특정 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 "키메라" 서열을 포함할 수 있고, 여기서 중쇄 및/또는 경쇄의 일부는 특정 종에서 유래되거나 특정 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체의 상응하는 서열과 동일하거나 상동성이고, 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한, 나머지 사슬(들)은 다른 종에서 유래되거나 다른 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체, 및 그러한 항체의 파편의 상응하는 서열과 동일하거나 상동성이다(미국 특허 번호 4,816,567; 및 Morrison et al., 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-55 참조).
특정 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 인간 면역글로불린(예를 들어, 수용자 항체)을 포함하는 키메라 항체인 비인간(예를 들어, 뮤린) 항체의 "인간화" 형태의 일부를 포함할 수 있고, 여기서 천연 CDR 잔기는 마우스, 랫, 토끼, 또는 원하는 특이성, 친화성, 및 능력을 포함하는비인간 영장류와 같은 비인간 종의 상응하는 CDR의 잔기(예컨대 공여자 항체)로 교체된다. 일부 경우에, 인간 면역글로불린의 하나 이상의 FR 영역 잔기는 상응하는 비인간 잔기로 교체된다. 또한, 인간화 항체는 수용자 항체 또는 공여자 항체에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이러한 변형은 항체 성능을 더욱 개선하기 위해 수행된다. 인간화 항체 중쇄 또는 경쇄는 적어도 하나 이상의 가변 영역을 실질적으로 모두 포함할 수 있으며, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 CDR은 비인간 면역글로불린의 CDR에 상응하고 모든 또는 실질적으로 모든 FR은 인간 면역글로불린 서열의 CDR이다. 특정 구현예에서, 인간화 항체는 면역글로불린 불변 영역(Fc)의 적어도 일부, 전형적으로 인간 면역글로불린의 불변 영역을 포함할 것이다. 더 자세한 내용은 Jones et al., 1986, Nature 321:522-25; Riechmann et al., 1988, Nature 332:323-29; Presta, 1992, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-96; Carter et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:4285-89; U.S. Pat. Nos: 6,800,738; 6,719,971; 6,639,055; 6,407,213; 및 6,054,297를 참조.
특정 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 "완전한 인간 항체" 또는 "인간 항체"의 일부를 포함할 수 있으며, 여기서 용어는 본원에서 상호교환가능하게 사용되고 인간 가변 영역 및, 예를 들어 인간 불변 영역을 포함하는 항체를 지칭한다. 특정 구현예에서, 상기 용어는 인간 기원의 가변 영역 및 불변 영역을 포함하는 항체를 지칭한다. "완전 인간" 항체는, 특정 구현예에서, 폴리펩티드와 결합하고, 인간 생식계열 면역글로불린 핵산 서열의 자연 발생 체세포 변이체인 핵산 서열에 의해 코딩되는 항체를 또한 포함할 수 있다. 용어 "완전한 인간 항체"는 Kabat et al.에 서술된 바와 같이 인간 생식계열 면역글로불린 서열에 상응하는 가변 및 불변 영역을 포함하는 항체를 포함한다(Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242 참조). "인간 항체"는 인간에 의해 생성되고 및/또는 인간 항체를 제조하기 위한 임의의 기술을 사용하여 제조된 항체의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 갖는 것이다. 인간 항체의 이러한 정의는 비인간 항원 결합 잔기를 포함하는 인간화 항체를 구체적으로 배제한다. 인간 항체는 파지-디스플레이 라이브러리(Hoogenboom and Winter, 1991, J. Mol. Biol. 227:381; Marks et al., 1991, J. Mol. Biol. 222:581) 및 이스트 디스플레이 라이브러리(Chao et al., 2006, Nature Protocols 1: 755-68)를 포함하는 공지의 다양한 기술을 이용하여 생성될 수 있다. 인간 모노클로날 항체의 제조를 위해 또한 이용가능한 방법은 Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy 77 (1985); Boerner et al., 1991, J. Immunol. 147(1):86-95; 및 van Dijk and van de Winkel, 2001, Curr. Opin. Pharmacol. 5: 368-74에 기술된다. 인간 항체는 항원 공격에 반응하여 이러한 항체를 생산하도록 변형되었지만 내인성 유전자좌(endogenous loci)가 비활성화된 형질전환 동물(예: 마우스)에 항원을 투여하여 제조될 수 있다(예컨대 Jakobovits, 1995, Curr. Opin. Biotechnol. 6(5):561-66; Bruggemann and Taussing, 1997, Curr. Opin. Biotechnol. 8(4):455-58; 및 XENOMOUSETM technology에 관한 U.S. 특허 제6,075,181 및 6,150,584 참조). 또한 예를 들어, 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 인간 항체에 관한, Li et al., 2006, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103:3557-62을 참조.
특정 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 "재조합 인간 항체"의 일부를 포함할 수 있고, 여기서 상기 어구는 숙주 세포로 형질감염된 재조합 발현 벡터를 사용하여 발현되는 항체, 재조합체로부터 분리된 항체, 조합 인간 항체 라이브러리, 인간 면역글로불린 유전자에 대한 트랜스제닉(transgenic) 및/또는 트랜스염색체(transchromosomal)인 동물(예컨대, 마우스 또는 소))부터 분리된 항체(예컨대, Taylor, L. D. et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295 참조), 또는 인간 면역글로불린 유전자 서열을 다른 DNA 서열에 스플라이싱하는 것을 포함하는 임의의 다른 수단에 의해 제조, 발현, 생성, 또는 분리되는 항체와 같은 재조합 수단에 의해 제조, 발현, 생성, 또는 분리되는 인간 항체를 포함한다. 이러한 재조합 인간 항체는 인간 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래되는 가변 및 불변 영역을 가질 수 있다(Kabat, E. A. et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242 참고). 특정 구현예에서, 그러나, 이러한 재조합 인간 항체는 시험관내 돌연변이 유발에 적용되고(즉, 인간 Ig 서열에 대한 동물 트랜스제닉이 사용되는 경우, 생체내 체소포 돌연변이 유발), 따라서 재조합 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은 인간 생식계열 VH 및 VL 서열로부터 유래되고 관련되지만, 생체 내 인간 항체 생식계열 레퍼토리 내에 자연적으로 존재하지 않을 수 있는 서열이다.
특정 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 "모노클로날 항체"의 일부를 포함할 수 있고, 여기서 본원에서 사용된 바와 같은 상기 용어는 실질적으로 균질한 항체의 집단으로부터 수득된 항체를 지칭하며, 예컨대 집단을 구성하는 개별 항체는 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이를 제외하고는 동일하며, 각 모노클로날 항체는 일반적으로 항원의 단일 에피토프를 인식할 것이다. 특정 구현예에서, 본원에서 사용되는 "모노클로날 항체"는 단일 하이브리도마 또는 다른 세포에서 생성되는 항체이다. 용어 "모노클로날"은 항체를 제조하기 위한 임의의 특정 방법으로 제한되지 않는다. 예를 들어, 본 개시에 유용한 모노클로날 항체는 Kohler et al., 1975, Nature 256:495에 처음 기술된 하이브리도마 방법론에 의해 제조될 수 있거나, 또는 박테리아 또는 진핵 동물 또는 식물 세포에서 재조합 DNA 방법을 사용하여 제조될 수 있다(예컨대, U.S. Pat. No. 4,816,567 참조). "모노클로날 항체"는 또한 예를 들어, Clackson et al., 1991, Nature 352:624-28 및 Marks et al., 1991, J. Mol. Biol. 222:581-97에 기술된 기술을 이용하여, 파지 항체 라이브러리에서 분리될 수 있다. 클론 세포 라인 및 이에 의해 발현되는 모노클로날 항체의 제조를 위한 기타 방법은 당업계에 잘 알려져 있다. 예컨대, Short Protocols in Molecular Biology (Ausubel et al. eds., 5th ed. 2002) 참조.
전형적인 4-사슬 항체 유닛은 2개의 동일한 경쇄(L) 및 2개의 동일한 중쇄(H)로 구성된 이종사량체 당단백질이다. IgG의 경우, 4-사슬 유닛은 일반적으로 약 150,000 달톤이다.각 L 사슬은 하나의 공유 이황화 결합에 의해 H 사슬에 연결되어 있는 반면, 두 개의 H 사슬은 H 사슬 아이소타입에 따라 하나 이상의 이황화 결합에 의해 서로 연결되어 있다. 각 H 및 L 사슬은 규칙적으로 간격을 둔 사슬 내 이황화 브릿지를 갖는다. 각 H 사슬은 N-말단에 가변 도메인(VH)과 α 및 γ 사슬 각각에 대한 3개의 불변 도메인(CH) 및 μ 및 ε 아이소타입에 대한 4개의 CH 도메인을 갖는다. 각 L 사슬은 N-말단에 가변 도메인(VL) 및 다른 쪽 끝에 불변 도메인(CL)을 갖는다.VL은 VH와 정렬되고, CL은 중쇄(CH1)의 첫 번째 불변 도메인과 정렬된다. 특정 아미노산 잔기는 경쇄 및 중쇄 가변 도메인 사이의 계면을 형성하는 것으로 믿어진다. VH와 VL의 쌍은 함께 단일 항원 결합 부위를 형성한다. 상이한 클래스의 항체의 구조 및 특성에 대해서는, 예를 들어, Basic and Clinical Immunology 71 (Stites et al. eds., 8th ed. 1994); 및 Immunobiology (Janeway et al. eds., 5th ed. 2001)를 참조.
용어 "Fab" 또는 "Fab 영역"은 항원에 결합하는 항체 영역을 지칭한다. 통상적인 IgG는 일반적으로 2개의 Fab 영역을 포함하며, 각각은 Y형 IgG 구조의 2개의 암 중 하나에 위치한다. 각각의 Fab 영역은 전형적으로 중쇄 및 경쇄 각각의 하나의 가변 영역 및 하나의 불변 영역으로 구성된다. 보다 구체적으로, Fab 영역에서 중쇄의 가변영역 및 불변영역은 VH 및 CH1 영역이고, Fab 영역에서 경쇄의 가변영역 및 불변영역은 VL 및 CL 영역이다. Fab 영역에서 VH, CH1, VL 및 CL은 다양한 방식으로 배열되어, 본 개시에 따른 항원 결합 능력을 부여할 수 있다. 예를 들어, 기존의 IgG의 Fab 영역과 유사하게, VH 및 CH1 영역은 하나의 폴리펩티드에 있을 수 있고, VL 및 CL 영역은 별도의 폴리펩티드에 있을 수 있다. 대안적으로, VH, CH1, VL 및 CL 영역은 모두 동일한 폴리펩타이드 상에 있을 수 있고 하기 섹션에 더 상세히 기재된 바와 같이 상이한 순서로 배향될 수 있다.
용어 "가변 영역", "가변 도메인", "V 영역" 또는 "V 도메인"은 일반적으로 경쇄 또는 중쇄의 아미노-말단에 위치되며,중쇄에서 약 120 내지 130개 아미노산 및 경쇄에서 약 100 내지 110개 아미노산의 길이를 가지는, 항체의 경쇄 또는 중쇄의 일부를 지칭한다. 중쇄의 가변 영역은 "VH"로 지칭될 수 있다. 경쇄의 가변 영역은 "VL"로 지칭될 수 있다. 용어 "가변"은 가변 영역의 특정 세그먼트가 항체 중에서 서열이 광범위하게 상이하다는 사실을 의미한다. V 영역은 항원 결합을 매개하고 특정 항원에 대한 특정 항체의 특이성을 정의한다. 그러나 가변성은 가변 영역의 110개 아미노산 범위에 걸쳐 고르게 분포되지 않는다. 대신, V 영역은 각각 약 9-12개의 아미노산 길이인 "초가변 영역"으로 불리는 더 큰 가변성(예컨대 극도의 가변성)의 더 짧은 영역으로 분리되는 약 15-30개의 아미노산의 프레임워크 영역(FR)으로 불리는 덜 가변적(예컨대 상대적으로 불변) 스트레치로 구성된다..중쇄 및 경쇄의 가변 영역은 각각 4개의 FR을 포함하며, 주로 β 시트 구성(configuration)을 채택하고, 3개의 초가변 영역으로 연결되어 루프 연결을 형성하고 일부 경우에는 β 시트 구조의 일부를 형성한다. 각 사슬의 초가변 영역은 FR에 의해 밀접하게 함께 유지되고, 다른 사슬의 초가변 영역과 함께, 항체의 항원-결합 부위 형성에 기여한다(예컨대, Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (5th ed. 1991) 참조). 불변 영역은 항체가 항원에 결합하는데 직접적으로 관여하지 않지만, 항체 의존성 세포독성(ADCC) 및 보체 의존성 세포독성(CDC)에 대한 항체의 참여와 같은 다양한 이펙터 기능을 나타낸다. 가변 영역은 상이한 항체 사이에서 서열이 광범위하게 상이하다. 특정 구현예에서, 가변 영역은 인간 가변 영역이다.
용어 "Kabat에 따른 가변 영역 잔기 넘버링" 또는 "Kabat에서와 같은 아미노산 위치 넘버링" 및 이의 변형은 상기 Kabat et al.의 항체 모음(compiliation)의 중쇄 가변 영역 또는 경쇄 가변 영역에 사용되는 넘버링 시스템을 지칭한다. 이러한 넘버링 시스템을 사용하여, 실제 선형 아미노산 서열은 가변 도메인의 FR 또는 CDR의 단축 또는 삽입에 상응하는 더 적거나 추가의 아미노산을 함유할 수 있다. 예를 들어, 중쇄 가변 도메인은 잔기 52 뒤에 단일 아미노산 삽입체(Kabat에 따른 잔기 52a) 및 잔기 82 뒤에 3개의 삽입된 잔기(예를 들어, Kabat에 따른 잔기 82a, 82b 및 82c 등)를 포함할 수 있다. 잔기의 Kabat 넘버링은 "표준" Kabat 넘버링된 서열을 갖는 항체 서열의 상동성 영역에서의 정렬에 의해 주어진 항체에 대해 결정될 수 있다. Kabat 넘버링 시스템은 일반적으로 가변 도메인의 잔기(대략 경쇄의 잔기 1-107 및 중쇄의 잔기 1-113)를 언급할 때 사용된다(예컨대, 상기 Kabat et al. 참조). "EU 넘버링 시스템" 또는 "EU 인덱스"는 일반적으로 면역글로불린 중쇄 불변 영역의 잔기를 언급할 때 사용된다(예컨대, 상기 Kabat et al.에 보고된 EU 인덱스). "Kabat에서와 같은 EU 인덱스"는 인간 IgG 1 EU 항체의 잔기 넘버링을 지칭한다. 다른 넘버링 시스템은 예를 들어 AbM, Chothia, Contact, IMGT 및 AHon에 의해 설명되었습니다.
항체와 관련하여 사용될 때, 용어 "중쇄"는 약 50-70 kDa의 폴리펩티드 사슬을 지칭하며, 여기서 아미노-말단 부분은 약 120 내지 130개 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함하고, 카르복시 말단 부분은 불변 영역을 포함한다. 불변 영역은 중쇄 불변 영역의 아미노산 서열에 기초하여, 알파(α), 델타(δ), 엡실론(ε), 감마(γ) 및 뮤(μ)로 지칭되는 5가지 별개의 타입 중 하나일 수 있다(예컨대, 아이소타입). 별개의 중쇄는 크기가 상이하다: α, δ 및 γ는 대략 450개의 아미노산을 함유하는 반면, μ 및 ε은 대략 550개의 아미노산을 함유한다. 경쇄와 결합될 때, 이러한 별개의 타입의 중쇄는 각각 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM의 5가지 잘 알려진 클래스(예컨대, 아이소타입)의 항체를 생성하며, 4개의 IgG의 서브 클래스, 즉 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함한다.
항체와 관련하여 사용될 때, 용어 "경쇄"는 약 25kDa의 폴리펩티드 사슬을 지칭하며, 여기서 아미노-말단 부분은 약 100 내지 약 110개 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함하고, 카복시-말단 부분은 불변 영역을 포함한다. 경쇄의 대략적인 길이는 211 내지 217개의 아미노산이다. 불변 도메인의 아미노산 서열에 기초하여, 카파(κ) 또는 람다(λ)라고 하는 두 가지 타입이 있다.
본원에 사용된 용어 "초가변 영역", "HVR", "상보성 결정 영역" 및 "CDR"은 상호교환적으로 사용된다. "CDR"은 면역글로불린(Ig 또는 항체) VH β-시트 프레임워크의 비-프레임워크 영역 내의 3개의 초가변 영역(H1, H2 또는 H3) 중 하나 또는 항체 VL β-시트 프레임워크의 비-프레임워크 영역 내의 3개의 초가변 영역(L1, L2 또는 L3) 중 하나를 지칭힌다. 따라서, CDR은 프레임워크 영역 서열 내에 산재된 가변 영역 서열이다.
CDR 영역은 당업자에게 잘 알려져 있고 잘 알려진 넘버링 시스템에 의해 정의되어왔다. 예를 들어, Kabat 상보성 결정 영역(CDR)은 서열 가변성을 기반으로 하며 가장 일반적으로 사용된다(예를 들어, 상기 Kabat et al. 참조). Chothia는 대신 구조적 루프의 위치를 나타낸다(예를 들어, Chothia and Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196:901-17 참조). Kabat 넘버링 규칙을 사용하여 넘버링할 때, Chothia CDR-H1 루프의 끝은 루프의 길이에 따라 H32와 H34 사이에서 달라진다(이는 Kabat 넘버링 체계가 H35A와 H35B에 삽입을 배치하기 때문이며; 35A와 35B가 둘 다 존재하지 않는 경우, 루프는 32에서 끝나며; 35A만 존재하는 경우, 루프는 33에서 끝나고; 35A와 35B가 모두 존재하는 경우, 루프는 34에서 끝난다). AbM 초가변 영역은 Kabat CDR과 Chothia 구조적 루프 간의 절충안을 나타내며, Oxford Molecular의 AbM 항체 모델링 소프트웨어에서 사용된다(예를 들어, Antibody Engineering Vol. 2(Kontermann and Dubel eds., 2d ed. 2010) 참조). "접촉" 초가변 영역은 사용 가능한 복잡한 결정 구조의 분석을 기반으로 한다. 개발되어 널리 채택된 또 다른 보편적인 넘버링 시스템은 ImMunoGeneTics(IMGT) Information System®이다(Lafranc et al., 2003, Dev. Comp. Immunol. 27(1):55-77). IMGT는 인간 및 기타 척추동물의 면역글로불린(IG), T-세포 수용체(TCR) 및 주요 조직적합성 복합체(MHC)를 전문으로 하는 통합 정보 시스템이다. 여기서, CDR은 아미노산 서열 및 경쇄 또는 중쇄 내 위치 모두의 관점에서 언급된다. 면역글로불린 가변 도메인의 구조 내 CDR의 "위치"가 종 사이에 보존되고 루프라고 하는 구조에 존재하기 때문에, 구조적 특징에 따라 가변 도메인 서열을 정렬하는 넘버링 시스템을 사용하여, CDR 및 프레임워크 잔기는 쉽게 식별될 수 있다. 상기 정보는 한 종의 면역글로불린에서 CDR 잔기를 일반적으로 인간 항체의, 수용체 프레임워크로 이식하고 대체하는데 사용될 수 있다. 추가 넘버링 시스템(AHon)은 Honegger and Pluckthun, 2001, J. Mol. Biol. 309: 657-70에 의해 개발되었다. 예를 들어, Kabat 넘버링 및 IMGT 고유 넘버링 시스템을 포함하는 넘버링 시스템 간의 대응은 당업자에게 잘 알려져 있다(예를 들어, Kabat, supra; Chothia and Lesk, supra; Martin, supra; Lefranc et al., supra 참조). 상기 초가변 영역 또는 CDR 각각으로부터의 잔기는 하기 표 1에 기재되어 있다.
Kabat AbM Chothia Contact IMGT
CDR L1 L24--L34 L24--L34 L24--L34 L30--L36 L27--L38
CDR L2 L50--L56 L50--L56 L50--L56 L46--L55 L56--L65
CDR L3 L89--L97 L89--L97 L89--L97 L89--L96 L105-L117
CDR H1 H31--H35B H26--H35B H26--H32..34 H30--H35B H27--H38
(Kabat Numbering)
CDR H1 H31--H35 H26--H35 H26--H32 H30--H35
(Chothia Numbering)
CDR H2 H50--H65 H50--H58 H52--H56 H47--H58 H56--H65
CDR H3 H95--H102 H95--H102 H95--H102 H93--H101 H105-H117
주어진 CDR의 경계는 식별에 사용되는 체계에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 달리 명시되지 않는 한, 주어진 항체 또는 예를 들어 가변 영역과 같은, 항체의 영역의 용어 "CDR" 및 "상보적 결정 영역", 뿐만 아니라 항체 또는 이의 영역의 개별 CDR(예: "CDR-H1, CDR-H2)은 상기 본원에 기재된 임의의 공지된 체계에 의해 정의된 상보적 결정 영역을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 어떤 경우에는, Kabat, Chothia 또는 Contact 방법에 의해 정의된 CDR과 같은 특정 CDR 또는 CDRs의 식별을 위한 체계가 지정된다. 다른 경우에는 CDR의 특정 아미노산 서열이 제공됩니다.
초가변 영역은 다음과 같이 "연장된 초가변 영역"을 포함할 수 있다: VL의 24-36 또는 24-34(L1), 46-56 또는 50-56(L2), 89-97 또는 89-96(L3), 및 VH의 26-35 또는 26-35A(H1), 50-65 또는 49-65(H2) 및 93-102, 94-102 또는 95-102(H3).
용어 "불변 영역" 또는 "불변 도메인"은 항원에 대한 항체의 결합에 직접 관여하지 않지만, Fc 수용체와의 상호작용과 같은 다양한 이펙터 기능을 나타내는, 경쇄 및 중쇄의 카르복시 말단 부분을 지칭한다. 상기 용어는 항원 결합 부위를 함유하는 가변 영역인 면역글로불린의 다른 부분에 비해 더 보존된 아미노산 서열을 포함하는 면역글로불린 분자의 부분을 지칭한다. 불변 영역은 중쇄의 CH1, CH2 및 CH3 영역과 경쇄의 CL 영역을 포함할 수 있다.
용어 "프레임워크" 또는 "FR"은 CDR에 인접하는 가변 영역 잔기를 지칭한다. FR 잔기는, 예를 들어 키메라, 인간화, 인간, 도메인 항체, 디아바디, 선형 항체, 및 이중특이성 항체에 존재한다. FR 잔기는 초가변 영역 잔기 또는 CDR 잔기 이외의 가변 도메인 잔기이다.
본원에서 용어 "Fc 영역"은 예를 들어 천연 서열 Fc 영역, 재조합 Fc 영역 및 변이체 Fc 영역을 포함하는 면역글로불린 중쇄의 C-말단 영역을 정의하는데 사용된다. 면역글로불린 중쇄의 Fc 영역의 경계는 다양할 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 종종 위치 Cys226 또는 Pro230의 아미노산 잔기에서 그의 카르복실 말단까지 스트레치되도록 정의된다. Fc 영역의 C-말단 라이신(EU 넘버링 시스템에 따른 잔기 447)은 예를 들어, 항체의 생산 또는 정제 동안, 또는 항체의 중쇄를 코딩하는 핵산을 재조합적으로 엔지니어링함으로써 제거될 수 있다. 따라서, 온전한 항체의 조성물은 모든 K447 잔기가 제거된 항체 집단, 어떤 K447 잔기도 제거되지 않은 항체 집단, 및 K447 잔기가 있거나 없는 항체의 혼합물을 포함하는 항체 집단을 포함할 수 있다. "기능적 Fc 영역"은 천연 서열 Fc 영역의 "이펙터 기능"을 갖는다. 예시적인 "이펙터 기능"은 C1q 결합; CDC; Fc 수용체 결합; ADCC; 식균 작용; 세포 표면 수용체(예컨대, B 세포 수용체)의 하향조절 등은 포함한다. 이러한 이펙터 기능은 일반적으로 Fc 영역이 결합 영역 또는 결합 도메인(예를 들어, 항체 가변 영역 또는 도메인)과 조합될 것을 요구하고, 당업자에게 공지된 다양한 어세이를 사용하여 평가될 수 있다. "변이체 Fc 영역"은 적어도 하나의 아미노산 변형(예를 들어, 치환, 부가 또는 결실)으로 인해 천연 서열 Fc 영역과 상이한 아미노산 서열을 포함한다. 특정 구현예에서, 변이체 Fc 영역은, 예를 들어 천연 서열 Fc 영역 또는 모 폴리펩티드의 Fc 영역에서 약 1 내지 약 10개의 아미노산 치환, 또는 약 1 내지 약 5개의 아미노산 치환과 같은, 천연 서열 Fc 영역 또는 모 폴리펩티드의 Fc 영역과 비교하여 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는다. 본원의 변이체 Fc 영역은 천연 서열 Fc 영역 및/또는 모 폴리펩티드의 Fc 영역과 적어도 약 80%의 상동성, 또는 적어도 약 90%의 상동성, 예를 들어 적어도 약 95%의 상동성을 가질 수 있다.
본원에 사용된 "에피토프"는 당업계의 용어이고, 결합 분자(예를 들어, 항체)가 특이적으로 결합할 수 있는 항원의 국소 영역을 지칭한다. 에피토프는 선형 에피토프 또는 입체구조(conformational), 비선형 또는 불연속 에피토프일 수 있다. 예를 들어, 폴리펩티드 항원의 경우, 에피토프는 폴리펩티드의 인접 아미노산일 수 있거나("선형" 에피토프), 에피토프는 폴리펩티드의 2개 이상의 비인접 영역으로부터의 아미노산을 포함할 수 있다("입체구조 ," "비선형" 또는 "불연속적인" 에피토프). 일반적으로 선형 에피토프는 2차, 3차, 또는 4차 구조에 의존하거나 의존하지 않을 수 있다는 것이 당업자에 의해 이해될 것이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 결합 분자는 아미노산이 천연 3차원 단백질 구조로 접혀 있는지 여부에 관계없이 아미노산 그룹에 결합한다. 다른 구현예에서, 결합 분자는 에피토프를 인식하고 결합하도록 특정 입체구조(예를 들어, 벤딩, 트위스트, 턴 또는 접힘)를 나타내기 위해 에피토프를 구성하는 아미노산 잔기를 필요로 한다.
용어 "폴리펩티드" 및 "펩티드" 및 "단백질"은 본원에서 상호교환가능하게 사용되며 임의의 길이의 아미노산의 중합체를 지칭한다. 중합체는 선형 또는 분지형일 수 있고, 변형된 아미노산을 포함할 수 있으며, 비-아미노산에 의해 중단될 수 있다. 상기 용어는 또한 자연적으로 또는 개입에 의해 변형된 아미노산 중합체를 포함한다, 예를 들어, 이황화 결합 형성, 글리코실화, 지질화, 아세틸화, 인산화, 또는 기타 조작(manipulation) 또는 변형. 예를 들어, 비천연 아미노산뿐만 아니라 당업계에 공지된 다른 변형을 포함하나 이에 제한되지 않는 하나 이상의 아미노산 유사체를 함유하는 폴리펩티드도 상기 정의 내에 포함된다. 본 개시의 폴리펩티드가 항체 또는 면역글로불린 슈퍼패밀리의 다른 구성원에 기초할 수 있기 때문에, 특정 구현예에서 "폴리펩티드"는 단일 사슬 또는 2개 이상의 관련된 사슬로서 발생할 수 있는 것으로 이해된다.
본원에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는"은 연방 또는 주 정부의 규제 기관에 의해 승인되거나, 미국 약전(United States Pharmacopeia), 유럽 약전(European Pharmacopeia) 또는 동물, 보다 구체적으로 인간에 대한 사용에 대해 일반적으로 인정되는 기타 약전에 등재되는 것을 의미한다.
"부형제"는 약학적으로 허용되는 물질, 조성물 또는 비히클, 예를 들어 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 용매 또는 캡슐화 물질을 의미한다. 부형제는 예를 들어 캡슐화 물질 또는 첨가제, 예를 들어 흡수 촉진제, 산화방지제, 결합제, 완충제, 담체, 코팅제, 착색제, 희석제, 붕해제, 유화제, 증량제, 충전제, 향미제, 보습제, 윤활제, 향수, 방부제, 추진제, 이형제, 살균제, 감미료, 가용화제, 습윤제 및 이들의 혼합물을 포함한다. "부형제"라는 용어는 또한 희석제, 보조제(예컨대, Freunds 보조제(완전 또는 불완전) 또는 비히클을 지칭할 수 있다.
일 구현예에서, 각 성분은 약제학적 제형의 다른 성분과 상용성이고, 합리적인 이익/위험 비율에 상응하여, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 면역원성, 또는 기타 문제 또는 합병증 없이 인간 또는 동물의 조직 또는 장기와 접촉하여 사용하기에 적합하다는 의미에서 "약제학적으로 허용가능하다". 예컨대, Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2005; Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th ed.; Rowe et al., Eds.; The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association: 2009; Handbook of Pharmaceutical Additives, 3rd ed.; Ash and Ash Eds.; Gower Publishing Company: 2007; Pharmaceutical Preformulation and Formulation, 2nd ed.; Gibson Ed.; CRC Press LLC: Boca Raton, FL, 2009 참조. 몇몇 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 부형제는 사용되는 투여량 및 농도에서 이들에 노출되는 세포 또는 포유동물에 대해 무독성이다. 몇몇 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 부형제는 수성 pH 완충 용액이다.
약어 "MMAE"는 모노메틸 아우리스타틴 E를 지칭한다.
달리 언급되지 않는 한, 용어 "알킬"은 약 1 내지 약 20 탄소 원자(그리고 그 안의 탄소 원자의 범위의 모든 조합 및 서브조합 및 특정 수)를 포함하는, 바람직하게는 약 1 내지 약 8개의 탄소 원자를 갖는 포화 직쇄 또는 분지형 탄화수소를 지칭한다. 알킬기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, iso-프로필, n-부틸, iso-부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, 2-펜틸, 3-펜틸, 2-메틸-2-부틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸, n-노닐, n-데실, 3-메틸-2-부틸, 3-메틸-1-부틸, 2 메틸-1-부틸, 1-헥실, 2 -헥실, 3-헥실, 2-메틸-2-펜틸, 3-메틸-2-펜틸, 4-메틸-2-펜틸, 3-메틸-3-펜틸, 2-메틸-3-펜틸, 2,3 -디메틸-2-부틸, 및 3,3-디메틸-2-부틸이다. 알킬기는, 단독으로 또는 다른 기의 일부로서든, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R', -OC(O)R', -C(O)OR', -C(O)NH2, -C(O)NHR', -C(O)N(R')2, -NHC(O)R', -SR', - SO3R', -S(O)2R', -S(O)R', -OH, =O, -N3, -NH2, -NH(R'), -N(R')2 및 -CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 기와, 바람직하게는 1 내지 3개의 기(및 할로겐으로부터 선택되는 임의의 추가 치환체) 선택적으로 치환될 수 있고, 여기서 각각의 R'는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, 및 -C2 -C8 알키닐 기는 -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R'', -OC(O)R'', -C(O)OR'', -C(O)NH2, -C(O) NHR'', -C(O)N(R'')2, -NHC(O)R'', -SR'', -SO3R'', -S(O)2R'', -S(O) R'', -OH, -N3, -NH2, -NH(R''), -N(R'')2 및 CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 기로 선택적으로 추가 치환될 수 있으며, 여기서 각각의 R''는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택된다.
달리 언급되지 않는 한, 용어 "알케닐" 및 "알키닐"은 약 2 내지 약 20개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 및 분지형 탄소 사슬(및 그 안의 탄소 원자의 특정 수 및 범위의 모든 조합 및 하위 조합)을 지칭하며, 약 2 내지 약 8개의 탄소 원자가 바람직하다. 알케닐 사슬은 사슬에 적어도 하나의 이중 결합을 갖고, 알키닐 사슬은 사슬에 적어도 하나의 삼중 결합을 갖는다. 알케닐 기의 예는 에틸렌 또는 비닐, 알릴, -1 부테닐, -2 부테닐, -이소부틸레닐, -1 펜테닐, -2 펜테닐, -3 메틸 1 부테닐, -2 메틸 2 부테닐, 및 2,3 디메틸-2 부테닐을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 알키닐 기의 예는 아세틸렌, 프로파길, 아세틸레닐, 프로피닐, -1 부티닐, -2 부티닐, -1 펜티닐, -2 펜티닐, 및 3 메틸 1 부티닐을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 알케닐 및 알키닐기는, 단독이든 다른 그룹의 일부이든, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R', -OC(O)R', -C(O)OR', -C(O)NH2, -C(O)NHR', -C(O)N(R')2, -NHC(O)R' , -SR', -SO3R', -S(O)2R', -S(O)R', -OH, =O, -N3, -NH2, -NH(R'), -N(R')2 및 -CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 기로, 바람직하게는 1 내지 3개의 기(및 할로겐으로부터 선택되는 임의의 추가 치환체)로 선택적으로 치환될 수 있고, 여기서 각각의 R'는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, 및 -C2-C8 알키닐 기는 -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2C8 알키닐), -아릴, -C(O)R'', -OC(O)R'', -C(O)OR'', -C(O)NH2, -C(O)NHR' ', C(O)N(R'')2, -NHC(O)R'', -SR'', -SO3R'', -S(O)2R'', -S(O)R'' , -OH, -N3, -NH2, -NH(R''), -N(R'')2 및 -CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 치환기로 선택적으로 추가 치환될 수 있고, 여기서 각각의 R''는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택된다.
달리 언급되지 않는 한, 용어 "알킬렌"은 약 1 내지 약 20개(및 그 안의 탄소 원자의 범위의 모든 조합 및 서브 조합 및 특정 수)의 탄소 원자를 포함하고, 바람직하게는 약 1 내지 약 8개의 탄소 원자를 갖고, 모 알칸의 동일하거나 2개의 상이한 탄소 원자에서 2개의 수소 원자를 제거함으로써 유래된 2개의 1가 라디칼 중심을 갖는, 포화 분지쇄 또는 직쇄 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 전형적인 알킬렌은 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌, 펜틸렌, 헥실렌, 헵틸렌, 옥틸렌, 노닐렌, 데칼렌, 1,4-사이클로헥실렌 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 알킬렌기는, 단독이든 다른 그룹의 일부이든, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R' , -OC(O)R', -C(O)OR', -C(O)NH2, -C(O)NHR', -C(O)N(R')2, -NHC(O)R ', -SR', -SO3R', -S(O)2R', -S(O)R', -OH, =O, -N3, -NH2, -NH(R'), -N(R' )2 및 -CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 기, 바람직하게는 1 내지 3개의 기(및 할로겐으로부터 선택된 임의의 추가 치환체)로 선택적으로 치환될 수 있고, 여기서 각각의 R'는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, 및 -C2 -C8 알키닐 기는 -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R'', -OC(O)R'', -C(O)OR'', -C(O)NH2, -C(O) NHR'', -C(O)N(R'')2, -NHC(O)R'', -SR'', -SO3R'', -S(O)2R'', -S(O)R'', -OH, -N3, -NH2, -NH(R''), -N(R'')2 및 -CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 치환기로 추가로 선택적으로 치환될 수 있으며, 여기서 각각의 R''는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택된다.
달리 언급되지 않는 한, 용어 "알케닐렌"은 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 선택적으로 치환된 알킬렌기를 지칭한다. 예시적인 알케닐렌 기는 예를 들어 에테닐렌(-CH=CH-) 및 프로페닐렌(-CH=CHCH2-)을 포함한다.
달리 언급되지 않는 한, 용어 "알키닐렌"은 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합을 함유하는 선택적으로 치환된 알킬렌 기를 지칭한다. 예시적인 알키닐렌 기는, 예를 들어 아세틸렌(-C≡C-), 프로파길(-CH2C≡C-), 및 4-펜티닐(-CH2CH2CH2C≡CH-)을 포함한다.
달리 언급되지 않는 한, 용어 "아릴"은 모 방향족 링 시스템의 단일 탄소 원자의 으로부터 1개의 수소 원자를 제거함으로써 유래되는 6-20 개의 탄소 원자(및 그 안의 탄소 원자의 범위의 모든 조합 및 하위 조합 및 특정 수)의 1가 방향족 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 일부 아릴기는 예시적인 구조에서 "Ar"로 표시된다. 전형적인 아릴 기는 벤젠, 치환된 벤젠, 페닐, 나프탈렌, 안트라센, 바이페닐 등으로부터 유래된 라디칼을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
아릴 기는, 단독이든 다른 그룹의 일부이든, -할로겐, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R', -OC(O)R', -C(O)OR', -C(O)NH2, -C(O)NHR', -C(O)N(R')2, -NHC(O)R', -SR', -SO3R', -S(O)2R', -S(O)R', -OH, -NO2, -N3, -NH2, - NH(R'), -N(R')2및 -CN을 포함하나 이에 제한되지 않는, 하나 이상으로, 바람직하게는 1 내지 5개, 또는 심지어 1 내지 2개 그룹으로 선택적으로 치환될 수 있고, 여기서 각각의 R'는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), 및 -아릴 기는 -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O -(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R'', -OC(O)R'', -C(O)OR'', -C(O)NH2, -C(O) NHR'', -C(O)N(R'')2, -NHC(O)R'', -SR'', -SO3R'', -S(O)2R'', -S(O)R'', -OH, -N3, -NH2, -NH(R''), -N(R'')2 및 -CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 치환기로 추가로 선택적으로 치환될 수 있으며, 여기서 각각의 R''는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택된다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 "아릴렌"은 2가인(즉, 모 방향족 링 시스템의 동일하거나 또는 2개의 상이한 탄소 원자로부터 2개의 수소 원자를 제거함으로써 유래된) 선택적으로 치환된 아릴 기를 지칭하며, 및 예시적인 아릴 그룹으로서 페일을 갖는 다음 구조에서 나타나는 바와 같은 오쏘, 메타, 또는 파라 배열일 수 있다.
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전형적인 "-(C1-C8 알킬렌)아릴", "-(C2-C8 알케닐렌)아릴", "및 -(C2-C8 알키닐렌)아릴" 기는 벤질, 2-페닐에탄-1-일, 2-페닐에텐-1-일, 나프틸메틸, 2-나프틸에탄-1-일, 2-나프틸에텐-1-일, 나프토벤질, 2 나프토페닐에탄-1-일 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다:
달리 언급되지 않는 한, 용어 "헤테로사이클"은 3 내지 14개 링 원자(또는 링 구성원으로 지칭됨)를 갖는 모노사이클릭, 바이사이클릭, 또는 폴리사이클릭 링 시스템을 지칭하며, 여기서 적어도 하나의 링에서 적어도 하나의 링 원자는 N, O, P, 또는 S에서 선택되는 헤테로 원자이다(및 그 안의 탄소 원자 및 헤터로원자 범위의 모든 조합 및 서브 조합 및 특정 수). 헤테로사이클은 N, O, P 또는 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 링 헤테로원자를 가질 수 있다. 헤테로사이클에서 하나 이상의 N, C 또는 S 원자는 산화될 수 있다. 모노사이클릭 헤테로사이클은 바람직하게는 3 내지 7개의 링 구성원(예를 들어, 2 내지 6개의 탄소 원자 및 N, O, P 또는 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자)을 갖고, 바이사이클릭 헤테로사이클은 바람직하게는 5 내지 10개의 링 구성원(예를 들어, 4 내지 9개의 탄소 원자 및 N, O, P 또는 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자)을 갖는다. 헤테로원자를 포함하는 링은 방향족 또는 비방향족일 수 있다. 달리 언급되지 않는 한, 헤테로사이클은 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에서 그의 펜던트 기에 부착되며, 이는 안정한 구조를 결과한다. 헤테로사이클은 Paquette, "Principles of Modern Heterocyclic Chemistry" (W.A. Benjamin, New York, 1968), particularly Chapters 1, 3, 4, 6, 7, 및 9; "The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs" (John Wiley & Sons, New York, 1950 to present), 특히 Volumes 13, 14, 16, 19, 및 28; 및 J. Am. Chem. Soc. 82:5566 (1960)에서 설명된다. "헤테로사이클" 그룹의 예는 제한이 아닌 예시로 피리딜, 디히드로피리딜, 테트라히드로피리딜(피페리딜), 티아졸릴, 피리미디닐, 푸라닐, 티에닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 테트라졸릴, 벤조푸라닐, 티아나프탈레닐, 인돌릴, 인돌레닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 벤즈이미다졸릴, 피페리디닐, 4-피페리도닐, 피롤리디닐, 2-피롤리도닐, 피롤리닐, 테트라히드로푸라닐, 비스-테트라히드로푸라닐, 테트라히드로피라닐, 비스-테트라히드로피라닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐, 데카히드로퀴놀리닐, 옥타히드로이소퀴놀리닐, 아조시닐, 트리아지닐, 6H-1,2,5-티아디아지닐, 2H,6H-1,5,2-디티아지닐, 티에닐, 티안트레닐, 피라닐, 이소벤조푸라닐, 크로메닐, 크산테닐, 페녹사티닐, 2H-피롤릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 피라지닐, 피리다지닐, 인돌리지닐, 이소인돌릴, 3H-인돌릴, 1H-인다졸릴, 퓨리닐, 4H-퀴놀리지닐, 프탈라지닐, 나프티리디닐, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 신놀리닐, 프테리디닐, 4H-카바졸릴, 카바졸릴, β-카볼리닐, 페난트리디닐, 아크리디닐, 피리미디닐, 페난트롤리닐, 페나지닐, 페노티아지닐, 푸라자닐, 페녹사진, 이소크로마닐, 크로마닐, 이미다졸리디닐, 이미다졸리닐, 피라졸리디닐, 피라졸리닐, 피페라지닐, 인돌리닐, 이소인돌리닐, 퀴누클리디닐, 모르폴리닐, 옥사졸리디닐, 벤조트리아졸릴, 벤즈이속사졸릴, 옥신돌릴, 벤족사졸리닐 및 이사티노일을 포함한다. 바람직한 "헤테로사이클" 그룹은 벤조푸라닐, 벤조티오페닐, 인돌릴, 벤조피라졸릴, 쿠마리닐, 이소퀴놀리닐, 피롤릴, 티오페닐, 푸라닐, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 퀴놀리닐, 피리미디닐, 피리디닐, 피리도닐, 피라지닐, 피리다지닐, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 및 테트라졸릴을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 헤테로사이클 그룹은 단독이든 다른 그룹의 일부이든, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R', -OC(O)R', -C(O)OR', -C(O)NH2, -C(O)NHR', C(O)N(R')2, -NHC(O)R', -SR', -SO3R', -S(O)2R', -S(O)R', -OH, -N3, -NH2, -NH(R'), -N(R')2 및 -CN을 포함하나,이에 제한되지 않는, 하나 이상의 그룹으로, 바람직하게는 1 내지 2개의 그룹으로 선택적으로 치환될 수 있고, 여기서 각각의 R'는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -아릴 기는 -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R'', -OC(O)R'', -C(O)OR'', -C(O)NH2, -C(O) NHR'', -C(O)N(R'')2, NHC(O)R'', -SR'', -SO3R'', -S(O)2R'', -S(O)R '', -OH, -N3, -NH2, -NH(R''), -N(R'')2 및 -CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 치환기로 추가로 선택적으로 치환될 수 있으며, 여기서 각각의 R''는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 아릴로부터 독립적으로 선택된다.
비제한적인 예로서, 탄소 결합된 헤테로사이클은 다음의 위치에서 결합될 수 있다: 피리딘의 위치 2, 3, 4, 5, 또는 6; 피리다진의 위치 3, 4, 5 또는 6; 피리미딘의 위치 2, 4, 5, 또는 6; 피라진의 위치 2, 3, 5 또는 6; 푸란, 테트라히드로푸란, 티오푸란, 티오펜, 피롤 또는 테트라히드로피롤의 위치 2, 3, 4 또는 5; 옥사졸, 이미다졸 또는 티아졸의 위치 2, 4 또는 5; 이속사졸, 피라졸 또는 이소티아졸의 위치 3, 4 또는 5; 아지리딘의 위치 2 또는 3; 아제티딘의 위치 2, 3, 또는 4; 퀴놀린의 위치 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8; 또는 이소퀴놀린의 위치 1, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8. 더욱 더 전형적으로, 탄소 결합된 헤테로사이클은 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 5-피리딜, 6-피리딜, 3-피리다지닐, 4-피리다지닐, 5-피리다지닐, 6-피리다지닐, 2-피리미디닐, 4-피리미디닐, 5-피리미디닐, 6-피리미디닐, 2-피라지닐, 3-피라지닐, 5-피라지닐, 6-피라지닐, 2-티아졸릴, 4-티아졸릴, 또는 5-티아졸릴을 포함한다.
비제한적인 예로서, 질소 결합 헤테로사이클은 아지리딘, 아제티딘, 피롤, 피롤리딘, 2-피롤린, 3-피롤린, 이미다졸, 이미다졸리딘, 2-이미다졸린, 3-이미다졸린, 피라졸, 피라졸린, 2-피라졸린, 3-피라졸린, 피페리딘, 피페라진, 인돌, 인돌린 또는 1H-인다졸의 위치 1; 이소인돌 또는 이소인돌린의 위치 2; 모르폴린의 위치 4; 및 카르바졸 또는 β-카르볼린의 위치 9에 결합될 수 있다. 더욱 더 전형적으로, 질소 결합 헤테로사이클은 1-아지리딜, 1-아제테딜, 1-피롤릴, 1-이미다졸릴, 1피라졸릴 및 1-피페리디닐을 포함한다.
달리 언급하지 않는 한, 용어 "카르보사이클"은 3 내지 14개 링 원자(및 그 안의 탄소 원자의 범위의 모든 조합 및 서브 조합 및 특정 수)를 갖는 포화 또는 불포화 비-방향족 모노사이클릭, 바이사이클릭, 또는 폴리사이클릭 링 시스템을 지칭하며, 여기서 모든 링 원자는 탄소 원자이다. 모노사이클릭 카르보사이클은 바람직하게는 3 내지 6개의 링 원자, 더욱 더 바람직하게는 5 또는 6개의 링 원자를 갖는다. 바이사이클릭 카르보사이클은, 예를 들어 바이사이클로 [4,5], [5,5], [5,6] 또는 [6,6] 시스템으로 배열된, 7 내지 12개 링 원자, 또는 바이사이클로 [5,6] 또는 [6,6] 시스템으로 배열된 9 또는 10개의 링 원자를 바람직하게는 갖는다. 용어 "카르보사이클"은 예를 들어, 아릴 링에 융합된 모노사이클릭 카르보사이클 링을 포함한다(예컨대, 벤젠 링에 융합된 모노사이클릭 카르보사이클 링). 카르보사이클은 3 내지 8개의 탄소 링 원자를 바람직하게는 갖는다. 카르보사이클 그룹은, 단독으로든 다른 그룹의 일부이든, -할로겐, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐) , -아릴, -C(O)R', -OC(O)R', -C(O)OR', -C(O)NH2, -C(O)NHR', -C(O)N(R')2, -NHC(O)R', -SR', -SO3R', -S(O)2R', -S(O)R', -OH, =O, -N3, -NH2, -NH(R'), -N(R')2 및 -CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 예를 들어, 하나 이상의 그룹으로, 바람직하게는 1 또는 2개의 그룹(및 할로겐으로부터 선택된 임의의 추가 치환기)으로 선택적으로 치환될 수 있고, 여기서 각각의 R'는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴 기는 -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, -할로겐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C2-C8 알케닐), -O-(C2-C8 알키닐), -아릴, -C(O)R'', -OC(O)R'', -C(O)OR'', -C(O)NH2, -C(O)NHR'', -C(O)N(R'')2, -NHC(O)R'', -SR'', -SO3R'', -S(O)2R'', -S(O)R'', -OH, -N3, -NH2, -NH(R''), -N(R'')2 및 -CN을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 치환기로 추가로 선택적으로 치환될 수 있고, 여기서 각각의 R''는 -H, -C1-C8 알킬, -C2-C8 알케닐, -C2-C8 알키닐, 또는 -아릴로부터 독립적으로 선택된다.
모노사이클릭 카르보사이클릭 치환기의 예는 -사이클로프로필, -사이클로부틸, -사이클로펜틸, -1-사이클로펜트-1-에닐, -1-사이클로펜트-2-에닐, -1-사이클로펜트-3-에닐, 사이클로헥실, -1-사이클로헥스-1-에닐, -1-사이클로헥스-2-에닐, -1-사이클로헥스-3-에닐, -사이클로헵틸, -사이클로옥틸. -1,3-사이클로헥사디에닐, -1,4-사이클로헥사디에닐, -1,3-사이클로헵타디에닐, -1,3,5-사이클로헵타트리에닐, 및 -사이클로옥타디에닐을 포함한다.
"카르보사이클로"는, 단독으로 사용되든 또는 다른 그룹의 일부로서 사용되든, 2가인 위에서 정의되는 선택적으로 치환되는 카르보사이클 그룹을 지칭한다(즉, 모 카르보사이클릭 링 시스템의 동일 또는 2개의 상이한 탄소 원자에서 2개의 수소 원자를 제거함으로써 유래됨)
문맥상 달리 표시되지 않는 한, 하이픈(-)은 펜던트 분자에 대한 부착 지점을 지정한다. 따라서, 용어 "-(C1-C8 알킬렌) 아릴" 또는 "-C1-C8 알킬렌(아릴)"은 본원에서 정의되는 C1-C8 알킬렌 라디칼을 지칭하고, 여기서 알킬렌 라디칼은 알킬렌 라디칼의 임의의 탄소 원자에서 펜던트 분자에 부착되고, 알킬렌 라디칼의 탄소 원자에 결합되는 수소 원자 중 하나는 본원에 정의되는 바와 같은 아릴 라디칼로 대체된다.
특정 그룹이 "치환"되는 경우, 상기 그룹은 치환기 목록에서 독립적으로 선택되는, 하나 이상의 치환기, 바람직하게는 1 내지 5개의 치환기, 보다 바람직하게는 1 내지 3개의 치환기, 가장 바람직하게는 1 내지 2개의 치환기를 가질 수 있다. 그룹은, 그러나, 할로겐으로부터 선택되는 임의의 수의 치환기를 일반적으로 가질 수 있다. 치환되는 그룹은 그렇게 표시된다. 분자의 특정 위치에서 임의의 치환기 또는 변수의 정의는 해당 분자의 다른 곳에서의 정의와 독립적인 것으로 의도된다. 본 발명의 화합물에 대한 치환기 및 치환 패턴은 화학적으로 안정하고, 당업계의 공지된 기술 뿐만 아니라 본원에 설명되는 방법에 의해 쉽게 합성될 수 있는 화합물을 제공하기 위해 당업자에 의해 선택될 수 있는 것으로 이해된다.
본원에서 사용되는 보호 그룹은 다기능성 화합물의 하나의 반응성 부위를 일시적으로 또는 영구적으로, 선택적으로 차단하는 그룹을 지칭한다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 히드록시-보호 그룹은 약학적으로 허용가능하며, 화합물이 활성이 되기 위해 대상에 투여 후 모 화합물로부터 절단될 필요가 있거나 필요하지 않을 수 있다. 절단은 신체 내의 정상적인 대사 과정을 통해 이루어진다. 히드록시 보호 그룹은 당업계에 잘 알려져 있다. 모든 목적을 위해, 그 전체가 참조로 여기에 통합되는 Protective Groups in Organic Synthesis by T. W. Greene and P. G. M. Wuts (John Wiley & sons, 3rd Edition) 참조. 이는 예를 들어, 에테르(예컨대, 이달킬실릴에테르, 트리알킬실리에테르, 디알킬알콕시실릴에테르를 포함하는 실릴 에테르 및 알킬 에테르), 에스테르, 카르보네이트, 카르바메이트, 술포네이트, 및 포스페이트 보호 그룹을 포함한다. 히드록시 보호 그룹의 예는 메틸 에테르; 메톡시메틸 에테르, 메틸티오메틸 에테르, (페닐디메틸실릴)메톡시메틸 에테르, 벤질옥시메틸 에테르, p-메톡시벤질옥시메틸 에테르, p-니트로벤질옥시메틸 에테르, o-니트로벤질옥시메틸 에테르, (4-메톡시페녹시)메틸 에테르, 구아이아콜메틸 에테르, t-부톡시메틸 에테르, 4-펜테닐옥시메틸 에테르, 실록시메틸 에테르, 2-메톡시에톡시메틸 에테르, 2,2,2-트리클로로에톡시메틸 에테르, 비스(2-클로로에톡시)메틸 에테르, 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 에테르, 멘톡시메틸 에테르, 테트라히드로피라닐 에테르, 1-메톡시시클로헥실 에테르, 4-메톡시테트라히드로티오피라닐 에테르, 4 메톡시테트라히드로티오피라닐 에테르 S,S-디옥사이드, 1-[(2-클로로-4-메틸)페닐]-4-메톡시피페리딘-4-일 에테르, 1-(2-플루오로프닐)-4-메톡시피페리딘-4-일 에테르, 1,4-디옥산-2-일 에테르, 테트라히드로푸라닐 에테르, 테트라히드로티오푸라닐 에테르; 1-에톡시에틸 에테르, 1-(2-클로로에톡시)에틸 에테르, 1-[2-(트리메틸실릴)에톡시]에틸 에테르, 1-메틸-1-메톡시에틸 에테르, 1-메틸-1-벤질옥시에틸 에테르, 1-메틸-1-벤질옥시-2-플루오로에틸 에테르, 1-메틸-1페녹시에틸 에테르, 2-트리메틸실릴 에테르, t-부틸 에테르, 알릴 에테르, 프로파길 에테르, p-클로로페닐 에테르, p-메톡시페닐 에테르, 벤질 에테르, p-메톡시벤질 에테르 3,4-디메톡시벤질 에테르, 트리메틸실릴 에테르, 트리에틸실릴 에테르, 트리프로필실릴에테르, 디메틸이소프로필실릴 에테르, 디에틸이소프로필실릴 에테르, 디메틸헥실실릴 에테르, t-부틸디메틸실릴 에테르, 디페닐메틸실릴 에테르와 같은, 치환된 에틸 에테르, 벤조일포르메이트 에스테르, 아세테이트 에스테르, 클로로아세테이트 에스테르, 디클로로아세테이트 에스테르, 트리클로로아세테이트 에스테르, 트리플루오로아세테이트 에스테르, 메톡시아아세테이트 에스테르, 트리프닐메톡시아아세테이트 에스테르, 페닐아세테이트 에스테르, 벤조에이트 에스테르, 알킬 메틸 카보네이트, 알킬 9-플루오레닐메틸 카보네이트, 알킬 에틸 카보네이트, 알킬 2,2,2,-트리클로로에틸 카보네이트, 1,1,-디메틸-2,2,2-트리클로로에틸 카보네이트, 알킬설포네이트, 메탄설포네이트, 벤질술포네이트, 토실레이트, 메틸렌 아세탈, 에틸리덴 아세탈 및 t-부틸메틸리덴 케탈을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 바람직한 보호 그룹은 -Ra, -Si(Ra)(Ra)(Ra), -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NH(Ra), -S(O)2Ra, -S(O)2OH, P(O)(OH)2, 및 -P(O)(OH)ORa의 화학식으로 표시되며, 여기서 Ra는 C1-C20 알킬, C2-C20 알케닐, C2-C20 알키닐, -C1-C20 알킬렌(카르보사이클), -C2-C20 알케닐렌(카르보사이클), -C2-C20 알키닐렌(카르보사이클), -C6-C10 아릴, -C1-C20 알킬렌(아릴), -C2-C20 알케닐렌(아릴), -C2-C20 알키닐렌(아릴), -C1-C20 알킬렌(헤테로사이클), -C2-C20 알케닐렌(헤테로사이클), 또는 -C2-C20 알키닐렌(헤테로사이클)이며, 여기서 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬렌, 알케닐렌, 알키닐렌, 아릴, 카르보사이클 및 헤테로사이클 라디칼은, 단독이든 다른 그룹의 일부이든, 선택적으로 대체된다.
용어 "화학요법제"는 종양 성장을 억제하는데 효과적인 모든 화학적 화합물을 지칭한다. 화학요법제의 비제한적인 예는 알킬화제; 예를 들어, 질소 머스타드, 에틸렌이민 화합물 및 알킬 술포네이트; 항대사물질, 예를 들어 엽산, 퓨린, 또는 피리미딘 길항제; 유사 분열 억제제, 예를 들어, 빈카 알칼로이드, 아우리스타틴, 및 포도필로톡신 유도체와 같은 항-튜불린 제; 세포독성 항생제; DNA 발현 또는 복제를 손상시키거나 방해하는 화합물, 예를 들어, DNA 마이너 그루브 바인더; 및 성장 인자 수용체 길항제를 포함한다. 또한, 화학요법제는 세포독성제(본원에 정의된 바와 같은), 항체, 생물학적 분자, 및 소분자를 포함한다.
용어 "화합물"은 화학적 화합물 자체 뿐만 아니라 명시적으로 언급되었든지 간에, 문맥에서 다음이 제외되어야 함을 명확히 하지 않는 한: 다형성 형태를 포함하는, 화합물의 무정형 및 결정형 형태, 여기서 이러한 형태는 혼합물의 일부이거나 분리된 형태일 수 있으며; 전형적으로 본원에 제공되는 구조에 나타난 형태인 화합물의 유리 산 및 유리 염기 형태; 화합물의 이성질체, 이는 광학 이성질체 및 호변 이성질체를 의미하며, 여기서 광학 이성질체는 거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체, 키랄 이성질체, 및 비-키랄 이성질체를 포함하고, 광학 이성질체는 분리된 광학 이성질체 뿐만 아니라 라세미(racemic) 및 비-라세미 혼합물을 포함하는 광학 이성질체의 혼합물을 포함하며; 여기서 이성질체는 분리된 형태 또는 하나 이상의 다른 이성질체와의 혼합물일 수 있고; 중수소 및 삼수소 합유 화합물을 포함하고, 치료 및 진단에 효과적인 방사성 동위원소를 포함하는 방사성 동위원소를 함유하는 화합물을 포함하는 화합물의 동위원소(isotopes); 이량체, 삼량체 등의 형태를 포함하는 화합물의 다량체 형태; 유기 반대이온 및 무기 반대이온을 갖는 염을 포함하고, 및 양쪽성 이온 형태를 포함하는, 산 부가염 및 염기 부가 염을 포함하는 화합물의 염, 바람직하게는 약제학적으로 허용되는 염, 여기서 화합물이 둘 이상의 반대이온과 관련되는 경우, 둘 이상의 반대이온은 동일하거나 상이할 수 있으며; 및 반용매화물, 단일용매화물, 이용매화물 등을 포함하고, 유기 용매화물 및 무기 용매화물을 포함하는, 화합물의 용매화물을 지칭하고 포함하며, 상기 무기 용매화물은 수화물을 포함하며; 여기서 화합물이 둘 이상의 용매 분자와 관련되는 경우, 둘 이상의 용매 분자는 동일하거나 상이할 수 있다. 일부 경우에, 본 발명의 화합물에 대한 언급은 하나 또는 예컨대 염 및/또는 용매화물과 같은 위의 형태에 대한 명시적 언급을 포함할 것이며; 그러나 이러한 언급은 단지 강조를 위한 것이며, 위의 식별된 바와 같은 다른 형태를 배제하는 것으로 해석되어서는 안된다.
본원에 사용되는 용어 "보존적 치환(conservative substitution)"은 당업자에게 공지되어 있고, 생성된 분자의 생물학적 활성을 변경하지 않고 일반적으로 이루어질 수 있는 아미노산의 치환을 지칭한다. 당업자는, 일반적으로, 폴리펩티드의 비-필수 영역에서 단일 아미노산 치환이 생물학적 활성을 실질적으로 변경하지 않는다는 것을 인식한다(예컨대, Watson, et al., MOLECULAR BIOLOGY OF THE GENE, The Benjamin/Cummings Pub. Co., p. 224 (4th Edition 1987) 참고). 이러한 예시적인 치환은 바람직하게는 표 2 및 표 3에 기재된 것에 따라 이루어진다. 예를 들어, 이러한 변화는 이소류신(I), 발린(V), 및 류신(L) 의 소수성 아미노산 중 임의의 다른 것을 이소류신(I), 발린(V), 및 류신(L) 중 임의의 것으로; 글루탐산(E)을 아스파트 산(D)으로, 또는 그 반대로; 아스파라긴(N)을 글루타민(Q)으로, 또는 그 반대로; 및 트레오닌(T)을 세린(S)으로, 또는 그 반대로 치환하는 것을 포함한다. 다른 치환도 특정 아미노산의 환경 및 단백질의 3-차원 구조에서의 역할에 따라 보존적인 것으로 간주될 수 있다. 예를 들어, 글리신(G)과 알라닌(A)은 알라닌(A)과 발린(V)과 마찬가지로 종종 상호 교환 가능하다. 상대적으로 소수성인 메티오닌(M)은 종종 류신 및 이소류신, 때로는 발린과 상호교환될 수 있다. 라이신(K)과 아르기닌(R)은 아미노산 잔기의 중요한 특징이 전하이고 상기 2개의 아미노산 잔기의 pK의 차이가 크지 않은, 위치에서 종종 상호교환 가능하다. 또 다른 변화는 특정 환경에서 "보존적"으로 간주될 수 있다(예컨대, 본원의 표 3; pages 13-15 “Biochemistry” 2nd ED. Lubert Stryer ed (Stanford University); Henikoff et al., PNAS 1992 Vol 89 10915-10919; Lei et al., J Biol Chem 1995 May 19; 270(20):11882-11886 참조). 다른 치환도 허용되며 경험적으로 또는 공지의 보존적 치환에 따라 결정될 수 있다.
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용어 "상동성" 또는 "상동성의"는 2개의 폴리뉴클레오티드 사이 또는 2개의 폴리펩티드 사이의 서열 유사성을 의미하는 것으로 의도된다. 유사성은 비교 목적으로 정렬될 수 있는 각 서열의 위치를 비교함으로써 결정될 수 있다. 2개의 폴리펩티드 서열의 주어진 위치가 동일하지 않은 경우, 그 위치의 유사성 또는 보존성은 예를 들어, 표 3에 따라 위치의 아미노산의 유사성을 평가함으로써 결정될 수 있다. 서열 간의 유사성 정도는 서열이 공유하는 일치 또는 상동성 위치의 수의 함수이다. 이들의 서열 유사성을 결정하기 위한 두 서열의 정렬은 예를 들어, Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons, Baltimore, MD (1999)에 기술된 것과 같은 공지의 소프트웨어 프로그램을 사용하여 수행될 수 있다. 바람직하게는, 기본 파라미터가 정렬에 사용되며, 그 예는 아래에 설명된다. 사용될 수 있는 당업계에 잘 알려진 하나의 정렬 프로그램은 디폴트 파라미터로 설정된 BLAST이다. 특히, 프로그램은 다음 디폴트 파라미터를 사용하는 BLASTN 및 BLASTP이다: Genetic code = standard; filter = none; strand = both; cutoff = 60; expect = 10; Matrix = BLOSUM62; Descriptions = 50 sequences; sort by = HIGH SCORE; Databases = non-redundant, GenBank + EMBL + DDBJ + PDB + GenBank CDS translations + SwissProtein + SPupdate + PIR. 상기 프로그램의 세부사항은 국립 생명 공학 정보 센터에서 확인될 수 있다.
주어진 아미노산 서열 또는 핵산 서열에 대한 용어 "상동체(homologs)"는 주어진 아미노산 서열 또는 핵산 서열과 실질적으로 동일성 또는 상동성을 갖는 "상동체"의 상응하는 서열을 나타내는 것으로 의도된다.
2개의 서열(예컨대, 아미노산 서열 또는 핵산 서열) 사이의 퍼센트 동일성의 결정은 수학적 알고리즘을 사용하여 달성될 수 있다. 두 서열의 비교에 사용되는 수학적 알고리즘의 바람직한, 비-제한적인 예는 Karlin and Altschul, 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87:2264 2268, modified as in Karlin and Altschul, 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:5873 5877의 알코리즘이다. 이러한 알고리즘은 NBLAST and XBLAST programs of Altschul et al., 1990, J. Mol. Biol. 215:403에 통합된다. BLAST 뉴클레오티드 검색은 예를 들어 score=100, wordlength=12와 같은, NBLAST 뉴클레이티드 프로그램 파라미터 세트로 수행되어, 본원에 기술된 핵산 분자와 상동성인 뉴클레오티 서열을 얻을 수 있다. BLAST 단백질 검색은 예를 들어 score 50, wordlength=3과 같은, XBLAST 프로그램 파라미터 세트로 수행되어, 본원에 기재된 단백질 분자와 상동성인 아미노산 서열을 얻을 수 있다. 비교 목적을 위한 갭핑된 정렬을 얻기 위해, Altschul et al., 1997, Nucleic Acids Res. 25:3389 3402에 기술된 바와 같은 Gapped BLAST가 사용될 수 있다. 대안적으로, PSI BLAST가 분자 사이의 먼 관계(distant relationships)를 감지하는 반복 검색(Id.)을 수행하기 위해 사용될 수 있다. BLAST, Gapped BLAST 및 PSI Blast 프로그램을 사용할 때, 각 프로그램의 디폴트 파라미터(예컨대, XBLAST 및 NBLAST)가 사용될 수 있다. (예컨대, National Center for Biotechnology Information (NCBI) on the worldwide web, ncbi.nlm.nih.gov 참고) 서열 비교에 사용되는 수학적 알고리즘의 다른 비-제한적인 예는 Myers and Miller, 1988, CABIOS 4:11 17의 알고리즘이다. 이러한 알고리즘은 GCG 서열 정렬 소프트웨어 패키지읠 일부인 ALIGN 프로그램(version 2.0)에 통합된다. 아미노산 서열을 비교하기 위해 ALIGN 프로그램을 사용하는 경우, PAM120 가중치 잔기 표, 12의 갭 길이 패널티, 및 4의 갭 페널티가 사용될 수 있다.
2개 서열 사이의 퍼센트 동일성은 갭을 허용하거나 허용하지 않고 상기 기재된 것과 유사한 기술을 사용하여 결정될 수 있다. 퍼센트 동일성을 계산할 때, 일반적으로 정확히 일치하는 것만 계산된다.
용어 "세포독성제"는 세포의 발현 활성, 세포의 기능을 억제 또는 방지하거나 및/또는 세포의 파괴를 유발하는 물질을 지칭한다. 상기 용어는 방사성 동위원소, 화학요법제, 및 파편 및/또는 변이체를 포함하는 박테리아, 진균, 식물 또는 동물 기원의 효소 활성 독소 또는 소분자 독소와 같은 독소를 포함하는 것으로 의도된다. 세포독성제의 예는 아우리스타틴(예컨대, 아우리스타틴 E, 아우리스타틴 F, MMAE 및 MMAF), 아우로마이신, 메이탄시노이드, 리신, 리신 A-사슬, 콤브레스타틴, 듀오카르마이신, 돌라스타틴, 독소루비신, 다우노루비신, 탁솔, 시스플라틴, cc1065, 에티듐 브로마이드, 미토마이신, 에토포사이드, 테노포사이드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 콜히친, 디히드록시 안트라신 디온, 악티노마이신, 디프테리아 톡신, 슈도모나스 엑소톡신(PE) A, PE 40, 아브린, 아브린 A 사슬, 모데신 A 사슬, 알파-사르신, 젤로닌, 미토겔린, 레트스트릭토신, 페노마이신, 에노마이신, 큐리신, 크로틴, 칼리케아미신, 사파오나리아 오피시날리스 억제제, 및 글루코코르티코이드, 및 기타 화학요법제, 뿐만 아니라, At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212 또는 213, P32와 같은 방사성 동위원소 및 Lu177을 포함하는 Lu의 방사성 동위원소를 포함하나, 제한되지 않는다. 항체는 전구-약물을 활성 형태로 전환할 수 있는 항-암 전구-약물 활성화 효소에 또한 컨쥬게이트될 수 있다.
본원에 사용되는 용어 "유효량" 또는 "치료학적으로 유효량"은 원하는 결과를 초래하기에 충분한 본원에 제공된 결합 분자(예컨대, 항체) 또는 약제학적 조성물의 양을 지칭한다.
용어 "대상" 및 "환자"는 상호교환적으로 사용될 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 특정 구현예에서, 대상은 비-영장류(예컨대, 소, 돼지, 말, 고양이, 개, 랫 등) 또는 영장류(예컨대, 원숭이 및 인간)와 같은, 포유동물이다. 특정 구현예에서, 대상은 인간이다. 하나의 구현예에서, 대상은 병태(condition) 또는 질병(disorder)을 갖는 것으로 진단된 포유동물, 예컨대 인간이다. 다른 구현예에서, 대상은 병태 또는 질병이 발병할 위험이 있는 포유동물, 예컨대 인간이다.
"투여하다", 또는 "투여"는 점막, 피내, 정맥내, 근육내 전달, 및/또는 본원에서 기술하거나 당업계에 공지된 임의의 기타 물리적 전달 방법과 같이, 신체 외부에 존재하는 물질을 환자에게 주사하거나 또는 달리 물리적으로 전달하는 행위를 지칭한다.
본원에 사용되는, 용어 "치료하다", "치료", 및 "치료하는"은 하나 이상의 요법의 투여로 인한 질환 또는 병태의 진행, 중증도, 및/또는 기간의 감소 또는 개선을 지칭한다. 치료는 환자가 여전히 기저 질환에 시달리고 있음에도 불구하고, 환자에게 개선이 관찰되도록 기저 질환과 관련된 하나 이상의 증상의 감소, 경감(alleviation), 및/또는 완화(mitigation)가 있었는지 여부를 평가함으로써 결정될 수 있다. 용어 "치료"는 질병을 관리하고 개선하는 것을 모두 포함한다. 용어 "관리하다", "관리하는", 및 "관리"는 질병의 치료를 반드시 결과하지는 않는 요법으로부터 대상이 유도하는 유익한 효과를 지칭한다.
용어 "예방하다", "예방하는", 및 "예방"은 질병, 질환, 병태, 또는 관련 증상(들)(예컨대, 암)의 발병(또는 재발) 가능성을 감소시키는 것을 지칭한다
용어 "암" 또는 "암 세포"는 정상 조직 또는 조직 세포와 구별되는 특징을 갖는 신생물(neoplasm)에서 발견되는 조직 또는 세포를 나타내기 위해 본원에서 사용된다. 이러한 특성은 다음을 포함하지만 이제 제한되지 않는다: 역형성 정도, 모양의 불규칙성, 세포 윤곽의 불분명, 핵 크기, 핵 또는 세포질의 구조 변화, 기타 표현형 변화, 암성 또는 전(pre)-암성 상태를 나타내는 세포 단백질의 존재, 증가된 유사 분열의 수 및 전이 능력. "암"과 관련된 단어는 암종, 육종, 종양, 상피종, 백혈병, 림프종, 폴립 및 경막, 형질전환, 신생물 등을 포함한다.
용어 "약" 및 "대략"은 20% 이내, 15% 이내, 10% 이내, 9% 이내, 8% 이내, 7% 이내, 6% 이내, 5% 이내, 4% 이내, 3% 이내, 2% 이내, 1% 이내 또는 주어진 값 또는 범위 미만을 의미한다.
본 개시 및 청구항에 사용된 바와 같이, 단수 형태의 표현은 문맥이 명백하게 달리 지시하지 않는 한, 복수 형태를 포함한다.
구현예가 용어 "포함하는"과 함께 본원에 기술될 때마다, "이루어지는" 및/또는 "본질적으로 이루어지는"과 관련하여 설명된 다른 유사한 구현예가 또한 제공된다는 것이 이해된다. 구현예가 "본질적으로 이루어지는"이라는 문구와 함께 본원에서 설명될 때마다, "이루어지는"의 용어로 설명과 관련하여 설명된 유사한 실시예가 또한 제공되는 것으로 이해된다.
본원에서 "A 및/또는 B"와 같은 문구에서 사용된 용어 "및/또는"은 A 및 B; A 또는 B; A(단독); 및 B(단독)을 모두 포함하도록 의도된다. 유사하게, "A, B, 및/또는 C"와 같은 문구에서 사용되는 "및/또는"이라는 용어는 다음 구현예 각각을 포함하도록 의도된다: A, B 및 C; A, B 또는 C; A 또는 C; A 또는 B; B 또는 C; A 및 C; A 및 B; B 및 C; A(단독); B(단독); 및 C(단독).
용어 "변이체"는 구체적으로 기술된 단백질의 상응하는 위치(들)에 하나 이상의 상이한 아미노산 잔기를 갖는 단백질(예: 도 1에 도시된 191P4D12 단백질)과 같은, 기술된 타입 또는 표준으로부터 변이를 나타내는 분자를 지칭한다. 유사체는 변이체 단백질의 예이다. 스플라이스 아이소폼 및 단일 뉴클레오티드 다형성(SNP)은 변이체의 추가 예이다.
본 발명의 "191P4D12 단백질" 및/또는 "191P4D12 관련 단백질"은 본원에서 구체적으로 식별된 것들(도 1 참조) 뿐만 아니라 본원에서 서루된 방법 또는 당업계에서 용이하게 이용가능한 방법에 따라 과도한 실험 없이 분리/생성 및 특성화될 수 있는 대립형질 변이체, 보존적 치환 변이체, 유사체 및 상동체를 포함한다. 상이한 191P4D12 단백질의 일부 또는 이의 단편을 조합하는 융합 단백질, 뿐만 아니라 191P4D12 단백질 및 이종성 폴리펩티드의 융합 단백질도 포함된다. 이러한 191P4D12 단백질은 191P4D12 관련 단백질, 본 발명의 단백질, 또는 191P4D12라고 총칭된다. "191P4D12 관련 단백질"이라는 용어는 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 또는 25개 초과의 아미노산; 또는, 적어도 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 40, 135, 1 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 330, 335, 339개 이상의 아미노산의 폴리펩티드 단편 또는 191P4D12 단백질 서열을 지칭한다.
5.2 암을 치료하는 방법
본원에 제공되는 것은 191P4D12에 결합하는 항체 약물 컨쥬게이트(ADC)를 이용하는 유방암(예컨대, HER+/HER2- 유방암 및 ER 음성, PR 음성 및 HER2 음성인 삼중 음성 유방암(ER-/PR-/HER2-), 폐암(예컨대, 편평상피암, 비편평폐암, 편평비소세포폐암, 비편평비소세포폐암), 두경부암, 및 위암 또는 식도암을 포함하는, 다양한 암의 치료 방법이다. 몇몇 구현예에서, ADC는 엔포르투맙 베도틴이다(항-191P4D12-ADC, Ha22-2(2,4)6.1vcMMAE, ASG-22CE 또는 AGS-22M6E라고도 함).
일 관점에서, 본원에 제공되는 것은 대상에게 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 투여하는 것을 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법이며, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트되는 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하고, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23으로 제시된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며, 및 여기서 대상은 호르몬 수용체 양성 및 인간 표피 성장 인자 수용체 2 음성(HR+/HER2-) 유방암을 갖는다.
몇몇 관점에서, 본원에 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 대상에게 투여하는 것을 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법이며, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하고, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO: 22에 제시된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO: 23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하고; 및 여기서 대상은 ER 음성, PR 음성, 및 HER2 음성(ER-/PR-/HER2-) 유방암을 갖는다.
다른 관점에서, 본원에 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 대상에게 투여하는 것을 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법이며, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하고, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO: 22에 제시된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO: 23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하고; 및 여기서 대상은 편평 비소 세포 폐암(NSCLC)을 갖는다.
추가 관점에서, 본원에 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 대상에게 투여하는 것을 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법이며, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하고, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO: 22에 제시된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO: 23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하고; 및 여기서 대상은 비편평 NSCLC을 갖는다.
몇몇 관점에서, 본원에 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 대상에게 투여하는 것을 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법이며, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하고, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO: 22에 제시된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO: 23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하고; 및 여기서 대상은 국소 진행성 또는 전이성 두경부암을 갖는다.
특정 관점에서, 본원에 제공되는 것은 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 대상에게 투여하는 것을 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법이며, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하고, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO: 22에 제시된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO: 23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하고; 및 여기서 대상은 위암 또는 식도암을 갖는다.
본원에 제공되는, 구체적으로 이전 7개의 단락에서 설명되는 모든 방법에서, 사용될 수 있는 치료제는 섹션 5.3에 설명되고, 치료를 위한 환자의 선택은 여기에서 설명되고 섹션 5.2 및 섹션 6에 예시되어 있으며, 치료제를 투여하기 위한 투여 요법 및 약제학적 조성물은 하기 섹션 5.4 및 섹션 6에 기재되어 잇으며, 치료제를 식별하고, 환자를 선택하고, 이러한 방법의 결과를 결정하고, 및/또는 이러한 방법에 대한 어떠한 방식으로의 기준의 역할로서 사용될 수 있는 바이오마커는 여기에 기술되고, 섹션 5.2 및 섹션 6에 예시되며, 본원에 제공되는 방법에 대한 치료 결과는 본원에 기술되는 바이오마커, 예를 들어 섹션 5.2 및 섹션 6에서 설명되고 예시된 것의 개선일 수 있다. 그러므로, 당업자는 본원에 제공되는 방법이 모든 이상에서 그리고 이하에서 설명되는 환자, 치료제, 투여 요법, 바이오마커, 및 치료 결과의 순열(permutations) 및 조합을 포함함을 이해할 것이다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법은 대상의 유방암의 치료에 사용된다. 몇몇 구현예에서, 유방암은 호르몬 수용체 양성 및 인간 표피 성장 인자 수용체 2 음성(HR+/HER2-) 유방암이다. 몇몇 구현예에서, 유방암은 에스트로겐 수용체(ER) 양성 및/또는 프로게스테론 수용체(PR) 양성, 및 HER2 음성이다. 몇몇 구현예에서, 유방암은 ER 양성, PR 양성, 및 HER2 음성이다. 몇몇 구현예에서, 유방암은 ER 양성 및 HER2 음성이다. 몇몇 구현예에서, 유방암은 PR 양성 및 HER2 음성이다. 몇몇 구현예에서, 예를 들어 HR+/HER2- 유방암, ER 양성, PR 양성 및 HER2 음성 유방암, ER 양성 및 HER2 음성 유방암, PR 양성 및 HER2 음성 유방암을 포함하는, 유방암은 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로나 세포학적으로 모두 확인된다. 몇몇 구현예에서, 조직학적, 세포학적, 또는 조직학적 및 세포학적 확인 모두는 가장 최근에 분석된 조직을 기반으로 하는 미국 임상 종양 학회/미국 병리 학회(ASCO/CAP) 지침에 따라 수행된다.
몇몇 구현예에서, 호르몬 수용체 양성 및 인간 표피 성장 인자 수용체 2 음성(HR+/HER2-) 유방암은 국소 진행성 또는 전이성 유방암이다. 몇몇 구현예에서, ER 양성 및/또는 프로게스테론 수용체(PR) 양성 및 HER2 음성 유방암은 국소 진행성 또는 전이성 유방암이다. 몇몇 구현예에서, ER 양성, PR 양성 및 HER2 음성 유방암은 국소 진행성 또는 전이성 유방암이다. 몇몇 구현예에서, ER 양성 및 HER2 음성 유방암은 국소 진행성 또는 전이성 유방암이다. 몇몇 구현예에서, PR 양성 및 HER2 음성 유방암은 국소 진행성 또는 전이성 유방암이다. 몇몇 구현예에서, 예를 들어 HR+/HER2- 유방암, ER 양성, PR 양성, 및 HER2 음성 유방암, ER 양성 및 HER2 음성 유방암, PR 양성 및 HER2 음성 유방암을 포함하는, 국소 진행성 또는 전이성 유방암은 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로나 세포학적으로 모두 확인된다. 몇몇 구현예에서, 이러한 조직학적, 세포학적, 또는 조직학적 및 세포학적 확인 모두는 가장 최근에 분석된 조직을 기반으로 하는 미국 임상 종양 학회/미국 병리 학회(ASCO/CAP) 지침에 따라 수행된다.
몇몇 구현예에서, 유방암을 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 전이성 또는 국소 진행성 환경(setting)에서 ≥ 1 라인의 내분비 요법 및 사이클린 의존성 키나제(CDK) 4/6 억제제를 받았다. 몇몇 구현예에서, 유방암을 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 임의의 환경에서 탁산 또는 안트라사이클린으로 사전 치료를 받았다. 몇몇 구현예에서, 유방암을 갖고, 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 유방암 감수성 유전자(BRCA) 1 또는 2에 유해한 생식계열 돌연변이를 가지며, 폴리 ADP 리보스 폴리머라제(PARP) 억제제로 치료를 받았음에 틀림없다.
몇몇 특정 구현예에서, 여기에 제공된 방법으로 치료받은 대상은 가장 최근에 분석된 조직을 기반으로 한 미국 임상 종양 학회/미국 병리 학회(ASCO/CAP) 지침에 따라, ER 양성 및/또는 프로게스테론 수용체(PR) 양성 및 HER2 음성으로 정의되는, 조직학적 또는 세포학적으로 확인된 HR+/HER2 유방암을 갖고; 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖고; 전이성 또는 국소 진행성 환경에서 ≥ 1 라인의 내분비요법 및 사이클린 의존성 키나제(CDK) 4/6 억제제를 받았고; 어떤 환경에서든 탁산 또는 안트라사이클린으로 사전 치료를 받은 적이 있으며; 및/또는 유방암 감수성 유전자(BRCA) 1 또는 2에 유해한 생식계열 돌연변이가 가지며, 폴리 ADP 리보스 폴리머라제(PARP) 억제제로 치료를 받았음에 틀림없다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법은 대상의 삼중 음성 유방암(TNBC)의 치료에 사용된다. 몇몇 구현예에서, TNBC는 조직학적 및/또는 세포학적으로 확인된 TNBC이다. 몇몇 구현예에서, TNBC는 가장 최근에 분석된 조직에 기초한 ASCO/CAP 지침에 따라 TNBC 조직학(ER-음성/PR-음성/HER2-음성)에 따라 결정된다. 몇몇 구현예에서, TNBC는 국소 진행성 또는 전이성이다. 몇몇 구현예에서, TNBC를 갖고, 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 ≥ 2 라인의 전신 요법을 받았다. 몇몇 구현예에서, TNBC를 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 임의의 환경에서 탁산을 포함하는 ≥ 2 라인의 전신 요법을 받았다. 몇몇 구현예에서, TNBC를 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 BRCA1, BRCA2, 또는 BRCA1 및 BRCA2 둘 모두에서 유해한 생식계열 돌연변이를 갖는다. 몇몇 구현예에서, TNBC를 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 PARP 억제제로 치료받은 적이 있다. 몇몇 구현예에서, TNBC에 대해 본원에 제공된 방법에 의해 치료되는 대상은 상기 단락에 기재된 특성의 임의의 순열 또는 조합을 갖는다.
몇몇 구현예에서, 여기에 제공된 방법으로 치료받은 대상은 가장 최근에 분석된 조직을 기반으로 한 ASCO/CAP 지침에 따라 명백한 TNBC 조직학(ER-음성/PR-음성/HER2-음성)으로 정의되는, 조직학적 또는 세포학적으로 확인된 TNBC를 갖고; 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖고; 임의의 환경에서의 탁산을 포함하는, ≥ 2 라인의 전신 요법을 받았고; BRCA1 또는 BRCA2 또는 둘 다에 유해한 생식계열 돌연변이를 갖고; 및/또는 PARP 억제제로 치료되었다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법은 대상의 편평 비-소세포 폐암(NSCLC)의 치료에 사용된다. 몇몇 구현예에서, 편평 NSCLC는 조직학적으로 및/또는 세포학적으로 확인된 편평 NSCLC이다. 몇몇 구현예에서, 편평 NSCLC는 국소 진행성 또는 전이성이다. 몇몇 구현예에서, 편평 NSCLC를 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 예를 들어 완치 후 12 개월 내에 재발이 발생한 경우, 보조 환경에서 투여되는 백금 요법을 포함하여, 백금-기반 요법 후 진행 또는 재발되었다. 몇몇 구현예에서, 편평 NSCLC를 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료받은 대상은 대상의 종양 PD-1 또는 PD-L1 발현 및 국소 치료 지침에 기반하여 적격한 경우, 항-프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1) 또는 항-프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)을 사용한 사전 요법을 받은 적이 있다.
몇몇 특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 편평 NSCLC를 갖고; 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖고; 예컨대, 완치 후 12 개월 이내에 재발이 발생한 경우, 요법으로 간주되는 보조 환경에서 투여된 백금 요법을 포함하는 백금-기반 요법 후 진행되거나 재발하였고; 및/또는 대상의 종양 PD-1 또는 PD-L1 발현 및 국소 치료 지침에 기초하여 적격인 경우, 항-프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1) 또는 항-프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)을 사용한 사전 요법을 받은 적이 있다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법은 대상의 비-편평 NSCLC의 치료에 사용된다. 몇몇 구현예에서, 편평 NSCLC는 조직학적으로 및/또는 세포학적으로 확인된 편평 NSCLC이다. 몇몇 구현예에서, 편평 NSCLC은 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 야생형 및 역형성 림프종 키나제(ALK) 야생형이다. 몇몇 구현예에서, 편평 NSCLC는 지역 실험실 표준에 의해 EGFR 야생형 및 ALK 야생형이다. 몇몇 구현예에서, 비편평 NSCLC는 국소 진행성 또는 전이성이다. 몇몇 구현예에서, 편평 NSCLC를 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 예를 들어, 완치 후 12개월 내에 재발이 발생하는 경우, 보조 환경에서 투여되는 백금 요법을 포함하는, 전이성 또는 국부적 진행성 환경에서 백금 기반 요법 후에 진행되거나 재발되었다. 몇몇 구현예에서, 편평 NSCLC를 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 대상의 종양 PD-1 또는 PD-L1 발현 및 국소 치료 지침에 기초하여 적격한 경우, 항-PD-1 또는 항-PD-L1 요법을 받았다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 국소 실험실 표준에 의해 EGFR 야생형 및 ALK 야생형인 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 비편평 NSCLC를 갖고; 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖고; 예를 들어, 완치 후 12개월 내에 재발이 발생하는 경우, 보조 환경에서 투여되는 백금 요법을 포함하는, 전이성 또는 국부적 진행성 환경에서 백금 기반 요법 후에 진행되거나 재발되었고; 대상의 종양 PD-1 또는 PD-L1 발현 및 국소 치료 지침에 기초하여 적격한 경우, 항-PD-1 또는 항-PD-L1 요법을 받았다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법은 대상의 두경부암의 치료에 사용된다. 몇몇 구현예에서, 두경부암은 조직학적으로 및/또는 세포학적으로 확인된 두경부암이다. 몇몇 구현예에서, 두경부암은 국소 진행성 또는 전이성이다. 몇몇 구현예에서, 두경부암을 갖고, 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 전이성 또는 국소 진행성 환경에서 백금 함유 요법 후 진행되거나 재발되었으며, 이 백금 함유 요법은 대상이 완치 후 6개월 내에 재발하거나 진행되지 않는 한, 치료 환경에서 다중 모드 요법의 일부로서 투여된 백금 요법을 포함하지 않는다. 몇몇 구현예에서, 두경부암을 갖고, 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 대상의 종양 PD-1 또는 PD-L1 발현 및 국소 치료 지침에 기초하여 적격한 경우, 항-PD-1 또는 항-PD-L1 요법을 받았다.
몇몇 특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 두경부암을 갖고; 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖고; 전이성 또는 국소적으로 진행된 환경에서 백금 함유 요법 후 진행되거나 재발하였고, 이는 대상이 완치 후 6개월 내에 재발하거나 진행되지 않은 한 치유 환경에서 다중 모드 요법의 일부로 투여된 백금 요법을 포함하지 않으며; 대상의 종양 PD-1 또는 PD-L1 발현 및 국소 치료 지침에 기초하여 적격한 경우, 항-PD-1 또는 항-PD-L1 요법을 받았다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법은 대상의 위암 또는 식도암의 치료에 사용된다. 몇몇 구현예에서, 위암 또는 식도암은 조직학적으로 및/또는 세포학적으로 확인된 위암 또는 식도암이다. 몇몇 구현예에서, 위암 또는 식도암은 국소 진행성 또는 전이성이다. 몇몇 구현예에서, 두경부암을 갖고, 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 전이성 질환 또는 국소 진행성 질환에 대한 백금 및 플루오로피리미딘을 포함하는 화학요법 치료 후에 진행되거나 재발되었고, 상기 화학요법 요법은 대상이 완치 후 6개월 이내에 재발 또는 진행되지 않은 경우, 선행 요법 또는 보조 요법을 포함하지 않는다. 몇몇 구현예에서, 두경부암을 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 대상이 HER2 양성 암을 갖는 경우, HER2 지시 요법을 받았다. 몇몇 구현예에서, 두경부암을 갖고 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 HER2 양성 암을 갖고 HER2 지시 요법을 받은 적이 있다.
몇몇 특정 구현예에서, 본원에 제공되는 방법으로 치료된 대상은 조직학적 또는 세포학적으로 확인된 위암 또는 식도암을 갖고; 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖고; 전이성 질환 또는 국소 진행성 질환에 대해 플루오로피리미딘 및 백금을 포함하는 화학요법 치료 후에 진행되거나 재발되었고, 이 화학요법 치료는 대상이 완치 후 6개월 이내에 재발하거나 진행하지 않는 한 선행보조 또는 보조 요법을 포함하지 않으며; HER2 양성 암을 갖고, HER2 지시 요법을 받은 적이 있다. 또 다른 특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법으로 치료된 대상은 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 위암 또는 식도암을 갖고; 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖고; 전이성 질환 또는 국소 진행성 질환에 대해 플루오로피리미딘 및 백금을 포함하는 화학요법 치료 후 진행되거나 재발하였고; 이 화학요법 치료는 대상이 완치 후 6개월 내에 재발하거나 진행되지 않는 한, 선행 요법 또는 보조 요법을 포함하지 않는다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법은 191P4D12 RNA를 발현하거나, 191P4D12 단백질을 발현하거나, 또는 191P4D12 RNA 및 191P4D12 단백질 모두를 발현하는 암을 갖는 대상을 치료하는데 사용된다. 특정 구현예에서, 본원에서 제공되는 방법은 예를 들어 편평 NSCLC, 비-편평 NSCLC, 위(GEJ)암, 식도암, HNSCC, NSCLC-선암종, 두경부암(예컨대, 두경부암-편평), 및 유방암(HR+/HER2- 유방암 및 TNBC를 포함)을 포함하는, 191P4D12 RNA 및 191P4D12 단백질 모두를 발현하는 암을 갖는 대상을 치료하는데 사용된다. 몇몇 구현예에서, 암의 191P4D12 RNA 발현은 폴리뉴클레오티드 혼성화, 시퀀싱(서열의 상대적 풍부함 평가), 및/또는 PCR(RT-PCR 포함)에 의해 결정된다. 몇몇 구현예에서, 암의 191P4D12 단백질 발현은 IHC, 형광-활성화 세포 분류(FACS) 분석, 및/또는 웨스턴 블로팅에 의해 결정된다. 몇몇 구현예에서, 암의 191P4D12 단백질 발현은 IHC의 2가지 방법에 의해 결정된다.
특정 구현예에서, 본원에 제공되는 방법은 암을 갖는 대상을 치료하기 위해 사용되며, 여기서 암은 191P4D12 RNA를 발현하거나, 191P4D12 단백질을 발현하거나, 또는 191P4D12 RNA 및 191P4D12 단백질을 모두 발현하고, 여기서 암은 미세소관 중합을 차단하는 세포독성제(Vinca 및 MMAE)에 민감하다. 발현하거나, 특정 구현예에서, 본원에 제공되는 방법은 191P4D12 RNA 및 191P4D12 단백질을 모두 발현하고, 미세소관 중합을 차단하는 세포독성제(예컨대, Vinca 및 MMAE)에 민감하며, 암을 갖는 대상을 치료하는데 사용되며, 이 암은 예를 들어 편평 NSCLC, 비-편평 NSCLC, 위(GEJ) 암, 식도암, HNSCC, NSCLC-선암종, 두경부암(예컨대, 두경부암-편평), 및 유방암(HR+/ HER2- 유방암 및 TNBC를 포함)을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 방법으로 치료될 수 있는 대상은 예를 들어, 호르몬 수용체 양성 및 인간 표피 성장 인자 수용체 2 음성(HR+/HER2-) 유방암을 갖는 대상, ER 음성, PR 음성 및 HER2 음성(ER-/PR-/HER2-) 유방암을 갖는 대상, NSCLC를 갖는 대상, 비편평 NSCLC를 갖는 대상,두부암을 갖는 대상, 경부암을 갖는 대상, 두경부암을 갖는 대상, 위암을 갖는 대상, 식도암을 갖는 대상, 및/또는 위암 또는 식도암을 갖는 대상을 포함하는, 고형 종향을 갖는 대상이다.
특정 구현예에서, 본원에 제공되는 방법으로 치료될 수 있는 대상은 국소 진행성, 전이성(전이성 악성 포함), 및 국소 진행성 및 전이성 고형 종양 둘 다인, 고형 종양을 갖는 대상을 더욱 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 방법에서 치료될 수 있는 고형 종양은 국소 진행성 HR+/HER2- 유방암, 국소 진행성 ER-/PR-/HER2- 유방암, 국소 진행성 NSCLC, 국소 진행성 비편평 NSCLC, 국소 진행성 두부암, 국소 진행성 경부암, 국소 진행성 두경부암, 국소 진행성 위암, 국소 진행성 식도암, 및/또는 국소 진행성 위암 및 식도암이다. 다른 구현예에서, 본원에 제공되는 방법에서 치료될 수 있는 고형 종양은 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) HR+/HER2- 유방암, 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) ER-/PR-/HER2- 유방암, 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) NSCLC, 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 비편평 NSCLC, 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 두부암, 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 경부암, 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 두경부암, 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 위암, 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 식도암, 및/또는 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 위암 및 식도암이다.
몇몇 구현예에서, 국소 진행성, 전이성(전이성 악성을 포함), 및 국소 진행성 및 전이성 고형 종양 모두는 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 모두 확인된다.
몇몇 구현예에서, 본원에서 제공되는 방법으로 치료될 수 있는 대상은 암에 대한 하나 이상의 다른 치료 후에 진행되거나 재발하였다. 대상이 진행되거나 재발한 하나 이상의 치료는 예를 들어, 내분비 요법의 하나 이상의 라인, 사이클린 의존성 키나제(CDK) 4/6 억제제(전이성 또는 국소 진행성 환경 포함), 탁산 치료, 안트라사이클린 치료, 폴리 ADP 리보스 폴리머라제(PARP) 억제제, 백금 기반 요법, 프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1) 억제제 요법, 프로그래밍된세포 사멸-리간드 1(PD-L1)의 억제제, 플루오로피리미딘을 포함한 화학요법, HER2 지시 요법 및/또는 본 단락에 제공된 요법과 여기에 설명된 요법 중 2가지 이상의 임의의 순열 또는 조합을 포함한다.
특정 구현예에서, 본원에 제공되는 방법으로 치료될 수 있는 대상은 이전에 적어도 2, 3, 4, 5 또는 6 라인의 전신 요법을 받은 적이 있다. 이러한 전신 요법은 혈류를 통해 이동하고 몸 전체의 세포에 도달하고 영향을 미치는, 물질을 사용하는 모든 치료법이 될 수 있다. 이러한 전신 요법은 이전 단락에 설명된 것들일 수 있다. 일 구현예에서, 이러한 전신 요법은 탁산이다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 방법으로 치료될 수 있는 대상은 예를 들어, 이 단락 앞의 두 번째 단락에서 설명된 치료 중 임의의 것 또는 임의의 조합을 제한 없이 포함하는 다른 치료 후, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24개월 내에 암에 대한 다른 치료를 진행했거나 재발했다. 일부 특정 구현예에서, 대상은 백금 기반 요법 또는 플루오로피리미딘을 포함하는 화학요법 후 6개월 이내에 진행되거나 재발했다. 다른 특정 구현예에서, 대상은는 백금 기반 요법 후 6개월 이내에 진행되거나 재발하였다. 추가 구현예에서, 대상은 백금 기반 요법 후 12개월 이내에 진행되거나 재발하였다.
몇몇 구현예에서, 본원에서 제공되는 방법으로 치료될 수 있는 대상은 이미 암에 대한 하나 이상의 다른 치료를 받았다. 대상이 받은 하나 이상의 치료는, 예를 들어, 내분비 요법의 하나 이상의 라인, 사이클린 의존성 키나제(CDK) 4/6 억제제(전이성 또는 국소 진행성 환경 포함), 탁산 치료, 안트라사이클린 치료, 폴리 ADP 리보스 폴리머라제(PARP) 억제제, 백금 기반 요법, 프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1) 억제제를 사용한 요법, 프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)의 억제제, 플루오로피리미딘을 포함한 화학요법, HER2 지시 요법 및/또는 이 단락에 제공된 요법 및 여기에 설명된 요법 중 2가지 이상의 임의의 순열 또는 조합을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에서 제공되는 방법으로 치료될 수 있는 대상은 이전 단락에서 설명된 바와 같은 암에 대한 하나 이상의 다른 치료를 받았거나; 및 이 단락 앞 4번째 단락에 설명된 바와 같은 암에 대한 하나 이상의 다른 치료 후 진행되거나 또는 재발된 것 중 임의의 조합 또는 순열을 갖는다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 방법에서 치료될 수 있는 대상은 특정 표현형 또는 유전형 특징을 갖는다. 일 구현예에서, 대상은 에스트로겐 수용체(ER) 양성 및 HER2 음성인 HR+/HER2- 유방암을 갖는다. 일 구현예에서, 대상은 또한 프로게스테론 수용체(PR) 양성 및 HER2 음성인 HR+/HER2- 유방암을 갖는다. 일 구현예에서, 대상은 또한 에스트로겐 수용체(ER) 양성, 프로게스테론 수용체(PR) 양성 및 HER2 음성인 HR+/HER2- 유방암을 갖는다. 일 구현예에서, 대상은 유방암 감수성 유전자(BRCA)1, BRCA2, 또는 BRCA1 및 BRCA2 둘 모두에서 유해한 생식계열 돌연변이를 갖는다. 일 구현예에서, 대상은 ER 음성, PR 음성 및 HER2 음성(ER-/PR-/HER2-) 유방암을 갖는다. 일 구현예에서, 대상은 야생형 표피 성장 인자 수용체(EGFR)를 갖는다. 일 구현예에서, 대상은 야생형 역형성 림프종 키나제(ALK)를 갖는다. 일 구현예에서, 대상은 야생형 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 및 야생형 역형성 림프종 키나제(ALK) 둘 다를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 대상은 본원에 기재된 표현형 또는 유전형 특성의 임의의 순열 및 조합을 갖는다.
몇몇 구현예에서, 표현형 또는 유전형 특성은 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 둘 모두로 결정된다. 일 구현예에서, 에스트로겐 수용체(ER) 양성 및 HER2 음성인 HR+/HER2- 유방암은 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 둘 모두로 결정된다. 일 구현예에서, 프로게스테론 수용체(PR) 양성 및 HER2 음성인 HR+/HER2- 유방암은 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 둘 모두로 결정된다. 일 구현예에서, 에스트로겐 수용체(ER) 양성, 프로게스테론 수용체(PR) 양성 및 HER2 음성인 HR+/HER2- 유방암은 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 둘 모두로 결정된다. 일 구현예에서, 유방암 감수성 유전자(BRCA)1, BRCA2, 또는 BRCA1 및 BRCA2 둘 모두에 유해한 생식계열 돌연변이는 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 둘 모두로 결정된다. 일 구현예에서, ER 음성, PR 음성 및 HER2 음성(ER-/PR-/HER2-) 유방암은 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 둘 모두로 결정된다. 일 구현예에서, 야생형 표피 성장 인자 수용체(EGFR)는 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 둘 모두로 결정된다. 일 구현예에서, 야생형 역형성 림프종 키나제(ALK)는 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 둘 모두로 결정된다. 일 구현예에서, 야생형 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 및 야생형 역형성 림프종 키나제(ALK) 둘 모두는 조직학적으로, 세포학적으로, 또는 조직학적으로 및 세포학적으로 둘 모두로 결정된다.
본원에 제공되는 방법의 몇몇 구현예에서, 표현형 및/또는 유전형 특성의 조직학적 및/똔느 세포학적 결정은 가장 최근에 분석된 조직을 기반으로 한 미국 임상 종양 학회/미국 병리 학회(ASCO/CAP) 지침에 설명된 바와 같이 수행되고, 이는 전체가 참조로서 본원에 통합된다.
몇몇 구현예에서, 표현형 또는 유전형 특성은 차세대 시퀀싱(예컨대, Illumina, Inc의 NGS), DNA 혼성화 및/또는 RNA 혼성화를 포함하는 시퀀싱에 의해 결정된다. 일 구현예에서, 에스트로겐 수용체(ER) 양성 및 HER2 음성인 HR+/HER2- 유방암은 차세대 시퀀싱(예컨대, Illumina, Inc의 NGS), DNA 혼성화 및/또는 RNA 혼성화를 포함하는 시퀀싱에 의해 결정된다. 일 구현예에서, 프로게스테론 수용체(PR) 양성 및 HER2 음성인 HR+/HER2- 유방암은 차세대 시퀀싱(예컨대 Illumina, Inc의 NGS), DNA 혼성화 및/또는 RNA 혼성화를 포함하는 시퀀싱에 의해 결정된다. 일 구현예에서, 에스트로겐 수용체(ER) 양성, 프로게스테론 수용체(PR) 양성 및 HER2 음성인 HR+/HER2- 유방암은 차세대 시퀀싱(예: Illumina, Inc의 NGS), DNA 혼성화 및/또는 RNA 혼성화를 포함하는, 시퀀싱에 의해 결정된다. 일 구현예에서, 유방암 감수성 유전자(BRCA)1, BRCA2, 또는 BRCA1 및 BRCA2 모두에 유해한 생식계열 돌연변이는 차세대 시퀀싱(예: Illumina, Inc의 NGS), DNA 혼성화 및/또는 RNA 혼성화를 포함하는, 시퀀싱에 의해 결정된다. 일 구현예에서, ER 음성, PR 음성 및 HER2 음성(ER-/PR-/HER2-) 유방암은 차세대 시퀀싱(예: Illumina, Inc의 NGS), DNA 혼성화 및/또는 RNA 혼성화를 포함하는, 시퀀싱에 의해 결정된다. 일 구현예에서, 야생형 표피 성장 인자 수용체(EGFR)는 차세대 시퀀싱(예: Illumina, Inc의 NGS), DNA 혼성화 및/또는 RNA 혼성화를 포함하는, 시퀀싱에 의해 결정된다. 일 구현예에서, 야생형 역형성 림프종 키나제(ALK)는 차세대 시퀀싱(예: Illumina, Inc의 NGS), DNA 혼성화 및/또는 RNA 혼성화를 포함하는, 시퀀싱에 의해 결정된다. 일 구현예에서, 야생형 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 및 야생형 역형성 림프종 키나제(ALK) 모두는 차세대 시퀀싱(예: Illumina, Inc의 NGS), DNA 혼성화 및/또는 RNA 혼성화를 포함하는, 시퀀싱에 의해 결정된다.
몇몇 구현예에서, 대상이 받았거나 또는 이로부터 대상의 암이 진행되었거나 재발한, 암에 대한 하나 이상의 다른 치료법은 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제이다. 특정 구현예에서, PD-1 억제제는 펨브롤리주맙 또는 니볼루맙이다. 다른 구현예에서, PD-L1 억제제는 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 더발루맙으로 이루어진 군으로부터 선택된다. PD-1/PD-L1 억제제의 다른 예는 미국 특허 번호 7,488,802; 7,943,743; 8,008,449; 8,168,757; 8,217,149 및 PCT 특허 출원 공보 WO2003042402, WO2008156712, WO2010089411, WO2010036959, WO2011066342, WO2011159877, WO2011082400, 및 WO2011161699에 기술된 것들을 포함하나, 이에 제한되지 않으며, 이들 모두는 그 전체가 본원에 통합된다.
특정 구현예에서, PD-1 억제제는 항-PD-1 항체이다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체는 BGB-A317, 니볼루맙(ONO-4538, BMS-936558 또는 MDX1106으로도 공지됨) 또는 펨브롤리주맙(MK-3475, SCH 900475 또는 람브롤리주맙으로도 공지됨)이다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙이다. 니볼루맙은 인간 IgG4 항-PD-1 모노클로날 항체이며, 상표명 Opdivo™로 판매된다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙이다. 펨브롤리주맙은 인간화 모노클로날 IgG4 항체이며 상품명 Keytruda™로 판매된다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 인간화 항체인 CT-011이다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 융합 단백질인 AMP-224이다. 또 다른 구현예에서, PD-1 항체는 BGB-A317이다. BGB-A317은, Fc 감마 수용체 I에 결합하는 능력이 특이적으로 엔지니어링되고, 높은 친화성의 PD-1에 고유한 결합 시그니처 및 우수한 표적 특이성을 갖는,모노클로날 항체이다.
추가 구현예에서, PD-L1 억제제는 항-PD-L1 항체이다. 일 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 MEDI4736(더발루맙)이다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 BMS-936559(MDX-1105-01로도 공지됨)이다. 또 다른 구현예에서, PD-L1 억제제는 아테졸리주맙(MPDL3280A 및 Tecentriq®으로도 공지됨)이다.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 방법에서 치료될 수 있는 대상은 포유동물이다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 방법에서 치료될 수 있는 대상은 인간이다.
5.3 항-191P4D12 항체 약물 컨쥬게이트
일반적으로, 본원에 제공된 방법은 본원 및/또는 그 전체가 참조로 여기에 포함되는, 미국 특허 8,637,642에서, 설명된 항-191P4D12 ADC를 활용한다. 본원에 제공된 항-191P4D12 항체 약물 컨쥬게이트는 세포독성제의 하나 이상의 유닛(또는 약물 유닛)에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 세포독성제(또는 약물 유닛)는 직접적으로 또는 링커 유닛(LU)을 통해 공유적으로 연결될 수 있다.
몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트 화합물은 하기 화학식:
L - (LU-D)p (I)
또는 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 갖고; 여기서
L은 하기 섹션 5.3.1에 제공된 바와 같은 예를 들어 항-191P4D12 항체와 같은 항체 유닛, 또는 그의 항원 결합 단편이고, 및
(LU-D)는 링커 유닛-약물 유닛 모이어티이며, 여기서:
LU-는 링커 유닛이고, 및
D는 표적 세포에 대해 세포 증식 억제 또는 세포 독성 활성을 갖는 약물 유닛이고; 및
p는 1에서 20 사이의 정수이다.
몇몇 구현예에서, p는 1 내지 10, 1 내지 9, 1 내지 8, 1 내지 7, 1 내지 6, 1 내지 5, 1 내지 4, 1 내지 3, 또는 1 내지 2의 범위이다. 몇몇 구현예에서, p는 2 내지 10, 2 내지 9, 2 내지 8, 2 내지 7, 2 내지 6, 2 내지 5, 2 내지 4 또는 2 내지 3의 범위이다. 다른 구현예에서, p는 약 1이다. 다른 구현예에서, p는 약 2이다. 다른 구현예에서, p는 약 3이다. 다른 구현예에서, p는 약 4이다. 다른 구현예에서, p는 약 5이다. 다른 구현예에서, p는 약 6이다. 다른 구현예에서, p는 약 7이다. 다른 구현예에서, p는 약 8이다. 다른 구현예에서, p는 약 9이다. 다른 구현예에서, p는 약 10이다.
몇몇 구현예에서,
항체 약물 컨쥬게이트 화합물은 하기 화학식,
L - (Aa-Ww-Yy-D)p (II)
또는 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 가지며, 여기서:
L은 하기 섹션 5.3.1에 제공된 바와 같은 항체 유닛, 예를 들어 항-191P4D12 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고; 및
-Aa-Ww-Yy-는 링커 유닛(LU)이며, 여기서:
-A-는 스트레처 유닛이며,
a는 0 또는 1이고,
각각의 -W-는 독립적으로 아미노산 유닛이고,
w는 0 내지 12 범위의 정수이고,
-Y-는 자가 희생(self-immolative) 스페이서 유닛이며,
y는 0, 1 또는 2이고;
D는 표적 세포에 대해 세포 증식 억제 또는 세포 독성 활성을 갖는 약물 유닛이고; 및
p는 1에서 20의 정수이다.
몇몇 구현예에서, a는 0 또는 1이고, w는 0 또는 1이고, y는 0, 1 또는 2이다. 몇몇 구현예에서, a는 0 또는 1이고, w는 0 또는 1이고, y는 0 또는 1이다. 몇몇 구현예에서, p는 1 내지 10, 1 내지 9, 1 내지 8, 1 내지 7, 1 내지 6, 1 내지 5, 1 내지 4, 1 내지 3, 또는 1 내지 2의 범위이다. 몇몇 구현예에서, p는 2 내지 8, 2 내지 7, 2 내지 6, 2 내지 5, 2 내지 4 또는 2 내지 3의 범위이다. 다른 구현예에서, p는 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이다. 몇몇 구현예에서, p는 2 또는 4이다. 몇몇 구현예에서, w가 0이 아닌 경우, y는 1 또는 2이다. 몇몇 구현예에서, w가 1 내지 12인 경우, y는 1 또는 2이다. 몇몇 구현예에서, w는 2 내지 12이고 y는 1 또는 2이다. 몇몇 구현예에서, a는 1이고 w 및 y는 0이다.
복수의 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 조성물의 경우, 약물 로딩은 항체 유닛당 약물 분자의 평균 수인 p로 표시된다. 약물 로딩은 항체당 1 내지 20개의 약물(D) 범위일 수 있다. 컨쥬게이션 반응을 준비하는 항체당 평균 약물 수는 질량 분광법, ELISA 분석 및 HPLC와 같은 종래의 수단에 의해 특징지어질 수 있다 p에 대한 항체 약물 컨쥬게이트의 정량적 분포도 결정될 수 있다. 어떤 경우에, 균질한 항체 약물 컨쥬게이트의 분리, 정제 및 특성화는, 여기서 p는 다른 약물 로딩의 항체 약물 컨쥬게이트의 특정 값이며, 역상 HPLC 또는 전기영동과 같은 수단에 의해 달성될 수 있다. 예시적인 구현예에서, p는 2 내지 8이다.
5.3.1 항-191P4D12 항체 또는 항원 결합 단편
일 구현예에서, 191P4D12 관련 단백질에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:2의 아미노산 서열을 포함하는 191P4D12 단백질에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항원 결합 단편이다(도 1a 참조). 191P4D12 단백질을 코딩하는 상응하는 cDNA는 SEQ ID NO:1의 서열을 갖는다(도 1a 참조).
SEQ ID NO:2의 아미노산 서열을 포함하는 191P4D12 단백질에 특이적으로 결합하는 항체는 다른 191P4D12 관련 단백질에 결합할 수 있는 항체를 포함한다. 예를 들어, SEQ ID NO:2의 아미노산 서열을 포함하는 191P4D12 단백질에 결합하는 항체는 191P4D12 변이체 및 이의 상동체 또는 유사체와 같은, 191P4D12 관련 단백질에 결합할 수 있다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항-191P4D12 항체는 모노클로날 항체이다.
몇몇 구현예에서, 항체는 도 1b 및 c에 도시된 바와 같이, SEQ ID NO:4의 아미노산 서열(SEQ ID NO:3의 cDNA 서열)을 포함하는 중쇄 및/또는 SEQ ID NO: 6의 아미노산 서열(SEQ ID NO;5의 cDNA 서열)을 포함하는 경쇄를 포함한다.
몇몇 구현예에서, 항-191P4D12 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22에 제시된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역(SEQ ID NO:7의 20번째 아미노산(글루탐산)부터 136번째 아미노산(세린)까지의 아미노산 서열임) 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역(SEQ ID NO:8의 23번째 아미노산(아스파트산)부터 130번째 아미노산(아르기닌)까지의 아미노산 서열임)을 포함한다. SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:7 및 SEQ ID NO:8은 도 1d 내지 도 e에 도시된 바와 같고, 아래에 나열된다:
SEQ ID NO:22
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYNMNWVRQAPGKGLEWVSYISSSSSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLSLQMNSLRDEDTAVYYCARAYYYGMDVWGQGTTVTVSS
SEQ ID NO:23
DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISGWLAWYQQKPGKAPKFLIYAASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPPTFGGGTKVEIKR
SEQ ID NO:7
MELGLCWVFLVAILEGVQCEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYNMNWVRQAPGKGLEWVSYISSSSSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLSLQMNSLRDEDTAVYYCARAYYYGMDVWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
SEQ ID NO:8
MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRCDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISGWLAWYQQKPGKAPKFLIYAASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 위에서 설명한 바와 같이, CDR 영역은 당업자에게 잘 알려져 있으며, 잘 알려진 넘버링 시스템에 의해 정의되었다. 예를 들어, Kabat 상보성 결정 영역(CDR)은 서열 가변성을 기반으로 하며 가장 일반적으로 사용됩니다(예를 들어, Kabat et al., 참조). Chothia는 대신 구조적 루프의 위치를 지칭한다(예를 들어, Chothia and Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196:901-17 참조). Chothia CDR-H1 루프의 말단은, Kabat 넘버링 규범을 사용하여 넘버링할 때, 루프의 길이에 따라 H32 및 H34 사이에서 달라진다(이는 Kabat 넘버링 체계가 H35A 및 H35B에 삽입을 배치하기 때문이다; 35A 및 35B가 존재하지 않는 경우, 루프는 32에서 끝나고; 35A만 존재하는 경우, 루프는 33에서 끝나며; 35A 및 35B가 모두 존재하는 경우, 루프는 34에서 끝난다). AbM 초가변 영역은 Kabat CDR과 Chothia 구조 루프 사이의 절충안을 나타내며, Oxford Molecular의 AbM 항체 모델링 소프트웨어에서 사용된다. (예를 들어, Antibody Engineering Vol. 2(Kontermann and Dubel eds., 2d ed. 2010) 참조). "접촉" 초가변 영역은 사용 가능한 복잡한 결정 구조의 분석을 기반으로 한다. 개발되어 널리 채택되어 온 또 다른 범용적인 넘버링 시스템은 ImMunoGeneTics(IMGT) Information System®이다(Lafranc et al., 2003, Dev. Comp. Immunol. 27(1):55-77). IMGT는 인간 및 기타 척추동물의 주요 조직적합성 복합체(MHC), 면역글로불린(IG), 및 T-세포 수용체(TCR)를 전문으로 하는 통합 정보 시스템이다. 여기서, CDR은 아미노산 서열 및 경쇄 또는 중쇄 내 위치 모두를 의미한다. 면역글로불린의 구조 내에서 CDR의 "위치"로서 가변 도메인은 종 사이에 보존되며, 루프라고 하는 구조에 존재하며, 구조적 특징에 따라 가변 도메인 서열을 정렬하는 넘버링 시스템을 사용하여, CDR 및 프레임워크 잔기는 쉽게 식별된다. 상기 정보는 한 종의 면역글로불린에서 일반적으로 인간 항체의, 수용체 프레임워크로 CDR 잔기를 이식하고 대체하는데 사용될 수 있다. 추가 넘버링 시스템(AHon)은 Honegger and Pluckthun, 2001, J. Mol. Biol. 309: 657-70에서 개발되었다. 예를 들어, Kabat 넘버링 및 IMGT 고유 넘버링 시스템을 포함하는 넘버링 사이의 대응은 당해 기술 분야의 당업자에게 잘 알려져 있다(예를 들어, Kabat, supra; Chothia and Lesk, supra; Martin, supra; Lefranc et al., supra 참조). 이들 초가변 영역 또는 CDR 각각으로부터의 잔기는 상기 표 1에 기재되어 있다.
몇몇 구현예에서, 항-191P4D12 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 Kabat 넘버링에 따라 SEQ ID NO:22에 제시된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 Kabat 넘버링에 따라 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 항-191P4D12 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 AbM 넘버링에 따른 SEQ ID NO:22에 기재된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 AbM 넘버링에 따른 SEQ ID NO:23에 기재된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
다른 구현예에서, 항-191P4D12 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 Chothia 넘버링에 따른 SEQ ID NO:22에 기재된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 Chothia 넘버링에 따른 SEQ ID NO:23에 기재된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
다른 구현예에서, 항-191P4D12 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 Contact 넘버링에 따른 SEQ ID NO:22에 기재된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 Contact 넘버링에 따른 SEQ ID NO:23에 기재된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
또 다른 구현예에서, 항-191P4D12 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 IMGT 넘버링에 따른 SEQ ID NO:22에 기재된 중쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 IMGT 넘버링에 따른 SEQ ID NO:23에 기재된 경쇄 가변 영역의 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
상기 기재된 바와 같이, 상이한 넘버링 시스템에 따른 CDR 서열은 예컨대, 항원 수용체 넘버링 및 수용체 분류(ANARCI)에 의해 제공되는 것과 같은 온라인 툴을 이용하여 쉽게 결정될 수 있다. 예를 들어, ANARCI에 의해 결정된 Kabat 넘버링에 따른 SEQ ID NO:22 내의 중쇄 CDR 서열 및 SEQ ID NO:23 내의 경쇄 CDR 서열은 하기 표 4에 열거되어 있다.
SEQ ID NO:22의 VH SEQ ID NO:23의 VL
CDR1 SYNMN (SEQ ID NO:9) RASQGISGWLA (SEQ ID NO:12)
CDR2 YISSSSSTIYYADSVKG (SEQ ID NO:10) AASTLQS (SEQ ID NO:13)
CDR3 AYYYGMDV (SEQ ID NO:11) QQANSFPPT (SEQ ID NO:14)
또 다른 예로서, ANARCI에 의해 결정된 IMGT 넘버링에 따른 SEQ ID NO:22 내의 중쇄 CDR 서열 및 SEQ ID NO:23 내의 경쇄 CDR 서열은 하기 표 5에 열거되어 있다.
SEQ ID NO:22의 VH SEQ ID NO:23의 VL
CDR1 GFTFSSYN (SEQ ID NO:16) QGISGW (SEQ ID NO:19)
CDR2 ISSSSSTI (SEQ ID NO:17) AAS (SEQ ID NO:20)
CDR3 ARAYYYGMDV (SEQ ID NO:18) QQANSFPPT (SEQ ID NO:21)
몇몇 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H1, SEQ ID NO:10의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H2, SEQ ID NO:11의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H3, SEQ ID NO:12의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L1, SEQ ID NO:13의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L2, 및 SEQ ID NO:14의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L3를 포함한다.
몇몇 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:16의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H1, SEQ ID NO:17의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H2, SEQ ID NO:18의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H3, SEQ ID NO:19의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L1, SEQ ID NO:20의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L2, 및 SEQ ID NO:21의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L3을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 항체는 SEQ ID NO:7의 20번째 아미노산(글루탐산) 내지 466번째 아미노산(라이신) 범위의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 SEQ ID NO:8의 23번째 아미노산(아스파트산) 내지 236번째 아미노산(시스테인) 범위의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 기재된 항체의 아미노산 서열 변형(들)이 고려된다. 예를 들어, 항체의 결합 친화도 및/또는 특이성, 열안정성, 발현 수준, 이펙터 기능, 글리코실화, 감소된 면역원성 또는 용해도를 포함하나, 이에 제한되지 않는, 기타 생물학적 특성을 최적화하는 것이 바람직할 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 항체에 더하여, 항체 변이체는 예를 들어, 적절한 뉴클레이티드 변화를 코딩 DNA에 도입하거나 및/또는 원하는 항체 또는 폴리펩티드의 합성에 의해 제조될 수 있는 것으로 고려된다. 아미노산이 변하는 것을 인식하는 당업자는 글리코실화 부위의 수 또는 위치 변경 또는 멤브레인 고정 특성과 같은 항체의 번역 후 과정을 변경할 수 있다.
몇몇 구현예에서, 본원에서 제공되는 항체는 예를 들어, 항체에 대한 임의의 타입의 분자의 공유 부착에 의해 화학적으로 변형된다. 항체 유도체는 예를 들어 글리코실화, 아세틸화, 페길화, 인산화, 아미드화, 공지의 보호/차단 그룹에 의한 유도체화, 단백질 분해 절단, 세포 리간드 또는 다른 단백질에 대한 연결 등에 의해, 화학적으로 변형된 항체를 포함할 수 있다. 수많은 화학적 변형 중 임의의 것은 특정 화학 절단, 아세틸화, 제형화, 투니카마이신의 대사 합성 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는, 공지의 기술에 의해 수행될 수 있다. 추가로, 항체는 하나 이상의 비-전형적 아미노산을 함유할 수 있다.
변이는 원래의 항체 또는 폴리펩티드와 비교하여 아미노산 서열의 변화를 결과하는 단일 도메인 항체 또는 폴리펩티드를 코딩하는 하나 이상의 코돈의 치환, 결실, 또는 삽입일 수 있다. 아미노산 치환은 예컨대 보존적 아미노산 대체와 같이, 류신을 세린으로 대체하는 것과 같이, 하나의 아미노산을 유사한 구조 및/또는 화학적 특성을 포함하는 다른 아미노산으로 대체한 결과일 수 있다. 당업자에게 공지된 표준 기술은, 예를 들어, 아미노산 치환을 결과하는 PCR-매개 돌연변이 유발 및 부위-지향적 돌연변이 유발을 포함하는, 본원에 제공된 분자를 코딩하는 뉴클레오티드 서열에 돌연변이를 도입하는데 사용될 수 있다. 삽입 또는 결실은 선택적으로 약 1 내지 5개 아미노산 범위일 수 있다. 특정 구현예에서, 치환, 결실, 삽입은 원래 분자에 비해 25개 미만의 아미노산 치환, 20개 미만의 아미노산 치환, 15개 미만의 아미노산 치환, 10개 미만의 아미노산 치환, 5개 미만의 아미노산 치환, 4개 미만의 아미노산 치환, 3개 미만의 아미노산 치환, 또는 2개 미만의 아미노산 치환을 포함한다. 특정 구현예에서, 치환은 하나 이상의 예측된 비-필수 아미노산 잔기에서 이루어진 보존적 아미노산 치환이다. 허용된 변이는 서열 내 아미노산의 삽입, 결실, 또는 치환을 체계적으로 수행하고, 생성된 변이체를 모 항체에 의해 나타나는 활성에 대해 시험함으로써 결정될 수 있다.
아미노산 서열 삽입은 단일 또는 다중 아미노산 잔기의 서열내 삽입 뿐만 아니라 하나의 잔기에서 다중 잔기를 함유하는 폴리펩티드까지의 길이 범위의 아미노- 및/또는 카르복실-말단 융합을 포함한다. 말단 삽입의 예는 N-말단 메티오닐 잔기를 갖는 항체를 포함한다.
보존적 아미노산 치환에 의해 생성된 항체가 본 개시에 포함된다. 보존적 아미노산 치환에서, 아미노산 잔기는 유사한 전하를 갖는 측쇄를 포함하는 아미노산 잔기로 대체된다. 상기 기재된 바와 같이, 유사한 전하를 갖는 측쇄를 포함하는 아미노산 잔기 패밀리가 당업계에 정의되어 있다. 이러한 패밀리는 염기성 측쇄(예: 라이신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄(예: 아스파트산, 글루탐산), 전하를 띠지 않는 극성 측쇄(예: 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인), 비극성 측쇄(예: 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 베타-분지 측쇄(예: 트레오닌, 발린, 이소류신) 및 방향족 측쇄(예: 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)를 갖는 아미노산을 포함한다. 대안적으로, 돌연변이는 포화 돌연변이 유발에 의해서와 같이, 코딩 서열의 전부 또는 일부를 따라 랜덤하게 도입될 수 있고, 생성된 돌연변이는 활성을 유지하는 돌연변이를 식별하기 위해 생물학적 활성에 대해 스크리닝될 수 있다. 돌연변이 유발 후, 코딩된 단백질이 발현될 수 있고 단백질의 활성이 결정될 수 있고, 보존적(예컨대, 유사 특성 및/또는 측쇄를 갖는 아미노산 그룹 내에서) 치환이 이루어질 수 있어, 특성을 유지하거나 현저하게 변화시키지 않을 수 있다. 보존적(예를 들어, 유사한 특성 및/또는 측쇄를 갖는 아미노산 그룹 내에서) 치환이 이루어질 수 있어 특성을 유지하거나 유의하게 변화시키지 않을 수 있다.
아미노산은 측쇄 특성의 유사성에 따라 그룹핑될 수 있다(예컨대, Lehninger, Biochemistry 73-75 (2d ed. 1975) 참조): (1) 비극성: Ala (A), Val (V), Leu (L), Ile (I), Pro (P), Phe (F), Trp (W), Met (M); (2) 비하전 극성: Gly (G), Ser (S), Thr (T), Cys (C), Tyr (Y), Asn (N), Gln (Q); (3) 산성: Asp (D), Glu (E); 및 (4) 염기성: Lys (K), Arg (R), His(H). 대안적으로, 천연 발생 잔기는 공통 측쇄 특성에 기반하여 그룹으로 나누어질 수 있다: (1) 소수성: 노르류신, Met, Ala, Val, Leu, Ile; (2) 중성 친수성: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln; (3) 산성: Asp, Glu; (4) 염기성: His, Lys, Arg; (5) 사슬 배향에 영향을 미치는 잔기: Gly, Pro; 및 (6) 방향족: Trp, Tyr, Phe.
예를 들어, 항체의 적절한 형태를 유지하는데 관여하지 않는 임의의 시스테인 잔기는 분자의 산화 안정성을 개선하고, 비정상적인 가교를 방지하기 위해 예를 들어, 알라닌 또는 세린과 같은, 다른 아미노산으로 치환될 수 있다.
변이는 올리고뉴클레오티드-매개(부위-지정) 돌연변이 유발, 알라닌 스캐닝, 및 PCR 돌연변이 유발과 같은 당업계에 공지된 방법을 이용하여 수행될 수 있다. , 부위-지정 돌연변이 유발(예컨대, Carter, 1986, Biochem J. 237:1-7; 및 Zoller et al., 1982, Nucl. Acids Res. 10:6487-500 참조), 카세트 돌연변이 유발(예컨대, Wells et al., 1985, Gene 34:315-23 참조), 또는 기타 알려진 기술은 항-항-MSLN 항체 변이체 DNA를 생성하기 위해 클로닝된 DNA에 대해 수행될 수 있다.
항체의 공유 변형은 본 개시의 범위 내에 포함된다. 공유 변형은 항체의 표적화된 아미노산 잔기를 항체의 선택된 측쇄 또는 N- 또는 C- 말단 잔기와 반응할 수 있는 유기 유도체화제와 반응시키는 것을 포함한다. 다른 변형은 글루타미닐 및 아스파라기닐 잔기를 각각 상응하는 글루타밀 및 아스파틸 잔기로 탈아미드화, 프롤린과 라이신의 수산화, 세릴 또는 트레오닐 잔기의 히드록실 기의 인산화, 라이신, 아르기닌, 및 히스티딘 측쇄의 α-아미노기의 메틸화 (예컨대, Creighton, Proteins: Structure and Molecular Properties 79-86 (1983) 참고), N-말단 아민의 아세틸화, 및 임의의 C-말단 카르복실기의 아미드화를 포함한다.
본 개시의 범위 내에 포함되는 항체의 다른 타입의 공유 변형은 항체 또는 폴리펩티드의 천연 글리코실화 패턴 변경하는 것(예를 들어, Beck et al., 2008, Curr. Pharm. Biotechnol. 9:482-501; 및 Walsh, 2010, Drug Discov. Today 15:773-80 참조), 및 예를 들어, U.S. 특허 4,640,835; 4,496,689; 4,301,144; 4,670,417; 4,791,192; 또는 4,179,337에 명시된 방식으로, 항체를 다양한 비단백질성 중합체, 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 폴리프로필렌 글리콜, 또는 폴리옥시알킬렌 중 하나에 연결하는 것을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:7에 기재된 바와 같은 중쇄에 대해 70% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 중쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:7에 기재된 바와 같은 중쇄에 대해 75% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 중쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:7에 기재된 바와 같은 중쇄에 대해 80% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 중쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:7에 기재된 바와 같은 중쇄에 대해 85% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 중쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:7에 기재된 바와 같은 중쇄에 대해 90% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 중쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:7에 기재된 바와 같은 중쇄에 대해 95% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 중쇄를 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:8에 제시된 바와 같은 경쇄에 대해 70% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:8에 제시된 바와 같은 경쇄에 대해 75% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:8에 제시된 바와 같은 경쇄에 대해 80% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:8에 제시된 바와 같은 경쇄에 대해 85% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:8에 제시된 바와 같은 경쇄에 대해 90% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:8에 제시된 바와 같은 경쇄에 대해 95% 초과의 상동성 또는 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항-191P4D12 항체는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 Ha22-2(2,4)6.1로 지정된 항체의 중쇄 및 경쇄 CDR 영역, 또는 Ha22-2(2,4)6.1의 중쇄 및 경쇄 CDR 영역의 아미노산 서열과 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 CDR 영역을 포함하고, 여기서 항체는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 Ha22-2(2,4)6.1로 지정된 항-191P4D12 항체의 원하는 기능적 특성을 보유한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 인간화 중쇄 가변 영역 및 인간화 경쇄 가변 영역을 포함하고, 여기서:
(a) 중쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체에 제시된 중쇄 가변 영역 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함하며;
(b) 경쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체에 제시된 경쇄 가변 영역 CDR의 아미노산 서열을 포함하는 CDR을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에서 제공되는 항-191P4D12 항체는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267(도 3 참조) 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 Ha22-2(2,4)6.1로 지정된 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역, 또는 Ha22-2(2,4)6.1의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열에 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하고, 여기서 항체는 본원에 제공되는 항-191P4D12 항체의 원하는 기능적 특성을 보유한다. 본 발명의 항체의 불변 영역으로서, 불변 영역의 임의의 서브클래스는 선택될 수 있다. 일 구현예에서, 중쇄 불변 영역으로서 인간 IgG1 불변 영역 및 경쇄 불변 영역으로서 인간 Ig kappa 불변 영역이 사용될 수 있다.
몇몇 구현예에서, 본원에서 제공되는 항-191P4D12 항체는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267(도 3 참조) 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 Ha22-2(2,4)6.1로 지정된 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역, 또는 Ha22-2(2,4)6.1의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열에 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하고, 여기서 항체는 본원에 제공되는 항-191P4D12 항체의 원하는 기능적 특성을 보유한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함하고, 여기서:
(a) 중쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열과 적어도 80% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함하며; 및
(b) 경쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열과 적어도 80% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 중쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열과 적어도 85% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, 중쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열과 적어도 90% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 중쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열과 적어도 95% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, 중쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열과 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 상동성 또는 동일성일 수 있다.
몇몇 구현예에서, 경쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열과 적어도 85% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, 경쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열과 적어도 90% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 경쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열과 적어도 95% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, 경쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열과 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 상동성 또는 동일성일 수 있다.
다른 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 및 경쇄를 포함하고, 여기서:
(a) 중쇄는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 아미노산 서열과 적어도 80% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함하고; 및
(b) 경쇄는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 아미노산 서열과 적어도 80% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 중쇄는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 아미노산 서열과 적어도 85% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, 중쇄는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 아미노산 서열과 적어도 90% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 중쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 아미노산 서열과 적어도 95% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, 중쇄는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 중쇄 아미노산 서열과 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 상동성 또는 동일성일 수 있다.
몇몇 구현예에서, 경쇄는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 아미노산 서열과 적어도 85% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, 경쇄는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 아미노산 서열과 적어도 90% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 경쇄 가변 영역은 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 아미노산 서열과 적어도 95% 상동성 또는 동일성인 아미노산 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, 경쇄는 American Type Culture Collection (ATCC) Accession NO: PTA-11267 하에 기탁된 하이브리도마에 의해 생성된 항체의 경쇄 아미노산 서열과 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 상동성 또는 동일성일 수 있다.
본원에 제공되는 엔지니어링된 항체는 변형이 VH 및/또는 VL 내의 프레임워크 잔기에 이루어진 것을 포함한다(예컨대, 항체의 특성을 개선하기 위해). 전형적으로, 이러한 프레임워크 변형은 항체의 면역원성을 감소시키기 위해 이루어진다. 예를 들어, 하나의 접근법은 하나 이상의 프레임워크 잔기를 상응하는 생식계열 서열로 "역돌연변이(backmutate)" 시키는 것이다. 보다 구체적으로, 체세포 돌연변이를 겪은 항체는 항체가 유래된 생식계열 서열과 상이한 프레임워크 잔기를 함유할 수 있다. 이러한 잔기는 항체 프레임워크 서열을 항체가 유래된 생식계열 서열과 비교함으로써 확인될 수 있다. 프레임워크 영역 서열을 이들의 생식계열 구성으로 되돌리기 위해, 체세포 변이는 예를 들어, 부위-지정 돌연변이 유발, 또는 PCR-매개 돌연변이 유발에 의해 생식계열 서열로 "역돌연변이"될 수 있다. (예컨대, 류신에서 메티오닌으로 "역돌연변이"). 이러한 "역돌연변이" 항체는 본 발명에 포함되는 것으로 또한 의도된다.
프레임워크 변형의 또 다른 타입은 T-세포 에피토프를 제거하여 항체의 잠재적인 면역원성을 감소시키기 위해, 프레임워크 영역 내, 또는 하나 이상의 CDR 영역 내의 하나 이상의 잔기를 변이시키는 것을 포함한다. 이 접근법은 "탈면역화"로도 또한 지칭되며, Carr et al.의 미국 특허 공보 2003.0153043에 더 상세하게 기재되어 있다.
프레임워크 또는 CDR 영역 내에서 이루어진 변형에 추가로 또는 대안적으로, 본 발명의 항체는 Fc 영역 내에 변형을 포함하도록, 예컨대 혈청 반감기, 보체 고정, Fc 수용체 결합 및/또는 항원-의존적 세포 세포독성과 같은, 일반적으로 항체의 하나 이상의 기능적 특성을 변경하기 위해, 엔지니어링될 수 있다. 또한, 본원에 제공되는 항-191P4D12 항체는 화학적으로 변형되거나 또는 이의 글리코실화를 변경하고, 다시 항체의 하나 이상의 기능적 특성을 변경하도록 변형될 수 있다. 이들 구현예 각각은 아래에서 더 상세히 설명된다.
일 구현예에서, CH1의 힌지 영역은 힌지 영역의 시스테인 잔기의 수가 예를 들어 증가 또는 감소되게 변경되도록 변형된다. 이 접근법은 Bodmer et al의 US 특허 5,677,425에 더욱 기재된다. CH1의 힌지 영역의 시스테인 잔기의 수는 예를 들어, 경쇄 및 중쇄의 어셈블리를 용이하게 하기 위해, 또는 항-191P4D12 항체의 안정성을 증가시키거나 감소시키기 위해 변경된다.
또 다른 구현예에서, 항체의 Fc 힌지 영역은 항-191P4D12 항체의 생물학적 반감기를 감소시키도록 변이된다. 더 구체적으로, 하나 이상의 아미노산 돌연변이는, 항체가 천연 Fc-힌지 도메인 SpA 결합에 비해 손상된 포도상구균 단백질 A(SpA) 결합을 갖도록 Fc-힌지 단편의 CH2-CH3 도메인 인터페이스 영역으로 도입된다. 상기 접근법은 Ward et al의 미국 특허 6,165,745에서 더 자세히 기술된다.
또 다른 구현예에서, 항-191P4D12 항체는 이의 생물학적 반감기를 증가시키도록 변형된다. 다양한 접근법이 가능하다. 예를 들어, 돌연변이는 Ward에 미국 특허 6,277,375에 기재된 바와 같이, 도입될 수 있다. 대안적으로, 생물학적 반감기를 증가시키기 위해, 항체는, Presta et al의 미국 특허 5,869,046 및 6,121,022에 기술된 바와 같이, IgG의 Fc 영역의 CH2 도메인의 2개의 루프로부터 취한 샐비지 수용체 결합 에피토프를 함유하도록 CH1 또는 CL 영역 내에서 변경될 수 있다.
또 다른 구현예에서, Fc 영역은 항체의 이펙터 기능(들)을 변경하기 위해, 적어도 하나의 아미노산 잔기를 상이한 아미노산 잔기로 대체함으로써 변경된다. 예를 들어, 아미노산 특이적 잔기로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산은 항체가 이펙터 리간드에 대해 변경된 친화성을 갖으나, 모 항체의 항원-결합 능력을 유지하도록 상이한 아미노산 잔기로 대체될 수 있다. 친화도가 변경되는 이펙터 리간드는 예를 들어, Fc 수용체 또는 보체의 C1 성분일 수 있다. 상기 접근법은 Winter et al.의 미국 특허 5,624,821 및 5,648,260에서 더 상세히 기술된다.
191P4D12-관련 단백질과 항-191P4D12 항체의 반응성은 191P4D12-관련 단백질, 191P4D12-발현 세포, 또는 이의 추출물을 적절하게 사용하여, 웨스턴 블롯, 면역 침전, ELISA, 및 FACS 분석을 포함하는 다수의 공지의 수단에 의해 확립될 수 있다. 191P4D12 항체 또는 이의 단편은 검출 가능한 마커로 표지되거나 제2 분자에 컨쥬게이트될 수 있다. 적합한 검출가능한 마커는 방사성 동위원소, 형광성 화합물, 생물발광성 화합물, 화학발광성 화합물, 금속 킬레이트제 또는 효소를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 추가로, 2개 이상의 191P4D12 에피토프에 특이적인 이중특이성 항체는 당업계에 일반적으로 공지된 방법을 사용하여 생성된다. 동종이량체 항체는 또한 당업계에 공지된 가교 기술에 의해 생성될 수 있다(예를 들어, Wolff et al., Cancer Res. 53: 2560-2565).
또 다른 특정 구현예에서, 본원에서 제공되는 항-191P4D12 항체는 Ha22-2(2,4)6.1로 명명된 항체의 중쇄 및 경쇄를 포함하는 항체이다. Ha22-2(2,4)6.1의 중쇄는 SEQ ID NO:7의 20번째 E 잔기에서 466번째 K 잔기 범위의 아미노산 서열로 구성되고, Ha22-2(2,4)6.1의 경쇄는 SEQ ID NO:8 서열의 23번째 D 잔기에서 236번째 C 잔기 범위의 아미노산 서열로 구성된다.
Ha22-2(2,4)6.1로 명명된 항체를 생산하는 하이브리도마는 American Type Culture Collection(ATCC), P.O. Box 1549, Manassas, VA 20108로, 2010.08.18자로 보내졌고(Federal Express를 통해), 수탁번호 PTA-11267로 할당되었다.
5.3.2 세포독성제(약물 유닛)
몇몇 구현예에서, ADC는 돌라스타틴 또는 돌로스타틴 펩티드 유사체 및 유도체, 아우리스타틴에 컨쥬게이트된 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다(US 특허 5,635,483; 5,780,588). 돌라스타틴 및 아우리스타틴은 미세소관 역학, GTP 가수분해, 및 핵 및 세포 분열을 방해(Woyke et al(2001) Antimicrob. Agents and Chemother. 45(12):3580-3584)하고, 항암(US 5,663,149) 및 항진균 활성(Pettit et al (1998) Antimicrob. Agents Chemother. 42:2961-2965)을 갖는 것으로 나타났다. 돌라스타틴 또는 아우리스타틴 약물 유닛은 펩티드 약물 유닛의 N(아미노) 말단 또는 C(카르복실) 말단을 통해 항체에 부착될 수 있다(WO 02/088172).
예시적인 아우리스타틴 구현예는 "2004년 3월 28일 발표된, Senter et al, Proceedings of the American Association for Cancer Research, Volume 45, Abstract Number 623" 및 미국 특허 공보 2005/0238649에 기술된, N-말단 연결된 모노메틸아우리스타틴 약물 유닛 DE 및 DF를 포함하고, 그 개시 내용은 전체가 참고로서 명시적으로 통합된다.
몇몇 구현예에서, 아우리스타틴은 MMAE이다(여기서 물결선은 항체 약물 컨쥬게이트의 링커에 대한 공유 부착을 나타낸다).
Figure pct00007
몇몇 구현예에서, MMAE 및 링커 성분(본원에 추가로 기재됨)을 포함하는 예시적인 구현예는 다음 구조를 갖는다(여기서 L은 항체를 나타내고, p는 1 내지 12 범위이다):
Figure pct00008
일반적으로, 펩티드-기반 약물 유닛은 2개 이상의 아미노산 및/또는 펩티드 단편 사이에 펩티드 결합을 형성함으로써 제조될 수 있다. 이러한 펩티드 결합은 예를 들어 펩티드 화학 분야에서 잘 알려져 있는, 액상 합성 방법에 따라 제조될 수 있다(E. Schroder and K. Lubke, “The Peptides”, volume 1, pp 76-136, 1965, Academic Press 참조). 아우리스타틴/돌라스타틴 약물 유닛은 하기 방법에 따라 제조될 수 있다: US 5635483; US 5780588; Pettit et al (1989) J. Am. Chem. Soc. 111:5463-5465; Pettit et al (1998) Anti-Cancer Drug Design 13:243-277; Pettit, G.R., et al. Synthesis, 1996, 719-725; Pettit et al (1996) J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 5:859-863; 및 Doronina (2003) Nat Biotechnol 21(7):778-784.
5.3.3 링커
일반적으로, 항체 약물 컨쥬게이트는 약물 유닛(예: MMAE)와 항체 유닛(예컨대, 항-191P4D12 항체 또는 이의 항원 결합 단편) 사이에 링커 유닛을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 링커는 링커의 절단이 세포내 환경에서 항체로부터 약물 유닛을 방출하도록 세포내 조건 하에 절단가능하다. 또 다른 구현예에서, 링커 유닛은 절단가능하지 않고 약물은 예를 들어 항체 분해에 의해 방출된다.
몇몇 구현예에서, 링커는 세포내 환경(예: 리소좀 또는 엔도좀 또는 카베올라 내)에 존재하는 절단제에 의해 절단가능하다. 링커는 예를 들어, 리소솜 또는 엔도솜 프로테아제를 포함하나 이에 제한되지 않는 프로테아제 효소 또는 세포내 펩티다제에 의해 절단되는 펩티딜 링커일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 펩티딜 링커는 적어도 2개의 아미노산 길이 또는 적어도 3개의 아미노산 길이이다. 절단제는 카텝신 B 및 D 및 플라스민을 포함할 수 있으며, 이들 모두는 표적 세포 내부에서 활성 약물의 방출을 초래하는 디펩티드 약물 유도체를 가수분해하는 것으로 알려져 있다(예를 들어, Dubowchik and Walker, 1999, Pharm. Therapeutics 83:67-123 참조). 가장 전형적인 것은 191P4D12-발현 세포에 존재하는 효소에 의해 절단될 수 있는 펩티딜 링커이다. 예를 들어, 암 조직에서 많이 발현되는 티올-의존성 프로테아제 카텝신-B에 의해 절단 가능한 펩티딜 링커가 사용될 수 있다(예를 들어, Phe-Leu 또는 Gly-Phe-Leu-Gly 링커(SEQ ID NO:15)). 이러한 링커의 다른 예는, 예를 들어, 미국 특허 제6,214,345호에 기재되어 있으며, 이는 그 전체가 모든 목적을 위해 참고로 본원에 통합된다. 특정 구현예에서, 세포내 프로테아제에 의해 절단가능한 펩티딜 링커는 Val-Cit 링커 또는 Phe-Lys 링커이다(예를 들어, Val-Cit 링커를 사용한 독소루비신의 합성을 서술하는 미국 특허 6,214,345 참조). 치료제의 세포내 단백질 분해 방출을 사용하는 것의 한 가지 이점은 제제가 컨쥬게이트될 때, 전형적으로 약화되고, 컨쥬게이트의 혈청 안정성이 일반적으로 높다는 것이다.
다른 구현예에서, 절단 가능한 링커는 pH 민감성, 즉 특정 pH 값에서 가수분해에 민감하다. 일반적으로 pH에 민감성 링커는 산성 조건에서 가수분해할 수 있다. 예를 들어, 리소좀에서 가수분해 가능한 산-불안정 링커(예를 들어, 히드라존, 세미카르바존, 티오세미카르바존, 시스-아코니트산 아미드, 오르토에스테르, 아세탈, 케탈 등)가 사용될 수 있다(예를 들어, 미국 특허 5,122,368; 5,824,805; 5,622,929; Dubowchik and Walker, 1999, Pharm. Therapeutics 83:67-123; Neville et al., 1989, Biol. Chem. 264:14653-14661 참조). 이러한 링커는 혈액과 같은 중성 pH 조건에서는 비교적 안정하지만, 리소좀의 대략적인 pH인 pH 5.5 또는 5.0 미만에서 불안정하다. 특정 구현예에서, 가수분해성 링커는 티오에테르 링커, 예를 들어 아실히드라존 결합을 통해 치료제에 부착된 티오에테르이다(예를 들어, 미국 특허 5,622,929 참조).
또 다른 구현예에서, 링커는 환원 조건 하에서 절단가능하다(예컨대, 이황화 링커). 예를 들어, SATA(N-숙신이미딜-S-아세틸티오아세테이트), SPDP(N-숙신이미딜-3-(2-피리딜디티오)프로피오네이트), SPDB(N-숙신이미딜-3-(2-피리딜디티오)부티레이트) 및 SMPT(N-숙신이미딜-옥시카르보닐-알파-메틸-알파-(2-피리딜-디티오)톨루엔),SPDB 및 SMPT를 사용하여 형성될 수 있는 것들을 포함하는 다양한 이황화 링커가 당업계에 공지되어 있다(예컨대, Thorpe et al., 1987, Cancer Res. 47:5924-5931; Wawrzynczak et al., In Immunoconjugates: Antibody Conjugates in Radioimagery and Therapy of Cancer (C. W. Vogel ed., Oxford U. Press, 1987. 참조. 또한 미국 특허 4,880,935 참조).
또 다른 특정 구현예에서, 링커는 말로네이트 링커((Johnson et al., 1995, Anticancer Res. 15:1387-93), 말레이미도벤조일 링커((Lau et al., 1995, Bioorg-Med-Chem. 3(10):1299-1304), 또는 3'-N-아미드 유사체(Lau et al., 1995, Bioorg-Med-Chem. 3(10):1305-12)이다.
또 다른 구현예에서, 링커 유닛은 절단가능하지 않으며, 약물은 항체 분해에 의해 방출되지 않는다(모든 목적을 위해 그 전체가 여기에 참조로 통합되는 미국 공보 2005/0238649 참조).
일반적으로, 링커는 세포외 환경에 실질적으로 민감하지 않다. 본원에서 사용된 바와 같이, 링커의 맥락에서, "세포외 환경에 실질적으로 민감하지 않음"은 항체 약물 컨쥬게이트가 세포외 환경(예컨대, 혈장)에 존재하는 경우, 항체 약물 컨쥬게이트의 샘플 내 링커의 약 20% 이하, 일반적으로 약 15% 이하, 보다 일반적으로 약 10% 이하, 및 훨씬 더 일반적으로 약 5% 이하, 약 3% 이하, 또는 약 1% 이하가 절단됨을 의미한다. 링커가 세포외 환경에 실질적으로 민감하지 않은지 여부는 예를 들어 미리 결정된 시간 동안(예컨대, 2, 4, 8, 16, 또는 24 시간) 항체-약물 컨쥬게이트 화합물을 혈장과 함께 배양하고 혈장에 존재하는 유리 약물의 양을 정량화함으로써 결정될 수 있다.
상호 배타적이지 않은 다른 구현예에서, 링커는 세포 내재화를 촉진한다. 특정 구현예에서, 링커는 치료제에 컨쥬게이트될 때, 세포 내재화를 촉진한다(즉, 본원에 기재된 바와 같은, 항체 약물 컨쥬게이트 화합물의 링커-치료제 모이어티의 환경에서). 또 다른 구현예에서, 링커는, 아우리스타틴 화합물 및 항-191P4D12 항체 또는 이의 항원 결합 단편 둘 다에 컨쥬게이트될 때, 세포 내재화를 촉진한다.
본 조성물 및 방법과 함께 사용될 수 있는 다양한 예시적인 링커는 WO 2004-010957, 미국 공보 2006/0074008, 미국 공보 20050238649, 및 미국 공보 2006/0024317에 기재된다(이들 각각은 모든 목적을 위해, 전체가 본원에 참조로서 통합된다).
"링커 유닛"(LU)은 항체 약물 컨쥬게이트를 형성하기 위해 약물 유닛 및 항체 유닛을 연결하여 사용될 수 있는 이관능성 화합물이다. 몇몇 구현예에서, 링커 유닛은 하기 화학식을 갖는다:
-Aa-Ww-Yy-
여기서: -A-는 스트레처 유닛이고,
a는 0 또는 1이고,
각 -W-는 독립적인 아미노산 유닛이며,
w는 0 내지 12 범위의 정수이며,
-Y-는 자가-희생 스페이서 유닛이며, 및
y는 0, 1, 또는 2이다.
일부 구현예에서, a는 0 또는 1이고, w는 0 또는 1이고, y는 0, 1 또는 2이다. 일부 구현예에서, a는 0 또는 1이고, w는 0 또는 1이고, y는 0 또는 1이다. 일*?*몇몇 구현예에서, w가 1 내지 12일 때, y는 1 또는 2이다. 일부 구현예에서, w는 2 내지 12이고 y는 1 또는 2이다. 일부 구현예에서, a는 1이고 w 및 y는 0이다.
스트레처 유닛(A)은 존재하는 경우 항체 유닛을 아미노산 유닛(-W-)에, 존재하는 경우 스페이서 유닛(-Y-)에, 존재하는 경우, 또는 약물 유닛(-D)에 연결할 수 있다. 자연적으로 EH는 화학적 조작을 통해, 항-191P4D12 항체 또는 이의 항원 결합 단편(예컨대 Ha22-2(2,4)6.1)에 존재할 수 있는 유용한 작용기는 설프히드릴, 아미노, 히드록실, 탄수화물의 아노머 히드록실기, 및 카로복실을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 적합한 작용기는 설프히드릴 및 아미노이다. 일 예에서, 설프히드릴 기는 항-191P4D12 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 분자내 이황화 결합의 환원에 의해 생성될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 설프히드릴기는 항-191P4D12 항체 또는 항원 결합 단편의 라이신 모이어티의 아미노기와 2-이미노티올란(Traut 시약) 또는 기타 설프히드릴 생성 시약의 반응에 의해 생성될 수 있다. 특정 구현예에서, 항-191P4D12 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 재조합 항체이고 하나 이상의 라이신을 보유하도록 엔지니어링된다. 특정 다른 구현예에서, 재조합 항-191P4D12 항체는 추가 설프히드릴 기, 예를 들어 추가 시스테인을 보유하도록 엔지니어링된다.
일 구현예에서, 스트레처 유닛은 항체 유닛의 황 원자와 결합을 형성한다. 황 원자는 항체의 설프히드릴기로부터 유래될 수 있다. 본 구현예의 대표적인 스트레처 유닛은 하기 화학식 IIIa 및 IIIb의 대괄호 안에 도시되며, 여기서 L-, -W-, -Y-, -D, w 및 y는 위에서 정의한 바와 같고, R17은 -C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알케닐렌-, -C1-C10 알키닐렌-, 카보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, O-(C1-C8 알케닐렌)-, -O-(C1-C8 알키닐렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -C2-C10 알케닐렌-아릴렌, -C2-C10 알키닐렌-아릴렌, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -아릴렌-C2-C10 알케닐렌-, -아릴렌-C2-C10 알키닐렌-, -C1-C10 알킬렌-(카르보사이클로)-, -C2-C10 알케닐렌-(카보사이클로)-, -C2-C10 알키닐렌-(카르보사이클로)-, -(카르보사이클로)-C1-C10 알킬렌-, -(카르보사이클로)-C2-C10 알케닐렌-, -(카르보사이클로)-C2-C10 알키닐렌, -헤테로시클로-, -C1-C10 알킬렌-(헤테로시클로)-, -C2-C10 알케닐렌-(헤테로시클로)-, -C2-C10 알키닐렌-(헤테로시클로)-, -(헤테로시클로)-C1-C10 알킬렌-, -(헤테로시클로)-C2-C10 알케닐렌-, -(헤테로사이클로)-C1-C10 알키닐렌-, -(CH2CH2O)r-, 또는 -(CH2CH2O)r-CH2-, 중에서 선택되며, 및 r은 1-10 범위의 정수이고, 여기서 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬렌, 알케닐렌, 알키니클렌, 아릴, 카보사이클, 카르보사이클로, 헤테로사이클로 및 아릴렌 라디칼은, 혼자이든 다른 그룹의 일원이든, 선택적으로 치환된다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬렌, 알케닐렌, 알키니클렌, 아릴, 카보사이클, 카보사이클로, 헤테로사이클로 및 아릴렌 라디칼은, 혼자이든 다른 그룹의 일원이든, 치환되지 않는다.
몇몇 구현예에서, R17은 -C1-C10 알킬렌-, 카르보사이클로-, -O-(C1-C8 알킬렌)-, -아릴렌-, -C1-C10 알킬렌-아릴렌-, -아릴렌-C1-C10 알킬렌-, -C1-C10 알킬렌-(카르보시클로)-, -(카르보시클로)-C1-C10 알킬렌-, -C3-C8 헤테로시클로-, -C1-C10 알킬렌-(헤테로시클로)-, -(헤테로시클로)-C1-C10 알킬렌-, -(CH2CH2O)r-, 및 -(CH2CH2O)r-CH2-로부터 선택되고; 및 r은 1-10 범위의 정수이고, 여기서 상기 알킬렌기는 비치환되고 나머지 기들은 선택적으로 치환된다.
모든 예시적인 실시예로부터, 명시적으로 나타내지 않은 경우에도, 1 내지 20개의 약물 유닛이 항체 유닛에 연결될 수 있는 것으로 이해되어야 한다(p = 1-20).
Figure pct00009
Figure pct00010
예시적인 스트레처 유닛은 R17이 -(CH2)5-인 화학식 IIIa의 그것이다:
Figure pct00011
또 다른 예시적인 스트레처 단위는 R17이 -(CH2CH2O)r-CH2-이고; r은 2인 그것이다:
Figure pct00012
예시적인 스트레처 유닛은 화학식 IIIa의 R17이 아릴렌- 또는 아릴렌-C1-C10 알킬렌-인 그것이다. 몇몇 구현예에서, 아릴기는 비치환된 페닐기이다.
또 다른 예시적인 스트레처 유닛은 R17이 -(CH2)5-인 화학식 IIIb의 유닛의 그것이다:
Figure pct00013
특정 구현예에서, 스트레처 유닛은 항체 유닛의 황 원자와 스트레처 유닛의 황 원자 사이의 이황화 결합을 통해 항체 유닛에 연결된다. 상기 구현예의 대표적인 스트레처 유닛은 화학식 IV의 대괄호 안에 도시되어 있으며, 여기서 R17, L-, -W-, -Y-, -D, w 및 y는 상기 정의된 바와 같다.
Figure pct00014
본 출원 전반에 걸쳐, 하기 화학식의 S 모이어티는 문맥에 의해 달리 명시되지 않는 한, 항체 유닛의 황 원자를 지칭함에 유의해야 한다.
Figure pct00015
본원에서 황 결합 ADC의 특정 구조적 설명에서, 항체는 "L"로 표시된다. 이는 "Ab-S"로 표시될 수도 있다. "S"를 포함하는 것은 단순히 황 결합 특징을 나타내며, 특정 황 원자가 다중 링커-약물 모이어티를 갖고 있다는 것을 나타내지 않는다. "Ab-S" 설명을 사용하는 구조의 왼쪽 괄호는 Ab와 S 사이의 황 원자 왼쪽에 위치할 수도 있으며, 이는 본원 전반에 걸쳐 설명된 본 발명의 ADC의 동등한 설명일 것이다.
또 다른 구현예에서, 스트레처는 항체 유닛의 1차 또는 2차 아미노기와 결합을 형성할 수 있는 반응성 부위를 함유한다. 이러한 반응성 부위의 예는 숙신이미드 에스테르, 4 니트로페닐 에스테르, 펜타플루오로페닐 에스테르, 테트라플루오로페닐 에스테르, 무수물, 산 염화물, 설포닐 염화물, 이소시아네이트 및 이소티오시아네이트와 같은, 활성화된 에스테르를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 상기 구현예의 대표적인 스트레처 유닛은 화학식 Va 및 Vb의 대괄호 안에 도시되어 있으며, 여기서 -R17-, L-, -W-, -Y-, -D, w 및 y는 위에서 정의된 바와 같다;
Figure pct00016
Figure pct00017
몇몇 구현예에서, 스트레처는 항체 유닛에 존재할 수 있는 변형된 탄수화물(-CHO) 그룹에 반응성인, 반응성 부위를 함유한다. 예를 들어, 탄수화물은 과요오드산나트륨과 같은 시약을 사용하여 마일드하게 산화될 수 있고, 산화된 탄수화물의 생성된 (-CHO) 유닛은 Kaneko et al., 1991, Bioconjugate Chem. 2:133-41에 기술된 바와 같은, 히드라지드, 옥심, 1차 또는 2차 아민, 히드라진, 티오세미카르바존, 히드라진 카르복실레이트 및 아릴히드라지드와 같은 작용기를 함유하는 스트레처로 응축될 수 있다. 상기 구현예의 대표적인 스트레처 유닛은 화학식 VIa, VIb 및 VIc의 대괄호 안에 도시되어 있으며, 여기서 -R17-, L-, -W-, -Y-, -D, w 및 y는 위에 정의된 바와 같다.
Figure pct00018
5.3.3.2 아미노산 유닛
아미노산 유닛(-W-)은 존재하는 경우, 스페이서 유닛이 존재하는 경우 스트레처 유닛을 스페이서 유닛에 연결하고, 스페이서 유닛이 없는 경우 스트레처 유닛을 약물 유닛에 연결하고, 스트레처 유닛과 스페이서 유닛이 없는 경우 항체 유닛을 약물 유닛에 연결한다.
Ww-는 예를 들어 모노펩티드, 디펩티드, 트리펩티드, 테트라펩티드, 펜타펩티드, 헥사펩티드, 헵타펩티드, 옥타펩티드, 노나펩티드, 데카펩티드, 운데카펩티드 또는 도데카펩티드 유닛일 수 있다. 각 -W- 유닛은 독립적으로 아래의 대괄호 안에 표시된 화학식을 가지며, w는 0 내지 12 범위의 정수이다.
Figure pct00019
여기서 R19는 수소, 메틸, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, 벤질, p-히드록시벤질, -CH2OH, -CH(OH)CH3, -CH2CH2SCH3, -CH2CONH2, -CH2COOH, -CH2CH2CONH2, -CH2CH2COOH, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3, -(CH2)3NHCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2, -(CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2, -(CH2)4NHCONH2, -CH2CH2CH(OH)CH2NH2, 2-피리딜메틸-, 3-피리딜메틸-, 4-피리딜메틸-, 페닐, 시클로헥실이고,
Figure pct00020
몇몇 구현예에서, 아미노산 단위는 암 또는 종양 관련 프로테아제를 포함하는, 하나 이상의 효소에 의해 효소적으로 절단되어, 일 구현예에서 방출 시 생체내에서 양성자화되어 약물 (D)를 제공하는, 약물 단위(-D)를 해방시킬 수 있다.
특정 구현예에서, 아미노산 유닛은 천연 아미노산을 포함한다. 다른 구현예에서, 아미노산 유닛은 비천연 아미노산을 포함한다. 예시적인 Ww 유닛은 하기 화학식 VII-IX로 표시된다:
Figure pct00021
여기서 R20 및 R21은 다음과 같다:
Figure pct00022
Figure pct00023
R20, R21 및 R22은 다음과 같다:
Figure pct00024
Figure pct00025
R20, R21 및 R22 및 R23은 다음과 같다:
Figure pct00026
예시적인 아미노산 유닛은 상술한 화학식 VII의 유닛을 포함하지만 이에 제한되지 않는다: R20은 벤질이고 R21은 -(CH2)4NH2이고; R20은 이소프로필이고 R21은 -(CH2)4NH2이고; 또는 R20은 이소프로필이고, 및 R21은 -(CH2)3NHCONH2이다.
또 다른 예시적인 아미노산 유닛은 화학식 VIII의 유닛이고, 여기서 R20은 벤질이고, R21은 벤질이고, R22는 -(CH2)4NH2이다.
유용한 -Ww- 유닛은 특정 효소, 예를 들어 종양 관련 프로테아제에 의한 효소적 절단에 대한 선택성이 설계되고 최적화될 수 있다. 일 구현예에서, -Ww- 유닛은 그의 절단이 카텝신 B, C 및 D, 또는 플라스민 프로테아제에 의해 촉매화되는 유닛이다.
일 구현예에서, -Ww-는 디펩티드, 트리펩티드, 테트라펩티드 또는 펜타펩티드이다. R19, R20, R21, R22 또는 R23이 수소가 아닌 경우, R19, R20, R21, R22 또는 R23이 부착된 탄소 원자는 키랄이다.
R19, R20, R21, R22 또는 R23이 부착된 각각의 탄소 원자는 독립적으로 (S) 또는 (R) 배열로 존재한다.
하나의 특정 구현예에서, 아미노산 유닛은 발린-시트룰린(vc 또는 Val-Cit)이다. 또 다른 특정 구현예에서, 아미노산 유닛은 페닐알라닌-리신(즉, fk)이다. 또 다른 특정 구현예에서, 아미노산 유닛은 N-메틸발린-시트룰린이다. 또 다른 특정 구현예에서, 아미노산 유닛은 5-아미노발레르산, 호모 페닐알라닌 라이신, 테트라이소퀴놀린카르복실레이트 라이신, 시클로헥실알라닌 라이신, 이소네페코트산 라이신, 베타 알라닌 라이신, 글리신 세린 발린 글루타민 및 이소네페콧산이다.
5.3.3.3 스페이서 유닛
스페이서 유닛(-Y-)은 존재하는 경우, 아미노산 유닛이 존재할 때 아미노산 유닛을 약물 유닛에 연결한다. 대안적으로, 스페이서 유닛은 아미노산 유닛이 없을 때 스트레처 유닛을 약물 유닛에 연결한다. 스페이서 유닛은 또한 아미노산 유닛과 스트레처 유닛이 모두 없을 때 약물 유닛을 항체 유닛에 연결한다.
스페이서 유닛은 두 가지 일반적인 타입이 있다: 비 자가 희생 또는 자가 희생. 비-자가 희생 스페이서 유닛은 스페이서 단위의 일부 또는 전부가 항체 약물 컨쥬게이트로부터의 아미노산 유닛의 절단, 특히 효소에 의한 절단 후에 약물 유닛에 결합된 채로 남아 있는 것이다. 비-자가 희생 스페이서 유닛의 예는 (글리신-글리신) 스페이서 유닛 및 글리신 스페이서 유닛(둘 모두 하기 스킴(Scheme) 1에 도시됨)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 글리신-글리신 스페이서 유닛을 함유하는 컨쥬게이트 또는 또는 글리신 스페이서 유닛이 효소(예를 들어, 종양 세포 관련 프로테아제, 암세포 관련 프로테아제 또는 림프구 관련 프로테아제)를 통해 효소적 절단을 겪는 경우, 글리신- 글리신-약물 유닛 또는 글리신-약물 유닛은 L-Aa-Ww-에서 절단된다. 일 구현예에서, 표적 세포 내에서 독립적인 가수분해 반응이 일어나고, 글리신-약물 유닛 결합을 절단하고 약물을 유리시킨다.
스킴 1
Figure pct00027
몇몇 구현예에서, 비-자가 희생 스페이서 유닛(-Y-)은 -Gly-이다. 몇몇 구현예에서, 비-자가 희생 스페이서 유닛(-Y-)은 -Gly-Gly-이다.
일 구현예에서, 스페이서 유닛은 존재하지 않는다(-Yy - 여기서 y=0).
대안적으로, 자가 희생 스페이서 유닛을 함유하는 항체 약물 컨쥬게이트는 -D를 방출할 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "자가 희생 스페이서"는 두 개의 이격된 화학적 모이어티를 안정적인 삼중 분자로 공유적으로 연결할 수 있는 이관능성 화학적 모이어티를 지칭한다. 이는 제1 모이어티에 대한 결합이 절단되면 제2 화학적 모이어티에서 자발적으로 분리된다.
일부 구현예에서, -Yy-는 페닐렌 부분이 Qm으로 치환된, p-아미노벤질 알코올(PAB) 유닛이고(스킴 2 및 3 참조), 여기서 Q는 -C1-C8 알킬, -C1-C8 알케닐, -C1-C8 알키닐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C1-C8 알케닐), -O-(C1-C8 알키닐) , -할로겐, -니트로 또는 -시아노이고; 및 m은 0-4 범위의 정수이다. 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는, 단독으로든 또는 다른 기의 일부로서든, 선택적으로 치환될 수 있다.
일부 구현예에서, -Y-는 PAB 기의 아미노 질소 원자를 통해 -Ww -에 연결되고, 카보네이트, 카바메이트 또는 에테르 기를 통해 -D에 직접 연결되는 PAB 기이다. 어떤 특정한 이론이나 메커니즘에 얽매이지 않고, 스킴 2는 Toki et al., 2002, J. Org. Chem. 67:1866-1872에 기재된 바와 같이, 카바메이트 또는 카보네이트 그룹을 통해 -D에 직접 부착되는 PAB 기의 약물 방출의 가능한 메커니즘을 도시한다.
스킴 2
Figure pct00028
스킴 2에서, Q는 -C1-C8 알킬, -C1-C8 알케닐, -C1-C8 알키닐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C1-C8 알케닐), -O-(C1-C8 알키닐), -할로겐, -니트로 또는 -시아노이고; m은 0-4 범위의 정수이고; 및 p는 1 내지 약 20의 범위이다. 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는, 단독으로든 또는 다른 기의 일부로서든, 선택적으로 치환될 수 있다.
특정 이론이나 메커니즘에 얽매이지 않고, 스킴 3은 에테르 또는 아민 결합을 통해 -D에 직접 부착되는 PAB 기의 약물 방출의 가능한 메커니즘을 도시하며, 여기서 D는 약물 유닛의 일부인 산소 또는 질소 기를 포함한다.
스킴 3
Figure pct00029
스킴 3에서, Q는 -C1-C8 알킬, -C1-C8 알케닐, -C1-C8 알키닐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C1-C8 알케닐), -O-(C1-C8 알키닐), -할로겐, -니트로 또는 -시아노이고; m은 0-4 범위의 정수이고; 및 p는 1 내지 약 20의 범위이다. 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는, 단독으로든 또는 다른 기의 일부로서든, 선택적으로 치환될 수 있다.
자가 희생 스페이서의 다른 예는 2-아미노이미다졸-5-메탄올 유도체(Hay et al., 1999, Bioorg. Med. Chem. Lett. 9:2237) 및 오르토 또는 파라-아미노벤질아세탈과 같은 PAB 기와 전자적으로 유사한 방향족 화합물을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 치환된 및 비치환된 4-아미노부티르산 아미드(Rodrigues et al., 1995, Chemistry Biology 2:223), 적절하게 치환된 비시클로[2.2.1] 및 비시클로[2.2.2] 고리 시스템(Storm et al., 1972, J. Amer. Chem. Soc. 94:5815) 및 2-아미노페닐프로피온산 아미드(Amsberry et al., 1990, J. Org. Chem. 55:5867)와 같은 아미드 결합 가수분해 시 고리화를 겪는 스페이서가 사용될 수 있다. 글리신의 α-위치에서 치환된 아민 함유 약물의 제거는 또한 자가-희생 스페이서의 예이다(Kingsbury et al., 1984, J. Med. Chem. 27:1447)
일 구현예에서, 스킴 4에 도시된 바와 같이, 스페이서 유닛은 분지형 비스(히드록시메틸)-스티렌(BHMS) 유닛이며, 이는 여러 약물을 통합하고 방출하는데 사용될 수 있다.
스킴 4
Figure pct00030
스킴 4에서, Q는 -C1-C8 알킬, -C1-C8 알케닐, -C1-C8 알키닐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C1-C8 알케닐), -O-(C1-C8 알키닐), -할로겐, -니트로 또는 -시아노이며; m은 0-4 범위의 정수이고; n은 0 또는 1이고; 및 p는 1에서 약 20 사이의 범위이다. 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는, 단독으로 또는 다른 기의 일부로서, 선택적으로 치환될 수 있다.
몇몇 구현예에서, -D 유닛은 동일하다. 또 다른 구현예에서, -D 모이어티는 상이하다.
일 관점에서, 스페이서 유닛(-Yy-)은 화학식 X-XII로 표시된다:
Figure pct00031
여기서 Q는 -C1-C8 알킬, -C1-C8 알케닐, -C1-C8 알키닐, -O-(C1-C8 알킬), -O-(C1-C8 알케닐), -O-(C1-C8 알키닐) , -할로겐, -니트로 또는 -시아노이고; 및 m은 0-4 범위의 정수이다. 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는, 단독으로 또는 다른 기의 일몇몇로서, 선택적으로 치환될 수 있다.
Figure pct00032
및
Figure pct00033
항체-약물 컨쥬게이트 화합물을 포함하는 화학식 I 및 II의 구현예는 다음을 포함할 수 있다:
Figure pct00034
여기서 w 및 y는 각각 0, 1, 또는 2이고, 및
Figure pct00035
여기서 w 및 y는 각각 0이고,
Figure pct00036
Figure pct00037
, 및
Figure pct00038
5.3.3.4 약물 로딩
약물 로딩은 p로 표시되며 분자 내 항체당 약물 유닛의 평균 수이다. 약물 로딩은 항체당 1 내지 20의 약물 유닛(D)의 범위일 수 있다. 본원에서 제공되는 ADC는 다양한, 예를 들어 1 내지 20의 약물 유닛과 컨쥬게이트된 항체 또는 항원 결합 단편의 집합을 포함한다. 컨쥬게이션 반응으로부터 ADC의 제제에서 항체당 약물 유닛의 평균 수는 질량 분광법 및 ELISA 분석과 같은 통상적인 수단에 의해 특성화될 수 있다. p에 대한 ADC의 정량적 분포도 결정될 수 있다. 일부 경우에, p가 다른 약물 로딩을 갖는 ADC로부터의 특정 값인 균질 ADC의 분리, 정제 및 특성화는 전기영동과 같은 수단에 의해 달성될 수 있다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 20의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 18의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 15의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 12의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 10의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 9의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 8의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 7의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 6의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 5의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 4의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 3의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 2 내지 12의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 2 내지 10의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 2 내지 9의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 2 내지 8의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 2 내지 7의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 2 내지 6의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 2 내지 5의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 2 내지 4의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 3 내지 12의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 3 내지 10의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 3 내지 9의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 3 내지 8의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 3 내지 7의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 3 내지 6의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 3 내지 5의 범위이다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 3 내지 4의 범위이다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 1 내지 약 8; 약 2 내지 약 6; 약 3 내지 약 5; 약 3 내지 약 4; 약 3.1 내지 약 3.9; 약 3.2 내지 약 3.8; 약 3.2 내지 약 3.7; 약 3.2 내지 약 3.6; 약 3.3 내지 약 3.8; 또는 약 3.3 내지 약 3.7의 범위이다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 약 1, 약 2, 약 3, 약 4, 약 5, 약 6, 약 7, 약 8, 약 9, 약 10, 약 11, 약 12 또는 그 이상이다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 ADC에 대한 약물 로딩은 약 3.1, 약 3.2, 약 3.3, 약 3.4, 약 3.5, 약 3.6, 약 3.7, 약 3.8, 또는 약 3.9이다.
특정 구현예에서, 컨쥬게이션 반응 동안 약물 유닛의 이론상 최대값보다 적은 양이 항체에 컨쥬게이트된다. 항체는 예를 들어, 약물-링커 중간체 또는 링커 시약과 반응하지 않는 라이신 잔기를 함유할 수 있다. 일반적으로 항체는 약물 유닛에 연결될 수 있는 많은 유리 및 반응성 시스테인 티올기를 함유하지 않고; 실제로 항체의 대부분의 시스테인 티올 잔기는 이황화 브릿지로 존재한다. 특정 구현예에서, 항체는, 부분 또는 전체 환원 조건 하에서, 디티오트레이톨(DTT) 또는 트리카르보닐에틸포스핀(TCEP)과 같은 환원제로 환원되어, 반응성 시스테인 티올기를 생성할 수 있다. 특정 구현예에서, 항체는 라이신 또는 시스테인과 같은 반응성 친핵성 그룹을 나타내기 위해 변성 조건에 도입된다. 몇몇 구현예에서, 링커 유닛 또는 약물 유닛은 항체 유닛 상의 라이신 잔기를 통해 컨쥬게이트된다. 몇몇 구현예에서, 링커 유닛 또는 약물 유닛은 항체 유닛 상의 시스테인 잔기를 통해 컨쥬게이트된다.
몇몇 구현예에서, 링커 유닛 또는 약물 유닛에 부착되는 아미노산은 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 중쇄에 있다. 몇몇 구현예에서, 링커 유닛 또는 약물 유닛에 부착되는 아미노산은 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 경쇄에 있다. 몇몇 구현예에서, 링커 유닛 또는 약물 유닛에 부착되는 아미노산은 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 힌지 영역에 있다. 몇몇 구현예에서, 링커 유닛 또는 약물 유닛에 부착되는 아미노산은 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 Fc 영역에 있다. 다른 구현예에서, 링커 유닛 또는 약물 유닛에 부착되는 아미노산은 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 불변 영역(예를 들어, 중쇄의 CH1, CH2 또는 CH3, 또는 경쇄의 CH1)에 있다. 또 다른 구현예에서, 링커 유닛 또는 약물 유닛에 부착되는 아미노산은 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 VH 프레임워크 영역에 있다. 또 다른 구현예에서, 링커 유닛 또는 약물 유닛에 부착되는 아미노산은 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 VL 프레임워크 영역에 있다.
ADC의 로딩(약물/항체 비율)은 예를 들어 다음과 같은 다양한 방식으로 제어될 수 있다: (i) 항체에 대한 약물-링커 중간체 또는 링커 시약의 몰 과량을 제한,
(ii) 컨쥬게이션 반응 시간 또는 온도를 제한, (iii) 시스테인 티올 변형을 위한 부분적 또는 제한적 환원 조건, (iv) 링커-약물 부착의 수 및/또는 위치의 제어를 위해 시스테인 잔기의 수 및 위치가 변형되도록 재조합 기술에 의한 항체의 아미노산 서열 엔지니어링(본원 및 WO2006/034488(본원에 그 전체가 참고로 통합됨)에 개시된 바와 같이 제조된 thioMab 또는 thioFab).
하나 이상의 친핵성 기가 약물-링커 중간체 또는 링커 시약에 이어 약물 유닛 시약과 반응하는 경우, 생성된 생성물은 항체 유닛에 부착된 하나 이상의 약물 유닛 분포를 갖는 ADC 화합물의 혼합물임이 이해되어야 한다. 항체 당 약물의 평균 수는 이중 ELISA 항체 어세이에 의해 혼합물로부터 계산될 수 있으며, 이는 항체에 특이적이고 약물에 특이적인 것이다. 개별 ADC 분자는 질량 분광법으로 혼합물에서 식별되고, 예를 들어 소수성 상호작용 크로마토그래피와 같은, HPLC로 분리할 수 있다(예를 들어, Hamblett, K.J., et al. “Effect of drug loading on the pharmacology, pharmacokinetics, and toxicity of an anti-CD30 antibody-drug conjugate,” Abstract No. 624, American Association for Cancer Research, 2004 Annual Meeting, March 27-31, 2004, Proceedings of the AACR, Volume 45, March 2004; Alley, S.C., et al. “Controlling the location of drug attachment in antibody-drug conjugates,” Abstract No. 627, American Association for Cancer Research, 2004 Annual Meeting, March 27-31, 2004, Proceedings of the AACR, Volume 45, March 2004 참조). 특정 구현예에서, 단일 로딩 값을 갖는 균질 ADC는 전기영동 또는 크로마토그래피에 의해 컨쥬게이션 혼합물로부터 단리될 수 있다.
항체 약물 컨쥬게이트를 제조, 스크리닝 및 특성화하는 방법은 예를 들어, 미국 특허 제8,637,642호에 기술된 바와 같이, 당업자에게 공지되어 있으며, 이는 그 전체가 참고로 본원에 포함된다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 방법을 위한 항체 약물 컨쥬게이트는 AGS-22M6E이고, 이는 미국 특허 제8,637,642호에 기재된 방법에 따라 제조되고 하기 화학식을 갖는다:
Figure pct00039
여기서 L은 Ha22-2(2,4)6.1이고 p는 1 내지 20이다.
몇몇 구현예에서, p는 1 내지 20, 1 내지 10, 1 내지 9, 1 내지 8, 1 내지 7, 1 내지 6, 1 내지 5, 1 내지 4, 1 내지 3, 또는 1 내지 2의 범위이다. 몇몇 구현예에서, p는 2 내지 10, 2 내지 9, 2 내지 8, 2 내지 7, 2 내지 6, 2 내지 5, 2 내지 4 또는 2 내지 3의 범위이다. 다른 구현예에서, p는 약 1이다. 다른 구현예에서, p는 약 2이다. 다른 구현예에서, p는 약 3이다. 다른 구현예에서, p는 약 4이다. 다른 구현예에서, p는 약 5이다. 다른 구현예에서, p는 약 6이다. 다른 구현예에서, p는 약 7이다. 다른 구현예에서, p는 약 8이다. 다른 구현예에서, p는 약 9이다. 다른 구현예에서, p는 약 10이다. 다른 구현예에서, p는 약 3.1이다. 다른 구현예에서, p는 약 3.2이다. 다른 구현예에서, p는 약 3.3이다. 다른 구현예에서, p는 약 3.4이다. 다른 구현예에서, p는 약 3.5이다. 다른 구현예에서, p는 약 3.6이다. 다른 구현예에서, p는 약 3.7이다. 다른 구현예에서, p는 약 3.8이다. 다른 구현예에서, p는 약 3.9이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.0이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.1이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.2이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.3이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.4이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.5이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.6이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.7이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.8이다. 다른 구현예에서, p는 약 4.9이다. 다른 구현예에서, p는 약 5.0이다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 방법에 사용된 ADC는 엔포르투맙 베도틴이다. 엔포르투맙 베도틴은 프로테아제 절단 가능한 링커를 통해 미세소관-교란제(MMAE)에 컨쥬게이트된 완전한 인간 면역글로불린 G1 카파(IgG1K) 항체로 구성된 ADC이다(Challita-Eid PM et al, Cancer Res. 2016;76(10):3003-13). 엔포르투맙 베도틴은 ADC-191P4D12 복합체의 내재화를 유도하는 세포 표면의 191P4D12 단백질에 결합하여 항종양 활성을 유도하고, 그런 다음 링커의 단백질 분해 절단을 통해 MMAE가 방출되는 리소좀 구획으로 이동한다. MMAE의 세포 내 방출은 이후 튜불린 중합을 방해하여 G2/M기 세포 주기 정지 및 아팝토시스성 세포 사멸을 초래한다(Francisco JA et al, Blood. 2003 Aug 15;102(4):1458-65).
상기 및 미국 특허 제8,637,642호에 기재된 바와 같이, AGS-22M6E는 뮤린 하이브리도마 세포 라인으로부터 유래된 ADC이다. 엔포르투맙 베도틴은 AGS-22M6E ADC의 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포 라인 유래 등가물이며, 인간 치료에 사용되는 대표적인 생성물이다. 엔포르투맙 베도틴은 AGS-22M6E와 동일한 아미노산 서열, 링커 및 세포독성 약물을 갖는다. 엔포르투맙 베도틴과 AGS-22M6E 간의 비교가능성(comparability)은 191P4D12에 대한 결합 친화성, 시험관 내 세포 독성 및 생체 내 항종양 활성과 같은 광범위한 분석 및 생물학적 특성화 연구를 통해 확인되었다.
5.4 약제학적 조성물
본원에 제공된 방법의 특정 구현예에서, 방법에 사용된 ADC는 "약제학적 조성물"로 제공된다. 이러한 약제학적 조성물은 본원에 제공된 항체 약물 컨쥬게이트, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되거나 생리학적으로 허용되는 부형제를 포함한다. 특정 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 하나 이상의 추가 제제와 조합하여 또는 이와 별도로 제공된다. 또한, 이러한 하나 이상의 추가 제제 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되거나 생리학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 조성물이 제공된다. 특정 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트 및 추가 제제(들)는 치료학적으로 허용되는 양으로 존재한다. 약제학적 조성물은 본원에 제공된 방법 및 용도에 따라 사용될 수 있다. 따라서, 예를 들어, 약제학적 조성물은 본원에 제공된 치료 방법 및 용도를 실행하기 위해 대상에게 생체외 또는 생체내 투여될 수 있다. 본원에서 제공되는 약제학적 조성물은 의도된 투여 방법 또는 경로와 양립가능하도록 제형화될 수 있으며; 예시적인 투여 경로가 본원에 제시되어 있다.
몇몇 구현예에서, 암 또는 종양을 조절하는 항체 약물 컨쥬게이트의 약제학적 조성물이 제공된다.
본원에 제공된 방법의 특정 구현예에서, ADC를 포함하는 약제학적 조성물은 본원에 기재된 바와 같은 다양한 질병 및 장애의 치료 또는 예방에 사용될 수 있는, 본원에 개시되거나 당업자에게 공지된 기타 치료 활성제 또는 화합물을 더욱 포함할 수 있다(예컨대, 암). 상기 기재된 바와 같이, 추가의 치료 활성제 또는 화합물은 별도의 약제학적 조성물(들)에 존재할 수 있다.
약제학적 조성물은 전형적으로 치료적 유효량의 본원에 제공된 적어도 하나의 항체 약물 컨쥬게이트 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 제제를 포함한다. 특정 구현예에서, 약제학적 조성물은 본원에 기재된 하나 이상의 추가 제제를 더욱 포함한다.
한 구현예에서, 약제학적 조성물은 본원에 제공된 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 본원에 제공된 치료적 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 특정 구현예에서, 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 항체 약물 컨쥬게이트는 하기 섹션 5.3에 기재된 항체 약물 컨쥬게이트로부터 선택된다.
특정 구현예에서, 약제학적 조성물은 0.1 내지 100 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 1 내지 20 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 5 내지 15 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 8 내지 12 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 9 내지 11 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 9.5 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 9.6 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 9.7 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 9.8 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 9.9 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 10 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 10.1 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 10.2 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 10.3 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 10.3 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 10.4 mg/mL의 농도로 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 약 10.5 mg/mL 농도의 항체 약물 컨쥬게이트를 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에서 제공되는 약제학적 조성물은 L-히스티딘, TWEEN-20, 및 트레할로스 이수화물 또는 수크로스 중 적어도 하나를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 염산(HCl) 또는 숙신산을 더욱 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물에 유용한 L-히스티딘의 농도는 5 내지 50mM 범위이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 10 내지 40mM 범위이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 15 내지 35mM 범위이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 15 내지 30mM 범위이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 15 내지 25mM 범위이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 15 내지 35mM 범위이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 16mM이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 17mM이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 18mM이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 19mM이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 20mM이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 21mM이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 22mM이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 23mM이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 24mM이다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물 중 L-히스티딘의 농도는 약 25mM이다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물에 유용한 TWEEN-20의 농도는 0.001 내지 0.1%(v/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 0.0025 내지 0.075%(v/v) 범위이다. 한 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 0.005 내지 0.05%(v/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 0.0075 내지 0.025%(v/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 0.0075 내지 0.05%(v/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 0.01 내지 0.03%(v/v) 범위이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.01%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.015%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.016%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.017%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.018%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.019%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.02%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.021%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.022%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.023%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.024%(v/v)이다. 한 특정 구현예에서, TWEEN-20의 농도는 약 0.025%(v/v)이다.
한 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물에 유용한 트레할로스 이수화물의 농도는 1% 내지 20%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 2% 내지 15%(w/v) 범위이다. 한 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 3% 내지 10%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 4% 내지 9%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 4% 내지 8%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 4% 내지 7%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 4% 내지 6%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 4.5% 내지 6%(w/v) 범위이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 4.6%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 4.7%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 4.8%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 4.9%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.0%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.1%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.2%(w/v)이다. 또 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.3%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.4%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.5%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.6%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.7%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.8%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 5.9%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 6.0%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 6.1%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 6.2%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 6.3%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 6.4%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 농도는 약 6.5%(w/v)이다.
특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 50 내지 300 mM이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 75 내지 250mM이다. 몇몇 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 100 내지 200 mM이다. 다른 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 130 내지 150 mM이다. 일부 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 135 내지 150 mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 135mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 136mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 137mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 138mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 139mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 140mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 141 mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 142 mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 143mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 144mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 145mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 146mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 150mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 151mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 151mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 152mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 153mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 154mM이다. 특정 구현예에서, 트레할로스 이수화물의 몰 농도는 약 155mM이다.
한 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물에 유용한 수크로스의 농도는 1% 내지 20%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 2% 내지 15%(w/v) 범위이다. 한 구현예에서, 수크로스의 농도는 3% 내지 10%(w/v) 범위이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 4% 내지 9%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 4% 내지 8%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 4% 내지 7%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 4% 내지 6%(w/v) 범위이다. 또 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 4.5% 내지 6%(w/v) 범위이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 4.6%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 4.7%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 4.8%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 4.9%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.0%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.1%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.2%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.3%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.4%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.5%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.6%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.7%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.8%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 5.9%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 6.0%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 6.1%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 6.2%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 6.3%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 6.4%(w/v)이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 농도는 약 6.5%(w/v)이다.
특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 50 내지 300mM이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 75 내지 250mM이다. 몇몇 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 100 내지 200mM이다. 다른 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 130 내지 150mM이다. 몇몇 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 135 내지 150mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 135mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 136mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 137mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 138mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 139mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 140mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 141mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 142mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 143mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 144mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 145mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 146mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 150mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 151mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 151mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 152mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 153mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 154mM이다. 특정 구현예에서, 수크로스의 몰 농도는 약 155mM이다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 HCl을 포함한다. 다른 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 숙신산을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 5.5 내지 6.5 범위의 pH를 갖는다. 다른 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 5.7 내지 6.3 범위의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 5.7의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 5.8의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 5.9의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 6.0의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 6.1의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 6.2의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 6.3의 pH를 갖는다.
몇몇 구현예에서, pH는 실온에서 취해진다. 다른 구현예에서, pH는 15℃ 내지 27℃에서 취해진다. 또 다른 구현예에서, pH는 4℃에서 취해진다. 또 다른 구현예에서, pH는 25℃에서 취해진다.
몇몇 구현예에서, pH는 HCl에 의해 조정된다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 5.5 내지 6.5 범위의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 5.7 내지 6.3 범위의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 5.7의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 5.8의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 5.9의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 6.0의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 6.1의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 6.2의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 6.3의 pH를 갖는다.
몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 5.5 내지 6.5 범위의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 5.7 내지 6.3 범위의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 5.7의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 5.8의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 5.9의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 6.0의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 6.1의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 6.2의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 HCl을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 6.3의 pH를 갖는다.
몇몇 구현예에서, pH는 숙신산에 의해 조정된다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 5.5 내지 6.5 범위의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 5.7 내지 6.3 범위의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 5.7의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 5.8의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 5.9의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 6.0의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 6.1의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 6.2의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 실온에서 약 6.3의 pH를 갖는다.
몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 5.5 내지 6.5 범위의 pH를 갖는다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 5.7 내지 6.3 범위의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 5.7의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 5.8의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 5.9의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 6.0의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 6.1의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 6.2의 pH를 갖는다. 몇몇 보다 구체적인 구현예에서, 약제학적 조성물은 숙신산을 포함하고, 약제학적 조성물은 15℃ 내지 27℃에서 약 6.3의 pH를 갖는다.
몇몇 특정 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 및 약 5.5%(w/v) 트레할로스 이수화물 또는 약 5%(w/v) 자당 중 적어도 하나를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 HCl 또는 숙신산을 더욱 포함한다. 몇몇 구현예에서, pH는 실온에서 약 6.0이다. 몇몇 구현예에서, pH는 25℃에서 약 6.0이다.
몇몇 특정 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5.5%(w/v) 트레할로스 이수화물 및 HCl을 포함한다. 몇몇 구현예에서, pH는 실온에서 약 6.0이다. 몇몇 구현예에서, pH는 25℃에서 약 6.0이다.
몇몇 특정 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5%(w/v) 수크로스 및 HCl을 포함한다. 몇몇 구현예에서, pH는 실온에서 약 6.0이다. 몇몇 구현예에서, pH는 25℃에서 약 6.0이다.
다른 특정 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5.5%(w/v) 트레할로스 이수화물 및 숙신산을 포함한다. 몇몇 구현예에서, pH는 실온에서 약 6.0이다. 몇몇 구현예에서, pH는 25℃에서 약 6.0이다.
몇몇 특정 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5%(w/v) 수크로스 및 숙신산을 포함한다. 몇몇 구현예에서, pH는 실온에서 약 6.0이다. 몇몇 구현예에서, pH는 25℃에서 약 6.0이다.
특정 구현예에서, 본원에 제공되는 것은
(a) 하기 구조를 포함하는 항체 약물 컨쥬게이트:
Figure pct00040
여기서 L-은 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 나타내고 p는 1 내지 10이고; 및
(b) 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5.5%(w/v) 트레할로스 이수화물, 및 HCl을 포함하는 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하고, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 약 10 mg/mL의 농도이고, pH는 25℃에서 약 6.0이다.
또 다른 특정 구현예에서, 본원에 제공되는 약제학적 조성물은
(a) 하기 구조를 포함하는 항체 약물 컨쥬게이트:
Figure pct00041
여기서 L-은 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 나타내고 p는 1 내지 10이고; 및
(b) 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5.5%(w/v) 트레할로스 이수화물, 및 숙신산을 포함하는 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하고, 여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 약 10 mg/mL의 농도이고, pH는 25℃에서 약 6.0이다.
또 다른 특정 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은
(a) 하기 구조를 포함하는 항체 약물 컨쥬게이트:
Figure pct00042
여기서 L-은 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 나타내고 p는 1 내지 10이고; 및
(b) 약 20mM L-히스티딘, 약 0.02%(w/v) TWEEN-20, 약 5.0%(w/v) 수크로스, 및 HCl을 포함하는 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하며,
여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 약 10 mg/mL의 농도이고, 여기서 pH는 25℃에서 약 6.0이다.
특정 수치(및 그 수치 범위)가 제공되지만, 특정 구현예에서, 예를 들어, 상기 수치(또는 수치 범위)의 2%, 5%, 10%, 15% 또는 20% 내의 수치 값도 고려됨이 이해되어야 한다. 다른 예시적인 약제학적 조성물은 하기 실험 섹션에서 제공된다.
비히클의 1차 용매는 사실상 수성 또는 비수성일 수 있다. 또한, 비히클은 약제학적 조성물의 pH, 삼투압 농도, 점도, 무균성 또는 안정성을 변경하거나 유지하기 위한 다른 약제학적으로 허용되는 부형제를 함유할 수 있다. 특정 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 비히클은 수성 완충액이다. 다른 구현예에서, 비히클은 예를 들어 염화나트륨 및/또는 시트르산나트륨을 포함한다.
본원에서 제공되는 약제학적 조성물은 본원에 기재된 바와 같이 항체 약물 컨쥬게이트 및/또는 추가 제제의 방출 속도를 변형 또는 유지하기 위한 또 다른 약제학적으로 허용되는 제제를 함유할 수 있다. 이러한 제제는 서방성 제제의 제조에 숙련된 기술자에게 알려진 물질을 포함한다. 약제학적 및 생리학적으로 허용되는 제제에 관한 추가 참조는 예를 들어 Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed.(1990, Mack Publishing Co., Easton, Pa. 18042) pages 1435-1712, The Merck Index, 12th Ed. (1996, Merck Publishing Group, Whitehouse, NJ); 및 Pharmaceutical Principles of Solid Dosage Forms (1993, Technonic Publishing Co., Inc., Lancaster, Pa.)를 참고하라. 투여에 적합한 추가의 약제학적 조성물은 당업계에 공지되어 있으며, 여기에 제공된 방법 및 조성물에 적용가능하다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공되는 약제학적 조성물은 액체 형태이다. 다른 구현예에서, 본원에 제공되는 약제학적 조성물은 동결건조된다.
약제학적 조성물은 그의 의도된 투여 경로와 양립가능하도록 제형화될 수 있다. 따라서, 약제학적 조성물은 비경구(예: 피하(s.c.), 정맥내, 근육내 또는 복강내), 피내, 경구(예: 섭취), 흡입, 강내, 두개내 및 경피(국소)를 포함하는, 경로에 의한 투여에 적합한 부형제를 포함한다. 다른 예시적인 투여 경로가 본원에 제시되어 있다.
약제학적 조성물은 멸균 주사 가능한 수성 또는 유성 현탁액의 형태일 수 있다. 이 현탁액은 본원에 개시되거나 당업자에게 공지된 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 제형화될 수 있다. 멸균 주사 가능한 제제는 또한 예를 들어 1,3-부탄 디올의 용액과 같은 무독성 비경구 허용 희석제 또는 용매의 멸균 주사 가능 용액 또는 현탁액일 수 있다. 사용될 수 있는 허용 가능한 희석제, 용매 및 분산 매질은 물, 링거 용액, 등장성 염화나트륨 용액, Cremophor EL™(BASF, Parsippany, NJ) 또는 인산염 완충 식염수(PBS), 에탄올, 폴리올(예: 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜), 및 이들의 적절한 혼합물을 포함한다. 또한, 멸균, 고정 오일(fixed oils)은 통상적으로 용매 또는 현탁 매체로 사용된다. 이 목적을 위해 합성 모노 또는 디글리세리드를 포함하는, 임의의 블랜드(bland) 고정 오일이 사용될 수 있다. 또한, 올레산과 같은 지방산은 주사제의 제조에 사용된다. 특정 주사 가능 제형의 장기간 흡수는 흡수를 지연시키는 제제를 포함함으로써 달성될 수 있다(예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트 또는 젤라틴).
일 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 국소 또는 전신 투여를 위해, 주사, 주입 또는 이식에 의해 비경구적으로 투여될 수 있다. 본원에 사용된 비경구 투여는 정맥내, 동맥내, 복강내, 척추강내, 뇌실내, 요도내, 흉골내, 두개내, 근육내, 활막내, 및 피하 투여를 포함한다
일 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 비경구 투여에 적합한 임의의 투여 형태로 제형화될 수 있다. 용액, 현탁액, 에멀젼, 미셀, 리포솜, 미소구체, 나노시스템 및 고체 형태를 포함하여 주입 전 액체의 용액 또는 현탁액에 적합합니다. 이러한 투여 형태는 약제학 분야의 숙련가에게 공지된 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다(예를 들어, Remington, The Science and Practice of Pharmacy, supra 참조).
일 구현예에서, 비경구 투여용 약제학적 조성물은 수성 비히클, 수혼화성 비히클, 비수성 비히클, 미생물의 성장에 대한 항균제 또는 방부제, 안정제, 용해도 향상제, 등장제, 완충제, 항산화제, 국소마취제, 현탁 및 분산제, 습윤제 또는 유화제, 착화제, 격리제(sequestering agent) 또는 킬레이트제, 냉동 보호제(cryoprotectants), 동결건조 보호제(lyoprotectants), 증점제, pH 조절제, 및 불활성 가스를 포함하나, 이에 제한되지 않는, 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함할 수 있다.
일 구현예에서, 적합한 수성 비히클은 물, 식염수, 생리 식염수 또는 인산완충식염수(PBS), 염화나트륨 주사, 링거 주사, 등장성 덱스트로스 주사, 멸균수 주사, 덱스트로스 및 젖산 링거 주사를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 비-수성 비히클은 식물 기원 고정유, 피마자유, 옥수수유, 면실유, 올리브유, 땅콩유, 페퍼민트유, 홍화유, 참기름, 대두유, 경화식물유, 경화대두유, 코코넛 오일의 중간 사슬 트리글리세리드, 및 야자씨 오일을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 수혼화성 비히클을 에탄올, 1,3-부탄디올, 액체 폴리에틸렌 글리콜(예: 폴리에틸렌 글리콜 300 및 폴리에틸렌 글리콜 400), 프로필렌 글리콜, 글리세린, N-메틸-2-피롤리돈, N,N-디메틸아세트아미드, 및 디메틸 설폭사이드를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
일 구현예에서, 적합한 항미생물제 또는 보존제는 페놀, 크레졸, 수은, 벤질 알코올, 클로로부탄올, 메틸 및 프로필 p-히드록시벤조에이트, 티메로살, 염화벤잘코늄(예: 염화벤제토늄), 메틸- 및 프로필-파라벤, 소르브산을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 적합한 등장제는 염화나트륨, 글리세린 및 덱스트로스를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 적합한 완충제는 포스페이트 및 시트레이트를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 적합한 항산화제는 중아황산염 및 메타중아황산나트륨을 포함하는 본원에 기재된 바와 같은 것들이다. 적합한 국소 마취제는 염산프로카인이 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 적합한 현탁 및 분산제는 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 히드록시프로필 메틸셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리돈을 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 것들이다. 적합한 유화제는 본원에 기재된 것을 포함하고, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트 80 및 트리에탄올아민 올레에이트를 포함한다. 적합한 격리제 또는 킬레이트제는 EDTA를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 적합한 pH 조절제는 수산화나트륨, 염산, 시트르산 및 젖산을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 적합한 착화제는 a-시클로덱스트린, b-시클로덱스트린, 히드록시프로필-b-시클로덱스트린, 설포부틸에테르-b-시클로덱스트린, 및 설포부틸에테르 7-b-시클로덱스트린(CAPTISOL®, CyDex, Lenexa, KS)을 포함하는 시클로덱스트린을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
일 구현예에서, 본원에서 제공되는 약제학적 조성물은 단일 또는 다중 투여용으로 제형화될 수 있다. 단일 투여 제형은 앰플, 바이알 또는 주사기에 패키징된다. 다중 투여 비경구 제형은 정균 또는 정진균 농도의 항균제를 함유할 수 있다. 모든 비경구 제형은 당업계에 공지되고 실시되는 바와 같이 멸균되어야 한다.
일 구현예에서, 약제학적 조성물은 즉시 사용 가능한 멸균 용액으로 제공된다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 사용 전에 비히클로 재구성되는 동결건조 분말 및 피하 정제를 포함하는 멸균 건조 가용성 제품으로서 제공된다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 즉시 사용 가능한 멸균 현탁액으로서 제공된다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 사용 전에 비히클로 재구성되는 멸균 건조 불용성 제품으로서 제공된다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 즉시 사용 가능한 멸균 에멀젼으로 제공된다.
일 구현예에서, 본원에서 제공되는 약제학적 조성물은 지연형, 지속형, 펄스형, 제어형, 표적형 및 프로그래밍된 방출 형태를 포함하는, 즉시 방출 또는 변형 방출 투여 형태로 제형화될 수 있다.
물의 첨가에 의한 수성 현탁액의 제조에 적합한 분산성 분말 및 과립은 분산제 또는 습윤제, 현탁제 및 하나 이상의 보존제와 혼합하여 활성 성분을 제공한다. 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제가 본원에서 예시된다.
약제학적 조성물은 또한 임플란트, 리포솜, 하이드로겔, 전구약물 및 마이크로캡슐화된 전달 시스템을 포함하는 제어 방출 제형과 같은, 급격한 분해 또는 신체로부터의 제거로부터 조성물을 보호하기 위한 부형제를 포함할 수 있다. 예를 들어, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 스테아레이트와 같은 시간 지연 물질은 단독으로 또는 왁스와 조합하여 사용될 수 있다. 주사 가능 약제학적 조성물의 연장된 흡수는 예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트 또는 젤라틴과 같은 흡수를 지연시키는 제제를 포함함으로써 달성될 수 있다. 미생물의 작용은 예를 들어, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 아스코르브산, 티메로살 등과 같은 다양한 항균 및 항진균제에 의해 방지될 수 있다.
본원에 제공되는 약제학적 조성물은 -80℃, 4℃, 25℃, 또는 37℃에서 저장될 수 있다.
동결건조된 조성물은 본원에 제공된 액체 약제학적 조성물을 냉동 건조함으로써 제조될 수 있다. 특정 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 동결건조된 약제학적 조성물이다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 제형은 용액, 에멀젼 및 기타 혼합물로서 투여를 위해 재구성될 수 있는 동결건조된 분말이다. 이들은 또한 고체 또는 겔로 재구성 및 제형화될 수 있다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 동결건조 제형의 제조는 동결건조를 위해 제형화된 벌크 용액의 배칭(batching), 무균 여과, 바이알 충전, 냉동-건조기 챔버에서 바이알을 냉동시킨 후 동결 건조, 스토퍼링 및 캡핑을 포함한다.
동결건조기는 동결건조된 제형을 제조하는데 사용될 수 있다. 예를 들어 VirTis Genesis Model EL 파일럿 유닛이 사용될 수 있다. 이 유닛은 3개의 작업 선반(약 0.4제곱미터의 총 사용 가능한 선반 면적)을 갖는 챔버, 외부 응축기 및 기계식 진공 펌핑 시스템을 혼입한다. 캐스캐이드 기계식 냉각은 선반을 -70°C 이하로, 외부 콘덴서를 -90°C 이하로 냉각시킬 수 있다. 선반 온도와 챔버 압력은 각각 +/- 0.5℃ 및 +/- 2 미크론(milliTorr)으로 자동 제어되었다. 상기 유닛에는 정전용량 압력계 진공 게이지, Pirani 진공 게이지, 압력 변환기(0에서 1기압까지 측정) 및 상대 습도 센서가 장착되어 있다.
동결건조된 분말은 본원에 제공된 항체 약물 컨쥬게이트 또는 이의 약제학적으로 허용되는 유도체를 적합한 용매에 용해시켜 제조될 수 있다. 몇몇 구현예에서, 동결건조된 분말은 멸균된 것이다. 당업자에게 공지된 표준 조건하에서 동결건조에 이은 용액의 후속 멸균 여과는 원하는 제형을 제공한다. 일 구현예에서, 생성된 용액은 동결건조를 위해 바이알에 분배될 것이다. 각 바이알은 단일 투여량 또는 다중 투여량의 항체 약물 컨쥬게이트를 함유할 것이다. 동결건조된 분말은 약 4°C 내지 실온과 같은 적절한 조건하에서 보관될 수 있다.
주사용수로 이 동결건조된 분말의 재구성은 비경구 투여에 사용하기 위한 제형을 제공한다. 재구성을 위해, 동결건조된 분말은 멸균수 또는 기타 적절한 부형제에 첨가된다. 이러한 양은 경험적으로 결정되고 특정 필요에 따라 조정될 수 있다.
예시적인 재구성 절차는 다음과 같이 예시된다: (1) 5mL 또는 3mL 주사기를 18 또는 20 게이지 바늘로 맞추고 주사기를 주사용수(WFI) 등급의 물로 채운다; (2) 주사기 눈금을 사용하여 적절한 양의 WFI를 측정하여 주사기에 기포가 없는지 확인한다; (3) 고무 스토퍼를 통해 바늘이 삽입된다; (4) 주사기의 전체 내용물을 바이알 벽 아래로 용기에 분배하고 주사기와 바늘을 제거하고 샤프 용기에 넣는다; (4) 완전히 재구성될 때까지(예를 들어, 약 20-40초) 전체 바이알 내용물을 조심스럽게 가용화하기 위해 계속해서 바이알을 휘젓고 거품을 일으킬 수 있는 단백질 용액의 과도한 교반을 최소화한다.
5.5 병용 요법에서 약제학적 조성물을 사용하는 방법
본원에 제공된 약제학적 조성물을 화학요법 또는 방사선 또는 둘 모두와 조합하여 사용하여 종양 세포의 성장을 억제하는 방법은 화학요법 또는 방사선 요법을 개시하기 전, 개시하는 동안 또는 개시한 후, 뿐만 아니라 이들의 임의의 조합(즉, 화학요법 및/또는 방사선 요법을 개시하기 전과 도중, 전과 후에, 도중과 후에, 또는 전, 도중 및 후에)에서 본 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 치료 프로토콜과 특정 환자의 필요에 따라, 방법은 가장 효과적인 치료를 제공하고 궁극적으로 환자의 생명을 연장할 방식으로 수행된다.
화학요법제의 투여는 비경구 및 장 경로에 의한 전신을 포함하는 다양한 방식으로 달성될 수 있다. 일 구현예에서, 화학요법제는 별도로 투여된다. 화학요법제 또는 화학요법의 특정 예는 시스플라틴, 다카바진(DTIC), 닥티노마이신, 메클로레타민(질소 머스타드), 스트렙토조신, 사이클로포스파미드, 카르무스틴(BCNU), 로무스틴(CCNU), 독소루비신(아드리아마이신), 다우노루비신, 프로카바진, 미토마이신, 시타라빈, 에토포사이드, 메토트렉세이트, 5-플루오로우라실, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 블레오마이신, 파클리탁셀(탁솔), 도세탁셀(탁소테레), 알데스류킨, 아스파라기나제, 부설판, 카보플라틴, 클라드리빈, 다카바진, 플록수리딘, 플루다라빈, 히드록시우레아, 이포스파미드, 인터페론 알파, 류프롤리드, 메게스트롤, 멜팔란, 메르캅토퓨린, 플리카마이신, 미토탄, 페가스파가제, 펜토스타틴, 피포브로만, 플리카마이신, 스트렙토조신, 타목시펜, 테니포시드, 테스토락톤, 티오구아닌, 티오테파, 우라실 머스타드, 비노렐빈, 젬시타빈, 클로람부실, 탁솔 및 이들의 조합을 포함한다.
본원에 제공된 약제학적 조성물과 조합하여 사용되는 방사선원은 치료 중인 환자의 외부 또는 내부에 있을 수 있다. 방사선원이 환자 외부에 있는 경우 상기 요법은 외부 빔 방사선 요법(EBRT)이라고 한다. 방사선원이 환자 내부에 있는 경우, 상기 치료는 근접 치료(BT)라고 한다.
상기 기재된 치료 요법은 예를 들어 추가 화학 요법, 암 백신, 신호 전달 억제제, 비정상적인 세포 성장 또는 암 치료에 유용한 제제, 항체(예를 들어 WO/2005/092380(화이자)에 기술된 항-CTLA-4 항체) 또는 IGF-1R 및 사이토카인에 결합하여 종양 성장을 억제하는 다른 리간드와 같은 추가 암 치료제 및/또는 요법과 더욱 조합될 수 있다.
포유동물이 추가 화학요법을 받는 경우, 상기 기재된 화학요법제가 사용될 수 있다. 또한, 성장 인자 억제제, 생물학적 반응 조절제, 항호르몬 요법, 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERMs), 혈관신생 억제제 및 항안드로겐이 사용될 수 있다. 예를 들어, 예를 들어 Nolvadex(타목시펜)와 같은 항에스트로겐과 같은, 항호르몬제, 또는, 카소덱스(4'-시아노-3-(4-플루오로페닐설포닐)-2-히드록시-2-메틸-3-'-(트리플루오로메틸)프로피오아닐리드)와 같은 항안드로겐이 사용될 수 있다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 제약은 예를 들어 암을 치료하기 위한, 제2 치료제와 조합되어 사용된다.
몇몇 구현예에서, 제2 치료제는 면역 체크포인트 억제제이다. 본원에 사용된 용어 "면역 체크포인트 억제제" 또는 "체크포인트 억제제"는 하나 이상의 체크포인트 단백질을 전체적으로 또는 부분적으로 감소, 억제, 간섭 또는 조절하는 분자를 지칭한다. 특정 이론에 제한되지 않고, 체크포인트 단백질은 T-세포 활성화 또는 기능을 조절한다. CTLA-4 및 이의 리간드 CD80 및 CD86; 및 리간드 PD-L1 및 PD-L2를 갖는 PD-1 같이, 수많은 체크포인트 단백질이 알려져 있다(Pardoll, Nature Reviews Cancer, 2012, 12, 252-264). 이들 단백질은 T 세포 반응의 공동 자극 또는 억제 상호 작용을 담당하는 것으로 보인다. 면역 체크포인트 단백질은 자가-내성과 생리적 면역 반응의 기간 및 진폭을 조절하고 유지하는 것으로 보인다. 면역 체크포인트 억제제는 항체를 포함하거나 항체로부터 유래된다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 CTLA-4 억제제이다. 일 구현예에서, CTLA-4 억제제는 항-CTLA-4 항체이다. 항 CTLA 4 항체의 예는 미국 특허 번호: 5,811,097; 5,811,097; 5,855,887; 6,051,227; 6,207,157; 6,682,736; 6,984,720; 및 7,605,238을 포함하나, 이에 제한되지 않으며, 이들 모두는 그 전체가 본원에 포함된다. 일 구현예에서, 항-CTLA-4 항체는 트레멜리무맙이다(티실리무맙 또는 CP-675,206으로도 알려짐). 또 다른 구현예에서, 항-CTLA-4 항체는 이필리무맙이다(MDX-010 또는 MDX-101로도 알려짐). 이필리무맙은 CTLA-4에 결합하는 완전한 인간 모노클로날 IgG 항체이다. 이필리무맙은 상표명 Yervoy™로 판매된다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 PD-1/PD-L1 억제제이다. PD-1/PD-L1 억제제의 예는 미국 특허 번호 7,488,802; 7,943,743; 8,008,449; 8,168,757; 8,217,149 및 PCT 특허 출원 공보 WO2003042402, WO2008156712, WO2010089411, WO2010036959, WO2011066342, WO2011159877, WO2011082400 및 WO2011161699에 기재된 것들을 포함하나, 이에 제한되지 않으며, 이들 모두는 그 전체가 본원에 포함된다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 PD-1 억제제이다. 일 구현예에서, PD-1 억제제는 항-PD-1 항체이다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체는 BGB-A317, 니볼루맙(ONO-4538, BMS-936558 또는 MDX1106으로도 공지됨) 또는 펨브롤리주맙(MK-3475, SCH 900475 또는 람브롤리주맙으로도 공지됨)이다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙이다. 니볼루맙은 인간 IgG4 항-PD-1 모노클로날 항체이며 상표명 Opdivo™로 판매된다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙이다. 펨브롤리주맙은 인간화 모노클로날 IgG4 항체이며 상품명 Keytruda™로 판매된다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 인간화 항체인 CT-011이다. 단독 투여된 CT-011은 재발 시 급성 골수성 백혈병(AML) 치료에서 반응을 나타내지 못하였다. 또 다른 구현예에서, 항-PD-1 항체는 융합 단백질인 AMP-224이다. 또 다른 구현예에서, PD-1 항체는 BGB-A317이다. BGB-A317은 Fc 감마 수용체 I에 결합하는 능력이 특이적으로 조작된 모노클로날 항체이고, 높은 친화성과 표적 특이성으로 PD-1에 고유한 결합 특징을 갖는다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 PD-L1 억제제이다. 일 구현예에서, PD-L1 억제제는 항-PD-L1 항체이다. 일 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 MEDI4736이다(두르발루맙). 또 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 BMS-936559이다(MDX-1105-01이라고도 함). 또 다른 구현예에서, PD-L1 억제제는 아테졸리주맙이다(MPDL3280A 및 Tecentriq®라고도 함).
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 PD-L2 억제제이다. 일 구현예에서, PD-L2 억제제는 항-PD-L2 항체이다. 일 구현예에서, 항-PD-L2 항체는 rHIgM12B7A이다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 림프구 활성화 유전자-3(LAG-3) 억제제이다. 일 구현예에서, LAG-3 억제제는 가용성 Ig 융합 단백질인 IMP321이다(Brignone et al., J. Immunol., 2007, 179, 4202-4211). 또 다른 구현예에서, LAG-3 억제제는 BMS-986016이다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 B7 억제제이다. 일 구현예에서, B7 억제제는 B7-H3 억제제 또는 B7-H4 억제제이다. 일 구현예에서, B7-H3 억제제는 항-B7-H3 항체인 MGA271이다(Loo et al., Clin. Cancer Res., 2012, 3834).
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 TIM3(T-세포 면역글로불린 도메인 및 뮤신 도메인 3) 억제제이다(Fourcade et al., J. Exp. Med., 2010, 207, 2175-86; Sakuishi et al., J. Exp. Med., 2010, 207, 2187-94).
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 OX40(CD134) 작용제이다. 일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 항-OX40 항체이다. 일 구현예에서, 항-OX40 항체는 항-OX-40이다. 또 다른 구현예에서, 항-OX40 항체는 MEDI6469이다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 GITR 작용제이다. 일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 항-GITR 항체이다. 일 구현예에서, 항-GITR 항체는 TRX518이다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 CD137 작용제이다. 일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 항-CD137 항체이다. 일 구현예에서, 항-CD137 항체는 우렐루맙이다. 또 다른 구현예에서, 항-CD137 항체는 PF-05082566이다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 CD40 작용제이다. 일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 항-CD40 항체이다. 일 구현예에서, 항-CD40 항체는 CF-870,893이다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 재조합 인간 인터루킨-15(rhIL-15)이다.
일 구현예에서, 체크포인트 억제제는 IDO 억제제이다. 일 구현예에서, IDO 억제제는 INCB024360이다. 또 다른 구현예에서, IDO 억제제는 인독시모드이다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 조합 요법은 본원에 기재된 2개 이상의 체크포인트 억제제(동일하거나 상이한 부류의 체크포인트 억제제 포함)를 포함한다. 더욱이, 본원에 기술된 조합 요법은 본원에 기술되고 당업계에서 이해되는 질병을 치료하는 데 적절한 경우, 본원에 기술된 하나 이상의 제2 활성제와 조합되어 사용될 수 있다.
몇몇 구현예에서, 체크포인트 억제제는 본 약제학적 조성물의 투여 전에 투여된다. 다른 구현예에서, 체크포인트 억제제는 본원에 제공된 약제학적 조성물과 동시에 (예를 들어, 동일한 투여 기간에) 투여된다. 또 다른 구현예에서, 체크포인트 억제제는 본원에 제공된 약제학적 조성물의 투여 후에 투여된다.
몇몇 구현예에서, 체크포인트 억제제의 양은 표준 임상 기술에 의해 결정될 수 있다.
체크포인트 억제제의 투여량은 약 0.1㎍/ml 내지 약 450㎍/ml의 혈청 역가를 초래하고, 및 몇몇 구현예에서 적어도 0.1㎍/ml, 적어도 0.2㎍/ml, 적어도 0.4㎍/ml, 적어도 0.5㎍/ml, 적어도 0.6㎍/ml, 적어도 0.8㎍/ml, 적어도 1㎍/ml, 적어도 1.5㎍/ml, 예를 들어, 적어도 2㎍/ml, 적어도 5㎍/ml, 적어도 10㎍/ml, 적어도 15㎍/ml, 적어도 20㎍/ml, 적어도 25㎍/ml, 적어도 30㎍/ml , 적어도 35㎍/ml, 적어도 40㎍/ml, 적어도 50㎍/ml, 적어도 75㎍/ml, 적어도 100㎍/ml, 적어도 125㎍/ml, 적어도 150㎍/ml, 적어도 200㎍/ml, 적어도 250㎍/ml, 적어도 300㎍/ml, 적어도 350㎍/ml, 적어도 400㎍/ml, 또는 적어도 450㎍/ml은, 암의 예방 및/또는 치료를 위해 인간에게 투여될 수 있다. 사용될 체크포인트 억제제의 정확한 투여량은 또한 투여 경로 및 대상의 암의 심각도에 따라 달라질 것이며, 실무자의 판단과 환자 각각의 상황에 따라 결정되어야 함이 이해되어야 한다.
몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 체크포인트 억제제(예를 들어, PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제)의 투여량은 전형적으로 대상의 체중의 0.1 mg/kg 내지 100 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 1 mg/kg 내지 약 75 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 1 mg/kg 내지 20 mg/kg, 예를 들어 대상의 체중의 1 mg/kg 내지 5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 1 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 1.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 2 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 2.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 3 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 3.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 4 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 4.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 5.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 6 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 6.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 7 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 7.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 8 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 8.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 9.0 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 10.0 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 15.0 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상체 체중의 약 20.0 mg/kg이다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물은 밀폐된 밀봉 용기에 건조 멸균 동결건조 분말 또는 물이 없는 농축액으로 공급되며 예를 들어, 대상에게 투여하기에 적절한 농도로 물 또는 식염수와 함께. 재구성될 수 있다. 특정 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 적어도 0.1 mg, 적어도 0.5 mg, 적어도 1 mg, 적어도 2 mg, 또는 적어도 3 mg, 예컨대 적어도 5 mg, 적어도 10 mg, 적어도 15 mg, 적어도 25 mg, 적어도 30mg, 적어도 35 mg, 적어도 45 mg, 적어도 50 mg, 적어도 60 mg, 적어도 75 mg, 적어도 80 mg, 적어도 85 mg, 적어도 90 mg, 적어도 95 mg, 또는 적어도 100 mg의 유닛 투여량으로 밀폐된 밀봉 용기에 건조 멸균 동결건조 분말로서 공급된다. 동결건조된 항체 약물 컨쥬게이트는 원래의 용기에 넣어 2 내지 8℃에서 보관될 수 있으며, 항체 약물 컨쥬게이트는 12시간 이내 예를 들어 재구성 후 6시간 이내, 5시간 이내, 3시간 이내, 또는 1시간 이내에 투여될 수 있다. 대안의 구현예에서, 본원에 제공된 항체 약물 컨쥬게이트를 포함하는 약제학적 조성물은 항체 약물 컨쥬게이트의 양과 농도를 나타내는 밀폐된 밀봉된 용기에 액체 형태로 공급된다. 특정 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트의 액체 형태는 적어도 0.1 mg/ml, 적어도 0.5 mg/ml, 또는 적어도 1 mg/ml, 및 예컨대 적어도 5 mg/ml, 적어도 10 mg/ml, 적어도 15 mg/ml, 적어도 25 mg/ml, 적어도 30 mg/ml, 적어도 40 mg/ml, 적어도 50 mg/ml, 적어도 60 mg/ml, 적어도 70 mg/ml, 적어도 80 mg/ml, 적어도 90 mg/ml, 또는 적어도 100 mg/ml로 밀폐된 밀봉 용기에 담겨 공급된다.
5.6 방법에 대한 ADC의 투여량
몇몇 구현예에서, 암의 예방 및/또는 치료에 효과적일 예방제 또는 치료제(예를 들어, 본원에서 제공되는 항체 약물 컨쥬게이트), 또는 본원에서 제공되는 약제학적 조성물의 양은 표준 임상 기술에 의해 결정될 수 있다.
따라서, 약 0.1㎍/ml 내지 약 450㎍/ml, 몇몇 구현예에서 적어도 0.1㎍/ml, 적어도 0.2㎍/ml, 적어도 0.4㎍/ml, 적어도 0.5㎍/ml, 적어도 0.6㎍/ml, 적어도 0.8㎍/ml, 적어도 1㎍/ ml, 적어도 1.5㎍/ml, 예컨대 적어도 2㎍/ml, 적어도 5㎍/ml, 적어도 10㎍/ml, 적어도 15㎍/ml, 적어도 20㎍/ml, 적어도 25㎍/ml, 적어도 30㎍/ml, 적어도 35㎍/ml, 적어도 40㎍/ml, 적어도 50㎍/ml, 적어도 75㎍/ml, 적어도 100㎍/ml, 적어도 125㎍/ml, 적어도 150㎍/ml, 적어도 200㎍/ml, 적어도 250㎍/ml, 적어도 300㎍/ml, 적어도 350㎍/ml, 적어도 400㎍/ml, 또는 적어도 450㎍/ml의 혈청 역가를 결과하는 약제학적 조성물의 항체 약물 컨쥬게이트의 투여량은 암의 예방 및/또는 치료를 위해 인간에게 투여될 수 있다. 제형에 사용되는 정확한 용량은 또한 투여 경로 및 대상의 암의 심각도에 따라 달라질 것이며, 실무자의 판단과 환자 각각의 상황에 따라 결정되어야 함이 이해되어야 한다.
유효 용량은 시험관 내 또는 동물 모델 테스트 시스템에서 유래된 투여량-반응 곡선에서 외삽될 수 있다.
본원에 제공된 항체 약물 컨쥬게이트를 포함하는 약제학적 조성물의 경우, 환자에게 투여되는 항체 약물 컨쥬게이트의 투여량은 전형적으로 대상의 체중의 0.1 mg/kg 내지 100 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 1 mg/kg 내지 약 75 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 1 mg/kg 내지 20 mg/kg, 예를 들어 대상의 체중의 1 mg/kg 내지 5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 0.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 0.75 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 1 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 1.25 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 1.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 2 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 2.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 3 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 3.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 4 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 4.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 5.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 6 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 6.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 7 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 7.5 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 8 mg/kg이다. 몇몇 구현예에서, 환자에게 투여되는 투여량은 대상의 체중의 약 8.5 mg/kg이다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제제화된 항체 약물 컨쥬게이트는 기준선에서 환자의 실제 체중을 기준으로 투여되고 투여량은 환자의 체중이 이전 주기의 기준선에서 ≥10%만큼 변하거나 투여량 조정 기준이 충족되지 않는 한 변경되지 않을 것이다. 몇몇 구현예에서, 체중이 100kg을 초과하는 환자를 제외하고 실제 체중이 사용될 것이며, 이러한 경우에 투여량은 100kg의 체중을 기준으로 계산될 것이다. 몇몇 구현예에서, 최대 투여량은 1.00 mg/kg 투여량 수준을 받는 환자에 대해 100 mg이고 1.25 mg/kg 투여량 수준을 받는 환자에 대해 125 mg이다.
일 구현예에서, 본 약제학적 조성물에서 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트의 대략 100 mg/kg 이하, 대략 75 mg/kg 이하, 대략 50 mg/kg 이하, 대략 25 mg/kg 이하, 대략 10 mg/kg 이하, 대략 5 mg/kg 이하, 대략 1.5 mg/kg 이하, 대략 1.25 mg/kg 이하, 대략 1 mg/kg 이하, 대략 0.75 mg/kg 이하, 대략 0.5 mg/kg 이하, 또는 대략 0.1 mg/kg 이하가 암을 치료하기 위해 5회, 4회, 3회, 2회 또는 1회 투여된다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 항체 약물 컨쥬게이트를 포함하는 약제학적 조성물은 약 1-12회 투여되고, 여기서 투여량은 의사에 의해 결정된 바와 같이 필요에 따라, 예를 들어 매주, 격주로, 매월, 격월로, 3개월마다 등으로 투여될 수 있다. 몇몇 구현예에서, 더 낮은 투여량(예를 들어, 0.1-15 mg/kg)은 더 자주(예를 들어, 3-6회) 투여될 수 있다. 다른 구현예에서, 더 높은 투여량(예를 들어, 25-100 mg/kg)은 덜 자주(예를 들어, 1-3회) 투여될 수 있다.
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트의 단일 투여량은 일정 기간(예: 1년) 동안 2주 주기마다(예: 약 14일), 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 또는 26회 암을 예방 및/또는 치료하기 위해 환자에게 투여되고, 여기서 투여량은 약 0.1 mg/kg, 약 0.5 mg/kg, 약 0.75 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.25 mg/kg, 약 1.5 mg/kg, 약 2 mg/kg, 약 2.5 mg/kg, 약 3mg/kg, 약 4 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 60 mg/kg, 약 65 mg/kg, 약 70 mg/kg, 약 75 mg/kg, 약 80 mg/kg, 약 85 mg/kg, 약 90 mg/kg, 약 95 mg/kg, 약 100 mg/kg, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다(즉, 각 투여량의 월간 투여량은 동일하거나 동일하지 않을 수 있음).
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트의 단일 투여량은 일정 기간(예: 1년) 동안 3주 주기마다(예: 약 21일), 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 또는 26회 암을 예방 및/또는 치료하기 위해 환자에게 투여되고, 여기서 투여량은 약 0.1 mg/kg, 약 0.5 mg/kg, 약 0.75 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.25 mg/kg, 약 1.5 mg/kg, 약 2 mg/kg, 약 2.5 mg/kg, 약 3mg/kg, 약 4 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 60 mg/kg, 약 65 mg/kg, 약 70 mg/kg, 약 75 mg/kg, 약 80 mg/kg, 약 85 mg/kg, 약 90 mg/kg, 약 95 mg/kg, 약 100 mg/kg, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다(즉, 각 투여량의 월간 투여량은 동일하거나 동일하지 않을 수 있음).
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트의 단일 투여량은 일정 기간(예: 1년) 동안 4주 주기마다(예: 약 28일), 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 또는 26회 암을 예방 및/또는 치료하기 위해 환자에게 투여되고, 여기서 투여량은 약 0.1 mg/kg, 약 0.5 mg/kg, 약 0.75 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.25 mg/kg, 약 1.5 mg/kg, 약 2 mg/kg, 약 2.5 mg/kg, 약 3mg/kg, 약 4 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 60 mg/kg, 약 65 mg/kg, 약 70 mg/kg, 약 75 mg/kg, 약 80 mg/kg, 약 85 mg/kg, 약 90 mg/kg, 약 95 mg/kg, 약 100 mg/kg, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다(즉, 각 투여량의 월간 투여량은 동일하거나 동일하지 않을 수 있음).
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트의 단일 투여량은 일정 기간(예: 1년) 동안 약 1개월마다(예: 약 30일), 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12회 암을 예방 및/또는 치료하기 위해 환자에게 투여되고, 여기서 투여량은 약 0.1 mg/kg, 약 0.5 mg/kg, 약 0.75 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.25 mg/kg, 약 1.5 mg/kg, 약 2 mg/kg, 약 2.5 mg/kg, 약 3mg/kg, 약 4 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 60 mg/kg, 약 65 mg/kg, 약 70 mg/kg, 약 75 mg/kg, 약 80 mg/kg, 약 85 mg/kg, 약 90 mg/kg, 약 95 mg/kg, 약 100 mg/kg, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다(즉, 각 투여량의 월간 투여량은 동일하거나 동일하지 않을 수 있음).
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트의 단일 투여량은 일정 기간(예: 1년) 동안 2 개월마다(예: 약 60일), 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6회 암을 예방 및/또는 치료하기 위해 환자에게 투여되고, 여기서 투여량은 약 0.1 mg/kg, 약 0.5 mg/kg, 약 0.75 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.25 mg/kg, 약 1.5 mg/kg, 약 2 mg/kg, 약 2.5 mg/kg, 약 3mg/kg, 약 4 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 60 mg/kg, 약 65 mg/kg, 약 70 mg/kg, 약 75 mg/kg, 약 80 mg/kg, 약 85 mg/kg, 약 90 mg/kg, 약 95 mg/kg, 약 100 mg/kg, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다(즉, 각 투여량의 월간 투여량은 동일하거나 동일하지 않을 수 있음).
몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트의 단일 투여량은 일정 기간(예: 1년) 동안 3 개월마다(예: 약 120일), 1, 2, 3, 또는 4회 암을 예방 및/또는 치료하기 위해 환자에게 투여되고, 여기서 투여량은 약 0.1 mg/kg, 약 0.5 mg/kg, 약 0.75 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.25 mg/kg, 약 1.5 mg/kg, 약 2 mg/kg, 약 2.5 mg/kg, 약 3mg/kg, 약 4 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 60 mg/kg, 약 65 mg/kg, 약 70 mg/kg, 약 75 mg/kg, 약 80 mg/kg, 약 85 mg/kg, 약 90 mg/kg, 약 95 mg/kg, 약 100 mg/kg, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다(즉, 각 투여량의 월간 투여량은 동일하거나 동일하지 않을 수 있음).
특정 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트의 투여량을 환자에게 투여하는 경로는 비강내, 근육내, 정맥내 또는 이들의 조합이지만, 본원에 기재된 다른 경로도 허용가능하다. 각 투여량은 동일한 투여 경로로 투여되거나 투여되지 않을 수 있다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트는 하나 이상의 추가 치료제의 다른 투여량과 동시에 또는 후속적으로 다중 투여 경로를 통해 투여될 수 있다.
몇몇 더 구체적인 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트는 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의한 대상의 체중의 약 0.5 mg/kg, 약 0.75 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.25 mg/kg, 또는 약 1.5 mg/kg의 투여량으로 투여된다.
몇몇 더 구체적인 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트는 매 3주 주기마다 2회 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입을 통해 대상의 체중의 약 0.5 mg/kg, 약 0.75 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.25 mg/kg, 또는 약 1.5 mg/kg의 투여량으로 투여된다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트는 매 3주 주기의 1일 및 8일차에 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여된다. 몇몇 구현예에서, 상기 방법은 각 3주 주기에 1회 이상 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 면역 체크포인트 억제제를 투여하는 것을 더욱 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기 방법은 매 3주 주기의 l일차에 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 면역 체크포인트 억제제를 투여하는 것을 더욱 포함한다. 몇몇 구현예에서, 면역 체크포인트 억제제는 펨브롤리주맙이고, 여기서 펨브롤리주맙은 약 30분에 걸쳐 약 200 mg의 양으로 투여된다. 다른 구현예에서, 면역 체크포인트 억제제는 아테졸리주맙이고, 여기서 아테졸리주맙은 약 60분 또는 30분에 걸쳐 약 1200 mg의 양으로 투여된다. 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 면역 체크포인트 억제제로 치료 중 또는 치료 후에 질병 진행 또는 재발을 보이는, 요로상피암 환자에게 투여된다. 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 면역 체크포인트 억제제로 치료 중 또는 치료 후에 질병 진행 또는 재발을 보이는, 전이성 요로상피암 환자에게 투여된다.
다른 보다 구체적인 구현예에서, 본원에 제공된 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트는 4주 주기마다 3회 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입을 통해 대상의 체중의 약 0.5 mg/kg, 약 0.75 mg/kg, 1 mg/kg, 약 1.25 mg/kg, 또는 약 1.5 mg/kg의 투여량으로 투여된다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트는 28일(4주) 주기의 1일, 8일 및 15일차에 투여된다. 몇몇 구현예에서, 약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트는 매 28일(4주) 주기의 1일, 8일 및 15일차에 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여된다. 몇몇 구현예에서, 상기 방법은 각각의 4주 주기에서 1회 이상 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 면역 체크포인트 억제제를 투여하는 것을 더욱 포함한다. 몇몇 구현예에서, 면역 체크포인트 억제제는 펨브롤리주맙이다. 다른 구현예에서, 면역 체크포인트 억제제는 아테졸리주맙이다. 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 면역 체크포인트 억제제 치료 중 또는 치료 후에 질병 진행 또는 재발을 보인, 요로상피암 환자에게 투여된다. 몇몇 구현예에서, 항체 약물 컨쥬게이트는 면역 체크포인트 억제제 치료 중 또는 치료 후에 질병 진행 또는 재발을 보인, 전이성 요로상피암 환자에게 투여된다.
본 발명은 일반적으로 다수의 구현예를 설명하기 위해 긍정적인 언어를 사용하여 본원에 개시된다. 본 발명은 또한 구체적으로 물질 또는 재료, 방법 단계 및 조건, 프로토콜, 절차, 어세이 또는 분석과 같은 특정 주제가 전체 또는 부분적으로 제외되는 구현예를 포함한다 따라서, 본 발명이 본 발명이 포함하지 않는 측면에서 본원에서 일반적으로 표현되지 않더라도, 본 발명에 명시적으로 포함되지 않은 관점은 그럼에도 불구하고 본원에서 개시된다.
본 발명을 수행하기 위해 본 발명자들에게 알려진 최상의 모드를 포함하여 본 발명의 특정 구현예는 여기에서 설명된다. 위의 설명을 읽어보면, 개시된 구현예의 변형은 해당 기술 분야에서 일하는 개인에게 명백할 수 있으며, 당업자는 그러한 변형을 적절하게 사용할 수 있을 것으로 예상된다. 따라서, 본 발명은 여기에 구체적으로 기술된 것과는 다르게 실시되는 것으로 의도되며, 본 발명은 적용 가능한 법률이 허용하는 바에 따라 여기에 첨부된 청구범위에 인용된 주제의 모든 변형 및 균등물을 포함한다. 또한, 모든 가능한 변형에서 전술한 요소의 임의의 조합은 본원에서 달리 나타내지 않거나 달리 문맥상 명백하게 모순되지 않는 한, 본 발명에 포함된다.
본 명세서에 인용된 모든 간행물, 특허 출원, 수탁 번호 및 기타 참고 문헌은 각 개별 간행물 또는 특허 출원이 참조로 통합되도록 구체적이고 개별적으로 표시된 것처럼 전체가 참조로 여기에 통합된다. 여기에 논의된 간행물은 본 출원의 출원일 이전의 이들의 개시를 위해서만 제공된다. 여기의 어느 것도 본 발명이 선행 발명으로 인해 그러한 공개보다 선행할 자격이 없음을 인정하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 또한, 제공된 발행일은 실제 발행일과 다를 수 있으므로 독립적으로 확인이 필요할 수 있다.
본 발명의 다수의 구현예가 설명되었다. 그럼에도 불구하고, 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않고 다양한 수정이 이루어질 수 있음이 이해될 것이다. 따라서, 실험 섹션의 설명은 예시를 위한 것이지 청구범위에 기재된 발명의 범위를 제한하려는 것이 아니다.
6. 실시예
다음은 연구에 사용된 다양한 방법 및 재료에 대한 설명이며, 본 발명의 제조 및 사용 방법에 대한 완전한 개시 및 설명을 당업자에게 제공하기 위해 제시되고, 본 발명자들이 그들의 발명으로 간주하는 것의 범위를 제한하기 위한 것이 아니며, 아래의 실험들이 수행되었고 수행될 수 있는 모든 실험임을 나타내기 위한 것이 아니다. 현재 시제로 작성된 예시적인 설명이 반드시 수행된 것은 아니며, 오히려 설명이 수행되어 본 발명의 교시와 관련된 데이터 등을 생성할 수 있이 이해되어야 한다. 사용된 수치(예: 양, 온도 등)와 관련하여 정확성을 보장하기 위해 노력했지만, 일부 실험 오차 및 편차가 고려되어야 한다.
6.1 실시예 1 - 생체 내 종양 성장의 Ha22-2(2,4)6.1vcMMAE 억제
종양 조직의 세포 표면 상의 191P4D12의 유의한 발현은 정상 조직에서의 제한적인 발현과 함께, 191P4D12를 항체 치료 및 유사하게 ADC를 통한 치료의 좋은 표적으로 만든다. 따라서, 인간 방광, 폐, 유방 및 췌장암 이종이식 마우스 모델에서 Ha22-2(2,4)6.1vcMMAE의 치료 효능이 평가된다.
종양 성장 및 전이 형성에 대한 항체 약물 컨쥬게이트 효능은 마우스 암 이종이식 모델(예를 들어, 피하 및 동소 이식)에서 연구된다.
피하(s.c.) 종양은 수컷 SCID 마우스의 오른쪽 옆구리에 Matrigel(Collaborative Research)과 1:1 희석으로 혼합된 5 x 104-106 암세포를 주사하여 생성된다. 종양 형성에 대한 ADC 효능을 테스트하기 위해, ADC 주사는 종양 세포 주사와 같은 날에 시작된다. 대조군으로서, 마우스에 정제된 인간 IgG 또는 PBS; 또는 인간 세포에서 발현되지 않는 관련 없는 항원을 인식하는 정제된 MAb를 주사한다. 예비 연구에서, 종양 성장에 대한 대조군 IgG 또는 PBS 간에 차이가 발견되지 않았다. 종양 크기는 캘리퍼스 측정에 의해 결정되고, 종양 부피는 너비2 x 길이/2로 계산되며, 여기서 너비는 가장 작은 치수이고 길이는 가장 큰 치수이다. 직경이 1.5cm보다 큰 피하 종양이 있는 마우스가 희생된다.
이종이식 암 모델의 장점은 신생혈관 및 혈관신생을 연구하는 능력이다. 종양 성장은 부분적으로 새로운 혈관 발달에 의존한다. 모세 혈관계와 발달하는 혈액 네트워크는 숙주 기원이지만, 신생혈관의 시작과 구조는 이종이식 종양에 의해 조절된다(Davidoff et al., Clin Cancer Res. (2001) 7:2870; Solesvik et al., Eur J Cancer Clin Oncol. (1984) 20:1295). 혈관신생에 대한 항체 및 소분자의 효과는 종양 조직 및 그 주변 미세환경의 IHC 분석과 같은 당업계에 공지된 절차에 따라 연구된다.
Ha22-2(2,4)6.1ADC는 폐암 및 유방암 이종이식편의 형성을 억제한다. 이러한 결과는 예를 들어, 폐암 및 유방암을 포함하여, 암의 국소 및 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 단계의 치료에서 Ha22-2(2,4)6.1ADC의 유용성을 나타낸다.
191P4D12 ADC:
191P4D12에 대한 모노클로날 항체 및 MMAE에 대한 이의 컨쥬게이션은 위에 설명된다. Ha22-2(2,4)6.1vcMMAE는 FACS, 및 당업계에 공지된 다른 방법에 의해 특성화되어 191P4D12에 결합하는 그의 능력을 결정한다.
세포 라인 및 이종이식편:
BT-483 및 HPAC 세포는 당업계에 공지된 바와 같이 L-글루타민 및 10% FBS가 보충된 DMEM에서 유지된다. AG-L4 이종이식편은 SCID 마우스에서 연속 증식에 의해 유지된다.
SCID 마우스에서 피하 확립된 인간 폐암 이종이식편 AG-L4에서 Ha22-2(2,4)6.1-vcMMAE의 효능
다른 실험에서, 환자 유래 폐암 이종이식편 AG-L4는 SCID 마우스에서 연속 계대(serial passages)에 의해 유지되었다. 스톡 종양은 무균적으로 수확되고, 1mm3 조각으로 잘게 썰렸다. 6개의 조각은 개별 SCID 마우스의 옆구리에 이식되었다. 종양을 대략 200 mm3의 부피에 도달할 때까지 처리하지 않고 성장하도록 하였다. Ha22-2(2,4)6.1vcMMAE 및 대조군 ADC는 정맥내 일시 주사에 의한 2회 투여량에 대해 매 칠(7)일마다 10 mg/kg으로 투여되었다. 투여된 ADC의 양은 투여 직전에 얻은 각 동물의 개별 체중을 기준으로 하였다. 3 내지 4일마다 캘리퍼스 측정을 사용하여 종양 성장을 모니터링하였다. 종양 부피는 너비2 x 길이/2로 계산되었으며, 여기서 너비는 가장 작은 치수이고 길이는 가장 큰 치수이다.
결과는 Ha22-2(2,4)6.1-vcMMAE 처리가 대조군 ADC와 비교하여 누드 마우스에 피하 이식된 AG-L4 폐암 이종이식편의 성장을 유의하게 억제하였음을 보여준다(도 2). 또한, 다른 191P4D12 MAb가 이 연구에서 활용되었다. 상기 결과는 표시되지 않는다.
SCID 마우스에서 피하 확립된 인간 유방암 이종이식편 BT-483에서 Ha22-2(2,4)6.1-vcMMAE의 효능
이 실험에서, 인간 유방암 BT-483 세포를 사용하여 SCID 마우스에서 연속 계대에 의해 유지되는 스톡 이종이식편을 생성하였다. 스톡 종양을 무균적으로 수확하고 1mm3 조각으로 잘게 썬다. 6개의 조각을 개별 SCID 마우스의 옆구리에 이식했다. 종양은 대략 100 mm3의 부피에 도달할 때까지 처리되지 않고 성장하도록 하였다. Ha22-2(2,4)6.1vcMMAE 및 대조군 ADC는 정맥내 일시 주사에 의한 4회 투여 동안 4일마다 5 mg/kg으로 투여되었다. 투여된 ADC의 양은 투여 직전에 얻은 각 동물의 개별 체중을 기준으로 하였다. 종양 성장은 3 내지 4일마다 캘리퍼스 측정을 사용하여 모니터링되었다. 종양 부피는 너비2 x 길이/2로 계산되었으며, 여기서 너비는 가장 작은 치수이고 길이는 가장 큰 치수이다.
결과는 Ha22-2(2,4)6.1-vcMMAE를 사용한 치료가 대조군 ADC와 비교하여 SCID 마우스에 피하 이식된 BT-483 유방 종양 이종이식편의 성장을 유의하게 억제했음을 보여준다(도 3). 또한, 다른 191P4D12 MAb가 이 연구에서 활용되었다. 결과는 표시되지 않는다.
결론
요약하면, 도 2 및 3은 Ha22-2(2,4)6.1vcMMAE로 명명된 191P4D12 ADC가 대조군 ADC와 비교할 때 191P4D12를 발현하는 종양 세포의 성장을 유의하게 억제했음을 보여준다. 따라서, Ha22-2(2,4)6.1vcMMAE는 예를 들어 유방암 및 폐암을 포함하는 다양한 암을 치료 및 관리하기 위한 치료 목적으로 사용될 수 있다.
6.2 실시예 2 - IHC에 의한 암 환자 표본에서 191P4D12 단백질의 검출
면역조직화학에 의한 191P4D12 단백질의 발현은 (i) 유방, (ii) 폐, (iii) 식도, 및 (iv) 두경부 환자로부터의 환자 종양 표본에서 시험되었다. 간단히 말해서, 포르말린 고정 파라핀 왁스 포매 조직은 4 미크론 섹션으로 절단되고 유리 슬라이드에 마운트되었다. 섹션은 탈왁싱, 재수화되고 95℃에서 30분 동안 EZ-Retriever 마이크로웨이브(Biogenex, San Ramon, CA)에서 EDTA 항원 검색 용액(Biogenex, San Ramon, CA)으로 처리되었다. 그런 다음 섹션은 3% 과산화수소 용액으로 처리되어 내인성 과산화효소 활성을 비활성화했다. 무혈청 단백질 블록(Dako, Carpenteria, CA)은 모노클로날 마우스 항-191P4D12 항체 또는 아이소타입 대조군과 함께 인큐베이션하기 전에 비특이적 결합을 억제하는데 사용되었다. 이어서, 섹션은 Super Enhancer™ 시약에서 인큐베이션한 후 폴리머-HRP 2차 항체 컨쥬게이트(BioGenex, San Ramon, CA)와의 인큐베이션으로 구성되는 Super Sensitive™ Polymer-horseradish peroxidase(HRP) 검출 시스템으로 처리되었다. 그런 다음 섹션은 DAB 키트(BioGenex, San Ramon, CA)를 사용하여 개발(develop)되었다. 핵은 헤마톡실린을 사용하여 염색되었고, 명시야 현미경으로 분석되었다. 특정 염색은 갈색 염색으로 표시된 바와 같이 191P4D12 면역 반응성 항체를 사용하여 환자 표본에서 검출되었다(도 4a, 4c, 4e 및 4g 참조). 대조적으로, 대조군 항체는 어느 환자 표본도 염색하지 않았다(도 4b, 4d, 4f 및 4h 참조).
결과는 환자 방광, 유방, 췌장, 폐, 난소, 식도, 두경부암 조직의 종양 세포에서 191P4D12의 발현을 나타낸다. 이러한 결과는 191P4D12가 인간 암에서 발현되고 상기 항원에 대한 항체와 Ha22-2(2,4)6.1vcMMAE)로 명명된 항체 약물 컨쥬게이트가 진단 및 치료 목적으로 유용함을 나타낸다(도 4a-h).
6.3 실시예 3 - 상기 방법에 의해 치료될 수 있는 예시적인 암
본원에 제공된 방법에 의해 치료될 수 있는 특정 예시적인 암을 선택하기 위해, Nectin-4 발현의 유병률은 암 표본의 RNA와 단백질 수준에서 결정되었다. 간단히 말해서, RNA 수준에서 Nectin-4 발현의 유병률은 The Cancer Genome Atlas(TCGA) 데이터베이스의 환자 샘플 데이터를 사용하여 먼저 결정되었다. 두 가지 개별 IHC 방법은 암 환자의 조직 샘플에서 Nectin-4 단백질 발현을 결정하기 위해 사용되었다. 표 6에 나타난 바와 같이, Nectin-4 RNA 발현의 유병률은 단백질 수준에서 Nectin-4 발현의 유병률과 유사하다. Nectin-4 RNA와 Nectin-4 단백질 모두를 널리 발현하는 것으로 확인된 다양한 종양은 MMAE에 대한, MMAE에 대한 데이터가 이용 가능하지 않은 경우, Vinca에 대한 민감도와 관련하여 평가되었으며, Vinca는 미세소관 중합을 차단하여 MMAE와 동일한 메커니즘을 통해 세포독성을 발휘한다.
종양 유형 전반에 걸친 IHC의 Nectin-4 유병률과 유사한 RNA I에 의한 Nectin-4 발현의 유병률
IHC METHOD 1 TCGA RNA IHC METHOD 2
Breast 78% (512/654) 93% (1036/1114) 90% (199/220)
NSCLC-Squamous 62% (145/235) 90% (451/501)
NSCLC-Adenocarcinoma 64% (136/212) 88% (466/530)
Head & Neck-Squamous 59% (79/135) 96% (501/522) 77% (98/128)
Gastric (GEJ) 26% (108/416) 66% (94/143)
표 6의 이러한 결과는 편평 NSCLC, 위(GEJ) 암, HNSCC, NSCLC-선암종, 두경부암-편평 및 유방암(HR+ /HER2- 유방암 및 TNBC 포함)이 RNA와 단백질 수준 모두에서 Nectin-4를 널리 발현함을 입증한다. 이들 암은 또한 MMAE, Vinca 또는 MMAE와 Vinca 모두의 세포독성에 민감했으며, 이들 둘 다 미세 소관 중합을 차단하는 메커니즘을 통해 세포 독성을 발휘한다. 따라서 편평 NSCLC, 위(GEJ), HNSCC, NSCLC-선암종, 두경부암-편평 및 유방암(HR+/HER2- 유방암 및 TNBC 포함)은 여기에 제공된 방법으로 치료될 수 있으며, 아래 실시예에 설명된 인간 연구에서 테스트되었다.
6.4 실시예 4 - 이전에 치료된 국소 진행성 또는 전이성 악성 고형 종양을 갖는 대상의 항-191P4D12-ADC를 평가하기 위한 오픈-라벨, 멀티센터, 멀티-코호트, 페이즈 2 연구
6.4.1. 연구의 요약
6.4.1.1. 시놉시스
Figure pct00043
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
Figure pct00047
Figure pct00048
Figure pct00049
Figure pct00050
Figure pct00051
Figure pct00052
6.4.2 연구에 대해
6.4.2.1 엔포르투맙 베도틴 및 이의 비임상 및 임상 연구에서의 효능
6.4.2.1.1 엔포르투맙 베도틴
엔포르투맙 베도틴은 프로테아제 절단 가능한 링커를 통해 미세소관 교란제(MMAE)에 컨쥬게이트된 완전 인간 면역글로불린 G1 카파(IgG1K) 항체로 구성된 ADC이다(Challita-Eid PM et al, Cancer Res. 2016;76(10):3003-13]. 엔포르투맙 베도틴은 ADC-191P4D12 복합체의 내재화를 유도하는 세포 표면의 191P4D12 단백질에 결합하여 항종양 활성을 유도하고, 리소좀 구획으로 이동하여 링커의 단백질 분해 절단을 통해 MMAE가 방출된다. MMAE의 세포 내 방출은 이후 튜불린 중합을 방해하여 G2/M기 세포 주기 정지 및 세포 사멸을 초래한다(Francisco JA et al, Blood. 2003 Aug 15;102(4):1458-65).
6.4.2.1.2. 비임상 및 임상적 데이터
약리학
AGS-22M6E는 약리학 및 독물학 연구 뿐만 아니라 완료된 I상 연구에 사용된 뮤린 하이브리도마 세포주로부터 유래된 ADC이다. 중국 햄스터 난소(CHO) 세포주 유래 AGS-22M6E ADC인 엔포르투맙 베도틴(Enfortumab vedotin)은 임상 개발에 사용되는 최종 제품이다. 엔포르투맙 베도틴은 AGS-22M6E와 동일한 아미노산 서열, 링커 및 세포독성 약물을 갖는다. 엔포르투맙 베도틴과 AGS-22M6E 사이의 동등성은 191P4D12에 대한 결합 친화성, 시험관 내 세포 독성 및 생체 내 항종양 활성과 같은 광범위한 분석 및 생물학적 특성화 연구를 통해 확인되었다.
시험관내 약리학 연구에서, AGS-22M6E는 인간 191P4D12를 발현하도록 엔지니어링된 세포주와 인간 191P4D12를 내인적으로 발현하는 T47D 유방암 세포주에서 세포 생존을 억제했으며, AGS-22M6(비컨쥬게이트된 항체)은 임의의 191P4D12 발현 세포주의 세포 성장에 영향을 미치지 않았다.
AGS-22M6E의 항종양 활성은 191P4D12의 발현이 입증된 다양한 암 징후를 나타내는 종양 이종이식 모델의 패널에서 평가되었다. AGS 22M6E는 환자 유래 방광암의 이종이식편에서 용량 의존적으로 종양 성장을 유의하게 억제했다. 인간 HR+ 유방암 세포주의 이종이식에서 5 mg/kg으로 4일마다 4회 투여. AGS-22M6E는 또한 인간 폐 선암종 세포주의 이종이식편 및 환자 유래 폐 선암종의 종양 성장을 유의하게 억제했다. 엔포르투맙 베도틴과 AGS-22M6E는 환자 유래 TNBC 세포 이종이식 모델에서 유사한 약리학적 항종양 활성을 보였다. 이 연구에서 시작 종양 크기에 대한 종양 퇴행 퍼센트는 21일째에 엔포르투맙 베도틴 및 AGS-22M6E 2 mg/kg에서 각각 68% 및 70%였다.
독성학
AGS-22M6E 및 엔포르투맙 베도틴의 안정성 프로파일 및 약동학은 사이노몰구스 원숭이에서 유사하였다.
랫트(≥ 5 mg/kg; 인간 전신 노출의 1배) 및 원숭이(≥ 1 mg/kg; 인간 전신 노출의 0.7배)에서 우수 실험실 관 행 준수 독성 연구에서 피부 병변이 관찰되었다. 피부 변화는 6주의 회복 기간이 끝날 때 완전히 되돌릴 수 있었다.
임상 연구에서 보고된 고혈당증은 랫트 및 원숭이 독성 연구 모두에서 없었고 각 종의 췌장에서 조직병리학적 소견은 없었다.
AGS-22M6E는 수컷 및 암컷 래트 뿐만 아니라 시노몰구스 원숭이에서 중간 정도의 면역원성이었다. AGS-22M6E와 엔포르투맙 베도틴은 사이노몰구스 원숭이에서 비슷한 면역원성을 보였다.
유전독성 연구는 MMAE가 박테리아에서의 역돌연변이 시험(Ames 시험) 또는 L5178Y TK+/- 마우스 림프종 돌연변이 어세이에서 식별할 수 있는 유전독성 가능성이 없음을 보여주었다. MMAE는 랫트의 소핵 시험에서 염색체 이상을 유도했는데 이는 미세소관 교란제의 약리학적 작용과 일치한다.
MMAE는 290 nm 내지 700 nm 범위에서 흡광도가 없고 발린 시트룰린 링커-MMAE(vc-MMAE)의 흡광도는 ICH S10 지침에 정의된 광독성 시험 기준을 충족하지 못했다. 따라서 엔포르투맙 베도틴은 직접적인 광독성을 일으킬 만큼 충분히 광반응성이 있는 것으로 간주되지 않았다.
고환 독성은 쥐에서만 관찰되었다. 발견 사항에는 정세관 변성 및 부고환의 정자 저하증이 포함되었다(≥ 2.0mg/kg, 임상적으로 권장되는 인체 전신 노출의 약 1배). 이러한 발견은 24주의 회복 기간이 끝날 때 부분적으로 역전되었습니다. 엔포르투맙 베도틴을 최대 6mg/kg(임상 권장 용량에서 인체 전신 노출의 6배) 용량으로 투여한 성적으로 미성숙한 수컷 원숭이에서는 고환 독성이 관찰되지 않았습니다.
6.4.2.1.3 임상 데이터
엔포르투맙 베도틴은 현재 단일요법으로서 및 여러 항암 요법과의 조합으로서 1, 2, 및 3상 연구를 포함하는 다수의 연구에서 시험되고 있다. 아래에 요약된 안전성 및 효능 데이터의 대부분은 단독 요법 데이터에서 가져온 것이며 1상 및 2상 연구로 제한된다.
EV-101은 이전에 항-PD-(L)1 요법을 받은, 전이성 UC 환자의 코호트를 포함하는 이전에 1개 이상의 화학요법 치료를 진행한 고형 종양(예: 전이성 요로상피암[UC])을 발현하는 191P4D12를 가진 환자를 등록한, 1상 용량 증량/확장 연구이다.
EV-101이 고형 종양을 발현하는 191P4D12를 갖는 환자를 등록했기 때문에, 191P4D12 발현 데이터는 이 연구와 관련된 여러 상이한 암 유형을 갖는 환자에 대해 얻어졌다. 검증된 191P4D12 IHC 테스트(Quest Diagnostics)가 사용되어, 0에서 300 범위의 191P4D12 H-점수를 할당했다. NSCLC(편평 및 비편평 포함) 환자의 98%가 191P4D12(n = 50)를 발현하였고, H-스코어 중앙값은 260이다. EV-101에 대해 사전 스크리닝된 3명의 유방암 환자 모두 140, 230 및 290의 H-스코어로 191P4D12를 발현했다. 2명의 위암 환자와 1명의 비인두암 환자가 각각 140, 230 및 290의 H 스코어로 191P4D12를 발현하였다. EV-101에서 얻은 191P4D12 발현 데이터를 보완하기 위해 191P4D12 IHC 테스트가 다양한 암 유형의 조직 마이크로어레이(TMA)에서 수행되었다. 191P4D12는 평가된 대부분의 조직에서 발현되었다: 유방(삼중 음성 및 HR+/HER2 포함; 91%, n = 220), 위(66%, n = 143), 두경부(77%, n = 128), 및 식도(88%, n = 96) 암 조직.
6.4.2.2. 연구 근거
현재, 화학요법은 비교적 낮은 반응률, 짧은 반응 기간 및 상당한 독성을 나타내는 치료 표준이다. 국소 진행성 또는 전이성 암 환자에 대한 승인된 치료법의 부족과 2차 화학요법에서 관찰된 제한된 활성은 이 집단이 상당한 미충족 의학적 요구를 갖고 있음을 적절하게 보여준다.
전이성 요로상피암 및 기타 악성 고형 종양 환자에서 엔포르투맙 베도틴 단독요법을 사용한 1상 용량 증량 및 확장 연구(EV-101)는 전이성 요로상피암 환자에서 항종양 활성을 촉진하는 것으로 나타났다. 이 연구에서 전이성 요로상피암 환자에서 종양 감소가 나타났다. 엔포르투맙 베도틴은 미충족 의학적 요구가 높은 인구 집단에서 항 PD-(L)-1 치료 후 환자에게 지속적인 반응과 의미 있는 생존 결과를 제공했다. 확인된 ORR은 엔포르투맙 베도틴 1.25mg/kg으로 치료받은 환자의 중앙 검토에서 45%였다. 12.3개월의 전체 생존 중앙값(OS)은 과거 OS 중앙값이 10.3개월 이함임을 감안할 때 고무적이다(Bellmunt J et al, N Eng J Med. 2017;376(11):1015-1026).
중추적인 2상 연구(EV-201)에서, 환자는 백금 함유 화학요법으로 사전 치료를 받았거나 백금 경험이 없고 시스플라틴 치료에 부적격해야 한다. 이 연구의 결과는 엔포르투맙 베도틴이 백금 화학요법 및 PD-1/L1 억제제 후 진행된 환자에서 실질적인 임상 활성을 입증한 최초의 신규 치료제임을 입증했다. 확인된 ORR은 엔포르투맙 베도틴 1.25mg/kg으로 치료받은 환자에서 44%였다. OS 중앙값은 11.7개월이었고 반응 기간 중앙값은 7.6개월이었다. 이러한 결과는 동일한 환자 집단에서 1상 EV-101 추적과 매우 일치한다.
현재 연구를 위해 선택된 종양(유방암, 폐암, 두경부암, 위암, 식도암)은 모두 중간 내지 높은 191P4D12 발현을 갖는 종양을 나타내며, 이에 대해 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 및 치료 불응성 환경에서 결과를 개선할 필요가 있다. 또한, 임상 데이터와 함께 엔포르투맙 베도틴에 대한 지지적인 전임상 민감도 및 출판된 문헌에 기반한 증거는 현재 연구를 뒷받침한다.
6.4.2.3. 위험 이익 평가
이 연구를 위해 선택된 국소 진행성 또는 전이성 암을 가진 대상은 표준 치료 요법에 따라 재발하거나 진행된 암을 갖고 제한된 치료 옵션을 갖는다. 현재까지의 임상 데이터는 요로상피암 환자에서 엔포르투맙 베도틴에 대한 유리한 이점-위험 비율을 지지한다. 또한, 비임상 데이터 및 임상 데이터는 요로상피암 이외의 종양을 발현하는 선택된 191P4D12에서 엔포르투맙 베도틴의 사용을 지지한다.
최근 치료의 발전에도 불구하고, 환자의 약 80%는 전이성(악성 또는 전이성 악성 포함) 질환에 대한 초기 치료로서 백금 함유 요법이 실패한 후의 표준 치료인, PD 1/L1 억제제에 반응하지 않는다(Alhalabi O et al Oncology (Williston Park). 2019;33(1):11-8; Kim & Seo Investig Clin Urol. 2018;59(5):285-296; National Comprehensive Cancer Network, 2017 (Non-small cell lung cancer, NCCN clinical practice guidelines in oncology (NCCN guidelines), http://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/nscl.pdf ; National Comprehensive Cancer Network (Bladder Cancer (Version 3, 2019) http:///www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/bladder.pdf)). 이 환자들은 치료 옵션이 거의 없으며 새로운 치료법이 시급하다.
6.4.3 연구 목표(들) 및 종점(들)
이 연구에 대한 1차, 2차 및 추가 목표 및 종점은 표 7에 열거된다.
연구 목표(들) 및 종점(들)
목표(들) 종점(들)
1차
● 확인된 ORR로 측정된 엔포르투맙 베도틴의 항종양 활성을 결정 ● 독립 검토 시설(BICR)에서 결정한 고형 종양 반응 평가 기준(RECIST) 버전 1.1에 따라 확인된 ORR(완전 반응[CR] + PR)
2차
● 엔포르투맙 베도틴의 반응 지속 기간(DOR) 평가
● 엔포르투맙 베도틴의 질병통제율(DCR) 평가
● 엔포르투맙 베도틴(PFS)의 무진행 생존을 평가
● OS를 평가
● 엔포르투맙 베도틴의 안전성 및 내약성을 평가		 ● 조사자 평가에 따른 RECIST 버전 1.1에 따라 확인된 ORR
● BICR 평가에 따른 RECIST 버전 1.1에 따른 DOR
● 조사자 평가에 따른 RECIST 버전 1.1에 따른 DOR
● BICR 평가에 따른 RECIST 버전 1.1에 따른 DCR(CR + PR + 안정 질환[SD])
● 조사자 평가에 따른 RECIST 버전 1.1에 따른 DCR
● BICR 평가에 따른 PFS
● 조사자 평가에 따른 PFS
● OS
● 안전 변수
● 이상반응(AE)
● 실험실 테스트
● 활력징후 측정
● 12-리드 심전도
● ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 성능 상태
추가
● 191P4D12 발현을 포함하여 치료 결과와 상관관계가 있을 수 있는 잠재적인 게놈 및/또는 기타 바이오마커를 평가
● 엔포르투맙 베도틴 및 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 약동학 평가
● 엔포르투맙 베도틴의 면역원성 평가
● 삶의 질(QOL)에 대한 엔포르투맙 베도틴의 치료 효과를 평가		 ● 191P4D12 발현을 포함하여 치료 결과와 상관관계가 있을 수 있는 게놈 및/또는 기타 바이오마커
● 엔포르투맙 베도틴 및 MMAE의 선택된 약동학적 매개변수(즉, Cmax[주입 종료 시 농도] 및 Ctrough[투여 전 농도])
● 엔포르투맙 베도틴에 대한 항치료 항체(ATA) 발생률
● EuroQOL 5-치수(EQ-5D-5L) 및 통증 평가에 따른 환자 보고 결과(PRO)
6.4.4. 치료 및 투여량
6.4.4.1. 치료
이것은 국소 진행성 또는 전이성 악성 고형 종양이 있는 성인 대상에서 단일 제제로서의 엔포르투맙 베도틴의 항종양 활성 및 안전성을 평가하도록 설계된 오픈-라벨, 멀티센터, 멀티-코호트, 2상 연구이다. 대략 40명의 대상이 다음 6개 코호트 각각에 등록된다.
코호트 1: HR+/HER2- 유방암; 또는
코호트 2: TNBC; 또는
코호트 3: SQNSCLC; 또는
코호트 4: NSCLC; 또는
코호트 5: 두경부암; 또는
코호트 6: 위암 또는 식도암
각 코호트에 대한 항종양 활성을 평가하기 위한 1개의 계획된 중간 분석이 있다. 중간 분석은 평가 가능한 종양 반응 데이터가 있는 20명의 대상이 치료된 후 주어진 코호트에 대해 수행된다. 2 상(BOP2)에 대한 베이지안 최적 설계(Zhou H et al, Stat Med. 2017;36(21):3302-3314)는 중간 결정 규칙을 가이드하는데 사용된다. 각 코호트에 대해 2-단계 BOP2 설계를 기반으로, 확인된 반응을 갖는 대상(CR 및 PR)의 수가 1단계에서 미리 지정된 최소 응답자 수 미만인 경우, 코호트 등록이 중단될 수 있다; 그렇지 않으면 계획된 코호트의 규모에 도달할 때까지 등록이 계속된다.
상기 연구는 3개의 기간으로 구성된다: 스크리닝/베이스라인, 치료 및 추적.
스크리닝/베이스라인 기간은 연구 치료의 1차 투여 전 28일까지 발생한다. 치료 기간 동안, 주기 1에서 시작하여, 대상은 치료 중단 기준 중 하나가 충족될 때까지 28일 주기마다 1, 8, 및 15일에 엔포르투맙 베도틴을 투여받는다. 질병 평가는 스크리닝/베이스라인에서 수행되고 대상이 방사선학적으로 확인된 질병을 갖거나, 새로운 후속 항암 요법을 시작하거나, 사망하거나, 동의를 철회하거나, 추적을 실패하거나, 또는 연구가 종료되는 것 중 어느 것이 먼저 발생할 때까지 연구 전반에 걸쳐 연구 치료의 1차 투여로부터 8주(56일±7일) 마다 반복된다.
치료 종료(EOT) 방문은 엔포르투맙 베도틴의 마지막 투여 또는 치료 중단 결정 후 7일 이내에, 또는 다른 항암 요법의 시작 전 중 더 이른 시점에 수행된다. 그 다음에는 엔포르투맙 베도틴의 마지막 투여 또는 치료 중단 결정으로부터 30일(+7일 창)까지 완료되는 30일 안전성 추적 관찰이 뒤따르며, 이는 약물-관련 AE의 해결을 확인하기 위해 평가를 반복해야하는 경우가 아니라면, 대상과의 전화 접촉으로 충분하다.
RECIST 버전 1.1에 의해 방사선학적으로 확인된 질병 진행 이외의 이유로 연구 치료를 중단하는 대상은 치료 후 추적 기간에 들어가고 대상이 방사선학적으로 확인된 질병 진행을 갖거나, 새로운 항암 요법을 시작하거나, 사망하거나, 동의를 철회하거나, 추적 관찰에 실패하거나, 또는 연구가 종료되는 것 중 어느 것이 먼저 발생할 때까지 8주 마다(56일± 7일) 이미징 스캔을 계속 받는다.
연구 치료에서 1년 후, 질병 평가 빈도는 12주 마다로 감소된다(84일±7일).
방사선학적으로 확인된 질병 진행 또는 후속 항암 요법의 개시 후, 어느 것이 먼저 발생하던 간에, 대상은 사망하거나, 동의를 철회하거나, 추적에 실패하거나, 또는 연구 종료 중 어느 것이 먼저 발생할 때까지 생존 상태에 대한 장기 추적 기간 동안 12주 마다 접촉된다.
확인된 ORR은 1차 종점이다. 확인된 ORR은 객관적인 반응이 RECIST 버전 1.1에 따라 확인된 CR 또는 PR인 대상의 비율로 정의된다. 반응(CR 또는 PR)은 1차 반응 후 4주(28일 + 7일 창)에 반복 이미징 스캔으로 확인되어야 한다.
약동학 및 ATA에 대한 혈액 샘플은 프로토콜-지정 시점에서 수집된다. 검증된 어세이는 혈청 또는 혈장에서 엔포르투맙 베도틴 및 MMAE의 농도를 측정하고 ATA를 평가하는데 사용된다. 바이오마커에 대한 샘플은 프로토콜 지정 시점에 수집된다.
6.4.4.2. 투여량
각 코호트에서, 대상은 각 28일 주기의 1, 8 및 15일에 정맥내(IV) 주입으로서 1.25 mg/kg의 용량으로 엔포르투맙 베도틴을 투여받는다.
6.4.5. 환자 집단
환자 집단은 다음을 포함하는 이전에 치료된 국소 진행성 또는 전이성 악성 고형 종양이 있는 대상으로 구성된다:
HR+/HER2- 유방암; 또는
TNBC; 또는
SQNSCLC; 또는
NSCLC; 또는
두경부암; 또는
위암 또는 식도암
모든 스크리닝 평가는 조사자가 완료하고 검토하여 잠재적인 대상이 모든 적격성 기준을 충족하는지 확인해야 한다. 적격성 기준에 대한 프로토콜 일탈(프로토콜 웨이버(waivers) 또는 면제(exemptions)라고도 함)의 잠정 승인은 허용되지 않는다.
6.4.5.1. 포함 기준
대상은 다음 모두가 적용되는 경우 연구에 참여할 자격이 있다:
코호트 1 내지 6의 모든 대상에 대해:
기관 검토 위원회(IRB)/독립 윤리 위원회(IEC)는 국가 규정(예: 미국 연구 사이트에 대한 건강 보험 이동성 및 책임법 승인)에 따라 사전 서면 동의서 및 개인 정보 보호 언어를 승인해야 합니다. 모든 연구 관련 절차(해당되는 경우 금지 약물 중단 포함).
Institutional Review Board (IRB)/Independent Ethics Committee (IEC) 승인된 서면 동의서 및 국가 규정에 따른 프라이버시 랭귀지(예컨대, 미국 연구 사이트에 대한 건강 보험 이동성 및 책임법 승인)가 임의의 연구 관련 절차(적용 가능한 경우, 금지된 약물의 철회를 포함) 전에 대상으로부터 얻어져야 한다.
대상은 정보 동의서(ICF)에 서명할 당시 로컬 규정에 따라 성인으로 간주된다.
대상은 RECIS 버전 1.1에 의해 측정 가능한 질병을 갖는다.
대상은 원발성 종양 또는 전이 부위에서 접근 가능한 보관 종양 조직을 가지며, 여기서 소스 및 이용가능성은 연구 치료 전에 확인된다. 이용가능한 보관 종양 조직이 없는 경우, 대상은 연구 치료 전에 종양 조직을 얻기 위해 생검을 받을 것이다. 대상이 안전 문제로 인해 생검을 받을 수 없는 경우, 연구 등록은 의료 모니터와 논의되어야 한다.
대상은 0 또는 1의 ECOG 수행 상태를 가진다.
대상은 다음과 같은 베이스라인 실험실 데이터를 갖는다:
절대 호중구 수(ANC) ≥ 1.0 Х 109/L
혈소판 수 ≥ 100 Х 109/L
헤모글로빈 ≥ 9 g/dL
혈청 총 빌리루빈 ≤ 1.5 Х 정상 상한치 (ULN) 또는 ≤ 길버트병 환자의 경우, 3 Х ULN
크레아티닌 청소율 (CrCl) ≥0 mL/min, 제도적 표준에 따라 추정 또는 24시간 소변 수집에 의해 측정 시(사구체 여과율(GFR)도 CrCl 대신 사용될 수 있음).
알라닌 아미노전이효소 (ALT) 및 아스파르테이트 아미노전이효소 (AST) ≤　3 Х　ULN
여성 대상은 임신하지 않았고, 다음 조건 중 적어도 하나가 적용된다:
가임 여성이 아님(WOCBP)
사전 동의 시점부터 연구 치료 투여의 최종 투여 후 적어도 6개월 동안 피임 지침을 따르기로 동의한 WOCBP
여성 대상은 스크리닝 시 시작하여 연구 기간 내내 그리고 연구 치료 투여의 최종 투여 후 6개월 동안 모유수유를 하지 않는데 동의해야 한다.
여성 대상은 연구 치료의 제1 투여 시부터 시작하여 연구 기간 내내 그리고 연구 치료 투여의 최종 투여 후 6개월 동안 난자를 기증해서는 안된다.
가임기 여성 파트너(들)(모유 수유 파트너 포함)이 있는 남성 대상은 치료 기간 내내 그리고 연구 치료 투여의 최종 투여 후 6개월 후 피임법을 사용하는데 동의해야 한다.
남성 대상은 치료 기간 동안 및 연구 치료 투여의 최종 투여 후 6개월 동안 정자를 기증해서는 안된다.
임신 파트너(들)가 있는 남성 대상은 연구 기간 내내 및 연구 치료 투여의 최종 투여 후 6개월 동안 임신 기간 동안 금욕을 유지하거나 또는 콘돔을 사용하는 것을 동의해야한다.
대상은 현재 연구에서 연구 치료를 받는 동안 다른 중재적 연구에 참여하지 않는 것에 동의한다.
질병별 포함 기준:
코호트 1: HR+/HER2- 유방암
대상은 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 HR+/HER2 유방암을 갖는다; 가장 최근에 분석된 조직을 기반으로 하여 American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists (ASCO/CAP) 지침에 따라 에스트로겐 수용체(ER) 양성 및/또는 프로게스테론 수용체(PR) 양성, 및 HER2 음성으로 정의된다.
대상은 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖는다.
대상은 전이성 또는 국소 진행성 환경에서 ≥ 1 라인의 내분비 요법 및 사이클린-의존성 키나제(CDK) 4/6 억제제를 받아야 한다.
대상은 임의의 환경에서 탁산 또는 안트라사이클린으로 사전 치료를 받아야 한다. 유방안 감수성 유전자(BRCA)1 또는 2에서 유해 생식성 돌연변이를 갖는 대상은 폴리 ADP 리보스 폴리머라제(PARP) 억제제로 치료받아야 한다.
코호트 2: 삼중 음성 유방암
대상은 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 TNBC를 갖는다; 가장 최근에 분석된 조직을 기반으로 한 ASCO/CAP 지침에 따라 명백한 TNBC 조직학(ER-음성/PR-음성/HER2-음성)으로 정의된다.
대상은 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖는다.
대상은 임의의 환경에서 탁산을 포함하는, ≥ 2 라인의 전신 요법을 받아야 한다. BRCA1 또는 2에 유해 생식계열 돌연변이가 있는 대상은 PARP 억제제로 치료를 받아야 한다.
코호트 3: 편평 비소세포 폐암
대상은 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 편평 NSCLC를 갖는다.
대상은 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖는다.
대상은 백금-기반 요법 후에 진행되었거나 재발했어야 한다; 보조제 환경에서 투여된 백금 요법은 완료 후 12개월 내에 재발이 발생한 경우 치료로 간주된다.
대상은, 대상의 종양 PD-1 또는 PD-L1 발현 및 국소 치료 지침에 기반하여 적격한 경우, 항-프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1) 또는 항-프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)로 사전 요법을 받았어야 한다.
코호트 4: 비-편평 비-소 세포 폐암
대상은 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 비-편평 NSCLC를 갖는다(로컬 실험실 표준에 의한 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 야생형 타입 및 역형성 림프종 키나제[ALK] 야생형 타입).
대상은 국소 진행성 또는 전이성 질병을 갖는다.
대상은 전이성 또는 국소 진행성 환경에서 백금-기반 요법 후 진행되거나 재발했어야 한다; 보조 환경에서 투여된 백금 요법은 완료 후 12개월 이내에 재발이 발생한 경우 치료로 간주된다.
대상의 종양 PD-1 또는 PD-L1 발현 및 국소 치료 지침에 기초하여 적격한 경우, 대상은 항-PD-1 또는 항-PD-L1을 받았어야 한다.
코호트 5: 두경부암
대상은 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 두경부 암을 갖는다.
대상은 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖는다.
대상은 전이성 또는 국소 진행성 환경에서 백금 함유 요법 후 진행되거나 재발했어야 한다. 치료 환경에서 복합 요법의 일부로 투여된 백금 요법은 대상이 완료 후 6개월 내에 재발되거나 진행되지 않는 경우, 사전 치료로로 간주되지 않는다.
대상의 종양 PD-1 또는 PD-L1 발현 및 국소 치료 지침에 기초하여 적격한 경우, 대상은 항-PD-1 또는 항-PD-L1을 받았어야 한다.
코호트 6: 위암 또는 식도암
대상은 조직학적으로 또는 세포학적으로 확인된 위암 또는 식도암이 있다.
대상은 국소 진행성 또는 전이성 질환을 갖는다.
대상은 전이성 질환 또는 진행성 질환에 대한 플루오로피리미딘 및 백금을 포함하는 화학 요법 치료 후에 진행되거나 재발했어야 한다. 선행 요법 또는 보조 요법은 대상이 완료 후 6개월 내에 재발하거나 진행되지 않는 한, 사전 치료로 계산되지 않는다.
6.4.5.2. 제외 기준
대상은 다음 중 하나가 적용되는 경우, 참여에서 제외된다:
코호트 1 내지 6의 모든 대상의 경우:
대상은 전이성 질환에 대해 ≥ 3 라인의 사전 화학요법 포함 치료를 받았다(비-화학요법 치료에 대한 제한 없음).
대상은 ≥ 2의 운동 신경병증 등급 또는 기존의 감각을 가진다.
대상은 활동성 중추 신경계(CNS) 전이를 가진다. 치료된 CNS 전이를 갖는 대상은 다음이 모두 참인 경우에 연구가 허용된다:
CNS 전이가 스크리닝 전 6주 이상 동안 임상적으로 안정적이었다
CNS 전이에 대한 스테로이드 치료가 필요한 경우, 대상은 2주 이상 동안 프레드니손 또는 균등물의 20 mg/일 이하의 안정한 투여 중이다.
베이스라인 이미징 스캔이 새로운 또는 확대된 뇌 전이의 증거를 보여주지 않는다.
대상은 연수막 질환이 없다.
대상은 이전 치료(전신 요법, 방사선 요법 또는 수술 포함)와 관련된 임상적으로 유의한 독성이 진행 중이다(탈모증 제외, 2 등급 이상).
2등급 이하의 면역요법 관련 갑상선기능저하증 또는 범뇌하수체기능저하증이 있는 대상은 안정적인 용량의 호르몬 대체 요법(표시된 경우)으로 잘 유지/조절되는 경우 등록될 수 있다. 진행 중인 ≥ 3 등급 면역 요법 관련 갑상선 기능 저하증 또는 범뇌하수체 기능 저하증이 있는 대상은 제외된다. 진행 중인 면역요법 관련 대장염, 포도막염, 심근염 또는 폐렴이 있는 대상, 또는 고용량의 스테로이드(> 20mg/일 프레드니손 또는 균등물)를 필요로 하는 다른 면역요법 관련 AE가 있는 대상은 제외된다.
대상은 연구 치료의 제1 투여의 3개월 이내에 조절되지 않는 진성 당뇨병의 병력이 있다. 조절되지 않는 당뇨병은 달리 설명되지 않는 관련 당뇨병 증상(다뇨증 또는 다갈증)과 함께 헤모글로빈 A1c(HbA1c) ≥ 8% 또는 7 내지 8% 미만의 HbA1c로 정의된다.
대상은 엔포르투맙 베도틴 또는 기타 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE) 기반 항체-약물 컨쥬게이트(ADC)로 사전 치료를 받은 적이 있다.
대상은 연구 약물의 1차 투여 전 3년 이내에 2차 악성 종양 진단을 받았거나 또는 이전에 진단된 악성 종양의 잔여 질환의 임의의 증거를 갖는다. 비흑색종 피부암, 진행의 증거 없이 치유 목적으로 치료된 국소 전립선암, 능동 감시/ 치료 의도가 없는 관찰 대기 하의 저위험 또는 초저위험(표준 지침에 따름) 국소 전립선암 또는 모든 유형의 상피내 암종(완전 절제가 수행된 경우)을 갖는 대상이 허용된다.
대상은 현재 연구 치료의 1차 투여 시점에 바이러스, 박테리아 또는 진균 감염에 대한 전신 항균 치료를 받고 있다. 일상적인 항균 예방은 허용된다.
대상은 알려진 활성 B형 간염(예: B형 간염 표면 항원[HBsAg] 반응성) 또는 활동성 C형 간염(예: C형 간염 바이러스[HCV] RNA[정성]이 검출됨)을 갖는다.
대상은 인간 면역결핍 바이러스(HIV) 감염(HIV 1 또는 2)의 병력이 있는 것으로 알려져 있다.
대상은 연구 약물의 1차 투여 전 6개월 이내에 뇌혈관 사건(뇌졸중 또는 일과성 허혈 발작), 불안정 협심증, 심근 경색 또는 New York Heart Association Class III-IV와 일치하는 심장 증상(울혈성 심부전 포함)의 기록된 이력이 있다.
대상은 연구 약물의 1차 투여 전 4주 이내에 대수술을 받는다.
대상은 연구 약물의 1차 투여 2주 전에 완료되지 않은 방사선 요법, 화학 요법, 생물학적 제제, 임상시험용 제제 및/또는 면역 요법을 통한 항종양 치료를 받는다.
대상은 엔포르투맙 베도틴 또는 엔포르투맙 베도틴의 약물 제형에 포함된 임의의 부형제(히스티딘, 트레할로스 이수화물 및 폴리소르베이트 20 포함)에 과민증이 있는 것으로 알려지거나, 또는 대상은 CHO 세포에서 생산되는 생물 의약품에 과민 반응을 보이는 것으로 알려진다.
대상은 활동성 각막염 또는 각막 궤양이 있는 것으로 알려져 있다. 표재성 점상각막염이 있는 대상은 조사자의 견해에서 장애가 적절히 치료되고 있는 경우, 허용된다.
대상은, 조사자의 견해에서, 대상을 연구 참여에 부적절하게 만드는 임의의 조건을 갖는다.
6.4.6. 치료제
6.4.6.1. 투여되는 치료제
치료제인 엔포르투맙 베도틴(ASG-22CE)은 정맥내 투여를 위해 재구성되는 멸균, 방부제, 백색 내지 회백색의 동결건조 분말이다. 치료제는 각 바이알에 20mg 또는 30mg 엔포르투맙 베도틴을 함유하는 일회용 유리 바이알에 공급된다. 치료제는 2℃ 내지 8℃에서 보관된다.
6.4.6.1.1. 용량 및 치료제의 투여
1.25 mg/kg의 용량의 엔포르투맙 베도틴은 매 28일 주기의 1, 8 및 15일에 대략 30분에 걸쳐 정맥내 주입으로 투여된다. 주입 관련 반응(IRR)이 없는 경우, 대략 30분 주입 기간을 달성하기 위해 모든 대상의 주입 속도가 계산된다. 엔포르투맙 베도틴은 정맥내 푸시(push) 또는 볼러스(bolus)로 투여해서는 안된다.엔포르투맙 베도틴은 다른 약물과 혼합해서는 안된다. 엔포르투맙 베도틴 투여 사이에는 적어도 7일이 경과해야 한다.
대상 체중은 평가 일정에 설명된 대로 모든 관련 평가 시점 동안 측정되어야 한다. 체중 기반 투여량은 대상의 실제 체중을 사용하여 계산된다. 체중 기반 투여에 대한 예외는 체중이 100kg을 초과하는 대상에 대해 이루어진다; 투여량은 이러한 개인에 대하여 100kg을 기준으로 한다. 이 연구에서 허용된 최대 용량은 125mg이다.
대상은 엔포르투맙 베도틴 투여 동안 및 처음 3주기 동안 주입 후 적어도 60분 동안 관찰되었다. 최적의 대상 관리와 일치하는 모든 지원 조치는 기관 표준에 따라 연구 전반에 걸쳐 제공된다.
주사 부위는 투여 중 및 투여 후 임의의 시간에 발적, 부종, 통증 및 감염에 대해 면밀히 모니터링된다. 대상은 투여 시 또는 주입 후 신속히 발적 또는 불편함을 보고하는 것이 좋다.
6.4.6.2. 무작위화 및 블라인딩
이것은 공개-라벨 연구이다. 엔포르투맙 베도틴의 대상 등록 및 분배는 인터렉티브 반응 기술(IRT) 시스템을 통해 수행된다. 연구 치료를 시작하기 전에, 연구 현장 직원은 IRT 시스템에서 대상 번호와 약물 할당을 얻는다. 특정 IRT 절차는 당업자에게 알려져 있다.
6.4.6.3. 용량 조절
1, 0.75 또는 0.5 mg/kg으로의 용량 감소는 독성의 유형 및 중증도에 따라 허용된다. 독성이 연구 약물 중단을 필요로 하지 않고 베이스라인 또는 1 등급 이하로 돌아가는 경우, 용량 감소가 필요한 대상은 1 용량 수준만큼 다시 증량될 수 있다(즉, 0.75mg/kg으로 감소된 대상은 1mg/kg으로만 다시 증량될 수 있다). 독성이 재발하면 재증가가 허용되지 않는다. 2등급 이상의 각막 AE를 갖는 대상은 용량 재증가가 허용되지 않는다. 엔포르투맙 베도틴 관련 독성에 대한 용량 조절 권장 사항은 표 8 및 표 9에 나와 있다.
다른 엔포르투맙 베도틴 관련 독성에 대한 투여 중단은 현장 조사자의 재량에 따라 허용된다. 투여 중단은 최대 8주(2주기)까지 지속될 수 있다.치료로부터 임상적 이익을 얻고 있는 대상에 대한 투여 중단은 대상의 독성이 달리 영구적인 중단을 필요로 하지 않는 경우 8주를 초과하여 연장될 수 있다. 투여 중단 중에는 반응 평가 일정이 조정되지 않는다.
Figure pct00053
Figure pct00054
6.4.7. 연구 절차 및 평가
6.4.7.1. 효능 평가
질병 반응 및 진행은 RECIST 버전 1.1을 사용하여 평가된다(6.4.8.3, RECIST 버전 1.1 참조). 방사선 사진 평가는 평가 일정에 따라 수행된다. 확인된 ORR, DOR, DCR, PFS 및 OS는 평가 일정에 따라 평가된다.
6.4.7.1.1. 질병 평가를 위한 이미징(컴퓨터 단층 촬영/자기 공명 영상/양전자 방출 단층 촬영-컴퓨터 단층 촬영 스캔)
이미징/질병 평가는 스크리닝/베이스라인에서 연구 전반에 걸쳐 연구 치료의 1차 투여로부터 8주(56일 ± 7일)마다, 대상이 방사선학적으로 확인된 질병 진행을 갖거나, 새로운 후속 항암 요법을 시작하거나, 사망하거나, 동의를 철회하거나, 추적 조사에 실패하거나 또는 연구가 종료되는 것 중 어느 것이라도 먼저 발생할 때까지 수행된다. 사전 동의 전에 수행된 베이스라인 영상은 연구 치료의 1차 투여 전 28일 이내에 수행되는 한 표준 치료로 사용될 수 있다.
조사자에 의해 질병 반응이 CR 또는 PR로 평가되는 경우, 확인 이미징 스캔은 1차 반응 4주(28일 + 7일) 후에 필요하다. 연구 치료 1년 후, 질병 반응 평가의 빈도는 매 12주(84일 ± 7일)로 감소된다.
질병 반응 및 진행은 BICR에 의해 평가된다. 치료 결정은 RECIST 버전 1.1에 의한 스캔의 사이트 평가를 기반으로 한다.
RECIST 버전 1.1에 의해 방사선학적으로 확인된 질병 진행 이외의 이유로 연구 치료를 중단한 대상은 대상이 방사선학적으로 확인된 질병 진행을 가지거나, 새로운 항암 요법을 시작하거나, 사망하거나, 동의를 철회하거나, 추적 관찰에 실패하거나, 연구가 종료되거나 중 어느 것이든 먼저 발생할 때까지 8주(56일 ± 7일)마다 이미지 스캔을 계속 받는다. 종양 이미징은 질병 진행이 의심될 때마다 수행될 수 있다.
뇌 스캔 및 뼈 이미징은 평가 일정에 따라 수행되고, 전이가 스크리닝/베이스라인에서 확인되었거나, 또는 전이가 알려져있거나 의심되거나, 또는 연구 전반에 걸쳐 임상적으로 표시된 바와 같이, 반응 평가 시점에서 반복된다.
조영제를 사용한 CT 스캔(흉부, 복부 및 뇌)은 종양 평가에 선호되는 방식이다. 자기 공명 영상은 지역 표준 관행이거나 대상에게 CT 스캔이 금기인 경우(예컨대, 대상이 조영제에 알레르기가 있는 경우) 허용된다. x-ray와 같은 다른 모든 RECIST 승인 스캔 방법은 선택 사항이다. 이미지 평가에 대한 추가 지침은 연구 절차 매뉴얼에서 찾을 수 있다.
평가는 표적 병변, 비표적 병변 및 임의의 새로운 병변에 대한 종양 측정을 포함한다. 반응 평가는 주어진 시점 평가에 대해 특성화된다. 각 대상에 대한 연구 종료 시, 연구 치료에 대한 최상의 전체 반응이 도출된다. 비교 가능성을 보장하기 위해, 스크리닝 및 후속 반응 평가가 동일한 기술을 사용하여 수행된다. 가능한 경우 동일한 개인이 연구 기간 동안 임의의 1명의 대상에 대한 이미지를 평가한다. 연구 전반에 걸쳐 병변을 추적하기 위해 알려진 뇌 전이가 있는 대상에 대해 반복 영상이 사용되는 것이 추천된다.
표적, 비표적 및/또는 새로운 병변을 포함하는 질병 진행 부위는 eCRF에 문서화되어 있다. 추가 영상은 의심되는 질병 진행을 확인하기 위해 언제든지 수행될 수 있다.
이 연구는 독립적 및 국부적(조사자) 방사선 평가 둘 다의 결과에 기초하여 분석된다. 모든 이미징 스캔의 사본은 연구 전반에 걸쳐 수집되고 당업자에게 알려진 표준에 따라 분석된다.
6.4.7.1.2. 표적 병변의 평가
완전 응답(CR)
CR은 모든 표적 및 비표적 병변의 소멸로 정의된다. 모든 병리학적 림프절(표적이든 비표적이든)은 베이스라인 측정에서 10mm 미만의 단축의 감소를 가져야한다.
부분 응답(PR)
PR은 베이스라인 합 직경을 기준으로 하여 표적 병변의 직경(비결정 병변의 경우 가장 긴 것, 결절 병변의 경우 단축)의 합에서 적어도 30% 감소로 정의된다.
안정 질환(SD)
SD는 연구 약물을 복용하는 동안 직경의 최소 합계를 기준으로 하여 PR에 대한 자격을 갖추기에 충분한 감소도 진행성 질환에 대한 자격을 갖추기에 충분한 증가도 아닌 것으로 정의된다.
진행성 질환(PD)
PD는 연구에서 가장 작은 합계를 기준으로 하여, 표적 병변의 직경(비결절 병변의 경우 가장 긴 것; 결절 병변의 경우 단축)의 합이 적어도 20% 증가하는 것으로 정의된다(이는 연구에서 가장 작은 경우 베이스라인 합계를 포함한다). 20%의 상대적인 증가 외에도, 합계는 적어도 5mm의 절대적인 증가도 입증해야 한다. 하나 이상의 새로운 병변의 출현도 진행으로 간주된다.
비표적 병변의 평가
비표적 병변을 기반으로 한 명백한 진행을 달성하기 위해, 표적 병변의 SD 또는 PR이 존재하는 경우에도, 전체 종양 부담이 요법을 중단할 가치가 있을만큼 충분히 증가하도록, 비표적 질환의 전반적인 수준의 실질적 악화가 있어야 한다. 1개 이상의 비표적 병변 크기의 적당한 증가는 일반적으로 명백한 진행에 대한 자격을 갖추기에 충분하지 않다.
미완성 반응/비진행성 질환
비표적 병변의 NonCR/NonPD는 하나 이상의 비표적 병변의 지속성으로 정의된다.
진행성 질환
비표적 병변의 PD는 기존 비표적 병변의 명백한 진행 또는 하나 이상의 새로운 병변의 출현으로 정의된다.
6.4.7.1.3. 시점 반응 평가
베이스라인에서 측정 가능한 질병이 있는 대상에 대한 각 시점에서의 반응 상태가 결정된다.
6.4.7.1.4. 생존 상태
방사선학적으로 확인된 질병 진행 또는 후속 항암 요법의 개시 후, 사망, 동의 철회, 추적 실패 또는 연구 종료 중 어느 것이라도 먼저 발생하는 때까지, 대상은 생존 상태 수집을 위해 장기 추적 기간에서 12주마다 접촉된다.
6.4.7.2. 추가 평가
6.4.7.2.1. 바이오마커(들)
연구 과정 동안 수집된 샘플은, 예를 들어, 여기에 설명된 연구의 각 시점에서, 연구 치료에 대한 내성 또는 민감성 메커니즘, 연구 치료와 관련된 동적 변화(용량, 안전성, 내약성 및 효능 등의 측면에서) 및 방법 개발 또는 엔포르투맙 베도틴과 관련된 진단 어세이의 검증과의 가능한 연관성을 조사하기 위해, DNA, RNA 및 단백질을 포함한 다른 바이오마커에 대해 분석될 수 있다.
바이오마커 분석을 위한 혈액 샘플
바이오마커 분석을 위한 혈액 샘플은 혈장, 혈청 및 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)의 단리를 위해 샘플 수집 일정에 표시된 시점에서 모든 대상으로부터 수집된다. 혈장 샘플의 하위 집합은 순환 유리 DNA(cfDNA)의 차세대 시퀀싱(NGS) 분석에 사용될 수 있다. 혈청 샘플의 하위 집합은 가용성 191P4D12 수준을 특성화하기 위해 사용될 수 있다. 혈장, 혈청 및 PBMC 샘플은 면역 기능 및 면역 세포 하위 집합의 마커를 식별하기 위해 사이토카인 또는 면역 표현형 분석을 받을 수 있다. 혈액 샘플은 본 명세서에 기술되고 당업자에게 공지된 추가 분석을 위해 사용될 수 있다.
바이오마커 분석을 위한 종양 조직 샘플 평가 일정에 표시된 대로 포르말린 고정, 파라핀 포매 종양 조직 블록 또는 염색되지 않은 하전 슬라이드 형태의 전처리 종양 조직 샘플(원발성 또는 전이성 부위로부터)이 수집된다. 보관 또는 치료 전 신선한 종양 조직이 허용된다. 보관 종양 조직 샘플을 이용할 수 없는 경우, 대상은 연구 치료 전에 종양 조직을 얻기 위해 생검을 받을 수 있다. 새로 절편되고 염색되지 않은 하전된 슬라이드가 수집되는 경우 계획된 바이오마커 연구를 위해 각 대상에서 최소 10개에서 최대 20개의 슬라이드가 필요하다.
연구 치료 중 또는 추적 기간 동안 생검이 표준 치료로 수행되는 경우, 대상의 종양 조직 샘플이 수집되고, 여기에 설명된 대로 평가된다.
종양 조직 샘플은 191P4D12 및 PD-L1 발현, 질병 서브타입의 마커 및 종양 면역 미세 환경과 관련된 마커에 대해 분석될 수 있다. 종양 조직 샘플은 본원에 기술되고 당업자에게 공지된 추가 분석을 위해 사용될 수 있다.
6.4.7.2.2. 라이프 퀄리티 및 환자 보고 결과 평가
통증 평가
대상은 평가 일정에 표시된 대로 지난 24시간 동안 최악의 통증을 가장 잘 설명하는 0에서 10까지의 척도로 자신의 통증을 평가한다. 6.4.8.6 통증 평가를 참조.
유로 라이프 퀄리티 - 5 치수
각 주기의 1일차 및 치료 종료 시, 대상은 EQ-5D-5L 설문지를 작성한다. EQ-5D-5L은 건강 결과의 일반적이고 선호도 기반 측정으로 사용하기 위해 EuroQOL Group에서 개발된 표준화된 도구이다. 이는 광범위한 건강 상태 및 치료에 적용될 수 있으며 간단한 설명 프로필 및 건강 상태에 대한 단일 지표 값을 제공한다. EQ-5D-5L은 이동성, 자가 관리, 일상 활동, 통증/불편, 불안/우울을 포함하는, 건강의 5가지 치수를 평가하는 기능 및 웰빙의 5개 항목 자체 보고 측정이다. 각 치수는 5가지 수준(문제 없음, 약간의 문제, 중간 문제, 심각한 문제, 극도의 문제)을 포함한다. 고유한 EQ-5D-5L 건강 상태는 5 치수 각각의 1레벨을 결합하여 정의된다. 상기 설문지는 또한 응답자의 자가 평가 건강 상태를 수직 눈금(0 내지 100) 시각적 아날로그 척도로 기록한다. 5개 항목에 대한 응답도 일반 집단 샘플에서 유래된 값에 기반하여 가중 건강 상태 지수(유틸리티 점수)로 변환된다(Herdman, M et al., Qual Life Res 2011;20(10):1727-36). 6.4.8.5 EQ-5D-5L을 참조.
6.4.8. 환자 결과 및 이의 분석
6.4.8.1. 효능 분석
효능 분석이 FAS, RES, 및 RES-BICR에서 수행된다. 종양 관련 분석은 RECIST 버전 1.1을 기반으로 요약된다. 종양 평가와 관련된 효능 종점은 BICR 및 WHTKWK 평가 모두에 대해 분석된다.
6.4.8.1.1. 1차 종료점 분석
1차 분석
1차 효능 종점은 BICR에 따른 확인된 ORR이다. 확인된 ORR은 BOR이 RECIST 버전 1.1에 따라 확인된 CR 또는 PR인 대상의 비율로 정의된다. 각 코호트에 대해 확인된 ORR이 계산되고 95% 신뢰 구간은 Clopper-Pearson 방법에 의해 구성된다. BICR당 확인된 ORR에 대한 1차 분석 세트는 RES-BICR이다. FAS 및 RES에 대한 추가 분석도 수행될 수 있다.
6.4.8.1.2. 2차 종점 분석
응답 기간
DOR은 RECIST 버전 1.1에 따른 첫 번째 문서화된 응답(CR 또는 PR) 날짜부터
첫 번째 문서화된 PD 날짜 또는 임의의 원인으로 인한 사망 중 먼저 발생하는 날짜까지의 시간으로 정의된다. DOR은 확인된 CR 또는 PR을 달성한 대상에 대해서만 계산된다. DOR은 Kaplan-Meier 방법론을 사용하여 분석되며 Kaplan-Meier 플롯이 제공된다. 중앙값 DOR 및 이의 양측 95% CI가 계산된다.
질병 통제율
DCR은 BOR이 확인된 CR 또는 PR 또는 SD인 대상의 비율로 정의된다. 각 코호트에 대한 DCR이 계산되고 이의 95% 신뢰 구간은 Clopper Pearson 방법으로 구성된다.
무-진행 생존
PFS는 연구 치료 시작부터 RECIST 버전 1.1에 따른 PD의 첫 번째 문서화 또는 임의의 원인으로 인한 사망 중 먼저 도래하는 시점까지의 시간으로 정의된다. PFS는 Kaplan-Meier 방법론을 사용하여 분석되며 Kaplan-Meier 플롯이 제공된다. PFS 중앙값과 이의 양측 95% CI가 계산된다
전체 생존
OS는 연구 치료 시작부터 임의의 원인으로 인한 사망 날짜까지의 시간으로 정의된다. OS는 Kaplan-Meier 방법론을 사용하여 분석되며 Kaplan-Meier 플롯이 제공된다. OS 중앙값과 이의 양측 95% CI가 계산된다.
6.4.8.1.3. 다른 효능 종점의 분석
베스트 전체 응답
BOR은 대상에 대한 모든 이용 가능한 종양 시점 반응 데이터를 기반으로 결정된다. 새로운 항암 요법 또는 진행성 질환(PD) 후에 기록된 반응은 BOR 유도에서 제외된다. BOR의 빈도 테이블은 각 코호트 및 전체에 대해 제공된다.
BOR은 RECIST 버전 1.1에 따른 아래 기준에 따라 도출된다:
대상이 적어도 2개의 CR을 갖고 첫 번째 및 마지막 CR 날짜가 28일 이상 차이가 나는 경우, BOR은 확인된 CR로 정의된다.
대상이 28일 이상 차이나는 PR과 다른 CR/PR을 갖는 경우, 이 대상에 대한 BOR은 확인된 PR이다.
확인된 CR 또는 PR을 갖지 않는 대상의 경우, 대상이 첫 번째 투여일로부터 적어도 49일 후인 CR/PR/SD 중 적어도 1개의 종양 평가 기록을 갖는다면, BOR은 SD로 정의된다.
위에서 정의된 바와 같은 확인된 CR, 확인된 PR 또는 SD가 없으나, PD로서 마지막 종양 평가를 가지고 있는 대상의 경우, 이들의 BOR은 PD이다.
그렇지 않으면, BOR은 베이스라인 이후 종양 평가 데이터가 없는 대상에 대해 평가 불가(NE) 또는 데이터 없음(ND)으로 정의된다.
직경의 합
RECIST 버전 1.1에 따라, 종양 부담은 각 종양 평가에서 모든 표적 병변의 직경 합계(SOD)로 측정된다. SOD의 베이스라인에서 최대 감소율은 각 대상에 대해 계산되고 워터폴 플롯과 함께 도표로 표시된다.
응답 시간
반응 시간(TRR)은 연구 약물의 1차 투여부터 객관적 반응의 첫 번째 문서화까지의 시간으로 계산된다(나중에 확인되는 CR 또는 PR). TTR은 확인된 CR 또는 PR을 달성한 대상에 대해서만 계산된다. TTR은 기술 통계로 요약된다.
6.4.8.2. 기타 분석
6.4.8.2.1. 바이오마커(들)의 분석
잠재적 게놈 및/또는 기타 바이오마커(191P4D12 발현 포함) 및 임상 결과(효능, 안전성 또는 약력학) 간의 연관은 특정 관심 파라미터에 대해 해석 가능한 결과를 제공하기 위해 필요한 기준선 및 연구 측정값을 갖는 대상에 대해 수행될 수 있다. 바이오마커는 해당되는 경우 임상 측정과 관련하여 도표적으로 또는 설명적으로 요약될 수 있다. 요약 통계는 표로 만들어질 수 있다. 대체 모델링 접근 방식과 같은 추가 사후 분석이 수행될 수 있다. 이 섹션에 설명된 모든 분석은 데이터의 가용성을 기반으로 한다.
6.4.8.2.2. 라이프 퀄리티 및 환자 보고 결과 파라미터의 분석
기술적인 QOL 및 PRO 분석이 수행된다. 각 설문지에 대한 완료율이 요약되어 있다.
6.4.8.3. RECIST version 1.1
Figure pct00055
Figure pct00056
Figure pct00057
재생산: Eisenhauer EA, Therasse P, Bogaerts J, Schwartz LH, Sargent D, Ford R, et al. 고형 종양의 새로운 반응 평가 기준: 개정된 RECIST 가이드라인(버전 1.1). Eur J Cancer. 2009;45:228 47.
6.4.8.4. 동부협력종양학회 성능 상태
Figure pct00058
ECOG: Eastern Cooperative Oncology Group 재생산: Oken MM, Creech RH, Tormey DC, Horton J, Davis TE, McFadden ET, et al. ECOG의 독성 및 반응 기준. Am J Clin Oncol. 1982;5:649-55.
6.4.8.5. EQ-5D-5L
Figure pct00059
Figure pct00060
6.4.8.6. 통증 평가
Figure pct00061
Figure pct00062
6.4.8.7. 인간 임상 연구 약어 목록에 대한 약어 및 정의 목록
Figure pct00063
Figure pct00064
6.4.8.8. 인간 연구에 사용된 용어의 정의
Figure pct00065
7. 서열 목록
본원 명세서는 서열 목록의 CRF(computer readable form) 사본과 함께 제출된다. 2020년 7월 30일에 생성된 14369-248-228_SEQ_LISTING.txt라는 제목의 CRF는 39,675 바이트의 크기이며, 전체가 참조로 여기에 통합된다.
SEQUENCE LISTING <110> AGENSYS, INC. SEATTLE GENETICS, INC. <120> TREATMENT OF CANCERS WITH ANTIBODY DRUG CONJUGATES (ADC) THAT BIND TO 191P4D12 PROTEINS <130> 14369-248-228 <140> <141> <150> US 62/886,270 <151> 2019-08-13 <160> 23 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 3464 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (264)...(1796) <220> <221> misc_feature <222> (1)...(3464) <223> 191P4D12 <400> 1 ggccgtcgtt gttggccaca gcgtgggaag cagctctggg ggagctcgga gctcccgatc 60 acggcttctt gggggtagct acggctgggt gtgtagaacg gggccggggc tggggctggg 120 tcccctagtg gagacccaag tgcgagaggc aagaactctg cagcttcctg ccttctgggt 180 cagttcctta ttcaagtctg cagccggctc ccagggagat ctcggtggaa cttcagaaac 240 gctgggcagt ctgcctttca acc atg ccc ctg tcc ctg gga gcc gag atg tgg 293 Met Pro Leu Ser Leu Gly Ala Glu Met Trp 1 5 10 ggg cct gag gcc tgg ctg ctg ctg ctg cta ctg ctg gca tca ttt aca 341 Gly Pro Glu Ala Trp Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ala Ser Phe Thr 15 20 25 ggc cgg tgc ccc gcg ggt gag ctg gag acc tca gac gtg gta act gtg 389 Gly Arg 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Leu Arg Leu Arg Val Leu Val Pro Pro Leu Pro Ser Leu Asn 140 145 150 cct ggt cca gca cta gaa gag ggc cag ggc ctg acc ctg gca gcc tcc 773 Pro Gly Pro Ala Leu Glu Glu Gly Gln Gly Leu Thr Leu Ala Ala Ser 155 160 165 170 tgc aca gct gag ggc agc cca gcc ccc agc gtg acc tgg gac acg gag 821 Cys Thr Ala Glu Gly Ser Pro Ala Pro Ser Val Thr Trp Asp Thr Glu 175 180 185 gtc aaa ggc aca acg tcc agc cgt tcc ttc aag cac tcc cgc tct gct 869 Val Lys Gly Thr Thr Ser Ser Arg Ser Phe Lys His Ser Arg Ser Ala 190 195 200 gcc gtc acc tca gag ttc cac ttg gtg cct agc cgc agc atg aat ggg 917 Ala Val Thr Ser Glu Phe His Leu Val Pro Ser Arg Ser Met Asn Gly 205 210 215 cag cca ctg act tgt gtg gtg tcc cat cct ggc ctg ctc cag gac caa 965 Gln Pro Leu Thr Cys Val Val Ser His Pro Gly Leu Leu Gln Asp Gln 220 225 230 agg atc acc cac atc ctc cac gtg tcc ttc ctt gct gag gcc tct gtg 1013 Arg Ile Thr His Ile Leu His Val Ser Phe Leu Ala Glu Ala Ser Val 235 240 245 250 agg ggc ctt gaa gac caa aat ctg tgg cac att ggc aga gaa gga 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cga tac cat cgg cgc aag 1397 Leu Leu Val Val Val Val Val Leu Met Ser Arg Tyr His Arg Arg Lys 365 370 375 gcc cag cag atg acc cag aaa tat gag gag gag ctg acc ctg acc agg 1445 Ala Gln Gln Met Thr Gln Lys Tyr Glu Glu Glu Leu Thr Leu Thr Arg 380 385 390 gag aac tcc atc cgg agg ctg cat tcc cat cac acg gac ccc agg agc 1493 Glu Asn Ser Ile Arg Arg Leu His Ser His His Thr Asp Pro Arg Ser 395 400 405 410 cag ccg gag gag agt gta ggg ctg aga gcc gag ggc cac cct gat agt 1541 Gln Pro Glu Glu Ser Val Gly Leu Arg Ala Glu Gly His Pro Asp Ser 415 420 425 ctc aag gac aac agt agc tgc tct gtg atg agt gaa gag ccc gag ggc 1589 Leu Lys Asp Asn Ser Ser Cys Ser Val Met Ser Glu Glu Pro Glu Gly 430 435 440 cgc agt tac tcc acg ctg acc acg gtg agg gag ata gaa aca cag act 1637 Arg Ser Tyr Ser Thr Leu Thr Thr Val Arg Glu Ile Glu Thr Gln Thr 445 450 455 gaa ctg ctg tct cca ggc tct ggg cgg gcc gag gag gag gaa gat cag 1685 Glu Leu Leu Ser Pro Gly Ser Gly Arg Ala Glu Glu Glu Glu Asp Gln 460 465 470 gat gaa ggc atc aaa cag gcc atg aac cat ttt gtt cag gag aat ggg 1733 Asp Glu Gly Ile Lys Gln Ala Met Asn His Phe Val Gln Glu Asn Gly 475 480 485 490 acc cta cgg gcc aag ccc acg ggc aat ggc atc tac atc aat ggg cgg 1781 Thr Leu Arg Ala Lys Pro Thr Gly Asn Gly Ile Tyr Ile Asn Gly Arg 495 500 505 gga cac ctg gtc tga cccaggcctg cctcccttcc ctaggcctgg ctccttctgt 1836 Gly His Leu Val 510 tgacatggga gattttagct catcttgggg gcctccttaa acacccccat ttcttgcgga 1896 agatgctccc catcccactg actgcttgac ctttacctcc aacccttctg ttcatcggga 1956 gggctccacc aattgagtct ctcccaccat gcatgcaggt cactgtgtgt gtgcatgtgt 2016 gcctgtgtga gtgttgactg actgtgtgtg tgtggagggg tgactgtccg tggaggggtg 2076 actgtgtccg tggtgtgtat tatgctgtca tatcagagtc aagtgaactg tggtgtatgt 2136 gccacgggat ttgagtggtt gcgtgggcaa cactgtcagg gtttggcgtg tgtgtcatgt 2196 ggctgtgtgt gacctctgcc tgaaaaagca ggtattttct cagaccccag agcagtatta 2256 atgatgcaga ggttggagga gagaggtgga gactgtggct cagacccagg tgtgcgggca 2316 tagctggagc tggaatctgc ctccggtgtg agggaacctg tctcctacca cttcggagcc 2376 atgggggcaa gtgtgaagca gccagtccct gggtcagcca gaggcttgaa ctgttacaga 2436 agccctctgc cctctggtgg cctctgggcc tgctgcatgt acatattttc tgtaaatata 2496 catgcgccgg gagcttcttg caggaatact gctccgaatc acttttaatt tttttctttt 2556 ttttttcttg ccctttccat tagttgtatt ttttatttat ttttattttt attttttttt 2616 agagatggag tctcactatg ttgctcaggc tggccttgaa ctcctgggct caagcaatcc 2676 tcctgcctca gcctccctag tagctgggac tttaagtgta caccactgtg cctgctttga 2736 atcctttacg aagagaaaaa aaaaattaaa gaaagccttt agatttatcc aatgtttact 2796 actgggattg cttaaagtga ggcccctcca acaccagggg gttaattcct gtgattgtga 2856 aaggggctac ttccaaggca tcttcatgca ggcagcccct tgggagggca cctgagagct 2916 ggtagagtct gaaattaggg atgtgagcct cgtggttact gagtaaggta aaattgcatc 2976 caccattgtt tgtgatacct tagggaattg cttggacctg gtgacaaggg ctcctgttca 3036 atagtggtgt tggggagaga gagagcagtg attatagacc gagagagtag gagttgaggt 3096 gaggtgaagg aggtgctggg ggtgagaatg tcgcctttcc ccctgggttt tggatcacta 3156 attcaaggct cttctggatg tttctctggg ttggggctgg agttcaatga ggtttatttt 3216 tagctggccc acccagatac actcagccag aatacctaga tttagtaccc aaactcttct 3276 tagtctgaaa tctgctggat ttctggccta agggagaggc tcccatcctt cgttccccag 3336 ccagcctagg acttcgaatg tggagcctga agatctaaga tcctaacatg tacattttat 3396 gtaaatatgt gcatatttgt acataaaatg atattctgtt tttaaataaa cagacaaaac 3456 ttgaaaaa 3464 <210> 2 <211> 510 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> misc_feature <222> (1)...(510) <223> 191P4D12 <400> 2 Met Pro Leu Ser Leu Gly Ala Glu Met Trp Gly Pro Glu Ala Trp Leu 1 5 10 15 Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ala Ser Phe Thr Gly Arg Cys Pro Ala Gly 20 25 30 Glu Leu Glu Thr Ser Asp Val Val Thr Val Val Leu Gly Gln Asp Ala 35 40 45 Lys Leu Pro Cys Phe Tyr Arg Gly Asp Ser Gly Glu Gln Val Gly Gln 50 55 60 Val Ala Trp Ala Arg Val Asp Ala Gly Glu Gly Ala Gln Glu Leu Ala 65 70 75 80 Leu Leu His Ser Lys Tyr Gly Leu His Val Ser Pro Ala Tyr Glu Gly 85 90 95 Arg Val Glu Gln Pro Pro Pro Pro Arg Asn Pro Leu Asp Gly Ser Val 100 105 110 Leu Leu Arg Asn Ala Val Gln Ala Asp Glu Gly Glu Tyr Glu Cys Arg 115 120 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tgt gcg aga gca tac 388 Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Tyr 105 110 115 tac tac ggt atg gac gtc tgg ggc caa ggg acc acg gtc acc gtc tcc 436 Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser 120 125 130 135 tca gcc tcc acc aag ggc cca tcg gtc ttc ccc ctg gca ccc tcc tcc 484 Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser 140 145 150 aag agc acc tct ggg ggc aca gcg gcc ctg ggc tgc ctg gtc aag gac 532 Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp 155 160 165 tac ttc ccc gaa ccg gtg acg gtg tcg tgg aac tca ggc gcc ctg acc 580 Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr 170 175 180 agc ggc gtg cac acc ttc ccg gct gtc cta cag tcc tca gga ctc tac 628 Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr 185 190 195 tcc ctc agc agc gtg gtg acc gtg ccc tcc agc agc ttg ggc acc cag 676 Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln 200 205 210 215 acc tac atc tgc aac gtg aat cac aag ccc agc aac acc aag gtg gac 724 Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp 220 225 230 aag aga gtt gag ccc aaa tct tgt gac aaa act cac aca tgc cca ccg 772 Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 235 240 245 tgc cca gca cct gaa ctc ctg ggg gga ccg tca gtc ttc ctc ttc ccc 820 Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 250 255 260 cca aaa ccc aag gac acc ctc atg atc tcc cgg acc cct gag gtc aca 868 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 265 270 275 tgc gtg gtg gtg gac gtg agc cac gaa gac cct gag gtc aag ttc aac 916 Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 280 285 290 295 tgg tac gtg gac ggc gtg gag gtg cat aat gcc aag aca aag ccg cgg 964 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 300 305 310 gag gag cag tac aac agc acg tac cgt gtg gtc agc gtc ctc acc gtc 1012 Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 315 320 325 ctg cac cag gac tgg ctg aat ggc aag gag tac aag tgc aag gtc tcc 1060 Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 330 335 340 aac aaa gcc ctc cca gcc ccc atc gag aaa acc atc tcc aaa gcc aaa 1108 Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 345 350 355 ggg cag ccc cga gaa cca cag gtg tac acc ctg ccc cca tcc cgg gag 1156 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu 360 365 370 375 gag atg acc aag aac cag gtc agc ctg acc tgc ctg gtc aaa ggc ttc 1204 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 380 385 390 tat ccc agc gac atc gcc gtg gag tgg gag agc aat ggg cag ccg gag 1252 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 395 400 405 aac aac tac aag acc acg cct ccc gtg ctg gac tcc gac ggc tcc ttc 1300 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 410 415 420 ttc ctc tat agc aag ctc acc gtg gac aag agc agg tgg cag cag ggg 1348 Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 425 430 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Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 7 <211> 466 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> misc_feature <222> (1)...(466) <223> Ha22-2(2,4)6.1 heavy chain <400> 7 Met Glu Leu Gly Leu Cys Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Glu Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Asn Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95 Ser Leu Ser Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln 115 120 125 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 130 135 140 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 145 150 155 160 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 165 170 175 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 180 185 190 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 195 200 205 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 210 215 220 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 225 230 235 240 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 245 250 255 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 260 265 270 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 275 280 285 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 290 295 300 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 305 310 315 320 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 325 330 335 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 340 345 350 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 355 360 365 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 370 375 380 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 385 390 395 400 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 405 410 415 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 420 425 430 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 435 440 445 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 450 455 460 Gly Lys 465 <210> 8 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> misc_feature <222> (1)...(236) <223> Ha22-2(2,4)6.1 light chain <400> 8 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Phe Pro Gly Ser Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Val Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Gly Ile Ser Gly Trp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Phe Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln 100 105 110 Ala Asn Ser Phe Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 9 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CDR1 of heavy chain <400> 9 Ser Tyr Asn Met Asn 1 5 <210> 10 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CDR2 of heavy chain <400> 10 Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 11 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CDR3 of heavy chain <400> 11 Ala Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val 1 5 <210> 12 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CDR1 of light chain <400> 12 Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Gly Trp Leu Ala 1 5 10 <210> 13 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CDR2 of light chain <400> 13 Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser 1 5 <210> 14 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> CDR3 of light chain <400> 14 Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Pro Thr 1 5 <210> 15 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> linker <400> 15 Gly Phe Leu Gly 1 <210> 16 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH CDR1 according to IMGT <400> 16 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Asn 1 5 <210> 17 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH CDR2 according to IMGT <400> 17 Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile 1 5 <210> 18 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH CDR3 according to IMGT <400> 18 Ala Arg Ala Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val 1 5 10 <210> 19 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VL CDR1 according to IMGT <400> 19 Gln Gly Ile Ser Gly Trp 1 5 <210> 20 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VL CDR2 according to IMGT <400> 20 Ala Ala Ser 1 <210> 21 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VL CDR3 according to IMGT <400> 21 Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Pro Thr 1 5 <210> 22 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain variable region (VH), the 20th amino acid (glutamic acid) to the 136th amino acid (serine) of SEQ ID NO:7 <400> 22 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Asn Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Ser 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ala Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 23 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> light chain variable region (VL), the 23rd amino acid (aspartic acid) to the 130th amino acid (arginine) of SEQ ID NO:8 <400> 23 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Gly Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Phe Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105

Claims (56)

  1. 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트(conjugate)를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서,
    여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며,
    여기서 대상은 호르몬 수용체 양성 및 인간 표피 성장 인자 수용체 2 음성(HR+/HER2-) 유방암을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  2. 청구항 1에 있어서,
    HR+/HER2- 유방암은 에스트로겐 수용체(ER) 양성 및/또는 프로게스테론 수용체(PR) 양성, 그리고 HER2 음성인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  3. 청구항 1 또는 2에 있어서,
    대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  4. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서,
    대상은 전이성 또는 국소 진행성 환경에서 내분비 요법 및 사이클린 의존성 키나제(CDK) 4/6 억제제 중 적어도 하나의 계열(line)을 이전에 받은, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  5. 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서,
    대상은 탁산 또는 안트라사이클린으로 치료를 이전에 받은, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  6. 청구항 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서,
    대상은 유방암 감수성 유전자 (BRCA)1 또는 BRCA2에 유해한 생식계열 돌연변이를 갖고, 대상은 폴리 ADP 리보스 폴리머라제(PARP) 억제제로 이전에 치료받은, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  7. 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트(conjugate)를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서,
    여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며,
    여기서 대상은 ER 음성, PR 음성, 및 HER2 음성(ER-/PR-/HER2-) 유방암(삼중 음성 유방암 - TNBC)을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  8. 청구항 7에 있어서,
    대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  9. 청구항 7 또는 8에 있어서,
    대상은 적어도 2 계열의 전신 요법을 이전에 받은, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  10. 청구항 9에 있어서,
    대상은 탁산으로 치료를 이전에 받은, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  11. 청구항 7 내지 10 중 어느 한 항에 있어서,
    대상은 유방암 감수성 유전자 (BRCA)1 또는 BRCA2에 유해한 생식계열 돌연변이를 갖고, 대상은 폴리 ADP 리보스 폴리머라제(PARP) 억제제로 이전에 치료받은, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  12. 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트(conjugate)를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서,
    여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며,
    여기서 대상은 편평 비소세포폐암(NSCLC)을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  13. 청구항 12에 있어서,
    대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  14. 청구항 12 또는 13에 있어서,
    대상은 백금-계 요법 후에 진행되거나 또는 재발된, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  15. 청구항 14에 있어서,
    대상은 백금-계 요법 후 12 개월 이내에 진행되거나 또는 재발된, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  16. 청구항 12 내지 15 중 어느 한 항에 있어서,
    대상은 프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1)의 억제제 또는 프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)의 억제제의 요법을 이전에 받았고 여기서 선택적으로 PD-1의 억제제는 니볼루맙이고, 여기서 선택적으로 PD-L1의 억제제는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 및 더발루맙으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  17. 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트(conjugate)를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서,
    여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며,
    여기서 대상은 비-편평 NSCLC를 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  18. 청구항 17에 있어서,
    대상은 야생-형 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 및 야생-형 역형성 림프종 키나제(ALK)를 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  19. 청구항 17 또는 18에 있어서,
    대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  20. 청구항 17 내지 19 중 어느 한 항에 있어서,
    대상은 백금-계 요법 후에 진행되거나 또는 재발된, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  21. 청구항 20에 있어서,
    대상은 백금-계 요법 후 12 개월 이내에 진행되거나 또는 재발된, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  22. 청구항 17 내지 21 중 어느 한 항에 있어서,
    대상은 프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1)의 억제제 또는 프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)의 억제제의 요법을 이전에 받았고, 여기서 선택적으로 PD-1의 억제제는 니볼루맙이고, 여기서 선택적으로 PD-L1의 억제제는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 및 더발루맙으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  23. 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트(conjugate)를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서,
    여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며,
    여기서 대상은 국소 진행성 또는 전이성 두경부암을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  24. 청구항 23에 있어서,
    대상은 백금-계 요법 후에 진행되거나 또는 재발된, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  25. 청구항 24에 있어서,
    대상은 백금-계 요법 후 6 개월 이내에 진행되거나 또는 재발된, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  26. 청구항 23 내지 25 중 어느 한 항에 있어서,
    대상은 프로그래밍된 세포 사멸 단백질-1(PD-1)의 억제제 또는 프로그래밍된 세포 사멸-리간드 1(PD-L1)의 억제제의 요법을 이전에 받았고, 여기서 선택적으로 PD-1의 억제제는 니볼루맙이고, 여기서 선택적으로 PD-L1의 억제제는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 및 더발루맙으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  27. 유효량의 항체 약물 컨쥬게이트(conjugate)를 대상에 투여하는 단계를 포함하는 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법으로서,
    여기서 항체 약물 컨쥬게이트는 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 하나 이상의 유닛에 컨쥬게이트된 191P4D12에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22로 제시된 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23에 제시된 경쇄 가변 영역의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 CDRs를 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하며,
    여기서 대상은 위암 또는 식도암을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  28. 청구항 27에 있어서,
    대상은 국소 진행성 또는 전이성 암을 갖는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  29. 청구항 27 또는 28에 있어서,
    대상은 백금-계 요법 및/또는 플루오로피리미딘을 포함한 화학요법 후에 진행되거나 재발된, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  30. 청구항 29에 있어서,
    대상은 백금-계 요법 또는 플루오로피리미딘을 포함한 화학요법 후 6 개월 이내에 진행되거나 재발된, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  31. 청구항 27 내지 30 중 어느 한 항에 있어서,
    위암 또는 식도암은 HER2 양성 암이고, 대상은 HER2 지시 요법을 이전에 받은, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  32. 청구항 1 내지 31 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H1, SEQ ID NO:10의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H2, SEQ ID NO:11의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H3; SEQ ID NO:12의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L1, SEQ ID NO:13의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L2, 및 SEQ ID NO:14의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L3을 포함하거나, 또는
    항체 또는 이의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:16의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H1, SEQ ID NO:17의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H2, SEQ ID NO:18의 아미노산 서열을 포함하는 CDR H3; SEQ ID NO:19의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L1, SEQ ID NO:20의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L2, 및 SEQ ID NO:21의 아미노산 서열을 포함하는 CDR L3을 포함하는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  33. 청구항 1 내지 31 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 또는 그의 항원 결합 단편은 SEQ ID NO:22의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:23의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  34. 청구항 1 내지 31 중 어느 한 항에 있어서,
    항체는 SEQ ID NO:7의 20번째 아미노산(글루탐산) 내지 466번째 아미노산(리신) 범위의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 SEQ ID NO:8의 23번째 아미노산(아스파르트산) 내지 236번째 아미노산(시스테인) 범위의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  35. 청구항 1 내지 34 중 어느 한 항에 있어서,
    항원 결합 단편은 Fab, F(ab')2, Fv 또는 scFv 단편인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  36. 청구항 1 내지 35 중 어느 한 항에 있어서,
    항체는 완전 인간 항체(fully human antibody)인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  37. 청구항 1 내지 36 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 또는 그의 항원 결합 단편은 재조합으로 생성되는 것인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  38. 청구항 1 내지 37 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 다음의 구조를 갖고:
    Figure pct00066

    여기서 L-은 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 나타내고 p는 1 내지 10인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  39. 청구항 38에 있어서,
    p는 2 내지 8인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  40. 청구항 38에 있어서,
    p는 3 내지 5인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  41. 청구항 1 내지 40 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 또는 항원 결합 단편은 링커를 통해 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE)의 각 유닛에 연결되는 것인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  42. 청구항 41에 있어서,
    링커는 효소-절단가능한 링커이고, 링커는 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 황 원자와 결합을 형성하는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  43. 청구항 41에 있어서,
    링커는 -Aa-Ww-Yy-의 화학식을 갖고; 여기서 -A-는 스트레처 유닛이고, a는 0 또는 1이고; -W-는 아미노산 유닛이고, w는 0 내지 12 범위의 정수이며; -Y-는 스페이서 유닛이고, y는 0, 1 또는 2인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  44. 청구항 43에 있어서,
    스트레처 유닛은 하기 화학식 (1)의 구조를 가지며; 아미노산 유닛은 발린 시트룰린이고; 스페이서 유닛은 하기 화학식 (2)의 구조를 포함하는 PAB 기인, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법:
    Figure pct00067
    화학식 (1)
    Figure pct00068
    화학식 (2).
  45. 청구항 43에 있어서,
    스트레처 유닛은 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 황 원자와 결합을 형성하고; 스페이서 유닛은 카바메이트 기를 통해 MMAE에 연결되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  46. 청구항 1 내지 37 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 항체 또는 그의 항원 결합 단편당 1 내지 10 유닛의 MMAE를 포함하는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  47. 청구항 1 내지 37 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 항체 또는 그의 항원 결합 단편당 2 내지 8 유닛의 MMAE를 포함하는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  48. 청구항 1 내지 37 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 항체 또는 그의 항원 결합 단편당 3 내지 5 유닛의 MMAE를 포함하는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  49. 청구항 1 내지 48 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 대상의 체중의 1 내지 10 mg/kg, 대상의 체중의 1 내지 5 mg/kg, 대상의 체중의 1 내지 2.5 mg/kg, 또는 대상의 체중의 1 내지 1.25 mg/kg의 용량으로 투여되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  50. 청구항 49에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 대상의 체중의 약 1 mg/kg의 용량으로 투여되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  51. 청구항 49에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 대상의 체중의 약 1.25 mg/kg의 용량으로 투여되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  52. 청구항 1 내지 51 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 정맥내(IV) 주사(injection) 또는 주입(infusion)에 의해 투여되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  53. 청구항 1 내지 51 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 3주 주기마다 2회 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  54. 청구항 1 내지 51 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 매 3주 주기의 1일 및 8일에 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  55. 청구항 1 내지 51 중 어느 한 항에 있어서,
    항체 약물 컨쥬게이트는 4주 주기마다 3회 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
  56. 청구항 1 내지 51 중 어느 한 항에 있어서,
    약제학적 조성물로 제형화된 항체 약물 컨쥬게이트는 매 4주 주기의 1, 8 및 15일에 약 30분에 걸쳐 정맥내(IV) 주사 또는 주입에 의해 투여되는, 대상의 암을 예방 또는 치료하는 방법.
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